MX2013003912A - Sales y polimorfos de inhibidores de sulfamida ns3. - Google Patents

Abstract

La invención proporciona nuevas sales y polimorfos de la (5 R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)- 1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3, 3-dimetil-butanoil]-N-{(1R,2R)-2-etil-1-[(pirrolidin-1-il-sulfoni l)-carbamoil]-ciclopropil}-10, 10-dimetil-7-aza-diespiro-[3.0.4.1] -decan-8-carboxamida (referida en la presente como el Compuesto X), composiciones farmacéuticas que los contienen, y procesos para su elaboración y uso en terapia.

Description

SALES Y POLIMORFOS DE INHIBIDORES DE SULFAMIDA NS3 La presente invención se refiere a las sales y polimorfos de (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1 R,2R)-2-etil-1 -[(pirro lidin-1-il-sulfonil)-carbamoil]-ciclopropil}- 10,10-dime ti I-7-aza-diespiro-[3.0.4.1 ]-decan-8-carboxamida, a las composiciones farmacéuticas que los contienen, y a su uso en terapia.

Antecedentes La infección crónica por el virus de hepatitis C (HCV) es una importante carga de salud global, con una estimación de 170 millones de personas infectadas en todo el mundo y de 3 a 4 millones de personas adicionales infectadas cada año (Véase, por ejemplo, World Health Organization (Organización Mundial de la Salud), Fact Sheet No. 164. Octubre 2000). Aunque el 25 por ciento de las nuevas infecciones son sintomáticas, del 60 al 80 por ciento de los pacientes desarrollarán la enfermedad crónica del hígado, de los cuales, una estimación del 20 por ciento progresarán hasta cirrosis con un riesgo anual del 1 al 4 por ciento de desarrollar carcinoma hepatocelular (Véase, por ejemplo, World Health Organization Guide on Hepatitis C. 2002; Pawlotsky, J-M. (2006) Therapy of Hepatitis C: From Empiricism to Eradication. Hepatology 43: S207-S220). Sobre todo, el virus de hepatitis C (HCV) es responsable por el 50 al 76 por ciento de todos los casos de cáncer de hígado y por dos terceras partes de todos los trasplantes de hígado en el mundo desarrollado (Véase, por ejemplo, World Health Organizaron Guide on Viral Cancers. 2006). Y por último, del 5 al 7 por ciento de los pacientes infectados morirán de las consecuencias de la infección por el virus de hepatitis C (Véase, por ejemplo, World Health Organization Guide on Hepatitis C. 2002).

La terapia estándar actual para la infección por el virus de hepatitis C el interferón alfa pegilado (IFN-a) en combinación con ribavirina. Sin embargo, solamente hasta el 50 por ciento de los pacientes con el virus del genotipo 1 pueden ser tratados con éxito con esta terapia basada en interferón. Más aún, tanto el interferón como la ribavirina pueden inducir efectos adversos significativos, desde síntomas tipo catarro (fiebre y fatiga), complicaciones hematológicas (leucopenia, trombocitopenia), problemas neuro-psiquiátricos (depresión, insomnio, irritabilidad), pérdida de peso, y disfunciones autoinmunes (hipotiroidismo, diabetes) por el tratamiento con interferón, hasta una anemia hemolítica significativa por el tratamiento con ribavirina. Por consiguiente, todavía se necesitan mucho fármacos más efectivos y mejor tolerados.

NS3, una proteína de aproximadamente 70 kDa, tiene dos dominios distintos: un dominio de proteasa de serina N-terminal de 180 aminoácidos (AA) y un dominio de helicasa/NTPasa C-terminal (aminoácidos 181 a 631). La proteasa NS3 se considera como un miembro de la familia de quimiotripsina, debido a las similitudes en la secuencia de la proteína, a la estructura tridimensional global, y a los mecanismos de catalización. La proteasa de serina NS3 del virus de hepatitis C es responsable de la disociación proteolítica de la poliproteína en las uniones NS3/NS4A, NS4A/NS4B, NS4B/NS5A y NS5A/NS5B (véase, por ejemplo, Bartenschlager, R., L. y colaboradores, (1993) J. Virol. 67:3835-3844; Grakoui, A. y colaboradores, (1993) J. Virol. 67:2832-2843; Tomei, L. y colaboradores, (1993) J. Virol. 67:4017-4026). La NS4A, una proteína de aproximadamente 6 kDa de 54 aminoácidos, es un co-factor para la actividad de la proteasa de serina de NS3 (véase, por ejemplo, Failla, C. y colaboradores, (1994) J. Virol. 68:3753-3760; Tanji, Y. y colaboradores, (1995) J. Virol. 69:1575-1581). La auto-disociación de la unión NS3/NS4A mediante la proteasa de serina NS3/NS4A se presenta intramolecularmente (es decir, c/'s), mientras que los otros sitios de disociación son procesados intermolecularmente (es decir, trans). Se ha demostrado que la proteasa NS3 del virus de hepatitis C es esencial para la réplica viral y, por consiguiente, representa un objetivo atractivo para la quimioterapia antiviral.

Sigue existiendo una necesidad de nuevos tratamientos y terapias para la infección por el virus de hepatitis C (HCV), así como para los trastornos asociados con el virus de hepatitis C (HCV). También existe una necesidad de compuestos útiles en el tratamiento o en la prevención o disminución de uno o más síntomas del virus de hepatitis C (HCV), así como una necesidad de métodos para el tratamiento o la prevención o disminución de uno o más síntomas del virus de hepatitis C (HCV). Adicionalmente, existe una necesidad de nuevos compuestos capaces de modular la actividad de las proteasas de serina del virus de hepatitis C (HCV), en particular la proteasa de serina NS3/NS4a del virus de hepatitis C, y de utilizar estos compuestos para tratar, prevenir o mitigar la infección por el virus de hepatitis C (HCV).

La Solicitud de Patente No Publicada Número PCT/IB2010/000784 describe una clase novedosa de compuestos útiles en el tratamiento de los trastornos asociados con el virus de hepatitis C (HCV). Uno de estos compuestos es la (5R, 8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acet¡l]-amino}-3,3-dimetil-butano¡l]-N-{(1R,2R)-2-etil-1-[(pirrolidin-1-il-sulfonil)-carbamoil]-ciclopropil}-10,10-d¡metil-7-aza-diespiro-[3.0.4.1 ]-decan-8-carboxamida, que tiene la estructura mostrada a continuación. Este compuesto es referido en la presente como el compuesto X: Compuesto X En la elaboración de las formulaciones farmacéuticas, es importante que el compuesto activo esté en una forma en la que se pueda manejar y procesar de una manera conveniente con el objeto de obtener un proceso de elaboración comercialmente viable. De conformidad con lo anterior, la estabilidad química y la estabilidad física del compuesto activo son factores importantes. El compuesto activo, y las formulaciones que lo contienen, deben ser capaces de almacenarse efectivamente durante períodos de tiempo apreciables, sin exhibir cambios significativos en las características físico-químicas (por ejemplo, composición química, densidad, higroscopicidad y solubilidad) del compuesto activo.

Adicionalmente, si el compuesto activo se va a incorporar en una forma de dosificación para su administración oral, tal como una tableta, es recomendable que el compuesto activo se micronice fácilmente para proporcionar un polvo con buenas propiedades de flujo para ayudar a la elaboración.

En general se encuentra que hay ventajas en la elaboración de una forma en estado sólido particular de un ingrediente farmacéutico y éstas se describen en "Handbook of Pharmaceutical Salts; Properties, Selection and Use", P. Heinrich Stahl, Camille G. Wermuth (Editores) (Verlag Helvética Chimica Acta, Zurich). Los métodos para la elaboración de las formas en estado sólido también se describen en "Practical Process Research and Development", Neal G. Anderson (Academic Press, San Diego), y "Polimorphism: In the Pharmaceutical Industry", Rolf Hilfiker (Ed) (Wiley VCH).

Los presentes inventores han descubierto un número de sales y polimorfos cristalinos del compuesto X. La formación de sales y cristales tiene el potencial para mejorar los rendimientos debido a que la nueva forma física resultante puede exhibir una solubilidad más baja en solventes orgánicos. Esto puede conducir a un mejor proceso de elaboración. Adicionalmente, las sales se pueden aislar y purificar más fácilmente. Por consiguiente, en un aspecto, la invención proporciona la sal de clorhidrato del compuesto X, o un derivado farmacéuticamente aceptable de la misma. En una modalidad, la pureza de la sal es de cuando menos el 98 por ciento. En otra modalidad, la pureza de la sal es de cuando menos el 99 por ciento. En otro aspecto, la invención proporciona la sal de hemi-clorhidrato del compuesto X, o un derivado farmacéuticamente aceptable de la misma. En otro aspecto, la invención proporciona la sal de ácido metan-sulfónico del compuesto X, o un derivado farmacéuticamente aceptable de la misma. En todavía otro aspecto, la invención proporciona la sal de ácido succínico del compuesto X, o un derivado farmacéuticamente aceptable de la misma.

Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención, se proporcionan un número de polimorfos cristalinos del compuesto X y sus sales.

Por consiguiente, en un aspecto, la invención proporciona una forma cristalina de la sal de clorhidrato del compuesto X (Forma A) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 7.7, 8.9, 11.8, 15.5 y 18.0. En una modalidad, la Forma A exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos: 7.7, 8.9, 11.8, 15.5, 17.3, 18.0 y 19.9. En otra modalidad, la Forma A exhibe cuando menos los picos de difracción en polvo de rayos-X característicos mostrados en la Tabla A. En todavía otra modalidad, la Forma A exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 1.

En otro aspecto, la invención proporciona una forma cristalina de la sal de clorhidrato del compuesto X (Forma B) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 7.8, 8.6, 11.3, 15.8 y 18.2. En una modalidad, la Forma B exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos: 7.8, 8.6, 9.5, 11.3, 14.8, 15.8 y 18.2. En otra modalidad, la Forma B exhibe cuando menos los picos de difracción en polvo de rayos-X característicos mostrados en la Tabla B. En todavía otra modalidad, la Forma B exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 2.

En otro aspecto, la invención proporciona una forma cristalina de la sal de clorhidrato del compuesto X (Forma C) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 9.2, 14.4, 15.3, 17.7 y 20.0. En una modalidad, la Forma C exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos: 8.0, 9.2, 14.4, 15.3, 17.7, 19.3 y 20.0. En otra modalidad, la Forma C exhibe cuando menos los picos de difracción en polvo de rayos-X característicos mostrados en la Tabla C. En todavía otra modalidad, la Forma C exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 3.

En otro aspecto, la invención proporciona una forma cristalina de la sal de clorhidrato del compuesto X (Forma D) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 8.0, 8.3, 14.3, 15.9 y 18.2. En una modalidad, la Forma D exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos: 8.0, 8.3, 9.1, 10.0, 10.7, 14.3, 14.8, 15.9, 17.2 y 18.2. En otra modalidad, la Forma D exhibe cuando menos los picos de difracción en polvo de rayos-X característicos mostrados en la Tabla D. En todavía otra modalidad, la Forma D exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 4.

En otro aspecto, la invención proporciona una forma cristalina de la sal de clorhidrato del compuesto X (Forma E) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 7.5, 8.8, 9.2, 15.6 y 17.8. En una modalidad, la Forma E exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos: 7.5, 8.8, 9.2, 15.6, 17.8, 18.2 y 19.5. En otra modalidad, la Forma E exhibe cuando menos los picos de difracción en polvo de rayos-X característicos mostrados en la Tabla E. En todavía otra modaíidad, la Forma E exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 5.

En otro aspecto, la invención proporciona una forma cristalina de la sal de hemi-clorhidrato del compuesto X (Forma F) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 6.9, 11.3, 14.8, 16.0 y 18.2. En una modalidad, la Forma F exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos: 6.9, 7.8, 9.1, 11.3, 14.8, 16.0, 17.4 y 18.2. En otra modalidad, la Forma F exhibe cuando menos los picos de difracción en polvo de rayos-X característicos mostrados en la Tabla F. En todavía otra modalidad, la Forma F exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 6.

En otro aspecto, la invención proporciona una forma cristalina de la sal de ácido metan-sulfónico del compuesto X (Forma G) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 5.8, 6.5, 7.8, 10.4 y 15.7. En una modalidad, la Forma G exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos: 5.8, 6.5, 7.8, 10.4, 12.9, 15.7 y 17.2. En otra modalidad, la Forma G exhibe cuando menos los picos de difracción en polvo de rayos-X característicos mostrados en la Tabla G. En todavía otra modalidad, la Forma G exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 7.

En otro aspecto, la invención proporciona una forma cristalina del compuesto X (Forma H) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 5.7, 6.9, 7.8, 14.4 y 18.5. En una modalidad, la Forma H exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos: 5.7, 6.9, 7.8, 9.2, 10.3, 12.4, 14.4, 15.5, 16.3, 16.7 y 18.5. En otra modalidad, la Forma H exhibe cuando menos los picos de difracción en polvo de rayos-X característicos mostrados en la Tabla H. En todavía otra modalidad, la Forma H exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X sustanciaimente igual al mostrado en la Figura 8.

En otro aspecto, la invención proporciona una forma cristalina del compuesto X (Forma I) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 9.5, 13.3, 14.5, 19.0 y 19.7. En una modalidad, la Forma I exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos: 6.8, 7.4, 7.9, 9.5, 13.3, 14.0, 14.5, 16.1, 17.9, 19.0 y 19.7. En otra modalidad, la Forma I exhibe cuando menos los picos de difracción en polvo de rayos-X característicos mostrados en la Tabla I. En todavía otra modalidad, la Forma I exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X sustanciaimente igual al mostrado en la Figura 9.

En otro aspecto, la invención proporciona una forma cristalina del compuesto X (Forma J) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 6.9, 8.3, 12.5, 13.6, 16.0, 16.8, y 17.1. En una modalidad, la Forma J exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos: 6.9, 8.3, 9.2, 12.5, 13.6, 16.0, 16.8, 17.1, 19.8 y 20.9. En otra modalidad, la Forma J exhibe cuando menos los picos de difracción en polvo de rayos-X característicos mostrados en la Tabla J. En todavía otra modalidad, la Forma J exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 10.

En otro aspecto, la invención proporciona una forma cristalina del compuesto X (Forma K) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 20): 6.1, 7.4, 8.3, 22.1, 23.7, 24.1, y 24.6. En una modalidad, la Forma K exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos: 5.2, 6.1, 7.4, 8.3, 9.7, 18.2, 19.6, 22.1, 23.2, 23.7, 24.1, y 24.6. En otra modalidad, la Forma K exhibe cuando menos los picos de difracción en polvo de rayos-X característicos mostrados en la Tabla K. En todavía otra modalidad, la Forma K exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 11.

En otro aspecto, la invención proporciona una forma cristalina del compuesto X (Forma L) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 5.7, 8.2, 16.9, 18.4 y 18.5. En una modalidad, la Forma L exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos: 5.7, 7.0, 8.2, 15.4, 16.0, 16.9, 18.4 y 18.5. En otra modalidad, la Forma L exhibe cuando menos los picos de difracción en polvo de rayos-X característicos mostrados en la Tabla L. En todavía otra modalidad, la Forma L exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 12.

En otro aspecto, la invención proporciona una forma cristalina del compuesto X (Forma M) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 6.7, 7.6, 7.7, 9.5, y 19.0. En una modalidad, la Forma M exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos: 6.7, 7.6, 7.7, 9.5, 13.1, 14.4, 15.4, 16.0, 17.8, 18.3, 19.0 y 19.6. En otra modalidad, la Forma M exhibe cuando menos los picos de difracción en polvo de rayos-X característicos mostrados en la Tabla M. En todavía otra modalidad, la Forma M exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 13.

En otro aspecto, la invención proporciona una forma cristalina del compuesto X (Forma N) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 6.3, 7.7, 8.7, 16.0, 18.1, y 20.5. En una modalidad, la Forma N exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos: 6.3, 7.7, 8.7, 10.2, 11.4, 13.8, 16.0, 17.2, 18.1, 18.6, 19.0 y 20.5. En otra modalidad, la Forma N exhibe cuando menos los picos de difracción en polvo de rayos-X característicos mostrados en la Tabla N. En todavía otra modalidad, la Forma N exhibe un patrón de difracción en polvo de rayos-X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 14.

En un aspecto de la invención, los polimorfos de la invención tienen propiedades cristalinas y son de preferencia cuando menos el 50 por ciento cristalinos, más preferiblemente cuando menos el 60 por ciento cristalinos, todavía más preferiblemente cuando menos el 70 por ciento cristalinos, y de una manera muy preferible cuando menos el 80 por ciento cristalinos. La cristalinidad se puede estimar mediante técnicas de difractometría de rayos-X convencionales o mediante técnicas espectroscópicas infra-rojas.

En un aspecto de la invención, los polimorfos de la invención son del 50 por ciento, 60 por ciento, 70 por ciento, 80 por ciento o 90 por ciento al 95 por ciento, 96 por ciento, 97 por ciento, 98 por ciento, 99 por ciento ó 100 por ciento cristalinos.

En la presente memoria descriptiva, los picos de difracción en polvo de rayos-X (expresados en grados 20) se miden utilizando rayos-X de cobre con una longitud de onda de 1.5406 A (alfa 1 ) , y 1.5444 A (alfa2).

Las formas cristalinas de la presente invención pueden existir en formas tanto no solvatadas como solvatadas. El término 'solvato' se utiliza en la presente para describir un complejo molecular que comprende el compuesto de la invención y una cantidad de uno o más solventes farmacéuticamente aceptables. Los ejemplos de los solventes farmacéuticamente aceptables incluyen etanol y agua. El término 'hidrato' se emplea cuando el solvente es agua.

En un aspecto, la invención proporciona una sal o una forma cristalina definida en la presente para utilizarse en terapia. En otro aspecto, la invención proporciona un método para el tratamiento mediante terapia, el cual comprende administrar a un sujeto que lo necesite, una cantidad farmacéuticamente aceptable de una sal o de una forma cristalina de la invención.

En un aspecto, la invención proporciona el uso de una sal o de una forma cristalina definida en la presente, en la elaboración de un medicamento para utilizarse en terapia.

En una modalidad, la terapia es el tratamiento de un trastorno asociado con el virus de hepatitis C (HCV). En otra modalidad, la terapia es el tratamiento de una infección por el virus de inmunodeficiencia humana (VIH). En otra modalidad, la terapia es el tratamiento, inhibición o prevención de la actividad del virus de hepatitis C (HCV). En otra modalidad, la terapia es la inhibición de la actividad de la proteasa NS2, la proteasa NS3, la helicasa NS3, la proteína NS5A, y/o la polimerasa NS5B. En otra modalidad, la terapia es la interrupción de la interacción entre la proteasa NS3 y el cofactor NS4A. En otra modalidad, la terapia es la prevención o alteración de la separación de una o más de las uniones NS4A-NS4B, NS4B-NS5A y NS5A-NS5B del virus de hepatitis C (HCV). En otra modalidad, la terapia es la inhibición de la actividad de una proteasa de serina. En otra modalidad, la terapia es la reducción de la carga de ARN del virus de hepatitis C de un sujeto.

En un aspecto, las sales y las formas cristalinas de la invención exhiben actividad de proteasa del virus de hepatitis C (HCV). En una modalidad, las sales y las formas cristalinas son inhibidoras de proteasa NS3-4A del virus de hepatitis C (HCV).

En un aspecto, la invención proporciona un método para inhibir la replicación del virus de hepatitis C en una célula, el cual comprende poner en contacto esta célula con una sal o una forma cristalina de la invención.

En otro aspecto, la invención proporciona un tratamiento empacado para un trastorno asociado con el virus de hepatitis C (HCV), el cual comprende una sal o una forma cristalina de la invención, empacada con instrucciones para utilizar una cantidad efectiva de la sal o de la forma cristalina para tratar un trastorno asociado con el virus de hepatitis C (HCV).

En ciertas modalidades, el trastorno asociado con el virus de hepatitis C (HCV) se selecciona a partir del grupo que consiste en infección por el virus de hepatitis C (HCV), cirrosis hepática, enfermedad crónica del hígado, carcinoma hepatocelular, crioglobulinemia, linfoma no de Hodgkin, fibrosis hepática, y una respuesta inmunitaria intracelular innata suprimida.

En otra modalidad, la invención proporciona un método para el tratamiento de una infección por el virus de hepatitis C (HCV), cirrosis hepática, enfermedad crónica del hígado, carcinoma hepatocelular, crioglobulinemia, linfoma no de Hodgkin, fibrosis hepática y/o una respuesta inmunitaria intracelular innata suprimida en un sujeto que lo necesite, el cual comprende administrar al sujeto, una cantidad farmacéuticamente aceptable de una sal o de una forma cristalina de la invención.

En una modalidad, el virus de hepatitis C que se va a tratar se selecciona a partir de cualquier genotipo del virus de hepatitis C (HCV). En otra modalidad, el virus de hepatitis C se selecciona a partir del genotipo 1, 2, y/o 3 del virus de hepatitis C (HCV).

Los estados asociados con el virus de hepatitis C (HCV) con frecuencia están asociados con la proteasa de serina NS3 del virus de hepatitis C (HCV), que es responsable de varios pasos en el procesamiento de la poliproteína del virus de hepatitis C (HCV) en proteínas funcionales más pequeñas. La proteasa NS3 forma un complejo heterodimérico con la proteína NS4A, un co-factor esencial que mejora la actividad enzimática, y se cree que ayuda a anclar el virus de hepatitis C (HCV) al retículo endoplásmico. NS3 primero auto-cataliza la hidrólisis de la unión NS3-NS4A, y luego disocia la poliproteína del virus de hepatitis C (HCV) ¡ntermolecularmente en las intersecciones NS4A-NS4B, NS4B-NS5A, y NS5A-NS5B. Este proceso está asociado con la réplica del virus de hepatitis C (HCV) en un sujeto. La inhibición o la modulación de la actividad de una o más de las proteínas NS3, NS4A, NS4B, NS5A, y NS5B, inhibirá o modulará la réplica del virus de hepatitis C (HCV) en un sujeto, previniendo o tratando de esta manera el estado asociado con el virus de hepatitis C (HCV). En una modalidad particular, el estado asociado con el virus de hepatitis C (HCV) está asociado con la actividad de la proteasa NS3. En otra modalidad particular, el estado asociado con el virus de hepatitis C (HCV) está asociado con la actividad del complejo heterodimérico NS3-NS4A.

La invención también proporciona procesos para la preparación de las formas cristalinas descritas en la presente. Por consiguiente, en un aspecto, la invención proporciona un proceso para la preparación de cualquiera de las Formas A, B, C, D, E, F, G, H e I, el cual comprende la cristalización de la forma a partir de una solución del compuesto X.

En el contexto de la presente invención, las referencias en la presente a "tratamiento" incluyen las referencias al tratamiento curativo, paliativo y profiláctico, a menos que haya indicaciones específicas que digan lo contrario. Los términos "terapia, "terapéutico" y "terapéuticamente" se deben interpretar de la misma manera.

Las sales y las formas cristalinas de la presente invención se pueden administrar solas o en combinación con uno o más fármacos adicionales. En términos generales, se administrarán como una formulación en asociación con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables. El término "excipiente" se utiliza en la presente para describir cualquier ingrediente diferente de los compuestos de la invención que pueda impartir cualquiera de una característica funcional (es decir, de control de la velocidad de liberación del fármaco) y/o no funcional (es decir, como auxiliar de procesamiento o diluyente) a las formulaciones. La elección del excipiente dependerá hasta un alto grado de factores tales como el modo particular de administración, el efecto del excipiente sobre la solubilidad y la estabilidad, y la naturaleza de la forma de dosificación.

Las composiciones farmacéuticas adecuadas para el suministro de las sales y las formas cristalinas de la presente invención y los métodos para su preparación serán fácilmente evidentes para los expertos en este campo. Estas composiciones y los métodos para su preparación se pueden encontrar, por ejemplo, en Remington's Pharmaceutical Sciences, 19a Edición (Mack Publishing Company, 1995).

Para la administración a pacientes humanos, la dosis total diaria de la sal o de la forma cristalina está típicamente en el intervalo de entre 0.01 miligramos y 1,000 miligramos, o de entre 0.1 miligramos y 250 miligramos, o de entre 1 miligramo y 50 miligramos dependiendo, desde luego, del modo de administración. La dosis total diaria se puede administrar en una sola dosis o en dosis divididas, y, a discreción del médico, puede caer fuera del intervalo típico dado en la presente. Estas dosificaciones se basan en un sujeto humano promedio que tiene un peso de aproximadamente 60 kilogramos a 70 kilogramos. El médico podrá determinar fácilmente la dosis para sujetos cuyo peso caiga fuera de este intervalo, tales como niños y ancianos.

Las composiciones farmacéuticas se pueden administrar tópicamente (por ejemplo, a la piel o al pulmón y/o a las vías respiratorias) en la forma, por ejemplo, de cremas, soluciones, suspensiones, aerosoles de heptafluoro-alcano (HFA), y formulaciones en polvo seco; o sistémicamente, por ejemplo, mediante la administración oral en la forma de tabletas, cápsulas, jarabes, polvos o gránulos; o mediante la administración parenteral en la forma de soluciones o suspensiones; o mediante la administración subcutánea; o mediante la administración rectal en la forma de supositorios; o transdérmicamente.

En una modalidad de la invención, el ingrediente activo se administra oralmente. La administración oral puede involucrar tragar, de tal manera que el compuesto entre al tracto gastrointestinal, y/o la administración bucal, lingual, o sublingual mediante la cual el compuesto entra a la corriente sanguínea directamente desde la boca.

Las formulaciones adecuadas para su administración oral incluyen tapones sólidos, m icroparticulados sólidos, semi-sólidos y líquidos (incluyendo sistemas de múltiples fases o dispersados) tales como tabletas; cápsulas blandas o duras que contienen multi- o nano-particulados, líquidos, emulsiones o polvos; grageas (incluyendo rellenas de líquido); gomas de mascar; geles; formas de dosificación de dispersión rápida; películas; óvulos; aspersiones; y parches bucales/mucoadhesivos.

Las formulaciones adecuadas para su administración oral también se pueden diseñar para suministrar las sales y las formas cristalinas en una forma de liberación inmediata o en una forma de liberación sostenida, en donde el perfil de liberación puede ser retardado, en impulsos, controlado, sostenido, o retardado y sostenido o modificado, de tal manera que optimice la eficacia terapéutica del agente activo. Los medios para suministrar los compuestos en una forma de liberación sostenida se conocen en la técnica, e incluyen polímeros de liberación lenta que se pueden formular con los compuestos mencionados para controlar su liberación.

Los ejemplos de los polímeros de liberación sostenida incluyen los polímeros degradables y no degradables que se pueden utilizar para liberar los compuestos mencionados mediante difusión o una combinación de difusión y erosión del polímero. Los ejemplos de los polímeros de liberación sostenida incluyen hidroxi-propil-metil-celulosa, hidroxi-propil-celulosa, metil-celulosa, etil-celulosa, carboxi-metil-celulosa de sodio, poli-alcohol vinílico, polivinil-pirrolidona, goma de xantano, polimetacrilatos, poli-óxido de etileno y polietilenglicol.

Las formulaciones líquidas (incluyendo los sistemas de múltiples fases y dispersados) incluyen emulsiones, suspensiones, soluciones, jarabes y elíxires. Estas formulaciones se pueden presentar como rellenos en cápsulas blandas o duras (hechas, por ejemplo, a partir de gelatina o hidroxi-propil-metil-celulosa), y típicamente comprenden un vehículo, por ejemplo, agua, etanol, polietilenglicol, propileng licol , metil-celulosa, o un aceite adecuado, y uno o más agentes emulsionantes y/o agentes de suspensión. Las formulaciones líquidas también se pueden preparar mediante la reconstitución de un sólido, por ejemplo, a partir de una bolsita.

Las sales y las formas cristalinas de la invención también se pueden utilizar en formas de dosificación de rápida disolución y rápida desintegración, tales como aquéllas descritas en Liang y Chen, Expert Opinión in Therapeutic Patents, 2001, 11 (6), 981-986.

La formulación de tabletas se discute en Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Volumen 1, por H. Lieberman y L. Lachman (Marcel Dekker, Nueva York, 1980).

Breve Descripción de las Figuras La invención se ¡lustrará ahora mediante los siguientes ejemplos no limitantes. En los Ejemplos se presentan las siguientes figuras: Figura 1: Patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma A, definida en la presente.

Figura 2: Patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma B, definida en la presente.

Figura 3: Patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma C, definida en la presente.

Figura 4: Patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma D, definida en la presente.

Figura 5: Patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma E, definida en la presente.

Figura 6: Patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma F, definida en la presente.

Figura 7: Patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma G, definida en la presente.

Figura 8: Patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma H, definida en la presente.

Figura 9: Patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma I, definida en la presente.

Figura 10: Patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma J, definida en la presente.

Figura 11: Patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma K, definida en la presente.

Figura 12: Patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma L, definida en la presente.

Figura 13: Patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma M , definida en la presente.

Figura 14: Patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma N, definida en la presente.

Detalles experimentales generales LISTA DE ABREVIATURAS Ac acetilo ACN acetonitrilo AcOEt / EtOAc acetato de etilo AcOH ácido acético aq acuoso Ar arilo Bn bencilo Bu butilo (nBu = butilo normal, tBu terbutilo) CDI carbonil-di-imidazol CH3CN acetonitrilo DBU 1 ,8-diazabiciclo-[5.4.0]-undec-7- eno DCE 1 ,2-d¡cloro-etano DCM dicloro-metano (DCM) DIPEA N-etil-di-isopropil-amina DMAP dimetil-amino-piridina DMF N,N'-dimetil-formamida DMSO sulfóxido de dimetilo El Ionización por electroaspersion Et20 dietil-éter Et3N trietil-amina Éter dietil-éter EtOH etanol FC cromatografía por evaporación instantánea h hora(s) HATU hexafluorofosfato de 0-(7- azabenzotriazol-1-¡l)-N,N,N'N'- tetrametil-uronio HBTU hexafluorofosfato de O- (benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'- tetrametil-uronio HCI ácido clorhídrico HOBt 1 -hidroxi-benzotriazol HPLC cromatografía de líquidos de rendimiento H20 agua IPA alcohol ¡sopropílico L Mtro(s) LC-MS cromatografía de líquidos - espectrometría de masas e metilo el yodo-metano MeOH metano! mg miligramos min minuto(s) ml_ mililitros MS espectrometría de masas Pd/C paladio sobre carbón PG grupo protector Ph fenilo Prep preparación Rf proporción de frentes RP fase inversa Rt tiempo de retención rt temperatura ambiente S¡02 gel de sílice TBAF fluoruro de tetrabutil-amonio TEA trietil-amina TFA ácido trifluoro-acético THF tetrahidrofurano TLC cromatografía de capa delgada Los patrones de difracción en polvo de rayos-X (XRPD) se recolectaron utilizando pesos de las muestras de aproximadamente 2 a 10 miligramos, las cuales se comprimieron suavemente sobre el soporte de una sola muestra oblicuamente cortada de sílice con un fondo de cero de la difracción en polvo de rayos-X (XRPD). La muestra se cargó entonces en un Bruker GADDS y se analizó utilizando las siguientes condiciones experimentales: Ánodo del tubo: (Cu) Tensión del generador 40 kV Corriente del tubo: 40 mA Ángulo inicial [2 T]: 3 Ángulo final [2 T]: 4 Tiempo de exploración 2 minutos Todos los materiales de partida, bloques de construcción, reactivos, ácidos, bases, agentes deshidratantes, solventes, y catalizadores utilizados para sintetizar los compuestos de la presente invención son cualquiera de aquéllos comercialmente disponibles, o se pueden producir mediante los métodos de síntesis orgánica conocidos por un experto ordinario en este campo (Houben-Weyl, 4a Edición 1952, Methods of Organic Synthesis, Thieme, Volumen 21). Además, los compuestos de la presente invención se pueden producir mediante los métodos de síntesis orgánica conocidos por un experto ordinario en este campo, como se muestra en los siguientes ejemplos.

Método B: HPLC Instrumento: Sistema Agilent.

Columna: Waters Symmetry C18, 3.5 mieras, 2.1 x 50 milímetros, flujo: 0.6 mililitros/minuto.

Solvente: CH3CN (CF3C02H al 0.1 por ciento), HzO (CF3C02H al 0.1 por ciento).

Gradiente: 0-3.5 minutos: del 20 al 95 por ciento de CH3CN, 3.5-5 minutos: 95 por ciento de CH3CN, 5.5-5.55 minutos del 95 por ciento al 20 por ciento de CH3CN.

Método G : LCMS Instrumento: Sistema Agilent.

Columna: Halo C18, 2.7 mieras, 2.1 x 30 milímetros, flujo: 1.1 mililitros/minuto.

Solvente: CH3CN (HC02H al 0.1 por ciento), H20 (HC02H al 0.1 por ciento).

Gradiente: 0-2 minutos: del 5 al 95 por ciento de CH3CN, 2-2.6 minutos: 95 por ciento de CH3CN, 2.6-2.65 minutos: del 95 por ciento al 5 por ciento de CH3CN, 2.65-3 minutos: 5 por ciento de CH3CN.

Método J: MS Instrumento: Sistema Agilent.

Método: Inyección de Flujo.

Detección: API-ES, positivo/negativo.

Compuesto X La preparación de la (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1 - isopropil-p¡peridin-2-il]-carbonil}-am¡no)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1 R,2R)-2-eti¡-1 -[(pirrolidin-1-it-suifonil)-carbamoil]-ciclopropil}-10, 10-dimetil-7-aza-diespiro-[3.0.4.1 ]-decan-8-carboxamida, como se describe en Solicitud de Patente No Publicada Número PCT/I B2010/000784, se detalla a continuación. Preparación del Reactivo A Paso 1a: Compuesto 1a Una suspensión de N-(terbutoxi-carbonil)-N-[4-(dimetil-azanio-iliden)- 1 ,4-dihidro-piridin-1 -il-sulfonil]-azanida (3 gramos; 9.955 mili-moles) preparada de acuerdo con el procedimiento de Winum y colaboradores (Organic Letters 2001, 3, 2241) en dicloro-metano (24 mililitros), se trató con pirrolidina (0.864 mililitros; 10.453 milimoles), y se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. La mezcla de reacción se pasó por cromatografía mediante cromatografía por evaporación Instantánea (FC) sobre gel de sílice (eluyente: CH2CI2/EtOAc, 100:1), para dar la amida del ácido [N-(terbutox¡-carbonil)]-pirrolidin-1-sulfón¡co. TLC: Rf (DCM/EtOAc, 100:1) = 0.40. Una solución de la amida del ácido [N-(terbutoxl-carbonil)]-pirrolidin- 1-sulfónico (57.09 gramos; 223 milimoles) en dicloro-metano (450 mililitros) se trató con ácido trifluoro-acético (120 mililitros; 1.56 moles), y se agitó a temperatura ambiente durante 7 horas. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el aceite residual se trituró con di-isopropil-éter. El polvo resultante se lavó con d¡- isopropil-éter, y se secó bajo un alto vacío, para proporcionar el compuesto 1a. TLC: Rf (DCM/EtOAc, 50:1) = 0.10.

Paso 1b: Una solución del ácido (1 R,2S)-1 -terbutoxi-carbonil- amino-2-vinil-ciclopropan-carboxílico preparada de acuerdo con el procedimiento descrito en la Publicación Internacional Número WO2000/09558 (8.24 gramos; 36.3 milimoles) en tetrahidrofurano (160 mililitros) se trató con 1 , 1 '-carbonil-di-imidazol (9.09 gramos; 54.4 milimoles), y se calentó a reflujo durante 1 hora. La mezcla de reacción resultante se enfrió a temperatura ambiente, y se trató con el compuesto 1a (7.62 gramos; 50.8 milimoles), seguido por DBU (8.28 gramos; 54.4 milimoles). Después de 16 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentró, el residuo se absorbió en dicloro-metano, y se lavó con una solución acuosa saturada de KHSO4 (3 veces). Las fases acuosas se extrajeron con dicloro-metano, los orgánicos se combinaron, se secaron sobre Na2S0 y se concentró al vacío. El residuo se pasó por cromatografía sobre gel de sílice (eluyente: hexano/EtOAc, 4:1), para dar el compuesto 1b. LCMS (método F) Rt = 3.21 minutos; MS (método J): M/z = 358 [M-1]. Paso 1 c: El compuesto 1b (7.84 gramos; 21.81 milimoles) se trató con HCI 4N en dioxano (84 mililitros) a temperatura ambiente. Después de 1.5 horas, la mezcla de reacción se concentró bajo un alto vacío, para dar el compuesto 1c como su sal de clorhidrato. LCMS (método E) Rt = 1.10 minutos; MS (método J): M/z = 260 [M + 1].

Preparación del Intermediario II: Intermediario II Paso 2a: 7-terbutil-éster del ácido (5R,8S)-10,10- dimetil-7-aza-diespiro-[3.0.4.1]-decan-7,8- Compuesto 2a dicarboxílico El 7-terbutil-éster del ácido (5R,8S)-10, 10-dimet¡l-7-aza-d¡-espiro-[3.0.4.1 ]-decan-7,8-dicarboxílico (32.84 gramos; 106 mili-moles - preparado mediante el procedimiento descrito en la Publicación Internacional Número WO2009/047264) en N , N'-dimetil-formamida (1 litro) se trató con K2C03 (22.00 gramos; 159 milimoles), seguido por yoduro de metilo (9.93 mililitros; 159 milimoles). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas, y se concentró al vacío. El residuo resultante se dividió entre agua y EtOAc, y se extrajo con EtOAc. Los orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2S04 y se concentraron. El residuo se pasó por cromatografía sobre gel de sílice (eluyente: DCM/Etil-éter, 120:1), para dar el compuesto 2a. TLC: Rf (DCM/Etil-éter, 120:1) = 0.22; MS (método J): M/z = 346 [M + Na].

Paso 2b: Compuesto 2b El clorhidrato del compuesto 2b se obtuvo a partir del compuesto 2a (6.3 gramos; 19.48 milimoles) mediante el tratamiento con HCI 4N en dioxano (84 mililitros), a temperatura ambiente. Después de 1.5 horas, la mezcla de reacción se concentró bajo un alto vacío, para dar el compuesto 2b como su sal de clorhidrato. MS (método J): M/z = 224 [M + 1] Paso 2c: Compuesto 2c compuesto 2c se obtuvo a partir de una solución del clorhidrato del compuesto 2b (7.33 gramos; 27.93 milimoles), y BOC-L-terleucina (0.248 gramos; 1.072 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (15 mililitros), la cual se enfrió a 0°C, y se trató con di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.46 mililitros; 2.68 milimoles), y HATU (0.611 gramos; 1.608 milimoles). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas, se concentró al vacío, y el residuo se purificó mediante HPLC de preparación (método K). Después del procesamiento (Procesamiento 2 = las fracciones se trataron con NaHC03 y se concentraron; el residuo se dividió entre agua y EtOAc, se extrajo con EtOAc; los orgánicos combinados se secaron sobre Na2S0 y se concentraron) TLC: Rf (hexano/EtOAc 4:1) = 0.37; MS (método J): M/z = 437 [M + 1].

Paso 2d: Compuesto 2d El clorhidrato del compuesto 2d se obtuvo a partir del compuesto 2c (10.55 gramos; 24.16 milimoles) mediante el tratamiento con HCI 4N en dioxano (84 mililitros), a temperatura ambiente. Después de 1.5 horas, la mezcla de reacción se concentró bajo un alto vacío, para dar el clorhidrato del compuesto 2d. TLC: Rf (DCM/MeOH, 95:5) = 0.39; MS (método J): M/z = 337 [M + 1].

Paso 2e: Compuesto 2e El compuesto 2e se obtuvo a partir del compuesto 2d (0.2 gramos; 0.456 milimoles), y BOC-L-ciclohexil-glicina (1.582 gramos; 6.15 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (65 mililitros), el cual se enfrió a 0°C, y se trató con di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (2.68 mililitros; 15.37 milimoles), seguida por HATU (3.51 gramos; 9.22 milimoles). Después de 16 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se dividió entre dicloro-metano (DCM) y HCI 1N, los materiales orgánicos se extrajeron con NaHC03 acuoso saturado, se secaron sobre Na2S04 y se concentraron. La purificación mediante HPLC de preparación (método K), seguida por el procesamiento (Procesamiento 2) proporcionó el compuesto 2e. LC-MS (método G): Rt = 2.21 minutos; M/z = 598 [M + Na].

Paso 2f: Compuesto 2f Una mezcla del compuesto 2e (1.136 gramos; 1.973 milimoles), y L¡OH.H20 (0.09 gramos; 2.17 milimoles) en TH F/MeOH/agua (6 mililitros; 2:1:1) se agitó a temperatura ambiente 16 h. La mezcla de reacción se dividió entre agua y EtOAc. La fase acuosa se acidificó con HCI 1N y se extrajo con EtOAC. Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre Na2S04 y se concentraron hasta obtener un residuo que se pasó por cromatografía sobre gel de sílice (DC /MeOH, desde el 100 por ciento hasta 9:1), para proporcionar el compuesto 2f. LC-MS (método G): Rt = 1.99 minutos; M/z = 562 [M + 1].

Paso 2g: Compuesto 2g Una solución del compuesto 2f (0.050 gramos; 0.089 milimoles), y ((1 R,2R)-1-amino-2-etil-ciclopropan-carbonil)-amida del ácido pirrolidin-1 -sulfónico- Reactivo A (0.030 gramos; 0.093 milimoles - preparada como se estipula en el procedimiento de la presente) en dicloro-metano (DCM) (2 mililitros) se enfrió a 0°C, y se trató con di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.078 mililitros; 0.445 milimoles), y HATU (0.102 gramos; 0.267 milimoles). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, se dividió entre dicloro-metano (DCM) y HCI 1N. Los materiales orgánicos se lavaron con una solución acuosa saturada de NaHC03, se secaron sobre Na2S0 y se concentraron al vacío hasta obtener un residuo que se purificó mediante HPLC de preparación. Después del procesamiento, se obtuvo el compuesto 2g. LC-MS (método G): Rt = 2.25 minutos; M/z = 828 [ + Na], Paso 2h: Intermediario II El clorhidrato del intermediario II se obtuvo a partir del compuesto 2g (0.02 gramos; 0.025 milimoles) mediante el tratamiento con HCI 4N en dioxano (84 mililitros), a temperatura ambiente. Después de 1.5 horas, la mezcla de reacción se concentró bajo un alto vacío, para dar el clorhidrato del intermediario II. (método G): Rt = 1.59 minutos; M/z = 706 [M + 1].

Síntesis del Compuesto X Intermediario II Compuesto X Una suspensión del ácido (S)-1 -isopropil-piperidin-2-carboxílico (1.39 gramos; 8.11 milimoles) en N , N-dimetil-formamida (DMF) (150 mililitros) se trató con HATU (3.86 gramos; 10.14 milimoles), y di-¡sopropil-etil-amina (DIPEA) (3.54 mililitros; 20.29 milimoles), y se agitó a temperatura ambiente. La solución resultante se trató con el clorhidrato del intermediario II (0.28 gramos; 0.378 milimoles), y se agitó a temperatura ambiente bajo Argón durante 1 hora. La mezcla de reacción se absorbió en EtOAc, y se lavó con agua. La fase acuosa se extrajo con EtOAc. Los materiales orgánicos se combinaron, se lavaron con NaHC03 acuoso saturado, se secaron sobre Na2S0 y se concentraron hasta obtener un aceite color café. La purificación mediante cromatografía por evaporación instantánea (FC) sobre gel de sílice (eluyente: ciclohexano hasta ciclohexano/ acetona, 3:2) proporcionó el clorhidrato del compuesto X. HPLC (método B): Rt = 3.70 minutos; MS (método J) M/z = 858 [M + 1]. 1 H-R M (400 MHz, metanol-d4) : d (ppm) = 8.4 (d, 1H), 4.75 (d, 1H), 4.3 (d, 1H), 4.2 (t, 1H), 3.95 (bs, 1H), 3.4-3.7 (m, 9H), 3.0 (m, 1H), 2.15 (m, 1H), 1.05-2.1 (m, 43H), 1.05 (s, 9H), 0.9 (s, 3H), 0.95 (s, 3H).

Sal de HCI del Compuesto X (Forma A) Se disuelve la base libre en alcohol isopropílico (IPA) y se agrega 1 equivalente de HCI. El alcohol isopropílico (IPA) se evapora y los sólidos se equilibran en acetonitrilo a temperatura ambiente para dar una forma de di-hidrato. La forma cristalina (referida en la presente como la Forma A) exhibió los picos de difracción en polvo de rayos-X mostrados en la Tabla A a continuación. La Figura 1 muestra el patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma A.

Tabla A Sal de HCI del Compuesto X (Forma B) Se disuelven 600 miligramos de la base libre en 3 mililitros de acetato de etilo/acetonitrilo (2:1), y se agregan 700 microlitros de HCI 6N. La solución se equilibró durante 1 hora, y entonces se evaporó. Los sólidos se volvieron a suspender en acetonitrilo, y se formaron en una pasta durante 1 hora antes del aislamiento, para dar una forma anhidra. La forma cristalina (referida en la presente como la Forma B) exhibió los picos de difracción en polvo de rayos-X mostrados en la Tabla B a continuación. La Figura 2 muestra el patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma B.

Tabla B Sal de HCI del compuesto X (Forma C) 2.54 gramos de la base libre se disuelven en 3 mililitros de acetona. Se agregan 1.075 mililitros de HCI 2.75 N a la solución de la sustancia de fármaco. Esta solución se equilibró durante 2 horas, y entonces los sólidos se recolectaron mediante filtración, para dar un material anhidro. La forma cristalina (referida en la presente como la Forma C) exhibió los picos de difracción en polvo de rayos-X mostrados en la Tabla C a continuación. La Figura 3 muestra el patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma C.

Tabla C Sal de HCI del Compuesto X (Forma D) La sal de HCI (Forma C) se equilibró en acetato de etilo durante 72 horas para dar una forma de di-hidrato. La forma cristalina (referida en la presente como la Forma D) exhibió los picos de difracción en polvo de rayos-X mostrados en la Tabla D a continuación. La Figura 4 muestra el patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma D.

Tabla D Sal de HCI del Compuesto X (Forma E) La sal de HCI se aisló después de la equilibración de la Forma B en agua durante 72 horas, para dar una forma de tri-hidrato. La forma cristalina (referida en la presente como la Forma E) exhibió los picos de difracción en polvo de rayos-X mostrados en la Tabla E a continuación. La Figura 5 muestra el patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma E.

Tabla E Sal de hemi-HCI del Compuesto X (Forma F) Se disolvieron 91 miligramos de la base libre en 0.5 mililitros de tetrahidrofurano (THF), se agregaron 53 microlitros de HCI 6N. Se agregaron 2 mililitros de acetonitrilo, y se equilibró el sistema durante 4 horas antes de recolectar los sólidos, para dar un dihidrato. La forma cristalina (referida en la presente como la Forma F) exhibió los picos de difracción en polvo de rayos-X mostrados en la Tabla F a continuación. La Figura 6 muestra el patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma F.

Tabla F Sal de MeSOgH del Compuesto X (Forma G) Se disuelven 50 miligramos de la base libre en metil-isobutil-cetona, se agrega 1 equivalente de ácido metan-sulfónico, y se equilibra durante 2 horas antes de recolectar los sólidos. La forma cristalina (referida en la presente como la Forma G) exhibió los picos de difracción en polvo de rayos-X mostrados en la Tabla G a continuación. La Figura 7 muestra el patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma G.

Tabla G Base Libre del Compuesto X (Forma H) La base libre del compuesto X se precipita a partir de acetato de isopropilo (solución transparente) durante el intercambio de solvente con CH3CN (suspensión), y se agita a 20°C durante 24 horas. La sustancia de fármaco final se aisló a partir de la suspensión de CH3CN y se lava con CH3CN para dar una forma anhidra. La forma cristalina (referida en la presente como la Forma H) exhibió los picos de difracción en polvo de rayos-X mostrados en la Tabla H a continuación. La Figura 8 muestra el patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma H.

Tabla H Compuesto X (Forma I) La Forma I se prepara mediante la disolución de la sustancia de fármaco en etanol y la precipitación con agua hasta una proporción final de 1:1, para dar una forma de mono-hidrato. La forma cristalina (referida en la presente como la Forma I) exhibió los picos de difracción en polvo de rayos-X mostrados en la Tabla I a continuación. La Figura 9 muestra el patrón de difracción en polvo de rayos-X de la Forma I.

Tabla I Compuesto X (Forma J)) La Forma J se obtiene a partir de metanol mediante la equilibración de la Forma H a 50°C. Los sólidos se recolectan mediante filtración, y se secan a 50°C.

Tabla J Compuesto X (Forma K) La Forma K se cristalizó a partir de etanol (100 por ciento) después de la adición de acetonitrilo. Los sólidos se recolectaron mediante centrifugación, y se secaron bajo un flujo de nitrógeno.

Tabla K Compuesto X (Forma L) La Forma L es la forma hidratada de la Forma H producida partir de acetonitrilo, y los sólidos se secan a 50°C. La exposición del sólido a una humedad elevada genera la Forma L.

Tabla L Compuesto X (Forma M) La Forma M se aisla a partir de etanol mediante la precipitación con agua. Los sólidos se aislan mediante filtración, y se secan a 50°C. La exposición del sólido a una humedad elevada genera la Forma M.

Tabla M Compuesto X (Forma N) La Forma N se cristalizó a partir de etanol (100 por ciento) después de la adición de acetonitrilo. Los sólidos se recolectaron mediante centrifugación, y se secaron bajo un flujo de nitrógeno.

Tabla N Actividad Biológica Ensayo de proteasa NS3-4A de HCV Se determina la actividad inhibidora del compuesto X contra la proteasa de serina NS3-4A del virus de hepatitis C en un ensayo homogéneo utilizando la proteína NS3-4A de longitud completa (genotipo 1a, cepa HCV-1), y un sustrato de péptido fluorogénico apagado internamente comercialmente disponible, como es descrito por Taliani, M., y colaboradores, 1996 Anal. Biochem. 240: 60-67, el cual se incorpora como referencia en su totalidad.

Ensayo de replicón de HCV basado en luciferasa Se determina la actividad antiviral y la citotoxicidad del compuesto X utilizando una línea celular de replicón de HCV del genotipo subgenómico 1b (Huh-Luc/neo-ET) que contiene un gen reportero de luciferasa, cuya expresión está bajo el control de la réplica y traducción del ARN del virus de hepatitis C (HCV). Brevemente, se siembran 5,000 células de replicón en cada pozo de las placas de cultivo de tejido de 96 pozos, y se dejan unirse en un medio de cultivo completo sin G418 durante la noche. Al siguiente día, el medio de cultivo se remplaza con un medio que contenga el compuesto X diluido en serie, en la presencia de suero bovino fetal (FBS) al 10 por ciento y sulfoxido de dimetilo (DMSO) al 0.5 por ciento. Después de 48 horas de tratamiento con el compuesto, se determinan las actividades restantes de luciferasa en las células, utilizando el reactivo BriteLite (Perkin Elmer, Wellesley, Massachusetts) con un lector de placas LMaxIl (Molecular Probé, Invitrogen). Cada punto de datos representa el promedio de cuatro réplicas en el cultivo celular. La IC50 es la concentración del compuesto en la cual se reduce la actividad de luciferasa en las células de replicón por el 50 por ciento. La citotoxicidad del compuesto se evalúa empleando un ensayo de viabilidad celular basado en TS.

El compuesto X se probó en el ensayo de proteasa anterior. El valor de IC50 se proporciona a continuación. El compuesto X también se probó en el ensayo de replicón anterior, y exhibió una I C5o de menos de aproximadamente 100 nM o menos.

Claims (27)

REIVINDICACIONES

1. La sal de clorhidrato de la (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-isopropil-piperid¡n-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimet¡l-butanoil]-N-{(1 R, 2 R)-2-eti 1-1 -[(pirrolidin-1 -i I-sulfonil)-carbamoil]-ciclopropil}-10,10-dimetil-7-aza-diespiro- [3.0.4.1 ]-decan-8-carboxam¡da, o un derivado farmacéuticamente aceptable de la misma.

2. La sal de hemi-clorhidrato de la (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amin o)-a ce til]-amino}-3,3-dimeti l-bu ta noil]-N-{(1R, 2R)-2-eti 1-1 - [(pirrolidin-1 -il-sulfonil)-carbamo¡l]-ciclopropil}-10,10-d¡met¡l-7-aza-diesp¡ro-[3.0.4.1 ]-decan-8-carboxam¡da, o un derivado farmacéutica-mente aceptable de la misma.

3. La sal de ácido metansulfónico de la (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1 R,2 )-2-etil-1 -[(pirrol¡din-1-il-sulfonil)-carbamoil]-ciclopropil}-10,10-dimetil-7-aza-d¡espiro-[3.0.4.1 ]-decan-8-carboxam¡da, o un derivado farmacéuticamente aceptable de la misma.

4. Una forma cristalina de la sal de clorhidrato de la (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-¡sopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1 R,2R)-2-eti 1-1 - [(pirrolidin-1 - i l-sulfon i l)-carbamoi l]-cicloprop¡ l}-10, 10-dimetil-7-aza-diespiro-[3.0.4.1 ]-decan-8-carboxamida (Forma A) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 7.7, 8.9, 11.8, 15.5 y 18.0.

5. Una forma cristalina de la sal de clorhidrato de la (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1R,2R)-2-et il-1 - [(pirro lid¡n-1-il-sulfonil)-carbamoil]-ciclopropil}- 10,10-dimet il-7-aza-diesp¡ro-[3.0.4.1]-decan-8-carboxamida (Forma B) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 7.8, 8.6, 11.3, 15.8 y 18.2.

6. Una forma cristalina de la sal de clorhidrato de la (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-¡sopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1R,2R)-2-etil-1 - [(pirrolidin-1 - il-sulfonil)-carbamoil]-ciclopropil}-10, 1 O-dimetil-7-aza-diespiro-[3.0.4.1 ]-decan-8-carboxamida (Forma C) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 9.2, 14.4, 15.3, 17.7 y 20.0.

7. Una forma cristalina de la sal de clorhidrato de la (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1R,2R)-2-etil-1 - [(pirrolidin-1 - il-sulfonil)-carbamoil]-ciclopropil}-10,10-dimetil-7-aza-diespiro-[3.0.4.1]-decan-8-carboxamida (Forma D) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 8.0, 8.3, 14.3, 15.9 y 18.2.

8. Una forma cristalina de la sal de clorhidrato de la (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-¡sopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1R,2R)-2-etil-1-[(pirrolidin-1-il-sulfonil)-carbamoil]-ciclopropil}-10,10-dimetil-7-aza-diespiro-[3.0.4.1 ]-decan-8-carboxamida (Forma E) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 7.5, 8.8, 9.2, 15.6 y 17.8.

9. Una forma cristalina de la sal de hemi-clorhidrato de la (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1R,2R)-2-et il-1 - [(pirro lid ¡?-1-il-sulfo nil)-carbamoil]-ciclopropil}- 10,10-dimet ¡I-7-aza-diespiro-[3.0.4.1 ]-decan-8-carboxamida (Forma F) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 6.9, 11.3, 14.8, 16.0 y 18.2.

10. Una forma cristalina de la sal de ácido metan-sulfónico de la (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1 R,2R)-2-etil-1 - [(pirro lidin-1 -il-sulfonil)-carbamoil]-ciclopropil}- 10,10-dimetil-7-aza-diespiro-[3.0.4.1]-decan-8-carboxamida (Forma G) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 5.8, 6.5, 7.8, 10.4 y 15.7.

11. Una forma cristalina de la (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2- ciclohexil-2-({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1 R ,2R)-2-etil- 1 -[(pirrol¡din-1 -il-sulfonilj-carbamoilj-ciclopropilj-l 0, 1 O-dimetil-7-aza-diespíro-[3.0.4.1]-decan-8-carboxamida (Forma H) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 5.7, 6.9, 7.8, 14.4 y 18.5

12. Una forma cristalina de la (5R ,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1 R , 2 R )-2-eti I- 1 -[(p¡ rrolid i n- 1 -il-sulfonil)-carbamoil]-ciclopropil}-10,10-dimetil-7-aza-diespiro- [3.0.4.1 ]-decan-8-carboxamida (Forma I) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 9.5, 13.3, 14.5, 19.0 y 19.7.

13. Una forma cristalina de la (5R ,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-¡sopropil-piperidin-2-¡l]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1 R ,2R)-2-etil-1 -[(pirrolidin-1 -il-sulfonil)-carbamoil]-ciclopropil}-10,10-dimetil-7-aza-diespiro-[3.0.4.1]-decan-8-carboxamida (Forma J) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 6.9, 8.3, 12.5, 13.6, 16.0, 16.8, y 17.1.

14. Una forma cristalina de la (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-c¡clohexil-2-({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-¡l]-carbonil}-amino)-acet¡l]-am ¡ no}-3, 3-d i metí l-buta noi l]-N -{( 1 R, 2 R)-2-et¡ 1-1 -[(pirrolidin-1 -il-sulfoníl)-carbamoil]-cicloprop¡l}-10,1 O-dímetil-7-aza-diespiro-[3.0.4.1]-decan-8-carboxamida (Forma K) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 6.1, 7.4, 8.3, 22.1, 23.7, 24.1, y 24.6.

15. Una forma cristalina de la (5R ,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimet¡l-butanoil]-N-{(1 R ,2R)-2-et¡l-1 -[(pirrolidin-1 -il-sulfoni -carbamoill-ciclopropil -IO.IO-dimetil^-aza-diespiro-[3.0.4.1]-decan-8-carboxamida (Forma L) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 5.7, 8.2, 16.9, 18.4 y 18.5.

16. Una forma cristalina de la (5R ,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-isopropil-piper¡din-2-¡l]-carbonil}-amino)-acetil]-am¡no}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1 R ,2 )-2-etil- 1 -[(pirro lid in- -il-sulfonil)-carbamoil]-ciclopropil}-10,10-dimetil-7-aza-diespiro-[3.0.4.1 ]-decan-8-carboxam¡da (Forma M) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 6.7, 7.6, 7.7, 9.5, y 19.0.

17. Una forma cristalina de la (5R ,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1 R ,2R)-2-etil- 1 -[(pirro lidin-1 -il-sulfonil)-carbamoil]-ciclopropil}-10,10-dimetil-7-aza-diesp¡ro- [3.0.4.1]-decan-8-carboxamida (Forma N) que exhibe cuando menos los siguientes picos de difracción en polvo de rayos-X característicos (expresados en grados 2T): 6.3, 7.7, 8.7, 16.0, 18.1, y 20.5.

18. Una composición farmacéutica, la cual comprende una sal de la (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1 -isopropil- rt piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N- {(1 R,2R)-2-et ¡1-1 - [(pirro lidin-1 -il-sulfo n¡l)-carbamoil]-c¡cloprop¡ I}- 10,10-dimetil-7-aza-diespiro-[3.0.4.1]-decan-8-carboxamida de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una forma cristalina de la misma de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 17, en asociación con un adyuvante, diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

19. Una sal de la (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohex¡l-2- ({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3- dimetil-butanoil]-N-{(1 R ,2 R)-2-etil-1 - [(pirrol id in-1 - il-sulfo nil)- ca rbamoil]-ciclopropil}- 10,10-dimetil-7-aza-diespiro-[3.0.4.1 ]-decan- 8-carboxamida de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una forma cristalina de la misma de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 17, para utilizarse en terapia.

20. Una sal de la (5R ,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2- ({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3- dimetil-butanoil]-N-{(1 R ,2R)-2-etil-1 -[(pirrolidin-1 -¡l-sulfoni - carbamoilJ-ciclopropilJ-IO.IO-dimetil^-aza-diespiro-fS.O^.I^decan- 8-carboxamida o una forma cristalina de la misma como se reclama en la reivindicación 14, en donde la terapia es el tratamiento de un trastorno asociado con el virus de hepatitis C (HCV).

21. La sal de la (5R ,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2- ({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3- dimetil-butanoil]-N-{(1 R,2 R)-2-etil-1 -[(pirrol id in-1 -il-sulfonil)- carbamoil]-ciclopropil}-10,10-dimetil-7-aza-diespiro-[3.0.4.1]-decan- 8-carboxam¡da o una forma cristalina de la misma de acuerdo con la reivindicación 15, en donde el trastorno asociado con el virus de hepatitis C (HCV) se selecciona a partir del grupo que consiste en infección por el virus de hepatitis C (HCV), cirrosis hepática, enfermedad crónica del hígado, carcinoma hepatocelular, crioglobulinemia, linfoma no de Hodgkin, fibrosis hepática, y una respuesta inmunitaria intracelular innata suprimida.

22. El uso de una sal de la (5R ,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1 R ,2R)-2-etil-1 -[(p¡rrol¡din-1 - il-sulfoniIJ-carbamoill-ciclopropiIJ-IO.IO-dimetil-y-aza-diespiro-[3.0.4.1]-decan-8-carboxamida de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una forma cristalina de la misma de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 17, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de un trastorno asociado con el virus de hepatitis C (HCV).

23. El uso de acuerdo con la reivindicación 17, en donde el trastorno asociado con el virus de hepatitis C (HCV) se selecciona a partir del grupo que consiste en infección por el virus de hepatitis C (HCV), cirrosis hepática, enfermedad crónica del hígado, carcinoma hepatocelular, crioglobulinemia, linfoma no de Hodgkin, fibrosis hepática, y una respuesta inmunitaria intracelular innata suprimida.

24. Un método de tratamiento, el cual comprende administrar a un sujeto que lo necesite, una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal de la (5R,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1- isopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1 R,2R)-2-etil-1-[(p¡rrol¡d¡n-1-il-sulfon¡l)-carbamo¡l]-ciclop ropil}- 10,10 -dimetil-7-aza-d ¡espiro-[3.0.4.1 ]-decan-8-carboxamida de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una forma cristalina de la misma de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 17.

25. El método de la reivindicación 19, para el tratamiento de un trastorno asociado con el virus de hepatitis C (HCV).

26. El método de la reivindicación 19, en donde el trastorno asociado con el virus de hepatitis C (HCV) se selecciona a partir del grupo que consiste en infección por el virus de hepatitis C (HCV), cirrosis hepática, enfermedad crónica del hígado, carcinoma hepatocelular, crioglobulinemia, linfoma no de Hodgkin, fibrosis hepática, y una respuesta inmunitaria intracelular innata suprimida.

27. Un proceso para la preparación de las formas cristalinas A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K, L, M o N de la (5R ,8S)-7-[(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-isopro il-piperidin-2-il]-carbonil}-am¡no)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butano¡l]-N-{(1 R , 2 R ) -2- eti I- 1 - [(pir rolidin-1-il-sulfonil)-carbamoil]-ciclop ropil}- 10,10-dimetil-7-az a-diespiro-[3.0.4.1]-decan-8-carboxamida, el cual comprende la cristalización de la forma a partir de una solución de la (5R,8S)-7- [(2S)-2-{[(2S)-2-ciclohexil-2-({[(2S)-1-¡sopropil-piperidin-2-il]-carbonil}-amino)-acetil]-amino}-3,3-dimetil-butanoil]-N-{(1 ,2R)-2-etil-1-[(p¡rrol¡din-1-il-sulfonil)-carbamoil]-ciclopro il}-10,10-dimetil-7-aza-diespiro-[3.0.4.1]-decan-8-carboxamida.