MD1056Z - Procedeu de conservare a tulpinii Pseudomonas aurantiaca cu activitate antifungică - Google Patents

Procedeu de conservare a tulpinii Pseudomonas aurantiaca cu activitate antifungică Download PDF

Info

Publication number
MD1056Z
MD1056Z MDS20150149A MDS20150149A MD1056Z MD 1056 Z MD1056 Z MD 1056Z MD S20150149 A MDS20150149 A MD S20150149A MD S20150149 A MDS20150149 A MD S20150149A MD 1056 Z MD1056 Z MD 1056Z
Authority
MD
Moldova
Prior art keywords
strain
antifungal activity
pseudomonas aurantiaca
pseudomonas
cnmn
Prior art date
Application number
MDS20150149A
Other languages
English (en)
Russian (ru)
Inventor
Людмила БАТЫР
Валерина СЛАНИНА
Тамара СЫРБУ
Олег КИСЕЛИЦА
Original Assignee
Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы filed Critical Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы
Priority to MDS20150149A priority Critical patent/MD1056Z/ro
Publication of MD1056Y publication Critical patent/MD1056Y/ro
Publication of MD1056Z publication Critical patent/MD1056Z/ro

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Invenţia se referă la biotehnologie, şi anume la un procedeu de conservare a tulpinii Pseudomonas auraniaca cu activitate antifungică.Procedeul, conform invenţiei, prevede cultivarea tulpinii Pseudomonas aurantiaca CNMN-PsB-08 pe un mediu nutritiv în decurs de 48 ore la temperatura de 28…30°C, resuspendarea într-un mediu constituit din lapte degresat şi 12% de zaharoză cu un titru de 10-8…10 -9, congelarea rapidă la temperatura de -20°C, liofilizarea şi păstrarea la temperatura de + 4°C.Rezultatul constă în majorarea activităţii antifungice a tulpinii după păstrare.

Description

Invenţia se referă la biotehnologie, şi anume la un procedeu de conservare a tulpinii Pseudomonas auraniaca cu activitate antifungică.
Invenţia poate fi utilizată în fitopatologie, şi anume pentru stimularea activităţii antifungice a tulpinii Pseudomonas aurantiaca CNMN-PsB-08 asupra fungilor fitopatogeni ca: Fusarium oxysporum, Fusarium solani, Alternaria alternata, Botrytis cinerea şi Aspergillus niger ce provoacă diferite boli la plantele de cultură. Datorită capacităţii de păstrare şi sporire a activităţii antifungice, la conservarea microorganismelor pe un termen îndelungat, utilizarea acestora ca agenţi de protejare a plantelor de cultură previne infectarea cu fitopatogeni.
Afectarea plantelor de cultură de către fitopatogeni duce la scăderea productivităţii lor, micşorarea recoltei şi diminuarea calităţii produsului obţinut. Astfel, utilizarea microorganismelor în calitate de agenţi cu proprietăţi antimicrobiene pronunţate asupra fitopatogenilor ar permite atât majorarea productivităţii plantelor, cât şi îmbunătăţirea calităţii produsului, metoda dovedindu-se a fi eficientă şi ecologică.
În prezent este cunoscut un procedeu de stimulare a activităţii antifungice a tulpinii Pseudomonas aurantiaca CNMN-PsB-08 asupra fungilor fitopatogeni în rezultatul liofilizării utilizând ca mediu protector succinat de Na + 12% zaharoză. În urma realizării procedeului, după 6 ani de păstrare, zonele de inhibiţie a patogenilor au atins valori de 21,3…23,0 mm, în dependenţă de test-cultura studiată. Dezavantajul procedeului constă în aceea că proprietăţile antifungice ale tulpinii sunt relativ slabe după păstrarea îndelungată [1].
Problema pe care o rezolvă prezenta invenţie constă în stimularea activităţii antifungice a tulpinii Pseudomonas aurantiaca CNMN-PsB-08, în urma liofilizării, cu utilizarea unui mediu protector ce asigură stimularea proprietăţilor antifungice asupra fitopatogenilor, după 6 ani de păstrare.
Procedeul de conservare a tulpinii Pseudomonas auraniaca cu activitate antifungică prevede cultivarea tulpinii Pseudomonas aurantiaca CNMN-PsB-08 pe un mediu nutritiv în decurs de 48 ore la temperatura de 28…30°C, resuspendarea într-un mediu constituit din lapte degresat şi 12% de zaharoză cu un titru de 10-8…10-9, congelarea rapidă la temperatura de -20°C, liofilizarea şi păstrarea la temperatura de + 4°C.
Rezultatul constă în majorarea activităţii antifungice a tulpinii după păstrare.
Rezultatul se datorează liofilizării tulpinii Pseudomonas aurantiaca CNMN-PsB-08, utilizând mediul de protecţie lapte degresat + 12% zaharoză. Zonele de inhibiţie a creşterii fitopatogenilor, după 6 ani de la conservare, ating valori de 25,7 mm pentru Fusarium oxysporum, 26,0 - Fusarium solani, 25,3 - Alternaria alternata, 27,0 - Botrytis cinerea şi 20,0 mm - Aspergillus niger.
Rezultatul constă în stimularea activităţii antifungice a tulpinii Pseudomonas aurantiaca CNMN-PsB-08 care permite amplificarea evidentă a proprietăţilor antifungice asupra fitopatogenilor Fusarium oxysporum, Fusarium solani, Alternaria alternata, Botrytis cinerea şi Aspergillus niger după 6 ani de păstrare, acestea fiind mai înalte faţă de cea mai apropiată soluţie. Zonele de inhibiţie a creşterii fitopatogenilor obţinute în rezultatul liofilizării cu utilizarea mediului protector succinat de Na + 12% zaharoză, cea mai apropiată soluţie, variază de la 21,3…23,0 mm pentru tulpinile F. oxysporum, F. solani, A. alternata şi B. cinerea şi lipseşte pentru tulpina A. niger, iar zonele de inhibiţie determinate cu utilizarea procedeului propus în invenţie variază între 25,3…27,0 mm pentru tulpinile F. oxysporum, F. solani, A. alternata şi B. cinerea şi 20,0 mm pentru tulpina A. niger, ceea ce depăşeşte de până la 1,2 ori caracteristicile analoage obţinute conform prototipului.
Rezultatul tehnic al invenţiei este condiţionat de faptul că pentru prima dată în calitate de mediu protector pentru liofilizarea tulpinii Pseudomonas aurantiaca CNMN-PsB-08 se utilizează laptele degresat + 12% zaharoză. Proprietăţile antifungice evidente sunt asigurate prin resuspendarea tulpinii în mediul dat, care asigură un efect protector faţă de şocurile osmotice şi termice şi nu permite acestora de a influenţa negativ sinteza metaboliţilor cu activitate antifungică.
Exemplu de realizare a invenţiei
Se prepară mediul nutritiv agarizat King B cu următorul conţinut al ingredientelor: peptonă - 20,0 g, glicerină - 15,0 ml, K2HPO4 - 1,5 g, MgSO4·7H2O - 1,5 g, agar - 15,0 g, apă distilată până la 1,0 litru, pH-ul = 7,0…7,2. Pe mediul preparat, în tuburi înclinate, se însămânţează tulpina Pseudomonas aurantiaca CNMN-PsB-08, după 48 ore de incubare la temperatura de 28…30°C, cultura se resuspendă în mediul protector lapte degresat + 12% zaharoză până la titrul de 10-8…10-9, se repartizează câte 1,0…2,0 m de suspensie în flacoane şi se congelează rapid la -20°C, după care probele se liofilizează. Probele liofilizate sunt sigilate şi plasate în frigider la temperatura de +4°C. După 6 ani de conservare în stare liofilizată tulpina se reînsămânţează pentru a determina activitatea antifungică.
Paralel se pregătesc culturile de fungi fitopatogeni care sunt inoculate pe mediul Czapek cu următoarea componenţă (g/L): zaharoză - 30,0, NaNO3 - 3,0, KH2PO4 - 1,0, MgSO4·7H2O - 0,5, KCl - 0,5, FeSO4 - 0,01, agar - 20,0, apă distilată până la 1,0 litru, pH-ul = 7,0…7,2. Suspensia de spori a fungilor fitopatogeni cu titrul 10-7…10-8 se reînsămânţează submers în plăcile Petri.
Activitatea antifungică a tulpinii Pseudomonas aurantiaca CNMN-PsB-08 după 6 ani de la liofilizare pe mediul protector lapte degresat + 12% zaharoză a fost determinată conform metodei de difuziune a metaboliţilor prin utilizarea discurilor de geloză. În calitate de culturi de referinţă în experimentul ,,in vitro” au fost folosite tulpinile fitopatogene de micromicete: Fusarium oxysporum, Fusarium solani, Alternaria alternata, Botrytis cinerea şi Aspergillus niger. După 4…5 zile de incubare se măsoară zonele de inhibiţie, aparente în jurul discurilor de geloză.
Proprietăţile antifungice, depistate în urma elaborării procedeului de conservare şi stimulare a activităţii antifungice a tulpinii Pseudomonas aurantiaca CNMN-PsB-08 asupra fitopatogenilor, prezintă interes din punct de vedere al extinderii arsenalului de microorganisme cu capacitate antifungică pronunţată, cu utilizarea acestora ca agenţi de prevenire şi protejare a plantelor de cultură.
Rezultatele studiului activităţii antifungice după 6 ani de conservare, în urma liofilizării tulpinii Pseudomonas aurantiaca CNMN-PsB-08 utilizând ca mediu protector laptele degresat + 12% zaharoză, sunt prezentate în tabel, care relevă o activitate mai sporită faţă de cea mai apropiată soluţie. Astfel, datele experimentale obţinute demonstrează că procedeul revendicat manifestă activitate antifungică mai sporită faţă de fitopatogenii Fusarium oxysporum, Fusarium solani, Alternaria alternata, Botrytis cinerea şi Aspergillus niger, care depăşeşte de până la 1,2 ori caracteristicile analoage ale procedeului descris în cea mai apropiată soluţie.
Tabel
Activitatea antifungică a tulpinii Pseudomonas aurantiaca CNMN-PsB-08, după 6 ani de conservare în stare liofilizată conform invenţiei şi celei mai apropiate soluţii
Procedeul utilizat Zona de inhibiţie a fungilor fitopatogeni (mm) Fusarium oxysporum Fusarium solani Alternaria alternata Botrytis cinerea Aspergillus niger Conform celei mai apropiate soluţii Liofilizarea pe mediul succinat de Na + 12% zaharoză 21,3±0,7 22,0±1,1 21,3±0,7 23,0±1,1 - Conform procedeului propus Liofilizarea pe mediul lapte degresat + 12% zaharoză 25,7±2,4 26,0±1,1 25,3±0,7 27,0±1,1 20,0±1,1
Datele din tabel demonstrează că zonele de inhibiţie determinate conform procedeului propus sunt mai mari şi le depăşesc de până la 1,2 ori pe cele descrise conform celei mai apropiate soluţii, iar pentru tulpina Aspergillus niger zona de inhibiţie lipseşte în cazul utilizării celei mai apropiate soliţii şi atinge valoarea de 20,0 mm la utilizarea procedeului propus în invenţie.
Proprietăţile depistate ale tulpinii Pseudomonas aurantiaca CNMN-PsB-08 liofilizate, conform procedeului revendicat, prezintă interes din punct de vedere al extinderii arsenalului de preparate cu acţiune antifungică pronunţată asupra fungilor fitopatogeni, dăunători ai plantelor de cultură.
1. Batîr L., Slanina V., Sârbu T., Chiseliţa O. Activitatea antifungică a unor tulpini autohtone de microorganisme după 3 şi 6 ani de conservare în stare liofilizată. Revista de Proprietate Intelectuală Intelectus. nr.3, 2015, p. 96-104

Claims (1)

  1. Procedeu de conservare a tulpinii Pseudomonas aurantiaca cu activitate antifungică, care prevede cultivarea tulpinii Pseudomonas aurantiaca CNMN-PsB-08 pe un mediu nutritiv în decurs de 48 ore la temperatura de 28…30°C, resuspendarea într-un mediu constituit din lapte degresat şi 12% de zaharoză cu un titru de 10-8…10-9, congelarea rapidă la temperatura de -20°C, liofilizarea şi păstrarea la temperatura de + 4°C.
MDS20150149A 2015-11-10 2015-11-10 Procedeu de conservare a tulpinii Pseudomonas aurantiaca cu activitate antifungică MD1056Z (ro)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
MDS20150149A MD1056Z (ro) 2015-11-10 2015-11-10 Procedeu de conservare a tulpinii Pseudomonas aurantiaca cu activitate antifungică

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
MDS20150149A MD1056Z (ro) 2015-11-10 2015-11-10 Procedeu de conservare a tulpinii Pseudomonas aurantiaca cu activitate antifungică

Publications (2)

Publication Number Publication Date
MD1056Y MD1056Y (ro) 2016-07-31
MD1056Z true MD1056Z (ro) 2017-02-28

Family

ID=56549959

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MDS20150149A MD1056Z (ro) 2015-11-10 2015-11-10 Procedeu de conservare a tulpinii Pseudomonas aurantiaca cu activitate antifungică

Country Status (1)

Country Link
MD (1) MD1056Z (ro)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1698285A1 (ru) * 1989-04-11 1991-12-15 Всесоюзный научно-исследовательский институт прикладной энзимологии Способ консервировани рекомбинантного штамма РSеUDомоNаS SpecIeS продуцента @ -2 интерферона
RU2123044C1 (ru) * 1998-03-02 1998-12-10 Открытое акционерное общество "Русский йогурт" Способ длительного хранения естественных симбиотических ассоциаций микроорганизмов человека и животных.
MD865Y (en) * 2014-06-30 2015-01-31 Instituţia Publică Institutul Ştiinţifico-Practic De Horticultură Şi Tehnologii Alimentare Process for producing a powdery fermented dairy product

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1698285A1 (ru) * 1989-04-11 1991-12-15 Всесоюзный научно-исследовательский институт прикладной энзимологии Способ консервировани рекомбинантного штамма РSеUDомоNаS SpecIeS продуцента @ -2 интерферона
RU2123044C1 (ru) * 1998-03-02 1998-12-10 Открытое акционерное общество "Русский йогурт" Способ длительного хранения естественных симбиотических ассоциаций микроорганизмов человека и животных.
MD865Y (en) * 2014-06-30 2015-01-31 Instituţia Publică Institutul Ştiinţifico-Practic De Horticultură Şi Tehnologii Alimentare Process for producing a powdery fermented dairy product

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Batîr L., Slanina V., Sârbu T., Chiseliţa O. Activitatea antifungică a unor tulpini autohtone de microorganisme după 3 şi 6 ani de conservare în stare liofilizată. Revista de Proprietate Intelectuală Intelectus. nr.3, 2015, p. 96-104 *

Also Published As

Publication number Publication date
MD1056Y (ro) 2016-07-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Mayo et al. Influence of Rhizoctonia solani and Trichoderma spp. in growth of bean (Phaseolus vulgaris L.) and in the induction of plant defense-related genes
Biswas et al. Establishment of the fungal entomopathogen Beauveria bassiana as a season long endophyte in jute (Corchorus olitorius) and its rapid detection using SCAR marker
Yu et al. Effect of chitin on the antagonistic activity of Cryptococcus laurentii against Penicillium expansum in pear fruit
Yang et al. Antifungal activity and mechanism of tea polyphenols against Rhizopus stolonifer
Bhadra et al. Efficacy of Trichoderma spp. and fungicides against Lasiodiplodia theobromae
CN104593283A (zh) 一株解淀粉芽孢杆菌株dppg-74及其防病促生应用
Wachid Inhibitory Power Test of Two Trichoderma Isolates in In Vitro Way Againts Fusarium oxysporum The Cause of Red Chilli Stem Rot
Basha et al. Growth promotion effect of Pichia guilliermondii in chilli and biocontrol potential of Hanseniaspora uvarum against Colletotrichum capsici causing fruit rot
CN103449914B (zh) 海藻糖在延长糙皮侧耳菌种贮藏寿命方面的应用、培养基及方法
Sharma et al. Characterization and evaluation of bioformulation from antagonistic and flower inducing Trichoderma asperellum isolate UCRD5
CN104195064A (zh) 一株体外高效拮抗稻瘟病菌的水稻内生放线菌
Mahfooz et al. Evaluation of antifungal and enzymatic potential of endophytic Fungi isolated from Cupressus torulosa D. Don
Magallon-Andalon et al. Parasitism and substrate competitions effect of antagonistic yeasts for biocontrol of Colletotrichum gloeosporioides in papaya (Carica papaya L.) var Maradol
Talib et al. Isolation, culture, and maintenance of Extremophilic fungi
Padmaja et al. In vitro antagonism of native isolates of Tricoderma spp. against Sclerotium rolfsii
MD1056Z (ro) Procedeu de conservare a tulpinii Pseudomonas aurantiaca cu activitate antifungică
MD1072Z (ro) Procedeu de conservare a tulpinii Pseudomonas aureofaciens cu activitate antifungică
MD1071Z (ro) Procedeu de conservare a tulpinii Bacillus cereus var. fluorescens cu activitate antifungică
Chen et al. Self-digestive solution of Lysobacter enzymogenes LE16 as a biofungicide to control plant powdery mildew
Minamor et al. Influence of the culture filtrate of three Paecilomyces species on some growth parameters, chlorophyll content, and root anatomy of two Ghanaian maize varieties (Abeleehi and Obaatanpa) and on germination capacity of tomato and pepper seeds
MALHOTRA IN VITRO EFFICACY OF VARIOUS FUNGAL AND BACTERIAL ANTAGONISTS AGAINST RHIZOCTONIA SOLANI, CAUSAL AGENT OF DAMPING OFF DISEASE IN CAPSICUN ANNUUM L. ABHINITI MALHOTRA*, TRIPTI AGARWAL2 AND PC TRIVEDI3
Amuza et al. Trichoderma spp.-mechanisms of action in the control of storage pathogens-review.
Ghewande Biological control of groundnut (Arachis hypogaea L.) rust (Puccinia arachidis Speg.) in India
Ji et al. Biocontrol potential of Bacillus licheniformis W10 against peach shoot blight caused by Phomopsis amygdali
CN116200301B (zh) 一株控制果蔬灰霉病的食窦魏斯氏菌及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
FG9Y Short term patent issued
MK4Y Short term patent expired