KR960705047A - 신규 단백질/폴리펩티드와 동시트랜스펙션 플라스미드 및 생조환형 담체 - Google Patents

신규 단백질/폴리펩티드와 동시트랜스펙션 플라스미드 및 생조환형 담체

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KR960705047A KR1019960701359A KR19960701359A KR960705047A KR 960705047 A KR960705047 A KR 960705047A KR 1019960701359 A KR1019960701359 A KR 1019960701359A KR 19960701359 A KR19960701359 A KR 19960701359A KR 960705047 A KR960705047 A KR 960705047A
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Abstract

코로나바이러스용 백신을 제조하는데 유용한 항원적-활성 단백질을 기술한다. 항원적-활성 단백질은 S단백질과 SM 단백질로서 표시되는 코로나바이러스 단백질이다. S 단백질은 수정되거나 삭제되거나 또는 여기에는 없는, A1, A2와/또는 D 항원 영역을 가지므로서, ADE 유발을 피한다. 또한 S 단백질의 신호 펩티드도 수정되거나 삭제될수 있다.
이들 항원적-활성 단백질을 암호화하는 DNA 암호화 서열을 제조하는 방법은 물론 코로나바이러스 감염에 대하여 포유동물을 보호하는 생조환형 담체를 포함하여, 약학적으로 수용할수 있는 담체에서 암호화하는 단백질 또는 DNA 암호화 서열을 형성하는 방법을 기술한다. 여기에 서술된 항원적-활성 단백질과 백신은 FIP와 FIPV 감염에 대한 고양이 보호에 관한 것이다.

Description

신규 단백질/폴리펩티드와 동시트랜스펙션 플라스미드 및 생조환형 담체
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 SM 단백질의 아미노산 서열과 SM 단백질을 암호화하는 대응하는 누클레오티드 염기 서열이다,
제2도는 pdTK.의 제한 효소지도,
제15도는 pRSVMS.의 제한 효소지도,
제23도는 pdTKRSVMLAC.의 제한 효소지도.

Claims (48)

  1. 최소한 하나의 A1, A2와 D 항원 영역을 수정하거나 제거하므로서, 이 수정된 영역이 ADE-비활성화하는 수정된 코로나바이러스 S단백질.
  2. 제1항에 있어서, A1과 A2 항원 영역을 수정하거나 제거하므로서, 이 수정된 영역이 ADE-비활성화하는 수정된 코로나바이러스 S단백질.
  3. 제1항에 있어서, A1과 D 항원 영역을 수정하거나 제거하므로서, 이 수정된 영역이 ADE-비활성화하는 수정된 코로나바이러스 S단백질.
  4. 제1항에 있어서, A2과 D 항원 영역을 수정하거나 제거하므로서, 이 수정된 영역이 ADE-비활성화하는 수정된 코로나바이러스 S단백질.
  5. 제1항에 있어서, A1, A2와 D 항원 영역을 수정하거나 제거하므로서, 이 수정된 영역이 ADE-비활성화하는 수정된 코로나바이러스 S단백질.
  6. 제1항에 있어서, 코로나바이러스 S 단백질이 수정된 FIPVS 단백질인, 수정된 코로나바이러스 S단백질.
  7. 신호 펩티드를 이로부터 삭제되는, 수정된 코로나바이러스 S단백질.
  8. 제1도의 아미노산 서열과 실제로 균질인 아미노산 서열을 갖는 실제순수한 코로나바이러스 SM 단백질.
  9. 실제 순수한 FIPV SM 단백질.
  10. (a) 코로나바이러스 S 단백질을 암호화하는 표현 카셋트를 단리시키는 단계; (b) S 단백질의 최소한 하나의 연관있는 영역을 암호화하는 누클레오티드 염기 서열의 위치를 측정하는 단계; (c) 최소한 하나의 연관있는 영역을 암호화하는 누클레오티드를 수정하거나 삭제하는 단계;로 이루어지는, 코로나바이러스에 대하여 항원적-활성을 갖는 수정된 코로나바이러스 S 단백질을 암호화하는 DNA 분자의 제조방법.
  11. 제10항에 있어서, 연관있는 영역이 S 단백질의 신호 펩티드 서열이고, 신호 펩티드를 암호화하는 누클레오티드 염기 서열을 삭제하므로서, 신호 펩티드가 누클레오티드 서열에 의하여 암호화되지 않는 제조방법.
  12. 제10항에 있어서, 연관있는 영역이 항원 영역이고, 연관있는 영역을 암호화하는 누클레오티드 염기 서열을 수정하거나 삭제하므로서 암호화된 단백질의 영역이 ADE-비활성화하는 제조방법.
  13. 제12항에 있어서, 연관있는 영역이 최소한 하나의 A1, A2와 D 항원 영역인, 제조방법.
  14. 제10항에 있어서, 코로나바이러스 S 단백질이 FIPV S 단백질인, 제조방법.
  15. 트랜스펙트러는 바이러스성 게놈에서 삽입 부위의 최소한 일부분의 근접 유전자 서열, RSV 또는 HCMV와 SV40에서 유도된 표현신호와 이러한 동시트랜스펙션에 의하여 생성된 생 조환형 담체에 의하여 연관있는 단백질이 표현되는 암호화 서열을 포함하는, 바이러스성 DNA와 동시트랜스펙션하는 동시트랜스펙션 플라스미드.
  16. 제15항에 있어서, 연관있는 단백질이 FIPV 단백질인 동시트랜스펙션 플라스미드.
  17. 제15항에 있어서, 동시트랜스펙트되는 바이러스성 균주가 FHV-1이고, 근접 유전자 서열을 FHV-1에서 유도하는 동시트랜스펙션 플라스미드.
  18. 제15항에 있어서, 연관있는 단백질의 암호화 서열이 코로나바이러스 S단백질을 암호화하는 동시트랜스펙션 플라스미드.
  19. 제18항에 있어서, 연관있는 단백질의 암호화 서열이 삭제된 신호 펩티드를 갖는 코로나바이러스 S 단백질을 암호화하는 동시트랜스펙션 플라스미드.
  20. 제18항에 있어서, 연관있는 암호를 갖는 단백질의 암호화 서열이 수정되거나 아니면 삭제된 최소한 하나의 항원 영역을 가지므로, 암호화된 단백질의 수정된 영역이 ADE-비활성화하는 코로나바이러스 S 단백질인, 동시트랜스펙션 플라스미드.
  21. 제15항에 있어서, 연관있는 단백질의 암호화 서열이 코로나바이러스 S 단백질을 암호화하는 동시트랜스펙션 플라스미드.
  22. 제15항에 있어서, 표적 단백질이 코로나바이러스 M 단백질인, 동시트랜스펙션 플라스미드.
  23. A1, A2 또는 D 항원 영역을 암호화하는 최소한 하나의 DNA 서열을 수정하거나 제거하므로서, 암호화된 단백질의 이 영역이 ADE-비활성화하는, 게놈이 수정된 코로나바이러스 S를 암호화하는 DNA 서열을 갖는 FHV-1을 함유하는 생 조환형 담체.
  24. 제23항에 있어서, A1, A2와 D 항원 영역을 암호화하는 DNA 서열을 모두 수정하거나 제거하므로서, 암호화된 단백질의 상기 A1, A2와 D 영역이 모두 ADE-비활성화하는, 생조환형 담체.
  25. 제23항에 있어서, 수정된 코로나바이러스 S 단백질이 수정된 FIPV S 단백질인 생조환형 담체.
  26. 암호된 수정 코로나바이러스 S 단백질을 신호 펩티드를 암호화하는 DNA 서열을 수정하거나 또는 제거하는 게놈이 수정된 코로난바이러스 S 단백질을 암호화하는 DNA 서열을 갖는 FHV-1을 함유하는 생조환형 담체.
  27. 제26항에 있어서, 수정된 코로나바이러스 S 단백질이 수정된 FIPV S 단백질인 생조환형 담체.
  28. 게좀이 코로나바이러스 SM 단백질을 암호화하는 DNA 서열을 가지므로서, 생조환형 담체가 코로나바이러스 SM 단백질을 표현하는 FHV-1을 함유하는 생조환형 담체.
  29. 제28항에 있어서, 코로나바이러스 SM 단백질이 FIPV SM 단백질인 생조환형 담체.
  30. 게놈이 코로나바이러스 M 단백질을 암호화하는 DNA 서열을 가지므로서, 생조환형 담체가 코로나바이러스 M 단백질을 표현하는 FHV-1을 함유하는 생조환형 담체.
  31. 제30항에 있어서, 코로나바이러스 M 단백질이 FIPV M 단백질인, 생조환형 담체.
  32. 게좀이 RSV 또는 HCMV와 SV40에서 유도된 표현 신호를 갖는 바이러스성 균주와 연관있는 단백질이 생조환형 담체에 의하여 표현되는 누클레오티드 암호화 서열을 함유하는, 표적 포유동물에서 최소한 하나의 연관있는 단백질/폴리펩티드를 생체내 표현하는 생조환형 담체.
  33. 제32항에 있어서, 바이러스성 균주가 FHV-1인 생조환형 담체.
  34. 제32항에 있어서, 누클레오티드 암호화 서열이 항원적-활성 코로나바이러스 단백질을 암호화하는 생조환형 담체.
  35. ADE를 유발하지 않고 코로나바이러스에 대하여 포유동물을 보호하는데 효과적인 코로나바이러스 백신.
  36. 제35항에 있어서, 백신이 적당한 담체에서 항원적-활성 코로나바이러스 단백질을 포함하는, 코로나바이러스 백신.
  37. 제36항에 있어서, 코로나바이러스 단백질이 코로나바이러스 S 단백질인 백신.
  38. 제36항에 있어서, 코로나바이러스 단백질이 수정된 코로나바이러스 S 단백질인 백신.
  39. 제38항에 있어서, 수정된 코로나바이러스 S 단백질이 ADE-비활성화하도록 수정되거나 삭제된 최소한 하나의 A1, A2 또는 D 항원 영역을 갖는 백신.
  40. 제38항에 있어서, 수정된 코로나바이러스 S 단백질이 삭제된 신호 펩티드를 갖는 백신.
  41. 제36항에 있어서, 코로나바이러스 단백질이 코로나바이러스 SM 단백질인 백신.
  42. 제36항에 있어서, 코로나바이러스가 코로나바이러스 M 단백질인 백신.
  43. 제36항에 있어서, 백신이 FIP에 대하여 고양이를 보호하는 FIPV 백신이고, 단백질이 FIPV 단백질인 백신.
  44. 제36항에 있어서, 생조환형 담체를 포함하므로서 필요한 숙주 유기체에서 단백질의 표현을 얻는 백신.
  45. a) 항원적-활성 코로나바이러스 단백질을 암호화하는 DNA 서열을 단되하고 정제하는 단계; b) 항원적-활성 코로나바이러스 단백질을 암호화하는 DNA 서열을 갖는 동시 트랜스펙션 플라스미드를 형성하는 단계; c) 동시트랜스펙션 플라스미드로 FHV-1 바이러스성 DNA을 동시트랜스펙트하여, 표적동물 생체내에 항원적-활성 코로나바이러스 단백질을 표현하는 항원적-활성 코로나바이러스 단백질을 암호화할 수 있는 생조환형 담체를 형성하는 단계; d) 생조환형 담체를 약학적으로 수용할 수 있는 담체와 조합하는 단계;를 포함하는 코로나바이러스 백신의 제조방법.
  46. a) 항원적-활성을 갖는 FIPV S 단백질을 암호화하는 DNA 서열을 단리하는 단계; b) 최소한 하나의 A1, A2 또는 D 항원 영역을 암호화하는 FIPV 단백질의 DNA 서열을 수정하여, 암호화된 단백질의 수정 항원 영역이 ADE-비활성화하는 단계; c) 수정된 FIPV S 단백질을 암호화하는 DNA 서열을 갖는 동시트랜스펙션플라스미드를 형성하는 단계; d) 동시트랜스펙션 플라스미드로 FHV-1 바이러스성 DNA을 동시트랜스펙트하므로서, 표적 동물 생체내에 항원적-활성의 수정된 FIPV S 단백질을 표현하는 항원적-활성의 수정된 FIPV S 단백질을 암호화할 수 있는 생조환형 담체를 형성하는 단계; e) 생조환형 담체를 약학적으로 수용할수 있는 담체와 조합하는 단계;를 포함하는 FIPV 백신의 제조방법.
  47. 제45항의 방법에 따른 코로나바이러스 백신을 제조하는 단계와 치료적으로 유효한 양의 백신을 필요한 포유동물에 투여하는 단계를 포함하는 코로나바이러스 감염으로부터 포유동물을 보호하는 방법.
  48. 제46항의 방법에 따른 FIPV 백신을 제조하는 단계와 치료적으로 유효한 양의 백신을 고양이에 투여하는 단계를 포함하는 FIPV로부터 고양이를 보호하는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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