LT5079B - Avies pararaupų viruso kamienų panaudojimas antivirusinių ir priešvėžinių vaistų gamybai - Google Patents

Avies pararaupų viruso kamienų panaudojimas antivirusinių ir priešvėžinių vaistų gamybai Download PDF

Info

Publication number
LT5079B
LT5079B LT2003009A LT2003009A LT5079B LT 5079 B LT5079 B LT 5079B LT 2003009 A LT2003009 A LT 2003009A LT 2003009 A LT2003009 A LT 2003009A LT 5079 B LT5079 B LT 5079B
Authority
LT
Lithuania
Prior art keywords
viruses
viral
fragments
virus
treatment
Prior art date
Application number
LT2003009A
Other languages
English (en)
Other versions
LT2003009A (lt
Inventor
Olaf Weber
Tobias Schlapp
Angela Siegling
Andreas Knorr
Claudia Hirth-Dietrich
Gudrun Theiss
Original Assignee
Bayer Aktiengesellschaft
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from DE10122451A external-priority patent/DE10122451A1/de
Application filed by Bayer Aktiengesellschaft filed Critical Bayer Aktiengesellschaft
Publication of LT2003009A publication Critical patent/LT2003009A/lt
Publication of LT5079B publication Critical patent/LT5079B/lt

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/12—Keratolytics, e.g. wart or anti-corn preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P41/00—Drugs used in surgical methods, e.g. surgery adjuvants for preventing adhesion or for vitreum substitution
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/24011—Poxviridae
    • C12N2710/24211—Parapoxvirus, e.g. Orf virus
    • C12N2710/24232—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Šis išradimas yra susijęs su avies pararaupų viruso kamienų panaudojimu gamyboje imuninių vaistų, skirtų gydyti žmones ir gyvūnus nuo auglių ir virusinių infekcijų. ą

Description

Šis išradimas yra susijęs su avies pararaupų viruso (Parapoxvirus ovis) kamienų, kaip imunoterapinių agentų infekcinės arba neinfekcinės kilmės imunodeficitiniams susirgimams, panaudojimu, su avies pararaupų viruso kamienų panaudojimu augliams ir virusinėms infekcijoms, bei ligoms, kurias lydi tokios infekcijos, gydyti ir su avies pararaupų viruso kamienų panaudojimu vaistų žmonėms ir gyvūnams gamyboje.
Be to, šis išradimas yra susijęs su avies pararaupų viruso kamienų ir iš jų išvestų jų medicininių formų panaudojimu imunoterapiniais agentais arba imunoprofilaktiniais agentais streso metafilaksijai, norint apsisaugoti arba norint išvengti po streso (pvz. operacijos) pasitaikančių ligų; su jų panaudojimu infekcijos profilaktikai, norint apsisaugoti arba norint išvengti infekcinių ligų, skiriant juos prieš operacijas arba intervencijas (pvz. prieš protezų implantavimą arba prieš dantų taisymą); su jų panaudojimu infekcijų metafilaksijai arba ūmių arba chroniškų virusinių infekcijų, pavyzdžiui, kvėpavimo trakto, papilomos viruso infekcijų, herpeso viruso infekcijos, ŽIV infekcijos ir vidaus organų infekcijos, kaip antai hepatito viruso infekcijos, gydymui; su jų panaudojimu žaizdų gydymui, norint pagreitinti žaizdų gijimo procesus; ir su jų panaudojimu žaizdų, kurios blogai gyja arba visai negyja (pvz. kojos opa) gijimui palaikyti; su jų panaudojimu gydyti ligoms, tokioms kaip išsėtinė sklerozė, astma, karpos ir kiti odos augliai; su jų panaudojimu alerginių ligų spektro ligų gydymui; su jų panaudojimu sisteminių alergijų priepuoliui sulaikyti, su jų panaudojimu vietinėms alergijoms stabdyti ir su jų panaudojimu sveikatos stoviui pagerinti, pavyzdžiui, pagyvenusiems pacientams; o šio išradimo kontekste naudojami avies pararaupų viruso kamienai yra NZ2, NZ-7, NZ-10 ir orf-11.
Taip pat galima naudoti šių kamienų palikuonis, kurie buvo gauti persėjant ir/arba adaptuojant prie tam tikrų ląstelių, pavyzdžiui, WI-38, MRC-5 arba Vero ląstelių, arba virusų iš šių kamienų arba jų palikuonių fragmentus arba dalis. Dalimis yra laikomi genominiai arba subgenominiai fragmentai, kurie yra ekspresuojami tam tikrų vektorių, pavyzdžiui, vakcinijos, pagalba tinkamose sistemose, pavyzdžiui, fibroblastų ląstelių kultūrose. Fragmentais yra laikomos frakcijos, kurios gaunamos biochemiškai gryninant, pavyzdžiui, chromatografijos būdu, daleles, kurios buvo fiziškai suardytos, pavyzdžiui, ultragarsu.
Be to, šis išradimas yra susijęs su minėtų avies pararaupų viruso kamienų panaudojimu vaistų ir farmacinių preparatų gamyboje. Apart to, Šis išradimas yra susijęs su minėtų avies pararaupų viruso kamienų panaudojimu, derinyje su kitais vaistais, vaistų ir farmacinių preparatų priešvirusinei terapijai arba vėžio terapijai gamyboje.
Žinoma, kad latentines ir chroniškai pasireiškiančias virusines infekcijas gali aktyvuoti arba reaktyvuoti imunosupresija arba, atvirkščiai, kad imuninė sistema slopina ūmią ligą kurią galėjo sukelti virusas, kuris yra latentinis (pvz. latentinė herpeso viruso infekcija pasikartoja ryšium su imunoslopinimu: pūslelės ant lūpų ryšium su stresu arba kortizono vartojimu). Taip pat yra žinoma, kad chroniškai pasireiškiančias ir latentines virusines infekcijas yra sunku ar netgi neįmanoma gydyti naudojant įprastas priešvirusines mažos molekulinės masės medžiagas.
To priežastis gali būti nebuvimas virusinio fermentinio aktyvumo susijusio su tokiomis infekcijomis (pavyzdžiui, nebuvimas virusinio polimerazinio aktyvumo, kuris pirmiausia turi įterpti nukleozidinį inhibitorių į virusinę nukleorūgštįtaip, kad šis inhibitorius, pavyzdžiui, gali sukelti virusinės DNR grandinės nutraukimą pavyzdžiui, nebuvimas virusinės timidinkinazės aktyvumo, kuri pirmiausia, pavyzdžiui, turi fosforilinti priešvirusinį junginį taip, kad šis junginys galėtų pasidaryti aktyvus) arba taip pat šeimininko imuninė sistema negali atpažinti infekuotų arba išsigimusių ląstelių, pavyzdžiui, vėžinių ląstelių arba virusinių antigenų.
Taip pat yra žinoma, kad kartu su chroniškai pasireiškiančiomis virusinėmis infekcijomis superinfekcija kitu virusu gali sukelti priešvirusinius efektus, kurie yra nukreipti prieš chroniškai pasireiškiantį virusą (Guidotti, L.G., Borrow, P., Hobbs, M.V., Matzake, B., Gresser, I., Gidstone, M.B.A., and Chisari, F.V. (1996): Virai cross talk: Intracellular inactivation of the hepatitis B virus during an unrelated virai infection of the liver. Proc. Natl. Acag. Sci. USA. 93:4589-4594). Autoriai galėjo parodyti šį poveikį interferonų, tokių kaip
IFN-γ ir TFN-α, atveju, kuriuos išskiria T-ląsteiės - gamtinės ląstelės-kileriai ir makrofagai.
Šių autorių gautas rezultatas patvirtina kitą, ankstesnį tyrimą kuris parodė, kad I klasės restriktuotos citotoksinės T ląstelės gali inhibuoti hepatoląstelinio HBV geno ekspresiją HBV-trasgeninėse pelėse, kad šis procesas vyksta be kepenų ląstelių destrukcijos ir kad šį procesą iššaukia TFN-a irlFN-γ (Guidotti, L.G., Ando, K., Hobbs, M.V., Ishikavva, T., Runkel, L., Schreiber, R.D., and Chisari, F.V. (1994): Cytotoxic T lymphocytes inhibit hepatitis B virus gene expression by noncytolytic mechanism in transgenic mice. Proc. Natl. Acag. Sci. USA. 91:3764-3768.)
Produktas “paraspecifiniam imuniškumui” sukelti, t.y. toks, kuris vadinamas paraimuniniu induktoriumi, buvo naudotas terapiškai, metafilaktiškai ir profilaktiškai veterinarijos praktikoje gana ilgą laiką. Paraimuniniai induktoriai susideda, pavyzdžiui, iš chemiškai inaktyvuotų avies pararaupų virusų (D 1701 kaminenas) (DE 3 504 940). Šio viruso (avies pararaupų virusas, D 1701 kamienas) pagrindu pagamintas produktas yra BAYPAMUN®.
Gyvūnams inaktyvuotas pararaupų virusas indukuoja nespecifinę apsaugą nuo infekcijos, kurią sukelia daugybė patogenų. Manoma, kad šioje apsaugoje tarpininkauja įvairūs mechanizmai, sudarantys dalį endogeninės apsaugos sistemos.
į šiuos mechanizmus įeina interferono indukcija, gamtinių ląsteliųkilerių aktyvavimas, “telkinio stimuliavimo aktyvumo” (CSA) indukavimas ir limfocitų proliferacijos stimuliavimas. Ankstesni veikimo mechanizmo tyrimai parodė interleukino 2 ir α-interferono stimuliacinį poveikį (Steinmassl G., G.
Wolf (1990): Bildung von Interleukin 2 und Interferon- durch mononukleare Leukozyten dės Schvveines nach in vitro-Stimulation mit verschiedenen Viruspraparaten. J. Vet. Med. B37, 5, 321-331.)
Remiantis šiais duomenimis atsiranda tikslas dar labiau pagerinti puikaus avies pararaupų viruso efekto terapinį naudingumą taip, kad būtų galima kokybiškai padidinti aukščiau aprašytą apibendrintą avies pararaupų viruso D 1701 kamieno paraspecifinę indukciją ir ją pagerinti taip, kad būtų pasiektas geresnis priešvirusinis arba priešvėžinis poveikis naudojant mažesnes dozes. Tada galima laukti, kad terapinis poveikis turės mažiau šalutinių efektų.
Todėl šio išradimo tikslas buvo pagerinti pararaupų viruso imunologinį efektą. Šis tikslas buvo pasiektas naudojant aukščiau minėtus pararaupų viruso kamienus vietoj paprastai naudojamo D1701 kamieno.
Šis išradimas yra susijęs su virusų, kurie taksonomiškai priklauso vienam iš avies pararaupų viruso kamienų NZ2, NZ-7, NZ-10 arba orf-11, panaudojimu vaistų prieš žmonių ir gyvūnų virusines infekcijas ir vėžį gamyboje.
Be to, šis išradimas yra susijęs su šio išradimo kamienų palikuonių panaudojimu, kur palikuonys yra gaunami persėjant arba adaptuojant prie tinkamų ląstelių sistemų pavyzdžiui, žmogaus ląstelių, tokių kaip WI-38, MRC-5, beždžionės ląstelių, pvz. Vero ląstelių, jaučio ląstelių, tokių kaip BKK13A47/Reg arba MDBK, ir avies ląstelių, tokių kaip MDOK, vaistų prieš žmonių ir gyvūnų virusines infekcijas ir vėžį gamyboje ir taip pat yra susijęs su minėtų kamienų ir jų palikuonių bei adaptuotų variantų dalių arba fragmentų kur dalimis yra laikomi genominiai arba subgenominiai fragmentai, kurie yra ekspresuojami tam tikrų vektorių tokių kaip vakcinijos virusai, pagalba tinkamose sistemose, kaip antai fibroblastų ląstelių kultūrose, o fragmentais yra laikomos frakcijos, kurios gaunamos biochemiškai gryninant, pavyzdžiui, chromatografijos būdu, ekspresuotas arba fiziškai suardytas daleles, panaudojimu vaistų prieš žmonių ir gyvūnų virusines infekcijas ir vėžį gamyboje, ir taip pat yra susijęs su vieno iš avies pararaupų viruso kamienų ir darinių, kurie yra išvesti aukščiau aprašytu būdu, panaudojimu vaistų ir farmacinių preparatų, kaip imunoterapinių agentų arba imunoprofilaktinių agentų autoimuninėms ligoms ir ūmioms ir chroniškoms kvėpavimo trakto ir vidaus organų virusinėms infekcijoms, gamyboje, ir taip pat yra susijęs su vieno iš kamienų ir išvestinių darinių panaudojimu vaistų ir farmacinių preparatų streso metafilaksijai ir prevencijai arba apsaugai nuo infekcinių ligų po streso ir taip pat ryšium su infekcijos profilaktika operacijų ir dantų taisymo kontekste, gamyboje, ir taip pat yra susijęs su vieno iš kamienų ir išvestinių darinių panaudojimu vaistų ir farmacinių preparatų, skirtų infekcijos metafilaksijai arba ūmių ir chroniškų virusinių infekcijų, pavyzdžiui, kvėpavimo trakto, papilomos viruso infekcijų, herpeso grupės viruso infekcijų, ŽIV infekcijų arba vidaus organų virusinių infekcijų, tokių kaip infekcija hepatito virusais, gydymui, gamyboje, ir taip pat yra susijęs su panaudojimu ryšium su ligomis, tokiomis kaip išsėtinė sklerozė, astma, karpos ir kiti odos augliai, ir taip pat yra susijęs su vieno iš kamienų ir išvestinių darinių panaudojimu vaistų ir farmacinių preparatų, skirtų dėti ant žaizdų gijimo procesams pagreitinti ir palaikyti žaizdų gijimui, kurios blogai gyja arba išvis negyja, ir kojos opoms gydyti, gamyboje, ir taip pat vieno iš kamienų ir išvestinių darinių panaudojimu vaistų ir farmacinių preparatų, skirtų alerginių ligų spektro ligoms, psoriazei, neurodermatitui ir kitoms autoimuninėms ligoms, tokioms kaip raudonoji vilkligė, gydymui ir taip pat sveikatos stovio pagerinimui, pavyzdžiui, pagyvenusiems pacientams, gamyboje, ir taip pat yra susijęs su vieno iš kamienų ir išvestinių darinių panaudojimu vaistų ir farmacinių preparatų, skirtų panaudoti prieš uždegimines, degeneracines ir proliferacines vidaus organų ligas, pavyzdžiui, Krono ligą, odos ligas, kraujo ligas, centrinės nervų sistemos ir jos pridėtinių struktūrų ligas, įskaitant akis, įskaitant vėžį gamyboje, ir taip pat yra susijęs su vieno iš kamienų ir išvestinių darinių panaudojimu deriniuose su kitais vaistais, vaistų ir farmacinių preparatų, skirtų žmonių ir gyvūnų priešvirusinei terapijai arba vėžio terapijai, gamyboje.
Labiausiai šis išradimas yra susijęs su vienu iš avies pararaupų viruso kamienų panaudojimu derinyje su kitais vaistais, vaistų ir farmacinių preparatų peroraliniam vartojimui ir/arba skrandžio sultims atsparių kompozicijų gamyboje.
Čia pateiktas kaip pavyzdys avies pararaupų virusas NZ-2 buvo deponuotas 2001 m. liepos 10 d. Europos ląstelių kultūrų kolekcijoje, Taikomosios mikrobiologijos ir tyrimų centre, Porton Down, Salisbury, VViltshire, SP4 OJG, United Kingdom. Depozito numeris yra 01071006.
Kaip pavyzdys buvo atrasti tokie reiškiniai:
1. Terapinio aktyvumo parodymas bandyme su hepatito B virusą turinčiomis transgeninėmis pelėmis “Mintį pagrindžiančiame” eksperimente buvo naudojamos hepatito B virusą turinčios transgeninės pelės (HBV 1.3 X’tg kamienas). Vienoje grupėje buvo naudojami 7 nuo 8 iki 10 savaičių amžiaus patinėliai. Pirmą dieną (eksperimento pradžioje) ir 4-tą dieną buvo suleistos įvairios dozės į pilvą 0,15 ml tūryje.
Atskirų dozių įvedimui į grupes buvo pagamintos tokios kiekvieno viruso kamieno koncentracijos:
dozė 1,5x106 TCID50 dozė 5x1O5TCID50 dozė 1,5x105 TCID50 dozė 5x1O4TCID5o
Sterilus, neturintis pirogenų PBS buvo naudojamas kaip placebo kontrolė.
Virusai buvo sukoncentruoti tokiu būdu: 500 ml nuopilo, gauto iš avies pararaupų viruso NZ2 kamieno (titras maždaug 2x105 TCID5o/ml) ir avies pararaupų viruso D1701 kamieno (titras 1x107 TCIDso/ml) titrai buvo suvienodinti. Šiam tikslui buvo panaudota Beckmano ultracentrifuga (SW28 rotorius, 28000 aps./min., 4 °C temp. 3 vai.). Nucentrifugavus nuosėdos buvo praskiestos iki 1x107 TCIDso/ml titro, naudojant atitinkamus praskiedimo terpės tūrius.
Atitinkamų dozių alikvotos buvo panaudotos patikrinimui atvirkštinio titravimo būdu, kuris patvirtino šiuos dozių titrus. Patikrinus, alikvotos buvo perkeltos, atitinkamos dozės buvo inaktyvuotos 56 °C temperatūroje 1 vai. Skiedimo terpė: 10 ml EMEM 10x
2,7 ml 2 g/l rūgščiojo karbonato ml 1 % glutamino
86,3 ml du kartus distiliuoto vandens
Penktą dieną gyvūnai buvo neskausmingai numarinti, išimtos kepenys ir paimta kraujo. Maždaug 20 mg kepenų iš kiekvieno gyvūno buvo apdorota naudojant QIAmp audinių rinkinį (Ctuiagen, Hilden), fotometriškai nustatyta DNR koncentracija, o jos vientisumas buvo patikrintas elektroforezės budu 1 % agarozės gelyje. Ši DNR buvo hibridizuota su HBV-specifiniu zondu taškinių blotų hibridizacijos metodu. Norint išvengti RNR sukeltų signalų, prieš tai DNR buvo paveikta RNRaze A (Qiagen, Hilden). 200 μΙ DNR (10 μg) buvo uždėta ant nailono membranos (Boehringer Mannheim) ir buvo paveikta 4 kartus (kiekvienu atveju 3 min.) Soak I (0,5 N NaOH; 1M NaCI) ir du kartus Soak II (3M NaCI; 0,5 M tris-HCI, pH 7,4); tada DNR buvo kepinama 120 °C temperatūroje pusę valandos ir po to prehibridizuota 60 °C temperatūroje 30 min. su standartiniu hibridizavimo buferiu (5xSSC, N-lauroilsarkozinas, 0,1 masės/tūrio %; SDS, 0,02 %; blokavimo reagentas, 1x ir 100 pg žuvies spermos DNR/ml), kuriame nėra zondo. Po šios stadijos DNR buvo hibridizuota su atsitiktiniu nukleotidų primuotu zondu, turinčiu visą HBV genomą (20-40 ng/ml hibridizavimo buferio), po to filtras buvo plaunamas 64 °C temperatūroje 10 min. 4xSSC/0,1%SDS, 2xSSC/0,1%SDS ir 1xSSC/0,1%SDS.
Imunologinis detektavimas buvo vykdomas naudojant CDP-Star® sistemą (Boehringer Mannheim) pagal gamintojo instrukcijas. Įvertinimui buvo naudojamas Lumilmager® (Boehringer Mannheim). HBV-specifinės DNR kiekis kraujyje buvo nustatytas kiekybinės PGS metodu. Pirmiausia, centrifuguojant EDTA kraują, buvo išskirta plazma. DNR buvo išgryninta naudojant HighPure 16 System Virai Nucleic Acid rinkinį (Boehringer Mannheim) ir panaudojant kiekybinę PGS, ištirta su ABI PRISM™ 7700 Seęuence Detection System (PE Applied Biosystems), nustatant HBVspecifinius signalus. Buvo naudoti tokie pradmenys ir zondai:
ayw-570f (prasminis) 5-CTGTACCAAACCTTCGGACGG-3’ ayw-670r (antiprasminis) 5’-AGGAGAAACGGGCTGAGGC-3’
Zondas:
ayw-613t 5’-CCATCATCCTGGGCTTTCGGAAAATT-3’
DNR buvo amplifikuota 50 μΙ reakcijos tūryje (reakcijos mišinyje buvo
1,4 mM kiekvieno dNTP, 4,75 mM MgCfe, 15 pmol kiekvieno pradmens ir zondo, 5 μΙ 10x PGS buferio (visi PGS reagentai pagaminti iš TaqMan pagrindinio reagentų rinkinio; Perkin Elmer/Roche Molecular Systems Ine.) ir 1,25 U Taq DNR polimerazės ir 0,25 U AmpErazės). Po pradinės denatūracijos stadijos (10 min. 95 °C temperatūroje) mėginiai buvo paleisti į 40 ciklų denatūraciją (95 °C, 30 sek.) ir atleidimą/išplėtimą (56 °C, 1 min.). Produktai buvo analizuojami naudojant ABI PRISM ™ 7700 Sequence Detection System standartinę programą.
Histocheminė analizė buvo vykdoma naudojant antikūnus prieš hepatito B viruso šerdies antigeną (Dako). Šiam tikslui vienos kepenų skilties dalys buvo fiksuotos per naktį 4 % formaldehide, įtvirtintos parafine ir supjaustytos (5 pm). Pašalinus parafiną ir rehidratavus, naudojant H2O2 20 minučių buvo stabdomas endogeninės perosidazės aktyvumas. Nespecifinis surišimas buvo blokuojamas normaliu avies serumu. Po to nuopjovos buvo inkubuojamos kambario temperatūroje 30 minučių su antikūnu, kuris buvo praskiestas 1:500. Visos tolimesnės stadijos buvo vykdomos naudojant Vectastain ABC rinkinį (Vector Laboratories) pagal gamintojo aprašymą.
Imuninė reakcija buvo išryškinta naudojant 3,3’-diaminobenzidino tetrachloridą ir vandenilio peroksidą. Nuopjovos buvo kontrastiškai nudažytos hematoksilinu/eozinu.
Rezultatai buvo statistiškai analizuoti variacinės analizės būdu ir post hoc palyginimu.
Reziumuojant, netikėtai buvo rasta, kad kai yra naudojamas NZ2 kamienas, yra pasiekiamas priešvirusinio poveikio sustiprinimas, lyginant su poveikiu, gautu su žinomu avies pararaupų viruso D 1701 kamienu. Tai duoda galimybę pirmą kartą panaudoti avies pararaupų virusą sudėtingam imuninės sistemos sugebėjimui indukuoti tokiu intensyvumu, kuris labai skiriasi nuo efekto intensyvumo, pasiekto su anksčiau žinomais paraimuniškumo induktoriais.
Netikėtai buvo gauti tokie rezultatai:
Kepenys: Buvo pastebėta žymiai didesnis HBV specifinės DNR sumažėjimas gyvūnuose, paveiktuose NZ2, lyginant su gyvūnais, paveiktais D 1701. Priešvirusinis NZ2 aktyvumas yra stipresnis nei D 1701: didesnės dozės grupėje NZ2 įvedimas sumažina HBV-specifinę DNR daugiau nei 45 kartus efektyviau, nei to paties kiekio D 1701 įvedimas, o mažiausios dozės grupėje jis sumažina ją 57 kartus efektyviau. Plazmoje mažiausios dozės grupėje NZ2 įvedimas sumažina HBV-specifinę DNR daugiau nei 10 kartus efektyviau, nei to paties kiekio D 1701 įvedimas. Tai rodo, kad avies pararaupų viruso NZ2 kamienas yra daug pranašesnis už D 1701 kamieną.
Figūrose yra parodytas HBV-specifinių signalų sumažėjimas lyginant su placebo grupe (ji prilyginta 100 %).
Fig.1 rodo D1701 arba NZ2 poveikio į HBV-transgenines peles rezultatus. Nors HBV-specifinė DNR yra žymiai sumažinta kepenyse, lyginant su placebo grupe, naudojant abu kamienus visose dozių grupėse, sumažėjimas yra didesnis, kai yra naudojamas NZ2 kamienas. Abiejų žemiausių NZ2 dozių atveju HBV-specifinės DNR sumažėjimas yra daug didesnis nei ekvivalentinių D 1701 dozės grupių atveju.
Fig.2 rodo rezultatus, gautus plazmoje, veikiant HBV-transgenines peles D 1701 arba NZ2 kamienu. Nors HBV-specifinė DNR yra žymiai sumažinta plazmoje, lyginant su placebo grupe, naudojant abu kamienus visose dozių grupėse, sumažėjimas yra didesnis, kai yra naudojamas NZ2 kamienas. Priešingai mažiausiai NZ2 dozei, mažiausia D 1701 kamieno dozė nebeturi žymaus priešvirusinio poveikio.
2. Citokinų Indukavimas:
Septynių-aštuonių savaičių amžiaus Balb/c pelių patelės buvo laikomos steriliomis sąlygomis ir naudojamos eksperimente. Gyvūnai buvo atstitiktinai pasiskirstyti grupėmis po 6 gyvūnus. Buvo naudojama tokia poveikio schema:
grupė: Placebas grupė: Avies pararaupų viruso D 1701 kamienas; 5x104 TCID50/dozė grupė: Avies pararaupų viruso NZ2 kamienas; 5x104 TCIDso/dozė grupė: Placebas grupė: Avies pararaupų viruso D 1701 kamienas; 5x104 TCIDso/dozė grupė: Avies pararaupų viruso NZ2 kamienas; 5x104 TCIDso/dozė
Įvedamas kiekis buvo 10 ml/kg, įvedama intraperitoniniu būdu.
1-3 grupės gyvūnai buvo numarinti praėjus 6 valandoms po įvedimo, o 4-6 grupių gyvūnai - praėjus 12 valandų po įvedimo; pilvaplėvės ląstelės buvo gautos plovimo būdu, naudojant ledo temperatūros PBS, ir buvo išimti vartų ir pasaitinis limfmazgiai.
Pilvaplėvės ląstelės buvo sukoncentruotos centrifuguojavimo stadijoje (5 min. esant 3000 aps./min. ir kambario temperatūroje Eppendorfo staline centrifūga) ir po to ištirpinant 0,2 ml ūžavimo buferio (ūžavimo tirpalas: 25 mM natrio citrato, 4 M guanidinio izotiocianato, 0,5 % N-lauroilsarkozino), staigiai sušaldomos ir laikomos -75 °C temperatūroje iki RNR paruošimo laiko.
Visa RNR buvo paruošta panaudojant rūgštinę fenolio/chloroformo ekstrakciją. Šiam tikslui užšaldyti ūžavimo buferyje mėginiai buvo atšildyti kambario temperatūroje ir paveikti ekstrakcijai tokiais tirpalais: 2 M natrio acetato 1/10 ūžavimo buferio tūrio (pH 4,0), vandenyje prisotinto fenolio 1 ūžavimo buferio tūriu ir chloroformo/izoamilo alkoholio (24:1) 1/5 ūžavimo buferio tūrio. Šie ingredientai buvo maišyti maišykle 10 sekundžių ir tada suvienodintos jų temperatūros palaikant 10 minučių leduose. Fazės buvo atskirtos centrifuguojant, esant 15365 g ir 4 °C, 30 minučių. Po to vandeninė fazė buvo perkelta į naują indą ir, norint išskirti šioje fazėje esančią RNR, pridėta 8 ml RNA-MATRIX iš Rnaid™ plius rinkinio (DIANOVA) ir visas mišinys inkubuotas kambario temperatūroje 15 minučių. Gautas RNR/RNAMATRIX kompleksas buvo suspaustas centrifuguojant esant 7000g, o nuopilas išpiltas. Po to suspaustos nuosėdos buvo plautos 2 x po 250 ml RNA-VVASH (DIANOVA) ir po paskutinio plovimo išdžiovintos vakuminio centrifugavimo būdu. RNR buvo eliuuota pridedant 20-30 ml neturinčio RNAzės distiliuoto vandens ir kaitinant visumą 55 °C temperatūroje 15 minučių. Po centrifugavimo, esant 7000 g, kambario temperatūroje 1 min. matrica buvo atskirta perpilant RNR tirpalą į naują indą.
RNR kokybė buvo tikrinta gel-elektroforezės metodu. RNR buvo laikoma -70 °C temperatūroje.
kDNR buvo sintezuota atvirkščiai transkribuojant iRNR naudojant oligo(dT) pradmenis kaip startines molekules polimerizacijai. Sintezės mišinyje buvo tokios komponentės: 200 ng-2 pg pilnos RNR, 2 pi M-MLV atvirkštinės transkriptazės (200 U/μΙ) (GIBCO/BRL), 8 μΙ tinkamo 5xRT buferio (GIBCO/BRL), 1 μΙ DTT (0,1 M) (GIBCO/BRL), 4 μΙ dNTP (2,5 mM) (SIGMA), μΙ oligo(dT)i2-ie pradmens (100 pg/m;) (PROMEGA), 1 pi žmogaus placentinės RNAzės inhibitoriaus (10000 U/ml) (GIBCO/BRL) ir vandens iki 40 μΙ bendro tūrio. Mišinys buvo laikomas kambario temperatūroje 10 minučių ir po to inkubuojamas 37 °C temperatūroje 45 minutes; po to jis buvo kaitintas 95 °C temperatūroje 3 minutes ir tuoj pat atšaldytas ledu. šiuo būdu susintetinta kDNR buvo laikoma -20 °C temperatūroje.
kDNR kiekiai buvo standartizuoti naudojant “namudinį” geną (β-aktiną). Kiekybinė PGS buvo vykdoma naudojant ABI PRISM™ 7700 Sequence Detection System (PE Applied Biosystems). Buvo naudoti tokie pradmenys:
β-aktinas prasminis: 5-TGG AAT CCT GTG GCATCC ATG AAA C-3’ antiprasminis: 5-TAA AAC GCA GCT CAG TAA CAG TCC G-3’ γ-IFN prasminis: 5-AGC GGC TGA CTG AAC TCA GATTGT AG-3’ antiprasminis: 5’-GTC ACA GTT TTC AGC TGT ATA GGG-3’ α-TFN prasminis: 5’-GGC AGG TCT ACT TTG GAG TCA TTG C-3’ antiprasminis:5’-ACA TTC GAG GCT CCA GTG AAT TCG G- 3’
IL-15 prasminis: 5’-GCC AAC TGG ATA GAT GTA AGA TAT GAC
CT-3’ antiprasminis: 5’-CGT GTT GAT GAA CAT TTG GAC AAT GCG TAT-3’
DNR buvo amplifikuota 25 μΙ reakcijos tūryje (reakcijos mišinyje buvo
1.4 mM kiekvieno dNTP, 4 mM MgCI2, 0,3 pmol kiekvieno pradmens ir zondo,
2.5 μΙ 10x PGS buferio, turinčio SYBR Green (visi PCR reagentai pagaminti iš SYBR Green PCR pagrindinio reagentų rinkinio; Perkin Elmer/Roche Molecular Systems Ine.) ir 1,25 U Taq DNR polimerazės ir 0,25 U AmpErazės). Po pradinės denatūracijos stadijos (10 min. 95 °C temperatūroje) mėginiai buvo paleisti į 40 ciklų denatūraciją (95 °C, 30 sek.) ir atleidimą/išplėtimą (60 °C, 1,30 min.). Produktai buvo analizuojami naudojant ABI PRISM ™ 7700 Sequence Detection System standartinę programą. Rezultatai buvo analizuojami statistiškai, panaudojant variacinę analizę ir post hoc palyginimą.
Netikėtai buvo gauti tokie rezultatai:
1. Paveikus D 1707 arba NZ2 kamienu, γ-interferono ekspresija yra indukuota ir po 6, ir po 12 vai. nuo įvedimo (Fig.3). NZ2 kamieno atveju ši indukcija yra žymiai didesnė ir lyginant su placebu, ir lyginant su D 1701 kamienu. γ-Interferono ekspresijos dydis, kuris yra stebimas po D
1701 įvedimo, nedaug skiriasi nuo placebo kontrolės dydžio. Ši figūra rodo reikšmes, kurios buvo išmatuotos ląstelėse, gautose iš pilvaplėvės plovimo.
2. Paveikus D 1707 kamienu, α-TNF ekspresija yra indukuota po 12 vai. nuo įvedimo, o paveikus NZ2 kamienu ji yra indukuota ir po 6, ir po 12 vai. nuo įvedimo (po 12 vai. jau buvo galima stebėti sumažėjimą lyginant su 6 vai. reikšme; Fig.4). NZ2 kamieno atveju ši indukcija po 6 vai. nuo įvedimo yra žymiai didesnė nei D 1701 kamieno atveju. Ši figūra rodo reikšmes, kurios buvo išmatuotos ląstelėse, gautose iš pilvaplėvės plovimo.
3. Paveikus D 1707 arba NZ2 kamienu, IL-15 ekspresija yra indukuota ir po 6, ir po 12 vai. nuo įvedimo (Fig.5). NZ2 kamieno atveju ši indukcija yra žymiai didesnė po 6 vai. nuo įvedimo nei D 1701 kamieno arba placebo atveju. IL-15 ekspresijos dydis, kuris yra stebimas po D 1701 įvedimo, nedaug skiriasi nuo placebo kontrolės dydžio. Ši figūra rodo reikšmes, kurios buvo išmatuotos ląstelėse, gautose iš pilvaplėvės plovimo.
3. Terapinio poveikio parodymas bandyme su augli turinčiomis beplaukėmis pelėmis
MDA-MB231 ląstelės (ATCC#TB26) buvo auginamos 37 °C temperatūroje, esant 5 % CO2, pilnoje terpėje (88 5 DMEM, 10 % PBS, 1 % penicilino/streptomicino, 1 % L-glutamino (kiekvienu atveju Gibco Life Technologies) inkubatoriuje. Transplantacijos dieną ląstelės buvo maždaug 70 % susinėjusios. Ląstelės buvo tripsinizuotos, perplautos HBSS, suskaičiuotos ir praskiestos iki 2,5x107 ląstelių/ml, naudojant prieš tai atšaldytą PBS. Buvo naudotos NCr beplaukiu pelių (takoninių) patelės. Pelės buvo tarp 8 ir 10 savaičių amžiaus ir svėrė maždaug 22 g. Visos manipuliacijos su gyvūnais buvo atliekamos steriliose sąlygose. Po oda į šoną buvo suleista 5x10® ląstelių bendrame 0,2 ml tūryje. Po to pelės buvo laikomos dar 7 dienas, kol augliai pasiekė maždaug 80 mg vidutinę masę.
Augliai buvo išmatuoti ir pelės buvo atsitiktinai paskirstytos į tris grupes po 10 gyvūnų. Atskiroms grupėms buvo įvesta:
grupei: placebas (PBS) grupei: avies pararaupų virusas, D1701 kamienas grupei: avies pararaupų virusas, NZ2 kamienas.
Buvo įvesta D 1701 2,5x10 5 TCID50 dozė, ir NZ2 1x105 TCID50 dozė; šios dozės buvo kiekvienu atveju įvestos keturis kartus kas trys dienos. Augliai buvo matuojami du kartus per savaitę. Rezultatų reikšmingumai buvo nustatomi naudojant Stjudento testą.
Fig.6 rodo vidutinį auglių dydį (miligramais) gyvūnuose, priklausančiuose 1-3 grupėms eksperimento laikotarpiu (dienomis).
(Simboliai: 1 grupė - apskritimai, 2 grupė - trikampiai, 3 grupė - kvadratai).
Šioje eksperimentinėje sistemoje, lyginai su kontroline grupe, netikėtai buvo rastas prieš auglius nukreiptas aktyvumas, kuris buvo reikšmingas (p<0,05). Buvo rasta, kad šiuo požiūriu NZ2 kamienas yra žymiai veiksmingesnis nei D 1701 kamienas. Norint pasiekti tą patį poveikį, buvo reikalinga tik pusė kiekio NZ2, lyginant su D 1701.
Šis faktas pateikia aiškų šio išradimo virusinių preparatų terapinio poveikio įrodymą bandyme su auglį turinčiomis beplaukėmis pelėmis.
Beplaukės pelės yra imunodeficitinės ir neturi jokių funkcinių T ląstelių.
Šioje eksperimentinėje sistemoje aktyvumas, kuris yra nukreiptas prieš auglius, tikriausiai yra dėl natūralių ląstelių-kilerių (NK), dėl kitų ląstelių ir dėl tiesioginio citokinų/chemokinų poveikio. Galima laukti, kad didesnis NZ2 efektyvumas turėtų būti dar labiau išreikštas imuninės sistemos, kuri yra pilna ir nepaliesta, atveju.
4. Kiti biologiniai skirtumai tarp NZ2 ir PI701
Buvo rasta, kad priešingai nei D1701, avies pararaupų NZ2 virusas gali būti pastoviai persėjamas į žmogaus ląstelių linijas. Tai rodo esminius skirtumus tarp NZ2 ir D1701 replikacijos elgsenos ir/arba virusiniuose receptoriuose.
Adaptacija prie žmogaus ląstelių linijų yra būtina sąlyga virusinių kamienų produkavimui žmogaus ląstelių linijose.
4. a) Galimybė nuolat persėti [žmogaus MCR-5 ląsteles
Fig.7 pavaizduotas mėginimas adaptuoti NZ2 ir D1701 prie žmogaus diploinės MRC-5 ląstelių linijos. MCR-8 yra tinkamos biologiškai aktyviems junginiams ir vakcinoms produkuoti. Abiems kamienams buvo naudojamas tas pats pradinis titras ir atitinkami ląstelių kultūros nuopilai buvo pastoviai naudojami per 5 peršėjimus MRC-5 ląstelėse. Figūra rodo mėginių iš MRC-5 ląstelių nuopilų, kurie buvo kiekvienu atveju infekuoti, titro (išreikšto TCID50) priklausomybę nuo peršėjimų skaičiaus. Tik NZ2 kamienas buvo vėl titruotinas jaučio inkstų kultūrose (BK 3a klonas). Tai rodo, kad yra esminiai biologiniai skirtumai tarp abiejų kamienų infekavimo ir replikacijos elgsenos.
Tuo pačiu metu šis rezultatas rodo, kad NZ2 gali būti replikuotas platesniame ląstelių spektre nei D1701, tokiu būdu duodantis galimybę produkcijos procesui, kuris remiasi žmogaus ląstelėmis.
4. b) Galimybė perkelti NZ2 ir D1701 įWI-38 ląsteles ir BK klono 3a ląsteles
Esminiai biologiniai skirtumai tarp NZ2 ir D1701 kamienų taip pat yra aiškiai parodyti Fig.8 ir Fig.9 parodytuose eksperimentuose. Fig. 8 rodo viruso titro, gauto bandant persėti D1701 [jaučio BK 3a klono ląsteles ir žmogaus WI-38 ląsteles, priklausomybę nuo peršėjimų skaičiaus. Galima matyti, kad D 1701 gali būti nuolat persėjamas į BK 3a klono ląsteles, bet negali būti persėjamas [žmogaus WI-38 ląsteles.
Skirtinga padėtis yra su NZ2 kamienu. Šis kamienas gali būti nuolat per keletą dienų persėjamas ir įBK 3a klono ląsteles, ir [žmogaus WI-38 ląsteles (Fig- 9).
Šie rezultatai taip pat aiškiai rodo NZ2 ir D 1701 replikacijos ir infekavimo elgsenos skirtumus.
4. c) NZ2 nuo dozės priklausantis poveikis į herpeso viruso iššaukimo testą po peršėjimo į VVI-38
Norint ištirti NZ2 kamienų, kurie buvo persėti į WI-38 ląsteles, imunostimuliacines savybes buvo atlikti herpeso viruso iššaukimo testai bandyme su pelėmis. Trys grupės po 10 eksperimentinių gyvūnų buvo veikiamos atitinkamai 1x104 TCID50, 5x104 TCID5o ir 1x105 TCID50, o kontrolinei grupei buvo duotas placebas. Fig. 10 rodo šių keturių eksperimentinių grupių išgyvenimo procentų priklausomybę nuo laiko po infekcijos herpeso virusu. Netikėtai buvo rasta, kad NZ2 nepraranda savo imunostimuliacinių savybių persėjus į WI-38 ląsteles.
Visi šio pavyzdžio eksperimentiniai rezultatai rodo esminius biologinius skirtumus tarp NZ2 ir D1701 infekavimo ir replikacijos elgsenos. Netikėtai buvo rasta, kad priešingai D1701, NZ2 preparatas, skirtas naudoti kaip imunomoduliatorius, nėra surištas su jaučio inkstų ląstelių, kaip produkavimo ląstelių linijos, naudojimu.
Remiantis žinomomis Th1 imuninio atsako įtakos į latentines ir chroniškai pastovias virusines infekcijas (P. Lucin, S. Jonjic, M. Messerle, B. Polic, H. Hengel, U.H. Koszinowski (1994): Late-Phase inhibition of murinę cytomegalovirus replication by synergistic action of interferon gamma and tumor necrosis factor alpha. J. Gert. Virol. 75:101-110; P.M.; ir Smith, R.M. Volcott, R. Chervenak, S.R. Jennings (1994): Control of acute cutaneous herpęs-simplex virus-infection - T-cell mediated virai clearance is dependent upon interferon gamma. Virology 202 (1):76-88) ir taip pat proliferacines ligas, pvz. vėžį (J.F. Bromberg, C.M. Horvath, Z.L. Wen, R.D. Schreiber, J.E. Darnell (1996): Transcriptionally active stat I is required for antiproliferative effects of both interferon alpha and interferon gamma. PNAS 93(15):76737678; ir M. Klouche, H. Kirchner, F. Holzel (1994): Antiproliferative effects of interferon gamma in combination with alpha-difluoromethylornithine on human carcinoma cell cultures. J. Cancer Research and Clinical Oncology 120(12):706) galimybėmis, o taip pat ir tuo, kad avies pararaupų viruso NZ2 kamienas yra geresnis nei avies pararaupų D1701 kamienas, yra galimas imunomoduliatorių avies pararaupų viruso NZ2 kamieno arba vieno iš aukščiau minėtų kamienų pagrindu panaudojimas kaip monoterapija arba derinyje su biologiškai aktyviais, pvz. priešvirusihiais, mažos molekulinės masės junginiais žmonėms ir gyvūnams gydyti kaip hepatito B viruso arba hepatito C viruso arba bet kurio kito patogeno iš hepatitą sukeliančių virusų grupės, bei kitų vidaus organų virusinių infekcijų, o taip pat infekcijų, lydinčių kitas ligas, įvairių tipų paprastojo herpeso infekcijų (HSV), įvairių tipų žmogaus papilomos virusų (HPV), žmogaus imunodeficito viruso (ŽIV), juostinės varicelės viruso, žmogaus citomegaloviruso (HCMV) ir atitinkamų gyvūnų virusinių ligų priešvirusinė terapija.
Be to, remiantis pademonstruotu veikimo mechanizmu aukščiau minėti avies pararaupų viruso kamienai su tam tikra sėkmės perspektyva gali būti naudojami vykdant profilatiką arba ypatingai: pasikartojimų, susijusių su herpeso viruso infekcijomis, prevenciją, metafilaksiją t.y. virusinių infekcijų (pvz. ŽIV) atsiradimo prevenciją, kai gydoma vaistais tuoj pat po galimo susidūrimo su virusu (Dhavvan, S., L.M. Whal, A. Heredia, Y.H. Zhang, J.S. Epštein, M.S. Meltzer, I.K. Hewlett (1995): Interferon gamma inhibits HIVinduced invasiveness of Monocytes. J. Leukocyte Biology, 58 (6): 713-716). Remiantis veikimo mechanizmu, galima tikėtis, kad yra galima gydyti vėžį (J.F. Bromberg, C.M. Horvath, Z.L. Wen, R.D. Schreiber, J.E. Darnell (1996): Transcriptionally active stat I is reųuired for antiproliferative effects of both interferon alpha and interferon gamma. PNAS 93(15)7673-7678; ir M. Klouche, H. Kirchner, F. Holzel (1994): Antiproliferative effects of interferon gamma in combination with alpha-difluoromethylornithine on human carcinoma cell cultures. J. Cancer Research and Clinical Oncology 120(12)706).
Priklausomai nuo klinikinės problemos prigimties, terapinis agentas pararaupų viruso pagrindu yra vartojamas arba sistemiškai, tai yra, pavyzdžiui, leidžiamas į raumenis, po oda, į veną arba vartojamas peroraliniu arba vietiniu būdu. Ryšium su tuo, pararaupų virusas yra arba išgrynintos ir liofilizuotos būsenos ir/arba yra suspenduojamas tinkamame tirpiklyje prieš vartojimą, arba kitu atveju yra kitoje tinkamoje kompozicijoje, arba yra skrandžio sultims atsparioje vartojimo formoje arba kitokioje peroralinio vartojimo formoje.
Tinkami preparatai taip pat gali būti pagaminami iš NZ2 palikuonių, kurie yra gauti persėjant ir/arba adaptuojant prie tam tikrų ląstelių, pavyzdžiui WI-38, MRC-5 arba Vera ląstelių, ir iš kitų aukščiau paminėtų kamienų arba NZ2 ir kitų aukščiau minėtų kamienų arba jų palikuonių dalių arba fragmentų.
Dalimis yra laikomi genominiai arba subgenominiai fragmentai, kurie yra ekspresuojami tam tikrų vektorių, pavyzdžiui, vakcinijos, pagalba tinkamose sistemose, pavyzdžiui, fibroblastų ląstelių kultūrose. Fragmentais yra laikomos frakcijos, kurios gaunamos biochemiškai gryninant, pavyzdžiui, chromatografijos būdu, daleles, kurios buvo fiziškai suardytos, pavyzdžiui, ultragarsu.
Ryšium su tuo, juos gali būti reikalinga keletą kartų įvesti arba ilgą laiką vartoti pagal chronologines schemas, atitinkančias klinikinės problemos reikalavimus.
Taigi, panaudojimas pagal toliau duodamą schemą pasirodė esąs ypač daug žadantis vėžio terapijos atveju, pavyzdžiui (bet juo neapsiribojant):
Į raumenis kiekvienu atveju yra įleidžiama nuo 106 iki 107 TCID50 (audinių kultūros infekcinė dozė) kas trečią dieną 4 savaites, po to padaroma 2 savaičių pertrauka: vėl į raumenis leidžiama nuo 106 iki 107 TCID50 kas trečią dieną 4 savaites, po to padaroma 2 savaičių pertrauka: vėl į raumenis leidžiama nuo 10® iki 107 TCID50 kas trečią dieną 4 savaites, po to padaroma 2 savaičių pertrauka; priklausomai nuo ligos sunkumo ir gydymo sėkmės šie ciklai gali būti papildomi kitais ciklais; kitu atveju gali būti imama schema, kurioje kompozicija yra vartojama kas ketvirtą-penktą dieną mažiausiai 3 mėnesius.
Pavyzdžiui, chroniškos virusinės infekcijos atveju nuo 10® iki 107 TCID50 kompozicijos yra leidžiama po oda į pilvo sritį arba į deltinį arba keturgalvį raumenį kas trečią dieną iš viso 5 kartus. Galima nukrypti nuo šios schemos priklausomai nuo iš ligos kylančių poreikių. Peršalimo profilaktikai kompozicija turi būti vartojama skalavimui ir tai turi būti kartojama kasdien, kol yra infekcijos rizika.
Norint apsisaugoti nuo infekcijų po chirurginių intervencijų burnos srityje (pvz. dantų operacijų) skalauti kompozicija reikia 1-2 minutes vakare prieš intervenciją.

Claims (11)

  1. IŠRADIMO APIBRĖŽTIS
    1. Virusų, taksonomiškai priklausančių vienam iš avies pararaupų viruso (Parapoxvirus ovis) NZ2, NZ-7, NZ-10 ir orf-11 kamienų, panaudojimas vaistų nuo žmonių ir gyvūnų virusinių infekcijų ir vėžio gamyboje.
  2. 2. Virusų pagal 1 punktą palikuonių, kurie yra gaunami persėjant arba adaptuojant prie tinkamų ląstelių sistemų, tokių kaip žmogaus ląstelės WI-38 ir MRC-5, Vera ląstelės, jaučio ląstelės BK-K13A47/Reg arba MDBK ir avies ląstelės MDOK, panaudojimas vaistų nuo žmonių ir gyvūnų virusinių infekcijų ir vėžio gamyboje.
  3. 3. Virusų pagal 1 ir 2 punktą dalių arba fragmentų, kur dalimis yra laikomi genominiai arba subgenominiai fragmentai, kurie yra ekspresuojami tam tikrų vektorių, tokių kaip vakcinijos virusai, pagalba tinkamose sistemose, tokiose kaip fibroblastų ląstelių kultūros, o fragmentais yra laikomos frakcijos, kurios yra gautos biochemiškai gryninant, kaip antai chromatografijos būdu, ekspresuotas arba fiziškai suardytas virusų daleles, panaudojimas vaistų nuo žmonių ir gyvūnų virusinių infekcijų ir vėžio gamyboje.
  4. 4. Virusų arba virusų palikuonių, arba virusų dalių ar fragmentų panaudojimas pagal 1-3 punktus, besiskiriantis tuo, kad yra skirtas vaistų ir farmacinių preparatų kaip imunoterapinių agentų arba imunoprofilaktinių agentų nuo autoimuninių ligų ir ūmių bei chroniškų kvėpavimo trakto ir vidaus organų virusinių infekcijų gamybai.
  5. 5. Virusų arba virusų palikuonių, arba virusų dalių ar fragmentų panaudojimas pagal 1-3 punktus, besiskiriantis tuo, kad yra skirtas vaistų ir farmacinių preparatų, skirtų streso metafilaksijai ir po streso pasitaikančių ligų prevencijai arba išvengimui bei infekcijos profilaktikai operacijų ir intervencijų taisant dantis kontekste, gamybai.
  6. 6. Virusų arba virusų palikuonių, arba virusų dalių ar fragmentų panaudojimas pagal 1-3 punktus, besiskiriantis tuo, kad yra skirtas vaistų ir farmacinių preparatų, skirtų infekcijų metafilaksijai arba ūmių virusinių infekcijų, tokių kaip kvėpavimo trakto, papilomos viruso infekcijos, herpeso viruso infekcijos, ŽIV infekcijos arba vidaus organų virusinės infekcijos, tokios kaip hepatito viruso infekcijos, gydymui ir taip pat naudojimui ryšium su ligomis, tokiomis kaip išsėtinė sklerozė, astma, karpos ir kiti odos augliai, gamybai.
  7. 7. Virusų arba virusų palikuonių, arba virusų dalių ar fragmentų panaudojimas pagal 1-3 punktus, besiskiriantis tuo, kad yra skirtas vaistų ir farmacinių preparatų, skirtų naudoti ant žaizdų, žaizdų gijimo procesams pagreitinti ir žaizdų, kurios blogai gyja arba visai negyja, bei kojos opos gijimo procesams palaikyti, gamybai.
  8. 8. Virusų arba virusų palikuonių, arba virusų dalių ar fragmentų panaudojimas pagal 1-3 punktus, besiskiriantis tuo, kad yra skirtas vaistų ir farmacinių preparatų, skirtų alerginių ligų spektro ligoms, psoriazei, neurodermatitui ir kitoms autoimuninėms ligoms, tokioms kaip raudonoji vilkligė, gydyti, o taip pat ir pagyvenusių pacientų sveikatos stoviui pagerinti, gamybai.
  9. 9. Virusų arba virusų palikuonių, arba virusų dalių ar fragmentų panaudojimas pagal 1-3 punktus, besiskiriantis tuo, kad yra skirtas vaistų ir farmacinių preparatų, skirtų naudoti prieš vidaus organų uždegimines, degeneracines ir proliferacines ligas (tokias kaip Krono liga), odos, kraujo, centrinės nervų sistemos ir ją lydinčių struktūrų, [skaitant akis, ligas ir įskaitant vėžį, gamybai.
  10. 10. Virusų arba virusų palikuonių, arba virusų dalių ar fragmentų panaudojimas pagal 1-3 punktus derinyje su kitais vaistais, besiskiriantis tuo, kad yra skirtas vaistų ir farmacinių preparatų žmonių ir gyvūnų priešvirusinei arba vėžio terapijai gamybai.
  11. 11. Virusų arba virusų palikuonių, arba virusų dalių ar fragmentų panaudojimas pagal 1-3 punktus derinyje su kitais vaistais, besiskiriantis tuo, kad yra skirtas vaistų ir farmacinių preparatų peroraliniam vartojimui ir/arba skrandžio sultims atsparių kompozicijų peroraliniam vartojimui gamybai.
LT2003009A 2000-07-11 2003-02-03 Avies pararaupų viruso kamienų panaudojimas antivirusinių ir priešvėžinių vaistų gamybai LT5079B (lt)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE10033582 2000-07-11
DE10122451A DE10122451A1 (de) 2000-07-11 2001-05-09 Verwendung von Stämmen des Parapoxvirus ovis zur Herstellung von antiviralen Arzneimitteln und Arzneimitteln gegen Krebs

Publications (2)

Publication Number Publication Date
LT2003009A LT2003009A (lt) 2003-08-25
LT5079B true LT5079B (lt) 2003-12-29

Family

ID=26006335

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
LT2003009A LT5079B (lt) 2000-07-11 2003-02-03 Avies pararaupų viruso kamienų panaudojimas antivirusinių ir priešvėžinių vaistų gamybai

Country Status (36)

Country Link
US (1) US6685950B2 (lt)
EP (1) EP1303286B1 (lt)
JP (1) JP5037775B2 (lt)
CN (1) CN1455674B (lt)
AR (1) AR029954A1 (lt)
AT (1) ATE324115T1 (lt)
AU (2) AU7063101A (lt)
BG (1) BG107448A (lt)
CA (1) CA2415397C (lt)
CY (1) CY1105408T1 (lt)
CZ (1) CZ200371A3 (lt)
DE (1) DE50109630D1 (lt)
DK (2) DK1303286T3 (lt)
EE (1) EE200300018A (lt)
ES (1) ES2262663T3 (lt)
FI (1) FI20030037A7 (lt)
GB (1) GB2381454B8 (lt)
HK (1) HK1054329B (lt)
HR (1) HRP20030096A2 (lt)
HU (1) HUP0400479A3 (lt)
IL (1) IL153643A0 (lt)
LT (1) LT5079B (lt)
LU (1) LU90997B1 (lt)
LV (1) LV12990B (lt)
MA (1) MA26927A1 (lt)
MX (1) MXPA03000279A (lt)
NO (1) NO20030082D0 (lt)
NZ (1) NZ523534A (lt)
PL (1) PL366397A1 (lt)
PT (1) PT1303286E (lt)
RU (1) RU2003104525A (lt)
SE (1) SE0300034L (lt)
SI (1) SI21122A (lt)
SK (1) SK362003A3 (lt)
UY (1) UY26832A1 (lt)
WO (1) WO2002004002A2 (lt)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19922407A1 (de) * 1999-05-14 2000-11-16 Bayer Ag Organ-, gewebs- und zellspezifisches Immuntherapeutikum für chronische virale Infektionen, sowie entzündliche, degenerative und proliferative Erkrankungen insbesondere der Leber sowie Krebs auf der Basis von rekombinantem Parapoxvirus
HU230198B1 (hu) 2000-11-23 2015-10-28 Bavarian Nordic A/S Módosított Vacciniavírus Ankara-variáns
WO2004022729A1 (en) * 2002-09-05 2004-03-18 Bavarian Nordic A/S Method for the cultivation of primary cells and for the amplification of viruses under serum free conditions
US7097842B2 (en) * 2000-11-23 2006-08-29 Bavarian Nordic A/S Modified vaccinia virus ankara for the vaccination of neonates
US7628980B2 (en) * 2000-11-23 2009-12-08 Bavarian Nordic A/S Modified vaccinia virus ankara for the vaccination of neonates
NZ512341A (en) 2001-06-13 2004-02-27 Bayer Ag Polynucleotides between 15 and 100 base pairs in length coding for parapoxvirus ovis (PPVO)/vaccinia virus recombinant (VVOV) viral genome fragments
US6844000B2 (en) 2001-12-07 2005-01-18 Bayer Pharmaceuticals Corporation Use of Parapox B2L protein to treat cancer and modify immune responses
EP2204180A3 (en) * 2002-04-19 2010-12-22 Bavarian Nordic A/S Modified Vaccinia Virus Ankara for the vaccination of neonates
ATE442155T1 (de) 2004-07-13 2009-09-15 Aicuris Gmbh & Co Kg Parapocken-viren in kombination mit anderen antiviralen mitteln zur behandlung von hiv/aids
ATE450266T1 (de) * 2005-11-24 2009-12-15 Aicuris Gmbh & Co Kg Parapocken-viren in kombination mit klassischen zytotoxischen chemotherapeutika als biochemotherapie zur behandlung von krebs
JP5004990B2 (ja) * 2009-03-31 2012-08-22 アイキュリス・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング・ウント・コムパニー・コマンディットゲゼルシャフト パラポックスウイルス・オヴィスの組換えタンパク質およびそれ由来の医薬組成物
JP2013514062A (ja) * 2009-12-18 2013-04-25 バヴァリアン・ノルディック・アクティーゼルスカブ 従来型樹状細胞によるｉｆｎ‐ラムダの産生及びその使用
JP5699093B2 (ja) * 2012-01-05 2015-04-08 アイキュリス・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング・ウント・コムパニー・コマンディットゲゼルシャフトＡｉＣｕｒｉｓ ＧｍｂＨ ＆ Ｃｏ． ＫＧ パラポックスウイルス・オヴィスの組換えタンパク質およびそれ由来の医薬組成物
TW201919675A (zh) * 2017-09-07 2019-06-01 德商艾庫瑞斯公司 使用羊副痘疹病毒(Parapoxvirus ovis；PPVO)及至少一種額外抗病毒藥之經B型肝炎病毒(HBV)感染之個體之組合療法
WO2023083943A1 (en) * 2021-11-10 2023-05-19 Aicuris Gmbh & Co. Kg Parapoxvirus for preparing for and treatment of respiratory virus infections in combination with antivirals
WO2023083950A1 (en) * 2021-11-10 2023-05-19 Aicuris Gmbh & Co. Kg Parapoxvirus for preparing for and treatment of respiratory virus infections in combination with immunomodulators

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3504940A1 (de) 1984-02-17 1985-10-31 Mayr, Anton, Prof. Dr.med.vet. Dr.h.c.mult., 8000 München Multipotente paramunitaetsmediatoren, verfahren zu ihrer herstellung und diese mediatoren enthaltende arzneimittel

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2714665A1 (de) * 1977-04-01 1978-10-05 Mayr Anton Praeparat zur behandlung von herpes zoster und anderen herpes-infektionen, sowie verfahren zu seiner herstellung
US5443964A (en) * 1987-08-10 1995-08-22 Duke University Poxvirus insertion/expression vector
DE4405841C1 (de) * 1994-02-23 1995-01-05 Mayr Anton Prof Dr Med Vet Dr Multipotente Paramunitätsinducer auf der Basis von Kombinationen von Pockenviruskomponenten, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
US5648101A (en) * 1994-11-14 1997-07-15 Tawashi; Rashad Drug delivery of nitric oxide
ATE364090T1 (de) * 1996-02-28 2007-06-15 Bayer Healthcare Ag Parapockenviren, die fremd-dna enthalten, ihre herstellung und ihre verwendung in impfstoffen
CA2250041A1 (en) * 1996-03-29 1997-10-09 University Of Otago Parapoxvirus vectors
PT885013E (pt) * 1996-04-15 2002-01-30 Anton Mayr Prof Dr Med Vet Dr Utilizacao de indutores de para-imunidade multipotentes baseados em poxvirus ou parapoxvirus atenuados e nao imunogenicos para a fabricacao de medicamentos
SE9700617D0 (sv) * 1997-02-21 1997-02-21 Kjell Alving New composition
DE19843222A1 (de) * 1998-09-22 2000-03-30 Hassan Jomaa Verwendung von phosphororganischen Verbindungen zur therapeutischen und prophylaktischen Behandlung von Infektionen
DE69931178T8 (de) * 1998-11-02 2007-06-28 Ludwig Institute For Cancer Research Ein dem vaskularen endothelen wachstumsfaktor verwandtes protein aus orf virus nz10 bindet und aktiviert den säuger vegf rezeptor-2

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3504940A1 (de) 1984-02-17 1985-10-31 Mayr, Anton, Prof. Dr.med.vet. Dr.h.c.mult., 8000 München Multipotente paramunitaetsmediatoren, verfahren zu ihrer herstellung und diese mediatoren enthaltende arzneimittel

Non-Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DHAWAN, S. ET AL.: "Interferon gamma inhibits HIV-induced invasiveness of Monocytes", J. LEUKOCYTE BIOLOGY, 1995, pages 713 - 716
GUIDOTTI, L. G. ET AL.: "Cytotoxic T lymphocytes inhibit hepatitis B virus gene expression by a noncytolytic mechanism in transgenic mice", PROC. NATL. ACAD. SCI. USA, 1994, pages 3764 - 3768
J. F. BROMBERG, C. M. HORVATH, Z. L. WEN, R.: "Transcriptionally active statl is required for the antiproliferative effects of both interferon alpha and interferon gamma", PNAS, 1996, pages 7673 - 7678
LUCA G. GUIDOTTI ET AL.: "Viral cross talk: Intracellular inactivation of the hepatitis B virus during an unrelated viral infection of the liver", PROC. NATL. ACAD. SCI. USA, 1996, pages 4589 - 4594
M. KLOUCHE, H. KIRCHNER, F. HOLZEL: "Antiproliferative effects of interferon gamma in combination with alpha-difluoromethylornithine on human carcinoma cell cultures", J. CANCER RESEARCH AND CLINICAL ONCOLOGY, 1994, pages 706
P. LUCIN, S. JONJIC, M. MESSERLE, B. POLIC, H: "Late-Phase inhibition of murine cytomegalovirus replication by synergistic action of interferon gamma and tumor necrosis factor alpha", J. GEN. VIROL, 1994, pages 101 - 110
SMITH, R. M. WOLCOTT, R. CHERVENAK, S. R. JEN: "Control of acute cutaneous herpes-simplex virus-Infection - T-cell mediated viral clearance is dependent upon interferon gamma", VIROLOGY, 1994, pages 76 - 88
STEINMASSL, G., G. WOLF: "Bildung von Interleukin 2 und Interferon- durch mononukleäre Leukozyten des Schweines nach in vitro-Stimulation mit verschiedenen Viruspräparaten", J. VET. MED., 1990, pages 321 - 331

Also Published As

Publication number Publication date
SE0300034L (sv) 2003-03-03
ES2262663T3 (es) 2006-12-01
WO2002004002A2 (de) 2002-01-17
DE50109630D1 (de) 2006-06-01
MA26927A1 (fr) 2004-12-20
CN1455674B (zh) 2019-03-29
WO2002004002A3 (de) 2002-10-31
SE0300034D0 (sv) 2003-01-10
PL366397A1 (pl) 2005-01-24
HK1054329B (zh) 2005-10-07
JP2004517807A (ja) 2004-06-17
LT2003009A (lt) 2003-08-25
ATE324115T1 (de) 2006-05-15
HUP0400479A2 (hu) 2004-06-28
PT1303286E (pt) 2006-08-31
BG107448A (bg) 2003-11-28
NO20030082L (no) 2003-01-08
JP5037775B2 (ja) 2012-10-03
LU90997B1 (en) 2003-01-08
CA2415397A1 (en) 2002-01-17
CY1105408T1 (el) 2010-04-28
RU2003104525A (ru) 2004-06-27
AU2001270631B2 (en) 2005-07-07
NZ523534A (en) 2005-02-25
SK362003A3 (en) 2003-07-01
US20030021769A1 (en) 2003-01-30
MXPA03000279A (es) 2004-04-05
UY26832A1 (es) 2002-01-31
NO20030082D0 (no) 2003-01-08
HUP0400479A3 (en) 2006-02-28
EP1303286B1 (de) 2006-04-26
CN1455674A (zh) 2003-11-12
GB2381454A (en) 2003-05-07
AU7063101A (en) 2002-01-21
LV12990B (en) 2003-08-20
IL153643A0 (en) 2003-07-06
CZ200371A3 (cs) 2003-04-16
HRP20030096A2 (en) 2005-02-28
FI20030037L (fi) 2003-03-10
AR029954A1 (es) 2003-07-23
GB2381454B (en) 2004-11-24
EP1303286A2 (de) 2003-04-23
EE200300018A (et) 2004-10-15
FI20030037A7 (fi) 2003-03-10
CA2415397C (en) 2011-04-26
SI21122A (sl) 2003-08-31
HK1054329A1 (en) 2003-11-28
GB2381454A8 (en) 2007-10-23
US6685950B2 (en) 2004-02-03
DK200300015A (da) 2003-03-07
GB2381454B8 (en) 2007-10-23
DK1303286T3 (da) 2006-08-28
GB0302630D0 (en) 2003-03-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
LT5079B (lt) Avies pararaupų viruso kamienų panaudojimas antivirusinių ir priešvėžinių vaistų gamybai
Zawatzky et al. The Role of Interferon in the Resistance of CS7BL/6 Mice to Various Doses of Herpes Simplex Virus Type 1
KR20180021083A (ko) 바이러스성 색전술을 위한 조성물 및 방법
Alfano et al. New players in cytokine control of HIV infection
Stringfellow et al. Interferon inducers in therapy of infection with encephalomyocarditis virus in mice. I. Effect of single doses of polyriboinosinic-polyribocytidylic acid and tilorone hydrochloride on viral pathogenesis
JP2012121902A (ja) 抗ウイルス薬および癌に対する医薬を製造するためのパラポックスウイルスｏｖｉｓ株の使用
JP5636284B2 (ja) フィロウイルスまたはアレナウイルス感染の暴露前または暴露後の治療法
Kumar Novel coronavirus (COVID-19) outbreak: Hope and search for effective therapeutic agent
Webster Virus infections in primary immunodeficiency
JP2000007578A (ja) Ｃ型肝炎ウイルスの陰性化のための投薬システム
JP2000501114A (ja) 弱毒化された非免疫原性ポックスウイルスまたはパラポックスウイルスからの多種有効性パラポックス免疫誘導剤の薬剤としての使用のための新規薬効
Kim et al. Intranasal treatment with CpG-B oligodeoxynucleotides protects CBA mice from lethal equine herpesvirus 1 challenge by an innate immune response
HK1060063A (en) Use of strains of the parapox ovis virus for producing antiviral pharmaceuticals and anticancer pharmaceuticals
IL176634A (en) Monoparamunity inducers based on attenuated rabbit myxoma viruses
CN112691094B (zh) 防治病毒的新型化合物及其应用
SARZOTTI et al. LFN-γ Production in Response to Neuropathogenic Cas-Br-M Murine Leukemia Virus Infection
WO2024113302A1 (zh) 靶向HSV必需基因的gRNA、CRISPR/Cas基因编辑系统、递送系统及应用
CN118252916A (zh) 一种抑制不同类型猪繁殖与呼吸综合症病毒感染的14-3-3γ蛋白及其应用
Flisiak et al. Effect of lamivudine treatment on plasma levels of transforming growth factor beta 1, tissue inhibitor of metalloproteinases-1 and metalloproteinase-1 in patients with chronic hepatitis B
CN115671145A (zh) 一种用于预防和抗嗜神经性病毒感染的药物及其制备方法
WO1998037905A1 (en) Arrestable therapeutic viral agent
Martino et al. Treatment of Hepatic Abcesses in Chronic Granulomatous Disease with Granulomatous Disease with...
Francavilla et al. Category 6: Viral hepatitis: clinical aspects 141
ATAULLAKHANOV et al. Immunomodulator Gepon suppresses the replication of Hepatitis C Virus (HCV) in human cell culture in vitro

Legal Events

Date Code Title Description
PC9A Transfer of patents

Owner name: AICURIS GMBH & CO. KG, DE

Effective date: 20070620

TC9A Change of representative
MM9A Lapsed patents

Effective date: 20140711