KR830000329B1

KR830000329B1 - 스피로-옥사졸리딘디온의 제조방법

Info

Publication number: KR830000329B1
Application number: KR1019790002850A
Authority: KR
Inventors: 코오렌슈누 로드니
Original assignee: 테렌스 제이. 겔라거; 화이자 인코포레이티드
Priority date: 1979-08-21
Filing date: 1979-08-21
Publication date: 1983-03-04

Abstract

내용 없음.

Description

스피로-옥사졸리딘디온의 제조방법

본 발명은 당뇨병(diabetes mellitus)의 만성합병증의 치료에 유효한 다음 일반식(I)의 신규 스피로-옥사졸리딘디온 및 그의 약학적으로 무독한 염의 제조방법에 관한 것이다.

상기 일반식에서,

X는 산소와 유황중에서 선택되고;

n은 1 또는 2이며;

R은 수소, 탄소수 1 내지 4의 알킬, 벤질 및 단일치환된 벤질(치환기는 클로로, 브로모,플루오로, 하이드록시,탄소수 1 내지 3의 알킬 및 탄소수 1 내지 3의 알콕시 중에서 선택됨)로 이루어진 그룹중에서 선택되며;

R₁,R₂및 R₃는 각각 수소, 클로로, 브로모, 플루오로, 탄소수 1 내지 3의 알킬, 페닐 및 단일치환된 페닐(치환기는 클로로, 브로모, 플루오로, 하이드록시, 탄소수 1 내지 3의 알킬 및 탄소수 1 내지 3의 알콕시중에서 선택된다)로 이루어진 그룹중에서 선택된다.

바람직한 화합물의 한 종류로 X가 산소인 화합물 특히 n이 1인 그런 화합물을 들수 있다.

R이 수소이며 R₁,R₂및 R₃가 각각 수소, 클로로,브로모 및 플루오로 중에서 선택되면 바람직하다. 이들중 특히 바람직한 경우는 R₁이 수소, 클로로, 브로모 또는 플루오로(클로로가 가장 바람직하다)인 화합물을 포함하여 R₂및 R₃가 각각 수소인 화합물이다. 또한 R₁이 클로로이고, R₂가 수소이며, R₃는 클로로인 경우 및 R₁이 클로로이고 R₂는 수소이며 R₃는 메틸인 화합물도 바람직하다.

흥미가 있는 또 다른 화합물은 X가 유황, 특히 n이 1인 화합물이다. R은 수소이고 R₁, R₂및 R₃가 각각 수소, 클로로 및 플루오로중에서 선택되면 바람직하다. 이들중에서 특히 바람직한 화합물은 R₂와 R₃가 각각 수소인 화합물이며 R₁이 수소, 클로로 및 플루오로중 하나인 화합물도 포함된다.

과거에도 보다 신규하며 유효한 당뇨병 치료제를 개발하려는 시도가 있어 왔다. 일반적으로 신규한 유기화합물, 특히 설포닐 우레아를 합성하여 이를 경구투여시 혈당량을 현저하게 감소시키는지를 측정하였다. 그러나 이들 유기화합물이 당뇨병의 만성 합병증인 당뇨병성 백내장, 신경병 및 망막증등을 방지하거나 완화시킬 수 있는 효과에 대해서는 별로 알려진 바가 없다. 미합중국 특허 제 3,821,383호에는 1,3-디옥소-1H-벤즈[d,e]-이소퀴놀린-2(3H)-아세트산과 이들의 유도체와 같은 알도스 환원효소 억제제가 이러한 합병증을 치료하는데 효과가 있음을 밝히고 있다. 이와 같은 알도스 환원효소 억제제는 사람과 기타동물에 있어서, 글루코스 및 갈락토스와 같은 알도스가 상응하는 플리올, 예를들면 슬비톨 및 갈락티톨과 같은 화합물로 환원되는 것을 조절하는데 주역할을 하는 알도스환원 효소의활성을 억제함으로써 작용을 나타낸다. 이렇게하여 갈락토스 혈증(galactosemia) 환자의 수정체중에 갈락티톨이 축적되는 것을 또한 여러 당뇨병의 말초신경대 및 신장의 슬비톨이 불필요하게 축적되는 것을 방지하거나 감소시킬 수 있다. 따라서 이러한 화합물은 안구의 수정체의 폴리올이 존재함으로써 야기되는 눈의 혼탁을 수반하는 백내장과 같은 만성 당뇨병의 합병증을 조절하는 알도스 환원효소 억제제로서 치료적인 가치가 있다.

본 발명은 당뇨병성 백내장 및 신경병 같은 당뇨병의 만성합병증 치료에 유용한 신규 스피로-옥사졸리딘디온의 제법에 관한 것으로 그 제조 중간체, 그런 화합물을 함유하는 약학조성물 및 이들 화합물을 사용하는 방법도 포함한다. 따라서, 본 발명은 일반식(Ⅰ) 화합물의 제조에 유용한 중간체인 일반식(Ⅱ)의 화합물을 포함한다.

(상기식에서 R₁,R₂,R₃,X 및 n는 전술한 바와 같고, R₄는 탄소수 1 내지 4의 알킬, 벤질 및 단일 치환된 벤질(치환기는 클로로, 브로모, 플루오로, 하이드록시, 탄소수 1 내지 3의 알킬기 및 탄소수 1 내지 3의 알콕시중에서 선택된다)로부터 선택된다).

본 발명의 또 다른 중간체로는 다음 일반식의 화합물이 있다.

(상기 일반식에서 R₁,R₂,R₃,R₄,X 및 n은 전술한 바와 같다).

일반식(Ⅱ) 및 (Ⅲ)인 바람직한 화합물은 본 발명의 바람직한, 즉 R₁,R₂,R₃,R₄,X 및 n이 전술한 바와 바람직한 의미를 갖는 스피로옥사졸리딘디온의 제조에 유용하다. R₄가 탄소수 1 내지 3이면 바람직하며, 에틸이 가장 바람직하다.

본 발명의 중간체로는 또한 일반식(Ⅳ) 화합물들을 들수 있다.

(상기 식에서 x 및 n은 전술한 바와 같으며 R'₁,R'₂및 R₃'는 각각 수소, 클로로 및 탄소수 3의 알킬중에서 선택된다).

x가 산소이며, n은 1이고 R₁',R₂' 및 R₃'는 각각 수소, 클로로 또는 메틸인 화합물이 바람직하다. 이들중에서 바람직한 화합물은 R₁'가 클로로이며 R₂' 및 R₃'가 각각 수소인 경우, R₁' 및 R₃'가 각각 클로로이고 R₂'가 수소인 경우이다.

X 가 유황이고 n가 1인 화합물중 바람직한 화합물은 R₁'가 염소이며 R₂'와 R₃'가 각각 수소인 화합물이다.

본 발명은 치료 유효량의 일반식(Ⅰ)화합물을 당뇨병환자(및 동물)에 투여하여 백내장, 신경병 또는 망막증과 같은 당뇨병-관련 합병증을 방지하거나 경감시키는 신규의 치료방법 또한 제공한다.

또한 본 발명에는 백내장, 신경병 또는 망막증과 같은 당뇨병-관련 합병증을 방지하거나 경감시키는데 유효한 양의 일반식(Ⅰ)화합물 및 약학적으로 허용되는 담체로 이루어지는 약학조성물 역시 포함된다.

일반식(Ⅰ)의 신규한 스피로-옥사졸리딘디온은 일반식(Ⅴ)인 적절하게 치환된 케톤으로부터 제조된다.

(상기식에서 R₁,R₂,R₃,x 및 n은 전술한 바와 같다).

그런 화합물은 쉽게 구할 수 있거나 통상적인 방법으로 합성할 수 있다.

일반식(Ⅰ)화합물의 제조반응 연쇄과정은 반응도식 A에 나타나 있으며 상세한 내용은 다음과 같다.

후술하는 중 사용된 명명법은 n이 1인 화합물에 대한 것이다.

그러나 n이 2인 유사화합물 역시 적절한 케톤을 출발물질로 하여 후술하는 바와 같은 반응에 의해 생성할 수 있다.

케톤(1a)를 처음에 트리알킬실릴시아나이드인 (R')₃SiCN과 작용시켜 4-시아노 -4-트리알킬실릴옥시유도체(2a)를 생성시킨다. 이 반응에 사용하기에 바람직한 트리알킬실릴시아나이드는 트리메틸실릴시아나이드이며, 각 알킬그룹이 탄소수 1 내지 4인 저급 트리알킬실릴 시아나이드도 사용될 수 있다. 이 반응은 아연할라이드, 알미늄할라이드나 보론트리플루오로라이드 특히 요드화아연과 같은 루이스산 촉매존재하에 이루어진다. 온도범위는 일반적으로 약 0 내지 약 50℃이며, 약 0°내지 20℃가 바람직하며, 불활성 유기용매 특히 디에틸에테르, 디메톡시에탄, 테트라하이드로푸란, 디옥산과 같은 에테르류 중에서 이루어진다.

다음에 화합물(2a)를 알콜용매인 R₄OH 중에서 산과 반응시켜서 알킬 4-하이드록시-4-카복스이미데이트 유도체(4)로 전환시킨다. 적절한 산으로서는 특히 염화수소 같은 수소 할라이드가 있다.

알콜인 R₄OH로는 탄소수 1 내지 4의 저급알칸을, 벤질알콜 또는 클로로, 브로모, 플루오로, 하이드록시, 탄소수 1 내지 3의 알킬기 및 탄소수 1 내지 3의 알콕시기중에서 선택된 치환기로 치환된 벤질알콜이 있으며, 반응은 일반적으로 약 -10°내지 약 25℃, 바람직하게는 약 0°내지 10℃에서 이루어진다.

4-하이드록시-4-카복스아미데이트 유도체(4)는 출발물질인 케톤체(1a)로 부터 시아노히드린 유도체(3a)를 거쳐 제조될 수도 있다. 이 후자의 화합물은 케톤과 시안화수소액을, 피페리딘, 피리딘 등과 같은 염기의 존재하에 약 0°내지 50℃, 바람직하게는 약 0°내지 10℃ 에서 스토우톤법(J.A.C.S. 63. 2376(1941))에 따라 반응시켜 제조한다. 전술한 바와 같은 (2a)를 (4)로 전환시키는 방법에 준하여서 알콜용매중에서 수소 할라이드를 사용하여 시아노히드린을 4-하이드록시-4-카복스이미데이트 유도체 (4)로 전환시킨다.

시아노히드린(3a)는 4-시아노-4-트리알킬실릴옥시 유도체(2a)로 부터도 제조할 수 있으며, 수소할라이드 및 적절한 알콜과 작용시켜 전술한 바와 같이 (2a)를 (4)로 전환시키는 초기단계에서 중간체로 분리될 수 있다.

4-하이드록시-4-카복스이미데이트 유도체(4)는 몇가지 방법으로 직접 스피로 -옥사졸리딘-2,4-디온(6a)로 전환될 수 있다. 어느 경우에나 스피로-옥사졸린-2- 온(5)가 중간체로 생성되며 필요시, 반응액으로 부터 분리될 수 있다. 그러나 이와 같은 중간체(5)를 분리하지 않고 직접(4) 화합물을 (6a)로 전환시키는 것이 바람직하다. 즉 4-하이드록시-4-카복스 이미데이트를 트리에틸아민이나 각 알킬그룹이 탄소수 1 내지 4인 트리알킬아민과 같은 염기존재하에 디에틸에테르, 테트라하이드로푸란, 디메톡시에탄, 디옥산과 같은 불활성 유기용매내에서 포스겐과 반응시킨다. 보통 포스겐을 약 -10°내지 약 10℃의 온도에서 약 15 내지 75분간 반응액중으로 통해 주고 계속해서 용액을 약 20°내지 50℃, 바람직하게는 실온에서약 12 내지 48시간 동안 교반시키면, 스피로-옥사졸린-2-온(5)가 주로 생성된다. 이 중간체는, 약 -10°내지 약 10℃에서 약 15 내지 75분간 포스겐을 더 작용시키고 이어서 실온에서 12 내지 48시간 더 교반하거나, 탄산칼륨이나 탄산나트륨 같은 알칼리금속 탄산염, 또는 탄산암모늄을 중간체 (5)의 용액에 가하고 약 15°내지 약 50℃의 온도에서, 바람직하게는 실온에서, 약 6 내지 24시간동안 교반시켜 소기의 스피로-옥사졸리딘-2,4-디온으로 전환시킬 수 있다.

목적하는 스피로-옥사졸리딘-2,4-디온은 4-하이드록시-4-카복스이미데이트 유도체(4)를 알킬그룹이 탄소수 1 내지 4인 알킬 할로포르메이트, 바람직하게는 에틸클로로 포르메이트와 작용시켜도 제조할 수 있다. 이 반응은 일반적으로 중간체(4)를 피리딘과 같은 불활성용매 중에서 알킬 할로포르메이트와 함께 약 -10°내지 약 15℃, 바람직하게는 약 0℃에서 약 30분 내지 약 2시간 동안 교반시킨 다음 용액을 피리딘중에서 더 고온인 약 50 내지 150℃, 바람직하게는 약 90°내지 120℃로 예를들면 환류 온도하에 약 2 내지 6시간 가열하여서 이루어진다. 필요하면 스피로-옥사졸리딘-2-온 중간체(5)는 비교적 단시간, 예를들면 약 1시간 용액을 가열한 후 초기반응혼합물로부터 분리할 수 있다.

스피로-옥사졸리딘-2,4-디온은 또한 중간체(4)를 1,1'-카보닐디이미다졸과 반응시켜 제조할 수도 있는데, 이 반응은 일반적으로 약 50℃ 또는 150℃, 바람직하게는 약 80℃ 내지 110℃에서, 그 자체로 또는 디옥산, 테트라하이드로푸란, 디메톡시에탄, 디메틸에테르 같은 불활성 용매중에서, 약 12내지 36시간에 걸쳐 이루어진다.

필요하면, 단지 비교적 단시간, 예를들어 약 30분 내지 약 90분간 가열하여 중간체인 스피로-옥사졸린-2-온(5)를 수득할 수 있다.

본 발명의 치환된 스피로-옥사졸리딘-2,4-디온을 제조하는 다른 방법이 반응도식 B에 나와 있으며 자세한 내용은 다음과 같다. 후술하는 가운데 사용된 명명법은 n이 1인 화합물에 대한 것이다. 그러나 n이 2인 유사화합물도 적절한 케톤을 출발물질로 하여 다음에 기술한 바와 같이 제조될 수도 있다. 출발물질인 일반식(Ⅰb)케톤중의 R₁,R₂및 R₃은 수소, 클로로 및 탄소수 1내지 3인 알킬이며 x 및 n은 전술한 바와 같다.

반응의 첫단계는, (1a)를 각각 (2a) 및 (3a)로 전환시키는 반응에서 전술한 바와 같은 조건과 시약을 사용하여 4-시아노-4-트리메틸실릴옥시 유도체(2b)나 시아노히드린(3b)를 형성하는 반응이다. 중간체(2b)와 (3b)를 약 0°내지 약 30℃의 수용액 중에서 농염산이나 황산과 같은 산으로 처리하여 아미드(7)로 전환시킨다. 예를들면 무수염화 수소를 약 0 내지 5℃에서 약 5 내지 30분간 (2b) 또는 (3b)의 농염산 용액에 통해주고, 약 15℃ 내지 30℃에서 약 6 내지 24시간 교반시켜 반응을 수행할 수 있다.

아미드(7)을 n-부탄올과 같은 탄소수 1 내지 6의 노말 알칸올용매중에서 나트륨 t-부톡사이드나 칼륨 t-부톡사이드와 같은 알카리금속 알콕사이드 존재하에, 디에틸 카보네이트와 같은 디알킬카보네이트와 반응시켜, 소기의 스피로-옥사졸리딘-2,4- 디온(6b)로 전환시킬 수 있다. 이 반응은 일반적으로 반응혼합물을 70°내지 150℃, 지바람직하게는 약 100°내지 125℃로 약 12 내지 72시간 동안 가열하여서 이루어진다.

아미드화합물(7)을 스토우톤법(J.A.C.S 63,2376(1941))에 따라 에틸 클로로포르메이트와 반응시켜 스피로-옥사졸리딘-2,4-디온으로 전환시킬 수도 있다.

일반식(Ⅰ)의 화합물(여기에서 R은 알킬, 벤질 혹은 치환벤질)은 R이 수소인 화합물에, 이 분야에 널리 알려진 알킬화반응에 의해 목적 치환기를 도입시켜 제조한다. 이 화합물들은 도표 A의 4-하이드록시-4-카복스이미데이트(4)를 유사한 방법으로 반응시켜 상응하는 N-알킬 또는 N-벤질치환화합물을 생성하고, (4)의 (6a)로의 전환시에 기술된 것처럼 N-치환스피로-옥사졸리딘-2,4-디온으로 전환시켜 제조할 수도 있다.

전술한 바와 같이 제조한 본 발명의 스피로-옥사졸리딘-2,4-디온은 통상적인 방법, 예를들어 용매 증발에 이어 에테르 및 클로로포름으로 추출하고 톨루엔 또는 유사한 방향족 용매로 부터의 재결정에 의해 반응매질로부터 쉽게 분리할 수 있다.

약학적으로 허용되는 염은 R이 수소인 일반식(Ⅰ)화합물로부터 통상적 방법에 의해 쉽게 제조할 수 있다. 따라서, 이들 염은 스피로-옥사졸리딘-2,4-디온을 목적으로 약학적으로 허용되는 양이온의 수용액으로 처리하고 생성용액을 바람직하게는 감압하에 증발 건고시켜 쉽게 제조할 수 있다. 또는 스피로-옥사졸리딘-2,4-디온의 저급알키노산 용액을 목적 금속의 알콕사이드와 혼합하고 이어서 용액을 증발건고시켜 제조할 수도 있다. 이 목적을 위해 적절한 약학적으로 허용되는 양이온에는 칼륨, 나트륨, 암모늄 칼슘 및 마그네슘이 포함되나, 여기에 국한되진 않는다.

본 발명의 신규한 스피로-옥사졸리딘-2,4-디온은 하나의 비대칭 중심을 가지므로 광학이성 현상을 나타낸다. 원한다면 전술한 방법으로 생성된 스피로-옥사졸리딘-2,4-디온의 라세미체를 보편적으로 분할법을 써서 d-및 1-이성체로 분할할 수 있다. 예를들면 6-클로로-스피로-04H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5')옥사졸리디노-2',4'-디온의 (+)이성체 부가체를 선택적으로 생성시키기 위해서는 신코니딘을 사용할 수 있다. (+)- 이성체는, 분리된 부가체를 염산과 같은 광산으로 처리하고 에틸아세테이트와 같은 유기용매로 추출하여 쉽게 얻을 수 있다. (-)-이성체도 (+)-이성체에 대해 선택적으로 생성된 부가체를 제거한 후 그 모액을 얻을 수 있다. (-)이성체는 또한 1-암페타민으로 부가체를 생성시키고, 이를 산과 반응시켜 유리상태로 수득할 수 있다. 6-클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5')-옥사졸리딘]-2',4'-디온과 6,8-디클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5') 옥사졸리딘]-2',4'-디온의 1-이성체(즉 좌선성을 나타내는 이성체)는 알도스 환원효소 억제제로서 특별한 관심을 끄는 화합물이다.

원한다면 d-혹은 1-배위의 광학이성체를 A.K. Boss법(Tetrahedron Letters 1973, 1619)과 유사한 방법으로 상응하는 에피머를 전환시킬 수 있다. 이에 따르면 전술한 분할방법으로 수득한 광학 이성체를 먼저,수산화나트륨이나 수산화칼륨 같은 알카리금속 수산화물등의 염기로 약 0 내지 100℃에서 물, 알콜, 에테르(예 : 디옥산) 또는 이들의 혼합용매 같은 용매중에서 처리하면, 스피로-옥사졸리딘이 처음 스피로-옥사졸리딘 디온과 같은 배위를 갖는 전구물질인 4-하이드로록시-카복스아미드(반응도표 B에서 일반식 7로 표시됨)로 전환된다. 이 카복스아미드(7)을 예를들면 트리페닐포스핀 등의 트리아릴포스핀과 같은 3가의 인화합물 존재하의 디에틸아조디카복실레이트 또는 그의 다른 저급알킬 유사체 같은 디알킬아조아디카복실레이트, 및 포름산이나 벤조산과 같은 카복실산과 반응시킨다. 이 반응은 일반적으로 테트라하이드로푸란과 같은 불활성 유기용매중에서 약 0 내지 150℃에서 수행된다.

이 반응으로 생성된 목적물은 상응하는 에피머성 4-하이드록시-카복스아마이드 에스테르 즉, 4-위치가 에피머화된 일반식(7)인 카복스아미드의포름산 혹은 벤조산 에스테르이다. 에스테르기를 알카리금속수산화물과 같은 염기로 처리하여 가수분해시켜서 4-위치에서 에피머화된 일반식(7)의 4-하이드록시-카복스아미드(즉, 처음에 분할된 스피로-옥사졸리딘디온과 반대의 배위를 갖는)를 얻는다. 에피머화된 4-하이드록시-카복스아미드를 전술한 화합물(7)의 (6b)로의 전환 방법으로 처음의 스피로-옥사졸리딘디온의 에피머로 전환시킨다. 라세미화는 상기의 반응연쇄 과정도중 다소간 일어날 수 있다. 원하는 광학 이성체는 전술한 분할법을 써서 얻을 수 있다. 상기 방법을 사용하여, 알도스 환원요소 억제제로서 바람직한 효과를 나타내는 스피로-옥사졸리딘디온 이성체를 상응하는 에피머로부터 얻을 수 있따. 예를 들면 6-클로로-스피로-04H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5') 옥사졸리디노-2',4'-디온과 6,8-디클로로-스피로-04H-2,3-디하이드로 벤조피란(4,5')-옥사졸리디노-2',4'-디온의 1-이성체들은 상응하는 d-이성체로부터 얻을 수 잇따.

본 발명의 새로운 스피로-옥사졸리딘-2,4-디온은 알도스 환원효소 억제제로 유용하고 그 자체로 백내장, 망막증, 신경병등의 만성 당뇨병 복합증상의 치료에도 유용하다. 특허청구의 범위와 명세서에서 쓰여진 바와 같이 여기에서 치료라 함은 그러한 증상을 예방 또는 경감시키는 것을 의미한다.이 화합물들은 치료를 요하는 환자에 경구 혹은 비경구적인 방법을 포함한 통상의 투여방법으로 투여할 수 있다.

일반적으로 이들 화합물은 1일에 체중 1kg당 약 1 내지 500mg을 투여하며 1일에 체중 kg당 약 1 내지 25mg 투여하는 것이 바람직하다. 그러나환자의 상태 및 특정사용 화합물에 따라 필요하다면 복용량을 증감시킬 수 있으며 어느 경우에나 의사의 판단에 따라 각 개인에게 적당한 용량이 결정된다.

이 화합물들은 단독으로나 혹은 약학적으로 수용가능한 담체들과혼합하여 일회 용량으로 또는 수회로 나누어 투여할 수 있다.약학적으로 적당한 담체는 불활성고체 희석제 혹은 충진제, 멸균 수용액 및 여러 무독성 유기용매를 지칭한다.스피로-옥사졸리딘-2,4-디온과 약학적으로 수용가능한 담체와의 약제학적은 배합조성물은 정체,산제,로젠지, 시럽제-주사제등의 여러가지 제형으로 쉽게 투여할 수 있다. 원한다면 이 약학제인 조성에 향료, 결합제, 부형제등의 첨가제를 가할 수 있다.

경구용을 위해서 나트륨 시트레이트, 탄산칼슘 및 인산칼슘등의 부형제를 함유하는 정제에, 전분, 바람직하게는 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산 및 규산염 착화합물 같은 여러가지의 붕해제, 및 폴리비닐피롤리돈, 서당, 젤라틴이나 아카시와와 같은 결합제를 사용할 수 있다. 또 마그네슘 스테아레이트, 나트륨 라우릴설페이트, 탈크와 같은 활탁제등도 타정의 목적으로 유용하다. 유사한 형의 고체조성물은 경질 및 연질젤라틴캡슐제의 충진제로도 사용될 수 있다.

이 목적으로 바람직한 것은 락토스나 밀크슈가 및 고분자량 폴리에틸렌 글리콜이다. 경구투여를 위해 수용성 현탁제나 엘릭서제가 요구된면, 여기에 함유되는 필수활성성분을, 감미제, 방향제, 착색제 및 필요하다면 물, 에탄올, 프로필렌글리콜, 글리세린 이들 혼합물과 같은 희석제와 함께 유화제나 현탁제와 혼합시킬 수 있다.

비경구투여에는, 스피로-옥사졸리딘-2,4-디온의 전술한 바와같은 상응하는 수용성 알카리금속염 또는 알카리 토금속염의 무균 수용액뿐 아니라, 참기름 또는 콩기름 또는 수성 프로필렌글리콜중에 용해한 그의 용액을 사용할 수 있다. 그런 수용액은 필요하면 적절하게 완충화되어야 하고 액상희석제는 먼저 충분한 생리식염수 또는 글루코즈로 등장화되어야 한다. 이러한 수용액은 특히 정맥, 근육, 피하와 복강내 주사용으로 적합하다. 사용되는 멸균 수성매질은 이 분야 전문가에게 잘 알려진 표준기술을 통해 쉽게 얻을 수 있다. 또 스피로-옥사졸리딘-2,4-디온을 적절한 점안용액의 사용에 의해 눈에 점적투여하여 국소적으로 사용할 수 있다.

본 발명 화합물의 당뇨병의 만성적 합병증 치료제로써의 효과는 여러가지의 표준 생물학적 또는 약리학적 시험으로 측정할 수 있따.

적당한 시험법에는 다음이 포함된다.

(1) 분리된 알도스 환원효소의 효소활성을 억제하는 능력을 측정하는 시험.

(2) 스트렙토조토신으로 급성 당뇨병을 유도한 쥐의 좌골신경에 슬비톨이 축적되는 것을 감소시키거나 억제시키는 능력을 측정하는 시험,

(3) 스트렙토조토신으로 만성당뇨병을 유도한 쥐의 좌골 신경 및 수정체중에서 이미 고양된 솔비톨 농도를 낮추는 능력을 측정하는 시험,

(4) 급성 갈락토스혈증을 유도한 쥐의 수정체에서 갈락티톨이 생성되는 것을 예방하거나 억제하는 능력을 측정하는 시험.

(5) 만성 갈락토스혈증을 유도한 쥐에서 수정체의 혼탁도를 감소시키거나 백내장형성을 지연시키는 능력을 측정하는 시험.

여기에 적당한 실험과정은 미합중국 특허 제3,821,383호 및 그에 인용된 참조문헌에 기술되어 있다.

본 발명을 다음 실시예로 설명한다. 그러나 본 발명이 이 실시에에 국한되는 것은 아니다.

[실시예 1]

6-클로로-4-시아노-4-트리메틸실릴옥시-4H-2,3-디하이드로벤조피란

6-클로로-4H-2,3-디하이드로벤조피란-4-온(20.0g,0.11몰, 알드리치), 트리메틸실릴 시아나이드(13.0g, 0.13몰, 실라)와 요드화아연(0.2g, 알파)를 50ml 에테르에 넣고 18시간 교반시킨다.

이 용액을 활성탄(다르코)으로 탈색시키고 여과하고, 진공에서 증발시켜서 오렌지색 유상물질을 얻는다. 여기에 펜탄을 첨가시키면 결정성의 6-클로로-4-시아노-4-트리메틸실릴옥시 -4H-2,3-디하이드로벤조피란을 얻는다. 수율 : 26.4g(84%), 융점 : 67 내지 69℃

[실시예 2]

에틸6-클로로-4-허아드록시-4H-2,3-디하이드로벤조피란-4-카복스이미데이트

6-클로로-4-시아노-4-트리메틸실릴옥시-4H-2,3-디하이드로벤조피란(273g, 0.97몰)의 포화용액을 2.0ℓ의 에탄올에 넣어 0℃로 냉각하고 무수 염화수소가스를 40분간 통해준다. 혼합물이 균질하게됨에 따라 다소의 반응열이 발생한다. 16시간 후에 4℃에서 휘발성 물질을 진공에서 휘산시켜 제거하여 반고체형 잔사를 얻는다. 800ml의 디에틸에테르로 처리하고 여과하면 고체 생성물을 얻는다. 이 고상물질을 3.8ℓ의 클로로포름과 500ml의 포화중탄산나트륨 용액을 넣어 분배시킨다. 유기층은 따로 500ml의 포화중탄산나트륨용액으로 세척하고 황산마그네슘으로 건조시킨 후 여과하고, 진공에서 증발시켜, 에틸 6-클로로-4-하이드록시-4H-2,3-디하이드로벤조피란-4-카복스이미데이트 고체 193.0g(78%)를 얻는다.

에테르로 처리한 물질의 융점은 124내지 126℃이다.

[실시예 3]

6-클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온

에틸 6-클로로-4-허아드록시-4H-2,3-디하이드로벤조피란-4-카복스이미데이트(500g, 1.95몰)및 트리에틸아민(400g, 3.96몰)의 혼합물을 13ℓ의 무수테트라하이드로푸란에 넣고 온도를 5℃로 한 후에 포스겐(1818g, 18.4몰)을 통해주는데, 온도를 27℃이하로 유지한다. 가스통과 및 그에 따른 침전이 발생할 경우에도 계속 교반을 해야한다. 가스를 통해준 후 온도를 20℃로 올리고 48시간 동안 유지시킨다. TLC에 의한 분석결과 Rf치 0.57에서 단일반점이 나타났으나, Rf치 0.29에서는 반점이 나타나지 않았다(1 : 1 클로로포름 : 에틸아세테이트, 실리카겔상에서). (Rf치가 0.29인 물질은 출발 이미데이트이고, Rf치가 0.57인 물질은 실시예 6에서 후술하 중간체인 에톡시 옥사졸린-2'-온이다).

다음에 반응혼합액을 교반하면서 13ℓ의 빙편에 넣어 포스겐과 탄산가스를 발생시킨다. 두층의 혼액을 50%수산화나트륨용액(1.7ℓ)에 의해 pH7로 중화한다. 탄산나트륨(248g, 2.0몰)을 가하고 혼액을 20℃에서 16시간 교반한다. 목적물은 하기의 추출방법으로 분리한다. 에틸아세테이트(12ℓ)를 혼액에 가하고 진탕한후에 수층을 모은다. 유기층은 12ℓ의 7%중탄산나트륨 용액으로 두번 세척한다. 혼합한 수층을 10내지 15℃로 냉각시키면서 농염산을 가하여 pH1로 산성화시킨다. 수층은 12ℓ의 에틸아세테이트로 3회 추출한다.

혼합한 유기층은 12ℓ 포화식염수로 세척하고 황산마그네슘으로 건조하고 여과한 후 진공농축하여 고체를 얻는다. 수율 : 392g (79%), 융점 : 191 내지 195℃

톨루엔에서 재결정하여 6-클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온을 수득한다. 융점 : 196내지 198℃, Rf=0.44 (1 : 1클로로포름 : 에틸아세테이트, 실릭산).

[실시예 4]

에틸 6-클로로-4-하이드록시-4H-2,3-디하이드로벤조피란-4-카복스이미데이트(5.0g, 0.019몰)와 1,1'-카보닐디이미다졸(알드리치, 3.7g, 0.023몰)을 디옥산 (5ml)중에서 90℃로 16시간 가열시킨다.

1시간 후에 반응혼액을 TLC로 분석한 결과 Rf치 0.57(실릭산상 클로로포름 : 에틸아세테이트(1 : 1)에 단일반점이 나타나는데, 이는 에톡시 옥사졸린-2'-온으로 실시예 6에서 후술되어 있다. 반응혼액을 냉각한 후에 100ml에틸아세테이트로 희석하고 100ml의 1N-염산으로 2회 세척한다. 유기층을 100ml의 포화중탄산나트륨 용액으로 2회 추출한다. 염기성층을 6N-염산으로 pH1까지 산성화시키고 100ml에틸아세테이트로 3회 추출한다. 그 후에 유기층을 염수로 세척하고 황산마그네슘으로 건조하고 여과하여 진공에서 농축시켜 고상물질을 얻는다.1.20g(25%), 융점 : 189내지 191℃. 톨루엔에서 재결정하여 6-클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온을 얻는다. 융점 : 192내지 193℃

[실시예 5]

에틸클로로포르메이트(2.00g, 2.82몰)과 에틸-6-클로로-4-하이드록시-4H-2,3-디하이드로벤조피란-4-카복스이미데이트(1.69g, 1.56몰)의 혼합물 및 5ml의 피리딘을 0℃에서 1시간 반응시키고 실온으로 가온한 다음 4시간 동안 환류시킨다. 진공에서 농축하고 실시예 3에서 기술된 방법으로 추출하여 6-클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온을 얻는다. 수율 : 10%, 융점 : 195내지 198℃.

[실시예 6]

6-클로로-4'-에톡시-스피로[4H-2,3-디하이드로-벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2'-온

에틸 6-클로로-4-하이드록시-4H-2,3-디하이드로벤조피란-4-카복스이미데이트(1.15g, 4.00몰)을 60ml테트라하이드로푸란에 녹인 용액을 0℃로 냉각하고 교반하면서 5분간 포스겐을 통해준다.

30분후에 반응물을 TLC로 분석한 결과 Rf=0.57(실릭산상클로로포름 : 에틸아세테이트(1 : 1))에 새로운 반점이 나타났고 출발물질 이미데이트의 반점(Rf=0.29)은 나타나지 않았다. 이 혼액을 90ml빙수에 주가시키고 50ml 에틸아세테이트로 2회 추출한다.유기층을 30ml 5%중탄산나트륨 용액으로 2회 세척하고 황산마그네슘에서 건조하고 여과한후, 진공에서 농축하여 유상물질(0.651g)을 얻는다. 이 물질을 저온에서 에테르/헥산으로 재결정한다. 수율 : 0.350g(30%), 융점 : 108내지 110℃.

이 에톡시 옥사졸린은 피리딘중의 에틸클로로포르메이트를 사용한 이미데이트로부터도 62%수율로 제조가능하다.

[실시예 7]

6-클로로-4'-에톡시-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5'))옥사졸린]-2 '-온(100mg, 0.355밀리몰)과 탄산나트륨(88mg, 0.710밀리몰)을 2ml의 테트라하이드로푸란 : 물(1 : 1)에 넣고 20℃에서 16시간 교반한다. 10ml에탈아세테이트와 10ml의 물을 가한 후 실시예 3에서와 같이 추출하여 6-클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5')-옥사졸리딘]-2',4'-디온을 얻는다.

수율 : 63mg(70%), 융점 : 192내지 195℃

[실시예 8]

6-클로로-하이드록시-4H-2,3-디하이드로벤조피란-4-카복스아미드

6-클로로-4-시아노-4-트리메틸실릴옥시-4H-2,3-디하이드로벤조피란(1.40g, 5.0밀리몰)과 3ml 농염산 혼액을 0℃에서 무수 염화수소 가스로 5분간 취입시킨다. 반응혼액은 20℃에서 23시간 지난 후에도 균일하게 되지 않는다. 혼액을 물로 에틸아세테이트 각각 30ml 씩으로 희석한다.유기층을 50ml의 포화식염수로 2회 세척하고 황산마그네슘으로 건조한 후 여과하고, 진공에서 농축시켜 생성한 잔사를 메틸렌-클로라이드로 연마하면 6-클로로-4-하이드록시-4H-2,3-디하이드로벤조피란-4-카복스아미드0.606g(54%)이 생성된다. 융점 ; 168내지 169℃,

Rf=0.18(1 : 1 클로로포름 ; 에틸아세테이트, 실락산).

[실시예 9]

나트륨(0.101g, 4.40밀리몰)을 n-부탄올(3.34g, 44.0밀리몰)및 디에틸카보네이트(0.545g, 4.62밀리몰)와 반응시킨다. 수소의 발생이 멈춘후에 6-클로로-4-하이드록시-4H-2,3-디하이드로-벤조피란-4-카복스아미드(1.00g, 4.40밀리몰)를 가하고 혼액을 115℃에서 3일간 가열한다. 반응을 종결시키기 위하여 디에틸카보네이트 (0.545g, 4.62밀리몰)과 칼륨 t-부톡사이드(알드리치, 0.100g, 0.89밀리몰)을 가하여 4일간 더 가열시킨다. 냉각한 혼액을 100ml의 빙냉시킨 1N-염산에 주가한다. 수층은 100ml에틸아세테이트로 두번 추출한다.

유기층은 합해서 50ml의 5% 중탄산나트륨 용액으로 두번 추출한다. 염기성 층을 6N-염산으로 산성화시키고 100ml의 에틸아세테이트로 2회 추출한다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조시킨후 여과하고 진공농축하여 고상물질을 얻는다. 톨루엔으로 재결정하여 6-클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온을 얻는다. 수율 : 0.299g(27%), 융점 : 190내지 193℃

[실시예 10 내지 17]

실시예 1에서 기술한 것과 같은 방법으로, 다음 화합물들을 6-클로로-4H-2,3-디하이드로-벤조피란-4-온 대신에 적당한 케톤을 사용하여 제조한다. 모든 화합물들은 5%중탄산나트륨과 염수로 세척하고 황산마그네슘으로 건조한 후 진공 농축하면 유상물질로 분리된다. NMR및/또는 실락산상 TLC에 의해 이 화합물을 분석하였다.

[실시예 18 내지 23]

실시예 2에서와 같은 방법으로, 다음의 화합물들은 6-클로로-4-시아노-4-트리메틸실릴옥시-4H-2,3-디하이드로벤조피란 대신에 적당한 반응물질을 써서 제조 가능하다. 단, 다음과 같은 변형된 과정으로 반응을 완결짓는다.조반응혼액을 물과 에틸아세테이트로 분배시켜서 층을 분리한다. 수층을 6N-수산화나트륨으로 pH12로 염기성화하고 에틸아세테이트로 추출한다.이 유기층을 염수로 세척하고 황산마그네슘으로 세척하고 여과한 후 진공에서 농축하여 고체 이미데이트를 얻는다.

[실시예 24 내지 26]

실시예 8에서 기술한 것과 같은 방법으로 6-클로로-4-시아노-4-트리메틸실리옥시-4H-2,3-디하이드로벤조피란 대신에 적당한 반응물질을 써서 다음 화합물을 제조한다.

[실시예 27]

스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온

에틸 4-하이드록시-4H-2,3-디하이드로벤조피란-4-카복스이미데이트(5.50g, 24.9밀리몰), 트리에틸아민(5.03g, 49.7밀리몰)을 50ml 테트라하이드로푸란에 넣고 0℃에서 포스겐가스로 30분간 포화시킨다.

포화시키는 중에 고체가 즉각 생성된다. 혼액을 20℃에서 16시간 교반한다.이 조건하에서 옥사졸린 중간체를 분리하거나 가수분해 할 필요가 없이 옥사졸리딘디온을 직접 얻을 수 있다. 반응혼액을 200ml의 빙편에 가하고 에틸 아세테이트로 추출한다. 스피로 [4H-2,3-디하이드로 벤조피란(4,5')-옥사졸리딘]-2',4'-디온을 실시예 3에서 기술한 방법으로 유기층으로부터 얻는다.

수율 : 56.7%, 융점 : 168 내지 170℃.

[실시예 28]

6-플루오로-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5) 옥사졸리딘]-2',4'-디온

6-플루오로-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온을 실시예 4에서 기술된 것과 같은 방법으로, 에틸 6-플루오로-4-하이드록시-4H-2 ,3-디하이드로 벤조피란-4-카복스이미데이트로부타 43% 수율로 제조한다. 실시예 4와 다른 한가지 점은 반응혼액을 100℃에서 1시간 가열하는 것이다.톨루엔에서 재결정한 후의 융점은 177.5℃ 내지 180℃이다.

[실시예 29]

6-브로모-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온

6-브로모-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온은 실시에 4에서 기술된 것과 같은 방법으로 에틸 6-브로모-4-하이드로시-4H-2,3-디하이드로베조피란-4-카복스이미데이트로부터 38%의 수율로 제조가능하나 혼액을 100℃에서 30분간 가열시키는 조건만 다르다. 톨루엔에서 재결정한 후의 융점은 188 내지 191℃이다.

[실시예 30]

스피로[4H-2,3-디하이드로벤조티오피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온

스피로[4H-2,3-디하이드로벤조티오피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온도 실시예 4에서 기술한 것과 같은 방법으로, 에틸-4-하이드록시-4H-2,3-디하이드로-벤조티오피란-4-카복스이미데이트로 부터 45% 수율로 제조 가능하나 다만 혼액을 100℃에서 7시간 가열한다. 톨루엔에서 재결정한 후의 융점은 165 내지 167℃이다.

[실시예 31]

6-플루오로-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조티오피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온

6-플루오로-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온은 실시예 4에서 기술한 것과 같은 방법으로 에틸-6-플루오로-4-하이드록시-4H-2,3-디하이드로벤조티오피란-4-카복스이미데이트로부터 41% 수율로 제조하는데, 단, 혼액을 100℃에서 48시간 가열시키는 점이 다르다.톨루엔으로 재결정한 후의 융점은 193 내지 194.5℃이다.

[실시예 32]

6,8-디클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로 벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온

6,8-디클로로-4-하이드록시-4-카복스아미드 (524mg, 2.00몰 ), 에틸카보네이트(531mg, 4.5밀리몰), 칼륨 t-부톡사이드(396mg, 2.67밀리몰, 안드리치)와 1.80ml의 n-부탄올의 혼액을 64시간 환류시킨다. 반응혼액을 100ml의 1N황산과 100ml의 에틸아세테이트로 냉각시킨다. 수층을 또다른 100ml의 에틸아세테이트로 씻고 합한 유기층을 50ml의 5% 중탄산나트륨 용애으로 2회 세척한다. 염기성층은 6N-염산으로 산성화하고 75ml의 에틸아세테이트로 두번 추출한다. 합한 유기층은 50ml 염수로 세척하고 황산마그네슘으로 건조하고 여과한후 진공농축하여 고체를 생성한다; 330mg (57%). 이 물질을 톨루엔으로 재결정하여 6,8-디클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로 벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온을 수득한다. 융점 : 193내지 195℃.

[실시예 33]

6-클로로-8-메틸-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2', 4'-디온

6-클로로-8-메틸-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2', 4'-디온은 실시예 32에서 기술한 바와 같은 방법으로 6-클로로-8-메틸-4- 하이드록시-4H-2,3-디하이드로벤조피란-4-카복스아미드로부터 제조가능하다. 수율 : 21.6%톨루엔에서 재결정한 후의 융점은 185.5내지 187℃이다.

[실시에 34]

6-클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로 벤조티오피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온

6-클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로 벤조티오피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온은 실시에 32에서와 같은 방법으로 6-클로로-4-하이드록시-4H-2,3-벤조티오피란-4-카복스아미드부터 38%수율로 얻을 수 있다. 단지 반응혼액을 54시간 환류하는 조건만 다르다. 톨루엔에서 재결정한후의 융점은 213내지 216℃이다.

[실시예 35]

(-)-6-클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로 벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2', 4'-디온

라세미체형인 6-클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로 벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온(32.0g, 0.126몰)과 신코니딘(37.1g, 0.126몰)을 290ml무수 에탄올에 가열하면서 용해시킨다. 냉각한 후에, (+)-옥사졸리딘디온의 부가체 및 신코니딘을 여과하여 모은다. 수율 : 28.0g (81%).

여액을 진공농축하여 얻은 잔사를 500ml의 에틸-아세테이트와 400ml의 1N-염산으로 분배시킨다. 유기층을 또다른 400ml의 1N-염산과 200ml염수로 세척하고 황산마그네슘으로 건조하고 여과하고 150ml로 농축시킨다. 이 유기용액에 액상 1-암페타민(10.13g, 0.075몰)을 가한다. 결과로 얻어지는 다량의 침전물을 여과하고 에테르로 씻고 진공건조하여 (-)-옥사졸리딘디온-1-암페타민 부가체를 얻는다.

수율 : 14.85g(60%).

=-36.29° 융점 171내지 174℃.

이 부가체(14.80g)를 300ml의 에틸아세테이트와 200ml의 3N-염산으로 분해시킨다.유기층을 또다른 200ml의 3N-염산과 100ml의 염수로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조하고, 여과한후 진공농축하여 무색의 고체를 얻는다.수율 : 9.45g (97.8%회수),

=-60.58℃. 융점 : 201내지 202.5℃

톨루엔에서 재결정하여 (-)-6-클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로벤조피란 (4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온을 얻는다.수율 : 8.203g, 융점 ; 200내지 200.5℃,

=-61.59℃

[실시예 36]

6-클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로 벤조피란(4,5')-옥사졸리딘]-2',4'-디온의 분할

6-클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로 벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온 (1.00g, 3.95 밀리몰)과 신코니딘(1.16g, 3.95밀리몰)을 열(hot)에탄올에 녹인다.생성된 물질이 침전된 후에 모아서 에탄올로 재결정한다. 융점 : 206내지 207℃.

이 고체는 50ml의 에틸 아세테이트와 50ml의 1N-염산으로 분배시킨다. 산성층으로 50ml의 에틸아세테이트로 추출한다. 합한 유기층은 50ml의 염수로 세척하고 황산마그네슘으로 건조하고 여과한 후 진공에서 농축하여 얻은 잔사를 툴루엔에서 재결정한다. 수율 : 288mg (57%), 융점 : 193내지 197℃.

이 물질을 톨루엔에서 재결정하여 (+)-6-클로로-스피로[4H-2,3-디하이드로 벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온을 얻는다. 수율 : 200mg (40%), 융점 : 200내지 201.5℃,

=(+)60.55℃

첫번째 에탄올 모액을 하룻밤 방치하면 (+)-부가체 결정을 또 다시 소량 얻을 수 있다.여과한 후에 이 모액을 각각 50ml씩의 1N-염산과 에틸아세테이트로 분배시킨다. 상기와 같이 하여 얻은 옥사졸리디논은 톨루엔에서 2번 재결정하여 6-클로로-스피로 [4H-2,3-디하이드로 벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'디온을 얻는다. 수율 : 143mg (29%), 융점 : 199내지 200℃,

=(-)61.27℃.

[실시예 37]

6-클로로-스피로- [4H-2,3-디하이드로 벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온의 분할

6-클로로-스피로- [4H-2,3-디하이드로 벤조피란(4,5')옥사졸리딘]-2',4'-디온(1.00g, 3.95밀리몰)과 L-암페타민(246mg, 2.00밀리몰)을 뜨거운 에틸아세테이트에 녹인다. 냉각한 후에 무수 결정(419mg, 융점 165내지 168℃)을 모아 에틸 아세테이트로부터 재결정하여 221mg을 생성한다; 융점 171내지 173℃,

(-) 32.7℃, 부가체의 분해및 (-) 옥사졸리딘디온의 분리는 실시예 33에 기술된 방법으로 수행한다. 53mg, 융점 198내지 200℃,

(-) 60.83℃

[실시예 38]

상기 실시예에서 기술한 바와 같이 제조한 스피로-옥사졸리딘디온에 대해 알도스 환원효소 효소활성을 저하시키거나 억제하는 능력을 미합중국 특히 제 3,821,383호에 기술되어 있으며 Hayman 법(Jurnal of Biological Chemistry, 240, 877(1965))에 근거한 방법에 의해 시험하였다. 사용된 기질은 송아지의 수정체에서얻은 부분적으로정제한 알도스 환원효소이다. 각각의 물질농도 10^-6M에서 얻은 결과는 효소활성의 억제 %로 표시되어 있다.

[실시예 39]

상기 실시에로부터 제조한 스피로-옥사졸리딘디온에 대해 미합중국 특허 제 3,821,383호에 기재된 방법으로, 스트렙토조토신화한 쥐의 좌골신경에 솔비톨이 축적되는 것을 감소시키거나 억제시키는 능력을 측정하였다. 여기에서 당뇨병을 유도한지 27시간 후에 좌골신경의 솔비톨 축적량을 측정하였다. 이 화합물은 스트렙토조토신을 투여한지 4,8,24시간 후에 정해진 용량을 경구 투여하였다.

이와 같은 방법으로 실험한 결과를 화합물을 투여하지 않은 경우(즉 솔비톨 농도가 27시간의 시험기간내에 조직 g당 통상적으로 대략 50내지 100mM에서 400mM까지 상승되는 비처리동물)와 비교하여 시험화합물에 의한 억제%로 다음에 표시하였다. 이 실험에서 20이하의 실험치는 반드시 실험상이나 통계학적으로 유의성을 나타내는 것은 아니다.

Claims

일반식(Ⅱ)의 화합물을 일반식(Ⅲ)의 화합물과 축합(단, 일반식(Ⅲ)의 W₁및 W₂가 다같이 Cl인 경우에는 염기존재하에 축합반응을 수행한다)시키는 것을 특징으로하는, 일반식(Ⅰ)의 신규한 스피로옥사졸리딘디온의 제조방법.

상기 일반식에서

X는 산소와 유황중에서 선택되며;

n은 1이나 2이며;

R은 수소, 탄소수 1내지 4의 알킬, 벤질 및 단일치환된 벤질(치환기는 클로로,브로모,플루오로, 하이드록시, 탄소수 1내지 3의알킬 및 탄소수 1내지 3의 알콕시중에서 선택된다)로 이루어진 그룹중에서 선택되며;

R₁,R₂및 R₃는 각각 수소, 클로로, 브로모,플루오로,탄소수 1내지 3의 알킬, 페닐 및 단일 치환된 페닐(치환기는 클로로, 브로모,플루오로,하이드록시,탄소수 1내지 3의 알킬 및 탄소수 1내지 3의 알콕시중에서 선택된다)로 이루어진 룹중에서 선택되며;

R₄는 탄소수 1내지 4의 알킬, 벤질 및 단일치환된 벤질(치환기는 클로로,브로모,플루오로,하이드록시,탄소수 1내지 3의 알킬 및 탄소수 1내지 3의 알콕시중에서 선택된다)로 이루어진 그룹중에서 선택되며 ;

W₁및 W₂는 같거나 다른 이탈그룹이며 클로로, 탄소수 1내지 4의 알콕시그룹 또는 이미다졸릴 그룹을 나타내는데, 단, 이들 두 라디칼이 각각 클로로 또는 알콕시를 나타낼때는 W₁과 W₂는 동일해야 한다.