KR20240021658A

KR20240021658A - 바나나꼭지 추출물을 유효성분으로 함유하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물

Info

Publication number: KR20240021658A
Application number: KR1020220118469A
Authority: KR
Inventors: 정태우
Original assignee: 중앙대학교 산학협력단
Priority date: 2022-08-10
Filing date: 2022-09-20
Publication date: 2024-02-19

Abstract

본 발명은 바나나꼭지 추출물을 유효성분으로 함유하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물에 대한 것으로, 식품 폐기물로 분류되는 바나나꼭지(stalk)를 활용하여 이의 추출물의 팔미틱산으로 인한 간세포 내 지질침착 호전시킬 뿐만 아니라 세포 내 지질신생합성 관련 단백질의 발현을 억제시키고, AMPK 인산화를 증가시키며 나아가 소포체스트레스를 억제함을 확인하였고, 바나나껍질(skin) 추출물과 함께 사용하는 경우 지질침착 억제효과에 대한 시너지 효과를 확인하여 비알콜성 지방간을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다.

Description

바나나꼭지 추출물을 유효성분으로 함유하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물{Pharmaceutical composition for preventing or treating fatty liver disease comprising banana stalk water extract}

본 발명은 바나나꼭지(stalk) 추출물을 유효성분으로 함유하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.

국내 간질환 사망률은 인구 십만명 당 23.5명으로 매우 높으며, 40대 사망원인 1위(41.1명/10만 명), 50대 사망원인 2위(72.4명/10만 명), 30대 사망원인 3위(10명/10만 명)를 차지하는 등 간질환은 한국 중년층 인구의 주요 사망원인이다.

상기 간질환 중에서 지방간은 정상세포 내에는 존재하지 않는 중성지방이 간세포 내에 비정상적으로 침착되어 보이는 현상이 나타난 것을 말한다. 정상 간은 약 5%가 지방조직으로 구성되어 있으며 중성지방, 지방산, 인지질, 콜레스테롤 및 콜레스테롤 에스터가 지방의 주요 성분이나, 일단 지방간이 발생하면 대부분의 성분이 중성지방으로 대체되며 중성지방의 양이 간 중량의 5% 이상이면 지방간으로 진단된다. 지방간이 악화되어 간세포 속의 지방 덩어리가 커지면 핵을 포함한 세포의 중요한 구성성분이 한쪽으로 밀려 간세포의 기능이 저하되며, 세포 내에 축적된 지방으로 인하여 팽창된 간세포들이 간세포 사이에 있는 미세 혈관과 임파선을 압박하여 간 내의 혈액과 임파액의 순환에 장애가 생기게 된다. 이렇게 되면 간세포는 산소와 영양공급을 적절히 받을 수 없어 간기능이 저하되는 것이다.

비알콜성 지방간 질환(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)은 알코올에 의한 간 손상이 아니라, 지방산이 중성지방의 형태로 간세포 내에 5% 이상 축적된 경우로 정의한다. 병리학적으로는 단순 지방간(simple steatosis)과 염증을 동반한 지방간염(steatohepatitis)으로 분류되는데, 장기간 방치 시, 간염, 간 섬유, 간경변 등의 심각한 간 질환으로 이행될 수 있다. 국내에서도 생활양식의 변화로 인해 비알코올성 간질환 발생빈도가 증가하는 추세이다.

또한, 알콜성 지방간은 과다한 음주로 인해 발생하는데, 개인별로 유전적인 특징, 성별에 따라 차이가 있지만, 하루 80g 이상의 알코올의 섭취를 하는 경우 알콜성 지방간과 같은 간질환이 발생할 가능성이 크다. 여성의 경우 이보다 적은 양으로도 알코올성 간질환이 발생할 가능성이 커진다. 일반적으로 소주 1잔, 맥주 1잔, 양주 1잔, 막걸리 1홉에 약 10g의 알코올이 포함된 것으로 계산할 수 있다. 증상으로는 가장 경미한 형태인 알코올성 지방간 환자들의 경우 대부분 무증상이지만, 경미한 간비대(간이 정상보다 크게 된 상태)가 나타난 경우 오른쪽상 복부에 가벼운 압통을 호소할 수 있다.

한편, 아직까지 확실하고 효과적인 비알코올성 지방간 예방제 또는 치료제가 없으며, 화학합성 성분을 기반으로 한 약물이 대부분이기 때문에 고용량에서는 오히려 간독성을 유발시킬 가능성을 가지고 있는 실정이다. 그러므로 상대적으로 인체에 무리가 덜하고, 원가가 저렴한 천연물의 추출물 기반의 효과적인 비알코올성 지방간 치료제의 개발이 요청된다.

1. 중국 공개특허 113229307호.

본 발명의 목적은 바나나꼭지(stalk) 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 데에 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 바나나꼭지(stalk) 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하는 데에 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 바나나꼭지(stalk) 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간의 예방 또는 치료용 반려동물용 사료 조성물을 제공하는 데에 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 바나나꼭지(stalk) 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간의 예방 또는 치료용 반려동물용 사료첨가제 조성물을 제공하는 데에 있다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 바나나꼭지(stalk) 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 바나나꼭지(stalk) 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 바나나꼭지(stalk) 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간의 예방 또는 치료용 반려동물용 사료 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 바나나꼭지(stalk) 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간의 예방 또는 치료용 반려동물용 사료첨가제 조성물을 제공한다.

본 발명은 바나나꼭지 추출물을 유효성분으로 함유하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물에 대한 것으로, 식품 폐기물로 분류되는 바나나꼭지(stalk)를 활용하여 이의 추출물이 팔미틱산으로 인한 간세포 내 지질침착 호전시킬 뿐만 아니라 세포 내 지질신생합성 관련 단백질의 발현을 억제시키고, 바나나껍질(skin) 추출물과 함께 사용하는 경우 지질침착 억제효과에 대한 시너지 효과가 있어 비알콜성 지방간의 예방 또는 치료에 매우 효과적이며, 천연물 기반의 안전한 소재이므로, 비알콜성 지방간 치료용 약제 또는 건강기능식품 등 다양한 형태로 활용될 수 있다.

도 1은 바나나꼭지 추출물(banana stalk water extract; 이하 BSE라 함.)의 지질침작 및 지질신생합성을 억제 효과를 확인한 실험결과를 나타낸 것이다.
도 2는 BSE가 AMPK의 인산화를 증가시키는 효과를 확인한 실험결과를 나타낸 것이다.
도 3은 BSE가 지질침작 및 지질신생합성을 억제시키는데 AMPK가 관여하고 있음을 확인한 실험결과를 나타낸 것이다.
도 4는 BSE의 소포체스트레스 억제 효과를 확인한 실험결과를 나타낸 것이다.
도 5는 바나나껍질 추출물(banana skin water extract; 이하 BKE라 함.)과 BSE의 지질침착 억제능력을 비교한 실험결과를 나타낸 것이다.
도 6은 BSE와 BKE의 지질침착 억제능력에 대한 시너지효과를 확인한 실험결과를 나타낸 것이다.

이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.

본 명세서에서 바나나꼭지(stalk)란 바나나의 바로 윗부위를 의미하는 것으로, 바나나 나무에 붙어 있는 바나나줄기(stem)와 구별된다.

본 발명은 바나나꼭지(stalk) 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.

상기 바나나꼭지(stalk) 추출물은 물, (C1~C4)알코올 또는 이의 혼합용액에서 추출한 것일 수 있다.

상기 지방간 질환은 알콜성 지방간 질환 또는 비알콜성 지방간 질환일 수 있으며, 상기 알콜성 지방간 질환은 알콜성 단순성 지방간, 알콜성 간섬유화 및 알콜성 간경변으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 비알콜성 지방간 질환은 비알콜성 단순성 지방간, 비알콜성 간섬유화 및 비알콜성 간경변으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.

상기 약학 조성물은 간세포 내 지질침착 억제, 지질신생합성 억제, AMPK 인산화 증가 또는 소포체스트레스 억제할 수 있다.

상기 약학 조성물은 바나나껍질(skin) 추출물을 추가로 포함할 수 있다.

본 발명의 다른 구체예에서, 약학 조성물은 약학 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제, 붕해제, 감미제, 피복제, 팽창제, 윤활제, 활택제, 향미제, 항산화제, 완충액, 정균제, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 첨가제를 추가로 포함할 수 있다. 구체적으로 담체, 부형제 및 희석제는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 사용할 수 있으며, 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제할 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용할 수 있다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 있으며 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등이 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기재로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다. 본 발명의 일실시예에 따르면, 상기 약학 조성물은 정맥내, 동맥내, 복강내, 근육내, 동맥내, 복강내, 흉골내, 경피, 비측내, 흡입, 국소, 직장, 경구, 안구내 또는 피내 경로를 통해 통상적인 방식으로 대상체로 투여할 수 있다. 본 발명에 따른 유효성분의 투여량은 대상체의 상태 및 체중, 질환의 종류 및 정도, 약물 형태, 투여경로 및 기간에 따라 달라질 수 있으며 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있고, 1일 투여량이 0.01 mg/kg 내지 200 mg/kg, 바람직하게는 0.1 mg/kg 내지 200 mg/kg, 보다 바람직하게는 0.1 mg/kg 내지 100 mg/kg 일 수 있다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고 수회로 나누어 투여할 수도 있으며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다.

상기 건강기능식품 조성물은 바나나껍질(skin) 추출물을 추가로 포함할 수 있다.

상기 건강기능식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일 주스, 합성 과일 주스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 또한, 건강기능식품 조성물은 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 껌류, 아이스크림류, 스프, 음료수, 차, 기능수, 드링크제, 알코올 및 비타민 복합제 중 어느 하나의 형태일 수 있다. 또한, 상기 건강기능식품은 식품첨가물을 추가로 포함할 수 있으며, "식품첨가물"로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한 식품의약품안전청에 승인된 식품첨가물공전의 총칙 및 일반 시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다. 상기 "식품첨가물공전"에 수재된 품목으로 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼륨, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성품, 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고랭색소, 구아검 등의 천연첨가물, L-글루타민산나트륨 제제, 면류 첨가 알칼리제, 보존료제제, 타르색소 제제 등의 혼합 제제류 등을 들 수 있다. 이때, 건강기능식품을 제조하는 과정에서 식품에 첨가되는 유효성분은 필요에 따라 그 함량을 적절히 가감할 수 있으며, 바람직하게는 식품 100 중량부에 1 중량부 내지 90 중량부 포함되도록 첨가될 수 있다.

상기 사료 조성물은 바나나껍질(skin) 추출물을 추가로 포함할 수 있다.

상기 사료첨가제 조성물은 바나나껍질(skin) 추출물을 추가로 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 사료 조성물은 당업계에서 공지된 다양한 형태의 사료로 제조 가능하며, 바람직하게는 농후사료, 조사료 또는 특수사료가 포함될 수 있다.

농후사료에는 밀, 귀리, 옥수수 등의 곡류를 포함하는 종자 열매류, 곡물을 정제하고 남은 부산물로서 쌀겨, 밀기울, 보릿겨 등을 포함하는 겨류, 콩, 유체, 깨, 아마인, 코코야자 등을 채유하고 얻은 부산물인 깻묵류와 고구마, 감자 등에서 녹말을 뺀 나머지인 녹말찌꺼기의 주성분인 잔존녹말질류 등의 찌꺼기류, 어분, 물고기 찌꺼기, 어류에서 얻은 신선한 액상물(液狀物)을 농축시킨 것인 피시솔루블(fish soluble), 육분(肉粉), 혈분, 우모분, 탈지분유, 우유에서 치즈, 탈지유에서 카제인을 제조할 때의 잔액인 훼이(whey)를 건조한 건조훼이 등의 동물질사료, 효모, 클로렐라, 해조류 등이 있다.

조사료에는 야초, 목초, 풋베기 등의 생초(生草)사료, 사료용 순무, 사료용 비트, 순무의 일종인 루터베어거 등의 뿌리채소류, 생초, 풋베기작물, 곡실(穀實) 등을 사일로에 채워 놓고 젖산 발효시킨 저장사료인 사일리지(silage), 야초, 목초를 베어 건조시킨 건초, 종축용(種畜用) 작물의 짚, 콩과 식물의 나뭇잎 등이 있다.

특수사료에는 패각, 암염 등의 미네랄 사료, 요소나 그 유도체인 디우레이드 이소부탄 등의 요소사료, 천연사료 원료만을 배합했을 때 부족하기 쉬운 성분을 보충하거나, 사료의 저장성을 높이기 위해서 배합사료에 미량으로 첨가하는 물질인 사료첨가물, 식이보조제 등이 있다.

한편, 본 발명에 따른 사료 조성물은 사료 첨가제를 포함하거나 사료 첨가제 일 수 있다.

본 발명에서 용어 "사료 첨가제" 란 영양소 보충 및 체중감소 예방, 사료 내 섬유소의 소화 이용성 증진, 유질개선, 번식장애 예방 및 수태율 향상, 하절기 고온 스트레스 예방 등 다양한 효과를 목적으로 사료에 첨가하는 물질을 말한다. 본 발명의 사료첨가제는 사료관리법상의 보조사료에 해당하며, 탄산수소나트륨(중조), 벤토나이트(bentonite), 산화마그네슘, 복합광물질 등의 광물질제제, 아연, 구리, 코발트, 셀레늄 등의 미량 광물질인 미네랄제제, 케로틴, 비타민 E, 비타민 A, D, E, 니코틴산, 비타민 B 복합체 등의 비타민제, 메티오닌, 리이산 등의 보호아미노산제, 지방산 칼슘염 등의 보호지방산제, 생균제(유산균제), 효모배양물, 곰팡이 발효물 등의 생균, 효모제 등이 추가로 포함될 수 있다.

본 발명에 따른 사료 조성물은 고기능성 지방산의 강화 및 가축 사육을 목적으로 하는 개체이면 특별히 한정되지 않고, 어떠한 것이든 적용 가능하다. 상기 개체는 동물, 예를 들어 비-영장류(예를 들면, 소, 돼지, 말, 고양이, 개, 래트 및 마우스) 및 영장류(예를 들면, 원숭이, 예를 들어 사이노몰구스(cynomolgous) 원숭이 및 침팬지)를 비롯한 포유동물을 나타낸다. 또 다른 구체예에서, 상기 개체는 축산용 동물(예를 들면, 말, 소, 돼지 등) 또는 애완용 동물(예를 들면, 개 또는 고양이)이다. 또한, 어류, 예를 들어, 넙치, 가자미, 뱀장어, 민물장어, 바다장어, 우럭 등 이다. 또 다른 구체예에서 상개 개체는 곤충, 예를 들면, 등에, 꽃무지, 풍뎅이, 거저리, 귀뚜라미, 누에, 반모, 백강잠, 굼벵이, 지렁이, 거머리, 지네, 전갈, 거미 등 이다. 본 발명의 구체예에서 바람직한 개체는 가축으로서, 육우, 젖소, 돼지, 닭, 오리, 염소, 양, 말, 염소, 당나귀, 고양이, 거위, 꿩, 메추라기, 타조 또는 청둥오리로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있으며, 바람직하게는 육우일 수 있으나 이에 한정하는 것은 아니다.

본 발명에 따른 사료 조성물의 복용량은 개체의 종(species), 크기(size), 무게(weight), 나이(age)와 같은 다수의 요인들에 좌우될 수 있다. 원칙적으로, 전형적인 복용량은 개체/일 당 0.001 g 내지 1000kg의 범위일 수 있다. 다만, 이에 한정되지 않는다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예 등은 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예 등에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예 등은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.

<실험 예1> 바나나 부산물 추출물 준비

바나나꼭지(stalk) 추출물

5개월령 바나나꼭지 건조 중량 2 g을 40 mL의 3차 증류수 95℃에 3시간동안 열탕 추출을 진행하였다. 추출액을 4℃에서 13,000 rpm으로 5분간 원심분리하여 상층액을 취하여 바나나꼭지 추출물을 준비하였다.

바나나껍질(skin) 추출물

5개월령 바나나껍질 건조 중량 2 g을 40 mL의 3차 증류수에 95℃에 3시간동안 열탕 추출을 진행하였다. 추출액을 4℃에서 13,000 rpm으로 5분간 원심분리하여 상층액을 취하여 바나나껍질 추출물로 준비하였다.

<실험 예2> 간세포 및 시료 준비

쥐 1차 간세포(Zen-Bio, Research Triangle Park, NC, USA)는 10% 태아 소 혈청(FBS, fetal bovine serum, Invitrogen), 100 units/mL 페니실린 및 100 ㎍/ml 스트렙토마이신(Invitrogen)을 포함한 간세포 부착 배지(hepatocyte attachment medium, Zen-Bio)에서 배양되었다. 세포가 안착이 되는 것을 확인한 후 간세포 부착 배지 37℃, 5% CO₂ 조건에서 배양되었다. 마이코플라즈마는 간세포에서 검출되지 않았다. 모든 실험에서, 세포를 팔미틱산 염-BSA(bovine serum albumin) 200 μM로24시간동안 처리하고, 2% BSA을 대조군으로 사용하였다.

항-AMPK(1:2500) 및 항-포스포 AMPK(1:1000)는 Cell Signaling(Beverly, MA, USA)에서 구입하였다. 항-SREBP1(1:2500), 항-SCD1(1:2500) 및 항-베타액틴(1:5000)은 Santa Cruz Biotechnology에서 구입하였다.

<실험 예3> 웨스턴 블롯

간세포를 수득하고 단백질을 4℃에서 60분동안 용해완충액(PRO-PREP; Intron Biotechnology, Seoul Korea)으로 추출하였다. 단백질 시료(35㎍)를 12% SDS-PAGE에 적용하고 니트로셀룰로오스막(Amersham Bioscience, Westborough, MA, USA)에 옮기고, 1차 항체로 검출한 후, 2차 항체와 홀스래디쉬 퍼옥시다제(Santa Cruz Biotechnology)를 접합시킨 2차 항체로 탐침하였다. 샘플은 ECL키트로 검출되었다.

<실험 예4> 오일 레드-O 염색

오일 레드-O 키트(Sigma)를 이용하여 중성지질 염색을 시행하였다. 세포 배양액을 제거하고, PBS로 세척 후 oil red-O 수용액을 37℃, 30분간 처리하였다. 다시 PBS로 세척 후, 현미경으로 관찰 및 중성지질 측정 키트(Abcam)를 사용하여 중성지질 정량을 시행하였다.

<실시 예1> BSE의 지질침착 및 지질신생합성 억제 효과 확인

BSE의 지질침착 및 지질신생합성 억제 효과 확인하기 위해, 1차 간세포(primary hepatocyte)에 팔미틱산을 처리한 후, BSE를 처리하였다. 트리글리세라이드(triglyceride; 이하 TG라 함.)농도를 확인하기 위해 오일 레드-O 염색을 진행하였고 SREBP1 및 SCD1의 발현정도를 비교하기 위해 웨스턴블롯을 진행하였다.

그 결과, 도 1에 따르면, TG농도가 BSE에 농도의존적으로 감소함을 확인하여 지질침착 억제 효과가 있음을 확인하였으며, SREBP1 및 SCD1의 발현이 BSE에 농도의존적으로 억제됨을 확인하여 지질신생합성 억제 효과가 있음을 확인하였다.

<실시 예2> BSE에 의한 AMPK 인산화 농도 증가 확인 후 지질침착 및 지질신생합성과 AMPK의 관계 확인

BSE에 의한 AMPK 인산화 농도 증가를 확인하기 위해 BSE 처리에 따른 pAMPK와 AMPK를 웨스턴블롯으로 확인하였으며, 지질침작 및 지질신생합성과 AMPK의 관계를 확인하기 위해 1차 간세포(primary hepatocyte)에 팔미틱산을 처리한 후, 팔미틱산만 처리한 군, BSE 처리군 및 BSE와 AMPK siRNA(Santa Cruz Biotechnology, Cat. No. sc-45313)를 함께 처리한 군의 TG농도, SREBP1 및 SCD1 유전자의 발현 정도를 비교하였다.

그 결과, 도 2에 따르면, AMPK 인산화 농도가 BSE에 농도의존적으로 증가함을 확인하였다. 또한, 도 3에 따르면, BSE와 AMPK siRNA를 함께 처리한 군이 BSE 처리군에 비해서 TG농도가 증가함을 확인하였으며, SREBP1 및 SCD1의 발현 역시 BSE와 AMPK siRNA를 함께 처리한 군이 BSE 처리군에 비해서 증가함을 확인하여 AMPK가 있는 쪽이 지질침착 및 지질신생합성 억제 효과가 더 큼을 알 수 있었다.

따라서, BSE에 의해서 AMPK 인산화 농도가 증가하며, BSE의 지질침착 및 지질신생합성을 억제시키는데 AMPK가 관여하고 있음을 확인하였다.

<실시 예3> BSE의 소포체스트레스 억제 효과와 AMPK와의 관계 확인

BSE의 소포체스트레스 억제 효과와 AMPK와의 관계 확인하기 위해, 1차 간세포(primary hepatocyte)에 팔미틱산을 처리한 후, 팔미틱산만 처리한 군, BSE 처리군 및 BSE와 AMPK siRNA를 함께 처리한 군의 elF2α와 CHOP 유전자의 발현 정도를 비교하였다.

그 결과, 도 4에 따르면, BSE 처리군이 팔미틱산만을 처리한 군에 비해 elF2α와 CHOP 유전자 발현이 감소하여 소포체스트레스 억제 효과가 있음을 확인하였다.

또한, BSE와 AMPK siRNA를 함께 처리한 군이 BSE 처리군에 비해서 elF2α와 CHOP 유전자의 발현이 증가함을 확인하여 AMPK가 있는 쪽이 소포체스트레스 억제효과가 더 큼을 확인할 수 있었다.

따라서, BSE에 의해서 소포체스트레스가 억제되며, 이에 AMPK가 관여하고 있음을 확인하였다.

<실시 예4> BKE와 BSE의 지질침착 억제 능력 비교

바나나의 부위별 추출물의 지질침착 억제 능력 비교하기 위해, 1차 간세포(primary hepatocyte)에 팔미틱산을 처리한 후, BKE와 BSE를 각각 처리하고 TG농도를 비교하였다.

그 결과, 도 5에 따르면, 팔미틱산을 처리한 군과 팔미틱산과 BKE를 함께 처리한 군 간의 유의한 차이가 없는 것을 확인한 반면, 팔미틱산과 BSE를 함께 처리한 군의 TG농도가 유의하게 감소한 것을 확인하였다.

따라서, 같은 바나나에서 유래한 추출물이라도, 바나나껍질(skin)보다 바나나꼭지(stalk)에서 유래한 추출물이 지질침착 억제 능력이 더욱 뛰어남을 확인하여 바나나의 부위마다 효과가 다름을 확인할 수 있었다.

<실시 예5> BKE와 BSE의 지질침착 억제 능력에 대한 시너지 효과 확인

BKE와 BSE의 지질침착 억제 능력에 대한 시너지 효과를 확인하기 위해, 1차 간세포(primary hepatocyte)에 팔미틱산을 처리한 후 BKE와 BSE를 각각 또는 함께 처리하여 TG농도를 비교하였다.

그 결과, 도 6에 따르면, 단순히 BKE만 처리한 경우 유의한 효과가 나타나지 않았으나, BSE만 처리한 경우와 BKE와 BSE를 함께 처리한 경우 TG농도가 유의하게 감소하였음을 확인하였다. 특히, BKE와 BSE를 함께 처리한 경우 TG농도가 현저하게 감소되는 효과가 있음을 확인하였다.

따라서, BKE와 BSE를 함께 처리한 경우 지질침작 억제 능력에 대한 시너지 효과가 있는 것을 알 수 있었다.

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.

본 발명의 범위는 후술하는 청구범위에 의하여 나타내어지며, 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims

바나나꼭지(stalk) 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 지방간 질환은 알콜성 지방간 질환 또는 비알콜성 지방간 질환인 것을 특징으로 하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
제 2항에 있어서,
상기 알콜성 지방간 질환은 알콜성 단순성 지방간, 알콜성 간섬유화 및 알콜성 간경변으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 비알콜성 지방간 질환은 비알콜성 단순성 지방간, 비알콜성 간섬유화 및 비알콜성 간경변으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 약학 조성물은 간세포 내 지질침착 억제, 지질신생합성 억제, AMPK 인산화 증가 또는 소포체스트레스 억제하는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
청구항 1에 있어서,
상기 약학 조성물은 바나나껍질(skin) 추출물을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
바나나꼭지(stalk) 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
청구항 6에 있어서,
상기 건강기능식품 조성물은 바나나껍질(skin) 추출물을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 건강기능식품 조성물.
바나나꼭지(stalk) 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간의 예방 또는 치료용 반려동물용 사료 조성물.
청구항 8에 있어서,
상기 사료 조성물은 바나나껍질(skin) 추출물을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 사료 조성물.
바나나꼭지(stalk) 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간의 예방 또는 치료용 반려동물용 사료첨가제 조성물.
청구항 10에 있어서,
상기 사료첨가제 조성물은 바나나껍질(skin) 추출물을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 사료첨가제 조성물.