KR960031596A - 신규의 혈전용해효소 및 이의 정제 방법 - Google Patents

신규의 혈전용해효소 및 이의 정제 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR960031596A
KR960031596A KR1019950002101A KR19950002101A KR960031596A KR 960031596 A KR960031596 A KR 960031596A KR 1019950002101 A KR1019950002101 A KR 1019950002101A KR 19950002101 A KR19950002101 A KR 19950002101A KR 960031596 A KR960031596 A KR 960031596A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
column
chromatography
ile
eluted
protein
Prior art date
Application number
KR1019950002101A
Other languages
English (en)
Other versions
KR0151825B1 (ko
Inventor
박선양
윤혜숙
김미란
이흥복
Original Assignee
박선양
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 박선양 filed Critical 박선양
Priority to KR1019950002101A priority Critical patent/KR0151825B1/ko
Publication of KR960031596A publication Critical patent/KR960031596A/ko
Priority to KR1019980010512A priority patent/KR100215647B1/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR0151825B1 publication Critical patent/KR0151825B1/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
    • C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
    • C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
    • C07K1/18—Ion-exchange chromatography
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
    • C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
    • C07K1/20—Partition-, reverse-phase or hydrophobic interaction chromatography
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
    • C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
    • C07K1/22—Affinity chromatography or related techniques based upon selective absorption processes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
    • C07K1/36—Extraction; Separation; Purification by a combination of two or more processes of different types

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

본 발명은 망충(Tabanus falvus)으로부터 분리 정제된 신규의 혈전용해효소 및 이의 정제 방법에 관한 것으로, 본 발명의 신규의 혈전용해효소인 타바나제 I 및 Ⅱ는 세린계열 단백분해효소로서 분자량이 각각 22,000달톤 및 27,000달톤이고 룸브로키나제보다 훨씬 우수한 섬유소 분해능을 나타내며 넓은 범위의 pH에서 안정하다.

Description

신규의 혈전용해효소 및 이의 정제 방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 망충 추출액을 세파크릴(Sephacryl) S-200젤 여과 크로마토 그래피로 분리한 분획의 섬유소 용해능을 나타낸 것이고,
제2도는 제1도에서 섬유소 용해능이 높은 분획들을 이온 교환 크로마토그래피로 분리한 분획의 섬유소 용해능을 나타낸 것이고,
제3도는 제2도에서 섬유소 용해능이 높은 분획을 소수성 친화 컬럼(토요펄 HW)크로마토그래피로 분리한 분획의 섬유소 용해능을 나타낸 것이다.

Claims (9)

  1. 망충(Tabanus falvus)으로부터 추출된 혈전용해효소.
  2. 제1항에 있어서, 분자량이 22,000달톤 또는 27,000 달톤임을 특징으로 하는 혈전용해효소.
  3. 제1항에 있어서, N-말단의 아미노산 서열이 N-Asp-Ile-Gly-Asn-Arg-Pro- Ile-Asp-Ile-Gln-Gln-Phe-Arg-Thr-Trp-C 또는 N-Asn-Gly-Trp-His-Arg-Ile- Asp-Ser-Gln-C임을 특징으로 하는 혈전용해효소.
  4. (가) 망충의 생리식염수 추출액에 황산 암모늄을 가하여 침전물을 수득하고; (나) 상기 침전물을 완충용액에 현탁시킨 후 동일 완충용액에서 투석시키고; (다) 투석된 용액을 음이온 교환 수지 컬럼으로 여과하고; (라) 용출된 단백질을 농축한 후 젤 여과 크로마토그래피, 음이온 교환 컬럼 크로마토그래피, 소수친화성 컬럼 크로마토그래피, 및 젤 여과 크로마토그래피를 차례로 수행하는 단계를 포함하는, 망충으로부터 혈전용해효소의 정제 방법.
  5. 제4항에 있어서, 상기 (다)에서 DE-52 음이온 교환 컬럼을 사용하고, 0.6M NaCl을 포함하는 완충액으로 단백질을 용출시키는 방법.
  6. 제4항에 있어서, 상기 (라)의 첫 번째 젤 여과 크로마토그래피에서 세파크릴 S-200 컬럼을 사용하는 방법.
  7. 제4항에 있어서, 상기 (라)의 음이온 교환 컬럼 크로마토그래피에서 DE-52 컬럼을 사용하고 0.1M NaCl 완충용액과 0.6M NaCl 완충용액으로 농도구배를 형성하여 단백질을 용출시키는 방법.
  8. 제4항에 있어서, 상기 (라)의 소수친화성 컬럼 크로마토그래피에서 토요펄(Toyopearl HW) 컬럼을 사용하고 30% 내지 10%의 황산 암모늄 농도구배를 이용하여 단백질을 용출시키는 방법.
  9. 제4항에 있어서, 상기 (라)의 두 번째 젤 여과 크로마토그래피에서 세파덱스 G-75컬럼을 사용하고 2회의 크로마토그래피를 연속해서 수행하는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019950002101A 1995-02-07 1995-02-07 신규의 혈전용해효소 및 이의 정제 방법 KR0151825B1 (ko)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1019950002101A KR0151825B1 (ko) 1995-02-07 1995-02-07 신규의 혈전용해효소 및 이의 정제 방법
KR1019980010512A KR100215647B1 (ko) 1995-02-07 1998-03-26 신규의 혈전용해효소 및 이의 정제 방법

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1019950002101A KR0151825B1 (ko) 1995-02-07 1995-02-07 신규의 혈전용해효소 및 이의 정제 방법

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1019980010512A Division KR100215647B1 (ko) 1995-02-07 1998-03-26 신규의 혈전용해효소 및 이의 정제 방법

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR960031596A true KR960031596A (ko) 1996-09-17
KR0151825B1 KR0151825B1 (ko) 1998-10-01

Family

ID=19407720

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1019950002101A KR0151825B1 (ko) 1995-02-07 1995-02-07 신규의 혈전용해효소 및 이의 정제 방법
KR1019980010512A KR100215647B1 (ko) 1995-02-07 1998-03-26 신규의 혈전용해효소 및 이의 정제 방법

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1019980010512A KR100215647B1 (ko) 1995-02-07 1998-03-26 신규의 혈전용해효소 및 이의 정제 방법

Country Status (1)

Country Link
KR (2) KR0151825B1 (ko)

Also Published As

Publication number Publication date
KR100215647B1 (ko) 1999-08-16
KR0151825B1 (ko) 1998-10-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES8100502A1 (es) Un procedimiento para purificar proteinas con pesos moleculares superiores a 12.000,en particular interferon
KR860002567A (ko) 혈액응고 억제 단백질의 제조방법
DK0539530T3 (da) Rensningsstyret kloning af peptider
DE3750451D1 (de) Rekombinanter menschlicher endothelzellenwachstumsfaktor.
KR850007083A (ko) 재조합체 인터로이킨-2의 회수방법
DE69333802T8 (de) Äusseres membranprotein von haemophilus
ATE73138T1 (de) Reinigung und aktivierung von proteinen aus unloeslichen einschlusskoerpern.
KR880012765A (ko) 신규의 글리코프로테인, 이의 생산방법 및 유효성분으로서 이를 함유하는 면역억제제
ES8103976A1 (es) Un metodo de producir proteinas de interferon humano de for-ma le
ATE113960T1 (de) Proteingewinnung.
ZHAO et al. Surface topography of histidine residues in lysozymes
Avissar et al. Actin-activated ATPase from human erythrocytes
DE69125381D1 (de) Proteinstruktur des pflanzlichen toxins gelonin
Swadesh et al. Purification and characterization of hementin, a fibrinogenolytic protease from the leech Haementeria ghilianii
KR960031596A (ko) 신규의 혈전용해효소 및 이의 정제 방법
IT1262981B (it) Procedimento per la purificazione della proteina big endotelina
Zoon [66] Purification and characterization of human interferon from lymphoblastoid (Namalva) cultures
RU2006123543A (ru) Способ очистки интерферона бета
KR890008166A (ko) 융합 단백질의 선택적 분해 방법
Lane et al. Multiple forms of α2u, a sex-dependent urinary protein of the adult male rat
KR950000889A (ko) 신규 아미노펩티다제
Baudin-Chich et al. Strategy for structural characterization of haemoglobin variants
KR950032281A (ko) 혈장 헤파린 결합 단백질-70
Rushbrook Purification of myosin light chains by high-performance liquid chromatography
Houck et al. Purification of thymic macrophage migration inhibitory factor (MIF)

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20020625

Year of fee payment: 5

LAPS Lapse due to unpaid annual fee