KR940703918A - 발효법에 의한 L-트레오닌의 생산방법(Method for the production of L-threonine by fermentation) - Google Patents
발효법에 의한 L-트레오닌의 생산방법(Method for the production of L-threonine by fermentation)Info
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Abstract
에스케리챠 박테리아에서 기원한 아스파토키나제 Ⅲ을 암호화하고 이 암호화 도메인에 아스파르토키나제 Ⅲ에 대한 리신에 의한 피이드백 억제를 해방시키는 돌연변이를 갖는 유전자를 함유하는 DNA, 이 DNA가 에스케리챠 박테리아에서 자가 복제할 수 있는 벡터 DNA에 결합된 제조합 DNA, 상기 언급된 제조합 DNA의 세포로의 도입에 의해 형질전환된 에스케리챠속에 속하는 미생물, 및 발효배지에서 미생물을 배양하고 배양 배지에 L-트레오닌을 생산하고 축적시키고 상기 배양배지로부터 L-트레오닌을 수거함을 특징으로 하는 L-트레오닌을 생상하는 방법이 기술되어 있다.
리신에 기인한 피이드백 억제를 충분히 해방시키는 에스케리챠 박테리아-유도된 AK Ⅲ 유전자가 수득된다. 이들 유전자의 트레오닌 생산 박테리아로의 도입은 선행 기술에 비해 트레오닌 생산면에서 훨씬 개선된 신규한 트레오닌-생산 박테리아를 초래한다. 이들 트레오닌-생산 박테리아의 사용은 통상의 방법보다 훨씬 더 우수한, 발효법에 의한 L-트레오닌 생산 방법을 제공한다.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제 1 도는 트레오닌의 생합성 경로를 도시한 것이다. 제 2 도는 pLYSC1 및 pLYSC2에 대한 제한 효소 지도를 도시한 것이다(실시예 1참조). 제 3 도는 1ysC에 대한 하이드록실아민에 의해 유발된 돌연변이 도입효과를 보여주는 그래프마다(실시예 2(2-4) 참조). 제 4 도는 다양한 1ysC*유전자에 의해 암호화된 아스파르토키나제의 리신-의존성 억제 정도를 도시한 것이다(실시예 3(3-4) 참조). x축의 리신 농도는 로그로 표현된다. y축의 특이 활성은 리신 OmM 첨가에서 야생형 AK Ⅲ의 활성을 100%로서 정의한 비율로서 표현된다.
Claims (7)
- 에스케리챠박테리아에서 기원한 아스파르토카나제 Ⅲ을 암호화하고 이 암호화 도메인에 아스파르토카나제 Ⅲ에 대한 리신에 의한 피이드백 억제를 해방시키는 돌연변이를 갖는 유전자를 함유하는 DNA.
- 제 1 항에 있어서, 아스파르토카나제 Ⅲ에 대한 리신에 의한 피이드백 억제를 해방시키는 돌연변이가 아스파르토카나제 Ⅲ의 A 도메인 또는 B 도메인상에 위치된 DNA.
- 제 1 항에 있어서, 아스파르토카나제 Ⅲ에 대한 리신에 의한 피이드백 억제를 해방시키는 돌연변이가 서열 목록 : 서열 확인 번호 : 1에서 323번 Gly 가 Asp로 대체된 돌연변이 ; 323번 Gly가 Asp로 대체되고 408번 Gly가 Asp로 대체된 돌연변이 ; 34번 Arg가 Cys로 대체되고 323번 Gly이 Asp로 대체된 돌연변이 ; 325번 Leu이 Phe로 대체된 돌연변이 ; 318번 Met가 Ile로 대체된 돌연변이 ; 318번 Met가 Ile로 대체되고 349번 Val이 Met로 대체된 돌연변이 ; 345번 Ser이 Leu로 대체된 돌연변이 ; 347번 돌연변이 ; 352번 Thr 이 Ile로 대체되고 369번 Ser이 Phe로 대체된 돌연변이 ; 164번 Glu이 Lys로 대체된 돌연변이 ; 및 417번 Met가 Ile로 대체되고 419번 Cys가 Tyr로 대체된 돌연변이로 구성된 그룹중에서 선택된 DNA.
- 제 1 항 내지 제 3 항중 어느 한 항에 따른 DNA가 에스케리챠 박테리아 세포에서 자가 복제할 수 있는 벡터 DNA에 결합된 재조합 DNA.
- 제 4 항에 따른 재조합 DNA가 세포내로 도입됨으로써 형질전환시킨, 에스케리챠속에 속하는 미생물.
- 제 3 항에 있어서, 제 1 항 내지 제 3 항중 어느 한 항에 따른 DNA를 염색체성 DNA로 혼입함으로써 형질전환시킨 미생물.
- 발효배지에서 제 5 항 또는 제 6 항에 따른 미생물을 배양하여 발효 배지중에 L-트레오닌이 생산되고 축적되게 한 다음, 상기 배양 배지로부터 L-트레오닌을 수거함을 특징으로 하는 L-트레오닌의 생산방법.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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