KR870001711B1 - 발효법에 의한 5'-이노신산의 제조방법 - Google Patents

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제일제당 주식회사
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Abstract

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Description

발효법에 의한 5'-이노신산의 제조방법
본 발명은 5'-이노신산의 생산능을 가진 브레비박테리움 암모니아 게네스를 아스파라긴산(aspartic acid) 또는 글루탐산(glutamic acid)중 1종 이상이 함유된 배지에 배양하여 발효법에 의해 5'-이노신산을 제조하는 방법에 관한 것이다.
5'-이노신산은 5'-구아닐산과 더불어 정미성 물질로써 글루타민산나트륨과 배합사용시 맛의 상승효과를 내기 때문에 더욱 각광을 받고 있는 핵산계 조미료이다.
종래 브레비박테리움 암모니아게네스를 이용하여 5'-이노신산을 발효생산하는 경우에는 적당한 당질원료, 무기질소원, 균의생육에 필요한 각종 무기염(인산칼리, 황산마그네슘, 황산칼륨, 황산철, 황산아연, 황산망간 등) 아미노산원 및 비타민류 또는 이들을 함유한 육엑기스, 이스트 엑기스, CSL(Corn Steep Liquor) 등과 균주의 요구성에 따라 필요한 핵산 또는 핵산함유물질이 적당히 함유된 배지를 이용하여 왔다.
그러나, 본 발명자들은 5'-이노신산의 생산성 향상을 위해 배지보강 방법을 연구해 오던중 5'-이노신산의 구조식에서 퓨린 염기 부분의 1번 질소의 선구물질이 아스파라긴산이며, 글루탐산은 미생물의 균체내 효소인 트랜스아미나제에 의해 아스파라긴산으로 변하여 퓨린 염기부분의 1번 질소의 선구물질로 작용한다는 사실에 착안하여, 종래 이용되어온 발효 배지에 아스파라긴산 또는 글루탐산중 1종 이상을 첨가하여 브레비 박테리움 암모니아게네스를 접종 배양시 5'-이노신산의 축적량이 현저히 증가하고, 발효시간이 단축된다는 점을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.
다음의 실시예에서 본 발명을 구체적으로 설명한다.
[실시예 1]
사용균주 : 브레비박테리움 암모니아게네스 ND 16850(KFCC 10003)
종 배 지 : 포도당 50g, 육즙 10g, 펩톤 5g, 효모엑기스 5g, 염화나트륨 2.5g, 증류수 1l, pH7.3
발효배지 : 포도당 200g, 인산제 1, 제2칼륨 각 20g, 황산망간 5mg, 황산마그네슘 20g, 황산철 10mg, 황산아연 1mg, 효모엑기스 5g, 대두박가수분해액 20g, 타아민 염산염 5mg, 비오틴 30μg, 아데닌 30mg, 크산틴(구아닌) 30mg, 증류수 1l, 여기에 아스파라긴산 및 글루탐산을 1종 이상 첨가하고 살균전 pH를 8.5로 조정하였다.
배양방법 : 미리 공살균된 500ml 진탕응 삼각플라스크에 상기 종배지 30ml를 분주하고 115℃에서 15분간 가압살균한 후 ND16850을 접종하여 30℃에서 24시간 배양한 종배양액 90ml를 발효배지 900ml를 사입한 2.6l 소형발효조에 식균하고 900rpm, 1vvm의 조건으로 30℃에서 배양하였다.
배양중 pH는 암모니아수로 7.0으로 유지하였다.
5'-이노신산 축적량 : 배양 완료액중 5'-이노신산의 축적량은 표 1과 같다.
[표 1]
Figure kpo00001
[실시예 2]
사용균주 : 브레비박테리움 암모니아게네스 MP 77519 (KFCC 10005)
종 배 지 : 포도당 5%, 펩톤 0.5%, 육즙 0.5%, 효모엑기스 1%, 염화나트륨 0.25%, pH 7.2
발효배지 : 인산제 1, 제2칼륨 각 2%, 황산마그네슘 2%, 염화칼슘 0.01%, 황산철 10mg/l, 황산망간 1mg/l, 황산아연 1mg/l, 대두박가수분해물 5%, 효모엑기스 0.5%, 비오틴 30μg/l, 티아민염산염 5mg/l, 아데닌 50mg/l, pH 8.5의 기본배지에 과당 및 포도당 20% 을첨가하고 아스파라긴산 및 글루탐산을 1종 이상 첨가하였다.
발효방법 : 상기 종배지 40ml를 500ml 진탕용 삼각플라스크에 분주하고 상법에 따라 가압살균한 후 MP 77519 균주를 접종하고 30℃에서 24시간 진탕 배양하여 종배양액으로 하였다.
발효배지 900ml를 2.6l 소형발효조에 사입하고 115℃에서 30분간 가압살균하여 종배양액 80ml를 식균한 다음 900rpm, 1vvm의 조건으로 30℃에서 배양하였다.
배양중 pH는 암모니아수 7.0로 유지하였다.
5'-이노신산 축적량 : 배양완료액중 5'-이노신산의 축적량은 표 2와 같다.
[표 2]
Figure kpo00002
[실시예 3]
시용군주 : 브레비박테리움 암모니아 게네스 UD-11225(아데닌, 구아닌 요구주)
종 배 지 : 실시예 1과 동일
발효배지 : 황산망간 2.5mg 첨가외에는 실시예 1과 동일
배양방법 : 실시예 1과 동일
5'-이노신산의 축적량 : 배양완료액중의 5'-이노신산의 축적량은 표 3과 같다.
[표 3]
Figure kpo00003
[실시예 4]
사용균주 : 브레비박테리움 암모니아게네스 E-10068(아데닌 요구주)
종 배 지 : 포도당 5%, 육즙 0.5%, 펩톤 0.5%, 효모엑기스 1%, 염화나트륨 0.25%, pH7.3
발효배지 : 포도당 20%, 인산제1,제2칼륨 각 2%, 황산마그네슘 2%, 염화칼륨 0.01%, 황산망간 1mg/l, 황산철 10mg/l, 황산아연 1mg/l, 아데닌, 구아닌 각각 30mg/l, 비오틴 30 μg/l, 티아민 염산염 5mg/l에 아스파라긴산 및 글루탐산을 1종 이상 첨가하고 살균전 pH를 8.5로 조정하였다.
배양방법 : 실시예 1과 동일
5'-이노신산 축적량 : 배양 완료액중 5'-이노신산의 축적량은 표 4와 같다.
[표 4]
Figure kpo00004
[실시예 5]
사용균주 : 브레비박테리움 암모니아게네스 U-3014(아데닌, 알라닌 요구주)
종 배 지 : 실시예 4와 동일
발효배지 : 실시예 4의 발효배지에 알라닌 30mg/l을 첨가하였다.
배양방법 : 실시예 1과 동일
5'-이노신산의 축적량 : 배양완료액중 5'-이노신산의 축적량은 표 5와 같다.
[표 5]
Figure kpo00005
[실시예 6]
사용군주 : 브레비박테리움 암모니아게네스 UD11225(아데닌, 구아닌 요구주)
종 배 지 : 실시예 4와 동일
발효배지 : 실시예 4와 동일
배양방법 : 실시예 1과 동일
5'-이노신산 축적량 : 배양 완료액중 5'-이노신산의 축적량은 표 6과 같다.
[표 6]
Figure kpo00006

Claims (1)

  1. 5'-이노신산 생산능이 있는 브레비박테리움 암모니아 게네스를 아스파라긴산 또는 글루탐산중 1종 이상이 함유된 배지에서 배양하여 발효액중에 5'-이노신산을 직접 축적시키는 것을 특징으로 하는 발효법에 의한 5'-이노신산의 제조방법.
KR1019850004079A 1985-06-08 1985-06-08 발효법에 의한 5'-이노신산의 제조방법 KR870001711B1 (ko)

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