KR20240053610A - 항혈관신생 활성을 갖는 펩타이드 - Google Patents

Abstract

본 발명은 펩타이드, 서열 DKY, 바람직하게는 XDKY(서열 번호 7) 또는 DKYX(서열 번호 8), 또는 서열 DRY, 바람직하게는 XDRY(서열 번호 9) 또는 DRYX(서열 번호 10)를 포함하고, X는 임의의 아미노산인, 약물로서 사용하기 위한, 특히 병리학적 혈관신생으로부터 유래된 장애의 치료에 사용하기 위한, 5개 아미노산 이하 길이의 펩타이드, 또는 이의 유도체, 및 이를 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 부형제와 함께 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.

Description

항혈관신생 활성을 갖는 펩타이드

본 발명은, 예를 들어 암, 만성 염증, 및 신생혈관증식 장애와 같은 혈관신생 관련 장애의 치료에 유용한, 항혈관신생 활성을 갖는 펩타이드, 및 이를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.

혈관신생은 혈관 형성의 복잡한 과정이다. 이 과정은 (i) 혈관신생 자극에 의한 내피 세포(EC)의 활성화; (ii) 세포외 기질의 분해, 활성화된 EC의 주변 조직으로의 침입, 및 혈관신생 자극원으로의 이동; 및 (iii) 새로운 혈관을 형성하기 위한 EC의 증식 및 분화를 포함하는, 생화학적 이벤트 및 세포 이벤트를 둘 다 수반한다.

혈관신생의 조절은 혈관신생 자극제 및 억제제를 이용하는, 고도로 통제된 과정이다. 인간과 건강한 동물에서, 혈관신생은 특정하고 제한된 상황에서 발생한다. 예를 들어, 혈관신생은 일반적으로 태아 및 배아 발달에서, 정상 조직 및 기관의 발달 및 성장에서, 상처 치유에서, 및 황체, 자궁내막 및 태반의 형성에서 관찰된다.

특정 질환에서, 혈관신생의 조절에 장애가 생기며, 따라서 소위 병리학적 혈관신생이 발생하고, 즉, 병리학적 상태를 뒷받침하고 많은 경우 이들 질환과 관련된 세포 및/또는 조직 손상에 기여하는 과잉 혈관 또는 원하지 않는 혈관의 형성이 발생한다.

종양에는 영양분과 산소를 공급하고 세포 폐기물을 제거하기 위해 혈관이 필요하기 때문에, 병리학적 혈관신생은 종양 형성에 중요한 역할을 한다. 동시에, 종양에서 혈관의 형성은 암세포가 혈류로 진입하고 몸 전체를 순환하는 것을 가능하게 하여 전이를 발생시킨다.

혈관신생이 중요한 종양에는 고형 종양뿐만 아니라 청신경초종, 신경섬유종, 트라코마, 및 화농성 육아종과 같은 양성 종양도 포함된다. 병리학적 혈관신생은 백혈병 및 골수의 다양한 급성 또는 만성 신생물성 질환과 같은 특정 혈액암과도 관련이 있다.

병리학적 혈관신생은 염증성 장 질환, 건선, 사르코이드증, 및 류마티스 관절염과 같은 다양한 만성 염증성 질환에서도 중요한 역할을 한다. 이러한 질환에서 발생하는 만성 염증은, 염증 세포의 유입을 유지하기 위해, 병든 조직에서 모세혈관 스프라우트(sprout)의 지속적인 형성에 의존한다. 염증 세포의 유입 및 존재는 육아종을 생성하고 따라서 만성 염증 상태를 유지시킨다.

정상 및 병리학적 혈관신생은 둘 다, 혈관신생 인자 하나 이상의 작용을 필요로 한다. 이러한 인자에는, 예를 들어 안지오제닌(ANG), 혈관 내피 성장 인자(VEGF-혈관 내피 성장 인자), 염기성 섬유아세포 성장 인자(bFGF), 산성 섬유아세포 성장 인자(aFGF), 표피 성장 인자(EGF), 종양 괴사 인자-알파(TNF-α), 종양 성장 인자-알파(TGF-α), 및 종양 성장 인자-베타(TGF-β)가 포함된다.

수많은 혈관신생 관련 질환에서 혈관신생의 중심적 위치는, 항혈관신생제(즉, 병리학적 혈관신생을 저해 또는 억제하는 작용제)에 대한 탐구의 원동력이 되었다.

많은 항혈관신생제가 단리되거나 또는 개발되었다. 이들은 연골 유래 인자, 혈관신생 억제 스테로이드, 비타민 D의 혈관신생 억제 유사체, 안지오스타틴, 엔도스타틴, 및 베로스타틴을 포함한다.

예를 들어, 성장 인자의 작용을 억제하는 작용제; 항침습제; 및 혈관 차단제를 포함하는, 많은 상이한 카테고리의 항혈관신생제가 있다.

성장 인자의 작용을 억제하는 작용제는,

(i) 수용체 길항제, 예를 들어 CA 2213833에 기술된 바와 같은 항-VEGF 수용체 항체;

(ii) 단백질 키나제 C 억제제;

(iii) 티로신 키나제 억제제, 예를 들어 WO 96/40116에 기술된 바와 같은 VEGF 수용체 티로신 키나제 억제제;

(iv) Tie-1 및/또는 Tie 2 수용체 신호전달의 조절인자; 및

(v) 단백질 발현의 억제제, 예를 들어 US4987071에 기술된 바와 같은 VEGF 발현의 억제제

를 포함한다.

항침습제는,

(i) 기질 금속 단백분해효소 억제제, 예를 들어 프리노마스타트(US5753653); 일로마스타트(WO 92/9556); 마리마스타트(WO 94/2447); 및 바티마스타트(WO 90/5719),

(ii) 유로키나제 플라스미노겐 활성제 수용체 길항제, 예를 들어 WO96/40747 및 WO 2000/001802에 기술된 화합물, 및

(iii) 유로키나제 플라스미노겐 활성제 억제제, 예를 들어 WO 2000/005245에 기술된 화합물

을 포함한다.

혈관 차단제는 콤브레타스타틴(US4996237) 및 WO 99/02166 및 WO 00/40529에 기술된 화합물을 포함한다.

공지된 항혈관신생제는 EP1640382A1, EP1668129A1, EP1786451A2, EP1799716A1, EP1812030A2, EP1951750A2, EP3209683A1, EP3621597A1에 기술된 것과 같은 항혈관신생 펩타이드를 포함한다.

WO2004/031220은 암 또는 암 관련 질환, 예컨대 암종, 육종, 흑색종 또는 전이로 이루어진 군으로부터 선택되는 고형 종양의 치료를 위한 이펙터 유닛 적어도 하나에 직접 또는 간접 결합된 서열 DRYYNLRSK(서열 번호 6)를 갖는 종양 표적화 펩타이드를 개시한다.

WO2008/085828은 세포, 조직 또는 기관에서 혈관 형성을 조절하는 데 유용한 G-X(3)-CL인 "CXC" 모티프를 보유하는 서열 GDRYCL을 갖는 펩타이드를 개시한다.

WO00/63236은 흑색종 주위에 펩타이드 관련 기질의 물리적 장벽을 형성하여 표적 세포의 기질에 대한 접착을 조절함으로써, 특히 흑색종 세포의 부착을 억제함으로써 이의 전이를 방지할 수 있는, 서열 DRYLKFRPV를 갖는 펩타이드를 개시한다.

출원인은 병리학적 혈관신생과 관련된 질환의 치료를 위한 새로운 펩타이드를 찾는 문제에 직면하였다.

인간 헤르페스바이러스 6(HHV-6)은 인간 집단에 널리 퍼져 있는 β-헤르페스바이러스이다. HHV-6은 2개의 인지된 종(HHV-6A 및 HHV-6B)을 포함한다. HHV-6A/B는 높은 게놈 상동성을 보이고 U94 유전자를 보유한다. U94는 바이러스 수명 주기 및 관련 질환에서 핵심 기능을 갖고, 바이러스 복제, 통합 및 재활성화에서 입증되었거나 추정되는 역할을 갖는다. 자연 감염 동안, U94는 면역 반응을 유도하고, 항-U94 반응의 출현률 및 정도는 특정 질병과 관련이 있다. 특히, U94는 세포 이동의 억제, 사이토카인 및 HLA-G 발현의 유도, 및 혈관신생의 억제를 포함하는, 세포 수준에서 바이러스의 일부 효과를 완전히 모방할 수 있으며, 이는 HHV-6 관련 질환의 발생에서 U94의 직접적인 역할을 뒷받침한다(Caselli E., et al., "The U94 Gene of Human Herpesvirus 6: A Narrative Review of Its Role and Potential Functions," Cells. 2020 Dec; 9(12): 2608).

이러한 관찰에 기초하여, 출원인은 항혈관신생 활성을 갖는 U94 유전자에 의해 발현되는 바이러스 단백질의 일부가 반드시 있어야 한다는 가설을 세웠고, 이 부분을 확인하기 위해 집중적인 연구 및 개발을 시작하였다.

U94 유전자에 의해 발현되는 바이러스 단백질은 도 6(서열 번호 1)에 도시된 바와 같은 490개 아미노산의 서열이다.

광범위한 실험 후에, 출원인은 놀랍게도 항혈관신생 효과가 바이러스 단백질의 위치 14-17에 있는 4개의 아미노산 서열, 즉 KDKY 서열(서열 번호 2)로부터 왔다는 것을 발견하였다.

실험을 계속하며, 출원인은 항혈관신생 효과가 놀랍게도 바이러스 단백질의 위치 15-17에 있는 단지 3개 아미노산의 서열, 즉 DKY 서열로부터 유래되었고, 이 효과가 DRY 서열에서도 유지된다는 것을 추가로 발견하였다.

따라서, 제1 양태에서, 본 발명은 서열 DKY, 바람직하게는 XDKY(서열 번호 7) 또는 DKYX(서열 번호 8), 또는 서열 DRY, 바람직하게는 XDRY(서열 번호 9) 또는 DRYX(서열 번호 10)를 포함하고, X는 임의의 아미노산인, 약물로서 사용하기 위한, 5개 아미노산 이하 길이의 펩타이드, 또는 이의 유도체에 관한 것이다.

유리하게는, 본 발명은 예를 들어 종양 및/또는 만성 염증 및/또는 신생혈관 장애와 같은 병리학적 혈관신생으로부터 유래된 장애의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 제1 양태에 따른 펩타이드에 관한 것이다.

제2 양태에서, 본 발명은 (a) 서열 DKY, 바람직하게는 XDKY(서열 번호 7) 또는 서열 DRY(서열 번호 8), 또는 서열 DRY, 바람직하게는 XDRY(서열 번호 9) 또는 DRYX(서열 번호 10)를 포함하고, X는 임의의 아미노산인, 5개 아미노산 이하 길이의 펩타이드, 또는 이의 유도체, 및 (b) 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.

제3 양태에서, 본 발명은 치료가 필요한 대상체에서, 예를 들어 종양 및/또는 만성 염증 및/또는 혈관신생 장애와 같은 병리학적 혈관신생으로부터 유도된 장애를 치료하는 방법으로서, 서열 DKY, 바람직하게는 XDKY(서열 번호 7) 또는 DKYX(서열 번호 8) 또는 서열 DRY, 바람직하게는 XDRY(서열 번호 9) 또는 DRYX(서열 번호 10)을 포함하고, X는 임의의 아미노산인, 5개 아미노산 이하 길이의 펩타이드, 또는 이의 유도체를 유효량으로 투여하는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다.

제4 양태에서, 본 발명은 서열 DKY, 바람직하게는 XDKY(서열 번호 7) 또는 DKYX(서열 번호 8), 또는 서열 DRY, 바람직하게는 XDRY(서열 번호 9) 또는 DRYX(서열 번호 10)를 포함하고, X는 임의의 아미노산인, 5개 아미노산 이하 길이의 펩타이드, 또는 이의 유도체에 관한 것이다.

도 1은 본 설명의 실험 부분의 실시예 1의 결과를 도시한다.
도 2는 본 설명의 실험 부분의 실시예 2의 결과를 도시한다.
도 3은 본 설명의 실험 부분의 실시예 3의 결과를 도시한다.
도 4는 본 설명의 실험 부분의 실시예 4의 결과를 도시한다.
도 5는 본 설명의 실험 부분의 실시예 5의 결과를 도시한다.
도 6은 인간 헤르페스바이러스 6(HHV-6)의 U94 유전자로부터 발현된 단백질의 490개 아미노산의 서열(서열 번호 1)을 도시한다.

제1 양태에서, 본 발명은 서열 DKY, 바람직하게는 XDKY(서열 번호 7) 또는 DKYX(서열 번호 8), 또는 서열 DRY, 바람직하게는 XDRY(서열번호 9) 또는 DRYX(서열번호 10)를 포함하고, X는 임의의 아미노산인, 약물로서 사용하기 위한, 5개 아미노산 이하 길이의 펩타이드, 또는 이의 유도체에 관한 것이다.

본 발명에 따른 펩타이드는 최소 3개 아미노산부터 최대 5개 아미노산을 포함할 수 있고, 따라서 3, 4, 또는 5개 아미노산의 펩타이드로 이루어진다. 유리하게는, 본 발명에 따른 펩타이드는 3, 4 또는 5개 아미노산의 펩타이드로 이루어진다.

본 발명에 따른 펩타이드는 하기 표 A에 나열된 임의의 천연 아미노산을 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 펩타이드는 또한 예를 들어 2-아미노아디프산, 3-아미노아디프산, 베타-알라닌, 베타-아미노프로피온산, 2-아미노부티르산, 4-아미노부티르산, 피페리딘산, 6-아미노카프론산, 2-아미노헵탄산, 2-아미노이소부티르산, 3-아미노이소부티르산, 2-아미노피멜산, 2,4-디아미노부티르산, 데스모신, 2,2'-디아미노피멜산, 2,3-디아미노프로피온산, N-에틸글리신, N-에틸아스파라긴, 히드록시리신, 알로-히드록시리신, 3-히드록시프롤린, 4-히드록시프롤린, 이소데스모신, 알로-이소류신, N-메틸글리신, 사르코신, N-메틸이소류신, 6- N-메틸리신, N-메틸발린, 노르발린, 노르류신, 및 오르니틴과 같이 당업계에 공지된 임의의 변형되거나 또는 비통상적인 아미노산을 포함할 수 있다.

본 발명의 다양한 양태에 따른 펩타이드는 N- 및/또는 C-말단이 유기 화합물에 의해 화학적으로 변형되거나 또는 보호되는, 변형된 펩타이드 형태일 수 있다.

본 발명의 다양한 양태에 따른 펩타이드와 관련하여 본 설명 및 하기 청구범위에서 사용된 용어 "유도체" 또는 "~의 유도체"는 N- 및/또는 C-말단이 예를 들어 포스포릴(-PO₃ ^2-), 글리코실, 아실, 알킬, 카르복실, 아민, 비오틴, 유비퀴틴과 같은 유기 화합물에 의해 화학적으로 변형되거나 또는 보호되는 펩타이드를 의미한다.

변형의 예는 인산화, 글리코실화, 아실화(아세틸화, 라우로일화, 미리스토일화, 팔미토일화 포함), 알킬화, 카르복실화, 히드록실화, 당화, 비오티닐화, 유비퀴틴화 및 아미드화를 포함한다.

바람직하게는, 본 발명의 다양한 양태에 따른 펩타이드는 이의 N-말단에서, 가장 바람직하게는 예를 들어 아세틸화, 라우로일화, 미리스토일화, 팔미토일화를 포함하는, 아실화에 의해 변형될 수 있다.

본 발명의 다양한 양태에 따른 펩타이드는 그 길이에 따라, 당업계에 잘 공지된 방법, 예를 들어 자동 펩타이드 합성기에 의해 합성되거나, 또는 유전공학 기술에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 융합 파트너와 펩타이드를 포함하는 융합 단백질을 부호화하는 융합 유전자를 유전공학으로 제조하고 이어서 숙주 세포에서 형질전환시켜 융합 단백질을 발현시킨다. 이어서, 원하는 펩타이드를 제조하기 위해 프로테아제 또는 화합물을 사용하여 융합 단백질로부터 펩타이드를 절단 및 단리한다. 이러한 목적을 위해, 인자 Xa 또는 엔테로키나제와 같은 프로테아제, 또는 CNBr 또는 히드록실아민과 같은 화합물에 의해 절단될 수 있는 아미노산 잔기를 부호화하는 DNA 서열이, 융합 파트너를 부호화하는 폴리뉴클레오티드와 펩타이드 사이에 삽입될 수 있다.

본 발명의 다양한 양태에 따른 펩타이드는 입체이성질체 또는 입체이성질체의 혼합물로 존재할 수 있고; 예를 들어, 이를 구성하는 아미노산은 L 배열, D 배열을 갖거나 또는 서로 독립적으로 라세미일 수 있다. 따라서, 비대칭 탄소의 수와 존재하는 이성질체 또는 이성질체 혼합물에 따라, 이성질체 혼합물뿐만 아니라 라세미 또는 부분입체이성질체 혼합물 또는 순수 부분입체이성질체 또는 거울상이성질체를 얻는 것이 가능하다. 펩타이드의 바람직한 구조는 순수 이성질체, 즉 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체이다. 펩타이드의 바람직한 구조는 L 배열을 갖는 아미노산을 포함한다. 달리 명시하지 않는 한, 아미노산이 Ala일 수 있다고 표시되는 경우, 이는 L-Ala-, D-Ala- 또는 둘 다의 라세미 또는 비라세미 혼합물로부터 선택되는 것으로 이해된다.

제2 양태에서, 본 발명은 (a) 서열 DKY, 바람직하게는 XDKY(서열 번호 7) 또는 DKYX(서열 번호 8), 또는 서열 DRY, 바람직하게는 XDRY(서열번호 9) 또는 DRYX(서열번호 10)를 포함하고, X는 임의의 아미노산인, 5개 아미노산 이하 길이의 펩타이드, 또는 이의 유도체, 및 (b) 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 약학 조성물은 펩타이드 또는 이의 유도체를, 조성물의 총 중량에 대해 0.0001 중량% 내지 20 중량%, 바람직하게는 0.0001 중량% 내지 15 중량%, 더 바람직하게는 0.001 중량% 내지 10 중량%, 더욱 더 바람직하게는 0.01 중량% 내지 5 중량%의 범위의 양으로 포함할 수 있다.

바람직하게는, 본 발명의 약학 조성물은, 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 부형제와 함께 상기 기술된 펩타이드 중 적어도 하나를 유효량으로 포함하는, 적합한 제형으로 제조된다.

적합한 제형의 예로는 경구 투여용 정제, 캡슐, 코팅 정제, 과립, 용액, 및 시럽; 국소 투여용 용액, 도포제 및 연고; 경피 투여용 약용 패치; 직장 투여용 좌약; 및 멸균 주사액이 있다. 기타 적합한 제형에는 경구, 주사, 또는 경피 투여용 서방형 및 리포좀 기반 제형이 포함된다.

본원에 기술된 바와 같이, 본 발명의 약학 조성물은 상기 기술된 펩타이드 중 적어도 하나를 약학적으로 허용가능한 부형제와 함께 포함하고, 이는 본원에 사용된 바와 같이, 원하는 특정 제형에 적합한 임의의 및 모든 용매, 희석액, 또는 기타 비히클, 분산 또는 현탁 보조제, 표면 활성제, 등장화제, 증점제 또는 유화제, 방부제, 고체 결합제, 윤활제 등을 포함한다.

약학적으로 허용가능한 부형제로 사용될 수 있는 물질의 일부 예는 당, 예컨대 유당, 포도당 및 자당; 전분, 예컨대 옥수수 전분 및 감자 전분; 셀룰로오스 및 이의 유도체, 예컨대 카르복시메틸셀룰로오스나트륨, 에틸셀룰로오스, 및 셀룰로오스아세테이트; 아드라고스타 분말; 맥아; 젤라틴; 활석; 부형제, 예컨대 코코아 버터 및 좌약 왁스; 오일, 예컨대 땅콩 오일, 목화씨 오일; 홍화유; 참기름; 올리브유; 옥수수 기름; 및 콩기름; 글리콜, 예컨대 프로필렌 글리콜; 에스테르, 예컨대 에틸올레이트 및 에틸라우레이트; 한천; 완충제, 예컨대 수산화마그네슘 및 수산화알루미늄; 알긴산; 무발열원수; 등장성 염 용액; 링거 용액; 에틸 알코올, 및 인산염 완충 용액; 기타 호환가능한 무독성 윤활제, 예컨대 나트륨 라우릴 황산염 및 마그네슘 스테아레이트; 착색제; 이형제; 코팅제; 감미료; 향료 및 방향제; 방부제; 및 항산화제를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

용어 "약학적으로 허용가능한" 및 "생리학적으로 허용가능한"은, 임의의 특별한 제한 없이, 생명체에 투여될 약학 조성물을 제조하는 데 적합한 임의의 물질을 정의하려는 의도이다.

제형은 또한 기타 전통적인 성분, 예컨대 방부제, 안정제, 계면활성제, 완충제, 삼투압 조절 염, 유화제, 감미료, 염료, 향료 등을 함유할 수 있다.

본 발명의 약학 조성물은 경구적으로, 비경구적으로, 흡입 스프레이에 의해, 국소적으로, 직장으로, 비강으로, 협측으로, 질로, 또는 이식된 리저버를 통해 투여될 수 있다. 본 발명과 하기 청구범위에 사용된 용어 비경구는, 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 관절내, 윤활막내, 흉골내, 척수강내, 병변내, 및 두개강내 주사 또는 주입 기술을 포함한다.

본 발명의 약학 조성물은 또한 흡입(스프레이, 분말, 또는 에어로졸)에 의해 투여되거나 또는 이식(예를 들어, 수술), 예를 들어 스텐트와 같은 이식가능한 장치에 의해 투여될 수 있다.

본 발명의 약학 조성물의 제형은 제약 화학자에게 친숙한 기술에 의해 제조될 수 있고, 혼합, 과립화, 압축, 용해, 멸균 등을 포함한다.

유리하게는, 본 발명은 서열 DKY, 바람직하게는 XDKY(서열 번호 7) 또는 DKYX(서열 번호 8), 또는 서열 DRY, 바람직하게는 XDRY(서열번호 9) 또는 DRYX(서열번호 10)를 포함하고, X는 임의의 아미노산인, 5개 아미노산 이하 길이의 펩타이드, 또는 이의 유도체의, 병리학적 혈관신생으로부터 유도된 장애 치료에서의 용도에 관한 것이다.

바람직하게는, 전술한 펩타이드 및 이를 포함하는 약학 조성물은 병리학적 혈관신생으로부터 유도된 질환, 예를 들어 암 및/또는 만성 염증 및/또는 신생혈관 장애의 치료에 사용된다.

본 발명의 펩타이드 및 약학 조성물로 유용하게 치료될 수 있는 종양의 예로는 고형 종양 및 혈액암이 있다.

본 발명의 펩타이드 및 약학 조성물로 치료될 수 있는 고형 종양은 육종 및 암종, 예컨대 섬유성 성상세포종, 수모세포종, 두개인두종, 뇌실막세포종, 송과체종, 혈관모세포종, 청신경초종, 희소돌기아교세포종, 수막종, 흑색종, 신경모세포종, 망막모세포종 및 양성 고형 종양, 예컨대 청신경초종, 신경섬유종, 트라코마, 및 화농성 육아종을 포함한다.

본 발명의 펩타이드 및 약학 조성물로 치료될 수 있는, 백혈병과 같은 혈액암은, 예를 들어 급성 림프구성 백혈병 및 급성 골수성 백혈병(골수모구성, 전골수구성, 골수단구성, 단구성, 및 적백혈병); 만성 백혈병(만성 골수성 [과립구성] 및 만성 림프구성 백혈병); 및 진성적혈구증가증, 림프종(호지킨병 및 비호지킨병), 다발성 골수종, 발덴스트롬 마크로글로불린혈증을 포함한다.

구체적으로, 본 발명의 펩타이드 및 약학 조성물은, 섬유육종, 점액육종, 지방육종, 연골육종, 골육종, 척색종, 혈관육종, 연부조직육종, 림프관육종, 림프관연부조직육종, 활막종, 중피종, 유잉육종, 평활근육종, 횡문근육종, 결장암, 췌장암, 유방암, 난소암, 전립선암, 편평세포암종, 기저세포암종, 선암종, 한선암종, 피지선암종, 유두암종, 유두상 선암종, 낭선암종, 수질암종, 기관지원성 암종, 신세포암종, 간세포암, 담관암종, 융모막암종, 정상피종, 배아성 암종, 윌름즈 종양, 자궁경부암, 고환암, 폐암종, 소세포폐암종, 방광암종, 상피암종, 신경아교종, 성상세포종, 수모세포종, 두개인두종, 상의세포종, 송과체종, 혈관모세포종, 청신경초종, 희소돌기아교세포종, 수막종, 흑색종, 신경모세포종, 망막모세포종, 청신경초종, 신경섬유종, 트라코마, 및 화농성 육아종의 치료에 유용할 수 있다.

암 치료에 사용되는 본 발명의 약학 조성물은 선택적으로 하나 이상의 항신생물제, 예컨대 (i) 알칼로이드, 예컨대 도세탁셀, 에토포시드, 트론테칸, 파클리탁셀, 테니포시드, 토포테칸, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 및 빈데신; (ii) 알킬화제, 예컨대 부술판, 임프로술판, 피포술판, 아지리딘, 벤조데파, 카르보쿠온, 메투레데파, 우레데파, 알트레타민, 트리에틸렌멜라민, 트리에틸렌포스포르아미드, 트리에틸렌티오포스포르아미드, 클로람부실, 클로라파진, 시클로포스파미드, 에스트라무스틴, 이포스파미드, 메클로레타민, 메클로레타민 옥사이드 하이드로클로라이드, 멜팔란, 노벰비친, 퍼포스파미드, 페네스테린, 프레드니무스틴, 트로포스파미드, 카르무스틴, 클로로조토신, 포트무스틴, 로무스틴, 니무스틴, 라니무스틴, 다카르바진, 만노무스틴, 미토브로니톨, 미토락톨, 피포브로만, 테모졸로미드; (iii) 항생제 및 유사체, 예컨대 아클라시노마이신, 악티노마이신, 안트라마이신, 아자세린, 블레오마이신, 칵티노마이신, 카루비신, 카르지노필린, 크로모마이신, 닥티노마이신, 다우노루비신, 독소루비신, 에피루비신, 이다루비신, 메노가릴, 미토마이신, 마이코페놀산, 노갈라마이신, 올리보마이신, 페플로마이신, 피알루비신, 플리카마이신, 포르피로마이신, 퓨로마이신, 스트렙토니그린, 스트렙토조신, 투베르시딘, 지노스타틴, 조루비신; (iv) 항대사물질, 예컨대 데노프테린, 에다트렉세이트, 메토트렉세이트, 피리트렉심, 프테롭테린, 트리메트렉세이트, 클라드리빈, 플루다라빈, 6-메르캅토푸린, 티아미프린, 티오구아닌, 안시타빈, 아자시티딘, 6-아자우리딘, 시타라빈, 독시플루리딘, 에미테푸르, 에노시타뷴, 플록수리딘, 플루오로우라실, 젬시타빈, 테가푸르; L-아스파라기나제; (v) 면역조절제, 예컨대 인터페론-α, 인터페론-β, 인터페론-γ, 인터루킨-2, 렌티난, 프로파게르마늄, PSK, 로퀴니멕스, 시조피칸, 유베니멕스; (vi) 백금 착체, 예컨대 카보플라틴, 시스플라틴, 미보플라틴, 옥살리플라틴; (vii) 항신생물성 호르몬 또는 유사체, 예컨대 칼루스테론, 드로모스타놀론, 에피티오스타놀, 메피티오스탄, 테스토라콘, 아미노글루테티미드, 미토탄, 트릴로스탄, 비칼루타미드, 플루타미드, 닐루타미드, 드롤록시펜, 타목시펜, 토레미펜 아미노글루테티미드, 아나스트로졸, 파드로졸, 포메스탄, 레트로졸, 포스페스트롤, 헥세스트롤, 폴리에스트라디올 인산염, 부세렐린, 고세렐린, 류프롤리드, 트립토렐린, 클로르마디논아세테이트, 메드록시프로게스테론, 메게스트롤아세테이트, 멜렌게스트롤; 포르피머 나트륨; 바티마스타; 및 폴린산을 포함할 수 있다.

본 발명의 펩타이드 및 약학 조성물로 유용하게 치료될 수 있는 만성 염증성 질환의 예로는 염증성 장 질환, 예컨대 크론병 및 궤양성 대장염, 건선, 사르코이드증, 및 류마티스 관절염이 있다.

본 발명의 펩타이드 및 약학 조성물로 유용하게 치료될 수 있는 신생혈관 장애의 예로는 (i) 각막 장애, 예컨대 예를 들어 안구 여드름 주사, 아토피성 각막염, 세균성 궤양, 화학 화상, 콘택트렌즈 과다 사용, 각막 이식 거부, 유행성 각결막염, 진균 궤양, 단순 포진 감염 대상포진 감염, 카포시 육종, 지질 변성, 가장자리 각질용해, 마이코박테리아 감염, 무렌 궤양, 신생혈관녹내장 및 수정체후부 섬유증식증, 천포창 방사형 각막 절개술, 플릭텐증, 다발동맥염, 원생동물 감염, 미숙아 망막병증, 류마티스 관절염, 스티븐 존슨병, 상윤부각결막염, 매독, 전신성 루푸스, 테리엔 변연변성, 비타민 A 결핍 및 베게너 사르코이드증, 및 (ii) 망막 장애, 예컨대 예를 들어 동맥 폐색, 베체트병, 베스트병, 만성 망막박리, 포도막염/만성 신경염, 폐쇄성 경동맥 질환, 당뇨망막병증, 일스병, 과다점성 증후군, 망막염 또는 맥락막염을 유발하는 감염, 라임병, 황반 변성, 마이코박테리아 감염, 시신경 소와, 파제트병, 레이저 후 합병증, 추정 눈히스토플라스마증, 탄력섬유거짓황색종, 미숙아 망막병증, 겸상 적혈구 빈혈, 사르코이드증, 스타가르트병, 톡소플라스마증, 루베오시스와 관련된 질환, 및 당뇨병과 관련이 있는지 여부에 관계없이, 모든 형태의 증식성 유리체망막병증을 포함하는, 섬유혈관 또는 섬유 조직의 비정상적 증식으로 인한 질환이 있다.

다음 실시예는 본 발명을 추가로 예시하기 위해 의도되었지만, 이를 제한하지는 않는다.

실시예

물질 및 방법

세포 배양

인간 제대 정맥 내피 세포(HUVEC)를 문헌 [Caruso A. et al. , "HHV-6 infects human aortic and heart microvascular endothelial cells, increasing their ability to secrete proinflammatory chemokines," J Med Virol. 2002; 67: 528-533]에 기술된 바와 같이 단리 및 특성화하였다.

세포를 5% CO₂를 포함하는 가습된 분위기에서 37℃에서 10%(부피/부피) 소 태아 혈청(FBS)으로 보충된 내피 세포 성장 배지(EGM MV; Promo cell, 하이델베르크, 독일)에서 배양하였다.

인간 폐 미세혈관 내피 세포(HL-mEC)를 Lonza Clonetics(워커스빌, 메릴랜드주, 미국)에서 구입하여 10% FBS를 함유하는 EGM-2 MV 성장 배지(론자, 바젤, 스위스)에서 배양하였다. 부착 세포를 80 내지 90% 컨플루언스까지 성장시켰다.

모든 실험은 패시지 2 내지 6에서의 세포로 수행되었다.

U94 유전자를 발현시키는 플라스미드의 클로닝, 제조 및 뉴클레오펙션

U94 유래 유전자를, 플라스미드 U94 pSR2PH를 주형으로 사용하여 증폭하였다. PCR 생성물을 pVAX1 발현 벡터에 삽입하였다. 제조사의 프로토콜에 따라 Amaxa Nucleofector 기술(론자)을 사용하여 세포의 핵천공을 수행하였다. U94 또는 U94 유래 유전자를 발현시키는, 내독소가 없는 플라스미드를, 100 μl의 뉴클레오펙션 완충액에 재현탁된 세포(1x10⁶)에 첨가하였다. 실험은 뉴클레오펙션 24시간 후에 수행되었다.

관 형성 분석

관 형성 분석은 문헌 [Caccuri F. et al. , "Evolution toward beta common chain receptor usage links the matrix proteins of HIV-1 and its ancestors to human erythropoietin," Proc Natl Acad Sci USA. 2021; 11810]에 기술된 바와 같이 수행되었다.

간단히 말하면, 150 μl의 Cultrex Basement Membrane Extract(Matrigel; 10 mg/ml)(Trevigen Inc., 게이더스버그, 메릴랜드주, 미국) 또는 감소된 성장 인자 Matrigel(Trevigen Inc.)를 미리 냉각된 48웰 배양 플레이트에 옮겼다. 이어서 플레이트를 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다.

세포를 10% FBS를 함유하는 EGM 성장 배지에 재현탁시키고 시딩하였다(웰당 5x10⁴개). 세포를 시딩한 후 상이한 시점에서 혈관 형성이 관찰되었다. 모세혈관 구조를 Hitachi KP-D50 카메라로 촬영한 후 관의 수/웰로 정량화하였다.

일부 실험에서, HUVEC는 혈관 내피 성장 인자-A(VEGF-A), 섬유아세포 성장 인자-2(FGF-2) 또는 인터루킨-8(IL-8)과 같은 인간 혈관신생 촉진 분자의 최적 농도로 자극되었다. 뉴클레오펙션된 세포 또는 U94 유래 펩타이드로 자극된 세포를 사용하여 실험을 수행하였다.

스페로이드 분석

분석은 뉴클레오펙션된 세포 또는 U94 유래 펩타이드로 자극된 세포를 사용하여 수행되었다. 10% FBS를 함유하는 EGM 성장 배지에서 HUVEC(1.5x10⁵개 세포/ml)를 5 mg/ml 메틸셀룰로오스(Sigma-Aldrich)와 혼합함으로써 스페로이드를 생성하여 최종 부피를 10 ml로 만들었다.

이어서, 세포(100 μl/웰)를 96웰 플레이트(Greiner Bio-one, 크렘스뮌스터, 오스트리아)에 첨가하고 24시간 동안 5% CO₂ 분위기에서 37℃에서 인큐베이션하였다.

별도로, 콜라겐 I 겔 용액(Rat Tail, Corning)을 얼음 상에 유지시키고 NaOH 0.1 M 및 PBS 10X를 첨가하여 7.4의 최종 pH로 중화시켰다.

이어서, 24웰 플레이트를 중화된 콜라겐(200 μl/웰)으로 코팅하고 가습된 5% CO₂ 인큐베이터에서 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다.

96웰 플레이트로부터의 스페로이드를 Eppendorf 튜브에 수집하고 4000 x rpm에서 5 내지 10초 동안 원심분리시켰다. 투명한 펠릿이 구별되면, 상청액을 제거하고 펠릿을 약 100 μl의 콜라겐 I 중화된 용액에 보관하였다.

각각의 콜라겐-스페로이드 혼합물을 미리 코팅된 24웰 플레이트에 100 μl/웰로 신속하게 첨가하고 1시간 동안 인큐베이션하였다. 1시간 후, 표면을 완전히 덮도록 웰에 500 μl의 상이한 자극제를 첨가하거나 첨가하지 않고 플레이트를 24시간 동안 추가로 인큐베이션하였다.

스페로이드 코어로부터 발아가 발생하였으며, 이를 Hitachi KP-D50 카메라로 촬영하였고, 스프라우트 수는 플레이트의 세 가지 상이한 웰로부터 유사한 크기의 스페로이드로 카운트하였다.

HL-mEC의 SARS-CoV-2 감염

감염 실험을 문헌 [Caccuri F. et al., "A persistently replicating SARS-CoV-2 variant derived from an asymptomatic individual," J Transl Med. 2020; 18: 362]에 전술된 임상 SARS-CoV-2 단리 AP66을 사용하여 수행하였다.

모든 실험은 1의 MOI(감염 다중도)에서, 생물안전성 수준 3(BLS-3) 실험실에서 단일 바이러스 접종원을 사용하여 수행되었다.

통계적 분석

여러 번의 독립적인 실험으로부터 얻은 데이터는 평균 ± 표준 편차(SD)로 표시된다. 일원 분산 분석을 사용하여 데이터의 통계적 유의성을 분석하였고, Bonferroni 사후 테스트를 사용하여 데이터를 비교하였다. P ＜ 0.05에 대해서는 차이가 유의한 것으로 간주되었다. GraphPad Prism 8 소프트웨어를 사용하여 통계적 테스트를 수행하였다.

실시예 1

상이한 혈관신생 매개체에 의해 가해진 자극에 반응하는 HUVEC의 능력에 영향을 미치는 서열 번호 2의 서열의 펩타이드의 능력을 평가하기 위해, HUVEC를 상이한 혈관신생 촉진 자극제(VEGF-A, FGF-2, 또는 IL-8)의 최적 농도의 단독 존재 또는 부재(NT) 하에 또는 대조 펩타이드(CTRL) 또는 서열 번호 2 서열의 펩타이드(KDKY)의 존재 하에, 성장이 감소된 Matrigel 상에 시딩하였다.

도 1에 도시된 바와 같이, 처리되지 않은 HUVEC(NT)는 Matrigel 상에 시딩한지 8시간 후에 단층을 형성하였다. 동시에, 각각의 혈관신생 촉진 분자(VEGF-A, FGF-2 또는 IL-8)로 처리된 HUVEC는 이동하고 정렬되어 모세관 네트워크에 조직된 관을 형성하였다. 이러한 혈관신생 활성은 대조 펩타이드(CTRL)에 의해 변경되지 않았고, 서열 번호 2의 서열의 펩타이드로 처리된 세포에서 유의하게 손상되었다.

도 1의 그래프는 각각의 웰에 형성된 관의 수를 예시한다. 값은 3회 반복 수행된, 유사한 결과를 갖는 세 가지 실험 중 대표적인 한 가지의 평균을 나타낸다. 통계적 분석은 일원 분산 분석을 이용하여 수행하였고, 데이터는 Bonferroni 사후 테스트를 이용하여 비교하였다(**** p ＜ 0.0001).

실시예 2

바이오폴리머 겔에 내장된 HUVEC 스페로이드는 혈관신생 인자로 자극한 후 내피 스프라우트를 형성하도록 유도될 수 있고, 따라서 문헌 [Laib AM, Bartol A, Alajati A, Korff T, Weber H, Augustin HG. Spheroid-based human endothelial cell microvessel formation in vivo. Nat Protoc. 2009; 4: 1202-1215]에 기술된 바와 같이 생체 내 혈관신생을 모방하는 3D 세포 모델을 나타낸다.

이를 바탕으로, HUVEC 유래 스페로이드는 상이한 혈관신생 촉진 자극제(VEGF-A, FGF-2, 또는 IL-8)의 단독 존재 또는 부재(NT) 하에 또는 대조 펩타이드(CTRL) 또는 서열 번호 2(KDKY) 서열의 펩타이드와 조합하여 유형 I 콜라겐 겔에 통합되었다.

도 2에 도시된 바와 같이, 임의의 혈관신생 촉진 자극제(VEGF-A, FGF-2, 또는 IL-8)는 미세혈관 증식을 강력하게 촉진하는 반면, 서열 번호 2의 서열의 펩타이드는 발아 반응의 급격한 감소를 유도하였다.

도 2의 그래프는 각각의 스페로이드에 대해 형성된 스프라우트의 수를 예시한다. 값은 3회 반복 수행된, 유사한 결과를 갖는 세 가지 실험 중 대표적인 한 가지의 평균을 나타낸다. 통계적 분석은 일원 분산 분석을 이용하여 수행하였고, 데이터는 Bonferroni 사후 테스트를 이용하여 비교하였다(****p ＜ 0.0001).

이들 데이터는 서열 번호 2의 서열의 펩타이드가 자발적인 혈관신생의 기초가 되는 메커니즘을 방해하고 여러 강력한 혈관신생 촉진 분자의 자극에 대한 내피 세포 반응을 방해함으로써 혈관신생 억제제로서 작용할 수 있음을 강력히 시사한다.

실시예 3

SARS-CoV-2 감염된 HL-mEC는, 성장 인자가 감소된 Matrigel에서 혈관신생을 촉진하는 HL-mEC의 능력을 지속하는 혈관신생 분자를 과다 분비하였다.

실제로, SARS-CoV-2 감염된 HL-mEC의 분비체는 VEGF-A 및 FGF-2뿐만 아니라, 금속단백분해효소(MMP), 인슐린 유사 성장 인자 결합 단백질-1(IGFBP-1 인슐린 성장 인자 결합 단백질-1), 헤파린에 결합된 EGF 유사 성장 인자(HB-EGF, 헤파린 결합-표피 성장 인자), 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CSF), 엔도글린, 안지오제닌, 및 아르테민과 같은 여러 혈관신생의 유도제도 발현시킬 수 있다.

서열 번호 2의 서열의 펩타이드가 SARS-CoV-2 감염된 HL-mEC에 의해 분비된 과다한 혈관신생 분자에 의해 유도된 혈관신생을 중화할 수 있을지 이해하기 위해, 대조 펩타이드(CTRL) 또는 서열 번호 2의 서열 펩타이드(KDKY)의 존재 또는 부재 하에, 감염된 세포를 성장 인자 감소된 Matrigel 상에 시딩하여 실험을 수행하였다.

도 3에 도시된 바와 같이, 서열 번호 2의 서열의 펩타이드의 존재 하에, SARS-CoV-2 감염된 HL-mEC는 어떠한 혈관신생 활성도 수행하지 않았다. 반면, 대조 펩타이드 CTRL은 SARS-CoV-2 감염에 의해 유도된 혈관신생 촉진 활성을 방해하지 않았다.

도 3의 그래프는 각각의 웰에 형성된 관의 수를 예시한다. 값은 3회 반복 수행된, 유사한 결과를 갖는 세 가지 실험 중 대표적인 한 가지의 평균을 나타낸다. 통계적 분석은 일원 분산 분석을 이용하여 수행하였고, 데이터는 Bonferroni 사후 테스트를 이용하여 비교하였다(**** p ＜ 0.0001). NT는 감염되지 않은 HL-mEC를 나타낸다.

실시예 4

서열 번호 2 서열의 펩타이드의 항혈관신생 효과는 또한 스페로이드 분석에서 관찰되었다.

실제로, 도 4에 도시된 바와 같이, 대조 펩타이드 CTRL로 처리되거나 처리되지 않은 SARS-CoV-2 감염된 스페로이드에서 극적인 스프라우트의 증식이 관찰된 반면, 서열 번호 2(KDKY) 서열의 펩타이드는 SARS-CoV-2 유도된 혈관신생을 강력하게 억제하였다.

도 4의 그래프는 각각의 스페로이드에 형성된 스프라우트의 수를 예시한다. 값은 3회 반복 수행된, 유사한 결과를 갖는 세 가지 실험 중 대표적인 한 가지의 평균을 나타낸다. 통계적 분석은 일원 분산 분석을 이용하여 수행하였고, 데이터는 Bonferroni 사후 분석을 이용하여 비교하였다(**** p ＜ 0.0001). NT는 감염되지 않은 HL-mEC를 나타낸다.

이들 데이터는 서열 번호 2 서열의 펩타이드의 강력하고 광범위한 항혈관신생 활성을 확인시켜준다.

실시예 5

항혈관신생 활성을 달성하기 위해 어떤 아미노산이 필요한지 정확히 이해하기 위해, 4개의 테트라-펩타이드를 D 배열로 합성하였고, 여기서 원래 펩타이드 KDKY(서열 번호 2)의 각각의 단일 아미노산은 알라닌(A), 즉 ADKY(서열 번호 3), KAKY(서열 번호 4), KDAY(서열 번호 5) 및 KDKA(서열 번호 6)으로 대체되었다.

HUVEC를 50 ng/ml의 VEGF-A 또는 FGF-2를 단독으로 또는 10 ng/ml의 대조 펩타이드(CTRL), 또는 KDKY, AKDY, KAKY, KDAY 또는 KDKA와 함께 함유하는 완전 배지에서, 감소된 성장 인자 Matrigel 코팅된 웰 상에 시딩하였다.

도 5 A-B에 도시된 바와 같이, 서열 ADKY(서열 번호 3)의 펩타이드만이 VEGF-A 또는 FGF-2로 처리된 HUVEC에 대해 강력한 항혈관신생 활성을 유지하였다.

이어서, DKY 서열 펩타이드와 DRY 서열 펩타이드를 합성하였고 이들의 항혈관신생 활성을 상기 기술한 바와 같이 검증하였다.

50 ng/ml의 VEGF-A 또는 FGF-2를 단독으로 또는 10 ng/ml의 CTRL, KDKY, DKY 또는 DRY와 함께 함유하는 완전 배지에서 감소된 성장 인자 Matrigel 코팅된 웰 상에 HUVEC를 시딩하였다.

도 5 C-D에 도시된 바와 같이, DKY 서열 펩타이드와 DRY 서열 펩타이드는 둘 다 서열 KDKY(서열 번호 2)의 펩타이드로서, VEGF-A 또는 FGF-2에 의해 촉진되는 혈관신생 활성을 차단할 수 있었다.

이러한 결과는 항혈관신생 활성에 대한 DKY 서열의 중요성을 확인시켰고, 생물학적 활성 에피토프에서 Arg(R)에 대한 Lys(K) 치환의 일반적인 내성을 확인시켰다.

도 5의 그래프는 각각의 웰에 형성된 관의 수를 예시한다. 값은 3회 반복 수행된, 유사한 결과를 갖는 세 가지 실험 중 대표적인 한 가지의 평균을 나타낸다. 통계적 분석은 일원 분산 분석을 이용하여 수행하였고, 데이터는 Bonferroni 사후 테스트를 이용하여 비교하였다(**** p ＜ 0.0001). NT는 처리되지 않은 세포를 나타낸다.

Claims (10)

1. 서열 DKY, 바람직하게는 XDKY(서열 번호 7) 또는 DKYX(서열 번호 8), 또는 서열 DRY, 바람직하게는 XDRY(서열 번호 9) 또는 DRYX(서열 번호 10)를 포함하고, X는 임의의 아미노산인, 약물로서 사용하기 위한, 5개 아미노산 이하 길이의 펩타이드, 또는 이의 유도체.
2. 제1항에 있어서, 병리학적 혈관신생으로부터 유도된 장애를 치료하는 데 사용하기 위한 펩타이드.
3. 제2항에 있어서, 상기 병리학적 혈관신생으로부터 유도된 장애는 종양, 만성 염증, 및 신생혈관증식 장애로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 펩타이드.
4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 펩타이드는 3 또는 4개의 아미노산과 동일한 길이를 갖는 것인 펩타이드.
5. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 유도체는, N- 및/또는 C-말단이 포스포릴(PO₃ ^2-), 글리코실, 아실, 알킬, 카르복실, 아민, 비오틴, 유비퀴틴으로 이루어진 군으로부터 선택된 유기 화합물에 의해 화학적으로 변형되거나 또는 보호되는 펩타이드인 펩타이드.
6. (a) 서열 DKY, 바람직하게는 XDKY(서열 번호 7) 또는 DKYX(서열 번호 8), 또는 서열 DRY, 바람직하게는 XDRY(서열 번호 9) 또는 DRYX(서열 번호 10)를 포함하고, X는 임의의 아미노산인, 5개 아미노산 이하 길이의 펩타이드, 또는 이의 유도체, 및 (b) 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학 조성물.
7. 제6항에 있어서, 상기 약학 조성물은 상기 펩타이드, 또는 이의 유도체를, 0.0001 중량% 내지 20 중량%, 바람직하게는 0.0001 중량% 내지 15 중량%의 양으로 포함하는 것인 약학 조성물.
8. 제6항에 있어서, 상기 조성물은 경구, 비경구, 흡입(스프레이, 분말 또는 에어로졸), 국소, 직장, 비강, 협측, 질 투여용으로 또는 이식 장치를 통해 제제화되는 것인 약학 조성물.
9. 제6항에 있어서, 상기 조성물은, 바람직하게는 (i) 알칼로이드, (ii) 알킬화제, (iii) 항생제 및 유사체, (iv) 항대사물질, (v) 면역조절제, (vi) 백금 착체, 및 (vii) 항신생물 호르몬 또는 유사체로 이루어진 군으로부터 선택된 항신생물제를 더 포함하는 것인 약학 조성물.
10. 서열 DKY, 바람직하게는 XDKY(서열 번호 7) 또는 DKYX(서열 번호 8), 또는 서열 DRY, 바람직하게는 XDRY(서열 번호 9) 또는 DRYX(서열 번호 10)를 포함하고, X는 임의의 아미노산인, 5개 아미노산 이하 길이의 펩타이드, 또는 이의 유도체.