MX2007015083A

MX2007015083A - Combinacion de inhibidores de hmg-coa-reductasa e inhibidores de mtor.

Info

Publication number: MX2007015083A
Application number: MX2007015083A
Authority: MX
Inventors: Richard Jean Dorent; Carole Anne Sips
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 2005-05-31
Filing date: 2006-05-29
Publication date: 2008-01-17
Also published as: JP2008542317A; BRPI0611021A2; KR20080012917A; AU2006254397A1; CN101227927A; US20080194614A1; RU2007147600A; EP1890728A1; CA2608879A1; WO2006128660A1

Abstract

La invencion se refiere a una combinacion farmaceutica que comprende un inhibidor de HMG-Co-A-reductasa, en especial fluvastatina o pitavastatina, o una sal farmaceuticamente aceptable de las mismas, y un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina.

Description

COM BINACIÓN DE INH IBIDORES DE HMG-CoA-R E D U CTAS -'. E INHIBIDORES DE mTOR La presente invención se refiere a una combinación, tal como una preparación combinada o una composición farmacéutica, respectivamente, la cual comprende un inhibidor de HMG-CoA-reductasa (también denominado como un i nhibidor de ß-hidroxi-ß-metil-glutaril-coenzima-A-reductasa) , o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, y un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina, opcionalmente en la presencia de un veh ículo farmacéuticamente aceptable, para su uso simultáneo, separado, o en secuencia, en especial en la prevención, demora de progreso, o tratamiento de las condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de H MG-Co-A-reductasa, tales como hipercolesterolemia, dislipidemia mixta, prevención secundaria de evento cardiovascular, ateroesclerosis, y en la prevención, demora de progreso, o tratamiento de condiciones o enfermedades relacionadas con un agente inhibidor de mTOR, al uso de esta combinación para la preparación de una preparación farmacéutica para la prevención , demora de progreso, o tratamiento de tales condiciones; a un método para la prevención, demora de progreso, o tratamiento de las condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa, tales como hipercolesterolemia, dislipidemia mixta, prevención secundaria de evento cardiovascular, ateroesclerosis, y condiciones o enfermedades relacionadas con un agente inhibidor de mTOR, tales como trasplante, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino ( IBD) , rechazo crónico de injerto, restenosis en seguida de angioplastía, tumores sólidos, en especial invasividad de tumor sólido o síntomas asociados con este crecimiento tumoral , rechazo de xeno-trasplante, enfermedad del injerto contra el huésped (GvH) , enfermedades autoinmunes y condiciones inflamatorias (lupus eritematoso sistémico (SLE) , diabetes tipo I , etc.) , asma, resistencia a múltiples fármacos, trastornos proliferativos (tumores, trastornos hiperproliferativos de la piel, por ejemplo psoriasis) , uveítis, queratoconjuntivitis sicca, infecciones fúngicas, angiogénesis, e inhibición de la resorción ósea. La presente invención se refiere a combinaciones o composiciones farmacéuticas que comprenden un inhibidor de HMG-Co-A-reductasa, o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, y un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina, opcionalmente en la presencia de un vehículo farmacéuticamente aceptable, y a sus usos en el tratamiento de las condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa, tales como hipercolesterolemia, dislipidemia mixta, prevención secundaria de evento cardiovascular, ateroesclerosis como hipercolesterolemia, y condiciones o enfermedades relacionadas con un agente inhibidor de mTOR, tales como trasplante, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino ( IBD) , rechazo crónico de injerto, restenosis en seguida de angioplastía, tumores sólidos, en especial invasividad de tumor sólido o síntomas asociados con este crecimiento tumoral , rechazo de xeno-trasplante, enfermedad del injerto contra el huésped (GvH) , enfermedades autoinmunes y condiciones inflamatorias (lupus eritematoso sistémico (SLE) , diabetes tipo I , etc.) , asma, resistencia a múltiples fármacos, trastornos proliferativos (tumores, trastornos hiperproliferativos de la piel, por ejemplo psoriasis) , uveítis, queratoconjuntivitis sicca, infecciones fúngicas, angiogénesis, e inhibición de la resorción ósea. La presente invención se refiere además a combinaciones farmacéuticas o a composiciones que comprenden , en combinación, un inhibidor de HMG-Co-A-reductasa seleccionado a partir de la lista de atorvastatina, cerivastatina, fluvastatina, lovastatina, pitavastatina (anteriormente itavastatina) , pravastatina, rosuvastatina, y simvastatina, o en cada caso, una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas (se prefiere fluvastatina, atorvastatina, pitavastatina, o simvastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas) , y un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina, y opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable, para su uso simultáneo, en secuencia, o separado. En una modalidad preferida, la presente invención se refiere a combinaciones o composiciones farmacéuticas que comprenden, en combinación, fluvastatina o pitavastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina, y opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable, para su uso simultáneo, en secuencia, o separado. En otra modalidad preferida, la presente invención se refiere a combinaciones o composiciones farmacéuticas que comprenden, en combinación, fluvastatina o pitavastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina seleccionado a partir del grupo de: 32-deso?o-rapamicina, 1 6-pent-2-iniloxi-32-desoxo-rapamicina, 1 6-pent-2-iniloxi-32-(S ó R)-dihidro-rapamicina, 16-pent-2-iniloxi-32-(S ó R)-dihidro-40-O-(2-hidroxietil)-rapam icina, 40- [3- hidroxi -2- (hidroxi -meti I) -2-m eti I -propanoato]-rapamicina (también denominada como CCI779) , 40-epi-(tetrazolil)-rapamicina (también denominada como ABT578) , 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina, 32-desoxo-rapamicina, y 16-pent-2-iniloxi-32(S)-dihidro-rapamicina, y opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable, para su uso simultáneo, en secuencia, o separado. En otra modalidad preferida, la presente invención se refiere a combinaciones o composiciones farmacéuticas que comprenden, en combinación, fluvastatina o pitavastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y 40-O-(2-hidro?i-etil)-rapamicina, y opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable, para su uso simultáneo, en secuencia, o separado. En un aspecto, la presente invención se refiere a combinaciones o composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención, para el tratamiento o la prevención de las condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa, tales como las condiciones o enfermedades relacionadas con hipercolesterolemia, las condiciones o enfermedades relacionadas con dislipidemia mixta, prevención secundaria de evento cardiovascular, las condiciones o enfermedades relacionadas con ateroesclerosis, las cuales comprenden, en combinación , un inhibidor de HMG-Co-A-reductasa, en especial pitavastatina o fluvastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina seleccionado a partir del grupo de: 32-desoxo-rapamicina, 1 6-pent-2-iniloxi-32-desoxo-rapamicina, 1 6-pent-2-iniloxi-32-(S ó R)-dihidro-rapamicina, 16-pent-2-iniloxi-32-(S ó R)-d i hidro-40-O-(2-h id roxieti I) -rapamicina, 40-[3-hidroxi-2-(hidroxi-metil)-2-metil-propanoato]-rapamicina (también denominada como CCI779) , 40-epi-(tetrazolil)-rapamicina (también denominada como ABT578) , 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina, 32-desoxo-rapamicina, y 1 6-pent-2-iniloxi-32(S)-dihidro-rapamicina, y opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable, para su uso simultáneo, en secuencia, o separado. En un aspecto, la presente invención se refiere a combinaciones o composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención, para el tratamiento o la prevención de las condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa, tales como las condiciones o enfermedades relacionadas con hipercolesterolemia, las condiciones o enfermedades relacionadas con dislipidemia mixta, prevención secundaria de evento cardiovascular, las condiciones o enfermedades relacionadas con ateroesclerosis, las cuales comprenden, en combinación, fluvastatina o pitavastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y el agente inhibidor de mTOR de 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina, y opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable, para su uso simultáneo, en secuencia, o separado. En un aspecto preferido, la presente invención se refiere a combinaciones o composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención, para el tratamiento o lá prevención de las condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa, tales como las condiciones o enfermedades relacionadas con hipercolesterolemia, las condiciones o enfermedades relacionadas con dislipidemia mixta, prevención secundaria de evento cardiovascular, las condiciones o enfermedades relacionadas con ateroesclerosis, las cuales comprenden, en combinación, fluvastatina o pitavastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y el agente inhibidor de mTOR de 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina, y opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable, para su uso simultáneo, en secuencia, o separado. En otro aspecto, la presente invención se refiere a combinaciones o composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención, para el tratamiento o la prevención de condiciones o enfermedades relacionadas con un agente inhibidor de mTOR, tales como trasplante, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino (IBD), rechazo crónico de injerto, restenosis en seguida de angioplastía, tumores sólidos, en especial invasividad de tumor sólido o síntomas asociados con este crecimiento tumoral, rechazo de xeno-trasplante, enfermedad del injerto contra el huésped (GvH), enfermedades autoinmunes y condiciones inflamatorias (lupus eritematoso sistémico (SLE), diabetes tipo I, etc.), asma, resistencia a múltiples fármacos, trastornos proliferativos (tumores, trastornos hiperproliferativos de la piel, por ejemplo psoriasis), uveítis, queratoconjuntivitis sicca, infecciones fúngicas, angiogénesis, e inhibición de la resorción ósea, las cuales comprenden, en combinación: (i) fluvastatina, atorvastatina, pitavastatina, o simvastatina, una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y (ii) un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina seleccionado a partir del grupo de: 32-desoxo-rapam icina, 16-pent-2-iniloxi-32-desoxo-rapamicina, 16-pent-2-iniloxi-32-(S ó R)-dihidro-rapamicina, 16-pent-2-iniloxi-32-(S ó R)-d i hidro-40-O- (2- hidroxietil) -rapamicina, 40-[3-hidroxi-2-(hidrox¡-metil)-2-metil-propanoato]-rapamicina (también denominada como CCI779), 40-epi-(tetrazolil)-rapamicina (también denominada como ABT578), 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina, 32-desoxo-rapamicina, y 16-pent-2-iniloxi-32(S)-dihidro-rapamicina, y opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable, para su uso simultáneo, en secuencia, o separado. En un aspecto preferido, la presente invención se refiere a combinaciones o composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención, para el tratamiento o la prevención de condiciones o enfermedades relacionadas con un agente inhibidor de mTOR, tales como trasplante, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino (IBD), rechazo crónico de injerto, restenosis en seguida de angioplastía, tumores sólidos, en especial invasividad de tumor sólido o síntomas asociados con este crecimiento tumoral, rechazo de xeno-trasplante, enfermedad del injerto contra el huésped (GvH), enfermedades autoinmunes y condiciones inflamatorias (lupus eritematoso sistémico (SLE), diabetes tipo I, etc.), asma, resistencia a múltiples fármacos, trastornos proliferativos (tumores, trastornos hiperproliferativos de la piel, por ejemplo psoriasis), uveítis, queratoconjuntivitis sicca, infecciones fúngicas, angiogénesis, e inhibición de la resorción ósea, las cuales comprenden, en combinación: (i) fluvastatina o pitavastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y (ii) el agente inhibidor de mTOR de 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina, y opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable, para su uso simultáneo, en secuencia, o separado. En estas composiciones, los componentes (i) y (ii) se pueden obtener y administrar juntos, uno después del otro, o por separado en una forma de dosis unitaria combinada, o en dos formas de dosis unitaria separadas. La forma de dosis unitaria también puede ser una combinación fija. En otra modalidad, la invención proporciona el uso de una combinación farmacéutica de acuerdo con la invención, para la preparación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de las condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa, tales como hipercolesterolemia, dislipidemia mixta, prevención secundaria de evento cardiovascular, ateroesclerosis, y condiciones o enfermedades relacionadas con un agente inhibidor de mTOR, tales como trasplante, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino (IBD) , rechazo crónico de injerto, restenosis en seguida de angioplastía, tumores sólidos, en especial invasividad de tumor sólido o síntomas asociados con este crecimiento tumoral , rechazo de xeno-trasplante, enfermedad del injerto contra el huésped (GvH) , enfermedades autoinmunes y condiciones inflamatorias (lupus eritematoso sistémico (SLE) , diabetes tipo I , etc.), asma, resistencia a múltiples fármacos, trastornos proliferativos (tumores, trastornos hiperproliferativos de la piel, por ejemplo psoriasis) , uveítis, queratoconjuntivitis sicca, infecciones fúngicas, angiogénesis, e inhibición de la resorción ósea.

En otra modalidad, la invención proporciona el uso de una composición farmacéutica de acuerdo con la invención , para el tratamiento o la prevención de las condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa, tales como las condiciones o enfermedades relacionadas con hipercolesterolemia, las condiciones o enfermedades relacionadas con dislipidemia mixta, prevención secundaria de evento cardiovascular, las condiciones o enfermedades relacionadas con ateroesclerosis. En otra modalidad, la invención proporciona el uso de una composición farmacéutica de acuerdo con la invención, para el tratamiento o la prevención de condiciones o enfermedades relacionadas con un agente inhibidor de mTOR, tales como trasplante, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino (IBD) , rechazo crónico de injerto, restenosis en seguida de angioplastía, tumores sólidos, en especial invasividad de tumor sólido o síntomas asociados con este crecimiento tumoral , rechazo de xeno-trasplante, enfermedad del injerto contra el huésped (GvH) , enfermedades autoinmunes y condiciones inflamatorias (lupus eritematoso sistémico (SLE) , diabetes tipo I , etc.) , asma, resistencia a múltiples fármacos, trastornos proliferativos (tumores, trastornos hiperproliferativos de la piel , por ejemplo psoriasis) , uveítis, queratoconjuntivitis sicca, infecciones fúngicas, angiogénesis, e inhibición de la resorción ósea. La presente invención proporciona un kit que comprende, en recipientes separados, en un solo paquete, combinaciones o composiciones farmacéuticas que comprenden, en un recipiente, una composición farmacéutica que comprende un inhibidor de H MG-Co-A-reductasa, en especial pitavastatina o fluvastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y en un segundo recipiente, una composición farmacéutica que comprende un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina seleccionado a partir del grupo de: 32-desoxo- rapamicina, 16-pent-2-iniloxi-32-desoxo-rapamicina, 1 6-pent-2-iniloxi-32-(S ó R)-dihidro-rapamicina, 16-pent-2-iniloxi-32-(S ó R)-dihidro-40-O-(2-hidroxietil)-rapamicina> 40-[3-hidroxi-2-(hidroxi-metil)-2-metil-propanoato]-rapamicina (también denominada como CCI779) , 40-epi-(tetrazolil)-rapamicina (también denominada como ABT578), 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina, 32-desoxo-rapamicina, y 1 6-pent-2-iniloxi-32(S)-dihidro- rapamicina. La presente invención proporciona un kit que comprende, en recipientes separados, en un solo paquete, combinaciones o composiciones farmacéuticas que comprenden, en un recipiente, una composición farmacéutica que comprende fluvastatina o pitavastina, y en un segundo recipiente, el agente inhibidor de mTOR de 40-OJ2-hidroxi-et i I)- rapamicina. La forma de kit es particularmente conveniente cuando los componentes separados se deben administrar en formas de dosificación diferentes, o se administran a intervalos de dosificación diferentes. La presente invención se refiere a un paquete que comprende un inhibidor de H MG-Co-A-reductasa, en especial fluvastatina o pitavastatina, junto con instrucciones para utilizarse en combinación con un agente inhibidor de mTOR , por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina seleccionado a partir del grupo de: 32-desoxo-rapam icina, 1 6-pent-2-iniloxi-32-desoxo-rapamicina, 1 6-pent-2-iniloxi-32-(S ó R)-dihidro-rapamicina, 16-pent-2-iniloxi-32-(S ó R)-d i hidro-40-O- (2- hidroxietil) -rapamicina, 40-[3-hidroxi-2-(hidroxi- metil)-2-metil-propanoato]-rapamicina (también denominada como CCI779) , 40-epi-(tetrazolil)-rapamicina (también denominada como ABT578) , 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina, 32-desoxo-rapamicina, y 1 6-pent-2-iniloxi-32(S)-dihidro-rapamicina para el tratamiento o la prevención de las condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa, tales como las condiciones o enfermedades relacionadas con hipercolesterolemia, las condiciones o enfermedades relacionadas con dislipidemia mixta, prevención secundaria de evento cardiovascular, ateroesclerosis, y condiciones o enfermedades relacionadas con un agente inhibidor de mTOR , tales como trasplante, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino (IBD) , rechazo crónico de injerto, restenosis en seguida de angioplastía, tumores sólidos, en especial invasividad de tumor sólido o síntomas asociados con este crecimiento tumoral , rechazo de xeno-trasplante, enfermedad del injerto contra el huésped (GvH), enfermedades autoinmunes y condiciones inflamatorias (lupus eritematoso sistémico (SLE) , diabetes tipo I , etc.) , asma, resistencia a múltiples fármacos, trastornos proliferativos (tumores, trastornos hiperproliferativos de la piel , por ejemplo psoriasis) , uveítis, queratoconjuntivitis sicca, infecciones fúngicas, angiogénesis, e inhibición de la resorción ósea. En una modalidad preferida, el paquete de acuerdo con la invención comprende, en combinación, fluvastatina, o pitavastina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y el agente inhibidor de mTOR de 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina.

En otra modalidad, la presente invención se refiere a métodos para la prevención o el tratamiento de condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de H MG-Co-A-reductasa, tales como las condiciones o enfermedades relacionadas con hipercolesterolemia, las condiciones o enfermedades relacionadas con dislipidemia mixta, prevención secundaria de evento cardiovascular, las condiciones o enfermedades relacionadas con ateroesclerosis, los cuales comprenden la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de cualquier composición farmacéutica preferida de acuerdo con la invención, y opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable, a un mamífero que lo necesite. En otra modalidad , la presente invención se refiere a métodos para la prevención o el tratamiento de condiciones o enfermedades relacionadas con un agente inhibidor de mTOR, tales como trasplante, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino (IBD), rechazo crónico de injerto, restenosis en seguida de angioplastía, tumores sólidos, en especial invasividad de tumor sólido o síntomas asociados con este crecimiento tumoral , rechazo de xeno-trasplante, enfermedad del injerto contra el huésped (GvH), enfermedades autoinmunes y condiciones inflamatorias (lupus eritematoso sistémico (SLE) , diabetes tipo I , etc.) , asma, resistencia a múltiples fármacos, trastornos proliferativos (tumores, trastornos hiperproliferativos de la piel, por ejemplo psoriasis) , uveítis, queratoconjuntivitis sicca, infecciones fúngicas, angiogénesis, e inhibición de la resorción ósea, los cuales comprenden la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de cualquier composición farmacéutica preferida de acuerdo con la invención , y opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable, a un mam ífero que lo necesite. En una modalidad preferida, la presente invención se refiere a métodos para la prevención o el tratamiento de las condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa, tales como las condiciones o enfermedades relacionadas con hipercolesterolemia, las condiciones o enfermedades relacionadas con dislipidemia mixta, prevención secundaria de evento cardiovascular, las condiciones o enfermedades relacionadas con ateroesclerosis, los cuales comprenden la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de fluvastatina o pitavastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y el agente inhibidor de mTOR de 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina, y opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable, a un mamífero que lo necesite. En una modalidad preferida, la presente invención se refiere a métodos para la prevención o el tratamiento de condiciones o enfermedades relacionadas con un agente inhibidor de mTOR , tales como trasplante, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino (IBD) , rechazo crónico de injerto, restenosis en seguida de angioplastía, tumores sólidos, en especial invasividad de tumor sólido o síntomas asociados con este crecimiento tumoral , rechazo de xeno-trasplante, enfermedad del injerto contra el huésped (GvH) , enfermedades autoinmunes y condiciones inflamatorias (lupus eritematoso sistémico (SLE) , diabetes tipo I , etc.) , asma, resistencia a múltiples fármacos, trastornos proliferativos (tumores, trastornos hiperproliferativos de la piel, por ejemplo psoriasis) , uveítis, queratoconjuntivitis sicca, infecciones fúngicas, angiogénesis, e inhibición de la resorción ósea, los cuales comprenden la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de fluvastatina o pitavastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y el agente inhibidor de mTOR de 40-O-(2-hidrox¡-etil)-rapamicina, y opcionalmente un veh ículo farmacéuticamente aceptable, a un mamífero que lo necesite. Los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa (también denominados como inhibidores de ß-hidroxi-ß-metil-glutaril-coenzima-A-reductasa) , se entiende que son los agentes activos que se pueden utilizar para reducir los niveles de lípidos, incluyendo el colesterol en sangre. La clase de inhibidores de HMG-Co-A-reductasa comprende compuestos que tienen diferentes características estructurales. Por ejemplo, se puede hacer mención de los compuestos que se seleccionan a partir del grupo que consiste en atorvastatina, cerivastatina, fluvastatina, lovastatina, pitavastatina (anteriormente itavastatina) , pravastatina, rosuvastatina, y simvastatina, en cada caso, una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas. Los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa preferidos son los agentes que se han comerciado, y se prefieren más fluvastatina, atorvastatina, pitavastatina, o simvastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas. Los métodos para la elaboración de los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa son bien conocidos por los expertos en este campo, y estos agentes incluyen los que están comercialmente disponibles. Los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa se pueden utilizar en sus formas de ácido libre, en sus formas de éster, o como sus sales farmacéuticamente aceptables. Estas sales farmacéuticamente aceptables incluyen , por ejemplo, las sales de sodio, las sales de calcio, y las sales de éster. Los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa se pueden utilizar como mezclas racémicas, o como un estereoisómero más activo, como sea apropiado. Los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa pueden estar presentes en una cantidad efectiva para inhibir la biosíntesis de colesterol en los seres humanos. En una modalidad, las composiciones farmacéuticas comprenden de aproximadamente el 5 a aproximadamente el 50 por ciento en peso del inhibidor de HMG-Co-A-reductasa, basándose en el peso total de la composición. De una manera más preferible, las composiciones comprenden de aproximadamente el 20 a aproximadamente el 40 por ciento en peso del inhibidor de HMG-Co-A-reductasa, basándose en el peso total de la composición. Un inhibidor de mTOR es un compuesto que dirige el mTOR intracelular ("objetivo de mam ífero de rapamicina"). mTOR es un miembro de la familia de la cinasa relacionada con 3-cinasa de fosfatidil-inositol (cinasa-PI3). La rapamicina y los derivados de rapamicina inhiben la senda de mTOR mediante un complejo con su receptor intracelular FKBP12 (proteína 12 de enlace con FK506). La rapamicina es un antibiótico macrólido conocido producido por Streptomyces hygroscopicus. Un derivado de rapamicina significa una rapamicina sustituida que tiene propiedades inhibidoras de mTOR, por ejemplo rapamicina sustituida en la posición 40 y/o 16 y/o 32, por ejemplo un compuesto de la Fórmula I: en donde: R? es CH3 o alquinilo de 3 a 6 átomos de carbono; R2 es H, -CH -CH2-OH, 3-hidroxi-2-(hidroxi-metil)-2-metil-propanoílo o tetrazolilo, y X es -O, (H,H), o (H,OH), en el entendido de que R2 es diferente de H cuando X es =0 y o un pro-fármaco del mismo, cuando R2 es CH2-CH2-OH, por ejemplo un éter fisiológicamente hidrolizable del mismo. Los derivados de rapamicina representativos de la Fórmula I son, por ejemplo, 32-desoxo-rapamicina, 16-pent-2-iniloxi-32-desoxo-rapamicina, 16-pent-2-iniloxi-32-(S ó R)-dihidro-rapamicina, 1 6-pent-2-iniloxi-32-(S ó R)-dihidro-40-0-(2-hidroxietil)-rapamicina, 40-[3-h id roxi -2- ( hidroxi -meti I) -2-m eti l-propanoato]- rapamicina (también denominada como CCI779) , 40-epi-(tetrazolil)-rapamicina (también denominada como ABT578) . Un compuesto preferido es, por ejemplo, 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina, que se da a conocer en el Ejemplo 8 de la Publicación Internacional Número WO 94/0901 0 (referido posteriormente en la presente como el Compuesto A), o 32-desoxo-rapamicina ó 16-pent-2-iniloxi-32(S)-dihidro-rapamicina, como se dan a conocer en la Publicación Internacional Número WO 96/41807. Los derivados de rapamicina también pueden inclui r a los denominados como rapálogos, por ejemplo, como se dan a conocer en las Publicaciones Internacionales Números WO 98/02441 y WO01 /1 4387, por ejemplo AP23573, AP23464, AP23675 ó AP23841 . Otros ejemplos de un derivado de rapamicina son los que se dan a conocer bajo el nombre TAPA-93, biolimus-7, ó biolimus-9. De una manera sorprendente, se ha encontrado que las combinaciones o composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención se pueden utilizar para el tratamiento o la prevención de las condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de H MG-Co-A-reductasa, tales como las condiciones o enfermedades relacionadas con hipercolesterolemia, las condiciones o enfermedades relacionadas con dislipidemia mixta, prevención secundaria de evento cardiovascular, las condiciones o enfermedades relacionadas con ateroesclerosis, y las condiciones o enfermedades relacionadas con un agente inhibidor de mTOR, tales como trasplante, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino ( IBD) , rechazo crónico de injerto, restenosis en seguida de angioplastía, tumores sólidos, en especial invasividad de tumor sólido o síntomas asociados con este crecimiento tumoral, rechazo de xeno-trasplante, enfermedad del injerto contra el huésped (GvH) , enfermedades autoinmunes y condiciones inflamatorias (lupus eritematoso sistémico (SLE) , diabetes tipo I , etc.) , asma, resistencia a múltiples fármacos, trastornos proliferativos (tumores, trastornos hiperproliferativos de la piel , por ejemplo psoriasis) , uveítis, queratoconjuntivitis sicca, infecciones fúngicas, angiogénesis, e inhibición de la resorción ósea. De una sorprendente, se ha encontrado que una combinación de un inhibidor de HMG-Co-A-reductasa, en especial fluvastatina o pitavastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina, logra un mayor efecto terapéutico (una potenciación) que la administración de fluvastatina o pitavastatina o el agente inhibidor de mTOR , por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina, solos. De una manera preferible, los estudios de las pares experimentales que se encuentran más adelante se llevan a cabo con: 1 ) una combinación que comprende pitavastatina o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, y 40-O-(2-hidroxi-etil)- rapamicina, 2) pitavastatina sola, y 3) 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina sola. De preferencia, los siguientes estudios experimentales se llevan a cabo con: 1 ) una combinación que comprende fluvastatina o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, y 40-O-(2-hidrox¡-etil)-rapamicina, 2) fluvastatina sola, y 3) 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina sola. Por ejemplo, los estudios representativos se llevan a cabo con una combinación de fluvastatina, andeverolim us, por ejemplo aplicando la siguiente metodología: Hemos evaluado el efecto anti-aterotrombótico del everolimus (40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina) solo o en combinación con fluvastatina o pitavastatina, con el objetivo final de resolver los beneficios aditivos o sinérgicos potenciales de esta combinación de fármacos con diferentes mecanismos de acción. Lesión de arteria carótida de conejo: Un modelo experimental de aterotrom bosis Con el objeto de investigar la modulación farmacológica potencial de la aterotrombosis, es fundamental utilizar un modelo experimental que se parece a muchos de los eventos que se presentan durante la aterogénesis y sus complicaciones tromboembólicas. Hemos establecido un modelo in vivo de aterogénesis basado en la manipulación perivascular de las arterias carótidas de conejo, mediante la inserción quirúrgica de un collar de silicona blando y hueco ("el modelo de collar") . Este planteamiento induce, dentro de dos semanas, una lesión hiperplásica reproducible de la íntima, caracterizada por migración y proliferación de SMCs que se presentan en la presencia de un endotelio intacto. En particular, la pudimos detectar la adhesión e infiltración de leucocitos (linfocitos-T, PN M, monocitos) , así como la expresión de moléculas de adhesión, tales como ICAM-1 y VCAM-1 . En este modelo, mediante el microscopio de electrones de transmisión, también observamos recientemente una interacción previamente desconocida entre los leucocitos polimorfonucleares mediales y las SMC, referida como emperipolesis, un fenómeno activo de las células que engolfan a otras células distinto de la fagocitosis. La lesión previamente descrita se obtiene independientemente de la elevación de lípidos; sin embargo, la hipercolesterolemia tiene un efecto perjudicial general sobre los procesos aterogénicos que se presentan en este modelo, conduciendo a un engrosamiento de la íntima más severo y complicado, caracterizado por abundante ECM, depósito de l ípido, y monocitos/macrófagos cargados de colesterol. Durante la última década, pudimos demostrar la capacidad de varias clases de fármacos (por ejemplo, estatinas, antagonistas de calcio, apoproteína Al-Milano) para inhibir la formación de la placa que se presenta después de la colocación del collar tanto en los animales normocolesterolémicos como hipercolesterolémicos, así como el mecanismo de acción de los compuestos probados. En particular, demostramos que la fluvastatina o la pitavastatina son capaces de interferir con la formación de placa a través de su acción primaria (es decir, inhibición de la H MG-Co-A-reductasa) . También demostramos un aumento de la expresión de TF (factor de tejido) y MMPs (metaloproteinasas de matriz), y un aumento en el índice de esterificación del colesterol en la pared carótida, en seguida de manipulación perivascular en los conejos hipercolesterolémicos (manuscrito en preparación) . La alta expresión del factor de tejido confiere un fenotipo protrombogénico a la arteria carótida; sin embargo, se demostró que la fluvastatina o la pitavastatina atenúan las propiedades inflamatorias y protrombogénicas de las lesiones ateroescleróticas. Estatinas y ateroesclerosis Los estudios clínicos han establecido firmemente que los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa pueden inducir la regresión de la ateroesclerosis vascular, así como la reducción de la patología y muerte relacionadas cardiovascularmente en los pacientes con y sin arteriopatía coronaria. Estos efectos benéficos sobre los eventos coronarios se han atribuido en general a las propiedades hipocolesterolémicas de las estatinas. Sin embargo, debido a que el mevalonato, el producto de la reacción enzimática, es el precursor no solamente del colesterol sino también de muchos compuestos isoprenoides no esteroidales, la inhibición de la HMG-Co-A-reductasa puede dar como resultado efectos pleiotrópicos. En realidad, la senda del mevalonato produce una serie de isoprenoides que son vitales para diversas funciones celulares. Se han identificado varias proteínas modificadas después de la traducción mediante la unión covalente de los grupos isoprenoides derivados del mevalonato, ya sea pirofosfato de farnesilo o de geranil-geranilo. Estas proteínas se deben prenilar como un requisito previo para la asociación de membrana, que se requiere para su función. Los miembros de esta familia están involucrados en un número de procesos celulares, incluyendo la señalización celular, la diferenciación y proliferación celular, la mielinización, la dinámica del citoesqueleto, y el transporte endocitósico/exocitósico. Una variedad de datos experimentales indican que las estatinas, a través de la inhibición de la HMG-Co-A-reductasa, podrían afectar a varios procesos involucrados en la formación de las lesiones ateroescleróticas, independientemente de sus propiedades hipocolesterolémicas. El efecto benéfico de las estatinas sobre los eventos clínicos puede involucrar mecanismos no relacionados con los lípidos que modifican la función endotelial, las respuestas inflamatorias, la modificación oxidativa de las lipoproteínas circulantes, la formación de células de espuma, la activación de células de músculo liso, la angiogénesis, la estabilidad de placa, y la formación de trombos. El perfil pleiotrópico de las estatinas probablemente se puede explicar por la modulación de la senda del mevalonato, debido a que el agotamiento de mevalonato (como un resultado de la inhibición de la HMG-Co-A-reductasa por parte de las estatinas) tiene consecuencias para la función celular que se extienden más allá de la síntesis de colesterol disminuida. Los datos disponibles demuestran que los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa, más allá de sus propiedades de reducción de lípidos, ejercen un efecto anti-ateroesclerótico directo sobre la pared arterial, que podría prevenir de una manera significativa la enfermedad cardiovascular. Agentes inmunosupresores y ateroesclerosis La rapamicina (sirolimus), un macrólido inhibidor inmunosupresor de mTOR (objetivo de mamífero de la rapamicina), inhibe la proliferación dependiente del factor de crecimiento de las células hematopoiéticas y no hematopoiéticas mediante el paro del ciclo celular en la última fase G1. Se ha demostrado que el sirolimus inhibe la proliferación y migración de las SMCs vasculares (células de músculo liso) in vitro, y afecta el crecimiento neoíntimo en las arterias carótida de rata y coronaria porcina lesionadas con globo. Más recientemente, se demostró que los stents (implantes vasculares) recubiertos con sirolimus inhiben el crecimiento neoíntimo dentro del stent (implante vascular) en las arterias coronarias porcinas a los 28 días, y se han reportado resultados iniciales impresionantes con los stents (implantes vasculares) que eluyen el sirolimus en los seres humanos (índice de restenosis del 0 por ciento a los 210 días). Un compuesto inmunosupresor y antiproliferativo oralmente activo de la misma familia que el sirolimus, el everolimus [40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina], también ha mostrado efectos prometedores para prevenir el rechazo en el trasplante renal y de corazón. El everolimus exhibe una potente inhibición de la proliferación inducida por el factor de crecimiento de los linfocitos, así como otras células hematopoiéticas y no hematopoiéticas de origen mesenquimal. De una manera similar al sirolimus, la actividad biológica del everolimus depende de su enlace con la inmunofilina - proteína 1 2 de enlace de FK506 (FKBP1 2) . El complejo de everolimus-FKBP12 interactúa con mTOR, una cinasa de tirosina esencial para el progreso del ciclo celular desde la fase G 1 hasta la fase S, posteriormente identificada como la cinasa FRAP. El everolimus prolonga la sobrevivencia del aloinjerto en varios modelos de trasplante con animales experimentales, y los datos más nuevos sugieren que puede ser benéfico para prevenir la vasculopatía asociada con la disfunción crónica de aloinjerto. La experiencia utilizando everolimus en el trasplante cardíaco también ha proporcionado un panorama potencialmente importante sobre las consecuencias de los efectos antiproliferativos sobre las células de músculo liso vasculares y los fibroblastos, en donde se identificó una reducción de expansión de la íntima mediante un examen de ultrasonido coronario intravascular entre los pacientes que recibieron everolimus. Este efecto presenta objetivos terapéuticos adicionales de relevancia potencial . En un modelo de conejo, el everolimus oral en dosificaciones similares a las utilizadas para la inmunosupresión, previnieron la expansión neoíntima asociada con el stent (implante vascular) . Tal vez lo más prometedor para los trasplantes fueron los resultados obtenidos utilizando everolimus para la inmunosupresión en los receptores por primera vez de trasplantes cardíacos, en donde se observó una reducción dramática de la incidencia de arterioesclerosis coronaria del aloinjerto. Estudio in vivo Se utilizaron cuatro grupos de animales ( 10 animales por grupo): ° N ingún tratamiento (control) , ° Everolimus (dosificación propuesta en el intervalo de 0.75 a 1 .5 miligramos/kilogramo/día) , ° Fluvastatina o pitavastatina (dosificación propuesta de 5 miligramos/kilogramo/día) , ß Everolimus (dosificación propuesta en el intervalo de 0.75 a 1 .5 miligramos/kilogramo/día) más fluvastatina o pitavastatina (dosificación propuesta de 5 miligramos/kilogramo/día). En estos animales, medimos: • El perfil de lípido en plasma (colesterol total , colesterol- HDL, triglicéridos); ß Acumulación de lípido en la arteria carótida; ° Procesos celulares involucrados en la formación de lesión, es decir, acumulación de células de músculo liso, e infiltración de leucocitos (en particular monocitos/macrófagos, PMNs, linfocitos-T) ; T Expresión de moléculas de adhesión (VCAM-1 , ICAM-1 , e ¡ntegrina-al ) en las células endoteliales y en las células de músculo liso; ° Funciones de macrófagos críticas para la complicación de la lesión y la estabilidad de la placa, es decir, expresión y actividad de metaloproteinasas de matriz; ° Expresión de Factor de Tejido en las lesiones arteriales; ° Depósito de colágeno y remodelación. Estudio in vitro Con el fin de obtener un panorama adicional sobre el mecanismo molecular del efecto anti-aterotrombótico del everolimus solo o en combinación con fluvastatina o pitavastatina, se utilizaron células de músculo liso arteriales vasculares cultivadas de conejo y de rata, y macrófagos peritoneales de ratón. En adición , se utilizaron fibroblastos de piel humana (HFS) y la línea celular de hepatoma humano Hep-G2, que representan el modelo periférico y central del metabolismo de la lipoproteína, con el objetivo final de evaluar el efecto del everolimus sobre el metabolismo de la lipoproteína. En particular, evaluaremos el efecto de los fármacos probados sobre: ° Proliferación de células de músculo liso. Estos estudios in vitro nos permiten evaluar el efecto aditivo o sinérgico potencial de las combinaciones de everolimus +/- fluvastatina o pitavastatina. Se llevará a cabo el análisis de isobolograma para resolver esta cuestión, como se describe anteriormente. 8 Metabolismo de lipoproteína celular. Este planteamiento in vitro es muy útil para investigar los posibles mecanismos responsables del efecto hiperlipidémico del everolimus.

De una manera más específica, exploramos el efecto del everolimus sobre el catabolismo de la lipoproteína y el metabolismo del colesterol en fibroblastos de piel humana y en Hep-G2. • Homeostasis de colesterol celular. Estudiamos la síntesis, esterificación, y eflujo de colesterol para tener un cuadro claro sobre el efecto del everolimus, solo o en combinación con fluvastatina o pitavastatina, sobre el metabolismo, homeostasis y depósito de l ípidos en las células vasculares. 9 Expresión y actividad de las metaloproteinasas de matriz. Esta investigación es muy informativa para explicar algunos de los efectos anti-ateroescleróticos potenciales del everolimus solo o en combinación con fluvastatina o pitavastatina. Materiales y métodos Estudios in vivo Diseño experimental - Se evalúa el efecto de los fármacos probados sobre la lesión de carótida inducida por el collar en los conejos hipercolesterolémicos 1 4 días después de la colocación del collar. Los conejos reciben los fármacos ya sea mediante intubación oral (everolimus) , o bien mezclados con la dieta (fluvastatina o pitavastatina) , empezando en el día de la manipulación perivascular. Se induce la hipercolesterolemia mediante la administración de una dieta rica en colesterol (colesterol al 1 por ciento), empezando cuatro semanas antes de la inserción del collar. Evaluación de lípidos en plasma - Se extraen muestras de sangre después de un ayuno durante la noche de la arteria central de la oreja en la línea base, en la cirugía, y en el sacrificio, para llevar a cabo el análisis de l ípidos. Se determinan enzimáticamente los niveles de colesterol total , colesterol-HDL, y triglicéridos. Se calculan los cambios globales en los lípidos mediante el Área Debajo de la Curva (AUC) de la concentración de lípidos contra el tiempo, utilizando la regla trapezoidal . Actividad de ACA T (actividad de acil-coenzima-acil-transferasa de colesterol) y el contenido de colesterol en carótida - La actividad de ACAT se determina esencialmente mediante el método de Helgerud. Los anillos de carótida se homogeneizan en regulador de TR IS/sacarosa conteniendo [14C]-oleoil-coenzima A (0.5 µCi/muestra) formando complejo con suero bovino, en regulador de fosfato de potasio OJ M , pH de 7.4. Después de la incubación durante 2 horas a 37°C, se detiene la reacción mediante la adición de 5 mililitros de cloroformo/metanol (2: 1 , volumen/volumen) , y se extraen los lípidos) . Después de la centrifugación, se seca la capa de cloroformo bajo un flujo de N2. Para la determinación del contenido de colesterol en el arco aórtico, se sigue el mismo procedimiento, pero omitiendo la adición de [1 4C]-oleoil-coenzima A en la mezcla de reacción. Los lípidos extraídos se separan mediante cromatografía de capa delgada (t. I . c.) (iso-octano/dietil-éter/ácido acético, 75:25:2, volumen/volumen/volumen) . La radioactividad del colesterol en las manchas se determina mediante conteo de cintilación de líquido (Insta-Flúor, Packard, Groningen, Holanda) , mientras que el contenido de masa de colesterol en las manchas se determina mediante un método enzimático. Probamos la linearidad de este método entre 1 .5 y 50 microgramos de colesterol (r2 = 0.99) . En cada determinación, se agregó [3H]-colesterol como un estándar interno, con una recuperación de más del 90 por ciento. Lesión de carótida - Los conejos nueva Zelanda Blancos Machos (de 2.7 a 3.0 kilogramos) se anestesian mediante inyección intramuscular de xilazina (5 miligramos/kilogramo) y quetamina (35 miligramos/kilogramo) . Luego se colocan los animales en recumbencia dorsal , y se hace una incisión en la línea media del cuello para exponer quirúrgicamente ambas arterias carótidas. Se coloca un collar Silastic hueco, blando, biológicamente inerte, no oclusivo (SI LICOLLAR®, MediGene Oy, Kuopio, Finlandia) alrededor de ambas arterias carótidas. El collar es de 25 milímetros de largo, y toda la circunferencia de la arteria en dos puntos, a 20 mil ímetros de separación. En cada animal , la arteria carótida contra-lateral se opera falsamente, colocando el collar alrededor de la arteria, pero removiéndolo justo antes de suturar las heridas. Al final del estudio, los animales se sacrifican mediante la administración de una dosis intravenosa letal de uretano ( 10 mililitros, solución acuosa al 25 por ciento) , y se recolectan y procesan las muestras de las arterias carótidas de acuerdo con los procedimientos apropiados para los diferentes métodos de análisis. Histología - Se disectan fácilmente y se separan segmentos de las arterias carótidas justo después de la eutanasia. Las arterias se congelan o se empotran en parafina, y se cortan transversalmente con el objeto de obtener secciones en serie de 5 mieras. Los tejidos se tiñen con hematoxilina y eosina para identificar y cuantificar las estructuras vasculares mediante análisis morfométrico. Se miden los siguientes parámetros mediante análisis de imágenes asistido por computadora (ÓPTIMAS 6.2, Media Cybernetics, Silver Spring, MD, EUA) : área del lumen (L), área rodeada por la lámina elástica interna (IEL), y área rodeada por la lámina elástica interna (EEL). Entonces se determinan los siguientes parámetros: (a) área de la íntima = I EL-L; (b) área medial = M = EEL-I EL; y (c) proporción de íntima a media l/M . Se tiñen secciones adicionales con tinte rojo de picrosirio para marcar el colágeno. Las regiones positivas para el rojo de picrosirio dentro de la lesión se miden utilizando un análisis de imágenes a colores asistido por computadora. Detección inmunohistoquímica de la expresión de moléculas de adhesión (VCAM- 1, ICAM- 1, e integrina-a1) en las células endoteliales y en las células de músculo liso - Se lleva a cabo la identificación de las moléculas de adhesión celular en la lesión de carótida íntima utilizando anticuerpos para ICAM-1 , VCAM- 1 (sistema R&D) , e integrina-a1 (Chemicon) . De acuerdo con los procedimientos convencionales, se incuban criosecciones de carótida con el anticuerpo primario específico, y luego con un anticuerpo secundario específico de la especie biotinilado (Vector Laboratories Inc. , Burlingame, CA, EUA). El marcado se hace con un kit de avidi na-biotina-peroxidasa (Vectastain ABC Élite, Vector Laboratories Inc.) , seguido por 3,3-diamino-benzidina (Sigma) . Para el control negativo, se omite el anticuerpo primario, y se incuban las secciones con suero de caballo normal. Las lesiones positivas para VCAM-1 , ICAM-1 , e integrina-a1 dentro de la lesión, se miden utilizando análisis de imágenes a colores asistido por computadora. Análisis cuantitativo de acumulación de macrófagos derivados de monocitos y de linfocitos T dentro de la lesión - Se lleva a cabo la identificación de los subconjuntos de leucocitos que se infiltran en la lesión de carótida íntima utilizando anticuerpos para los marcadores de todos los leucocitos (anti-CD18, Serotec), células polimorfonucleares (PMNs) (neutrófilos polinucleares) (MCA 805, Serotec) , monocitos/macrófagos (RAM 1 1 , DAKO) , y linfocitos-T (anti-CD5, Serotec), de acuerdo con los procedimientos convencionales: las secciones de tejido se incubarán con el anticuerpo primario específico, y luego con el anticuerpo secundario específico de la especie biotinilado (Vector Laboratories Inc.) . El marcado se hace con un kit de avidina-biotina-peroxidasa (Vectastain ABC Élite, Vector Laboratories Inc.) , seguido por 3,3'-diamino-benzidina (Sigma) . Para el control negativo, se omite el anticuerpo primario, y las secciones se incubarán con suero de caballo normal . El área total de leucocitos, células polimorfonucleares, monocitos/macrófagos, y linfocitos-T, identificada respectivamente como las regiones positivas para CD1 8, MCA805, RAM 1 1 , y CD5 dentro de la lesión, se miden utilizando análisis de imágenes a colores asistido por computadora.

Detección inmunohistoquímica de Factor de Tejido y Análisis Cuantitativo de Expresión de Proteína de Factor de Tejido - Para la detección inmunohistoquímica del Factor de Tejido, se incuban secciones de tejido previamente digeridas con un anticuerpo de ratón anti-factor de tejido de conejo específico (AP-1 ) , y luego con un anticuerpo secundario secundario de caballo anti-lgG de ratón biotinilado (Vector Laboratories I nc.) . El marcado se hace con un kit de avidina-biotina-peroxidasa (Vectastain ABC Élite, Vector Laboratories Inc.) , seguido por 3,3'-diamino-benzidina (Sigma) de acuerdo con el método ABC estándar (Vector) . Para el control negativo, se omite el anticuerpo primario, y se incubarán las secciones con suero de caballo normal . La extensión de las áreas íntimas inmunopositivas de Factor de Tejido se mide utilizando análisis de imágenes a colores asistido por computadora. Análisis de la expresión y actividad de las metaloproteinasas de matriz - Se evalúa la distribución de diferentes metaloproteinasas de matriz mediante inmunohistoqu ímica. Las secciones se incuban con anticuerpo monoclonal primario (Amersham-Pharmacia-Biotech, Reino Unido) , y luego con anticuerpo secundario específico de la especie biotinilado (Vector Laboratories Inc.) . El marcado se llevará a cabo con extravidina conjugada con FITC. Se lleva a cabo el inmunoteñido de las secciones en serie con anticuerpos anti-metaloproteinasas de matriz y con anticuerpos específicos de las células (anti-a-actina para las células de músculo liso, anti-CD31 para las células endoteliales, y anti-CD 1 8 para los leucocitos), con el fin de identificar los tipos de células predominantes responsables de la expresión de las diferentes metaloproteinasas de matriz. La actividad de las metaloproteinasas de matriz se mide en un homogenato de carótida de conejo mediante cimografía en gel de gelatina. Estudios in vitro Aislamiento y cultivos celulares - Se recolectan macrófagos peritoneales de ratón (MPM) mediante lavado peritoneal con suero regulado con fosfato (PBS) de ratones a los que se les aplica una inyección intraperitoneal de 3 mililitros de tioglicolato al 4 por ciento en agua. Los macrófagos peritoneales de ratón se granulan, se lavan dos veces con medio de Eagle Modificado por Dulbecco (DME) sin suero, y se aplican en una densidad de 3 x 106 células/plato de 35 milímetros, y se dejan adherirse a los platos durante 2 horas en un medio de Eagle Modificado por Dulbecco conteniendo suero bovino fetal al 10 por ciento (FBS) . Luego se lavan los platos tres veces con medio de Eagle Modificado por Dulbecco para remover las células no adherentes, y se incuban en medio de Eagle Modificado por Dulbecco conteniendo suero bovino fetal al 10 por ciento hasta el d ía del experimento. Se cultivan fibroblastos de piel humana (HSF) a partir de explantes de biopsias de piel obtenidas de individuos normolipidémicos clínicamente saludables. Los fibroblastos se caracterizan en términos de enlace de LDL mediado por el receptor, internalización, y degradación. Las células se cultivan en monocapas, y se mantienen en matraces de plástico de 75 centímetros cuadrados a 37°C en una atmósfera humidificada con aire al 95 por ciento y C02 al 5 por ciento en un medio F11 complementado con suero fetal de becerro al 10 por ciento, solución de aminoácido no esenciales (1 por ciento, volumen:volumen), penicilina (100 unidades/mililitro), estreptomicina (100 microgramos/mililitro), regulador de tricina (20 mM, pH de 7.4), NaHC03 (24 mM). Para todos los experimentos, las células de los matraces de suministro se disocian con tripsina al 0.05 por ciento -EDTA al 0.02 por ciento a la confluencia (de 5 a 15 pasadas), se siembran en cajas de Petri de plástico de 35 milímetros (1-1.5 x 105 células para el experimento de la absorción de enlace), y se utiliza degradación antes de llegar a la confluencia usualmente 6 días después de la aplicación, y se cambia el medio cada 2 a 3 días. Para la medición del colesterol y de la síntesis de ácidos grasos, las células se siembran en cajas de Petri de plástico de 35 milímetros (7.5 x 105 células), y se incuban con MEM complementado con suero fetal de becerro al 10 por ciento. Veinticuatro horas después, se cambia el medio hasta uno que contiene LPDS al 10 por ciento, y los cultivos se incuban durante 24 horas. En este tiempo (tiempo 0), se reemplaza el medio por uno que contenga LPDS al 10 por ciento en la presencia o en ausencia de concentraciones conocidas de los compuestos probados, y se continúa la incubación durante 72 horas adicionales a 37°C. La síntesis de colesterol se estima midiendo la incorporación de [14C]-acetato en esteróles celulares29.

Se cultiva línea celular de hepatoma humano, Hep-G2, que representa el modelo central del metabolismo de lipoproteína, obtenida en la American Type Culture Collection, en monocapas, y se cultiva como se describe para HSF con la adición al medio de 0.11 gramos/litro de piruvato de sodio. Para todos los experimentos, las células se siembran en platos de 35 milímetros (3-5 x 105 células) en 2 mililitros del medio conteniendo suero fetal de becerro al 10 por ciento, y se utiliza 6 días después de su aplicación. Las células de músculo liso se aislan de las capas íntima-media de las aortas de ratas Sprague Dawley machos, o de las carótidas de conejos Nueva Zelanda machos. Las células se cultivan en MEM complementado con suero fetal de becerro (FCS) al 10 por ciento (volumen/volumen), 100 unidades/mililitro de penicilina, 0J miligramos/mililitro de estreptomicina, regulador de tricina 20 mM, y solución de aminoácidos no esenciales al 1 por ciento (volumen/volumen). Las células se utilizan entre la cuarta y la décima pasada. Las células de músculo liso se identifican para determinar el comportamiento de crecimiento, la morfología, y se utiliza un anticuerpo monoclonal específico para a-actina (Sima, MO, EUA). Proliferación celular - Se siembran células de músculo liso de ratas en una densidad de 2 x 105 células por caja de Petri (35 milímetros), y se incuban con MEM complementado con suero fetal de becerro al 10 por ciento. Veinticuatro horas después, se cambia el medio con uno que contenga suero fetal de becerro al 0.4 por ciento para detener el crecimiento celular, y los cultivos se incuban durante 72 horas. Después de este tiempo (tiempo cero) se reemplaza el medio con uno que contenga suero fetal de becerro al 10 por ciento como un estímulo mitogénico, y diferentes concentraciones de los compuestos probados. En el tiempo cero, justo antes de la adición de los fármacos, se utilizan tres cajas de Petri para el conteo de células. El número de células se evalúa después de 3 días de incubación mediante un Contador Coulter. Sobre un grupo separado de cajas de Petri, se llevan a cabo análisis de inmunomanchado de Ciclina D y PCNA. En otro conjunto de experimentos, se lleva a cabo la sincronización de las células de músculo liso con la interfase G0/G1 del ciclo celular mediante la incubación de cultivos en crecimiento logarítmico (2.5 x 105 células/placa) durante 96 a 120 horas en un medio que contiene suero fetal de becerro al 0.4 por ciento. Las células pasivas se incuban durante 20 horas en un medio fresco con suero fetal de becerro al 10 por ciento en la presencia de los fármacos probados. Luego se estima la síntesis del ADN por la incorporación nuclear de [3H]-timidina, y se incuba con las células ( 1 µCi/m ililitro del medio) durante 2 horas. La radioactividad se mide con un cóctel de cintilación Aquasol (Packard, Groningen, NL). Las células de músculo liso de conejo se siembran en una densidad de 2 x 105 células por caja de Petri (35 milímetros), y se incuban con MEM complementado con suero fetal de becerro al 10 por ciento. 18 horas después, se cambia el medio con uno que contenga suero fetal de becerro al 0.4 por ciento para detener el crecimiento celular, y los cultivos se incuban durante 48 horas. Después de este tiempo (tiempo cero), se reemplaza el medio con una contenga suero fetal de becerro al 10 por ciento y diferentes concentraciones de los compuestos. En el tiempo cero, justo antes de la adición del fármaco, se utilizan algunas cajas de Petri para el conteo de células. El crecimiento celular se evalúa mediante el conteo de células después de 1 a 7 días de incubación. El número de células se determina mediante el Contador Coulter después de la tripsinización de las monocapas. Las curvas de isoefecto se trazan como se describe. Expresión de ciclina D y PCNA - Las monocapas de células se enfrían, se lavan con suero regulado con fosfato frío (PBS), se raspan en suero regulado con fosfato conteniendo un cóctel de inhibidores de proteasa (Boehringer Mannheim), y se centrifugan (2,000 revoluciones por minuto, 10 minutos). Luego se solubilízan los granulos celulares en 80 microlitros de regulador de muestras (SDS al 3 por ciento, Tris-HCl 62.5 µM, pH = 6.8, ß-mercapto-etanol al 5 por ciento, glicerol al 10 por ciento). Se pasan por electroforesis de 10 a 25 microgramos de proteína sobre poliacrilamida al 12 por ciento o sobre un gradiente del 5 al 20 por ciento de gel para PCNA y ciclina D, respectivamente. Las muestras se transfieren electroforéticamente a una membrana de fluoruro de polivinilideno, y se incuban con anticuerpo policlonal de conejo anti-ciclina D o con anticuerpo monoclonal anti-PCNA. Los anticuerpos se detectan con una inmunoglobulina de burro anti-conejo y de conejo anti-ratón marcada con un conjugado de peroxidasa. La actividad de peroxidasa se revela con ECL plus (Amersham) . Se evalúan modificaciones de la expresión de ciclina D y PCNA mediante exploración densitométrica de Western blots, y se expresa como un porcentaje promedio de las condiciones de control (suero fetal de becerro al 10 por ciento) . Expresión y actividad de metaloproteinasa de matriz - Se evalúa la expresión de la metaloproteinasa de matriz mediante análisis Western blot del medio acondicionado con células, utilizando anticuerpos específicos contra las metaloproteinasas de matriz humanas. La actividad de la metaloproteinasa de matriz se mide mediante cimografía en gel de gelatina. Cimografía en gel de gelatina - Se identifican las proteínas con actividad proteinolítica mediante electroforesis sobre geles de poliacrilamida al 7.5 por ciento conteniendo SDS al 1 0 por ciento y gelatina (1 miligramo/mililitro) bajo condiciones no reductoras y sin ebullición. Luego se incuban durante la noche a 37°C con agitación suave en TRIS 50 mM/pH de 7.5 conteniendo NaCI 150 mM , CaCI2 1 0 mM, ZnCI2 1 µM , para activar la capacidad de la metaloproteinasa para digerir el sustrato. Al final de la incubación, los geles se tiñen con Azul Coomassie. Las zonas claras contra el fondo azul indican la presencia de actividad proteinol ítica. Análisis Western Blot - Se pasan alícuotas del medio acondicionado (40 microlitros por pista) sobre gel de poliacrilamida al 10 por ciento conteniendo SDS , bajo condiciones no reductoras (Bellosta y colaboradores, 1998). Las proteínas se aplican a membranas de nitrocelulosa (Bio-Rad Laboratories, Milán, Italia), y se identifican utilizando un anticuerpo monoclonal de ratón anti-MMP-9 de ratón (R & D). Lipoproteínas y suero deficiente en lipoproteínas - Se prepararon lipoproteínas a partir del plasma de voluntarios normolipidémicos clínicamente saludables. Se aislaron las LDL (d 1.019-1.063 gramos/mililitro) mediante ultracentrifugación de preparación en secuencia, y se yodaron con 125l. Se utilizaron LDL radioactivas dentro de 3 días después de la preparación, y se esterilizaron pasándolas a través de un filtro Millipore (tamaño de poros de 0.22 mieras) inmediatamente antes de la incubación con las células. Absorción de enlace de LDL, y degradación - Las células confluentes se incuban previamente durante 48 horas a 37°C en un medio que contiene LPDS humano al 10 por ciento. Después del tratamiento previo durante 24 horas con medio deficiente en lipoproteína para aumentar la actividad del receptor de LDL en la presencia o en ausencia de los compuestos probados, cada capa recibirá 1 mililitro de medio fresco. Se agrega LDL marcada con 125l en las concentraciones finales de 7.5 microgramos/mililitro, y las células se incuban ya sea a 37°C durante 4 horas en un medio deficiente en lipoproteína, o bien a 4°C en el medio A (complementado con regulador Hepes 10 mM) conteniendo suero deficiente en lipoproteína al 10 por ciento. Luego las células se colocan sobre hielo, y se lavan tres veces con suero regulado con fosfato helado, pH de 7.4, conteniendo albúmina de suero bovino al 0.2 por ciento, y tres veces con suero regulado con fosfato helado. Tratamiento previo a 4°C. Las capas celulares se lavan adicionalmente mediante incubación a 4°C durante 30 minutos en el medio A conteniendo suero deficiente en lipoproteína al 10 por ciento. En ciertos experimentos, se remueven las LDL enlazadas con receptor antes del estímulo mediante su exposición a heparina de sodio. (1 0 miligramos/mililitro de heparina de sodio durante 60 minutos a 4°C) . Se analiza una alícuota de este medio para determinar su contenido de 125l (heparina liberable) . Después de todos los tratamientos previos al estímulo, las células se lavan dos veces más con suero regulado con fosfato a 4°C. Para el estímulo a 37°C, las células reciben 2 mililitros de medio deficiente en lipoproteína. Para el estímulo a 4°C , las células se exponen al medio A helado conteniendo suero deficiente en lipoproteína al 10 por ciento, y se mantienen sobre hielo. Después de un período de estímulo de 2 horas, se remueve el medio, y se guarda para el análisis (véase más adelante) . La capa de células se lava tres veces con suero regulado con fosfato, y las células se disuelven mediante incubación nocturna a 37°C en NaOH 1 N . Se cuenta una alícuota de la capa solubilizada para determinar la radioactividad-125! asociada con las células, y se utiliza una alícuota para la estimación de la proteína celular de acuerdo con el método de Lowry. Análisis del medio - Se agregan 0.3 mililitros de ácido tricloro- acético al 100 por ciento a 2 mililitros del medio. Después de reposar durante 30 minutos sobre hielo, el precipitado se recolecta mediante filtración a 1 ,000 x g durante 30 minutos, y se cuenta el granulo para determinar su contenido de material precipitable con ácido tricloro-acético marcado con 1 25l . Se cuenta una alícuota de 1 mililitro del sobrenadante de ácido para determinar la radioactividad total soluble en ácido tricloro-acético, y luego se utiliza para la determinación de la tricloro-actividad que no sea de yodo. Síntesis de esteróles totales - Se determina la síntesis de colesterol midiendo la incorporación de acetato radioactivo en los esteróles celulares. Las monocapas de células, después de incubación con [2-1 4C]-acetato (1 µCi/mililitro) durante 72 horas, se lavan con suero regulado con fosfato, y se digieren con NaOH 0.1 M. Se saponifican alícuotas a 60°C durante 1 hora en NaOH alcohólico después de la adición de [1 ,2(n)-3H]-colesterol como un estándar interno (0.04 µCi/muestra) . El material no saponificado se extrae con éter de petróleo de bajo punto de ebullición , y se cuenta para determinar la radioactividad. Con el fin de evaluar la incorporación de acetato marcado en los esteróles celulares, éstos se separan de la fracción no saponificada mediante cromatografía de capa delgada, con el uso de éter de petróleo (punto de ebullición de 40°C a 60°C)/dietil-éter/ácido acético (70:30: 1 ) . La radioactividad se mide con un cóctel de cintilación Insta-Flúor (Packard, Milán, Italia) . Síntesis de ácidos grasos - Se reservan las fases acuosas a partir de las extracciones de éter de petróleo, se acidifican con HCl concentrado, y se extraen tres veces con éter de petróleo. Las fases orgánicas reservadas se evaporan entonces a sequedad, se vuelven a suspender en cloroformo conteniendo 1 00 microgramos de ácido linoleico como portador, y se someten a cromatografía de capa delgada sobre gel de sílice G con un sistema de solventes consistente en heptano/dietil-éter/vapor de ácido acético, y se cuantifica como se describe anteriormente para la medición de los colesteril-ésteres- 14C. Los datos se expresan como picomoles de [14C]-acetato incorporado en los ácidos grasos de 1 4 átomos de carbono por miligramo de proteína celular total. Ensayo de esterificación de colesterol (actividad de ACA T): Las células se incuban con los fármacos probados y AcLDL (50 microgramos/mililitro) como se indica. Se mide la esterificación de colesterol después de la adición de [1 -14C]-ácido oleico (0.68 µCi/muestra) formando complejo con albúmina de suero bovino durante las últimas 2 horas de incubación, y se hacen la subsiguiente determinación de radioactividad asociada con los colesteril-ésteres celulares. Al final de la incubación, las células se lavan con suero regulado con fosfato, y se extraen los lípidos con hexano/isopropanol (3:2) . Los lípidos extraídos se separan mediante cromatografía de capa delgada (isoctano/dietil-éter/ácido acético, 75:25:2, volumen/volumen/volumen) . La radioactividad de colesterol en las manchas se determina mediante conteo de cintilación de l íquido. Eflujo de esterol y colesterol - Las células se cultivan en placas de 24 pozos hasta una confluencia del 80 por ciento. Las células se marcan ya sea mediante la adición de 30 microgramos/mililitro de [3H]-LDL acetilada durante 24 horas, o para radiomarcar el colesterol celular, mediante la adición de 3 µCi/mililitro de [1 ,2-3H]-colesterol con 30 microgramos/mililitro de LDL acetilada durante 24 horas. Luego se incuban las células durante 24 horas con el medio conteniendo albúmina de suero bovino al 0.2 por ciento con o sin HDL ó apoAI . Estadísticas - Con el objeto de asegurar un resultado imparcial , se recopilan los datos morfométricos en una forma ciega. Las muestras se adscriben a su grupo de tratamiento respectivo después de que se obtienen todos los datos numéricos. Los datos se expresan como el promedio + SD. Las diferencias entre los grupos se evalúan mediante ANOVA de una vía, seguido por la prueba t de Student no emparejada. El significado estadístico se asigna en el nivel de confianza del 95 por ciento (P<0.05). De una manera sorprendente, se ha descubierto que la combinación de fluvastatina o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, y everolimus (40-O-(2-hidro?i-etil)-rapamicina logra un mayor efecto terapéutico (una potenciación) en la prevención o el tratamiento de aterotrombosis. De una manera más general, también se ha descubierto de una manera sorprendente que una combinación de un inhibidor de HMG-Co-A-reductasa, en especial fluvastatina o pitavastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina, logra un mayor efecto terapéutico (una potenciación) en la prevención o el tratamiento de aterotrombosis. Las combinaciones de acuerdo con la invención también disminuyen de una manera sorprendente los síntomas, y mejoran los efectos secundarios , por ejemplo la miotoxicidad. También se ha documentado una mayor eficacia como una duración de acción prolongada. La duración de acción se puede monitorear ya sea como el tiempo para regresar hasta la línea base antes de la siguiente dosis, o como el área debajo de la curva (AUC) , y se e?presa como el producto del cambio en la presión sanguínea en mil ímetros de mercurio (cambio en mm Hg) y la duración del efecto (minutos, horas, o días). Otros beneficios son que se pueden utilizar dosis más bajas de los fármacos individuales que se vayan a combinar de acuerdo con la presente invención para reducir la dosificación, por ejemplo, que las dosificaciones no necesitan ser solamente con frecuencia más pequeñas, sino que también se aplican con menos frecuencia, o se pueden utilizar para disminuir la incidencia de los efectos secundarios. Se prefiere una combinación de dosis baja de inhibidor de H MG-Co-A-reductasa y agente inhibidor de mTOR. La administración combinada de un inhibidor de HMG-Co-A-reductasa, en especial fluvastatina o pitavastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina, da como resultado una respuesta significativa en un mayor porcentaje de pacientes tratados, es decir, resulta un mayor índice de respondentes, independientemente de la etiología subyacente de la condición. Esto está de acuerdo con los deseos y requerimientos de los pacientes que se van a tratar. Se puede demostrar que la terapia de combinación con un agente de fluvastatina o pitavastatina y un agente inhibidor de mTOR , por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina, da como resultado una terapia más efectiva de las condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa, tales como las condiciones o enfermedades relacionadas con hipercolesterolemia, las condiciones o enfermedades relacionadas con dislipidemia mi?ta, prevención secundaria de evento cardiovascular, las condiciones o enfermedades relacionadas con ateroesclerosis, y las condiciones o enfermedades relacionadas con un agente inhibidor de mTOR , a través de una mayor eficacia, así como un mayor índice de respondentes. Además, se puede demostrar que la terapia de combinación con fluvastatina o pitavastatina y un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina, es benéfica en la reducción de los efectos secundarios debidos al tratamiento con inhibidores de HMG-Co-A-reductasa, por ejemplo, hay una reducción de toxicidad. Por consiguiente, en la presente descripción, los términos "tratamiento" o "tratar" se refieren tanto el tratamiento profiláctico como preventivo, así como al tratamiento curativo o modificador de la enfermedad, incluyendo el tratamiento de los pacientes en riesgo de contraer la enfermedad, o que se sospeche que han contraído la enfermedad, así como de los pacientes que estén enfermos o que hayan sido diagnosticados por sufrir de una enfermedad o condición médica. Los agentes de la invención, es decir, los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa o los agentes de fibratos, de preferencia se utilizan en la forma de preparaciones farmacéuticas que contienen la cantidad terapéuticamente efectiva relevante de cada ingrediente activo (ya sea por separado o en combinación) , y opcionalmente junto con , o en mezcla con , vehículos farmacéuticamente aceptables inorgánicos u orgánicos, sólidos o l íquidos, que sean adecuados para la administración. Los agentes de la invención pueden estar presentes en las mismas composiciones farmacéuticas, aunque de preferencia están en composiciones farmacéuticas separadas. Por consiguiente, los ingredientes activos se pueden administrar al mismo tiempo (por ejemplo, de una manera simultánea) , o en diferentes tiempos (por ejemplo, en secuencia) , y durante diferentes períodos de tiempo, los cuales pueden estar separados unos de otros, o pueden estar traslapados. La forma de dosis unitaria también puede ser una combinación fija. De una manera preferible, las composiciones farmacéuticas se adaptan para administración oral o parenteral (en especial oral) . Se considera que la administración intravenosa y oral, y primero y más que nada oral, es de una importancia particular. Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención se pueden preparar de una manera conocida por sí misma, y son aquéllas adecuadas para administración enteral, tal como oral, rectal , por inhalación de aerosol, o nasal, y parenteral, tal como administración intravenosa o subcutánea, o composiciones para administración transdérmica (por ejemplo, pasiva o iontoforética) a mam íferos (animales de sangre caliente) , incluyendo el hombre. Estas composiciones comprenden una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto farmacológicamente activo, solo o en combinación con uno o más veh ículos farmacéuticamente aceptables, en especial adecuados para la aplicación enteral o parenteral. Las formulaciones orales típicas incluyen tabletas, cápsulas, jarabes, elíxires, y suspensiones. Las formulaciones inyectables típicas incluyen soluciones y suspensiones. Las tabletas pueden estar recubiertas de película o pueden tener recubrimiento entérico de acuerdo con los métodos conocidos en la materia. Se prefieren las tabletas y las cápsulas de gelatina que comprendan al ingrediente activo junto con: a) diluyentes, por ejemplo lactosa, dextrosa, sacarosa, manitol , sorbitol , celulosa, y/o glicina; b) lubricantes, por ejemplo sílice, talco , ácido esteárico, su sal de magnesio o calcio, y/o polietilenglicol ; para tabletas también c) aglutinantes, por ejemplo silicato de magnesio y aluminio, pasta de almidón, gelatina, tragacanto, metil-celulosa, carboxi-metil-celulosa de sodio, y/o polivinil-pirrolidona; si se desea d) desintegrantes, por ejemplo almidones, ágar, ácido algínico o su sal sódica, o mezclas efervescentes; y/o e) absorbentes, colorantes, saborizantes, y edulcorantes. Las composiciones inyectables de preferencia son soluciones o suspensiones isotónicas acuosas, y los supositorios convenientemente se preparan a partir de emulsiones o suspensiones grasas. Estas composiciones se pueden esterilizar y/o pueden contener adyuvantes, tales como agentes conservadores, estabilizantes, humectantes, o emulsionantes, promotores de solución, sales para regular la presión osmótica, y/o reguladores del pH. En adición, también pueden contener otras sustancias terapéuticamente valiosas. Estas composiciones se preparan de acuerdo con los métodos convencionales de mezcla, granulación, o recubrimiento, respectivamente, y contienen de aproximadamente el OJ al 85 por ciento, de preferencia de aproximadamente el 1 al 70 por ciento del ingrediente activo. Los vehículos farmacéuticamente aceptables típicos para utilizarse en las formulaciones descritas anteriormente son ejemplificados por: azúcares, tales como lactosa, sacarosa, manitol , y sorbitol ; almidones, tales como almidón de maíz, almidón de tapioca, y almidón de papa; celulosa y derivados, tales como carboxi-metil-celulosa de sodio, etil-celulosa, y metil-celulosa; fosfatos de calcio, tales como difosfato de calcio y trifosfato de calcio; sulfato de sodio; sulfato de calcio; polivinil-pirrolidona; poli-alcohol vinílico; ácido esteárico; estearatos de metales alcalinotérreos, tales como estearato de magnesio y estearato de calcio; ácido esteárico; aceites vegetales, tales como aceite de cacahuate, aceite de semilla de algodón , aceite de ajonjol í, aceite de oliva, y aceite de maíz; tensoactivos no ¡ónicos, catiónicos, y aniónicos; polímeros de etilenglicol ; beta-ciclodextrina; alcohol grasos; y sólidos de cereales hidrolizados, así como otros rellenos, aglutinantes, desintegrantes, reguladores del pH, conservadores, antioxidantes, lubricantes, agentes saborizantes, y similares compatibles no tóxicos comúnmente utilizados en las formulaciones farmacéuticas. Las preparaciones farmacéuticas para administración enteral y parenteral son, por ejemplo, aquéllas que están en formas unitarias de dosificación, tales como grageas, tabletas, o cápsulas , y también ampolletas. Éstas se preparan de una manera conocida por sí misma, por ejemplo por medio de los procesos convencionales de mezcla, granulación, confitería, disolución o liofilización . Por ejemplo, las preparaciones farmacéuticas para administración oral se pueden obtener mediante la combinación del ingrediente activo con vehículos sólidos, donde sea apropiado se granula una mezcla resultante, y se procesa la mezcla o el granulado, si se desea o es necesario después de la adición de auxiliares adecuados, en tabletas o núcleos de grageas. Otras preparaciones farmacéuticas oralmente administrables son las cápsulas llenadas en seco hechas de gelatina, y también las cápsulas selladas blandas hechas de gelatina y un plastificante, tal como glicerol o sorbitol . Las cápsulas llenadas en seco pueden contener al ingrediente activo en la forma de un granulado, por ejemplo mezclado con rellenos, tales como lactosa, aglutinantes, tales como almidones, y/o derrapantes, tales como talco o estearato de magnesio, y, cuando sea apropiado, estabilizantes. En las cápsulas blandas, el ingrediente activo de preferencia se disuelve o se suspende en l íquidos adecuados, tales como aceites grasos, aceite de parafina, o polietilenglicoles l íquidos, siendo posible también que se agreguen estabilizantes. Las formulaciones parenterales son en especial fluidos inyectables que sean efectivos de diferentes maneras, tales como intravenosamente, intramuscularmente, intraperitonealmente, intranasalmente, intradérmicamente, o subcutáneamente. Estos fluidos de preferencia son soluciones o suspensiones acuosas isotónicas, las cuales se pueden preparar antes de usarse, por ejemplo, a partir de preparaciones liofilizadas que contengan al ingrediente activo solo o junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable. Las preparaciones farmacéuticas se pueden esterilizar y/o pueden contener auxiliares, por ejemplo agentes conservadores, estabilizantes, humectantes, y/o emulsionantes, solubilizantes, sales para regular la presión osmótica, y/o reguladores del pH. Las formulaciones adecuadas para aplicación transdérmica incluyen una cantidad efectiva de un compuesto de la invención con un vehículo. Los vehículos convenientes incluyen los solventes farmacológicamente aceptables absorbibles para ayudar al paso a través de la piel del huésped . Por ejemplo, los dispositivos transdérmicos están en la forma de un parche que comprende un miembro de respaldo, un depósito que contiene al compuesto opcionalmente con vehículos, opcionalmente una barrera de control de velocidad para suministrar el compuesto a la piel del huésped a una velocidad controlada y previamente determinada durante un período de tiempo prolongado, y elementos para asegurar el dispositivo a la piel . Las formulaciones adecuadas para aplicación tópica, por ejemplo a la piel y a los ojos, incluyen soluciones acuosas, suspensiones, ungüentos, cremas, geles, o formulaciones atomizables, por ejemplo para suministrarse mediante aerosol o similar. Por ejemplo, las preparaciones farmacéuticas consisten en de aproximadamente el OJ al 90 por ciento, de preferencia de apro?imadamente el 1 por ciento a aproximadamente el 80 por ciento de los compuestos activos. Las preparaciones farmacéuticas para administración enteral o parenteral, por ejemplo, están en formas de dosis unitaria, tales como tabletas recubiertas , tabletas, cápsulas, o supositorios, y también ampolletas. Éstas se preparan de una manera que es conocida por sí misma, por ejemplo empleando los procesos convencionales de mezcla, granulación, recubrimiento, solubilización , o liofilización . Por consiguiente, las preparaciones farmacéuticas para uso oral se pueden obtener mediante la combinación de los compuestos activos con excipientes sólidos, si se desea se granula una mezcla que se haya obtenido, y si se requiere o es necesario, se procesa la mezcla o el granulado en tabletas o en núcleos de tabletas recubiertas, después de haber agregado las sustancias auxiliares adecuadas. La dosificación del compuesto activo puede depender de una variedad de factores, tales como el modo de administración , la especie homeotérmica, la edad, y/o la condición individual . Las dosificaciones preferidas para los ingredientes activos de la combinación farmacéutica de acuerdo con la presente invención son las dosificaciones terapéuticamente efectivas, en especial aquéllas que están comercialmente disponibles. La fluvastatina se suministra en la forma de una unidad de dosificación adecuada, por ejemplo una cápsula o tableta, y comprendiendo una cantidad terapéuticamente efectiva, por ejemplo de aproximadamente 20 miligramos a aproximadamente 80 miligramos, que se pueden aplicar a los pacientes. La aplicación del ingrediente activo puede presentarse hasta tres veces al día, empezando, por ejemplo, con una dosis diaria de 20 miligramos o de 40 miligramos al día, aumentando hasta 40 miligramos al día y más hasta 80 miligramos al día. De preferencia, la fluvastatina se aplica una vez al día o dos veces al día en los pacientes con una dosis de 80 miligramos , o se toman dosis de 40 miligramos dos veces al día, respectivamente. Las dosis correspondientes se pueden tomar, por ejemplo, en la mañana, al medio día, o en la noche. Las dosificaciones diarias para la fluvastatina, desde luego, variarán dependiendo de una variedad de factores, por ejemplo, del compuesto seleccionado, de la condición particular que se vaya a tratar, y del efecto deseado. Sin embargo, en general, se logran resultados satisfactorios con la administración de fluvastatina en índices de dosificación diarios del orden de 20 a 80 miligramos/kilogramo al día. Un intervalo de dosificación diaria preferido es de aproximadamente 20 a 40 miligramos al día como una sola dosis o en dosis divididas. La fluvastatina se puede administrar por cualquier vía convencional , en particular enteralmente, por ejemplo oralmente, por ejemplo en la forma de tabletas, cápsulas, soluciones para beber, o parenteralmente, por ejemplo en la forma de soluciones o suspensiones inyectables. Las formas de dosificación adecuada unitarias para administración oral comprenden de aproximadamente 20 miligramos de ingrediente activo, usualmente 40 miligramos, por ejemplo de fluvastatina, junto con uno o más diluyentes o vehículos farmacéuticamente aceptables para la misma. Las dosificaciones diarias para el inhibidor de mTOR , desde luego, variarán dependiendo de una variedad de factores, por ejemplo del compuesto seleccionado, de la condición particular que se vaya a tratar, y del efecto deseado. Sin embargo, en general , se logran resultados satisfactorios con la administración del inhibidor de mTOR en índices de dosificación diarios del orden de aproximadamente 0.01 a 5 miligramos/kilogramo al día, en particular de 0.5 a 5 miligramos/kilogramo al día, como una sola dosis o en dosis divididas. Un intervalo de dosificación diaria preferido es de aproximadamente OJ a 30 miligramos como una sola dosis, o en dosis divididas. El inhibidor de mTOR, por ejemplo el Compuesto A, se puede administrar por cualquier vía convencional , en particular enteralmente, por ejemplo oralmente, por ejemplo en la forma de tabletas, cápsulas, soluciones para beber, o parenteralmente, por ejemplo en la forma de soluciones o suspensiones inyectables. Las formas de dosificación unitaria adecuadas para administración oral comprenden de apro?imadamente 0.05 a 1 5 miligramos de ingrediente activo, usualmente de 0.25 a 10 miligramos, por ejemplo del Compuesto A, junto con uno o más diluyentes o vehículos farmacéuticamente aceptables para el mismo. La rapamicina o sus derivados son bien tolerados en las dosificaciones requeridas para utilizarse de conformidad con la presente invención. Por ejemplo, la NTEL para el Compuesto A en un estudio de to?icidad de 4 semanas es de 0.5 miligramos/-kilogramo/día en ratas, y de 1 .5 miligramos/kilogramo/día en monos.

La persona experta en la técnica pertinente está absolutamente capacitada para seleccionar un modelo de prueba relevante para probar la eficacia de una combinación de la presente invención en las indicaciones terapéuticas indicadas anteriormente en la presente y más adelante en la presente. Los siguientes Ejemplos ilustran la invención anteriormente descrita; sin embargo, no pretenden restringir el alcance de esta invención de ninguna manera.

EJEMPLOS A) Ejemplos de formulación de fluvastatina. Tabla 1 Composición de una Tableta Recubierta de Película de Lescol XL de 80 Miligramos Tabla 2 Composición de Una Cápsula de Lescol de 20 Miligramos Tabla 3 Composición de Una Cápsula de Lescol de 40 Miligramos Ejemplos de formulación de pitavastatina (Ejemplos 1 a 7). Eiemplo 1 Núcleo (porcentaje relacionado con el peso del núcleo): 4J8 miligramos (5.225 por ciento en peso) de sustancia de fármaco, por ejemplo, sales de calcio de pitavastatina; 42.82 miligramos (53.525 por ciento en peso) de celulosa microcristalina; 4 miligramos (5 por ciento en peso) de hidroxi-propil-metil-celulosa (3 cps); 25 miligramos (31.25 por ciento en peso) de hidroxi-propil-metil-celulosa (100 cps); 3.2 miligramos (4 por ciento en peso) de Neusilina; comprendiendo la fase externa 0.4 miligramos (0.5 por ciento en peso) de dióxido de silicio coloidal, y 0.4 miligramos (0.5 por ciento en peso) de estearato de magnesio. Sub-recubrimiento de hidroxi-propil-metil-celulosa (recubrimiento no funcional) (porcentaje relacionado con el peso del sub-recubrimiento): 2.856 miligramos (71.4 por ciento en peso) de hidroxi-propil-metil-celulosa (3 cps); 0.286 miligramos (7J5 por ciento en peso) de polietilenglicol; 0.286 miligramos (7J5 por ciento en peso) de talco; y 0.572 miligramos (14.3 por ciento en peso) de dióxido de titanio. Recubrimiento entérico (porcentaje relacionado con el peso del recubrimiento entérico): 5 miligramos (83.34 por ciento en peso) de Eudragit L30D; 0.5 miligramos (8.33 por ciento en peso) de talco; y 0.5 miligramos (8.33 por ciento en peso) de polietilenglicol. Eiemplo 2 Núcleo (porcentaje relacionado con el peso del núcleo): 8.36 miligramos (10.45 por ciento en peso) de sustancia de fármaco, por ejemplo, sales de calcio de pitavastatina; 38.64 miligramos (48.3 por ciento en peso) de celulosa microcristalina; 4 miligramos (5 por ciento en peso) de hidroxi-propil-metil-celulosa (3 cps); 25 miligramos (31.25 por ciento en peso) de hidroxi-propil-metil-celulosa (100 cps); 3.2 miligramos (4 por ciento en peso) de Neusilina; comprendiendo la fase externa 0.4 miligramos (0.5 por ciento en peso) de dió?ido de silicio coloidal, y 0.4 miligramos (0.5 por ciento en peso) de estearato de magnesio. Sub-recubrimiento de hidro?i-propil-metil-celulosa (recubrimiento no funcional) (porcentaje relacionado con el peso del sub-recubrimiento): 2.856 miligramos (71.4 por ciento en peso) de hidro?i-propil-metil-celulosa (3 cps); 0.286 miligramos (7J5 por ciento en peso) de polietilenglicol; 0.286 miligramos (7J5 por ciento en peso) de talco; y 0.572 miligramos (14.3 por ciento en peso) de dió?ido de titanio. Recubrimiento entérico (porcentaje relacionado con el peso del recubrimiento entérico): 5 miligramos (83.34 por ciento en peso) de Eudragit L30D; 0.5 miligramos (8.33 por ciento en peso) de talco; y 0.5 miligramos (8.33 por ciento en peso) de polietilenglicol. Eiemplo 3 Núcleo (porcentaje relacionado con el peso del núcleo): 16.72 miligramos (20.9 por ciento en peso) de sustancia de fármaco, por ejemplo, sales de calcio de pitavastatina; 30.28 miligramos (37.85 por ciento en peso) de celulosa microcristalina; 4 miligramos (5 por ciento en peso) de hidro?i-propil-metil-celulosa (3 cps); 25 miligramos (31.25 por ciento en peso) de hidro?i-propil-metil-celulosa (100 cps); 3.2 miligramos (4 por ciento en peso) de Neusilina; comprendiendo la fase e?terna 0.4 miligramos (0.5 por ciento en peso) de dió?ido de silicio coloidal, y 0.4 miligramos (0.5 por ciento en peso) de estearato de magnesio. Sub-recubrimiento de hidro?i-propil-metil-celulosa (recubrimiento no funcional) (porcentaje relacionado con el peso del sub-recubrimiento): 2.856 miligramos (71.4 por ciento en peso) de hidro?i-propil-metil-celulosa (3 cps); 0.286 miligramos (7J5 por ciento en peso) de polietilenglicol; 0.286 miligramos (7J5 por ciento en peso) de talco; y 0.572 miligramos (14.3 por ciento en peso) de dió?ido de titanio. Recubrimiento entérico (porcentaje relacionado con el peso del recubrimiento entérico): 5 miligramos (83.34 por ciento en peso) de Eudragit L30D; 0.5 miligramos (8.33 por ciento en peso) de talco; y 0.5 miligramos (8.33 por ciento en peso) de polietilenglicol. Eiemplo 4 Núcleo (porcentaje relacionado con el peso del núcleo): 3J35 miligramos (3.92 por ciento en peso) de sustancia de fármaco, por ejemplo, sales de calcio de pitavastatina; 43.865 miligramos (54.83 por ciento en peso) de celulosa microcristalina; 4 miligramos (5 por ciento en peso) de hidro?i-propil-metil-celulosa (3 cps); 12.50 miligramos (15.625 por ciento en peso) de hidro?i-propil-metil-celulosa (100 cps); 12.50 miligramos (15.625 por ciento en peso) de hidroxi-propil-metil-celulosa (100,000 cps), 3.2 miligramos (4 por ciento en peso) de Neusilina; comprendiendo la fase externa 0.4 miligramos (0.5 por ciento en peso) de dióxido de silicio coloidal, y 0.4 miligramos (0.5 por ciento en peso) de estearato de magnesio. Sub-recubrimiento de hidro?i-propil-metil-celulosa (recubrimiento no funcional) (porcentaje relacionado con el peso del sub-recubrimiento): 2.856 miligramos (71.4 por ciento en peso) de hidro?i-propil-metil-celulosa (3 cps); 0.286 miligramos (7J5 por ciento en peso) de polietilenglicol; 0.286 miligramos (7J5 por ciento en peso) de talco; y 0.572 miligramos (14.3 por ciento en peso) de dió?ido de titanio. Recubrimiento entérico (porcentaje relacionado con el peso del recubrimiento entérico): 5 miligramos (83.34 por ciento en peso) de Eudragit L30D; 0.5 miligramos (8.33 por ciento en peso) de talco; y 0.5 miligramos (8.33 por ciento en peso) de polietilenglicol. Eiemplo 5 Núcleo (porcentaje relacionado con el peso del núcleo): 6.27 miligramos (7.84 por ciento en peso) de sustancia de fármaco, por ejemplo, sales de calcio de pitavastatina; 40.73 miligramos (50.91 por ciento en peso) de celulosa microcristalina; 4 miligramos (5 por ciento en peso) de hidro?i-propil-metil-celulosa (3 cps); 16.64 miligramos (20.8 por ciento en peso) de hidro?i-propil-metil-celulosa (100 cps); 8.36 miligramos (10.45 por ciento en peso) de hidro?i-propil-metil-celulosa (100,000 cps), 3.2 miligramos (4 por ciento en peso) de Neusilina; comprendiendo la fase externa 0.4 miligramos (0.5 por ciento en peso) de dióxido de silicio coloidal, y 0.4 miligramos (0.5 por ciento en peso) de estearato de magnesio. Sub-recubrimiento de hidroxi-propil-metil-celulosa (recubrimiento no funcional) (porcentaje relacionado con el peso del sub-recubrimiento): 2.856 miligramos (71.4 por ciento en peso) de hidroxi-propil-metil-celulosa (3 cps); 0.286 miligramos (7J5 por ciento en peso) de polietilenglicol; 0.286 miligramos (7J5 por ciento en peso) de talco; y 0.572 miligramos (14.3 por ciento en peso) de dióxido de titanio. Recubrimiento entérico (porcentaje relacionado con el peso del recubrimiento entérico): 5 miligramos (83.34 por ciento en peso) de Eudragit L30D; 0.5 miligramos (8.33 por ciento en peso) de talco; y 0.5 miligramos (8.33 por ciento en peso) de polietilenglicol. Eiemplo 6 Núcleo (porcentaje relacionado con el peso del núcleo): 12.54 miligramos (15.675 por ciento en peso) de sustancia de fármaco, por ejemplo, sales de calcio de pitavastatina; 34.46 miligramos (43.075 por ciento en peso) de celulosa microcristalina; 4 miligramos (5 por ciento en peso) de hidroxi-propil-metil-celulosa (3 cps); 18.75 miligramos (23.4375 por ciento en peso) de hidroxi-propil-metil-celulosa (100 cps); 6.25 miligramos (7.8175 por ciento en peso) de hidroxi-propil-metil-celulosa (100,000 cps), 3.2 miligramos (4 por ciento en peso) de Neusilina; comprendiendo la fase externa 0.4 miligramos (0.5 por ciento en peso) de dió?ido de silicio coloidal, y 0.4 miligramos (0.5 por ciento en peso) de estearato de magnesio.

Sub-recubrimiento de hidroxi-propil-metil-celulosa (recubrimiento no funcional) (porcentaje relacionado con el peso del sub-recubrimiento): 2.856 miligramos (71.4 por ciento en peso) de hidroxi-propil-metil-celulosa (3 cps); 0.286 miligramos (7J5 por ciento en peso) de polietilenglicol; 0.286 miligramos (7J5 por ciento en peso) de talco; y 0.572 miligramos (14.3 por ciento en peso) de dióxido de titanio. Recubrimiento entérico (porcentaje relacionado con el peso del recubrimiento entérico): 5 miligramos (83.34 por ciento en peso) de Eudragit L30D; 0.5 miligramos (8.33 por ciento en peso) de talco; y 0.5 miligramos (8.33 por ciento en peso) de polietilenglicol. Eiemplo 7 Núcleo (porcentaje relacionado con el peso del núcleo): 16.72 miligramos (20.9 por ciento en peso) de sustancia de fármaco, por ejemplo, sales de calcio de pitavastatina; 30.28 miligramos (37.85 por ciento en peso) de celulosa microcristalina; 4 miligramos (5 por ciento en peso) de hidroxi-propil-metil-celulosa (3 cps); 20 miligramos (25 por ciento en peso) de hidro?i-propil-metil-celulosa (100 cps); 5 miligramos (6.25 por ciento en peso) de hidro?i-propil-metil-celulosa (100,000 cps), 3.2 miligramos (4 por ciento en peso) de Neusilina; comprendiendo la fase externa 0.4 miligramos (0.5 por ciento en peso) de dióxido de silicio coloidal, y 0.4 miligramos (0.5 por ciento en peso) de estearato de magnesio. Sub-recubrimiento de hidroxi-propil-metil-celulosa (recubrimiento no funcional) (porcentaje relacionado con el peso del sub-recubrimiento): 2.856 miligramos (71.4 por ciento en peso) de hidro?i-propil-metil-celulosa (3 cps); 0.286 miligramos (7J5 por ciento en peso) de polietilenglicol; 0.286 miligramos (7J5 por ciento en peso) de talco; y 0.572 miligramos (14.3 por ciento en peso) de dió?ido de titanio. Recubrimiento entérico (porcentaje relacionado con el peso del recubrimiento entérico): 5 miligramos (83.34 por ciento en peso) de Eudragit L30D; 0.5 miligramos (8.33 por ciento en peso) de talco; y 0.5 miligramos (8.33 por ciento en peso) de polietilenglicol.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una combinación farmacéutica, la cual comprende un inhibidor de HMG-Co-A-reductasa, en especial fluvastatina o pitavastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y un agente inhibidor de mTOR.

2. La combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el inhibidor de HMG-Co-A-reductasa es fluvastatina o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

3. La combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el inhibidor de HMG-Co-A-reductasa es pitavastatina o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

4. La combinación farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde el agente inhibidor de mTOR se selecciona a partir de rapamicina o un derivado de rapamicina seleccionado a partir del grupo de: 32-deso?o-rapamicina, 16-pent-2-iniloxi-32-desoxo-rapamicina, 16-pent-2-inilo?i-32-(S ó R)-dihidro-rapamicina, 16-pent-2-iniloxi-32-(S ó R)-dihidro-40-O-(2-hidroxietil)-rapam icina, 40-[3-hidroxi-2-(hidro?i-metil)-2-metil-propanoato]-rapamicina (también denominada como CCI779), 40-epi-(tetrazolil)-rapamicina (también denominada como ABT578), 40-O-(2-hidro?i-etil)-rapamicina, 32-deso?o-rapamicina, y 16-pent-2-inilo?i-32(S)-dihidro-rapamicina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, para su uso simultáneo, en secuencia, o separado.

5. La combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1 , la cual comprende pitavastati na o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, y 40-O-(2-hidro?i-etil)-rapamicina, para su uso simultáneo, en secuencia, o separado.

6. La combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1 , la cual comprende fluvastatina o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, y 40-O-(2-hidro?i-etil)-rapamicina, para su uso simultáneo, en secuencia, o separado.

7. La combinación farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, para el tratamiento o la prevención de las condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa, tales como las condiciones o enfermedades relacionadas con hipercolesterolemia, las condiciones o enfermedades relacionadas con dislipidemia mi?ta, prevención secundaria de evento cardiovascular, las condiciones o enfermedades relacionadas con ateroesclerosis, y las condiciones o enfermedades relacionadas con un agente inhibidor de mTOR, tales como trasplante, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino (IBD) , rechazo crónico de injerto, restenosis en seguida de angioplastía, tumores sólidos, en especial invasividad de tumor sólido o síntomas asociados con este crecimiento tumoral , rechazo de xeno-trasplante, enfermedad del injerto contra el huésped (GvH) , enfermedades autoinmunes y condiciones inflamatorias (lupus eritematoso sistémico (SLE) , diabetes tipo I , etc.) , asma, resistencia a múltiples fármacos, trastornos proliferativos (tumores, trastornos hiperproliferativos de la piel, por ejemplo psoriasis) , uveítis, queratoconjuntivitis sicca, infecciones fúngicas, angiogénesis, e inhibición de la resorción ósea.

8. El uso de una combinación farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, para la preparación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de las condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa, tales como las condiciones o enfermedades relacionadas con hipercolesterolemia, las condiciones o enfermedades relacionadas con dislipidemia mi?ta, prevención secundaria de evento cardiovascular, las condiciones o enfermedades relacionadas con ateroesclerosis, y las condiciones o enfermedades relacionadas con un agente inhibidor de mTOR, tales como trasplante, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino (IBD) , rechazo crónico de injerto, restenosis en seguida de angioplastía, tumores sólidos, en especial invasividad de tumor sólido o síntomas asociados con este crecimiento tumoral , rechazo de xeno-trasplante, enfermedad del injerto contra el huésped (GvH) , enfermedades autoinmunes y condiciones inflamatorias (lupus eritematoso sistémico (SLE) , diabetes tipo I , etc.) , asma, resistencia a múltiples fármacos, trastornos proliferativos (tumores, trastornos hiperproliferativos de la piel , por ejemplo psoriasis) , uveítis, queratoconjuntivitis sicca, infecciones fúngicas, angiogénesis, e inhibición de la resorción ósea.

9. Un kit que comprende, en recipientes separados, en un solo paquete, composiciones farmacéuticas que comprenden, en un recipiente, una composición farmacéutica que comprende pitavastatina, y en un segundo recipiente, una composición farmacéutica que comprende un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina.

10. Un kit que comprende, en recipientes separados, en un solo paquete, composiciones farmacéuticas que comprenden , en un recipiente, una composición farmacéutica que comprende fluvastatina, y en un segundo recipiente, una composición farmacéutica que comprende un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina. 1 1 . Un kit de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 9 ó 1 0, en donde el agente inhibidor de mTOR es 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina. 12. Un paquete que comprende un inhibidor de HMG-Co-A-reductasa, en especial fluvastatina o pitavastatina, junto con instrucciones para utilizarse en combinación con un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina, para el tratamiento o la prevención de las condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa, tales como las condiciones o enfermedades relacionadas con hipercolesterolemia, las condiciones o enfermedades relacionadas con dislipidemia mixta, prevención secundaria de evento cardiovascular, las condiciones o enfermedades relacionadas con ateroesclerosis, y las condiciones o enfermedades relacionadas con un agente inhibidor de mTOR, tales como trasplante, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino (IBD), rechazo crónico de injerto, restenosis en seguida de angioplastía, tumores sólidos, en especial invasividad de tumor sólido o síntomas asociados con este crecimiento tumoral, rechazo de ?eno-trasplante, enfermedad del injerto contra el huésped (GvH), enfermedades autoinmunes y condiciones inflamatorias (lupus eritematoso sistémico (SLE), diabetes tipo I, etc.), asma, resistencia a múltiples fármacos, trastornos proliferativos (tumores, trastornos hiperproliferativos de la piel, por ejemplo psoriasis), uveítis, queratoconjuntivitis sicca, infecciones fúngicas, angiogénesis, e inhibición de la resorción ósea. 13. Un paquete de acuerdo con la reivindicación 12, el cual comprende fluvastatina o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, junto con instrucciones para utilizarse en combinación con el agente inhibidor de mTOR de 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina. 14. Un paquete de acuerdo con la reivindicación 12, el cual comprende pitavastatina o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, junto con instrucciones para utilizarse en combinación con el agente inhibidor de mTOR de 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina. 15. Un método para la prevención o el tratamiento de las condiciones o enfermedades relacionadas con los inhibidores de HMG-Co-A-reductasa, tales como las condiciones o enfermedades relacionadas con hipercolesterolemia, las condiciones o enfermedades relacionadas con dislipidemia mi?ta, prevención secundaria de evento cardiovascular, las condiciones o enfermedades relacionadas con ateroesclerosis, y las condiciones o enfermedades relacionadas con un agente inhibidor de mTOR, el cual comprende la administración de una combinación de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, y un opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable, a un mamífero que lo necesite. RESUMEI La invención se refiere a una combinación farmacéutica que comprende un inhibidor de HMG-Co-A-reductasa, en especial fluvastatina o pitavastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas, y un agente inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina o un derivado de rapamicina.