KR930013106A - 연어 성장 호르몬의 정제 방법 - Google Patents

연어 성장 호르몬의 정제 방법 Download PDF

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    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
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Abstract

본 발명은 연어 성장 호르몬 발현으로 유전자 제조합 대장균 세포를 초음파로 파괴하여 4M 우레아 용액에서 침전하는 불수용성 단백질을 분리하여 6M 구아니딘 용액에 용해시킨 다음 회석시에 침전되는 단백질을 SDS용액으로 용해시킨 후 S-200수지 투과 크로마토그래피와 G-25수지 여과 크로마토그래피를 행하여 고순도의 생물활성도를 지닌 연어 성장 호르몬을 제조하는 방법을 제공한다.

Description

연어 성장 호르몬의 정제방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 세포내 불용해 단백질 분리 및 구아니딘 염 분별 결과를 진기영동 사진으로 나타낸 것이고,
제2도는 S-200 수지 투과 크로마토그래피 결과를 나타낸 것이고,
제3도는 정제된 연어 성장호르몬의 산화 상태를 전기영동으로 나타낸 것이고.

Claims (6)

  1. 연어 성장호르몬이 발현되는 유전자 재조합 대장균 세포를 초음파로 파괴하여 우레아 용액에서 침전하는 불용성 단백질을 분리하여 6M 구아니딘 용액에 용해시킨 다음 희석시에 침전되는 단백질을 SDS용액으로 용해시킨 후 S-200수지 투과 크로마토그래피와 G-25 수지 여과 크로마토그래피를 행함을 특징으로 하는 고순도의 생물 활성도를 지닌 연어 성장호르몬의 정제 방법.
  2. 제1항에 있어서, 불용성 단백질을 분리하기 위한 우레아 용액이 NaCl 농도 1M, 5mM EDTA, 5mM 베타머캡토에탄올 및 4M 우레아를 포함하는 50mM 트리스 완충용액(pH 8.0)을 사용하는 것을 특징으로 하는 연어 성장 호르몬의 정제방법.
  3. 제1항에 있어서, 단백질을 6mM 구아니딘 용액에 용해시킨 후 3M 내지 1M 구아니딘 용액이 되도록 희석시켜 연어 성장 호르몬을 침전시킴을 특징으로 하는 연어 성장 호르몬의 정제방법.
  4. 제1항에 있어서, 연어 성장 호르몬을 용해 시키는 SDS 용액으로 2% SDS, 5mM DTT, 1mM EDTA가 포함된 50mM 트리스 완충용액(pH 8.0)을 사용함을 특징으로 하는 연어 성장 호르몬의 정제 방법.
  5. 제1항에 있어서, S-200 수지 투과 크로마토그래피 용출용액으로 0.1% SDS를 포함하는 50mM 트리스 완충용액 (pH 8.0)을 사용하는 것을 특징으로 하는 연어 성장 호르몬의 정제 방법.
  6. 제1항에 있어서, G-25 수지 투과 크로마토그래피 용출용액으로 5mM NaOH를 사용하는 것을 특징으로 하는 연어 성장 호르몬의 정제방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개되는 것임.
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