KR20240028455A - 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매(토마토) 껍질 추출물의 화장료 용도 - Google Patents
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매(토마토) 껍질 추출물의 화장료 용도 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 피부 또는 점막의 자연 방어를 유지, 회복 및/또는 균형, 또는 강화하기 위한, 적어도 5 중량%의 아미린, 적어도 1.5 중량%의 스테롤, 및 적어도 0.5 중량%의 리코펜을 포함하는 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물의 화장료 용도에 관한 것이다.
Description
본 발명은 피부 또는 점막의 자연 방어를 유지, 회복 및/또는 균형, 또는 강화하기 위하여, 활성 성분으로서 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매(토마토) 껍질 추출물의 화장료 용도에 관한 것이다.
피부 장벽은 피부의 자연 방어 시스템과 관련된 물리적 장벽과 화학적 장벽 둘로 구성된다.
피부의 최상의 표층인, 표피(Epidermis)는 각질형성세포(keratinocyte)로 구성되어 있으며, 이는 증식과 분화 과정을 거쳐서 그 결과 상부 피부층이 지속적으로 재생된다. 표피 각질형성세포는 다양한 환경 요인에 대한 장벽으로서 중요한 역할을 한다. 구체적으로, 각질형성세포 분화 프로그램은 피부 최상층에서 죽은 세포(각질세포, corneocytes)의 형성을 유도한다. 각질화된 피부층은 탄력성, 안정성, 보습성, 기계적 저항성 증가를 포함하는, 얼굴 및 조직에 많은 이점을 제공한다.
광범위한 특수 세포, 각질형성세포, 멜라닌세포, 조직 상주 백혈구(수지상 세포) 및 항균 펩타이드(antimicrobial peptides, AMP) 또는 지질 매개체(사이토카인)와 같은 용해성 매개체가 표피 장벽에 기여한다.
피부는 바이러스, 박테리아, 곰팡이, 기생충 및 독소에 대한 제1 장벽이다. 병원체에 대한 선천적 면역 방어는 물리적 장벽, 호중구, NK 세포, 대식세포와 같은 세포 모집(recruitment), 항균 펩타이드 분비에 의해 발생한다. 세 가지 유형의 표피 세포가 면역 반응에 참여한다: 각질형성세포(keratinocytes), 멜라닌세포(melanocytes), 랑게르한스 세포(Langerhans cells). 피부 내에서만 발견되는 이들 세포는 선천적 및 적응 시스템에서 중요한 역할을 한다. 특히, 각질형성세포는 백혈구 모집 및 활성화(선천성 면역 반응)을 위한 케모카인을 생성하며, 후천적 면역 체계 활성화를 유도하는 항원 제시 세포이다. 표피의 최상층에서 발견되는, 랑게르한스 세포는 외부 요소를 감지하고 다른 세포에 경고하여 면역 기능을 활성화한다.
어떤 세포 고갈, 빈약한 면역 조절 또는 기능적 결함은 피부 시각적 측면의 비병리학적 변화 및/또는 기계적 특성, 피부 불편함, 피부 병리학적 장애, 미생물 공격에 대한 더 큰 민감성을 포함하는 징후(manifestation) 발생을 선호할 가능성이 높다. 피부 면역 장애는 나이와 함께 나타나는 정상적인 생리적 현상이지만, 미생물 감염(바이러스 및 박테리아), 물리적 또는 화학적 스트레스, 연대적 노화(chronological ageing), 자외선, 도시 생활 환경 등에 의하여 가속화될 수 있다. 스트레스, 부실한 식사, 햇빛, 오염, 건조 또는 열을 포함한 환경적, 화학적 또는 물리적 공격자와 같은 요인의 축적은 이러한 보호 세포의 기능을 약화시킬 수 있다.
숙주 방어 펩타이드(host defence peptide, HDP)라고도 불리는, 항균 펩타이드(Antimicrobial peptide, AMP)는 모든 생명 종류에서 발견되는 선천적 면역 반응의 일부이다. 소리아신(psoriasin, S100A7), 코에브네리신(koebnerisin, S100A7A), 락토트랜스페린(lactotransferrin, LTF), 칼슘 결합 단백질(S100B), 인간 β-디펜신(human β-defensins, HBD) 및 카텔리시딘(cathelicidin, LL-37)을 포함하여 각질형성세포에서 확인된 수많은 AMP가 있다. 그들의 항균 효과와 더불어, 그들은 과립구, 수지상 세포 및 T 림프구의 이동 및 선천적 및 후천적 면역 반응의 활성화에 역할을 한다.
각질형성세포 내에서의 항균 펩타이드 자극은 건강하거나 병든 피부의 자연 방어를 강화 및/또는 복원하는 것을 가능하게 한다. 따라서 이 자극은 각질층(stratum corneum)(각질 세포 + 세포간접합질(intercellular cement))로 구성된 피부의 수동 방어 시스템을 유리하게 보충하며, 건강 여부에 관계없이, 신생아, 어린이, 성인 및 노인에서 적응 면역 반응을 준비하는 것을 가능하게 한다.
따라서 이러한 AMP 생산에 작용하는 활성 성분은 피부의 자연 방어, 특히 피부 선천적 면역 반응을 강화하여 일반적으로 물리적, 화학적 및 미생물 공격에 맞서 싸운다.
이에 따라, 각질형성세포에서 항균펩타이드의 생성을 자극하는 신규한 활성 성분의 필요성이 존재한다.
본 발명은 피부 또는 점막의 자연 방어를 유지, 균형, 또는 강화하기 위한 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물의 화장료 용도에 관한 것이다.
일부 실시 형태에서, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 리코펜(lycopene)이 고갈된다.
본 발명의 화장료 용도는 바람직하게는 피부 장벽 기능 강화 및/또는 화학적, 물리적 또는 미생물 공격과 같은 외부 공격 또는 스트레스에 대한 피부의 저항성 또는 내성을 유지 또는 증가, 및/또는 화학적, 물리적 또는 미생물 공격성과 같은 공격 또는 스트레스로 인한 피부의 비병리학적 변화를 예방 또는 치료하기 위한 것이다.
일부 실시 형태에서, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 진정제(soothing agent), 특히 피부의 편안함을 개선하거나 회복하기 위하여, 및/또는 건강한 피부 미생물 군집을 회복 및/또는 유지하기 위한 것이다.
특정 실시 형태에서, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 바람직하게는 식물성 또는 미네랄 오일, 바람직하게는 식물성 오일과 조합하여 사용된다. 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물 대 식물성 오일 또는 미네랄 오일의 중량비는 바람직하게는 1:2 내지 1:70이다. 식물성 오일 및 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 토마토 부산물의 동시 또는 개별 추출, 예를 들어 초임계 CO2 추출에 의하여 수득될 수 있다.
본 발명에 따르면, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 유리하게는 추출물 총 중량에 대하여, 최대 0.5%, 바람직하게는 최대 0.3 중량%, 바람직하게는 최대 0.2 중량%, 바람직하게는 최대 0.1 중량%의 리코펜을 포함한다.
상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 바람직하게는 추출물의 총 중량에 대하여, 적어도 5 중량%의 아미린, 특히 α-아미린, β-아미린 및/또는 δ-아미린을 포함하며, 보다 바람직하게는 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 추출물의 총 중량에 대하여, 적어도 1.5 중량%의 α-아미린, 적어도 1 중량%의 β-아미린 및 적어도 2.5 중량%의 δ-아미린을 포함한다.
상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 유리하게는 추출물의 총 중량에 대하여, 적어도 1.5 중량%의 스테롤, 및 바람직하게는 추출물의 총 중량에 대하여 적어도 1 중량%의 β-시토스테롤(β-sitosterol) 및 스티그마스테롤(stigmasterol)을 추가로 포함한다.
일부 실시 형태에서, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 국소 투여용(topical administration) 화장료 조성물 내에 조성물의 총 중량을 기준으로 0.01% 내지 30%, 특히 0.1% 내지 5%의 중량 함량으로 존재하며, 상기 조성물은 적어도 하나의 화장용으로 허용되는 부형제를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물 및 식물성 오일의 조합, 또는 상기 화장료 조성물은, 민감성 피부, 건성 피부, 노화된 피부, 잡티성 피부(blemish-prone skin), 여드름성 피부(acne-prone skin), 아토피성 또는 외부 자극이나 스트레스로 약해진 피부를 가진 건강한 대상에게 국소 적용 또는 경구 투여된다.
본 발명은 또한 여드름성 피부, 잡티성 피부 및/또는 아토피성 피부를 치료하기 위한, 활성 성분으로서, 바람직하게는 상기 정의된 바와 같이, 리코펜이 고갈된 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물을 포함하는 경구 또는 국소 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 바람직하게는 습진, 건선, 주사(rosacea), 여드름, 피부염, 아토피성 피부염 및 자극성 피부(irritative skin)에서 선택된, 변경되거나 불균형한 선천적 면역 반응을 특징으로 하는 피부 질환 치료에 사용하기 위한, 활성 성분으로서, 바람직하게는 상기 정의된 바와 같이, 리코펜이 고갈된 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물을 포함하는 경구 또는 국소 조성물에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 다음을 포함하는 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물에 관한 것이다:
- 추출물의 총 중량에 대하여, 최대 0.3 중량%, 바람직하게는 최대 0.2 중량%, 바람직하게는 최대 0.1 중량%의 리코펜;
- 추출물의 총 중량에 대하여, 적어도 5 중량%의 아미린, 특히 α-아미린, β-아미린 및/또는 δ-아미린;
- 추출물의 총 중량에 대하여, 적어도 1.5 중량%의 스테롤, 및 바람직하게는 추출물의 총 중량에 대하여, 적어도 1 중량% 이상의 β-시토스테롤 및 스티그마스테롤.
본 발명은 또한 상기 정의된 바와 같은, 바람직하게는 조성물의 총 중량에 대하여, 0.01% 내지 30%의 중량 함량의, 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물 및 적어도 하나의 화장용으로 허용가능한 부형제를 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
도 1은 테스트 제품에 따라: 위약 조성물 또는 1% 또는 2%의 본 발명의 추출물에 따른, 시간 경과에 따른 홍반 수준의 변화를 나타낸다.
도 2는 테스트 제품: 위약 조성물 또는 1%(도 2A) 또는 0.5%(도 2B)의 본 발명의 추출물에 따른, 시간 경과에 따른 수화(hydration)의 변화를 나타낸다.
도 2는 테스트 제품: 위약 조성물 또는 1%(도 2A) 또는 0.5%(도 2B)의 본 발명의 추출물에 따른, 시간 경과에 따른 수화(hydration)의 변화를 나타낸다.
본 발명자들은 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물이 피부 자연 방어, 특히, 예를 들어 항균 펩타이드 생산을 통하여, 피부 선천적 면역을 향상시키는데에 사용될 수 있음을 발견하였다.
실험예에서 입증된 바와 같이, 본 발명에 따른 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 전사 조절, 예를 들어 생체 외(ex vivo) 인간 피부 체외이식편(explant) 상에서의 유전자 발현 프로필 조절을 제공한다.
중요하게는, 본 발명의 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 소리아신(psoriasin, S100A7), 코에브네리신(koebnerisin, S100A7A), 락토트랜스페린(lactotransferrin, LTF), 칼슘 결합 단백질(Calcium binding protein, S100B)과 같은, 항균 펩타이드(AMP)를 암호화하는 유전자의 발현을 상향 조절한다. 이러한 AMP 유전자의 상향 조절은 기본 및 자극된 산화 상태(즉, 포르볼 12-미리스테이트 13-아세테이트(phorbol 12-Myristate 13-Acetate)의 존재) 모두에서 관찰되었다.
따라서, 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 생체 내(in vivo) 피부의 선천적 면역을 자극하여 결과적으로 피부 보호 장벽을 강화시킬 것으로 기대된다. 실험예에 사용된 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 일반적으로 리코펜이 고갈되어 있으나, 상당량의 아미린(amyrin), 특히 δ-아미린 및 스테롤을 함유하고 있다.
중요하게, 아미린은 식물계 전체에 걸쳐 편재적으로 분포되는 펜타사이클릭 트리테르펜(pentacyclic triterpene)의 한 종류이다. α-아미린(우르산 골격, ursane skeleton), β-아미린(올레아난 골격, oleanane skeleton) 및 δ-아미린은 트리테르펜의 밀접하게 관련된 세 가지 천연 화학 화합물이다. ABAM(α 및 β-아미린)은 위장 보호(Oliveira FA et al., Planta Med 2004; 70: 780-782), 및 간 보호 활성(Oliveira FA et al., J Ethnopharmacol 2005; 98: 103-108) 과 같은 다양한 약리학적 활성을 나타내는 것으로 나타났다. 대조적으로, δ-아미린은 식물 사이에 편재적으로 분포되지 않는다.
발명자들이 아는 한, 선행 기술에서는 아미린이 풍부하고 리코펜이 고갈된 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 추출물이 특히 AMP의 발현을 유도하여, 피부 선천적 면역을 촉진할 것이라고 서술하지 않는다.
따라서, 본 발명은 피부 또는 점막의 자연 방어를 유지, 균형 또는 강화하기 위한, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물의 화장료, 비치료적 용도에 관한 것이다.
본 발명의 맥락에서, "솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매" 또는 "토마토"는 일반적으로 토마토 식물로 알려진 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 식물의 식용 열매를 나타낸다. "토마토"와 "솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 "이라는 용어는 상호교환적으로 사용될 수 있다.
본 발명의 맥락에서, "솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질" 용어는 토마토의 외부 보호층을 나타낸다. 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질은 큐티클(큐티클막(cuticular membrane))로 덮인 표피, 및 다층의 피하조직을 포함한다. 용어 "솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질(skin)", "솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 과일 껍질(peel)", "토마토 과일 껍질(peel)" 및 "토마토 열매 껍질(skin)"은 상호교환적으로 사용될 수 있다. 따라서, 용어 "토마토 껍질 추출물" 또는 "솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물"은 본원에 정의된 토마토 껍질의 친유성 추출물을 의미한다.
본 발명의 맥락에서, 용어 "피부(skin)"는 인체 피부의 모든 부분, 특히 입술과 눈꺼풀, 목, 두피를 포함하는 얼굴 피부 및 손 피부를 나타낸다. 용어 "피부"는 또한 머리카락 및 손톱과 같은 피부 부속물도 포괄할 수 있다.
피부의 자연 방어 시스템은 화학적, 물리적 또는 미생물 공격으로부터 피부를 보호하며 두가지 주요 목표를 가진다: 공격을 억제하고(containing) 나머지 면역 체계에 공격을 경고한다. 피부나 점막의 자연적 방어력을 유지, 균형(또는 정상화) 또는 강화함으로써, 피부와 피부 미생물 군집이 좋은 건강 상태로 유지된다. 따라서 피부는 시각적 측면과 기계적 특성을 유지하면서, 화학적, 물리적 또는 미생물 공격으로부터 완전히 방어할 수 있다.
본 발명의 맥락에서, "공격" 또는 "스트레스"라는 용어는 피부의 면역 반응을 변경하거나 촉발할 수 있는 외부 조건에 대한 피부의 노출을 나타낸다. 이러한 용어는 또한 피부의 면역 반응을 변경하거나 촉발할 수 있는 내부 또는 정서적 스트레스를 나타낼 수 있다.
본 발명의 맥락에서, 화학적 공격에는 알레르겐, 오염물질(예를 들어, 배기 가스, 미세 입자, 휘발성 유기 화합물), 담배(tabaco), 유기용매, 건조제, 산성 또는 염기성 용액과 같은 자극제 및 소독제, 하이드로알코올 용액이나 젤, 항여드름제와 같은 특정 치료제를 포함한다.
본 발명의 맥락에서, 물리적 공격은 열 공격, 기계적 공격(예를 들어, 필링(peeling), 피부 마모, 면도, 제모, 레이저) 및 전기 공격을 포함한다. 특정 실시 형태에서, 물리적 공격성은 바람, 추위 또는 더위와 같은 기상 상태를 의미한다.
본 발명의 맥락에서, 상기 미생물 공격은 박테리아, 곰팡이, 바이러스 및 기타 병원체 제제와 같은 미생물 제제에 의한 공격을 포함한다.
특정 실시 형태에서, 공격은 담배 소비, 알코올 소비, 고지방 또는 빈약한 식습관, 초가공식품 소비, 정서적 스트레스 등과 같은 생활 방식으로 인한 스트레스를 더 포함한다.
특정 실시 형태에서, 공격은 UV-방사선에 의한 공격성을 포함하지 않는다.
특히, 본 발명에 따라 사용되는 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 피부 각질형성세포에 의한 항균 펩타이드의 생성을 강화시킴으로써 피부의 선천 면역 반응을 강화시킨다.
따라서 본 발명은 피부 또는 점막의 선천적 면역 반응을 유지, 균형 또는 강화하기 위한, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물의 화장료 용도에 관한 것일 수 있다. 본 발명은 또한 면역 체계, 특히 피부 면역 체계의 정상적인 기능에 기여, 및/또는 피부 선천 면역 증진을 위한, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물의 미용 용도에 관한 것이다. 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물의 화장료 용도는 피부의 면역 불균형을 회복하기 위한 것일 수 있다.
특정 실시 형태에서, 상기 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 피부 장벽 기능 강화 및/또는 화학적, 물리적 또는 미생물 공격과 같은 외부 공격 또는 스트레스에 대한 피부의 저항 또는 내성을 유지 또는 증가시키기 위하여, 미용 분야에서 따라서 사용된다.
본 발명의 화장료 용도의 맥락에서, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 건강한 피부 부위에 국소적으로 도포되거나, 건강한 피부를 갖는 대상에게 경구 투여될 수 있다.
본 명세서에서, "건강한 피부" 또는 "건강한 피부 부위"는 어떠한 피부 질환 또는 상처에도 시달리지 않은 피부를 의미한다. 그러나 용어 "건강한 피부"는 또한 외부 공격 또는 스트레스에 대한 비병리학적, 변형된, 면역 반응 및/또는 하기에 추가로 설명되는 피부의 시각적인 측면 또는 기계적 특성의 비병리학적 변형을 나타내는 피부를 포함한다.
일부 실시 형태에서, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 민감성 피부, 건성 피부, 노화된 피부, 잡티성(blemish-prone) 피부, 여드름성(acne-prone) 피부, 아토피성 또는 화학적, 물리적, 또는 미생물 공격과 같은 외부 공격 또는 스트레스에 의해 약해진 피부를 가진 대상에게 투여된다.
외부 공격에 대한 피부의 저항성을 높여줌으로써, 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 외부 공격에 대한 노출로 기인한 피부의 비병리학적 변형를 예방 또는 완화할 수 있다.
따라서, 본 발명은 또한 예를 들어, 상기 기술한 바와 같은 공격 또는 스트레스에 의한 피부의 비병리학적 변화를 예방하거나 치료하기 위한 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물의 용도에 관한 것이다.
본 명세서에 사용된 바와 같이, 피부의 비병리학적 변화는 피부의 외관 또는 기계적 특성의 비병리학적 변화를 의미한다. 피부의 비병리학적 변화는 피부, 특히 표피 얇아짐, 피부의 윤기 상실, 다크 서클, 칙칙한 안색, 피부 탄력 상실, 피부의 매끄러운 면의 변화, 피부 발적(redness) 거칠기(roughness)의 증가, 건조함 등에 국한되지 않고 포함한다.
본 발명의 범위 내에서, "비병리학적 변화의 예방"은 상기 피부 변화의 발생을 예방, 감속 또는 지연시키는 사실을 의미한다.
"비병리학적 변화의 치료"는 상기 출현(appearance)을 교정, 약화, 절감, 눈 덜 띄지 않게 만드는 것, 감소, 또는 피부 변화를 심지어는 사라지게 만드는 사실을 의미한다.
추가 실시 형태에서, 본 발명은 바람직하게는 리코펜이 고갈된 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물의 피부 미생물군(microbiota)의 유지, 회복 또는 균형을 위한 화장료 용도에 관한 것이다.
본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "피부 미생물군(skin microbiota)", "피부 미생물 군집(skin microbiome)" 또는 "피부 균총(skin flora)"은 피부, 일반적으로 인간 피부 상에 서식하는 미생물을 의미하며 박테리아, 마이코박테리아, 바이러스, 진균 및 기생충 세균을 포함한다. 대부분은 표피의 표면층(superficial layer)과 모낭의 상부에서 발견된다. 피부 균총은 대개 비병원성이고, 공생적(commensal) 또는 상리공생적(mutualistic)이다. 이러한 미생물이 제공할 수 있는 이점은 영양분 경쟁, 그들에 대하여 화학물질 분비, 또는 피부 면역 체계 자극을 통하여, 일시적인 병원성 유기체가 피부 표면에 서식(colonizing)하는 것을 방지하는 것을 포함한다.
피부 미생물군을 "복원", "균형" 또는 "정상화"한다는 것은 피부 건강 촉진 및/또는 건강한 피부에 상응하는 미생물 분포의 균형을 획득하기 위하여 미생물의 다양성을 회복하는 것을 의미한다. 예를 들어, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은, 예를 들어 특정 C. acnes 균주와 같은, 잡티나 여드름과 관여될 수 있는 박테리아 균주의 다량을 줄일 수 있다. 그러한 맥락에서, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 여드름성 피부 또는 잡티성 피부를 가진 대상에 일반적으로 사용될 수 있다.
본 발명자들은 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물이 기본 상태와 자극 상태 모두에서 염증 및 산화 스트레스와 관련된 유전자의 발현을 조절한다는 것을 추가로 보여주었다.
실제로, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 염증(주로 CXCL8, IL6, CXCL2, CXCL3, CCL20, TNFAIP3, TNFAIP6) 및 산화 스트레스(PTGS2, GPX3, HMOX1), 및 말단 각질형성세포 분화(KRT17, SPRR1A, TGM1, 여러 LCE, EREG, CDSN 및 IVL)에 관여하는 유전자의 강력한 하향 조절을 유도하였다.
이러한 하향조절은 또한, 예를 들어 외부 공격(insult) 또는 스트레스에 대한 피부의 과민반응을 예방하여, 정상적인 피부 장벽 기능을 유지하고 강화하는 데 기여할 수 있다.
그 외에 본 발명에 따른 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 피부가 산화 스트레스 하에 있으며, 활성산소종(Reactive Oxygen Species)의 생성을 겪을 때 염증을 감소시키는 데에도 사용될 수 있다. 보다 일반적으로, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 예를 들어 산화 스트레스 억제 및 항염증 효과를 통하여 진정 효과(soothing effect)를 나타낼 수 있다.
추가 실시 형태에서, 따라서 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 진정제로서, 특히 피부 편안함을 개선 또는 회복시킬 뿐만 아니라 피부 불편함을 예방 또는 완화시키기 위하여 사용된다.
본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "피부 불편함"은 당김감, 따끔거림, 가려움 또는 열감, 피부가 건조하거나 탈수된 감각 및 일시적인 발적(redness)과 같이, 병리(pathology)와 관련되지 않은 일련의 불쾌한 감각을 의미한다. 이러한 감각은 병리와 관련이 없으며 특정 외부 요인(예를 들어, 태양, 바람 또는 추위에의 장기간 노출), 특정 미용 치료(예를 들어 석회암 또는 하이드로알코올 용액으로 너무 자주 씻음, 필링(peeling), 면도, 각질 제거(exfoliation), 제모, 염색, 영구 화장(permanent)과 같은 공격적인 미용 치료)에 의하여 유발될 수 있거나 소위 민감성, 과민성, 반응성, 불내성(intolerant) 또는 심지어 아토피성 피부와 관련될 수 있다.
예를 들어, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 민감성, 반응성 또는 불내성 피부를 완화하고, 보다 일반적으로 관리하는 데 사용할 수 있다.
용어 "민감성, 반응성 또는 불내성 피부"는 피부 불편함을 유발하는 외부 요인에 대한 불균형한 반응을 특징으로 하는 피부를 의미한다. 이러한 증가된 반응성은 피부의 장벽 기능, 보다 일반적으로는 피부 선천 면역 체계의 비병리적 변화로 인해 발생할 수 있으며, 이는 외부 자극에 대한 피부의 내성 역치를 감소시킨다.
보다 구체적으로, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 산화 스트레스에 대한 피부 반응 조절 및/또는 염증성 피부 반응 조절을 통하여 피부 진정제로 사용될 수도 있다.
보다 일반적인 측면에서, 본 발명은 본 명세서에 정의된 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물을 피부 및/또는 점막에 적용하거나 경구 투여하는 것을 특징으로 하는, 민감성 피부, 건성 피부, 탈수 피부, 불내성(intolerant) 피부, 노화된 피부, 잡티성 피부, 여드름성 피부, 아토피성 피부, 화학적, 물리적, 미생물 공격과 같은 외부 공격 또는 스트레스로 약화된 피부, 비병리학적 면역 불균형 또는 비병리학적 홍반(reddening)를 나타내는 피부의 미용적 치료를 위한 방법에 관한 것일 수 있다.
본 발명은 또한 본 명세서에 정의된 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물을 대상체에게 국소 도포 또는 경구 투여하는 것으로 구성되는, 그의 상태 및/또는 외관 개선의 관점에서 피부 및/또는 점막의 미용 관리 방법에 관한 것일 수도 있다.
본 발명의 맥락에서, 용어 "피부의 상태 및/또는 외관 개선"은 다음을 포함한다 :
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피부톤 통일;
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더 화사하고 및/또는 더 밝고 및/또는 더 깨끗한 피부톤의 균형(Balancing) 및/또는 복원;
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피부 견고함(firmness)의 균형 및/또는 복원 및/또는 표피, 특히 얼굴 피부의 표피의 퍼밍(firming) 및 노화 방지 촉진.
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피부, 특히 얼굴 피부의 능력을 균형 및/또는 보습화(moisturizing);
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칙칙한 피부톤 및/또는 흐릿한 피부톤의 예방 또는 치료;
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외부 공격 또는 스트레스로 유발된 색소침착 반점을 포함하는, 피부 색소 침착 불규칙성의 예방 또는 치료;
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피부, 특히 얼굴 피부를 더 신선하고, 더 빛나게 만듬;
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피부의 외관을 진정시킴;
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표피, 특히 얼굴의 표피의 회복을 촉진 또는 가속화;
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피부, 특히 얼굴 피부의 재활력화(Revitalizing);
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표피 두께의 증가;
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건강한 피부 톤의 균형 및/또는 촉진; 및/또는
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피부 장벽 기능의 예방, 치료 또는 회복.
추가 실시 형태에서, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 산화 스트레스에 대한 피부 반응을 조절하고 피부 각질형성세포에 의한 항균 펩타이드 생성을 향상시킴으로써 면역 피부 증진제 및/또는 피부 보호제로 사용된다.
상기 기술된 미용 방법 및 용도에서, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 바람직하게는 미용제, 즉 미용 효과를 갖는 활성제로서 사용된다. "미용효과가 있는 활성제"는 피부에 작용하여 피부에 적어도 하나의 미용 효과를 주는 화합물을 의미한다. "미용 효과"란 피부 또는 점막의 외형(aspect), 기계적 특성 또는 감촉(feeling)을 수정 및/또는 개선, 및/또는 외부 침입으로 인한 피부의 비병리학적 변형으로부터 보호하는 것을 목적으로 하는 모든 비치료적 효과를 의미한다.
본 발명은 또는 여드름성 피부, 잡티성 피부 및/또는 아토피성 피부의 치료에 사용하기 위하여, 바람직하게는 상기에 정의된 바와 같은, 리코펜이 고갈된 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물을 활성 성분으로 포함하는 경구 또는 국소 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한, 바람직하게는 습진, 건선, 주사비(rosacea), 여드름, 피부염, 아토피성 피부염 및 자극성 피부(irritative skin)로부터 선택된, 선천성 면역체계의 변화 또는 불균형을 특징으로 하는 피부 질환에 사용하기 위하여, 바람직하게는 본 명세서에 정의된 바와 같이, 유리하게는 리코펜이 고갈된, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물을 활성 성분으로 포함하는 경구 또는 국소 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 바람직하게는 습진, 건선, 주사비, 여드름, 피부염, 아토피성 피부염 및 자극성 피부로부터 선택되는, 선천성 면역 체계의 변화 또는 불균형을 특징으로 하는 피부 질환 치료를 위한 약학적 또는 피부과학적 조성물을 생산하기 위하여, 바람직하게는 본 명세서에서 정의된 바와 같이, 유리하게는 리코펜이 고갈된, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 또한, 바람직하게는 본 명세서에 정의된 바와 같이, 유리하게는 리코펜이 고갈된, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물의 유효량을, 이를 필요로 하는 대상에게 투여, 특히 국소 또는 경구 투여하는 단계를 포함하는, 바람직하게는 습진, 건선, 주사비, 여드름, 피부염, 아토피성 피부염 및 자극성 피부 중에서 선택되는, 선천성 면역 체계의 변화 또는 불균형을 특징으로 하는, 피부 질환의 치료 방법에 관한 것이다,
추가 실시 형태에서, 본 명세서에 정의된 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 미성숙, 정상 또는 성숙/노인 여부에 관계없이, 피부 및/또는 점막의 장애 또는 질환을 예방 또는 치료하기 위한 것일 수 있다.
추가 실시 형태에서, 본 발명은 미성숙, 정상, 성숙/노인 여부에 관계없이, 피부 및/또는 점막의 장애 또는 질환을 예방 또는 치료하기 위한 약학적 또는 피부과학적 조성물을 제조하기 위한, 명세서에서 정의된 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물의 용도에 관한 것일 수 있다.
추가 실시 형태에서, 본 발명은 바람직하게는 본원에 정의된 바와 같은, 유리하게는 리코펜이 고갈된, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물의 유효량을 이를 필요로 하는 대상에게 투여, 특히 국소 또는 경구 투여하는 것을 포함하는, 미성숙, 정상 또는 성숙/노인 여부에 관계없이, 피부 및/또는 점막의 장애 또는 질환을 예방 또는 치료하는 방법에 관한 것일 수 있다.
상기 실시 형태에서, 상기 피부 및/또는 점막의 장애 또는 질환은 염증성 질환, 산화 질환, 부스럼(blotchiness), 화학적 또는 대기 오염과 관련된 및/또는 UV 또는 IR 방사선 노출과 관련된 라디칼 공격(radical attack)과 관련 장애, 장벽 또는 항상성 장애, 노화, 특히 연대적 노화(chronological aging) 및/또는 화학선 노화(actinic aging), 및/또는 물리적, 화학적 또는 미생물 공격 요인, 더욱 유리하게는 염증성 및 자극성 질환, 또는 장벽 또는 항상성 장애로 구성된 군으로부터 선택될 수 있다.
유리하게는, 피부의 염증성 또는 자극성 질환, 또는 피부의 장벽 또는 항상성 장애는 다음과 같다: 여드름, 주사비 또는 홍반증(erythrocouperose), 혈관 장애, 특히 부스럼(blotchiness), 좌위 피부염(seat dermatitis), 아토피성 피부염, 습진, 접촉성 피부염, 자극성 피부염, 알레르기성 피부염, 지루성 피부염(영아지방관(cradle cap)), 건조증(xerosis), 피부 홍반(cutaneous erythema), 노인 또는 광노화 피부, 광과민성 피부, 피부 침착(pigmented skin)(기미, 염증후 색소침착 등), 튼살이 있는 피부, 일광 화상, 화학적, 물리적, 세균학적 및 곰팡이 제제에 의한 자극, 및 화학적 또는 대기 오염 및/또는 UV 또는 IR 방사선 노출과 관련된 라디칼 공격(radical attack)과 관련된 장애.
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물과 식물성 오일의 조합
본 발명의 유리한 실시 형태에서, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 친유성 비히클(vehicle), 바람직하게는 식물성 또는 미네랄 오일, 더욱 바람직하게는 식물성 오일과 조합하여 사용된다. 특히 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 식물성 오일에 희석된다.
본 발명자들은 본 발명에 따라 사용되는 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물을 식물성 오일과 같은 친유성 비히클과 결합함으로써, 아미린 및 스테롤을 포함하는, 본 발명에 따른 용도에 특히 관심이 있는 화합물이 더 높은 생체접근성을 갖는 것을 발견하였다. 따라서 상기 추출물이 식물성 오일과 같은 친유성 비히클로 희석되는 경우, 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물의 미용, 피부과학 또는 약학적 활성이 향상된다.
유리하게는, 상기 친유성 비히클은 식물성 오일이다.
유리하게는, 본 발명에 따라 사용되는 식물성 오일은 토마토 종자유, 사과 종자유, 배 종자유, 해바라기 오일, 팜 오일, 팜핵(palm kernel) 오일, 코코넛 오일, 포도 종자유, 흑겨자 오일, 양귀비 종자유, 카리테 버터(karite butter) 오일, 스위트 아몬드 오일, 대두 오일, 아보카도 오일, 땅콩 오일, 코튼(cotton) 오일, 참기름, 올리브오일, 옥수수오일, 코코아빈 오일, 피마자 오일, 베헨(behen) 오일, 아마(flax) 오일, 유채유, 아나토(annatto) 오일, 소맥배아(wheatgerm) 오일, 홍화유, 호두유, 헤이즐넛 오일, 순무 종자유(turnip seed oil)을 포함하는 군으로부터 선택된 오일이다. 바람직하게는, 본 발명에 따라 사용되는 식물성 오일은 식물성 종자유고, 더욱 바람직하게는 토마토 종자유다.
특정 실시 형태에서, 식물성 또는 미네랄 오일, 바람직하게는 식물성 오일에 대한 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물의 중량비는 1:70 내지 1:1, 예를 들어 1:50 내지 9:10, 0.1 내지 0.9, 예를 들어 0.2 내지 0.8 또는 1:2(0.5)와 같은 0.3 내지 0.6이다.
예를 들어, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 친유성 비히클, 바람직하게는 토마토 종자유와 결합되어, 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물과 친유성 비히클의 중량비가 0.1 내지 0.9, 예를 들어 약 0.5인 중간 조성물을 제공할 수 있다. 이 중간 조성물은 바람직하게는 피부에 도포하기 위한 화장료 조성물에 포함된다. 예를 들어, 이러한 중간 조성물은 피부에 도포될 화장료 조성물의 총 중량의 0.1 중량% 내지 10 중량%를 차지할 수 있다.
또 다른 예로서, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 식물성 또는 미네랄 오일에 대한 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물의 중량비가 1:75 내지 1:20, 특히 1:60 내지 1:30, 바람직하게는 1:55 내지 1:45, 예를 들어 약 1:49의 범위에서 친유성 비히클에 희석될 수 있다. 이러한 실시 형태에서, 상기 조합은 피부에 직접 도포되거나 경구 경로로 투여될 수 있다.
특정 실시예에서, 본 발명에 따라 사용되는 식물성 오일은 토마토 종자유로서, 토마토 종자유의 총 중량에 대하여, 적어도 40 중량%, 특히 45 내지 70 중량%의 리놀레산을 포함하는 것이 바람직하다. 본 발명에 사용되는 토마토 종자유는 토마토 종자유의 총 중량에 대하여, 적어도 10 중량%, 특히 10 내지 30 중량%의 올레산을 더 포함할 수 있다. 본 발명에 사용되는 토마토 종자유는 토마토 종자유의 총 중량에 대하여, 적어도 5 중량%, 특히 5 내지 15 중량%의 올레산을 더 포함할 수 있다. 예를 들어, 식물성 오일은 리놀레산 45 중량% 내지 55중량%, 올레산 15 중량% 내지 25 중량%, 팔미트산 5 중량% 내지 15 중량%를 포함할 수 있다.
솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물 또는 상기 추출물 및 식물성 오일의 조합을 포함하는 조성물
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 일반적으로 조성물 형태로 국소적으로 또는 경구적으로 투여된다.
본 발명에 따르면, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 단독으로, 식물성 오일 또는 미네랄 오일과 조합하여 사용될 수 있거나, 또는 화장료, 더마코스메틱(dermo-cosmetic), 약학적 또는 식이 보충제와 같은 뉴트라슈티컬(nutraceutical) 조성물, 바람직하게는 화장료, 더마코스메틱(dermo-cosmetic)또는 뉴트라슈티컬 조성물에 활성 성분으로 존재할 수 있다. 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물이 식물성 또는 미네랄 오일과 조합되는 경우, 상기 조합은 화장료, 더마코스메틱, 의약품 또는 식이 보충제와 같은 뉴트라슈티컬 조성물, 바람직하게는 화장료, 더마코스메틱 또는 뉴트라슈티컬 조성물에도 존재할 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 국소 또는 경구 투여, 특히 국소 투여를 위해 제형화되는 것이 바람직하다.
유리하게는, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 조성물의 총 중량에 대하여, 0.001% 내지 20%, 0.01% 내지 10%, 특히 0.1% 내지 5%의 중량 함량으로 조성물 내에 존재하며, 상기 조성물은 적어도 하나의 부형제를 포함한다.
유형에 따라(화장료, 약학 또는 피부과학), 본 발명에 따른 조성물은 화장료, 약학, 영양학 또는 피부과학적으로 허용되는 적어도 하나의 부형제를 더 포함한다. 특히, 본 발명에 따른 조성물은 계면활성제 및/또는 유화제, 증점제, 방부제, 화학 또는 미네랄 필터, 보습제, 완충제, 킬레이트제, 변성제, 불투명제, pH 조절제, 환원제, 안정제, 열수, 겔화제, 필름 형성 폴리머, 필러, 매트화제(mattifying agent), 광택제(gloss agent), 안료, 염료, 향수 및 이들의 혼합물 중에서 선택되는 당업자에게 미용적, 약학적, 영양학적 또는 피부과학적으로 공지된 적어도 하나의 첨가제(excipient)를 더 포함할 수 있다. 당업자는 본 발명의 일반 지식을 사용하여 본 발명에 따른 조성물의 제형을 조정하는 방법을 인지한다. 또한 CFTA(Cosmetic Ingredient Handbook, sixteenth Edition(2016))은 본 발명에 사용하기에 적합한 다양한 화장품 부형제에 대해 설시한다.
본 발명에 따른 조성물은 국소 투여에 적합한 다양한 제제의 형태로 제형화될 수 있으며, 크림, 에멀젼, 마이크로에멀젼, 나노에멀젼, 세럼, 비누, 젤, 밀크제, 연고, 로션, 오일, 수성, 알코올성 또는 글리콜성 용액, 분말, 패치, 스프레이, 샴푸, 바니시(varnishes), 폼 또는 기타 모든 외용 제품을 포함한다.
실제로, 본 발명에 따른 조성물은 미용 케어 제품, 메이크업 제품 또는 신체 위생 제품과 같은 모든 유형의 화장품 형태일 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 또한 경구 투여에 적합한 다양한 제제의 형태로 제형화될 수 있으며, 정제, 캡슐, 코팅정, 시럽, 현탁액, 용액, 분말, 펠렛, 에멀젼, 마이크로스피어 또는 나노스피어의 현탁액, 지질 소포(vesicle) 현탁액 또는 다양한 폴리머 기반 소포를 포함한다.
유리하게는, 상기 조성물은 국소 화장료 조성물이다.
화장료 조성물은 또한 다른 화장료 활성 성분을 포함할 수 있다. 당업자에게는 피부의 건강 및/또는 물리적 외관을 개선하기 위하여 많은 화장료 활성 성분이 알려져 있다. 한편으로, 본 발명에 기술된 화합물들은 서로 조합될 때 시너지 효과를 가질 수 있다. 이러한 조합 또한 본 발명에 의해 포괄된다. CTFA 화장품 성분 핸드북, 16판(2016)은 화장품 및 제약 산업에서 일반적으로 사용되는 다양한 화장료 및 약학 성분을 설명하며, 이는 특히 국소 용도로 사용하기에 적합하다. 이러한 성분 종류의 예는 다음의 화합물을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다: 연마제, 흡수제, 향수, 안료, 염료, 에센셜 오일, 수렴제 예를 들어, 올리브 오일과 같은 화장료 화합물. 정향, 멘톨, 장뇌(camphor), 유칼립투스 오일, 유제놀(eugenol), 멘틸 락테이트(menthyl lactate), 위치하젤 증류액, 항여드름제, 항응집제, 항거품제, 항균제(예: 요오도프로필 부틸카바메이트), 항산화제, 결합제(binder), 생물학적 첨가제, 완충제, 발포제, 킬레이트제, 첨가제, 살생물제, 변성제, 증점제 및 비타민 및 이들의 유도체 또는 등가물, 필름 형성재, 폴리머, 불투명제, pH 조절제, 환원제, 탈색 또는 미백제(예: 하이드로퀴논, 코직산(kojic acid), 아스코르브산, 마그네슘아스코르빌포스페이트, 아스코르빌글루코사민), 컨디셔닝제(예: 습윤제).
유리하게는, 본 발명에 따라 사용되는 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 단독으로 또는 식물성 또는 미네랄 오일과 같은 친유성 비히클와 조합되어, 조성물의 유일한 활성 성분이다.
특정 실시 형태에서, 본 발명에 따라 사용되는 조성물은 다음을 포함할 수 있다(조성물의 총 중량에 대한 중량 함량으로 표현):
- 0.001% 내지 20%의 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물, 구체적으로 0.01% 내지 10%, 더 구체적으로 0.1% 내지 5%;
- 60 % 내지 99.999 %의 적어도 하나의 부형제; 및
- 0 % 내지 20 %의 추가 활성 성분.
본 발명에 따른 용량 및 최적의 갈레닉(galenic) 제형은 환자 또는 동물에 적합한 약리학, 피부과학, 뉴트라수티컬 또는 미용 치료적으로 제형화 되는 경우, 일반적으로 고려되는 기준, 예를 들어 환자 또는 동물의 연령 및 체중, 일반적 상태의 중증도, 치료 내성, 관찰된 부작용, 피부 유형에 따라 확립될 수 있다.
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물 및 이의 수득을 위한 공정
본 발명에 따른 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질의 추출로부터 수득한, 특히 산업 또는 음식물 폐기물로부터 나온 토마토 부산물의 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질의 추출로부터 수득된 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물이다. 추출물이 수득되는 토마토 부산물은 일반적으로 식품 산업에서 나오는 토마토 찌꺼기이다. 토마토 부산물이 토마토 껍질 및 종자를 포함하는 경우, 상기 종자 및 껍질은, 예를 들어 스크리닝에 의해 분리될 수 있으며 껍질은 회수된다.
본 발명에 따른 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물이다. 본 발명의 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 식물성 오일과 같은 지질 매질에 비하여 물에서의 낮은 용해도를 나타낸다. 본 발명의 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 바람직하게는 솔라늄 리코퍼시쿰 열매(토마토) 껍질 왁스(skin wax)라고도 불리는, 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 왁스(peel wax)이다. 본 발명의 솔랴늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 바람직하게는 리코펜이 고갈되고 바람직하게는 아미린 및 스테롤을 포함한다.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 사용된 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 리코펜이 고갈되어 있다. 유리하게는, 상기 추출물은 추출물의 총 중량에 대하여, 최대 0.5 중량%, 바람직하게는 최대 0.3 중량%, 바람직하게는 최대 0.2 중량%, 바람직하게는 최대 0.1 중량%, 보다 바람직하게는 최대 0.05 중량%의 리코펜을 포함한다. 특히, 사용된 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 추출물의 총 중량에 대하여, 0% 내지 0.1 중량%, 바람직하게는 0% 내지 0.05 중량%의 리코펜을 포함한다.
리코펜은 카로티노이드이다. 본 발명의 특정 실시 형태에서, 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물에는 카로티노이드가 고갈되어 있다. 더욱 특히, 추출물은 추출물의 총 중량에 대하여 최대 0.6 중량%, 바람직하게는 최대 0.3 중량%, 특히 최대 0.2 중량%의 카로티노이드를 포함한다. 본 발명의 맥락에서, 카로티노이드, 및 특히 리코펜의 중량 함량은 당업자에게 공지된 방법, 예를 들어 Gleize 등에 의해 기술된 방법에 따른 HPLC-DAD에 의해 결정된다(Gleize, B., M. Steib, M. Andre, and E. Reboul. 2012. Simple and fast HPLC method for simultaneous determination of retinol, tocopherols, coenzyme Q10 and carotenoids in complex samples. Food Chemistry 134: 2560-2564). 본 발명의 맥락에서, "최대 X%"는 0% 내지 X%를 의미한다.
바람직한 실시예에서, 본 발명에 따라 사용되는 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 아미린, 특히 δ-아미린이 풍부하다. 특히, 본 발명에 따라 사용되는 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물의 총 중량에 대하여 적어도 5 중량%의 아미린을 포함한다. 유리하게는, 본 발명에 따라 사용되는 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물의 총 중량 대비 5 내지 32중량%의 아미린을 포함한다. 예를 들어, 본 발명에 따라 사용되는 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물의 총 중량에 대하여 5 내지 25중량%, 5 내지 20 중량%, 5 내지 15 중량% 또는 5 내지 10 중량%의 아미린을 포함한다.
아미린은 다음 화학식(Iα), (Iβ) 및(Iδ)의 α-아미린, β-아미린 및 δ-아미린 형태로 발견될 수 있는 트리테르펜 화합물이다:
본 발명에 따르면, 사용된 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 바람직하게는 α-아미린, β-아미린 및/또는 δ-아미린을 포함하고, 더욱 바람직하게는 사용된 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 α-아미린, β-아미린 및 δ-아미린을 포함하고, 특히 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물의 총 중량에 대하여, 적어도 1.5 중량%, 특히 1.5 내지 10 중량%의 α-아미린, 적어도 1 중량%, 특히 1 중량% 내지 7 중량%의 β-아미린 및 2.5 중량% 이상, 특히 2.5 중량% 내지 17 중량%의 δ-아미린을 포함한다. 본 발명의 맥락에서, 아미린의 중량 함량은 당업자에게 공지된 방법, 예를 들어 Bauer et al.에 의해 기술된 방법에 따른 GC-MS에 의해 측정된다(Bauer, S., E. Schulte, and H.-P. Thier. 2004. Composition of the surface wax from tomatoes: I. Identification of the components by GC/MS. European Food Research and Technology 219).특정 실시 형태에서, α-아미린과 β-아미린의 합에 대한 δ-아미린의 중량비는 0.8 내지 1.2, 바람직하게는 0.9 내지 1.1이다.
본 발명에 따라 사용되는 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 또한 스테롤, 특히 β-시토스테롤 및 스티그마스테롤이 풍부할 수 있다. 바람직하게는, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물의 총 중량에 대하여 적어도 1.5 중량%, 특히 1.5 내지 12 중량%의 스테롤을 추가로 포함한다. 더욱 바람직하게는, 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물의 총 중량에 대하여 적어도1 중량%, 특히 1 내지 3 중량%의 β-시토스테롤 및 스티그마스테롤을 포함한다. 본 발명의 맥락에서, 스테롤, 및 특히 β-시토스테롤 및 스티그마스테롤의 중량 함량은 당업자에게 공지된 방법, 예를 들어 Bauer et al.에 의해 기술된 방법에 따른 GC-MS에 의해 결정된다.
본 발명에 따라 사용되는 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 또한 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물의 총 중량에 대하여, 적어도 10 중량%, 특히 10 내지 60 중량%의 트리글리세리드를 포함할 수 있다. 본 발명의 맥락에서, 트리글리세리드의 중량 함량은 UPLC-DAD-M과 같이 당업자에게 공지된 방법에 의해 결정된다.
본 발명에 따라 사용되는 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매(토마토) 껍질 추출물은 또한, 솔라늄 리코퍼시쿰 열매(토마토) 껍질 추출물의 전체 중량에 대하여, 적어도 10 중량%, 특히 10 내지 30 중량%의 알칸(alkane)을 포함할 수 있다. 본 발명에 따르면, 알칸 유형 C31, C32 및 C33의 함량 합계는 솔라늄 리코퍼시쿰 열매(토마토) 껍질 추출물의 총 알칸 함량에 대하여 적어도 70 중량%, 특히 70 내지 90 중량%이다. 본 발명의 맥락에서, 알칸의 중량 함량은 당업자에게 공지된 방법, 예를 들어 Bauer et al.에 의해 기술된 방법에 따른 GC-MS에 의해 측정된다.
본 발명에 따라 사용되는 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 또한, 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물의 전체 중량에 대하여, 적어도 5 중량%, 특히 5 내지 15 중량%의 알카디엔(alkadiene), 특히 알카디엔 유형 C33 및 C35를 포함할 수 있다. 본 발명의 맥락에서, 알칸의 중량 함량은 당업자에게 공지된 방법, 예를 들어 Bauer et al.에 의해 기술된 방법에 따른 GC-MS에 의해 측정된다.
본 발명에 따른 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 다음 단계를 포함하는 제조 방법에 의하여 수득될 수 있다:
a) 토마토 껍질, 특히 토마토 찌꺼기로부터의 토마토 껍질을 선별하는 단계;
b) 선택적으로 토마토 껍질을 분쇄하는 단계
c) 토마토 껍질을 추출하여 친유성 추출물을 수득하는 단계; 및
d) 선택적으로, 수득된 추출물을 여과하고, 친유성 토마토 껍질 추출물을 회수하는 단계.
단계 a)에서, 산업 폐기물 또는 음식물 쓰레기로부터 수득되는 토마토 찌꺼기는 토마토 껍질 및 씨앗을 포함할 수 있다. 따라서 토마토 껍질과 씨앗을 분리하는 추가 단계는 당업자에게 공지된 수단, 예를 들어 체가름(sieving)(예를 들어, 1μm 메쉬를 통하여)에 의해 수행될 수 있다. 또한 단계 a)에서 선별된 토마토 껍질은 최대 10%의 잔류 수분을 얻기 위하여 건조될 수도 있다. 건조 방법은 당업자에게 일반적으로 공지되어 있으며, 예를 들어 오븐 또는 건조기에서 40℃ 내지 90℃의 온도에서 가열하는 것을 포함한다. 아미린 및 스테롤과 같은 관심 화합물의 열화(deterioration)를 피하기 위하여 건조 온도가 선택되어야 한다.
단계 b)에서, 토마토 껍질은 당업자에게 일반적으로 공지된 방법에 의해 선택적으로 분쇄되고, 이는 나이프 밀, 커팅 밀 또는 해머 밀로 분쇄하는 것을 포함한다.
토마토 껍질 추출물의 제조 방법은 리코펜 및 유리하게는 카로티노이드를 제거하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 이 단계는 당업자에게 일반적으로 공지된 수단에 의하여 추출 단계 c)의 전, 도중 또는 후에 수행될 수 있다. 특히, 리코펜은 예를 들어, 수지(즉, 거대 다공성 흡착 수지, 타입 컬럼 포장된 LX-68, HP20 또는 동등물)를 사용한 흡착/탈착, 결정화, 용매 추출, 역류 크로마토그래피(countercurrent chromatography, CCC) 또는 원심 분할 크로마토그래피(centrifugal partition chromatography, CPC) 또는 기타 크로마토그래피, 염석(salting out)(침전 방법), 여과 방법(이중 여과, 미세 여과 및/또는 한외 여과 또는 이들의 조합) 열 방법, 증류 또는 CO2 초임계 추출과 같은, 당업자에게 공지된 물리적 또는 화학적 방법에 의해 제거될 수 있다. 리코펜을 제거하기 위해 용매추출법을 사용하는 경우, 사용되는 용매는 아세톤, 에틸 아세테이트, 디에틸 에테르, 석유 에테르, 헥산, 헵탄, 클로로포름 및 테트라히드로푸란(tetrahydrofuran), 프로필렌 글리콜(1,2-프로판디올), 물 및 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘 또는 수산화암모늄 또는 인산삼나트륨과 같은 알칼리, 및 이들의 혼합물 중에서 선택될 수 있다. 12내지 36, 특히 14내지 19 로 알려진 힐데브란트 용해도 매개변수(Hildebrand Solubility Parameters)(δ) 값을 갖는 임의의 다른 용매도 사용될 수 있다(예를 들어, Johannes Karl Fink의 책 "Reactive Polymers Fundamentals and Application(Second Edition)" p. 303-315, 12장 “Terpene Resins"(Plastics Design Library: 2013), 535 p.등에서 이의 목록을 찾을 수 있음). 리코펜을 제거하기 위하여 가열 방법을 사용하는 경우, 토마토 껍질을 리코펜이 제거될 때까지 60℃ 내지 110℃의 온도, 예를 들어 1시간 내지 10시간 동안 가열할 수 있다.
단계 c)에서, 토마토 껍질의 추출은 물리적 추출(예를 들어, 기계식 프레스에서 열 또는 냉압착, 또는 이중 스크류 압출기에서 압착), 유기 용매(예를 들어, 지방족 알칸, 알코올, 염소화 용매, 불소화 용매), 바람직하게는 비극성 용매를 통한 화학적 추출, 또는 식물성 오일과 같이, 이산화탄소 단독 및/또는 보조 용매와의 조합으로 초임계 매질에서의 추출을 포함하는 당업자에게 잘 알려진 여러 가지 방법으로 수행될 수 있다.
단계 c)에서, 용매추출법을 사용하는 경우, 용매는 아세톤, 에틸 아세테이트, 디에틸 에테르, 석유 에테르, 헥산, 헵탄, 클로로포름 및 테트라히드로푸란, 프로필렌 글리콜(1,2-프로판디올)와 혼합물(admixture), 물 및 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘 또는 수산화암모늄 또는 인산삼나트륨과 같은 알칼리, 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 용매 추출 중 토마토 껍질 추출물/용매의 중량비는 1:1 내지 1:60, 특히 1:1 내지 1:20일 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시 형태에서, 단계 c)는 초임계 추출 방법을 사용하여 수행된다. 초임계 추출 공정은 초임계 유체 탱크, 압축기, 추출기, 하나 이상의 분리기, 온도 조절 시스템 및 일부 압력 감소 밸브로 구성된 종래의 초임계 추출 장비에서 수행된다. 초임계 추출을 수행하기 위하여, 토마토 껍질이 추출기에 도입되고, 초임계 유체, 바람직하게는 CO2 단독 또는 에탄올과 같은 보조 용매와 조합되어, 더욱 바람직하게는 CO2 단독은, 관심 화합물, 특히 아미린 및 스테롤의 CO2 초임계 유체 내 용해를 허용하는 압력 및 온도 조건 하에서 고체 출발 물질 배드(bed)을 통과한다. CO2 초임계 유체가 출발 물질층을 통과할 때, CO2 초임계 유체는 용해성 성분을 추출한 다음 분리기로 이동하여, 원하는 제품을 수득한다. 그런 다음 CO2 초임계 유체는 감압 처리된 후 제거된다. 유리하게는, CO2 초임계 추출 단계는 200bar 내지 500bar, 바람직하게는 200bar 내지 400bar, 보다 바람직하게는 200bar 내지 350bar의 압력에서, 40℃ 내지 80℃, 바람직하게는 50℃ 내지 80℃, 보다 바람직하게는 60℃ 내지 80℃의 온도에서 수행된다. 참고로, 저온이 사용되는 경우(예를 들어, 60℃ 미만의 온도) 더 높은 압력(예를 들어, 최소 150bar의 압력)이 필요할 수 있다. 유사하게, 낮은 압력이 사용되는 경우(예를 들어, 150bar 미만의 압력), 높은 온도(예를 들어, 최소 55℃의 온도)가 사용되어야 한다.
단계 d)에서, 단계 c) 후에 수득된 추출물은 선택적으로 필터(예를 들어 45μm 다공성 필터 r)를 통해 체가름하는 것과 같이, 당업자에게 일반적으로 공지된 수단에 의해 여과된다. 이 단계를 통해 불순물을 제거할 수 있다. 그런 다음 토마토 껍질 추출물은 회수된다.
일부 실시 형태에서, 본 발명에 따른 추출물을 제조하는 방법은 위에서 언급한 단계에 하나 이상의 추가 단계를 포함할 수 있다. 이러한 단계에는 예를 들어, 출발 식물 물질의 세척, 냉동 및/또는 해동 단계를 포함한다.
또한 공정은 하나 이상의 추가 정제 단계를 포함할 수 있으며, 바람직하게는 단계 c) 또는 d) 후에 수행되고, 바람직하게는 증류 단계, 예를 들어 분자 증류 또는 분별 증류, 침전 단계, 여과 단계, 추출 단계, 특히 적합한 수용액을 사용한 액체-액체 추출, 제거할 화합물을 포착할 수 있는 고체 지지체 상의 고체-액체 추출로부터 선택된다.
일부 실시예에서, 단계 c) 또는 d) 후에 수득한 친유성 추출물은 아미린 및/또는 스테롤에서 추출물을 농축 및/또는 알카디엔 및/또는 알칸과 같은 미용 효과가 낮은 특정 화합물을 제거하기 위하여, 선택적으로 정제 단계(들)을 받는다. 정제 단계(들)는 크로마토그래피, 특히 원심분리 크로마토그래피(Centrifugal Partition Chromatography, CPC) 및/또는 분자 증류를 포함하는, 당업자에게 일반적으로 공지된 수단에 의해 수행될 수 있다.
본 발명의 특정 실시예에서, 토마토 껍질 추출물이 본 명세서에 정의된 식물성 오일과 조합되는 경우, 식물성 오일 및 토마토 껍질 추출물은, 예를 들어 물리적 추출, 화학적 추출 또는 CO2 초임계 추출을 통하여, 동시 또는 개별 추출에 의하여 수득될 수 있다. 더욱 특히, 토마토 껍질 추출물과 토마토 종자유가 조합되는 경우, 상기 추출물 및 상기 오일은 예를 들어 물리적 추출, 화학적 추출 또는 CO2 초임계 추출, 바람직하게는 CO2 초임계 추출을 통하여 토마토 부산물의 동시 또는 개별 추출에 의해 수득될 수 있다.
본 발명에 따라 사용되는 식물성 오일은 당업자에게 일반적으로 공지된 수단에 의하여 수득될 수 있다. 본 발명에 따라 토마토 종자유가 사용되는 경우, 상기 오일의 제조 방법은 토마토 껍질 추출물에 대하여 기술된 것과 유사하다. 특정 실시 형태에서, 토마토 종자유가 본 발명에 따라 사용될 때, 오일은 다음 조건에서 CO2 초임계 추출에 의하여 수득될 수 있다: 200 bar 내지 450 bar, 바람직하게는 200 내지 400 bar, 더 바람직하게는 200 내지 300 bar의 압력 및 50 ℃내지 80 ℃, 바람직하게는 50 ℃ 내지 70 ℃의 온도.
본 발명은 단지 설명의 목적으로 제공되는, 다음 실시예에 비추어 더 잘 이해될 것이다.
실시예
실시예 1 - 본 발명에 따른 토마토 껍질 추출물의 제조 - 트리테르펜 및 카로티노이드의 확인 및 정량
본 발명에 따른 토마토 껍질 추출물(토마토 껍질 왁스)을 다음과 같이 제조하였다:
a) 토마토 찌꺼기로부터 토마토 껍질을 선별하는 단계;
b) 토마토 껍질을 열처리하여 10% 미만의 습도를 수득하고, 라이코펜(lycopene)을 제거하는 단계(라이코펜 제거는 HPLC-DAD 분석으로 모니터링함);
c) 단계 b)에서 수득된 건조 덩어리를 커팅밀을 사용하여 분쇄하는 단계;
d) 260-300 bar 및 60-80 ℃에서 초임계 CO2 가스를 사용하여 토마토 껍질 분획을 추출하는 단계; 및
e) 45μm 종이필터를 통하여 수득한은 추출물을 여과하여 불순물을 제거하는 단계.
수득한 토마토 껍질 추출물의 관심 화합물의 정량화는 표 1에 요약한다.
아미린, 스테롤 및 알칸(Bauer et al.이 설명한 방법에 따라 GC-MS로 결정됨) | |
총 아미린 | 5.3 g / 100 g 추출물 |
α-아미린 | 1.61 g / 100 g 추출물 |
β-아미린 | 1.07 g / 100 g 추출물 |
δ-아미린 | 2.73 g / 100 g 추출물 |
스티그마스테롤 | 0.79 g / 100 g 추출물 |
β-시토스테롤 | 1,21 g / 100 g 추출물 |
알칸 | 14.6 g / 100 g 추출물 |
알카디엔 | 6.82 g/100 g 추출물 |
카로티노이드 및 토코페롤(Gleize et al.에 의해 기술된 방법에 따라 HPLC-DAD로 결정됨) | |
총 카로티노이드 | 0.17 g/100 g 추출물 |
리코펜(λmax = 476 nm) | 14.4 mg / 100 g 추출물 |
β-카로틴(β-caroten)(λmax = 450 nm) | 30.90 mg / 100 g 추출물 |
α-토코페롤(λmax = 347 nm) | 179.19 mg / 100 g 추출물 |
지질(UPLC-DAD-M으로 결정됨) | |
팔미트산 | 4.06 g / 100 g 추출물 |
스테아르산(Steraric acid) | 1.13 g / 100 g 추출물 |
올레산 | 4.67 g / 100 g 추출물 |
리놀레산 | 17.62 g / 100 g 추출물 |
트리글리세리드 | 15.34.28 g / 100 g 추출물 |
디글리세리드 | 12.05 g / 100 g 추출물 |
Bauer et al.: Bauer, S., E. Schulte, and H.-P. Thier. 2004. Composition of the surface wax from tomatoes: I. Identification of the components by GC/MS. European Food Research and Technology 219.Gleize et al.: Gleize, B., M. Steib, M. Andre, and E. Reboul. 2012. Simple and fast HPLC method for simultaneous determination of retinol, tocopherols, coenzyme Q10 and carotenoids in complex samples. Food Chemistry 134: 2560-2564.확인 및 정량 테스트는 INRAE PACA와 협력하여 수행되었다.
실시예 2 - 토마토 껍질 추출물과 토마토 종자유 조합의 제조
토마토씨 오일은 다음과 같이 제조하였다:
a) 산업폐기물에서 토마토 종자를 선별하는 단계,
b) 12% 미만의 습도를 수득할 때까지 토마토 종자를 60℃ 내지 110℃의 온도에서 건조하는 단계;
c) 단계 b)에서 수득한 건조 덩어리를 분쇄하는 단계;
d) 초임계 CO2 가스를 이용하여 토마토 종자 분획물을 추출하는 단계:
- 미리 선택된 조건(200-300bar 및 50-70℃)에서 분리를 수행하여 의도된 토마토 종자유를 수득함; 및
- 이산화탄소는 그 다음 압축기로 이동됨.
e) 45μm 종이 필터를 통하여 수득한 오일을 필터링하여 불순물을 제거하는 단계.
뒤이어 토마토 종자유를 실시예 1에서 제조한 토마토 껍질 추출물과 토마토 껍질 추출물/토마토종자유 중량비 1/49로 조합하였다.
실시예3 - 기본 상태 하에서 생체외 인간 피부 체외이식편(explant)에서 유전자 발현에 대한 토마토 껍질 추출물의 효과
본 연구에서, 실시예 1에서 수득한 추출물, 토마토 종자유 및 실시예 2에서 수득한 조합(이하 각각 토마토 껍질 추출물, 토마토종자유 및 조합 1/49로 명명됨)의 전사 효과(transcriptional effect)를 기본 상태 또는 포르볼 12-미리스테이트 13-아세테이트(Phorbol 12-Myristate 13-Acetate, PMA) 자극 상태 하에서 생체 외(ex vivo) 인간 피부 체외이식편에서 평가하였다. 다양한 전사체 프로필의 비교 분석은 Affymetrix GeneAtlas 플랫폼 및 36,000개의 전사체와 변이체를 포함하는 인간 "전체 전사체(full transcriptome)" U219 칩을 이용하여 수행하였다.
재료 및 방법
생물학적 모델
- 모델: 복부 성형외과의 Donor E2002(44세 여성)로부터의 피부 체외이식편(2 cm x 2 cm)
- 배양조건 : 37 ℃, 5% CO2
테스트 샘플 및 조합(표 2)
테스트 샘플 | 성상(Aspect)/저장 | 적용 | 테스트 농도 |
토마토 껍질 추출물 | - 페이스트(paste) - 저장: +4℃ 빛으로부터 보호 |
/ | 조합으로만 테스트됨 |
토마토 종자유 | - 걸쭉한 균질한 탁한 액체 - 저장: +4℃ 빛으로부터 보호 |
국소 (5 mg/cm2) |
순수(pure) |
조합1/49 | 국소 (5 mg/cm2) |
1/49(w/v) |
배양 및 처리
복부 생검을 받은 직후, 지방조직을 제거 후, 피부 체외이식편을 조각(2cm x 2cm)으로 절개하고 배양배지에서 인큐베이션하였다. 그 다음 테스트 샘플을 피부 체외이식편 표면에 국소적으로 적용(5 mg/cm²)하거나 하지 않았으며(기본 상태), 상기 피부 체외이식편은 24시간동안 사전-인큐베이션하였다. 사전-인큐베이션 후:
- 기본 상태
배지를 제거하고, 새로운 배양 배지로 교체하고, 국소 처리를 재개하였다.
- 자극 상태
배지를 제거하고, 0.3μg/ml의 유도제 PMA를 함유하는 새로운 배양 배지로 교체하고, 국소 처리를 재개하였다.
뒤이어 피부 체외이식편은 48시간 동안 인큐베이션하였다.
인큐베이션 종료시, 체외이식편은 인산염 완충 식염수(phosphate buffered saline, PBS) 용액으로 세척하고, 각 체외이식편에 대하여 3 펀칭(4 mm 직경)이 수행된 후 즉시 80 ℃에서 냉동하였다.
모든 실험 조건은 n=3으로 수행되었다.
차등 발현 분석 (Differential expression analysis)
샘플은 프리셀리스/크라이올리스(Precellys/cryolys)를 이용하여 자동으로 균질화하였으며, 복제물(replicate)를 모집하였다. 공급자의 지침에 따라 뉴클레오스핀(NucleoSpin®) RNA 키트(Macherey-Nagel)®를 사용하여 사용하는 각 샘플로부터 총 RNA가 추출하였다. 모세관 전기영동(Bioanalyzer 2100, Agilent Technologies)을 사용하여 모든 샘플에 대하여 총 RNA의 양과 품질을 평가하였다. 각 RNA로부터, GeneChip 3'IVT PLUS Kit(Affymetrix)를 사용하여 표지하고 증폭된 안티센스 RNA(aRNA)를 수득하였다. 각각의 표지 및 증폭된 aRNA 샘플에 대하여, 모세관 전기영동(Bioanalyzer 2100, Agilent 기술)을 사용하여 단편화(fragmentation) 전후 프로필을 평가하였다. Affymetrix® U219 칩(36,000개 전사체 및 변이체)상의 단편화된 aRNA의 혼성화는 GeneAtlas™ 플루이딕스 Affymetrix® 혼성화 스테이션에서 45℃에서 20시간 동안 수행하였다.
형광 강도 데이터를 생성하기 위하여 U219 칩은 GeneAtlas™ 이미징 스테이션(Affymetrix® - 해상도 2μm)을 사용하여 분석되었다.
결과
폴드변화(fold change)측면에서 검출 임계값이 정의되고, 정규화된 데이터에 적용되었다; 해석에 도움이 되도록, 임계값은 다음과 같이 정의된다:
더욱이, 프로브 조정은 p-value ≤ 0.05인 경우, 유의미한 것으로 간주된다.
결과
유전자 | 단백질 | 기본 상태 | 자극된 | |||
오일 | 추출물/오일(1/49) | 오일 | 추출물/오일(1/49) | |||
염증 | CXCL 2 | 대식세포 염증성 단백질 2-알파 (Macrophage inflammatory protein 2-alpha) |
0.19 | 0.02 | 0.87 | 0.15 |
CXCL 3 | 대식세포 염증성 단백질-2-베타 (Macrophage inflammatory protein-2-beta) |
0.13 | 0.1 | 0.80 | 0.29 | |
CXCL 8 | 인터루킨 8 (Interleukin 8) |
0.20 | 0.01 | 0.64 | 0.30 | |
CXCL 10 | 인터페론 감마 유도 단백질 10(Interferon gamma-induced protein 10) | 3.46 | 1.06 | 0.84 | 0.82 | |
CCL 20 | 케모카인(C-C 모티프) 리간드 20 (Chemokin(C-C motif) ligand 20) |
0.15 | 0.04 | 0.72 | 0.57 | |
IL6 | 인터루킨 6 | 0.74 | 0.09 | 1.01 | 0.73 | |
IL20 | 인터루킨 20 | 0.31 | 0.08 | 0.43 | 0.10 | |
SAA1 | 혈청 아밀로이드 A1 (Serum Amyloid A1) |
0.13 | 0.07 | 1.24 | 0.13 | |
TNFAIP3 | 종양 괴사 인자, 알파-유도 단백질 6(Tumor Necrosis Factor, alpha-induced protein 6) | 0.66 |
0.32 |
1.19 | 0.47 | |
TNFAIP6 | 종양 괴사 인자, 알파 유도 단백질 4 | 1.06 | 0.16 |
0.83 | 0.33 | |
항균 펩타이드
(Peptides Anti Microbien, PAMs) |
LTF | 락토트랜스페린 (Lactotransferin) |
0.46 | 3.95 | 0.82 | 1.26 |
S100A7 | 소리아신(Psoriasin) | 0.69 | 2.61 | 2.18 | 4.63 | |
S100A7A | 코에브네리신(Koebnerisin) | 0.44 | 6.00 | 1.65 | 2.38 | |
S100B | S100 칼슘 결합 단백질 B(S100 calcium binding protein B) | 1.88 | 4.11 | 2.09 | 3.15 | |
산화 스트레스 | PTGS2 | 프로스타글란딘-엔도퍼옥사이드 합성효소 2 (Prostaglandin-endoperoxide synthase 2) |
0.49 | 0.08 | 0.54 | 0.30 |
GPX3 | 글루타티온 퍼옥시다제 3 (Glutathione peroxidase 3) |
0.37 | 0.28 | 0.79 | 1.01 | |
HMOX1 | 헴 옥시게나제 1(Heme oxygenase 1) | 0.21 | 0.07 | 0.12 | 0.69 | |
각질형성세포 분화 | KRT17 | 케라틴 17. 타입 I (Keratin 17. type I) |
0.67 | 0.26 | 0.19 | 0.92 |
KRT6C | 케라틴 6C. 타입 II (Keratin 6C. type II) |
0.53 | 2.33 | 1.86 | 4.60 | |
COL3A1 | 콜라겐. 타입 III. 알파 1(Collagen. type III. alpha 1) | 1.20 | 2.89 | 1.04 | 1.23 | |
SPRR1A | 작은 프롤린-풍부 단백질 1A(Small proline-rich protein 1A) | 0.88 | 0.38 | 1.30 | 1.38 | |
SPRR2A | 작은 프롤린-풍부 단백질 2A | 0.14 | 0.31 | 0.83 | 2.82 | |
SPRR2B | 작은 프롤린-풍부 단백질 2B | 0.09 | 0.18 | 2.53 | 8.78 | |
SPRR2D | 작은 프롤린-풍부 단백질 2D | 0.30 | 0.28 | 0.67 | 1.31 | |
SPRR2F | 작은 프롤린-풍부 단백질 2F | 0.33 | 0.34 | 0.67 | 1.02 | |
TGM1 | 트랜스글루타미나제 1(Transglutaminase 1) | 0.79 | 0.30 | 1.56 | 1.87 | |
LCE 3E | 후기 각화 외피3E (Late Cornified Envelope 3E) | 0.20 | 0.09 | 2.10 | 1.94 | |
CASP14 | 카스파제 14(Caspase 14) | 0.59 | 0.33 | 2.46 | 1.38 | |
DSC1 | 데스모콜린 1(Desmocollin 1) | 0.82 | 0.72 | 1.28 | 0.99 | |
CDSN | 코르네오데스모신(Corneodesmosin) | 0.47 | 0.17 | 0.97 | 1.19 | |
EREG | 에피레귤린 (Epiregulin) |
0.52 | 0.15 | 0.88 | 0.60 |
토마토 종자유에 1/49(w/v) 비율로 희석된 테스트된 토마토 껍질 추출물은 유전자 발현 프로필의 상당한 조정을 유도하였다.
기본 상태 하에서, 희석제인 토마토 종자유와 비교하는 경우, 1/49(w/v) 비율의 테스트된 토마토 껍질 추출물은 염증(주로 CXCL8, IL6, CXCL2), 산화스트레스(PTGS2, GPX3, HMOX1), 및 말단 각질형성세포 분화(KRT17, SPRR1A, TGM1, 여러 LCE, EREG, CDSN)에 관여되는 유전자에 대한 강력한 억제를 유도하였다. 동시에 토마토 껍질 추출물은 항균 펩타이드(LTF, S100A7, S100A7A, S100B)와 KRT6C 및 COL3A1 마커의 상향 조절을 유도하였다.
자극 상태 하에서, 1/49(w/v) 비율로 토마토 종자유에 희석되어 테스트된 토마토 껍질 추출물은 유전자 발현 프로필의 상당한 조정을 유도하였다. 자극 상태에서 면역 반응(CCL22, SERPINB9, CD83, IDO1, IL20, LIF) 및 기질 분해(MMP10 및 MMP7)에 관여하는 유전자의 약간의 억제가 관찰되었다. 토마토 껍질 추출물은 또한 말단 각질형성세포 분화와 관련된 마커(SPRR2B, CASP14, LCE3D 및 LCE3E)의 증가, 및 선천성 면역과 관련된 마커(PI3, S100A7, S100B)의 약간의 상향 조절을 유도하였다. 희석제인 토마토종자유와 비교하였을 때, 토마토 껍질 추출물은 염증 반응과 관련된 유전자(주로 CXCL8, IL6, CXCL2, CXCL3, SAA1, IL20, TNFAIP3 및 TNFAIP6)의 억제를 유도하였다. 동시에, 토마토 껍질 추출물은 항균 펩타이드(S100A7A)와 말단 각질형성세포 분화에 관여하는 마커(SPRR2B, KRT6C, SPRR2A)의 상향 조절을 유도하였다.
결론
본 연구의 실험 조건 하에서, 토마토종자유에 1/49(w/v) 비율로 희석되어 테스트된 토마토 껍질 추출물은 이 생체 외 피부 모델에서 뚜렷한 진정 효과(산화 스트레스 억제)를 나타내었다. 또한 이 추출물은 항균 펩타이드의 상향 조절을 통하여 생체 외 피부의 선천적 면역을 명확히 촉진하였다.
실시예 4 - 재건된 인간 표피에서 S100A7 발현에 대한 본 발명에 따른 토마토 껍질 추출물과 토마토 종자유의 조합의 효과
본 연구에서는, 현장(in situ) 면역표지 및 이미지 분석을 사용하여 S100A7 발현을 평가함으로써 토마토 껍질 추출물과 토마토종자유(실시예 2에서 제조) 조합의 효과를 재건된 인간 표피(reconstructed human epidermis, RHE) 모델에서 조사하였다.
약어
AU 임의 단위(Arbitrary unit)
GAM 염소 항마우스(Goat antimouse)
PBS 인산염 완충 식염수(Phosphate buffered saline)
PI 프로피듐 요오드화물(Propidium iodide)
PMA 포르볼 미리스테이트 아세테이트(Phorbol myristate acetate)
RHE 재건된 인간 표피(Reconstructed human epidermis)
Sd 표준편차(Standard deviation)
sem 평균의 표준오차(Standard error of the mean)
물질 및 방법
생물학적 모델
- 표피: 재건된 인간 표피(RHE), 10일령
- 배양 조건: 37℃, 5% CO2
- 분석 배지: 유지 배지
테스트 샘플 및 조합(표 4)
테스트 샘플 | 성상/저장 | 적용 | |
미네랄 오일 | M5904 씨그마알드리치/ 머크 Cas 번호: 8042-47-5 | - 무색 걸쭉한(tick) 오일 - 저장: +4℃ 빛으로부터 보호 |
국소 (2.5 μl/RHE) |
토마토 껍질 추출물 + 유기농 종자유의 조합 (비율 1/49) |
토마토 껍질 추출물 | - 페이스트 - 저장: +4℃ 빛으로부터 보호 |
국소 (2.5 μl/RHE) |
유기농 종자유 | - 걸쭉한 균질한 탁한 액체 - 저장: +4℃ 빛으로부터 보호 |
||
토마토 껍질 추출물 + 유기농 종자유 + 미네랄 오일의 조합 (비율 1/2/47) |
토마토 껍질 추출물 | - 페이스트 - 저장: +4℃ 빛으로부터 보호 |
국소 (2.5 μl/RHE) |
유기농 종자유 | - 걸쭉한 균질한 탁한 액체 - 저장: +4℃ 빛으로부터 보호 |
배양 및 처리
10일차에, RHE는 분석 배지 내 12웰 플레이트에 위치시켰다. 위약 대조군으로서 미네랄 오일(2.5μl/RHE, 참조 M5904 Sigma Aldrich/Merck, CAS 번호 8042-47-5) 또는 테스트 샘플의 조합(2.5μl/RHE)을 RHE에 국소 처리하였다다. 모든 실험 조건은 n=3에서 수행되었다.
파라핀 포매 및 절편화
RHE를 포름알데히드 용액으로 고정하였다. 고정된 조직은 에탄올 농도를 증가시키면서 여러 배스(bath)에서 탈수시킨 다음 파라핀에 포매하였다. 횡단 절단은 마이크로톰(microtome)(두께 5μm, RHE당 슬라이드 1개)을 사용하여 수행되었으며 면역조직라벨링(immunohistolabeling)될 때까지 실온에서 유지하였다.
현장 면역 형광 라벨링(In situ immunofluorescent labeling)
항원-항체 상호작용을 최적화하기 위해 절편을 탈파라핀화하고 회수 표적 용액(retrieval target solution)에서 92℃, pH 6에서 인큐베이션하였다. 절편은 동일한 용액에 실온으로 냉각하였다. 그 후, PBS-Tween-5% 우유 포화도(milk saturation)에 따라, 절편을 적절한 1차 항체(항-S100A7)와 함께 1시간 동안 인큐베이션 하였다. 여러 번 세척 후, 1차 항체에 의해 인식된 결합 부위를 2차 형광 적합 항체(GAM Alexa-488)에 노출시켰으며 세포핵은 요오드화 프로피듐(propidium iodide, PI) 용액으로 염색하였다. 절편은 PBS-Tween으로 세척하였고 형광 장착 매체에 장착하였다.
현미경 관찰
단면은 Nikon 카메라가 장착된 NIKON 현미경(대물렌즈 x40)을 사용하여 관찰하였다. 이미지는 NIS-Elements 소프트웨어로 처리되었다. 복제당 5개의 이미지가 캡처 되었다. ImageJ 소프트웨어를 사용하여 캡처된 이미지에서 형광 강도를 측정하였다. 형광 강도 값은 표피 영역에 대해 정규화되었다.
데이터 관리
로 데이터(Raw data)는 Microsoft Excel® 소프트웨어를 사용하여 분석되었다.
내부-그룹 간 비교는 Kruskall-Wallis의 비모수 테스트에 이어 Dunn의 다중 비교 테스트에 의해 수행되었다.
평균의 표준오차: sem = Sd/√n. 평균의 표준 오차(standard error of the mean, sem)는 샘플 평균이 실제 모집단 평균에서 얼마나 멀리 떨어져 있는지를 측정한 것이다. sem은 표본 크기의 제곱근으로 나눈 sd로 계산된다.
결과
수득한 결과를 표 5에 요약하였다.
테스트 샘플 |
농도
(국소 적용) |
S100A7 - 형광 강도/ μm² | ||||
평균
(조건별) (AU) |
Sem
(AU) |
%
대조군 |
Sem
(%) |
P
Dunn's 다중 비교 테스트 Vs 대조군 |
||
위약 대조군(미네랄 오일) | - | 1 | 1 | 100 | 99 | - |
P1=토마토 껍질 추출물 + 유기농 종자유의 조합 (ratio 1/49) |
2.5 μl/RHE | 23 | 12 | 3190 | 1708 | *** |
P2=토마토 껍질 추출물 + 유기농 종자유 + 미네랄 오일의 조합 (ratio 1/2/47) |
2.5 μl/RHE | 7 | 2 | 1009 | 312 | * |
기본 상태에서 S100A7 신호는 약하고 표피의 과립층에 국한되었다.
상기 분석의 실험 조건 하에서, 2.5μl/RHE로 테스트된 본 발명에 따른 토마토 껍질 추출물과 유기농 종자유의 조합(1/49) 및 본 발명에 따른 토마토 껍질 추출물, 유기농 종자유 및 미네랄 오일(1/2/47)의 조합은, S100A7 발현의 유의미한 자극을 유도하였다(각각, 3190% - p < 0.001, Dunn 테스트 - 및 1009% - p < 0.05, Dunn 테스트 - 대조군).
결론
실시예 3에서 앞서 관찰된 항균 펩타이드(S100A7A)를 코딩하는 유전자의 상향 조절이 본 발명에 따른 토마토 껍질 추출물 및 유기농 종자유(1/49)의 조합에서 확인되었으며, 본 발명에 따른 토마토 껍질 추출물, 유기농 종자유 및 미네랄 오일(1/2/47)의 조합은 S100A7 단백질 발현을 증가시켰다. 또한 본 발명자는 본 발명에 따른 토마토 껍질 추출물, 유기농 종자유 및 미네랄 오일(1/2/47)의 조합에 비하여, 본 발명에 따른 토마토 껍질 추출물과 유기농 종자유(1/49)의 조합에서 더 나은 결과를 관찰하였다.
실시예 5 - 생체 내(
In vivo)
항-자극 평가
목표
20명의 지원자를 대상으로 120분 동안 캡사이신으로 유발된 피부 자극 후 토마토 껍질 추출물과 토마토 종자유 조합(실시예 2에서 제조됨)의 진정 효과를 평가하기 위함이다.
방법론
건조하고 민감한 피부의 가시적인 징후를 가진, 45세 내지 65세 사이의 20명의 지원자(여성)가 연구에 포함되었다. 분석에 포함된 각 자원자의 팔뚝에 4개의 독립적인 실험 영역을 정의하였다. 각 실험 부위에 캡사이신 밀폐 패치를 1시간 동안 노출시킴으로써 가벼운 피부 자극을 유발하였다. 연구원이 이 밀폐 패치를 준비하고 팔뚝의 4개의 독립적인 실험 영역에 적용하였다. 패치 제거 후, 연구원은 테스트한 제품(3~4 mg/cm2)을 해당 실험 영역에 적용하였다. 피부 홍반 수준은 Mexameter®를 사용하여 5가지 다른 시점에서 정량화되었다: 처리 시작 전(T0), 캡사이신 밀폐 패치로 가벼운 피부 자극을 유발한 직후(홍반 유발 후 T1), 첫 도포 후 10분(T2), 30분(T3), 90분(T4), 120분(T5). 자극을 유발한 후 각 시점의 홍반 수준 변화를 T1의 상태로 정규화하였다. 모든 데이터는 통계적으로 분석되었다. 피부과학적 감시가 연구에 포함되었다.
샘플
테스트한 제품은 다음과 같다:
1- 위약 세럼 제제(Placebo serum formula) (물 98% + 페녹시에탄올 + 소듐 스테아로일 글루타메이트(sodium stearoyl glutamate) + 숙시노글리칸 클로르페네신(succinoglycan chlorphenesin))
2 - 위약 세럼 제제에 농도 1%의 본 발명에 따른 추출물(테스트1%)
3 - 위약 세럼 제제에 농도 2%의 본 발명에 따른 추출물(테스트 2%)
결과
결과를 도 1에 나타내었다. 결과는 캡사이신 폐쇄 패치의 1시간 동안의 처리는 4개 실험 영역에서 홍반 수준을 유의하게 증가시키는 것을 나타냈으며, 따라서 피부 자극의 효과적인 유도를 나타낸다.
자극 유발 후 제품을 무처리 대조군과 비교했을 때, "테스트 2%"는 처리 30분 후 62.11%, 처리 90분 후 49.55%, 120분 후 56.53% 홍반 수준을 감소시킨 반면, 홍반 수준은 "테스트 1%"로 처리 30분 후 59.52%, 90분 후 52.55%, 120분 후 75.47% 감소되는 것으로 나타났다.
또한 30분 후 홍반이 58.61% 감소한 것으로 입증된 바와 같이, "테스트 2%"는 "위약"에 대비 피부 자극을 감소시켰으며, '위약' 대비 홍반이 56.01% 감소한 것으로 증명된 바와 같이, "테스트 1%"도 마찬가지였다.
테스트한 모든 시점에서 본 발명자는 "위약"과 비처리 조건 사이의 홍반 수준에 유의미한 차이를 관찰하지 못했다는 것은 주목할 가치가 있다.
피부 적합성(compatibility)과 수용성(acceptability)에 관련하여, 지원자 중 어느 누구도 처리 중에 피부 수용성 문제를 나타내거나, 피부 반응을 나타내지 않았다.
결론적으로, 이 임상 연구는 '테스트 1%'와 '테스트 2%' 제품은 피부자극을 효과적으로 진정시켜 피부자극을 줄여준다.
실시예 6 - 생체내
(in vivo)
보습 및 장벽 기능 능력 평가
목표
팔뚝에 국소 적용한 후 3가치 처리(0.5%, 1%의 테스트 제품 및 위약)의 보습 및 장벽 기능에 대한 생체 내(in vivo) 평가. 측정 동역학을 다음과 같이 설정하였다: T0(처리 전), 적용 후 30분, 90분, 120분 및 24시간.
적용 영역: 팔뚝.
플랫폼 :
자원봉사자 30명(건조하고 민감한 피부 상태를 가진 40 내지 70세 사이의 여성). 민감성 피부 지원자의 상태 선별을 위한 포함 기준(inclusion criteria)은 다음과 같다 :
- 40 내지 70세 여성.
- 피부 포토타입(피츠페트릭, Fitzpatrick) : II, III 및 IV.
- 피험자 자기 보고에 따르면, 전반적으로 양호한 건강 상태(질병/허약함이 없을 뿐만 아니라 신체적, 정신적, 사회적 안녕(well-being)).
- 건조하고 민감한 피부의 가시적 징후를 나타내는 대상(대상은 양성설문지와 젖산검사를 통하여 민감성 피부로 진단되었다. 설문지는 대상의 피부 불편감에 대한 기능적 증상의 최근 반복적인 병력을 반영하는 경우 양성이며, 10% 젖산수용액 1mL를 도포한 후, 3분 후 팔자주름(nasolabial fold)에 가려움증이 있는 경우, 팔자 주름의 젖산 검사가 양성이다). - 건조하고 민감한 피부의 가시적 징후를 나타내는 대상
한편, 제외 기준(criteria of exclusion)은 다음과 같다:
- 제품의 일부 구성성분 또는 테스트 제품 외 유사한 카테고리의 제품에 알레르기 또는 반응성이 있는 경우.
- 측정에 방해가 될 수 있는 실험 영역의 관련 피부 자국(상처, 일광화상 등).
- 사용 중인 관련 약리학적 또는 호르몬 치료.
- 피부 질환이나 흑색종의 존재.
샘플
테스트 제품은 다음과 같다:
1) 위약 세럼 제제(Placebo serum formula)(=물 98% + 페녹시에탄올 + 소듐스테아로일글루타메이트 + 숙시노글리칸 클로르페네신)(P.2328)
2) 위약 세럼 제제에 1% 농도의 본 발명에 따른 추출물(P2330 1%)
3) 위약 세럼 제제에 0.5% 농도의 본 발명에 따른 추출물(P2329 0.5%)
방법론:
팔뚝의 4개의 독립적인 실험 영역에서 연구원이 천연 부석으로 20번 마찰 이동(rubbing passe)을 통한 미란(erosion)으로 각 실험 영역에 가벼운 피부 자극을 유발하였다. 처리 시작 전, 발명자는 Tewameter®를 사용하여 TEWL이 2배 증가하는지 측정함으로써 피부장벽 손상 여부를 확인한다. 이 효과를 얻은 후, 연구원은 테스트 제품을 해당 실험 영역에 적용하였다.
피부 수화(hydration)는 Corneometer®를 사용하여 5가지 다른 시점에서 정량화하였다 : 천연 부석으로 가벼운 피부 자극을 유도한 후(피부 자극 유발 후 T0), 최초 도포 후 30분(T1), 90분(T2), 120분(T3), 24h(T4). 데이터의 정규분포 확인 후, 결과는 이중쌍 이원(doubled paired two-way) ANOVA 통계 테스트를 적용하여 통계적으로 분석하였다.
결과
미용 수화 효과에 대한 결과를 도 2A와 B에 나타내었다(P2330 1%의 경우 도 2A - P2329 0.5%의 경우 도 2B). 위약 세럼 제제 내에 본 발명에 따른 추출물을 0.5% 및 1% 농도로 적용 후 피부 수화(hydratation)의 유의적 증가가 관찰되었다. 이러한 증가는 위약 제제를 적용한 후에는 관찰되지 않았다.
또한, Tewameter®를 사용하여 TEWL 수준의 정량화 및 측정을 수행하였다. P2330 1% 및 P2329 0.5% 적용 90분 후에 TEWL 수준이 유의미하게 감소하는 것이 예비 결과에 나타났다.
실시예 7: 화장품 및 기능식품
실시예 7a: 민감성 피부를 위한 피부 면역 자극 크림
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum, 토마토) SKIN WAX로 명명된 본 발명의 솔라늄 리코퍼시쿰 열매(토마토) 껍질 추출물을 포함하는 크림인, 피부면역자극크림(민감성 피부용)은 하기 표 6에 기술된 성분의 조합으로 제조할 수 있다.
INCI 명칭 | 역할 | 함량(중량%) |
물 | 용매 | QSP |
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum, 토마토) SKIN WAX: 토마토 종자유(1:49) | 활성 성분(피부면역증진제): 연화제(emollient) | 25 |
암모늄 폴리아크릴디메틸 타우라미드(Ammonium polyacryldimethyl tauramide)/잔탄검(Xanthan gum) | 수성상의 겔화제 | 1.5 |
글리세린 | 계류(Mooring) | 5 |
공동유화제(Co-emulsifier) | 공동유화제 | 2 |
덱스트린 팔미테이트(Dextrin palmitate)/ 에틸헥사노에이트(ethylhexanoate) | 유상 겔화제 | 1 |
페녹시에탄올 | 보존제(Conservative) | 0.5 |
실시예 7b: 고성능 클렌징 밤 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum, 토마토) SKIN WAX로 명명된 본 발명의 솔라늄 리코퍼시쿰 열매(토마토) 껍질 추출물을 포함하는 밤인, 고성능 클렌징밤은 하기 표 7과 같은 성분들을 조합하여 제조할 수 있다.
INCI 명칭 | 역할 | 함량(중량%) |
물 | 용매 | QSP 100 |
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum, 토마토) SKIN WAX: 토마토 종자유(1:2 중량비 희석) | 활성성분(피부면역증진제) | 1 |
수산화 나트륨 | 염기성(Based) | 1-3 |
판테놀 | 활성(Active) | 1-3 |
비스-PEG-15 메틸 에테르 디메티콘 (Bis-PEG-15 methyl ether dimethicone) |
계면활성제 | 1-3 |
디프로필렌글리콜 | 용매 | 1-3 |
만니톨, 자일리톨, 람노즈, 프락토올리고당 |
에셋(Assets) | 1-3 |
암모늄 아크릴로일디메틸타우레이트(Ammonium acryloyldimethyltaurate)/VP 코폴리머 | 농화(Thickening) | 0.3-1.5 |
하이드록시에틸셀룰로오스 | 농화 | 0.3-15 |
프로필렌 글리콜 | 용매 | 0.3-2 |
바이오사카라이드검-1(Biosaccharide gum-1) | 컨디셔너(Conditioner) | 0.3-0.6 |
페녹시에탄올 | 보존제 | 0.2-0.4 |
실시예 7c: 아토피성 피부질환 예방 또는 치료용 크림
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum, 토마토) SKIN WAX로 명명된 본 발명의 솔라늄 리코퍼시쿰 열매(토마토) 껍질 추출물을 포함하는 크림인, 아토피성 피부질환 예방 또는 치료용 크림은 하기 표 8과 같은 성분을 조합하여 제조될 수 있다.
Inci 명칭 | 역할 | 함량(중량%) |
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum, 토마토) SKIN WAX: 토마토종자유(중량비 1:49 희석) | 활성성분(피부면역증진제) : 연화제 | 0.5 to 30% |
부틸렌글리콜 | 피부 컨디셔닝 | 3.0 |
글리세린 | 계류(Mooring) | 5.0 |
PEG-60 경화 피자마유(Hydrogenated Castor Oil) | 계면활성제 | 0.2 |
에탄올 | 용매 | 8.0 |
시트르산 | 완충(Buffering) | 0.02 |
시트르산 나트륨 | 완충(Buffering) | 0.06 |
물(ACQUA) | QSP 100 |
실시예 7d: 세안용 클렌징 폼 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum, 토마토) SKIN WAX로 명명된, 본 발명의 솔라늄 리코퍼시쿰 열매(토마토) 껍질 추출물을 포함하는 아토피 피부 세정제(세안용 클렌징 폼)는 하기 표 9에 기술된 성분을 조합하여 제제화한다.
INCI 명칭 | 역할 | 함량(중량%) |
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum, 토마토) SKIN WAX: 토마토 종자유(중량비 1:49 희석) | 활성성분(피부면역증진제) : 연화제 | 0.5 내지 30% |
소듐스테아로일글루타메이트(Sodium Stearoyl Glutamate) | 클렌징 | 20.0 |
클리세린 | 계류(Mooring) | 10.0 |
PEG-400 | 에멀젼 안정화(Emulsion stabilising) | 15.0 |
프로필렌 글리콜 | 피부 컨디셔닝 | 10.0 |
올레일 알코올 | 점도 조절 | 3.0 |
트리라우린(Trilaurin) | 피부 컨디셔닝 | 2.0 |
페녹시에탄올 | 방부제(preservative) | 0.2 |
물(ACQUA) | QSP 100 |
실시예 7e: 민감성 피부를 위한 면역 증진 애프터 선 세럼
본 발명에 따른 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum, 토마토) SKIN WAX로 명명된, 본 발명의 솔라늄 리코퍼시쿰 열매(토마토) 껍질 추출물을 포함하는, 면역 증진 세럼(지성 피부용)는 하기 표 10에 기술된 성분을 조합하여 제제화된다.
INCI 명칭 | 역할 | 함량(중량%) |
물 | 용매 | QSP 100 |
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum, 토마토) SKIN WAX | 활성성분(피부면역증진제) | 0.5 -4% |
수산화 나트륨(Sodium hydroxyde) | 염기성(Based) | 1-3 |
식물성/미네랄 오일 | 연화제(emmollient) | 10-20 |
판테놀 | 활성(Active) | 1-3 |
비스-PEG-15 메틸 에테르 디메티콘 (Bis-PEG-15 methyl ether dimethicone) |
계면활성제 | 1-3 |
디프로필렌글리콜(Dipropylene glycol) | 용매 | 1-3 |
만니톨, 자일리톨, 람노즈, 프락토올리고당 | 에셋(Assets) | 1-3 |
암모늄 아크릴로일디메틸타우레이트(Ammonium acryloyldimethyltaurate)/VP 코폴리머 | 농화(Thickening) | 0.3-1.5 |
하이드록시에틸셀룰로오스 | 농화 | 0.3-15 |
프로필렌 글리콜 | 용매 | 0.3-2 |
바이오사카라이드검-1 | 컨디셔너(Conditioner) | 0.3-0.6 |
페녹시에탄올 | 방부제(Conservative) | 0.2-0.4 |
실시예 7f: 토마토의 면역 립스틱 제형:
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum, Tomato) SKIN WAX로 명명된 본 발명의 솔라늄 리코퍼시쿰 열매(토마토) 껍질 추출물을 포함하는 토마토 면역 립스틱 제형은 하기 표 11에 기술된 성분을 조합하여 제제화된다.
INCI 명칭 | 역할 | 양(%) |
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum, 토마토) SKIN WAX: 토마토 종자유(1/49) | 활성성분(피부면역증진제) : 연화제 | 5-10% |
세라 알반(CERA ALBAN) | 조직화제(Texturizing agent) | 90-95% |
실시예 7g: 면역 증진을 위한 식품 보충제 또는 뉴트리코스메틱(nutricosmetic) 보충제를 위한 경구 복용 캡슐:
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum, 토마토) SKIN WAX로 명명된 본 발명의 솔라늄 리코퍼시쿰 열매(토마토) 껍질 추출물을 포함하는 경구 복용 캡슐(ORAL TAKING CAPSULES)은 하기 표 12에 기술된 성분을 조합하여 제형화하였다.
INCI 명칭 | 캡슐 무게 | 양(%) |
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum, 토마토) SKIN WAX 및 식물성 오일/미네랄 오일(중량비 1:49) | 250 mg | 100% |
실시예 7h : 비듬 예방 또는 치료용 샴푸(민감한 두피용)
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum, 토마토) SKIN WAX로 명명된 본 발명의 솔라늄 리코퍼시쿰 열매(토마토) 껍질 추출물을 포함하는 비듬 예방 또는 치료용 샴푸 제형은 하기 표 13에 기재된 성분을 조합하여 제형화하였다.
INCI 명칭 | 역할 | 함량(중량%) |
단계 A | ||
솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum, Tomato) SKIN WAX | 활성 성분(헤어 컨디셔닝제) | 1-2 |
판테놀 | 헤어 컨디셔닝제 | 0.3-0.5 |
폴리쿼터늄(Polyquaternium) | 컨디셔닝제 | 0.5-1 |
시트르산 | 완충(Buffering) | 0.7 |
단계 B | ||
디소듐 라우레스 설포석시네이트 (DISODIUM LAURETH SULFOSUCCINATE) |
포밍(Foaming) | 8-12 |
하이드록시프로필트리모늄 하이드롤라이즈드 밀 단백질(HYDROXYPROPYLTRIMONIUM HYDROLYZED WHEAT PROTEIN) | 헤어 컨디셔닝 | 6-10 |
징크 코세스 설페이트(ZINC COCETH SULFATE) | 계면활성제(Surfactant) | 20-30 |
코코글루코사이드 하이드록시프로필트라이모늄 클로라이드(OCOGLUCOSIDES HYDROXYPROPYLTRIMONIUM CHLORIDE) | 계면활성제(Surfactant) | 3-6 |
단계 C | ||
소듐 라우로일 사코시네이트(SODIUM LAUROYL SARCOSINATE) | 클렌징 | 4-6 |
피록톤 올아민(PIROCTONE OLAMINE) | 방부제(Preservative) | 0.5 |
단계 D | ||
포타슘 코코일 글리시네이트(POTASSIUM COCOYL GLYCINATE) | 계면활성제(Surfactant) | 1 |
단계 E | ||
PEG-90 글리세릴 아이소스테아레이트 (PEG-90 GLYCERYL ISOSTEARATE) |
Cleansing | 2-3 |
단계 F | ||
향수 | 퍼퓨밍(Perfuming) | QS |
PEG-120 메틸 글루코오스 다이올리에이트 (PEG-120 METHYL GLUCOSE DIOLEATE) | Emulsifying | 1 |
물(ACQUA) | QSP 100 |
Claims (20)
- 피부 또는 점막의 자연 방어를 유지, 균형 또는 강화하기 위하여, 추출물의 총 중량에 대하여, 최대 0.5 중량%의 리코펜, 적어도 5중량%의 아미린 및 적어도 1.5 중량%의 스테롤을 포함하는 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물의 화장료 용도.
- 청구항 1에 있어서, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 피부 장벽 기능 강화, 및/또는 화학적, 물리적 또는 미생물 공격과 같은 외부 공격 또는 스트레스에 대한 피부의 저항성 또는 내성의 유지하거나 증가 및/또는 화학적, 물리적 또는 미생물 공격과 같은 외부 공격 또는 스트레스로 인한 피부의 비병리학적 변화를 예방 또는 치료하는데에 사용되는 것인, 화장료 용도.
- 청구항 1 또는 2에 있어서, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 진정제(soothing agent), 특히 피부의 편안함을 개선하거나 회복하기 위하여, 및/또는 건강한 피부 미생물 군집을 회복 및/또는 유지하기 위한 것인, 화장료 용도.
- 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 항균 펩타이드(antimicrobial peptides, AMPs)의 발현을 유도하는 것인, 화장료 용도.
- 청구항 1 내지 4 중 어느 한 항에 있어서, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 식물성 또는 미네랄 오일, 바람직하게 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 종자유와 같은 식물성 오일과 조합하여 사용되는 것인, 화장료 용도.
- 청구항 5에 있어서, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물 대 식물성 또는 미네랄 오일의 중량비는 1:2 내지 1:70인 것인, 화장료 용도.
- 청구항 5 또는 6에 있어서, 상기 식물성 오일 및 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 토마토 부산물의, 예를 들어 초임계 CO2 추출과 같은, 동시 또는 개별 추출에 의하여 수득되는 것인, 화장료 용도.
- 청구항 1 내지 7 중 어느 한 항에 있어서, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 추출물의 총 중량에 대하여, 최대 0.3 중량%, 바람직하게는 최대 0.1 중량%의 리코펜을 포함하는 것인, 화장료 용도.
- 청구항 1 내지 8 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아미린은 α-아미린, β-아미린 및/또는 δ-아미린인 것인, 화장료 용도.
- 청구항 9에 있어서, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 추출물의 총 중량에 대하여, 적어도 1.5 중량%의 α-아미린, 적어도 1 중량%의 β-아미린 및 적어도 2.5 중량%의 δ-아미린을 포함하는 것인, 화장료 용도.
- 청구항 1 내지 10 중 어느 한 항에 있어서, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 추출물의 총 중량에 대하여, 적어도 1 중량%의 β-시토스테롤 및 스티그마스테롤을 포함하는 것인, 화장료 용도.
- 청구항 1 내지 11 중 어느 한 항에 있어서, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물은 국소 투여용 화장료 조성물 내에 조성물의 총 중량에 대하여 0.01% 내지 30%, 특히 0.1% 내지 5%의 중량 함량으로 존재하고, 상기 조성물은 적어도 하나의 화장용으로 허용가능한 부형제를 포함하는 것인, 화장료 용도.
- 청구항 1 내지 12 중 어느 한 항에 있어서, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물, 상기 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰 열매 껍질 추출물 및 식물성 오일의 조합, 또는 상기 화장료 조성물은, 민감성 피부, 건성 피부, 노화된 피부, 잡티성 피부(blemish-prone skin), 여드름성 피부(acne-prone skin), 아토피성 피부(atopic-prone skin) 또는 외부 손상 또는 스트레스에 의하여 약해진 피부를 가진 건강한 대상에게 국소 적용 또는 경구 투여되는 것인, 화장료 조성물.
- 잡티성 피부, 여드름성 피부 및 또는 아토피성 피부의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한, 추출물의 총 중량에 대하여, 최대 0.3 중량%의 리코펜, 적어도5 중량%의 아미린 및 적어도 1.5 중량%의 스테롤을 포함하는 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물을 활성 성분으로 포함하는 경구 또는 국소 조성물.
- 변경되거나 불균형한 선천적 면역 반응을 특징으로 하는, 바람직하게는 습진, 건선, 주사, 여드름, 피부염, 아토피성 피부염 및 자극성 피부(irritated skin)에서 선택된, 피부 질환 치료에 사용하기 위하여, 추출물의 총 중량에 대하여, 최대 0.5 중량%의 리코펜, 적어도 5 중량%의 아미린 및 적어도 1.5 중량%의 스테롤를 포함하는 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물을 활성 성분으로 포함하는 경구 또는 국소 조성물.
- 다음을 포함하는 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물:
- 추출물의 총 중량에 대하여, 최대 0.3 중량%, 바람직하게는 최대 0.1 중량%의 리코펜;
- 추출물의 총 중량에 대하여, 적어도 5 중량%의 아미린, 특히 α-아미린, β-아미린 및/또는 δ-아미린;
- 추출물의 총 중량에 대하여, 적어도 1.5 중량%의 스테롤; 및 바람직하게는 추출물의 총 중량에 대하여, 적어도 1 중량%의 β-시토스테롤 및 스티그마스테롤.
- 청구항 16에 정의된 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물, 바람직하게는 조성물의 총 중량에 대하여0.01% 내지 30%의 중량 함량, 및 적어도 하나의 화장용으로 허용가능한 부형제를 포함하는 화장료 조성물.
- 친유성 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물을 대상에게 국소적으로 적용 또는 경구 투여하는 단계를 포함하는, 그의 상태 및/또는 외관의 개선을 고려한, 피부 및/또는 점막의 미용 관리 방법으로, 상기 추출물은 추출물의 총 중량에 대하여, 최대 0.5 중량%의 리코펜, 적어도 5 중량%의 아미린 및 적어도 1.5 중량%의 스테롤을 포함하는 것인, 방법.
- 청구항 18에 있어서, 피부 또는 점막의 자연 방어를 유지, 균형 또는 강화하기 위하여; 특히, 피부 장벽 기능 강화, 및/또는 화학적, 물리적, 또는 미생물 공격 또는 정서적 스트레스와 같은 외부 공격 또는 스트레스에 대한 피부의 저항성 또는 내성을 유지하거나 증가, 및/또는 화학적, 물리적, 또는 미생물 공격 또는 정서적 스트레스와 같은 외부 공격 또는 스트레스에 기인한 피부의 비병리학적 변화를 예방 또는 치료하기 위하여; 및/또는 피부 편안함을 개선하거나 회복 및/또는 건강한 피부 미생물 군집을 회복 및/또는 유지하기 위한 것인, 미용 관리 방법.
- 청구항 18 또는 19에 있어서, 상기 솔라늄 리코퍼시쿰(Solanum lycopersicum) 열매 껍질 추출물은 청구항 4 내지 16 중 어느 한 항에 정의된 것인, 미용 관리 방법.
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