MX2007010603A - Terapia de cancer de prostata con anticuerpos contra ctla4 y terapia hormonal. - Google Patents

Abstract

La invencion se refiere a metodos para tratar cancer de prostata que comprenden la administracion de un anticuerpo anti-CTLA4, o una parte de union a antigeno del mismo, particularmente un anticuerpo humano contra CTLA4 humano, por ejemplo, el anticuerpo 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, ticilimumab (tambien conocido como 11.2.1), 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1 e ipilimumab (tambien conocido como MDX-010 Y 10D1), en combinacion con terapia hormonal. Los agentes de terapia hormonal incluyen, entre otros, un anti-androgeno (por ejemplo, megestrol, ciproterona, flutamida, nilutamida y bicalutamida), un antagonista de GnRH (por ejemplo, abarelix e histrelin), y un agonista de LH-RH (por ejemplo, leuprolida, goserelina y buserelina). La invencion se refiere a terapia neoadyuvante, terapia adyuvante, terapia para la elevacion de PSA, terapia de primera linea, terapia de segunda linea y terapia de tercera linea de cancer de prostata, ya sea localizado o metastasico.

Description

TERAPIA DE CÁNCER DE PRÓSTATA CON ANTICUERPOS CONTRA CTLA4 Y TERAPIA HORMONAL CAMPO DE LA INVENCIÓN La invención se refiere a métodos para tratar el cáncer de próstata que comprenden la administración de un anticuerpo anti-CTLA4, o una parte de unión a antígeno del mismo, particularmente un anticuerpo humano contra CTLA4 humano, por ejemplo, el anticuerpo 3.1.1 , 4.1.1 , 4.8.1 , 4.10.2, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1, ticilimumab (también conocido como 11.2.1 ), 11.6.1 , 11.7.1 , 12.3.1.1 , 12.9.1.1 e ipilimumab (también conocido como MDX-010 y 10D1 ), en combinación con terapia hormonal incluyendo agentes de terapia hromonal tales como un anti-andrógeno (por ejemplo, megestrol, ciproterona, flutamida, nilutamida y bicalutamida), un antagonista de GnRH (por ejemplo, abarelix e histrelin), y un agonista de LH-RH (por ejemplo, leuprolida, goserelina y buserelina).

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Debido a la ausencia de tratamientos eficaces, el cáncer de próstata ahora es la segunda causa más habitual de muerte por cáncer en hombres. Aproximadamente un tercio de los hombres que se someten a una prostatectomía radical para cáncer de próstata clínicamente localizado necesitarán tratamiento para cáncer de próstata recurrente en cinco años (Syed et al., Urol. Oncol. 21:235:243 (2003)). Los pacientes que sufren reaparición bioquímica (es decir, aquellos que tienen un aumento en su nivel de antígeno específico de próstata [PSA] después de la cirugía o después de una radioterapia) reciben cada vez más terapia con hormonas (HT, también mencionado en este documento como "terapia de supresión de andrógenos", "terapia de ablación de andrógenos" y "terapia anti-andrógenos"). Como alternativa, puede retrasarse la terapia hormonal hasta que aparezcan pruebas clínicas de enfermedad metastásica. Finalmente, la mayoría de los pacientes llegarán a ser refractarios a la terapia hormonal, y muchos morirán debido a las progresiones del cáncer. De esta manera, a pesar de los avances, incluyendo la terapia hormonal, desde hace mucho tiempo se siente la necesidad no satisfecha de nuevos métodos de tratamiento para el cáncer de próstata.

Los agentes antitumorales actuales funcionan por medio de una diversidad de mecanismos que inhiben el crecimiento y división de células cancerosas, destruyendo en última instancia las células malignas. Sin embargo, como estos agentes citotóxicos generalmente no son selectivos para células neoplásicas, destruyen células normales, alteran las funciones fisiológicas y, a menudo, están asociados con efectos adversos. Un enfoque alternativo a la terapia del cáncer es fijar como objetivo el sistema inmune ("inmunoterapia") en lugar del propio tumor, de modo que el sistema inmune del propio paciente ataque a los tumores evitando las células no tumorales.

Un enfoque de la inmunoterapia para el cáncer fija como objetivo el antígeno 4 asociado a linfocitos T citotóxicos (CTLA4; CD152), que es un receptor de la superficie celular expresado en células T activadas. La unión de CTLA4 a sus ligandos naturales, B7.1 (CD80) y B7.2 (CD86), suministra una señal reguladora negativa a las células T, y el bloqueo de esta señal negativa provoca una función inmune de células T y actividad tumoral potenciadas en modelos animales (Thompson y Allison, Immunity 7:445-450 (1997); McCoy y LeGros, Immunol. & Cell Biol. 77:1-10 (1999)). Varios estudios han demostrado que el bloqueo de CTLA4 usando anticuerpos potencia de manera notable la eliminación de tumores mediada por células T y puede inducir inmunidad antitumoral (Leach et al., Science 271 :1734-1736 (1996); Kwon et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA. 94:8099-8103 (1997); Kwon et al., Nati. Acad. Sci. USA 96:15074-15079 (1999)).

Los anticuerpos anti-CXLA4 son muy prometedores en el tratamiento de cánceres, pero desde hace mucho tiempo se siente la necesidad de desarrollar nuevas inmunoterapias para tratar tumores con dichos anticuerpos reduciendo los efectos secundarios citotóxicos de los agentes quimioterapéuticos actuales. La presente invención satisface esta necesidad.

SUMARIO DE INVENCIÓN La invención incluye un método para el tratamiento de cáncer de próstata en un paciente en necesidad de dicho tratamiento. El método comprende administrar al paciente a) una cantidad de un agente de terapia hormonal y b) una cantidad de un anticuerpo, o parte de unión a antígeno del mismo, que se une a CXLA4 humano, donde el anticuerpo o la parte se administra primero más de un día y menos de veintiocho días después de la administración del agente de terapia hormonal, y donde las cantidades son eficaces en combinación para el tratamiento.

En una realización, el anticuerpo o parte del mismo se administran más de dos días después de la administración del agente de terapia hormonal.

En otra realización, el anticuerpo o parte del mismo se administra menos de veintiún días después de la administración del agente de terapia hormonal.

En una realización adicional, la administración del agente de terapia hormonal termina antes de la primera administración del anticuerpo o parte del mismo.

En otra realización más, el agente de terapia hormonal se selecciona entre el grupo consistente en un anti-andrógeno, un antagonista de la hormona de liberación de gonadotropina (GnRH) y un agonista de la hormona de liberación de hormona luteinizante (LH-RH).

En otra realización, el cáncer se selecciona entre un cáncer dependiente de hormonas y un cáncer independiente de hormonas.

En una realización, el cáncer es independiente de hormonas y la administración de la terapia hormonal termina antes de la primera administración del anticuerpo o parte del mismo.

En otra realización, el anticuerpo se administra de acuerdo con un régimen seleccionado entre la administración de aproximadamente 10 mg/kg cada veintiocho días y la administración de aproximadamente 15 mg/kg cada tres meses En otra realización, el anticuerpo ant?-CTLA4, o parte de unión a antígeno del mismo, es al menos un anticuerpo seleccionado entre el grupo consistente en (a) un anticuerpo humano que tiene una afinidad de unión para CTLA4 de aproximadamente 10'8 o superior, y que inhibe la unión entre CTLA4 y B7-1 , y la unión entre CTLA4 y B7-2, (b) un anticuerpo humano que tiene una secuencia de aminoácidos que comprende al menos una secuencia de CDR humana que corresponde a una secuencia de CDR de un anticuerpo seleccionado entre el grupo consistente en 4 1 1 , 4 8 1 , 4 102, 4.13 1 , 4 14 3, 6 1 1 , ticilimumab, 11 6 1 , 11 7 1 , 12 3 1 1 , 12 9 1 1 e ipilimumab, (c) un anticuerpo humano que tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de un anticuerpo seleccionado entre el grupo consistente en 4 1 1 , 4 8 1 , 4 10 2, 4 13 1 , 4 14 3, 6 1 1, t?c?l?mumab, 11 6 1 , 11 7 1 , 12 3 1 1, 12 9 1 1 e ipilimumab, (d) un anticuerpo humano que tiene las secuencias de aminoácidos de una región variable de cadena pesada y una región variable de cadena ligera de un anticuerpo seleccionado entre el grupo consistente en 4 1 1, 4 8 1, 4 10 2, 4 13 1, 4 14 3, 6 1 1 , ticilimumab, 11 6 1, 11 7 1 , 12 3 1 1 , 12 9 1 1 e ipilimumab, (e) un anticuerpo, o parte de unión a antígeno del mismo, que compite por la unión a CTLA4 con al menos un anticuerpo que tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de un anticuerpo seleccionado entre el grupo consistente en 4 1 1 , 4 8 1, 4 102, 4 13 1 , 4 14 3, 6 1 l . tici mumab, 11 6 1 , 11 7 1 , 12 3 1 1 , 12 9 1 1 e ipilimumab, y (f) un anticuerpo, o parte de unión a antígeno del mismo, que compite de manera cruzada por la unión a CTLA4 con al menos un anticuerpo que tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de un anticuerpo seleccionado entre el grupo consistente en 4 1 1, 4 8 1 , .10.2, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1 , 11.7.1., 12.3.1.1 , 12.9.1.1 e ipilimumab.

En otra realización, el anticuerpo es un anticuerpo humano que tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera del anticuerpo ticilimumab.

En otra realización más, el anticuerpo comprende una cadena pesada y una cadena ligera donde las secuencias de aminoácidos de la región variable de cadena pesada de la cadena pesada y la región variable de cadena ligera de la cadena ligera se seleccionan entre el grupo consistente en: (a) la secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 3 y la secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 9; (b) la secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 15 y la secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 21 ; (c) la secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 27 y la secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 33; (d) la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia de ácido nucleico de la SEC ID N°: 1 y la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia de ácido nucleico de la SEC ID N°: 7; (e) la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia de ácido nucleico de la SEC ID N°: 13 y la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia de ácido nucleico de la SEC ID N°: 19; (f) la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia de ácido nucleico de la SEC ID N°: 25 y la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia de ácido nucleico de la SEC ID N°: 31 ; (g) la secuencia de aminoácidos de una región variable de cadena pesada y una región variable de cadena ligera del anticuerpo ipilimumab.

En una realización, el anticuerpo o parte de unión a antígeno del mismo, es un anticuerpo seleccionado entre el grupo consistente en: (a) un anticuerpo que tiene una región variable de cadena pesada que comprende las secuencias de aminoácidos expuestas en la SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5 y SEC ID N°: 6 y que tiene adicionalmente una región variable de cadena ligera que comprende las secuencias de aminoácidos expuestas en la SEC ID N°: 10, SEC ID N°: 11 y SEC ID N°: 12; (b) un anticuerpo que tiene una región variable de cadena pesada que comprende las secuencias de aminoácidos expuestas en la SEC ID N°: 16, SEC ID N°: 17 y SEC ID N°: 18 y que tiene adicionalmente una región variable de cadena ligera que comprende las secuencias de aminoácidos expuestas en la SEC ID N°: 22, SEC ID N°: 23 y SEC ID N°: 24; (c) un anticuerpo que tiene una región variable de cadena pesada que comprende las secuencias de aminoácidos expuestas en la SEC ID N°: 28, SEC ID N°: 29 y SEC ID N°: 30, y que tiene adicionalmente una región variable de cadena ligera que comprende las secuencias de aminoácidos expuestas en SEC ID N°: 34, SEC ID N°: 35 y SEC ID N°: 36; y (d) un anticuerpo que tiene una región variable de cadena pesada que comprende las secuencias de aminoácidos de la CDR1, CDR2 y CDR3 de cadena pesada del anticuerpo ipilimumab, que tiene adicionalmente una región variable de cadena ligera que comprende las secuencias de aminoácidos de la CDR1 , CDR2 y CDR3 de cadena ligera del anticuerpo ipilimumab.

La invención incluye un método para el tratamiento de un cáncer de próstata independiente de hormonas en un paciente en necesidad de dicho tratamiento. El método comprende administrar al paciente una cantidad de un anticuerpo que se une a CTLA4 humano, o la parte de unión a antígeno del mismo, y una cantidad de un agente de terapia hormonal, donde el agente de terapia hormonal se administra en múltiples dosis durante un periodo de tiempo superior a un mes y donde. el anticuerpo, o parte del mismo, se administra durante el periodo de administración del agente de terapia hormonal, y donde las cantidades son eficaces en combinación para el tratamiento.

En una realización, el agente de terapia hormonal se administra durante un periodo superior a dos meses.

En otra realización, el método comprende adicionalmente administrar múltiples dosis del anticuerpo, o una parte del mismo, durante un periodo superior a un mes que solapa con el periodo de administración del agente de terapia hormonal.

En otra realización, el periodo de administración del anticuerpo, o parte del mismo, y el período de administración del agente de terapia hormonal solapan en más de dos meses.

En otra realización más, las múltiples dosis del anticuerpo, o parte del mismo, y el periodo de administración del agente de terapia hormonal solapan en más de seis meses.

La invención incluye un método para el tratamiento de un cáncer de próstata dependiente de hormonas en un paciente en necesidad de dicho tratamiento. El método comprende coadministrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo anti-CTLA4, o la parte de unión a antígeno del mismo, y una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos dos agentes de terapia hormonal, donde el agente se selecciona entre el grupo consistente en un anti- andrógeno, un antagonista de la hormona de liberación de gonadotropina (GnRH), y un agonista de la hormona de liberación de hormona luteinizante (LH-RH). ° En una realización, el anti-andrógeno es bicalutamida y el agonista es leuprolida.

La invención incluye una composición farmacéutica para el tratamiento del cáncer de próstata. La composición comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo anti- CTLA4, o la parte de unión a antígeno del mismo, y una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos dos agentes de terapia hormonal, donde el agente de terapia hormonal se selecciona entre el grupo consistente en un anti-andrógeno, un antagonista de la hormona de liberación de gonadotropina (GnRH) y un agonista de la hormona de liberación de hormona luteinizante (LH-RH).

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS El resumen anterior, así como la siguiente descripción detallada de la invención, se entenderán mejor cuando se lean junto con los dibujos adjuntos. Con el fin de ilustrar la invención, la realización o realizaciones que actualmente se prefieren se muestran en dibujos. Debe entenderse, sin embargo, que la invención no se limita a los preparativos precisos y medios mostrados.

En los dibujos: La Figura 1 , que comprende las Figuras 1-1C, muestra las secuencias de nucleótidos y aminoácidos para el anticuerpo anti-CTLA4 4.1.1. La Figura 1 muestra la secuencia de nucleótidos de longitud completa para la cadena pesada de 4.1.1 (SEC ID N°: 1). La Figura 1A muestra la secuencia de aminoácidos de longitud completa para la cadena pesada de 4.1.1 (SEC ID N°: 2) y la secuencia de aminoácidos para la región variable de cadena pesada de 4.1.1. (SEC ID N°: 3) señalada entre corchetes "[ ]", y la secuencia del péptido señal se indica en el extremo amino terminal fuera del corchete "[". La secuencia de aminoácidos para cada CDR de cadena pesada de 4.1.1 está subrayada. Las secuencias de CDR son las siguientes: CDR1 : GFTFSSHGMH (SEC ID N°: 4); CDR2: VIWYDGRNKYYADSV (SEC ID N°: 5); y CDR3: GGHFGPFDY (SEC ID N°: 6). La Figura 1B muestra la secuencia de nucleótidos para la cadena ligera 4.1.1. (SEC ID N°: 7). La Figura 1C muestra la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de 4.1.1 de longitud completa (SEC ID N°: 8) y la región variable indicada entre corchetes "[ ]" (SEC ID N°: 9) y la secuencia del péptido señal se indica en el extremo amino fuera del corchete "[". La secuencia de aminoácidos de cada CDR se indica del siguiente modo: CDR1 ; RASQSISSSFLA (SEC ID N°: 10); CDR2: GASSRAT (SEC ID N°: 11); y CDR3: QQYGTSPWT (SEC ID N°: 12).

La Figura 2, que comprende las Figuras 2-2C, muestra las secuencias de nucleótidos y aminoácidos para el anticuerpo anti-CTLA4 4.13.1. La Figura 2 muestra la secuencia de nucleótidos de longitud completa para la cadena pesada de 4.13.1 (SEC ID N°: 13). La Figura 2A muestra la secuencia de aminoácidos de longitud completa para la cadena pesada de 4.13.1 (SEC ID N°: 14), y la secuencia de aminoácidos para la región variable de cadena pesada de 4.13.1 (SEC ID N°: 15) señalada entre corchetes "[ ]". La secuencia de aminoácidos de cada CDR de cadena pesada de 4.13.1 está subrayada. Las secuencias de CDR son las siguientes: CDR1 : GFTFSSHGIH (SEC ID N°: 16); CDR2: VIWYDGRNKDYADSV (SEC ID N°: 12); y CDR3: VAPLGPLDY (SEC ID N°: 18). La Figura 2B muestra la secuencia de nucleótidos para la cadena ligera de 4.13.1 (SEC ID N°: 19). La Figura 2C muestra la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de 4.13.1 de longitud completa (SEC ID N°: 20) y la región variable indicada entre corchetes "[ ]" (SEC ID N°: 21). La secuencia de aminoácidos de cada CDR se indica del siguiente modo: CDR1: RASQSVSSYLA (SEC ID N°: 22); CDR2: GASSRAT (SEC ID N°: 23); y CDR3: QQYGRSPFT (SEC ID N°: 24).

La Figura 3, que comprende las Figuras 3-3C, muestra las secuencias de nucleótidos y aminoácidos para el anticuerpo anti-CTLA4 11.2.1 , ahora denominado ticilimumab. La Figura 3 muestra la secuencia de nucleótidos de longitud completa para la cadena pesada de 11.2.1. (SEC ID N°: 25). La Figura 3A muestra la secuencia de aminoácidos de longitud completa para la cadena pesada de 11.2.1 (SEC ID N°: 26), y la secuencia de aminoácidos para la región variable de cadena pesada de 11.2.1 (SEC ID N°: 27) señalada entre corchetes "[ ]". La secuencia de aminoácidos de cada CDR de cadena pesada de 11.2.1 está subrayada. Las secuencias de las CDR son las siguientes: CDR1 : GFTFSSYGMH (SEC ID N°: 28); CDR2: VIWYDGSNKYYADSV (SEC ID N°: 29); y CDR3: DPRGATLYYYYYGMDV (SEC ID N°: 30). La Figura 3B muestra la secuencia de nucleótidos para la cadena ligera de 11.2.1 (SEC ID N°: 31). La Figura 3C muestra la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de 11.2.1 de longitud completa (SEC ID N°: 32), y la región variable indicada entre corchetes "[ ]" (SEC ID N°: 33). La secuencia de aminoácidos de cada CDR se indica del siguiente modo: CDR1 : RASQSINSYLD (SEC ID N°: 34); CDR2: AASSLQS (SEC ID N°: 35); y CDR3: QQYYSTPFT (SEC ID N°: 36).

La Figura 4 representa una fotografía que demuestra el efecto de terapia neoadyuvante de combinación de anticuerpo y terapia hormonal sobre tejido de próstata.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La invención se refiere en diversas realizaciones a usos de anticuerpos anti-CTLA4 en combinación con al menos un agente de terapia hormonal para tratar un cáncer de próstata en un paciente en necesidad de dicho tratamiento.

Salvo que se defina de otra manera en este documento, los términos científicos y técnicos usados en relación con la presente invención tendrán los significados conocidos habitualmente por los especialistas en la técnica. Además, salvo que se requiera otra cosa por el contexto, los términos singulares incluirán pluralidades y los términos plurales incluirán el singular. En líneas generales, las nomenclaturas usadas en relación con, y las técnicas de, cultivo celular y tisular, biología molecular, inmunología, microbiología, genética y química de proteínas y ácidos nucleicos e hibridación descritas en este documento son las que son bien conocidas y usadas habitualmente en la técnica.

Los métodos y técnicas de la presente invención se realizan en líneas generales de acuerdo con métodos bien conocidos en la técnica y como se describe en diversas referencias generales y más específicas que se citan y analizan a lo largo de la presente memoria descriptiva salvo que se indique otra cosa. Dichas referencias incluyen, por ejemplo, Sambrook y Russell, Molecular Cloning, A Laboratory Approach, Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, NY (2001), Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, NY (2002), y Harlow y Lañe Antibodies: A Laboratory Manual; Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, Y (1990), que se incorporan en este documento como referencia. Las reacciones enzimáticas y técnicas de purificación se realizan de acuerdo con las especificaciones del fabricante, como se realizan habitualmente en la técnica o como se descríbe en este documento. Las nomenclaturas usadas en relación con, y los procedimientos de laboratorio y técnicas de química analítica, química orgánica sintética y química médica y farmacéutica descritos en este documento son los que son bien conocidos y usados habitualmente en la técnica. Para síntesis química, análisis químico, preparación farmacéutica, formulación y suministro, y para el tratamiento de pacientes, se usan técnicas convencionales.

Como se usa en este documento, cada uno de los siguientes términos tiene el significado asociado con el mismo en esta sección.

Los artículos "un" y "una" se usan en este documento para referirse a uno o más de uno (es decir, al menos uno) del objeto gramatical del artículo. A modo de ejemplo "un elemento" significa un elemento o más de un elemento.

Como se usa en este documento, los veinte aminoácidos convencionales y sus abreviaturas siguen el uso convencional. Véase lmmunology--A Synthesís (2a Edición, E.S. Golub y D.R. Gren, Eds., Sinauer Associates, Sunderland, Mass. (1991)), que se incorpora en este documento como referencia.

Una "sustitución de aminoácidos conservativa" es una en la que un resto de aminoácido se sustituye por otro resto de aminoácido que tiene un grupo R de cadena lateral con propiedades químicas similares (por ejemplo, carga o hidrofobia). En general, una sustitución de aminoácidos conservativa no cambiará de manera sustancial las propiedades funcionales de una proteína. En casos en los que dos o más secuencias de aminoácidos difieren entre sí por sustituciones conservativas, el porcentaje de identidad o grado de similitud de secuencia puede ajustarse al alza para corregir la naturaleza conservativa de la sustitución. Los medios para realizar este ajuste son bien conocidos para los especialistas en la técnica. Véase, por ejemplo, Pearson, Methods Mol. Biol. 243:307-31 (1994).

Los ejemplos de grupos de aminoácidos que tienen cadenas laterales con propiedades químicas similares incluyen 1) cadenas laterales alifáticas: glicina, alanina, valina, leucina e isoleucina; 2) cadenas laterales hidroxil-alifáticas: serina y treonina; 3) cadenas laterales que contienen amida: asparagina y glutamina; 4) cadenas laterales aromáticas: fenilalanina, tirosina y triptófano; 5) cadenas laterales básicas: lisina, arginina e histidina; 6) cadenas laterales acidas: ácido aspártico y ácido glutámico; y 7) cadenas laterales que contienen azufre: cisteína y metionina. Los grupos de sustitución de aminoácidos conservativa preferidos son: valina-leucina-isoleucina, fenilalanina-tirosina, lisina-arginina, alanina-valina, glutamato-aspartato y asparagina-glutamina.

Como alternativa, un reemplazo conservativo es cualquier cambio que tiene un valor positivo en la matriz de probabilidad logarítmica PAM250 descrita en Gonnet et al., Science, 256:1443-45 (1992), incorporada en este documento como referencia. Un reemplazo "moderadamente conservativo" es cualquier cambio que tiene un valor no negativo en la matriz de probabilidad logarítmica PAM250.

Son sustituciones de aminoácidos preferidas aquellas que: (1) reducen la susceptibilidad a la proteolisis, (2) reducen la susceptibilidad a la oxidación, (3) alteran la afinidad de unión para formar complejos proteicos y (4) confieren o modifican otras propiedades físico-químicas o funcionales de dichos análogos. Los análogos que comprenden sustituciones, deleciones y/o inserciones pueden incluir diversas muteínas de una secuencia distinta de la secuencia peptídica especificada. Por ejemplo, pueden hacerse sustituciones de aminoácidos únicas o múltiples (preferiblemente sustituciones de aminoácidos conservativas) en la secuencia especificada (preferiblemente en la parte del polipéptido fuera del dominio o dominios que forman contactos intermoleculares, por ejemplo, fuera de las CDR). Una sustitución de aminoácidos conservativa no debe cambiar de manera sustancial las características estructurales de la secuencia parental (por ejemplo, un aminoácido de reemplazo no debe tender a romper una hélice que existe en la secuencia parental, o alterar otros tipos de estructura secundaria que caracteriza a la secuencia parental). Se describen ejemplos de estructuras secundarias y terciarias de polipéptidos reconocidas en la técnica en Proteins, Structures and Molecular Principies (Creighton, Ed., W. H. Freeman and Company, New York (1984)); Introduction to Protein Structure (C. Branden y J. Xooze, eds., Garland Publishing, New York, N.Y. (1991); y Thornton et al., Nature, 354:105 (1991), que se incorporan en este documento como referencia.

La similitud de secuencia para polipéptidos típicamente se mide usando un software de análisis de secuencia. Los softwares de análisis de proteínas hacen coincidir secuencias similares usando medidas de similitud asignadas a diversas sustituciones, delecíones y otras modificaciones, incluyendo sustituciones de aminoácidos conservativas. Por ejemplo, Genetics Computer Group (GCG disponible en Genetics Computer Group, Inc.), también denominado el Paquete Wisconsin, es un paquete de software integrado de más de 130 programas de acceso, análisis y manipulación de secuencias de nucleótidos y proteínas. GCG contiene programas tales como "Gap" y "Bestfit" que pueden usarse con parámetros por defecto para determinar la similitud, homología de secuencia y/o identidad de secuencia entre polipéptidos estrechamente relacionados, tales como polipéptidos homólogos de diferentes especies de organismos o entre una proteína de tipo silvestre y una muteína de la misma. Véase, por ejemplo, GCG versión 6.1 , versión 9.1 y versión 10.0.

Las secuencias polipeptídicas también pueden compararse usando FASTA usando parámetros por defecto o recomendados, un programa de GCG Versión 6.1. FASTA (por ejemplo, FASTA2 y FASTA3) proporciona alineamientos y el porcentaje de identidad de secuencia de las regiones del mejor solapamiento entre las secuencias cuestión y de búsqueda (Pearson, Methods Enzymol. 183:63-98 (1990); Pearson, Methods Mol. Biol. 132:185-219 (2000)). Otro algoritmo preferido cuando se compara una secuencia de la invención con una base de datos que contiene un gran número de secuencias de diferentes organismos es el programa informático BLAST, especialmente blastp o tblastn, usando parámetros por defecto. Véase, por ejemplo, Altschul et al., J. Mol. Biol. 215:403-410 (1990); Altschul et al., Nucleic Acids Res. 25:3389-402 (1997); incorporados en este documento como referencia.

Un "anticuerpo" intacto comprende al menos dos cadenas pesadas (H) y dos cadenas ligeras (L) interconectadas por puentes disulfuro. Véase, en líneas generales, Fundamental Immunology, Cap. 7 (Paul, W., ed., 2a ed. Raven Press, N.Y. (1989)) (incorporado como referencia en su totalidad para todos los propósitos). Cada cadena pesada está compuesta de una región variable de cadena pesada (HCVR o VH) y una región constante de cadena pesada (CH). La región constante de cadena pesada está compuesta de tres dominios, CH1 , CH2 y CH3. Cada cadena ligera está compuesta de una región variable de cadena ligera (LCVR o VL) y una región constante de cadena ligera. La región constante de cadena ligera está compuesta de un dominio, CL. Las regiones VH y VL pueden subdividirse adicionalmente en regiones de hipervariabilidad, denominadas regiones determinantes de complementariedad (CDR), intercaladas con regiones que están más conservadas, llamadas regiones flanqueantes (FR). Cada VH y VL está compuesta de tres CDR y cuatro FR, ordenados de amino-terminal a carboxi-terminal en el siguiente orden: FR1 , CDR1 , FR2, CDR2, FR3, CDR3 y FR4. La asignación de aminoácidos a cada dominio sucede de acuerdo con las definiciones de Kabat, Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, MD (1987 y 1991)), o Chothia & Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987); Chothia et al., Nature 342:878-883 (1989).

La expresión "parte de unión a antígeno" de un anticuerpo (o simplemente "parte de anticuerpo"), como se usa en este documento, se refiere a uno o más fragmentos de un anticuerpo que retienen la capacidad de unirse específicamente a un antígeno (por ejemplo, CTLA4). Se ha demostrado que la función de unión a antígeno de un anticuerpo puede realizarse por fragmentos de un anticuerpo de longitud completa. Los ejemplos de fragmentos de unión incluidos en la expresión "parte de unión a antígeno" de un anticuerpo incluyen (i) un fragmento Fab, un fragmento monovalente consistente en los dominios VL, VH, CL y CH1 ; (¡i) un fragmento F(ab')2, un fragmento bivalente que comprende dos fragmentos Fab unidos por un puente disulfuro en la región de bisagra; (iii) un fragmento Fd consistente en los dominios VH y CH1; (iv) un fragmento Fv consistente en los dominios VL y VH de un solo brazo de un anticuerpo, (v) un fragmento dAb (Ward et al., (1989) Nature 341:544-546), consistente en un dominio VH; y (vi) una región determinante de complementariedad aislada (CDR). Además, aunque los dos dominios del fragmento Fv, VL y VH, están codificados por genes distintos, pueden unirse, usando métodos recombinantes, mediante un enlazador sintético que permite que se obtengan como una sola cadena proteica en la que las regiones VL y VH se emparejan para formar moléculas monovalentes (conocido como Fv monocatenario (scFv)), véase, por ejemplo, Bird et al. Science 242:423-426 (1988) y Huston et al. Proc. Nati. Acad. Sci. USA 85:5879-5883 (1988)). Dichos anticuerpos monocatenarios también pretenden incluirse en la expresión "parte de unión a antígeno" de un anticuerpo. También se incluyen otras formas de anticuerpos monocatenarios, tales como diacuerpos. Los diacuerpos son anticuerpos bivalentes biespecíficos en los que los dominios VH y V se expresan en una única cadena polipeptídica, pero que usan un enlazador que es demasiado corto para permitir el emparejamiento entre los dos dominios de la misma cadena, forzando de este modo que los dominios se emparejen con dominios complementarios de otra cadena y creen dos sitios de unión a antígeno (véase, por ejemplo, Holliger et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 90:6444-6448 (1993); Poljak et al., Structure 2:1121-1123 (1994)).

Además, un anticuerpo o parte de unión a antígeno del mismo puede ser parte de moléculas de inmunoadhesión más grandes, formadas por asociación covalente o no covalente del anticuerpo o parte del anticuerpo con una o más proteínas o péptidos distintos. Los ejemplos de dichas moléculas de inmunoadhesión incluyen el uso de la región núcleo de estreptavidina para producir una molécula scFv tetramérica (Kipriyanov et al., Human Antibodies and Hybridomas 6:93- 101 (1995)) y el uso de un resto de cisteína, un péptido marcador y una señal de polihistidina C- terminal para producir moléculas scFv bivalentes y biotiniladas (Kipriyanov et al. Mol. Immunol. 31 :1047-1058, (1994)). Otros ejemplos incluyen, cuando se incorporan una o más CDR de un anticuerpo en una molécula de manera covalente o no covalente para producirlo, una inmunoadhesina que se une específicamente a un antígeno de interés, tal como CTLA4. En dichas realizaciones, la CDR o las CDR pueden incluirse como parte de una cadena polipeptídica más grande, pueden unirse de manera covalente a otra cadena polipeptídica, o pueden incorporarse de manera no covalente. Las partes de anticuerpo, tales como fragmentos Fab y F(ab')2, pueden prepararse a partir de anticuerpos enteros usando técnicas convencionales tales como digestión con papaína o pepsina, respectivamente, de anticuerpos enteros. Además, los anticuerpos, partes de anticuerpo y moléculas de inmunoadhesión pueden obtenerse usando técnicas de ADN recombinante convencionales, como se describe en este documento.

Cuando se menciona un "anticuerpo" en este documento con respecto a la presente invención, debe entenderse que también puede usarse una parte de unión a antígeno del mismo. Una parte de unión a antígeno compite con el anticuerpo intacto por la unión específica. Véase, en lineas generales, Fundamental Immunoloqy. Cap. 7 (Paul, W., ed., 2a ed. Raven Press, N.Y. (1989)) (incorporado como referencia en su totalidad para todos los propósitos). Las partes de unión a antígeno pueden producirse por técnicas de ADN recombinante o por escisión enzimática o química de anticuerpos intactos. En algunas realizaciones, las partes de unión a antígeno incluyen fragmentos Fab, Fab', F(ab')2, Fd, Fv, dAb y de regiones determinantes de complementariedad (CDR), anticuerpos monocatenarios (scFv), anticuerpos quiméricos, fragmentos bivalentes y polipéptidos que contienen al menos una parte de un anticuerpo que es suficiente para conferir unión con especificidad de antígeno al polipéptido. En realizaciones que tienen uno o más sitios de unión, los sitios de unión pueden ser idénticos entre sí o pueden ser diferentes.

Las expresiones "anticuerpo humano" o "anticuerpo de secuencia humana", usados indistintamente en este documento, ¡ncluyen anticuerpos que tienen regiones variables y constantes (si están presentes) derivadas de secuencias de inmunoglobulina de la línea germinal humana. Los anticuerpos de secuencia humana de la invención pueden incluir restos de aminoácidos no codificados por secuencias de inmunoglobulina de la línea germinal humana (por ejemplo, mutaciones introducidas por mutagénesis aleatoria o específica de sitio ¡n vitro o por mutación somática in vivo). Sin embargo, la expresión "anticuerpo humano", como se usa en este documento, no pretende incluir anticuerpos "quiméricos" en los que se han injertado secuencias de CDR derivadas de la línea germinal de otra especie de mamífero, tal como un ratón, en secuencias flanqueantes humanas (es decir, anticuerpos "humanizados" o PRIMATIZED™).

La expresión "anticuerpo quimérico", como se usa en este documento, significa un anticuerpo que comprende regiones de dos o más anticuerpos diferentes. En una realización, una o más de las CDR proceden de un anticuerpo anti-CTLA4 humano. En otra realización, todas las CDR proceden de un anticuerpo anti-CTLA4 humano. En otra realización, las CDR de más de un anticuerpo anti-CTLA4 humano se combinan en un anticuerpo humano quimérico. Por ejemplo, un anticuerpo quimérico puede comprender una CDR1 de la cadena ligera de un primer anticuerpo anti-CD40 humano, una CDR2 de la cadena ligera de un segundo anticuerpo anti-CTLA4 humano y una CDR3 de la cadena ligera de un tercer anticuerpo anti-CTLA4 humano, y las CDR de la cadena pesada pueden proceder de uno o más anticuerpos anti-CD40 distintos. Además, las regiones flanqueantes pueden proceder de uno de los mismos anticuerpos anti-CTLA4 o de uno o más seres humanos diferentes.

Además, como se ha descrito previamente en este documento, anticuerpo quimérico incluye un anticuerpo que comprende una parte procedente de las secuencias de la línea germinal de más de una especie.

Por la expresión "cantidad eficaz" o "cantidad terapéuticamente eficaz", como se usa en este documento, se entiende una cantidad que cuando se administra a un mamífero, preferiblemente un ser humano, media una respuesta terapéutica detectable en comparación con la respuesta detectada en ausencia del compuesto. Una respuesta terapéutica, tal como, aunque sin limitación, inhibición de y/o reducción del crecimiento tumoral, tamaño tumoral, metástasis y similares, puede evaluarse fácilmente por un conjunto de métodos reconocidos én la técnica, incluyendo, por ejemplo, métodos tales como los descritos en este documento.

El especialista en la técnica entenderá que la cantidad eficaz del compuesto o composición administrado en la presente invención varía, y puede determinarse fácilmente basándose en varios factores tales como la enfermedad o afección a tratar, la fase de la enfermedad, la edad, salud y el estado físico del mamífero a tratar, la gravedad de la enfermedad, el compuesto particular a administrar, y similares.

Por el término "coadministración", se entiende que la terapia hormonal y terapia de anticuerpo se administran al paciente de manera sustancialmente contemporánea. Es decir, la terapia hormonal y la terapia de anticuerpo se administran en el mismo día, o no transcurren más de 4 meses entre la administración de la dosis final de terapia hormonal en el ciclo de tratamiento (por ejemplo, una dosis alta de acetato de leuprolida para una suspensión de depósito que se administra típicamente cada 4 meses de modo que pueda persistir la exposición a la terapia hormonal) y la administración del anticuerpo, o no transcurren más de 3 meses entre la administración de una dosis de anticuerpo y la administración de terapia hormonal.

Por el término "competir", como se usa en este documento en relación con un anticuerpo, se entiende que un primer anticuerpo, o parte de unión a antígeno del mismo, compite por la unión con un segundo anticuerpo, o una parte de unión a antígeno del mismo, donde la unión del primer anticuerpo con su epítopo afín está disminuida de manera detectable en presencia del segundo anticuerpo en comparación con la unión del prímer anticuerpo en ausencia del segundo anticuerpo. Puede ocurrir una alternativa, cuando la unión del segundo anticuerpo a su epítopo también está disminuida de manera detectable en presencia del primer anticuerpo, pero necesariamente ocurre esto. Es decir, un primer anticuerpo puede inhibir la unión de un segundo anticuerpo a su epítopo sin que el segundo anticuerpo inhiba la unión del primer anticuerpo a su epítopo respectivo. Sin embargo, cuando cada anticuerpo inhibe de manera detectable la unión del otro anticuerpo con su epítopo afín o ligando, en la misma, en mayor o menor medida, se dice que los anticuerpos "compiten de manera cruzada" entre sí por la unión de su epítopo o epítopos respectivos. Por ejemplo, los anticuerpos que compiten de manera cruzada pueden unirse al epítopo, o parte del epítopo, al que se unen los anticuerpos usados en la invención. La presente invención incluye el uso tanto de anticuerpos que compiten como de anticuerpos que compiten de manera cruzada. Independientemente del mecanismo mediante el cual sucede dicha competición o competición cruzada (por ejemplo, impedimento estérico, cambio conformacional o unión a un epítopo común, o parte del mismo, y similares), el especialista en la técnica apreciará, basándose en las enseñanzas proporcionadas en este documento, que dichos anticuerpos competitivos y/o competitivos de manera cruzada están incluidos y pueden ser útiles para los métodos descritos en este documento.

El término "epítopo" incluye cualquier determinante proteico capaz de unirse específicamente a una inmunoglobulina o receptor de células T. Los determinantes de epítopos habitualmente consisten en agrupamientos superficiales químicamente activos de moléculas tales como aminoácidos o cadenas laterales de azúcar y habitualmente tienen características estructurales tridimensionales específicas, así como características de carga específicas. Los epítopos conformacionales y no conformacionales se distinguen en que la unión al primero pero no al último se pierde en presencia de disolventes desnaturalizantes.

"Terapia hormonal" o "supresión de andrógenos", usándose estas expresiones indistintamente en este documento, incluyen cualquier método que comprende la administración de un agente o compuesto mediante el cual se ve disminuido de manera detectable el nivel de un andrógeno (hormona esteroidea masculina, tal como, aunque sin limitación, testosterona y dihidrotestosterona) en comparación con el nivel del andrógeno en ausencia de, o antes de, la administración del agente o del compuesto. La terapia hormonal incluye, aunque sin limitación, el uso de anti-andrógenos, antagonistas de la hormona de liberación de gonadotropina y agonistas de la hormona de liberación de hormona luteinizante, y combinaciones de los mismos.

"Anti-andrógeno", como se usa este término en este documento, se refiere a cualquier agente o compuesto que bloquea de manera detectable un receptor de andrógenos en una célula de próstata, disminuyendo de este modo el nivel de andrógenos en un mamífero en comparación con el nivel de andrógenos en el mamífero antes de la administración del agente o compuesto y/o en comparación con el nivel de andrógenos en un mamífero idéntico de otro modo al que no se administra el agente o compuesto. Preferiblemente, el mamífero es un ser humano.

Un anti-andrógeno puede ser "no esteroideo" o "esteroideo", según se entienden estos términos en la técnica y se usan en este documento. Es decir, un antiandrógeno no esteroideo (por ejemplo, bicalutamida (CASODEX), nilutamida (NILANDRON), flutamida (EULEXIN, DROGENIL) y similares) se une de manera competitiva al receptor de andrógenos en una célula de próstata, inhibiendo el efecto estimulador de los andrógenos sobre la próstata. Los anti-andrógenos esteroideos (por ejemplo, megestrol (MEGACE) y ciproterorla (ANDROCUR)) no sólo inhiben la unión de andrógenos al receptor celular, sino que también disminuyen la liberación de LH desde la glándula pituitaria.

"Antagonista de la hormona de liberación de gonadotropina (GnRH)", como se usa en este documento, se refiere a un agente que se une a los receptores de GnRH (también conocida como LH-RH) en la glándula pituitaria, bloqueando de este modo los receptores sin provocar liberación de gonadotropina. Los antagonistas de GnRH incluyen, por ejemplo, abarelíx (PLENAXIS) e histrelin (SUPPRELIN). Los antagonistas de GnRH, a diferencia de los agonistas de LH-RH, no provocan una elevación detectable de testosterona.

La expresión "agonista de hormonas de liberación de la hormona luteinizante (LH-RH)", significa un agente o compuesto que disminuye de manera detectable la producción en la glándula pituitaria de al menos una hormona que estimula de otro modo la producción de testosterona en comparación con el nivel de producción en la pituitaria de dicha hormona en ausencia, o antes de la administración del agonista de LH-RH. Un agonista de LH-RH, según se usa este término en este documento, es un agente que provoca la superestimulación continua del receptor de LH-RH y la internalización del complejo de receptor y LH-RH haciendo de este modo que la célula de la pituitaria sea refractaria a una estimulación adicional debido a la presencia reducida del receptor en la célula. Esto, a su vez, provoca una disminución de LH y de la posterior secreción de testosterona. Los agonistas de LH-RH incluyen, aunque sin limitación, leuprorelina (leuprolida; LUPRON, ELIGARD), goserelina (ZOLADEX), buserelina (SUPREFACT), triptorelina (DECAPEPTIL) y similares.

Por la expresión "bloqueo máximo de andrógenos", se entiende la combinación de al menos un anti-andrógeno con al menos un agonista de LH-RH u orquiectomía para bloquear las hormonas androgénicas. En la expresión se incluye cualquier combinación de estos métodos y compuestos, incluyendo anti-andrógenos múltiples, agonistas de LH-RH múltiples y cualquier permutación de los mismos.

"Material de instrucciones", como se usa este término en este documento, incluye una publicación, un registro, un diagrama o cualquier otro medio de expresión que pueda usarse para comunicar la utilidad del compuesto, combinación y/o composición de la invención en el kit para influir, aliviar o tratar las diversas enfermedades o trastornos mencionados en este documento. Opcionalmente, o como alternativa, el material de instrucciones puede describir uno o más métodos para aliviar las enfermedades o trastornos en una célula, un tejido o un mamífero, incluyendo los descritos en otra parte en este documento.

El material de instrucciones del kit puede, por ejemplo, fijarse a un recipiente que contiene el compuesto y/o composición de la invención o adjuntarse junto con un recipiente que contiene el compuesto y/o composición. Como alternativa, el material de instrucciones puede adjuntarse por separado del recipiente con la intención de que el destinatario use el material de instrucciones y el compuesto de manera cooperativa.

Excepto cuando se indica, los términos "paciente" o "sujeto" se usan indistintamente y se refieren a mamíferos tales como pacientes humanos y primates no humanos, así como sujetos de veterinaria tales como conejos, ratas y ratones, y otros animales. Preferiblemente, paciente se refiere a un ser humano.

En este documento se usa la notación convencional para representar las secuencias polipeptídicas: el extremo que queda a la izquierda de una secuencia polipeptídica es el aminoterminal; el extremo que queda a la derecha de una secuencia polipeptídica es el carboxi-terminal.

Por la expresión "se une específicamente", como se usa en este documento, se entiende un compuesto, por ejemplo, una proteína, un ácido nucleico, un anticuerpo y similares, que reconoce y se une a una molécula específica, pero no reconoce o se une sustancíalmente a otras moléculas en una muestra. Por ejemplo, un anticuerpo o un inhibidor peptídico que reconoce y se une a un ligando afín (por ejemplo, un anticuerpo anti-CTLA4 que se une a su antígeno cognado, CTLA4) en una muestra, pero no reconoce o se une sustancialmente a otras moléculas en la muestra. De esta manera, en las condiciones de ensayo indicadas, el resto de unión especificado (por ejemplo, un anticuerpo o una parte de unión a antígeno del mismo) se une con preferencia a una molécula diana particular y no se une en una cantidad significativa a otros componentes presentes en una muestra de ensayo. Puede usarse una diversidad de formatos de ensayo para seleccionar un anticuerpo que se una específicamente a una molécula de interés. Por ejemplo, se usan inmunoensayo ELISA en fase sólida, inmunoprecipitación, análisis BIAcore y de transferencia de Western para identificar un anticuerpo que reaccione específicamente con CTLA4. Típicamente, una reacción específica o selectiva será de al menos dos veces la señal de fondo o interferencia y más típicamente de más de 10 veces la señal de fondo, incluso más específicamente, se dice que un anticuerpo "se une específicamente" a un antígeno cuando la constante de disociación en equilibrio (KD) es < 1 µM, preferiblemente < 100 nM y más preferiblemente < 10 nM.

El término "KD" se refiere a la constante de disociación en equilibrio de una interacción anticuerpo-antígeno particular.

Como se usa en este documento, "sustancialmente puro" significa que una especie objeto es la especie predominante presente (es decir, en una base molar es más abundante que cualquier otra especie individual en la composición), y preferiblemente una fracción sustancialmente purificada es una composición en la que la especie objeto (por ejemplo, un anticuerpo anti-CTLA4) comprende al menos aproximadamente 50 por ciento (en una base molar) de todas las especies macromoleculares presentes. Generalmente, una composición sustancialmente pura comprenderá más de aproximadamente 80 por ciento de todas las especies macromoleculares presentes en la composición, más preferiblemente más de aproximadamente 85%, 90%, 95% y 99%. Aún más preferiblemente, la especie objeto se purifica hasta una homogeneidad esencial (las especies contaminantes no pueden detectarse en la composición por métodos de detección convencionales) donde la composición consta esencialmente de una sola especie macromolecular.

Como se usa en este documento, "tratar" significa reducir la frecuencia con la que un paciente experimenta los síntomas de una enfermedad (es decir, crecimiento y/o metástasis tumoral, u otro efecto mediado por la cantidad y/o actividad de células inmunes, y similares). El término incluye la administración de los compuestos o agentes de la presente invención para evitar o retrasar la aparición de los síntomas, complicaciones o indicios bioquímicos de una enfermedad (por ejemplo, elevación del nivel de PSA), aliviar los síntomas o detener o inhibir el desarrollo adicional de la enfermedad, afección o trastorno. El tratamiento puede ser profiláctico (para evitar o retrasar la aparición de la enfermedad, o para evitar la manifestación de los síntomas clínicos o subclínicos de la misma) o supresión terapéutica o alivio de los síntomas después de la manifestación de la enfermedad.

I. Terapia de Combinación La invención se refiere a métodos descritos más adelante para la administración de un anticuerpo que se une a CTLA4 humano, o una parte de unión a antígeno del anticuerpo, en combinación con terapia hormonal para tratar el cáncer de próstata. Tanto si el cáncer de próstata es dependiente de hormonas como si es independiente de hormonas, la combinación del bloqueo de CTLA4 con la reducción en el nivel de andrógenos en un paciente de acuerdo con un método de la invención puede proporcionar un efecto terapéutico beneficioso sinérgico como se describe más adelante con más detalle.

Aunque la invención incluye numerosas terapias de combinación en las que el anticuerpo se administra al paciente en combinación con al menos un agente terapéutico hormonal para tumor de próstata, la presente invención no está limitada de forma alguna a los agentes ejemplificados, que se exponen en este documento sólo con fines ilustrativos.

En una realización de la invención, un anticuerpo anti-CTLA4, o parte de unión a antígeno del mismo, se administra más de un día y menos de veintiocho días después de la administración de un agente de terapia hormonal. La cantidad del agente de terapia hormonal y el anticuerpo son eficaces en combinación para el tratamiento de cáncer de próstata. La terapia hormonal puede administrarse antes de la administración de la terapia de anticuerpo independientemente del estado dependiente de hormonas del tumor. Por ejemplo, cuando el tumor es dependiente de hormonas, el estado dependiente de hormonas no se ha evaluado pero no se ha administrado ninguna terapia hormonal previa, o se sabe que el tumor es independiente de hormonas (también denominado "refractario a hormonas"), se administra un anticuerpo que se une a CTLA4 humano, o una parte de unión a antígeno del anticuerpo, más de un día y menos de veintiocho días después de la administración del agente de terapia hormonal. El agente incluye, aunque sin limitación, un anti-andrógeno, un antagonista de la hormona de liberación de gonadotropina (GnRH), y un agonista de la hormona de liberación de hormona luteinizante (LH-RH), o una combinación de los mismos.

En una realización, se media un efecto sinérgico o aditivo mediante la administración del anticuerpo anti-CTLA4 más de un día después de la administración de al menos un agente de terapia hormonal. Sin el deseo de limitarse por ninguna teoría particular de la invención, la terapia hormonal puede aumentar, quizás por cambios apoptóticos u otros cambios en la arquitectura en la próstata, la exposición del antígeno o antígenos con especificidad de tumor de próstata al sistema inmune de modo que aumenta la respuesta inmune contra las células tumorales. Es decir, la terapia hormonal puede crear o aumentar una fuente de antígeno con especificidad de tumor en el hospedador mediada por la muerte de células tumorales que, a su vez, puede suministrar antígeno tumoral a las rutas de presentación de antígeno del hospedador. El anticuerpo anti-CTLA4 media una respuesta inmune aumentada contra los niveles aumentados de antígenos con especificidad de tumor en la ruta de presentación de antígenos, proporcionando de este modo un efecto terapéutico sinérgico. Otras terapias de combinación que pueden provocar sinergia con potenciación de la respuesta inmune anti-CTLA4 por medio de la liberación por células muertas de antígenos con especificidad de tumor son radiación, cirugía y terapia hormonal, entre otras.

Además, una disminución en el nivel de andrógenos puede aumentar o prolongar una respuesta inmune en el paciente que puede mediarse por un efecto no específico de tumor, por ejemplo, disminuyendo el nivel de un andrógeno se puede mediar una potenciación de la respuesta inmune mediante un mecanismo no relacionado con un ataque sobre el tumor. Los datos presentados en este documento sugieren que puede haber una interacción biológica aparente entre el bloqueo de andrógenos y el anticuerpo anti-CTLA4 de la invención que conduce a una mayor gravedad de diarrea observada con el anticuerpo solo, lo que sugiere una eficacia aumentada de la terapia de combinación. Los estudios previos sugieren que los andrógenos pueden jugar un papel en el sistema inmune. Véase, en líneas generales, Grossman, Science 227:257-261 (1985) (que analiza la regulación del sistema inmune por esteroides de las gónadas); Olsen y Kovacs, Immunologic Res. 23:281-288 (2001 ) (que analiza los efectos de los andrógenos sobre el desarrollo de linfocitos T y B); Sutherland et al., J. Immunol. 175:2741-2753 (2005) (que indica la regeneración tímica después del bloqueo de andrógenos); Tanriverdi et al., J. Clin. Endocrinol. 176:293-304 (2003) (que analiza la interacción potencial entre el sistema inmune y GnRH y esteroides sexuales); y Mercader et al., Proc Nati Acad Sci USA 98:14565-14570 (2001) (que indica que la infiltración de células T de próstata está aumentada después de la retirada de andrógenos); Arlen et al., J. Urol 174:539-546 (2005) (que analiza la vacunación usando vectores de poxvirus que expresan el antígeno de próstata, PSA, en combinación con terapia hormonal).

Sin el deseo de limitarse por ninguna teoría de la invención, la combinación del bloqueo de andrógenos y anticuerpo anti-CTLA4 puede inducir una respuesta inmunológica más sólida en la próstata que la esperada. Por lo tanto, la combinación del bloqueo de andrógenos, usando, entre otros, una combinación de leuprolida y bicalutamida, en combinación con un anticuerpo anti-CTLA4, puede proporcionar un efecto sinérgico potencial proporcionando de este modo un nuevo tratamiento terapéutico importante para cáncer de próstata.

En una realización, la terapia de anticuerpo se administra menos de veintiocho días después de la terapia hormonal a un paciente que no ha recibido antes terapia hormonal. Esto puede hacerse cuando, por ejemplo, aún no se ha evaluado el estado dependiente de hormonas del tumor. La terapia de anticuerpo se administra al menos un día y menos de veintiocho días después de la administración de la terapia hormonal. Preferíblemente, la terapia hormonal se continúa a lo largo de todo el transcurso de la terapia de anticuerpo.

En otra realización, el anticuerpo, o parte del mismo, se administra menos de veintiún días después de la administración del agente de terapia hormonal. Además, en una realización de la presente invención, el anticuerpo, o parte de unión a antígeno del mismo, se administra más de dos días después de la administración del agente de terapia hormonal.

En otra realización más, el anticuerpo se administra más de un día y menos de veintiocho días después de la administración del agente de terapia hormonal, cuando la administración de terapia hormonal termina antes de la administración del anticuerpo. Es decir, el paciente no recibe terapia hormonal adicional una vez que se ha administrado el anticuerpo; sin embargo, pueden administrarse múltiples dosis del anticuerpo según se desee sin administración adicional de terapia hormonal. De manera similar, en otra realización, el anticuerpo se administra más de dos días y menos de veintiún días después de la administración del agente de terapia hormonal, y la administración de la terapia hormonal termina antes de la administración del anticuerpo.

En una realización, el cáncer de próstata es dependiente de hormonas, mientras que en otra realización, el cáncer independiente de hormonas. De esta manera, cuando se administra el anticuerpo más de un día y menos de veintiocho días después de la administración del agente de terapia hormonal, el cáncer de próstata puede ser dependiente de hormonas o independiente de hormonas. Dicha administración puede proporcionar un efecto terapéutico beneficioso sinérgico independientemente del estado hormonal del tumor.

Cuando el tumor es dependiente de hormonas, se puede administrar el agente de terapia hormonal. La terapia de anticuerpo se administra al paciente después de al menos un día y antes de veintiocho días desde la administración de una dosis de terapia hormonal, pudiendo continuar la terapia hormonal después de la administración del anticuerpo. De acuerdo con una teoría de la Invención, está terapia puede proporcionar un efecto beneficioso al paciente en el sentido de que la terapia puede proporcionar una mayor exposición del antígeno o antígenos con especificidad de tumor y/o reducir cualquier efecto regulador negativo inmune de los andrógenos de modo que se induzca y/o prolongue la respuesta inmune contra el tumor, proporcionando de este modo un efecto terapéutico beneficioso al paciente. La terminación de la terapia hormonal se ha asociado con la respuesta tumoral, por ejemplo, regresión tumoral, estabilización o disminución del nivel de PSA, disminución del dolor óseo y similares, lo que sugiere que el cese de la terapia hormonal está asociado con un cambio paradójico en el control del crecimiento tumoral que puede tener un efecto sinérgíco cuando se combina con una terapia de anticuerpo CTLA4 posterior, proporcionando de este modo un efecto terapéutico beneficioso.

En otra realización, cuando el tumor es independiente de hormonas, la terapia hormonal que comprende al menos un agente de terapia hormonal se co-administra con un anticuerpo anti-CTLA4. Incluso cuando un tumor es independiente de hormonas, la administración de la terapia reductora de andrógenos puede proporcionar un efecto terapéutico sinérgico o aditivo cuando se co-administra con una terapia de anticuerpo. Como se ha analizado previamente con más detalle, sin el deseo de limitarse por ninguna teoría particular de la invención, puede ser que la terapia hormonal que reduce los niveles de andrógenos medie una mayor exposición de antígenos tumorales al sistema inmune y/o reduzca cualquier efecto inmunosupresor que los andrógenos pudieran mediar de otro modo. Como alternativa, puede ser que la terapia hormonal que reduce los niveles de andrógenos medie un efecto en el timo que potencie la capacidad del sistema inmune de establecer una respuesta inmune adaptativa (véase, Sutherland et al., J. Immunol. 175:2741-2753 (2005)). Sin embargo, la invención incluye proporcionar un efecto terapéutico beneficioso a un paciente mediante cualquier mecanismo administrando dicha terapia de combinación.

En otra realización, la terapia de anticuerpo se administra antes de la administración de la terapia hormonal. Es decir, la terapia de anticuerpo puede administrarse una vez al mes, o como alternativa, una vez cada dos o tres meses, hasta que se consiga su efecto beneficioso máximo (por ejemplo, regresión tumoral, reducción del dolor óseo, disminución o estabilización del nivel de PSA, etc.) y después seguirse por una terapia hormonal adicional a la terapia de anticuerpo o la terapia de anticuerpo se detiene y después se administra la terapia hormonal. Esto es porque, debido a la prolongada vida media del anticuerpo y la persistencia de células T provocadas por la administración anterior de la terapia de anticuerpo, una HT adicional posterior, o la sustitución de la terapia de anticuerpo por HT, puede alterar la naturaleza y/o potenciar la respuesta inmune iniciada por anticuerpo. De esta manera, la invención incluye la administración de terapia de anticuerpo primero, preferiblemente durante un periodo prolongado (por ejemplo un mes, más preferiblemente dos meses, incluso más preferiblemente tres meses, y mucho más preferiblemente cuatro meses de terapia de anticuerpo), seguido de la co-administración de terapia hormonal o la sustitución de la terapia de anticuerpo por terapia hormonal.

En una realización, la terapia de anticuerpo es terapia neoadyuvante administrada antes de la cirugía. Después de la cirugía, se administra una terapia hormonal, en lugar de la terapia de anticuerpo continuada o junto con la terapia de anticuerpo continuada. Esto se debe a que, como se ha analizado previamente, la administración de terapia de anticuerpo antes de la terapia hormonal, seguida de terapia hormonal en ausencia de terapia de anticuerpo continuada o cuando la terapia hormonal se administra junto con la terapia de anticuerpo después de una prostatectomía, puede proporcionar un efecto terapéutico sinérgico a un paciente.

Como se ha indicado previamente en este documento, se conocen muchos agentes de terapia hormonal en la técnica, de modo que la invención incluye, aunque sin limitación, el uso de anti-andrógenos, antagonistas de GnRH y agonistas de LH-RH ejemplares. Los anti-andrógenos incluyen, por ejemplo, anti-andrógenos no esteroideos tales como, aunque sin limitación, bicalutamida (CASODEX), nilutamida (NILANDRON), flutamida (EULEXIN, DROGENIL) y anti- andrógenos esteroideos, incluyendo megestrol (MEGACE) y ciproterona (ANDROCUR). Los antagonistas de GnRH incluyen, entre otros, albarelix (PLENAXIS) e histrelin (SUPPRELIN). Los agonistas de LH-RH ¡ncluyen, por ejemplo, leuprorelina (leuprolída; LUPRON, ELIGARD), goserelina (ZOLADEX), buserelina (SUPREFACT), triptorelina (DECAPEPTYL), y similares.

En otra realización, el tratamiento de cáncer de próstata independiente de hormonas comprende administrar un anticuerpo, o una parte de unión a antígeno del mismo, y un agente de terapia hormonal a un paciente, donde la terapia hormonal se administra en múltiples dosis durante un periodo de tiempo superior a un mes y donde el anticuerpo, o la parte de unión a antígeno, se administra durante el periodo de administración de la terapia hormonal. Además, las cantidades son eficaces en combinación para el tratamiento del cáncer de próstata. Como se ha analizado anteriormente, de acuerdo con una teoría de la invención, incluso cuando el cáncer de próstata es independiente de hormonas, la combinación de terapia hormonal con terapia de anticuerpo puede mediar la exposición de antígenos tumorales y/o disminuir cualquier efecto inmunosupresor de los andrógenos de modo que la terapia hormonal combinada con el bloqueo de CTLA4 pueda proporcionar una respuesta inmune potenciada y/o prolongada en comparación con cualquier terapia sola.

En una realización, el agente de terapia hormonal se administra en múltiples dosis durante un periodo superior a dos meses. Además, en otra realización, durante el periodo superior a dos meses de administración de la terapia hormonal, se administran múltiples dosis del anticuerpo durante un periodo superior a un mes. El periodo de administración de múltiples dosis de anticuerpo durante un periodo superior a un mes puede solapar con el periodo de administración de la terapia hormonal. En otra realización, el periodo de administración de anticuerpo y el periodo de administración de terapia hormonal pueden solapar en más de dos meses. Además, en otra realización más, el periodo de administración de anticuerpo y el periodo de administración de terapia hormonal solapan en más de seis meses. Como se apreciaría por un especialista en la técnica que dispone de la descripción de este documento, el periodo de administración de terapia hormonal, así como el período de administración de anticuerpo, pueden solapar y ajustarse como se indica para proporcionar un efecto terapéutico beneficioso.

En otra realización, cuando se ha interrumpido la terapia hormonal anterior debido a que el tumor se considera independiente de hormonas, la terapia hormonal se vuelve a administrar (es decir, usando el mismo o un agente de terapia hormonal diferente al que se administró previamente) en combinación con el anticuerpo anti-CTLA4. En este caso, la terapia hormonal comprende administrar al menos un agente de terapia hormonal, por ejemplo, un anti-andrógeno y un agonista de LH-RH, un anti-andrógeno y un antagonista de GnRH y un anticuerpo anti-CTLA4 (por ejemplo, 4.1.1 , 4.13.1 , 6.1.1 , ticilímumab, ipilimumab), o una parte de unión a antígeno del mismo. Más preferiblemente, el agente de terapia hormonal incluye, aunque sin limitación, bicalutamida, flutamida, nilutamida y leuprolida, y se administra con el anticuerpo durante un periodo superior a un mes. En otra realización, se administran múltiples dosis del anticuerpo y el agente de terapia hormonal y el pepodo de administración del anticuerpo y la terapia hormonal solapan durante un periodo de al menos un mes.

En otra realización más, la terapia hormonal que comprende al menos dos agentes de terapia hormonal se co-administra con terapia de anticuerpo a un paciente en el que el tumor es dependiente de hormonas. Es decir, la terapia hormonal que comprende al menos dos agentes de terapia hormonal, que proporciona de este modo una terapia de ablación máxima de andrógenos, se administra a un paciente con cáncer de próstata dependiente de hormonas, habiéndose determinado el estado dependiente de hormonas del tumor y/o sin que se haya determinado el estado, pero sin que el paciente haya recibido una terapia hormonal anterior. Sin el deseo de limitarse por ninguna teoría de la invención, la terapia hormonal de ablación máxima de andrógenos co-administrada con la terapia de anticuerpo anti-CTLA4 puede proporcionar un efecto beneficioso al paciente en el sentido de que la combinación puede proporcionar una mayor exposición de antígeno o antígenos con especificidad de tumor y/o disminuir cualquier efecto inmunosupresor de los andrógenos de modo que se induzca y/o prolongue una respuesta inmune contra el tumor proporcionando de este modo un efecto terapéutico beneficioso al paciente.

Por lo tanto, en esta realización de la invención, cuando el cáncer de próstata es dependiente de hormonas, se administra una cantidad eficaz de al menos dos agentes de terapia hormonal seleccionados independientemente entre un anti-andrógeno, un antagonista de GnRH y un agonista de LH-RH, y una cantidad eficaz de un anticuerpo anti-CTLA4, o una parte de unión a antígeno del mismo, al paciente. La administración de los agentes de terapia hormonal y el anticuerpo pueden solapar y cada uno puede administrarse en múltiples dosis durante un periodo que puede, pero no tiene que, solapar. La duración del curso del tratamiento puede ajustarse como se indica y como entendería un especialista en la técnica de tratamiento de cáncer.

La administración del anticuerpo y los agentes de terapia hormonal, de manera contemporánea o secuencial, incluye administrar una composición farmacéutica que comprende tanto el anticuerpo anti-CTLA4 como uno o más agentes de terapia hormonal adicionales, y administrar dos o más composiciones farmacéuticas diferentes, comprendiendo una el anticuerpo anti-CTLA4 y comprendiendo la otra u otras los agentes de terapia hormonal adicionales. Además, aunque la co-administración o terapia de combinación (conjunta) incluye la administración al mismo tiempo, también incluye la dosificación simultánea, secuencial o por separado de los componentes individuales del tratamiento. Adicionalmente, cuando un anticuerpo se administra por vía intravenosa y el agente o agentes de terapia hormonal se administran por vía oral (por ejemplo, blcalutamida y similares), o por inyección subcutánea o intramuscular (por ejemplo, leuprolida), se entiende que la combinación puede administrarse como composiciones farmacéuticas separadas.

Cuando el tratamiento comprende co-administrar una combinación de un anticuerpo anti- CTLA4 y al menos dos agentes de terapia hormonal, los agentes pueden ser, entre muchos otros, un anti-andrógeno, un antagonista de la hormona de liberación de gonadotropina (GnRH) y un agonista de la hormona de liberación de hormona luteinizante (LH-RH). Muchos de dichos agentes de terapia hormonal son conocidos en la técnica, de modo que la invención incluye, aunque sin limitación, compuestos ejemplares de cada una de las clases de agentes terapéuticos hormonales mencionados anteriormente. Más particularmente, los anti-andrógenos que incluyen, por ejemplo, anti-andrógenos no esteroideos, incluyen bicalutamida (CASODEX), nilutamida (NILANDRON), flutamida (EULEXIN, DROGENIL) y similares. Los anti-andrógenos esteroideos incluyen megestrol (MEGACE), y ciproterona (ANDROCUR). Los antagonistas de la hormona de liberación de gonadotropina (GnRH) incluyen, entre otros, abarelix (PLENAXIS) e histrelin (SUPPRELIN). Además, los agonistas de la hormona de liberación de hormona luteinizante (LH-RH) incluyen, por ejemplo, leuprorelina (leuprolida; LUPRON, ELIGARD), goserelina (ZOLADEX), buserelina (SUPREFACT), triptorelina (DECAPEPTYL) y similares. En una realización, el anticuerpo anti-CTLA4 se co-administra con un anti-andrógeno (bicalutamida) y un agonista de LH-RH (leuprolida), pero la invención incluye cualquier combinación de al menos dos agentes terapéuticos hormonales, así como un solo agente de terapia hormonal, y un anticuerpo anti-CTLA4.

Como se indica en otra parte en este documento, la leuprolida es un miembro de la clase de antagonistas de la hormona de liberación de hormona luteinizante (LH-RH). La leuprolida es útil para el tratamiento de, entre otras cosas, el cáncer de próstata en hombres, la endometriosis y fibroides en mujeres, y la pubertad precoz central en niños. La combinación de anticuerpo anti-CTLA4 y leuprolida, en combinación adicional con bicalutamida, es útil para el tratamiento del cáncer de próstata. La invención incluye el uso de un anticuerpo anti-CTLA4 en combinación con terapia anti-andrógenos, tal como, aunque sin limitación, leuprolida y bicalutamida, como neoadyuvante, adyuvante y/o primera línea y segunda línea para cáncer de próstata con elevación de PSA no metastásico (recurrencia bioquímica) y/o metastásico. Preferíblemente, la combinación se usa como terapia neoadyuvante para cáncer de próstata. Más particularmente, la terapia neoadyuvante se administra antes de cualquier tratamiento posterior, por ejemplo, la combinación de terapia hormonal y terapia de anticuerpo se administra antes de la prostatectomía. Adicionalmente, la terapia de combinación, o la terapia de anticuerpo como un solo agente, puede continuarse después de la prostatectomía como se ejemplifica en otra parte en este documento.

Los métodos de la invención pueden realizarse como terapia neoadyuvante antes de la cirugía, radioterapia o cualquier otro tratamiento, para sensibilizar las células tumorales o para conferir de otro modo un efecto terapéutico beneficioso al paciente. Sin embargo, la invención no se limita a la situación neoadyuvante. En su lugar, los métodos de la invención pueden usarse a lo largo de toda la enfermedad y el tratamiento completo, por ejemplo, aunque sin limitación, terapia adyuvante, de elevación de PSA (antes de la aparición de metástasis clínicamente evidente), y de primera línea, segunda línea y/o tercera línea para el cáncer de próstata.

La presente invención puede combinarse adicionalmente con agentes y terapias adicionales, por ejemplo, quimioterapia, cirugía, radioterapia, transplante y similares, para tratar a un paciente. Es decir, el paciente puede someterse a quimioterapia adicional con agentes bien conocidos, tales como, aunque sin limitación, inhibidores de factores de crecimiento, modificadores de la respuesta biológica, agentes alquilantes, antibióticos intercalantes, alcaloides de la vinca, inmunomodulares, taxanos, moduladores selectivos del receptor de estrógenos (SERM) tales como, aunque sin limitación, lasofoxifeno e inhibidores de la angiogénesis.

Los agentes terapéuticos son numerosos y se han descrito, por ejemplo, en la Publicación de Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 2004/0005318, N° 2003/0086930, N° 2002/0086014, y la Publicación Internacional N° WO 03/086459, todas las cuales se incorporan como referencia en este documento, entre muchas otras. Dichos agentes terapéuticos incluyen, aunque sin limitación, inhibidores de la topoisomerasa I; otros anticuerpos (bevacizumab, cetuximab, panitumumab, rituximab, trastuzumab, pertuzumab, anti-IGF-1R, anti-MAdCAM, anti-CD40, anti-4-1BB, y similares); agentes quimioterapéuticos tales como, aunque sin limitación, imatinib (GLEEVEC), SU11248 (SUTENT), SU12662, SU14813; BAY 43-9006, inhibidores de indolamina-2,3-dioxigenasa (IDO), moduladores selectivos del receptor de estrógenos (SERM; por ejemplo, lasofoxifeno), taxanos, alcaloides de la vinca, temozolomida, inhibidores de la angiogénesis, inhibidores de EGFR, inhibidores de VEGF, inhibidores del receptor erbB2, agentes anti-proliferativos (por ejemplo, inhibidores de la farnesil proteína transferasa, e inhibidores de avß3, inhibidores de avß5, inhibidores de p53, y similares), inmunomodulares, citoquinas, vacunas tumorales; antígenos con especificidad de tumor; vacunas tumorales basadas en proteínas de choque por calor; terapias de células dendríticas y madre; agentes alquilantes, antagonistas de folato; antagonistas de pirimidina; antibióticos de aptraciclina; compuestos de platino; moléculas co-estimuladoras (por ejemplo, CD4, CD25, PD-1 , B7-H3, 4-1 BB, OX40, ICOS, CD30, HLA-DR, MHCII y LFA y anticuerpos agonistas para las mismas).

Como se ha mencionado anteriormente, los métodos de la invención pueden combinarse adicionalmente con transplantes, por ejemplo, transplante de células madre, para proporcionar un efecto terapéutico beneficioso a un paciente que padece cáncer de próstata. El transplante de células madre puede realizarse de acuerdo con los métodos conocidos en la técnica y puede ser transplante de células madre alogénico o autólogo. Adicionalmente, un especialista en la técnica apreciaría, basándose en la descripción proporcionada en este documento, que el transplante incluye la transferencia adoptiva de linfocitos, autólogos u obtenidos de un donante con HLA coincidente. Cuando el método comprende transplante de células madre, la primera dosis de la combinación de anticuerpo-agente de terapia hormonal puede administrarse después de que el sistema inmune del mamífero se haya recuperado del transplante, por ejemplo, en el periodo de uno a 12 meses después del transplante. En ciertas realizaciones, la primera dosis se administra en el periodo de uno a tres, o uno a cuatro meses después del transplante. Los métodos de transplante se describen en muchos tratados, incluyendo Appelbaum en Harrison's Principies of Internal Medicine, Capítulo 14, Braunwald, et al., Eds. 15a ed., McGraw-Hill Professional (2001 ), que se incorpora en este documento como referencia.

La presente invención también incluye la administración de otros agentes terapéuticos además de anticuerpo anti-CTLA4 y agentes de terapia hormonal. Dichos agentes terapéuticos ¡ncluyen analgésicos, vacunas para el cáncer, agentes anti-vasculares, agentes anti-proliferativos, agentes anti-eméticos y agentes anti-diarreicos. Los agentes anti-eméticos preferidos incluyen hidrocloruro de ondansetrón, hidrocloruro de ganisetrón y metoclopramida. Los agentes anti-diarreicos preferidos incluyen difenoxilato y atropina (LOMOTIL), loperamida (IMMODIUM) y octreotide (SANDOSTATIN).

En otra realización, la invención incluye administrar un agente con efecto anti-diarreico donde el agente está indicado en el tratamiento de afecciones inflamatorias crónicas del tracto grastrointestinal. Dichos agentes ¡ncluyen, entre otros, esteroides con actividad tópica (por ejemplo, budesonida [ENTOCORT]) y fármacos anti-factor de necrosis tumoral (TNF) (por ejemplo, infliximab [REMICADE], etanercept [ENBREL] y adalimumab [HUMIRA]).

II. Anticuerpos anti-CTLA4 En una realización, el anticuerpo contra CTLA4 comprende una cadena pesada en la que la secuencia de aminoácidos de la VH comprende las secuencias de aminoácidos expuestas en las SEC ID N°: 3, 15 y 27. En otra realización más, la VL del anticuerpo contra CTLA4 comprende las secuencias de aminoácidos expuestas en las SEC ID N°: 9, 21 y 33. Más preferiblemente, las regiones VH y VL del anticuerpo comprenden las secuencias de aminoácidos expuestas en la SEC ID N°: 3 (VH de 4.1.1) y la SEC ID N°: 9 (VL de 4.1.1), respectivamente; las secuencias de aminoácidos expuestas en la SEC ID N°: 15 (VH de 4.13.1) y la SEC ID N°: 21 (VL de 4.13.1), respectivamente; y las secuencias de aminoácidos expuestas en la SEC ID N°: 27 (VH de ticilimumab) y la SEC ID N°: 33 (VL de ticilimumab), respectivamente. Más preferiblemente, el anticuerpo es ticilimumab (también conocido como CP-675.206, que tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera del anticuerpo ticilimumab).

En otra realización más, la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada comprende la secuencia de aminoácidos codificada por un ácido nucleico que comprende las secuencias de ácido nucleico expuestas en las SEC ID N°: 1, 13 y 25. En otra realización más, la cadena ligera comprende la secuencia de aminoácidos codificada por un ácido nucleico que comprende las secuencias de ácido nucleico expuestas en las SEC ID N°: 7, 19 y 31. Más preferiblemente, las cadenas pesada y ligera comprenden las secuencias de aminoácidos codificadas por ácidos nucleicos que comprenden las secuencias de ácido nucleico expuestas en la SEC ID N°: 1 (cadena pesada de 4.1.1 ) y la SEC ID N°: 7 (cadena ligera de 4.1.1 ), respectivamente; las secuencias de ácido nucleico expuestas en la SEC ID N°: 13 (cadena pesada de 4.13.1) y la SEC ID N°: 19 (cadena ligera de 4.13.1 ), respectivamente; y las secuencias de ácido nucleico expuestas en la SEC ID N°: 25 (cadena pesada de ticilimumab) y SEC ID N°: 31 (cadena ligera de ticilimumab), respectivamente.

Además, el anticuerpo puede comprender una secuencia de aminoácidos de cadena pesada que comprende las secuencias de aminoácidos de CDR humanas obtenidas a partir del gen 3-30 o 3-33 de VH, o sustituciones conservativas o mutaciones somáticas del mismo. Se entiende que el gen 3-33 de VH codifica desde FR1 a FR3 de la región variable de cadena pesada de una molécula de anticuerpo. De esta manera, la invención incluye un anticuerpo que comparte al menos 85%, más preferiblemente al menos 90%, aún más preferiblemente al menos 91%, incluso más preferiblemente al menos 94%, más preferiblemente aún al menos 95%, más preferiblemente al menos 97%, incluso más preferiblemente al menos 98%, más preferiblemente aún al menos 99%, y mucho más preferiblemente 100% de identidad, con la secuencia desde FR1 a FR3 de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 3.1.1 , 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1 , 11.7.1., 12.3.1.1 , 2.9.1.1 , ipilimumab y DP-50.

El anticuerpo puede comprender adicionalmente regiones CDR en su cadena ligera obtenida a partir del gen A27 o el gen 012 o puede comprender las regiones CDR de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 3.1.1 , 4.1.1 , 4.8.1 , 4.10.2, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1 , 11.7.1 , 12.3.1.1 , 2.9.1.1 , ipilimumab.

En otras realizaciones de la invención, el anticuerpo inhibe la unión entre CTLA4 y B7-1 , B7-2 o ambos. Preferiblemente, el anticuerpo puede inhibir la unión con B7-1 con una Cl50 de aproximadamente 100 nM o inferior, más preferiblemente aproximadamente 10 nM o infepor, por ejemplo aproximadamente 5 nM o inferior, más preferiblemente aún, aproximadamente 2 nM o inferior, o incluso más preferiblemente, por ejemplo, aproximadamente 1 nM o inferior. Del mismo modo, el anticuerpo puede inhibir la unión con B7-2 con una CI50 de aproximadamente 100 nM o inferior, más preferiblemente 10 nM o inferior, por ejemplo, incluso más preferiblemente aproximadamente 5 nM o inferior, más preferiblemente aún, aproximadamente 2 nM o inferior, o incluso más preferiblemente, aproximadamente 1 nM o inferior.

Además, en otra realización, el anticuerpo anti-CTLA4 tiene una afinidad de unión por CTLA4 de aproximadamente 10"8, o una afinidad superior, más preferiblemente, aproximadamente 10'9 o una afinidad superior, más preferiblemente aproximadamente 10"10 o una afinidad superior, e incluso más preferiblemente aproximadamente 10"11 o afinidad superior.

El anticuerpo anti-CTLA4 incluye un anticuerpo que compite por la unión con un anticuerpo que tiene secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 4.1.1 , 6.1.1 , ticilimumab, 4.13.1 y 4.14.3. Además, el anticuerpo anti-CTLA4 puede competir por la unión con el anticuerpo ipilimumab.

En otra realización, el anticuerpo preferiblemente compite de manera cruzada con un anticuerpo que tiene una secuencia de cadena pesada y ligera, una secuencia de cadena pesada variable y ligera variable, y/o las secuencias de CDR pesadas y ligeras del anticuerpo 4.1.1, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1 o ticilimumab. Por ejemplo, el anticuerpo puede unirse al epítopo al que se une un anticuerpo que tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera, secuencias variables y/o secuencias de CDR, de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 4.1.1 , 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1 o ticilimumab. En otra realización, el anticuerpo compite de manera cruzada con un anticuerpo que tiene secuencias de cadena pesada y ligera, o secuencias de unión a antígeno, de ipilimumab.

En otra realización, la invención se pone en práctica usando un anticuerpo anti-CTLA4 que comprende una cadena pesada que comprende las secuencias de aminoácidos de CDR-1 , CDR-2 y CDR-3, y una cadena ligera que comprende las secuencias de aminoácidos de CDR-1 , CDR-2 y CDR-3, de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 3.1.1 , 4.1.1 , 4.8.1 , 4.10.2, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1 , 11.7.1 , 12.3.1.1 y 12.9.1.1 , o secuencias que tienen cambios de las secuencias de CDR seleccionadas entre el grupo que consiste en cambios conservativos, donde los cambios conservativos se seleccionan entre el grupo que consiste en el reemplazo de restos no polares por otros restos no polares, el reemplazo de restos cargados polares por otros restos no cargados polares, el reemplazo de restos cargados polares por otros restos cargados polares y la sustitución de restos estructuralmente similares; sustituciones no conservativas, donde las sustituciones no conservativas se seleccionan entre el grupo que consiste en sustitución de restos cargados polares por restos no cargados polares y sustitución de restos no polares por restos polares, adiciones y deleciones.

En una realización adicional de la invención, el anticuerpo contiene menos de 10, 7, 5 ó 3 cambios de aminoácido a partir de la secuencia de la línea germinal en las regiones flanqueantes o CDR. En otra realización, el anticuerpo contiene menos de 5 cambios de aminoácido en las regiones flanqueantes y menos de 10 cambios en las regiones CDR. En una realización preferida, el anticuerpo contiene menos de 3 cambios de aminoácido en las regiones flanqueantes y menos de 7 cambios en las regiones CDR. En una realización preferida, los cambios en las regiones flanqueantes son conservativos y las de las regiones CDR son mutaciones somáticas.

En otra realización, el anticuerpo comparte al menos 80%, más preferiblemente al menos 85%, incluso más preferiblemente al menos 90%, más preferiblemente aún al menos 94%, preferiblemente al menos 95%, más preferiblemente al menos 99% de identidad de secuencia (por ejemplo de aminoácidos, de ácido nucleico o ambas) o similitud de secuencia sobre las secuencias de longitud completa de cadena pesada y ligera, o sobre la cadena pesada o ligera, por separado, con las secuencias del anticuerpo 3.1.1, 4.1.1 , 4.8.1 , 4.10.2, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1 , 11.7.1 , 12.3.1.1 , 12.9.1.1 , ipilimumab. Incluso más preferiblemente, el anticuerpo comparte 100% de identidad de secuencia o similitud de secuencia sobre la cadena pesada y la cadena ligera, o con la cadena pesada o la cadena ligera, por separado, de un anticuerpo seleccionado entre el anticuerpo 3.1.1 , 4.1.1 , 4.8.1 , 4.10.2, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1 , 11.7.1 , 12.3.1.1 , 12.9.1.1 e ipilimumab.

En otra realización, el anticuerpo comparte al menos 80%, más preferiblemente al menos 85%, incluso más preferiblemente al menos 90%, más preferiblemente aún al menos 94%, más preferiblemente al menos 95%, incluso más preferiblemente al menos 99%, de identidad de secuencia o similitud de secuencia sobre las secuencias de longitud completa de cadena pesada y ligera, o sobre la cadena pesada o ligera, por separado, con las secuencias de V? A27 de la línea germinal, V? 012 de la línea germinal y DP50 de la línea germinal (que es un alelo del locus del gen 3-33 de VH). Incluso más preferiblemente, el anticuerpo comparte 100% de identidad de secuencia o similitud de secuencia sobre la secuencia de cadena pesada de DP50 de la línea germinal y/o con la secuencia de cadena ligera de A27 de la línea germinal u 012 de la línea germinal.

En una realización, el anticuerpo comparte al menos 80%, más preferiblemente al menos 85%, incluso más preferiblemente al menos 90%, más preferiblemente aún al menos 94%, preferiblemente al menos 95%, más preferiblemente al menos 99%, de identidad de secuencia (por ejemplo, de aminoácidos, de ácido nucleico, o ambas) o similitud de secuencia sobre las secuencias de la región variable de cadena pesada y ligera, o sobre la secuencia de región variable de cadena pesada o ligera, por separado, con las secuencias del anticuerpo 3.1.1 , 4.1.1 , 4.8.1 , 4.10.2, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1, ticilimumab, 11.6.1 , 11.7.1, 12.3.1.1 , 12.9.1.1 e ipilimumab. Incluso más preferiblemente, el anticuerpo comparte 100% de identidad de secuencia o similitud de secuencia sobre las secuencias de la región variable de cadena pesada y cadena ligera, o con la secuencia de cadena pesada o cadena ligera, por separado, de un anticuerpo seleccionado entre el anticuerpo 3.1.1 , 4.1.1 , 4.8.1 , 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1 , 11.7.1 , 12.3.1.1 , 12.9.1.1 e ipilimumab.

En otra realización, el anticuerpo comparte al menos 80%, más preferiblemente al menos 85%, incluso más preferiblemente al menos 90%, más preferiblemente aún al menos 94%, más preferiblemente al menos 95%, incluso más preferiblemente al menos 99% de identidad de secuencia o similitud de secuencia sobre la secuencia de la región variable de cadena pesada con la secuencia variable de cadena pesada de DP50 de la línea germinal de cadena pesada (que es un alelo del locus del gen 3-33 de VH) o con la secuencia variable de cadena ligera de V? A27 de la linea germinal, o V? 012 de la línea germinal. Incluso más preferiblemente, la secuencia de la región de cadena pesada del anticuerpo comparte 100% de identidad de secuencia o similitud de secuencia con la secuencia de DP50 de la línea germinal o con la secuencia de cadena ligera de A27 de la línea germinal, u 012 de la línea germinal.

En una realización de la presente invención, el anticuerpo comparte al menos 80%, más preferiblemente al menos 85%, incluso más preferiblemente al menos 90%, más prefepblemente aún al menos 95%, más preferiblemente al menos 99% de identidad de secuencia o similitud de secuencia con las secuencias de cadena pesada, cadena ligera o ambas, desde FR1 a FR4 con las secuencias de la región FR1 a FR4 del anticuerpo 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1 , 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1 , 11.7.1 , 12.3.1.1 , 12.9.1.1 e ipilimumab. Incluso más preferiblemente, el anticuerpo comparte 100% de identidad de secuencia o similitud de secuencia sobre las secuencias de cadena pesada, ligera o ambas, desde FR1 a FR4 con el anticuerpo 3.1.1 , 4.1.1 , 4.8.1 , 4.10.2, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1 , 11.7.1 , 12.3.1.1 , 12.9.1.1 e ipilimumab.

En otra realización de la presente invención, el anticuerpo comparte al menos 80%, más preferiblemente al menos 85%, incluso más preferiblemente al menos 90%, más preferiblemente aún al menos 95%, más preferiblemente al menos 99%, y mucho más preferiblemente aproximadamente 100% de identidad de secuencia o similitud de secuencia con las secuencias de cadena pesada desde FR1 a FR3 con las secuencias de la región FR1 a FR3 de DP50 de la línea germinal.

En otra realización más de la presente invención, el anticuerpo comparte al menos 80%, más preferiblemente al menos 85%, incluso más preferiblemente al menos 90%, más preferiblemente aún al menos 95%, más preferiblemente al menos 99%, y mucho más preferiblemente aproximadamente 100% de identidad de secuencia o similitud de secuencia con las secuencias de cadena ligera desde FR1 a FR4 con las secuencias de la región FR1 a FR4 de V? A27 de la línea germinal, o V? 012 de la línea germinal.

En una realización de la presente invención, el anticuerpo comparte al menos 80%, más preferiblemente al menos 85%, incluso más preferiblemente al menos 90%, más preferiblemente aún al menos 95%, más preferiblemente al menos 99%, de identidad de secuencia o similitud de secuencia con las secuencias de CDR-1 , CDR-2 y CDR-3 de cadena pesada, cadena ligera o ambas, del anticuerpo 3.1.1 , 4.1.1 , 4.8.1 , 4.10.2, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1 , 11.7.1, 12.3.1.1 , 12.9.1.1 e ipilimumab. Incluso más preferiblemente, el anticuerpo comparte 100% de identidad de secuencia o similitud de secuencia sobre las secuencias de CDR-1 , CDR-2 y CDR-3 de cadena pesada, ligera, o ambas, con el anticuerpo 3.1.1 , 4.1.1 , 4.8.1 , 4.10.2, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1 , 11.7.1 , 12.3.1.1, 12.9.1.1 e ipilimumab.

En otra realización de la presente invención, el anticuerpo comparte al menos 80%, más preferiblemente al menos 85%, incluso más preferiblemente al menos 90%, más preferiblemente aún al menos 95%, más preferiblemente al menos 99%, y mucho más preferiblemente aproximadamente 100% de identidad de secuencia o similitud de secuencia con las secuencias de CDR-1 y CDR-2 de cadena pesada con las secuencias de CDR-1 y CDR-2 de DP50 de la línea germinal.

En otra realización más de la presente invención, el anticuerpo comparte al menos 80%, más preferiblemente al menos 85%, incluso más preferiblemente al menos 90%, más preferiblemente aún al menos 95%, más preferiblemente al menos 99%, y mucho más preferiblemente aproximadamente 100% de identidad de secuencia o similitud de secuencia con las secuencias de CDR-1 y CDR-2 y CDR-3 de cadena ligera con las secuencias de CDR-1 , CDR-2 y CDR-3 de V? A27 de la línea germinal, o V? 012 de la línea germinal.

Se describen ejemplos de anticuerpos que se pueden emplear en la presente invención, y métodos para producirlos, entre otros documentos, en la Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 09/472.087, ahora expedida como Patente de Estados Unidos N° 6.682.736; Solicitud Internacional N° PCT/US00/23356 (publicada el 1 de marzo de 2001 , como documento WO 01/14424) (por ejemplo, anticuerpo ipilimumab, también conocido como MDX-010, Medarex, Princeton, NJ); Solicitud Internacional N° PCT/US99/28739 (publicada el 8 de junio de 2000, como documento WO 00/32231); Patentes de Estados Unidos N° 5.811.097, 5.855.887, 6.051.227 y 6.207.156; cada una de las cuales se incorpora como referencia en este documento. Aunque en este documento se proporciona información sobre las secuencias de aminoácidos y ácidos nucleicos relacionadas con estos anticuerpos, puede encontrarse información adicional en la Patente de Estados Unidos N° 6.682.736, así como en el documento WO 00/37504; estando incorporadas en este documento como referencia las secuencias expuestas en esas solicitudes.

Se analizan ciertos usos de estos anticuerpos para tratar diversos cánceres en la Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 10/153.382, publicada ahora como Publicación de Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 2003/0086930, que se incorpora como referencia como si se hubiera expuesto en su totalidad en este documento Las características de los anticuerpos ant?-CTLA4 humanos útiles en los métodos de la invención se analizan ampliamente en, por ejemplo, la Patente de Estados Unidos N° 6 682 736, e incluyen anticuerpos que tienen secuencias de aminoácidos de un anticuerpo tal como, aunque sin limitación, el anticuerpo 3 1 1 , 4 1 1 , 4 8 1 , 4 10 2, 4 13 1 , 4 14 3, 6 1 1 , ticilimumab, 11 6 1, 11 7 1 , 12 3 1 1 , 12 9 1 1 e ipi mumab Esta invención también se refiere a métodos que usan anticuerpos que comprenden las secuencias de amino ácidos de las CDR de las cadenas pesada y ligera de estos anticuerpos, así como las que comprenden cambios en las regiones CDR, como se describe en las solicitudes y patentes citadas anteriormente La invención también se refiere a anticuerpos que comprenden las regiones variables de las cadenas pesada y ligera de esos anticuerpos En otra realización, el anticuerpo se selecciona entre un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos de longitud completa, región variable o CDR de las cadenas pesada y ligera de los anticuerpos 3 1 1 , 4 1 1 , 4 8 1 , 4 102, 4 13 1 , 4 14 3, 6 1 1 , ticilimumab, 11.6 1, 11.7 1 , 12 3 1 1 , 12 9 1 1 e ipilimumab Aunque pueden preferirse los anticuerpos ant?-CTLA4 analizados previamente en este documento, el especialista en la técnica, basándose en la descripción proporcionada en este documento, apreciará que la invención incluye una amplia diversidad de anticuerpos ant?-CTLA4 y no se limita a esos anticuerpos particulares Más particularmente, aunque se prefieren anticuerpos humanos, la invención no está limitada de modo alguno a anticuerpos humanos, en su lugar, la invención incluye anticuerpos útiles independientemente del origen de la especie, e incluye, entre otros, anticuerpos quiméricos, humanizados y/o ppmatizados Ademas, aunque los anticuerpos ejemplificados en este documento se obtuvieron usando un mamífero transgénico, por ejemplo, un ratón que comprende un repertorio inmune humano, el especialista en la técnica, basándose en la descripción proporcionada en este documento, entenderá que la presente invención no se limita a un anticuerpo producido por este o por cualquier otro método particular En su lugar, la invención incluye un anticuerpo anti-CTLA4 producido por cualquier método, incluyendo, aunque sin limitación, un método conocido en la técnica (por ejemplo, selección de bibliotecas de presentación de fagos y similares) o a desarrollar en el futuro para producir un anticuerpo anti-CTLA4 de la invención. Basándose en la amplia descripción proporcionada en este documento y, por ejemplo, en la Patente de Estados Unidos N° 6.682.736, de Hanson et al., y la Publicación de Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 2002/0088014, un especialista en la técnica puede producir fácilmente e identificar un anticuerpo útil para el tratamiento del cáncer de próstata en combinación con un agente terapéutico hormonal usando los nuevos métodos descritos en este documento.

La presente invención incluye anticuerpos humanos producidos usando un mamífero transgénico no humano, es decir, XenoMouse™ (Abgenix, Inc., Fremont, CA) como se describe en el documento US 6.682.736, de Hanson et al.

Otro sistema de ratón transgénico para la producción de anticuerpos "humanos" se denomina "HuMAb-Mouse™" (Medarex, Princeton, NJ), que contiene el miniloci del gen de la inmunoglobulina humana que codifica las secuencias de inmunoglobulina de cadena pesada (mu y gamma) y ligera capa humanas desorganizadas, junto con mutaciones dirigidas que inactivan el loci de la cadena mu y kappa endógeno (Lonberg et al. Nature 368:856-859 (1994), y Patente de Estados Unidos N° 5.770.429).

Sin embargo, la invención usa anticuerpos anti-CTLA4 humanos producidos usando cualquier mamífero transgénico tal como, aunque sin limitación, el Kirin TC Mouse™ (Kírin Beer Kabushiki Kaisha, Tokio, Japón) como se describe, por ejemplo, en Tomizuka et al. Proc. Nati. Acad. Sci USA 97:722 (2000); Kuroiwa et al., Nature Biotechnol 18:1086 (2000); Publicación de Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 2004/0120948, de Mikayama et al., y el HuMAb- Mouse™ (Medarex, Princeton, NJ) y XenoMouse™ (Abgenix, Inc., Fremont, CA), supra. De esta manera, la invención incluye el uso de un anticuerpo anti-CTLA4 producido usando cualquier animal transgénico u otro animal no humano.

En otra realización, los anticuerpos empleados en métodos de la invención no son completamente humanos, pero están "humanizados". En particular, los anticuerpos murinos o anticuerpos de otras especies pueden "humanizarse" o "primatizarse" usando técnicas bien conocidas en la técnica. Véase, por ejemplo, Winter y Harris Immunol. Today 14:43-46 (1993), Wright et al., Crit. Reviews in Immunol. 12:125-168 (1992), y Patente de Estados Unidos N° 4.816.567, de Cabilly et al, y Mage y Lamoyi en Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications pág. 79-97, Marcel Dekker, Inc., Nueva York, NY (1987). De esta manera, los anticuerpos humanizados, quiméricos, anticuerpos anti-CTLA4 procedentes de cualquier especie (incluyendo anticuerpos monocatenarios procedentes de camélidos como se descpbe en, por ejemplo, las Patentes de Estados Unidos N° 5.759.808 y 6.765.087, de Casterman y Hamers), así como cualquier anticuerpo humano, pueden combinarse con un agente terapéutico para poner en práctica los nuevos métodos descritos en este documento.

Como se apreciará basándose en la descripción proporcionada en este documento, los anticuerpos para uso en la invención pueden obtenerse a partir de un mamífero no humano transgénico, e hibridomas derivados de los mismos, pero también pueden expresarse en líneas celulares distintas de hibridomas.

Las líneas celulares de mamífero disponibles como hospedadores para la expresión son bien conocidas en la técnica e incluyen muchas líneas celulares inmortalizadas disponibles en la American Type Culture Collection (ATCC), incluyendo aunque sin limitación células de ovario de hámster chino (CHO), NSO, Sp2, HEK, células HeLa, células de riñon de cría de hámster (BHK), células de riñon de mono (COS) y células de carcinoma hepatocelular humano (por ejemplo, Hep G2). También pueden emplearse células procariotas y eucariotas que no son de mamífero, incluyendo células bacterianas, de levaduras, de insecto y vegetales.

Pueden usarse diversos sistemas de expresión que se conocen bien en la técnica, tales como, aunque sin limitación, los descritos en, por ejemplo, Sambrook y Russell, Molecular Cloning, A Laboratory Approach, Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, NY (2001 ), y Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, NY (2002). Estos sistemas de expresión incluyen sistemas basados en dihidrofolato reductasa (DHFR), entre muchos otros. El sistema de expresión de glutamina sintetasa se analiza por completo o en parte junto con las Patentes Europeas N° 0216846B1 , N° 0256055B1 y N° 0323997B1, y la Solicitud de Patente Europea N° EP89303964. En una realización, el anticuerpo usado se produce en células NSO usando un sistema de glutamina sintetasa (GS-NSO). En otra realización, el anticuerpo se produce en células CHO usando un sistema DHFR. Ambos sistemas son bien conocidos en la técnica y se describen en, entre otros, Barnes et al. Biotech & Bioengineering 73:261-270 (2001), y referencias citadas en el mismo.

Puede preferirse mutagénesis de localización dirigida del dominio CH2 del anticuerpo para eliminar la glicosilación para evitar cambios en la inmunogenicidad, farmacocinética y/o funciones efectoras provocados por glicosilación no humana. Además, el anticuerpo puede desglicosilarse por métodos enzimáticos (véase, por ejemplo, Thotakura et al. Meth. Enzymol. 138:350 (1987)) y/o químicos (véase, por ejemplo, Hakimuddin et al., Arch. Biochem. Biophys. 259:52 (1987)).

Además, la invención incluye el uso de un anticuerpo anti-CTLA4 que comprende un patrón de glicosilación alterado. Los especialistas en la técnica apreciarán, basándose en la descripción proporcionada en este documento, que un anticuerpo anti-CTLA4 puede modificarse para comprender sitios de glicosilación adicionales, en menor cantidad, o diferentes en comparación con el anticuerpo de origen natural. Dichas modificaciones se describen, por ejemplo, en las Publicaciones de Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 2003/0207336 y 2003/0157108, y en las Publicaciones de Patente Internacional N° WO 01/81405 y 00/24893.

Adicionalmente, la invención comprende el uso de un anticuerpo anti-CTLA4 independientemente de la glicoforma, si la hay, presente en el anticuerpo. Además, los métodos para remodelar ampliamente la glicoforma presente en una glicoproteína son bien conocidos en la técnica e incluyen, por ejemplo, los descritos en las Publicaciones de Patente Internacional N° WO 03/031464, WO 98/58964 y WO 99/22764 y en las Publicaciones de Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 2004/0063911 , 2004/0132640, 2004/0142856, 2004/0072290, y en la Patente de Estados Unidos N° 6.602.684 de Umaña et al.

Además, la invención incluye el uso de un anticuerpo anti-CTLA4 con cualquier modificación covalente y no covalente conocida en la técnica, incluyendo, aunque sin limitación, unión del polipéptido a uno de una diversidad de polímeros no proteicos, por ejemplo, polietilenglicol, polipropilenglicol o polioxialquilenos, del modo expuesto, por ejemplo, en las Publicaciones de Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 2003/0207346 y 2004/0132640, y en las Patentes de Estados Unidos N° 4.640.835; 4.496.689; 4.301.144; 4.670.417; 4.791.192; y 4.179.337.

Adicionalmente, la invención incluye el uso de un anticuerpo antí-CTLA4, o proteína de unión a antígeno del mismo, y una proteína quimérica que comprende, por ejemplo, un polipéptido de albúmina de suero humana, o fragmento del mismo. Si la proteína quimérica se produce usando métodos recombinantes, por ejemplo, por clonación de un ácido nucleico quimérico que codifica la proteína quimérica, o por unión química de las dos partes peptídicas, el especialista en la técnica entendería una vez provisto de las enseñanzas proporcionadas en este documento, que dichas proteínas quiméricas son bien conocidas en la técnica y pueden conferir propiedades biológicas deseables tales como, aunque sin limitación, mayor estabilidad y vida media en suero al anticuerpo de la invención y, por lo tanto, dichas moléculas se incluyen en este documento.

Los anticuerpos que se generan para su uso en la invención no necesitan tener en un principio un isotipo particular deseado. En su lugar, el anticuerpo generado de este modo puede tener cualquier isotipo y puede cambiarse de isotipo posteriormente usando técnicas convencionales. Éstas incluyen técnicas recombinantes directas (véase, por ejemplo, la Patente de Estados Unidos N° 4.816.397), y técnicas de fusión célula-célula (véase, por ejemplo, la Patente de Estados Unidos N° 5.916.771 ).

La función efectora de los anticuerpos de la invención puede cambiarse cambiando el isotipo a un lgG1 , lgG2, lgG3, lgG4, IgD, IgA, IgE o IgM para diversos usos terapéuticos. Además, la dependencia del complemento para eliminar células puede evitarse por medio del uso, por ejemplo, de moléculas biespecíficas, inmunotoxinas o radiomarcadores.

Aunque el anticuerpo 4.1.1 , 4.13.1 y ticilimumab son anticuerpos lgG2 y las secuencias de las regiones variables de los anticuerpos se proporcionan en este documento (Figuras 1-3), y en las solicitudes y patentes mencionadas e incorporadas en este documento, se entiende que en este documento se incluyen las secuencias de longitud completa de estos anticuerpos, así como el uso de cualquier anticuerpo que comprenda las secuencias expuestas en las SEC ID N°: 1-36, y que comprenda adicionalmente cualquier región constante, independientemente del ¡sotipo como se ha analizado con más detalle en otra parte en este documento. Del mismo modo, cualquier anticuerpo que comprende la secuencia de longitud completa de ipilimumab, o cualquier parte del mismo, incluyendo una secuencia que codifica una parte de unión a antígeno de ipilimumab, puede usarse de acuerdo con los métodos de la invención.

De esta manera, el especialista en la técnica, una vez provisto de las enseñanzas proporcionados en este documento, apreciará fácilmente que la combinación de anticuerpo anti- CTLA4-agente terapéutico de la invención puede comprender un amplio conjunto de anticuerpos anti-CTLA4.

Además, un especialista en la técnica, basándose en la descripción proporcionada en este documento, entenderá que la invención no se limita a la administración de sólo un único anticuerpo; en su lugar, la invención incluye la administración de al menos un anticuerpo anti-CTLA4, por ejemplo, uno de 4.1.1 , 4.13.1 o ticilimumab, en combinación con un agente terapéutico. Además, cualquier combinación de anticuerpos anti-CTLA4 puede combinarse con al menos un agente terapéutico y la presente invención incluye cualquiera de dichas combinaciones y permutaciones de los mismos.

En una realización de la invención, los métodos usan el anticuerpo anti-CTLA4 denominado ticilimumab. En otra realización de la invención, los métodos usan un anticuerpo anti-CTLA4 descrito, por ejemplo, en las siguientes solicitudes y patentes: Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 09/472.087, ahora expedida como Patente de Estados Unidos N° 6.682.736; Solicitud Internacional N° PCT/US99/30895 (publicada el 29 de junio de 2000, como documento 00/37504), Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 10/612.497 (publicada el 18 de noviembre de 2004, como documento US 2004/0228858); Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 10/776.649 (publicada el 18 de noviembre de 2004, como documento US 2004/0228861); Solicitud Internacional N° PCT/US00/23356 (publicada el 1 de marzo de 2001, como documento WO 01/14424) (por ejemplo, anticuerpo 10D1 , también conocido como MDX-010, e ipilimumab, Medarex, Princeton, NJ); Solicitud Internacional N° PCT/US99/28739 (publicada el 8 de junio de 2000, como documento WO 00/32231); Patente de Estados Unidos N° 5.811.097, 5.855.887, 6.051.227 y 6.207.156; Patente de Estados Unidos N° 5.844.095, de Linsley et al., Solicitud Internacional N° PCT/US92/05202 (publicada el 7 de enero de 1993, como documento WO 93/00431); Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 10/153.382 (publicada el 8 de mayo de 2003, como documento US 2003/0086930); Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 10/673.738 (publicada el 24 de febrero de 2005, como documento US 2005/0042223); Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 11/085.368 (publicada el 13 de octubre de 2005, como documento US 2005/0226875); Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 60/624.856 (presentada el 4 de noviembre de 2004); Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 60/664.364 (presentada el 23 de marzo de 2005); Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 60/664.653 (presentada el 23 de marzo de 2005); Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 60/697.082 (presentada el 7 de julio de 2005); Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 60/711.707 (presentada el 26 de agosto de 2005). lll. Regímenes de Dosificación Los regímenes de dosificación pueden ajustarse para proporcionar la respuesta deseada óptima para el método relevante de la invención. Por ejemplo, puede administrarse una única embolada, pueden administrarse varias dosis divididas en el tiempo o la dosis puede reducirse o aumentarse proporcionalmente según se indique por las exigencias de la situación terapéutica. Es especialmente ventajoso formular composiciones parenterales en forma de dosificación unitaria para una fácil administración y uniformidad de dosificación. "Forma de dosificación unitaria", como se usa en este documento, se refiere a unidades físicamente discretas apropiadas como dosificaciones unitarias para los mamíferos a tratar; conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de compuesto activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado junto con el vehículo farmacéutico necesario. La especificación para las formas de dosificación unitarias de la invención se dictan y dependen directamente de (a) las características únicas del anticuerpo y el efecto terapéutico o profiláctico particular que se desea conseguir, y (b) las limitaciones inherentes en la técnica de composición de dicho compuesto activo para el tratamiento de individuos.

Debe tenerse en cuenta que los valores de dosificación pueden variar con el tipo y gravedad de la afección a aliviar, y pueden incluir dosis únicas o múltiples. También debe entenderse que para cualquier sujeto particular, los regímenes de dosificación específicos deben ajustarse en el tiempo de acuerdo con la necesidad individual y el juicio profesional de la persona que está administrando o supervisando la administración de las composiciones, y que los intervalos de dosificación expuestos en este documento son sólo ejemplares y no pretenden limitar el alcance o la práctica de la composición reivindicada.

Un intervalo ejemplar, no limitante, para una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo administrado de acuerdo con la invención es al menos aproximadamente 1 mg/kg, al menos aproximadamente 5 mg/kg, al menos aproximadamente 10 mg/kg, más de aproximadamente 10 mg/kg, o al menos aproximadamente 15 mg/kg, por ejemplo aproximadamente 1-30 mg/kg, o por ejemplo aproximadamente 1-25 mg/kg, o por ejemplo aproximadamente 1-20 mg/kg, o por ejemplo aproximadamente 5-20 mg/kg, o por ejemplo aproximadamente 10-20 mg/kg, o por ejemplo aproximadamente 15-20 mg/kg, o por ejemplo, aproximadamente 15 mg/kg. En una realización, la cantidad es 10 mg/kg. En otra, es 15 mg/kg.

Además, puede usarse el protocolo de aumento de dosis para determinar la dosis máxima tolerada (MTD), para evaluar la toxicidad limitante de la dosis (DLT), si la hay, asociada con la administración de la terapia de combinación de anticuerpo-terapia hormonal. El aumento de la dosis comprende dosis crecientes, tales como, aunque sin limitación, 0,1 mg/kg, 0,3 mg/kg, 1 mg/kg, 3 mg/kg, 6 mg/kg, 10 mg/kg y 15 mg/kg, o cualquier combinación de las mismas. En otra realización, se administran dosis sucesivas de 3 mg/kg, 6 mg/kg y 10 mg/kg y en el paciente se evalúa la toxicidad, si la hay, así como la eficacia del tratamiento, entre otros parámetros.

En una realización, el anticuerpo se administra en una formulación intravenosa como una solución acuosa estéril que contiene de aproximadamente 5 a 20 mg/ml de anticuerpo, en un sistema tampón apropiado.

En una realización, parte de la dosis se administra por medio de una inyección intravenosa en embolada y el resto por infusión de la formulación del anticuerpo. Por ejemplo, una inyección intravenosa de 0,01 mg/kg del anticuerpo puede administrarse en embolada, y el resto de la dosis de anticuerpo predeterminada puede administrarse por inyección intravenosa. Una dosis predeterminada del anticuerpo puede administrarse, por ejemplo, durante un periodo de aproximadamente una hora y media a aproximadamente 5 horas. En una realización, el anticuerpo se administra como una sola infusión IV a aproximadamente 100 ml por hora, más preferiblemente, la velocidad es aproximadamente 200 ml por hora, y la velocidad de infusión puede determinarse por el especialista en la técnica de acuerdo con métodos reconocidos en la técnica.

En una realización, puede administrarse una sola dosis o múltiples dosis del anticuerpo. El anticuerpo anti-CTLA4 puede administrarse a un ser humano de forma tan frecuente como varias veces al día, o puede administrarse menos frecuentemente, tal como una vez al día, una vez a la semana, una vez cada dos semanas, una vez al mes, o incluso menos frecuentemente, tal como una vez cada varios meses o incluso una vez al año o menos. Las dosis pueden administrarse, por ejemplo, cada dos semanas, mensualmente, cada veinte dias, cada 25 días, cada 28 días, cada 30 días, cada 40 días, cada 50 días, cada dos meses, cada 70 días, cada 80 días, cada tres meses, cada seis meses o anualmente. Además, el agente de terapia hormonal puede administrarse varias veces al día, una vez al día, varias veces a la semana, semanalmente, una semana sí y otra no, cada tres semanas, cada cuatro semanas, mensualmente, cada tres meses, cada seis meses, una vez al año, o cualquier otro periodo que proporcione un efecto terapéutico beneficioso al paciente. La frecuencia de la dosis será fácilmente evidente para el especialista en la técnica y dependerá de varios factores tales como, aunque sin limitación, el tipo y la gravedad de la enfermedad a tratar, y la edad del ser humano, etc.

En una realización de la invención en la que la administración del anticuerpo y la terapia hormonal solapan, el anticuerpo y el agente de terapia hormonal pueden co-administrarse en el sentido de que pueden administrarse por separado, o a diferentes momentos del día, así como simultáneamente o en la misma fecha, de modo que la co-administración sea sustancialmente contemporánea. De esta manera, la coadministración incluye la administración sustancialmente contemporánea del anticuerpo y el agente de terapia hormonal de modo que la administración de los dos medie un efecto terapéutico beneficioso para el paciente que es detectablemente superior a la administración de cada agente en ausencia del otro.

Adicionalmente, en ciertas realizaciones de la invención, se administran el anticuerpo y el agente de terapia hormonal, administrándose el agente de terapia hormonal antes de la administración del anticuerpo y habiendo un periodo de descanso entre la administración de la última dosis del agente de terapia hormonal y la administración del anticuerpo. La duración de la fase de descanso puede ajustarse de acuerdo con una diversidad de factores bien conocidos en la técnica.

Como se ha establecido previamente, en ciertas realizaciones, la combinación de anticuerpo y agente de terapia hormonal se combinan adicionalmente con numerosos compuestos adicionales (otros agentes terapéuticos, citoquinas, fármacos quimioterapéuticos y/o antivirales, entre muchos otros). Como alternativa, el compuesto o compuestos pueden administrarse una hora, un día, una semana, un mes, o incluso más, antes de la combinación anticuerpo-agente terapéutico, o cualquier permutación de los mismos. Además, el compuesto o compuestos pueden administrarse una hora, un día, una semana, o incluso más, después de la administración de radiación, transplante de células madre, o administración de cualquier agente terapéutico (por ejemplo, citoquina, compuesto quimioterapéutico y similares), o cualquier permutación de los mismos. La frecuencia y régimen de administración serán fácilmente evidentes para el especialista en la técnica y dependerán de varios factores tales como, aunque sin limitación, el tipo y gravedad de la enfermedad a tratar, la edad y estado de salud del animal, la identidad del compuesto o compuestos a administrar, la vía de administración de los diversos compuestos y similares.

La leuprolida preferiblemente se administra por vía subcutánea (s.c.) o intramuscular (i.m.; LUPRON DEPOT) de acuerdo con regímenes de dosificación convencionales bien conocidos en la técnica, que comprenden, entre otros, administrar el compuesto diariamente, mensualmente, un mes sí y otro no, a intervalos de tres o cuatro meses y similares. Además, la dosis de leuprolida/LUPRON DEPOT puede ajustarse dependiendo de diversos factores conocidos por el especialista en la técnica, y puede variar de manera convencional de aproximadamente 1 mg al día en el caso de la leuprolida administrada s.c., a aproximadamente 3,5 y 7,5 mg por dosis en el caso de LUPRON DEPOT administrado mensualmente i.m. y 11 ,23 y 22,5 mg para dosis de LUPRON DEPOT administrado cada tres meses, y aproximadamente 30 mg para LUPRON DEPOT administrado cada cuatro meses. Los regímenes alternativos incluyen, entre otros, 1 mg de leuprolida administrada diariamente como una sola inyección subcutánea, 22,5 mg administrados cada tres meses como una inyección intramuscular, entre muchos otros regímenes conocidos en la técnica. En ciertas realizaciones de la invención, el anticuerpo anti-CTLA4 se administra en cualquier momento durante, antes o después de la administración de leuprolida. Preferiblemente, la leuprolida se administra por vía intramuscular cada veintiocho días, junto con la administración intravenosa del anticuerpo anti-CTLA4. Incluso más preferiblemente, la leuprolida se administra en la cantidad de aproximadamente 7,5 mg por vía intramuscular.

En realizaciones de la invención en las que la administración de leuprolida y anticuerpos solapan, en particular, en las que el anticuerpo se administra con leuprolida y bicalutamida, pueden administrarse tres ciclos de leuprolida/anticuerpo cada veintiocho días. Opcionalmente, se administra al menos un ciclo adicional de leuprolida/anticuerpo después de prostatectomía. Más preferiblemente, se administran aproximadamente tres ciclos de leuprolida/anticuerpo después de cirugía. Incluso más preferiblemente, el primer ciclo después de cirugía comienza cuarenta y cinco días después de la cirugía para mantener un nivel terapéutico de anticuerpo presente en el paciente.

La bicalutamida puede administrarse de acuerdo con regímenes de dosificación convencionales bien conocidos en la técnica. En resumen, preferiblemente se administra bicalutamida una vez al día en una cantidad que varía de aproximadamente 50 mg a 200 mg.

Preferiblemente, la bicalutamida se administra per os (a través de la boca) en una cantidad de aproximadamente 50 mg por día. Incluso más preferiblemente, la bicalutamida se administra durante los primeros catorce días del primer ciclo de dosificación, aún más preferiblemente, se coadministran bicalutamida, leuprolida y el anti-CTLA en el primer día del primer ciclo (D1 ). Después, preferiblemente se suspende la bicalutamida después del día 14 (D14). En una realización, se coadministra leuprolida y el anticuerpo en D28 y D56. Incluso más preferiblemente, se administra leuprolida por inyección i.m. a aproximadamente 7,5 mg y el anticuerpo se administra por infusión i.v. a una dosis que varía de aproximadamente 1 mg/kg a 20 mg/kg, en otra realización, de aproximadamente 3 mg/kg a 15 mg/kg, y en otra realización, de aproximadamente 3 mg/kg a 10 mg/kg.

El especialista en la técnica apreciará, basándose en la descripción proporcionada en este documento, que la dosis y el régimen de dosificación se ajustan de acuerdo con métodos bien conocidos en las técnicas terapéuticas. Es decir, la dosis tolerable máxima puede establecerse fácilmente, y también puede determinarse la cantidad eficaz que proporciona un efecto terapéutico beneficioso detectable en un paciente. Por consiguiente, aunque en este documento se ejemplifican ciertas dosis y regímenes de administración, estos ejemplos no limitan de modo alguno la dosis y régimen de administración que pueden proporcionarse a un paciente en la puesta en práctica de la presente invención. Además, un especialista en la técnica entendería, una vez provisto de las enseñanzas proporcionadas en este documento, que un efecto terapéutico beneficioso, tal como, aunque sin limitación, disminución detectable del tamaño tumoral y/o metástasis, reducción del nivel de PSA, aumento del tiempo hasta la recurrencia, entre muchos otros parámetros, puede evaluarse mediante una amplia diversidad de métodos conocidos en la técnica para evaluar la eficacia del tratamiento del cáncer de próstata, y estos métodos se incluyen en este documento, así como métodos para desarrollar en el futuro.

En una realización, se administra una sola inyección en embolada que comprende el anticuerpo anti-CTLA4, a un paciente por vía intravenosa a una dosis que varía de aproximadamente 1 mg/kg a 20 mg/kg, aproximadamente cada veintiocho días. En otra realización de la invención, se administra ticilimumab a una dosis de aproximadamente 10 mg/kg cada veintiocho días. En otra realización más, se administra ticilimumab a aproximadamente 15 mg/kg cada tres meses. Se administra una dosis de agonista de LH-RH (leuprolida) el primer día en el que se administra el anticuerpo, y aproximadamente cada veintiocho días después de ello. Preferiblemente, se co-administran el anticuerpo y leuprolida en el mismo día de cada ciclo de dosis. En otra realización, se administra leuprolida cada veintiocho días y se administra ticilimumab cada tres meses. Adicionalmente, se administra bicalutamida diariamente durante catorce días comenzando el día en el que se co-administran el anticuerpo y leuprolida. Preferiblemente, no se administra bicalutamida durante ciclos de dosis posteriores; sin embargo, puede administrarse bicalutamida en ciclos posteriores y/o durante más de catorce días. Además, la invención incluye administrar bicalutamida y/o leuprolida en cualquier momento durante la administración del anticuerpo y la invención no se limita de ningún modo con respecto a la administración relativa del anticuerpo y el agente de terapia hormonal. De esta manera, puede administrarse terapia hormonal antes, durante y/o después de la administración del anticuerpo.

IV. Composiciones Farmacéuticas La invención incluye la preparación y uso de composiciones farmacéuticas que comprenden un anticuerpo anti-CTLA4, o una parte de unión a antígeno del mismo, en combinación con al menos dos agentes de terapia hormonal seleccionados independientemente entre, por ejemplo, un anti-andrógeno, un antagonista de GnRH y un agonista de LH-RH. Dicha composición farmacéutica puede consistir en un anticuerpo o un agente de terapia hormonal solo (por ejemplo, una dosis eficaz de un anti-CTLA4 y un dosis eficaz de al menos un agente de terapia hormonal) en una forma adecuada para la administración a un sujeto, o la composición farmacéutica puede comprender el anticuerpo o el agente de terapia hormonal y uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables, uno o más ingredientes adicionales (activos y/o inactivos) o alguna combinación de estos.

En una realización, el anticuerpo se administra por vía parenteral (por ejemplo, intravenosa) en una solución acuosa mientras que el agente de terapia hormonal (por ejemplo, un anti-andrógeno, un antagonista de GnRH, un agonista de LH-RH y similares) se administra por vía oral en forma de pildora/cápsula. Sin embargo, el especialista en la técnica entenderá, basándose en la descripción proporcionada en este documento, que la invención no se limita a estas u otras formulaciones, dosis y vías de administración cualesquiera, y similares. En su lugar, la invención incluye cualquier formulación o método de administración de un anticuerpo en combinación con un agente de terapia hormonal, incluyendo, aunque sin limitación, la administración de cada agente por separado en una formulación diferente mediante una vía de administración diferente (por ejemplo, administración de un anticuerpo anti-CTLA4 i.v. mientras se co-administra un anti-andrógeno no esteroideo (bicalutamida) por vía oral y un agonista de LH-RH (leuprolida) por inyección intramuscular), y la administración del anticuerpo y la terapia hormonal (por ejemplo, un segundo anticuerpo anti-CTLA4, tal como, aunque sin limitación, ipillmumab, entre otros) en una sola composición (por ejemplo, en una composición acuosa administrada, entre otras, i.v.), entre muchos otros. De esta manera, el siguiente análisis describe diversas formulaciones para poner en práctica los métodos de la invención que comprenden la administración de cualquier anticuerpo anti-CTLA4 en combinación con cualquier agente de terapia hormonal, pero la invención no está limitada a estas formulaciones, sino que comprende cualquier formulación que pueda determinarse fácilmente por un especialista en la técnica una vez provisto de las enseñanzas proporcionadas en este documento para su uso en los métodos de la invención.

Los anticuerpos empleados en la invención pueden incorporarse en composiciones farmacéuticas adecuadas para la administración a un sujeto. Típicamente, la composición farmacéutica comprende el anticuerpo y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Como se usa en este documento, "vehículo farmacéuticamente aceptable" incluye todos y cada uno de los disolventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifúngicos, agentes isotónicos y para retardar la absorción, y similares, que son fisiológicamente compatibles. Los ejemplos de vehículos farmacéuticamente aceptables incluyen uno o más de agua, solución salina, solución salina tamponada con fosfato, dextrosa, trehalosa, glicerol, etanol y similares, así como combinaciones de los mismos. En muchos casos, será preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, polialcoholes tales como manitol, sorbitol o cloruro sódico en la composición. También pueden añadirse sustancias farmacéuticamente aceptables tales como humectantes o pequeñas cantidades de sustancias auxiliares tales como agentes humectantes o emulsionantes, conservantes o tampones, que potencian la vida o eficacia del anticuerpo o de la parte de anticuerpo.

Los anticuerpos pueden estar en una diversidad de formas. Éstas incluyen, por ejemplo, formas líquidas tales como soluciones líquidas (por ejemplo, soluciones inyectables y de infusión), dispersiones o suspensiones, y liposomas. La forma preferida depende del modo de administración deseado y de la aplicación terapéutica. Las composiciones preferidas típicas están en forma de soluciones inyectables o de infusión, tales como composiciones similares a las usadas para inmunización pasiva de seres humanos con otros anticuerpos. El modo de administración preferido es parenteral (por ejemplo, administración intravenosa, subcutánea, intraperitoneal, intramuscular). En una realización preferida, el anticuerpo se administra por infusión o inyección intravenosa. En otra realización preferida, el anticuerpo se administra por inyección intramuscular o subcutánea.

Las composiciones terapéuticas típicamente deben ser estériles y estables en condiciones de fabricación y almacenamiento. La composición puede formularse como una solución, microemulsión, dispersión, liposoma u otra estructura ordenada adecuada para una alta concentración de fármaco. Las soluciones inyectables estériles pueden prepararse incorporando el anticuerpo en la cantidad necesaria en un disolvente apropiado con uno o una combinación de ingredientes enumerados anteriormente, según sea necesario, seguido de esterilización por filtración. Generalmente, las dispersiones se preparan incorporando el compuesto activo en un vehículo estéril que contiene un medio de dispersión básico y los otros ingredientes necesarios de los enumerados anteriormente. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos preferidos de preparación son secado al vacío y liofilización que producen un polvo del ingrediente activo más cualquier ingrediente deseado adicional a partir de una solución del mismo previamente filtrada hasta esterilidad. La fluidez apropiada de una solución puede mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de un recubrimiento tal como lecitina, manteniendo el tamaño de partícula necesario en el caso dispersión y mediante el uso de tensioactivos. La absorción prolongada de composiciones inyectables puede conseguirse incluyendo en la composición un agente que retarda la absorción, por ejemplo, sales de monoestearato y gelatina.

Los anticuerpos pueden administrarse por una diversidad de métodos conocidos en la técnica, incluyendo, sin limitación, por vía oral, parenteral, a través de la mucosa, por inhalación, tópica, bucal, nasal y rectal. Para muchas aplicaciones terapéuticas, la vía/modo preferido de administración es subcutánea, intramuscular, intravenosa o por infusión. Puede emplearse inyección sin aguja, sí se desea. Como se apreciará por el especialista en la técnica, la vía y/o modo de administración variará dependiendo de los resultados deseados.

En ciertas realizaciones, el anticuerpo puede prepararse con un vehículo que protegerá al compuesto frente a una liberación rápida, tal como una formulación de liberación controlada, incluyendo implantes, parches transdérmicos y sistemas de suministro microencapsulados. Pueden usarse polímeros biodegradables, biocompatibles, tales como acetato de etilenvinilo, polianhídridos, ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres y ácido poliláctico. Muchos métodos para la preparación de dichas formulaciones están patentados o se conocen en líneas generales por los especialistas en la técnica. Véase, por ejemplo, Sustained and Controlled Reléase Drug Delivery Systems, J. R. Robison, ed., Marcel Dekker, Inc., Nueva York (1978).

En una realización, el anticuerpo se administra en una formulación intravenosa como una solución acuosa estéril que contiene 5 ó 10 mg/ml de anticuerpo, con acetato sódico, polisorbato 80 y cloruro sódico a un pH que varía de aproximadamente 5 a 6. Preferiblemente, la formulación intravenosa es una solución acuosa estéril que contiene 5 ó 10 mg/ml de anticuerpo, con acetato sódico 20 mM, 0,2 mg/ml de polisorbato 80 y cloruro sódico 140 mM a pH 5,5.

En otra realización de la invención, el anticuerpo se administra en una solución estéril que comprende tampón histidina 20 mM, pH 5,5, 84 mg/ml de trehalosa dihidrato, 0,2 mg/ml de polisorbato 80 y 0,1 mg/ml de EDTA disódico dihidrato. En un aspecto, la formulación se envasa en viales de vidrio transparente con un tapón de goma y un precinto de aluminio. En otro aspecto, el vial contiene aproximadamente 20 mg/ml de anticuerpo con una carga nominal de aproximadamente 400 mg por vial.

Con respecto al agente de terapia hormonal, el agente puede estar presente en la composición farmacéutica en forma de un éster o sal fisiológicamente aceptable, tal como en combinación con un catión o anión fisiológicamente aceptable, como se sabe bien en la técnica.

Las formulaciones de las composiciones farmacéuticas descritas en este documento pueden prepararse por cualquier método conocido o desarrollado posteriormente en la técnica de la farmacología. En general, dichos métodos de preparación incluyen la etapa de asociar el ingrediente activo con un vehículo o uno u más ingredientes accesorios diferentes, y después, si es necesario o deseable, dar forma o envasar el producto en una unidad de una sola dosis o multidosis deseada.

Una composición farmacéutica de la invención puede prepararse, envasarse o venderse a granel, como una sola dosis unitaria, o como una pluralidad de dosis unitarias únicas. Como se usa en este documento, una "dosis unitaria" es una cantidad discreta de la composición farmacéutica que comprende una cantidad predeterminada del ingrediente activo. La cantidad del ingrediente activo generalmente es igual a la dosificación del ingrediente activo que se administraría a un sujeto o una fracción conveniente de dicha dosificación tal como, por ejemplo, la mitad o un tercio de dicha dosificación.

Las cantidades relativas del ingrediente activo, el vehículo farmacéuticamente aceptable y cualquier ingrediente adicional en una composición farmacéutica de la invención variarán dependiendo de la identidad, tamaño y estado del sujeto tratado y dependiendo adicionalmente de la vía por la que se va a administrar la composición. A modo de ejemplo, la composición puede comprender entre 0,1% y 100% (p/p) de ingrediente activo.

Además del ingrediente activo, una composición farmacéutica de la invención puede comprender adicionalmente uno o más agentes farmacéuticamente activos adicionales. Los agentes adicionales particularmente contemplados incluyen anti-eméticos, anti-diarreicos, agentes quimioterapéuticos, citoquinas y similares.

Pueden producirse formulaciones de liberación controlada o sostenida de una composición farmacéutica de la invención usando la tecnología convencional.

Como se usa en este documento, la "administración parenteral" de una composición farmacéutica incluye cualquier vía de administración caracterizada por la apertura física de un tejido de un sujeto y la administración de la composición farmacéutica a través de la brecha en el tejido. De esta manera, la administración parenteral incluye, aunque sin limitación, la administración de una composición farmacéutica por inyección de la composición, por aplicación de la composición a través de una incisión quirúrgica, por aplicación de la composición a través de una herida no quirúrgica que penetra en el tejido, y similares. En particular, se contempla que la administración parenteral incluye, aunque sin limitación, inyección subcutánea, intraperitoneal, intramuscular, intraesternal y técnicas de infusión por diálisis renal.

Las formulaciones de una composición farmacéutica adecuada para administración parenteral comprenden el ingrediente activo combinado con un vehículo farmacéuticamente aceptable, tal como agua estéril o solución salina isotónica estéril. Dichas formulaciones pueden prepararse, envasarse o venderse en una forma adecuada para administración en embolada o para administración continua. Las formulaciones inyectables pueden prepararse, envasarse o venderse en forma de dosificación unitaria, tal como en ampollas o recipientes multidosis que contienen un conservante. Las formulaciones para administración parenteral ¡ncluyen, aunque sin limitación, suspensiones, soluciones, emulsiones en vehículos oleosos o acuosos, pastas y formulaciones de liberación sostenida o biodegradables para implante como se analiza más adelante. Dichas formulaciones pueden comprender adicionalmente uno o más ingredientes adicionales que incluyen, aunque sin limitación, agentes de suspensión, estabilizantes o de dispersión. En una realización de una formulación para administración parenteral, el ingrediente activo se proporciona en forma seca (es decir, en forma de polvo o granular) para la reconstitución con un vehículo adecuado (por ejemplo, agua sin pirógenos estéril) antes de la administración parenteral de la composición reconstituida.

Las composiciones farmacéuticas pueden prepararse, envasarse o venderse en forma de una suspensión o solución acuosa u oleosa inyectable estéril. Esta suspensión o solución puede formularse de acuerdo con la técnica conocida, y puede comprender, además del ingrediente activo, ingredientes adicionales tales como los agentes de dispersión, agentes humectantes o agentes de suspensión descritos en este documento. Dichas formulaciones inyectables estériles pueden prepararse usando un diluyente o disolvente parenteralmente aceptable no tóxico, tal como agua o 1 ,3-butanodiol, por ejemplo. Otros diluyentes y disolventes aceptables ¡ncluyen, aunque sin limitación, solución de Ringer, solución de cloruro sódico isotónica y aceites fijos tales como mono- o diglicéridos sintéticos. Otras formulaciones que se pueden administrar por vía parenteral que son útiles incluyen las que comprenden el ingrediente activo en forma microcristalina, en una preparación liposomal, o como un componente de sistemas poliméricos biodegradables. Las composiciones para liberación sostenida o implante pueden comprender materiales poliméricos o hidrófobos farmacéuticamente aceptables tales como una emulsión, una resina de intercambio iónico, un polímero moderadamente soluble, o una sal moderadamente soluble.

V. Kits La invención incluye diversos kits para el tratamiento del cáncer de próstata. En una realización, el kit se usa para el tratamiento de cáncer de próstata dependiente de hormonas y comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo anti-CTLA4, o una parte de unión a antígeno del mismo, y una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos dos agentes de terapia hormonal, junto con un aplicador y materiales de Instrucción que describen el uso de la combinación para realizar los métodos de la invención. Aunque se describen kit ejemplares más adelante, los contenidos de otros kits útiles serán evidentes para los especialistas en la técnica a la luz de la presente descripción. Cada uno de estos kits se incluye en la invención.

La invención incluye un kit para el tratamiento del cáncer de próstata independiente de hormonas en un paciente en necesidad del mismo. El kit incluye un anticuerpo anti-CTLA4 humano de la invención y al menos un agente de terapia hormonal. El kit comprende adicionalmente un aplicador, incluyendo, aunque sin limitación, una jeringa, para la administración de los componentes del kit a un paciente. Además, el kit comprende un material de instrucciones que indica la información pertinente para el uso del kit para tratar cáncer de próstata en el paciente.

En una realización, el kit comprende al menos un anticuerpo anti-CTLA4 seleccionado entre 4.1.1 , 4.8.1 , 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1, 11.7.1., 12.3.1.1 , 12.9.1.1 y 10D1 (ipilimumab; MDX-010, Medarex), incluso más preferiblemente, el anticuerpo se selecciona entre 4.1.1 , 4.13.1 , 6.1.1 , ticilimumab e ipilimumab. Más preferiblemente, el anticuerpo se selecciona entre 4.1.1 , 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1 y ticilimumab.

En una realización, el agente de terapia hormonal es al menos un agente seleccionado entre un anti-andrógeno, un antagonista de GnRH y un agonista de LH-RH, entre otros. En un aspecto, el anti-andrógeno es un anti-andrógeno esteroideo o no esteroideo. En otro aspecto, al anti-andrógeno no esteroideo se selecciona entre bicalutamida, nilutamida y flutamida, entre otros. Se selecciona un anti-andrógeno esteroideo entre el grupo que consiste en megestrol, ciproterona y similares. En otro aspecto más, el GnRH se selecciona entre el grupo que consiste en abarelix e histrelin. Y en un aspecto adicional, el LH-RH se selecciona entre el grupo que consiste en leuprolida, goserelina, buserelina y triptorelína, y similares.

La invención incluye un kit para el tratamiento del cáncer de próstata independiente de hormonas, donde el kit comprende cualquier combinación de un anticuerpo anti-CTLA4 y cualquier agente hormonal, tal como, aunque sin limitación, leuprolida, bicalutamida y un anticuerpo. Aunque se prefiere dicho kit, la invención no se limita a esta combinación particular. En su lugar, el kít puede comprender cualquier combinación de agentes de terapia hormonal conocidos que se sabe que reducen los niveles de andrógenos. Además, el kit puede comprender un amplio conjunto de agentes adicionales para el tratamiento de cáncer. Dichos agentes se han expuesto previamente e ¡ncluyen compuestos quimioterapéuticos, vacunas para el cáncer, inhibidores de la transducción de señales, agentes útiles en el tratamiento del crecimiento celular anormal o cáncer, anticuerpos u otros ligandos que inhiben el crecimiento tumoral mediante la unión a IGF-1R, un agente quimioterapéutico (taxano, alcaloide de la vinca, compuesto de platino y antibióticos intercalantes, entre muchos otros), y citoquinas, entre muchos otros, así como agentes paliativos para tratar, por ejemplo, cualquier toxicidad que se produzca durante el tratamiento.

Las descripciones de todas y cada una de las patentes, solicitudes de patente, y publicaciones citadas en este documento se incorporan en este documento como referencia en su totalidad.

La invención se describe adicionalmente en detalle como referencia a los siguientes ejemplos experimentales. Estos ejemplos se proporcionan sólo con fines ilustrativos y no se pretende que sean limitantes salvo que se especifique lo contrario. De esta manera, la invención no debe considerarse de ningún modo limitada por los siguientes ejemplos, sino que debe considerarse que abarca todas y cada una de las variaciones que serán evidentes como resultado de las enseñanzas proporcionadas en este documento.

EJEMPLOS Ejemplo 1 : Anti-CTLA4 en Combinación con al Menos Dos Agentes de Terapia Hormonal en el Tratamiento Neoadvuvante de Cáncer de Próstata de Alto Riesgo Los pacientes con cáncer de próstata que cumplen los requisitos para prostatectomía radical y que tienen un riesgo intermedio o alto de recurrencia de acuerdo con los patrones médicos actuales son candidatos para una terapia neoadyuvante de combinación de anticuerpo-hormonas. La población diana para este estudio se define usando el riesgo de recurrencia bioquímica en lugar de la probabilidad de cáncer patológicamente localizado. Este enfoque se respalda por la observación de que pacientes con enfermedad localizada en la próstata pueden tener una recurrencia bioquímica a pesar del tratamiento local "definitivo". Por lo tanto, esta definición de paciente es más completa. Considerando los datos recientes que demuestran que un tiempo hasta el fallo de PSA de menos de 2 años prevé un fallo remoto, los pacientes que tienen alto riesgo de un fallo de PSA temprano son candidatos para la terapia neoadyuvante (y adyuvante) de combinación de anticuerpo-hormonas como se describe en este documento.

Para todos los pacientes, se evalúan el estado de rendimiento ECOG (Eastern Cooperative Oncology Group), signos vitales y peso corporal antes de la dosis, y se repite la evaluación de los signos vitales después de la dosis, como se indica clínicamente. Se realiza un examen físico (incluyendo evaluación oftalmológica y signos de autoinmunidad) en el Día 1. Se obtienen muestras para el panel hematológico (hematocrito, recuento de glóbulos rojos (RBC), recuento de glóbulos blancos (WBC), diferencial), el panel químico (Fosfatasa Alcalina, calcio, cloruro, GGT, LDH, magnesio, fósforo, glucosa aleatoria, sodio, urea, ácido úrico), urinálisis (incluyendo proteinuria y sedimentación de orina), y otros (tiempo de tromboplastina parcial activada [APTT], tiempo de protrombina (PT), panel de autoanticuerpos, proteína reactiva C, TSH, T3, T4, amilasa, lipasa, C3 en suero, C4, nivel de Ig en suero, nivel de PSA).

Se determina el título de anticuerpo humano anti-humano (HAHA) basal y se obtiene una muestra farmacocinética (PK) antes de la dosis. La farmacocinética se obtiene a las 0 horas (justo antes de la dosificación) y 1 hora después de la infusión de anticuerpo.

En el día 14, se evalúan el ECOG PS y los acontecimientos adversos si los hay. Se obtienen muestras para hematología, laboratorios de química, junto con PT, APTT, CRP y PSA.

Antes de la operación, aproximadamente después del final del último ciclo de terapia de combinación de anticuerpo-hormonas y antes de la prostatectomía programada, se completan las siguientes evaluaciones: cualquier suceso adverso, ECOG PS, signos vitales y peso, examen físico (incluyendo signos de autoinmunidad), ECG y DRE. Se obtienen muestras para los paneles hematológico y químico, junto con PT, APTT, CRP y PSA.

Se realizan evaluaciones post-operatorias aproximadamente dos semanas después de la cirugía. La evaluación incluye el examen físico (incluyendo autoinmunidad), signos vitales, estado de rendimiento ECOG, peso corporal, paneles hematológico y químico, PT, APTT, TSH, T3, T4, amilasa, lipasa, CRP y urinálisis. Se obtienen muestras adicionales para el panel de autoantlcuerpos, PSA, testosterona, título HAH y PK. En todos los pacientes se realiza una evaluación patológica de la muestra quirúrgica y se evalúan los acontecimientos adversos.

En el caso de los pacientes que no reciben ciclos adicionales de terapia de combinación de anticuerpo-hormonas, los pacientes se evalúan aproximadamente un mes después de la evaluación post-operatoria. En los pacientes se evalúa ECOG PS, se realiza un examen físico (incluyendo signos de autoinmunidad) y un examen rectal digital. También se obtiene una muestra de sangre para PSA.

Los pacientes se siguen cada tres meses hasta la recurrencia de la enfermedad o progresión de PSA o un máximo de 24 meses o hasta el comienzo de un régimen terapéutico alternativo, lo que suceda primero.

Los pacientes que han mostrado una respuesta patológica, reciben opcionalmente hasta tres ciclos adicionales de anticuerpo sin terapia hormonal cada veintiocho días. Preferiblemente, el anticuerpo se administra a los pacientes 45 días después de la cirugía.

Los pacientes se evalúan en los días 1 , 14 y durante el seguimiento como se ha descrito previamente para los ciclos de terapia de combinación de anticuerpo-hormonas.

Se miden los siguientes criterios de valoración: parámetros PK, HAHA, velocidad de respuesta y tiempo de progresión. El tiempo de progresión y la supervivencia global se calculan usando el método de producto límite de Kaplan-Meier.

El anticuerpo se proporciona en viales de vidrio transparente de 10 ml con un tampón de goma y un precinto de aluminio. Cada vial contiene 5 mg/ml (con una carga nominal de 50 mg/vial) de anticuerpo anti-CTLA4, en una solución acuosa estéril que comprende acetato sódico 20 mM, 0,2 mg/ml de polisorbato 80 y cloruro sódico 140 mM a pH 5,5.

El paciente se premedica con antihistamina (H1) al menos media hora antes de la infusión de anti-CTLA4, pero no es necesaria la premedicación.

A los pacientes se les administró leuprolida (LUPRON) y bicalutamida (CASODEX) en combinación con un anticuerpo anti-CTLA4 (ticilimumab). Más específicamente, en el día 1 (D1), al paciente se le administró una sola infusión IV (100 ml/h) de anticuerpo anti-CTLA4 a una dosis de 1 mg/kg, 3 mg/kg ó 6 mg/kg, junto con una inyección IM de 7,5 mg de leuprolida (LUPRON DEPOT). Se administró cada dosis de anticuerpo a un minimo de 3 pacientes. El estudio se modificó para reiniciar un aumento de la dosis a un nivel de dosis inferior, es decir, 1 mg/kg. Tres pacientes recibieron ese nivel de dosis y se sometieron a cirugía (después de 3 meses de terapia de combinación). El aumento de la dosis continuó hasta 3 mg/kg. El aumento de la dosis actualmente es 6 mg/kg y 10 mg/kg.

Se administró bicalutamida (CASODEX) por vía oral, en forma de un comprimido, a una dosis de 50 mg, una vez al día durante los primeros catorce días, comenzando en el día 1 (D1 ).

Preferiblemente, se tomó bicalutamida en el mismo momento cada día en los días D1-D14, y se usó una agenda de medicación del paciente para registrar cualquier interrupción de la dosificación de bicalutamida.

Se proporcionaron anti-eméticos y antí-diarreicos profilácticos cuando fue apropiado. El tratamiento se repitió después de 28 días con una transfusión de anticuerpo y una inyección IM de 7,5 mg de LUPRON DEPOT durante un máximo de tres ciclos (D1 , D28 y D56) antes de la cirugía.

Opcionalmente, la dosis del anticuerpo está aumentada, por ejemplo, de 1 a 3 mg/kg, de 3 a 6 mg/kg y de 6 a 10 mg/kg, y similares. Las dosis se aumentan usando un diseño de titulación acelerada utilizando un esquema para doblar la dosis con 3-6 sujetos por cohorte. En cada nueva cohorte no es necesario un periodo de espera entre los sujetos. Las cohortes posteriores no se abren hasta que el primer sujeto en el nivel de dosis actual se haya observado durante 21 días y los sujetos posteriores se observan durante 14 días. Más preferiblemente, la dosis de partida se mantiene salvo que una toxicidad o cualquier otro indicio adverso requiera la reducción de la dosis.

Después de la cirugía, se administran hasta tres ciclos adicionales de combinación de terapia de anticuerpo-hormonas, preferiblemente en los 45 días posteriores a la prostatectomía. Después de la cirugía, se co-administran el anticuerpo (IV) y 7,5 mg de leuprolida (IM) cada veintiocho días sin bicalutamida.

Es digno de atención que en estudios de un solo agente en melanoma, 1 de cada tres pacientes tratados con una sola dosis de 6 mg/kg de ticilimumab tuvo una diarrea de grado 3, y ninguno de los pacientes tratados con múltiples dosis de 6 mg/kg tuvo diarrea. Por el contrario, en el presente estudio, 2 de cada 3 pacientes tratados con la combinación de terapia hormonal y bloqueo de CTLA4 tuvieron diarrea de grado 3. Es mucho más notable que la gravedad (duración y magnitud) de la diarrea fuera significativamente superior a la observada previamente en cualquier otro estudio a cualquier nivel de dosis. Por ejemplo, un paciente que recibió 3 mg/kg de ticilimumab y terapia hormonal mostró diarrea prolongada. Esto sugiere una interacción entre la terapia hormonal y ticilimumab, de modo que la capacidad de ticilimumab para inducir diarrea estaba potenciada. Se considera que la diarrea está mediada farmacológicamente en el sentido de que probablemente está relacionada con el mecanismo de acción de ticilimumab. Por lo tanto, estos datos sugieren que hay una interacción biológica entre HT y el bloqueo de CTLA4, suponiendo que la diarrea sea un efecto mediado por el sistema inmune. De esta manera, estos datos sugieren una posible asociación entre los efectos potenciales mediados por el sistema inmune mediados por la terapia hormonal y el bloqueo de CTLA4. Se ha informado de una posible correlación entre la respuesta del tumor en melanoma y los supuestos "sucesos de avances autoinmunes" para un único agente de bloqueo de CTLA4 en ausencia de cualquier otra terapia (véase, Attia et al., J. Clin Oncol. 23 (25):6043-6053 (2005)). De esta manera, puede haber un efecto sinérgico mediado por la terapia hormonal y la terapia de anticuerpo que se sugiere por los datos de mayor gravedad de la diarrea observada en el presente estudio.

Una cohorte de tres pacientes se asignó a 6 mg/kg de tícilimumab (también conocido como anticuerpo 11.2.1 o CP-675.206). Uno de los 3 pacientes (paciente número 1005-1004) permaneció en estudio y se sometió prostatectomía. La muestra de prostatectomía mostró una regresión tumoral detectable y signos de un infiltrado inflamatorio alrededor de las células tumorales (Figura 4). Es decir, después de tres meses de terapia con anticuerpo y terapia hormonal (leuprolida y bicalutamida), se detectaron efectos de tratamiento prolongado e infiltrados linfocíticos en una muestra de prostatectomía obtenida de un paciente. Los otros dos pacientes experimentaron diarrea y no completaron el estudio.

Se observó evidencia del efecto del tratamiento en las muestras de prostatectomía de varios pacientes tratados con 1 mg/kg y 6 mg/kg. Estos efectos incluyeron regresión del carcinoma y tejido glandular de próstata benigno, infiltrados linfocíticos (véase, Figura 4) y signos de inflamación aguda y crónica. Tanto la magnitud de los cambios observados en el tejido glandular como los cambios inflamatorios e inmunes, no pueden atribuirse únicamente al bloqueo de andrógenos, y por lo tanto sugieren un efecto mediado por el sistema inmune del anticuerpo anti- CTLA4 11.2.1 (también conocido como ticilimumab) sobre el tejido glandular de la próstata.

Ejemplo 2: Anti-CTLA4 en Combinación con al Menos Dos Agentes de Terapia Hormonal en el Tratamiento Adyuvante de Cáncer de Próstata Clínicamente Localizado A pacientes con cáncer de próstata clínicamente localizado se les administra (antes y durante radioterapia) tanto goserelina (ZOLADEX) y flutamida (EULEXIN) según el protocolo de terapia hormonal, por ejemplo, se administran 250 mg tid (tres veces al día) de EULEXIN y se administran 3,6 mg de ZOLADEX por vía subcutánea mensualmente durante un total de cuatro meses (2 meses antes y 2 meses durante la radioterapia). Como alternativa, el paciente recibe 24 meses adicionales de tratamiento con ZOLADEX. Dicho régimen para terapia adyuvante, típicamente administrada con radioterapia, pero no con o después de la cirugía, se describe en, por ejemplo, Hanks et al., J Clin Oncology 21 :3972-3978 (2003).

Al paciente se le administra adicionalmente una sola infusión IV (100 ml/h) de ticilimumab como se describe en este documento a una dosis de aproximadamente 3 mg/kg, ó 6 mg/kg ó 10 mg/kg ó 15 mg/kg. Se proporcionan antidiarreicos profilácticos según sea apropiado. El tratamiento se repite después de 28 días con anti-CTLA4 a la dosis inicial recibida, preferiblemente, sin aumento de la dosis, posteriormente cada 28 días durante un máximo de 12 ciclos en ausencia de toxicidad intolerable o progresión de la enfermedad. Como alternativa, el anticuerpo se administra cada tres meses. ZOLADEX se coadministra con el anticuerpo y/o cada veintiocho días, por vía subcutánea a 3,6 mg.

Preferiblemente, el paciente se premedica con antihistamina (H1 ) al menos media hora antes de la infusión de ticilimumab. Se recomienda la premedicación, pero no es necesaria.

Además, puede administrarse un agente con efecto anti-diarreico, incluyendo los agentes indicados en el tratamiento de afecciones inflamatorias crónicas del tracto gastrointestinal. Estos agentes ¡ncluyen, entre otros, esteroides con actividad tópica (por ejemplo, budesonida [ENTOCORT]), y fármacos anti-factor de necrosis tumoral (TNF) (por ejemplo, infllximab [REMICADE], etanercept [ENBREL], y adalimumab [HUMIRA]).

El ticilimumab se proporciona en viales de vidrio transparente de 20 ml con un tapón de goma y un precinto de aluminio. Cada vial contiene 20 mg/ml (con una carga nominal de 400 mg/vial) de ticilimumab, en una solución acuosa estéril que comprende tampón histidina 20 mM, pH 5,5, 84 mg/ml de trehalosa dihidrato, 0,2 mg/ml de polisorbato 80 y 0,1 mg/ml de EDTA disódico dihidrato.

En todos los pacientes se evalúa el estado de rendimiento ECOG, signos vitales y peso corporal antes de la dosis, y la evaluación de los signos vitales puede repetirse después de la dosis, cuando está indicado clínicamente. Se realiza un examen físico (incluyendo evaluación oftalmológica y signos de autoinmunidad) en el Día 1. Se obtienen muestras para el panel hematológico (hematocrito, recuento de glóbulos rojos, recuento de glóbulos blancos, diferencial), química (Fosfatasa Alcalina, calcio, cloruro, GGT, LDH, magnesio, fósforo, glucosa aleatoria, sodio, urea, ácido úrico), urinálisis (sangre, proteínas), otros (tiempo de tromboplastina parcial activada [APTT], tiempo de protrombina (PT), panel de autoanticuerpos, proteína reactiva C, TSH, T3, T4, amilasa, lipasa, C3 en suero, C4, nivel de Ig en suero), y PSA.

Se determina el título de anticuerpo humano anti-humano (HAHA) inicial y se obtiene una muestra farmacocinética (PK) antes de la dosis.

Se miden los siguientes criterios de valoración: parámetros PK, HAHA, velocidad de respuesta y tiempo de progresión. El tiempo de progresión y la supervivencia global se calculan usando el método de producto límite de Kaplan-Meier.

El anticuerpo anti-CTLA4 tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de al menos un anticuerpo seleccionado entre 4.1.1 , 4.13.1 , ticilimumab e ipilimumab. El anticuerpo tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de ticilimumab. El anticuerpo anti- CTLA4 es ticilímumab.

Ejemplo 3: Anti-CTLA4 en Combinación con al Menos Dos Agentes de Terapia Hormonal en el Tratamiento de Pacientes con Cáncer de Próstata con Elevación de PSA A pacientes con cáncer de próstata y elevación de PSA después de la cirugía o radioterapia se les administra leuprolida (LUPRON) o goserelina (ZOLADEX), con o sin bicalutamida (CASODEX) o flutamida (EULEXIN) según el protocolo de terapia hormonal convencional, por ejemplo, se administran 7,5 mg de LUPRON por vía intramuscular aproximadamente cada cuatro semanas, se administran 3,6 mg de ZOLADEX por vía subcutánea aproximadamente cada cuatro semanas, se administran 50 mg de CASODEX al día durante catorce días del primer ciclo únicamente, y se administran tid 250 mg de EULEXIN diariamente. Al paciente se le administra adicionalmente una sola infusión IV (100 ml/h) de ticilimumab como se describe en este documento a una dosis de aproximadamente 1 mg/kg, 3 mg/kg, 6 mg/kg, 10 mg/kg o 15 mg/kg. Se proporcionan anti-diarrelcos profilácticos cuando es apropiado.

Posteriormente, el tratamiento se repite cada 28 días sin aumento de la dosis, en ausencia de toxicidad intolerable o progresión de la enfermedad. LUPRON se administra cada veintiocho días, IM a 7,5 mg.

Preferiblemente, el paciente se premedica con antihistamina (H1) al menos media hora antes de la infusión de anti-CTLA4. Se recomienda la premedicación pero no es necesaria.

Además, puede administrarse un agente con efecto anti-diarreico, incluyendo los agentes indicados en el tratamiento de afecciones inflamatorias crónicas del tracto gastrointestinal. Estos agentes incluyen, entre otros, esteroides con actividad tópica (por ejemplo, budesonida [ENTOCORT]), y fármacos anti-factor de necrosis tumoral (TNF) (por ejemplo, infliximab [REMICADE], etanercept [ENBREL] y adalimumab [HUMIRA]).

Se proporciona ticilimumab en viales de vidrio transparente de 20 ml con un tapón de goma y un precinto de aluminio. Cada vial contiene 20 mg/ml (con una carga nominal de 400 mg/vial) de ticilimumab, en una solución acuosa estéril que comprende tampón histídina 20 mM, pH 5,5, 84 mg/ml de trehalosa dihidrato, 0,2 mg/ml de polisorbato 80 y 0,1 mg/ml de EDTA disódico dihidrato.

En todos los pacientes, se evalúan el estado de rendimiento ECOG, signos vitales y peso corporal antes de la dosis, y la evaluación de los signos vitales puede repetirse después de la dosis, cuando está indicado clínicamente. Se realiza un examen físico (incluyendo evaluación oftalmológica y signos de autoinmunidad) en el Día 1. Se obtienen muestras para el panel hematológico (hematocrito, recuento de glóbulos rojos, recuento de glóbulos blancos, diferencial), química (Fosfatasa Alcalina, calcio, cloruro, GGT, LDH, magnesio, fósforo, glucosa aleatoria, sodio, urea, ácido úrico), urinálisis (sangre, proteínas), otros (tiempo de tromboplastina parcial activada [APTT], tiempo de protrombina (PT), panel de autoanticuerpos, proteína reactiva C, TSH, T3, T4, amilasa, lipasa, C3 en suero, C4, nivel de Ig en suero) y PSA.

Se determina el título de anticuerpo humano antí-humano (HAHA) basal y se obtiene una muestra farmacocinética (PK) antes de la dosis.

Se miden los siguientes criterios de valoración: parámetros PK, HAHA, velocidad de respuesta y tiempo de progresión. El tiempo de progresión y la supervivencia global se calculan usando el método de producto límite de Kaplan-Meier.

El anticuerpo anti-CTLA4 tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de al menos un anticuerpo seleccionado entre 4.1.1, 4.13.1, ticilimumab e ipilimumab. El anticuerpo tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de ticilimumab. El anticuerpo anti- CTLA4 es ticilimumab.

Ejemplo 4r Anti-CTLA4 en Combinación con al Menos un Agente de Terapia Hormonal en el Tratamiento de Primera Línea o Segunda Linea de Cáncer de Próstata Metastásico Independiente de Hormonas A pacientes con cáncer de próstata metastásico (después de cirugía o radioterapia) se les administra leuprolída (LUPRON) y bicalutamida (CASODEX) según el protocolo de terapia hormonal convencional, por ejemplo, se administran 50 mg de CASODEX al día durante catorce días del primer ciclo únicamente, y se administran 7,5 mg de LUPRON por vía intramuscular aproximadamente cada cuatro semanas. Al paciente se le administra adicionalmente una infusión IV única (100 ml/h) de anticuerpos anti-CTLA4 como se describe en este documento a una dosis de aproximadamente 1 mg/kg, 3 mg/kg, 6 mg/kg, 10 mg/kg o 15 mg/kg. Se proporcionan anti-eméticos y anti-diarreicos profilácticos cuando es apropiado.

Posteriormente, el tratamiento se repite cada 28 días sin aumento de la dosis, en ausencia de toxicidad intolerable o progresión de la enfermedad. Se administra LUPRON cada veintiocho días, IM a 7,5 mg.

Preferiblemente, el paciente se premedica con antíhistamina (H1) al menos media hora antes de la infusión de anti-CTLA4. Se recomienda la premedicación pero no es necesaria.

Además, puede administrarse un agente con efecto anti-diarreico, incluyendo los agentes indicados en el tratamiento de afecciones inflamatorias crónicas del tracto gastrointestinal. Estos agentes incluyen, entre otros, esteroides con actividad tópica (por ejemplo, budesonida [ENTOCORT]), y fármacos anti-factor de necrosis tumoral (TNF) (por ejemplo, infliximab [REMICADE], etanercept [ENBREL] y adalimumab [HUMIRA]).

El ticilimumab se proporciona en viales de vidrio transparente de 20 ml con un tapón de goma y un precinto de aluminio. Cada vial contiene 20 mg/ml (con una carga nominal de 400 mg/vial) de ticilimumab, en una solución acuosa estéril que comprende tampón histidina 20 mM, pH 5,5, 84 mg/ml de trehalosa dihidrato, 0,2 mg/ml de polisorbato 80 y 0,1 mg/ml de EDTA disódico dihidrato.

En todos los pacientes, se evalúan el estado de rendimiento ECOG, signos vitales, y peso corporal antes de la dosis, y la evaluación de los signos vitales puede repetirse después de la dosis, cuando está indicado clínicamente. Se realiza un examen físico (incluyendo evaluación oftalmológica y signos de autoinmunidad) en el Día 1. Se obtienen muestras para el panel hematológico (hematocrito, recuento de glóbulos rojos, recuento de glóbulos blancos, diferencial), química (Fosfatasa Alcalina, calcio, cloruro, GGT, LDH, magnesio, fósforo, glucosa aleatoria, sodio, urea, ácido úrico), urinálisis (sangre, proteínas), otros (tiempo de tromboplastina parcial activada [APTT], tiempo de protrombina (PT), panel de autoanticuerpos, proteína reactiva C, TSH, T3, T4, amilasa, lipasa, C3 en suero, C4, nivel de Ig en suero) y PSA.

Se determina el título de anticuerpo humano anti-humano (HAHA) basal y se obtiene una muestra farmacocinética (PK) antes de la dosis.

Se miden los siguientes criterios de valoración: parámetros PK, HAHA, velocidad de respuesta y tiempo de progresión. El tiempo de progresión y la supervivencia global se calculan usando el método de producto límite de Kaplan-Meier.

El anticuerpo anti-CTLA4 tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de al menos un anticuerpo seleccionado entre 4.1.1 , 4.13.1 , ticilimumab e ipilimumab. El anticuerpo tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de ticilimumab. El anticuerpo anti- CTLA4 es ticilimumab.

Ejemplo 5: Anti-CTLA4 en Combinación con al Menos un Agente de Terapia Hormonal en el Tratamiento de Primera Línea o de Segunda Línea de Cáncer de Próstata Metastásico Independiente de Hormonas A pacientes con cáncer de próstata metastásico (después de cirugía o radioterapia) se les administra leuprolida (LUPRON) y bicalutamida (CASODEX) según el protocolo de terapia hormonal convencional, por ejemplo, se administran 50 mg de CASODEX al día durante catorce días del primer ciclo únicamente, y se administran 7,5 mg de LUPRON por vía intramuscular aproximadamente cada cuatro semanas. Al paciente se le administra adicionalmente una sola infusión IV (100 ml/h) de anticuerpo anti-CTLA4 como se describe en este documento a una dosis de aproximadamente 15 mg/kg. Se proporcionan anti-eméticos y anti-diarreicos profilácticos cuando es apropiado.

Posteriormente, el anticuerpo se administra cada tres meses sin aumento de la dosis, en ausencia de toxicidad intolerable o progresión de la enfermedad. Se administra leuprolida cada veintiocho días, IM a 7,5 mg.

Preferiblemente, el paciente se premedica con antihistamina (H1) al menos media hora antes de la infusión de anti-CTLA4. Se recomienda la premedicación pero no es necesaria.

Además, puede administrarse un agente con efecto anti-diarreico, incluyendo los agentes indicados en el tratamiento de afecciones inflamatorias crónicas del tracto gastrointestinal. Estos agentes incluyen, entre otros, esteroides con actividad tópica (por ejemplo, budesonida [ENTOCORT]), y fármacos anti-factor de necrosis tumoral (TNF) (por ejemplo, infliximab [REMICADE], etanercept [ENBREL] y adalimumab [HUMIRA]).

El ticilimumab se proporciona en viales de vidrio transparente de 20 ml con un tapón de goma y un precinto de aluminio. Cada vial contiene 20 mg/ml (con una carga nominal de 400 mg/vial) de ticilímumab, en una solución acuosa estéril que comprende tampón histidina 20 mM, pH 5,5, 84 mg/ml de trehalosa dihidrato, 0,2 mg/ml de polisorbato 80 y 0,1 mg/ml de EDTA disódico dihidrato.

En todos los pacientes, se evalúan el estado de rendimiento ECOG, signos vitales y peso corporal antes de la dosis, y la evaluación de los signos vitales puede repetirse después de la dosis, cuando está indicado clínicamente. Se realiza un examen físico (incluyendo evaluación oftalmológica y signos de autoinmunidad) en el Día 1. Se obtienen muestras para el panel hematológico (hematocrito, recuento de glóbulos rojos, recuento de glóbulos blancos, diferencial), química (Fosfatasa Alcalina, calcio, cloruro, GGT, LDH, magnesio, fósforo, glucosa aleatoria, sodio, urea, ácido úrico), urinálisis (sangre, proteínas), otros (tiempo de tromboplastina parcial activada [APTT], tiempo de protrombina (PT), panel de autoanticuerpos, proteína reactiva C, TSH, T3, T4, amilasa, lipasa, C3 en suero, C4, nivel de Ig en suero) y PSA.

Se determina el título de anticuerpo humano anti-humano (HAHA) basal y se obtiene una muestra farmacocinética (PK) antes de la dosis.

Se miden los siguientes criterios de valoración: parámetros PK, HAHA, velocidad de respuesta y tiempo de progresión. El tiempo de progresión y la supervivencia global se calculan usando el método de producto límite de Kaplan-Meier.

El anticuerpo anti-CTLA4 tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de al menos un anticuerpo seleccionado entre 4.1.1, 4.13.1, ticilimumab e ipilimumab. El anticuerpo tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de ticilimumab. El anticuerpo anti- CTLA4 es ticilimumab.

Ejemplo 6: Anti-CTLA4 en Combinación Secuencial con Hormonas en el Tratamiento de Cáncer de Próstata Dependiente de Hormonas A pacientes con cáncer de próstata dependiente de hormonas, incluyendo pacientes que no han recibido terapia hormonal anterior, se les administra al menos un curso de terapia hormonal que comprende al menos un agente de terapia hormonal según el protocolo de terapia hormonal convencional (por ejemplo, se administran 7,5 mg de leuprolida (LUPRON) por vía intramuscular aproximadamente cada cuatro semanas, se administran 3,6 mg de goserelina (ZOLADEX) por vía subcutánea aproximadamente cada cuatro semanas, se administran 50 mg de bicalutamida (CASODEX) al día durante catorce días del primer ciclo únicamente, y se administran tid 250 mg de flutamida (EULEXIN) al día, entre otros). Después de al menos un curso de terapia hormonal y después de dejar pasar al menos una semana pero menos de cuatro meses después de la administración de la última dosis de agente de terapia hormonal, al paciente se le administra secuencialmente una sola infusión IV (100 ml/h) de tlcilimumab como se describe en este documento a una dosis de al menos 10 mg/kg cada cuatro semanas. Se proporcionan antidiarreicos profilácticos según sea apropiado.

El tratamiento se repite como se indica con o sin aumento de la dosis, en ausencia de toxicidad intolerable o progresión de la enfermedad.

El paciente se premedica con antihistamina (H1) al menos media hora antes de la infusión de anti-CTLA4, pero la premedicación no es necesaria.

Además, puede administrarse un agente con efecto anti-diarreico, incluyendo los agentes indicados en el tratamiento de afecciones inflamatorias crónicas del tracto gastrointestinal. Estos agentes incluyen, entre otros, esferoides con actividad tópica (por ejemplo, budesonida [ENTOCORT]), y fármacos anti-factor de necrosis tumoral (TNF). (por ejemplo, ¡nfliximab [REMICADE], etanercept [ENBREL] y adalímumab [HUMIRA]).

El ticilimumab se proporciona en víales de vidrio transparente de 20 ml con un tapón de goma y un precinto de aluminio. Cada vial contiene 20 mg/ml (con una carga nominal de 400 mg/vial) de ticilimumab, en una solución acuosa estéril que comprende tampón histidina 20 mM, pH 5,5, 84 mg/ml de trehalosa dihidrato, 0,2 mg/ml de polisorbato 80 y 0,1 mg/ml de EDTA disódico dihidrato.

En todos los pacientes, se evalúan el estado de rendimiento ECOG, signos vitales y peso corporal antes de la dosis, y la evaluación de los signos vitales puede repetirse después de la dosis, cuando está indicado clínicamente. Se realiza un examen físico (incluyendo evaluación oftalmológica y signos de autoinmunidad) en el Día 1. Se obtienen muestras para el panel hematológico (hematocrito, recuento de glóbulos rojos, recuento de glóbulos blancos, diferencial), química (Fosfatasa Alcalina, calcio, cloruro, GGT, LDH, magnesio, fósforo, glucosa aleatoria, sodio, urea, ácido úrico), urinálisis (sangre, proteínas), otros (tiempo de tromboplastina parcial activada [APTT], tiempo de protrombina (PT), panel de autoanticuerpos, proteína reactiva C, TSH, T3, T4, amilasa, lipasa, C3 en suero, C4, nivel de Ig en suero) y PSA.

Se determina el título de anticuerpo humano anti-humano (HAHA) basal y se obtiene una muestra farmacocinética (PK) antes de la dosis.

Se miden los siguientes criterios de valoración: parámetros PK, HAHA, velocidad de respuesta y tiempo de progresión. El tiempo de progresión y la supervivencia global se calculan usando el método de producto límite de Kaplan-Meier.

El anticuerpo anti-CTLA4 tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de al menos un anticuerpo seleccionado entre 4.1.1, 4.13.1, ticilimumab e ipilimumab. El anticuerpo tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de ticilimumab. El anticuerpo anti- CTLA4 es ticilimumab.

Ejemplo 7 Ant?-CTLA4 en Combinación Secuencial con Hormonas en el Tratamiento de Cáncer de Próstata Dependiente de Hormonas A pacientes con cáncer de próstata dependiente de hormonas, incluyendo pacientes que no han recibido terapia hormonal anterior, se les administra al menos un transcurso de terapia hormonal que comprende al menos un agente de terapia hormonal según el protocolo de terapia hormonal convencional (por ejemplo, se administran 7,5 mg de leuprolida (LUPRON) por vía intramuscular aproximadamente cada cuatro semanas, se administran 3,6 mg de goserelina (ZOLADEX) por vía subcutánea aproximadamente cada cuatro semanas, se administran 50 mg de bicalutamida (CASODEX) al día durante catorce días del primer ciclo únicamente, y se administran tid 250 mg de flutamida (EULEXIN) al día, entre otros) Después de al menos un curso de terapia hormonal y después de dejar pasar al menos una semana pero menos de cuatro meses después de la administración de la ultima dosis de agente de terapia hormonal, al paciente se le administra secuencialmente una sola infusión IV (100 ml/h) de ticilimumab como se describe en este documento a una dosis de al menos 15 mg/kg cada cuatro semanas Se proporcionan anti-diarreicos profilácticos cuando es apropiado El tratamiento se repite como se indica con o sin aumento de la dosis, en ausencia de toxicidad intolerable o progresión de la enfermedad El paciente se premedica con antihistamina (H1 ) al menos media hora antes de la infusión de ant?-CTLA4, pero la premedicación no es necesaria Además, puede administrarse un agente con efecto anti-diarreico, incluyendo los agentes indicados en el tratamiento de afecciones inflamatorias crónicas del tracto gastrointestinal Estos agentes incluyen, entre otros, esferoides con actividad tópica (por ejemplo, budesonida [ENTOCORT]), y fármacos anti-factor de necrosis tumoral (TNF) (por ejemplo, infliximab [REMICADE], etanercept [ENBREL], y adalimumab [HUMIRA]).

El ticilimumab se proporciona en viales de vidrio transparente de 20 ml con un tapón de goma y un precinto de aluminio. Cada vial contiene 20 mg/ml (con una carga nominal de 400 mg/vial) de ticilimumab, en una solución acuosa estéril que comprende tampón histidina 20 mM, pH 5,5, 84 mg/ml de trehalosa dihidrato, 0,2 mg/ml de polisorbato 80, y 0,1 mg/ml de EDTA disódico dihidrato.

En todos los pacientes, se evalúan el estado de rendimiento ECOG, signos vitales, y peso corporal antes de la dosis, y la evaluación de los signos vitales puede repetirse después de la dosis, cuando está indicado clínicamente. Se realiza un examen físico (incluyendo evaluación oftalmológica y signos de autoinmunidad) en el Día 1. Se obtienen muestras para el panel hematológico (hematocrito, recuento de glóbulos rojos, recuento de glóbulos blancos, diferencial), química (Fosfatasa Alcalina, calcio, cloruro, GGT, LDH, magnesio, fósforo, glucosa aleatoria, sodio, urea, ácido úrico), urinálisis (sangre, proteínas), otros (tiempo de tromboplastina parcial activada [APTT], tiempo de protrombina (PT), panel de autoanticuerpos, proteína reactiva C, TSH, T3, T4, amilasa, lipasa, C3 en suero, C4, nivel de Ig en suero) y nivel de PSA.

Se determina el título de anticuerpo humano anti-humano (HAHA) basal y se obtiene una muestra farmacocinética (PK) antes de la dosis.

Se miden los siguientes criterios de valoración: parámetros PK, HAHA, velocidad de respuesta y tiempo de progresión. El tiempo de progresión y la supervivencia global se calculan usando el método de producto límite de Kaplan-Meier.

El anticuerpo anti-CTLA4 tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de al menos un anticuerpo seleccionado entre 4.1.1 , 4.13.1 , ticilimumab e ipilimumab. El anticuerpo tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de ticilimumab. El anticuerpo anti-CTLA4 es ticilimumab.

Ejemplo 8: Anti-CTLA4 en Combinación Secuencial con al Menos un Agente de Terapia Hormonal en el Tratamiento de Cáncer de Próstata Independiente de Hormonas A pacientes con cáncer de próstata independiente de hormonas, por ejemplo, después de terapia hormonal previa (por ejemplo, leuprolida (LUPRON), goserelina (ZOLADEX), bicalutamida (CASODEX), flutamida (EUXELIN), y combinaciones de los mismos según el protocolo de terapia hormonal convencional), se les administra al menos un curso de terapia hormonal que comprende al menos un agente de terapia hormonal según el protocolo de terapia hormonal convencional (por ejemplo, se administran 7,5 mg de LUPRON por vía intramuscular aproximadamente cada cuatro semanas, se administran 3,6 mg de ZOLADEX por vía subcutánea aproximadamente cada cuatro semanas, se administran 50 mg de CASODEX al día durante catorce días del primer ciclo únicamente, y se administran tid 250 mg de EULEXIN al día). Después de al menos un curso de terapia hormonal y después de dejar pasar un periodo de al menos una semana pero no más de cuatro meses después de administrar la última dosis de agente de terapia hormonal, al paciente se le administra una sola infusión IV (100 ml/h) de ticilimumab como se describe en este documento a una dosis de al menos 10 mg/kg cada veintiocho días.

El tratamiento se repite sin aumento de la dosis, en ausencia de toxicidad intolerable o progresión de la enfermedad. Por ejemplo, se administra LUPRON IM cada veintiocho días a 7,5 mg.

El paciente se premedica con antihistamina (H1) al menos media hora antes de la infusión de ticilimumab, pero no es necesaria la premedicación.

Además, puede administrarse un agente con efecto anti-diarreico, incluyendo los agentes indicados en el tratamiento de afecciones inflamatorias crónicas del tracto gastrointestinal. Estos agentes incluyen, entre otros, esteroides con actividad tópica (por ejemplo, budesonida [ENTOCORT]), y fármacos anti-factor de necrosis tumoral (TNF) (por ejemplo, infliximab [REMICADE], etanercept [ENBREL], y adalimumab [HUMIRA]).

El ticilimumab se proporciona en viales de vidrio transparente de 20 ml con un tapón de goma y un precinto de aluminio. Cada vial contiene 20 mg/ml (con una carga nominal de 400 mg/vial) de ticilimumab, en una solución acuosa estéril que comprende tampón histidina 20 mM, pH 5,5, 84 mg/ml de trehalosa dihidrato, 0,2 mg/ml de polisorbato 80, y 0,1 mg/ml de EDTA disódico dihidrato.

En todos los pacientes, se evalúan el estado de rendimiento ECOG, signos vitales, y peso corporal antes de la dosis, y la evaluación de los signos vitales puede repetirse después de la dosis, cuando está indicado clínicamente. Se realiza un examen físico (incluyendo evaluación oftalmológica y signos de autoinmunidad) en el Día 1. Se obtienen muestras para el panel hematológico (hematocrito, recuento de glóbulos rojos, recuento de glóbulos blancos, diferencial), química (Fosfatasa Alcalina, calcio, cloruro, GGT, LDH, magnesio, fósforo, glucosa aleatoria, sodio, urea, ácido úrico), urinálisis (sangre, proteínas), otros (tiempo de tromboplastina parcial activada [APTT], tiempo de protrombina (PT), panel de autoanticuerpos, proteína reactiva C, TSH, T3, T4, amilasa, lipasa, C3 en suero, C4, nivel de Ig en suero), y nivel de PSA.

Se determina el título de anticuerpo humano anti-humano (HAHA) basal y se obtiene una muestra farmacocinética (PK) antes de la dosis.

Se miden los siguientes criterios de valoración: parámetros PK, HAHA, velocidad de respuesta y tiempo de progresión. El tiempo de progresión y la supervivencia global se calculan usando el método de producto límite de Kaplan-Meier.

El anticuerpo anti-CTLA4 tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de al menos un anticuerpo seleccionado entre 4.1.1 , 4.13.1 , ticilimumab e ipilimumab. El anticuerpo tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de ticilimumab. El anticuerpo anti-CTLA4 es ticilimumab.

Ejemplo 9: Anti-CTLA4 en Combinación Secuencial con al Menos un Agente de Terapia Hormonal en el Tratamiento de Cáncer de Próstata Independiente de Hormonas A pacientes con cáncer de próstata independiente de hormonas, por ejemplo, después de terapia hormonal previa (por ejemplo, leuprolida (LUPRON), goserelina (ZOLADEX), bicalutamida (CASODEX), flutamida (EUXELIN), y combinaciones de los mismos según el protocolo de terapia hormonal convencional), se les administra al menos un curso de terapia hormonal que comprende al menos un agente de terapia hormonal según el protocolo de terapia hormonal convencional (por ejemplo, se administran 7,5 mg de LUPRON por vía intramuscular aproximadamente cada cuatro semanas, se administran 3,6 mg de ZOLADEX por vía subcutánea aproximadamente cada cuatro semanas, se administran 50 mg de CASODEX al día durante catorce días del primer ciclo únicamente, y se administran tid 250 mg de EULEXIN al día). Después de al menos un curso de terapia hormonal, y después de dejar pasar un periodo de al menos una semana pero no más de cuatro meses después de administrar la última dosis de agente de terapia hormonal, al paciente se le administra una sola infusión IV (100 ml/h) de ticilimumab como se describe en este documento a una dosis de al menos 15 mg/kg cada tres meses.

El tratamiento se repite sin aumento de la dosis, en ausencia de toxicidad intolerable o progresión de la enfermedad. Por ejemplo, se administra LUPRON IM cada veintiocho días a 7,5 mg.

El paciente se premedica con antihistamina (H1) al menos media hora antes de la infusión de ticilimumab, pero no es necesaria la premedicación.

Además, puede administrarse un agente con efecto anti-diarreico, incluyendo los agentes indicados en el tratamiento de afecciones inflamatorias crónicas del tracto gastrointestinal. Estos agentes incluyen, entre otros, esteroides con actividad tópica (por ejemplo, budesonida [ENTOCORT]), y fármacos anti-factor de necrosis tumoral (TNF) (por ejemplo, infliximab [REMICADE], etanercept [ENBREL], y adalimumab [HUMIRA]).

El ticilimumab se proporciona en viales de vidrio transparente de 20 ml con un tapón de goma y un precinto de aluminio. Cada vial contiene 20 mg/ml (con una carga nominal de 400 mg/vial) de ticilimumab, en una solución acuosa estéril que comprende tampón histidina 20 mM, pH 5,5, 84 mg/ml de trehalosa dihidrato, 0,2 mg/ml de polisorbato 80, y 0,1 mg/ml de EDTA disódico dihidrato.

En todos los pacientes, se evalúan el estado de rendimiento ECOG, signos vitales, y peso corporal antes de la dosis, y la evaluación de los signos vitales puede repetirse después de la dosis, cuando está indicado clínicamente. Se realiza un examen físico (incluyendo evaluación oftalmológica y signos de autoinmunídad) en el Día 1. Se obtienen muestras para el panel hematológico (hematocrito, recuento de glóbulos rojos, recuento de glóbulos blancos, diferencial), química (Fosfatasa Alcalina, calcio, cloruro, GGT, LDH, magnesio, fósforo, glucosa aleatoria, sodio, urea, ácido úrico), urinálisis (sangre, proteínas), otros (tiempo de tromboplastina parcial activada [APTT], tiempo de protrombina (PT), panel de autoanticuerpos, proteína reactiva C, TSH, T3, T4, amilasa, lipasa, C3 en suero, C4, nivel de Ig en suero), y nivel de PSA.

Se determina el título de anticuerpo humano anti-humano (HAHA) basal y se obtiene una muestra farmacocinética (PK) antes de la dosis.

Se miden los siguientes criterios de valoración: parámetros PK, HAHA, velocidad de respuesta y tiempo de progresión. El tiempo de progresión y la supervivencia global se calculan usando el método de producto límite de Kaplan-Meier.

El anticuerpo anti-CTLA4 tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de al menos un anticuerpo seleccionado entre 4.1.1, 4.13.1, ticilimumab e ipilimumab. El anticuerpo tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de ticílimumab. El anticuerpo anti-CTLA4 es ticilimumab.

Las descripciones de todas y cada una de las patentes, solicitudes de patente, y publicaciones citadas en este documento se incorporan por la presente como referencia en su totalidad.

Aunque la invención se ha descrito con respecto a realizaciones específicas, es evidente que otros especialistas en la técnica pueden elaborar otras realizaciones y variaciones de esta invención sin alejarse del verdadero espíritu y el alcance de la invención. Se pretende que se entienda que las reivindicaciones adjuntas incluyen todas estas realizaciones y variaciones equivalentes.

Claims (20)

REIVINDICACIONES

1. Un método para el tratamiento de cáncer de próstata en un paciente que lo necesite, comprendiendo dicho método administrar a dicho paciente a) una cantidad de un agente de terapia hormonal y b) una cantidad de un anticuerpo, o parte de unión a antígeno del mismo, que se une a CTLA4 humano, donde dicho anticuerpo o parte se administra primero más de un día y menos de veintiocho días después de la administración de dicho agente de terapia hormonal, y donde dichas cantidades son eficaces en combinación para dicho tratamiento.

2. El método de la reivindicación 1, en el que dicho anticuerpo o parte del mismo se administra más de dos días después de la administración de dicho agente de terapia hormonal.

3. El método de la reivindicación 1, en el que dicho anticuerpo o parte del mismo se administra menos de veintiún días después de la administración de dicho agente de terapia hormonal.

. 4. El método de la reivindicación 1 , en el que la administración de dicho agente de terapia hormonal termina antes de dicha primera administración de dicho anticuerpo o parte del mismo.

5. El método de la reivindicación 1 , en el que dicho agente de terapia hormonal se selecciona entre el grupo que consiste en un anti-andrógeno, un antagonista de la hormona de liberación de gonadotropina (GnRH), y un agonista de la hormona de liberación de hormona luteinizante (LH-RH).

6. El método de la reivindicación 1 , en el que dicho cáncer se selecciona entre cáncer dependiente de hormonas y cáncer independiente de hormonas.

7. El método de la reivindicación 1 , en el que dicho cáncer es independiente de hormonas y dicha administración de terapia hormonal termina antes de dicha primera administración de dicho anticuerpo o parte del mismo.

8. El método de la reivindicación 1 , en el que dicho anticuerpo se administra de acuerdo con un régimen seleccionado entre la administración de aproximadamente 10 mg/kg cada veintiocho días y la administración de aproximadamente 15 mg/kg cada tres meses.

9. El método de la reivindicación 1 , en el que dicho anticuerpo anti-CTLA4, o parte de unión a antígeno del mismo, es al menos un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en: (a) un anticuerpo humano que tiene una afinidad de unión por CTLA4 de aproximadamente 10'8 o superior, y que inhibe la unión entre CTLA4 y B7-1, y la unión entre CTLA4 y B7-2; (b) un anticuerpo humano que tiene una secuencia de aminoácidos que comprende al menos una secuencia de CDR humana que corresponde a una secuencia de CDR de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 4.1.1 , 4.8.1., 4.10.2, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1., 11.7.1., 12.3.1.1 , 12.9.1.1 e ipilimumab; (c) un anticuerpo humano que tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 4.1.1 , 4.8.1 , 4.10.2, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1 , 11.7.1., 12.3.1.1 , y 12.9.1.1; (d) un anticuerpo humano que tiene las secuencias de aminoácidos de una región variable de cadena pesada y una región variable de cadena ligera de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 4.1.1 , 4.8.1 , 4.10.2, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1 , 11.7.1., 12.3.1.1 , 12.9.1.1 e ipilimumab; (e) un anticuerpo, o parte de unión a antígeno del mismo, que compite por la unión a CTLA4 con al menos un anticuerpo que tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 4.1.1 , 4.8.1 , 4.10.2, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1 , 11.7.1., 12.3.1.1 , 12.9.1.1 e ipillmumab; y (f) un anticuerpo, o parte de unión a antígeno del mismo, que compite de manera cruzada por la unión a CTLA4 con al menos un anticuerpo que tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 4.1.1 , 4.8.1 , 4.10.2, 4.13.1 , 4.14.3, 6.1.1 , ticilimumab, 11.6.1 , 11.7.1., 12.3.1.1 , 12.9.1.1 e ipilimumab.

10. El método de la reivindicación 1 , en el que dicho anticuerpo es un anticuerpo humano que tiene las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de ticilimumab.

11. El método deja reivindicación 1 , en el que dicho anticuerpo comprende una cadena pesada y una cadena ligera, donde las secuencias de aminoácidos de la región variable de cadena pesada de dicha cadena pesada y la región variable de cadena ligera de dicha cadena ligera se seleccionan entre el grupo que consiste en: (a) la secuencia de aminoácidps de la SEC ID N°: 3 y la secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 9; (b) la secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 15 y la secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 21; (c) la secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 27 y la secuencia de aminoácidos de la SEC ID N°: 33; (d) la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia de ácido nucleico de la SEC ID N°: 1 y la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia de ácido nucleico de la SEC ID N°: 7; (e) la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia de ácido nucleico de la SEC ID N°: 13 y la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia de ácido nucleico de la SEC ID N°: 19; (f) la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia de ácido nucleico de la SEC ID N°: 25 y la secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia de ácido nucleico de la SEC ID N°: 31; (g) la secuencia de aminoácidos de una región variable de cadena pesada y una región variable de cadena ligera de ipilimumab.

12. El método de la reivindicación 1 , en el que dicho anticuerpo, o parte de unión a antígeno del mismo, es un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en: (a) un anticuerpo que tiene una región variable de cadena pesada que comprende las secuencias de aminoácidos expuestas en la SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5 y SEC ID N°: 6; y que tiene adicionalmente una región variable de cadena ligera que comprende las secuencias de aminoácidos expuestas en la SEC ID N°: 10, SEC ID N°: 11 y SEC ID N°: 12; (b) un anticuerpo que tiene una región variable de cadena pesada que comprende las secuencias de aminoácidos expuestas en la SEC ID N°: 16, SEC ID N°: 17 y SEC ID N°: 18, y que tiene adicionalmente una región variable de cadena ligera que comprende las secuencias de aminoácidos expuestas en la SEC ID N°: 22, SEC ID N°: 23 y SEC ID N°: 24; (c) un anticuerpo que tiene una región variable de cadena pesada que comprende las secuencias de aminoácidos expuestas en la SEC ID N°: 28, SEC ID N°: 29 y SEC ID N°:30, y que tiene adicionalmente una región variable de cadena ligera que comprende las secuencias de aminoácidos expuestas en la SEC ID N°: 34, SEC ID N°: 35 y SEC ID N°: 36; (d) un anticuerpo que tiene una región variable de cadena pesada que comprende las secuencias de aminoácidos de la CDR1, CDR2 y CDR3 de cadena pesada del anticuerpo ipilimumab, que tiene adicionalmente una región variable de cadena ligera que comprende las secuencias de aminoácidos de la CDR1 , CDR2 y CDR3 de cadena ligera del anticuerpo ipilimumab.

13. Un método para el tratamiento de un cáncer de próstata independiente de hormonas en un paciente en necesidad de dicho tratamiento, comprendiendo dicho método administrar a dicho paciente una cantidad de un anticuerpo que se une a CTLA4 humano, o parte de unión a antígeno del mismo, y una cantidad de un agente de terapia hormonal, donde dicho agente de terapia hormonal se administra en múltiples dosis durante un tiempo superior a un mes y donde dicho anticuerpo, o parte del mismo, se administra durante el periodo de administración de dicho agente de terapia hormonal, y donde dichas cantidades son eficaces en combinación para dicho tratamiento.

14. El método de la reivindicación 13, en el que dicho agente de terapia hormonal se administra durante un periodo superior a dos meses.

15. El método de la reivindicación 14, comprendiendo adicionalmente dicho método administrar dosis múltiples de dicho anticuerpo, o parte del mismo, durante un periodo superior a un mes que solapa con dicho periodo de administración de dicho agente de terapia hormonal.

16. El método de la reivindicación 15, en el que dicho periodo de administración de dicho anticuerpo, o parte del mismo, y dicho periodo de administración de dicho agente de terapia hormonal solapan en más de dos meses.

17. El método de la reivindicación 15, en el que dichas múltiples dosis de dicho anticuerpo, o parte del mismo, y dicho periodo de administración de dicho agente de terapia hormonal solapan en más de seis meses.

18. Un método para el tratamiento de cáncer de próstata dependiente de hormonas en un paciente en necesidad de dicho tratamiento, comprendiendo dicho método la co-administración a dicho paciente de una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo antí-CTLA4, o parte de unión a antígeno del mismo, y una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos dos agentes de terapia hormonal, donde dicho agente se selecciona entre el grupo que consiste en un anti- andrógeno, un antagonista de la hormona de liberación de gonadotropina (GnRH), y un agonista de la hormona de liberación de hormona luteinizante (LH-RH).

19. El método de la reivindicación 18, en el que dicho anti-andrógeno es bicalutamida y dicho agonista es leuprolida.

20. Una composición farmacéutica para el tratamiento de cáncer de próstata, comprendiendo dicha composición una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo anti-CTLA4, o parte de unión a antígeno del mismo, y una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos dos agentes de terapia hormonal, donde dicho agente de terapia hormonal se selecciona entre el grupo que consiste en un anti-andrógeno, un antagonista de la hormona de liberación de gonadotropina (GnRH) y un agonista de la hormona de liberación de hormona luteinizante (LH-RH).