KR910016919A - 핵산주형의 특정증식방법 및 핵산의 측정방법 - Google Patents
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Abstract
내용 없음
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 실시예 1에 사용된 제1 프라이머의 뉴클레오티드 배열, 제2도는 제2프라이머에 대한 2개의 변형, 제3도는 본 발명에 따른 핵산에 대한 검출방법의 바람직한 변형.
Claims (13)
- 핵산 주형에 2개의 핵산 프라이머를 혼성화시키고, 이러한 프라이머들을 가지고서 주형에 상보적인 핵산을 형성시키고, 형성된 핵산을 주형과 유사한 다수의 핵산으로 전사시키는 핵산의 특정증식방법에 있어서, 같은 방향으로 배열되고, 주형에 상보적인 배열을 가지며, 제1프라이머로부터 떨어져있는 말단에서. 제2프라이머는 RNA폴리머라아제가 결합될 수 있는 2중바닥 배열 및 전사개시부를 호함하는 2개의 프라이머들을 가지고서 주형을 혼성화시키고, 이러한 방식으로 혼성화된 2개의 프라이머들을 이들간의 갭을 채움으로서 공유적으로 결합시켜 주형에 상보적인 핵산을 형성하고, 주형에 상보적인 상기 핵산의 전사체를 형성시키는 것을 특징으로 하는 방법.
- 핵산 주형에 2개의 핵산 프라이머를 혼성화시키고, 이러한 프라이머들을 가지고서 주형에 상보적인 핵산을 형성시키고, 형성된 핵산을 주형과 유사한 다수의 핵산으로 전사시키는 핵산주형의 검출방법에 있어서, 같은 방향으로 배열되고, 주형에 상보적인 배열을 가지며, 제1프라이머로부터 떨어진 마주보는 말단에서 제2프라이머는 전사개시부 및 RNA폴리머라아제가 결합될 수 있는 2중 가닥배열을 갖는 2개의 프라이머들을 가지고서 주형을 혼성화시키고, 이러한 방식으로 혼성화된 2개의 프라이머들을 이들간의 갭을 채움으로서 공유결합시켜 주형에 상보적인 핵산을 형성시키고, 전사체를 주형에 상보적인 상기 핵산으로부터 형성하고 이러한 전사체를 공지의 방법으로 검출하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 형성된 전사체를 프라이머를 가지고 혼성화시키기 위한 주형으로서 재사용하고, 증식방법을 반복하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 주형과 주형에 상보적인 핵산간의 혼성화를 전사체가 형성되기전에 중단하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제4항에 있어서, 혼성화가 RNaseH에 의해 중단되는 것을 특징으로하는 방법.
- 제1항 또는 2항에 있어서, DNA를 주형으로서 사용하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항 또는 2항에 있어서, RNA를 주형으로서 사용하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항 또는 2항에 있어서, 프라이머로서 혼성화하기전에 주형을 단일가닥형태로 전환시키는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항 또는 2항에 있어서, 2중가닥 DNA 주형을 하나 또는 여러개의 제한 엔도뉴클라아제를 가지고서 분열시키고 단일 가닥형태로 전환시키는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항 또는 2항에 있어서, 제 1프라이머의 이중가닥 배열이 각각 17-100상보염기의 길이를 갖는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제10항에 있어서 이중가닥의 상보적 부분들이 5-100염기의 핵산프래그먼트를 통해 결합되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제1항 또는 2항에 있어서, 제 2프라이머내 5′말단이 포스포릴화되어있고, 제1프라이머와 마주보는 이중가닥의 3′말단은 디데옥시뉴클레오티드로 끝남을 특징으로 하는 방법.
- 제11항에 있어서, 제 2프라이머내 5′말단이 포스포릴화되어있고, 제 1프라이머와 마주보는 이중가닥의 3′말단은 디데옥시뉴클레오티드로 끝남을 특징으로 하는 방법.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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