MX2007004373A - Metodo para prevenir y tratar el remoldeo de las vias respiratorias e inflamacion pulmonar utilizando antagonistas de receptor adenosina a2b. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se refiere a los metodos para prevenir el remoldeo de las vias respiratorias utilizando los antagonistas de receptor adenosina 2AB. Esta invencion encuentra utilidad en el tratamiento y prevencion de asma, COPD, fibrosis pulmonar, enfisema, y otras enfermedades pulmonares. La invencion tambien se refiere a composiciones farmaceuticas para utilizarse en el metodo.

Description

MÉTODO PARA PREVENIR Y TRATAR EL REMOLDEO DE LAS VÍAS RESPIRATORIAS E INFLAMACIÓN PULMONAR UTILIZANDO ANTAGONISTAS DE RECEPTOR ADENOSINA A7R Campo de la Invención La presente invención se refiere a los métodos para prevenir el remoldeo de la vía respiratoria y/o inflamación pulmonar utilizando antagonistas de receptor adenosina A2B. Esta invención encuentra utilidad en el tratamiento y prevención de asma, COPD, fibrosis pulmonar, enfisema, y otras enfermedades pulmonares. La invención también se refiere a composiciones farmacéuticas para utilizarse en el método.

Antecedentes De acuerdo a la Fundación de América de Asma y Alergia y al Consejo Nacional Farmacéutico, un estimado de 17 millones de Americanos actualmente padecen de asma. Es la enfermedad crónica de niñez más común, afectando a más de un niño en 20, casi 5 millones de niños del todo, y es la única enfermedad crónica, además del SIDA y tuberculosis, con una tasa de muerte creciente. Cada año más de 5,000 Americanos mueren de asma. El costo anual de asma en 1998 se estimó que era de $11.3 billones. Los costos directos contabilizaron $7.5 billones y costos indirectos fueron $3.8 billones. Las hospitalizaciones se contaron por la porción más grande única del costo y la cantidad a casi medio millón de hospitalizaciones, 1.6 millones de visitas al cuarto de emergencias, y más de 10 millones de visitas de consultorio. Claramente existe una gran necesidad de nuevos métodos para tratar la condición. Según se discute por Elias et al. (1999) J. Clin. Inv. , 104(8) : 1001 -1006, los efectos del remoldeo de las vías respiratorias en el desarrollo de asma eran previamente desconocidos a medida que la condición se consideró que era un desorden completamente reversible. Las investigaciones más recientes han revelado, sin embargo, que el remoldeo importante de las vías respiratorias se presenta durante el asma y que el grado de este remoldeo es usualmente proporcionar a la severidad del síntoma. El remoldeo típicamente toma la forma del espesamiento de pared de la vía respiratoria, el desarrollo de fibrosis subepitelial, masa muscular de miocito aumentado, hiperplasia de miofibroblasto, y metaplasia mucosa. El remoldeo de las vías respiratorias también es un factor común en el avance del desorden pulmonar obstructivo crónico (COPD), y fibrosis pulmonar. La inflamación pulmonar es también un componente común en el desarrollo de remoldeo de las vías respiratorias y puede tipificarse por bronquiolitis, alveolitis, y/o vasculitis. La correlación entre el remoldeo de las vías respiratorias y el asma presenta una nueva posibilidad de investigación de asma. Recientemente la habilidad de esferoides corticales y antagonistas de receptor leucotrino de prevenir o tratar el remoldeo de las vías respiratorias se ha reportado (véase Hocino (2004) Clin Rev Allergy Immunol. 27 (1):59-64). Dados los efectos secundarios negativos potenciales del tratamiento a largo plazo con ésteroides corticales y las incertidumbres respecto a la eficacia de antagonistas de receptor leucotrino, existe una fuerte necesidad de otros métodos para inhibir el remoldeo de las vías respiratorias. Adenosina se sabe que juega un papel en el asma y COPD (Véase, Spicuzza et al. (2003) TiPS 24(8):409-4130; Mann et al. (1986) J Appl Physiol 6J_: 1667-1676; y Feoktistov et al. (1998) Trends Pharamcol Sci 19:148-153). La evidencia clínica que soporta la inclusión de adenosina incluye: 1) Las concentraciones de plasma de adenosina se aumentan por cambio de alérgeno en pacientes asmáticos y niveles de adenosina en fluido de lavado bronquioalveolar se elevan en pacientes asmáticos y con COPD (Driver et al, (1993) Am Rev Respir Dis 148:91-97) 2) La adenosina (dada como AMP) induce la bronquioconstrición en asmáticos pero no en sujetos normales (Cushley et al. (1983) Br J Clin Pharmacol 1_5:161-165), y aumenta las concentraciones de mediadorse selecciona de mastocitos, tales como histamina, triptasa, LTC4 y PDG2 (Crimi et al. (1997) Allergy 52:48-54). La bronquioconstricción inducida por adenosina se aminora por los fármacos ya sea que inhiban la activación de mastocitos o sirvan como antagonistas para los mediadores liberados de los mastocitos. De esta manera, el mecanismo potencial de bronquioconstricción inducida por adenosina se debe probablemente a su efecto en la activación de mastocitos (Polosa et al. (2002) Thorax 57:649-654 y Polosa (2002) Eur Respir J 20:488-496). 3) La adenosina también se ha mostrado que induce la eosinofilia y la inflamación. Los efectos globales y las utilidades clínicas potenciales de cambio de AM P se resumen en un artículo de revisión reciente por Spicuzza y Polosa , (2003) Curr Opin Allergy Clin Immunol 3:65-69.

La adenosina es un nucleósido que se origina naturalmente, el cual ejerce sus efectos biológicos al interactuar con una familia de receptores de adenosina conocidos como Ai , A2A, A2B, y A3, todos los cuales modulan los procesos fisiológicos importantes. De los diversos receptores, los receptores de adenosina A2B se considera que se incluyen de manera más importante en el asma por medio de su conexión a la activación de mastocitos, vasodilatación, y regulación de crecimiento celular (Véase Receptores de Adenosina A2B como Objetivos Terapéuticos, Drug Dev Res 45: 198; Feoktistov et al. , Trends Pharmacol Sci 19: 148-153). Específicamente, los antagonistas de receptor adenosina A2B han mostrado que afectan la activación de mastocitos y se han implicado de esta manera en la inhibición de la hiperresponsividad aguda de las vías respiratorias. Sorprendentemente, se ha encontrado que los antagonistas de receptor adenosina A2B también son útiles en la prevención del remoldeo de las vías respiratorias y la inflamación pulmonar. De acuerdo con lo anterior, se desea proporcionar un método para prevenir el remoldeo de la vías respiratorias e/o inflamación pulmonar por administración de compuestos que son antagonistas A2B, potentes, completa o parcialmente selectivos, es decir, compuestos que muestran el receptor adenosina A2B.

Breve Descripción de la Invención En una modalidad de la invención, se proporciona un método para el tratamiento y prevención de remoldeo de las vías respiratorias e/o inflamación pulmonar mediante la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un antagonista receptor A2 B a un mamífero que se predispone genética y/o ambientalmente al remoldeo de las vías respiratorias e inflamación pulmonar. En otra modalidad de la invención, se proporciona un método para el tratamiento y prevención del remoldeo de las vías respiratorias e/o inflamación pulmonar mediante la administración a un mamífero que se predispone genética y/o ambientalmente al remoldeo de las vías respiratorias, una cantidad terapéuticamente eficaz de un antagonista de receptor A2B que tiene la estructura de la Fórmula I o la Fórmula I I : Fórmula I Fórmula I I en donde: R y R2 se seleccionan i ndependientemente de hidrógeno, alquilo opcional mente sustituido, o un grupo -D-E, en el cual D es un enlace covalente o alquileno, y E es alcoxi opcional mente sustituido, cicloalquilo opcionalmente sustituido, arilo opcional mente sustituido, heteroarilo opcional mente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido o alqui nilo opcional mente sustituido, con la condición de que cuando D sea un enlace covalente E no puede ser alcoxi ; R3 es hidrógeno, alquilo opcional mente sustituido o cicloalquil o opcionalmente sustituido; X es arileno opcionalmente sustituido heteroarileno o opcionalmente sustituido; Y es un enlace covalente o alquileno en el cual un átomo de carbono puede reemplazarse opcionalmente por -O-, -S-, o -N H-, y se sustituye opcionalmente por hidroxi , alcoxi , amino opcionalmente sustituido, o -COR, en el cual R es hidroxi , alcoxi o ami no; y Z es arilo monocíclico opcionalmente sustituido o heteroaril o monocíclíco opci onalmente sustituido; o Z es hidrógeno cuando X es heteroarileno opcional mente sustituido y Y es un enlace covalente. Todavía en otra modalidad de la invención, las formulaciones farmacéuticas se proporcionan, comprendiendo una cantidad terapéuticamente eficaz de un antagonista de receptor A2B, y al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable. La formulación es preferentemente para la administración oral. Un grupo preferido de los compuestos de ia Fórmula I y II son aquellos en los cuales R1 y R2 son independientemente hidrógeno, alquilo inferior opcionalmente sustituido, o un grupo -D-E, en el cual D es un enlace covalente o alquileno, y E es fenilo opcional mente sustituido, cicloalquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, o alquinilo opcionalmente sustituido, particularmente aquellos en el cual R3 es hidrógeno. Dentro de este grupo, una primer clase preferida de los compuestos incluyen aquellos en los cuales R y R2 son independientemente alquilo inferior opcionalmente sustituido por cicloalquilo, preferentemente n-propilo, y X es fenileno opcionalmente sustituido. Dentro de esta clase, una subclase preferida de compuestos son aquellos en los cuales Y es un alquileno, incluyendo aiquileno en el cual un átomo de carbono se reemplaza por oxígeno, preferentemente -O-CH2-, más especialmente en donde el oxígeno es el punto de unión de fenileno. Dentro de esta subclase, se prefiere que Z sea oxadiazol opcionalmente sustituido, particularmente [1 ,2,4]-oxadiazol-3-ilo opcional mente sustituido, especialmente [1 ,2 ,4]-oxadiazol-3-ilo sustituido por fenilo opcionalmente sustituido o piridil o opcional mente sustituido. Una segunda clase preferida de los compuestos i ncluyen aquellos en los cuales X es 1 , 4-pirazoleno opcionalmente sustitui do. Dentro de esta clase, una subclase preferida de los compuestos son aquellos los cuales Y es un enlace covalente o alquileno, especial mente alquileno i nferior, y Z es hidrógeno, fenilo opcional mente sustituido, piri dilo opcional mente sustitui do, o oxadi azol opcional mente sustituido. Dentro de esta subclase, una modalidad preferida i ncluye los compuestos en los cuales R1 es alquilo i nferi or opcionalmente sustituido por cicloalquilo, y R2 es hidrógeno. Una modalidad más preferida i ncl uye aquellos compuestos en los cuales Y es -(CH2)- o -CH(CH3)- y Z es fenilo opcional mente sustituido, o Y es -(CH2)- o -CH(CH3)- y Z es oxadiazol opcionalmente sustituido, particularmente 3, 5-[ 1 ,2,4]-oxadiazol , o Y es -(CH2)- o -CH(CH3)- y Z es piridilo opcional mente sustituido. Dentro de esta subclase, también se prefieran aquellos compuestos en los cuales R1 y R2 son independientemente alquilo inferior opcional mente sustituido por cicloal quilo, especialmente n-propilo. Se prefieren más aquellos compuestos en los cuales Y es un enlace covalente, -(CH2)- o -CH(CH3)- y Z es hidrógeno, fenilo opci onal mente sustituido, o piridilo opcional mente sustituido, particul armente en donde Y es un enlace covalente y Z es hidrógeno. En la actualidad, los compuestos preferidos para utilizarse en la invención incluyen, pero no se limitan a: 1 -propil -8-(1-{[3-(trifl uorometil)fenil]-metil}pirazol -4-il)- 1,3, 7-trihidropurina-2,6-diona; 1 -propi I -8-[ 1 - benci I pirazol -4-il ]-1, 3, 7-trihidropurina-2,6-di ona; 1-butil-8-(1-{[3-fluorofenil]metil}pirazol-4-il)-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1-propil-8-[1-(feniletíl)pirazol-4-il]-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 8-(1-{[5-(4-clorofenil)(1,2,4-oxadiazol-3-il)]metil}pirazol-4-M)-1-propil-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 8-(1-{[5-(4-clorofenil)(1,2,4-oxadiazol-3-il)]metil}pirazol-4-il)-1-butil-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1 , 3-di propi l-8-pirazol-4-i 1-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1-metil-3-sec-butil-8-pirazol-4-il-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1 -ciclopropi I metil-3-metil-8-{1 -[(3-trifluorometilfenil)metil]pirazol-4-il}-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1,3-dimetil-8-{1-[(3-fluorofenil)metil]pirazol-4-il}-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 3-metil- 1-propil-8-{1 -[(3-trif luorometilf enil )meti I] pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 3-etil -1 -propi l-8-{1-[( 3-trif luorometilf enil )meti I] pi razol-4-il}-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1, 3-di propil -8-(1-{[3-(trifl uorometil)fenil]metil}pirazol-4-il)- 1,3, 7-trihidropurina-2,6-diona; 1,3-dipropil-8-{1-[(3-fluorofenil)metil]pirazol-4-il}-1,3,7- trihidropurina-2,6-diona; 1 -etil -3-metil -8-{1-[(3-fluorof eni I) metil ]pirazol-4-i I}- 1,3, 7-trihidropurina-2,6-diona; 1, 3-di propi I -8-{1-[(2-metoxif enil)metil]pirazol-4-i I}- 1,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1,3-dipropil-8-(1-{[3-(trifluorometil)-fenil]etil}pirazol-4-il)-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1 , 3-di propi I -8-{1-[(4-carboxif enil) meti I] pirazol -4-il}- 1,3, 7-trihidropurina-2,6-diona; ácido 2-[4-(2,6-dioxo-1,3-dipropil(1,3,7-trihidropurin-8-il))pirazolil]-2-feniloacético; 8-{4-[5-(2-metoxifenil)-[1,2,4]oxadiazol-3-ilometoxi]fenil}-1,3-di propi 1-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 8-{4-[5-(3-metoxifenil)-[1,2,4]oxadiazol-3-ilometoxi]fenil}-1,3-dipropil-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 8-{4-[5-(4-fluorofenil)-[1,2,4]oxadiazol-3-ilometoxi]fenil}-1,3-di propi 1-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona. 1 -(ciclopropil metil )-8-[1 -(2-piri di I ometi I )pirazol-4-i I]- 1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1 -n-butil-8-[1 -(6-trif luorometil piri di n-3-ilometil)pi razol-4-il]- 1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 8-(1-{[3-(4-clorofenil)(1,2,4-oxadiazol-5-il)]metil}pirazol-4-il)-1 ,3-dipropil-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1 , 3-di propi I -8-[1-({5-[4-(trif luorometil )feni I Jisoxazol -3-il}metil)pirazol-4-il]-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1,3-dipropil-8-[1-(2-piridilometil)pirazol-4-il]-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona; ácido 3-{[4-(2, 6-di oxo- 1, 3-di propil- 1,3, 7-trihidropuri n-8-il)pirazolil]metil}benzoico; 1,3-dipropil-8-(1-{[6-(trifluorometil)(3-piridil)]metil}pirazol-4-il)- 1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1,3-dipropil-8-{1-[(3-(1H-1,2,3,4-tetraazol-5-il)fenil)metil]pirazol-4-il}-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona; ácido 6-{[4-(2,6-dioxo-1 , 3-di propil- 1 ,3,7-trihidropurin-8-il)pirazolil]metil}piridina-2-carboxílico; 3-etil-1-propil-8-[1-(2-piridilometil)pirazol-4-il]-1,3,7-trihidropurina-2, 6-di ona; 8-( 1-{[5-(4-clorof enil )isoxazol-3-i I] meti l}pirazol -4-il) -3-eti 1-1-propil-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 8-(1-{[3-(4-clorofen¡l)(1,2,4-oxadiazol-5-il)]metil}pirazol-4-il)-3-etil-1- propil-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 3-etil-1-propil-8-(1-{[6-(trifluorometil)(3-piridil)]metil}pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1 -(ciclopropil metil)-3-etíl-8-( 1-{[6-(trif luorometil ) (3-piridil)]metil}pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; y 3-etil-1 -(2-metil propil)-8-(1 -{[6-(trifl uorometil )(3-piridil)]metil}pirazol- 4-il)-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona.

Breve Descripción de las Figuras La Figura 1 representa las diferencias en histopatología pulmonar en ratones con deaminasa adenosina (ADA)-/- que siguen el tratamiento con antagonistas de receptor adenosina A2B según se describe en el Ejemplo 21. Los pulmones se colectaron y se procesaron para análisis histológico utilizando tintación H&E. (A) Pulmón de ratón tratado con vehículo ADA+ . (B) Pulmón de ratón tratado con vehículo ADA-/-. (C) Pulmón de ratón tratado con antagonista de receptor A2B ADA-/-. (D) Sección de magnificación más alta a través del pulmón de un ratón tratado con vehículo ADA+ . (E) Sección de magnificación más alta a través del pulmón de un ratón tratado con vehículo ADA-/-. (F) Sección de magnificación más alta de un pulmón de un ratón tratado con antagonista de receptor adenosina A2B ADA-/-. Las flechas señalan los macrófagos alveolares. Las barras de escala en A-C= 100 µm, barras de escala en D-F= 10 µm. Las secciones son representativas de 6 diferentes muestras de cada tratamiento. La Figura 2 muestra los efectos de un antagonista de receptor adenosina A2B (A2B-A) en celularidad de vía respiratoria según se describe en el Ejemplo 21 . (A) Los ratones se lavaron con PBS y los conteos celulares totales se determinaron. Las células (B y C) fueron citogiraron sobre portaobjetos de microscopio, se tintaron con DiffQuick y los diferenciales celulares se determinaron al contar al menos 200 células por muestra. Los valores se presentan como total de células promedio x 104 + SEM . *, importante en p<0.05 en comparación a los animales ADA+ utilizando la prueba de estudiantes T, n=8; #, importante en p<0.05 en comparación a los ratones tratados con vehículo ADA''' utilizando la prueba de estudiantes T, n=6-8. La Figura 3 representa el resultado de la celularidad BAL en ratones ADA-/-tratados con un antagonista de receptor adenosina A2 B según se describe en el Ejemplo 21. El fluida BAL se colectó de los pulmones de ratones y las células fueron citogiraron sobre los portaobjetos de microscopio y se tintaron con DiffQuick. (A) tratados con vehículo ADA+ , (B) tratados con antagonista de receptor adenosina A2B ADA+, (C) tratados con vehículo ADA-/-, (D) tratados con adenosina de receptor adenosina A2B ADA-/-. Las fotografías son representativas de 6 muestras separadas de cada condición. Barra de escala = 10 µm. La Figura 4 ilustra niveles de transcripción de varias citoquinas pro-inflamatorias que se midieron en completos extractos de pulmón utilizando RT-PCR cuantitativa según se describe en el Ejemplo 21 . (A) I L-6 (B) Eotaxina 1 (C) TARC. Los resultados se presentan como transcripciones pg promedio + SEM . *, importante en p<0.05 en comparación a los animales con ADA* utilizando la prueba de estudiantes T; #, importante en p<0.05 en comparación a los ratones tratados con vehículo ADA''' utilizando la prueba de estudiantes T , n=4 para los ratones con ADA*, n=8 para los ratones ADA''', n=no detectados. La Figura 5 muestra los resultados de la inmunotintación por actina del músculo a-liso. Las secciones del pulmón se tintaron con antisuero contra actina de músculo a-liso para visualizar el miofibroblasto (café) . A) Pulmón de ratón tratado con vehículo ADA+ . (B) Pulmón de ratón tratado con vehículo ADA-/-. (C) Pulmón de ratón tratado con antagonista de receptor adenosina A2B ADA-/-. Las secciones son representativas de 6 diferentes ratones de cada tratamiento. Barra de escala= 100 µm. La Figura 6 representa la deposición de colágeno en los pulmones de ratones ADA-/-tratados con antagonista de receptor adenosina A2B según se describe en el Ejemplo 21. Las secciones del pulmón se tintaron con Masson's Tricromo para visualizar la deposición de colágeno (azul). (A) Pulmón de un ratón tratado con vehículo ADA*. (B) Pulmón de un ratón tratado con antagonista de receptor A2B ADA*. (D) Pulmón de un ratón tratado con antagonista de receptor adenosina A2B ADA'''. Las secciones son representativas de 6 diferentes ratones de cada tratamiento. Barra de escala= 100 µm. (E) Los niveles de transcripción de procolágeno a-1 se presentan como transcripciones pg promedio/µg de ARN + S EM . * , importante en p<0.05 en comparación a animales ADA* utilizando la prueba de estudiantes T; #, importante en p<0.05 en comparación a los ratones tratados con vehículo ADA''' utilizando la prueba de estudiantes T, n=4 para ratones con ADA*, n=8 para ratones ADA'''. (F) Los niveles de proteína de colágeno soluble presentados como colágeno µg promedio por ml de fluido BAL + SEM. *, importante en p<0.05 en comparación a animales ADA* utilizando la prueba de estudiantes T; #, importante en p<0.05 en comparación a los ratones tratados con vehículo ADA''' utilizando la prueba de estudiantes T, n=4 para ratones ADA*, n=8 para ratones ADA'''. La Figura 7 muestra la expresión de genes asociados a fi brosis. ARN se extrajo de pulmones completos para análisis utilizando RT-PCR cuantitativa para diversas transcripciones asociadas con fibrosis. Los resultados demuestran que los pulmones de ratones tratados con antagonista de receptor adenosina A2 B ADA* muestran niveles inferiores de transcripciones para TGF-ß1 (A), osteopontina (OPN), (B) e inhibidor-1 de activador de plasmi nogen (Pai-1 ) (C), según se compara a aquel observado en los pulmones de los ratones tratados con vehículo ADA' . *, importante en p<0.05 en comparación a los ratones ADA* utilizando la prueba de estudiantes T, #, importante en p<0.05 en comparación a los ratones tratados con vehículo ADA''' utilizando la prueba de estudiantes T, n=4 para ratones ADA +, n=8 para ratones ADA*. La Figura 8 muestra la elevación de genes asociados con la destrucción de la vía aérea respiratoria alveolar. Los niveles de transcripción de TI M P-1 , M M P-9, y M M P-12 se midieron en extractos de ARN de pulmón completo utilizando RT-PCR cuantitativa. (A) TI M P-1 . (B) M M P-9. (C) M MP-12. Los datos se presentan como promedio pg de transcripciones/µg ARN + SEM. #, importante en p<0.05 en comparación a los ratones tratados con vehículo ADA''' utilizando la prueba de estudiantes T, n=4 para ratones ADA +, n=8 para ratones ADA*. La Figura 9 presenta la destrucción alveolar en ratones ADA-/-tratados con un antagonista de receptor adenosina A2B según se describe en el Ejemplo 21 . Los pulmones se colectaron y se procesaron para análisis histológico utilizando tintación H&E. (A) Pulmón de ratones tratados con vehículo ADA+ , ( B) Pulmón de ratones tratados con vehículo ADA-/-, y (C) Pulmón con ratones tratados con ADA-/- con un antagonista de receptor adenosina A2B. Las fotografías se tomaron bien a la misma magnificación ( 10x) y representan descubrimientos de 6 diferentes animales para cada grupo de tratamiento. (D) Los tamaños de la vía respiratoria alveolar se calcularon utilizando I magePro y la información se presenta como longitud de cuerda promedio + SEM , n=6. En (D), *señala que los resultados son diferentes de manera importante de ratones ADA+ y **señala que los resultados son diferentes de manera importante de ratones tratados con vehículo ADA-/-.

Descripción Detallada de la Invención Definiciones y Parámetros Generales Según se utiliza en la presente invención, las siguientes palabras y frases se pretende generalmente que tengan los significados según se establece abajo, excepto al grado que el contexto en los cuales se utiliza indiquen otra forma. El término "alquilo" se refiere a una cadena de hidrocarburo saturado no ramificado o ramificado monoradical que tiene 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 1 1 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 o 20 átomos de carbono. Este término se ejemplifica por grupos tales como metilo, etilo, n-propilo, iso- propilo, n-butilo, iso-butilo, t-butilo, n-hexilo, n- decilo, tetradecilo, y lo similar. El término "alquilo sustituido" se refiere a: 1) un grupo alquilo según se define anteriormente, teniendo 1, 2, 3, 4 o 5 sustituyentes, preferentemente 1 a 3 sustituyentes, seleccionados del grupo que consiste de alquenilo, alquinilo, alcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo, acilo, acílamino, aciloxi, amino, aminocarbonilo, alcoxicarbonilamino, azido, ciano, halógeno, hidroxi, keto, tiocarbonilo, carboxi, carboxialquilo, ariltio, heteroariltio, heterocicliltio, tiol, alquiltio, arilo, ariloxi, heteroarilo, aminosulfonilo, aminocarbonilamino, heteroariloxi, heterociclilo, heterocicloxi, hidroxiamino, alcoxiamino, nitro, -SO-alquilo, -SO-arilo, -SO-heteroarilo, -SO2- alquilo, SO2-arilo y -SO2-heteroarilo. Al menos que se interprete de otra forma la definición, todos los sustituyentes pueden opcionalmente además sustituirse por 1, 2, o 3 sustituyentes seleccionados de alquilo, carboxi, carboxialquilo, aminocarbonilo, hidroxi, alcoxi, halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(O)nR, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo y n es 0, 1 o 2; o 2) un grupo alquilo según se define anteriormente que se interrumpe por 1-10 átomos independientemente seleccionados de oxígeno, azufre y NRa-, en donde R3 se selecciona de hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, arilo, heteroarilo y heterociclilo. Todos los sustituyentes pueden opcionalmente además sustituirse por alquilo, alcoxi, halógeno, CF3, ami no, amino sustituido, ciano, o -S(O)nR, en el cual R es alquilo, arilo, o heteroarilo y n es 0, 1 o 2; o 3) un grupo alquilo según se define anteriormente que tiene tanto 1 , 2, 3, 4 como 5 sustituyentes según se define anteriormente y se interrumpe también por 1 -10 átomos según se define anteriormente. El término "alquilo inferior" se refiere a una cadena de hidrocarburo saturado ramificado o no ramificado monoradical que tiene 1 , 2, 3, 4, 5, o 6 átomos de carbono. Este término se ejemplifica por grupos tales como metilo, etilo, n-propilo, iso-propilo, n-butilo, iso-butilo, t-butilo, n-hexilo, y lo similar. El término "alquilo inferior sustituido " se refiere a alquilo inferior según se define anteriormente teniendo 1 a 5 sustituyentes, preferentemente 1 , 2, o 3 sustituyentes, según se define para alquilo sustituido, o un grupo alquilo inferior según se define anteriormente que se interrumpe por 1 , 2, 3, 4, o 5 átomos según se define para alquilo sustituido, o un grupo alquilo inferior según se define anteriormente que tiene tanto 1 , 2, 3, 4 como 5 sustituyentes según se define anteriormente y se interrumpe también por 1 , 2, 3, 4, o 5 átomos según se define anteriormente. El término "alquileno" se refiere a un diradical de una cadena de hidrocarburo saturado no ramificado o ramificado, que tiene 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 o 20 átomos de carbono, preferentemente 1-10 átomos de carbono, más preferentemente 1, 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono. Este término se ejemplifica por grupos tales como metileno (-CH2-), etileno (-CH2CH2-), los isómeros de propileno (por ejemplo, -CH2CH2CH2- y -CH(CH3)CH2-) y lo similar. El término " alquileno inferior " se refiere a un diradical de una cadena de hidrocarburo saturado no ramificado o ramificado, preferentemente teniendo de 1, 2, 3, 4, 5, o 6 átomos de carbono. El término " alquileno inferior " se refiere a un diradical de una cadena de hidrocarburo saturado no ramificado o ramificado, preferentemente teniendo de 1, 2, 3, 4, 5, o 6 átomos de carbono. El término"sustituido alquileno" se refiere a: (1) un grupo alquileno según se define anteriormente teniendo 1, 2, 3, 4, o 5 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de alquilo, alquenilo, alquinílo, alcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo, acilo, acilamino, aciloxi, amino, aminocarbonilo, alcoxicarbonilamino, azido, ciano, halógeno, hidroxí, keto, tiocarbonilo, carboxi, carboxialquilo, ariltio, heteroariltio, heterocicliltio, tiol, alquiltio, arilo, ariloxi, heteroarilo, aminosulfonilo, aminocarbonilamino, heteroariloxi, heterociclilo, heterocicloxi, hidroxiamino, alcoxiamino, nitro, -SO- alquilo, -SO-arilo,-SO-heteroarilo, -SO2-alquilo, SO2-arilo y -SO2-heteroarilo. Al menos que se interprete de otra forma para la definición, todos los sustituyentes pueden opcionalmente además sustituirse por 1, 2, o 3 sustituyentes seleccionados de alquilo, carboxi, carboxialquilo, aminocarbonilo, hidroxi, alcoxi, halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(O)„R, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo y n es 0, 1 o 2; o (2) un grupo alquileno según se define anteriormente que se interrumpe por 1-20 átomos independientemente seleccionados de oxígeno, azufre y NR3-, en donde Ra se selecciona de hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, cicloalquilo, cicloalquenilo, arilo, heteroarilo y heterociclilo, o grupos seleccionados de carbonilo, carboxiéster, carboxiamida y sulfonilo; o (3) un grupo alquileno según se define anteriormente que tiene tanto 1, 2, 3, 4 como 5 sustituyentes según se define anteriormente y se interrumpe también por 1-20 átomos según se define anteriormente. Los ejemplos de alquílenos sustituidos son clorometileno (-CH(CI)-), aminoetileno (-CH(NH2)CH2-), metilaminoetileno (- CH(NHMe)CH2-), isómeros 2-carboxipropileno (- CH2CH(CO2H)CH2-), etoxietilo (-CH2CH2O-CH2CH2-), etilmetilaminoetilo (-CH2CH2N(CH3)CH2CH2-), 1-etoxi-2- (2-etoxi-etoxi)etano (-CH2CH2O-CH2CH2-OCH2CH2- OCH2CH2-), y lo similar. El término "aralquilo" se refiere a un grupo arilo covalentemente unido a un grupo alquileno, en donde arilo y alquileno se definen en la presente. "Aralquilo opcionalmente sustituido" se refiere a un grupo arilo opcionalmente sustituido covalentemente unido a un grupo alquileno opcionalmente sustituido. Tales grupos aralquilo se ejemplifican por bencilo, feniletilo, 3-(4-metoxifenil)propilo, y lo similar. El término "alcoxi" se refiere al grupo R-O-, en donde R es alquilo opcionalmente sustituido o cicloalquilo opcionalmente sustituido, o R es un grupo -Y-Z, en el cual Y es alquileno opcionalmente sustituido y Z es alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido; o cicloalquenilo opcionalmente sustituido, en donde alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo y cicloalquenilo son según se definen en la presente. Los grupos alcoxi preferidos son alquilo-O- opcionalmente sustituido e incluyen, a manera del Ejemplo, metoxi, etoxi, n-propoxi, iso-propoxi, n-butoxi, tert-butoxi, sec-butoxi, n-pentox¡, n-hexoxi, 1,2-dimetilbutoxi, trifluorometoxi, y lo similar. El término "alquiltio" se refiere al grupo R-S-, en donde R es según se define para alcoxi. El término "alquenilo" se refiere a un monoradical de un grupo hidrocarburo no saturado no ramificado o ramificado preferentemente teniendo de 2 a 20 átomos de carbono, más preferentemente 2 a 10 átomos de carbono y aún más preferentemente 2 a 6 átomos de carbono y teniendo 1-6, preferentemente 1, enlace doble (vinilo). Los grupos alquenilo preferidos incluyen etenilo o vinilo (-CH = CH2), 1 -propileno o alilo (-CH2CH = CH2), isopropileno (-C(CH3)=CH2), biciclo[2.2.1 ]hepteno, y lo similar. En el caso de que el alquenilo se una a nitrógeno, el enlace doble no puede ser alfa para el nitrógeno. El término " alquenilo inferior " se refiere a un grupo alquenilo según se define anteriormente teniendo de 2 a 6 átomos de carbono. El término " alquenilo sustituido " se refiere a un grupo alquenilo según se define anteriormente teniendo 1 , 2, 3, 4 o 5 sustituyentes, y preferentemente 1 , 2, o 3 sustituyentes, seleccionados del grupo que consiste de alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi , cicloalquilo, cicloalquenilo, acilo, acilamino, aciloxi , amino, aminocarbonilo, alcoxicarbonilamino, azido, ciano, halógeno, hidroxi , keto, tiocarbonilo, carboxi , carboxialquilo, ariltio, heteroariltio, heterociclíltio, tiol , alquiltio, arilo, ariloxi , heteroarilo, aminosulfonilo, aminocarbonilamino, heteroariloxi , heterociclilo, heterocicloxi , hidroxiamino, alcoxiamino, nitro, -SO-alquilo, -SO-arilo,- SO-heteroarilo, -SO2-alquilo, SO2-arilo y -SO2-heteroarilo. Al menos que se interprete de otra forma para la definición, todos los sustituyentes pueden opcionalmente además sustituirse por 1 , 2, o 3 sustituyentes seleccionados de alquilo, carboxi, carboxialquilo, aminocarbonilo, hidroxi , alcoxi , halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(O)„R, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo y n es 0, 1 o 2. El término "alquinilo" se refiere a un monoradical de un hidrocarburo no saturado, preferentemente teniendo de 2 a 20 átomos de carbono, más preferentemente 2 a 10 átomos de carbono y aún más preferentemente 2 a 6 átomos de carbono y teniendo al menos 1 y preferentemente de 1 -6 sitios de no saturación de acetileno (enlace triple). Los grupos alquinilo preferidos incluyen eti nilo, (-C=CH), propargilo (o prop-1 -in-3-ilo, -CH2C=CH), y lo similar. En el caso de que alquinilo se una a nitrógeno, el enlace triple no puede ser alfa para el nitrógeno. El término "alquinilo sustituido" se refiere a un grupo alquinilo según se define anteriormente teniendo 1 , 2, 3, 4 o 5 sustituyentes, y preferentemente 1 , 2, o 3 sustituyentes, seleccionados del grupo que consiste de alquilo, alquenil o, alquinilo, alcoxi , cicloalquilo, cicloalquenilo, acilo, acilamino, aciloxi, amino, aminocarbonilo, alcoxicarbonilamino, azido, ciano, halógeno, hidroxi , keto, tiocarbonilo, carboxi , carboxialquilo, ariltio, heteroariltio, heterocicliltio, tiol , alquiltio, arilo, ariloxi, heteroarilo, aminosulfonilo, aminocarbonilamino, heteroariloxi, heterociclilo, heterocicloxi , hidroxiamino, alcoxiamino, nitro, -SO-alquilo, -SO-arilo,- SO-heteroarilo, -SO2-alquilo, SO2-arilo y -SO2-heteroarilo. Al menos que se interprete de otra forma para la definición, todos los sustituyentes pueden opcionalmente además sustituirse por 1 , 2, o 3 sustituyentes seleccionados de alquilo, carboxi, carboxialquilo, aminocarbonilo, hidroxi , alcoxi , halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(O)nR, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo y n es 0, 1 o 2. El término "aminocarbonilo" se refiere al grupo -C(O)NRR en donde cada R es independientemente hidrógeno, alquilo, arilo, heteroarilo, heterociclilo o en donde ambos grupos R se unen para formar un grupo heterocíclico (por ejemplo, morfolino) . Al menos que se interprete de otra forma para la definición, todos los sustituyentes pueden opcionalmente además sustituirse por 1 -3 sustituyentes seleccionados de alquilo, carboxi , carboxialquilo, aminocarbonilo, hidroxi , alcoxi, halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(O)nR, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo y n es 0, 1 o 2. El término "acilamino" se refiere al grupo -NRC(O)R en donde cada R es independientemente hidrógeno, alquilo, arilo, heteroarilo, o heterociclilo. Al menos que se interprete de otra forma para la definición, todos los sustituyentes pueden opcionalmente además sustituirse por 1 -3 sustituyentes seleccionados de alquilo, carboxi, carboxialquilo, aminocarbonilo, hidroxi, alcoxi , halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(O)nR, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo y n es 0, 1 o 2. El término "aciloxi" se refiere a los grupos -O(O)C-alquilo, -O(O)C-cicloalquilo, -O(O)C-arilo, -O(O)C-heteroarilo, y -O(O)C-heterociclilo. Al menos que se interprete de otra forma para la definición, todos los sustituyentes pueden opcionalmente además sustituirse por alquilo, carboxi, carboxialquilo, aminocarbonilo, hidroxi, alcoxi, halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, o -S(O)nR, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo y n es 0, 1 o 2. El término "arilo" se refiere a un grupo carbocíclico aromático e 6 a 20 átomos de carbono teniendo un anillo único (por ejemplo, fenilo) o anillos múltiples (por ejemplo, bifenilo), o anillos múltiples condensados (fusionados) (por ejemplo, naftílo o antrilo). Los arilos preferidos incluyen fenilo, naftilo y lo similar. El término "arileno" se refiere a un diradical de un grupo arilo según se define anteriormente. Este término se ejemplifica por grupos tales como 1 ,4-fenileno, 1 ,3-fenileno, 1 ,2-fenileno, 1,4'-bifenileno, y lo similar. Al menos que se interprete de otra forma para la definición para el sustituyente de arilo o arileno, tales grupos arilo o arileno pueden sustituirse opcionalmente con de 1 a 5 sustituyentes, preferentemente 1 a 3 sustituyentes, seleccionados del grupo que consiste de alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo, acilo, acilamino, aciloxi, amino, aminocarbonilo, alcoxicarbonilamino, azido, ciano, halógeno, hidroxi, keto, tiocarbonilo, carboxi, carboxialquilo, ariltio, heteroariltio, heterocicliltio, tiol, alquiltio, arilo, ariloxi, heteroarilo, aminosulfonilo, aminocarbonilamino, heteroariloxi, heterociclilo, heterocicloxi, hidroxiamino, alcoxiamino, nitro, -SO-alquilo, -SO-arilo,-SO-heteroarilo, - SO2-alquilo, SO2-arilo y -SO2-heteroarilo. Al menos que se interprete de otra forma para la definición, todos los sustituyentes pueden opcionalmente además sustituirse por 1-3 sustituyentes seleccionados de alquilo, carboxi, carboxialquilo, aminocarbonilo, hidroxi, alcoxi, halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(O)„R, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo y n es 0, 1 o 2. El término "ariloxi" se refiere al grupo aril-O- en donde el grupo arilo es según se define anteriormente, y incluye opcionalmente grupos arilo sustituidos también según se define anteriormente. El término "ariltio" se refiere al grupo R-S-, en donde R es según se define para arilo. El término "amino" se refiere al grupo -NH2. El término "amino sustituido" se refiere al grupo -NRR en donde cada R se selecciona independientemente del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, carboxialquilo (por ejemplo, benciloxicarbonilo), arilo, heteroarilo y heterociclilo con la condición de que ambos grupos R no sean hidrógeno, o un grupo -Y-Z, en el cual Y es alquileno opcionalmente sustituido y Z es alquenilo, cicloalquenilo, o alquinilo. Al menos que se interprete de otra forma para la definición, todos los sustituyentes pueden opcionalmente además sustituirse por 1 -3 sustituyentes seleccionados de alquilo, carboxi, carboxialquilo, aminocarbonilo, hidroxi , alcoxi , halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(O)„R, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo y n es 0, 1 o 2. El término "carboxialquílo" se refiere a los grupos -C(O)O-alquilo o -C(O)O-cicloalquilo, en donde alquilo y cicloalquílo, son según se definen en la presente, y pueden opcionalmente además sustituirse por alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi, halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, o -S(O)nR, en el cual R es alquilo, arilo, o heteroarilo y n es 0, 1 o 2. El térmi no "cicloalquilo" se refiere a grupos carbocíclicos de desde 3 a 20 átomos de carbono teniendo un anillo cíclico único o anillos condensados múltiples. Tales grupos cicloalquilo incluyen, a manera del Ejemplo, estructuras de anillo único tales como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclooctilo, y lo similar, o estructuras de anillo múlti ple tales como adamantanilo, biciclo[2.2.1 ]heptano, 1 , 3,3-trimetilbiciclo[2.2.1 ]hept-2-ilo, (2, 3,3-trimetilbiciclo[2.2.1 ]hept-2-il), o grupos carbocíclicos a los cuales se fusiona un grupo arilo, por ejemplo, indano, y lo similar. El término " cicloalquilo sustituido " se refiere a grupos cicloalquilo teniendo 1 , 2, 3, 4 o 5 sustituyentes, y preferentemente 1 , 2, o 3 sustituyentes, seleccionados del grupo que consiste de alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi , cicloalquilo, cicloalquenilo, acilo, acilamíno, aciloxi , amino, aminocarbonilo, alcoxicarbonilamino, azido, ciano, halógeno, hidroxi, keto, tiocarbonilo, carboxi, carboxialquilo, ariltio, heteroariltio, heterocicliltio, tiol , alquiltio, arilo, ariloxi , heteroarilo, aminosulfonilo, aminocarbonilamino, heteroariloxi, heterociclilo, heterocicloxi, hidroxíamino, alco?iamino, nitro, -SO-alquilo, -SO-arilo.-SO-heteroarilo, - SO2-alquilo, SO2-arilo y -SO2-heteroarilo. Al menos que se interprete de otra forma para la definición, todos los sustituyentes pueden opcionalmente además sustituirse por 1 , 2, o 3 sustituyentes seleccionados de alquilo, carboxi, carboxialquilo, aminocarbonilo, hidroxi, alcoxi , halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(O)„R, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo y n es 0, 1 o 2. El término "halógeno" o "halo" se refiere a fluoro, bromo, cloro, y yodo.

El término "acilo" señala un grupo -C(O)R, en el cual R es hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, cicloalquilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido , arilo opcionalmente sustituido , y heteroarilo opcionalmente sustituido . El término "heteroarilo" se refiere a un radical derivado de un grupo cíclico aromático (es decir, completamente no saturado) teniendo 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 1 1 , 12, 13, 14, o 15 átomos de carbono y 1 , 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados de oxígeno, nitrógeno y azufre dentro al menos un anillo. Tales grupos heteroarilo pueden tener un anillo único (por ejemplo, piridilo o furilo) o anillos condensados múltiples (por ejemplo, indolizinilo, benzotiazolilo, o benzotienilo). Los ejemplos de heteroarilos incluyen, pero no se limitan a, [1 ,2,4]oxadiazol , [1 ,3,4]oxadiazol , [1 ,2,4]tiadiazol , [1 ,3,4]tiadiazol, pirróla, imidazol , pirazol, piridina, pirazina, pirimidina, piridazina, indolizina, isoindol , indol, indazol , purina, quinolizina, isoquinolina, quinolina, ftalazina, naftilopiridina, quinoxalina, quinazolina, cinnolina, pteridina, carbazol , carbolina, fenantridina, acridina, fenantrolina, isotiazol , fenazina, isoxazol, fenoxazina, fenotiazina, imidazolidina, imidazolina, y lo similar así como también N-óxido y N-alcoxi derivados de nitrógeno que contienen compuestos heteroarilo, por ejemplo, derivados piridina-N-óxido. El término "heteroarileno" se refiere a un diradical de un grupo heteroarilo según se define anteriormente. Este término se ejemplifica por grupos tales como 2,5-imidazoleno, 3,5-[1,2,4]oxadiazoleno, 2,4-oxazoleno, 1 ,4-pirazoleno, y lo similar. Por ejemplo, 1,4- pirazoleno es: en donde A representa el punto de unión. Al menos que se interprete de otra forma para la definición para el sustituyente heteroarilo o heteroarileno, tales grupos heteroarilo o heterarileno pueden opcionalmente sustituirse con 1 a 5 sustituyentes, preferentemente 1 a 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo, acilo, acilamino, aciloxi, amino, aminocarbonilo, alcoxicarbonilamino, azido, ciano, halógeno, hidroxi, keto, tiocarbonilo, carboxi, carboxialquilo, ariltio, heteroariltio, heterocicliltio, tiol, alquiltio, arilo, ariloxi, heteroarilo, aminosulfonilo, aminocarbonilamino, heteroariloxi, heterociclilo, heterocicloxi, hidroxiamino, alcoxiamino, nitro, -SO-alquilo, -SO-arilo,-SO-heteroarilo, -SO2-alquilo, SO2-arilo y -SO2-heteroarilo. Al menos que se interprete de otra forma para la definición, todos los sustituyentes pueden opcionalmente además sustituirse por 1-3 sustituyentes seleccionados de alquilo, carboxi, carboxialquilo, aminocarbonilo, hidroxi, alcoxi, halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(O)„R, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo y n es 0, 1 o 2. El término "heteroaralquilo" se refiere a un grupo heteroarilo covalentemente unido a un grupo alquileno, en donde heteroarilo y alquileno se definen en la presente. " Heteroaralquilo opcionalmente sustituido" se refiere a un grupo heteroarilo opcionalmente sustituido covalentemente unido a un grupo alquilo opcionalmente sustituido. Tales grupos heteroaralquilo se ejemplifican por 3-pi ridilometilo, quinolin-8-iloetilo, 4-metoxitiazol-2-ilopropilo, y lo similar. El término "heteroariloxi" se refiere al grupo heteroaril-O-. El término "heterociclilo" se refiere a un grupo saturado o parcialmente no saturado monoradical teniendo un anillo único o anillos condensados múltiples, teniendo de 1 a 40 átomos de carbono y de 1 a 10 heteroátomos, preferentemente 1 , 2, 3 o 4 heteroátomos, seleccionados de nitrógeno, azufre, fósforo, y/o oxígeno dentro del anillo. Los grupos heterocíclicos pueden tener un anillo único o anillos condensados múltiples, e incluyen tetrahidrofuranoilo, morfolino, piperidinilo, piperazino, dihidropiridino, y lo similar. Al menos que se interprete de otra forma para la defi nición para el sustituyente heterocíclico, tales grupos heterocíclicos pueden opcionalmente sustituirse con 1 , 2, 3, 4 o 5, y preferentemente 1 , 2 o 3 sustituyentes, seleccionados del grupo que consiste de alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo, acilo, acilamino, aciloxi, amino, aminocarbonilo, alcoxicarbonilamino, azido, ciano, halógeno, hidroxi, keto, tiocarbonilo, carboxi, carboxialquilo, ariltio, heteroariltio, heterocicliltio, tiol , alquiltio, arilo, ariloxi , heteroarilo, ami nosulfonilo, aminocarbonilamino, heteroariloxi, heterociclilo, heterocicloxi, hidroxiamino, alcoxiamino, nitro, -SO-alquilo, -SO-arilo,-SO-heteroarilo, - SO2-alquilo, SO2-arilo y -SO2-heteroarilo. Al menos que se interprete de otra forma para la definición, todos los sustituyentes pueden opcíonalmente además sustituirse por 1-3 sustituyentes seleccionados de alquilo, carboxi, carboxialquilo, aminocarbonilo, hidroxi, alcoxi, halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(O)„R, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo y n es 0, 1 o 2. El término "tiol" se refiere al grupo -SH. El término "alquiltio sustituido" se refiere al grupo -S-alquilo sustituido. El término "heteroariltiol" se refiere al grupo -S-heteroarilo en donde el grupo heteroarilo es según se define anteriormente incluyendo grupos heteroarilo opcionalmente sustituidos según se define también anteriormente. El término "sulfóxido" se refiere a un grupo -S(O)R, en el cual R es alquilo, arilo, o heteroarilo. "Sulfóxido sustituido " se refiere a un grupo -S(O)R, en el cual R es alquilo sustituido, arilo sustituido, o heteroarilo sustituido, según se define en la presente. El término "sulfona" se refiere a un grupo -S(O)2R, en el cual R es alquilo, arilo, o heteroarilo. "Sulfona sustituida" se refiere a un grupo -S(O)2R, en el cual R es alquilo sustituido, arilo sustituido, o heteroarilo sustituido, según se define en la presente. El término "keto" se refiere a un grupo -C(O)-.

El término "tiocarbonilo" se refiere a un grupo -C(S)-. El término "carboxi" se refiere a un grupo -C(O)-OH . "Opcional" u "opcionalmente" significa que en el caso o la circunstancia subsecuentemente descrito (a) puede o no puede ocurrir, y que la descripción incluye casos en donde dicho evento o circunstancia ocurre y casos en los cuales no ocurre. El término "compuesto de la Fórmula I y Fórmula I I" se pretende que comprenda los compuestos de la invención, según se describe, y las sales farmacéuticamente aceptables, esteres farmacéuticamente aceptables, profármacos, hidratos y polimorfos de tales compuestos. Adicionalmente, los compuestos de la invención pueden poseer uno o más centros asimétricos, y pueden producirse como una mezcla racémica o como enantiómeros individuales o diastereoisómeros. El número de estereoisómeros presentes en cualquier compuesto dado de la Fórmula I depende del número de centros asimétricos presentes (existen 2" esteroisómeros posibles en donde n es el número de centros asimétricos). Los estereoisómeros pueden obtenerse al resolver una mezcla racémica o no racémica de un producto intermediario en alguna etapa adecuada de la síntesis, o por resolución del compuesto de la Fórmula I mediante medios convencionales. Los estereoisómeros individuales (incluyendo enantiómeros individuales y diastereoisómeros) así como también mezclas racémicas y no racémicas de estereoisómeros se comprenden dentro del alcance de la presente invención, todos los cuales se pretende que se representen las estructuras de esta especificación al menos que se indique de otra forma específicamente. Los "isómeros" son compuestos diferentes que tienen la misma fórmula molecular. Los "estereois?meros" son isómeros que difieren solamente en la manera en la que los átomos se colocan en el espacio. Los "enantiómeros" son un par de estereoisómeros que no son imágenes espectrales super-imponibles entre sí. Una mezcla 1:1 de un par de enantiómeros es una mezcla "racémica". El término "(+.)" se utiliza para designar una mezcla racémica en donde sea adecuado. Los "diastereoisómeros" son estereoisómeros que tienen al menos dos átomos asimétricos, pero que no son imágenes espectrales entre sí. La estereoquímica absoluta se especifica de acuerdo al sistema Cahn-Ingold-Prelog R-S. Cuando el compuesto es un enantiómero puro la estereoquímica en cada carbono quiral puede especificarse ya sea por R o S. Los compuestos resueltos cuya configuración absoluta se desconoce se designan (+) o (-) dependiendo de la dirección (dextro- o levorotativo) que giran el plano de luz polarizada a la longitud de onda de la línea de sodio D. La "administración local" deberá definirse como el suministro del agente terapéutico a la superficie de la herida y epitelio adyacente. La "administración parenteral" es el suministro sistémico del agente terapéutico por medio de la inyección al paciente. El término "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a aquella cantidad de un compuesto de la Fórmula I que es suficiente para efectuar el tratamiento, según se define posteriormente, cuando se administra a un mamífero en necesidad de tal tratamiento. La cantidad terapéuticamente eficaz variará dependiendo de la actividad específica del agente terapéutico que se utiliza, y la edad, la condición física, la existencia de otros estados de enfermedad, y el estado nutritivo del paciente. Adicionalmente, otro medicamento que el paciente puede recibir efectuará la determinación de la cantidad terapéuticamente eficaz del agente terapéutico a administrar. El término "tratamiento" o "tratar" significa cualquier tratamiento en una enfermedad en un mamífero, incluyendo: (i) prevenir la enfermedad, es decir, que origina que los síntomas clínicos de la enfermedad no se desarrollen; (ii) inhibir la enfermedad, es decir, que origina el desarrollo de síntomas clínicos; y/o (iii) aminorar la enfermedad, es decir, que origina la regresión de los síntomas clínicos. El lenguaje "genética y/o ambientalmente predispuesto al remoldeo de las vías respiratorias e/o inflamación pulmonar" se refiere a los mamíferos que son susceptibles a los Ejemplos de tales condiciones ambientales incluyen, pero no se limitan a, exposición al humo del cigarro y otros contaminantes, la exposición a rociadores o agentes químicos al trabajo, hogar, o con otros hobbies, la exposición a alérgenos comunes tales como polvo, pastos, mohos , malezas, árboles, y caspa de animal, y exposición a irritantes tales como asbestos, sílice y polvos metálicos. Los ejemplos de la predisposición genética pueden evidenciarse por la historia familiar o análisis genético para mutaciones sospechosas en el gen ADAM33, poli morfismos TLR4, polimorfismos I L-3, polimorfismos CD14 C-159T, y lo similar. Los métodos biooinformáticos de la selección de una predisposición genética se han presentado por Tomita et al. (2004) BMC Bioinformatics. 5( 1 ): 120. Otras condiciones y estados de enfermedad que se conocen originan el remoldeo de las vías respiratorias e/o inflamación pul monar incluyen, pero no se limitan a, lupus, escleroderma, tuberculosis, y artritis reumatoide. En varios casos, los compuestos de esta invención son capaces de formar las sales acidas y/o base por virtud de la presencia de grupos amino y/o carboxilo, o grupos similares a los mismos. El término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a sales que retienen la efectividad biológica y las propiedades de los compuestos de la Fórmula I , y que no son biológicamente o de otra forma indeseables. Las sales de adición base farmacéuticamente aceptables pueden prepararse de bases inorgánicas y orgánicas. Las sales derivadas de las bases inorgánicas, incluyen a manera del Ejemplo solamente, sales de sodio, potasio, litio, amonio, calcio y magnesio. Las sales derivadas de bases orgánicas incluyen, pero no se limitan a, sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, tales como alquilo aminas, dialquilo aminas, trialquilo aminas, alquilo aminas sustituidas, di(alquilo sustituido) aminas, tri(alquilo sustituido) aminas, alquenilo aminas, dialquenilo aminas, trialquenilo aminas, alquenilo aminas sustituidas, di(alquenilo sustituido) aminas, tri(alquenilo sustituido) aminas, cicloalquilo aminas, di(cicloalquil) aminas, tri(cicloalquil) aminas, cicloalquilo aminas sustituidas, cicloalquilo amina disustituidas, cicloalquilo aminas trisustituidas, cicloalquenilo aminas, di(cicloalquenil) aminas, tri(cicloalquenil) aminas, cicloalquenilo aminas sustituidas, cicloalquenilo amina disustituidas, cicloalquenilo aminas trisustituidas, arilo aminas, diarílo aminas, triarilo aminas, heteroarilo aminas, diheteroarilo aminas, triheteroarilo aminas, heterocíclico aminas, diheterocíclico aminas, triheterocíclico aminas, di- y tri-aminas mezcladas en donde al menos dos de los sustituyentes sobre la amina son diferentes y se seleccionan del grupo que consiste de alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, cicloalquenilo, cicloalquenílo sustituido, arilo, heteroarilo, heterocíclico, y lo similar. También se incluyen las aminas en donde los dos o tres sustituyentes, junto con el nitrógeno amino, forman un grupo heterociclico o heteroarilo. Los ejemplos específicos de aminas adecuadas incluyen, a manera del Ejemplo solamente, isopropiloamina, trimetil amina, dietil amina, tri(iso-propil) amina, tri(n-propil) amina, etanolamina, 2-dimetilaminoetanol, trometamina, lisina, arginina, histidina, cafeína, procaina, hidrabamina, colina, betaina, etilenodiamina, glucosamina, N-alquiloglucaminas, teobromina, purinas, piperazina, piperidina, morfoli na, N-etil piperidi na, y lo si milar. Las sales de adición acida farmacéuticamente aceptables pueden prepararse de ácidos orgánicos e inorgánicos. Las sales derivadas de ácidos inorgánicos, incluyen ácido clorhídrico, ácido hidrobrómico, áci do sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfóri co, y lo similar. Las sales derivadas de ácidos orgánicos i ncl uyen ácido acético, ácido propiónico, ácido glicólico, ácido pirúvíco, ácido oxálico, ácido málico, ácido malónico, ácido succínico, ácido mal eico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoi co, ácido ci nnámico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónicos , ácido p-tolueno-sulfónico, ácido sali cílico, y lo similar. Según se utiliza en la presente, "vehículo farmacéuticamente aceptabl e" i ncl uye cualquiera y todos los solventes, medios de dispersión, revestimientos, agentes antibacterianos y antifúngicos, agentes retardadores isotónicos y de absorción y lo similar. El uso de tales medio y agentes para las sustancias farmacéuticamente activas se conoce bien en la materia. Excepto hasta ahora a medida que cual quier agente o medio convencional es incompatible con el ingrediente activo, su uso en las composiciones terapéuti cas se contempla. Los ingredientes activos complementari os también pueden i ncorporarse en las composiciones.

Nomenclatura El nombramiento y la numeración de los compuestos de l a invención se ilustra con un compuesto representativo de la Fórmula I en la cual R es n-propilo, R es n-propilo, R es hidrógeno, X es fenileno, Y es -O-(CH2), y Z es 5-(2-metoxifenil)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-ilo, el cual se llama: 8-{4-[5-(2-metoxifenil)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-ilometoxi]-fenil}-1 ,3-di propil- 1 , 3, 7-trihidropurina-2, 6-di ona.

El Método de la Invención La presente invención se refiere a métodos para prevenir el remoldeo de las vías respiratorias e/o inflamación pulmonar mediante la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un antagonista de receptor adenosina A2B a un mamífero que tiene una condición que produce o se origina por remoldeo de las vías respiratorias. A medida que el remoldeo de las vías respiratorias y la inflamación pulmonar son componentes importantes de asma, fibrosis pulmonar, y COPD, el método de la invención incluirá generalmente la administración de un antagonista de receptor adenosina A2 B a un paciente que padece de cualquier asma, fibrosís pulmonar, y/o COPD.

El antagonista de receptor adenosina A2B se administra sistemáticamente como una formulación oral pero también pueden administrarse directamente al tejido pulmonar por medio de un inhalador. Esta administración puede ser como una dosis única o como dosis repetidas dadas en múltiples intervalos designados. Se apreciará fácilmente por aquellos expertos en la materia que el régimen de dosificación preferido variará con el paciente y la severidad de la condición que se trate.

Composiciones Farmacéuticas Cuando se seleccionan como el antagonista de receptor adenosina A2B, los compuestos de la Fórmula I se administran usualmente en la forma de composiciones farmacéuticas. Esta invención por lo tanto proporciona composiciones farmacéuticas que contienen, como el ingrediente activo, uno o más de los compuestos de la Fórmula I , o una sal farmacéuticamente aceptable o éster de los mismos, y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables, vehículos, incluyendo diluyentes sólidos inertes y materiales de relleno, diluyentes, incluyendo solución acuosa estéril y varios solventes orgánicos, solubilizadores y adyuvantes. Los compuestos de la Fórmula I pueden administrarse solos o en combinación con otros agentes terapéuticos. Tales composiciones se preparan en una manera bien conocida en la técnica farmacéutica (véase, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mace Publishing Co. , Filadelfia, PA 17,h Ed. ( 1985) y "Modern Pharmaceutics", M arcel Dekker, Inc. 3rd Ed. (G.S. Banker & CT. Rhodes, Eds.).

Antagonistas de Receptor adenosina A?B El antagonista de receptor adenosina A2B, puede utilizarse en el método de la invención. Numerosos compuestos que antagonizan el receptor A2B, se conocen en la materia, a medida que son métodos para determinar si un compuesto específico tiene tal actividad. Por ejemplo, un artículo de revisión por Feoktistov y Baggioni, ((1997) Pharmacological Reviews 49:381-402) reporta la afinidad de unión de ocho combatientes de receptor adenosina y ocho antagonistas para todos los cuatro subtipos de receptores de adenosina. Las referencias citadas en la presente proporcionan descripciones detalladas de los procedimientos utilizados. (Robeva et al, (1996) J. Drug Dev. Res 39:243-252; Jacobson et al. (1996) Drug Dev. Res. 39:289-300; Feoktistov y Baggioni (1993) Molecular Pharmacology 43:909-914). Los métodos eficaces para determinar la afinidad de unión de un compuesto para un receptor utilizan un combatiente o antagonista radiomarcado y correlación de la unión de aquel compuesto a una fracción de membrana conocida por contener ese receptor; por ejemplo, para determinar si un compuesto es un antagonista A2B, la fracción de membrana podría comprender el receptor adenosina A2B. Otro procedimiento particularmente eficaz para determinar si un compuesto es un antagonista A2B se reporta en la Patente de EE.UU. No.5,854,081. Los compuestos selectivos para el subtipo de receptor A2B se prefieren por lo tanto para los presentes métodos. Un ejemplo, pero no una limitación, de tal compuesto es 3-n-propilxantina (enprofilina).

Los compuestos adecuados también se describen en la Patente de EE.UU. No. 6,545,002. Los compuestos que antagonizan otros receptores además del receptor A2B también son adecuados para utilizarse en la presente invención. Un ejemplo de tal compuesto es 1 ,3-dipropil-8-(p-acrílico)fenilxantina. Una clase particularmente preferida de los antagonistas de receptor adenosina A2B son aquellos descritos en la Patente de EE.UU. copendiente y comúnmente asignada No. Serial 6,825,349 y en la Solicitud de Patente de EE.UU. copendiente y comúnmente asignada No. Serial 10/719,102, las cuales se publican como Solicitud de Patente de EE.UU. No. de Publicación No. 20040176399.

Los compuestos descritos en esa solicitud tienen la estructura de la Fórmula I y la Fórmula II según se presenta en la Breve Descripción de la Invención anterior y pueden sintetizarse según se describe en las referencias o según se detalla abajo.

Parámetros de Reacción Sintética Los términos "solvente", "solvente orgánico inerte" o "solvente inerte" significan un solvente inerte bajo las condiciones de la reacción que se describe junto con el mismo [incluyendo, por ejemplo, benceno, tolueno, acetonitrilo, tetrahidrofurano ("THF"), dimetilformamida ("DMF"), cloroformo, cloruro de metileno (o diclorometano), dietiléter, metanol, piridina y lo similar]. Al menos que se especifique lo contrario, los solventes utilizados en las reacciones de la presente invención son solventes orgánicos inertes, y las reacciones se llevan a cabo bajo un gas inerte, preferentemente nitrógeno. El término "q.s." significa agregar una cantidad suficiente para lograr una función establecida, por ejemplo, para traer una solución al volumen deseado (es decir, 100%) .

Síntesis de los Compuestos de la Fórmula I v II Un método preferido para preparar los compuestos de la Fórmula I o I I en donde R3 es hidrógeno se muestra en el Esquema de Reacción I . Esguema de Reacción I Fórmula Etapa 1 - Preparación de la Fórmula (2) El compuesto de la fórmula (2) se elabora del compuesto de la fórmula ( 1 ) por una etapa de reducción. Las técnicas de reducción convencionales pueden utilizarse, por ejemplo, utilizando ditionita de sodio en solución de amonio acuoso; preferentemente, la reducción se lleva a cabo con hidrógeno y un catalizador metálico. La reacción se lleva a cabo en un solvente inerte, por ejemplo, metanol , en la presencia de un catalizador, por ejemplo, 10% de paladio en catalizador de carbono, bajo una atmósfera de hidrógeno, preferentemente bajo presión, por ejemplo, a aproximadamente 30 psi, por aproximadamente 2 horas. Cuando la reacción es sustancialmente completa, el producto de la fórmula (2) se aisla por medios convencionales para proporcionar un compuesto de la fórmula (2).

Etapa 2 - Preparación de la Fórmula (3) El compuesto de la fórmula (2) reacciona así con un ácido carboxílico de la fórmula Z-Y-X-CO2H en la presencia de una carbodiimida, por ejemplo, hidrocloruro 1 -(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida. La reacción se conduce en un solvente prótico, por ejemplo, metanol, etanol, propanol, y lo similar, preferentemente metanol , a una temperatura de aproximadamente 20-30°C, preferentemente aproximadamente temperatura ambiente, por aproximadamente 12-48 horas, preferentemente aproximadamente 16 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula (3) se aisla convencionalmente, por ejemplo, por remoción del solvente bajo presión reducida, y lavado del producto. Alternativamente, la siguiente etapa puede llevarse a cabo sin ninguna purificación adicional .

Preparación Alternativa de un Compuesto de la Fórmula (31) Alternativamente, el ácido carboxílico de la fórmula Z-Y-X- CO2H se convierte primero en un haluro ácido de la fórmula Z-Y-X-C(O)L, en donde L es cloro o bromo, al reaccionar con un agente halogenante, por ejemplo, cloruro de tionilo o bromuro de tionilo, preferentemente cloruro de tionilo. Alternativamente, cloruro de oxalilo, pentacloruro de fósforo o oxicloruro de fósforo pueden utilizarse. La reacción se conduce preferentemente en la ausencia de un solvente, utilizando agente halogenante en exceso, por ejemplo, a una temperatura de aproximadamente 60-80°C, preferentemente aproximadamente 70°C, por aproximadamente 1 -8 horas, preferentemente aproximadamente 4 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula Z-Y-X-C(O)L se aisla convencíonalmente, por ejemplo, por remoción del en exceso agente halogenante bajo presión reducida. El producto reacciona así con un compuesto de la Fórmula (2) en un solvente inerte, por ejemplo, acetonitrilo, en la presencia de una base terciaria, por ejemplo, trietilamina. La reacción se conduce a una temperatura inicial de aproximadamente 0°C, y después se dejó calentar a 20-30°C, preferentemente aproximadamente temperatura ambiente, por aproximadamente 12-48 horas, preferentemente aproximadamente 16 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula (3) se aisla convencionalmente, por ejemplo, al diluir la mezcla de reacción con agua, filtrado del producto, y lavado del producto con agua seguido por éter. Etapa 3- Preparación de la fórmula I El compuesto de la fórmula (3) se convierte así en un compuesto de la Fórmula I por una reacción de ciclización. La reacción se conduce en un solvente prótico, por ejemplo, metanol, etanol, propanol, y lo similar, preferentemente metanol, en la presencia de una base, por ejemplo, hidróxido de potasio, hidróxido de sodio, metóxido de sodio, etóxido de sodio, t-butóxído de potasio, preferentemente hidróxido de sodio acuoso, a una temperatura de aproximadamente 50-80°C, preferentemente aproximadamente 80°C, por aproximadamente 1-8 horas, preferentemente aproximadamente 3 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula I se aisla convencionalmente, por ejemplo, por remoción del solvente bajo presión reducida, acidificación del residuo con un ácido acuoso, filtrado del producto, después lavado y secado del producto. El compuesto de la fórmula (1) puede prepararse por diversos métodos. Un método preferido se muestra en el Esquema de Reacción II.

Esguema de Reacción II Etapa 1 - Preparación de la fórmula fS) El compuesto de la fórmula (4) se encuentra ya sea comercialmente disponible o se prepara por medios bien conocidos en la materia. Reacciona con etil cianoacetato en un solvente prótico, por ejemplo, etanol, en la presencia de una base fuerte, por ejemplo, etóxido de sodio. La reacción se lleva a cabo a aproximadamente temperatura de reflujo, por aproximadamente 4 a aproximadamente 24 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el compuesto de la fórmula (5) producido así se aisla convencionalmente.

Etapa 2 v 3 - Preparación de la fórmula (7) El compuesto de la fórmula (5) reacciona con el dimetilacetal de N5N-dimetilformamida en un solvente polar, por ejemplo, N , N-dimetilformamida. La reacción se lleva a cabo a aproximadamente 40°C, por aproximadamente 1 hora. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el compuesto de la fórmula (6) producido así reacciona con un compuesto de la Fórmula R1 Hal , en donde Hal es cloro, bromo, o yodo, en la presencia de una base, por ejemplo, carbonato de potasio. La reacción se lleva a cabo a aproximadamente 80°C, por aproximadamente 4-24 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula (7) se aisla convencionalmente, por ejemplo, por evaporación de los solventes bajo presión reducida, y el residuo se utiliza en la siguiente reacción sin purificación adicional .

Etapa 4 - Preparación de la fórmula (8) El compuesto de la fórmula (7) reacciona con amonio acuoso en un solvente polar, por ejemplo, se suspende en metanol. La reacción se lleva a cabo a aproximadamente temperatura ambiente, por aproximadamente 1 -3 días. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula (8) se aisla convencionalmente, por ejemplo, por cromatografía sobre una columna de gel de sílice, eluyéndose, por ejemplo, con una mezcla de diclorometano/metanol.

Etapa 5 - Preparación de la fórmula ( 1 ) El compuesto de la fórmula (8) se mezcla así con nitrito de sodio en un solvente ácido acuoso, preferentemente ácido acético y agua, por ejemplo, 50% de ácido acético/agua. La reacción se lleva a cabo a una temperatura de aproximadamente 50-90°C, preferentemente aproximadamente 70°C, por aproximadamente 1 hora. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula (1 ) se aisl a por medios convencionales. Alternativamente, la reacción puede conducirse en un solvente acuoso, por ejemplo, dimetilformamida y agua, y reacciona con un ácido fuerte, por ejemplo, ácido clorhídrico. Un compuesto de la Fórmula (8) puede prepararse de un compuesto de la Fórmula (10) utilizando un método similar, según se muestra en el Esquema de Reacción HA.

Esguema de Reacción HA Etapa 2 y 3- Preparación de la fórmula (7) El compuesto de la fórmula ( 10) reacciona con el dimetilacetal de N5N-dimetilformamida en un solvente polar, por ejemplo, N, N-dimetilformamida. La reacción se lleva a cabo a aproximadamente 40°C, por aproximadamente 1 hora. Cuando la reacción está sustanci almente completa, el compuesto de la fórmula (6a) producido así reacci ona con un compuesto de la Fórmula R2Hal , en donde Hal es cloro, bromo, o yodo, en la presencia de una base, por ejemplo, carbonato de potasio. La reacción se lleva a cabo a aproxi madamente 80°C, por aproximadamente 4-24 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de l a fórmula (7) se aisla convencionalmente, por ejemplo, por evaporación de los solventes bajo presión reducida, y el residuo se utiliza en la siguiente reacción si n purificación adicional .

Etapa 4 - Preparación de la fórmula (8) El compuesto de la fórmula (7) reacciona con amonio acuoso en un solvente polar, por ejempl o, se suspende en metanol . La reacción se lleva a cabo a aproximadamente temperatura ambiente, por aproxi madamente 1 -3 días. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula (8) se aisla convenci onal mente, por ejemplo, por cromatografía sobre una col umna de gel de sílice, eluyéndose, por ejemplo, con una mezcla de diclorometano/metanol . El compuesto de la fórmula (3) puede también prepararse por diversos métodos. Un método preferido se muestra en el Esquema de Reacción l l l .

Esquema de Reacción lll ¡91 ca: Etapa 1- Preparación de la fórmula (10) El compuesto comercialmente disponible 6-aminouracil se sililata primero, por ejemplo, por reacción con un exceso de hexametildisilazano como un solvente en la presencia de un catalizador, por ejemplo, sulfato de amonio. La reacción se lleva a cabo a aproximadamente temperatura de reflujo, por aproximadamente 1 -10 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el compuesto sílilatado producido así se aisla convencionalmente, y después reacciona con un compuesto de la Fórmula R1 Hal , en donde Hal es cloro, bromo, o yodo, preferentemente en la ausencia de un solvente. La reacción se lleva a cabo a aproximadamente reflujo, por aproximadamente 4-48 horas, preferentemente aproximadamente 12-16 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula ( 10) se aisla por medios convencionales.

Etapa 2 - Preparación de la fórmula (11 ) El compuesto de la fórmula (10) se disuelve así en un ácido acuoso, por ejemplo, ácido acuoso acético, y reacciona con nitrito de sodio. La reacción se lleva a cabo a una temperatura de aproximadamente 20-50°C, preferentemente aproximadamente 30°C, durante aproximadamente 30 minutos. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula (11) se aisla por medios convencionales, por ejemplo, por filtración.

Etapa 3- Preparación de la fórmula (12) El compuesto de la fórmula (11) se reduce así a un derivado de diamino. En general, el compuesto de la fórmula (11) se disuelve en amonio acuoso, y después un agente reductor, por ejemplo, hidrosulfito de sodio, agregado. La reacción se conduce a una temperatura de aproximadamente 70°C. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula (12) se aisla convencionalmente, por ejemplo, por filtración de la mezcla de reacción fría.

Etapa 4 - Preparación de la fórmula (13) El compuesto de la fórmula (12) reacciona así con a ácido carboxílico de la fórmula Z-Y-X-CO2H en la presencia de una carbodiimida, por ejemplo, hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida. La reacción se conduce a una temperatura de aproximadamente 20-30°C, por aproximadamente 12-48 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula ( 13) se aisla convencionalmente, por ejemplo, por filtración de la mezcla de reacción fría. Alternativamente, el ácido carboxílico de la fórmula Z-Y-X-CO2H se convierte en un haluro ácido de la fórmula Z-Y-X-C(O)L, en donde L es cloro o bromo, al reaccionar con un agente halogenante, por ejemplo, cloruro de tionilo o bromuro de tionilo; alternativamente, pentacloruro de fósforo o oxicloruro de fósforo pueden utilizarse. La reacción se conduce preferentemente en la ausencia de un solvente, utilizando en exceso agente halogenante, por ejemplo, a una temperatura de aproximadamente 60-80°C, preferentemente aproximadamente 7O°C, por aproximadamente 1 -8 horas, preferentemente aproximadamente 4 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula Z-Y-X-C(O)L se aisla convencionalmente, por ejemplo, por remoción del exceso de agente halogenante bajo presión reducida. El producto de la fórmula Z-Y-X-C(O)L reacciona así con un compuesto de la Fórmula (12) en un solvente inerte, por ejemplo, acetonitrilo, en la presencia de una base terciaria, por ejemplo, trietilamina. La reacción se conduce a una temperatura inicial de aproximadamente 0°C, y después se dejó calentar a 20-30°C, preferentemente aproximadamente temperatura ambiente, por aproximadamente 12-48 horas, preferentemente aproximadamente 16 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula ( 13) se aisla convencionalmente, por ejemplo, al diluir la mezcla de reacción con agua, filtrado del producto, y lavado del producto con agua seguido por éter.

Etapa 5 - Preparación de la fórmula (3) El compuesto de la fórmula ( 13) reacciona con un compuesto de la Fórmula R2Hal , en donde Hal es cloro, bromo, o yodo, en la presencia de una base, por ejemplo, carbonato de potasio La reacción se lleva a cabo a aproximadamente temperatura ambiente, por aproximadamente 4-24 horas, preferentemente aproximadamente 16 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula (3) se aisla convencionalmente, por ejemplo, por evaporación de los solventes bajo presión reducida, y el residuo puede purificarse convencionalmente, o pueden utilizarse en la siguiente reacción sin purificación adicional . Otro método para preparar un compuesto de la Fórmula (3) se muestra en el Esquema de Reacción IV.

Esquema de Reacción IV Etapa 1 - Preparación de la fórmula (14) El compuesto de la fórmula (5) se mezcla así con nitrito de sodio en un solvente ácido acuoso, preferentemente ácido acético y agua, por ejemplo, 50% ácido acético/agua. La reacción se lleva a cabo a una temperatura de aproximadamente 50-90°C, preferentemente aproximadamente 70°C, por aproximadamente 1 hora. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula (14) se aisla por medios convencionales. Alternativamente, la reacci ón puede conducirse en un solvente acuoso, por ejemplo, dimetilformamida y agua, y reaccionarse con un ácido fuerte, por ejemplo, ácido clorhídrico.

Etapa 3 - Preparación de la fórmula (15) El compuesto de ia fórmula (14) se reduce así a un derivado de diamino. En general, el compuesto de la fórmula ( 14) se disuelve en amonio acuoso, y después un agente reductor, por ejemplo, hidrosulfito de sodio, agregado. La reacción se conduce a una temperatura de aproximadamente 70°C. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula ( 15) se aisla convencionalmente, por ejemplo, por filtración de la mezcla de reacción fría..

Etapa 4 - Preparación de la fórmula (16) El compuesto de la fórmula ( 15) reacciona así con a ácido carboxílico de la fórmula Z-Y-X-CO2H en la presencia de una carbodiimida, por ejemplo, hidrocloruro de 1 -(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida. La reacción se conduce a una temperatura de aproximadamente 20-30°C, por aproximadamente 12-48 horas, en un solvente inerte, por ejemplo, metanol . Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula (16) se aisla convencionalmente, por ejemplo, por filtración de la mezcla de reacción fría. Alternativamente, el ácido carboxílico de la fórmula Z-Y-X-CO2H se convierte en un haluro ácido de la fórmula Z-Y-X-C(O)L. en donde L es cloro o bromo, al reaccionar con un agente halogenante, por ejemplo, cloruro de tionilo o bromuro de tionilo; alternativamente, pentacloruro de fósforo o oxicloruro de fósforo pueden utilizarse. La reacción se conduce preferentemente en la ausencia de un solvente, utilizando en exceso agente halogenante, por ejemplo, a una temperatura de aproximadamente 60-80°C, preferentemente aproximadamente 70°C, por aproximadamente 1 -8 horas, preferentemente aproximadamente 4 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula Z-Y-X-C(O)L se aisla convencionalmente, por ejemplo, por remoción del en exceso agente halogenante bajo presión reducida. El producto de la fórmula Z-Y-X-C(O)L reacciona así con un compuesto de la Fórmula (15) en un solvente inerte, por ejemplo, acetonitrilo, en la presencia de una base terciaria, por ejemplo, trietilamina. La reacción se conduce a una temperatura inicial de aproximadamente 0°C, y después se dejó calentar a 20-30°C, preferentemente aproximadamente temperatura ambiente, por aproximadamente 12-48 horas, preferentemente aproximadamente 16 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula ( 16) se aisla convencionalmente, por ejemplo, al diluir la mezcla de reacción con agua, filtrado del producto, y lavado del producto con agua seguido por éter.

Etapa 5 - Preparación de la fórmula (3) El compuesto de la fórmula (16) reacciona con un compuesto de la Fórmula R1 Hal , en donde Hal es cloro, bromo, o yodo, en la presencia de una base, por ejemplo, carbonato de potasio. La reacción se lleva a cabo a aproximadamente 80°C, por aproximadamente 4-24 horas, preferentemente aproximadamente 16 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el producto de la fórmula (3) se aisla convencionalmente, por ejemplo, por evaporación de los solventes bajo presión reducida, y el residuo puede purificarse convencional mente, o pueden utilizarse en la siguiente reacción sin purificación adicional . Un ejemplo de una síntesis de un compuesto Z-Y-X-CO2H en el cual X es pirazol-1 ,4-ilo, Y es metileno, y Z es 3-trifluorometilfenilo, se muestra en el Esquema de Reacción V.

Esquema de Reacción V Etil pirazol-4-carboxílato reacciona con 1 -(bromometil)-3- (trifluorometil)benceno in acetona en la presencia de carbonato de potasio. El producto, etil 1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4-carboxilato, se hidroliza así con hidróxido de potasio en metanol, para proporcionar ácido 1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4-carboxílico.

Prueba de Utilidad y Administración Utilidad General El método y las composiciones farmacéuticas de la invención son eficaces en la prevención del remoldeo de las vías respi ratorias y/o inflamación pulmonar en un mamífero que se predispone al remoldeo de las vías respiratorias e/o inflamación pulmonar. La predisposición puede deberse a las anormalidades genéticas, estados de enfermedad, y/o condiciones ambientales que se ha mostrado que inducen el remoldeo de las vías respiratorias e/o inflamación pul monar.

Prueba La prueba de actividad se conduce según se describe en aquellas patentes y solicitudes de patente anteriormente referidas, y en los Ejemplos de abajo, y por los métodos aparentes por aquellos expertos en la materia.

Administración Los compuestos de la Fórmula I pueden administrarse ya sea en dosis únicas o múltiples mediante cualquiera de los modos aceptados de administración de agentes que tienen utilidades similares, por ejemplo, según se describe en aquellas patentes y solicitudes de patente incorporadas para referencia, incluyendo bucal , intranasal , inyección intra-arterial , intravenosamente, intraperitonealmente, parenteralmente, intramuscularmente, subcutáneamente, oralmente, o como un inhalador. La administración oral en la vía preferida para administración de los compuestos de la Fórmula I . La administración puede ser por medio de la cápsula o tabletas revestidas entéricas, o lo similar. Al elaborar las composiciones farmacéuticas que incluyen al menos un compuesto de la Fórmula I , el ingrediente activo se diluye usualmente por un excipiente y/o se encierra dentro de tal vehículo que puede encontrarse en la forma de una cápsula, saquito, papel u otro contenedor. Cuando el excipiente sirve como un diluyente, puede encontrarse en material sólido, semi-sólido, o líquido (según anteriormente), el cual actúa como un vehículo, portador o medio para el i ngredi ente activo. De esta manera, las composiciones pueden encontrarse en la forma de tabletas, pildoras, polvos , pastillas, saquitos, cápsulas, elíxires, suspensiones, em ulsiones, soluciones, j arabes, aerosoles (como un medio sólido o l íquido) , ungüentos que contienen, por ejemplo, hasta 10% en peso del compuesto activo, cápsulas de gelatina suave y dura, soluciones inyectables estériles, y polvos envasados estériles. Algunos ejemplos de los excipientes adecuados i ncl uyen lactosa, dextrosa, sucrosa, sorbitol, manitol , al midones, goma acacia, fosfato de calcio, alginatos, tragacanto, gelatina, silicato de calcio, celulosa microcristalina, polivinilpirrolidona, celulosa, agua estéril , jarabe y metilcelulosa. Las formulaciones pueden adici onal mente i ncl ui r: agentes lubricantes tales como talco , estearato de magnesio, y aceite mineral; agentes humectantes ; agentes emulsificadores y de suspensión; agentes conservadores tales como metil- y propilhidroxi-benzoatos; agentes edulcorantes; y agentes saborizantes . Las composiciones de la i nvención pueden formularse a fin de proporcionar li beración rápida, sostenida o retardada del ingrediente activo después de l a admi nistración al paciente al empl ear procedimientos conocidos en la materia. Los sistemas de sumi nistro de fármaco de liberación controlada para la administración oral incl uyen sistemas de bomba osmótica y sistemas de disol ución que contienen recipientes revestidos con polímero o formulaciones de aglomerante de polímero fármaco. Los ejemplos de sistemas de liberación controlada se dan en la Patente de EE. UU. Nos. 3,845,770; 4,326,525; 4,902,514; y 5,616,345. Otra formulación para utilizarse en los métodos de la presente i nvención emplea dispositivos de suministro transdérmico ("parches"). Tales parches transdérmicos pueden utilizarse para proporcionar infusión continua o discontinua de los compuestos de la presente invención en cantidades controladas. La construcción y uso de parches transdérmicos para el suministro de los agentes farmacéutico se conoce bien en la materia. Véase, por ejemplo, Patentes de EE. UU Nos. 5,023,252, 4, 992,445 y 5,001 , 139. Tales parches pueden construirse para suministro de agentes farmacéuticos continuo, pulsátil o en demanda. Los antagonistas de receptor adenosina A2B tal como los compuestos de la Fórmula I son eficaces sobre un amplio rango de dosificación y se administra generalmente en una cantidad farmacéuticamente eficaz. Típicamente, para administración oral , cada unidad de dosis contiene de 1 mg a 2 g de un antagonista de receptor adenosina A2B, más comúnmente de 1 a 700 mg, y para administración parenteral , de 1 a 700 mg de un antagonista de receptor adenosina A2 B, más comúnmente aproximadamente 2 a 200 mg. Se entenderá, sin embargo, que la cantidad del antagonista de receptor adenosina A2B actualmente administrado se determinará por un médico, a la luz de las circunstancias relevantes, incluyendo la condición a tratar, la vía de administración elegida, el compuesto actual administrado y su actividad relativa, la edad, el peso, y la respuesta del paciente individual , la severidad de los síntomas del paciente, y lo similar. Para preparar dichas composiciones sólidas tales como tabletas, el ingrediente activo principal se mezcla con un excipiente farmacéutico para formar una composición de preformulación sólida que contiene una mezcla homogénea de un compuesto de la presente invención. Cuando se refieren a estas composiciones de preformulación como homogéneas, se entiende que el ingrediente activo se dispersa aún a lo largo de la composición de tal forma que la composición puede subdividirse fácilmente en formas de dosificación de unidad igualmente eficaces tales como tabletas, pildoras y cápsulas. Las tabletas o pildoras de la presente invención pueden revestirse o de otra forma componerse para proporcionar una forma de dosificación que logre la ventaja de la acción prolongada, o para protegerse de las condiciones acidas del estómago. Por ejemplo, la tableta o la pildora pueden comprender un componente de dosificación interna y de dosificación externa, la última encontrándose en la forma de una envoltura sobre el formador. Los dos componentes pueden separarse por una capa entérica que sirve para resistir la desintegración en el estómago y permite al componente interno pasar intacto en el duodeno o retardarse en la liberación. Una variedad de materiales pueden utilizarse para tales capas entéricas o revesti mientos , tales materiales i ncl uyendo un número de ácidos poliméricos y mezclas de ácidos poliméricos con tales materiales como laca, alcohol cetílico, y acetato de cel ulosa. Las composiciones para la inhalación o insuflación incluyen sol uciones y suspensi ones en solventes farmacéuticamente aceptables, acuosos u orgánicos, o mezclas de l os mismos, y polvos. Las composiciones sólidas o l íquidas pueden contener exci pientes farmacéuticamente aceptables adecuados según se describe anteriormente. Preferentemente, las composiciones se admi nistran por la vía respiratoria nasal u oral para el efecto sistémico o local . Las composiciones en los solventes preferentemente farmacéuticamente aceptables pueden nebulizarse por el uso de gases i nertes. Las sol uciones nobulizadas pueden i nhalarse directamente del di spositivo nebulizador o el dispositivo nebulizador puede uni rse a una cámara de máscara facial , o máquina para respirar de presión positiva intermitente. Las composiciones de solución, suspensión, o polvo pueden administrarse, preferentemente oralmente o nasalmente, de dispositivos que sumi ni stran l a formul aci ón en una manera adecuada. Los siguientes ejemplos se incluyen para demostrar las modalidades preferidas de la invención. Deberá apreci arse por aquell os expertos en la materi a que las técnicas descritas en los ejemplos que siguen representan las técnicas descubiertas por el inventor para funcionar bien en la práctica de la invención, y de esta manera pueden considerarse que constituyen modos preferi dos para su práctica. Sin embargo, aquellos expertos en la materia, a la luz de la presente descripción, aprecian que varios cambios pueden hacerse en las modalidades específicas que se describen y todavía obtener un resultado parecido o similar sin alejarse del espíritu y alcance de la invención.

Ejemplo 1 Preparación de un compuesto de la Fórmula (5) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (5*) en el cual R2 es Etilo Una solución de etóxido de sodio se preparó de sodio (4.8 g, 226 mmol) y etanol seco (150 ml). A esta solución se agregó amino-N-etilamida ( 10 g, 1 13 mmol) y etil cianoacetato (12.8 g, 1 13 mmol) . Esta mezcla de reacción se agitó un reflujo por 6 horas, se enfrió, y el solvente se removió de la mezcla de reacción bajo presión reducida. El residuo se disolvió en agua (50ml), y el pH se ajustó a 7 con ácido clorhídrico. La mezcla se dejó mantener durante la noche a 0°C, y el precipitado se filtró, se lavó con agua y secó por aire, para proporcionar 6-amino-1 -etil-1 , 3-dihidropirimidina-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (5). 1 H-NM R (DMSO-d6) d 10.29 (s, 1 H), 6.79 (s, 2H), 4.51 (s, 1 H), 3.74-3.79 (m, 2H), 1.07 (t, 3H, J = 7.03 Hz); MS m/z 155.98 (M+), 177.99 (M++ Na) B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (5) en el cual R es Metilo De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 A, pero reemplazando amino-N-etílamida con amino-N-metilamida, 6-amino-1 -metil-1 ,3-dihidropirimídina-2,4-diona se preparó.

C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (5*) variando R De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 A, pero reemplazando amino-N-etilamida con otros compuestos de ia fórmula (4), otros compuestos de la fórmula (5) se preparan.

Ejemplo 2 Preparación de un compuesto de la Fórmula (6) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (6) en el cual R2 es Etilo Una suspensión de 6-amino-1 -etil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona (0.77g, 5 mmol) en N, N-dimetilacetamida anhidra (25 ml) y N,N-dimetilformamida dimetilacetal (2.7 ml, 20 mmol) y se calentó a 40°C por 90 minutos. El solvente se removió así bajo presión reducida, y el residuo se trituró con etanol, se filtró, y se lavó con etanol, para proporcionar 6-[2-(dimetilamino)-1-azavinil]-1-etil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (6). 1H-NMR (DMSO-d6) d 10.62 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 4.99 (s, 1H). 3.88-3.95 (m, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.99 (s, 3H), 1.07 (t, 3H, J = 7.03 Hz); MS m/z 210.86 (M+), 232.87 (M++Na) B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (ß) en el cual R2 es Metilo De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 2A, pero reemplazando 6-amino-1-etil-1,3-dihidropirimidina-2,4-diona con 6-ami no- 1 -metil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona, 6-[2-(dimetilamino)-1-azavinil]-1-metil-1,3-dihidropirimidina-2,4-diona se preparó.

C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (6) variando R2 De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 2 A, pero reemplazando 6-amino-1-etil-1,3-dihidropirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la fórmula (5), otros compuestos de la fórmula (6) se preparan.

Ejemplo 3 Preparación de un compuesto de la Fórmula (7) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (7) en el cual R1 es n-Propilo y R2 es Etilo Una mezcla de una solución de 6-[2-(dimetilamino)-1-azavinil]-1-etil-1,3-dihidropirimidina-2,4-diona (1.5 g, 7.1 mmol) en dimetilformamida (25ml), carbonato de potasio (1.5g, 11 mmol) y yoduro n-propilo (1.54g, 11 mmol) se agitó a 80°C por 5 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se filtró, los solventes se evaporaron y el producto de la fórmula (7), 6-[2-(dimetilamino)-1-azavinil]-1-etil-3-propil-1,3-dihidropirimidina-2,4-diona, se utilizó como tal en la siguiente reacción.

B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (7) variando R1 y_R! De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 3A, pero reemplazando 6-[2-(dimetilamino)-1-azavinil]-1-etil-1,3-dihidropirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la fórmula (6), los siguientes compuestos de la fórmula (7) se prepararon: 6-[2-(dimetilamino)-1-azavinil]-1-metil-3-propil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona. 6-[2-(dimetilamino)-1-azavinil]-1-metil-3-ciclopropilmetil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona; 6-[2-(dimetilaniino)-1-azavinil]-1-etil-3-ciclopropilmetil-1,3- dihidropirimidina-2,4-diona; 6-[2-(di metílamino)-1 -azavinil]-1 -metil-3-(2-metilpropíl)-1 , 3-dihidropirimidina-2,4-diona; y 6-[2-(di meti lamí no)- 1 -azavinil]-1 -etil -3-(2-metil propi I)- 1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona.

C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (7). variando R1 v R2 De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 3A, pero reemplazando 6-[2-(dimetilamino)-1 -azavinil]-1 -etil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la fórmula (6), otros compuestos de la fórmula (7) se preparan.

Ejemplo 4 Preparación de un compuesto de la Fórmula (8) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (8) en el cual R1 es n-Propilo y R2 es Etilo Una solución dihidropirimidina-2,4-diona (2. Ig) se disolvió en una mezcla de metanol (10ml) y 28% solución de amonio acuoso (20ml), y se agitó por 72 horas a temperatura ambiente. El solvente se removió así bajo presión reducida, y el residuo se purificó por cromatografía sobre una columna de gel de sílice, eluyéndose con una mezcla de diclorometano/metanol (15/1), para proporcionar 6-amino-1-etil-3-propil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (8). 1H-NMR (DMSO-d6) d 6.80 (s, 2H), 4.64 (s, 1H), 3.79-3.84 (m, 2H), 3.63-3.67 (m, 2H), 1.41-1.51 (m, 2H), 1.09 (t, 3H, J = 7.03 Hz), 0.80 (t, 3H, J = 7.42 Hz); MS m/z 197.82 (M+) B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (8), variando R1 y R2 De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 4A, pero reemplazando 6-[2-(dimetilamino)-1-azavinil]-1-etil-3-propil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la fórmula (7), los siguientes compuestos de la fórmula (8) se prepararon: 6-amino-1-metil-3-propil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona; 6-ami no- 1-metil-3-ciclopropil metil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona; 6-amino-1-etil-3-ciclopropilmetil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona; 6-amino-1-metil-3-(2-metilpropil)-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona; y 6-amino-1-etil-3-(2-metilpropil)-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona.

C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (7) variando R1 y R2 De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 4A, pero reemplazando 6-[2-(d¡ metil amino)- 1-azavinil]-1 -etil -3-propi 1-1,3-dihidropirimidina-2,4-díona con otros compuestos de la fórmula (7), otros compuestos de la fórmula (8) se preparan.

Ejemplo 5 Preparación de un compuesto de la Fórmula (1) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (1) en el cual R1 es n-Propilo v R2 es Etilo A una solución de 6-amino-1-etil-3-propil-1,3-dihidropirimidina- 2,4-diona (1.4g, 7.1 mmol) en una mezcla de 50% de ácido acético/agua (35ml) se agregó nitrito de sodio (2g, 28.4 mmol) en partes durante un periodo de 10 minutos. La mezcla se agitó a 70°C por 1 hora, después la mezcla de reacción se concentró a un bajo volumen bajo presión reducida. El sólido se filtró, y se lavó con agua, para proporcionar 6-amino-1-etil-5-nitroso-3-propil-1,3-dihidropirimidina-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (1). MS m7z 227.05 (M+), 249.08 (M++Na) B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (W variando R1 v R2 De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 5A, pero reemplazando 6-ami no-1 -etil-3-propil-1 , 3-dihidropirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la fórmula (8) , los siguientes compuestos de la fórmula ( 1 ) se prepararon: 6-am¡ no- 1 -meti l-5-nitroso-3-propil-1 , 3-di hidropiri mi di na-2, 4-diona; 6-amino-1 -metil-3-ciclopropilmetil-5-nitroso-1 , 3-di hidropirimidina-2,4-diona; 6-amino-1 -etil-3-ciclopropilmetil-5-nitroso-1 , 3-di hidropiri mi dina -2,4-diona; 6-amino-1 -metil-3-(2-metilpropil)-5-nitroso-1 , 3-di hidropirimidina-2,4-diona; y 6-amino-1 -etil-3-(2-metilpropil)-5-nitroso-1 ,3-dihidropiri midina-2,4-diona.

C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (1 ) variando R y_RÍ De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 5A, pero reemplazando 6-amino-1 -etil-3-propil-1 , 3-di hidropiri mi din a-2, 4-diona con otros compuestos de la fórmula (8), otros compuestos de la fórmula (1 ) se preparan.

Ejemplo 6 Preparación de un compuesto de la Fórmula (2) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (2) en el cual R1 es n-Propilo v R2 es Etilo A una solución de 6-amino-1 -etil-5-nitroso-3-propil-1 , 3-dihidropirimidina-2,4-diona (300 mg) en metanol ( 10 ml) se agregó 10% de paladio en catalizador de carbono (50 mg), y la mezcla se hidrogenó bajo hidrógeno a 30 psi por 2 horas. La mezcla se filtró a través de celita, y el solvente se removió del filtrado bajo presión reducida, para proporcionar 5,6-diamino-1 -etil-3-propil-1 ,3-dihidropirimidi na-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (2). MS m z 213.03 (M4), 235.06 (M+ + Na) B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (2). variando R1 v R2 De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 6A, pero reemplazando 6-amino-1 -etil-5-nitroso-3-propil-1 , 3-dihidropirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la fórmula ( 1 ), los siguientes compuestos de la fórmula (2) se prepararon: 5,6-diamino-1 -metil-3-propil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona; 5,6-diami no-1 -metil-3-ciclopropilmetil-1 , 3-di hidropiri mi di na-2, 4-diona; 5,6-diamino-1 -etil-3-ciclopropilmetil-1 , 3-di hidropiri mi di na-2, 4-diona; 5,6-amino-1 -metil-3-(2-metilpropíl)-1 , 3-dihidropirimidina-2,4- diona; y 5, 6-di amino- 1 -etil -3-(2-meti I propi l)-1 , 3-di hidropiri mi di na-2, 4-diona.

C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (2) variando R1 v R2 De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 6A, pero reemplazando 6-amino-1 -etil-5-nitroso-3-propil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la fórmula (1 ), otros compuestos de la fórmula (2) se preparan.

Ejemplo 7 Preparación de un compuesto de la Fórmula (3) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (3) en el cual R1 es n-Propilo. R2 es Etilo. X es 1.4-Pirazolilo. Y es Metileno. y Z es 3-Trif luorometilf en ilo A una mezcla de 5,6-diamino-1 -etil-3-propil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona ( 100 mg, 0.47 mmol) y ácido 1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4-carboxílico (0.151 g, 0.56 mmol) en metanol ( 10ml) se agregó hidrocloruro 1 -(3-dimetilaminopropil)-3- etilcarbodiimida (0.135g, 0.7 mmol), y la mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. El solvente se removió bajo presión reducida, y el residuo se purificó utilizando Bistag, eluyéndose con 10% de metanol/ctoruro de metileno, para proporcionar N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-3-propil( 1 ,3-di hidropiri mi di n-5-il))(1 -{[3-(trifluorometil)f eni l]metil}-pirazol-4-il)carboxamida. 1 H-NM R (DMSO-d6) d 8.59 (s, 1 H), 8.02 (s, 1 H), 7.59-7.71 (m , 4H), 6.71 (s, 2H) , 5.51 (s, 2H), 3.91 -3.96 (m, 2H), 3.70-3.75 (m, 2H) , 1 .47-1.55 (m, 2H), 1 .14 (t, 3H , J = 7.03 Hz), 0.85 (t, 3H , J = 7.42 Hz).

B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (3). variando R1. R2. X. Y. v Z De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 7A o 7B, pero opcionalmente reemplazando 5,6-diamino-1 -etil-3-propil-1 , 3-dihidropirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la fórmula (2) , y opcionalmente reemplazando ácido 1 -{[3- (trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4-carboxílico con otros compuestos de la fórmula Z-Y-X-CO2H, los siguientes compuestos de la fórmula (3) se prepararon: N-(6-ami no- 1 -metil-2, 4-dioxo-3-propil( 1 , 3-di hidropiri mi di n-5-il))( 1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}-pirazol-4-il)carboxamida; N-(6-amino-1 -metil-2,4-dioxo-3-ciclopropilmetil( 1 ,3-di hidropiri mi di n-5-il))( 1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}-pirazol-4-il)carboxamida; N-(6-amino-1-etil-2,4-dioxo-3-ciclopropilmetil(1,3-di hidropiri mi di n-5-i I ))(1-{[3-(trifl uorometil)f enil ]metil}-pi razol-4-il)carboxamida; N-(6-ami no- 1 -metil-2, 4-dioxo-3-etil(1 , 3-di hidropiri mi di n-5-i I) )(1-{[3-fluorofenil]metil}-pirazol-4-il)carboxamida; N-6-amino-1-metil-2,4-dioxo-3-ciclopropilometil(1 ,3-di hidropiri mi di n-5-il))(1 -{[3-f I uorofenil]metil}-pirazol-4-il)carboxamida; N-(6-amino-1-etil-2,4-dioxo-3-ciclopropilmetil(1,3-dihidropirimidin-5-il))(1-{[3-fluorofenil]metil}-pirazol-4-il)carboxamida; N-[6-amino-3-(ciclopropilmetil)-1-metil-2,4-dioxo(1,3-dihidropirimidin-5-il)][1-bencilpirazol-4-il]carboxamida; N-6-amino-1 -metil-2, 4-dioxo-5-ci clopropilometi l)-5-dihidropirimidin-5-il))(1-{[3-cianofenilojmetil}-pirazol-4-il)carboxamida; [1-(2-(1 H-1 ,2,3,4-tetraazol-5-il)etil)pirazol-4-il]-N-[6-amino-3- (ciclopropilmetil)-1-metil-2,4-dioxo(1 , 3-di hidropiri mi din- 5-il)]carboxamida; N-[6-amino-3-(ciclopropilmetil)-1-etil-2,4-dioxo(1 ,3-di hidropiri mi di n-5-íl)](1-{[6-(trifluorometil)(3-piri di l)]metil}pirazol -4-il)carboxamida; N-[6-amino-3-propil)-1-etil-2,4-dioxo(1 ,3-dihídropirimidin-5-il)](1-{(2-piridil)]metil}pirazol-4-il)carboxamida; N-[6-amino-3-(2-metilpropil)-1-metil-2,4-dioxo(1,3-dihidropirimidin-5-il)][1-bencilpirazol-4-il]carboxamida; N-[6-amino-3-(2-metilpropil)-1-metil-2,4-dioxo(1,3- dihidropirimidi n-5-il)][1 -{[3-fluorofenil]metil}pirazol-4-il]carboxamida; N-[6-amino-3-(2-meti I propil )-1 -etil-2, 4-d ioxo( 1 , 3-di hidropiri mi di n-5-il)][1 -{[3-fluorofenil]metil}pirazol-4-il]carboxami da; -[6-amino-3-(2-metil propil )-1 -metil -2, 4-dioxo( 1 , 3-di hidropiri mi di n-5-il)][1 -{[3-(trif luorometil )f eni l]metil}pirazol-4-iljcarboxamida; y N-[6-ami no-3-(2-metil propil)- 1 -etil-2,4-dioxo( 1 , 3-dihidropirimidin-5-il)]( 1 -{[6-(trifluorometil)(3-pipdil)]metil}pirazol-4-il)carboxamida.

C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (2) variando: R1 v R2 De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 7A, pero opcionalmente reemplazando 5,6-diamino-1 -etil-3-propil-1 ,3-dihidropirimidína-2,4-diona con otros compuestos de la fórmula (2), y opcionalmente reemplazando ácido 1 -{[3- (trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4-carboxílico con otros compuestos de la fórmula Z-Y-X-CO2H, otros compuestos de la fórmula (3) se preparan.

Ejemplo 8 Preparación de un compuesto de la Fórmula I A. Preparación de un compuesto de la Fórmula I en el cual R1 es n-Propilo, R2 es Etilo. X es 1.4-Pirazolilo. Y es Metileno. v Z es 3-Trifl uoro meti Ife nilo Una mezcla de N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-3-propil( 1 ,3-dihidropirimidin-5-il))(1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}pírazol-3-il)carboxamida (80mg, 0.17 mmol), 10% de hidróxido de sodio acuoso (5ml), y metanol (5ml) se agitó a 100°C por 2 horas. La mezcla se enfrió, metanol se removió bajo presión reducida, y el residuo diluido con agua y acidificado con ácido clorhídrico. El precipitado se filtró, se lavó con agua, después metanol, para proporcionar 3-etil-1 -propil-8-(1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidropur¡na-2,6-diona, un compuesto de la Fórmula I . 1 H-NM R (DMSO-d6) d 8.57 (s, 1 H), 8.15 (s, 1 H), 7.60-7.75 (m, 4H), 5.54 (s, 2H), 4.05- 4.50 (m, 2H), 3.87-3.91 (m, 2H), 1 .55-1 .64 (m, 2H), 1.25 (t, 3H, J = 7.03 Hz), 0.90 (t, 3H, J = 7.42 Hz); MS myz 447.2 (M + ).

B. Preparación de un compuesto de la Fórmula I. variando R1. R2- X. Y- v Z De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 8 A, pero reemplazando N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-3-propil( 1 , 3-di hidropiri midin-5-il))( 1 -{[3-(trif I uorometil)f eni l]-metil}pirazol-3-il)carboxamida con o¿tros compuestos de la fórmula (3), los siguientes compuestos de la fórmula I se prepararon: 1-ciclopropilmetil-3-metil-8-[1-(fenilometil)pirazol-4-il]-1 ,3,7-trihidropurina-2, 6-di ona; 1 -ciclopropi I meti l-3-m etil -8-{1-[( 3-trifluorometilfenil)metil]pirazol-4-il}-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1 -ciclopropi I metil-3-etil-8-{1-[(3-trifluorometilf enil )meti I] pirazol -4-il}-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1 -ciclopropil metil-3-metil-8-{ 1-[(3-fluorof eníl) metiljpirazol -4-il o}-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1 -ciclopropil meti l-3-etil-8-{ 1-[(3-fluorof enil)metil]pi razol-4-il}- 1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1 -ciclopropil metil-3-etil-8-(1-{[6-(trifluorometil)( 3-piridil)]metil}pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 3-({4-[1 -(ciclopropi I meti I )-3-metil-2, 6-di oxo- 1,3, 7-trihidropuri n-8-¡l]pirazolil}metil)bencenocarbonitrilo; 8-[1-(2-(1H-1,2,3,4-tetraazol-5-il)etil)pirazol-4-il]-3-metil-1-ciclopropilmetil-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1-(2-metilpropil)-3-metil-8-[1-bencilpirazol-4-il]-1,3,7-tríhidropurina-2, 6-di ona; 1-(2-metilpropil)-3-etil-8-{1-[(3-fluorofenil)metil]pirazol-4-il}- 1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 1 -(2-metil propil)-3-metil-8-{1 -[(3-trif luorometilf enil ) meti I] pirazol -4-il}-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-díona; 1 -(2-metil propi I )-3-metil-8-{1 -[(3-f luorofenil )metil]pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona; 3-etil-1 -(2-metil propil)-8-(1 -{[6-(trífl uorometil)(3-piridil)]metíl}pirazol-4-il)-1 ,3,7-tri hidropurina-2,6-d¡ona; 1 -etil-3-metil-8-{1 -[(3-fluorofenil)metil]pirazol-4-il}-1 , 3,7-trihidropurina-2,6-diona; y 3-etil-1 -propil-8-[1 -(2-piridilometil)pirazol-4-il]-1 , 3,7-trihidropurina-2, 6-di ona.

C. Preparación de un compuesto de la Fórmula I. variando R . R2- X. Y. v Z De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 8 A, pero reemplazando N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-3-propil( 1 ,3-di hidropiri midin-5-i I) )(1 -{[3-(trif I uorometil)fenil]-metil}pirazol-3-¡l)carboxamida con otros compuestos de la fórmula (3), otros compuestos de la fórmula I se preparan.

Ejemplo 9 Preparación de un compuesto de la Fórmula (10) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (10) en el cual R1 es n-Propilo Una mezcla de 6-aminouracil (5.08 g, 40 mmol) , hexametildisilazano (50 ml) , y sulfato de amonio (260 mg, 1.96mmol) se refl uyó por 12 horas. Después de enfriarse, el sólido se filtró, y el solvente se removió del filtrado bajo presión reducida para proporcionar el derivado trimetílsililatado de 6-aminouracil. El producto se disolvió en tolueno ( 1.5ml) , y yodopropano (7.8 ml, 80 mmol) y se calentó en un baño de aceite a 120°C por 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió después a 0°C, y se agregó lentamente bicarbonato de sodio acuoso saturado. El precipitado resultante se filtró, y se lavó secuencialmente con agua, tolueno, y éter, para proporcionar 6-ami no-3-propil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (10), el cual se utilizó en la siguiente reacción sin purificación adicional . 1 H-NM R (DMSO-d6) d 10.34 (s, 1 H), 6.16 (s, 2H), 4.54 (s, 1 H), 3.57-3.62 (m, 2H), 1 .41 -1 .51 (m, 2H), 0.80 (t, 3H, J = 7.43 Hz) .

B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (10). variando ! De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 9A, pero reemplazando yodopropano con otros haluros de alquilo de la fórmula R1 Hal , otros compuestos de la fórmula ( 10) se preparan, incluyendo: 6-am i no-3-ci cl opropi I meti 1-1 , 3-di hidropiri mi di na-2,4-di ona; y 6-am¡no-3-(2-m etil propi I )-1 , 3-di hidropiri mi di na-2,4-di ona.

Ejemplo 10 Preparación de un compuesto de la Fórmula (11 ) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (10) en el cual R1 es n-Propilo A una solución de 6-amino-3-propil-1 ,3-dihidropirimídina-2,4-diona (5.6 g) en una mezcla de 50% ácido acético/agua (160ml) a 70°C se agregó nitrito de sodio (4.5g) en partes durante un período de 15 minutos. La mezcla se agitó a 70°C por 45 minutos, después la mezcla de reacción se concentró a un bajo volumen bajo presión reducida. El sólido se filtró, y se lavó con agua, para proporcionar 6-amino-5-nitroso-3-propil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (11). 1H-NMR (DMSO-d6) d 11.42 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 3.77-3.81 (m, 2H), 3.33 (s, 1H), 1.55-1.64 (m, 2H), 0.89 (t, 3H, J = 7.43 Hz); MS myz 198.78 (M+), 220.78 (M+ +Na) B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (11) variando R± De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 10A, pero reemplazando 6-amino-3-propil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la fórmula (10), otros compuestos de la fórmula (11) se preparan, incluyendo: 6-amino-5-nitroso-3-cicloprop¡ I meti 1-1, 3-di hidropiri mí di na-2, 4- diona; y 6-amino-5-nitroso-3-(2-meti I propil )-1, 3-di hidropiri mi di na-2, 4-diona.

Ejemplo 11 Preparación de un compuesto de la Fórmula (12) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (12) en el cual R1 es n-Propilo o II A una solución de 6-amino-5-nitroso-3-propil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona (5.4g, 27 mmol) en 12.5% de amonio acuoso (135 ml) a 70°C se agregó ditionito de sodio (Na2S2O4, 9.45g, 54 mmol) en partes durante 15 minutos, y la mezcla se agitó por 20 minutos. La solución se concentró bajo presión reducida, enfría a 5°C, el precipitado se filtró, y se lavó con agua fría, para proporcionar 5,6-diamino-3-propil-1,3-dihídropirimidina-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (12). 1H-NMR (DMSO-de) d 0.81 (t, 3H, J = 7.43 Hz), 1.43-1.52 (m, 2H), 3.63-3.67 (m, 2H), 5.56 (s, 2H); MS m/z 184.95 (M+), 206.96 (M + + Na) B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (12). variando Rl De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 1 A, pero reemplazando 6-amino-3- propil-1 ,3-dihidropirimid¡na-2,4-diona con otros compuestos de la fórmula ( 1 1 ), otros compuestos de la fórmula (12) se preparan, incluyendo: 5,6-diami no-3-ciclopropil etil-1 ,3-dihidropirímid¡na-2,4-diona; y 5,6-diam¡no-3-(2-metilpropil )-1 , 3-dih¡dropirimidina-2,4-diona.

Ejemplo 12 Preparación de un compuesto de la Fórmula (13) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (13*) en el cual R1 es n-Propilo. X es 1.4- Pirazolil. Y es Metileno. y Z es 3- Trifluorometilfenilo A una mezcla de 5,6-diami no-3-propil-1 , 3-dihídropirimidina-2,4-diona (2, 3g, 126 mmol) y ácido 1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4- carboxílico (3.79g, 14 mmol) en metanol (50ml) se agregó hidrocloruro 1 -(3-di metilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (2.67g, 14 mmol), y la mezcla de reacción se agitó por 3 días a temperatura ambiente (a pesar de que menos tiempo es aceptable) . El precipitado se filtró, y se lavó secuencialmente con agua, y metanol.

El producto se secó bajo vacío para proporcionar N-(6-amino-2,4-dioxo-3-propil( 1 , 3-dihidropirimidin-5-il))( 1 -{[3- (trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4-il)carboxamida, un compuesto de la Fórmula ( 13). 1 H-NM R (DMSO-d6) d 10.44 (s, 1 H), 8.56 (s, 1 H), 8.37 (s, 1 H) , 8.00 (s, 1 H), 7.56-7.71 (m, 3H), 6.02 (s, 1 H), 5.49 (s, 2H), 3.62-3.66 (m, 2H) , 1 .44-1 .53 (m, 2H), 0.82 (t, 3H, J = 7.43 Hz); MS mfz 458.92 (M+ + Na).

B. Preparación alternativa de un compuesto de la Fórmula (3) en el cual R1 es n-Propilo. X es 1.4-Pirazolilo. Y es Metileno. y Z es 3-Trifluorometilfenilo Una solución de 1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4-ácido carboxílico ( 1 g, 3.7 mmol) en cloruro de tionilo (1 ml ) se calentó a 70°C por 4 horas. El exceso de cloruro de tionilo destiló, y el residuo se trató con cloruro de metileno/hexanos. El solvente se removió bajo presión reducida, y el residuo se disolvió en acetonitrilo. Esta solución se agregó a una suspensión de 5,6-diamino-3-propil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona (2.3 g, 126 mmol) y trietilamina ( 1 ml) en acetonitrilo (20 ml) a 0°C, y se agitó por 16 horas. La mezcla de reacción se enfrió rápidamente con agua (5 ml) , se acidificó con ácido clorhídrico, se agitó por 30 mi nutos, y el precipitado se filtró. El producto se lavó con éter, para proporcionar N-(6-ami no-2,4-dioxo-3-prop¡ 1( 1 , 3-di hidropiri mi di n-5-il))( 1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4-il)carboxamida, un compuesto de la Fórmula (13).

C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (13). variando; R1. X Y. v Z De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 12A o 12B, pero opcionalmente reemplazando 6-amino-3-propil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la fórmula (12), y opcionalmente reemplazando ácido 1-{[3- (trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4-carboxílico con otros compuestos de la fórmula Z-Y-X-CO2H, otros compuestos de la fórmula (13) se preparan, incluyendo: N-(6-amino-2,4-dioxo-3-ciclopropil metil (1 , 3-di hidropiri mi di n-5-il))(1-{[3-(trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4-il)carboxamida; N -( 6-a m i no-2,4-dioxo-3-( 2-metil propil) (1 , 3-di hidropiri mi di n-5-il))(1-{[3-(trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4-il)carboxamida; N-(6-ami no-2, 4-dioxo-3-propi 1(1, 3-di hidropiri mi di n-5-¡ I ))(1 -{[3-fluorofenil]metil}pirazol-4-il)carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-ciclopropilmetil(1 , 3-di hidropiri mi din-Sil ))(1 -{[3-f luorof eni l]metil}pirazol-4-il)carboxami da; N -(6-amino-2,4-di oxo-3-(2-meti I propil )(1, 3-di hidropiri mi din-Sil ))(1 -{[3-f luorof enil] meti l}pirazol-4-i I )carboxami da; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-propil(1, 3-di hidropiri mi di n-5-¡ I ))(1-[1-bencil]pirazol-4-il)carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-ciclopropilmetil(1 , 3-di hidropiri mi di n-5-il))(1-[1-bencil]pirazol-4-il)carboxamida; N-(6-ami no-2,4-díoxo-3-(2-metil propi l)(1, 3-di hidropiri mi di n-5-il))(1-[1-bencil]pirazol-4-il)carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-propil(1,3-dihidropirimidin-5-il))(1-{[3-cianofenil]metil}pirazol-4-il)carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-ciclopropilmetil(1 , 3-di hidropiri mi din-5- ¡l))(1-{[3-cianofenil]metil}pirazol-4-íl)carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-(2-metil propi l)(1, 3-di hidropiri mi din-Sil) )(1-{[3-c¡anofenil]metil}pirazol-4-il)carboxami da; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-propil(1 , 3-di hidropiri mi di n-5-i I ))(1-{[1 -(2-(1 H-1 ,2,3,4-tetraazol-5-il)etil)pirazol-4-il}carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-ciclopropilmetil(1 , 3-di hidropiri mi di n-5-il))(1-{[1-(2-(1H-1,2,3,4-tetraazol-5-il)etil)pirazol-4-il)carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-(2-metilpropil)(1 , 3-di hidropiri mi di n-5->'))(] -{[1-(2-(1H-1,2,3,4-tetraazol-5-il)etil)pirazol-4-il)carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-propil(1,3-dihidropirimidin-5-il))(1-{[6- (trifluorometil)(3-piridil)]metil}pirazol-4-il)carboxamida; N-(6-ami no-2,4-dioxo-3-ciclopropilmeti 1(1, 3-di hidropiri mi din-5-il))(1-{[6-(trifluorometil)(3-piridil)]metil}pirazol-4-il)carboxamida; y N-(6-amino-2,4-dioxo-3-(2-metilpropil)(1 , 3-di hidropiri mi di n-5-il))(1-{[6-(trifluorometil)(3-piridil)]metil}pirazol-4-il)carboxamida.

Ejemplo 13 Preparación de un compuesto de la Fórmula (3) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (3) en el cual R1 es n-Propilo. R2 es Etilo. X es 1.4-Pirazolilo. Y es Metileno. y Z es 3-Trifluorometilfenilo Una mezcla de una solución de N-(6-amino-2,4-dioxo-3-propi 1(1, 3-di hidropiri midin-5-íl))(1-{[3-(trif I uorometil)-fenil]metil}pirazol-3-il)carboxamida (872 mg, 2 mmol) en dimetilformamida (10 ml), carbonato de potasio (552 mg, 4 mmol) y yoduro de etil (0.24ml, 3 mmol) se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se filtró, y el solvente se evaporó del filtrado bajo presión reducida. El residuo se agitó con agua por dos horas a temperatura ambiente, y el precipitado se filtró, se lavó con agua, y después se disolvió en metanol. El solvente se removió así bajo presión reducida para proporcionar N-(6-amino-1-etil-2, 4-dioxo-3-propi 1(1, 3-di hidropiri mí di n-5-il))(1 -{[3-(trifiuorometil)fenil]metil}pirazol-4-il)carboxamida, un compuesto de la Fórmula (3). 1H-NMR (DMSO-dß): d 8.58 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.72 - 7.50 (m, 4H), 6.71 (s, 2H), 5.51 (s, 2H), 4.0 - 3.82 (m, 2H), 3.77 - 3.65 (m, 2H), 1.60 -1.50 (m, 2H), 1.13 (t, 3H, J - 6.8 Hz), 0.84 (t, 3H, J = 7.2 Hz); MS mfz 462.9 (M") B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (13), variando R1. X. Y. v Z De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 13A, pero reemplazando N-(6-amino-2,4-dioxo-3-propil(1 ,3-di hidropiri mi di n-5-i I) )(1-{[3-(trif luorometil )-f eni I] meti l}pirazol-3-il)carboxamida con otros compuestos de la fórmula (13), otros compuestos de la fórmula (3) se preparan, incluyendo: N-(6-amino-1-metil-2,4-dioxo-3-propil(1 , 3-di hidropiri mi din- 5-i'))(1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}-pirazol-4-il)carboxamida; N-(6-amino-1-metil-2,4-dioxo-3-ciclopropilmetil(1 ,3-di hidropiri mi di n-5-il))(1 -{[3-( trif luorometil )f eni l]metíl}-pi razol-4-il)carboxamida; N-(6-amino-1-etil-2,4-dioxo-3-ciclopropilmetil(1,3-di hidropiri mi di n-5-il))(1 -{[3-(trif luorometil )fenil]metil}-pirazol -4-il)carboxamida; N-(6-amino-1-metil-2,4-dioxo-3-etíl(1 , 3-di hidropiri midin-5-il))(1 -{[3-f luorof eni l]metil}-pirazol-4-il)carboxamida; N-(6-am¡ no- 1 -metil-2, 4-dioxo-3-ciclopropilmetíl(1 ,3-d¡ hidropiri mi di n-5-il))(1-{[3-fluorofenil]metil}-pirazol-4-M)carboxamida; N-(6-amino-1-etil-2,4-dioxo-3-ciclopropilmetil(1,3-di hidropiri mi di n-5-il))(1-{[3-fluorofenil]metil}-pirazol-4-il)carboxami da; N-[6-ami no-3-(ciclopropil metil )-1 -metil-2, 4-dioxo(1, 3-dihidropirimidin-5-il)][1-bencilpirazol-4-il]carboxamida; N-(6-amino-1-metil-2,4-dioxo-3-ciclopropilmetil(1 ,3-dihidropirimidin-5-il))(1-{[3-cianofenilojmetil}-pirazol-4- ¡l)carboxamida; [1-(2-(1H-1,2,3,4-tetraazol-5-il)etil)pirazol-4-il]-N-[6-amino-3-(ciclopropilmetil)-1-metil-2,4-dioxo(1 , 3-di hidropiri mi din -5-il)]carboxamida; N-[6-amino-3-(ciclopropilmetil)-1-etil-2,4-dioxo(1 ,3-di hidropiri mi di n-5-il)](1-{[6-(trif luorometil )(3-piri di I )]metil}pi razol-4-il)carboxamida; N-[6-amino-3-propil)-1-etil-2,4-dioxo(1 , 3-di hidropiri mi di n-5-il)](1-{(2-piridil)]metil}pirazol-4-il)carboxamida; N-[6-amino-3-(2-metilpropil)-1-metil-2,4-dioxo(1,3-dihidropirimidin-5-il)][1-bencílpirazol-4-il]carboxamida; N-[6-amino-3-(2-metilpropil)-1-metil-2,4-dioxo(1,3-dihidropirimidin-5-il)][1-{[3-fluorofenil]metil}pirazol-4-il]carboxamida; N-[6-amino-3-(2-metilpropil)-1-etil-2,4-dioxo(1 ,3-dihidropirimidin-5-il)][1-{[3-fluorofenil]metil}pirazol-4-il]carboxamida; N-[6-amino-3-(2-metilpropil)-1-metil-2,4-dioxo(1,3-di hidropiri mi di n-5-il)][1-{[3-(trif I uorometil)f enil]metil}pi razol-4-il]carboxamida; y N-[6-amino-3-(2-metilpropil)-1-etil-2,4-dioxo(1,3-di hidropiri mi din- 5-il) ](1-{[6-(trif luorometil )(3-piri di I)] metil} pirazol -4-il)carboxamida.

Ejemplo 14 Preparación de un compuesto de la Fórmula I A. Preparación de un compuesto de la Fórmula I en el cual R1 es n-Propilo. R2 es Etilo. X es 1 ,4-Pirazorilo. Y es Metileno. y Z es 3-Trif luorometilf enilo Una mezcla de N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-3-propil(1 ,3-dihidropirimidin-5-il))( 1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}pirazol-3-il)carboxamida (850 mg, 2.34 mmol), 10% de hídróxido de sodio acuoso (10 ml), y metanol (10 ml ) se agitó a 100°C por 18 horas. La mezcla se enfrió, el metanol se removió bajo presión reducida, y la mezcla restante se acidificó con ácido clorhídrico a pH 2. El precipitado se filtró, se lavó con mezcla de agua/metanol , para proporcionar 3-etil-1 -propil-8-( 1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona, un compuesto de la Fórmula I . 1 H-NM R (DMSO-d6) d 8.57 (s, 1 H), 8.15 (s, 1 H), 7.60-7.75 (m, 4H), 5.54 (s, 2H), 4.05- 4.50 (m, 2H), 3.87-3.91 (m , 2H), 1.55-1.64 (m, 2H), 1.25 (t, 3H, J = 7.03 Hz), 0.90 (t, 3H, J = 7.42 Hz); MS m/z 447.2 (M + ) B. Preparación de un compuesto de la Fórmula I. variando R1. R2. X. Y. v Z De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 14A, pero reemplazando N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-3-propil(1 ,3- di hidropiri mi di n-5-il))( 1 -{[3-(trif luorometil )fenil]metil}pirazol-3-il)carboxamida con otros compuestos de la fórmula ( 13), otros compuestos de la fórmula I se preparan, incluyendo aquellos listados en el Ejemplo 8.

Ejemplo 15 Preparación de un compuesto de la Fórmula (14) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (14) en el cual R2 es Etilo A una solución de 6-amino-1 -etil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona (5.0 g, 32.3 mmol) en una mezcla de 50% de ácido acético/agua (50ml) a 70°C se agregó nitrito de sodio (4.45g, 64.5 mmol) en partes durante un período de 30 minutos. La mezcla se agitó a 70°C por un adicional de 30 minutos. La mezcla de reacción se enfrió, y el precipitado se filtró, y se lavó con agua, después metanol , para proporcionar 6-amino-1 -etil-5-nitroso-1 , 3-dihidropirimidina-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (14). 1 H-NM R (DMSO-d6): d 1 1 .52 (s, 1 H), 9.16 (s, 1 H), 3.83 (q, 2H , J = 7.0 Hz), 1 .1 1 (t, 3H, J = 7.0 Hz). MS m/z 184.8 (M + ), 206.80 (M + + Na) B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (14). variando Ei De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 15A, pero reemplazando 6-amino-1-etil-1,3-dihidropirimidína-2,4-diona con 6-ami no- 1 -meti 1-1, 3-di hidropiri mi di na-2,4-diona, 6-amino-1-metil-5-nitroso-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-díona se preparó.

C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (14). variando ñ! De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 15A, pero reemplazando 6-amino-1-etil-1,3-dihidropirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la fórmula (5), otros compuestos de la fórmula (14) se preparan.

Ejemplo 16 Preparación de un compuesto de la Fórmula (15) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (15) en el cual R2 es Etilo A una solución de 6-amino-1-etil-5-nitroso-1,3-dihidropirimidina-2,4-diona (3.9g, 21.2 mmol) en 14.5% de amonio acuoso (50ml) a 50°C se agregó ditionito de sodio (Na2S2O , 7.37g, 42.4 mmol) en partes durante 15 minutos, y la mezcla se agitó por 20 minutos. La solución se concentró bajo presión reducida a un volumen de 30 ml, se enfrió a 5°C, el precipitado se filtró, y se lavó con agua fría, para proporcionar 5,6-diamino-1-etil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (15). 1H-NMR (DMSO-d6): d 10.58 (s, 1H), 6.18 (s, 2H), 3.83 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 2.82 (s, 2H), 1.10 (t, 3H5 J = 7.2 Hz).

B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (15). variando EÍ De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 16A, pero reemplazando 6-amino-1-etil-5-nitroso-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona con 6-am¡no-1-metil-5-nitroso-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona, 5 ,6-diamino-1-metil-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona se preparó.

C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (15). variando Ei De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 16A, pero reemplazando 6-amino-1-etil- 5-nitroso-1,3-dihidropirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la fórmula (14), otros compuestos de la fórmula (15) se preparan.

Ejemplo 17 Preparación de un compuesto de la Fórmula (16) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula TI 6) en el cual R2 es Etilo. X es 1.4-Pirazolilo, Y es Metileno, y Z es 3- Trif luorometilf enilo A una mezcla de 5,6-diamino-1-etíl-1 ,3-dihidropirimidina-2,4-diona (2 g, 11.76 mmol) y 1-{[3-(trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4-ácido carboxílico (3.5 g, 12.94 mmol) en metanol (50 ml) se agregó hidrocloruro 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (2.47 g, 12.94 mmol), y la mezcla de reacción se agitó por 16 horas a temperatura ambiente. El solvente se removió bajo presión reducida, y el residuo se lavó con agua y metanol. El producto se secó bajo vacío para proporcionar N-(6-amino-1-etil-2,4-dioxo(1 ,3-di hidropiri mi di n-5-i I) )(1-{[3-(trifl uorometil)f eni l]metil}pirazol-4-il)carboxamida, un compuesto de la Fórmula (16). 1H-NMR (DMSO-d6): d 10.60 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.72 - 7.50 (m, 4H), 6.69 (s, 2H), 5.50 (s, 2H), 3.87 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 1.11 (t, 3H, 7.2 Hz); MS mfz 421 (M") B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (16). variando R . X. Y. v Z De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 17A, pero reemplazando 5,6-diamino-1 -etil-1 , 3-dihidropirimidina-2,4-diona con 5, 6-di ami no- 1 -metil-1 , 3-di hidropiri mi di na-2,4-di ona, N-(6-amino-1 -metil-2, 4-dioxo(l53-di hidropiri mí di n-5-i I ))( 1 -{[3-(trifluorometil)feni I] metil}pirazol-4-i I) carboxamida se preparó.

C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (16). variando R2. X. Y. v Z De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 16A, pero reemplazando 5, 6-di ami no- 1 -etil-1 , 3-di hidropiri mi di na-2,4-di ona con otros compuestos de la fórmula (14), otros compuestos de la fórmula ( 15) se preparan.

Ejemplo 18 Preparación de un compuesto de la Fórmula (3) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (3) en el cual R1 es n-Propilo. R2 es Etil. X es 1.4-Pirazolil. Y es Metileno. v Z es 3-Trifluorometilfenilo Una mezcla de una solución de N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo( 1 , 3-d¡ hidropiri midin-5-i I) )(1 -{[3-(trif luorometil )f eni l]metil}pirazol-3-il)carboxamida (1 .5g, 3.55 mmol) en dimetilformamida (30 ml) , carbonato de potasio (980mg, 7.1 mmol) y yoduro de propilo (724mg, 4.26 mmol) se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se agregó agua, y el precipitado se filtró, para proporcionar N-(6-amino-1-etil-2,4-dioxo-3-propil(1,3-dihidropirimidin-5-il))(1-{[3-(trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4-il)carboxamida, un compuesto de la Fórmula (3), el cual se utilizó en la siguiente reacción sin purificación adicional. H-NMR (DMSO-d6): d 8.58 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.72 - 7.50 (m, 4H), 6.71 (s, 2H), 5.51 (s, 2H), 4.0 - 3.82 (m, 2H), 3.77 - 3.65 (m, 2H), 1.60 -1.50 (m, 2H), 1.13 (t, 3H, J = 6.8 Hz), 0.84 (t, 3H, J = 7.2 Hz); MS m/z 462.9 (M~) B. Preparación de un compuesto de la Fórmula O), variando R1. R2. X. Y. v Z De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 18A, pero reemplazando N-(6-amino-1-etil-2,4-dioxo(1 , 3-di hidropiri mi di n-5-il))(1-{[3-(trifluorometil)fenil]-metil}pirazol-3-il)carboxamida con N-(6-amino-1-metil-2,4-dioxo(1 ,3-dihidropirimidin-5-íl)), N-(6-amino-1-metil-2,4-dioxo-3-propil(1,3-dihidropirimidin-5-il))(1-{[3-(trifluorometil)fenil]metil}pirazol-4-il)carboxamida se preparó.

C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (3). variando R1. R2. X. Y. v Z De igual forma, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 18 A, pero opcionalmente reemplazando N-(6-amino-1-etil-2,4-dioxo(1 ,3- di hidropiri mi di n-5-il))( 1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}p¡razol -3-il)carboxamida con otros compuestos de la fórmula (15), y opcionalmente reemplazando yoduro de propilo con otros compuestos de la fórmula R1 Hal , otros compuestos de la fórmula (3) se preparan.

Ejemplo 19 Preparación de un compuesto de la Fórmula I A. Preparación de un compuesto de la Fórmula I en el cual R1 es n-Propilo. R2 es Etilo. X es 1.4-Pirazolilo. Y es Metlleno. y Z es 3-Trif I uoro metilf en ilo Una mezcla de N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-3-propil( 1 , 3-d¡ hidropiri midin-5-il))( 1 -{[3-(trif I uorometíl)f enil]metíl}pi razol-3-il)carboxamida (300mg, 464 mmol), 20% de hidróxido de sodio acuoso (5ml), y metanol (10ml) se agitó a 80°C por 3 horas. La mezcla se enfrió, el metanol se removió bajo presión reducida, y la mezcla restante se acidificó con ácido clorhídrico a pH 2. El precipitado se filtró, se lavó con agua y metanol , para proporcionar 3-etil-1 -propil-8-( 1 -{[3-(trif luorometil )fenil]metil}pirazol-4-il)-1 , 3, 7-trihidropurina-2,6-diona, un compuesto de la Fórmula I .

H-NMR (DMSO-d6) d 8.57 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.60-7.75 (m, 4H), 5.54 (s, 2H), 4.05- 4.50 (m, 2H), 3.87-3.91 (m, 2H), 1.55-1.64 (m, 2H), 1.25 (t, 3H, J = 7.03 Hz), 0.90 (t, 3H, J = 7.42 Hz); MS m/z 447.2 (M + ) Ejemplo 20 Caracterización de Antagonistas A?3 Unión de radioligando para receptor adenosina A2B El cADN de receptor adenosina humana A2B. se transfectó establemente en células HEK-293 (referidas como células HEK-2AB). Las monocapas de células HEK-A2B se lavaron con PBS una vez y se colectaron en un regulador que contiene 10 mM de HEPES (pH 7.4), 10 mM de EDTA e inhibidores de proteasa. Esta células se homogenizaron en plitron por 1 minuto en fijación 4 y se centrifugaron a 29000 g por 15 minutos a 4°C. Las pastillas de célula se lavaron una vez con un regulador que contiene 10 mm de HEPES (pH 7.4), 1 mM de EDTA e inhibidores de proteasa, y se volvieron a suspender en el mismo regulador complementado con 10% de sucrosa. Las alícuotas congeladas se mantuvieron a -80°C. Los ensayos de competición comenzaron al mezclar 10 nM de 3H-ZM241385 (Tocris Cookson) con diversas concentraciones de compuestos de prueba, y 50 µg de proteínas de membrana en regulador TE (50 mM de Tris y 1 mM de EDTA) complementado con 1 Unidad/mL de deaminasa de adenosina. Los ensayos se incubaron por 90 minutos, se detuvieron por filtración utilizando Recolector Packard y se lavaron cuatro veces con regulador de TM de agua fría (10 mM de Tris, 1 mM de MgC12, pH 7.4). La unión no específica se determinó en la presencia de 10 µM ZM241385. Las afinidades de los compuestos (es decir, valores Ki) se calcularon utilizando el software GraphPad.

Unión de radioligando para otros receptores de adenosina Los cADNs de receptor adenosina humana Ai, A2 , A3 se transfectaron establemente ya sea en células CHO o HEK-293 (referidas como CHO-Ai, HEK-A2A, CHO-A3). Las membranas se prepararon de estas células utilizando el mismo protocolo según se describe anteriormente. Los ensayos de competición se comenzaron al mezclar 0.5 nM de 3H-CPX (para CHO-A , 2 nM de 3H-ZM214385 (HEK-A2A) o 0.1 nM de 125I-AB-MECA (CHO-A3) con diversas concentraciones de compuestos de prueba y las membranas perspectivas en el regulador TE (50 mM de Tris y 1 mM de EDTA de CHO-AT y HEK- A2A) o regulador TEM (50 mM de Tris, 1 mM de EDTA y 10 mM de MgCI2 para CHO-A3) complementados con 1 Unidad/mL de deaminasa adenosina. Los ensayos se incubaron por 90 minutos, se detuvieron por filtración utilizando un recolector Packard y se lavaron cuatro veces con regulador TM de agua fría (10 mM de Tris, 1 mM de MgCI2, pH 7.4). La unión no específica se determinó en la presencia de 1 µM de CPX (CHO-A,), 1 µM de ZM241385 (HEK-A2A) y 1 µM de IB-MECA (CHO-A3). Las afinidades de los compuestos (es decir valores Ki) se calcularon utilizando un software GraphPad™.

Mediciones cAMP La monocapa de células transfectadas se colectaron en PBS conteniendo 5 mM de EDTA. Las células se lavaron una vez con DM EM y se volvieron a suspender en DM EM conteniendo 1 Unidad/mL de deaminasa de adenosina a una densidad de 100,000-500,000 cél ulas/ml . 100 µl de la suspensión celular se mezcló con 25 µl conteniendo diversos combatientes y/o antagonistas y la reacción se mantuvo a 37°C por 15 minutos. Al final de los 15 minutos, 125 µl de 0.2 N de HCl se agregó para detener la reacción. Las células se centrifugaron por 10 minutos a 1000 rpm. 100 µl del sobrenadante se removió y se acetilató. Las concentraciones de cAM P en los sobrenadantes se midieron utilizando el ensayo directo de cAM P del Diseño de Ensayo. Los receptores de adenosina A2A y A2 B se acoplan a proteínas Gs y de tal manera los combatientes para el receptor adenosina A2A (tales como CGS21680) o para receptor adenosina A2B (tales como ÑECA) aumentan las acumulaciones de cAMP acumulaciones mientras que los antagonistas para estos receptores previenen el aumento en las acumulaciones de cAM P inducidas por los combatientes. Los receptores de adenosina Ai y A3 se acoplan a proteínas Gi y de esta manera los combatientes para el receptor adenosina Ai (tales como CPA) o para el receptor adenosina A3 (tales como I B-M ECA) inhiben el aumento en las acumulaciones de cAM P - i nducidas por forskolina. Los antagonistas para los receptores Ai y A3 previenen la inhibición en las acumulaciones de cAMP.

Ejemplo 21 Efecto de Antagonista A?B en la Reestructuración de las Vías Respiratorias en Modelo de Ratón El sistema de modelo que se utiliza es el modelo de ratón deficiente por deaminasa adenosina (ADA) de lesión pulmonar dependiente de adenosina. En este modelo, las elevaciones en adenosina se asocian con inflamación pulmonar y remoldeo de las vías respiratorias. Varias de las características observadas en estos ratones se asemejan a aquellas observadas en pacientes con varias formas de enfermedad de pulmón crónica incluyendo asma severa, COPD y fibrosis pulmonar. El procedimiento es tratar estos ratones con el antagonista A2B AR 3-etil-1-propil-8-(1-{[3-(trifluorometil)fenil]metil}(4-hidropirazol-4-il))-1 ,3,7-tríhidropurina-2,6-diona como un medio para probar las contribuciones de A2BAR a la inflamación pulmonar y lesión en ratones deficientes por ADA, los cuales podrían proporcionarse a la vista en la eficacia de este fármaco para el tratamiento de las enfermedades de pulmón crónicas. Los ratones se trataron por inyección intraperitoneal (ip) dos veces diariamente con 1 mg/kg de 3-etil-1-propil-8-(1-{[3-(trifluorometil)fenil]metil}(4-hidropirazol-4-il))-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-díona. El protocolo específico es como sigue: los ratones que contienen ADA o deficientes por ADA (ADA-/-) se identificaron al nacer mediante la selección de la actividad enzimática de ADA en la sangre. Los ratones con ADA-/- se mantuvieron en una terapia de enzima de ADA desde el día postnatal 2 hasta el día postnatal 21. En esta etapa, los tratamientos con 3-etil-1-propil-8-(1-{[3-(trifluorometil)fenil]metil}(4-hidropirazol-4-il))-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona o controles de vehículo (aceite de maíz/etanol/DMSO) se iniciaron. Los tratamientos consistieron de una inyección ip en la mañana (8-9 AM) y en la tarde (5-6 pm). Los tratamientos se dieron diariamente por 17 días, y el experimento se terminó en el día postnatal 38. Los grupos de tratamiento incluyen ratones con ADA-/-o ADA+ que reciben 3-etil-1-propil-8-(1-{[3-(trifluorometil)fenil]metil} (4-hidropirazo!-4-il))-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona, vehículo, o nada de tratamiento. Todos los ratones fueron cachorros de la misma camada y por lo tanto se igualaron por cepa. Tanto machos como hembras se incluyeron en estos experimentos. A la terminación del experimento, el suero se colectó para análisis de farmacocinética (PK) de niveles de 3-etil-1-propil-8-(1-{[3-(trifluorometil)fenil]metil}(4-hidropirazol-4-il))-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona y diversos puntos finales pulmonares se evaluaron. Los resultados de estos estudios indican que el tratamiento de ratones ADA-/- con 3-etil-1-propil-8-(1-{[3- (trif luorometil )f eni I] meti l}(4-hidropirazol-4-i I))- 1,3, 7-trihidropuri na-2, 6-diona dieron como resultado una reducción importante en la inflamación pulmonar y la destrucción de las vías respiratorias. Quizás la observación más dramática de este estudio fue la salud general de los animales al final del protocolo de tratamiento. Los ratones con ADA-/- se trataron ya sea con vehiculo o sin tratar mostraron señales externas de severa alteración respiratoria que incluyeron respiración y postura de impresión. Estas características no se observaron en ratones con ADA-/- tratados con 3-etil-1 -prop¡l-8-( 1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}(4-hidropirazol-4-il))-1 ,3,7-trihidropurina-2, 6-di ona.

Métodos: Ratones Los ratones deficientes con ADA se generaron y se genotiparon según se describe (Blackburn et al. (1998) J Biol Chem 273: 5093-5100 y Young ef al. (2004) J . Immunol . 173: 1380-1389. Los ratones homocigosos para el alelo nulo Ada se designaron deficientes de ADA (ADA'''), mientras que los ratones heterocigosos para el alelo nulo Ada se designaron como ratones de control ADA (ADA*). Todos los ratones se mezclaron en un antecedente 129sv/C57BL/6J y todas las comparaciones fenotípicas se realizaron entre los cachorros de la misma camada. El cuidado animal fue de acuerdo con las directrices institucionales y NI H. Los ratones se alojaron en cajas ventiladas equipadas con tapas microaisladoras y se mantuvieron bajo estrictos protocolos de contención. No se encontró evidencia de infección bacteriana, parasítica, o fúngica, y las serologías en los cachorros de la misma camada de la caja fueron negativas por 12 de los virus murino más comunes.

Diferenciales Celulares e Histología Los ratones se anestesiaron con avertina, y los pulmones se lavaron cuatro veces con 0.3 ml de PBS, y 0.95-1 ml de fluido de lavado agrupado se recuperó. El total de conteos celulares se determinaron utilizando un hemocitómetro, y las alícuotas se citogiraron sobre portaobjetos de microscopio y se tintaron con Diff-Quick (Dade Nehring) para diferenciales celulares. Los pulmones se infusionaron después con 4% de paraformaldehído en PBS a 25 cm de presión y después se fijaron durante I anoche a 4°C. Las muestras de pulmón fijas se enjuagaron en PBS, se deshidrataron, y se incluyeron en parafina. Las secciones (5 µm) se colectaron en portaobjetos de microscopio y se tintaron con hematoxilina y eosina (H&E, Shandon-Lipshaw) o tricromo Masson (EM Science), de acuerdo a las instrucciones del fabricante.

Análisis de mARN Los ratones se anestesiaron y los pulmones se removieron rápidamente y se congelaron en nitrógeno l íquido. El ARN se aisló de tejido de pulmón congelado utilizando el Reactivo TRIzol (Life Technologies I nc. , Grand Island, Nueva York, USA) . Las muestras de ARN se trataron después con DNasa y se sometieron a RT-PCR de tiempo real cuantitativo. Los cebadores, medidores y procedimientos para RT-PCR de tiempo real se descri bieron previamente en Sun et al. (2005) J Clin Invest 1 15: 35-43. Las reacciones se llevaron a cabo sobre un sistema ciclador térmico rápido Smart Cycler (Cepheid, Sunnyvale, CA). Los niveles de transcripción específicos se determinaron utilizando el software de análisis Smart Cycler análisis software a través de una comparación a la curva estándar generada de la amplificación de PCR de las diluciones templadas.

Cuantificación de Colágeno El ensayo de colágeno Sircol (Biocolor Ltd. , Belfast N. Irlanda) se realizó sobre pulmones completos congelado de gol pe. Los pulmones se homogenizaron en 5 ml de 0.5 M de ácido acético con 20 mg de pepsina y se incubaron con agitación por 24 horas a 4°C. El homenato se giro a 4000 rpm y el sobrenadante se ensayó por colágeno soluble de pepsina de acuerdo a las instrucciones del fabricante.

Inmunohistoquímica a-SMA y TGF-B1 La inmunohistoquímica se realizó en secciones de 5 µm cortadas de pulmones incorporados por parafina, fijos por formalina. Las secciones es rehidrataron a través de etanoles graduados a agua, las peroxidasas endógenas se enfriaron rápidamente con 3% de peróxido de hidrógeno, la recuperación de antígeno se realizó (DAKO Corp. , Carpenteria, CA) , y la avidina y biotina endógenas se bloquearon con el Sistema Bloqueador de Biotina (DAKO Corp.). Para una tintación con actina de músculo a-liso (sma), los pedazos se procesaron con el Ratón en el Equipo de Ratón, y los Reactivos de Streptavidina Élite ABC (Vector Laboratories, Burlingame, CA) y se incubaron con una dilución de un anticuerpo monoclonal a-sma (sigma, clon monoclonal 1 A-4) durante la noche a 4°C. Las secciones se desarrollaron con DAB (Sigma) y se contratintaron con Verde Metilo. Determinación del Tamaño del espacio respiratorio alveolar El tamaño de las vías respiratorias alveolares se determinó en pulmones infusionados con presión al medir las longitudes de cuerda promedio en secciones de pulmón tintadas con H&E (Blackburn et al. (2000) J Exp Med 192:159-170). Las imágenes representativas se digitalizaron, y una rejilla que consiste de 53 líneas negras a 10.5-µm intervalos se sobrepuso sobre la imagen. Esta rejilla de linea se substrajo de las imágenes de pulmón utilizando el software de análisis de imagen Image-Pro® Plus (Media Cybernetics), y las líneas resultantes se midieron y se promediaron para dar la longitud de cuerda promedio de las vías respiratorias alveolares. Las longitudes de cuerda promedio finales representan promedios de 10 imágenes no sobrepuestas de cada espécimen de pulmón. Todos los estudios cuantitativos se realizaron cegados con respecto al genotipo de animal.

Resultados Análisis Histológico El análisis histológico de los pulmones se muestra en la Figura 1 . Los pulmones de ratones con ADA-I- tratados con vehiculo mostraron importante simplificación de vía respiratoria alveolar (Figura 1 B) y aumentaron la inflamación pulmonar que consistió predomi nantemente de la acumulación de macrófagos activados en las vías respiratorias distales (Figura 1 E) . Sin embargo, la inflamación peribronquial/perivasculartambién fue evidente (no mostrado) . La simplificación de las vías respiratorias alveolares e inflamación pulmonar no fue evidente en el vehículo ADA+ tratado (Figura 1 A y D) o 3-etil-1 -propil-8-( 1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}(4-hidropirazol-4-il))-],3,7-trihidropurina-2,6-diona o ratones no tratados (no mostrado) . El tratamiento de ratones con ADA-I- con el antagonista de receptor adenosina A2B dio como resultado una reducción importante en la simplificación de vía respiratoria alveolar (Figura 1 C) e inflamación pulmonar (Figura 1 F) . Estos descubri mientos indican que el tratamiento con un antagonista de receptor adenosina A2B pueden prevenir el desarrollo de la inflamación pulmonar y la destrucción de las vias respiratorias en ratones con ADA-/-.

Análisis de Lavado Bronquioalveolar El lavado bronquioalveolar (BAL) se realizó y los conteos celulares de la vía respiratoria y los diferenciales se determinaron (Figura 2). Los resultados revelaron que hubo una importante reducción en el número del total de células recubiertas de BAL de ratones con ADA-/- tratados con el antagonista de receptor adenosina A2B según se compara a un vehículo tratado con ratones ADA-/- (Figura 2A) . El análisis de los diferenciales celulares de BALs reveló una reducción en todos los tipos celulares eval uados incluyendo linfocitos, neutrófilos, eosinófilos (Figura 2C) y macrófagos (Figura 2B) en ratones ADA-I- tratados con el antagonista de receptor adenosina A2B. La eval uación de macrófagos alveolares dentro de los pulmones de ratones con ADA-I- con y sin el tratamiento de antagonista de receptor adenosina A2 B indican que hubo una diferencia en el grado de la activación de macrófago alveolar (comparar Figura 1 E y F). Estas observaciones se confirmaron al cuantificar el número de macrófagos activados recuperados de BAL (Figura 2C). Además, la reducción en la activación de macrófago alveolar puede apreciarse al evaluar directamente las células BAL citogiraron sobre portaobjetos de microscopio (Figura 3) . Estos datos demuestran que existe una reducción importante en la inflamación de las vías respiratorias en ratones ADA-/- tratados con un antagonista de receptor adenosina A2B que muestra que el antagonismo A2BAR puede prevenir la inflamación de las vías respiratorias en mamíferos que se predisponen genética y/o ambientalmente al remoldeo de las vías respiratorias.

Efecto sobre Marcadores Inflamatorios La habilidad del tratamiento de antagonista A2 B para humedecer el grado de inflamación pulmonar en ratones con ADA''' dio pronto la evaluación de los niveles de citoquinas y quimioquinas clave. Los extractores de ARN de pulmón completo de ratones con ADA* y ADA''' tratados con vehículo o un antagonista de receptor adenosina A2B se analizaron. I L-5, I L-4, TNFa, RANTES y varias proteínas quimioatrayentes de monocitos (MCPs) se encontró que se estaban elevados en los pulmones de ratones con ADA''' tratados con vehículo; sin embargo, sus niveles no cambiaron con el tratamiento de antagonista de receptor adenosina A2B. En contraste, I L-6, Eotaxina I y TARC se elevaron en los ratones con ADA''' tratados con vehículo y sus ni veles fueron de manera importante inferiores en ratones con ADA''' tratados con el antagonista de receptor adenosina A2BAR.

El Efecto sobre la Acumulación de Miofibroblasto Los estudios previos han demostrado que los ratones con ADA' '' desarrollan fibrosis pulmonar junto con las elevaciones de adenosina. Para determinar el efecto de un tratamiento con antagonista de receptor adenosina A2B sobre fibrosis pulmonar en ratones con ADA''" el estado de los miofibroblastos pulmonares se evaluaron al tintarse por actina de músculo a-liso (a-sma) (Figura 5). Las células positivas no a-sma se observaron en las vías respiratorias dístales de ratones tratados con vehículo ADA* (Figura 5A) , mientras que la tintación a-sma fue prominente en las vías respiratorias distales de los ratones tratados con vehículo ADA''' (Figura 5B). Pocas a nada de células positivas a-sma se observaron en las vías respiratorias distales de ratones con ADA''' tratados con un antagonista de receptor adenosina A2B (Figura 5C), sugiriendo que un antagonismo A2BAR puede prevenir la acumulación de miofibroblastos en el pulmón de ratones ADA'''.

Efectos de Deposición de Colágeno El trabajo previo en el modelo de ADA-I- ha demostrado que los ratones con ADA-/- desarrollan severa fibrosis pulmonar junto con elevaciones de adenosina. Para determinar el efecto del tratamiento del antagonista de receptor adenosina A2B en fibrosis en ratones con ADA-/- evaluamos el grado de deposición de colágeno utilizando la tintación de tricromo de Masón (Figura 6). La evaluación de la deposición de colágeno reveló que hubo poca a nada de deposición de colágeno en los pulmones de ratones tratados con vehículo ADA* o antagonista de receptor adenosina A2B (Figura 6A y B), mientras que la deposición de colágeno de la vía respiratoria distal fue prominente en ratones tratados con vehículo ADA''' (Figura 6C). El tratamiento de ratones con ADA"'" con el antagonista de receptor de adenostina A2B 3-etil-1-propil-8-(1-{[3-(trifluorometil)fenil]metil}(4-hidropirazol-4-il))-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona dio como resultado una reducción en la deposición de colágeno en las vías respiratorias (Figura 6D). La producción de colágeno se midió al cuantificar los niveles de transcripción de a1-procolágeno de pulmón completo (Figura 6E) y los niveles de proteína de colágeno en fluido BAL (Figura 6F). Los aumentos importantes en la producción de colágeno se observaron en los pulmones de ratones con ADA''' tratados con vehículo, y estos aumentos se previnieron mayormente por el tratamiento CVT-6883. Estos descubrimientos demuestran que los antagonistas de receptor adenosina A2B pueden prevenir el desarrollo de fibrosis en ratones con ADA''' e implican la señalización de A2BAR en la regulación de la fibrosis pulmonar.

Reducción en los Mediadores Profibróticos TGF-ß1 , osteopontina (OPN) e inhibidor-1 de activador de plasmi nogen (PAI-1 ) son mediadores profibróticos que se ha mostrado que están elevados en los pulmones de ratones con ADA''' (Chunn et al. (2005) J Immunol 175: 1937-1946). Los niveles de estos reguladores fibróticos se elevaron en los pulmones de ratones con ADA''' tratados con vehículo, mientras que el tratamiento de antagonista de receptor adenosina A2B redujo la expresión de estas moléculas (Figura 7). Estos descubrimiento sugieren que el antagonismo A2 BAR pueden prevenir la expresión de reguladores clave de fibrosis en los pulmones de ratones con ADA'''.

Normalización de Niveles de Proteasa/Anti-Proteasa Los niveles aumentados de metaloproteinasas (M M Ps) e inhibidores de proteasas son características del alargamiento de la vía respiratoria distal en varios modelos que incluyen ratones ADA''' (Sun et al. (2005) J Clin Invest 1 15:35-43, Hautamaki et al. ( 1997) Science 277:2002-2004, Lanone ef al. (2002) J Clin Invest 1 10:463-474). La evaluación de las anti-proteasas y proteasas en los pulmones de ratones con ADA''' tratados con vehículo demostró un aumento en la expresión de TI M P-I , M MP-9 y MM P-12 (Figura 8). El tratamiento de ratones con ADA '' con un receptor de antagonista de adenosina A2B condujo a la expresión disminuida de todos los tres de estos reguladores de integridad alveolar, sugiriendo que la señalización A2BAR se incluye en la regulación de la proteasa inducida por adenosina y la expresión de anti-proteasa en los pulmones de ratones ADA'''.

Efectos en la Destrucción Alveolar Los ratones ADA-I- desarrollan características de la característica de alargamiento de la vía respiratoria distal de enfisema que se median por elevaciones en los niveles de adenosina pulmonar. Para evaluar el efecto de 3-etil-1 -propil-8-( 1 -{[3- (trifluorometil)fenil]metil}(4-hidropirazol-4-il))-1 , 3,7-tri hidropurina-2,6-diona en el alargamiento de la vía respiratoria distal observado en ratones con ADA-I-, la destrucción alveolar se valoró histológicamente y al determinar el tamaño de longitud de cuerda promedio de las vías respiratorias distales (Figura 9). Las vías respiratorias de animales ADA+ también se ordenaron bien fueron pequeñas cuando se observaron histológicamente (Figura 9A) . Las vías respiratorias con ADA-/- fueron alargadas (Figura 9B) y el tratamiento de ratones con ADA-/- con 3-etil-1 -propil-8-( 1 -{[3- (trifluorometil)fenil]metil}(4-hidropirazol-4-il))-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona previnieron este alargamiento (Figura 9C). La cuantificación del tamaño de la vía respiratoria distal se acordó con las observaciones histológicas (Figura 9D). Estos datos demuestran que el tratamiento de ratones con ADA-/- con 3-etil-1 -propil-8-( 1 -{[3-(trifluorometil)fenil]metil}(4-hidropirazol-4-il))-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona pueden prevenir la destrucción de las vías respiratorias alveolares observadas en ratones con ADA-/-.

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES 1. Un método para el tratamiento y prevención del remoldeo de las vías respiratorias e/o inflamación pulmonar mediante la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un antagonista de receptor A2B a un mamífero que se predispone genética y/o ambientalmente a un remoldeo de las vías respiratorias e/o inflamación pulmonar. 2. El método de la reivindicación 1 en donde el método es para el tratamiento y prevención del remoldeo de las vías respiratorias. 3. El método de la reivindicación 1, en donde el método es para el tratamiento y prevención de inflamación pulmonar. 4. El método de la reivindicación 1, en donde el mamífero es humano. 5. El método de la reivindicación 1, en donde la administración es sistémica. 6. El método de la reivindicación 5, en donde la administración es oral. 7. El método de la reivindicación 5, en donde la administración es intravenosa. 8. El método de la reivindicación 5, en donde la administración es intramuscular. 9. El método de la reivindicación 5, en donde la administración es intraperitoneal. 10. El método de la reivindicación 1, en donde el combatiente de receptor A2B se administra por inhalación. 1 1 . El método de la reivi ndicación 1 , en donde el mamífero padece de un estado de enfermedad seleccionado de asma, fibrosis pulmonar, y COPD. 12. El método de la reivindicación 1 1 , en donde el estado de enfermedad es asma. 13. El método de la reivindicación 1 1 , en donde el estado de enfermedad es fibrosis pulmonar. 14. El método de la reivindicación 1 1 , en donde el estado de enfermedad es COPD. 15. El método de la reivindicación 1 , en donde el antagonista de receptor A2 B tiene la estructura de la Fórmula I o Formula I I : Formula I Formula II en donde: R1 y R2 se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, o un grupo -D-E, en el cual D es un enlace covalente o alquileno, y E es alcoxi opcionalmente sustituido, cicloalquilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido , heteroarilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, o alquinilo opcionalmente sustituido, con ia condición de que cuando D sea un enlace covalente E no puede ser alcoxi; R3 es hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido o cicloalquilo opcionalmente sustituido; X es arileno o heteroarileno opcionalmente sustituido; Y es un enlace covalente o alquileno en el cual un átomo de carbono puede reemplazarse opcionalmente por -O-, -S-, o -NH-, y se sustituye opcionalmente por hidroxi, alcoxi, amino opcionalmente sustituido, o -COR, en el cual R es hidroxi, alcoxi o amino; con la condición de que cuando la sustitución opcional sea hidroxi o amino dicha sustitución puede no presentarse sobre un átomo de carbono adyacente a un heteroátomo; y Z es hidrógeno, arilo monocíclíco opcionalmente sustituido o heteroarilo monocíclico opcionalmente sustituido; con la condición de que (a) Z es hidrógeno solamente cuando Y es un enlace covalente y X es 1 ,4-pirazoleno opcionalmente sustituido unido al anillo purina por un átomo de carbono; y, (b) cuando X es arileno opcíonalmente sustituido, Z es un heteroarilo monociclico opcionalmente sustituido diferente a imidazol opcionalmente sustituido. 16. El método de la reivindicación 15, en donde: R1 y R2 son independientemente hidrógeno, alquilo inferior opcionalmente sustituido, o un grupo -D-E, en el cual D es un enlace covalente o alquileno, y E es fenilo opcionalmente sustituido, cicloalquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, alquinilo opcionalmente sustituido, y R3 es hidrógeno. 17. El método de la reivindicación 16, en donde: X es fenileno opcionalmente sustituido; y Y es un enlace covalente o alquileno inferior en el cual un átomo de carbono puede reemplazarse opcionalmente por -O-, -S-, o -NH-. 18. El método de la reivindicación 17, en donde R1 y R2 son independientemente alquilo inferior opcionalmente sustituido por cicloalquilo. 19. El método de la reivi ndicación 18, en donde R1 y R2 son n-propilo, Y es -OCH2-, y Z es oxadiazol opcionalmente sustituido. 20. El método de la reivindicación 19, en donde Z es 5-(2-metoxifenil)-( 1 ,2,4-oxadiazol-3-il) , principalmente 8-{4-[5-(2-metoxifenil)-[1 ,2,4]oxadiazol-3-ilmetoxi]fenil}-1 ,3-dipropil-1 , 3,7-trihidropurina-2, 6-di ona; 21 . El método de la reivindicación 19, en donde Z es 5-(3-metoxifenil)-( 1 ,2,4-oxadiazol-3-il) , principalmente 8-{4-[5-(3-metoxifenil)-[1 ,2,4]oxadiazol-3-ilmetoxi]fenil}-1 ,3-dipropil-1 , 3,7-trihidropurin a-2, 6-di ona. 22. El método de la reivindicación 19, en donde Z es 5-(4-fluorofenil)-(1 ,2,4-oxadiazol-3-il), principalmente 8-{4-[5-(4-fluorofenil)-[1 ,2,4]oxadiazol-3-ilometoxi]fenilo}-1 , 3-dipropil-1 ,3,7- tri hídropurina-2, 6-di ona. 23. El método de la reivindicación 16, en donde: X es pirazoleno opcionalmente sustituido, Y es un enlace covalente, alquileno inferior opcionalmente sustituido por hidroxi , alcoxi , amino opcionalmente sustituido, o -COR, en el cual R es hidroxi , alcoxi o amino; y Z es hidrógeno, fenilo opcionalmente sustituido, oxadiazolilo opcionalmente sustituido, isoxazolilo opcionalmente sustituido, o piridilo opcionalmente sustituido. 24. El método de la reivindicación 23, en donde X es 1 ,4-pirazoleno opcionalmente sustituido. 25. El método de la reivindicación 24, en donde Z es fenilo opcionalmente sustituido. 26. El método de la reivindicación 25, en donde R1 es alquilo inferior opcionalmente sustituido por cicloalquílo, R2 es hidrógeno, y Y es -CH2- o -CH(CH3). 27. El método de la reivindicación 26, en donde R1 es n-propilo, X es 1 ,4-pirazoleno, Y es -CH2-, y Z es 3-trifluorometilfenilo, principalmente 1 -propi I -8-( 1 -{[3-( trif luorometil )f eni l]-metil}pi razol -4-il)-1 , 3,7-trihidropurina-2,6-diona. 28. El método de la reivindicación 26, en donde R1 es n-propilo, X es 1 ,4-pirazoleno, Y es -CH2-, y Z es fenilo, principalmente 1 -propi I -8-[1 -bencil pirazol -4-il]- 1 , 3, 7-trihidropurina-2, 6-di ona. 29. El método de la reivindicación 26, en donde R1 es n-butilo, X es 1 ,4-pirazoleno, Y es -CH2-, y Z es 3-fl uorofenilo, principalmente 1-butil-8-(1-{[3-fluorofenil]metil}pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidropurina-2, 6-di ona. 30. El método de la reivindicación 26 en donde R1 es n-propilo, X es 1,4-pirazoleno, Y es -CH(CH3)-, y Z es fenilo, principalmente 1-propil-8-[1 -(fenil etil)pirazol-4-il]- 1,3, 7-trihidropuri na-2,6-diona. 31. El método de la reivindicación 25, en donde R1 y R2 son independientemente metilo, etilo, n-propilo, o ciclopropilmetilo, y Y es metileno o etileno que pueden ser opcionalmente sustituidos por hidroxi, alcoxi, amino opcionalmente sustituido, o -COR, en el cual R es hidroxi, alcoxi o amino. 32. El método de la reivindicación 31, en donde R1 y R2 son n-propilo, Y es -CH2-, y Z es 3-(1,2,3,4-tetrazol-5-il)fenilo, principalmente 1 , 3-di propil-8-{1-[(3-( 1H- 1,2,3, 4-tetraazol -5-il)fenil)metil]pirazol-4-il}-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona. 33. El método de la reivindicación 31, en donde R1 es n-propilo, R2 es etilo, Y es -CH2-, y Z es 3-trifluorometilfenilo, principalmente 3-etil- 1 -propi I -8-{1 -[(3-trif luorometilf enil) meti I] pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona. 34. El método de la reivindicación 31, en donde R1 y R2 son n-propilo, Y es -CH(CH3)-, y Z es 3-trifluorometilfenilo, principalmente 1 , 3-di propi I -8-(1-{[3-( trif luorometil )-f eni I] etil }pirazol -4-il)-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona. 35. El método de la reivindicación 31, en donde R1 y R2 son n-propilo, Y es -CH2-, y Z es 4-carboxifenilo, principalmente 1,3- dipropil-8-{1-[(4-carboxifenil)metil]pirazol-4-il}-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona. 36. El método de la reivindicación 31, en donde R1 y R2 son n-propilo, Y es -CH2-, y Z es 3-carboxifenilo, principalmente ácido 3-{[4-(2, 6-di oxo- 1, 3-di propi 1-1,3, 7-trihidropuri n-8-il)pirazolil]metil}benzoico. 37. El método de la reivindicación 31, en donde R1 y R2 son n-propilo, Y es -CH(CO2H)-, y Z es fenilo, principalmente ácido 2-[4-(2, 6-d¡ oxo- 1, 3-di propil (1, 3, 7-trihidropurin-8-il)) pirazol i l]-2-f enil oáci do acético. 38. El método de la reivindicación 24, en donde Z es oxadiazol opcionalmente sustituido. 39. El método de la reivindicación 38, en donde R1 es alquilo inferior opcionalmente sustituido por cicloalquilo, R2 es H, y Y es -CH2- o -CH(CH3)-. 40. El método de la reivindicación 31, en donde R1 es n-propilo, X es 1 ,4-pirazoleno, Y es -CH2-, y Z es 5-(4-clorofenil)-[1,2,4]-oxadiazol-3-ilo, principalmente 8-(1-{[5-(4-clorofenil)(1 ,2,4-oxadiazol-3-il)]metil}pirazol-4-il)-1 -propi 1-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona. 41. El método de la reivindicación 31, en donde R1 es n-butilo, X es 1 ,4-pirazoleno, Y es -CH2-, y Z es 5-(4-clorofenil)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-ilo, principalmente 8-(1-{[5-(4-clorofenil)(1 ,2,4-oxadiazol-3-il)]metil}pirazol-4-il)-1-butil-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona. 42. El compuesto de la reivindicación 38, en donde R1 y R2 son independientemente alquilo inferior opcionalmente sustituido por cicloalquilo y Y es -CH2- o -CH(CH3)-. 43. El método de la reivindicación 42, en donde R1 y R2 son n-propilo, Y es -CH2-, y Z es 3-(4-clorofenil)[1,2,4]oxadiazol-5-ilo, principalmente 8-(1-{[3-(4-clorofenil)(1 ,2,4-oxadiazol-5-il)]metil}pirazol-4-il)-1 , 3-di propil- 1, 3, 7-trihidropurina-2,6-d¡ ona. 44. El método de la reivindicación 42, en donde R1 es n-propilo, R2 es etilo, Y es -CH2-, y Z es 3-(4-clorofenil)-[1 ,2,4]-oxadiazol-5-ilo, principalmente 8-(1-{[3-(4-clorofenil)(1,2,4-oxadiazol-5-il)]metil}pirazol-4-il)-3-etil-1-propil-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona. 45. El método de la reivindicación 24, en donde Z es hidrógeno. 46. El método de la reivindicación 44, en donde R1 y R2 son independientemente alquilo inferior opcionalmente sustituido por cicloalquilo, y Y es -CH2-, -CH(CH3)- o un enlace covalente. 47. El método de la reivindicación 46, en donde R1 y R2 son n-propilo, Y es un enlace covalente, y Z es hidrógeno, principalmente 1 ,3-dipropil-8-pirazol-4-il-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona. 48. El método de la reivindicación 46, en donde R1 es sec-butilo, R2 es metilo, Y es un enlace covalente, y Z es hidrógeno, principalmente 1-metil-3-sec-butil-8-pirazol-4-il-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona. 49. El método de la reivindicación 24, en donde Z es isozaxolilo opcionalmente sustituido. 50. El método de la reivindicación 49, en donde R1 y R2 son independientemente alquilo inferior opcionalmente sustituido por cicloalquilo, y Y es -CH2-, -CH(CH3)-, o un enlace covalente 51 . El método de la reivindicación 50, en donde R1 y R2 son n-propilo, Y es -CH -, y Z es 5-(4-trifluorometilfenil)isoxazol-3-ilo, principalmente 1 ,3-dipropil-8-[1 -({5-[4-(trifluorometil)fenil]isoxazol-3-il} metil)pirazol-4-il]-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona. 52. El método de la reivindicación 50, en donde R1 es n-propilo, R2 es etilo, Y es -CH2-, y Z es 5-(4-clorofenil)-isoxazol-3-ilo, principalmente 8-( 1 -{[5-(4-clorofenil)isoxazol-3-il]metil}pirazol-4-il)-3-etil-1 -propil-1 , 3,7-trihidropurina-2,6-diona. 53. El método de la reivi ndicación 24, en donde Z es piridilo opcionalmente sustituido. 54. El método de la reivindicación 52, en donde R1 y R2 son independientemente alquilo inferior opcionalmente sustituido por cicloalquilo, y Y es -CH2-, -CH(CH3)-, o un enlace covalente. 55. El método de la reivindicación 54, en donde R1 y R2 son n-propilo, Y es -CH2-, y Z es pirid-2-ilo, principalmente 1 ,3-dipropil-8-[1 -(2-piridilometil)pirazol-4-il]-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona. 56. El método de la reivi ndicación 54, en donde R1 y R2 son n-propilo, Y es -CH2-, y Z es 2-trifluorometilpirid-3-ilo, principalmente 1 ,3-di propil-8-( 1 -{[6-(trifluorometil)(3-piridil)]metil}pirazol-4-il)-1 , 3, 7-trihidropurina-2, 6-di ona. 57. El método de la reivindicación 54, en donde R1 y R2 son n-propilo, Y es -CH2-, y Z es 6-carboxi-pirid-2-ilo, principalmente ácido 6-{[4-(2,6-dioxo-1 ,3-dipropil-1 ,3,7-trihidropurin-8- il)pirazolil]metil}piridina-2-carboxílico. 58. El método de la reivindicación 54, en donde R1 es n-propilo, R2 es etilo, Y es -CH2-, y Z es 2-piridilo, principalmente 3-etil-1-propil-8-[1-(2-piridilometil)pirazol-4-il]-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona. 59. 2 El método de la reivindicación 54, en donde R1 es n-propilo, R2 es etilo, Y es -CH2-, y Z es 6-(trifluorometil)-pirid-3-ilo, principalmente 3-eti 1-1 -propi I -8-(1-{[6-( trif luorometil )( 3-piridil)]metil}pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidropurina-2,6-diona. 60. El método de la reivindicación 54, en donde R1 es ciclopropilmetilo, R2 es etilo, Y es -CH2-, y Z es 6-(trifluorometil)-pirid-3-ilo, principalmente 1 -(ciclopropi I meti I )-3-etil-8-(1 -{[6-(trif luorometil) (3-piridi I )]metil}pirazol-4-i I)- 1,3, 7-trihidropuri na-2, 6-diona. 61. El método de la reivindicación 54, en donde R1 es 2-metilpropilo, R2 es etilo, Y es -CH2-, y Z es 6-(trifluorometil)-pirid-3-ilo, principalmente 3-eti 1-1 -(2-metil propil )-8-(1-{[6-(trif luorometil ) (3-piridil)]metil}pirazol-4-il)-1,3,7-trihidropurina-2,6-diona.