MX2010013246A - Alotropos cristalinos estables de dopc. - Google Patents

Abstract

La invención se refiere a alótropos cristalinos estables de (R,S)-, (R)- y (S)-DOPC, a un procedimiento para la preparación de estos alótropos, así como a su uso como constituyente para la preparación de medicamentos.

Description

ALOTROPOS CRISTALINOS ESTABLES DE DOPC DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a alótropos cr DOPC, a los correspondientes procedimie aración, así como a su uso para la prepar osiciones farmacéuticas .

DOPC se refiere, arriba y a continuación, al ral dioleoil-sn-glicero-3- fosfocolina, así c dioleoil-sn-glicero-3 -fosfatidilcolina, dioleoil-sn-glicero-3-fosforilcolina, ato de (R) -2,3 -bis (oleoiloxi) metilamonio) etilo, dioleoil-L-a-lecitina DOPC, Los liposomas son vesículas artificiales de s (membranas esféricas cerradas en sí mismas) sustancias anfífilas, generalmente lípidos natu que se encapsulan sustancias hidrófilas en rior acuosa, o bien, en las que se incorporan s filas en la parte interior de la membrana lipidi Se utilizan mayoritariamente en cosmética y cialmente en dermatología. Por lo tanto i ritariamente vitaminas, coenzimas, protectores d otectores contra el sol. Normalmente los lipo izan de forma tópica.

En la tecnología farmacéutica los liposomas ti más importancia, ya que mediante la aplicación p liposomas se puede conseguir una distribución nos más específica que en el caso de util cipios activos en forma disuelta.

Cuando se incorpora ADN, ARN o proteínas, se plexos .

Las nanopartículas son partículas de aproximad o orden de magnitud que los liposomas, pero entan una fase acuosa en su interior, sino sa o un núcleo sólido. Son especialmente adecu psular sustancias lipófilas.

Las microemulsiones son sistemas de una fase en ersiones coloidales, formados por componentes jantes a los lípidos y semejantes a los tensi entan un tamaño de partícula de 1-500 nm y se orma similar a los líquidos.

Precisamente en relación con los principios jantes a los péptidos, nucleótidos, vacunas ármacos, que normalmente no se disuelven bien, ivente de la aplicación anteriormente descrita Sin embargo, lo especialmente importante es la os liposomas y los lipoplexos basados en DOPC ar en las células y de este modo transpo cipios activos que contienen hacia el interio ia (transfección) . Estos liposomas con f ienen lípidos cargados, en especial lipidos ca embargo, tamBién se han publicado aplicaciones e lipoplexos sólo están formados por DOPC, como So ournal of the National Cáncer Institute (2008), 1 Todas estas características hacen que las DOPC muy interesantes para las terapias anticancerí és de estas características, se abre la posibi nistrar ARN, ADN o citostáticos trad rporados en liposomas DOPC.

Las aplicaciones médicas, en partícul La DOPC no es estable a temperatura ambiente y, ifícil prepararla con una pureza aceptable para para su uso en la fabricación de formula camentos .

Como todos los lípidos que llevan restos co, como por ejemplo los fosfolípidos naturale , la DOPC se oxida muy fácilmente. Sin emba uctos de oxidación de derivados de ácido turados normalmente presentan una elevada toxici En el presente documento se reivindican mé icación y de purificación adecuados. Por ejemplo te en forma de liofilizado o de sólido ceroso y, icamente es muy difícil obtenerla con una ciente .

Los métodos convencionales para hacer fren tabilidad, como por ejemplo, añadir agentes anti a DOPC cerosa se garantiza un tiempo de conserv o, sin embargo, se debe utilizar un agente antio lmacenamiento se debe realizar igualmente a -20°C Tanto la DOPC liofilizada como la cerosa prese orción muy elevada de material amorfo.

Esta DOPC amorfa, además de ser sensible a la o ién es extremadamente higroscópica y con una sférica normal se derrite en poco tiempo y se na lámina pegajosa. Además, la DOPC cerosa es mu rocear y, como en el caso de la DOPC liofilizada, CÍ1 de pesar. Esto dificulta enormemente la apli ste compuesto.

A partir de la bibliografía únicamente se rentes rutas sintéticas para la fabricación fa : Ichihara et al., Chemistry and Physics of Lipid hemistry (1989), 28(2), 541-8, informan acerca ilizada .

Baer y Kindler, en Biochemistry (1962), 1(3), an sobre DOPC cerosa.

Lekim, Biedermann y Ghyczy, DE 2647395, desc ficación genérica de esteres de GPC talización, sin embargo, no se describe explícit talización de DOPC.

Se puede obtener DOPC racémica a partir de pro ida racémicos con procedimientos análogos a los los enantiómeros .

Tampoco aparece en ninguna publicación el ón de la DOPC.

Por eso, el objeto de la presente invención es de elevada pureza, a ser posible en forma cr objeto de la presente invención es la prepar talinos así obtenidos tienen una es ticamente ilimitada a temperatura ambiente baj te. La DOPC cristalina también se obtiene en fg ucto suelto manipulable con una higroscopicidad Por lo tanto, es adecuada como constituyente o artida para la fabricación de medicamentos.

Por consiguiente, el objeto de la presente inve ropos cristalinos estables de enantiómeros de mezclas de los enantiómeros con la mis talina .

Los alotropos cristalinos estables pueden estar talina o parcialmente cristalina. Presentan u a conseguida hasta el momento de > 98%, así bilidad nunca conseguida hasta el momento ecto al valor inicial, tras un almacenamien s, en ausencia de aire, a 40°C y una humedad at a seleccionados para los distintos alotropos cr 3.6, 5.3, 18.3, 19.3 y 21.7 (tipo I), med ación de Cu-?a. Pueden aparecer pequeñas desvia s valores de bandas individuales cuando s runientos distintos o métodos de registro diferen exión o transmisión, o capilares o ventanas, ten condiciones de registro distintas respec dad atmosférica o la temperatura.

Los alotropos cristalinos presentan una propo de material cristalino, que se manifiesta lpía de fusión de más de 48 J/g. Normalmente el on de los alotropos cristalinos está por encim . 9) .

Además, los alotropos cristalinos según la inv enen en forma de productos sueltos manipulables carácter cristalino se observa claramente tico también puede contener una pequeña can lvente prótico, como por ejemplo agua. E pcionales, bajo las condiciones adecuadas, puede uso un 25% en peso de disolvente prótico. En e ristalización de la DOPC se puede realizar direc ir de la mezcla de reacción sin purificación lmente, la DOPC cristalina se puede obtener istalización de material amorfo, parcialmente c istalino .

Sobre todo, son adecuados como disolventes aprót éteres, como por ejemplo, tetrahidrofurano, ltetrahidrofurano y dioxano, ésteres, como por ejemplo, formiato de etilo, a lo, acetato de etilo, acetato de propilo, acetat ilo, acetato de butilo, acetato de isobutilo, imetilo, carbonato de dietilo y 1,3- dioxolidin- o mezclas de los mismos.

La cristalización de los alótropos de DOPC se ralmente mediante enfriamiento lento de la d ida hasta temperaturas por debajo de 30°C. La ristales se produce de forma espontánea o por in os correspondientes alótropos de DOPC.

Los distintos alótropos cristalinos de DOPC s sformar unos en otros. Las transformaciones s eguir mediante cambios de temperatura de los talinos aislados a temperatura elevada o medi a agitación continua de sus suspensiones en l es de cristalización.

Con el uso de DOPC amorfa o parcialmente crista rial de partida para la recristalización, med edimiento descrito se obtiene en esencia DOPC c una pureza y estabilidad nunca obtenidas OPC reivindicadas. Estas pueden existir, por eje a de liposomas, lipoplexos, microemulsi partículas y pueden contener, por ejemplo, un VO del grupo de los péptidos, nucleótidos, v státicos.

La presente descripción permite a los especiali nvención en todo su alcance. Por eso, incluso s icaciones, se asume que un especialista puede ut ripción anterior en el alcance más amplio. Por 1 resente descripción permite a los especialistas ecutar la invención en todo su alcance.

En el caso de posibles faltas de claridad, es se deben consultar las publicaciones y patentes consiguiente, estos documentos se consideran una ublicación de la presente descripción.

Para una mejor comprensión y para ilustrar la i °C. Si no se indica lo contrario, los porcen esan en % en peso.

Además, para los especialistas es evidente que, ejemplos dados como en el resto de descripc idades de componentes presentes en las comp pre suman como máximo 100% en peso o en moles r composición total y no pueden superar esta uso si se pudieran obtener valores más elevados os intervalos de porcentaje indicados. Si no se rario, los datos en % son en % en peso, a exce proporciones, que se expresan en volumen.

Ejemplos para ilustrar la invención Ejemplo 1 Cristalización de (R) -DOPC Se disuelven 200 g de (R) -DOPC amorfa en 17 onitrilo a 25°C. La disolución se enfría hasta C/min. La cristalización empieza a 10°C. C o se enfría a -10°C con una rampa de 0.01°C/min, cual se produce la cristalización. El talizado se filtra y se seca al vacío a te ente. Se obtienen 19.6 g de DOPC cristalina (9 ico) . A una velocidad de calentamiento de 5°C ucto presenta un punto de fusión de 71°C y una usión de 49.4 J/g.

Ejemplo 2 Estabilidades Para determinar la estabilidad de la DOPC cr sustancias se almacenan junto con muestras de r °C y una humedad relativa de 60% y a 40°C y un tiva de 75% en ausencia de aire. A intervalos p mide el contenido residual de DOPC y se i aración con el valor inicial.

La pureza y el contenido de DOPC se determinan el alótropo cristalino de tipo I se han encon Ejemplo 3 ramas de difracción de rayos X en polvo Para caracterizar los alótropos cristalinos de stran los diagramas de difracción de rayos X ectros de difracción XRD) de estas sustancias. P arar, también se registran los diagramas de difr s X en polvo (espectros de difracción XRD) antes de DOPC liofilizada y cerosa.

En el caso de los alótropos cristalinos de DOP se obtienen espectros relativamente bien resu as medianamente agudas para lípidos. Los tran un elevado porcentaje de material cristali oscopio de polarización no se observan partes am En la figura 1 (tipo I) se muestra un espe plo. Asimismo, para poder comparar se registran muestras amorfas comercialmente disponibl Ejemplo 4 ropos Los alótropos cristalinos de DOPC de tipo I se producto suelto granulado (Fig. 4) , mientras tras de DOPC comerciales se obtienen en ilizado o grumos cerosos (Fig. 5) .

En el microscopio de polarización, el talino de DOPC de tipo I se reconoce inequívocam rial cristalino (Fig. 6) , mientras que los mate rencia liofilizado (Fig. 7) o ceroso (Fig. 8) fos .

Ejemplo 5 bilidad Asimismo, las medidas de calorimetría difere ido (DSC, Differential Scanning Calorimetry) rencias claras entre el alótro o cristalino de

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como ante ama como propiedad lo contenido en las s indicaciones : 1. (R,S)-, (R) - y (S) -DÓPC cristalinas. 2. (R) - y (S)-DOPC cristalinas. 3. Mezclas de (R) - y (S) -DOPC cristalinas. 4. (R) -DOPC cristalina. 5. (R) - y (S) -DOPC cristalinas de conformida indicación 2, caracterizadas porque tienen cinc res 2-theta 3.6, 5.3, 7.1, 8.8, 11.0, 12.3, 15 , 19.3, 20.4, 21.1, 21.7, 22.8 y 26.4 6. (R) - y (S)-DOPC cristalinas de conformida indicación 2, caracterizadas porque tienen los v a 3.6, 5.3, 18.3, 19.3 y 21.7. punto de fusión por encima de 60 °C y una ent on por encima de 48 J/g. 10. Procedimiento para la preparación de talinos de (R,S)-, (R) - y (S) -DOPC, caracteriza cristalización se realiza en uno o varios di ticos . 11. Procedimiento para la preparación de talinos de (R,S)-, (R) - y (S) -DOPC de conformid indicación 10, caracterizado porque como d tico se utiliza un éter, prefer ahidrofurano, metiltetrahidrofurano o dioxano . 12. Procedimiento para la preparación de talinos de (R,S)-, (R) - y (S) -DOPC de conformid indicación 10, caracterizado porque como d tico se utiliza una cetona, preferentemente ac nona, metilisobutilcetona, metilisopropilcetona. ato de isopropilo, acetato de butilo, ac utilo, carbonato de dimetilo, carbonato de dieti olidin-2 -ona o mezclas de los mismos. 15. Procedimiento de conformidad con una o reivindicaciones 10 a 14, caracterizado porque s edio aprótico mezclado con un alcohol selecci o metanol, etanol, n-propanol, isopropanol, n utanol, 2-butanol, ter-butanol, 3-metil-l englicol, metoxietanol y etoxietanoL o mezcla os . 16. Procedimiento de conformidad con la reivi caracterizado porque la cristalización se etamente de la mezcla de reacción sin pur ia . 17. Procedimiento de conformidad con la reivi caracterizado porque se realiza una recristali talinos de (R,S)-; (R) - y (S) -DOPC de conformid indicación 19, caracterizada porque como princip acéutico se utiliza un principio activo selecci O de péptidos, nucleótidos, vacunas o citostático 21. Composición farmacéutica que contiene talinos de (R,S)-, (R) - y (S) -DOPC de conformid •indicación 19, caracterizada porque presenta l plexos, nanopartlculas o microemulsion.es .