KR960706559A - Bmp-12, bmp-13 및 이의 건(腱)-유도 조성물(bmp-12, bmp-13 andtendon-inducing compositions thereof) - Google Patents

Bmp-12, bmp-13 및 이의 건(腱)-유도 조성물(bmp-12, bmp-13 andtendon-inducing compositions thereof)

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Abstract

골 형태 발생 단백질 BMP-12 및 BMP-13를 클론시킨다. 건/인대-류 조직 유도 활성을 갖는 상기 단백질의 조성물을 개시한다. 조성물은 건염 및 건 또는 인대 결함의 치료 및 관련 조직 치유에 유용하다.

Description

BMP-12, BMP-13 및 이의 건(腱)-유도 조성물(BMP-12, BMP-13 ANDTENDON-INDUCING COMPOSITIONS THEREOF)
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 인간 BMP-12와 인간 MP52 서열과의 비교이다.

Claims (28)

  1. BMP-12 관련 단백질을 코딩하는 단린된 DNA 서열을 포함하는 DNA 분자.
  2. 제1항에 있어서, DNA 서열은 하기의 군으로부터 선택되는 DNA 분자：(a) SEQ ID NO: 1의 뉴클레오티드 #496, #571 또는 #577 내지 #882; (b) SEQ ID NO：25의 뉴클레오티드 #609 또는 #655 내지 #964; 및 (c) 스트린전트(stringent) 하이브리드화 조건하에서 (a) 또는 (b)에 하이브리드하고 건(腱)/인대-류 조직을 형성시키는 능력을 보이는 BMP-12 관련 단백질을 코딩하는 서열.
  3. DNA 서열은 하기의 군으로부터 선택되는, 제1항에 따른 DNA 서열을 포함하는 DNA 분자 : (a) SEQ ID NO : 2의 아미노산 #-25, #1 또는 #3 내지 #104를 코딩하는 뉴클레오티드; (b) 5 에서 3 으로의 배향에서, 네티브(native) BMP-12 프로펩티드 및 BMP 단백질 프로펩티드로 구성된 군으로부터 선택된 프로펩티드를 코딩하는 뉴클레오티드; 및 SEQ ID NO : 2의 아미노산 #25, #1 또는 #3 내지 #104를 코딩하는 뉴클레오티드; 및 (c) SEQ IN NO : 26의 아미노산 #1 또는 #19 내지 #120을 코딩하는 뉴클레오티드; (d) 5 에서 3 으로의 배향에서, 네티브 BMP-12 프로펩티드 및 BMP 단백질 프로펩티드로 구성된 군으로부터 선택된 프로펩티드를 코딩하는 뉴클레오티드；및 SEQ IN NO : 26의 아미노산 #1 또는 #19 내지 #120을 코딩하는 뉴클레오티드; (e) 스트린전트 하이브리드화 조건하에서 임의의 (a) 내지 (d)에 하이브리드하고 연골 및/또는 골을 형성시키는 능력을 보이는 BMP-12 관련 단백질을 코딩하는 서열.
  4. 제1항에 따른 DNA 분자로 형질 전환된 숙주 세포.
  5. 제2항에 따른 DNA 분자로 형질 전환된 숙주 세포.
  6. 제3항에 따른 DNA 분자로 형질 전환된 숙주 세포.
  7. 하기의 군으로부터 선택된 DNA 서열을 포함하고, 건/인대-류 조직의 형성을 유도하는 능력을 특징으로 하는 BMP-12 단백질을 코딩하는 서열을 갖는 단리된 DNA 분자：(a) SEQ ID NO：1의 뉴클레오티드 #496, #571 또는 #577 내지 #882；(b) SEQ ID NO : 25의 뉴클레오티드 #605 또는 #659 내지 #964; 및 (c) (a) 또는 (b)의 자연 발생 알레릭(allelic) 서열 및 등가(equivalent)등의 코딩 서열.
  8. 제7항에 따른 DNA 분자로 형질 전환된 숙주 세포.
  9. DNA 분자에 대한 발현 조절 서열과 작동적으로 관련된 제7항의 DNA 분자를 포함하는 벡터.
  10. 제9항에 따른 벡터로 형질 전환된 숙주 세포.
  11. 하기 단계로 구성된, 정제된 BMP-12 단백질의 제조 방법 : (a) BMP-12 관련 단백질을 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 제2항에 따른 DNA 분자로 형질 전환된 숙주 세포는 배양하는 단계；및 (b) 배양 배지로부터 BMP-12 관련 단백질을 회수 및 정제하는 단계.
  12. 하기 단계로 구성된, 정제된 BMP-12 관련 단백질의 제조 방법：(a) BMP-12 관련 단백질을 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는, 제3항에 따른 DNA 분자로 형질 전환된 숙주 세포를 배양하는 단계; 및 (b) 배양 배지로부터 BMP-12 관련 단백질을 회수 및 정제하는 단계.
  13. 하기 단계로 구성된, 정제된 BMP-12 관련 단백질의 제조 방법：(a) BMP-12 관련 단백질을 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 제7항에 따른 DNA 분자로 형질 전환된 숙주 세포를 배양하는 단계；및 (b) 배양 배지로부터 BMP-12 관련 단백질을 회수 및 정제하는 단계.
  14. 하기의 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 정제된 폴리펩티드; (a) SEQ ID NO：2에 나타낸 아미노산 #-25 내지 아미노산 #104；(b) SEQ ID NO：2에 나타낸 아미노산 #1 내지 아미노산 #104；(c) SEQ ID NO：2에 나타낸 아미노산 #3 내지 아미노산 #104；(d) SEQ IN NO：26에 나타낸 아미노산 #1 내지 아미노산 #120；및 (e) SEQ ID NO：26에 나타낸 아미노산 #19 내지 아미노산 #120.
  15. 폴리펩티드가 각각 제14항의 아미노산 서열을 갖는 2개의 소단위체로 구성된 다이머의 형태인 정제된 폴리펩티드.
  16. 하기의 단계로 제조되는 정제된 단백질：(a) SEQ ID NO：1에 나타낸 뉴클레오티드 #496, #571 또는 #577 내지 #882로부터의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 DNA 분자로 형질 전환된 세포를 배양하는 단계; 및 (b) SEQ ID NO：2에 나타낸 아미노산, #-25, #1 또는 #3 내지 #104로부터의 아미노산 서열을 포함하는 단백질을 배양 배지로부터 회수 및 정제하는 단계.
  17. 건/인대-류 조직의 형성을 유도하는 능력을 특징으로 하는 정제된 BMP-12 관련 단백질.
  18. 약제학적으로 허용가능한 부형제와 함께 혼합된 유효량의 제7항에 따른 BMP-12 관련 단백질을 함유하는 약제학적 조성물.
  19. 건/인대-류 조직을 필요로 하는 환자에게 유효량의 제18항에 따른 조성물을 투여하는 것을 특징으로 하는, 상기 환자에서의 건/인대-류 조직 형성 유도 방법.
  20. 약제학적으로 허용가능한 부형제내에 BMP-12 관련 단백질을 유효량의 단백질로 포함하는, 건/인대-류 조직 치료 및 조직 치유용 약제학적 조성물.
  21. 건염, 또는 기타 건 또는 인대 결함의 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 제20항에 따른 조성물을 투여하는 것을 특징으로 하는, 상기 환자에서의 건염, 또는 기타 건 또는 인대 결함의 치료 방법.
  22. BMP-12 관련 폴리펩티드를 코딩하는 DNA 서열에 정확한 판독 프레임 상태로 결합되어있는 단백질중의 TGF-β 수퍼패밀리(superfamily)의 하나의 원(member)으로부터의 프로펩티드를 코딩하는 DNA 서열을 포함하는 키메릭(chimeric) DNA 분자.
  23. 제22항에 있어서, 프로펩티드가 BMP-2로부터의 프로펩티드인, 키메릭 DNA 분자.
  24. 제14항에 따른 폴리펩티드의 아미노산 서열을 갖는 모노머 및 TGF-β 슈퍼패밀리의 단백질의 아미노산 서열을 갖는 모노머로 구성된 헤테로다이머성(heterodimeric) 단백질 분자.
  25. 하기의 군으로부터 선택된 DNA 서열로 코딩되는 단백질을 포함하는 유효량의 조성물을 건/인대-류 조직을 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 특징으로 하는, 상기 환자에서의 건/인대-류 조직 형성 유도방법 : (a) SEQ ID NO：1의 뉴클레오티드 #496, #571 또는 #577 내지 #882; (b) SEQ ID NO：3의 뉴클레오티드 #845 또는 #899 내지 #1204；(c) SEQ ID NO：25의 뉴클레오티드 #605 또는 #659 내지 #964；및 (d) 스트린전트 하이브리드화 조건하에서, (a), (b) 또는 (c)에 하이브리드하고 건/인대-류 조직을 형성시키는 능력을 보이는 단백질을 코딩하는 서열.
  26. 하기의 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 건/인대-류 조직 유도 단백질을 포함하는 유효량의 조성물을 건/인대-류 조직을 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 특징으로 하는, 상기 환자에서의 건/인대-류 조직 형성 유도 방법：(a) SEQ ID NO：2에 나타낸 아미노산 #-25, #1 또는 #3 내지 #104；(b) SEQ ID NO：4에 나타낸 아미노산 #1 또는 #19 내지 #120；(c) SEQ ID NO : 26에 나타낸 아미노산 #1 또는 #19 내지 #120; 및 (d) 건 및/또는 인대를 형성시키는 능력을 보이는 (a), (b) 또는 (c)의 돌연변이체 및/ 또는 변종.
  27. 약제학적으로 허용가능한 부형제내에 유효량의 BMP-12 관련 단백질을 포함하는, 건/인대-류 조직치료용 약제학적 조성물.
  28. 건염, 또는 기타 건 또는 인대 결함의 하는 환자에게 유효량의 제27항에 따른 조성물을 투여하는 것을 특징으로 하는, 상기 환자에서의 건염, 또는 기타 건 또는 인대 결함 치료 방법.
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