KR870005007A - 글루코오스 아이소머라아제 농축물 및 이의 제조방법 - Google Patents

글루코오스 아이소머라아제 농축물 및 이의 제조방법 Download PDF

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Abstract

내용 없음

Description

글루코오스 아이소머라아제 농축물 및 이의 제조방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

Claims (19)

  1. 용액을 함유하는 농축된 수성 폴리하이드록시 화합물에 용해된 글루코오스 아이소머라아제를 함유하는 안정한 글루코오스 아이소머라아제 농축물.
  2. 제 1항에 있어서, pH 약 5 내지 약 8에서 약 5 내지 약 20중량%의 글루코오스 아이소머라아제 및 약 30 내지 약 60중량%의 카보하이드레이트로 이루어진 농축물.
  3. 제2항에 있어서, 글루코오스 아이소머라아제 함량이 약 5 내지 약 15중량%이고, pH는 약 6 내지 약 8인 농축물.
  4. 제3항에 있어서, 약 15중량% 이하의 농도에서 염을 함유하는 농축물.
  5. 제4항에 있어서, 염이 황산암모늄 및/또는 황산마그네슘인 농축물.
  6. 제1항에 있어서, 클루코오스, 말토오스, 프락토오스, 삭카로오스, 소르비톨, 크실리톨, 또는 이의 화합물(예 : 전화당, 글루코오스 시럽 또는 이성체화된 글루코오스 시럽)에서 폴리하이드록시 화합물을 선택하는 농축물.
  7. 제2항에 있어서,50중량%의 클루코오스와 프락토오스,15중량%의 클루코오스 아이소머라아제, 5중량%의 황산암모늄 또는 황산마그네숨 및 30중량%의 물을 함유하는 농축물.
  8. 제2항에 있어서, 50중량%의 클루코오스와 프락토오스의 혼합물, 6.7중량%의 클루코오스 아이소머라아제, 3.5중량%의 황산암모늄 및 39.8중량%의 물을 함유하는 농축물.
  9. 발효시켜 수득한, 부분적으로 정제된 클루코오스 아이소머라아제에 적합한 염을 가하여 클루코오스 아이소머라아제를 결정화하고 ; 용액을 냉각시켜 클루코오스 아이소머라아제의 결정화를 촉진하고, 형성된 결정덩어리를 분리한 다음 경우에 따라 1회 또는 수회 재결정화한 다음 ; 카보하이드레이트 또는 이의 농축 수용액을 수득한 결정덩어리에 가하여 용해시킴으로써 안정한 클루코오스 아이소머라아제 농축물을 수득함을 특징으로 하여 용액을 함유하는 농축된 수성 폴리하이드록시 화합에 용해된 클루코오스 아이소머라아제를 함유하는 안정한 클루코오스 아이소머라아제 농축물을 제조하는 방법.
  10. 제9항에 있어서, 한외여과로 클루코오스 아이소머라아제를 부분적으로 정제하는 방법.
  11. 제10항에 있어서, 발효시켜 수득한 한외여과된 클루교오스 아이소머라아제 용액에 결정성 황산암모늄과 황산암모늄 수용액을 가하여 클루코오스 아이소머라아제를 결정화하고 ; 수득한 용액을 냉각시켜 클루코오스 아이소머라아제의 결정화를 촉진시키고, 형성된 결정덩어리를 분리한 다음, 결정을 물에 용해시켜 재결정화하고, 이어서 형성된 용액을 여과한 다음, 결정성 황산암모늄과 황산암모늄 수용액을 가하고, 이어서 형성된 결정덩어리를 분리한 다음 ; 수득한 결정덩어리에 결정성 프락오스를 가하여 용해시킴으로써 클루코오스 아이소머라아제의 안정한 농축물을 수득하는 방법.
  12. 제11항에 있어서, 재결정화를 1회 또는 수회 행하는 방법.
  13. 제1항에 있어서, 발효시켜 수득한, 한외여과된 클루코오스 아이소머라아제 용액에 황산마그네슘과 황산암모늄을 가하여, 클루코오스 아이소머라아제를 결정화하고 ; 용액을 냉각시켜 클루코오스 아아소머라아제의 결정화를 촉진시키고, 경사여과하여 형성된 결정을 분리한 다음, 결정에 물, 황산마그네슘 및 황산암모눔을 가하여 재결정화하고, 경사여과하여 결정을 분리한 다음, 묽은 암모니아를 가하여 pH를 6.5로 조절하고, 황산마그네슘과 황산암모늄을 가하여 한번 더 결정화함으로써 결정덩어리를 수득한 다음 ; 클루코오스와 프락토오스 뿐만 아니라 물을 결정덩어리에 가하여 용해시킴으로써 클루코오스 아이소머라아제의 안정한 농축물을 수득하는 방법.
  14. (a) 부분적으로 정제된 클루코오스 아이소머라아제 제형의 pH을 약 5.7 내지 약 8.0으로 조절하고 ; (b) 제형을 약 16℃ 또는 그 이하로 냉각시킨 다음 ; (c) 제형 ℓ당 약 50 내지 약 170g의 농도로 황산암모늄 및/또는 황산마그네슘을 가하고 ; (d) 혼합물의 빙점 부근까지 냉각시켜 결정형성을 촉진시킴을 특징으로 하는 클루코오스 아이소머라아제의 결정화방법.
  15. 제14항에 있어서, 용액으로부터 결정을 분리하는 단계를 포함하는 방법.
  16. 제15항에 있어서, 분리된 결정체를 약 20 내지 30℃에서 결정덩어리의 약 4 내지 10배량의 물로 용해시켜 결정화를 반복한 다음, 제14항의 단계들을 반복하는 방법.
  17. 제14항에 있어서, (c)단계를 단계적으로 행한 다음, 고체 및/또는 액체 형태로 황산암모늄 및/또는 황산마그네슘을 가하는 방법.
  18. 제14항에 있어서, (d)단계를 (c)단계와 부수적으로 행하는 방법.
  19. 용해된 미생물 세포를 한외여과하여 수득한 클루코오스 아이소머라아제 제형을 제공하고 ; pH를 약 7.0으로 조절한 다음 ; 제형을 약 16℃ 또는 그 이하로 냉각시키고 ; 혼합물을 이의 빙점까지 냉각시키는 약 2 내지 약 4시간 동안에 걸쳐 제형 ℓ당 약 50 내지 170g의 양으로 황산암모늄 및/또는 황산마그네슘을 가하여 결정형성을 촉진시킴을 특징으로 하는 클루코오스 아이소머라아제의 결정화방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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