DERIVADOS DE E GOLINA Y SU USO COMO LIGAN DEL RECEPTOR DE QUiMIOCINA
La presente invención se refiere derivados de ergolina, un proceso para su producción, sus usos como un producto farmacéutico, y composiciones farmacéuticas que los contienen. Más particularmente, la presente invención proporciona un compuesto de la fórmula I
en donde ya sea cada uno de R-i y R2, independientemente, es H; fenilo o fenilalquilo de C^ opcionalmente substituido con R10 y/o R-n ; heteroarilo o heteroaril-alquilo de C-?.4 opcionalmente substituido con R10 y/o Rn ; N-óxido de heteroarilo opcionalmente substituido con R10 y/o R-n ; alquilo de C-?-C8 opcionalmente substituido con Río; alquenilo de C2-C8 opcionalmente substituido con R10, alquinilo de C2-C8 opcionalmente substituido con R10; cicloalquilo de C3-C8 opcionalmente substituido con R-io, o cicloalquenilo de C4-C8 opcionalmente substituido con R10; o Ri y R2 forman junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos un anillo de 3 a 8 miembros opcionalmente substituido con R10 que contiene además del átomo de nitrógeno hasta 2 heteroátomos seleccionados independientemente de N, O y S; en donde R10 representa 1 a 4 sustituyentes independientemente seleccionados a partir de alquilo de C-?-C6; hidroxialquilo de C?-C6; alcoxialquilo de d- C6; halogenoalquilo de C-?-C6; cicloalquilo de C3-C6; alquenilo de C2-C6; cicloalquenilo de C3-C6; alquinilo de C2-C6; fenilo; heteroarilo; N-óxido de heteroarilo; F; Cl; Br; I ; OH ; OR9; OCOR9; OCOOR9; OCONHR9;
OCONR9R9; OSO2R9; COR9; COOH ; COOR9; CONH2; CONHR9;
CONR9R9; CF3; CHF2; CH2F; alquilo de d.^Hz; alquilo de C?.4NHR9; alquilo de CN; NO2; NH2; NHR9; NR9R9; NHCOR9; NR9COR9; NHCONHR9; NHCONH2; NR9CONHR9; NR9CONR9R9; NHCOOR9;
NR9COOR9; NHSO2R9; N(SO2R9)2; NR9SO2R9; SR9; SOR9; SO2R9;
SO2NH2; SO2NHR9; O2NR9R9; o R10 es =O unido a un átomo de carbono de fenilo o heteroarilo o puede ser uno o dos =O unidos al mismo átomo S de heteroarilo, si hubiera; R1 1 representa dos sustituyentes adyacentes que forman un anillo no aromático de 4 a 7 miembros anillados que contiene opcionalmente hasta dos heteroátomos seleccionados independientemente a partir de
N, O y S; cada R9, independientemente, es alquilo de C?-C6; hidroxilalquilo de C-?-C6; cicloalquilo de C3-C6; alquenilo de C2-C6; alquinilo de C2-C6; fenilo; bencilo; heteroarilo; -CH2-heteroarilo; o CF3; o dos R9, junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, forman un anillo de 4 a 8 miembros opcionalmente substituido con R10 que contiene además del átomo de nitrógeno hasta 2 heteroátomos independientemente seleccionados a partir de N, O y S; R3 es H; OR, ; CH^ Rz; (CHzh-zNR^; CH2-CH2-OR? ¡ CH2-CO-NR-| R2; o CO-CH2R? R2; R4 es F; Cl; Br; I ; OR-i ; NR-| R2 o tiene uno de los significados dados para R-, ; y R5 tiene uno de los significados dados para R en forma libre o en forma de sal. Cualquier alquilo, alquenilo o alquinilo puede ser lineal o ramificado. Por heteroarilo se define a un sistema de anillo aromático que comprende sistemas mono-, bi- o tricíclicos que contiene hasta 4 heteroátomos seleccionados independientemente a partir de N, O y S, tal como por ejemplo furilo, tienilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, piridilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, triazinilo, tetrazinilo, indolilo, benzotiofenilo, benzofuranilo, bencimidazolilo, indazolilo, benzotriazolilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, ftalazinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, cinolinilo o naftiridinilo. El anillo no aromático de 4 a 7 miembros anillados preferido representado por Rn es un anillo no aromático de 5 ó 6 miembros anillados que contiene opcionalmente 1 ó 2 oxígenos e incluye
-O-CH2-O- o -O-CH2-CH2-O-, unidos a 2 átomos de carbono adyacentes.
Los compuestos de fórmula I pueden existir en forma libre o en forma de sal, e.g. sales de adición de ácido con e.g. ácidos orgánicos o inorgánicos, por ejemplo ácido clorh ídrico, ácido acético cuando R1 f R2, y/o R3 comprende un grupo amino opcionalmente substituido o un residuo heterocíclico el cual puede formar sales de adición. Cuando los compuestos de fórmula I tienen uno o más centros asimétricos en la molécula, e.g. cuando un anillo de piperidina está substituido, debe entenderse que la presente invención incluye varios isómeros ópticos, así como racematos, diastereoisomeros y mezclas de los mismos. En los compuestos de fórmula I , se prefieren los siguientes significados individualmente o en cualquier sub-combinación: 1 . Cada uno de Ri and R2, independientemente, es H; fenilo opcionalmente substituido con R?0; heteroarilo opcionalmente substituido con R?0; N-óxido de heteroarilo opcionalmente substituido con R?0; alquilo de d-C6 opcionalmente substituido con R?0; alquenilo de C2-C6 opcionalmente substituido con Río, alquinilo de C2-C6 opcionalmente substituido con R?0; cicloalquilo de C3-C8 opcionalmente substituido con Río, o cicloalquenilo de C4=C8 opcionalmente substituido con R?0; 2. Ri y R2 forman junto con el átomo de N al cual están unidos un anillo de 3 a 6 miembros opcionalmente substituido con R 0 que contiene además del átomo de N hasta 1 heteroátomo seleccionado independientemente de N, O y S; Preferiblemente tal anillo de 3 a 6 miembros opcionalmente substituido con R10 contiene sólo un átomo de N o dos átomos de N o un átomo de N y un átomo de O; más preferiblemente no es aromático. Ejemplos son e.g. anillos derivados de azetidina opcionalmente substituida con R10, pirrolina, pirrolidina, piperidina, piperazina, ceto-piperazina, tiazina, tiazina-dióxido, tetrahidro-piridina, piperidona, morfolino o azepina, . Preferiblemente tal anillo está sustituido por uno o dos OH, alquilo de C1.4, alcoxi de C?.4, CO-alquilo de C?.4 o carbamoilo; 3. R-io representa 1 a 3 sustituyentes independientemente seleccionados a partir de alquilo de C?-C3; hidroxialquilo de C?-C3; alcoxialquilo de C?-C6; halogenoalquilo de C?-C3; fenilo; heteroarilo; F; Cl; OH; 4. R3 es H ; OR-, ; -CHz-CHz-NR^; -CH2-CH2-OR? ; -CH2-C(O)-NR1 R2; 5. R es F; Cl; Br; I ; -OR? ¡ -NR? R2 o tiene uno de los significados dados para Ri ; 6. R5 tiene uno de los significados dados para Ri . La presente invención también incluye un proceso para la preparación de un compuesto de fórmula I , el cual proceso comprende a) para la preparación de un compuesto de fórmula I en donde cada uno de R3 y R4 es H, hacer reaccionar un compuesto de fórmula II
en donde Ri y R2 son como se definieron anteriormente, con un agente de formación de urea; o b) para la preparación de un compuesto de fórmula I en donde cada uno de R3 y R es H, amidar un compuesto de fórmula l l l en donde R5 es como se definió antes, o un derivado funcional del mismo; o c) para la preparación de un compuesto de fórmula I en donde cada uno de R3 y R4 es diferente de H, convertir un compuesto de fórmula I en donde cada uno de R3 y R4 es H; y, en donde se requiera, convertir el compuesto resultante de fórmula I obtenido en forma libre en la forma de sal deseada, o viceversa. El agente de formación de urea usado en la etapa a) del proceso puede ser fosgeno, trifósgeno o triclorometilformato, seguido por la adición de una amina. La formación de urea también puede ser obtenida cuando el compuesto de fórmula I I se hace reaccionar con isocianato. La amidación en la etapa b) del proceso puede ser convenientemente llevada a cabo formando un derivado funcional de carboxi activado, e.g. cloruro ácido, anhídrido mixto o anh ídrido simétrico, seguido por la reacción con una amina o por reacción directa de e.g. un metil éster con una amina bajo calentamiento o con irradiación de microondas. Los compuestos de fórmula I I , usados como materias primas, pueden ser preparados como sigue: Ri y R2 son como se definieron anteriormente. Los compuestos de fórmula l l l, usados como materias primas, pueden ser preparados como sigue:
en donde R5 es como se definió anteriormente y P es un grupo protector, e.g. metilo, etilo, t-butilo, tritilo, bencilo, fluorenilo, trimeti Isil ileti lo o alil éster.
Las reacciones anteriores pueden ser llevadas a cabo conforme a métodos conocidos en la técnica o como se describió aquí anteriormente. La eliminación del grupo protector P puede ser llevada a cabo mediante hidrólisis acida o básica, tratamiento con ion fluoruro o mediante hidrogenación. Aunque la producción de las materias primas no está particularmente descrita, los compuestos son conocidos o pueden ser preparados de manera análoga a los métodos conocidos en la técnica o como se describe posteriormente. Los siguientes Ejemplos son ilustrativos de la invención, sin restricción. Eiemplo 1 9-Dietilami a 7-feniSanruda deí ácido (6aR,9R)=6,6a,8,9-4H-indolo[4,3-fg]quinolina°7,9-dicarboxílico Una mezcla del mesilato de dietilamida de ácido (6aR,9R)-4,6,6a,
7,8,9-hexahidro-indolo[4,3-fg]quinolina-9-carboxílico (122 mg, 0.30 mmol) e isocianato-benceno (36 mg , 0.30 mmol) en acetona (5 ml) se agito durante 3 h a 25°C. El solvente se eliminó, y el residuo se sometió a cromatografía instantánea (SiO2, ciclohexano/f-butil metil éter 1 :0?2:3) para dar el compuesto del título. MS/ES: 429 [M+H]+ Los compuestos de fórmula
en donde R5 tiene los significados proporcionados en la Tabla 1 , son preparados conforme a un procedimiento similar. Tabla 1
Ejemplo 13 Fenilamida del ácido 9-tetrahidro-4H-indolo[4,3=fg]quinolina-7-carboxól8co Paso 1 : Metil éster del ácido (6aR,9R)-7-ciano-4,6,6a,7,8,9-hexahidro- indolo[4,3-fg]quinolina-9-carboxílico A un matraz de fondo redondo de 50ml que conten ía una solución de metil éster de ácido lisérgico (1 .0 g, 3.54 mmol) en diclorometano anhidro (50ml) se agregó lentamente bromuro de cianógeno (2.02g , 19.1 1 mmol) y la mezcla de reacción resultante de color negro se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas tiempo en el cual la TLC (cromatografía en capa fina, en inglés) en 1 0% metanol/diclorometano mostró una conversión parcial de la materia prima para dar dos productos de corrida más rápida. La mezcla de reacción se mantuvo en agitación durante el fin de semana y se verificó mediante TLC sin mostrar ningún cambio. La mezcla de reacción se agitó entonces a 50°C durante 4 horas y se extrajo después entre ácido tartárico y diclorometano. La fase acuosa se re-extrajo con diclorometano ( 100ml) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (200ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y concentraron al vacío dar un aceite café oscuro (del color brea). La purificación se llevó a cabo mediante cromatografía en columna instantánea de fase normal (Biotage Flash 40, cartucho de 90g) usando 40% acetato de etilo/hexano para lograr la separación del producto de corrida rápida el cual se aisló como un sólido amarillo pálido. El producto se cristalizó a partir de terbutil metil éter y se evaporó lentamente. El material cristalizado resultante se filtró en la bomba para dar cristales amarillo pálido Paso 2: Metil éster del ácido (6aR,9R)-4,6,6a,7,8,9-hexahidro-indolo
[4,3-fg]quinolina-9-carboxílico A un matraz de fondo redondo de 100ml que contenía una solución de metil éster de ácido (6aR,9R)-7-ciano-4,6,6a,7,8,9-hexahidro-indolo [4,3-fg]quinolina-9-carboxílico ( 1 .57g , 5.35 mmol) en ácido acético (20ml) se agregó agua (4ml) y cinc (1 .5g). La mezcla de reacción se sometió a reflujo a 1 00°C durante 3 horas tiempo en el cual la TLC en 20% metanol/DCM mostró una conversión de la materia prima para dar el producto como una mezcla de disatereómeros. La mezcla de reacción se filtró para eliminar el cinc y el papel filtro se lavó perfectamente con agua (200ml) y acetato de etilo (200ml). La fase acuosa se hizo básica con la adición de carbonato hidrógeno de sodio sólido. Las fases se extrajeron entonces y se permitió que se separaran. La fase acuosa se re-extrajo con acetato de etilo (2 x 100ml) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (200ml), se secaron (MgSO4), filtraron en la bomba y se concentraron al vacío para dar una espuma de color beige. La purificación se llevó a cabo mediante cromatografía en columna instantánea de fase normal (Biotage Flash 40, cartucho 40g) usando 1 0% metanol/diclorometano para lograr la separación. El producto se aisló como una espuma beige. Paso 3: Metil éster del ácido (6aR,9R)-7-fenilcarbamoil-4,6,6a,7,8,9-hexahidro-indolo[4,3-fg]quinolina-9-carboxílico A un matraz de fondo redondo de 100ml que contenía una solución de metil éster de ácido (6aR,9R)-4,6,6a,7,8,9-hexahidro-indolo[4,3-fg] quinolina-9-carboxílico (0.8g, 2.98 mmol) en diclorometano (20ml) se agregó fenilisocianato (0.45 ml, 4.5 mmol, 1 .5 eq . ). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas tiempo en el cual la TLC en 10% metanol/DCM mostró una conversión de la materia prima para dar el producto como una mezcla de diastereómeros. Los volátiles se concentraron al vació y se purificaron directamente usando cromatografía en columna instantánea de fase normal (Biotage Flash 40, cartucho de 90 g) usando 30% de acetato de etilo/hexano para aislar el producto como una mezcla diastereomérica 1 : 1 . Paso 4: Ácido (6aR,9R)-7-fenilcarbamoil-4,6,6a,7,8,9-hexahidro-indolo [4,3-fg]quinolina-9-carboxílico A un matraz de fondo redondo de 100ml que contenía metil éster de ácido (6aR,9R)-7-fenilcarbamoil-4,6,6a,7,8,9-hexahidro-indolo[4,3-fg] quinolina-9-carboxílico (0.8g , 2.06 mmol) se agregó metanol ( 12ml), THF (24ml) y una solución de hidróxído de litio (247mg) en agua ( 12ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 20 minutos tiempo en el cual la TLC en 20% metanol/diclorometano mostró una conversión completa de la materia prima. El color de la mezcla de reacción cruda ha cambiado de amarillo claro a un rojo violeta. Los volátiles se eliminaron al vacío (dejando solo agua) y la solución acuosa se hizo acida con la adición de HCl 1 M. El precipitado beige resultante se filtró en la bomba y la torta del filtro se lavó con agua destilada (50ml). La torta del filtro se secó entonces en un horno al alto vacío a 50°C durante 16 horas proporcionando el producto. Paso 5: Fenilamida del ácido (6aR,9R)-9-(pirrolidina-1 -carbonil)-6,
6a,8,9-tetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinolina-7-carboxílico A un matraz de fondo redondo de 50 ml que contenía una suspensión de ácido (6aR,9R)-7-fenilcarbamoil-4,6,6a,7,8,9-hexahidro-indolo[4,3-fg]quinolina-9-carboxílico (0.2g, 0.54 mmol), se agregaron PYBOP (0.307g), diclorometano ( 1 0ml), pirrolidina (0.054ml, 0.64 mmol, 1 .2 eq . ) y base de Hünigs (0.187ml, 1 .07 mmol, 2 eq . ). La mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. La purificación se llevó a cabo mediante cromatografía en columna instantánea de fase normal (Biotage Flash 40, cartucho de 40g) usando 50% acetato de etilo/hexano como solvente. La fenilamida del ácido (6aR,9R)-9-(pirrolidina-1 -carbonil)-6,6a,8,9-tetrahidro-4H-indolo[4, 3-fg] quinolina-7-carboxílico se aisló como un sólido beige. MS/ES: 427 (M+H)+ Los compuestos de fórmula
en donde Ri y R2 tienen los significados proporcionados en la Tabla 2, son preparados usando procedimientos similares y las aminas apropiadas. Tabla 2
10 15 20 25 Ejemplo 45 (2=Metoxi-fenil)-am?da del ácido (6aR,9R)=9=(p8rrolidina=1=carlb©íT)il)= 6,6a,8,9=tetrahidro-4H-indo¡o[4,3-fg]quinolina=7=carb©XDl¡co Paso 1 : (6aR,9R)-7-metil-4,6,6a,7,8,9-hexah¡dro-indolo[4,3-fg]qu¡nolin-9-il)-pirrolidin-1 -il-metanona Se disolvió 30 g ( 1 1 1 .80 mmol) de ácido lisérgico en 400 ml de diclorometano y se enfrió a 0o- 5°C, se agregaron 31 .16 ml (223.61 , 2 eq . ) de trietilamina y 18.66 ml (223.61 mmol, 2 eq .) de pirrolidína y dentro de 1 5 minutos 1 .5 equivalentes de anhídrido de ácido propano fosfónico (50% en acetato de etilo). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h a temperatura ambiente, después se vertió sobre hielo y se extrajo con diclorometano, la fase orgánica se secó con Na2SO4, se evaporó y el residuo (28.6 g) se purificó por cromatografía sobre sílice eluyendo con diclorometano:metanol 9: 1 para dar ((6aR,9R)-7-metil-4,6, 6a,7,8,9-hexahidro-indolo[4,3-fg]quinolin-9-il)-pirrolidin-1 -il-metanona. Paso 2: (6aR,9R)-4,6,6a,7,8,9-Hexahidro-indolo[4,3-fg]quinolin-9-il-pirrol idin- 1 -i I-meta nona Se disolvieron 6 g ( 18.67 mmol) del producto del paso 1 en 1 80 ml de diclorometano a 0°C y se agregó 5.522 g (22.40 mmol, 1 .2 eq . ) de ácido meta-cloroperbenzóico al 70%. Después de 10 minutos se ha formado el intermediario N-óxido y se agregó 2.594 g (9.33 mmol, 0.5 eq. ) de FeSO4.7H2O en 12 ml metanol, se eliminó el enfriamiento y se agitó la mezcla a temperatura ambiente. Después de 1 hora 25 minutos la mezcla de reacción se extrajo con una solución de EDTA 0.1 M (previamente ajustada a un pH de 9), se secó con Na2SO4, se evaporó y se purificó mediante cromatografía con gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol:amoniaco 93:6: 1 para dar (6aR,9R)-4,6,6a,7,8,9-hexahidro-indolo[4,3-fg]quinolin-9-il-pirrolidin-1 -il-metanona. Paso 3: (2-metoxi-fenil)-amida del ácido (6aR,9R)-9-(pirrolidina-1 -carbonil)-6,6a,8,9-tetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinolina-7-carboxílico Se disolvieron 5.087 g ( 16.54 mmol) del producto del paso 2 en 80 ml de tetrahidrofurano y se agregó 1 .79 ml ( 16.5 mmol) de 1 -isocíanato-2-metoxi-benceno y se agitó a temperatura ambiente para atrapar el exceso de isocianato, se agregó 0.3 equivalentes de 3-amino-1 ,2-propanodiol y se agitó durante 2.5 horas. Posteriormente la mezcla de reacción se lavó con una solución saturada de carbonato hidrógeno de sodio y salmuera, se secó con Na2SO y se evaporó parcialmente. La cristalización proporcionó la (2-metoxi-fenil)-amida del ácido (6aR,9R)- 9-(pirrolidina-1 -carbonil)-6,6a,8,9-tetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinolina- 7-carboxílico. MS/ES: 457 (M + H)+ Los compuestos de fórmula
en donde R5 tiene los significados dados en la Tabla 3, son preparados siguiendo procedimientos similares. Tabla 3
Eiemplo 56 Fenilamida del ácido 5=meti 9=(piperidina=1 =ca?rbonp)=(B,6a,8,2>= íetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinoli?ma=7-carboxíl!C? La fenilamida del ácido 5-metil-9-(piperidina-1 -carbonil)-6,6a,8,9-tetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinolina-7-carboxílico se preparó siguiendo procedimientos similares al descrito para el Ejemplo 45 usando ácido 2-metil-lisérgico (en lugar de ácido lisérgico) y piperidina (en lugar de pirrolidina) en el paso 1 y fenilisocianato en el paso 3. MS: 455 (M+H)+ Ejemplo 57 (3<-Fluoro-fenil)-amida dei ácido 8,9°tetrahidro-4H-indolo[4,3°fg]quinolina-7°carboxDlDC? Se disolvieron 62 mg (0.20 mmol) del producto del paso 2 del Ejemplo 45 en 3 ml de diclorometano y se agregó 0.14 ml ( 10 eq . ) de trietilamina y 0.042 ml de triclorometil cloroformato en 2 ml de diclorometano. Después de 30 minutos a temperatura ambiente se agregaron 0.14 ml de trietilamina ( 10 eq. ) y 0.040 ml (2 eq . ) de 2-flouroanilina. Después de agitar durante 22 horas a temperatura ambiente la mezcla de reacción se separó entre 100 ml de diclorometano y una solución saturada de carbonato hidrógeno de sodio. La capa orgánica se secó con Na2SO4 y se evaporó. El producto crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo/ciclohexano 3: 1 para dar (3-fluoro-fenil)-amida de ácido (6aR,9R)-9-(pirrol id ina-1 -carbonil )-6, 6a, 8, 9-tetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinolína-7-carboxílico. MS/ES: 445 (M+H)+ Los compuestos de fórmula en donde R5 tiene los significado proporcionados en la Tabla 4, se preparan siguiendo procedimientos similares usando reactivos apropiados de amina. TabSa 4
Eiemplo 72 Fenilamida del ácido (6aR,9R)-5-cloro°9°(pirroBi lina-1°car[bonéO)° 6,6a,8,9°tetrahidro-4H°indolo[4,3-fg]q?umolina°7"CarhoxDlico Se disolvieron 64 mg del Ejemplo 1 3 (0.1 5 mmol) en 1 ml de DMF y se agregó 36 mg (0.27 mmol, 1 .8 eq .) de N-clorosuccinimida y se agitó a temperatura ambiente. Después de 55 minutos la mezcla de reacción se purificó mediante cromatografía sobre sílice eluyendo con acetato de etilo para dar fenilamida de ácido (6aR,9R)-5-cloro-9-(pirrol¡d¡na-1 -carbonil)-6,6a,8,9-tetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinolina-7-carboxílico. MS: 461 (M + H)+ Eiemplo 73 Fenilamida dei ácido (6aR,9R)°5-yodo°9°(pDrroBi?dina°i °ca?rlbom?iD)° 696a,8,9-tetrahidro-4H-indolo[4,3=fg]quinolina°7=ca?rboxíS¡co Se preparó fenilamida del ácido (6aR,9R)-5-yodo-9-(pirrolidina-1 -carbonil)-6,6a,8,9-tetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quínolina-7-carboxílico siguiendo un procedimiento similar al descrito para el Ejemplo 72 usando N-yodosuccinimida en lugar de N-clorosuccinimida. MS: 553 (M + H)+. Eiemplo 74 Fenilamida del ácido (6aR,9R)=5=bromo-9=(pDrrolidina=1l =c®[rbo[n)il)= ?,6a,8,9-tetrahidro-4H°indolo[4,3- g]qminoli a°7°ca?rb©xíiico Paso 1 : Ácido (6aR,9R)-5-bromo-7-metil-4,6,6a,7,8,9-hexahidro-indolo [4,3-fg]quinolina-9-carboxílico El ácido lisérgico (8.05 g, 30 mmol) se suspendió en dioxano y se trató con la adición gota a gota de TFA (exotérmico). Se agregó gota a gota de bromo ( 1 .54 ml, 30 mmol, 1 .0 eq . ) en cloroformo. La reacción se enfrió a 5°C y el producto cristalizó. El ácido (6aR,9R)-5-bromo-7-metil-4,6,6a,7,8,9-hexahidro-indolo[4,3-fg]quinolina-9-carboxílico se aisló por filtración y recristalizó a partir de dietil éter. Rf=0.5, 10% MeOH : DCM, M + H+=346,348, p.f. > 245 (descomposición). Paso 2: (6aR,9R)-5-bromo-7-metil-4,6,6a,7,8,9-hexahidro-indolo[4,3-fg]quinolin-9-il)-pirrolidin-1 -il-metanona A un matraz de fondo redondo de 50ml que contenía ácido (6aR, 9R)-5-bromo-7-metil-4,6,6a,7,8,9-hexahidro-indolo[4,3-fg]qu¡nolina-9-carboxílíco (5.0g, 1 3.38 mmol) en DMF (20ml) se agregó HATU (6.10g, 16.06 mmol, 1 .2 eq . ) y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Se agregó pirrolidina (2.24ml, 26.78 mmol, 2.0 eq . ) y la mezcla de reacción se agito durante 2 horas más a temperatura ambiente. La TLC en 10% metanol/DCM mostró una conversión completa de la materia prima (visualizada con reactivo de cloro/TBDM y con UV). Se agregó HCl 4M ( 1 50ml) y agua (1 50ml) a la mezcla de reacción y se agregó acetato de etilo (200ml). Después de la extracción, la fase acuosa se re-extrajo con acetato de etilo (2x200ml) y los extractos combinados se lavaron con bicarbonato saturado (2x200ml), agua (200ml), salmuera saturada (200ml), se filtraron (en la bomba), se secaron (MgSO ) y concentraron al vacío para dar un aceite café oscuro. La purificación se llevó a cabo mediante cromatografía en columna instantánea de fase normal (Biotage Flash 40, cartucho de 90g) usando 20% acetato de etilo/hexano aumentado a 1 00% acetato de etilo y después 5% metanol/acetato de etilo por 5 litros. Las fracciones relevantes se combinaron, concentraron al vacío y se dejaron en un horno al alto vacío durante 3 horas a 50°C para dar una mezcla de ácido (6aR,9R)-5-bromo-7-metil-4,6,6a,7,8,9-hexahidro-indolo[4,3-fg]quinolina-9-carboxílico y un diastereómero. Paso 3: ((R)-5-Bromo-7-metil-7-oxi-4,6,6a,7,8,9-hexahidro-indolo[4,3-fg] q uinolín-9-i I )-pirrol idin- 1 -i I-meta nona Se disolvió 1 .1 g (2.75 mmol) del producto del paso 2 en THF (40ml) con un ultrasonicador y después se enfrió la solución a -40°C usando un baño de acetona/hielo seco. Se agregó m-CPBA (0.640 g, 3.75 mmol, 1 .35 eq . ) en porciones (por 30 minutos) y la mezcla de reacción resultante de color café oscuro se dejó calentar a 0°C con agitación constante (aprox. 1 .5 horas). Se agregó gota a gota una solución de cloruro de fierro ( I I) (0.1 74 g, 1 .37 mmol, 0.5 eq . ) en agua ( 10ml) a la mezcla de reacción a 0°C. Después de 1 hora la mezcla de reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente y después se continuó agitando durante 2 horas. La TLC en 20% metanol/DCM mostró consumo completo del intermediario de N-óxido. Se agregó una solución de bisulfito de sodio ( 1 g) en agua (5ml) a la mezcla de reacción y después se eliminaron los volátiles al vacío para dar una espuma negra. Esta es purificada entonces en el sistema Biotage Flash 40 usando 2% metanol/DCM aumentado a 8% metanol/DCM en incrementos del 2% por litro de solvente proporcionando ((R)-5-bromo-7-metil-7-ox¡-4,6,6a,7,8,9-hexahidro-indolo[4,3-fg]quinolin-9-il)-pirrolidin-1 -il-metanona. Paso 4: Fenilamida del ácido (6aR,9R)-5-bromo-9-(pirrolidina-1 -carbonil )-6, 6a, 8, 9-tetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinolina-7-carboxílico El producto del paso 3 (0.504g, 1 .32 mmol) se disolvió en diclorometano anhidro (20ml) y la solución se enfrió a 0°C con un baño de hielo-sal. Después se agregaron la base de Hünigs (0.940ml, 0.21 mmol) y fenilisocianato (0.388ml, 3.9 mmol) y se dejó que la mezcla de reacción se calentara a temperatura ambiente. Se continuó agitando durante 16 horas. La TLC en 20% metanol/DCM mostró consumo completo de la materia prima. La purificación se llevó a cabo mediante cromatografía en columna instantánea de fase normal (Biotage Flash 40, cartucho de 40g) usando un sistema de gradiente comenzando con 20% de acetato de etilo/hexano ( 1 litro) aumentado a 30% de acetato de etilo/hexano (1 litro), después 50% de acetato de etilo/hexano ( 1 litro) y finalmente 60% de acetato de etilo/hexano ( 1 litro). Las fracciones relevantes se combinaron, se concentraron al vacío y se dejaron en un horno al alto vacío durante 3 horas a 50°C. La fenilamida ß del ácido (6aR,9R)-5-bromo-9-(pirrolid¡na-1 -carbonil)-6,6a,8,9-tetrah¡dro-4H- indolo[4,3-fg]quinolina-7-carboxílico se aisló como un sólido incoloro. MS/ES: 505 (M+H)+ Eiemplo 75 Fenilamida del ácido (6aR,9R)-5=fenii=9=(pir?r©ló ?na=1 =e§)[rfo®[p?il)= 6,6a,8,9-fetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]q inolina°7°ca?rboxílico A un frasco vial de reacción de microondas de 5ml que contenía el Ejemplo 74 (0.05g, 0.27 mmol) en DME ( 1 ml) se agregó ácido fenilborónico (46mg, 0.37 mmol, 1 .4 eq . ) y carbonato de sodio 2M ( 1 .50ml). La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 5 minutos mientras se agitaba y después se agregó el catalizador (30mg). Las paredes del frasco vial se lavaron con etanol con descargas de nitrógeno (0.75ml) y la mezcla de reacción se dejó purgar con nitrógeno durante otros 5 minutos. El frasco vial se selló con una tapa y la mezcla de reacción corre en el microondas 100°C durante 300 segundos (tiempo de retención fijo). La TLC en 10% metanol/DCM mostró consumo total de la material prima (visualizado con el reactivo de cloro/TBDM y con UV). La mezcla de reacción se dividió entre bicarbonato saturado (20ml) y diclorometano (20ml). Los orgánicos se aplicaron directamente a una columna instantánea y se purificó mediante cromatografía en columna instantánea en fase normal (Biotage Flash 40, cartucho de 40g) usando 30% acetato de etilo/hexano ( 1 litro) aumentado a 40% acetato de etilo/hexano ( 1 litro) como solvente. Las fracciones relevantes se combinaron, se concentraron al vacío y se dejaron en un horno al alto vacío 3 horas a 50°C y el producto se aisló. MS: 503 (M + H)+ Los compuestos de fórmula
en donde R4 tiene los significados proporcionados en la Tabla 5, on preparados usando procedimientos similares. Tabia 5
Ejemplo 78 Ácido (6aR,9R)-5-(3-hidroxi-p?rop-1-inil)-9-(pi?rroiidina-1 =ca?rbonil)= 6,6a,8,9=tetrahidro-4H=indolo[4,3-fg]qwinoii[iia=7=carboxBlico A un frasco vial de reacción de microondas de 5ml que contenía una solución del ejemplo 74 (50mg, 0.1 mmol), trifenilfosfina (3 mg, 0.001 mmol, 0.1 eq . ), yoduro de cobre ( 1 mg, 0.005 mmol, 0.05 eq . ), trietilamina (1 ml), piridina (1 ml) se agregó alcohol propargílíco (0.007 ml, 0.12 mmol, 1 .2 eq . ) y la mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 5 minutos mientras se agitaba. Se agregó catalizador de diclorobis(trifenilfosfina) paladio (7 mg, 0.01 mmol, 0.1 eq.) y la reacción se dejó purgar con nitrógeno durante 5 minutos más. El frasco vial se selló con una tapa y la mezcla de reacción corre en el microondas a 100°C durante 300 segundos (tiempo de retención fijo). LC-MS muestra algo de conversión al producto. Se agregaron el catalizador (7mg , 0.01 mmol, 0.1 eq . ), alcohol proparg ílico (7µl, 0.12 mmol, 1 .2 eq .) y yoduro de cobre (I) ( 1 mg, 0.005 mmol, 0.05 eq . ) a la mezcla de reacción y se corrió en el microondas durante otros 300 segundos a 100°C. LC-MS muestra aprox 1 : 1 de conversión de la materia prima: producto. La mezcla de reacción es corrida durante otros 600s a 100°C tiempo después del cual la LC-MS muestra un consumo virtual de la materia prima al producto. La purificación se llevó a cabo mediante cromatografía en columna instantánea en fase normal (Biotage Flash 40, cartucho de 40g) usando 50% acetato de etilo/hexano (2 litros). Las fracciones relevantes se combinaron, se concentraron al vacío y se dejaron en un horno al alto vacío durante 3 horas a 50°C y el producto resultante se aisló. MS/ES: 481 (M+H)+ Ejemplo 79 Isopropil éster del ácido [(6aR,9R)-7-fenilcarbamoil-9-(pirrolidina- 1 -carbonil)-6a,7,8,9-tetrah¡dro-6H-indolo[4,3-fg]quinol¡n-4-¡l]-acétíco Se disolvieron 5 g ( 1 1 .72 mmol) del Ejemplo 1 3 en 100 ml de diclorometano. A temperatura ambiente se agregaron 30 ml de una solución de hidróxido de sodio acuosa al 40% así como 400 mg de cloruro de benciltrietil-amonio. La mezcla de reacción se enfrió a 0-5°C y se agregaron 6.23 ml (46.89 mmol, 4 eq . ) de isopropilbromoacetato y se agitó durante 1 hora. La mezcla de reacción se vertió sobre hielo y se extrajo con CH2CI2, la capa orgánica se lavó con agua, se secó con Na2SO4 y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre sílice eluyendo con terbutil-metil éter para dar el isopropíl éster del ácido [(6aR,9R)-7-fenilcarbamoil-9-(pirrolidina-1 -carbonil)-6a, 7,8,9-tetrahidro-6H-indolo[4,3-fg]quinolin-4-il]-acético. MS/ES: 527 (M + H )+ Eiemplo 80 Ácido [(6aR,9R)-7 enilcarbamoßl-9-(pirf©lidBna=1»ca?rbonSI)-(Ba, 7,8,9-íetrahidro-6H-indolo[4,3-fg]qu?nolin-4=il]-acétsco El ácido [(6aR.9R)-7-fenilcarbamoil-9-pirrolidina-1 -carboni l)-6a, 7, 8,9-tetrahidro-6H-indolo[4,3-fg]quinolin-4-il]-acético se aisló como un subproducto de la síntesis del Ejemplo 79. MS/ES: 485 (M + H )+ Los compuestos de fórmula
en donde R3 tiene los significados proporcionados en la Tabla 6, son preparados siguiendo un procedimiento similar al Ejemplo 79. Tabla 6
Los compuestos de fórmula
en donde R3 tiene los significados proporcionados en la Tabla 7, son preparados conforme a un procedimiento similar al Ejemplo 79 comenzando a partir del Ejemplo 1 en lugar del Ejemplo 1 3 y usando haluros de alquilo apropiados. Tabla 7
Ejemplo 87 Feoiilamida del ácido (6aR,9R)-4-(2-hidro?i-etil)=S)=(pBrroli liot?a=1l = carboni l)-6, 6a, 8, 9-tetrahodro-4H-indolo[4,3-ffg]quinol5?rsa=7-ca?r[ ©p5i?co
Se disolvieron 3.99 g (7.57 mmol) del Ejemplo 79 en 1 00 ml de tetrahidrofurano y a 0-5°C se agregó 989 mg (45.43 mmol, 4 eq. ) de borohidruro de litio. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4.5 horas. Después la mezcla de reacción se vertió sobre una mezcla de hielo/ácido acético (evolución de CO2 vigorosa) y se extrajo con diclorometano. La capa orgánica se lavó con agua, se secó con Na2SO4 y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre sílice eluyendo con diclorometano: metanol 95:5 para dar en el orden de elución el isómero ß deseado de la fenilamída del ácido (6aR,9R)-4-(2-hidroxi-etil)-9-(pirrolidina-1 -carbonil)-6,6a,8,9-tetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinolina-7-carboxílico. MS/ES: 471 (M + H)+ Eiemplo 88 Fenilamida del ácido (6aR,9R)-4-(2-morfolim=4-i¡=etil)-9-(pinrolo li?p?a° 1 °carbonil)-6,6a,8,9-tetrahidro-4H-in loloE4,3-fg]qyinoDiraa°7-carb©KDDic© Paso 1 : 2-[(6aR,9R)-7-fenilcarbamoil-9-(pirrolidina-1 -carbonil)-6a,7,8, 9-tetrahidro-6H-indolo[4,3-fg]quinolin-4-il]-etil éster del ácido toluen-4-sulfónico Se disolvieron 1 .12 g (2.38 mmol) del Ejemplo 87 en 40 ml de diclorometano y a temperatura ambiente se agregó 437 mg (3.58 mmol, 1 .5 eq . ) de dimetilaminopíridina y la mezcla se enfrió a 0-5°C. Se agregó 683 mg (3.589 mmol, 1 .5 eq . ) de cloruro de 4-metil-bencenosulfonilo y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3.5 horas. La mezcla de reacción se vertió sobre hielo y algo de ácido sulfúrico 6 y se extrajo con diclorometano. La capa orgánica se secó con Na2SO4 y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre sílice para dar 2-[(6aR,9R)-7-fen¡lcarbamoil-9-(pirrolidina-1 -carbonil)-6a,7,8,9-tetra hidro-6H-indolo[4,3-fg]quinolin-4-il]-etil éster del ácido toluen-4-sulfónico. Paso 2: Fenilamida del ácido (6aR,9R)-4-(2-morfolin-4-il-etil)-9-(pirrolidina-1 -carbonil)-6,6a,8,9-tetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinolina-7-carboxílíco Se agitaron 80 mg (0.128 mmol) del producto del paso 1 y 1 ml de morfolina a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetona: ciciohexano 6:4 para dar la fenilamida del ácido (6aR,9R)-4-(2-morfolin-4-il-etil)-9-(pirrolidina-1 -carbonil)-6,6a,8,9-tetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinolina-7-carboxílico. MS/ES: 540 (M + H)+ Los compuestos de rmula
en donde R3 tiene los significados proporcionado en la Tabla 8, son preparados siguiendo un procedimiento similar al paso 2 del Ejemplo 88. Tabla 8
Eiemplo 97 Fenilamida dei ácido (6aR,9R)=4-aceti8=9=(piB?©l5di[r?a=1l=caß 6,6a,8,9-tetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quino0ina--7<-caíbo?ílico Se disolvieron 80 mg del Ejemplo 13 (0.18 mmol) y 69 mg (0.56 mmol, 3 eq . ) de dimetilaminopirimidina en 3 ml de dicloroetano y se agregó 0.036 ml (0.37 mmol, 2 eq .) de anhídrido acético. La mezcla de reacción se agito a 65°C durante 4 horas. La mezcla de reacción se separó entre diclorometano y solución acuosa saturada de bicarbonato. La capa orgánica se secó con Na2SO4 y se evaporó. El producto crudo se purificó mediante cromatografía sobre sílice eluyendo con diclorometano:metanol 97:3 para dar fenilamida del ácido (6aR,9R)-4-acet¡l-9-(pirrolidína-1 -carbon¡l)-6,6a,8,9-tetrahidro-4H-¡ndolo[4,3-fg] quinolina-7-carboxílíco. MS/ES: 469 (M+H)+ Eiemplo 98 Fenilamida del ácido (6aR,9R)-4-hidroxi°9"(p¡i??l?d?na-1-ca?rho?p]¡iO)-- 6,6a,8,9-tetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinolina°7°carboxlli o Paso 1 : Fenilamida del ácido (5aS,6aR,9R)-9-(pirrolidina-1 -carbonil)-5,5a, 6,6a,8,9-hexahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinolina-7-carboxílico Se disolvieron 351 mg (0.82 mmol) del Ejemplo 13 en 6 ml de ácido trifluoroacético y se agregó 0.407 ml (2.47 mmol, 3 eq . ) de trietilsilano. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y 10 minutos. Posteriormente la mezcla de reacción se separó entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato, la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4 y se evaporó y cristalizó a partir de ter-butil metil éter para dar fenilamida del ácido (5aS,6aR,9R)-9-(pirrolidina-1 -carbonil)-5,5a,6,6a,8,9-hexahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinolina-7-carboxílico. Paso 2: Fenilamida del ácido (6aR,9R)-4-hidroxi-9-(pirrolidina-1 -carbonil)-6,6a,8,9-tetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinolina-7-carboxílico Se disolvieron 212 mg (0.49 mmol) del producto del paso 1 en 1 2 ml de metanol y se agregó 41 mg (0.12 mmol, 0.25 eq. ) de dihidrato de wolframato sódico en algunas gotas de agua. Posteriormente se agregó 670 µl de H2O2 al 30% ( 10 eq. ) a 0°C y se agitó a temperatura ambiente durante 50 minutos. La mezcla de reacción se separó con diclorometano y solución acuosa saturada de bicarbonato, la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó con Na2SO y se evaporó y purificó mediante cromatografía sobre sílice eluyendo con ter-butil metil éter: ciciohexano 9: 1 para dar fenilamida del ácido (6aR,9R)-4-hidroxi-9-(pirrolidina-1 -carbonil)-6,6a,8,9-tetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinolina-7-carboxílíco. MS/ES: 441 (M + H)+ Eiemplo 99 Fenilamida del ácido (6aR,9R)°4-?metoxi~9°(pDrr©0i lina°1 °c@rí ©?¡?iD)° 6,6a,8,9-íetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]q inolina=7=carboxDlico Se disolvió 1 7 mg (0.038 mmol) del Ejemplo 98 en 2 ml de metanol: diclorometano 1 : 1 y se destiló una solución de diazometano recién preparada en la mezcla de reacción durante 10 minutos hasta que persistió el color amarillo. La mezcla de reacción se evaporó y purificó mediante cromatografía en sílice usando ter butil metil éter: ciciohexano 9: 1 como eluyente. El producto cristalizó con la evaporación para dar fenilamida del ácido (6aR,9R)-4-metoxi-9-(pirrol¡dina-1 -carbonil)-6,6a, 8,9-tetrahidro-4H-indolo[4,3-fg]quinolina-7-carboxílico. MS/ES: 458 (M + H)+ Los compuestos de formula I en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable muestra propiedades farmacológicas valiosas, e.g. como antagonistas de CXCR3, e.g. indicados en las pruebas in vitro y por lo tanto indicados para terapia. a) Análisis de la unión de membrana de CXCR3 Se usó un análisis de la unión del ligando para identificar los inhibidores de la unión de l-TAC a las membranas que expresan CXCR3. Las membranas celulares son preparadas a partir de células CHO transfectadas con CXCR3 humano. La unión del ligando CXCR3 marcado con 125l e.g. I-TAC (CXCL1 1 ) al CXCR3 es evaluada usando la tecnolog ía de Análisis de Centelleo por Proximidad (SPA) (Amersham Pharmacia Biotech). Se incubaron un amortiguador o diluciones en serie del compuesto durante 2 horas a temperatura ambiente con el ligando CXCR3 marcado (e.g. I-TAC), las membranas que expresan CXCR3 y bolitas de PVT recubiertas de WGA. Después las placas se centrifugaron y contaron en un instrumento Topcount (Packard). Los datos son reportados como la concentración del compuesto requerida para alcanzar el 50% de inhibición de la unión del ligando 125l. En este análisis, los compuestos de la fórmula I tienen un valor de IC50 de 1 µ M-1 nM. Por ejemplo, los compuestos de los Ejemplos 18, 23, 43, 59 y 79 nM tienen una IC50 de 54, 61 , 23, 43 y 145, respectivamente. b) Análisis funcional de CXCR3 - movilización de Ca2+. La movilización de Ca + inducida por el ligando CXCR3 es evaluada en células L1 .2 tranfectadas con CXCR3 (un ratón pre línea celular B). Para esto, las células se cargaron con el fluorocromo Fluo-4 sensible a Ca2+ (Molecular Probes). Después del lavado, las células se pre-incubaron con inhibidores de bajo peso molecular durante 2 horas a temperatura ambiente. El incremento momentáneo en el Ca2+ intracelular después de la adición del ligando CXCR3 (e.g. I-TAC) es verificado en un instrumento lector de placas de imagen fluorescente (FLIPR). La inhibición de la movilización de Ca2+ inducida por el ligando CXCR3 en la presencia de antagonistas de CXCR3 es reportada como valores de IC50 i. e. la concentración del compuesto que reduce la respuesta máxima de Ca2+ en un 50%. En este análisis, los compuestos de fórmula I tiene un valor de IC50 de 1 µ M-1 nM. Por ejemplo, los compuestos de los Ejemplos 18, 23, 43, 59 y 79 tienen una IC50 de 18, 8, 16, 20 y 53 nM, respectivamente. c) Análisis funcional de CXCR3 - quimiotaxis La migración celular dirigida inducida por ligandos CXCR3 e.g. I-TAC es evaluada usando cámaras de quimiotaxis desechables de 96 pozos (Multiscreen M IC, Costar) con membranas de policarbonato que contienen poros de 5 µm de diámetro. La quimiocina (e.g. I-TAC) es colocada en el pozo inferior de la cámara y las células (e.g. células L-1 .2 transfectadas con CXCR3) son colocadas en el compartimento superior de la cámara de quimiotaxis. La migración celular a través de la membrana porosa es permitida durante 4 h a 37°C. Las células migradas desde el compartimento superior hasta el compartimento inferior son cuantificadas mediante citometría de flujo. Cuando los inhibidores LMW son evaluados, se agregan los compuestos a ambos compartimentos en concentraciones idénticas; Las diluciones en serie de los compuestos son evaluadas para determinar su efecto inhibitorio sobre la migración celular dependiente de CXCR3. La concentración de los inhibidores LMW CXCR3 que conlleva a una reducción de células mígradas en un 50% es reportada como IC50. En este análisis, los compuestos de fórmula I tiene un valor IC50 de 1 µM-1 nM. Por ejemplo, los compuestos de los Ejemplos 1 8 y 43 tienen una IC50 de 74 y 75 nM, respectivamente, d) Los experimentos llevados a cabo en modelos de animales murino muestran que la remodelación de la pared recipiente después de una lesión experimental (e.g. inducida por alotrasplante) es significantemente reducida en la ausencia de CXCR3 funcional. Los compuestos de la fórmula I son, por lo tanto, útiles en la prevención y/o tratamiento de enfermedades o trastornos mediados por interacciones entre receptores de quimiocina, e.g. CXCR3, y sus ligandos, e.g. en enfermedades autoinmunes, e.g. artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémíco, tiroiditis de Hashimoto, esclerosis múltiple, miastenia grave, diabetes tipo I o II y los trastornos asociados con la misma, vasculitis, anemia perniciosa, síndrome de Sjoegren, uveítis, psoriasis, alopecia areata y otras, enfermedades alérgicas, e.g. asma alérgico, dermatitis atópica, rinitis alérgica/conjuntivitis, dermatitis alérgica por contacto, enfermedades inflamatorias opcionalmente con reacciones aberrantes implícitas, e. g. enfermedades inflamatoria intestinal, enfermedad de Crohn o colitis ulcerativa, asma intrínseco, lesión pulmonar inflamatoria, lesión inflamatoria del hígado, lesión glomerular inflamatoria, aterosclerosis, osteoartritis, dermatitis irritante por contacto y otras dermatitis eccematosa, dermatitis seborreica, manifestaciones cutáneas de trastornos mediados inmunológicamente, enfermedad ocular inflamatoria, queratoconjuntivitis, miocarditis o hepatitis, lesión por isquemia/reperfusión, e.g. infarto al miocardio, apoplej ía, isquemia intestinal, insuficiencia renal o choque hemorrágico, choque traumático y otros, cáncer, e.g. tumores sólidos o cáncer linfático tal como linfomas de las células T o leucemias de las células T, metastatización o angiogénesis, enfermedades infecciosas, e.g. choque tóxico (e.g. superantígeno inducido), choque séptico, síndrome de dificultad respiratoria del adulto, o trasplante, tal como rechazo agudo o crónico de alo- o xenoinjertos de órganos, tejidos o células o función de injerto retrasada. Por trasplante se quiere decir alo- o xenoinjertos de e.g. células, tejidos, u órganos sólidos, por ejemplo isletas pancreáticas, células madre, médula ósea, tejido de córnea, tejido neuronal, corazón, pulmón, corazón-pulmón combinados, riñon, hígado, intestino, páncreas, tráquea o esófago. El rechazo crónico es también llamado enfermedades del recipiente de un injerto. Para los usos anteriores la dosificación requerida variará por supuesto dependiendo del modo de administración, la condición particular a ser tratada y el efecto deseado. En general, se indican resultados satisfactorios a ser obtenidos sistemáticamente en dosis diarias de aproximadamente 0.01 a 10 mg/kg de peso corporal. Una dosis diaria indicada en mamíferos grandes, e.g. humanos, está en el intervalo de aproximadamente 0.5 mg a aproximadamente 1000 mg, convenientemente administrada, por ejemplo, en dosis divididas de hasta cuatro veces al día o en forma retardada. Las formas de dosificación unitarias adecuadas para administración oral comprenden de aproximadamente 1 a 500 mg de ingrediente activo. Los compuestos de la fórmula I pueden ser administrados por cualquier ruta convencional, en particular enteral, e.g. oralmente, e.g. en la forma de tabletas o cápsulas, o parenteral, e.g. en la forma de soluciones inyectables o suspensiones, tópica, e.g. en la forma de lociones, geles ungüentos o cremas, en una forma nasal o de supositorio. Las composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de fórmula I en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable en asociación con por lo menos un portador farmacéuticamente aceptable o diluyente pueden ser preparadas de manera convencional mezclando con un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable. Los compuestos de la fórmula I pueden ser administrados en forma libre o de sal farmacéuticamente aceptable, e.g. como se indicó anteriormente. Tales sales pueden ser preparadas de una manera convencional y exhiben el mismo orden de actividad que los compuestos libres. De conformidad con lo anterior la presente invención proporciona además: 1 .1 Un método para prevenir o tratar trastornos o enfermedades mediados por interacciones entre receptores de quimiocina y sus ligandos, e.g. tales como se indicó anteriormente, en un sujeto en necesidad de tal tratamiento, el cual método comprende administrar a dicho sujeto una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; 1 .2 Un método para prevenir o tratar enfermedades inflamatorias o autoinmunes, e.g. as se indicó anteriormente, en un sujeto en necesidad de tal tratamiento, el cual método comprende administrar a dicho sujeto una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; 2. Un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse como un producto farmacéutico, e.g. en cualquiera de los métodos indicados anteriormente en 1 .1 o 1 .2. 3. Una composición farmacéutica, e.g. para usarse en cualquiera de los métodos indicados anteriormente en 1 .1 o 1 .2 que comprende un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en asociación con un diluyente farmacéuticamente aceptable o portador para el mismo. 4. Un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para usarse en la preparación de una composición farmacéufica para usarse en cualquiera de los métodos indicados anteriormente en 1 .1 o 1 .2. Los compuestos de la fórmula I pueden ser administrados como el ingrediente activo solo o junto con, e.g. un adyuvante para, otros fármacos e.g. en regímenes inmunosupresores o inmunomoduladores u otros agentes antiínflamatorios, e.g. para el tratamiento o prevención de rechazo agudo o crónico de alo- o xenoinjertos o trastornos inflamatorios o autoinmunes, un agente quimioterapéutico o un agente anti-infectivo e.g. un agente anti-viral tal como e.g. un agente anti-retroviral o un antibiótico. Por ejemplo, los compuestos de fórmula I pueden ser usados en combinación con un inhibidor de calcineurina, e.g. ciclosporina A o FK 506; un inhibidor mTOR, e.g. rapamicina, 40-O-(2-hidroxietil)-rapamicina, CCI779, ABT578 o un rapalog, e. g. AP23573, AP23464, AP23675, AP23841 , TAFA-93, biolimus 7 o biolimus 9; una ascomicina que tiene propiedades inmunosupresoras, e.g. ABT-281 , ASM981 , etc. ; corticosteroides; ciclofosfamida; azatioprina; metotrexato; leflunomida; mizoribina; ácido micofenólico; micofenolato mofetil; 15-desoxispergualina o un inmunosupresor homólogo, análogo o derivado del mismo; un agonista o modulador del receptor S1 P, e.g. FTY720 o un análogo del mismo; un inhibidor de PKC, e.g. como se describió en WO 02/38561 o WO 03/82859, e.g. el compuesto del Ejemplo 56 o 70; anticuerpos monoclonales para receptores de leucocitos, e.g. , MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CD8, CD1 1 a/CD18, CD25, CD27, CD28, CD40. CD45, CD52, CD58, CD80, CD86, CD137, ICOS, CD1 50 (SLAM), OX40, 4-1 BB o para sus ligandos, e.g. CD1 54, o antagonistas de los mismos; otros compuestos inmunomoduladores, e.g. una molécula recombinante de enlace que tiene por lo menos una porción del dominio extracelular de CTLA4 o un mutante del mismo, e.g. una por lo menos porción extracelular de CTLA4 o un mutante del mismo unido a una secuencia de proteína diferente de CTLA4, e.g. CTLA4lg (por ejemplo designada ATCC 68629) o un mutante del mismo, e.g. LEA29Y; inhibidores de la molécula de adhesión, e.g. antagonistas LFA-1 , antagonistas ICAM-1 o -3, antagonistas VCAM-4 o antagonistas VLA-4; o anticuerpo anti- quimiocina, e.g. anticuerpos anti MCP-1 , o anticuerpos receptores de antiquimiocina o antagonistas del receptor de quimiocina de bajo peso molecular. En donde los compuestos de fórmula I son administrados junto con otra terapia inmunosupresora/inmunomoduladora, anti-inflamatoria o quimioterapéutica, las dosis del compuesto inmunosupresor, inmunomodulador, anti-inflamatorio o quimioterapéutico co-administrado variarán por supuesto dependiendo del tipo de co-fármaco empleado, e.g. si es un esteroide o un inhibidor de calcineurina, del fármaco específico empleado, de la condición a ser tratada, etc. De conformidad con lo anterior la presente invención proporciona en un aspecto más: 5. Un método como se definió anteriormente que comprende la co-administración e.g. concomitante o en secuencia, de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula I y por lo menos una segunda substancia fármaco, e.g. un fármaco inmunosupresor, inmunomodulador, anti-inflamatorio, anti-infectivo o quimioterapéutico, e.g. como se indicó anteriormente. 6. Una combinación farmacéutica, e.g. un estuche, que comprende a) un primer agente que es un antagonista de CXCR3, e. g. un compuesto de fórmula I como el aqu í descrito, en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, y b) por lo menos un coagente, e.g. un fármaco inmunosupresor, inmunomodulador, antiinflamatorio, anti-infectivo o quimioterapéutico. El estuche puede comprender instrucciones para su administración.
Los términos "co-administración" o "administración combinada" o los similares utilizados aqu í se refieren a la administración de los agentes terapéuticos seleccionados a un solo paciente, e incluyen regímenes de tratamiento en los cuales los agentes no son necesariamente administrados por la misma ruta de administración o al mismo tiempo. El término "combinación farmacéutica" como se usa aquí significa un producto que resulta del mezclado o combinación de más de un ingrediente activo e ¡ncluye ambas combinaciones fija y no fija de los ingredientes activos. El término "combinación fija" significa que los ingredientes activos, e.g. un compuesto de fórmula I y un co-agente, son ambos administrados a un paciente simultáneamente en la forma de una sola entidad o dosificación. El término "combinación no fija" significa que los ingredientes activos, e.g. un compuesto de fórmula I y un co-agente, son ambos administrados a un paciente como entidades separadas ya sea simultáneamente, concurrentemente o secuencialmente sin límites de tiempo específicos, en donde tal administración proporciona niveles terapéuticamente efectivos de los dos compuestos en el cuerpo del paciente. El último también aplica para terapia de coctel, e.g. la administración de 3 o más ingredientes activos.