KR810000818B1

KR810000818B1 - 모라노린의 제조법

Info

Publication number: KR810000818B1
Application number: KR7702854A
Authority: KR
Inventors: 신고 마쓰무라; 모도 히로시 에노; 요시 아끼 아오야기; 레요오지 에쓰; 요시아끼 요시구니; 마사히로 야기
Original assignee: 모리시다 히로시; 닛뽄신야꾸 가부시기 가이샤
Priority date: 1977-12-07
Filing date: 1977-12-07
Publication date: 1981-07-10

Abstract

내용 없음.

Description

모라노린의 제조법

제1도는 실시예에서 기술하는 방법에 의하여 얻어진 조제(粗製) 모라노린의 박층 크로마토그람.

제2도는 동일 배지(培地)로부터 얻어진 조제 노지리마이신의 박층(薄層)크로마토그람이다. 단, 어느 것이나 흡착제는 시리카겔, 전개용매는 에탄올, 물, 크로로포름(4 : 2 : 1)이며 검출은 수소염(水素炎) 이온화 검출기(야트론제신크로그라프)에 의해서 행한다.

본 발명은(I)식으로 표시되는 모라노린의 제조법에 관한 것이다.

본 발명자들은 이전부터 상속식물(桑屬植物) 및 한약 상백피(桑白皮) 중에서 (I)식으로 표시되는 물질을 천연물로서는 처음으로 단리(單離)하고 모라노린이라 명명(命名)하고 (야기(야木) 등 일본 농예화학회지 50권 571페이지(1976)), 또한 모라노린이 당부하동물(糖負荷動物)의 혈당상승을 억제한다고 하는 의약품으로서 극히 유용한 작용이 있다는 것을 발견했다. 그후 본 물질의 공업적 제조법에 대해서 더욱 연구를 거듭한 결과 이번에 드디어 모라노린의 극히 유리한 공업적 제조법을 확립하기에 이르러 본 발명을 완성하였다. 모라노린의 제조법으로서는 종래, 본 발명자들의 발전에 의한 상속(桑屬) 기타의 식물로부터 추출하는 방법이외에는 혹종(或種)의 방선균(放線菌)이 산생(産生)하는 항생물질 노지리마이신(II)을 백금 촉매 또는 수소화붕소(水素化硼素) 나트륨에 의해서 환원하는 방법(Inouye, et, al. Tetrahedron, 23.2125(1968)이 알려져 있을 뿐이었다.

발효에 의한 노지리마이신(II)의 제법, 정제법은 특공소(特公昭) 43-760 및 소(昭) 45-5033공보에 기재에 기재되어 있는 바 이들의 명세서에도 기재되어 있듯이 노지리마이신(II)은 극히 불안정한 물질로서 중성조건하에서 까지도 분해를 일으키고, 산성조건하에서는 용이하게 분해되고 만다는 것이 알려져 있다. 이 때문에 배양액 중에서의 노지리마이신(II)의 단리(單離)는, 극히 곤란하여 상술한 명세서에도 이온교환카람크로마토를 위시한 많은 번잡한 조작과 세심한 주의를 필요로하여 더욱 그외에 유리한 것으로 되어 있는 아황산부가 물법에 의한 정제법으로 하더라도, 정제단계에 있어서도 역시 50% 이상의 손실이 있음이 명백히 되어 있는 것이다. 더욱 정제된 노지리마이신(II)으로부터 모라노린(I)에의 유도는 고가인 백금 촉매를 사용하여도 역시 수율(收率)는 50% 이하이다.

이러한 사실을 종합하면 배양액중의 노지리마이신(II)으로 모라노린(I)을 제조한다고 하면, 종래의 방법에 의한 경우의 총수율은 많은 번잡한 조작과 공정을 요하고도 겨우 15-20%에 지나지 않으며 공업적 제조법으로서는 도저히 성립될 수 없는 것이었다.

본 발명자들은 의약품으로서 유용한 모라노린(I)의 공업적으로 유리한 제조법의 발견을 목표로하여 예의 연구를 거듭한 결과 이번에 드디어 노지리마이신(II)를 포함한 방선균 배양액을 그대로 여러종류의 금속촉매 예를들면 라네닉켈촉매에 의해서 촉매 환원하고 이어서 이 환원배양액을 이온 교환처리하는 방법에 의해서 놀랍게도 거의 정량적 수율로서 모라노린(I)을 제조할 수 있다는 것을 발견했다. 또한 금속촉매로서는 망강, 철, 아연, 코발트, 등등을 예로들 수 있는데 그중에서도 라네-닉켈이 바람직하다.

이 방법은 배지중(培地中)의 노지리마이신(II)으로부터 모라노린(I)예의 총수율이 단번에 종래법의 5배 이상으로 향상 개선될 뿐 아니라 중간에 있어서 노지리마이신(II)을 추출단리하기 위한 많은 번잡한 공정을 전혀 필요로 하지 않고도, 최종 생성물의 추출정제 조작까지 대폭 간략화할 수 있다는 점에 큰 특징을 가지고 있다. 즉 종래와 같이 배양액중에서 노지리마이신(II)을 일단 추출하는 경우에는, 배지중에 포함되는 영양물질, 대사산물(代謝産物) 혹은 노지리마이신의 분해산물 때문에, 목적으로하는 노지리마이신(II)의 추출조작이 방해되어, 이 때문에 추출물 중에 혼입되어오는 물질의 존재가, 노지리마이신 자체의 불안정성과 함께 노지리마이신(II)의 단리정제 조작을 곤란한 것으로 하였던 것이다. 그런데도, 불구하고 전혀 예기치 않았던 것으로는, 이들의 방해물질은 본 발명에 의한 환원조작에 의해서 모두 변성을 일으켜 환원 배양액중에서 모라노린(1)을 이온 교환수지처리에 의해서 추출단리조작을 행할 경우에는 거의 추출물중에 혼입돼오지 않는다는 것을 알았다. 만일 극소량의 불순한 방해물질이 혼입해온 경우에도, 보통방법에 의해서, 일반의 무기산, 적당한 유기산으로 염(鹽)을 제조함으로서, 용이하게 정제할 수가 있는 것이다. 이 발견에 의해서 예기 이상으로 대폭적인 조작의 간략화가 달성되며, 목적물(I)의 정량적 수율의 달성과, 동시에, 본 발명에 의한 모라노린(I)의 제조법은 공업적으로 극히 가치있는 것이다.

참고로 배양액을 환원한 후, 실시예에서 기술하는 방법에 의하여 이온교환 수지처리를 행하여 얻어진 조제(粗製) 모라노린(I)의 박층(薄層) 크로마토그람과 동일 배양액으로부터 특공소(特公昭) 43-760호 공보기재의 방법에 의해서 추출한 조제노지리마이신(II)의 박층 크로마토그람을 각각 제1도 및 제2도에 표시한다. 제2도에서 명백한 바와 같이 모라노린(I)의 환원전구물질(還元前驅物質)인 노지리마이신(II)은 배양액중에서는 다종다량(多種多量)의 협잡물과 혼재하여 그 추출조작을 방해하고 있다. 이에 대하여 본 발명의 방법에 의해서 환원하여 추출한 모라노린(I)은, 제1도에 표시하는 바와 같이 거의 협잡물이 없는 것이다.

본 발명에서 사용하는 닉켈촉매는 각종 활성화 닉켈촉매가 어느 것이나 유리하게 사용될 수 있으나, 일반적으로는 시판의 공업용 라네-닉켈촉매로서 충분하다. 이하 실시예에 의해서 본 발명의 실시상태(樣態)의 일예를 들어 더욱 상세하게 설명한다.

[실시예]

스트랩토미세스 속(屬)에 속하는 노지리마이신산생(産生) 방선균을 전분 2%, 콩가루(大豆粉) 1%, KCl 0.05%, MgSO₄7H2O0.05%, NaCl0.5% 및 CaCO₃0.35%로서 이루어진 액체배지 5ℓ에 접종하고, 27°에서 3일간 통기적(通氣的)으로 진탕(振湯) 배양한다. 배양종료 후 하이후토스-파-셀 500g을 가하여 여과하고, 여액 4.4ℓ을 얻는다. 본 여액중의 노지리마이신 함량은 β-구루코시다-제를 사용하는 생물학적 결정(Niwaet. al : Agr. Biol. Chem. 34.966(1970)에 의하면 500㎍/㎖ 이었다.

본 배양액 500㎖에 시판공업용 라네-닉켈 약 10㎖을 가하여 수소기류하, 상온상압(商溫常壓)에서 교반하면 6시간 걸려 약 200㎖의 수소가스를 흡수하고, 정지한다. 촉매를 여별하고, 여액을 다우엑스 1×2(OH) 300㎖의 카람을 통과시키고, 유출액을 다시금 다우엑스 50W×4(H) 200㎖의 카람에 통하게한다.

카람을 물 2ℓ로서 세척후 0.5% 암모니아수로서 흡착물을 용출시킨다. 용출액을 감압하에 농축견고하며는 담황갈색의 결정이 잔류한다.

특량 280mg 이것의 박층크로마토그람을 제1도에 표시한다. 메탄올로부터 재결정하면 정제모라노린(I) 218mg가 얻어진다. 융점 203-205°,

수율 87%

Claims

노지리마이신을 함유하는 방선균 배양액을 금속촉매를 사용하여 접촉환원하고 이어서 이온 교환수지로 처리함을 특징으로하는 모라노린의 제조법.