KR950012071A - 플로우 사이토미터를 이용한 고상형 면역 측정방법 - Google Patents

플로우 사이토미터를 이용한 고상형 면역 측정방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 플로우 사이토미터를 이용한 고상형 면역 측정방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 각종 생체물질을 측정함에 있어서 종래의 면역측정법보다 더욱 정확하고 적용범위(flow cytometer)를 이용한 새로운 고상형 면역 측정방법에 관한 것이다.

Description

플로우 사이토미터를 이용한 고상형 면역 측정방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 본 발명의 방법에 따라 lgM,IgG 및 IgA 표준물질에 내한 형광강도를 나타낸 그래프이고,
제2도는 본 발명에 따라 생쥐혈청의 면역글로블린 아이소타입(isotype) 조성을 측정한 결과이고,
제3도는 본 발명의 따라 아가로오즈 비이드에 상이한 농도의 IgG표준물질을 반응시킨후 FlTC결합 항-IgG를 반응시키고 그 형광강도를 측정한 결과이고,
제4도는 본 발명의 방법에 따라 제3도에서 측정한 형광강도를 IgG표준물질의 농노를 대응시킨 결과를 나타낸 그래프이며,
제 5 도는 본 발명의 방법에 따라 측정한 HCG의 양과 형광강도 사이의 상관관계와 종래의 효소 면역 측정법으로 측정한 HCG의 양과 흡광도 사이의 상관관계를 비교한 그래프.

Claims (8)

  1. 생체물질에 대한 면역측정 방법에 있어서, (가) 아가로오즈 비이드(agarose bead)에 면역글로블린(Ig)의 아이소타입에 대한 측정 대상물질의 항체로서 항-IgG. 항-IgM 및 항-IgA를 결합시키는 단계, (나) 항체가 결합된 상기 비이드에 측정 대상 물질을 투여하는 반응시키는 단계, (다) 반응되지 않은 IgG, IgM 및 IaA를 세척하여 제거하는 단계, (라) 1gG, IgM, 및 IgA에 결합될 수 있고 형광물질이 부착된 항-Ig를 투여하는 반응시키는 단계, (마) 반응되지 않은 투여항체를 세척, 제거하는 단계 및 (바) 플로우 사이토미터로 비이드를 분석하는 단계로 이루어지는 것을 특징으로 하는 플로우 사이토미터를 이용한 고상형 면역측정 방법.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 아가로오조 비이드(agarose bead)대신에 폴리스티렌입자, 합성 풀리머 또는 천연물질의 입자를 사용하는 것을 특징으로 하는 면역측정 방법.
  3. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 고형상 입자에 내한 면역항체 결합은 폴리스티렌 입자에 면역항체가 결합하는 물리적 흡착법과 아가로오즈 비이즈에 면역항체를 공유결합으로 경합시키는 화학적 방법으로 시행함을 특징으로 하는 고상형 면역측정 방법.
  4. 제 1항에 있어서, 상기 아가로오즈 비이드에 면역항체 결합은 면역항체 대신 바이러스 또는 항원성물질을 결합시켜 체액에 존재하는 항체를 측정하는 방법으로 항원성물질을 이용하는 특징으로 하는 면역측정 방법.
  5. 제1항에 있어서, 상기 형광물질은 플루오르신 이소치오시아네이트(FITC)를 사용하거나 그 대신 피코에리쓰린(Phycoerythrin) 또는 텍사스 레드(texas red)를 사용하는 특징으로 하는 면역측정 방법.
  6. 제 l항 또는 제5항에 있어서, 상기 형광물질의 사용은 자극 파장(excitation wavelength)이 같거나 비슷하고 방출파장(emission wavelength)이 다른 형광물질을 사용하여 2종류 이상의 생체물질을 동시에 측정할 수 있도록 이용하는 특징으로 하는 면역측정 방법.
  7. 제1항 또는 제2항에 있어서, 형광물질의 부착은 항체가 아닌 아비딘(avidin)을 이용하는 특징으로 하는 면역측정 방법.
  8. 생체물질에 대한 면역측정 정량방법에 있어서, (가) 측정 대상물질에 대한 항체를 비이드에 결합시키는 단계, (나) 측정대상물질을 반응시켜 아이소타입 조성을 측정하는 단계, (다) 항체가 결합된 상기 비이드에 서로 다른 농도의 IgG 표준물질을 투여하는 반응시키는 단계, (라) 반응되지 않은 IgG를 세척하여 제거하는 단계. (마) IgG에 결합될 수 있고 형광물질이 부착된 항-Ig를 투여하여 반응시키는 단계, (바) 반응되지 않은 투여항체를 세척, 제거하는 단계, (사) 플로우 사이토머터로 비이드에 대하여 형광강도를 분석하는 단계 및 (아) 형광강도를 1gG표준물질의 농도에 대응시켜 IgG물질을 정량하는 단계로 이루어지는 것을 특징으로 하는 플로우 사이도미터를 이용한 면역측정 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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