KR860009128A - 액상 효소 생성물의 회수방법 - Google Patents
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Abstract
내용 없음
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
Claims (29)
- (a) 무독성 침전제를 효소-함유 용액에 가하여, 용액에 거의 불용성이고 이로부터 침전되는 효소 또는 효소 착화합물-함유 케이크를 형성시키고; (b) 효소 또는 효소 착화합물-함유 케이크를 용액으로부터 분리시키며; (c) 케이크를 폴리올 용매와 접촉시켜 케이크로부터 효소 또는 효소 착화합물을 가용화하여 효소 또는 효소 착화합물의 폴리올 용액을 수득함으로써, 액상 효소 생성물을 회수함을 특징으로 하여, 효소-생성 미생물로부터 수득된 효소-함유 용액에 의해 제공되는 효소 생성물을 회수하는 방법.
- 제1항에 있어서, 단계(a)전에 적어도 두 가지 요소에 의해 효소-함유 용액을 농축시키는 단계를 추가로 포함하는 방법.
- 제2항에 있어서, 단계(b)에서의 분리를 여과에 의해 수행하는 방법.
- 제3항에 있어서, 단계(b) 후에, 과량의 모액을 제거하고, 케이크를 수세하여 통풍시켜 효소 또는 착화합물을 함유하는 비교적 더 건조한 케이크를 수득하는 단계(b′)를 포함하는 방법.
- 제1항에 있어서, 단계(c)에서 폴리올 용매와의 접촉을, 효소에 대한 조-용매와 혼합시킨 적어도 20용적％의 폴리올을 함유하는 용액을 필터 케이크를 통하여 적어도 1회 순환시켜 수행하는 방법.
- 제1항에 있어서, 단계(c)에서 폴리올 용매와의 접촉을, 효소에 대한 조-용매와 혼합시킨 적어도 20용적％의 폴리올을 함유하는 용액을 사용하여 케이크를 재-슬러링(re-slurrying)시켜 수행하는 방법.
- 제5항 또는 6항에 있어서,조-용매가 아세톤, 메틸에틸케톤, 메탄올, 에탄올, 1-프로판올, 이소프로판올, 3급-부탄올, n-부탄올, 디메틸 포름아미드, 디메틸 설폭사이드, 에틸렌글리콜의 모노 에틸에테르, 에틸렌글리콜의 모노메틸에테르, 물 또는 이들의 혼합물인 방법.
- 제1항에 있어서, 단계(c)에서 폴리올 용매와의 접촉을 거의 100％ 폴리올을 사용하여 수행하는 방법.
- 제8항에 있어서, 물 또는 유기용매를 사용하여 용적/용적 기준으로 효소 또는 효소 착화합물의 폴리올 용액 99 내지 30％ 및 물 또는 유기용매 1 내지 70％가 되도록 희석시킴으로써 효소 또는 효소 착화합물의 폴리올 용액을 제형화하는 단계(d)를 추가로 포함하는 방법.
- 제4항, 5항, 6항 또는 8항에 있어서, 효소 또는 효소 착화합물의 폴리올 용액을 처리하여, 용매를 거의 함유하지 않는 효소 생성물을 수득하는 단계(d)를 추가로 포함하는 방법.
- 제10항에 있어서, 추가의 처리가 한외여과를 포함하는 방법.
- 제10항에 있어서, 추가의 처리가 결정 형태의 효소를 침전시킨 다음, 여과 또는 원심분리하여 액을 제거하는 것을 포함하는 방법.
- 제1항에 있어서, 효소-생성 미생물이 바실루스 리케니포르미스(Bacillus licheniformis)인 방법.
- 제1항에 있어서, 효소를 프로테아제류, 아밀라제류, 아밀로글루코시다제류, 리파제류 및 옥시다제류 중에서 선택하는 방법.
- 제5항, 6항 또는 8항에 있어서, 사용된 폴리올이 저분자량 폴리에틸렌 글리콜, C2-C8폴리올 또는 이들의 혼합물인 방법.
- 제15항에 있어서, 폴리올이 글리세롤, 에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 약 900이하여 저분자량을 갖는 폴리에틸렌 글리콜, 또는 이들의 혼합물인 방법.
- 제1항에 있어서, 침전제가 염 또는 저분자량 유기용매인 방법.
- 제17항에 있어서, 유기 용매가 아세톤, 메틸에틸케톤, 메탄올, 에탄올, 1-프로판올, 이소프로판올, 3급-부탄올, n-부탄올, 디메틸 포름아미드, 디메틸 설폭사이드, 에틸렌글리콜의 모노 에틸에테르, 에틸렌글리콜의 모노 메틸에테르 또는 이들의 혼합물인 방법.
- 제17항에 있어서, 염을 제 I 족 금속염, 제Ⅱ 족 금속염, 제 I 족 또는 Ⅱ 족 금속염의 상응하는 암모늄염 및 이들의 혼합물 중에서 선택하는 방법.
- 제19항에 있어서, 염의 음이온가가 2가 이상인 방법.
- 제20항에 있어서, 염이 황산나트륨, 황산암모륨, 인산나트륨, 인산암모늄, 시트르산나트륨 또는 이들의 혼합물인 방법.
- 제19항에 있어서, 효소 또는 효소 착화합물의 폴리올 용액을 냉각시켜 과량의 염을 침전시킴으로써 폴리올 용액으로부터 회수하는 단계를 추가로 포하하는 방법.
- 제22항에 있어서, 효소가 알칼리성 프로테아제이고, 폴리올 용매와 접촉시키는 동안 pH를 대략 6.0 내지 6.4로 조절하는 방법.
- 제1항에 있어서, 효소-함유 용액의 용적과 폴리올 용매의 용적과의 비가 30:1 내지 2:1의 범위인 방법.
- 제3항에 있어서, 케이크 내에 소량의 여과 보조제를 혼합하여 여과를 촉진시키는 단계를 추가로 포함하는 방법.
- (a) 영양성장 배지를 여과하거나 원심분리하여 고체를 제거하고 효소-함유 용액을 얻고; (b) 농축시켜 농축 용액을 제조하며; (c) 염 및 저분자량 유기용매로 이루어지는 그룹중에서 선택된 무독성 침전제를 농축 용액에 가하여, 농축 용액에 거의 불용성이며 그로부터 침전된 효소 또는 효소 착화합물-함유습윤 케이크를 형성시키고; (d) 습윤 케이크로부터 과량의 모액을 제거하여 비교적 더 건조한 케이크를 수득하며; (e) 폴리올 용매를 케이크를 통하여 적어도 1회 순환시킴으로써 케이크로부터 효소 또는 효소 착화합물을 용해시켜 효소 또는 효소 착화합물의 폴리올 용액[여기에서, (b)에서의 농축된 효소-함유 용액의 용적과 폴리올 용매의 용적과의 비는 30:1 내지 2:1이다]을 수득함을 특징으로 하여, 수성영양 성장 배지에서 효소-생성 미생물을 발효시켜 수득된 효소-함유 용액에 의해 제공되는 효소 생성물을 회수하는 방법.
- 제26항에 있어서, 침전제가 염으로부터 선택되며, 효소 또는 효소 착화합물의 폴리올 용액을 실온 이하로 냉각시켜, 과랑의 염을 침전시킴으로써 폴리올 용액으로부터 회수하는 단계(e′)를 추가로 포함하는 방법.
- 제27항에 있어서, 염이 황산나트륨, 황산암모늄, 인산나트륨, 인산암모늄, 시트르산나트륨 또는 이들의 혼합물이며, 순환되는 폴리올 용매가 프로필렌 글리콜을 적어도 20용적％ 함유하는 방법.
- 제28항에 있어서, 효소 또는 효소 착화합물의 폴리올 용액을 거의 모든 용매가 제거되도록 처리하여, 용매를 거의 함유하지 않는 효소 생성물을 수득하는 단계(f)를 추가로 포함하는 방법.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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