MD31Y - Procedeu de micropropagare a Echinacea purpurea L. Moench in vitro - Google Patents

Procedeu de micropropagare a Echinacea purpurea L. Moench in vitro Download PDF

Info

Publication number
MD31Y
MD31Y MDS20090037A MDS20090037A MD31Y MD 31 Y MD31 Y MD 31Y MD S20090037 A MDS20090037 A MD S20090037A MD S20090037 A MDS20090037 A MD S20090037A MD 31 Y MD31 Y MD 31Y
Authority
MD
Moldova
Prior art keywords
concentration
moench
vitro
echinacea purpurea
micropropagation
Prior art date
Application number
MDS20090037A
Other languages
English (en)
Inventor
Iulia SIROMEATNICOV
Anatol Jacota
Stepan Svet
Pavel Chintea
Eugenia Cotenco
Original Assignee
Institutul De Genetica Si Fiziologie A Plantelor Al Academiei De Stiinte A Moldovei
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institutul De Genetica Si Fiziologie A Plantelor Al Academiei De Stiinte A Moldovei filed Critical Institutul De Genetica Si Fiziologie A Plantelor Al Academiei De Stiinte A Moldovei
Priority to MDS20090037A priority Critical patent/MD31Z/ro
Publication of MD31Y publication Critical patent/MD31Y/ro
Publication of MD31Z publication Critical patent/MD31Z/ro

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Inventia se refera la biotehnologie, in particular la un procedeu de micropropagare a plantelor de Echinacea purpurea L. Moench in vitro. Procedeul, conform inventiei, include germinarea aseptica a semintelor, obtinerea explantelor, segmentarea si cultivarea lor pe mediul nutritiv Murashige-Skoog, ce contine suplimentar glicozide steroidice obtinute din radacini de patlagele vinete Solanum melongena L. prin extractie cu apa la fierbere, prelucrarea extractului obtinut cu butanol-1 si concentrare, in concentratie de (3,0…3,5)·10-3%, totodata cultivarea se efectueaza la o temperatura de 22…26°C, umiditatea relativa a aerului de 70%, cu o fotoperioada de 16 si 8 ore noapte/zi si intensitatea iluminarii de 3000 lx. Rezultatulinventiei consta in sporirea embriogenezei somatice si regenerarii plantelor. Revendicari: 1

Description

Invenţia se referă la biotehnologie, în particular la un procedeu de micropropagare a plantelor de Echinacea purpurea L. Moench in vitro.
Echinacea purpurea L. Moench este o plantă decorativă şi medicinală preţioasă, multianuală. Acumulează şi sintetizează substanţele biologic active, este mult apreciată pentru calităţile sale terapeutice, posedă proprietăţi imunostimulente şi antivirale. În componenţa rădăcinilor se conţine substanţa anginoli. Preparatul din flori posedă proprietăţi hemostatice şi de vindecare a rănilor. Toate părţile componente ale plantei conţin glicozida steroidică echinacozidă şi ulei volatil eteric până la 1%.
Este cunoscut procedeul de micropropagare a plantelor de Rhodiola rosea L., ce constă în obţinerea şi activarea meristemoizilor de la care pornesc lăstarii. Pentru activarea şi creşterea intensivă a plantulelor, explantele primare prelevate din plantule obţinute prin germinarea seminţelor au fost cultivate pe mediul nutritiv de bază ce conţine săruri minerale după Murashige-Skoog (MS) (Murashige T., Skoog F. Revised medium for rapid growth and bio-assays with tabaco tissue cultures. Physiology Plantarum, 1962, v. 15, N. 95, p. 473, suplimentat cu cărbune activat în cantitate de 1200 mg/l, valoarea pH-ului fiind ajustată la 6,5 până la autoclavare [1].
Dezavantajele acestui procedeu sunt: coeficientul de micropropagare scăzut, faptul că nu toate explantele asigură iniţierea creşterii meristemoizilor de la baza cărora pornesc lăstarii.
Problema pe care o rezolvă invenţia constă în sporirea coeficientului de multiplicare a plantelor de Echinacea purpurea L. Moench pe calea modificării conţinutului mediului nutritiv utilizat pentru micropropagare.
Esenţa invenţiei constă în aceea că procedeul include germinarea aseptică a seminţelor, obţinerea explantelor, segmentarea şi cultivarea lor pe mediul nutritiv Murashige-Skoog, ce conţine suplimentar glicozide steroidice obţinute din rădăcini de pătlăgele vinete Solanum melongena L. prin extracţie cu apă la fierbere, prelucrarea extractului obţinut cu butanol-1 şi concentrare, în concentraţie de (3,0…3,5)·10-3%, totodată cultivarea se efectuează la o temperatură de 22…26°C, umiditatea relativă a aerului de 70%, cu o fotoperioadă de 16 şi 8 ore noapte/zi şi intensitatea iluminării de 3000 lx.
Preparatul Somelangozidă a fost obţinut din rădăcini de pătlăgele vinete prin extracţie cu apă la fierbere, prelucrarea extractului obţinut cu butanol-1 şi conşentrare (SU 1473317 A 1988.12.15).
Rezultatul invenţiei constă în sporirea embriogenezei somatice şi regenerării plantelor.
Exemplu de realizare a invenţiei
Plantulele de Echinacea purpurea L. Moench au fost obţinute prin germinarea aseptică a seminţelor. Pentru a asigura sterilitatea, seminţele s-au tratat cu agent de înălbire pe bază de clor de 15%, timp de 20 min, spălându-se de 4...5 ori cu apă distilată sterilă. În continuare s-au inoculat pe mediul nutritiv de bază MS. Plantulele obţinute ajungând la mărimea de 7...10 cm, s-au segmentat şi cultivat în condiţii aseptice la hota cu flux de aer laminar steril.
În calitate de material iniţial pentru iniţierea micropropagării de plantule au servit segmente de hipocotil şi frunze prelevate din pantulele germinate aseptic din seminţe. În vasele de sticlă de 50...100 ml s-au repartizat câte 15...20 ml de mediu nutritiv. S-au sterilizat prin autoclavare, în faza de vapori 10 min aerisire şi 15 min sterilizare în condiţiile de presiune (p=1 atm) şi temperatură (t=121°C, pH-ul fiind ajustat la 5,8...5,9).
Toate operaţiile au fost efectuate în condiţii strict aseptice la hota cu flux de aer laminar steril. În camera de creştere s-a menţinut un regim controlat de creştere constant, caracterizat prin temperatura de 24±2°C, umiditatea relativă a aerului de 70%, durata perioadei de iluminare 16 ore/zi şi 8 ore/noapte, intensitatea luminii 3000 lx.
O parte de explante (varianta control) s-au inoculat pe mediul de cultură de bază Murashige-Skoog, ce conţinea macroelemente (săruri minerale, mg/l): NH4NO3 - 1650, KNO3 - 1900, MgSO4 · 7H2O - 370, KH2PO4 - 170, CaCl2 · 7H2O - 440; microelemente, mg/l: H3BO3 - 6,2, MnSO4 · 4H2O - 22,3, COCl2 · 6H2O - 0,025, CuSO4 · 5H2O - 0,025, ZnSO4 · 7H2O - 8,6, Na2MoO4 · 2H2O - 0,25, KJ - 0,83, FeSO4 · 7H2O - 27,8, Na2EDTA - 37,3, Inozitol - 100, solidificat cu agar-agar 0,7%, zaharoză 3%.
Altă parte de explante (cea mai apropiată soluţie), s-a utilizat pe mediul de bază Murashige-Skoog, suplimentat cu cărbune activat în cantitate de 1200 mg/l, valoarea pH-ului fiind ajustată la 6,5.
A treia parte de explante au fost utilizate pe mediul de cultură de bază Murashige-Skoog, suplimentat cu Somelangozidă în concentraţie de 3,0...3,5·10-3.
Proliferarea explantelor în varianta martor s-a remarcat foarte slab, creşterea şi dezvoltarea calusului fără zone meristematice, ca rezultat explantele inoculate pe acest mediu s-au necrotizat.
În al doilea caz la utilizarea mediului Murashige-Skoog cărbune activat - cea mai apropiată soluţie, proliferarea explantelor s-a realizat după 10 zile de la inoculare, inducerea, creşterea şi dezvoltarea calusului s-au observat după 18 zile. Apariţia plantulelor - după 25 zile. Creşterea şi dezvoltarea plantulelor s-au observat după o lună de zile. În acest caz micropropagarea plantulelor a constituit 3·104 plante anual.
Pe al treilea mediu, conform invenţiei, proliferarea explantelor a evoluat la 5 zile de la cultivare, la 8 zile formarea şi dezvoltarea calusului embrionar cu zone meristematice de culoare roz. Apariţia plantulelor regenerate s-a observat la 14 zile. Creşterea şi dezvoltarea plantulelor s-a observat la 20 zile de la momentul cultivării explantelor pe mediul de cultură Murashige - Skoog, suplimentat cu substanţe furostanolice Somelangozidă în concentraţie de 3,0·10-3. În această variantă raportul optimal al ingredienţilor prezenţi în mediul nutritiv de cultură artificial sporeşte considerabil coeficientul de micropropagare a plantulelor de Echinacea - cu 4·105 plante anual. Valoarea medie a masei celulare a calusului s-a caracterizat cu valori de 64,23...75,1%. Capacitatea embriogenezei somatice a constituit 77,5...83,6%, iar capacitatea de regenerare a evoluat între 74,2...76,4%. În general calusul embrionar a fost multiplicat în scopul variabilităţii genetice de micropropagare a plantulelor obţinute in vitro.
1. MD 3375 G2 2007.08.31

Claims (1)

  1. Procedeu de micropropagare a Echinacea purpurea L. Moench in vitro care
    include germinarea aseptică a seminţelor, obţinerea explantelor, segmentarea şi cultivarea lor pe mediul nutritiv Murashige-Skoog, ce conţine suplimentar glicozide steroidice obţinute din rădăcini de pătlăgele vinete Solanum melongena L. prin extracţie cu apă la fierbere, prelucrarea extractului obţinut cu butanol-1 şi concentrare, în concentraţie de (3,0…3,5)·10-3%, totodată cultivarea se efectuează la o temperatură de 22…26°C, umiditatea relativă a aerului de 70%, cu o fotoperioadă de 16 şi 8 ore noapte/zi şi intensitatea iluminării de 3000 lx
MDS20090037A 2009-02-23 2009-02-23 Procedeu de micropropagare a Echinacea purpurea L. Moench in vitro MD31Z (ro)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
MDS20090037A MD31Z (ro) 2009-02-23 2009-02-23 Procedeu de micropropagare a Echinacea purpurea L. Moench in vitro

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
MDS20090037A MD31Z (ro) 2009-02-23 2009-02-23 Procedeu de micropropagare a Echinacea purpurea L. Moench in vitro

Publications (2)

Publication Number Publication Date
MD31Y true MD31Y (ro) 2009-06-30
MD31Z MD31Z (ro) 2010-01-31

Family

ID=40942308

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MDS20090037A MD31Z (ro) 2009-02-23 2009-02-23 Procedeu de micropropagare a Echinacea purpurea L. Moench in vitro

Country Status (1)

Country Link
MD (1) MD31Z (ro)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MD605Z (ro) * 2012-07-09 2013-10-31 Институт Генетики И Физиологии Растений Академии Наук Молдовы Procedeu de micropropagare a plantelor de Actinidia arguta in vitro

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4338745A (en) * 1980-03-05 1982-07-13 Kyowa Hakko Kogyo Kabushiki Kaisha Process for mass propagation of plantlets
JPS6356284A (ja) * 1986-04-28 1988-03-10 Noyaku Bio Technol Kaihatsu Gijutsu Kenkyu Kumiai ハエドクソウの大量培養法
RU2039427C1 (ru) * 1991-04-25 1995-07-20 Всероссийский селекционно-технологический институт садоводства и питомниководства Способ размножения смородины in vitro
RU2080780C1 (ru) * 1994-05-11 1997-06-10 Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной биотехнологии РАСХН Способ клонального микроразмножения растений
RU2123256C1 (ru) * 1996-08-08 1998-12-20 Всероссийский научно-исследовательский институт цветоводства и субтропических культур Способ получения микролуковиц тюльпанов из изолированных зародышей в условиях in vitro
MD1262G2 (ro) * 1997-03-03 2000-12-31 Институт Генетики И Физиологии Растений Академии Наук Молдовы Procedeu de obţinere a răsadului de Stevia rebaudiana Bertoni
RU2180165C2 (ru) * 2000-01-31 2002-03-10 Абукамель Ахмед Абдельсамад Способ микроклонального размножения гладиолуса
RU2222933C2 (ru) * 2002-04-26 2004-02-10 Государственное научное учреждение Всероссийский селекционно-технологический институт садоводства и питомниководства СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ САДОВЫХ РАСТЕНИЙ, ВЫРАЩИВАЕМЫХ in vitro
RU2273987C2 (ru) * 2004-02-24 2006-04-20 ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт цветоводства и субтропических культур РАСХН Способ получения полноценных растений-регенерантов тюльпанов культивированием семяпочек in vitro
RU2279212C2 (ru) * 2004-07-13 2006-07-10 ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "РОССИЙСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ - МСХА имени К.А.ТИМИРЯЗЕВА" СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ РАСТЕНИЙ in vitro
RU2286053C2 (ru) * 2005-02-17 2006-10-27 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева" Способ размножения гладиолуса in vitro
RU2324338C1 (ru) * 2007-01-25 2008-05-20 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Алтайский государственный технический университет им. И.И. Ползунова" (АлтГТУ) Способ получения биомассы in vitro
MD3375G2 (ro) * 2007-03-23 2008-03-31 Институт Генетики, Физиологии И Защиты Растений Академии Наук Молдовы Procedeu de micropropagare a plantelor de Rhodiola rosea L. in vitro
  • 2009

Also Published As

Publication number Publication date
MD31Z (ro) 2010-01-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100842420B1 (ko) 생물반응기를 이용한 에키네시아 속 식물의 부정근대량생산법
Laribi et al. In vitro propagation of Stevia rebaudiana (Bert.)-a non caloric sweetener and antidiabetic medicinal plant.
Ahmed et al. Development of rapid micropropagation method of Aloe vera L.
Benazir et al. In vitro regeneration and transformation studies on Pelargonium graveolens (geranium)-an important medicinal and aromatic plant
Wani et al. Callus induction studies in Tridax procumbens L
Ebrahimi et al. HAIRY ROOT INDUCTION AND SECONDARY METABOLITE PRODUCTION INPEROVSKIA ABROTANOIDES KAREL
KR100506625B1 (ko) 조직 배양에 의한 산삼배양근의 대량 생산방법
Yadav et al. A reliable protocol for micropropagation of Gloriosa superba L.(Colchicaceae)
Alam et al. Regeneration of shoot from nodal explants of Cucumis sativus considering different hormonal concentration
Ray et al. Methylglyoxal with glycine or succinate enhances differentiation and shoot morphogenesis in Nicotiana tabacum callus
MD31Y (ro) Procedeu de micropropagare a Echinacea purpurea L. Moench in vitro
Javed et al. Protocol optimization for efficient in vitro micro-propagation of Stevia rebaudiana Bertoni
Elsharnouby et al. Improvement of silymarin content in cell cultures of Silybum marianum by copper sulphate elicitor
Al-Mukhtar et al. Effect of growth regulator in micropropagation of Catharanthus roses in vitro
Nihayati et al. Comparative assessment of The Effect of Moringa oleifera Leaf Extract (MLE) and Zeatin on invitro Regeneration Response of Pogostemon cablin Bud Explants
Saglam In vitro propagation of bitter gourd (Momordica charantia L.).
BLIDAR et al. PHYSICAL NATURE SUBSTRATE INFLUENCE ON IN VITRO GERMINATION OF Ipomoea tricolor Cav.
RU2779988C1 (ru) Способ аэропонного выращивания каучуконосного растения кок-сагыз Taraxacum kok-saghyz R
RU2318376C1 (ru) Способ адаптации растений к нестерильным условиям
Tiwari et al. Efficient in vitro establishment and multiplication of Picrorhiza kurroa Royle ex Benth through in vitro raised seedlings
Azad et al. In vitro regeneration and ex vitro establishment of an antidiabetic plant-Gynura Procumbens (Lour.) Merr
CN110122328B (zh) 一种获得狗枣猕猴桃实生苗的方法
Subbaiya et al. In vitro rapid multiplication of Solanum trilobatum L. From shoot tip explants
Das et al. Quality planting material for large scale production of Aloe vera leaves
Alnuaimi et al. Role of Sucrose and Benzyladenine in Stevioside Content of Stevia Rebaudiana Leaves in Temporary Immersion Bioreactor

Legal Events

Date Code Title Description
KA4A Patent for invention lapsed due to non-payment of fees (with right of restoration)