MX2008013491A

MX2008013491A - Combinacion de alovudine y zidovudina en una relacion molar de 1:100 a 1:350.

Info

Publication number: MX2008013491A
Application number: MX2008013491A
Authority: MX
Inventors: Hong Zhang; Bo Oberg
Original assignee: Medivir Ab
Priority date: 2006-05-05
Filing date: 2007-05-04
Publication date: 2008-10-29
Also published as: PT2015759E; CA2651232A1; WO2007129274A3; DK2015759T3; EP2015759A2; CA2651232C; CN101437525B; BRPI0710730A2; ES2349486T3; EA200870501A1; HK1132651A1; JP2009536192A; ZA200809110B; DE602007008226D1; AU2007246644A1; US20090170806A1; AU2007246644B2; EP2015759B1; WO2007129274A2; CN101437525A

Abstract

Se describe la co-administración de alovudine y zidovudina en relaciones considerables en el exceso de la técnica anterior totalmente o sustancialmente suprimiendo la toxicidad mitocondrial de alovudine en experimentos de agotamiento de ADN mitocondrial. La invención proporciona así las composiciones farmacéuticas que comprenden alovudine y zidovudina en una relación molar en los métodos del intervalo 1:100 a 1:350 y métodos para el tratamiento o profilaxis de resistencia múltiple de VIH que comprende la administración simultanea o consecuente de alovudine y zidovudina en la relación molar característica.

Description

COMBINACION DE ALOVUDINE Y ZIDOVUDINA EN UNA RELACION MOLAR DE 1:100 A 1:350 Campo de la Invención Esta invención se refiere a métodos para el tratamiento de VIH y composiciones farmacéuticas en donde los antivirales conocidos para VIH alovudine y zidovudina se administran en una relación específica, opcionalmente en combinación con otros antivirales. Antecedentes de la Invención Zidovudina, también conocida como AZT ó 2'3'-dideoxi-3'-azido-timidina , fue el primer análogo nucleósido registrado para uso en el tratamiento de VIH. Zidovudina inhibe la forma viral codificada de la enzima transcriptasa inversa, de tal modo que bloquea el ciclo de replicación viral y retarda con eficacia la progresión del SIDA. Cuando primero fue introducido y prescrito como monoterapia a largo plazo, la zidovudina fue asociada con varias patologías del tejido caracterizando los síntomas de disfunción mitocondrial, que incluye la miopatía del músculo esquelético, cardiomiopatía y hepatoxicidad dilatadas. Aunque todavía es utilizada ampliamente en conjunto con otros antivirales para VIH, toxicidad, toxicidad hematológica en particular, y los inconvenientes en el desarrollo de resistencia limitan el uso clínico de zidovudina. El régimen de administración actual está dosificando dos veces al día, normalmente 300 mg BID (es decir una dosis diaria para adulto de 600 mg tomando por separado las tabletas 300 mg en la mañana y en la noche). Incluso las formas de unidad de dosis de la combinación tales como Combivir™ (zidovudina más lamivudina) o Trizivir™ (zidovudina más lamivudina más abacavir) se deben tomar BID. Esto no es un régimen conveniente de dosificación en el mejor de los tiempos desde un punto de vista de cumplimiento del paciente. Es sin embargo peor con los pacientes con VIH ya que muchos pacientes prescritos con zidovudina requieren tomar todavía fármacos antivirales para VIH adicionales tales como inhibidores de proteasa y/o no inhibidores de nucleósidos o medicaciones sintomáticas tales como antifungales, antivirales anti-CMV, antisicóticos o estimuladores inmunes. Estos productos farmacéuticos adicionales son tomados con frecuencia en una periodicidad deferente (QD, TID etc) al manejo de la zidovudina en regímenes de pildora muy complejos con pobre cumplimiento. Por ejemplo no es común que los pacientes avanzados de VIH tengan una carga de pildoras en exceso de 15-20 tabletas por día, varias veces durante el día, algunas en ayunas y algunas con las comidas, y con un número variante de pildoras en cada fecha de evaluación. La falta de conformidad con regímenes de dosificación es de importancia crucial en el caso del VIH donde se originan fácilmente los mutantes de escape de fármaco debido a la pobre capacidad de corrección de la maquinaria reproductiva de VIH.

La selección y propagación de mutantes de escape de fármaco es acelerada dramáticamente si los niveles de concentración de suero de las medicaciones de VIH y los niveles intracelulares de los trifosfatos nucleósidos caen debajo de un cierto umbral. Esto sucede rápidamente en pacientes de VIH si el régimen de dosificación prescrito no se sigue exhaustivamente. Alovudine (también conocido como FLT o 2',3'-dideox¡-3'-fluorotimidina) fue un antiviral prometedor para el VIH en el desarrollo clínico durante los años 90. Su desarrollo fue terminado después de que la toxicidad hematológica dependiente de la dosis fue observada en pacientes infectados del virus. En base de experimentos de cultivo de célula, esta toxicidad haemopoética fue atribuida por Sundseth y colaboradores Antmicrob AG Chemother 1996 40(2):331 -335 en la fragmentación y apoptosis del ADN. Sin embargo, estudios recientes revelan que la toxicidad de alovudine es debido a la inhibición de la síntesis mitocondrial del ADN. La solicitud de Patente Internacional WO91/01137 que fue presentada antes de que el desarrollo original de alovudine fuera terminado, describe un efecto antiviral sinérgico de combinaciones de antivirales 3'-fluorinado tal como FLT (ahora conocido por el alovudine INN) y cierto 2',3'-dideoxi nucleótidos incluyendo AZT (ahora conocido por INN zidovudina). La Solicitud de Patente ejemplifica combinaciones con la relación AZT:FLT de 1:1 y 8:1 in vitro y experimentos en animales. La Solicitud de Patente hace claro que es preferido que el FLT y AZT sean administrados en cantidades sustancialmente iguales. Por ejemplo la página 5 línea 16 de la Solicitud de Patente indica que la relación preferida de FLT con AZT da un efecto sinérgico que es 10:1 a 1:20, con la relación óptima siendo 1:1 a 1:10 FLT:AZT. La tabla 1 de WO91/01137 indica por que FLT.AZT en la relación 1:1 tiene un índice terapéutico superior, IC5o/IC5o con relación a la relación de FLT:AZT 1:8 según lo medido por un ensayo de inmunofluorescencia y un índice terapéutico comparable según lo medido por ELISA. La Solicitud de Patente Internacional WO2004/002433 describe una combinación alternativa de alovudine y otro NRTI, particularmente abacavir. La actividad sinergística con relación a la reducción viral fue identificada en pruebas clínicas en pacientes infectados con VIH donde los pacientes fueron prescritos con 7.5 mg QD alovudine como una agregación en los tratamientos antiretrovirales existentes. El diseño del estudio y los resultados totales se subrayan en Katlama y colaboradores AIDS 200418(9):1299-1304. Notar en particular que los pacientes que ya están siendo tratados con zidovudina fueron excluidos, ya que se sintió que la similitud estructural cercana a alovudine y zidovudina podría resultar en una toxicidad hematológica adicional. Abacavir es administrado normalmente en 300 mg BID o 600 mg QD. Esto corresponde a una relación molar de 1:70 alovudine con abacavir. La sinergia antiviral fue confirmada en la especificación del paciente en cultivo celular en una relación molar 1:200. Sin embargo, ni la toxicidad celular ni mitocondrial de la combinación fue medida. Según lo mostrado en los ejemplos comparativos en la presente, alovudine:abacavir en una relación molar intermedia estos valores que no pueden invertir la toxicidad mitocondrial de alovudine. La interacción de los nucleósidos inhibidores de la transcriptasa inversa, especialmente con relación a la toxicidad mitocondrial es un complejo y un fenonoma pobremente mal entendido. En una serie muy comprensiva de los estudios descritos en Vidal y colaboradores. Antimicrob AG Chemother 2006 50(11 ):3824-3832, el tenofovir NRTI fue mostrado para mejorar dramáticamente la toxicidad mitocondrial (según lo medido por la reducción drástica del ADN mt) de didanosina (ddl). En las dosificaciones de 3 uM didanosina: 30 uM tenofovir (es decir 1:10 en una base molar) la reducción en ADN mt fue aproximadamente de 80 % y >90 % en relaciones molares más altas. En contraste el tenofovir no afectó la toxicidad mitocondrial de zidovudina cuando fue probado en zidovudina de 3, 40 y 200 uM a 30 uM tenofovir (es decir 1:10, aproximadamente 1:1 y aproximadamente 6.5:1). Breve Descripción de la Invención Ahora hemos descubierto que la co-administración de alovudine y zidovudina en un intervalo particular de relaciones lejos de la técnica anterior produce una interacción con toxicidad mitocondrial asombrosamente reducida, mientras que conserva la eficacia antiviral sinergística de alovudine y zidovudina. De acuerdo con un primer aspecto de la invención, se proporciona un método para el tratamiento o profilaxis de VIH que comprende la administración simultánea o secuencial de alovudine y zidovudina en una relación molar en el intervalo de 1: 1:100 a 1:350. Convenientemente el método comprende la administración de una cantidad segura y eficaz de alovudine y zidovudina, en un sujeto en necesidad de los mismos, de tal modo que trata o previene el VIH Un aspecto relacionado de la invención proporciona el uso de alovudine y zidovudina en la fabricación de medicamentos para la administración simultánea o secuencial, de por qué los medicamentos son adaptados para alentar la dosificación en la relación 1:100 a 1:350, alovudine con zidovudina. Un aspecto relacionado proporciona el uso de alovudine y zidovudina en la administración simultánea o secuencial para el tratamiento o profilaxis del VIH Un segundo aspecto de la invención proporciona una composición farmacéutica adaptada para el uso en el método y comprende alovudine y zidovudina en una relación molar 1:100 a 1 :350. Por consiguiente, también se proporciona un kit de partes que comprenden una composición farmacéutica que comprende alovudine y una composición farmacéutica que comprende zidovudina, caracterizado en que el alovudine y zidovudina estén presentes en el kit en una relación molar en el intervalo de 1:100 a 1:350. Convenientemente el kit de partes comprenderá adicionalmente las instrucciones que dirigen la administración simultánea o secuencial de la composición farmacéutica que comprende alovudine y la composición farmacéutica que comprende zidovudina para el tratamiento o prevención de VIH Las combinaciones de la invención disminuyen notablemente los defectos experimentados con tratamientos de zidovudina y alovudine de la técnica anterior y las combinaciones de zidovudina/alovudine en relación con la toxicidad mitocondrial disminuida y de esta forma la seguridad mejorada, mejor cumplimiento por el paciente, consistencia mejorada de los niveles de concentración diaria y progreso de mutantes de escape de fármaco reducido. Aunque no se desea limitarse por la teoría, nuestros datos preliminares sugieren que la adopción de la relación característica entre alovudine y zidovudina permite a la zidovudina interferir con los mecanismos de transporte mitocondriales de tal modo que evitan que el metabolito activo del trifosfato alovudina interactúe negativamente con la polimerasa de ADN mitocondrial especialmente sensible. Este efecto beneficioso no fue considerado previamente en combinaciones de la técnica anterior AZT/FLT ya que fue enmascarada la toxicidad celular y reducción en el ADN mitocondrial inducido por las cantidades sustancialmente equimolares de los dos nucleósidos. En contraste con las combinaciones de la técnica anterior las combinaciones del documento WO91/01137 las cuales predicen las dosis de alovudine 0.1 a 1 mg/kg/día en conjunto con las dosis de zidovudina de 1-10 mg/kg/día, la presente invención considera las dosificaciones de alovudine en el orden de 0.005 a 0.05 mg/kg/día en conjunto con la dosis correspondiente de alovudine 1-10 mg/kg/día. Estudios clínicos más recientes han sugerido que la relación de 1:10 preferido en WO91/01137 basado en la dosis efectiva de zidovudina conduce a un nivel tóxico de alovudine y/o zidovudina. Convenientemente las composiciones y métodos de la invención usan alovudine y zidovudina en una relación en el intervalo de 1:150 a 1:250, tal como dentro del intervalo 1:150 a 1 :200. Normalmente la dosis diaria máxima de alovudine estará en el orden de 4 mg/día para un adulto de 70 kilogramos. Los regímenes de dosis de acuerdo con el método de la invención incluirán así generalmente una dosificación de alovudine en el intervalo 2-4 mg por día y una dosis de zidovudina en el intervalo de 300-900 mg por día. Los regímenes particularmente preferido de adulto comprenden una dosis diaria de alovudine en el intervalo de 2-3 mg/día, tal como 2 mg ó 2.5 mg. Los regímenes actualmente preferidos de adulto tienen una dosis diaria de zidovudina en el intervalo de 450-600 mg, especialmente 600 mg. Una dosificación diaria de 2.5 mg de alovudine y 600 mg de zidovudina corresponden a una relación molar de 1:218 usando 244 como peso molecular de alovudine y 269 como peso molecular de zidovudina. La co-administración de alovudine y zidovudina en el intervalo definido de las relaciones puede ocurrir secuencialmente o sustancialmente en secuencia, tal como cuando alovudine y zidovudina cada uno son administrados en una unidad de dosis separada, normalmente una cápsula o una tableta o una de cada una. Zidovudina es normalmente dosificada en BID, por ejemplo 300 mg BID. Sin embargo, es con frecuencia preferible dosificar alovudine QD, así que una modalidad de la invención administrada secuencialmente conveniente podría comprender 300 mg de zidovudina tableta y 2, 3 ó 4 mg de alovudine tableta en la mañana y 300 mg zidovudina tableta en la noche (o viceversa). Para simplificar el régimen de la pildora, una alternativa, pero una modalidad menos favorecida podría comprender actualmente la administración de 300 mg de zidovudina tableta o cápsula y 1, 1.5 ó 2 mg de una tableta o cápsula que contiene alovudine, tomar junto o con cierta diferencia en mañana y noche. Las formas de dosificación secuencialmente administradas tales como las descritas en el párrafo inmediatamente precedente pueden presentarse como paquetes separados, tales como cajas respectivas cada una conteniendo paquetes tipo ampolletas de tabletas de zidovudina o paquetes tipo ampolleta de tabletas de alovudine. Otro ejemplo adicional podría comprender envases separados de zidovudina y cápsulas o tabletas de alovudine. Un ejemplo adicional podría comprender envases separados de cápsulas o tabletas de zidovudina y alovudine. Por lo menos uno de los envases o cajas incluirá un paquete inserto u otro instructivo impreso indicando que el alovudine debe ser co-dosificado con zidovudina en la característica de relación 1:100 a 1:350. Convenientemente, sin embargo, un cartón común contiene las hojas de la ampolleta que contienen alovudine y las hojas de la ampolleta que contienen zidovudina. En una forma de dosificación secuencialmente administrada preferida de las tabletas o cápsulas de alovudine y zidovudina respectivas se presentan en la misma hoja de la ampolleta en un acomodo espacial que proporciona el estímulo visual de la dosificación correcta de los componentes respectivos. Por ejemplo si la dosis deseada de alovudine es 2, 3 ó 4 mg QD y la dosis de zidovudina es 300 mg BID, la hoja de la ampolleta puede arreglarse con una fila de tabletas de alovudine paralelas a dos filas cada una con un número idéntico de tabletas de zidovudina. De esta manera será fácil que el paciente compruebe si o no una ocasión de dosificación dada deberá tener alovudine y zidovudina o únicamente zidovudina. Las ampolletas individuales en la hoja de la ampolleta pueden marcarse con datos tal como los días de la semana para un soporte de cumplimiento adicional. Preferiblemente, sin embargo, el alovudine y zidovudina es presentado en una forma de unidad de dosificación común tal como una cápsula o pastilla o preferiblemente una tableta. La forma de unidad de dosificación puede adaptarse para la administración BID, es decir con mitad de la dosis diaria deseada de los componentes de alovudine y zidovudina en cada unidad de dosis, presumiendo que una sola tableta o cápsula es administrada en cualquier ocasión de dosificación. Una forma de unidad de dosis típica de acuerdo con esta modalidad comprende una cápsula o tableta que contiene 300 mg de zidovudina y 1 ó 1.25 mg de alovudine. Si el régimen de dosificación requiere unidades de dosis idénticas, múltiples que son ingeridas igual (como el caso de la combinación Kaletra™ lopinavir/ritonavir que es normalmente administrada como dos tabletas suaves cada una conteniendo 133 mg de lopinavir y 33 mg ritonavir tres veces por día), la cantidad de alovudine y zidovudina en cada unidad de dosis es por lo tanto ajustada. Una forma de unidad de dosis alternativa es adaptada para la administración QD. La administración QD facilita el cumplimiento y al mismo tiempo reduce al mínimo la toxicidad y proporciona efectos antivirales sinérgicos. Una tableta o cápsula deseada para adultos podría comprender así 2-4 mg de alovudine y 300-600 mg de zidovudina. Las formas de unidad de dosis preferidas incluyen: 2 mg de alovudine y 300 mg, 400 mg, 500 mg ó 600 mg especialmente de zidovudina; 2.5 mg de alovudine y 300 mg, 400 mg, 500 mg ó 600 mg especialmente de zidovudina; 3 mg de alovudine y 300 mg, 400 mg, 500 mg ó 600 mg especialmente de zidovudina; ó 4 mg de alovudine y 300 mg, 400 mg, 500 mg o 600 mg especialmente de zidovudina. Como es común con la terapia del VIH donde la terapia de combinación es la regla más que la excepción, los métodos y composiciones farmacéuticas de la invención pueden además comprender uno o dos agentes farmacéuticos adicionales, en particular antivirales de VIH adicionales. El antiviral o antivirales de VIH adicionales pueden tomarse de cualquiera de las clases mecánicas, tales como inhibidores nucleósidos de transcriptasa inversa (NRTI), inhibidores no nucleósidos de transcriptasa inversa (NNRTI), inhibidores de proteasa (Pl), inhibidores de ¡ntegrasa, inhibidores de fusión, inhibidores de maduración y similares. Los antivirales adicionales del VIH serán normalmente co-administrados o co-dosificados en sus dosis convencionales. El representante NRTI incluye estavudine (d4T, Zerit), zalcitabina (ddC), didanosina (ddl, Videx), abacavir, (ABC, Ziagen), lamivudina (3TC, Epivir), emtricitabina (FTC, Emtriva), racevir (FTC racémico), adefovir (ADV), entacavir (BMS 200475), alovudine (FLT), tenofovir disoproxil fumarato (TNF, Viread), amdoxavir (DAPD), D-d4FC (DPC-817), dOTC (Shire SPD754), elvucitabina (Achillion ACH-126443), BCH 10681 (Shire) SPD-756, racivir, D-FDOC, GS7340, INK-20 (fosfolipido tioéter AZT, Kucera), 2'3'-d¡deoxi-3'-fluroguanosina (FLG) & sus profármacos tales como MIV-210, reverset (RVT, D-D4FC , Phamasset DPC-817). NNRTI representativo incluye delavirdina (Rescriptor) , efavirenz (DMP-266, Sustiva), nevirapina (BIRG-587, Viramune), ( + ) el calanolide A y B (Advanced Life Sciences), capravirina (AG1549f S-1153; Pfizer), Gw-695634 (Gw-8248; Gsk), MIV-150 (Medivir), MV026048 (MIV-160 Medivir AB), MIV-170 (Medivir) NV-05 2 2 (Idenix Pharm.), R-278474 (Johnson & Johnson), RS- 588 (Idenix Pharm.), TMC-120/ 25 (Johnson & Johnson), rilpivirina (TMC-278, 165335; Johnson & Johnson), UC-781 (Biosyn Inc.) y YM215389 (Yamanoushi). Los inhibidores de la proteasa del VIH representativos incluyen BEA-403 (Medivir) PA-457 (Panacos), KPC-2 (Kucera Pharm.), 5 HGTV-43 (Enzo Biochem), amprenavir (VX-478, Agenerase), atazanavir (Reyataz), sulfato de indinavir (MK-639, Crixivan), Lexiva (calcio de fosamprenavir, GW -433908 o 908, VX-175), ritonavir (Norvir), lopinavir + ritonavir (ABT-378, Kaletra), tipranavir, mesilato de nelfinavir (Viracept), saquinavir (Invirasa, Fortovasa), AG1776 (JE-2147, KNI-764; T Nippon Mining Holdings), AG-1859 (Pfizer), DPC-681/684 (BMS), GS224338; Gilead Sciences), KNI-272 (Nippon Mining Holdings), Nar-DG-35 (Narhex), P(PL)-100 (P-1946; Procyon Biopharma), P- 1946 (Procyon Biopharma), R 944 (Hoffmann-LaRoche), RO-0334649 (Hoffmann-LaRoche), TMC-114 (Johnson & Johnson), VX-385 (GW640385; GSK 5E /Vértex), VX-478 (Vertex/GSK). Otros antivirales de VIH incluyen inhibidores de entrada, que incluyen inhibidores de fusión, inhibidores del receptor CD4, inhibidores del co-receptor CCR5 e inhibidores del co-receptor CXCR4, o una sal o un profármaco farmacéuticamente aceptable de los mismos. Los ejemplos de los inhibidores de entrada son AMD-070 (AMD11070; AnorMed), BlockAide/CR (Adventrx Pharm.), BMS 806 (BMS-378806; BMS), Enfurvirtide (T-20, R698, Fuzeon), KRH1636 (Kureha Pharmaceuticals), ONO-4128 (GW-873140, AK-602, E-913; ONO Phamaceuticals) , Pro-140 (Progenies Pharm), PR0542 (Progenies Pharm.), SCH-D (SCH-417690; Schering-Plough), T-1249 (R724; Roche/Trimehs) , TAK-220 (Takeda Chem. Ind.), TNX-355 (Tanox) y UK-427,857 (Pfizer). Los ejemplos de los inhibidores de integrasa son L-870810 (Merck y Co.), c-2507 (Merck & Co.) y S(RSC)-1838 (Shionogi/GSK). Un antiviral adicional actualmente favorecido para uso en los métodos y composiciones farmacéuticas de la invención es MIV-160, también conocido como cis-1 -(5-cianopiridin-2-il)-3- (4,7-difluoro-1,1a,2,7b-tetrahidrociclopropa[c]cromen-1-il)urea. La síntesis de MIV-160 se describe en el documento WO02/070516. Las dosificaciones convenientes de adulto incluyen 250-1500 mg, tal como 400 u 800 mg, normalmente QD o BID. Las modalidades de la invención que comprenden MIV-160 son co-dosificadas convenientemente con un antagonista de citocromo, especialmente un inhibidor Cyp450 3A4 tal como jugo de fruta de uva o más preferiblemente ritonavir. Ritonavir es un inhibidor de proteasa registrado ya para el tratamiento de VIH con una dosis recomendada de adulto de 600 mg BID, pero una dosis mucho más baja, normalmente 100 ó 200 mg BID, cuando es utilizado como un refuerzo. El uso de un refuerzo permite normalmente que la dosis MIV-160 sea reducida. Las modalidades de la unidad de dosificación típicas para este aspecto de la invención incluyen tabletas que comprenden: alovuine zidovudina MIV-160 ritonavir régimen 1 mg 300 mg 800 mg BID 1 mg 300 mg 100 mg 100 mg BID 1.5 mg 300 mg 800 mg BID 1.5 mg 300 mg 100 mg 100 mg BID 2 mg 600 mg 1500 mg QD 2 mg 300 mg 100 mg 100 mg QD 2 mg 300 mg 200 mg 100 mg QD 2 mg 600 mg 100 mg 100 mg QD 2 mg 600 mg 200 mg 100 mg QD 4 mg 400 mg 200 mg 100 mg QD QD BID 2 mg 300 mg 100 mg 100 mg 2 mg 300 mg 200 mg 100 mg alovuine zidovudina MIV-160 ritonavir régimen QB BID 4 mg 300 mg 200 mg 100 mg QD BID QD QD 2 mg 300 mg 100 mg 100 mg 2 mg 300 mg 200 mg 100 mg 4 mg 300 mg 200 mg 100 mg Un NNRTI adicional favorecido para uso en la invención es MIV-170, de otra forma conocido como N-[(1 S,1 aR,7bR)-4,7-difluoro-1,1a,2,7b-tetrahidrociclopropa[c]cromen-1-il]-N'-[5-(4-(sulfonamido)fenoxi)-2-piridinil]urea. La síntesis de MIV-170 se muestra en el documento WO05/066131. Las dosificaciones típicas de adulto están en la orden de 100-900 mg/día, especialmente 300-600 mg QD. Combinaciones de MIV-170 con alovudine y zidovudina en la relación característica no necesitará ser generalmente ritonavir debido a la biodisponibilidad oral sustancialmente mejorada. Los regímenes típicos de esta modalidad incluyen. alovuine zidovudina MIV-170 régimen 1 mg 300 mg 300 mg BID 1.5 300 mg 300 mg BID 2 mg 600 mg 600 mg QD 2 mg 600 mg 900 mg QD alovuine zidovudina MIV-170 régimen 4 mg 400 mg 600 mg QD 2 mg QD 300 mg BID 300 mg BID 2 mg QD 600 mg BID 600 mg QD 2 mg QD 300 mg BID 900 mg QD Volviendo ahora a la invención en general, alovudine y zidovudina no son referidos generalmente como difíciles de formular y los métodos galénicos convencionales, excipientes y portadores están extensamente disponibles. La co-formulación de alovudine y zidovudina con cualquiera de los antivirales adicionales mencionados puede requerir la adopción de las formulaciones apropiadas para ese antivirus adicional ya que es fácilmente aparente para el médico experto. Los antivirales adicionales preferidos MIV-160, MIV-170 y ritonavir no son conocidos por plantear desafíos insuperables a la formulación. Tales métodos galénicos bien conocidos incluyen la etapa de traer alovudine y zidovudina en el intervalo de las relaciones características especificadas, y cualquier antivirus adicional, en la asociación con un portador farmacéutico convencional. En general, las formulaciones están preparadas trayendo uniformemente e íntimamente a los agentes activos en asociación con los portadores líquidos o los portadores sólidos divididos finamente o ambos, y después formando el producto, si es finamente o ambos, y después formando el producto, si es necesario. La invención se extiende a los métodos para preparar una composición farmacéutica que comprende traer alovudine y zidovudina en el intervalo de las relaciones características especificadas, y opcionalmente uno o dos antivirales adicionales, en conjunto o asociación con un portador o vehículo farmacéutico aceptable. Si la fabricación de las formulaciones farmacéuticas implica la mezcla intima de excipientes farmacéuticos y del ingrediente activo que es en una forma de sal, después es preferido con frecuencia utilizar los excipientes que no son básicos en naturaleza, es decir acídicos o neutrales. Las formulaciones para la administración oral de la presente invención pueden presentarse como unidades discretas tales como cápsulas, pastillas o tabletas, cada una conteniendo una cantidad predeterminada de los agentes activos. Alternativamente pueden presentarse como un polvo o gránulos; como una solución o una suspensión del agente activo en un líquido acuoso o un líquido no acuoso, o como una emulsión líquida en aceite en agua o una emulsión líquida agua en aceite, como un bolo, etc. Con respecto a las composiciones para la administración oral (por ejemplo tabletas y cápsulas), el término "portador conveniente" incluye vehículos tales como excipientes comunes, por ejemplo agentes aglutinantes tales como jarabe, acacia, gelatina, sorbitol, tragacanto, polivinilpirrolidona (Povidone), metilcelulosa, etilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, hidroxipropil-metilcelulosa, sucrosa y almidón; llenadores y portadores, por ejemplo almidón de maíz, gelatina, lactosa, sucrosa, celulosa microcristalina, caolín, manitol, fosfato dícalcico, cloruro de sodio y ácido alginico; y lubricantes tales como estearato de magnesio, estearato de sodio y otros estearatos metálicos, ácido esteárico de estearato de glicerol, fluido de silicón, ceras de talco, aceites y silicona coloidal. Los agentes saborizantes tales como hierbabuena, aceite de piróla, saborizante de cereza o similares pueden también utilizarse. Puede ser deseable agregar un agente colorante para hacer la forma de dosis fácilmente identificable. Las tabletas pueden también cubrirse por métodos bien conocidos en la técnica. Una tableta puede hacerse por la compresión o moldeado, opcionalmente con uno o más ingredientes accesorios. Las tabletas comprimidas pueden prepararse comprimiendo en una máquina conveniente el agente activo en una forma que fluye libre tal como un polvo o gránulos, mezclados opcionalmente con un agente aglutinante, lubricante, preservativo, superficie activa o dispersante. Las tabletas moldeadas pueden ser hechas moldeando en una máquina conveniente una mezcla del compuesto pulverizado humedecido con un diluyente líquido inerte. Las tabletas pueden opcionalmente revestirse o marcarse y pueden formularse para proporcionar la liberación controlada o retardada del agente activo.

Otras formulaciones convenientes para la administración oral incluyen grageas que comprenden el agente activo en una base condimentada, usualmente sucrosa y acacia o tragacanto; las pastillas comprenden el agente activo en una base inerte tal como gelatina y glicerina, o sucrosa y acacia; y enjuagues bucales que comprenden el agente activo en un portador líquido conveniente. Alovudine y/o zidovudina pueden dosificarse como el nucleósido libre o una sal o hidrato farmacéuticamente aceptable convencional de los mismos. Las sales convencionales incluyen las sales de adición ácida tales como clorhidrato, hidrobromuro, citrato, sales de tosilato y maleato y sales formadas con ácido fosfórico o sulfúrico. En otro aspecto las sales convenientes son sales base tales como una sal de metal alcalino por ejemplo sodio o potasio, una sal de metal de tierra alcalina por ejemplo calcio o magnesio, sal de amina orgánica por ejemplo trietilamina . Los ejemplos de solvatos incluyen hidratos. Alternativamente alovudine y/o zidovudina pueden dosificarse como profármaco los cuales liberan alovudine/zidovudina o monofosfato de alovudine/zidovudina in vivo. Los profármacos nucleósidos convencionales liberan el nucleósido in vivo incluyendo ésteres de 5'-alquilo tales como acetilo, pivaloilo o estearoilo o ésteres 5'amino tales como ésteres L-valilo, L-isoleucilo o L-lactil-L-valilo. Los profármacos que liberan el monofosfato de zidovudina in vivo incluyen fosivudina, tal como tidoxil de fosivudina. Los profármacos que liberan alovudine in vivo incluyen los análogos de fosivudina descritos en EP 350 287, EP 545 966, EP741 740 y EP763 049, tales como tidoxil fosalvudina: donde n es 11, m es 9 y R es F (fosalvudina) o N3 (fosivudina). Las referencias para alovudine y zidovudina en esta especificación y las reivindiaciones se refieren también a tales sales, hidrato y profármacos, en donde las cantidades en peso (tales como dosis diarias) se ajustan normalmente hacia arriba para corresponder con el peso molecular creciente con relación al nucleósido libre. Zidovudina es ahora genérico y está extensamente disponible en grado farmacéutico de muchos fabricantes alrededor del mundo. Alovudine se sintetiza convenientemente usando las rutas de anhidronucleósido de hierro catalizado o aluminio descritas en o análogas a los documentos EP 470 355 o WO 94/26762. Fosivudina y fosalvudina están preparados en las patentes citadas arriba. La síntesis de MIV-160 y MIV-170 está según lo especificado arriba.

Descripción Detallada de las Modalidades Los varios aspectos de la invención ahora serán descritos por la ilustración únicamente con referencia a los siguientes ejemplos no limitantes. Toxicidad mitocondrial determinada en experimentos de la línea celular. Los experimentos son descritos abajo diseñados para iluminar la inhibición de la síntesis mitocondrial de ADN después de la administración de alovudine, zidovudina o ambos. Varias líneas celulares convenientes que soportan el crecimiento del VIH están fácilmente disponibles incluyendo líneas que incluyen los crecimiento de soporte de VIH incluyendo la línea celular CEMxl 74 derivada del Swedish Institute sueco para Infectius Disease Control (SMI) Sweden, MT-4 (comercialmente disponible) y Hep G2 (comercialmente disponible). En corto, 100 ul células son cosechadas en una placa de 96 pozos a una concentración de 1x104 células/ml, en crecimiento exponencial fueron cultivados en el medio RPMI 1640 (de Gibco) suplementado con 10 % de suero vacuno fetal inactivado por calor (de Gibco) y Penicillin-Streptomycin (de Gibco). El medio se cambia cada 3 ó 4 días, y las células son subcultivadas una vez por semana en una dilución de 1:10. Todos los cultivos son checados rutinariamente por la infección del Micoplasma y el crecimiento a 37°C en una atmósfera humedecida de C02 al 5 %. , Todos los fármacos son probados primero disueltos en 10 mM en sulfóxido de dimetilo (DMSO) antes de la dilución adicional en la concentración apropiada en el medio de cultivo. El análisis del ADN mitocondrial fue realizado usando la tecnología de Taqman como es descrito previamente en (Zhang, H y coalboradores Mol. Pharmacol 1994 46:1063-1069), con modificaciones, y se describe brevemente abajo. Las células son tratadas por una serie de duraciones con los fármacos de prueba, tal como alovudine, fosalvudina, zidovudina, abacavir etc., o varias combinaciones de alovudine/fosalvudina y zidovudina/abacavir. Las varias relaciones indicadas en las tablas respectivas. Después de .14 días de exposición del fármaco, las células son recogidas. El ADN celular total fue preparado usando el Mini kit de ADN para sangre QiAmp (QIAGEN, Chatsworth, CA), siguiendo las instrucciones del proveedor por el Qiagene Blood&Body Fluis Sin Protocol, y sujeto a la amplificación de ADN. Las pruebas del Taqman ADN mitocondrial y ADN nuclear humano fueron preparadas del Applied Biosystems, los cuales usaron una prueba de ADN enfriado internamente, utilizando una transferencia de energía de resonancia de fluorescencia (FRET) para generar una respuesta espectroscópica debido a la actividad de exonucleasa 5'-->3 de la polimerasa de ADN Taq durante la amplificación del ADN. Este proceso utiliza un ensayo de PCR- basado en la tecnología de exploración por láser para excitar los tintes fluorescentes presentes en las pruebas TaqMan especialmente diseñadas: Prueba de ADN mitocondrial que corresponde al bucle D, Etiqueta 5'Fluoro, 6-FAM-ACG CTG GAG CCG GAG-MGBNFQ; Pruebas para el ADN nuclear que corresponde al ARN ribosomal 18S, Etiqueta 5'FLUOR, 6'FAM-TCG AAC GTC TGC CC-MGBNFQ junto con un par de cebadores de amplificación de ADN (cebador mitocondrial de ADN frontal: 5'-CAC GCG ATA GCA TTG CGA-3' y cebador mitocondrial inverso de ADN: 5'-AGG AAT CAA AGA CAG ATA CTG CGA-3'. Cebador nuclear de ADN frontal: 5'-GCG GCG ACG CA-3' y cebador de ADN nuclear celular inverso: 5' GGC GAC TAC CAT CGA AAG TTG-3'). Este es un sistema completamente integrado para la detección en tiempo real de PCR usando ABI PRISM 7700 y los reactivos TaqMan para el ensayo de 5'nucleasa flurogénica.

El crecimiento de la célula fue controlado por el ADN nuclear celular (ADN ribosomal 16S). El resultado del ensayo mitocondrial está presente como el porcentaje de inhibición del ADN mitocondrial y ADN nuclear celular comparado al control (sin la exposición del fármaco). Ejemplo 1 El análisis arriba descrito fue realizado en la línea celular MT4 derivada de un linfocito T. La monoterapia con alovudine o zidovudina o combinación de terapia con combinaciones de alovudine y zidovudina fue realizada en las concentraciones molares descritas en la tabla 1 abajo: Tabla 1 Será evidente de la tabla 1 que la monoterapia con alovudine, aún en concentraciones tan bajas como 0.1 uM indujeron una reducción de 70 % del número de copia de ADN mitocondrial en este experimento. Esta inhibición es eliminada por la presencia de zidovudina en una relación 1:100 en términos molares. Mirando ahora a la combinación de 1 uM alovudine: 10 uM zidovudina: una relación dentro de intervalo particularmente preferido del documento WO91/01137 antes mencionado, se observa que hay toxicidad celular considerable (según lo reflejado por una gota al 60 % en un número nuclear de la copia de ADN) junto con una gota sustancial en un número de copia de ADN mitocondrial. En términos clínicos esta toxicidad celular enmascara la de toxicidad mitocondrial disminuida con relación al alovudine solo. Sin embargo, el punto es que permanece habiendo un nivel muy apreciable de toxicidad mitocondrial en esta combinación de alovudine/zidovudina de la técnica anterior.

En contraste, al alovudine y zidovudina en una relación molar de 1.100 (que corresponde a 1.110 en una base peso.peso) dentro del alcance de la invención que suprime totalmente la reducción en número de copias de ADN mitocondrial. Ejemplo 2 El experimento anterior fue repetido en las células MT-4 con concentraciones adicionales de alovurdina y/o zidovudina. Los datos crudos y estadísticos se presentan en la tabla 2A. Los datos son resumidos en la tabla 2B abajo: Tabla 2A Tratamiento No. de copias relativas % de reducción ADN SD n ADN SD mt ADN n ADN Mt zidovudina 60 uM 748730 116013 890663 89057 4 40 zidovudina 60 uM 748730 116013 890663 89057 4 40 Tratamiento No. de copias relativas % de reducción ADN SD n ADN SD mt ADN n ADN Mt zidovudina 30 uM 993321 133615 836935 257217 0 43 zidovudina 10 uM 856782 100863 891446 242554 0 40 alovudine 0.6 uM 96998 13914 1740000 889132 88 alovudine 0.3 uM 247481 36417 1160000 158760 68 22 alovudine 0.1 uM 434709 17528 956331 199387 44 35 0.6 uM alovudine + 520937 117899 303007 32122 33 80 60 uM zidovudina 0.3 uM alovudine + 985449 79005 1380000 307833 0 7 30 uM zidovudina 0.1 uM alovudina + 10 758191 65015 1790000 772598 2 0 uM zidovudina Células no tratadas 777492 287608 1480000 97906 0 0 Tabla 2B Tratamiento Relación % de reducción de mt/n Mitocondrial: ADN ADN nuclear zidovudina 60 uM 0.84 0 zidovudina 60 uM 1.19 0 zidovudina 10 uM 0.96 0 alovudina 0.6 uM 0.06 89 alovudina 0.3 uM 0.21 59 Alovudina 0.1 uM 0.45 13 Tratamiento Relación % de reducción Mitocondrial: de mt/n ADN nuclear ADN 0.6 uM alovudine + 60 uM 1.72 0 zidovudina 0.03 alovudine + 30 uM 0.71 0 zidovudina 0.1 alovudine + 10 uM 0.42 19 zidovudina Células no tratadas 0.53 0 El experimento confirma así el ejemplo 1 que la toxicidad mitocondrial de alovudine puede invertirse por la coadministración de una concentración molar significativa más grande que zidovudina.

Ejemplo 3 Un ensayo adicional de agotamiento mitocondrial fue realizado en las células MT-4, usando el profármaco de tidoxil fosalvudina monofosfato de alovudine, sintetizado según lo descrito en el ejemplo 19 EP741740 y/o zidovudina. Los resultados se muestran en la tabla 3.

Tabla 3 Nuevamente el alovudine, (en este caso administrado como el profármaco monofosfato), en monoterapia fue asociado con la toxicidad mitocondrial significativa, según lo medido por el agotamiento de ADN mt. Esta toxicidad fue invertida por la coadministración de una concentración mayor de 100 veces de zidovudina . Ejemplo Comparativo 1 Toxicidad mitocondrial de alovudine contra alovudine más abacavir determinado en las células MT-4. Abacavir y alovudine en una relación molar de 70:1 han exhibido actividad sinérgica en un ensayo clínico fase II - ver documento WO2004/002433. Esta solicitud de patente también describe la actividad sinérgica con relación al afecto antiviral en un ensayo de cultivo celular en una relación molar de 200:1. Abacavir, alovudine o abacavir & alovudine en varias concentraciones fueron probados según lo descrito en el ejemplo 1: Tabla 4 La resultados muestran que la toxicidad mitocondrial de alovudine no fue invertida por la adición de abacavir NRTI en las relaciones molares bajas o altas (1:10 alovudine:abacavir ó 1 :100 alovudine o abacavir). Esto implica que la sinergia que es alcanzada con relación a la eficacia antiviral no tiene ninguna unión mecánica con el antagonismo con relación a la toxicidad mitocondrial. Todas las referencias que incluyen solicitudes de patente y patente referidas en esta solicitud están incorporadas en la presente por referencia en la forma más completa posible.

A través de la especificación y las reivindicaciones que siguen, a menos que el contexto lo requiera de otra manera, la palabra 'comprende', y las variaciones tal como 'que comprende' y comprendiendo', será entendido para implicar la inclusión de un número entero o etapa o un grupo indicado de números enteros pero no la exclusión de cualquier otro número entero o etapa o grupo de enteros o etapas.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Composición farmacéutica que comprende alovudine y zidovudina en una relación molar en un intervalo de 1:100 a 1:350 y en donde alovudine está presente en el intervalo de 2-4 mgy la zidovdina está presente en la relación 300-900 mg.

2. Composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, en donde la relación está en el intervalo de 1:150 a 1:250, preferiblemente 1:150 a 1:200.

3. Composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1 ó 2, que además comprende uno o dos agentes farmacéuticos adicionales.

4. Composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 3, en donde el agente farmacéutico adicional es el antiviral MIV-170 para VIH; o el adicional del agente farmacéutico adicional que es el antivirial MIV-160 para VIH, solo o con una dosis de refuerzo de ritonavir.

5. Composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, presentada en una forma de unidad de dosificación QD.

6. Composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 5, que comprende 600 mg de zidovudina.

7. Composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde el alovudine es administrado como el profármaco de monofosfato de alovudine tidoxi fosalvudina.

8. Método para el tratamiento o profilaxis del VIH que comprende la administración secuencial o simultánea de alovudine y zidovudina en una relación en el intervalo de 1:100 a 1:350.

9. Método de conformidad con la reivindicación 8, en donde la relación en el intervalo 1:150 a 1:250 preferiblemente 1:150 a 200.

10. Método de conformidad con la reivindicación 8, que además comprende la administración secuencial o simultánea de uno o dos agentes farmacéuticos adicionales.

11. Método de conformidad con la reivindicación 10, que además comprende agentes farmacéuticos adicionales del antiviral MIV 170 para VIH; o MIV- 60 solo o con una dosis de refuerzo de ritonavir.

12. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 8-11, en donde alovudine y zidovudina son presentados en una forma de unidad de dosis QD.

13. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 9-12, en donde la forma de unidad de dosis comprende 2-4 mg de alovudine y 300-900 mg de zidovudina.

14. Método de conformidad con la reivindicación 13, en donde la forma de unidad de dosis comprende 600 mg de zidovudina.

15. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 8 a 11, en la dosis de alovudine es 2-4 mg QD y zidovudina 300 mg BID.

16. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 8 a 15 en donde el alovudine es adminsitrado como profármaco de monofosfato de alovudine , tidoxil fosivudina.

17. Partes de un kit que comprende: (i) una composición farmacéutica que comprende alovudine; y (ii) una composición farmacéutica que comprende zidovudina; caracterizado en que el alovudine y zidovudina están presentes en el kit en una relación molar en el intervalo de 1:100 a 1 :350.