MD4121C1 - Procedeu de obţinere a complexului celulazo-amilazic - Google Patents

Procedeu de obţinere a complexului celulazo-amilazic Download PDF

Info

Publication number
MD4121C1
MD4121C1 MDA20100101A MD20100101A MD4121C1 MD 4121 C1 MD4121 C1 MD 4121C1 MD A20100101 A MDA20100101 A MD A20100101A MD 20100101 A MD20100101 A MD 20100101A MD 4121 C1 MD4121 C1 MD 4121C1
Authority
MD
Moldova
Prior art keywords
cellulase
cultivation
amylase complex
separated
complex
Prior art date
Application number
MDA20100101A
Other languages
English (en)
Russian (ru)
Other versions
MD4121B1 (ro
Inventor
Janetta Tiurina
Larisa Caisin
Vasile Harea
Maria STRATAN
Elena Dvornina
Alexandra Deseatnic-Ciloci
Steliana Clapco
Svetlana Labliuc
Original Assignee
Inst De Microbiologie Si Biotehnologie Al Academiei De Stiinte A Moldovei
Universitatya Agrareh De Stat Din Moldova
Inst De Fizica Aplicata Al Academiei De Stiinte A Moldovei
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Inst De Microbiologie Si Biotehnologie Al Academiei De Stiinte A Moldovei, Universitatya Agrareh De Stat Din Moldova, Inst De Fizica Aplicata Al Academiei De Stiinte A Moldovei filed Critical Inst De Microbiologie Si Biotehnologie Al Academiei De Stiinte A Moldovei
Priority to MDA20100101A priority Critical patent/MD4121C1/ro
Publication of MD4121B1 publication Critical patent/MD4121B1/ro
Publication of MD4121C1 publication Critical patent/MD4121C1/ro

Links

Landscapes

  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Abstract

Invenţia se referă la biotehnologie, în particular la obţinerea unui complex celulazo-amilazic ce poate fi utilizat în zootehnie ca mijloc de sporire a asimilării raţiilor alimentare.Procedeul de obţinere a complexului celulazo-amilazic include cultivarea submersă a tulpinii de fungi Aspergillus niger CNMN-FD-10 pe un mediu de cultură cu următorul raport al componentelor, g/L: borhot de sfeclă - 10,0; amidon - 10,0; tărâţe de grâu - 20,0; KH2PO4 - 1,0; CaCl2 · 2H2O - 0,1; MgSO4 · 7H2O - 0,3; NaNO3 - 2,5; apă până la 1,0 L, la pH 6,0, timp de 168 ore, după cultivare lichidul de cultură se separă de biomasă prin filtrare sau centrifugare, complexul celulazo-amilazic se separă din filtratul de cultură prin sedimentare cu alcool etilic rectificat şi se centrifughează.

Description

Invenţia se referă la biotehnologie, în particular la obţinerea unui complex celulazo-amilazic ce poate fi utilizat în zootehnie ca mijloc de sporire a asimilării raţiilor alimentare.
Este cunoscut că în industriile de prelucrare a materiilor vegetale în scopul dezintegrării polimerilor naturali (celuloza, hemicelulozele, amidonul) din compoziţia furajelor pentru sporirea asimilării lor de către animale şi păsări sunt utilizate preparate enzimatice hidrolitice mixte, obţinute prin agitare mecanică a componentelor din diferite surse (diverse microorganisme producătoare) sau obţinute prin cultivarea mixtă a producătorilor microbieni de origine diferită [1].
Dezavantajul constă în optimizarea dificilă a preparatului după componentele enzimatice şi/ sau a condiţiilor de cultivare ce necesită cercetări suplimentare voluminoase, complexitatea sporită a realizării procesului tehnologic, ceea ce conduce la creşterea preţului de cost al produsului final.
Cea mai apropiată soluţie pentru invenţia revendicată este procedeul de obţinere a enzimelor celulozolitice care include cultivarea unui amestec în raport de 1:1 constituit din două microorganisme Trichoderma viride şi Aspergillus niger (tulpini de colecţie) pe un mediu de cultură constituit din tărâţe de grâu, extract de malţ şi săruri minerale [2].
Dezavantajul acestui procedeu constă în optimizarea dificilă a condiţiilor de cultivare mixtă a două microorganisme diferite pentru obţinerea efectului optim. Complexul enzimatic obţinut prin acest procedeu nu conţine amilaze şi ilanaze, enzime cu capacitate de dezintegrare a amidonului şi xemicelulozelor, constituenţi majori ai materiei vegetale. Lipsa acestor două componente conduce la diminuarea eficienţei complexului enzimatic integral la asimilarea de către animale şi păsări a furajelor concentrate în bază de orz, ovăz, grâu şi alte grăunţoase.
Procedeul nu permite modificarea ponderii componentelor enzimatice din compoziţia complexului în concordanţă cu compoziţia substratului.
Problema pe care o rezolvă prezenta invenţie constă în obţinerea unui complex celulazo-amilazic specific, echilibrat conform activităţii enzimatice respective (celobiohidrolaze, endoglucanaze, β-glucozidaze, amilaze) cu capacităţi de dezintegrare a polimerilor naturali din compoziţia ţesuturilor vegetale (celuloza, hemicelulozele, amidonul).
Esenţa invenţiei constă în aceea că procedeul de obţinere a complexului celulazo-amilazic include cultivarea submersă a tulpinii de fungi Aspergillus niger CNMN-FD-10 pe un mediu de cultură cu următorul raport al componentelor, g/L: borhot de sfeclă - 10,0; amidon - 10,0; tărâţe de grâu - 20,0; KH2PO4 - 1,0; CaCl2 · 2H2O - 0,1; MgSO4 · 7H2O - 0,3; NaNO3 - 2,5; apă până la 1,0 L, la pH 6,0, timp de 168 ore, după cultivare lichidul de cultură se separă de biomasă prin filtrare sau centrifugare, complexul celulazo-amilazic se separă din filtratul de cultură prin sedimentare cu alcool etilic rectificat şi se centrifughează.
Rezultatul tehnic al invenţiei constă în obţinerea complexului celulazo-amilazic echilibrat la cultivarea unui singur microorganism - tulpina fungică Aspergillus niger CNMN-FD-10.
Rezultatul tehnic obţinut se datorează capacităţii înalte de adaptare a fungilor la condiţiile de mediu, caracterul indus al enzimelor hidrolitice, diferenţa termenelor de acumulare maximă a enzimelor de tipuri diferite.
Exemplu de realizare a invenţiei
Tulpina Aspergillus niger CNMN-FD-10, utilizată ca producător, produce extracelular complexul enzimatic hidrolitic constituit din: celobiohidrolaze, endoglucanaze, β-glucozidaze, xilanaze, ca enzime-satelit în cantităţi mici - amilaze.
Se prepară mediul nutritiv cu compoziţia, g/L: borhot de sfeclă - 10,0; amidon - 10; tărâţe de grâu - 20,0; KH2PO4 - 1,0; CaCl2 · 2H2O - 0,1; MgSO4 · 7H2O - 0,3; NaNO3 - 2,5; apă până la 1,0 L; pH 6,0. Mediul se repartizează a câte 0,2 L în vase Erlenmayer cu capacitatea de 1 L şi se sterilizează în autoclavă la regimul 120°C, timp de 1 oră. După răcire la 30°C mediul se inoculează cu 5% v/v suspensie de spori ai culturii de 10…12 zile. Retortele se montează pe agitator cu viteza de rotaţie 180…200 rot./min. Cultivarea se efectuează într-o încăpere termostatată la 28...30°C, timp de 168 ore. Ca material de inoculare serveşte suspensia de spori cu concentraţia de 2,5 · 3,0 x 106…107 spori/mL, obţinută prin spălare cu apă distilată sterilă de pe suprafeţe înclinate de malţ-agar a culturii fungice Aspergillus niger CNMN-FD-10 în vârstă de 10…12 zile.
După cultivare lichidul de cultură se separă de biomasă prin filtrare sau centrifugare, complexul celulazo-amilazic se separă din filtratul de cultură prin sedimentare cu alcool etilic rectificat şi se centrifughează, ulterior se determină activităţile enzimatice care în aceste condiţii prezintă următoarele valori, u/g:
celobiohidrolaze 13,6 β-glucozidaze 309,9 Endoglucanaze 467,1 Xilanaze 2881,6 Amilaze 37,7
Eficacitatea complexului celulazo-amilazic (Cellamyl-5) obţinut a fost evaluată printr-un test de digestibilitate în nutriţia suinelor de prăsilă. Rezultatele sunt reprezentate în tabel. În urma cercetărilor s-a stabilit îmbunătăţirea indicilor de valorificare digestivă a substanţelor nutritive din nutreţul combinat (cu conţinutul de celuloză ridicat) de către suinele de prăsilă.
Digestibilitatea substanţei uscate în lotul experimental nr. 3 s-a mărit cu 1,75% în comparaţie cu lotul martor, iar digestibilitatea substanţelor nutritive în lotul experimental nr. 2 cu 1,67%, s-a constatat tendinţa măririi digestibilităţii proteinei brute 72,33 şi 72,06% respectiv loturile experimentale nr. 2 şi nr. 3 în comparaţie cu lotul martor (69,91%). Se poate observa astfel creşterea sub influenţa preparatului a digestibilităţii substanţelor: uscate, organice, proteinei brute şi grăsimii brute, reducând în acelaşi timp digestibilitatea grăsimii brute.
Tabel
Influenţa complexului celulazo-amilazic (Cellamyl-5) asupra digestibilităţii substanţelor nutritive din componenţa nutreţurilor combinate (NC) destinate tineretului porcin
Nr. d/o Lotul (X±sx) LM* (NC) LE**1 (NC + 0,8 kg/t Farmazyme 2575) LE2 (NC + 0,8 kg/t Cellamyl - 5) LE3 (NC + 1,0 kg/t Cellamyl - 5) 1 Digestibilitatea substanţei uscate ( SU) 75,37 ± 1,195 74,04 ± 1,288 76,98 ± 0,870 77,12 ± 1,588 2 Digestibilitatea substanţei organice (SO) 69,45 ± 3,019 72,73 ± 1,836 76,50 ± 1,276 76,84 ±1,028 3 Digestibilitatea proteinei brute (PB) 69,91 ± 2,826 68,82 ± 2,947 72,33 ± 4,100 72,06 ± 3,507 4 Digestibilitatea grăsimii brute 84,26 ± 3,194 84,88 ± 5,587 76,78 ± 8,045 73,36 ± 4,006 5 Digestibilitatea celulozei brute (CB) 39,89 ± 1,605 43,96 ± 1,284 42,57 ± 1,574 44,39 ±1,743 6 Digestibilitatea substanţelor extractive neazotoase (SEN) 85,44 ± 1,190 86,36 ± 4,00 88,03 ± 3,380 82,78 ± 0,847
LM* - lot martor; LE** - lot experimental
1. RO 114150 B 1999.01.29
2. RO 100891 A2 1991.08.02

Claims (1)

  1. Procedeu de obţinere a complexului celulazo-amilazic, care include cultivarea submersă a tulpinii de fungi Aspergillus niger pe un mediu de cultură constituit din tărâţe de grâu şi săruri minerale, caracterizat prin aceea că se utilizează tulpina de fungi Aspergillus niger CNMN-FD-10, iar cultivarea se efectuează pe un mediu conţinând, g/L: borhot de sfeclă - 10,0; amidon - 10,0; tărâţe de grâu - 20,0; KH2PO4 - 1,0; CaCl2 · 2H2O - 0,1; MgSO4 · 7H2O - 0,3; NaNO3 - 2,5; apă până la 1,0 L, la pH 6,0, timp de 168 ore, după cultivare lichidul de cultură se separă de biomasă prin filtrare sau centrifugare, complexul celulazo-amilazic se separă din filtratul de cultură prin sedimentare cu alcool etilic rectificat şi se centrifughează.
MDA20100101A 2010-09-16 2010-09-16 Procedeu de obţinere a complexului celulazo-amilazic MD4121C1 (ro)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
MDA20100101A MD4121C1 (ro) 2010-09-16 2010-09-16 Procedeu de obţinere a complexului celulazo-amilazic

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
MDA20100101A MD4121C1 (ro) 2010-09-16 2010-09-16 Procedeu de obţinere a complexului celulazo-amilazic

Publications (2)

Publication Number Publication Date
MD4121B1 MD4121B1 (ro) 2011-07-31
MD4121C1 true MD4121C1 (ro) 2012-02-29

Family

ID=45815215

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MDA20100101A MD4121C1 (ro) 2010-09-16 2010-09-16 Procedeu de obţinere a complexului celulazo-amilazic

Country Status (1)

Country Link
MD (1) MD4121C1 (ro)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MD4388C1 (ro) * 2014-08-01 2016-07-31 Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы Procedeu de obţinere a unui preparat enzimatic cu activitate b-glucozidazică

Citations (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0057146A2 (fr) * 1981-01-28 1982-08-04 TRANSEX S.A., Société dite: Composition destinée à augmenter la production de lait chez les animaux en lactation et son procédé de préparation
JPS6075238A (ja) * 1983-09-29 1985-04-27 Toshio Tsubaki 家畜飼料
RO100891A2 (ro) * 1988-05-06 1991-08-02 Universitatea, Galati; Ro Procedeu de obtinere a enzimelor celulozolitice
RO114150B1 (ro) * 1995-12-27 1999-01-29 Valentina Dan Procedeu de obţinere a unui complex proteazo-amilazic cu culturi selecţionate de bacillus sp
RU2156581C2 (ru) * 1998-11-17 2000-09-27 Государственное научное учреждение - Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства Способ кормления кур
RU2170253C1 (ru) * 2000-06-22 2001-07-10 Некоммерческое партнерство "Институт биотехнологии" Мультиэнзимная композиция для животноводства
KR20030000028A (ko) * 2002-12-02 2003-01-03 서희동 사료첨가제 제조 및 이용방법
KR20030003470A (ko) * 2001-07-02 2003-01-10 주식회사 진바이오텍 된장에서 분리한 신규한 바실러스 렌티모부스 gb-102 및이를 루핀종실배지에서 발효시킨 사료첨가물
RU2236459C2 (ru) * 2001-12-27 2004-09-20 Государственное учреждение Татарский научно-исследовательский институт сельского хозяйства Мультиэнзимная добавка для ферментативной обработки зерновых кормов
RU2275804C2 (ru) * 2004-08-09 2006-05-10 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Оренбургский государственный университет" Способ повышения продуктивности птицы
RU2006105357A (ru) * 2006-02-20 2007-09-27 ГНУ Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства (RU) Корм для цыплят-бройлеров
UA29130U (uk) * 2007-06-11 2008-01-10 Btu Ct Privately Owned Entpr Мультиензимна композиція мек-бту для сільськогосподарських тварин і птиці
EA200801356A1 (ru) * 2007-06-18 2008-12-30 Ет Енд Дс Компани Лтд. Пищевая добавка
CN101690545A (zh) * 2009-09-07 2010-04-07 肇东市日成酶制剂有限公司 一种菌剂与酶复合微生态制剂的生产方法
MD4072B1 (ro) * 2010-03-12 2010-10-29 Institutul De Microbiologie Si Biotehnologie Al Academiei De Stiinte A Moldovei Tulpina de fungi Aspergillus niger - producatoare de enzime cu activitate celulozolitica si xilanazica

Patent Citations (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0057146A2 (fr) * 1981-01-28 1982-08-04 TRANSEX S.A., Société dite: Composition destinée à augmenter la production de lait chez les animaux en lactation et son procédé de préparation
JPS6075238A (ja) * 1983-09-29 1985-04-27 Toshio Tsubaki 家畜飼料
RO100891A2 (ro) * 1988-05-06 1991-08-02 Universitatea, Galati; Ro Procedeu de obtinere a enzimelor celulozolitice
RO114150B1 (ro) * 1995-12-27 1999-01-29 Valentina Dan Procedeu de obţinere a unui complex proteazo-amilazic cu culturi selecţionate de bacillus sp
RU2156581C2 (ru) * 1998-11-17 2000-09-27 Государственное научное учреждение - Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства Способ кормления кур
RU2170253C1 (ru) * 2000-06-22 2001-07-10 Некоммерческое партнерство "Институт биотехнологии" Мультиэнзимная композиция для животноводства
KR20030003470A (ko) * 2001-07-02 2003-01-10 주식회사 진바이오텍 된장에서 분리한 신규한 바실러스 렌티모부스 gb-102 및이를 루핀종실배지에서 발효시킨 사료첨가물
RU2236459C2 (ru) * 2001-12-27 2004-09-20 Государственное учреждение Татарский научно-исследовательский институт сельского хозяйства Мультиэнзимная добавка для ферментативной обработки зерновых кормов
KR20030000028A (ko) * 2002-12-02 2003-01-03 서희동 사료첨가제 제조 및 이용방법
RU2275804C2 (ru) * 2004-08-09 2006-05-10 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Оренбургский государственный университет" Способ повышения продуктивности птицы
RU2006105357A (ru) * 2006-02-20 2007-09-27 ГНУ Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства (RU) Корм для цыплят-бройлеров
RU2321268C2 (ru) * 2006-02-20 2008-04-10 ГНУ Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства Корм для цыплят-бройлеров
UA29130U (uk) * 2007-06-11 2008-01-10 Btu Ct Privately Owned Entpr Мультиензимна композиція мек-бту для сільськогосподарських тварин і птиці
EA200801356A1 (ru) * 2007-06-18 2008-12-30 Ет Енд Дс Компани Лтд. Пищевая добавка
CN101690545A (zh) * 2009-09-07 2010-04-07 肇东市日成酶制剂有限公司 一种菌剂与酶复合微生态制剂的生产方法
MD4072B1 (ro) * 2010-03-12 2010-10-29 Institutul De Microbiologie Si Biotehnologie Al Academiei De Stiinte A Moldovei Tulpina de fungi Aspergillus niger - producatoare de enzime cu activitate celulozolitica si xilanazica

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MD4388C1 (ro) * 2014-08-01 2016-07-31 Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы Procedeu de obţinere a unui preparat enzimatic cu activitate b-glucozidazică

Also Published As

Publication number Publication date
MD4121B1 (ro) 2011-07-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Vendruscolo et al. Apple pomace: a versatile substrate for biotechnological applications
Godoy et al. Agricultural residues as animal feed: protein enrichment and detoxification using solid-state fermentation
US10954276B2 (en) Enzyme-based protein separation and enrichment from soy meal, wheat meal, and other protein-rich materials derived from plant seeds, fruits and other biomass
Ezekiel et al. Protein enrichment of cassava peel by submerged fermentation with Trichoderma viride (ATCC 36316)
CN103098979A (zh) 一种利用豆制品废水生产单细胞蛋白饲料的方法
dos Santos et al. Production, optimisation and partial characterisation of enzymes from filamentous fungi using dried forage cactus pear as substrate
CN102823725A (zh) 固态发酵纤维皮渣生产生物蛋白饲料的方法
Aslamyah et al. Fermentation of seaweed flour with various fermentors to improve the quality of fish feed ingredients.
CN103082145A (zh) 一种利用香菇与酵母共生发酵葡萄皮渣猪饲料的方法
Chen et al. Optimization of multi-enzyme production by fungi isolated from palm kernel expeller using response surface methodology.
Thiviya et al. Bioconversion of fruit wastes of papaya, watermelon, and banana into single cell protein production
Sanguine et al. Xylanases of Trichoderma koningii and Trichoderma pseudokoningii: production, characterization and application as additives in the digestibility of forage for cattle
Hu et al. Protein enrichment, cellulase production and in vitro digestion improvement of pangolagrass with solid state fermentation
CN103642695B (zh) 一株米曲霉及其在微生物发酵制备饲料添加剂中的应用
Kahil et al. Economic co-production of cellulase and αamylase by fungi grown on agro-industrial wastes using solid-state fermentation conditions
CN104789491A (zh) 地衣芽孢杆菌菌株及其应用
CN103750011B (zh) 一种含有纤维素酶的乳仔猪专用复合酶及其制备方法
MD4121C1 (ro) Procedeu de obţinere a complexului celulazo-amilazic
CN115777843B (zh) 一种植物蛋白发酵饲料的制备方法
KR101337406B1 (ko) 반추위 내용물을 포함하는 배지조성물 및 그 용도
RU2111253C1 (ru) Способ получения биомассы
Fadel et al. Clean production of xylanase from white corn flour by Aspergillus fumigates F-993 under solid state fermentation
Berikashvili et al. Integrated Process for Mycoprotein and Enzyme Production during Solid-State Fermentation of Lignocellulosic Materials Using Medicinal Mushrooms
Aleksieva et al. High-yield production of alpha-galactosidase excreted from Penicillium chrysogenum and Aspergillus niger
Ajayi Pelagia Research Library

Legal Events

Date Code Title Description
FG4A Patent for invention issued
KA4A Patent for invention lapsed due to non-payment of fees (with right of restoration)
MM4A Patent for invention definitely lapsed due to non-payment of fees