MX2011003532A - Derivados de indol adecuados para la formacion de imagen de neuroinflamacion. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a la formación de imagen, in vivo, y en particular a la formación de imagen, in vivo, del receptor de benzodiazepina periférica (PBR). Se proporciona un agente formador de imagen, in vivo, indol tetracíclico, que se une con alta afinidad al PBR, tiene buena absorción en el cerebro después de la administración, y el cual preferencialmente se une a tejidos expresando niveles superiores de PBR. La presente invención también proporciona un compuesto precursor útil en la síntesis del agente formador de imagen in vivo de la invención, así como un método para la síntesis de dicho agente formador de imagen in vivo, que comprende el uso de dicho compuesto precursor, y un equipo para llevar a cabo dicho método. También se proporciona un casete para la síntesis automatizada del agente formador de imagen in vivo. Además, la invención proporciona una composición radio-farmacéutica que comprende el agente formador de imagen in vivo de la invención, así como métodos para utilizar dicho agente formador de imagen in vivo.

Description

DERIVADOS DE INDOL ADECUADOS PARA LA FORMACIÓN DE IMAGEN DE N EUROIN FLAM ACIÓN Campo de la Invención La presente invención se refiere a la generación de imagen in vivo y en particular, generación de imagen in vivo del receptor de benzodiazepina periférico (PBR). Se proporciona un agente de generación de imagen in vivo de indol tetracíclico que enlaza con alta afinidad a PBR, tiene buena captación el cerebro después de la administración, y enlaza preferentemente a tejidos que expresan mayores niveles de PBR. La presente invención también proporciona un compuesto precursor útil en la síntesis del agente de generación de imagen in vivo de la presente invención, así como un método para la síntesis del agente de generación de imagen in vivo que comprende el uso de un compuesto precursor, y un equipo para llevar a cabo el método. También se proporciona un cartucho para la síntesis automática del agente de generación de imagen. Además, la presente invención proporciona una composición radiofarmacéutica que comprende el agente de generación de imagen in vivo de la presente invención, así como métodos para el uso del agente de generación de imagen in vivo.

Antecedentes de la Invención El receptor de benzodiazepina periférica (PBR), el cual también es conocido como una proteína transubicadora (TSPO), es conocido por estar localizado principalmente en los tejidos periféricos y células gliales, aunque su función fisiológica permanece sin ser aclarada. En forma subcelular, el PBR es conocido por localizarse en la membrana mitocondrial externa, indicando un papel potencial en la modulación de la función mitocondrial y en el sistema inmune. Se ha postulado en forma adicional que el PBR está implicado en la proliferación celular, esteroidogénesis, flujo de calcio y respiración celular. El PBR ha estado asociado con una variedad de condiciones que incluyen tensión aguda y crónica, ansiedad, depresión, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, daño cerebral, cáncer (Gavish y asociados Pharm. Rev. 1999; 51: 629), enfermedad de Huntington (MeBmer y Reynolds Neurosci. Lett. 1998; 241: 53-6), asma (Pelaia y asociados Gen. Pharmacol. 1997; 28(4): 495-8), artritis reumatoide (Bribes y asociados Eur. J. Pharmacol. 2002, 452(1): 111-22), ateroesclerosis (Davies y asociados J. Nucí. Med. 2004; 45: 1898-1907) y esclerosis múltiple (Banati y asociados 2000 Brain; 123. 2321). El PBR también se puede asociar con dolor neuropático, habiendo observado Tsuda y asociados, una microglia activada en sujetos con dolor neuropático (2005 TINS 28(2) pp101-7).

Los ligandos que tienen alta afinidad para el PBR son conocidos en la técnica. Una clase de compuestos de indol que tiene afinidad para el PBR (los valores IC5o para los compuestos más activos son de entre 0.2 nM y 5.0 nM) se describe en la Publicación de Patente US 6451795. Los compuestos ahí descritos son manifestados por ser útiles para la prevención o tratamientos de neuropatías periféricas y para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas centrales. Okubu y asociados (Bioorganic & Medicinal Chemistry 2004; 12: 3569-80) describe el diseño, síntesis y estructura de un grupo de compuestos de indol tatracíclico que tienen afinidad para PBR (los valores IC50 son tan bajos como aproximadamente 0.4 nM). En la publicación de Okubu y asociados, no se describe una aplicación particular de los compuestos.

La generación de imagen in vivo del PBR también es conocida en la técnica. Las generación de imagen mediante tomografía de emisión de positrón (PET) utilizando el ligando selectivo PBR, (R)-[11C]PK11195, proporciona un indicador genérico de la inflamación del sistema nervioso central (CNS). A pesar del uso exitoso de (R)-[C]PK11195, éste tiene sus limitaciones. Se sabe que tiene alto enlace de proteínas, y es específico en bajo nivel para enlace no específico (Lockhart y asociados. Nucí Med Biol. 30(2): 199-206). El desempeño de sus metabolitos radioetiquetados no es conocido, y la cuantificación del enlace requiere el modelado o complejo. Ha habido esfuerzos para proporcionar compuestos que tienen alta afinidad y selectividad para PBR, para permitir la medida mejorada de PBR en el CBS. [11C]DAA1106 y [18F]FEDAA 106 son radioligandos PET a base de compuestos de ariloxialinina, y han sido estudiados en humanos (Ikomo y asociados J. Cereb. Blood Flow Metab. 2007; 27: 173-84 y Fujimura y asociados J. Nuc. Med. 2006; 47: 43-50). Sin embargo, las propiedades cinéticas de estos compuestos no son ideales y pueden limitar su aplicación a estudios cuantitativos. En un esfuerzo para mejorar en forma adicional estos ligandos, Briard y asociados (J. Med. Chem. 2008; 51: 17-30), ha reportado otro derivado de ariloxianilina, PBR28. Se inyectó una versión etiquetada-1 C de PBR28 en monos para evaluar sus cinéticas cerebrales utilizando PET. [ 1C]PBR28 mostró alta captación cerebral, buen enlace específico a tejidos que expresan PBR y propiedades cinéticas más adecuadas para generación de imagen in vivo. También se han evaluado compuestos de pirazolopirimidina de enlace PBR como radioligandos PET para dirigir PBR. James y asociados (J. Nuc. Med. 2008; 49(5): 814-22) reporta que el radioligando PET [18F]-DP A-714 tiene alta afinidad para PBR, y una captación selectiva mediante PBR en el cerebro del orangután después de la administración intravenosa. Las cinéticas ,de la captación cerebral de [18F]-DPA-714, fue reportada por ser más lenta, pero similar en naturaleza a [1 C]DAA1106 y [18F]FEDAA1106. La Publicación Internacional WO 2007/057705 describe compuestos de indol tetracíclicos etiquetados con una porción de generación de imagen, los cuales son adecuados para la generación de imágenes in vivo. Los agentes de generación de imágenes in vivo ejemplificados en la Publicación Internacional WO 2007/057705, mostraron tener buena afinidad para el PBR, con valores K, en un ensayo de competición contra [3H]-PK-11195 de entre 1.0 nM y 0.1 nM. Sin embargo, los inventores de la presente invención ahora han descubierto que la selectividad de estos compuestos para tejidos que expresan PBR, no es ideal para generación de imágenes in vivo de expresión del PBR en el sistema nervioso central.

Hay alcance para mejorar los compuestos de indol tetracíclicos conocidos con el objeto de proporcionar agentes de generación de imágenes in vivo alternativos para evaluación de la expresión PBR en el sistema nervioso central.

Breve Descripción de la Invención La presente invención proporciona agentes de generación de imágenes in vivo basados en compuestos de indol tetracíclico. En comparación con agentes de generación de imágenes in vivo conocidos basados en compuestos de indol tetracíclico, los agentes de generación de imágenes in vivo de la presente invención tienen mejores propiedades para generación de imágenes in vivo. Los agentes de generación de imágenes in vivo de la presente invención tienen buenas propiedades de enlace con el receptor de benzodiazepina periférica, así como buena captación cerebral y cinética in vivo, después de la administración a un sujeto.

Descripción Detallada de la Invención Agente de generación de imágenes En un aspecto, la presente invención proporciona un agente de generación de imágenes in vivo de la fórmula I: o una sal o solvato del mismo, en donde: Q es hidrógeno o flúor; X es hidrógeno, flúor, bromo, yodo, hidroxi, alquilo, d.6 haloalquilo, C -6 alcoxi, o 01-6 alquil amida; Y es S, SO o S02; y, es hidrógeno, C -6 alquilo o d-6 fluoroalquilo; y en donde al menos un átomo del agente de generación de imágenes in vivo de la fórmula I es un radioisótopo adecuado para generación de imágenes in vivo; en donde cuando dicho radioisótopo es un radioisótopo de carbono, es un carbono de carbonilo. con la provisión de que cuando Y es S, Q o X ambos no son hidrógeno.

El término "generación de imágenes in vivo" tal como se utiliza en la presente invención, se refiere a las técnicas que producen en forma no invasiva imágenes de todo o parte del aspecto interno del sujeto de la presente invención. Los métodos de generación de imágenes in vivo preferidos para utilizarse en la presente invención, son tomografía computarizada de emisión de fotones simple (SPECT) y tomografía de emisión de positrón (PET), siendo especialmente preferido PET. La preferencia para PET en el método de la presente invención, se debe a su excelente sensibilidad y resolución, de modo que se pueden observar con el tiempo cambios incluso relativamente pequeños. Los exploradores de micro-PET miden en forma rutinaria las concentraciones de radioactividad en el rango pico molar. Los exploradores micro-PET, ahora alcanzan una resolución espacial de aproximadamente 1 mm, y los exploradores clínicos de aproximadamente 4 a 5 mm.

El "agente de generación de imágenes in vivo" de la fórmula I, comprende un radioisótopo adecuado para generación de imágenes in vivo. Este "radioisótopo adecuado para generación de imágenes in vivo" es una forma radioisotópica de uno de los átomos definidos anteriormente para el agente de generación de imagen in vivo de la fórmula I. Con el objeto de ser adecuado para la generación de imágenes in vivo tal como aquí se define, el radioisótopo es preferentemente un emisor gamma o un emisor de positrón, que permite de esta forma la detección del agente de generación de imágenes in vivo externo al sujeto después de la administración.

Las sales adecuadas de acuerdo con la presente invención incluyen (i) sales de adición de ácido fisiológicamente aceptables tales como las derivadas de ácidos minerales, por ejemplo ácidos clorhídrico, bromhídrico, fosfórico, metafosfórico, nítrico y sulfúrico, y las derivadas de ácidos orgánicos, por ejemplo ácido tartárico, trifluoroacético, cítrico, málico, láctico, fumárico, benzoico, glicólico, glucónico, succínico, metanosulfonico y para-toluenosulfónico; y (ii) sales base fisiológicamente aceptables tales como sales de amonio, sales de metal álcali (por ejemplo las de sodio y potasio), sales de metal de tierra alcalina (por ejemplo las de calcio y magnesio), sales con bases orgánicas tales como trietanolamina, N-metil-D-glucamina, piperidina, piridina, piperazina y morfolina, y sales con aminoácidos tales como arginina y Usina.

Los solvatos adecuados de acuerdo con la presente invención, incluyen los formados con etanol, agua, solución salina, amortiguador fisiológico y glicol.

A menos que se especifique lo contrario, el término "alquilo" solo o en combinación, significa un radical alquilo de cadena recta o cadena ramificada que contiene preferentemente de 1 a 6 átomos de carbono, más preferentemente 1 a 4 átomos de carbono. Los ejemplos de dichos radicales incluyen pero no se limitan a, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, ter-butilo, pentilo, iso-amilo, hexilo.

A menos que se especifique de otra manera, el término "alcoxi", solo o en combinación, significa un radical de éter alquilo en donde el término alquilo es tal como se definió anteriormente. Los ejemplos de radicales de éter alquílico adecuados incluyen, pero no se limitan a metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, n-butoxi, iso-butoxi, sec-butoxi, ter-butoxi.

El término "alquil amida" es un grupo alquilo tal como se definió anteriormente enlazado a una amida, en donde la amida es el grupo -(C = 0)-NR'R", en donde R' y R" son independientemente hidrógeno o un radical de hidrocarburo.

El término "halógeno" o "halo-" significa un sustituyente seleccionado de flúor, cloro, bromo o yodo. "Haloalquilo" es un grupo alquilo, tal como se definió anteriormente, sustituido con uno o más halógenos.

El término "hidroxi" se refiere al radical -OH.

En una modalidad preferida, Q es hidrógeno.

X es preferentemente hidrógeno, flúor, bromo, yodo, hidroxi, C1.4 alquilo, d-4 haloalquilo, C1.4 alcoxi, o Ci-4 alquil amida. X es más preferentemente hidrógeno o C1.4 alcoxi.

Y es preferentemente S o S02.

Y es más preferentemente S.

R es preferentemente hidrógeno, Ci-4 alquilo, o C1-4 fluoroalquilo. R es más preferentemente Ci-4 fluoroalquilo.

En una modalidad preferida de la fórmula I: X es hidrógeno, flúor, bromo, yodo, hidroxi, Ci-4 alquilo, C1.4 haloalquilo, Ci-4 alcoxi, o C1.4 alquil amida; Y es S o S02; y, R es hidrógeno, Ci-4 alquilo, o Ci-4 fluoroalquilo.

En una modalidad más preferida de la fórmula I: Q es hidrógeno; X es C -4 alcoxi; Y es S; y, R es C-i-4 fluoroalquilo.

En una modalidad preferida alternativa de la fórmula I: Q es flúor; X es hidrógeno; Y es S; y, R es Ci-4 fluoroalquilo.

Los radioisótopos preferidos adecuados para generación de imágenes in vivo de la presente invención, son halógenos radioactivos de emisión-gamma y no metales radioactivos de emisión de positrones. Los ejemplos de halógenos radioactivos de emisión-gamma adecuados para utilizarse en la presente invención son 123l, 131l y 77Br. Un halógeno radioactivo de emisión-gamma preferido es 123l.

Los ejemplos de no metal radioactivo de emisión-positrón adecuado para utilizarse en la presente invención son 11C, 13N, 8F y 12 l. Un no metal radioactivo de emisión-positrón preferido es 18F. 18F es el radioisótopo más preferido adecuado para generación de imágenes in vivo de la presente invención.

En una modalidad preferida, para el agente de generación de imágenes in vivo de la fórmula I X es 23l, 12 l o 131l, 18F o C-1 -4 [ 8F]-fluoroalquilo.

En una modalidad preferida alternativa, para el agente de generación de imágenes in vivo de la fórmula I, R es C-i -4 [ 8F]-fluoroalquilo.

En una modalidad preferida alternativa adicional, para el agente de generación de imágenes in vivo de la fórmula I el carbono de carbonilo es 11C.

Los ejemplos no limitantes de algunos agentes de generación de imágenes in vivo preferidos de la presente invención, son como se indica a continuación: 2 De los agentes de generación de imágenes in vivo anteriores, el más preferido es el agente de generación de imágenes 2.

Los métodos sintéticos utilizados para obtener estos agentes de generación de imágenes in vivo se describen en la sección experimental que se encuentra más adelante. La potencia de estas versiones no radioactivas de los agentes de generación de imágenes in vivo de la presente invención, se midió en un ensayo in vivo, tal como se describe en el ejemplo 10.

Los ejemplos 7 a 9 describen como obtener los agentes de generación de imágenes in vivo radiofluorinados 1 a 7. Los expertos en la técnica conocerán que cuando se maneja 18F, la escala y las condiciones utilizadas son diferentes por consideraciones de seguridad y prácticas. Para una revisión de la producción de los trazadores 18F PET, ver los capítulos 1 y 2 de la Publicación de "Principios y Práctica de Tomografía de emisión de positrones" (2002 Lippincott Williams & Wilkins; Wahl y Buchanan, Eds.). Los agentes de generación de imágenes in vivo fueron probados en un modelo de biodistribución animal (Ejemplo 11), y su biodistribución comparada con la del compuesto de la técnica anterior [18F]FE-PBR (preparado de acuerdo con el Ejemplo 14 de la Publicación Internacional WO 2007/057705): [10F]FE-PBR La tabla 1 que se encuentra a continuación, proporciona datos obtenidos en el ensayo de afinidad in vivo, así como en el estudio de biodistribución in vivo. Se probaron análogos no radioactivos en el ensayo de afinidad in vitro, y se evaluaron las versiones radioetiquetadas en el ensayo de biodistribución.

Tabla 1: Datos de afinidad in vitro y datos de captación específica in vivo para agentes de generación de imágenes in vivo 1 a 7 de la presente invención, en comparación con el compuesto de la técnica anterior [18F]FE-PBR. OB = bulbo olfativo.

Los datos ilustran que la potencia de las versiones no radioactivas de los agentes de generación de imágenes in vivo 1 a 7, se compara en forma favorable con el del compuesto de la técnica anterior [1BF]FE-PBR. Además, los datos muestran que los agentes de generación de imágenes in vivo 1 a 7 de la presente invención, son retenidos en forma significativamente mayor en el OB, en comparación con el estriato a los 30 minutos posteriores a la inyección, en comparación con [18F]FE- PBR. Tal como se sabe el PBR es altamente expresado en el OB en comparación con otras áreas del cerebro de rata (ver la Publicación de "Manual de Abuso de Sustancias" de Tarter, Ammerman and Ott; Springer 1998. 398-99) estos datos demuestran en forma sorprendente que los agentes de generación de imágenes in vivo 1 a 7, tienen selectividad mejorada para el PBR en comparación con el agente de generación de imágenes in vivo ejemplificado anteriormente, [18F]FE-PBR.

El agente de generación de imágenes in vivo 1, se analizó en forma adicional en un modelo de autorradiografía, tal como se describe en el ejemplo 12 que se encuentra a continuación. Se detectaron niveles de radioactividad significativamente mayores en la parte lesionada del núcleo facial (ver figuras 1 y 2). La intensidad promedio en la parte lesionada fue de 7.75 ±0.95 en comparación con 3.73 ± 0.36 en la parte no lesionada. La proporción entre los dos lados fue de 8.23 ± 2.36. Ya que la lesión tiene una mayor expresión de PBR en comparación con lo normal, estos datos soportan la conclusión, a partir de los datos de biodistribucion, de que el agente de generación de imágenes in vivo 1, tiene buena selectividad para el PBR.

Los agentes de generación de imágenes in vivo de la presente invención, por consiguiente tienen propiedades inesperadamente superiores para la generación de imágenes in vivo del PBR en comparación con los agentes de generación de imágenes in vivo de enlace-PBR de indol tetracíclico.

Compuesto Precursor En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de precursor de la fórmula II: 2 (?) en donde uno de R1, X1 o Z1 comprende un grupo químico que reacciona con una fuente adecuada de un radioisótopo, en donde el radioisótopo es tal como se define de manera adecuada y preferentemente en la presente invención, de modo que el agente de generación de imágenes in vivo aquí definido en forma adecuada y preferente, es formado al momento de la reacción del compuesto precursor con la fuente adecuada del radioisótopo; y en donde: cuando R1 no comprende grupo químico, es tal como se define en la presente invención en forma adecuada y preferente para R of Formula I, y comprende en forma opcionalmente adicional un grupo de protección. cuando Z1 no comprende grupo químico es -C( = 0)-N-(CH2- CH3)2> y comprende opcionalmente en forma adicional un grupo de protección; Q es tal como se define en forma adecuada y preferente para Q de la fórmula; y Y1 es tal como se define en forma adecuada y preferente para Y de la fórmula I, y comprende en forma opcionalmente adicional un grupo de protección.

Un "compuesto precursor" comprende un derivado de un compuesto radioetiquetado, diseñado de modo que la reacción química con una forma química conveniente de la etiqueta detectable, ocurre en forma específica del sitio; se puede llevar a cabo en el número mínimo de pasos (idealmente un solo paso); y sin la necesidad de purificación significativa (idealmente sin purificación adicional), para proporcionar el agente de generación de imágenes in vivo deseado. Dichos compuestos precursores son sintéticos y pueden ser obtenidos convenientemente con una buena pureza química. El compuesto precursor puede contener opcionalmente un grupo de protección para ciertos grupos funcionales del compuesto precursor.

Por el término "grupo de protección" se entiende un grupo que inhibe o suprime las reacciones químicas indeseables, pero el cual está diseñado para ser lo suficientemente reactivo de modo que pueda ser disociado del grupo funcional en cuestión, bajo condiciones lo suficientemente leves de modo que no se modifique el resto de la molécula. Después de la desprotección, se obtiene el producto deseado. Los grupos de protección son conocidos para los expertos en la técnica y se eligen en forma adecuada de, para grupos amina: Boc (en donde Boc es ter-butiloxicarbonilo), Fmoc (en donde Fmoc es fluorenilmetoxicarbonilo), trifluoroacetilo, aliloxicarbonilo, de [por ejemplo 1 -(4,4-dimetil-2,6-dioxociclohexilideno)etilo] o Npys (por ejemplo sulfenilo de 3-nitro-2-piridina); y para grupos carboxilo; éster metílico, éster ter-butílico o éster bencílico. Para grupos idroxilo, los grupos de protección adecuados son: metilo, etilo o ter-butilo; alcoximetilo o alcoxietilo; bencilo; acetilo; benzoilo; tritilo (TYt) o trialquilsililo tal como tetrabutildimetilsililo. El uso de grupos de protección adicionales se describe en la Publicación de "Grupos Protectores en Síntesis Orgánica", Theorodora W. Greene y Peter G. M. Wuts, (Tercer Edición, John Wiley & Sons, 1999).

El término "una fuente adecuada de un radioisótopo" significa que el radioisótopo está en una forma química que es reactiva con un sustituyente del compuesto precursor, de modo que el radioisótopo queda covalentemente adherido al compuesto precursor.

Para cada radioisótopo particular presentado en la siguiente sección, se describen una o más fuentes adecuadas del radioisótopo. Los expertos en la técnica de los agentes de generación de imágenes in vivo, estarán familiarizados con éstas y otras fuentes de radioisótopos que son adecuadas para aplicación en la presente invención.

Cuando el radioisótopo del agente de generación de imágenes in vivo es 8F, el átomo de radiofluoro puede formar parte de un grupo fluoroalquilo o fluoroalcoxi. Ya que los fluoruros de alquilo son resistentes a metabolismo in vivo. Como alternativa, el átomo de radiofluoro puede adherirse a través de un enlace covalente directo a un anillo aromático tal como un anillo de benceno.

Se puede llevar a cabo radiofluorinado a través de etiquetado directo utilizando la reacción de 8F-fluoruro, con un grupo químico adecuado en el compuesto precursor que tiene un buen grupo de partida, tal como un bromuro de alquilo, mesilato de alquilo o tosilato de alquilo. 18F también se puede introducir mediante O-alquilación de los grupos hidroxilo con 18F(CH2)3OMs o 18F(CH2)3Br.

Para sistemas de arilo, el desplazamiento nucleofílico de 18F-fluoruro de una sal de diazonio de arilo, compuesto de nitro de arilo o una sal de amonio cuaternaria de arilo, son rutas adecuadas para derivados arilo-18F. Dicha estrategia es adecuada por ejemplo para introducir 18F en las posiciones 1-4 o 7-10 de la fórmula I.

Como alternativa, el etiquetado con 18F puede lograrse mediante desplazamiento nucleofílico de un grupo de partida a partir de un derivado de la fórmula I. Los grupos de partida adecuados incluyen Cl, Br, I, tosilato (OTs), mesilato (OMs) y triflato (OTf). Dichos derivados son compuestos precursores para la preparación de compuestos de generación de imágenes in vivo de la presente invención.

Otra estrategia puede ser tener un grupo de partida adecuado tal como se definió anteriormente en su lugar en el grupo alquilamida presente en el compuesto precursor. En esta forma, el compuesto precursor puede ser etiquetado en un paso mediante reacción con una fuente adecuada de un [18F]-ión de fluoruro (18F"), el cual se obtiene normalmente como una solución acuosa de la reacción nuclear 180(p,n)18F, y se hace reactiva mediante la adición de un contraión catiónico y la eliminación subsecuente del agua. Para este método, los compuestos precursores normalmente son protegidos en forma químicamente selectiva, de modo que tenga lugar la radiofluorinación en un sitio particular en el compuesto. Los grupos de protección adecuados son los ya mencionados anteriormente.

Cuando el radioisótopo es 18F, se prefiere que ya sea X1 o R1 comprenda cualquiera de: (i) un haluro de alquilo o un sulfonato de alquilo (tal como bromuro de alquilo, mesilato de alquilo o tosilato de alquilo) para sustitución nucleofílica; o (ii) hidroxilo (para introducción de 18F mediante O-alquilación de grupos hidroxilo, por ejemplo con 18F(CH2)30Ms o 18F(CH2)3Br).

A continuación se ilustra un esquema de reacción genérica para llegar a ciertos agentes de generación de imágenes ¡n vivo 8F de la presente invención: en donde X es tal como se define para la fórmula I, y n es entre 0 y 5. RT permanece para temperatura ambiente y OMs permanece para mesilato.

A continuación se ¡lustra un esquema de reacción genérica alternativa para llegar en ciertos agentes de generación de imágenes in vivo 18F de la presente invención: en donde X es tal como se define para la fórmula I, y n es entre 0 y 5, y OTs permanece para tosilato.

Compuestos de trazo PET etiquetado-1 C, se pueden sintetizar haciendo reaccionar un compuesto precursor con 1C yoduro de metilo. Ya que la vida media de 1C es únicamente de 20.4 minutos, es importante que el 11C yoduro de metilo intermediario, tenga alta actividad específica, y en consecuencia, se produzca utilizando un proceso de reacción el cual es tan rápido como es posible. En la Publicación de Antoni y asociados "Aspectos en la Síntesis de Compuestos Etiq uetados-11 C" en el Manual de Radiofarmacéuticos de Ed. M.J. Welch y CS. Redvanly (2003, John Wiley y Sons), se encuentra una revisión profunda de dichas técnicas de etiquetado-1 C.

Cuando el agente de generación de imágenes in vivo de la presente invención es etiquetado con 1 C, el 11C es un carbono de carbonilo. Esto significa por consiguiente que 11C puede estar presente en el carbono de carbonilo de la fórmula I, o como alternativa a X cuando X es un C1-6 alquil amida.

Se puede obtener un agente de generación de imágenes in vivo etiquetado-11 C de la fórmula I, empleando el siguiente esquema de reacción: en donde R3, X3 y Y3 de la fórmula llb y fórmula Id son tal como se describe para R, X y Y de la fórmula I; y Z3 es un substrato adecuado para catalizadores de metal de transición, por ejemplo, hidrógeno, haluro, ácido borónico, OTf, organoestaño.

Los métodos para la síntesis de compuestos etiquetados-13N, se describen en la Publicación de Clark y Aigbirhio ("Química de Nitrogen-13 y Oxygen-15" en "Manual de Radiofarmacéuticos"; 2003 Wiley: Welch y Redvanly, Eds.). Por ejemplo, se puede obtener un agente de generación de imágenes in vivo de la fórmula I mediante sustitución nucleofílica de un halógeno en un compuesto precursor adecuado con dietil amina etiquetada-13N para obtener la amida deseada.

Cuando la porción de generación de imágenes es radioyodo, los compuestos precursores preferidos son aquellos que comprenden un derivado que ya sea pasa por yodinación electrofílica o nucleofílica, o pasa por condensación con un aldehido o cetona etiquetada. Los ejemplos de la primera categoría son: (a) derivados organometálicos tales como trialquilestaño (por ejemplo, trimetilestanilo o tributilestanilo) o un trialquilsilano (por ejemplo trimetilsililo) o un compuesto de organoboro (por ejemplo, ásteres de boronato u organotrifluoroboratos); (b) anillos aromáticos activados hacia las yodinación electrofílica (por ejemplo fenoles) y anillos aromáticos activados hacia la yodinación nucleofílica (por ejemplo diazonio de arilo, sal de yodinio de arilo, sales de trialquilamonio de arilo o derivados de nitroarilo).

Para radioyodinación, el compuesto precursor comprende preferentemente: un yoduro o bromuro de arilo (para permitir el intercambio de radioyodo); un anillo de arilo del compuesto precursor activado (por ejemplo, un grupo fenol); un compuesto precursor organometálico (por ejemplo, un compuesto de trialquilestaño, trialquilsililo u organoboro) o un compuesto precursor orgánico tal como triazenos o un buen grupo de partida para sustitución nucleofílica tal como una sal de yodinio. Los compuestos precursores y métodos para introducir radioyodo en moléculas orgánicas se describe en la Publicación de Bolton (J. Lab. Comp. Radiopharm. 2002; 45: 485-528). Los compuestos precursores y métodos para introducir radioyodo en proteínas, son descritos por Wilbur (Bioconj. Chem. 1992; 3(6): 433-470). Los compuestos de organoboro de éster de boronato adecuados, y su preparación se describen en la Publicación de Kabalaka y asociados (Nucí. Med. Biol., 2002; 29: 841-843 y 2003; 30: 369-373). Los organotrifluoroboratos adecuados y su preparación son descritos por Kabalaka y asociados (Nucí. Med. Biol., 2004; 31: 935-938). Los compuestos precursores preferidos para radioyodinación comprenden un compuesto precursor organometálico, más preferentemente un trialquilestaño.

Los ejemplos de grupos arilo a los cuales se puede adherir el yodo radioactivo se proporcionan a continuación: Ambos contienen sustituyentes que permiten una fácil sustitución de radioyodo en el anillo aromático. Los sustituyentes alternativos que contienen yodo radioactivo pueden ser sintetizados mediante yodinado directo, mediante intercambio de radiohalógeno, por ejemplo Cuando el radioisótopo es radioyodo, X1 de la fórmula II, junto con el grupo aromático al cual se adhiere, forma: (i) un anillo aromático sustituido ya sea con un derivado organometálico o un compuesto de organoboro; (ii) un anillo aromático activado hacia radioyodinado electrofílico (por ejemplo fenoles); o (iii) un anillo aromático activado hacia radioyodinado nucleofílico (por ejemplo sal de yodinio de arilo, diazonio de arilo, sales de trialquilamonio de arilo o derivados de nitroarilo.

Estos compuestos precursores son fácilmente convertidos en agentes de generación de imágenes in vivo radioyodinados de la presente invención, mediante sustitución de radioyodo.

Se puede lograr el radiobrominado a través de métodos similares a los descritos anteriormente para radioyodinado. Kabalka y Varma han revisado diversos métodos para la síntesis de compuestos radiohalogenados, incluyendo compuestos radiobrominados (Tetrahedron 1989; 45(21): 6601-21 ).

El compuesto precursor de la presente invención, se proporciona idealmente en forma apirogénica, estéril. El compuesto precursor puede ser utilizado con el siguiente para la preparación de la composición farmacéutica que comprende el agente de generación de imágenes in vivo junto con un transportador biocompatible adecuado para administración a mamíferos. El compuesto precursor también es adecuado para la inclusión como un componente en un equipo para la preparación de dicha composición farmacéutica.

En una modalidad preferida, el compuesto precursor se proporciona en una solución como parte de un equipo o de un cartucho diseñado para utilizarse en un aparato de síntesis automática. Estos aspectos se describen con mayor detalle más adelante en relación con aspectos adicionales de la presente invención.

En otra modalidad preferida, el compuesto precursor es enlazado a una fase sólida. El compuesto precursor es suministrado preferentemente, adherido en forma covalente a la matriz de soporte sólido. En esta forma, el producto deseado se forma en la solución, mientras que los materiales de partida y las impurezas permanecen enlazados a la fase sólida. Como un ejemplo de dicho sistema, los compuestos precursores del fluorinado electrofílico de fase sólida con 13F fluoruro se describen en la Publicación Internacional WO 03/002489, y los compuestos precursores para el fluorinado nucleofílico de fase sólida con 18F-fluoruro se describe en la Publicación Internacional WO 03/002157.

Métodos para Preparación de un Agente de Generación de I mágenes En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un método para la preparación de un agente de generación de imágenes in vivo de la presente invención, en donde el método comprende: (i) proporcionar un compuesto precursor de la fórmula II tal como se definió anteriormente; (ii) proporcionar una fuente adecuada de radioisótopo tal como se definió anteriormente; (iii) hacer reaccionar el compuesto precursor del paso (i) con un radioisótopo del paso (i) para obtener un agente de generación de imágenes in vivo de la presente invención.

En el paso (i), el compuesto precursor puede ser proporcionado en la solución en un equipo o en un cartucho adecuado para utilizarse con un aparato de síntesis automático, o adherido en forma alternativa a un soporte sólido, tal como se describió anteriormente en la descripción del compuesto precursor. El equipo y el cartucho forman aspectos adicionales de la presente invención, y serán descritos con mayor detalle más adelante.

Las fuentes adecuadas de radioisótopo, son tal como se describe anteriormente, en relación con el compuesto precursor de la presente invención.

El paso de "hacer reaccionar" el compuesto precursor con el radioisótopo, implica llevar los dos reactivos juntos bajo condiciones de reacción adecuadas para la formación del agente de generación de imágenes in vivo deseado en un rendimiento radioquímico (RCY) tan alto como sea posible. Las rutas sintéticas particulares para obtener agentes de generación de imágenes in vivo de la presente invención se presentan en la sección experimental que se encuentra más adelante.

Equipo para la Preparación de Agente de Generación de Imágenes In Vivo Aún en otro aspecto, la presente invención proporciona equipo para la preparación de un agente de generación de imágenes in vivo de la presente invención, en donde el equipo comprende un compuesto precursor de la fórmula II tal como se describió anteriormente, de modo que la reacción con una fuente estéril de un radioisótopo proporcione el agente de generación de imágenes in vivo deseado con el número mínimo de manipulaciones. Dichas consideraciones son particularmente importantes cuando el radioisótopo tiene una vida media relativamente corta, y para la facilidad de manejo y por lo tanto la dosis de radiación reducida para el radiofarmacéutico. El compuesto precursor está presente preferentemente en el equipo en forma liofilizada, y el medio de reacción para reconstitución de dichos equipos es preferentemente un transportador biocompatible.

El "transportador biocompatible" es un fluido, especialmente un líquido, en el cual el agente de generación de imágenes in vivo es suspendido o di suelto, de modo que la composición sea fisiológicamente tolerable, es decir se puede administrar al cuerpo del mamífero sin toxicidad o incomodidad indebida. El transportador biocompatible es en forma adecuada un líquido transportador inyectable tal como agua libre de pirógenos, solución estéril para inyección; una solución acuosa tal como solución salina (que puede ser balanceada en forma conveniente de modo que el producto final para inyección sea cualquiera de isotónico o no hipotónico); una solución acuosa de una o más sustancias de ajuste de tonicidad (por ejemplo sales de cationes de plasma con contraiones biocompatibles), azúcares (por ejemplo glucosa o sacarosa), alcoholes de azúcar (por ejemplo sorbitol o manitol), glicoles (por ejemplo glicerol) u otros materiales de poliol no iónico (por ejemplo polietilénglicoles, propilénglicoles y similares). El transportador biocompatible también puede comprender solventes orgánicos biocompatibles, tal como etanol. Dichos solventes orgánicos son útiles para solubilizar compuestos o formulaciones más lipofílicos. Preferentemente el transportador biocompatible es agua para inyección libre de pirógenos, solución salina ¡sotónica o una solución de etanol acuosa. El pH del transportador biocompatible para inyección intravenosa está en forma adecuada dentro del rango de 4.0 a 10.5.

En el equipo de la presente invención, el compuesto precursor se presenta preferentemente en un contenedor sellado que permite el mantenimiento de la integridad estéril y/o seguridad radioactiva, más opcionalmente un gas de espacio superior inerte (por ejemplo nitrógeno o argón), permitiendo al mismo tiempo la adición y extracción de soluciones mediante jeringa. Un contenedor sellado preferido es un frasco sellado con un tapón, en donde el cierre a prueba de gas es asegurado en el mismo con un sobresello (típicamente de aluminio). Dichos contenedores sellados tienen la ventaja adicional de que el cierre puede soportar si se desea el vacío, por ejemplo, para cambiar el gas del espacio superior o soluciones de extracción de gas.

Las modalidades preferidas dej compuesto precursor cuando se emplean en el equipo son tal como se describió anteriormente.

El compuesto precursor para utilizarse en el equipo, puede emplearse bajo condiciones de fabricación aséptica, para proporcionar el material no pirogénico, estéril deseado. El compuesto precursor puede ser empleado en forma alternativa bajo condiciones no estériles, seguido de esterilización terminal utilizando por ejemplo, irradiación-gamma, autoclave, calor seco o tratamiento químico (por ejemplo, óxido de etileno). Preferentemente, el compuesto precursor se proporciona en forma no pirogénica, estéril. Más preferentemente el compuesto precursor no pirogénico, estéril se proporciona en el contenedor sellado tal como se describió anteriormente.

Preferentemente, todos los componentes del equipo son desechables, para minimizar las posibilidades de contaminación entre corridas, y asegurar la esterilidad y calidad.

En una modalidad preferida, el equipo puede comprender un cartucho que puede ser conectado en un sintetizador automático adaptado en forma adecuada, que se describe con mayor detalle más adelante. Dicho equipo incluye normalmente medios para fluorinado con un ión de fluoruro, y también pueden comprender una columna para eliminar el ión de fluoruro no deseado. Los reactivos, solventes y otros consumibles requeridos para la síntesis también pueden estar incluidos junto con un medio de datos, tal como un software que lleva un disco compacto, que permite que el sintetizador automático sea operado en una forma que cumpla con los requerimientos de concentración, volumen, tiempo de suministro, etc., del usuario final.

Los [18F]-radiotrazadores para la generación de imágenes PET, actualmente son preparados con frecuencia en un aparato de radiosíntesis automático. Existen varios ejemplos comercialmente disponibles de dicho aparato, incluyendo Tracerlab y Fastlab (GE Heathcare). Dicho aparato comprende comúnmente un "cartucho", con frecuencia desechable, en el cual se lleva a cabo la radioquímica, el cual está adaptado al aparato con el objeto de llevar a cabo una radiosíntesis. El cartucho normalmente incluye trayectorias de fluido, un envase de reacción y puertas para recibir los frascos del reactivo, así como cualesquiera cartuchos de extracción de fase sólida utilizados en los pasos de limpieza post-radiosintética.

La presente invención proporciona por lo tanto en otro aspecto un cartucho para un aparato de síntesis automática que comprende el compuesto precursor en un contenedor sellado tal como se describió anteriormente. La presente invención también proporciona un cartucho para la síntesis automática de un agente de generación de imágenes ¡n vivo, tal como se define en la presente invención que comprende: (i) un envase que contiene un compuesto precursor tal como aquí se define; y (ii) medios para eluir el envase con una fuente adecuada de un radioisótopo, en donde el radioisótopo es tal como se define en la presente invención.

El cartucho puede comprender en forma adicional: (iii) un cartucho de intercambio de iones para la eliminación de una radioetiqueta en exceso; y opcionalmente; (iv) un cartucho para la desprotección del producto radioetiquetado resultante para formar un agente de generación de imágenes ¡n vivo tal como aquí se define.

Composición Radiofarmacéutica En otro aspecto adicional, la presente invención proporciona "composición radiofarmacéutica", la cual es una composición que comprende el agente de generación de imágenes in vivo de la presente invención, junto con un transportador biocompatible en una forma adecuada para administración a mamíferos. El transportador biocompatible es tal como se definió anteriormente en relación con el equipo de la presente invención.

La composición radiofarmacéutica se puede administrar en forma parenteral, es decir, a través de inyección, y más preferentemente es una solución acuosa. Dicha composición puede contener opcionalmente ingredientes adicionales tales como amortiguadores; solubilizadores farmacéuticamente aceptables (por ejemplo ciclodextrinas o tensoactivos tales como Pluronic, Tween o fosfolípidos); estabilizadores o antioxidantes farmacéuticamente aceptables (tal como ácido ascórbico, ácido gentísico o ácido para-aminobenzoico). Cuando el agente de generación de imágenes in vivo de la presente invención se proporciona como una composición radiofarmacéutica, el método para preparar el agente de generación de imágenes in vivo, puede comprender además los pasos requeridos para obtener una composición radiofarmacéutica, por ejemplo, eliminación del solvente orgánico, adición de un amortiguador biocompatible y cualesquiera ingredientes opcionales adicionales. Para administración parenteral, también se necesita realizar pasos para asegurar que la composición radiofarmacéutica es estéril y apirogénica.

Método de Generación de Imágenes In Vivo En aún un aspecto adicional, la presente invención proporciona un método de generación de imágenes in vivo para determinar la distribución y/o grado de expresión del PBR en un sujeto, en donde el método comprende: (i) administrar al sujeto un agente de generación de imágenes in vivo tal como se define en la presente invención; (ii) permitir que el agente de generación de imágenes in vivo enlace al PBR en el sujeto; (iii) detectar a través de un procedimiento de generación de imágenes in vivo, señales emitidas por el radioisótopo del agente de generación de imágenes in vivo. (iv) generar una imagen representativa del lugar y/o cantidad de las señales; y (v) determinar la distribución y grado de expresión del PBR en el sujeto, en donde la expresión se correlaciona directamente con las señales emitidas por el agente de generación de imágenes in vivo.

Para el método de generación de imágenes in vivo de la presente invención, el agente de generación de imágenes in vivo es tal como se define anteriormente en la especificación.

La "administración" del agente de generación de imágenes in vivo, se lleva a cabo preferentemente en forma parenteral, y lo más preferentemente en forma intravenosa. La ruta intravenosa representa la forma más eficiente de administrar el agente de generación de imágenes in vivo en el cuerpo del sujeto, y por consiguiente también atraviesa la barrera de sangre-cerebro (BBB) y está en contacto con el PBR expresado en el sujeto. El agente de generación de imágenes in vivo de la presente invención se administra preferentemente como la composición farmacéutica de la presente invención, tal como aquí se define.

Después del paso de administración y antes del paso de detección, el agente de generación de imágenes in vivo se deja enlazar al PBR. Por ejemplo, cuando el sujeto es un mamífero intacto, el agente de generación de imágenes in vivo se moverá dinámicamente a través del cuerpo del mamífero, quedando en contacto con diversos tejidos que se encuentran en el mismo.

Una vez que el agente de generación de imágenes in vivo está en contacto con el PBR, tiene lugar una interacción específica, de modo que el despeje del agente de generación de imágenes in vivo del tejido con el PBR, es más profundo que del tejido sin PBR, o con menos PBR. Se alcanzará un cierto punto en el tiempo cuando la detección de un agente de generación de imágenes in vivo que enlaza específicamente al PBR, se permita como resultado de la proporción entre el agente de generación de imágenes in vivo enlazado al tejido con el PBR versus el enlazado al tejido sin el PBR, o con los mismos PBR. Una proporción ideal es de aproximadamente 2:1.

El paso de "detección" del método de la presente invención, implica la detección de señales emitidas por el radioisótopo medio de un detector sensible a las señales Este paso de detección también puede ser comprendido como la adquisición de los datos de señal. La tomografía de emisión de fotón-simple (SPECT) y la tomografía de emisión-positrón (PET) son los procedimientos de generación de imágenes in vivo más adecuados para utilizarse en el método de la presente invención. PET es un procedimiento de agente de generación de imágenes in vivo preferido para utilizarse en el método de la presente invención.

El paso de "generación" del método de la presente invención, se lleva a cabo a través de una computadora que aplica un algoritmo de reconstrucción a los datos de señal adquirida, para producir un conjunto de datos. Este conjunto de datos posteriormente es manipulado para generar imágenes que muestran el lugar y/o cantidad de señales emitidas por el radioisótopo. Las señales emitidas se correlacionan directamente con la expresión del PBR, de modo que el paso de "determinación", se puede llevar a cabo evaluando la imagen generada .

El "sujeto" de la presente invención, puede ser cualquier sujeto humano o animal. Preferentemente el sujeto de la presente invención es un mamífero. Más preferentemente, el sujeto es un cuerpo de mamífero intacto in vivo. En una modalidad especialmente preferida, el sujeto de la presente invención es un humano. El método de generación de imágenes in vivo puede ser utilizado para estudiar el PBR en sujetos saludables, o en sujetos con los que se sabe o que se sospecha que tienen una condición patológica asociada con la expresión anormal del PBR (una "condición del PBR"). Preferentemente, el método se relaciona con la generación de imágenes in vivo a un sujeto que se sabe o se sospecha que tiene una condición del PBR, y por consiguiente tiene utilidad en un método para el diagnóstico de la condición. Los ejemplos de dichas condiciones del PBR, en donde la generación de imágenes in vivo puede ser de utilidad, incluyen neuropatolog ías tales como enfermedad de Parkinson, esclerosis múltiple, enfermedad de Alzheimer y enfermedad de Huntington, en donde está presente la neuroinflamación. Otras condiciones del PBR de las que se pueden generar imágenes útiles con los compuestos de la presente invención, incluyen dolor neuropático, artritis, asma, ateroesclerosis, así como enfermedades malignas tales como cáncer colorrectal y cáncer de mama. Los agentes de generación de imágenes in vivo de la presente invención son particularmente adecuados para generación de imágenes in vivo del sistema nervioso central (CNS), debido a su buena captación cerebral.

En una modalidad alternativa, el método de generación de imágenes in vivo de la presente invención, se puede llevar a cabo en forma repetida durante el curso del régimen de tratamiento para dicho sujeto, comprendiendo el régimen, la administración de un fármaco para combatir una condición del PBR. Por ejemplo, el método de generación de imágenes in vivo de la presente invención, se puede llevar a cabo antes, durante o después del tratamiento con un fármaco para combatir una condición del PBR. En esta forma, el efecto del tratamiento puede ser monitoreado con el tiempo. Preferentemente para esta modalidad, el procedimiento de generación de imágenes in vivo es PET. El PET tiene excelente sensibilidad y resolución, de modo que se pueden observar con el tiempo cambios en una lesión incluso relativamente pequeños, lo cual es conveniente para el monitoreo del tratamiento. Los exploradores del PET miden en forma rutinaria las concentraciones de radioactividad en el rango pico molar. Actualmente los exploradores micro-PET, alcanzan una resolución espacial de aproximadamente 1 mm, y los exploradores clínicos de aproximadamente 4 a 5 mm.

En un aspecto adicional, la presente invención proporciona métodos para el diagnóstico de una condición PBR. El método de diagnóstico de la presente invención, comprende el método de generación de imágenes in vivo tal como se definió anteriormente, junto con el paso adicional (vi) de atribuir la distribución y grado de expresión PBR a una imagen clínica en particular, es decir, la fase de decisión médica deductiva.

En otro aspecto, la presente invención proporciona el agente de generación de imágenes in vivo tal como se define en la presente invención, para utilizarse en el método de diagnóstico aquí descrito.

En un aspecto aún adicional, la presente invención proporciona el agente de generación de imágenes in vivo tal como se define en la presente invención, para utilizarse en la fabricación de una composición radiofarmacéutica tal como aquí se define para utilizarse en el método de diagnóstico aquí definido.

Breve Descripción de los Ejemplos Todos los reactivos fueron obtenidos en Sigma Aldrich. Los ejemplos 1 a 6 describen la síntesis de versiones no radioactivas de diversos agentes de generación de imágenes in vivo de la presente invención.

Los ejemplos 7 a 9 describen como obtener agentes de generación de imágenes in vivo etiquetados-18F de la presente invención.

El Ejemplo 10 describe el ensayo de potencia in vitro utilizado para medir la afinidad con el PBR de los agentes de generación de imagen de la presente invención.

El Ejemplo 11 describe como se llevan a cabo los estudios de biodistribución animal.

El Ejemplo 12 describe el modelo animal de axotomía de nervio facial y su uso en un estudio de autorradiografía.

Lista de abreviaturas utilizadas en los Ejemplos DCM diclorometano DMF dimetilformamida DMSO sulfóxido de dimetilo EtOAc acetato de etilo FNA: axotomía de nervio facial g gramo(s) h hora(s) HRMS espectrometría de masa de alta resolución K222 Kryptofix 2.2.2 M molaridad = moles de soluto/litro de solución MHz mega hertz MI mililitro(s) mmol milimol(s) N normalidad = número de equivalentes/1 L de solución RMN resonancia magnética nuclear PBR receptor de benzodiazepina periférica RT temperatura ambiente Ejemplos Ejemplo 1: Preparación de amida de dietilo de ácido fluoreno-6-carboxílico 1-(2-fluoroetil)-8-metoxi-6.11-dihidro-5-tia-11 -aza-benzofal (agente de generación de imagen no radioactivo 1) Ejemplo 1(¡). Amida de dietilo de ácido (+-)-4-oxo-tiocroman-2-carboxílico El ácido ( + -)-4-oxo-tiocroman-2-carboxílico (10.4 g, 50 mmol), preparado tal como se describe en la Publicación de T, Okubo y asociados (Bioorg. Med. Chem. 2004; 12-3569-3580), en DCM seco (100 mi), se agitó bajo una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente con cloruro de oxalilo (12.6 g, 100 mmoles) y una gota de DMF durante 18 horas. Posteriormente la reacción se evaporó al vacío hasta obtener una goma y posteriormente se volvió a disolver en DCM (100 mi), se enfrió a una temperatura 0°C en un baño de hielo, se agitó y trató en forma de gotas con dietilamina (8.03 g, 110 mmol) en DCM (20 mi) durante un período de 1 hora. La reacción se dejó templar a temperatura ambiente durante 1 hora y se agregó una solución de carbonato de potasio acuosa al 10% (100 mi) y la mezcla de reacción se agitó en forma vigorosa. Se separó la solución DCM. La solución acuosa se extractó con dos lotes adicionales de DCM (100 mi) y los extractos combinados se secaron con sulfato de magnesio. La solución DCM se concentró al vacío para proporcionar un aceite color gris oscuro el cual se cristalizó al momento de asentarse. El sólido cristalino se trituró con éter dietílico (50 mi) y se filtró para proporcionar el compuesto del título (8.57 g, 65%) en la forma de un sólido color verde pálido. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) d 1.06 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.23 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 3.0-3.5 (m, 6H), 4.25 (m, 1H), 7.15-7.21 (m, 2H), 7.32-7.39 (m, 1H), 8.10-8.14 (m, 1H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3) d 12.9, 14.8, 40.1, 40.7, 42.3, 42.5, 125.8, 127.2, 128.7, 130.8, 133.4, 137.9, 167.9, 193.1. Ejemplo 1 (¡i): amida de dietilo de ácido fluoreno-6-carboxílico de (+-)-8-metoxi-6.11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzofal A una solución de amida de dietilo de ácido ( + -)-4-oxo- tiocroman-2-carboxílico (1.32 g, 5.0 mmol), el Ejemplo 1(i)) y clorhidrato de hidrazina de 4-metoxifenilo (0.87 g, 5.0 mmol) en etanol (10 mi), se le agregó ácido sulfúrico concentrado (0.73 mi, 1.35 g, 13.8 mmol) bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se calentó bajo reflujo durante 24 horas. Después de enfriarse, la mezcla de reacción se filtró, el sólido se lavó con etanol, se secó al vacío (45°C) para proporcionar el compuesto del título (1.05 g, 57%) en la forma de un sólido color amarillo pálido. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 0.97 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 1.28 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 3.25 (m, 2H), 3.60 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 5.59 (s, 1H), 6.80 (m, 2H), 7.10-7.35 (m, 4H), 7.75 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 11.52 (s, 1H, NH). 13C RMN (75 MHz, DMSO-d6) d 10.5, 12.7, 32.7, 37.9, 39.5, 53.0, 97.6, 103.3, 109.87, 109.92, 120.3, 123.5, 123.8, 124.3, 124.7, 124.9, 127.8, 129.4, 131.8, 151.3, 166.2. m/z (ES + ) 367.1 (M + H).

Ejemplo 1(iii). Amida de dietilo de ácido fluoreno-6-carboxllico de (+-)-11 -(2-fluoroetiD-8-metoxi-6, 11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzofal A una solución de amida de dietilo de ácido fluoreno-6- carboxílico ( + -)-8-metoxi-6, 11-d¡hidro-5-tia-11-aza-benzo[a] (150 mg, 0.41 mmol; Ejemplo 1(ii)) en DMF anhidro (4 mi) se le agregó tosilato de 2-fluoroetilo (166 mg, 0.82 mmol)), preparado tal como se describe en la Publicación de L. Cronin y asociados (J. Org. Chem. 2004; 69: 5934-5946) seguido de una dispersión de hidruro de sodio al 60% en aceite mineral (34 mg, 0.82 mmol) bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se calentó a una temperatura de 80°C durante 1 hora. Después de enfriarse, los solventes se eliminaron al vacío, el residuo se extinguió con agua (30 mi), se extractó con DCM (2 x 30 mi), se secó (MgS04) y los solventes se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna sobre sílice, eluyendo con 5% a 10% EtOAc/CH2Cl2- El sólido crudo se extinguió con éter/pet. espíritu, se filtró, se secó al vacío (45°C) para proporcionar el compuesto del título (77 mg, 46%) en la forma de un sólido color café. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) d 1.12 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.36 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 3.25- 3.70 (m, 4H), 3.83 (s, 3H), 4.45-4.70 (m, 2H), 4.80 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.96 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 5.09 (s, 1H), 6.84-6.93 (m, 2H), 7.13-7.32 (m, 3H), 7.46 (m, 1H), 7.58 (d, J = 8.0 Hz, 1H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3) d 12.9, 14.9, 37.3, 41.1, 42.5, 45.5, 45.8, 55.9, 81.2, 83.5, 100.4, 110.1, 11 1.09, 111.12, 112.8, 124.31, 124.35, 125.2, 126.5, 127.1, 127.6, 128.8, 132.2, 134.4, 137.0, 154.8, 168.0. 19F RMN (282 MHz, CDCI3) d -219.4, -219.5, -219.6, -219.65, -219.73, -219.8, -219.9 m/z (ES + ) 413.1 (M + H).

Ejemplo 2: Preparación de amida de dietilo de ácido fluoreno-6-carboxílico (+-)-11-(2-fluoroetil) -10-metoxi-6. 11-dihidro-5-tia-11 -aza-benzoíal (actente de aeneración de imapen no radioactivo 3) Ejemplo 2(i): amida de dietilo de ácido fluoreno -6-carboxílico de (+-)-10-metoxi-6, 11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzoía] Este compuesto se preparó tal como se describe para el Ejemplo 1 (II) excepto que se utilizó clorhidrato de hidrazina de 2-metoxifenilo en lugar de clorhidrato de hidrazina de 4-metoxifenilo. El compuesto se obtuvo con un rendimiento del 40%. m/z (ES + ) 367.0 (M + H).

Ejemplo 2 (ii): amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 1 -(2-fluoroetil)-10-metoxi-6.11 -dihidro-5-tia- 11 -aza-benzoíal Este compuesto se preparó tal como se describe en el Ejemplo 1 ( i i i ) excepto que se utilizó amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico ( + -)-10-metoxi-6, 11-dihidro-5-tia-11 -aza-benzo[a] (Ejemplo 2(¡)) en lugar de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico ( + -)-8-metoxi-6, 11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzo[a]. Después de la recristalización (éter), se obtuvo con un rendimiento del 10% en la forma de un sólido color blanco. 1H R N (300 MHz, CDCI3) d 1.09 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.35 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 3.25-3.67 (m, 4H), 3.95 (s, 3H), 4.70-4.96 (m, 4H), 5.04 (s, 1H), 6.67 (m, 1H), 7.04 (m, 2H), 7.16 (m, 1H), 7.29 (m, 1H), 7.45 (m, 1H), 7.77 (m, 1H). m/z (ES + ) 413.1 (M + H).

Ejemplo 3: Preparación de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico (+-)-4-fluoro-11-(2-fluoroetil)-6, 11-dihidro-5-tia-11 -aza-benzofal (agente de generación de imagen no radioactivo 4) Ejemplo 3(i): ácido (+-)-8-fluoro-4-oxo-tiocromana-2-carboxílico En un frasco de fondo redondo se agitaron 2-fluorotiofenol (5.0 g, 39.0 mmol, 4.16 mL) y furan-2,5-diona (3.82 g, 39.0 mmol) en tolueno (12 mL) a una temperatura de 50°C durante 40 minutos. Posteriormente se agregaron en 10 minutos trietilamina (100 µ?) en tolueno (5 mL) asegurando que la temperatura de reacción no se incrementará arriba de 60°C. Posteriormente la reacción se calentó a una temperatura de 70°C durante 20 minutos. Posteriormente la reacción se concentró bajo alto vacío para obtener el producto crudo en la forma de un aceite. Este material se disolvió en DCM (75 mL), se enfrió en un baño de hielo y se trató con tricloruro de aluminio (7.78 g, 58.5 mmol) en pequeñas porciones para mantener la temperatura debajo de 10°C. La reacción se templó a temperatura ambiente y hubo una evolución vigorosa del gas de cloruro de hidrógeno, y la reacción se volvió muy viscosa y se volvió color rojo. Después de agitar a temperatura ambiente durante 1.5 horas, la mezcla de reacción se diluyó posteriormente con DCM (50 mL) para hacerla menos viscosa y se vertió lentamente en ácido clorhídrico concentrado (30 mL) agitado en forma vigorosa y hielo (30 g) en un frasco cónico de 2L. La reacción se agitó vigorosamente y se diluyó con una parte adicional de DCM (500 mL) y alcohol isopropílico (50 mL) para disolver cualquier sólido que hubiera sido cristalizado..Se separó la capa de DCM, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró al vacío para proporcionar un sólido color café. El sólido crudo se purificó mediante trituración con éter dietílico y se recolectó un sólido color crema mediante filtración para proporcionar 2.5 g (28%) de ácido 8-fluoro-4-oxo-tiocromana-2-carboxílico. 1H RMN (300 MHz; DMSO-d3): d 3.04-3.20 (2H, m, 3-H), 4.51 (1H, dd, J = 4 y 6 Hz, 2-H), 7.26-7.34 (1H, m, 6-H), 7.45- 7.52 (1H, m, 7-H), 7.82 (1H, dd, J = 1 y 8 Hz, 5H). 13C RMN (75 MHz; DMSO-d3): d 40.5, 40.7, 119.8, 120.1, 123.88, 123.92, 126.0, 126.1, 131.9, 156.1, 159.2, 171.5, 191.2, 191.3. Ejemplo 3 (¡i): amida de dietilo de ácido (+-)-8-Fluoro-4-oxo-tiocroman-2-carboxílico Se agitó ácido 8-fluoro-4-oxo-tiocromana-2-carboxílico (2.5 g, 11 1 mmol) en DCM seco (50 mi) bajo una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente con cloruro de oxalilo (2.81 g, 22.1 mmo, 1.93 mL) y una gota de DMF para catalizar la reacción durante 18 horas. El ácido inicialmente fue insoluble pero se disolvió conforme reaccionó para proporcionar una solución color naranja claro después de 2 horas y posteriormente se volvió color negro después de 24 horas. La reacción se evaporó posteriormente al vacío hasta obtener una goma, para eliminar el cloruro de oxalilo en exceso y la corrida 1H y 13C RMN en CDCI3 para confirmar la reacción completa. La reacción se volvió a disolver en DCM (50 mi), se enfrió a una temperatura de 0°C en un baño de hielo, se agitó y trató en forma de gotas con dietilamina (1.66 g, 22.7 mmol, 2.05 mL) en DCM (20 mi) durante un período de 1 hora. La reacción se dejo templar a temperatura ambiente durante un período de 1 hora. La reacción posteriormente se extinguió mediante la adición de una solución de carbonato de potasio al 5% (100 mi) y la mezcla de reacción se agitó vigorosamente. La solución DCM fue separada y se secó sobre sulfato de magnesio. Se agitaron dos lotes adicionales de DCM (100 mi) con la solución acuosa, y posteriormente se separó y se secó sobre sulfato de magnesio. Las soluciones DCM combinadas se concentraron al vacío para proporcionar un sólido color café. El sólido crudo se purificó mediante recristalización caliente a partir de acetato de etilo y petrol para producir 1.73 g (56%) de amida de dietilo de ácido 8-fluoro-4-oxo-tiocroman-2-carboxílico en la forma de cristales color amarillo. 1H RMN (300 MHz; CDCI3): d 1.07 (3H, t, J = 7 Hz, N(CH2CH3_)2), 1-26 (3H, t, J = 7 Hz, N(CH2CH¿)2), 3.02-3.55 (6H, m, 2-H y N(CH2CH3)2), 4.24-4.27 (1H, m, 2-H), 7.15-7.19 (2H, m, 6-H y 7-H)5 7.93-7.97 (1 H, m, 5-H).

LC-MS: m/z calculado para C14H16FN02S 281.1; encontrado, 282.0 (M + H) + Ejemplo 3(iü): amida de dietilo de ácido de fluoreno-6- carboxílico (+-)-4-Fluoro-6.11 -dihidro-5-tla-11 azabenzofal Se agitaron a reflujo durante la noche amida de dietilo de ácido 8-fluoro-4-oxo-tiocromana-2-carboxílico (17 g, 6.0 mmol) e hidrazina de fenilo (0.65 g, 6.0 mmol, 0.6 ml_) en etanol (10 mL) y ácido sulfúrico (conc, 0.8 ml_). Después de enfriar la reacción se filtró y el sólido color blanco se recolectó para producir 1.4 g (80%) del material crudo (90% de pureza). El sólido crudo (500 mg) fue purificado mediante recristalización caliente a partir de etanol para producir 277 mg (13%) de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 4-fluoro-6, 11 - dihidro-5-tia-11 -aza-benzo[a] en la forma de cristales color blanco. La estructura se confirmó mediante H RMN (300 MHz; DMSO-d6): d 0.96 (3H, t, J = 7 Hz, N(CH2CH3)2), 1.30 (3H, t, J = 9 Hz, N(CH2Ci±3)2), 3.19-3.25 (2H, m, N(CH2CH3)2), 3.56-3.66 (2H, m, NÍCHÍCHJJZ), 5.76 (1H, s, 6-H), 7.02-7.45 (6H, m, ArH), 7.65 (1H, dd, J = 1 y 6 Hz, ArH), 11.8 (1H, s, NH_).

LC-MS: m/z calculado para C2oHi9FN2OS 354.2; encontrado, 355.0 (M + H) + Ejemplo 3(iv): amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico (+-)-4-fluoro-11 -(2-fluoroetiD-6.11 -dihidro-5-tia-11-aza-benzoíal Se disolvió amida de dietilo de ácido fluoreno-6-carboxílico ( + -)-4-fluoro-6,11-dihidro-5-tia-11azabenzo[a] (0.10 g, 0.28 mmol) en DMF seco (6 mL) a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se agregó tosilato de fluoroetilo (0.12 g, 0.12 mmol) y posteriormente NaH (0.02 g, 0.56 mmol, 60% en aceite). La reacción se calentó a una temperatura de 80°C durante 1 hora. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se disolvió en DCM y se lavó con agua. Los orgánicos se secaron sobre MgS04, se filtraron y evaporaron hasta secarse. El material crudo se cristalizó a partir de metanol para producir 34.4 mg (30%) de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 4-fluoro-11-(2-fluoro-etil)-6,11-dihidro-5-tia-11-aza-benzo[a] en la forma de un sólido color blanco. 1H RMN (300 M Hz, DMSO-d6) d 0.94 (3H, t, J = 7 Hz, N(CH2CH3)2), 1.29 (3H, t, J = 7 Hz, N(CH2CH3)2), 3.14-3.26 (2H, m, N(CH2CH3)2), 3.55-3.65 (2H, m, N(CH2CH3)2), 4.65-4.95 (4H, m , NCH2CH2F), 5.62 (1H, s, 6-H), 7.12-7.37 (4H, m , ArH), 7.48 (1H, d, J = 9 Hz, ArH), 7.61-7.68 (2H, m, ArH).

LC-MS: m/z calculado para C22H22F2N2OS 401.1; encontrado, 401.1 (M + H) + Ejemplo 4: Preparación de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxiHco (+-)3-fluoro-11-(2-fluoroetH)-6.11-dihidro-5-tia-11 -aza-benzofal (agente de generación de imagen no radioactivo 5) Ejemplo 4(i): ácido (+-)-7-fluoro-4-oxo-tiocromana-2-carboxílico En un frasco de fondo redondo se agitaron 3-f luorotiofenol (10.0 g, 71.3 mmol, 8.85 mL) y diona de furan-2,5-diona (7.0 g, 71.3 mmol) en tolueno (12 mL) a una temperatura de 50°C durante 40 minutos. Posteriormente se agregó trietilamina (26 µ?) en tolueno (1 mL) durante 10 minutos, asegurando que la temperatura de reacción no incrementará arriba de 60°C. Posteriormente la reacción se calentó a una temperatura de 70°C durante 20 minutos. Posteriormente la reacción se concentró bajo alto vacío para obtener el producto crudo en la forma de un aceite. Este material se disolvió en DCM (75 mL), se enfrió en un baño de hielo y se extractó con tricloruro de aluminio (7.78 g, 58.5 mmol) en pequeñas porciones para mantener la temperatura debajo de 10°C. La reacción se templó a temperatura ambiente y hubo una evolución vigorosa del gas de cloruro de hidrógeno y la reacción se volvió muy viscosa y se volvió color rojo. Después de agitar a temperatura ambiente durante 1.5 horas, la mezcla de reacción se diluyó con DCM (50 mL) para hacerla menos viscosa y se vertió lentamente en ácido clorhídrico concentrado agitado en forma vigorosa (30 mL) y hielo (30 g) en un frasco cónico de 2L. La reacción se agitó vigorosamente y se diluyó con una porción adicional de DCM (500 mL) y alcohol isopropilico (50 mL) para disolver cualquier sólido que se hubiera cristalizado. Se separó la capa DCM, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró al vacío para proporcionar un sólido color café. El sólido se trituró con éter dietílico y posteriormente se filtró para proporcionar 4.2 g (48%) de ácido 7-fluoro-4-oxo-tiocroman-2-carboxílico en la forma de un sólido color crema. 1H RMN (300 MHz; DMSO-d3): d 3.00-3.16 (2H, m, 3-H), 4.44 (1H, dd, J - 5 y 10 Hz, 2-H), 7.08 (1H, td, J1 = 3 y 9 Hz, 6-H), 7.30 (1H, dd, J = 5 y 10 Hz, ArH), 8.01 (1H, dd, J = 5 y 10 Hz, ArH). 3C RMN (75 MHz; DMSO-d3): d 38.0, 39.6, 111.1, 111.3, 111.5, 111.8, 125.0, 125.1, 129.0, 129.2, 139.6, 139.7, 160.9, 164.3, 169.5, 188.9.

Ejemplo 4 (ii). Amida de dietilo de ácido ( + -)-7-fluoro-4-oxo- tiocromana-2-carboxílico Se agitó ácido 7-fluoro-4-oxo-tiocromana-2-carboxílico (4 g, 17.7 mmol) en DCM seco (50 mi) bajo una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente con cloruro de oxalilo (4.49 g, 35.4 mmol, 3.1 ml_) y una gota de DMF para catalizar la reacción durante 18 horas. El ácido fue inicialmente insoluble pero se disolvió conforme reaccionó para proporcionar una solución color naranja claro después de 2 horas, y posteriormente se volvió color negra después de 18 horas. Posteriormente la reacción se evaporó al vacío hasta obtener una goma para eliminar el cloruro de oxalilo en exceso y una corrida de H y 13C RMN en CDCI3 para confirmar la reacción completa. Posteriormente la reacción se volvió a disolver en DCM (50 mi), se enfrió a una temperatura de 0°C en un baño de hielo, se agitó y se trató en forma de gotas con dietilamina en DCM (10 mi) durante un período de 1 hora. La reacción se dejó templar a temperatura ambiente durante un período de 1 hora. La reacción se extinguió posteriormente mediante la adición de una solución de carbonato de potasio al 5% (50 mi) y la mezcla de reacción se agitó vigorosamente. La solución de DCM se separó y se secó sobre sulfato de magnesio. Se agitaron dos lotes adicionales de DCM (50 mi) con la solución acuosa, y posteriormente se separaron y secaron sobre sulfato de magnesio. Las soluciones de DCM combinadas se concentraron al vacío para proporcionar un sólido color café, el cual se cristalizó al asentarse para producir 5.03 g (quant) de diamida de dietilo de ácido 7-fluoro-4-oxo-tiocroman-2-carboxílico. La estructura se confirmó mediante 1H RMN (300 MHz; CDCI3): d 1.07 (3H, t, J = 7 Hz, N(CH2CH3)2), 1 24 (3H, t, J = 7 Hz, N(CH2CH3_)2), 2.99-3.50 (6H, m, 2-H y N(CH_2CH3)2), 4.24-4.27 (1 H, m, 2-H), 6.83- 6.94 (2H, m, 6-H y 8-H), 8.15 (1H, dd, J = 6 y 9 Hz, 5-H).

LC-MS: m/z calculado para C 4Hi6FN02S 281.1; encontrado, 282.0 (M + H) + Ejemplo 4(iii): amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico (+-)-3-fluoro-6.11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzoíal Se agitaron a reflujo durante la noche amida de dietilo de ácido de 7-fluoro-4-oxo-tiocromana-2-carboxílico (2.5 g, 8.9 mmol) e hidrazina de fenilo /0.96 g, 8.9 mmol, 0.9 mL) en etanol (10 mL) y ácido sulfúrico (conc, 1.2 mL). El sólido crudo se purificó mediante recristalización caliente a partir de etanol 1.49 g para producir (47%) de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 3-fluoro-6,11-dihidro-5-tia-11-aza-benzo[a] en la forma de cristales blancos. 1H RMN (300 MHz; DMSO-de): d 0.96 (3H, t, J = 6 Hz, N(CH2CH3)2), 1.29 (3H, t, J = 6 Hz, N(CH2CH3)2), 3.19-3.25 (2H, m, N(CH2CH3)2), 3.55-3.61 (2H, m, N(CH2CH3)2), 5.66 (1H, s, 6-H), 7.03 (1H, td, J = 1 y 8 Hz, ArH), 7.09-7.18 (2H, m, ArH), 7.25 (1H, dd, J = 3 y 9 Hz, ArH), 7.35 (1H, d, J = 8 Hz, ArH), 7.41 (1H, d, J = 8 Hz, ArH), 7.81 (1H, dd, J = 6 y 9 Hz, ArH), 11.68 (1H, s, NH).

LC-MS: m/z calculado para C20H19FN2OS 352.1; encontrado, 353.2 (M + H) + Ejemplo 4(iv). amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico ( + -) 3-fluoro-11 -(2-fluoro-etil)-6, 11 -d i h i d ro-5-tia- 11-aza-benzoíal Se disolvió amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 3-fluoro-6, 11 -d i h i d ro-5 - 1 i a - 11 -aza-benzo[a] (0.20 g, 0.56 mmol) en DMF seco (6 mL) a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se agregó tosilato de fluoroetilo (0.25 g, 1.13 mmol) y posteriormente NaH (0.05 g, 1.13 mmol, 60% en aceite). La reacción se calentó a una temperatura de 80°C durante 1 hora. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se disolvió en DCM y se lavó con agua. Los orgánicos se secaron sobre MgS04, se filtraron y evaporaron hasta secarse. El material crudo se purificó mediante HPLC de semi-preparación eluyendo con agua (A) y acetonitrilo (B) (Gemini 5u, C18, 110A, 150 x 21 mm, 5% a 95% B durante 20 minutos, 21 mL/min) para producir 79.9 mg (35%) de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 3-fluoro-11 -(2-fluoro-etil)-6, 11 -dihidro-5-tía- 11 -aza-benzo[a] en la forma de un sólido color blanco. H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 0.95 (3H, t, J = 9 Hz, N(CH2CH_3)2), 1.88 (3H, t, J = 9 Hz, N(CH2CH3)2), 3.14-3.26 (2H, m, N(CH2CH3)2), 3.51-3.67 (2H, m, N(CH2CH3)2), 4.58-4.97 (4H, m, NCfcbChhF), 5.53 (1H, s, 6-H), 7.12-7.27 (3H, m, ArH), 7.38-4.47 (2H, m, ArH), 7.61 (1H, d, J = 9 Hz, ArH), 7.80-7.86 (1H, m, ArH).

LC-MS: m/z calculado para C22H22F2N2OS 401.1; encontrado, 401.1 (M + H)+.

Ejemplo 5: Preparación de amida de dietilo de ácido de fíuoreno-6-carboxílico f+-)8-etoxi-11 -(2-fluoroetil)-6.11-dihidro-5-tia-11 -aza-benzofal (agente de generación de imagen no radioactivo 6) Ejemplo 5(i): amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico (+-) 11 -í2-(ter-butil-dimetil-silaniloxi)letill-8-metoxi-6.11-dihidro-5-tia-11 -aza-benzofa] A una solución de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico ( + -)-8-metoxi-6,11-dihidro-5-tia-11-aza-benzo[a] Ejemplo 1(ii) (2.0 g, 5.40 mmol) en DMF anhidro (20 mi) se le agregó dispersión de hidruro de sodio al 60% en aceite mineral (240 mg, 6.0 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos bajo nitrógeno. Se agregó 2-(bromoetoxi)-ter-butil-dimetilsilano (2.6 g, 10.8 mmol) y la mezcla se agitó durante 4 horas. Los solventes se eliminaron al vacío, el residuo se extinguió con agua (30 mi), se extractó con DCM (2 x 30 mi), se secó (MgS04) y los solventes se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna sobre sílice, eluyendo con 3% EtOAc/CH2CI2 para proporcionar el compuesto del título (2.0 g, 70%) en la forma de un sólido color amarillo.

Ejemplo 5 (ii). amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico ( + -) 11-[2-hidroxietil]-8-hidroxi-6,11-dihidro-5-tia-11-aza-benzo[a] A una solución de amida de dietilo de ácido fluoreno-6- carboxílico ( + -) 11-[2-(ter-butil-dimetil-silaniloxi)]etil]-8-metoxi- 6, 11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzo[a] (1.0 g, 1.91 mmol) en DCM seco (60 mi) a una temperatura de -78°C se le agregó tribromuro de boro (11.5 mi, 1 M en DCM, 11.5 mmol). La solución se dejo elevar a temperatura ambiente y se agitó durante 24 horas. Los solventes se eliminaron al vacío, se extinguieron con metanol (40 mi), y 1NHCI (10 mi) se sometió a reflujo durante 1 hora. Los solventes se eliminaron al vacío, la mezcla se disolvió en metanol (5 mi), se extinguió con agua (100 mi), se filtró, se secó al vacío (45°C) para proporcionar el compuesto del título (0.77 g, 100%) en la forma de un polvo color café claro.

Ejemplo 5(iii): amida de dietilo de ácido fluoreno-6-carboxílico (+-) 11 -r2-hidroxietill-8-etoxi-6.11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzofal A una solución de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico ( + -) 11-[2-hidroxietil]-8-hidroxi-6,11-dihidro-5-tia-11-aza-benzo[a] (400 mg, 1.01 mmol) en DMF anhidro (4 mi) a una temperatura de 0°C se le agregó una dispersión de hidruro de sodio al 60% en aceite mineral (40 mg, 1.01 mmol). La mezcla se agitó a una temperatura de 0°C durante 10 minutos bajo nitrógeno. Se agregó bromuro de etilo (218 mg, 2.0 mmol, 150ul) y la mezcla se agitó durante 24 horas. Los solventes se eliminaron al vacío, el residuo se extinguió con agua (30 mi), se extractó con DCM (2 x 30 mi), se secó (MgS04) y los solventes se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna sobre sílice, eluyendo con de 40% a 60% de EtOAc/CH2CI2 para proporcionar el compuesto del título (340 mg, 79 %) en la forma de un sólido color blanco.

Ejemplo 5(iv): amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico (+-) 11 -f2-metanosulfoxietill-8-etoxi-6.11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzofal A una suspensión de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico (+-)11-[2-hidroxietil]-8-etoxi-6,11-dihidro-5-tia- 11 -aza-benzo[a] (0.34 g, 0.80 mmol) en DCM anhidro (15 mi) se agregó piridina (0.63 g, 8.0 mmol, 0.65 mi). La reacción se enfrió a una temperatura de 0°C y se agregó cloruro de sulfonilo de metanol (0.37 g, 3.2 mmol, 0.25 mi). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla se lavó con 0.5 HCI (2 x 20 mi), posteriormente agua (2 x 20 mi), se secó (MgS04) y el solvente se eliminaron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna sobre sílice, eluyendo con 20% EtO Ac/CH2CI2. El residuo se extinguió con éter/pet, espíritu, se filtró, se secó al vacío (45 C) para proporcionar el compuesto del título (0.38 g, 95 %) en la forma de un sólido color amarillo pálido.

Ejemplo 5(v). amida de dietilo de ácido de fluoreno-6- carboxílico (+-) 11 -f2-fluoroetill-8-etoxi-6, 11 -dihidro-5-tia-11- aza-benzofal A una solución de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6- carboxílico ( + -) 11 - [2-metanosulfoxietil]-8-etox¡-6, 11-dihidro-5- tia-11 -aza-benzo[a] (100 mg, 0.20 mmol) en acetonitrilo anhidro (5 mi) bajo nitrógeno, se le agregó TBAF 1.0 M en THF (0.4 mi, 0.4 mmol). La mezcla se calentó a una temperatura de 80°C durante 2 horas. Los solventes se eliminaron al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía de columna sobre sílice eluyendo con del 5% al 10% de EtOAc/CH2CI2 para proporcionar el compuesto del título (26 mg, 31%) en la forma de un sólido color amarillo.

Ejemplo 6: Preparación de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico (+-)7-metoxi-11-(2-fluoroetil)-6.11-dihidro-5-tia-11 -aza-benzofal (agente de generación de imagen no radioactivo 2) y amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico (+-)9-metoxi-11-(2-fluoroetil)-6.11-dihidro-5-tia-11 -aza-benzofal (agente de generación de imagen no radioactivo 7) Ejemplo 6(¡). amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 7-metoxi-6.11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzofal v amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 9-metoxi-6.11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzofal A una solución de amida de dietilo de ácido ( + -)-4-oxo-tiocroman-2-carboxílico (3.33 g, 12.6 mmol) (Ejemplo 1(i)) y clorhidrato de hidrazina de 3-metoxifenilo (2.2 g, 12.6 mmol) en etanol (30 mi), se le agregó ácido sulfúrico concentrado (1.83 mi, 3.40 g, 11.5 mmol) bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se calentó bajo reflujo durante 24 horas. Después de enfriarse, la mezcla de reacción se filtró, el sólido se lavó con etanol, se secó al vacío (45°C) para proporcionar una mezcla de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 7-metox¡-6, 11 -dihidro-5-ti a- 11 -aza-benzo[a] y amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico de 9-metoxi-6, 11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzo[a] (3.2 g, 69%) en la forma de un sólido color blanco.

Ejemplo 6(H): amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 11 -(2-fluoroetH)-7-metoxi-6.11 -dihidro-5-tia-11-aza-benzofal y amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 11 -(2-fluoroetil)-9-metoxi-6.11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzofal A una solución de una mezcla de isómeros de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 7-metox¡-6, 11 -dihidro-5-ti a- 11 -aza-benzo[a] y amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 9-metoxi-6, 11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzo[a] (1.0 g, 2.73 mmol) (preparado de acuerdo con el Ejemplo 6(i)) en DMF anhidro (10 mi), se le agregó tosilato de 2-fluoroetilo (1.2 g, 5.46 mmol) seguido de una dispersión de hidruro de sodio al 60% en aceite mineral (131 mg, 5.46 mmol) bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se calentó a una temperatura de 80°C durante 1 hora. Después de enfriarse, los solventes fueron eliminados al vacío, el residuo se extinguió con agua (30 mi), se extractó con DCM (2 x 30 mi), se secó (MgS0 ) y los solventes se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna sobre sílice, eluyendo con 5% a 10% EtOAc/CH2CI2 para proporcionar la mezcla de isómeros (1.0 g, 89%). El material (400 mg) fue purificado mediante HPLC eluyendo con agua (A) y metanol (B) (Gemini 5u, Cl 8, 110A, 150 x 21 mm, 70-95% B durante 20 mm, 21 mL/min) para producir 240 mg de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 9-metoxi-6,11-dihidro-5-tia-11-aza-benzo[a] en la forma de un sólido color amarillo y 100 mg de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 7-metoxi-6, 11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzo[a] en la forma de un sólido color blanco.

Ejemplo 7: Preparación de Agentes de Generación de Imagen Etiguetados-i8F 2 v 7 Ejemplo 7(i): amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 11•[2-(terbutil-dimetil-silaniloxi)letill-7-metoxi-6.11 -dihidro-5-tia-11-aza-benzoíal v amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 11 -f2-(terbutU-dimetil-sHaniloxi)Tetil]-9-metoxi-6.11 -dihidro-5-tia-11-aza-benzoíal A una solución de la mezcla de isómeros preparada de acuerdo con el Ejemplo 6(i) (2.0 g, 5.46 mmol) en DMF anhidro (20 mi) se le agregó una dispersión de hidruro de sodio al 60% en aceite mineral (240 mg, 6.0 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos bajo nitrógeno. Se agregó 2-(bromoetoxi)-ter-butil-dimetilsilano (2.6 g, 10.9 mmol) y la mezcla se agitó durante 4 horas. Los solventes se eliminaron al vacío, el residuo se extinguió con agua (30 mi), se extractó con DCM (2 x 30 mi), se secó (MgS04) y los solventes se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna sobre sílice, eluyendo con 5% EtOAc/CH2CI2 para proporcionar la mezcla de isómero amida de dietilo de ácido de fluoreno-6- carboxílico 11 -[2-(terbutil-dimetil-silaniloxi)]etil]-7-metoxi-6,11-dihidro-5-tia-11-aza-benzo[a] y amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 11-[2-(terbutil-dimetil-silaniloxi)]etil]-9-metoxi-6,11-dihidro-5-tia-11 -aza-benzo[a] (2.53g, 88%) en la forma de un sólido color amarillo.

Ejemplo 7 (¡i): amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 11 -f2-hidroxietill-7-metoxi-6.11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzoíal v amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 11 -[2-(2-hidroxioxi)etill-7-metoxi-6.11 -dihidro-5-tia-11-aza-benzoía] A una solución de una mezcla de isómeros preparada de acuerdo con el Ejemplo 7(i) (2.5 g, 4.76 mmol) en THF anhidro (40 mi) se le agregó TBAF 1.0 M en THF (9.5 mi, 9.5 mmol) bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. Los solventes se eliminaron al vacío, el residuo se purificó mediante cromatografía de columna sobre sílice, eluyendo con 40% EtOAc/CH2CI2 para proporcionar la mezcla de isómero amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 11-[2-hidroxietil]-7-metoxi-6,11-dihidro-5-tia-11-aza-benzo[a] y amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 11-[2-(2-hidroxioxi)]etil]-7-metoxi-6, 11-dihidro-5-tia-11-aza-benzo[a] (1.90 g, 97 %) en la forma de un sólido color amarillo pálido. Ejemplo 7(iü): amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico (+-) 11 -í2-metanosulfoxietill-7-metoxi-6, 11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzoíal v amida de dietilo de ácido de fluoreno-6- carboxílico (+-) 11 -2-(metanosulfoxietil)-9-metoxi-6.11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzo íal A una solución de mezcla de isómeros preparada de acuerdo con el Ejemplo 7(ii) (1.0 g, 2.4 mmol) disuelto en DCM anhidro (30 mi) se agregó piridina (1.9 g, 24.0 mmol, 1.9 mi). La reacción se enfrió a una temperatura de 0°C y se agregó cloruro de metanosulfonilo (1.1 g, 9.6 mmol, 0.74 mi). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. La mezcla se lavó con 0.5 HCI (2 x 20 mi), posteriormente agua (2 x 20 mi), se secó (MgS04) y el solvente se eliminaron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna sobre sílice eluyendo con 20% EtOAc/CH2CI2 para proporcionar la mezcla de isómeros (1.0 g, 85%). El material (400 mg) fue purificado posteriormente mediante HPLC eluyendo con agua (A) y metanol (B) (Gemini 5u, C18, 110A, 150 x 21mm, 5-95% B durante 30 minutos, 21 mL/min) para producir 170 mg de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 11-[2-metanosulfoxietil]-7-metoxi-6,11-dihidro-5-tia-11 -aza-benzo[a] en la forma de un sólido color blanco y 60 mg de amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 11-2-(metanosulfoxietil)-9-metoxi-6,11-dihidro-5-tia-11-aza-benzo[a] en la forma de un sólido color blanco.

Ejemplo 7(iv): Método de Etiquetado Directo Los compuestos precursores amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 11-[2-metanosulfoxietil]-7-metoxi-6,11-dihidro-5-tia-11 -aza-benzo[a] y amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico 11-2-(metanosulfoxietil)-9-metoxi-6,11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzo[a], preparados de acuerdo con el Ejemplo 7(iii), fueron radioetiquetados mediante métodos de etiquetado directo para obtener los agentes de generación de imagen 2 y 7, respectivamente. Se agregó agua 18F al envase de reacción seguido de K222 (2 mg) en acetonitrilo (500 ul), y KHCO3 (0.1 mol dm"3, 50 ul) y se secó a una temperatura de 100°C durante 20 a 30 minutos. Se agregó el precursor (0.5-1 mg) en acetonitrilo (1000 ul). El envase de reacción se selló y se calentó a 100°C durante 10 minutos. La mezcla de reacción se enfrió, se lavó a partir del envase de reacción con agua (1.5 mi) y se purificó sobre una HPLC de semi-preparación. La fracción que contiene el producto radioactivo principal, fue recolectada y diluida hasta un volumen de 10 mi con H20. Esto se cargó en una sep pak C18 con luz acondicionada, se enjuagó con H20 (1 x 2 mi), y el producto se eluyó con EtOH (0.5 mi) en un frasco P6 y se agregó PBS (5 mi).

Ejemplo 8: Preparación Agentes de Generación de Imagen Etiguetados-18F 1. 3. 4 y 5 Ejemplo 8(i). Preparación de Compuestos Precursores Los compuestos precursores: (a) amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxilico ( + -)-8-metox¡-6, 11 -dihidro-5-tia- 11 -aza-benzo[a] (preparado de acuerdo con el Ejemplo 1(ii)); (b) amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico ( + -)-1 O-metoxi-6, 11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzo[a] (preparado de acuerdo con el Ejemplo 2(i)); (c) amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico ( + -)-4-fluoro-6, 11 -dihidro-5-tia- 11 azabenzo[a] (preparado de acuerdo con el Ejemplo 3(iii)); y, (d) amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico ( + -)3-fluoro-11-(2-fluoro-etil)-6,11 -d i h i d ro-5-ti a- 11-aza-benzo[a]£ (preparado de acuerdo con el Ejemplo 4(iv)) fueron radioetiquetados utilizando el método etiquetado directo descrito más adelante para obtener agentes de generación de imagen etiquetado-18F 1, 3, 4 y 5, respectivamente.

Ejemplo 8(H): Método etiquetado indirecto Se agregó 8F/agua a K222 (4 mg), K2C03 acuoso (50 µ? de una solución molar 0.1) y acetonitrilo (500 µ?) en un envase de reacción y se secó durante 20 a 30 minutos a una temperatura de 100°C bajo una corriente de nitrógeno. Se agregó etil-1 ,2-ditosilato (4 mg) en acetonitrilo (1000 ul) y se calentó a una temperatura de 100°C durante 10 minutos. La mezcla de reacción se enfrió y purificó mediante HPLC de semi-preparación y se recolectó la fracción que contiene 18F-tosilato de fluoroetilo. Esta fracción se diluyó hasta un volumen de ca.20 mi con H20, se cargó en una sep pak t-C18 de luz acondicionada, se enjuagó con H2O (1 x 2 mi). El paquete se secó sobre la línea N2 con flujo de alto nivel, durante 20 minutos. Posteriormente el 8F tosilato de fluoroetilo se eluyó con DMF (500 µ?).

Por separado, se agregó el precursor (13 mg) en DMF (250 ul) a un segundo envase de reacción, y se purgó con N2, durante 5 minutos. Posteriormente se agregó bajo nitrógeno NaH (1.3 mg) en DMF (2 x 250 ul) y el envase de reacción se calentó a una temperatura de 45°C durante 0.5-1 horas. A esto se le agregó el 18F tosilato de fluoroetilo en DMF preparado anteriormente, y se calentó a una temperatura de 100°C durante 10 minutos en un envase de reacción purgado con N2. La reacción se enfrió y se lavó a partir del envase de reacción con agua (1 mi). La solución se filtró a través de un filtro de jeringa y se purificó sobre una HPLC de preparación. La fracción que contiene el pico radioactivo principal se recolectó. Este se diluyó hasta un volumen de ca.10 mi con H20, y se cargó sobre una sep pak C18, con luz acondicionada, se enjuagó con H20 (1 x 2ml), y se eluyó con EtOH (0.5 mi) en un frasco P6 y se agregó Solución Salina Amortiguada con Fosfato (5 mi).

Ejemplo 9: Preparación de Agente de Generación de Imagen Etioguetado-i8F 6 Se radioetiquetó el compuesto amida de dietilo de ácido de fluoreno-6-carboxílico ( + -)11 -[2-metanosulfoxietil]-8-etoxi-6, 11 -dihidro-5-tia-11 -aza-benzo[a] (preparado de acuerdo con el Ejemplo 5(¡v)) utilizando el método de etiquetado directo descrito en el Ejemplo 7(iv) anterior.

Ejemplo 10: Ensayo de Potencia In Vitro Los compuestos se clasificaron con respecto a su afinidad para el PBR, utilizando un método adaptado de la Publicación de Le Fur y asociados (Life Sci. 1983; EUA 33: 449-57).

Los compuestos que fueron aprobados (disueltos en 50 m Tris-HCI, pH 7.4, 10 mM MgCI2 que contiene 1%DMSO) compitieron para enlazar a PBR de corazón de rata Wistar contra 0.3 nM [3H]-PK- 11195. La reacción se llevó a cabo en 50 mM Tris-HCI, pH 7.4 10 mM MgCh durante 15 minutos a una temperatura de 25°C.

Los compuestos se clasificaron en 6 diferentes concentraciones durante un rango de 300 veces de las concentraciones alrededor del Ki estimado. Los resultados se presentan en la tabla 1 anterior, y demuestran que la potencia de los compuestos de la presente invención, se compara de manera favorable con la de los compuestos de la técnica anterior.

Ejemplo 11: Método de Biodistribución In Vivo Se probaron agentes de generación de imagen in vivo 1 a 7 tal como se prepararon en los Ejemplos 7, 8 y 9 en el modelo de biodistribución in vivo y su biodistribución se comparó con la del compuesto de la técnica anterior [18F]FE-PBR (preparado de acuerdo con el Ejemplo 14 de la Publicación Internacional WO 2007/057705). Se inyectaron ratas macho adultas Wistar (200-300 g) con 1-3 MBq de cada agente de generación de imágenes in vivo a través de la vena lateral de la cola. A los 2. 10, 30 ó 60 minutos (n = 3) después de la inyección, las ratas fueron eutanizadas y se muestrearon los tejidos o fluidos para medida radioactiva mediante conteo de centelleo líquido.

Tal como se compara con [18F]FE-PBR, los compuestos de la presente invención demostraron una mayor proporción de enlace de bulbo olfativo: estriato (ver tabla 1 anterior) Ejemplo 12: Autorradioarafía utilizando Modelos de Axotomía de Nervio Facial (FNA) Para estudios in vivo, se utilizaron ratas Wistar macho (180-200 g). Bajo anestesia de isoflurano, se eliminó el pelo del lado derecho de la región auricular. Se hizo una incisión infraauricular y se identificó el tronco principal del nervio facial. El nervio facial fue dividido detrás de la oreja en la salida de perforación estilomastoide. La herida fue suturada y los animales se dejaron en recuperación. Siete días después de la cirugía los animales fueron inyectados con ~ 5 - 10MBq de agentes de generación de imágenes in vivo 1 a través de la vena lateral de la cola. Los animales fueron sacrificados 30 minutos después, y se eliminó el tronco cerebral y se congeló en isopentano. Se montaron secciones de Criostat (12 pm) del tronco cerebral que contienen ambos núcleos faciales sobre correderas de vidrio y se expusieron durante la noche a una malla de fósforo.

Posteriormente se exploraron las clasificaciones en el generador de imágenes de fósforo Storm (GE Healthcare) y la exploración resultante fue analizada y cuantificada utilizando ImageQuant TL (GE Healthcare). Las figuras 1 y 2 ilustran los datos obtenidos en este experimento.

Claims (29)

REIVINDICACIONES

1. Un agente de generación de imágenes in vivo de la fórmula I: o una sal o solvato del mismo en donde: Q es hidrógeno o flúor; X es hidrógeno, flúor, bromo, yodo, hidroxi, C1-6 alquilo, Ci-6 haloalquilo, Ci-e alcoxi, o Ci-6 alquilamida; Y es S, SO o S02, y, R es hidrógeno, Ci-6 alquilo, o -6 fluoroalquilo; y en donde al menos un átomo del agente de generación de imágenes in vivo de la fórmula I es un radioisótopo adecuado para generación de imágenes in vivo; en donde cuando el radioisótopo es un radioisótopo de carbono, es un carbono de carbonilo. con la provisión de que cuando Y es S, Q o X ambos no son hidrógeno.

2. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque Q es hidrógeno.

3. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizado porque X es hidrógeno, flúor, bromo, yodo, hidroxi, C -4 alquilo, Ci-4 haloalquilo, C -4 alcoxi, o Ci- alquilamida.

4. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en la reivindicación 3, caracterizado porque X es hidrógeno o Ci- alcoxi.

5. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 4, caracterizado porque Y es S o S02.

6. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en la reivindicación 5, caracterizado porque Y es S.

7. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 6, caracterizado porque R es hidrógeno, Ci-4 alquilo, o C 1-4 fluoroalquilo.

8. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en la reivindicación 7, caracterizado porque R es C i- fluoroalquilo.

9. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque: X es hidrógeno, flúor, bromo, yodo, hidroxi, d-4 alquilo, Ci-4 haloalquilo, Ci-4 alcoxi, o C ?- alquilamida; Y es S o S02; y, R es hidrógeno, Ci-4 alquilo, o C i-4 fluoroalquilo.

10. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en la reivindicación 8, caracterizado porque: Q es hidrógeno; X es C1-4 alcoxi; Y es S; y, R es C-i-4 fluoroalquilo.

11. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en la reivindicación 8, caracterizado porque: Q es flúor; X es hidrógeno; Y es S; y, R es C-i-4 fluoroalquilo.

12. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 11, caracterizado porque el radioisótopo es un halógeno radioactivo de emisión gamma o un no metal radioactivo de emisión de positrones.

13. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en la reivindicación 12, caracterizado porque el halógeno de reactivo de emisión gamma se selecciona de 123l, 131l y 77Br.

14. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en la reivindicación 12, caracterizado porque el no metal radioactivo de emisión de positrones se selecciona de 11C, 13N, 18F y 124l.

15. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en la reivindicación 14, caracterizado porque R es Ci-4 [18F]-fluoroalquilo.

16. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque se selecciona de

17. Un compuesto precursor útil en la preparación del agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 16, siendo el compuesto precursor de la fórmula II: en donde uno de R1, X1 o Z1 comprende un grupo químico que reacciona con una fuente adecuada de radioisótopo, en donde el radioisótopo es tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 y de la 12 a la 14, de modo que el agente de generación de imágenes in vivo se forma al momento de la reacción del compuesto precursor con la fuente adecuada del radioisótopo; y en donde: cuando R1 no comprende el grupo químico es tal como se describe para R en cualesquiera de las reivindicaciones 1 y de la 7 a la 11, y comprende opcionalmente en forma adicional un grupo de protección; cuando X1 no comprende el grupo químico, es tal como se describe para X en cualesquiera de las reivindicaciones 1, 3, 4, y de la 9 a la 11, y comprende opcionalmente en forma adicional un grupo de protección; cuando Z1 no comprende el grupo químico es -C( = 0)-N-(CH2-CH3)2, y comprende opcionalmente en forma adicional un grupo de protección; Q1 es tal como se define para Q en cualesquiera de las reivindicaciones 1. 2 y de la 9 a la 11; y, Y1 es tal como se describe para Y en cualesquiera de las reivindicaciones 1, 5, 6 y de la 9 a la 11, y comprende opcionalmente en forma adicional un grupo de protección.

18. El compuesto precursor tal como se describe en la reivindicación 17, caracterizado porque la fuente adecuada del radioisótopo es una fuente de 8F, y el grupo químico se selecciona de: (i) un haluro de alquilo o un sulfonato de alquilo para sustitución nucleofílica; o, (ii) hidroxilo.

19. El compuesto precursor tal como se describe en la reivindicación 18, caracterizado porque R1 o X1 de la fórmula II es tal como se describe en la reivindicación 17 y comprende el grupo químico.

20. Un método para la preparación del agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 16, en donde el método comprende: (i) proporcionar un compuesto precursor de la fórmula tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 17 a la 19; (ii) proporcionar una fuente adecuada de un radioisótopo, siendo el radioisótopo tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 y de la 12 a la 14; (iii) hacer reaccionar el compuesto precursor del paso (i) con la fuente del radioisótopo al paso (ii) para obtener el agente de generación de imágenes in vivo.

21. Un equipo para llevar a cabo un método tal como se describe en la reivindicación 20, caracterizado porque comprende el compuesto precursor tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 17 a la 19.

22. Un cartucho para la síntesis automática del agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 16, en donde el cartucho comprende: (i) un envase que contiene el compuesto precursor tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 17 a la 19; y (ii) medios para eluir el envase con una fuente adecuada de un radioisótopo, en donde el radioisótopo es tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 y de la 12 a la 14.

23. El cartucho tal como se describe en la reivindicación 22, caracterizado porque comprende en forma adicional: (iii) un cartucho de intercambio de iones para la eliminación de radioetiqueta en exceso; y opcionalmente (iv) un cartucho para desprotección del producto radioetiquetado resultante para formar un agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 16.

24. Una composición radiofarmacéutica que comprende un agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 16, junto con un transportador biocompatible en una forma adecuada para administración a un mamífero.

25. Un método de generación de imágenes in vivo para determinar la distribución y/o el grado de expresión del PBR en un sujeto, en donde el método comprende: (i) administrar al sujeto un agente de generación de Imágenes in vivo tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 16; (¡i) permitir que el agente de generación de Imágenes in vivo se enlace al PBR en el sujeto; (iii) detectar a través del procedimiento de generación de imágenes in vivo, señales emitidas a través del radioisótopo del agente de generación de imágenes in vivo; (iv) generar una imagen representativa del lugar y/o cantidad de las señales; y (v) determinar la distribución y grado de expresión PBR en el sujeto, en donde la expresión está correlacionada directamente con las señales emitidas a través del agente de generación de imágenes in vivo.

26. El método de generación de imágenes in vivo tal como se describe en la reivindicación 25, caracterizado porque se lleva a cabo en forma repetida durante el curso de un régimen de tratamiento para el sujeto, comprendiendo el régimen la administración de un fármaco para combatir una condición del PBR.

27. Un método para diagnóstico de una condición en la cual el PBR es activado, en donde el método comprende la generación de imágenes in vivo tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 25 ó 26, junto con un paso adicional (vi) de atribuir la distribución y grado de expresión del PBR a una imagen clínica particular.

28. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 16, para utilizarse en el método de diagnóstico tal como se describe en la reivindicación 27.

29. El agente de generación de imágenes in vivo tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 16 para utilizarse en la fabricación de una composición radiofarmacéutica tal como se describe en la reivindicación 24 para utilizarse en el método de diagnóstico tal como se describe en la reivindicación 27.