MX2007010715A

MX2007010715A - Recuperacion de cc-779 a partir de soluciones madre.

Info

Publication number: MX2007010715A
Application number: MX2007010715A
Authority: MX
Inventors: Warren Chew; Chia-Cheng Shaw; Bogdan Kazimierz Wilk; Genevieve Fortier
Original assignee: Wyeth Corp
Priority date: 2005-03-02
Filing date: 2006-02-22
Publication date: 2007-10-12
Also published as: EP1853611A1; IL185078A0; AR053151A1; JP2008531685A; US20060199253A1; CR9325A; BRPI0607390A2; KR20070107072A; CA2599580A1; US7288647B2; GT200600095A; NI200700226A; CN101133066A; MY138328A; NO20074101L; ZA200707526B; RU2007130407A; TW200643023A; WO2006093743A1; PE20061293A1

Abstract

La invencion provee un procedimiento para recuperar CCI-779 a partir de soluciones madre.

Description

RECUPERACIÓN DE CCI-779 A PARTIR DE SOLUCIONES MADRE ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere a la recuperación de CCI-779 a partir de soluciones madre. CCI-779 (42-éster de rapamicina con ácido 3-hidroxi-2-(hidroximetil)-2-metilpropiónico) es un éster de rapamicina, que ha demostrado efectos inhibidores significativos sobre el crecimiento de tumores tanto en modelos in vitro como in vivo. CCI-779 se une a la proteína citoplásmica FKBP y forma un complejo con la misma, que inhibe una enzima, mTOR (objetivo de rapamicina en mamífero, también conocida como proteína asociada a FKBP12 rapamicina [FRAP]). La inhibición de la actividad de cinasa de mTORs inhibe una variedad de vías de transducción de señal, incluyendo proliferación de células estimuladas por citosina, traducción de ARNm para varias proteínas clave que regulan la fase G1 del ciclo celular, y transcripción inducida por IL-2, que conduce a inhibición de progresión del ciclo celular de G1 a S. Se ha demostrado que CCI-779 es efectiva en múltiples aplicaciones, incluyendo inhibición de cáncer del sistema nervioso central, leucemia, cáncer de mama, cáncer de próstata, melanoma, gliomas y glioblastoma. La preparación y uso de hidroxiésteres de rapamicina, incluyendo CCI-779, se describen en la patente de E.U.A. No. 5,362,718. Una síntesis regioselectiva de CCI-779 se describen en la patente de E.U.A. No. 6,277,983. Sin embargo, el rendimiento de CCI-779 resultante es únicamente en el intervalo de 70-80%. Otra síntesis regioselectiva más se describe en la publicación de patente de E.U.A. No. 2005-0033046 A1. La recristalización de CCI-779 es necesaria para obtener un producto cristalino para usarse en aplicaciones clínicas. Lo que se necesita es un procedimiento para recuperar CCI-779 cristalina adicional a partir de las soluciones madre obtenidas como un subproducto de cristalización de CCI-779.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La invención provee un procedimiento para la recuperación de CCI-779 a partir de soluciones madre. El procedimiento incluye concentrar la soluciones madre, tratar el CCI-779 concentrado con un regulador de pH, secar y concentrar la capa orgánica, y recristalizar el CCI-779, preferiblemente a partir de éter. En otra modalidad, la solución madre obtenida del procedimiento se usa en el procedimiento para obtener rendimientos adicionales. En otras modalidades, el procedimiento se repite múltiples veces. Otros aspectos y ventajas de la invención serán evidentes a partir de la siguiente descripción detallada de la invención.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención provee un método novedoso para la recuperación de CCI-779 a partir de soluciones madre. CCI-779 (42-éster de rapamicina con ácido 3-hidroxi-2- (hidroximetil)-2-metilpropiónico) puede existir en forma de dos isómeros ilustrados más adelante en el esquema 2. El CCI-779 recuperado de las soluciones madre de conformidad con la invención generalmente contiene aproximadamente 95% en peso de isómero B de CCI-779 y aproximadamente 3% en peso de isómero C. Como se usa aquí, los términos rendimiento combinado o rendimiento combinado total significan el CCI-779 total recuperado de todos los pasos de recristalización, incluyendo recristalización inicial por técnicas convencionales y CCI-779 recuperado de soluciones madre por el procedimiento de la invención. En una modalidad, CCI-779 se prepara como se describe en la patente de E.U.A. No. 5,362,718. En otra modalidad, CCI-779 se prepara como se describen en la publicación de patente de E.U.A. No. 2005-0033046 A1. En otra modalidad, CCI-779 se obtiene de la hidrólisis acida de 42-éster de rapamicina con ácido 2,2,5-trimetil[1.3-dioxano]-5-carboxílico. En una modalidad, este es acompañado usando ácido sulfúrico seguido por cromatografía sobre gel de sílice. La hidrólisis acida se describen en la patente de E.U.A. No. 6,277,983 (Shaw, et al.). El esquema 1 aquí resume el procedimiento de hidrólisis. Después de la hidrólisis, la recristalización se logra usando técnicas convencionales. En una modalidad, la recristalización se realiza con éter. Típicamente, el CCI-779 obtenido de la recristalización tiene una relación isomérica B:C en el intervalo de aproximadamente 30:1 a aproximadamente 35:1 , y un rendimiento en el intervalo de aproximadamente 70% a aproximadamente 80%, o aproximadamente 72% a aproximadamente 76%. En una modalidad, el CCI-779 obtenido de la recristalización tiene una relación isomérica de B:C de aproximadamente 32:1 y un rendimiento de aproximadamente 74%.

ESQUEMA 1 42-éster de rapamicina con 42-éster de rapamicina con ácido ácido 2,2-bis- 2,2,d-tr¡metil[1,3-d¡oxano]- 5-carfcoxíl¡co (hidroximetil)propiónico (WAY-130459) (CCI-779) Los subproductos del procedimiento de recristalización son soluciones madre que contienen CCI-779 adicional. Típicamente, la cantidad de CCI-779 presente en las soluciones madre es 20% o más del producto después de la recristalización. En una modalidad, 25 a 26% del producto CCI-779 está presente en las soluciones madre. Además, el CCI-779 en estas soluciones madre contiene una proporción mayor de isómero C de CCI-779, es decir, una relación de B:C más baja, que se encuentra típicamente en CCI-779. En una modalidad, la relación de isómero B:C en las soluciones madre está en el intervalo de aproximadamente 1.5:1 a 3:1 , aproximadamente 1.5:1 a 2.5:1 , aproximadamente 2:1 o aproximadamente 1.6:1. La presencia de un porcentaje mayor de isómero C en las soluciones madre, a diferencia de aquella en CCI-779 cristalina, indica una mayor solubilidad de isómero C en el solvente de cristalización. Aunque no se desea estar limitado por la teoría, se cree que el isómero C es menos cristalino que el isómero B, lo que conduce a la presencia incrementada de isómero C en las soluciones madre. Los solicitantes han descubierto que la relación isomérica se puede incrementar a fin de recuperar el rendimiento adicional a partir de soluciones madre a través de la modificación del pH. El esquema 2 aquí ilustra el desplazamiento isomérico deseado.

ESQUEMA 2 Isómero B Isómero C Las soluciones madre obtenidas a partir de la cristalización de CCI-779, como se describió antes, primero se concentran bajo presión reducida. La espuma resultante se combina con un sistema regulador de pH, es decir, un regulador de pH de que ajusta el pH (solución reguladora de pH) y solvente. En una modalidad, el pH del regulador es de aproximadamente 5 a 6.5. En otra modalidad, el pH del regulador de pH es de aproximadamente 5 a 5.5. En una modalidad, la solución reguladora de pH contiene acetato de sodio. En otras modalidades, la solución reguladora de pH contiene acetato de potasio o acetato de zinc. En otras modalidades más, la solución reguladora de pH contiene una mezcla de acetato de sodio, acetato de potasio y/o acetato de zinc. En una modalidad, el solvente es un solvente anaranjado. En una modalidad adicional, el solvente orgánico es acetona. En otras modalidades más, el solvente orgánico es tetrahidrofurano, acetonitrilo o ácido acético. En otras modalidades, el solvente es una mezcla de solventes, v.gr., una mezcla de acetona, tetrahidrofurano, acetonitrilo y/o ácido acético. En una modalidad, la relación en volumen de solvente a regulador de pH es entre 1.5 a 1.1 :1.0. En otra modalidad, la relación en volumen es de 1.1 :1.0. Otros sistemas de regulador de pH, soluciones, solventes y relaciones en volumen para ajustar el pH son contempladas por la invención y serán conocidas por un experto en la técnica. La solución de espuma residual, a partir de las soluciones madre, y sistema de regulador de pH (es decir, solución reguladora de pH y solvente) se mezclan. En una modalidad, la solución se mezcla bajo nitrógeno a temperatura de aproximadamente 20 a 25°C durante 24 horas. En otras modalidades, la solución se mezcla durante 48 horas. La duración se puede ajustar para aumentar al máximo la relación de isómero B a isómero C. En otra modalidad, la relación es monitoreada durante el mezclado, por ejemplo, por CLAR. Después del mezclado, el producto es separado por medios convencionales. En una modalidad, la mezcla se diluye con acetato etilo y se lava con una solución de salmuera. Esto es seguido por lavado de la capa orgánica (o capas orgánicas combinadas) con agua y salmuera. La capa orgánica se seca después sobre sulfato de sodio y se concentra bajo presión reducida, generando una espuma. Otros métodos de separar el producto serán conocidos por un experto en la técnica, y son contemplados por la invención. El método de separar el producto comprende la adición de un medio orgánico para formar la capa orgánica. Después de la separación, la espuma es recristalizada por técnicas convencionales, v.gr., precipitación. En una modalidad, la espuma es recristalizada a partir de un éter. En modalidades adicionales, el éter es éter dietílico, o éter t-butilmetílico. Como solvente para recristalización también se puede usar acetonitrilo, una mezcla de éter con hexanos o heptano, o una mezcla de éter t-butilmetílico con hexanos o heptano. En una modalidad adicional, el éter es un éter dietílico. En una modalidad, el CCI-779 precipitado se puede secar, por ejemplo, bajo vacío por técnicas convencionales. En una modalidad, el CCI-779 recristalizado tiene una relación de isómero B:C mayor que aproximadamente 30:1. En otras modalidades, el CCI-779 tiene una relación de isómero B:C de aproximadamente 45:1 , o aproximadamente 49:1 , o mayor. En otras modalidades, el CCI-779 tiene una relación de isómero B:C de aproximadamente 55:1 , o aproximadamente 57:1 , o mayor. En otras modalidades, el procedimiento se repite usando las soluciones madre obtenidas a partir del procedimiento a fin de obtener un rendimiento total deseado de CCI-779. En una modalidad, el rendimiento combinado total logrado por el procedimiento de la invención es de aproximadamente 90%, o aproximadamente 95%, o mayor. En otra modalidad, el rendimiento combinado total logrado es de aproximadamente 98%, o mayor. El esquema 3 siguiente ilustra el procedimiento.

ESQUEMA 3 CCI-779 (crudo antes CCI-779 (soluciones madre) CCI-779 éter de la recristalización Isómeros B : C -+ (purificado, cristalino) final) = 1.6 : 1 Isómeros B : C isómeros B : C = 32 : 1 = > 9 : 1 Regulador de pH de acetona-acetato, pH 5-5.5 2 días CCI-779 Isómeros B : = 9 : 1 Regulador de pH de acetona-acetato, pH 5-5.5 2 días éter CCI-779 (purificado, cristalino) CCI-779 (soluciones madre) Isómeros B : C Isómeros B : C = 49 : 1 = 3 : 1 El siguiente ejemplo es ilustrativo de la presente invención, pero no es una limitación del mismo.

EJEMPLO Recuperación de CCI-779 de soluciones madre El regulador de pH de acetato (pH 5-5.5) se preparó añadiendo 400 ml de agua a un contenedor adecuado seguido por 5.5 g de acetato de sodio y se agitó para formar una solución. A esta solución se añadió ácido acético 0.05 M (300 ml) y se agitó para formar regulador de pH de acetato (pH 5-5.5). A un matraz de 2 litros se cargaron 600 ml de acetona, seguido por 545 ml de regulador de pH de acetato (pH 5-5.5). La mezcla se agitó para formar una solución homogénea como 1.1 :1 de acetona-regulador de pH de acetato (pH 5-5.5). A un matraz de 1 litro se cargaron 500 g de solución madre de CCI-779 (solvente de éter dietílico) (la prueba contenía 7.9% de CCI-779 con una relación isomérica de B:C = 1.6:1. La solución madre se concentró bajo presión reducida para obtener 49.85 g de producto como una espuma. La espuma se disolvió en 750 ml de regulador de pH de acetato 1.1 :1 y se mezcló bajo nitrógeno a 20 a 25°C durante un mínimo de 24 horas con el progreso de la reacción monitoreado por CLAR. Después de un día, la relación de B:C de una muestra en tratamiento fue de 8.1 :1 y 9:1 después de 48 horas. La relación de los dos isómeros siguió siendo la misma después de 48 horas. La mezcla de reacción se diluyó con 1200 ml de acetato de etilo y se lavó con 300 ml de salmuera. La capa acuosa se separó y se extrajo con 300 ml de acetato de etilo. Las capas orgánicas se combinaron y se lavaron con agua (300 ml) y salmuera (300 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y después se concentró bajo presión reducida para obtener 45.45 g de producto como una espuma de color amarillo pálido. La espuma se recristalizó a partir de éter (180 ml). El producto se secó en un horno bajo vacío a 50-55°C a peso constante para obtener 22.5 g de producto como un sólido blanco con una pureza de 93.2% (isómero B+C) y una relación isomérica de B:C = 57:1. El rendimiento de recuperación fue de 57%. La solución madre se concentró bajo presión reducida para obtener 19.5 g de producto como una espuma de color amarillo claro con isómeros B:C -3.3:1. La espuma se trató con 300 ml de acetona-regulador de pH de acetato a 20 a 25°C durante 48 horas. La mezcla de reacción se diluyó con 450 ml de acetato de etilo y se lavó con 150 ml de salmuera. La capa acuosa se separó y se extrajo con 150 ml de acetato de etilo. Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con agua (200 ml), salmuera (200 ml), y se secaron sobre sulfato de sodio. Después de concentrarse bajo presión reducida, 17.24 g de producto se obtuvo como una espuma de color amarillo claro con una relación de isómero B:C de 9:1. Ese material se puede recristalizar a partir de éter para obtener más CCI-779 cristalino como se describe en el ciclo del procedimiento. Todas las patentes, publicaciones y otros documentos identificados aquí se incorporan por referencia. Un experto en la técnica reconocerá que modificaciones menores a las condiciones y técnicas descritas en las modalidades específicas aquí descritas se pueden variar sin apartarse de la presente invención. Dichas modificaciones y variantes menores están dentro del alcance de la invención como lo definen las siguientes reivindicaciones.

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Un procedimiento para recuperar CCI-779 a partir de soluciones madre, que comprende: (a) concentrar la solución madre; (b) someter CCI-779 obtenido al concentrar la solución madre a tratamiento con un regulador de ajuste de pH que tiene un pH en el intervalo de aproximadamente 5 a aproximadamente 5.5; (c) someter la mezcla a extracción con solvente; (d) secar y concentrar la capa orgánica resultante; y (e) recristalizar el CCI-779.

2.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque los pasos (a) a (d) se repiten usando la solución madre obtenida del paso (e).

3.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el rendimiento combinado final excede 95%.

4.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el rendimiento combinado final excede 98%.

5.- El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado además porque el regulador de ajuste de pH comprende acetato de sodio, acetato de potasio o acetato de zinc.

6.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado además porque el regulador de ajuste de pH comprende acetato de sodio.

7.- El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizado además porque el regulador de ajuste de pH se usa con acetona, tetrahidrofurano, acetonitrilo o ácido acético como solvente.

8.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado además porque el regulador de ajuste de pH se usa con acetona como solvente.

9.- El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizado además porque un éter se usa en recristalización.

10.- El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizado además porque éter dietílico, éter t-butilmetílico, acetonitrilo, una mezcla de éter con hexanos o heptano, o una mezcla de éter t-butilmetílico con hexanos o heptano se usa como solvente para recristalización.

11.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado además porque el solvente es éter dietílico.

12.- El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 , caracterizado además porque comprende los pasos de: (f) precipitar el CCI-779; y (g) secar el CCI-779 bajo vacío.

13.- El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, caracterizado además porque el CCI-779 producido por el mismo tiene una relación isomérica de B:C mayor que 30:1.

14.- El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, caracterizado además porque el CCI-779 producido por el mismo tiene una relación isomérica de B:C mayor que 45:1.

15.- El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, caracterizado además porque se usa acetato de etilo como solvente para la extracción con solvente.