KR20240004268A - 안정화된 초유 조성물 - Google Patents

안정화된 초유 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20240004268A
KR20240004268A KR1020237033082A KR20237033082A KR20240004268A KR 20240004268 A KR20240004268 A KR 20240004268A KR 1020237033082 A KR1020237033082 A KR 1020237033082A KR 20237033082 A KR20237033082 A KR 20237033082A KR 20240004268 A KR20240004268 A KR 20240004268A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
colostrum
composition
growth factor
vaccine
cys
Prior art date
Application number
KR1020237033082A
Other languages
English (en)
Inventor
레이몬드 존 플레이포드
마이클 제임스 웨이서
타니아 마치뱅크
브루그겐카테 샌드라 요하나 마리아 텐
조지 스타그니티
Original Assignee
팬더릭스 인코포레이티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 팬더릭스 인코포레이티드 filed Critical 팬더릭스 인코포레이티드
Publication of KR20240004268A publication Critical patent/KR20240004268A/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/20—Milk; Whey; Colostrum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5015—Organic compounds, e.g. fats, sugars
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/19—Dairy proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/115—Fatty acids or derivatives thereof; Fats or oils
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/125—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols; containing starch hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/40—Complete food formulations for specific consumer groups or specific purposes, e.g. infant formula
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/1808—Epidermal growth factor [EGF] urogastrone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A61K38/57—Protease inhibitors from animals; from humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/32—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the health of the digestive tract
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00—Food ingredients
    • A23V2250/54—Proteins
    • A23V2250/542—Animal Protein
    • A23V2250/5424—Dairy protein
    • A23V2250/54252—Whey protein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55516—Proteins; Peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55583—Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55588—Adjuvants of undefined constitution

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pediatric Medicine (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

초유와 같은 회복 촉진 인자, 회복 촉진 인자의 효소적 소화를 감소시키는 영양 프로테아제 억제제, 및 임의로 경구 투여 후 회복 촉진 인자가 온전한 상태로 소장에 도달할 수 있도록 하는 안정화제를 포함하는 조성물이 제공된다. 위장관의 염증성 장 질환(IBD) 및 기타 장애를 치료하고, 완화시키고 예방하기 위한 방법이 제공된다.

Description

안정화된 초유 조성물
우선권 주장
[0001] 본 출원은 2021년 2월 26일자로 출원된 “Stabilized Colostrum Composition”이란 발명의 명칭의 미국 가출원 제63/154,495호에 대한 우선권의 이득을 주장하고 이의 전문은 본원에 참조로 인용된다.
서열 목록
[0002] 본 출원은 ASCI 형식으로 전자적으로 제출된 서열 목록을 포함하며, 이는 그 전체가 본원에 참조로 인용된다. "Sequence-Listing-40735-0056USP1"이라는 표제의 해당 ASCI 사본은 2021년 2월 26일자로 작성되었고 미국 가출원 번호 제63/154,495호로 제출되었으며 크기는 36.4킬로바이트(KB)이다.
[0003] 본원에 제공된 구현예는 안정화된 초유 조성물 및 이를 사용하는 방법에 관한 것이다.
[0004] 염증성 장 질환(IBD)은 주로 위장관에 영향을 미치는 심각한 재발성 질환으로 대장에 영향을 미치는 궤양성 대장염(UC)과 전체 위장관에 영향을 미칠 수 있으며 회장 말단을 선호하는 크론 질환으로 세분된다. 병태 둘다에서 과도한 염증 반응은 점막 온전성을 파괴하고 내강 내용물이 점막과 혈류로 침투하며 염증 과정을 더욱 악화시킨다. 현재 치료요법에는 프레드니솔론, 아자티오프린 또는 염증성 캐스케이드(예를 들어, TNFα)에 대해 지시된 모노클로날 항체와 같은 중증 부작용이 있는 강력한 면역 조절제가 포함되고, 이는 중증 감염 및/또는 골수 억제의 위험과 연관된다. 따라서 신규 치료요법이 요구된다.
[0005] 초유는 출생 후 처음 몇일 동안 생산되는 첫 번째 우유이다. 후속적으로 생산되는 우유에 비해 초유는 특히 면역글로불린, 항균 펩타이드(예를 들어, 락토페린, 락토퍼옥시다제) 및 성장 인자를 포함한 기타 생활성 분자가 풍부하다.
[0006] 소 초유(BC)는 다양한 위장 병태의 예방 및 치료에 유용할 수 있지만 위장관에서 초유가 분해되면 이의 유용성이 저해된다. 염증성 장 질환(IBD), 예를 들어, 전체 장에 영향을 미치는 궤양성 대장염(UC), 또는 전체 위장관에 영향을 미칠 수 있고 회장 말단을 선호하는 크론 질환을 포함하여 위장관에 영향을 미치는 병태의 치료, 완화, 예방 및/또는 재발을 예방하기 위한 안정화된 초유 조성물 및 안전하고 효과적이며 경제적인 방법에 대한 필요성이 여전히 남아 있다. 또한 식이 보충제, 기능성 식품 및 음료에 사용하고 정상적인 위장 및 면역 기능을 지원하기 위한 안정화된 초유 조성물이 필요하다.
발명의 개요
[0007] 본원의 개시내용은 안정화된 초유 조성물을 제공한다. 조성물은 회복 촉진 인자; 영양 세린 프로테아제 억제제; 및 선택적으로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함할 수 있다.
[0008] 본원의 개시내용은 회복 촉진 인자, 안정화제, 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물을 제공한다.
[0009] 본원의 개시내용은 치료가 필요한 대상체에서 위장관의 염증과 연관된 질환 또는 장애를 치료, 완화 또는 예방하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 치료학적 유효량의 회복 촉진 인자, 면역 인자, 또는 이들의 조합; 영양 세린 프로테아제 억제제; 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물을 상기 대상체에게 투여함을 포함한다. 영양 세린 프로테아제 억제제는 영양 트립신 억제제일 수 있다. 일부 구현예에서, 조성물은 추가로 안정화제를 포함할 수 있다.
[0010] 본원의 개시내용은 치료가 필요한 대상체에서 위장관의 염증과 연관된 질환 또는 장애를 치료, 완화 또는 예방하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 치료학적 유효량의 회복 촉진 인자 및/또는 면역 인자; 안정화제; 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물을 상기 대상체에게 투여함을 포함한다.
[0011] 본원의 개시내용은 치료학적 유효량의 조성물을 대상체에게 경구 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 백신접종 항체 역가를 증진시키는 방법을 제공한다. 조성물은 회복 촉진 인자, 면역 인자 또는 이의 조합; 영양 세린 프로테아제 억제제; 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제; 및 임의로 안정화제를 포함할 수 있다. 백신을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 백신접종 항체 역가를 증진시키는 방법이 제공된다.
[0012] 본원 개시내용은 정제된 락토페린, 안정화제 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물을 제공한다.
[0013] 본원 개시내용은 특히, 특정 조합 생성물의 첨가가 펩신 소화로부터 초유의 상승작용적 보호를 초래한다는 놀라운 발견에 기초하며, 이는 초유 및 조합 생성물을 포함하는 조성물이 보다 유익한 경구 생체이용률 프로파일을 제공함을 시사한다.
[0014] 도 1a는 시험관내 샘플 효소 소화 프로토콜의 도식적으로 도시한다.
[0015] 도 1b는 사람 AGS 세포주에서 Alamar 블루세포 증식 검정을 통해 시험관 내에서 성장 인자 보존에 대한 프로테아제 억제제의 효과를 보여주는 막대 그래프를 도시한다.
[0016] 도 1c는 사람 AGS 세포주에서 Alamar 블루세포 증식 검정을 통해 시험관 내에서 성장 인자 보존에 대한 프로테아제 억제제 효과의 막대 그래프를 보여준다.
[0017] 도 1d는 BC의 시험관내 안정성에 대한 조합 생성물 효과의 막대 그래프를 보여준다. Alamar 블루 세포 증식 검정을 통해 안정성을 측정하였다.
[0018] 도 1e는 BC의 시험관내 안정성에 대한 조합 생성물 효과를 보여주는 막대 그래프를 도시한다. 소 IgG 이. 콜라이 결합을 통해 안정성을 측정하였다.
[0019] 도 2a는 ELISA를 통해 IgG 면역반응성에 대한 조합 생성물의 영향을 보여주는 막대 그래프를 도시한다.
[0020] 도 2b는 성장 인자 면역반응성에 대한 조합 생성물의 영향을 보여주는 막대 그래프를 도시한다. TGFβ 면역반응성은 ELISA를 통해 측정하였다.
[0021] 도 2c는 성장 인자 면역반응성에 대한 조합 생성물의 영향을 보여주는 막대 그래프를 도시한다. EGF 면역반응성은 ELISA를 통해 측정하였다.
[0022] 도 2d는 성장 인자 면역반응성에 대한 조합 생성물의 영향을 보여주는 막대 그래프를 도시한다. 락토페린 면역반응성은 ELISA를 통해 측정하였다.
[0023] 도 3a는 9일에 걸친 래트 누적 총 체중 변화 및 래트의 DSS-유발 대장염에서 BC+난(egg) 또는 EGF의 보호 활성에 대한 세린 프로테아제 억제제의 영향의 막대 그래프를 도시한다.
[0024] 도 3b는 9일에 걸친 래트에서 DSS-유도된 대장염에서의 누적 질환 활성 지수(DAI) 스코어 및 BC+난 또는 EGF의 보호 활성에 대한 세린 프로테아제 억제제의 영향의 막대 그래프를 도시한다.
[0025] 도 3c는 9일에 걸친 래트에서 DSS-유도된 대장염에서의 결장 조직 미엘로퍼옥시다제(MPO) 농도 및 BC+난 또는 EGF의 보호 활성에 대한 세린 프로테아제 억제제의 영향의 막대 그래프를 도시한다.
[0026] 도 3d는 DSS-유도된 대장염 모델에서 래트의 총 조직학적 대장염 스코어의 막대 그래프를 도시한다.
[0027] 도 4a-4h는 도 2a-2d와 동일한 래트에서 DSS-유도된 대장염의 형태에 대한 현미경 사진을 보여준다. 보다 구체적으로:
[0028] 도 4a는 정상적인(DSS 없음) 래트 크립트(crypt) 구조의 현미경 사진을 보여준다.
[0029] 도 4b는 7일에 걸쳐 DSS를 투여한 후 래트 결장의 현미경 사진을 보여준다.
[0030] 도 4c는 세린 프로테아제 억제제 오보뮤코이드 단독 처리 후 래트 결장의 현미경 사진을 보여준다.
[0031] 도 4d는 세린 프로테아제 억제제 SBTI 단독 처리 후 래트 결장의 현미경 사진을 보여준다.
[0032] 도 4e는 BC + 난을 투여받은 동물의 래트 결장의 현미경 사진을 보여준다.
[0033] 도 4f는 BC + 난 + 오보뮤코이드의 조합을 투여받은 동물의 래트 결장의 현미경 사진을 보여준다.
[0034] 도 4g는 EGF 단독 처리 후 래트 결장의 현미경 사진을 보여준다.
[0035] 도 4h는 EGF + SBTI의 조합을 투여받은 동물의 래트 결장의 현미경 사진을 보여준다.
[0036] 도 5a는 7일에 걸쳐 특정 치료를 받은 마우스에 대한 총 체중 증가의 막대 그래프를 도시한다.
[0037] 도 5b는 특정 치료를 받은 마우스에 대해 결정된 누적 질환 활성 지수(DAI) 스코어의 막대 그래프를 보여준다.
[0038] 도 5c는 특정 치료를 받은 마우스에 대해 결정된 최종 질환 활성 지수(DAI) 스코어의 막대 그래프를 보여준다.
[0039] 도 6a는 DSS-유도된 대장염 모델에서 마우스의 결장 조직에서의 미엘로퍼옥시다제(MPO) 활성의 막대 그래프를 도시한다.
[0040] 도 6b는 도 6a의 DSS-유도된 대장염 모델에서 결장당 조직학적 스코어의 막대 그래프를 보여준다. 대표적인 현미경 사진은 도 7a-7g에 나타낸다.
[0041] 도 7a는 DSS 유도된 대장염 모델에서 "DSS 부재 대조군" 마우스의 결장 조직의 대표적인 현미경 사진을 보여준다.
[0042] 도 7b는 DSS 유도된 대장염 모델에서 "DSS 단독" 마우스의 결장 조직의 대표적인 현미경 사진을 보여준다.
[0043] 도 7c는 DSS 유도된 대장염 모델에서 "DSS + C7 7mg/kg" 마우스의 결장 조직의 대표적인 현미경 사진을 보여준다.
[0044] 도 7d는 DSS 유도된 대장염 모델에서 "DSS + C7 20 mg/kg" 마우스의 결장 조직의 대표적인 현미경 사진을 보여준다.
[0045] 도 7e는 DSS 유도된 대장염 모델에서 "DSS + C12 7mg/kg" 마우스의 결장 조직의 대표적인 현미경 사진을 보여준다.
[0046] 도 7f는 DSS 유도된 대장염 모델에서 "DSS + C12 20 mg/kg" 마우스의 결장 조직의 대표적인 현미경 사진을 보여준다.
[0047] 도 7g는 DSS 유도된 대장염 모델에서 "DSS + C17 20 mg/kg" 마우스의 결장 조직의 대표적인 현미경 사진을 보여준다.
[0048] 도 8은 내산성 캡슐 또는 비교되는 비-내산성 통상적인 캡슐에서 특정 그룹의 증식 효과의 막대 그래프를 도시한다.
정의
[0049] 본원에 사용된 용어는 단지 특정 구현예를 기재하기 위한 것이고 본원 개시내용을 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용되는 기술 용어 및 과학 용어들을 포함하는 모든 용어는 본원 개시내용이 속하는 분야의 숙련가가 통상적으로 이해하는 바와 동일한 의미를 갖는다. 용어가 모순되는 경우, 본 명세서가 제어한다.
[0050] 본 명세서 및 첨부된 청구범위에서 사용되는 바와 같은, 단수 형태 ("a", "an" 및 "the")는, 문맥상 명백하게 달리 언급하지 않는 한, 복수에 대한 언급을 포함한다. 따라서, 예를 들어 "회복 촉진 인자"를 함유하는 조성물은 2개 이상의 회복 촉진 인자의 혼합물을 포함한다.
[0051] "또는"이라는 용어는 일반적으로 "및/또는"을 포함하는 의미로 사용되며, 이는 문맥에서 달리 명시하지 않는 한 관련된 나열된 항목 중 하나 이상의 임의의 모든 가능한 조합을 포함하도록 의도된다.
[0052] 양, 일시적 지속기간 등과 같은 측정가능한 값을 언급하는 경우 본원에 사용된 바와 같은 용어 “약”은 상기 변화가 기재된 방법을 수행하기 위해 적당함으로써 특정된 값으로부터 ±20%, ±10%, ±5%, ±1%, 또는 ±0.1%의 변화를 포괄하는 것으로 의미된다.
[0053] 용어 "추가 활성제"는 질환 또는 장애를 앓고 있는 대상체의 치료, 예방 또는 완화 치료에 있어서 단독으로, 동시에 투여되거나, 순차적으로 투여되거나, 하나 이상의 추가 제제와 조합하여 투여되는 유용한 제제를 지칭한다. 추가 활성제는 예를 들어 항생제, 항진균제, 항바이러스제, 항미생물제, 항기생충제, 미량 영양소, 경구 재수화 염, 설사 흡착제, 항콜린성 약물, 항분비제, 운동 억제 약물, 또는 초유 성분, 또는 이들의 조합일 수 있다. 추가적인 활성제는 또한 히스타민 2형 수용체 차단제 또는 양성자 펌프 억제제일 수 있다. 히스타민 2형 수용체 차단제는 라니티딘, 파모티딘, 니자티딘 또는 시메티딘일 수 있다. 양성자 펌프 억제제는 오메프라졸, 란소프라졸, 라베프라졸, 판토프라졸, 에소메프라졸 또는 덱슬란소프라졸일 수 있다. 추가적인 활성제는 본원에 기재된 임의의 조성물과 함께 동시 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 추가적인 활성제는 이전에 "치료의 표준"으로서 단독으로 사용된 양으로 본원에 기재된 임의의 조성물에 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 추가적인 활성제는 이전에 "치료의 표준"으로서 단독으로 사용된 양 미만으로 조성물에 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 추가적인 활성제는 위장관의 염증 또는 손상, 장 염증 감소, 장내 미생물 변화, 장 융모 둔화 감소, 장 완전성 증가, 궤양 감소, 장 내용물 누출 감소, 전신 염증 감소, 바이오마커의 상당한 변화, 설사량 감소, 설사 기간 감소, 감소 복통, 메스꺼움 감소, 경련 감소, 장 조절 상실 또는 설사 증상의 긴급성 감소과 관련된 질환, 장애 또는 병태의 증상 또는 징후의 측정 가능한 감소를 유발하는데 효과적인 양, 또는 의사가 평가한 대상체의 웰빙을 증가시키는 양; 예를 들어, 추가 활성제가 없는 조성물과 비교하여 증가시키는 양으로 본원에 기재된 임의의 조성물에 동시 투여되거나 사용될 수 있다.
[0054] "응집" 또는 "응집하는"이라는 용어는 미세 분말의 입자 크기를 증가시키는 데 사용되는 기술을 지칭한다. 입자 크기의 증가는 습윤성 및 용해도를 개선시키고 따라서 본원 개시내용의 조성물에 즉각적인 성질을 부여한다. 상기 공정에는 미세한 분무 건조 분말을 다시 적시고 두 번째 건조 사이클을 거쳐 "응집체"를 생성시키는 것이 포함될 수 있다.
[0055] "초유"라는 용어는 분만 후 최대 24시간, 48시간 또는 72시간(예를 들어, 약 2, 5, 10, 12, 24, 36, 48 또는 72시간)까지 포유동물로부터 수득된 첫 번째 우유를 지칭한다. 초유는 소, 양, 염소, 버팔로 또는 기타 포유류로부터 수득될 수 있다. 일부 구현예에서, 초유는 소 초유이다. 일부 구현예에서, 초유는 사람 초유가 아니다. "후기 초유"라는 용어는 분만 후 72시간에서 7일 사이(예를 들어, 분만 후 약 3, 4, 5, 6 또는 7일)에 수득된 초유를 지칭한다.
[0056] 본원 개시내용의 범위를 이해하는데 있어서, 본원에 사용된 용어 "포함하는" 및 그 파생어는 언급된 특성, 요소, 성분, 그룹, 정수, 작업 및/또는 단계의 존재를 특정하는 개방형 용어로 의도되지만 명시되지 않은 다른 특성, 요소, 성분, 그룹, 정수, 작업 및/또는 단계의 존재를 배제하지 않는다. 전술한 내용은 "포함하는", "갖는"이라는 용어 및 그 파생어와 같이 유사한 의미를 갖는 단어에도 적용된다. 포함하는 용어가 전환 문구로서 사용되는 구현예 또는 청구범위에서, 이러한 구현예는 또한 용어 "포함하는(comprising)", 포함하는 (including)”, “갖는”을 "로 이루어진" 또는 "필수적으로 이루어진” 용어로 대체하는 것으로 고려될 수 있다. "이루어진"이라는 용어와 그 파생어는 명시된 특성, 요소, 성분, 그룹, 정수 및/또는 단계의 존재를 지정하는 폐쇄형 용어인 것으로 의도된다. 본원에 사용된 "필수적으로 이루어진"이라는 용어는 언급된 특성, 요소, 성분, 그룹, 정수 및/또는 단계의 존재뿐만 아니라 이들 특성, 요소, 성분, 그룹, 정수 및/또는 단계의 기본적이고 새로운 특징에 실질적으로 영향을 미치지 않는 것들을 명시하기 위해 의도된다. 본원에 예시적으로 기재된 구현예는 본원에 구체적으로 또는 구체적으로 기재되지 않은 임의의 요소 또는 요소(들), 제한 또는 제한들 부재하에서 적합하게 수행될 수 있다. 따라서, 예를 들어, 본원의 각 경우에 "포함하는", "필수적으로 이루어진" 및 "로 이루어진"이라는 임의의 용어는 통상적인 의미를 유지하면서 다른 두 용어 중 하나로 대체될 수 있다. 본원에 기재된 임의의 단일 용어, 단일 요소, 단일 문구, 용어 그룹, 문구 그룹 또는 요소 그룹은 각각 청구범위에서 구체적으로 배제될 수 있다. 최종적으로, 본원에 사용되는 '실질적으로', '약', '대략' 등의 정도의 용어는 최종 결과가 크게 변하지 않을 정도로 변형된 용어가 어느 정도 이탈한 합리적 정도를 의미한다. 이러한 정도의 용어는 편차가 변형된 단어의 의미를 부정하지 않는다면 변형된 용어의 적어도 ±5%의 편차를 포함하는 것으로 해석되어야 한다.
[0057] "난" 또는 "난 생성물"이라는 용어는 각각 조류에서 생산된 전각 난(일반 난, 면역화 난 또는 기타 난) 또는 이로부터 파생된 모든 생성물 또는 분획을 의미한다. 조류는 예를 들어 닭, 오리, 거위, 칠면조, 뿔닭, 비둘기, 메추라기, 에뮤 또는 타조로부터 선택된 하나 이상의 조류 사육종의 암컷일 수 있다.
[0058] 본원에 사용된 용어 "면역 인자"는 면역 반응을 조절하는 펩타이드 및 기타 인자를 지칭한다. 면역 인자는 면역글로불린, 사이토킨 또는 항미생물 펩타이드일 수 있지만 이에 제한되지 않는다. 본원에 사용된 용어 "면역글로불린"은 항체로서 기능하는 면역계의 혈청 및 세포에 존재하는 단백질 부류를 지칭한다. 면역글로불린은 IgG, IgA, 또는 IgM일 수 있지만 이에 제한되지 않는다. 본원에 사용된 용어 "사이토킨"은 면역계의 세포에 의해 분비되고 다른 세포에 영향을 미치는 임의의 다수의 물질 중 하나를 지칭한다. 사이토킨은 인터류킨(예를 들어, IL-1β, IL-2, IL-6, IL-10, IL-17), 종양 괴사 인자 α, 인터페론 γ, 과립구, 대식세포 또는 과립구 대식세포 콜로니 자극 인자일 수 있지만 이에 제한되지 않는다. 본원에 사용된 용어 "항미생물 펩타이드"는 모든 다세포 유기체에 의해 제1 선의 방어로 생성되는 천연적으로 존재하는분자를 지칭한다. 이들 단백질은 세균, 효모, 진균류, 바이러스, 및 심지어 암세포를 직접 사멸시키는 광범위한 활성을 가질 수 있다. 항미생물 펩타이드는 락토페린, 락토퍼옥시다제 또는 리소자임일 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
[0059] 본원에 사용된 "포함하는"이라는 용어는 범위가 비제한적이어서 열거된 요소 외에 추가 요소가 가능한 것으로 고려되고; 상기 용어는 어떤 경우에도 "포함하지만 이에 제한되지 않는"으로 해석될 수 있다.
[0060] 징후 또는 증상 또는 바이오마커의 완화 또는 개선은 1주 내지 2년, 2주 내지 18개월, 3주 내지 12개월, 4주 내지 9개월, 6주 내지 6개월, 또는 8주 내지 3개월 또는 투여 개시 후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24개월의 기간에 조성물을 투여한 후 발생할 수 있다.
[0061] 성분 또는 조성물의 "유효량"은 바람직한 활성을 제공하거나, 조성물의 성분의 안정성 또는 조성물의 안정성을 예를 들어, 동일한 기간 동안 동일한 조건에 노출되었을 때 제제가 없는 동일한 성분 또는 조성물에 비해 적어도 10%, 20%, 30%, 50%, 70%, 100% 또는 2배, 3배, 4배 이상 까지 개선시키거나 보존하는데 효과적인 양으로서 본원에 추가로 정의될 수 있다. 일부 구현예에서, "유효량" 및 "치료학적 유효량"은 상호교환적으로 사용되고, 특정 생물학적 결과를 달성하거나 치료학적 또는 예방학적 이득을 제공하기에 효과적인 본원에 기재된 바와 같은 화합물, 제형, 물질, 성분 또는 조성물의 양을 지칭한다. 그러한 결과는 포유류에게 투여되었을 때 환자 샘플에서 미엘로퍼오시다제(MPO)를 감소시키는 양을 포함할 수 있지만 이에 제한되지 않는다. 환자 샘플은 조직, 혈액, 혈청, 혈장, 타액 또는 대변 샘플일 수 있다. 일부 구현예에서, 조성물의 유효량은 대상체의 분변 MPO를 감소시킬 수 있다. 조성물의 유효량은 결장 또는 직장 조직 샘플에서 MPO를 감소시킬 수 있다. MPO에서의 감소는 약 0.1, 1, 5, 10, 20, 30, 40, 50% 이상의 감소일 수 있다. 조성물의 유효량은 조성물의 1일 치료학적 용량당 건조 중량 기준으로 약 0.5g 내지 100g, 1g 내지 75g, 2g 내지 50g, 3g 내지 20g, 또는 적어도 1 그램, 2 그램, 3 그램, 4그램, 5 그램 그램, 6그램, 7그램, 8그램, 9그램, 10그램일 수 있다. 조성물은 건조, 분말, 반고체, 고체, 페이스트 또는 액체 형태일 수 있다.
[0062] "기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제"라는 용어는 무독성, 불활성 고체, 반고체 또는 액체 충전제, 담체, 희석제, 부형제, 비히클, 캡슐화 물질 또는 임의의 유형의 제형화 보조제를 지칭한다. 기능식품적으로 허용되는 담체로 작용할 수 있는 물질의 일부 예는 본원에 제공되고, 예를 들어, 락토스, 글루코스 및 슈크로스와 같은 슈가; 알파-(α), 베타-(β) 및 감마-(γ) 사이클로덱스트린과 같은 사이클로덱스트린; 옥수수 전분, 감자 전분과 같은 전분; 덱스트린과 같은 부분 가수분해 전분; 나트륨 카복시메틸 셀룰로스, 에틸 셀룰로스, 셀룰로스 아세테이트와 같은 셀룰로스 및 이의 유도체; 분말 트라가칸트; 맥아; 겔라틴; 활석; 이산화규소, 코코아 버터, 좌약 왁스와 같은 부형제; 땅콩유, 면화씨유, 홍화유, 참기름, 올리브유, 옥수수유, 대두유와 같은 식물성 오일; 중간-쇄 트리글리세리드, 예를 들어, 팜 커널 오일 또는 코코넛 오일에서 추출된 것; 프로필렌 글리콜과 같은 글리콜; 에틸 올레에이트 및 에틸 라우레이트와 같은 에스테르; 한천; 수산화마그네슘, 수산화알루미늄 등의 완충제; 알긴산; 발열원이 없는 물; 등장성 식염수; 링거 용액; 에틸 알코올 및 포스페이트 완충액, 및 나트륨 라우릴 설페이트 및 마그네슘 스테아레이트와 같은 기타 무독성 호환 윤활제 및 가용화제, 착색제, 이형제, 코팅제, 감미료, 방향제, 향료, 방부제 및 항산화제는 또한 제형화 기술자 판단에 따라 조성물에 존재할 수 있다. 방향제는 천연 방향제일 수 있다.
[0063] "환자", "대상체" 또는 "대상체들"이라는 용어는 사람을 포함하지만 이에 제한되지는 않고, 상기 용어는 또한 다른 포유류, 또는 가축 또는 외래 동물, 예를 들어 돼지, 말, 양, 소, 황소, 염소, 알파카, 라마, 낙타, 개, 고양이, 흰 족제비, 토끼 또는 새를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 대상체는 사람 대상체이다. 사람 대상체는 28일령 이하의 신생아 대상체, 28일령 이상의 비신생아 대상체, 18세 연령 미만의 청소년 대상체, 18세 연령 이상의 성인 대상체, 또는 60세 연령 이상의 노인 대상체일 수 있다. 특정 구현예에서, 대상체는 신생아가 아닌 사람 대상체이다. 다른 구현예에서, 대상체는 가축 동물이다. 일부 구현예에서, 가축 동물은 송아지, 새끼 돼지, 어린 양, 또는 망아지와 같은 신생아 가축 동물일 수 있다. 일부 구현예에서, 가축 동물은 임신 중이거나 수유 중인 암컷 가축 동물일 수 있다. 일부 구현예에서, 가축 동물은 생산 동물일 수 있다. 생산 동물은 젖소, 낙농업 염소, 육우, 돼지, 가금류, 양, 알파카, 앙고라 토끼, 낙타, 염소, 라마, 사향소와 같은 양모 생산 동물일 수 있다. 일부 구현예에서, 가축 동물은 말, 개, 고양이, 흰족제비 또는 토끼와 같은 반려 동물일 수 있다. 일부 구현예에서, 가축 동물은 경주마, 퍼포먼스 말, 쇼 말, 목양견 또는 사냥개와 같은 퍼포먼스 동물일 수 있다.
[0064] "회복 촉진 인자"라는 용어는 세포 성장, 분화, 발달 및 기능에 영향을 미치는 성장 인자와 같은 소분자 및 펩타이드를 지칭한다. 이러한 회복 촉진 인자는 상피 성장 인자(EGF), 형질전환 성장 인자 α(TGF-α), 형질 전환 성장 인자 β(TGF-β), 인슐린 유사 성장 인자 I(IGF-I), 인슐린 유사 성장 인자 II(IGF-II) 및 혈소판 유래 성장 인자(PDGF)를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 회복 촉진 인자라는 용어는 단리된 회복 촉진 펩타이드와 같은 단일 인자, 또는 인자들의 그룹, 또는 초유와 같은 회복 촉진 인자를 포함하는 혼합물을 지칭할 수 있다.
[0065] 용어 "치료학적 유효량"은 특정 생물학적 결과를 달성하거나 치료학적 또는 예방학적 이득을 제공하기에 효과적인 본원에 기재된 바와 같은 화합물, 제형, 물질, 성분 또는 조성물의 양을 지칭한다. 이러한 결과는 질환, 장애 또는 부작용의 개선된 치료, 치유, 예방 또는 완화, 또는 질환 또는 장애의 진행 속도의 감소를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 이러한 결과는 환자 샘플에서 MPO의 감소를 포함할 수 있지만 이에 제한되지 않는다. 당업자는 "치료학적 유효량"이 화합물, 질환 및 이의 중증도, 투여 경로, 치료할 대상체의 병태, 연령, 체중, 성별 등에 따라 다양할 수 있음을 이해할 것이다.
[0066] 질환 상태 또는 병태를 "치료하는" 또는 이의 "치료"라는 용어는 다음을 포함한다: (i) 질환 상태 또는 병태를 예방하는 것, 즉 질환 상태 또는 병태에 노출되거나 걸리기 쉬울 수 있는 대상체에서 질병 상태 또는 병태의 하나 이상의 임상 증상이 발병하지 않도록 유발하지만 질환 상태 또는 병태의 증상을 아직 경험하지 않았거나 나타내지 않는 것, (ii) 질환 상태 또는 병태를 억제하거나 완화시키는 것, 즉 질환 상태 또는 병태 또는 하나 이상의 임상 증상의 발생을 정지시키는 것, (iii) 질환 또는 병태를 완화시키는 것, 즉 질환 상태나 병태 또는 하나 이상의 임상 증상을 일시적 또는 영구적으로 퇴행시키거나 (iv) 대상체가 경험한 질환 또는 장애의 적어도 하나의 징후 또는 증상의 빈도 또는 중증도를 감소시키는 것.
[0067] 모든 대명사는 가장 넓은 의미를 부여하도록 의도된다. 달리 명시하지 않는 한, 여성 대명사는 남성을 포함하고, 남성 대명사는 여성을 포함하며, 단수 대명사는 복수를 포함하고, 복수 대명사는 단수를 포함한다.
[0068] 본원 개시 내용 전반에 걸쳐, 다양한 양상의 구현예는 범위 포맷으로 제공될 수 있다. 범위 포맷의 기재는 단지 편의와 간결성을 위한 것이며 융통성 없는 제한으로 해석되어서는 안 된다는 점을 이해해야 한다. 따라서, 범위에 대한 기재는 가능한 모든 하위 범위뿐만 아니라 그 범위 내의 개별 수치도 구체적으로 개시한 것으로 간주되어야 한다. 또한, 이들 수치 범위는 해당 범위에 있는 임의의 숫자 또는 숫자의 서브세트에 대한 청구항을 뒷받침하는 것으로 해석되어야 한다. 예를 들어, 1 내지 10의 기재는 2 내지 8, 3 내지 7, 5 내지 6, 1 내지 9, 3.6 내지 4.6, 3.5 내지 9.9 등의 범위, 및 해당 범위 내의 개별 숫자, 예를 들어, 1, 2, 2.3, 3, 4, 5, 5.7, 6, 7, 8, 8.9, 9, 9.5, 9.9 및 10을 지지하는 것으로서 해석되어야 한다. 이것은 범위의 폭에 관계없이 적용된다. 다르게 명시적으로 달리 언급되지 않는 한, 기재된 범위는 또한 범위의 종말점을 포함한다.
[0069] “실질적 동일성” 또는 “실질적으로 동일한”은 참조 아미노산 서열 (예를 들어, 본원에 기재된 아미노산 서열 중 어느 하나) 또는 핵산 서열 (예를 들어, 본원에 기재된 핵산 서열 중 어느 하나)과 적어도 50% 동일성을 나타내는 폴리펩타이드 또는 핵산 분자를 의미한다. 일부 구현예에서, 서열은 비교를 위해 사용되는 아미노산 수준 또는 핵산 수준에서 적어도 60%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% 이상 동일할 수 있다.
서열 동일성은 서열 분석 소프트웨어를 사용하여 측정되고/결정될 수 있다(문헌참조: 예를 들어, Sequence Analysis Software Package of the Genetics Computer Group, University of Wisconsin Biotechnology Center, 1710 University Avenue, Madison, Wis. 53705, BLAST, BESTFIT, GAP, or PILEUP/PRETTYBOX programs). 상기 소프트웨어는 상동성 정도를 다양한 치환, 결실 및/또는 다른 변형에 할당함에 의해 동일하거나 유사한 서열을 매칭시킨다. 보존적 치환은 전형적으로 하기의 그룹 내 치환을 포함한다: 글라이신, 알라닌; 발린, 이소류신, 류신; 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴, 글루타민; 세린, 트레오닌; 라이신, 아르기닌; 및 페닐알라닌, 티로신. 동일성 정도를 결정하기 위한 예시적 접근법에서, BLAST 프로그램이 사용될 수 있고, 확률 스코어는 e3 내지 e100이고 이는 밀접하게 관련된 서열을 지적한다. 일부 구현예에서, 서열 동일성은 디폴트 설정으로 BLAST를 사용하여 결정된다.
본원에 제공된 구현예는 다양한 단백질을 포함하는 조성물을 포함하고, 이들 단백질은 일부 경우 본원에 기재된 아미노산 서열과 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다. 따라서, 특정 구현예에서, 특정 서열에 따라, 서열 동일성 정도는 본원에 기재된 서열에 대해 약 50%(예를 들어, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 이상) 초과일 수 있다. 이들 단백질은 동족체, 오톨로그, 대립유전자 변이체 및 기능적 돌연변이체를 포함할 수 있다. 전형적으로, 2개 폴리펩타이드 서열 사이의 50% 이상의 동일성은 기능적 동등성을 나타내는 것으로 간주된다. 폴리펩타이드 사이의 동일성은 MPSRCH 프로그램(Oxford Molecular)에서 구현된 스미쓰-워터맨(Smith-Waterman) 상동성 검색 알고리즘에 의해 결정될 수 있고, 파라미터 갭 개방 페널티 - 12 및 갭 연장 페널티 = 1을 사용한다.
[0070] 이들 단백질은 기재된 단백질과 비교하여 하나 이상(예를 들어 1, 2, 3,4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 등)의 보존적 아미노산 대체, 즉 하나의 아미노산을, 관련된 측쇄를 갖는 하나의 아미노산으로 대체하는 것을 포함한다. 유전학적으로 암호화된 아미노산은 일반적으로 4개의 계열로 나뉜다: (1) 산성, 즉 아스파르테이트, 글루타메이트; (2) 염기성, 즉 리신, 아르기닌, 히스티딘; (3) 비극성, 즉 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌, 트립토판; 및 (4) 하전되지 않은 극성, 즉 글라이신, 아스파라긴, 글루타민, 시스테인, 세린, 트레오닌, 티로신. 페닐알라닌, 트립토판 및 티로신은 때때로 함께 방향족 아미노산으로 분류된다. 일반적으로 이러한 계열 내에서 단일 아미노산의 치환은 생물학적 활성에 큰 영향을 미치지 않는다. 단백질은 기재된 단백질 서열에 비해 하나 이상(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 등)의 단일 아미노산 결실을 가질 수 있다. 단백질은 또한 기재된 단백질 서열과 비교하여 하나 이상(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 등) 삽입(예를 들어, 각각 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산)을 포함할 수 있다.
[0071] 일부 구현예에서, "영양 세린 프로테아제 억제제"는 성숙한 분비 형태, 또는 영양 세린 프로테아제 억제제의 연속적인 아미노산 서열을 포함하는 이의 실질적으로 동일한 변이체 펩타이드, 기능적 동족체, 또는 이의 활성 펩타이드 단편일 수 있다. 영양 세린 프로테아제 억제제는 트립신, 키모트립신 및 엘라스타제 효소 중 하나 이상을 억제할 수 있다. 영양 세린 프로테아제 억제제는 식용 영양원으로부터 유래될 수 있고 세린 프로테아제 억제제 활성을 나타낼 수 있다. 하나의 예에서, 세린 프로테아제 억제제는 대두 생성물이다. 일부 구현예에서, 영양 세린 프로테아제 억제제는 영양 트립신 억제제이다. 영양 트립신 억제제는 효소 활성 콩 생성물일 수 있다. 영양 트립신 억제제는 트립신 억제제 활성을 나타낼 수 있는 오보뮤코이드일 수 있다.
[0072] "단편"이라는 용어는 관심 대상의 아미노산 서열과 비교하여 본원에서 직접 유래되거나, 동일하게 합성되거나, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 97% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖도록 합성된 임의의 비-전장 스트링의 아미노산 잔기를 정의하기 위해 사용된다. 일부 비제한적인 구현예에서, 단편은 트립신 억제제 활성을 나타낼 수 있다. 펩타이드 단편은 최대 52개의 연속 아미노산 잔기, 최대 50개의 연속 아미노산 잔기, 최대 40개의 연속 아미노산 잔기, 최대 30개의 연속 아미노산 잔기, 15 내지 30개의 연속 아미노산 잔기 또는 관심 단백질 또는 펩타이드의 18 내지 25개의 연속 아미노산 잔기를 포함할 수 있다.
[0073] "기능적 동족체"는 아미노산 잔기에 1개 이상, 2개 이상, 3개 이상, 4개 이상 또는 5개 이상의 돌연변이가 있는 관심 대상의 단백질의 전장 아미노산 서열 또는 단편을 포함하는 것으로 정의될 수 있다. 기능적 동족체는 모 단백질 또는 펩타이드 활성의 적어도 50%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99% 이상을 유지할 수 있고, 이에 제한되지 않지만 1개 이상, 2개 이상, 3개 이상, 4개 이상 또는 5개 이상의 돌연변이가 있는, 재조합 버전의 전장의 단편화된 단백질일 수 있다.
[0074] 임의의 특정 이론에 얽매이지 않고, 본원에 제공된 구현예에 의해 예시된 조성물은 다양한 펩티다제에 의한 분해와 관련하여 초유의 증가된 안정성을 제공하는 것으로 밝혀졌다. 궤양성 대장염 또는 크론 질환의 치료를 위한 이들 초유 조성물은 초유 조성물의 생체이용률에 의해 방해받을 수 있다. 관장 치료요법이나 경구 투여와 같은 통상적인 접근법은 췌장 프로테아제에 의한 펩신 분해를 포함한 다양한 요인으로 인해 성공하지 못하였다. 초유를 다양한 영양학적 세린 프로테아제 억제제 및 안정화제와 조합함으로써 초유의 펩신 분해에 대한 내성이 달성되었다. 특정 조성물이 개별 성분을 기준으로 한 이론적인 억제제 활성을 능가하는 트립신 억제제 활성을 나타내기 때문에 내성의 양은 놀랍게도 상승작용적이었다. 이는 궤양성 대장염의 마우스 모델을 보호하는 초유 함유 조성물로 마우스를 경구 치료할 수 있게 하였다.
조성물
[0075] 본원에 기재된 구현예는 안정화된 초유에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 조성물은 회복 촉진 인자; 영양 세린 프로테아제 억제제; 및 선택적으로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함한다. 일부 구현예에서, 회복 촉진 인자; 영양 트립신 억제제 및 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물이 제공된다. 일부 구현예에서, 회복 촉진 인자, 영양학적 트립신 억제제, 안정화제, 및 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물이 제공된다. 일부 구현예에서, 정제된 락토페린, 안정화제 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물이 제공된다.
[0076] 특정 구현예에서, 조성물은 추가로 안정화제를 포함한다. 일부 구현예에서, 안정화제는 카세인, 카세이네이트 염, 폴리덱스트로스, 트레할로스, 외인성 초유 지방, 스테아린, 알기네이트, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스, 알기네이트 + 옥수수 전분, 알기네이트 + 아크릴 중합체, 또는 이의 조합물이다. 일부 구현예에서, 안정화제는 매트릭스 안정화제, 지질 안정화제, 폴리사카라이드 안정화제, 디사카라이드 안정화제, 슈가 알코올 안정화제, 또는 단백질 안정화제일 수 있다. 안정화제는 마이크로캡슐화 제제, 내산성 코팅 물질 및/또는 장용피 물질일 수 있다.
[0077] 일부 구현예에서, 회복 촉진 인자는 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 난 생성물, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 기능식품적으로 허용되는 염 또는 이들의 조합물이다. 일부 구현예에서, 초유는 소 초유이다. 일부 구현예에서, 소 초유는 탈지 소 초유, 부분 탈지된 소 초유, 전체 소 초유, 또는 이들의 조합물이다.
[0078] 일부 구현예에서, 회복 촉진 인자는 천연 조합 기능식품, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염일 수 있다. 천연 조합 기능식품은 초유, 난 생성물 또는 이들의 조합물일 수 있다.
[0079] 일부 구현예에서, 초유는 소 초유일 수 있다. 소 초유는 탈지 소 초유, 부분 탈지된 소 초유, 전체 소 초유, 또는 이들의 조합물일 수 있다.
[0080] 일부 구현예에서, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질은 상피 성장 인자(EGF), 형질전환 성장 인자 α(TGF-α), 형질전환 성장 인자 β(TGF-β), 인슐린 유사 성장 인자 I(IGF-I) 및 인슐린 유사 성장 인자 II(IGF-II), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 우유 지방구(milk fat globule)-상피 성장 인자 8(MFG-E8) 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 재조합 또는 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질일 수 있다.
[0081] 일부 구현예에서, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염의 치료학적 유효량은 1일 대상체의 체중 kg 당 0.001 mg 내지 약 10 mg, 약 0.005 mg 내지 약 5 mg, 약 0.01 mg 내지 약 1 mg, 또는 약 20 μg 내지 약 200 μg일 수 있다.
[0082] 일부 구현예에서, 본원에 기재된 조성물 중 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염, 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염의 치료학적 유효량은 1일당 약 0.01 mg 내지 약 500 mg, 약 0.05 mg 내지 약 80 mg, 약 0.1 내지 약 50 mg, 약 0.5 내지 약 10 mg, 또는 약 1 mg 내지 약 5 mg일 수 있다.
[0083] 일부 구현예에서, 영양 세린 프로테아제 억제제는 영양 트립신 억제제이고, 여기서 영양 트립신 억제제는 효소 활성 콩 생성물, 오보뮤코이드, 대두 트립신 억제제, 또는 이들의 조합물이다. 일부 구현예에서, 효소 활성 콩 생성물은 생 콩가루, 생 콩밀, 생 콩 생성물, 최소 가공 대두 생성물, 또는 이들의 조합물이다. 일부 구현예에서, 효소 활성 콩 생성물은 효소 콩가루이다. 일부 구현예에서, 영양 트립신 억제제는 비둘기콩, 병아리콩, 렌즈콩, 나방콩, 녹두, 리마콩, 블랙 그램, 건조 콩, 완두콩, 동부콩, 테파리콩 또는 파바/잠두콩으로부터의 효소 활성 식물 생성물을 포함할 수 있고, 단, 영양 트립신 억제제의 트립신 억제제 활성(TIA)이 샘플 mg당 적어도 약 10 트립신 유닛 억제(TUI)(예를 들어, 적어도 약 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 30, 40 이상 TUI/mg)되고/되거나; iii) 이의 전문이 본원에 참조로 인용되는 미국석유화학협회(AOCS) 표준 절차 Ba 106-09에 따라 시험되는 경우 40 초과(예를 들어, 약 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70 DPI 초과 이상의 PDI)의 단백질 분산성 지수(PDI) 값이다. 일부 구현예에서, 조성물은 약 40wt% 내지 약 90wt%(예를 들어, 약 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90wt% 이상 또는 약 40wt% 내지 90wt% 사이의 임의 범위)의 초유; 약 5wt% 내지 약 25wt% 효소 활성 콩 생성물(예를 들어, 약 5, 10, 15, 20, 25wt% 이상 또는 약 5wt% 내지 25wt% 사이의 임의 범위); 및 약 5 wt% 내지 약 40 wt%(예를 들어, 약 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40 wt% 이상 또는 약 5 wt% 내지 40 wt% 사이의 임의의 범위)의 안정화제를 포함한다. 특정 구체적인 구현예에서, 조성물은 약 40 wt% 내지 약 95 wt%의 초유; 약 0 wt% 내지 약 25 wt%의 효소 활성 콩 생성물; 및 약 5 wt% 내지 약 50 wt%의 하나 이상의 조합된 안정화제를 포함할 수 있다.
[0084] 일부 구현예에서, 효소 활성 콩 생성물은 다음을 나타낼 수 있다: i) 국제 표준화 기구(ISO 14902:2001, 전체 내용이 여기에 참조로 인용됨)의 방법에 따라 시험되는 경우 g 샘플당 적어도 10mg (예를 들어, 약 적어도 10, 15, 20mg/g 이상)의 트립신 억제제 활성(TIA); ii) 적어도 10 트립신 유닛 억제(TUI)/mg 샘플(예를 들어, 약 적어도 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30 이상의 TUI/mg)의 트립신 억제제 활성(TIA); 및/또는 iii) 이의 전문이 본원에 참조로 인용된 미국석유화학협회(AOCS) 표준 절차 Ba 10b-09에 따라 시험하는 경우 40을 초과하는 단백질 분산성 지수(PDI) 값(예를 들어, 약 40, 45, 50, 55, 60, 65 이상).
[0085] 일부 구현예에서, 조성물은 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 또는 초유 유장 농축물 및 유장 단백질 농축물의 혼합물 대 효소 활성 콩 생성물의 약 1:1 내지 약 20:1 및 임의로 약 5:1 내지 약 15:1의 중량비를 포함한다.
[0086] 특정 구현예에서, 조성물은 회복 촉진 인자; 영양 세린 프로테아제 억제제; 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 약 40wt% 내지 약 95wt%(예를 들어, 약 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 95wt% 이상 또는 약 40wt% 내지 95wt% 사이의 임의의 범위)의 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 또는 초유 유장 농축물과 농축 유청 단백질의 혼합물; 및 약 5wt% 내지 약 25wt%(예를 들어, 약 5, 10, 15, 20, 25wt% 이상 또는 약 5wt% 내지 25wt% 사이의 임의의 범위)의 효소 활성 콩 생성물을 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 약 5wt% 내지 약 40wt%(예를 들어, 약 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40wt% 이상 또는 약 5wt% 내지 40wt% 사이의 임의 범위)의 안정화제를 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 콩 렉틴, 중간-쇄 트리글리세리드, 유장 단백질 농축물, 무지방 분유, 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 최대 약 2 wt%(예를 들어, 약 0.01, 0.1, 1.0, 1.5, 2.0 wt%)의 콩 렉시틴, 최대 약 2 wt%(예를 들어, 약 0.01, 0.1, 1.0, 1.5, 2.0 wt%)의 중간-쇄 트리글리세리드, 최대 약 2 wt% (예를 들어, 약 0.01, 0.1, 1.0, 1.5, 2.0 wt%)의 방향제, 최대 약 2 wt%(예를 들어, 약 10, 20, 30, 40, 50 wt%) 유장 단백질 농축물, 최대 약 10 wt%(예를 들어, 약 1, 2, 5, 7, 10 wt%) 무지방 분유, 최대 약 10 wt%(예를 들어, 약 1, 2, 5, 7, 10 wt%) 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 포함한다. 일부 구현예에서, 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율은 약 1:20 내지 약 20:1이다. 일부 구현예에서, 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율은 약 60:40이다.
[0087] 일부 구현예에서, 조성물은 조성물의 약 50 wt% 내지 약 80 wt%(예를 들어, 약 50, 60, 70, 80 wt%)의 총 단백질 함량을 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 조성물의 약 15wt% 내지 약 60 wt%(예를 들어, 약 15, 20, 30, 40, 50, 60 wt%)의 양으로 면역글로불린 G를 포함한다.
[0088] 본원에 기재된 구현예는 안정화된 초유에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 조성물은 회복 촉진 인자, 안정화제, 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함한다.
[0089] 특정 구현예에서, 회복 촉진 인자는 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 난 생성물, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 또는 기능식품적으로 허용되는 염 또는 이들의 조합물이다. 일부 구현예에서, 초유는 소 초유이다.
[0090] 일부 구현예에서, 소 초유는 탈지 소 초유, 후기 소 초유, 부분 탈지된 소 초유, 소 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 전체 소 초유, 또는 이들의 조합물이다.
[0091] 일부 구현예에서, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질은 상피 성장 인자(EGF), 형질전환 성장 인자 α(TGF-α), 형질전환 성장 인자 β(TGF-β), 인슐린 유사 성장 인자 I(IGF-I) 및 인슐린 유사 성장 인자 II(IGF-II), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 우유 지방구-상피 성장 인자 8(MFG-E8) 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 재조합 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질이다.
[0092] 일부 구현예에서, 안정화제는 카세인, 카세이네이트 염, 폴리덱스트로스, 트레할로스, 외인성 초유 지방, 스테아린, 알기네이트, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스, 알기네이트 + 옥수수 전분, 알기네이트 + 아크릴 중합체이다. 일부 구현예에서, 안정화제는 칼슘 카세이네이트, 나트륨 칼세이네이트, 및 초유로부터의 단리된 카세네이트이다. 일부 구현예에서, 조성물은 약 2 wt% 내지 약 75 wt% (예를 들어, 약 2, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 75 wt%)의 칼슘 카세네이트를 포함한다.
[0093] 일부 구현예에서, 조성물은 약 40 wt% 내지 약 98 wt%(예를 들어, 약 40, 50, 60, 70, 80, 90, 98 wt%)의 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 또는 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물을 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 추가로 약 25 wt% 내지 약 40 wt% (예를 들어, 약 25, 30, 35, 40 wt%)의 안정화제를 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 추가로 콩 렉틴, 중간-쇄 트리글리세리드, 유장 단백질 농축물, 무지방 분유, 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 최대 약 2 wt%(예를 들어, 약 0.01, 0.1, 1.0, 1.5, 2.0 wt%)의 콩 렉시틴, 최대 약 2 wt%(예를 들어, 약 0.01, 0.1, 1.0, 1.5, 2.0 wt%)의 중간-쇄 트리글리세리드, 최대 약 2 wt% (예를 들어, 약 0.01, 0.1, 1.0, 1.5, 2.0 wt%)의 방향제, 최대 약 2 wt%(예를 들어, 약 10, 20, 30, 40, 50 wt%) 유장 단백질 농축물, 최대 약 10 wt%(예를 들어, 약 1, 2, 5, 7, 10 wt%) 무지방 분유, 최대 약 10 wt%(예를 들어, 약 1, 2, 5, 7, 10 wt%) 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 포함한다. 일부 구현예에서, 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율은 약 1:20 내지 약 20:1이다. 일부 구현예에서, 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율은 약 60:40이다.
[0094] 일부 구현예에서, 조성물은 조성물의 약 50 wt% 내지 약 80 wt%(예를 들어, 약 50, 60, 70, 80 wt%)의 총 단백질 함량을 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 조성물의 약 15wt% 내지 약 60 wt%(예를 들어, 약 15, 20, 30, 40, 50, 60 wt%)의 양으로 면역글로불린 G를 포함한다.
[0095] 본원에 기재된 구현예는 투여 형태에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 투여 형태는 추가로 회복 촉진 인자; 영양 프로테아제 억제제; 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함한다. 일부 구현예에서, 투여 형태는 추가로 회복 촉진 인자, 안정화제, 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물을 포함한다.
[0096] 특정 구현예에서, 투여 형태는 분말, 과립, 정제, 경구 붕해 정제, 캡슐, 내산성 캡슐, 트로키제, 로젠지제, 영양 바, 소프트 츄, 하이드로겔, 젤리, 요구르트, 현탁액 또는 즉석 음료이다. 일부 구현예에서, 투여 형태는 내산성 캡슐이다.
[0097] 일부 구현예에서, 본원 개시내용의 임의의 구현예에 따른 조성물을 포함하는 식이 보충물이 제공된다. 식이 보충물은 대상체에서 정상적인 건강한 생리학을 지원하는 데 유용할 수 있다. 정상적인 건강한 생리학은 위장 생리학, 면역 생리학, 근골격 생리학 및 호흡기 생리학일 수 있다.
[0098] 영양 세린 프로테아제 억제제는 서열번호 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 또는 25, 또는 트립신 억제제 활성을 나타내는 능력을 갖는 활성 펩타이드 단편 또는 이의 기능적 동족체 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
[0099] 활성 펩타이드 단편 또는 기능적 동족체는 관심 대상의 영양 트립신 억제제와 적어도 일부 서열 동일성을 나타내고 트립신 억제제 활성을 나타내는 능력을 갖는 단백질 또는 펩타이드일 수 있다. 특정 구현예에서, 본 발명의 활성 단백질 또는 펩타이드 단편은 관심 대상의 트립신 억제제 펩타이드 또는 이의 기능적 동족체의 최대 150개 아미노산 잔기, 최대 100개 아미노산 잔기, 최대 50개 아미노산 잔기, 최대 40개 아미노산 잔기, 최대 30개 아미노산 잔기, 예를 들어 15 내지 150개의 연속 아미노산 잔기, 또는 50 내지 100개의 아미노산 잔기로 이루어지고; 상기 기능적 동족체는 최대 3개의 아미노산 치환, 예를 들어 2개의 아미노산 치환 또는 1개의 아미노산 치환을 갖는다.
[00100] 소 초유는 세포 성장, 분화 및 기능에 영향을 미치는 다양한 회복 촉진 인자 또는 성장 인자를 포함하고, 상피 성장 인자(EGF), 형질전환 성장 인자α(TGF-α), 형질 전환 성장 인자 β(TGF-β), 인슐린 유사 성장 인자 I(IGF-I), 인슐린 유사 성장 인자 II(IGF-II), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF) 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는 광범위한 분자량을 포함한다. 20개 이상의 상이한 펩타이드 성장 인자가 BC에 기재되었다. 회복 촉진 인자는 BC 자체, 또는 그로부터 유래된 단리된 또는 재조합 성장 인자일 수 있다. 개별적으로 활성이지만, 초유의 다양한 인자들 간의 상승작용 활성이 입증되어 이들 기능은 상호 연관되어 있다. 예를 들어, 소 락토페린을 EGF와 함께 동시 투여하면 래트 장 상피 세포주 IEC-18의 성장을 자극하는 상승작용 활성을 초래할 수 있다.
[00101] 인슐린 유사 성장 인자(IGF, 소마토메딘)은 IGF-I 및 IGF-II가 포함되어 세포 증식 및 분화를 촉진하며 소와 사람 IGF 사이에는 100% 서열 상동성이 있다. 이들은 프로인슐린과 구조가 유사하고, IGF는 고농도에서 인슐린과 유사한 효과를 발휘할 수 있다. BC는 사람 초유보다 훨씬 보다 높은 농도의 IGF-I가 포함되어 있고(18mg L-1과 비교하여 500mg L-1) 성숙한 소 우유에서는 농도가 보다 낮다(10mg L-1). 이들 성장 인자는 열과 산성 조건 둘다에 상대적으로 안정적이므로 상업용 우유 가공 및 위산의 가혹한 조건 둘다에서도 살아남아 생물학적 활성을 유지한다. IGF-I는 단백질 부착을 촉진할 수 있고, 즉, 이는 동화작용제이고, 적어도 부분적으로 성장 호르몬의 성장 촉진 활동을 중재하는 역할을 한다. BC에서 고농도의 IGF는 이들이 국소 장 동화작용 회복 효과를 중재하는 데 중요할 수 있음을 시사한다.
[00102] 상피 성장 인자 수용체 리간드 계열은 EGF 수용체(c-erb1 수용체라고도 함)에 결합하는 공통 성질을 갖는 폴리펩타이드 그룹을 포함하고, EGF 자체, TGF-α, 유선(mammary) 유래 성장 인자 II(MDGF-II), 베타셀룰린 및 사람 우유 성장 인자 III(HMGF-III)를 포함한다. 이들 결합 특징을 갖지만 초유에 유의적인 농도로 존재하지 않는 다른 관련 폴리펩타이드로는 암피레귤린과 헤파린 결합 EGF가 있다.
[00103] 상피 성장 인자(EGF)는 침샘과 십이지장의 브루너샘에서 생성되는 53개의 아미노산 펩타이드이다. EGF는 사람 초유(200 mg L-1) 및 우유 (30-50mg L-1)에 존재하고, 많은 다른 종에 존재한다. 우유 기반 EGF는 전형적인 위 단백질용해 조건에서 비활성화되지 않는 반면, 성인 위액은 EGF1-49 형태로 절단되어 EGF의 생활성을 크게 감소시킨다. EGF가 소장에 진입하면 단식 상태에서 단백질용해가 잘 되지만 카세인과 트립신 억제제를 포함하는 섭취된 식품 단백질이 존재하는 경우 보존된다.
[00104] 형질전환 성장 인자 α(TGF-α)는 EGF보다 훨씬 낮은 농도(2.2~7.2 mg L-1)로 사람 초유와 우유에 존재하는 50개 아미노산 분자이다. EGF와 달리 TGF-α는 위장관 전체의 점막 내에서 생성된다. TGF-α의 전신 투여는 위장 성장 및 복구를 자극하고, 산 분비를 억제하며, 손상 후 점막 복원을 자극하고 위 뮤신을 증가시킨다. 소장과 결장 내에서 TGF-α 발현은 주로 상부(비증식성) 영역에서 발생하는데, 이는 TGF-α의 생리학적 역할이 세포 증식보다는 분화와 세포 이동에 영향을 미치는 것일 수 있음을 시사한다.
[00105] 형질전환 성장 인자 β 계열 분자는 구조적으로 TGF-α와 구별되고, 대부분의 시스템에서 증식을 자극하기보다는 억제한다. TGF-β에는 적어도 35가지의 서로 다른 이소형이 있고 이들의 주요 발현 부위는 정상 위장관의 표면 구역에 있다. TGF-β는 다양한 기능을 갖고 있고, 호중구에 대한 화학유인물질이며 상처 부위에서 상피 세포 이동을 자극한다. 따라서 상처 가장자리에서 살아남은 세포가 벗겨진 영역 위로 이동하여 상피 연속성을 다시 확립하는 복구 과정의 초기 단계를 자극하는 것이 중요할 수 있다. TGF-β 및 TGF-β 유사 분자는 소 우유(1~2mg L-1)와 초유(20~40mg L-1) 둘다에 고농도로 존재하고, 이들 농도는 래트에서 인도메타신으로 인한 위 손상을 예방하는데 충분하다.
[00106] 혈소판 유래 성장 인자(PDGF)는 원래 혈소판에서 확인되었지만 대식세포에서도 생산되고 분비된다. PDGF는 산에 안정하고 2개의 디설파이드 연결된 폴리펩타이드, 즉 쇄 A(14kDa)와 쇄 B(17kDa)로 이루어진다. 이량체는 티로신 키나제 유형 수용체에 결합하는 3개의 이소형(AA, AB 및 BB)으로 존재한다. PDGF는 섬유아세포와 동맥 평활근 세포에 대한 강력한 미토겐이다. 외인성 PDGF의 경구 투여는 동물 모델에서 궤양 치유를 증진시키는 것으로 나타났다. PDGF는 사람 우유와 소 우유, 초유에 존재하지만, 소 우유의 PDGF 유사 분열 활성의 대부분은 PDGF와 서열 상동성을 공유하는 소 초유 성장 인자로부터 유래한다.
[00107] 혈관 내피 성장 인자(VEGF)는 PDGF와 관련된 강력한 혈관 신생, 유사분열 촉진 및 혈관 투과성 증진 인자를 갖는 동종이량체 34-42 kD 헤파린 결합 당단백질이다. VEGF는 수유 첫 주 동안 사람의 모유에 약 75 mg L-1로 존재하고 출생 후 두 번째 주에는 약 25 mg L-1로 감소한다. 혈관 신생 활성으로 인해 BC의 VEGF 함량은 펩신 궤양과 같은 병태에서 국소 혈관 공급을 증진시키는 데 가치가 있을 수 있다.
[00108] 우유 지방구-상피 성장 인자 8(MFG-E8)은 척추동물에서 발견되는 분비 단백질이다. 이는 처음에 우유 지방구의 중요한 성분으로 발견되었고 BC에 고농도로 존재하며 젖먹이 신생아의 면역 및 회복 반응에 영향을 미칠 수 있다. MFG-E8은 조직에서 손상된 세포와 세포사멸 세포의 식세포 제거, VEGF 매개 혈관신생 유도, 장 상피 항상성 유지 및 점막 치유 촉진에 기여한다.
[00109] 섭취 후 초유의 회복 촉진 성장 인자는 펩신, 트립신 및 키모트립신을 포함한 소화 효소에 의해 비활성화되고 분해된다. 트립신은 아르기닌 및 리신 잔기의 C 말단 측면에 있는 아미드, 펩타이드 및 단백질을 특이적으로 가수분해하는 세린 프로테아제 소화 효소이다. 트립신 억제제는 대두 트립신 억제제 및 오보뮤코이드를 포함한다.
[00110] 영양 프로테아제 억제제는 식품으로부터 유래된 영양 트립신 억제제일 수 있다. 영양 프로테아제 억제제는 Kazal 유형 세린 프로테아제 억제제 도메인 또는 Kunitz 유형 세린 프로테아제 억제제 도메인을 포함할 수 있다. 영양학적 트립신 억제제는 트립신 억제제 활성을 갖는 대두 트립신 억제제(SBTI), 트립신 억제제 활성을 갖는 콩 생성물, 또는 트립신 억제제 활성을 갖는 오보뮤코이드일 수 있다. 영양 프로테아제 억제제는 카세인일 수 있다. 상기 카세인은 소, 양, 염소, 물소 또는 기타 포유류로부터 수득될 수 있다. 카세인은 칼슘 카세네이트, 나트륨 카세네이트 또는 콜로이드성 카세인 마이셀의 형태일 수 있다.
[00111] 영양학적 프로테아제 억제제는 트립신 억제제 활성을 포함하는 임의의 적절한 식품일 수 있거나, 농축, 단리, 정제, 상업적으로 구입하거나 당업계에 공지된 임의의 적절한 재조합 기술 또는 합성 기술에 의해 제조된 단백질 또는 펩타이드일 수 있거나 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 단백질 또는 펩타이드일 수 있다.
[00112] 영양 트립신 억제제는 임의의 적절한 식이성 트립신 억제제일 수 있다. 트립신 억제제는 세린 프로테아제 억제제 유형이다. 트립신은 소화 과정에서 단백질 분해에 관여하는 효소이다. 트립신 억제제 활성(TIA) 수준은 대두에서 특히 높지만 동부콩, 핀토콩, 비둘기콩, 강낭콩, 나방콩, 네이비콩뿐만 아니라 병아리콩 및 녹두와 같은 다양한 콩과 식물에서도 발견된다. 특정 다른 식품은 낮은 수준의 트립신 억제제 활성을 나타낼 수 있다. 트립신 억제제 활성(TIA)은 가공, 특히 열 또는 기타 단백질 변성 과정을 포함하는 가공에 의해 파괴될 수 있다. 통상적으로 트립신 억제제는 항영양 인자인 것으로 간주된다. 따라서 대두 생성물은 영양가를 극대화하기 위해 열처리가 필요하다. 대조적으로, 본원 개시내용은 적어도 최소 수준의 트립신 억제제 활성을 나타낼 수 있는 영양 세린 프로테아제 억제제를 제공한다. 예를 들어, 영양 세린 프로테아제 억제제는 위장관, 예를 들어 하부 소장의 초유 내 회복 촉진 인자 및 면역 인자의 활성을 안정화하거나 연장하는 데 유용하다.
효소 활성 대두 생성물
[00113] 영양 트립신 억제제는 트립신 억제 검정에서 적어도 10 mg/g 샘플 트립신 억제제 활성(TIA)(예를 들어, 적어도 약 10, 15, 20, 30, 35, 40 mg/g TIA 이상)을 포함하는 효소 활성 대두 생성물일 수 있다. 일부 구현예에서, 영양 트립신 억제제는 트립신 억제 검정에서 적어도 20 mg/g 샘플 트립신 억제제 활성(TIA)(예를 들어, 적어도 약 20, 30, 35, 40, 50, 60 mg/g TIA 이상)을 포함하는 효소 활성 대두 생성물일 수 있다.
[00114] 글리신(대두, 콩)은 콩과 파바세아(Fabaceae)에 속하는 속이다. 재배 대두는 글리신 맥스(max)이다. 2가지 주요 유형의 트립신 억제제가 콩에서 발견된다. 쿠니츠 트립신 억제제 (KTI) 및 보우맨-버크 억제제(Bowman-Birk inhibitor)　(BBI). KTI는 대형(~20,100 달톤)의 트립신에 대한 강력한 억제제이고 키모트립신과 약하게 결합하는 반면, BBI는 훨씬 더 작고(~8,000 달톤) 트립신과 키모트립신을 모두 억제한다. 많은 콩 생성물은 콩가루를 포함한 2가지 유형의 억제제가 모두 포함되어 있지만 일부 콩 식품에는 훨씬 적은 양이 포함되어 있다. 억제제 둘다는 통상적으로 체내에서 항영양 효과가 있는 것으로 간주되어 단백질 가수분해와 장내 다른 효소의 활성화를 방해하여 소화에 영향을 미친다. 콩에서는 KTI가 BBI보다 훨씬 더 높은 농도로 발견된다. 또한 대두 쿠니츠(Kunitz) 또는 보우만 버크(Bowman-Birk) 트립신 억제제의 래트 소장에서의 생존을 연구한 결과 보우만 버크 억제제는 소량(4.8%)만 생존했지만 대부분의 쿠니츠 억제제(76%)는 면역화학적으로 온전한 상태로 남아있다. 전체 대두는 17-27mg/그램의 트립신 억제제 활성(TIA) 샘플; 생 콩가루 28-32 mg/g의 TIA 샘플; 구운 콩가루 8-9 mg/g TIA 샘플; 단리된 1-30 mg/g TIA 샘플을 함유한다. 트립신 억제제는 열이나 화학적 변성에 의해 비활성화될 수 있다.
[00115] 대두 트립신 억제제(SBTI, 쿠니츠 트립신 억제제, KTI)는 세르핀-세린 프로테아제 억제제 계열에 속하며 대두에서 발견되는 여러 프로테아제 억제제 중 하나이다. 트립신은 1:1의 몰비로 억제되는 반면, 키모트립신과 플라스민은 이보다 적은 정도로 억제된다. SBTI는 또한 기타 세린 프로테아제를 억제한다. SBTI는 예를 들어 제조사(캘리포니아주 로슈(Roche), Gibco® 대두 트립신 억제제, ThermoFisher Scientific 또는 Sigma-Aldrich)로부터 시판된다.
[00116] 콩 생성물은 임의의 적합한 효소 활성 콩 생성물일 수 있다. 적합한 콩 생성물은 적어도 10 mg/g의 샘플 트립신 억제제 활성(TIA) (예를 들어, 적어도 약 10, 15, 20, 30, 35, 40 mg/g TIA 이상)을 포함한다.
[00117] 일부 구현예에서, 영양 트립신 억제제는 대두 트립신 억제제이다. 일부 구현예에서, 대두 트립신 억제제는 서열번호 1, 2, 3, 4, 20, 21, 22, 23, 24, 또는 25 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하거나 실질적으로 동일한 동족체 또는 이의 활성 단편이다.
[00118] 대두 트립신 억제제(SBTI)는 쿠니츠 대두 트립신 억제제일 수 있다. 대두 트립신 억제제는 승인 번호 1BA7_B를 갖는 아미노산 서열 또는
1 DFVLDNEGNP LENGGTYYIL SDITAFGGIR AAPTGNERCP LTVVQSRNEL DKGIGTIISS
61 PYRIRFIAEG HPLSLKFDSF AVIMLCVGIP TEWSVVEDLP EGPAVKIGEN KDAMDGWFRL
121 ERVSDDEFNN YKLVFCPQQA EDDKCGDIGI SIDHDDGTRR LVVSKNKPLV VQFQKLDKES
181 L
(서열번호 1) (181개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00119] 대두 트립신 억제제(SBTI)는 승인 번호 1BA7_A를 갖는 아미노산 서열 또는
1 DFVLDNEGNP LENGGTYYIL SDITAFGGIR AAPTGNERCP LTVVQSRNEL DKGIGTIISS
61 PYRIRFIAEG HPLSLKFDSF AVIMLCVGIP TEWSVVEDLP EGPAVKIGEN KDAMDGWFRL
121 ERVSDDEFNN YKLVFCPQQA EDDKCGDIGI SIDHDDGTRR LVVSKNKPLV VQFQKLDKES
181 L
(서열번호 2) (181개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00120] 대두 트립신 억제제(SBTI)는 승인 번호 1AVU_A를 갖는 아미노산 서열 또는
1 DFVLDNEGNP LENGGTYYIL SDITAFGGIR AAPTGNERCP LTVVQSRNEL DKGIGTIISS
61 PYRIRFIAEG HPLSLKFDSF AVIMLCVGIP TEWSVVEDLP EGPAVKIGEN KDAMDGWFRL
121 ERVSDDEFNN YKLVFCPQQA EDDKCGDIGI SIDHDDGTRR LVVSKNKPLV VQFQKLDKES
181 L
(서열번호 3) (181개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00121] 대두 트립신 억제제(SBTI)는 승인 번호 TISYC를 갖는 아미노산 서열 또는
1 DFVLDNEGNP LENGGTYYIL SDITAFGGIR AAPTGNERCP LTVVQSRNEL DKGIETIISS
61 PYRIRFIAEG HPLSLKFDSF AVIMLCVGIP TEWSVVEDLP EGPAVKIGEN KDAMDGWFRL
121 ERVSDDEFNN YKLVFCPQQA EDDKCGDIGI SIDHDDGTRR LVVSKNKPLV VQFQKLDKES
181 L
(서열번호 4) (181개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00122] 일부 구현예에서, 영양 세린 프로테아제 억제제는 보우만-버크 유형의 프로테아제 억제제일 수 있다. 보우만-버크 프로테이나제 유형의 억제제는 글리신 맥스로부터 유래될 수 있다. 일부 구현예에서, 보우만-버크 프로테이나제 유형의 억제제는 승인 번호AF106676.1을 갖는 아미노산 서열 또는
1 DDESSKPCCD QCACTKSNPP QCRCSDMRLN SCHSACKSCI CA
(서열번호 20) (42개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00123] 일부 구현예에서, 영양 세린 프로테아제 억제제는 승인 번호AF106675.1를 갖는 아미노산 서열 또는
1 KSCICALSYP AQCFCVDITD FCYEPCKPSE DDKEN
(서열번호 21) (35개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 부분적으로 포함하는 보우만-버크 유형의 프로테이나제 억제제일 수 있다.
[00124] 일부 구현예에서, 영양 세린 프로테아제 억제제는 승인 번호P01055를 갖는 아미노산 서열 또는
1 MVVLKVCLVL LFLVGGTTSA NLRLSKLGLL MKSDHQHSND DESSKPCCDQ CACTKSNPPQ
61 CRCSDMRLNS CHSACKSCIC ALSYPAQCFC VDITDFCYEP CKPSEDDKEN
(서열번호 22) (110개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함하는 보우만-버크 유형의 프로테이나제 억제제일 수 있다.
[00125] 일부 구현예에서, 영양 세린 프로테아제 억제제는 보우만-버크　유형의 프로테이나제　억제제　전구체 [글리신 맥스]일 수 있다. 보우만-버크　유형의 프로테이나제　억제제　전구체는 승인번호 NM_001250058.3을 갖는 아미노산 서열 또는
1 MGLKNNMVVL KVCLVLLFLV GGTTSANLRL SKLGLLMKSD HHQHSNDDES SKPCCDQCAC
61 TKSNPPQCRC SDMRLNSCHS ACKSCICALS YPAQCFCVDI TDFCYEPCKP SEDDKENY
(서열번호 23) (118개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함하는 보우만-버크 유형의 프로테이나제 억제제일 수 있다.
[00126] 일부 구현예에서, 대두 트립신 억제제 (SBTI)는 승인 번호 Ab070269.1를를 갖는 아미노산 서열 또는
1 MKSTIFFLFA LFCAFTTSYL PSAIADFVLD NEGNPLENGG TYYILSDITA FGGIRAAPTG
61 NERCPLTVVQ SRNELDKGIG TIISSPYRIR FIAEGHPLSL KFDSFAVIML CVGIPTEWSV
121 VEDLPEGPAV KIGENKDAMD GWFKLERVSD DEFNNYKLVF CPQQAEDDKC GDIGISIDHD
181 DGTRRLVVSK NKPLVVQFQK LDKESLAKKN HGLSRSE
(서열번호 24) (217개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 갖는 쿠니츠 트립신 억제제[글리신 맥스]일 수 있다.
[00127] 일부 구현예에서, 대두 트립신 억제제 (SBTI)는 승인 번호 Ab308133.1 또는 아미노산 서열
1 MKSTIFFALF LFCAFTTSYL PSAIADFVLD NEGNPLENGG TYYILSDITA FGGIRAAPTG
61 NERCPLTVVQ SRNELDKGIG TIISSPYRIR FIAEGHPLSL KFDSFAVIML CAGIPTEWSV
121 VEDLPEGPAV KIGENKDAMD GWFRLERVSD DEFNNYKLVF CPQQAEDDKC GDIGISIDHD
181 DGTRRLVVSK NKPLVVQFQK LDKESLAKKN HGLSRSE
(서열번호 25) (217개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 갖는 쿠니츠 트립신 억제제[글리신 소자(soja)]일 수 있다.
[00128] 상기 조성물은 약 0g/일 내지 약 10g/일, 약 0.1g/일 내지 약 8g/일, 약 0.5g/일 내지 약 5g/일, 또는 약 1g/일 내지 약 5 g/일, 또는 약 0 wt% 내지 약 10 wt%, 약 0.1 wt% 내지 약 8 wt%, 또는 약 1 wt% 내지 약 5 wt%의 범위로 영양 세린 프로테아제 억제제를 포함할 수 있다.
[00129] 효소 활성 대두 생성물은 대두로부터 유래되고 적어도 약 10 mg/g 생성물 트립신 억제제 활성(TIA)(예를 들어, 적어도 약 10, 15, 20, 30, 35, 40 mg/g TIA 이상)을 포함한다. 효소 활성 대두 생성물은 생 콩가루, 생 콩밀, 생 콩 생성물 또는 최소 가공 대두 생성물일 수 있다. 대두 생성물은 #100 스크린을 통과하는 콩가루일 수 있다. 대두 생성물은 #16 스크린을 통과하는 콩밀일 수 있다. 일부 구현예에서, 대두 생성물은 생대두 생성물 또는 최소로 가공된 대두 생성물일 수 있다. 일부 구현예에서, 대두 생성물은 측정 가능한 최소 수준의 트립신 억제제 활성을 함유한다. 대두 생성물은 비-탈지방, 전지방 또는 탈지 대두 생성물일 수 있다. 조성물은 약 0 wt% 내지 약 30 wt%, 약 5 wt% 내지 약 30 wt%, 약 0.5 wt% 내지 약 25 wt%, 약 2 wt% 내지 약 20 wt%, 또는 약 5 wt% 내지 약 15 wt%의 효소 활성 콩 생성물을 포함할 수 있다.
[00130] 적합한 대두 생성물은 가공에 따라 다양한 수준의 대두 트립신 억제제(SBTI)를 포함할 수 있다. SBTI와 같은 영양 트립신 억제제는 트립신 억제제 활성(TIA)를 나타낼 수 있고, 이는 적당한 TIA 억제제 검정에 의해 결정될 수 있다.
[00131] 영양 세린 프로테아제 억제제, 영양 트립신 억제제, 대두 생성물, SBTI 또는 오보뮤코이드에서 트립신 억제제 활성(TIA)을 결정하기 위해, 예를 들어 문헌(Liu, K., Soybean Trypsin Assay: Further Improvement of the Standard Method Approved and Reapproved by American Oil Chemists’ Society and American Association of Cereal Chemists International, J Am Chem Soc (2019) 96:635-645)의 방법에 따라 트립신 억제제 검정을 수행할 수 있다. 일부 구현예에서, 영양 트립신 억제제는 본 실시예 3 또는 Liu 2019의 방법에 따라 검정할 때 약 10 TUI/mg 초과, 약 20 TUI/mg 초과, 약 30 TUI/mg 초과, 또는 약 40 TUI/mg 초과의 트립신 억제제 활성을 갖는다.
[00132] 대안적으로, 트립신 억제제 활성(TIA)을 결정하기 위해 ISO 14902:2001. (2012) 국제표준화기구, 표준 14902:2001의 방법에 따라 트립신 억제제 검정을 수행할 수 있다. 동물 사료 - 콩 생성물의 트립신 억제제 활성 결정. 스위스 제네바에서 2001년 10월에 승인되고; 2012년 8월에 재승인되었다. 상기 국제 표준은 콩 생성물의 트립신 억제제 활성(TIA)의 측정 방법을 명시한다. 상기 트립신 억제제 활성은 이들 생성물의 굽기 정도를 나타낸다. 상기 방법의 검출 한계는 약 0.5　mg/g이다. Merck 24579와 같은, 소 췌장으로부터의 고유 트립신이 사용될 수 있다. 간략하게, 트립신 억제제는 pH 9.5에서 샘플로부터 추출된다. 나머지 트립신 활성은 벤조일-L-아르기닌-p-니트로아닐리드 (L-BAPA)를 기질로서 첨가함에 의해 측정된다. 방출된 p-니트로아닐린의 양은 분광법으로 측정된다. 트립신 억제제 활성은 샘플 그램당 트립신이 억제된 밀리그램으로 표시된다. 본원에 정의된 영양 트립신 억제제, 예를 들어 효소 활성 대두 생성물은 샘플 g당 적어도 약 10mg, 또는 샘플 g당 적어도 약 20mg의 트립신 억제제 활성(TIA)을 나타낼 수 있다.
[00133] 단백질 분산성 지수(PDI)는 예를 들어 시험 조건 하에서 대두 생성물의 분산성 단백질을 결정하는 데 사용될 수 있다. PDI 시험은 미국 석유화학협회 (AOCS) 표준 절차 Ba 10b-09의 방법에 따라 수행될 수 있다. 일부 구현예에서, 콩 생성물은 AOCS 표준 절차 Ba 10b-09에 따라 시험되는 경우 약 40 초과, 약 50 초과, 약 60 초과 또는 약 70 초과의 PDI를 갖는다.
오보뮤코이드
[00134] 영양 트립신 억제제는 오보뮤코이드일 수 있다. 오보뮤코이드는 당화된 단백질 및 세린 프로테아제 억제제로 암탉의 난 흰자 단백질의 약 11%를 차지한다. 오보뮤코이드는 또한 게란 흰자 트립신 억제제로서 공지되어 있다. 오보뮤코이드는 크기가 약 28 kD이고, 트립신 및 키모트립신을 억제할 수 있다. 오보뮤코이드 또는 트립신 억제제는 대부분의 조류 난 흰자에서 풍부하다. 암탉의 난 단백질은 186개 아미노산 잔기로 구성되고 고도로 당화되어 있다. 이는 면역원성이 매우 높고 많은 난 알레르기를 일으키는 것으로 공지되어 있다. 오보뮤코이드는 트립신, 키모트립신, 엘라스타제와 같은 소화 효소를 억제한다.
[00135] 오보뮤코이드는 트립신 억제제 활성을 포함하는 임의의 적절한 오보뮤코이드일 수 있다. 오보뮤코이드는 단리된 오보뮤코이드 또는 재조합 오보뮤코이드일 수 있다. 재조합 오보뮤코이드는 예를 들어 세균, 진균류, 조류 생물생산으로부터 제공될 수 있다. 예를 들어, 오보뮤코이드는 닭 오보뮤코이드, 칠면조 오보뮤코이드, 뿔닭 오보뮤코이드, 또는 오리 오보뮤코이드일 수 있다. 오보뮤코이드는 트립신 억제제 활성을 포함한다. 오보뮤코이드는 단리되고, 부분적으로 정제된 물질로서 조류 난 흰자로부터 유래할 수 있고 상업적으로 구입할 수 있다. 예를 들어, 닭 오보뮤코이드는 닭 난 흰자로부터 유래되거나 정제될 수 있거나 제조사(Cusabio® technology LLC 또는 Sigma-Aldrich)와 같은 상업용 공급업체로부터 구입할 수 있다. 일부 구현예에서, 오보뮤코이드는 서열번호 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 또는 19 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하거나 실질적으로 동일한 동족체 또는 이의 활성 단편이고 트립신 억제제 활성을 나타낼 수 있다.
[00136] 닭 오보뮤코이드 (OMCHI)는 또한 알레르겐 Gal d 1로서 공지되어 있고 닭 난 흰자에서 우성 알레르겐이다. Gal d 1은 3개의 도메인을 갖는 트립신 억제제인 것으로 공지되어 있고; 그러나 트립신 억제 활성은 주로 두 번째 도메인에 존재한다. Kato et al., Biochemistry, 1987 Jan 13; 26(1):193-201.　doi: 10.1021/bi00375a027. Gal d 1에 대한 과민성은 면역글로불린 E(IgE)에 효율적으로 결합하는 능력 때문에 발생한다. 하나 이상의 시스테인 잔기는 점 돌연변이되어 IgE에 결합하는 능력을 감소시킬 수 있다. 일부 구현예에서, 오보뮤코이드는 C192A 및 C210A로부터 선택된 점 돌연변이를 포함하는 아미노산을 포함한다.
[00137] 닭 오보뮤코이드는 승인 NP_001295423.1를 갖는 오보뮤코이드 이소형 1 전구체[Gallus gallus]의 아미노산 서열 또는
1 MAMAGVFVLF SFVLCGFLPD AAFGAEVDCS RFPNATDKEG KDVLVCNKDL RPICGTDGVT
61 YTNDCLLCAY SIEFGTNISK EHDGECKETV PMNCSSYANT TSEDGKVMVL CNRAFNPVCG
121 TDGVTYDNEC LLCAHKVEQG ASVDKRHDGG CRKELAAVSV DCSEYPKPDC TAEDRPLCGS
181 DNKTYGNKCN FCNAVVESNG TLTLSHFGKC
(서열번호 5) (210개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00138] 닭 오보뮤코이드는 승인NP_001106132.1를 갖는 오보뮤코이드 이소형 2 전구체[Gallus gallus]의 아미노산 서열 또는
1 MAMAGVFVLF SFVLCGFLPD AAFGAEVDCS RFPNATDKEG KDVLVCNKDL RPICGTDGVT
61 YTNDCLLCAY SIEFGTNISK EHDGECKETV PMNCSSYANT TSEDGKVMVL CNRAFNPVCG
121 TDGVTYDNEC LLCAHKVEQG ASVDKRHDGG CRKELAAVDC SEYPKPDCTA EDRPLCGSDN
181 KTYGNKCNFC NAVVESNGTL TLSHFGKC
(서열번호 6) (208개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00139] 닭 오보뮤코이드는 승인ACJ04729.1을 갖는 오보뮤코이드 [Gallus gallus]의 아미노산 서열 또는
1 MAMAGVFVLF SFVLCGFLPD AVFGAEVDCS RFPNATDMEG KDVLVCNKDL RPICGTDGVT
61 YTNDCLLCAY SVEFGTNISK EHDGECKETV PMNCSSYANT TSEDGKVMVL CNRAFNPVCG
121 TDGVTYDNEC LLCAHKVEQG ASVDKRHDGG CRKELAAVSV DCSEYPKPDC TAEDRPLCGS
181 DNKTYGNKCN FCNAVVESNG TLTLSHFGKC
(서열번호 7) (210개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00140] 닭 오보뮤코이드는 승인 0807280A를 갖는 오보뮤코이드의 아미노산 서열 또는
1 AEVDCSRFPN ATDKEGKDVL VCNKDLRPIC GTDGVTYNNE CLLCAYSIEF GTNISKEHDG
61 ECKETVPMNC SSYANTTSED GKVMVLCNRA FNPVCGTDGV TYDNECLLCA HKVEQGASVD
121 KRHDGECRKE LAAVSVDCSE YPKPDCTAED RPLCGSDNKT YGNKCNFCNA VVESNGTLTL
181 SHFGKC
(서열번호 8) (186개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00141] 닭 오보뮤코이드는 승인 XP_015149250.1를 갖는 오보뮤코이드 이소형 X2[Gallus gallus]의 아미노산 서열 또는
1 MAMAGVFVLF SFVLCGFLPD AAFGAEVDCS RFPNATDKEG KDVLVCNKDL RPICGTDGVT
61 YTNDCLLCAY SIEFGTNISK EHDGECKETV PMNCSSYANT TSEDGKVMVL CNRAFNPVCG
121 TDGVTYDNEC LLCAHKVEQG ASVDKRHDGG CRKELAAVDC SEYPKPDCTA EDRPLCGSDN
181 KTYGNKCNFC NAVVESNGTL TLSHFGKC
(서열번호 9) (208개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00142] 닭 오보뮤코이드는 승인 XP_015149249.1를 갖는 오보뮤코이드 이소형 X1[Gallus gallus]의 아미노산 서열 또는
1 MAMAGVFVLF SFVLCGFLPD AAFGAEVDCS RFPNATDKEG KDVLVCNKDL RPICGTDGVT
61 YTNDCLLCAY SIEFGTNISK EHDGECKETV PMNCSSYANT TSEDGKVMVL CNRAFNPVCG
121 TDGVTYDNEC LLCAHKVEQG ASVDKRHDGG CRKELAAVSV DCSEYPKPDC TAEDRPLCGS
181 DNKTYGNKCN FCNAVVESNG TLTLSHFGKC
(서열번호 10) (210개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00143] 일부 구현예에서, 영양 프로테아제 억제제는 임의의 적절한 칠면조 오보뮤코이드일 수 있다. 칠면조 오보뮤코이드는 야생 칠면조, 사육 칠면조(Meleagris gallopavo) 또는 유안 칠면조(Meleagris ocellata)의 난에서 유래될 수 있다.
[00144] 칠면조 오보뮤코이드는 승인 XP_031411566.1를 갖는 오보뮤코이드 [Meleagris gallopavo]의 아미노산 서열 또는
1 MAMAGIFVLF SFALCGFLPD AAFGVEVDCS RFPNTTNEEG KDVLVCTEDL RPICGTDGVT
61 HSECLLCAYN IEYGTNISKE HDGECREAVP MDCSRYPNTT NEEGKVMILC NKALNPVCGT
121 DGVTYDNECV LCAHNLEQGT SVGKKHDGGC RKELAAVSVD CSEYPKPACT LEYRPLCGSD
181 NKTYGNKCNF CNAVVESNGT LTLSHFGKC
(서열번호 11) (209개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00145] 칠면조 오보뮤코이드는 승인 P68390.1을 갖는 오보뮤코이드 [Meleagris gallopavo]의 아미노산 서열 또는
1 VEVDCSRFPN TTNEEGKDVL VCTEDLRPIC GTDGVTHSEC LLCAYNIEYG TNISKEHDGE
61 CREAVPMDCS RYPNTTSEEG KVMILCNKAL NPVCGTDGVT YDNECVLCAH NLEQGTSVGK
121 KHDGECRKEL AAVSVDCSEY PKPACTLEYR PLCGSDNKTY GNKCNFCNAV VESNGTLTLS
181 HFGKC
(서열번호 12) (185개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00146] 조류 오보뮤코이드는 승인 XP_021266564.1을 갖는 오보뮤코이드[Numida meleagris]의 아미노산 서열 또는
1 MAMAGVFVLF SFALCGFLPD AAFGVEVDCS RFPNATNEEG KDVLVCTEDL RPICGTDGVT
61 YSNDCLLCAY NIEYGTNISK EHDGECREAV PVDCSRYPNM TSEEGKVLIL CNKAFNPVCG
121 TDGVTYDNEC LLCAHNVEQG TSVGKKHDGE CRKELAAVDC SEYPKPACTM EYRPLCGSDN
181 KTYDNKCNFC NAVVESNGTL TLSHFGKC
(서열번호 13) (208개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함하는 야생형 색시닭의 오보뮤코이드일 수 있다.
[00147] 조류 오보뮤코이드는 오리 오보뮤코이드일 수 있다. 오리 오보뮤코이드는 승인 EOA95437.1을 갖는 부분적 오보뮤코이드 [Anas platyrhynchos]의 아미노산 서열 또는
1 QVDCSRFPNT TNEEGKEVLL CTKELSPVCG TDGVTYSNEC LLCAYNIEYG TNISKDHDGE
61 CKEAVPADCS MYPNMTNEEG KMTLLCNKMF SPVCGTDGVT YDNECMLCAH NVEQGTSVGK
121 KYDGKCKKEV ATVSVDCSGY PKPACTMEYM PLCGSDNKTY GNKCNFCNAV V
(서열번호 14) (171개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00148] 오리 오보뮤코이드는 승인 XP_005027968.1을 갖는 오보뮤코이드 [Anas platyrhynchos]의 아미노산 서열 또는
1 MRTAGVVVLL ALALCCCPDT VALKGYCSNY VVPRNFCTLE YIPHCGSDGV TYANKCLFCN
61 AFLRSRRTLR LLYLREC
(서열번호 15) (77개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00149] 오리 오보뮤코이드는 승인 P68150.1을 갖는 오보뮤코이드의 아미노산 서열 또는
1 VATVDCSGYP KPACTMEYMP LCGSDNKTYG NKCNFCNAVV DSNGTLTLSH FGEC
[00150] (서열번호 16) (54개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00151] 오리 오보뮤코이드는 승인 P68156.1을 갖는 오보뮤코이드의 아미노산 서열 또는
1 VATVDCSGYP KPACTMEYMP LCGSDNKTYG NKCNFCNAVV DSNGTLTLSH FGEC
[00152] (서열번호 17) (54개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00153] 오리 오보뮤코이드는 승인 XP_038042576.1을 갖는 오보뮤코이드 이소형 X2[Anas platyrhynchos]의 아미노산 서열 또는
1 MVLSVLPPFT QVTLAQGHGA LTCCPRHPET CPELERSTSW RGIKVDCSRF PNTTNEEGKE
61 VLLCTKELSP VCGTDGVTYS NECLLCAYNI EYGTNISKDH DGECKEAVPA DCSMYPNMTN
121 EEGKMTLLCN KMFSPVCGTD GVTYDNECML CAHNVEQGTS VGKKYDGKCK KEVATVDCSG
181 YPKPACTMEY MPLCGSDNKT YGNKCNFCNA VVDSNGTLTL SHFGEC
(서열번호 18) (226개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00154] 오리 오보뮤코이드는 승인 XP_038042575.1을 갖는 오보뮤코이드 이소형 X1[Anas platyrhynchos]의 아미노산 서열 또는
1 MISTSSGQLQ DNISCITSKL PSLVLPPFTQ VTLAQGHGAL TCCPRHPETC PELERSTSWR
61 GIKVDCSRFP NTTNEEGKEV LLCTKELSPV CGTDGVTYSN ECLLCAYNIE YGTNISKDHD
121 GECKEAVPAD CSMYPNMTNE EGKMTLLCNK MFSPVCGTDG VTYDNECMLC AHNVEQGTSV
181 GKKYDGKCKK EVATVDCSGY PKPACTMEYM PLCGSDNKTY GNKCNFCNAV VDSNGTLTLS
241 HFGEC
(서열번호 19) (245개 아미노산), 또는 트립신 억제제 활성을 포함하는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편을 포함할 수 있다.
[00155] 조성물은 오보뮤코이드를 약 0g/일 내지 약 10g/일, 약 0.1g/일 내지 약 8g/일, 약 0.5g/일 내지 약 5g/일, 또는 약 1g/일 내지 약 5g/일(예를 들어, 약 0, 0.1, 0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15g/일), 또는 약 0 wt% 내지 약 10 wt%, 약 0.1 wt% 내지 약 8 wt%, 또는 약 1 wt% 내지 약 5 wt% (예를 들어, 약 0, 0.1, 0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 wt%)의 등가 용량으로 포함할 수 있다.
조성물
[00156] 소 초유에서 발견되는 회복 촉진 인자와 면역 인자의 생물학적 활성은 본원에 나타낸 바와 같이 소화 효소에 민감하다. 이들 인자들은 위 소화에서 살아남고 손상되지 않은 채 소장에 도달하는 경우에만 효과적일 수 있다.
[00157] 일부 구현예에서, 건조 분말 조성물의 전처리를 통해 소 초유에서 발견되는 것과 같은 경구 투여된 회복 촉진 인자 및/또는 면역 인자의 생체이용률을 증진시켜 안정화되고 효과적인 전달 시스템을 생성하는 방법이 제공된다.
[00158] 시판되는 분무 건조된 소 초유 분말은 동시 분무, 캡슐화 및/또는 응집화에 의해 전처리되어 초유 주위에 보호 코팅을 생성시킬 수 있다. 보호 코팅은 지연 방출, 생체 이용률 증가, 내산성 증가, 장용피, 물리적 장벽 또는 초유와 같은 회복 촉진 인자의 소장 방출 증진을 위해 사용될 수 있다. 코팅은 초유 입자를 코팅하거나 둘러싸는 리포좀, 마이셀 또는 마이크로 캡슐화 구조의 형태로 존재할 수 있다. 보호 코팅은 장용피 형태로 존재할 수 있다. 장용피는 소화 과정 초기에 위산과 펩신으로부터 어느 정도 보호를 제공할 수 있고, 이를 통해 회복 촉진 인자와 기타 산에 민감한 성분이 훨씬 보다 높은 비율로 위 소화에서 온전하게 살아남을 수 있게 하여 이들 인자의 활성을 이들의 소장의 표적 부위에서 증진시킬 수 있다.
[00159] 장내 투여를 위해 안정화된 초유 조성물이 제공된다. 초유, 영양 트립신 억제제 및 임의로 안정화제를 포함하는 조성물이 제공된다.
[00160] 초유는 소 초유일 수 있다. 소 초유는 전지방 초유(전초유), 부분 탈지된 초유, 또는 완전 탈지 초유(탈지 초유)일 수 있다. 초유는 분만 후 약 24시간 이내, 약 48시간 이내 또는 몇일 이내에(예를 들어, 분만 후 약 2, 5, 10, 12, 24, 36, 48 또는 72시간) 수득될 수 있다. 초유는 농축되거나 단리될 수 있다. 초유는 분무 건조, 동결 건조, 응집 및/또는 인스턴트화될 수 있다. 상업용 초유는 전체 초유, 부분 탈지된 초유 또는 탈지 초유를 포함할 수 있다. 상업용 전체 초유는 AOAC 932.06 방법에 의해 약 7 wt% 내지 약 30 wt%, 또는 약 17.5 wt% 내지 약 28 wt%(예를 들어, 약 7, 10, 15, 17.5, 20, 22, 25, 28 wt%) 지방을 포함할 수 있다. 상업용 탈지 초유는 AOAC 932.06 방법에 의해 약 0 wt% 내지 약 6 wt%, 또는 약 2 wt% 내지 약 6 wt%(예를 들어, 약 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, wt%) 지방을 포함할 수 있다. 초유는 저온살균, 인스턴트화 및/또는 응집될 수 있다. 상업용 초유는 생활성을 보존하기 위해 낮은 압력과 온도에서 처리될 수 있다. 상업용 초유는 분무 건조될 수 있다. 상업용 초유는 예를 들어, 제조원(APS BioGroup, Inc. Phoenix, AZ or LaBelle Associates, Inc., Bellingham, WA)으로부터 가용하다. 일부 구현예에서, 초유는 전체 초유 및/또는 탈지 초유, 그리고 우유 단백질 농축물, 무지방 분유, 스위트 유장, 유장 단백질 농축물, 중간-쇄 트리글리세리드, 렉시틴 및 이산화규소 중 하나 이상을 함유할 수 있다. 일부 구현예에서, 초유는 약 80 wt% 내지 약 99 wt%(예를 들어, 약 80, 85, 90, 95, 99 wt%)의 전체 초유 또는 탈지 초유, 약 0 wt% 내지 약 20 wt%(예를 들어, 약 0, 2, 5, 10, 15, 20 wt%)의 유장 단백질 농축물(WPC), 약 0 wt% 내지 약 20 wt%(예를 들어, 약 0, 2, 5, 10, 15, 20 wt%)의 무지방 분유(NFDM), 약 0 wt% 내지 약 20 wt%(예를 들어, 약 0, 2, 5, 10, 15, 20 wt%) 스위트 유장, 약 0 wt% 내지 약 1 wt%(예를 들어, 약 0 , 0.01, 0.1, 0.5, 1.0 wt%)의 방향제, 약 0 wt% 내지 약 1 wt%(예를 들어, 약 0, 0.01, 0.1, 0.5, 1.0 wt%)의 렉시틴, 약 0 wt% 내지 약 1 wt%( 예를 들어, 약 0, 0.01, 0.1, 0.5, 1.0 wt%) 중간-쇄 트리글리세리드를 함유할 수 있다. 일부 구현예에서, 전체 초유는 약 89.5 wt% 전체 인스턴트화된 초유, 약 10 wt% WPC, 약 0.5 wt%의 방향제를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 탈지 초유는 약 97.5%의 탈지 초유, 약 1 wt%의 우유 단백질 농축물(MPC) 70, 약 1 wt%의 NFDM 및 약 0.5 wt%의 방향제를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 조성물은 약 30 wt% 내지 약 95 wt%의 초유, 약 40 wt% 내지 약 90 wt%의 초유, 또는 약 50 wt% 내지 약 75 wt%의 초유를 포함한다.
[00161] 일부 구현예에서, 조성물은 조성물의 약 50 wt% 내지 약 80 wt%(예를 들어, 약 50, 60, 70, 80 wt%)의 총 단백질 함량을 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 조성물의 약 60 wt% 내지 약 70 wt%의 총 단백질 함량을 포함한다.
[00162] 일부 구현예에서, 상기 조성물은 조성물의 약 15wt% 내지 약 60 wt%(예를 들어, 약 15, 20, 30, 40, 50, 60 wt%)의 양으로 면역글로불린 G를 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 조성물의 약 20 wt% 내지 약 30 wt%의 양으로 면역글로불린 G를 포함한다.
[00163] 영양 트립신 억제제는 효소 활성 콩 생성물, 단리된 또는 재조합 대두 트립신 억제제, 또는 단리된 또는 재조합 오보뮤코이드일 수 있다. 일부 구현예에서, 영양 트립신 억제제는 효소 활성 생 콩가루이다. 일부 구현예에서, 효소 활성 콩가루는 동시 분무 전에 초유와 혼합된다.
[00164] 본원에 정의된 바와 같이, 영양 트립신 억제제는 트립신 억제에 의해 결정된 바와 같이 적어도 약 10 mg/g 샘플 트립신 억제제 활성(TIA), 또는 적어도 약 20 mg/g 샘플 TIA를 나타낼 수 있다. 효소 활성 콩 생성물은 전체 대두, 생 콩가루, 생 콩밀, 특정 콩 단백질 농축물, 특정 콩 단백질 단리물을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 효소 활성 콩 생성물은 콩 두부, 콩 우유, 콩 된장 또는 콩 유아용 조제분유가 아닌데, 이는 일반적으로 약 10 mg/g 샘플 TIA 미만의 낮은 수준의 TIA를 나타내기 때문이다.
[00165] 임의로, 초유 조성물은 단리되거나 재조합 성장 인자, 예를 들어 상피 성장 인자 (EGF), 형질전환 성장 인자 α (TGF-α), 형질전환 성장 인자 β (TGF-β), 인슐린 유사 성장 인자 I (IGF-I), 및 인슐린 유사 성장 인자 II (IGF-II), 혈소판 유래된 성장 인자(PDGF), 혈관 내피 성장 인자 (VEGF), 우유 지방구 상피 성장 인자 8 (MFG-E8), 등, 또는 실질적으로 동일한 변이체, 기능적 동족체 또는 이의 활성 단편으로 “스파이킹”될 수 있다.
[00166] 임의로, 조성물은 난 생성물을 포함할 수 있다. 난 생성물은 조성물의 약 0 wt% 내지 약 70 wt%, 약 5 wt% 내지 약 50 wt%, 또는 약 30 wt% 내지 약 40 wt%(예를 들어, 약 0, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70 wt%)로 존재할 수 있다. 난 생성물은 저온살균되거나, 분무 건조된 전체 난, 난 노른자, 또는 난 흰자일 수 있다. 일부 구현예에서, 조성물은 약 40 wt% 내지 약 95 wt%의 초유 및 약 5 wt% 내지 약 25 wt%의 영양 트립신 억제제를 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 약 35 wt% 내지 약 95 wt% (예를 들어, 약 35, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95 wt%)의 초유, 약 0 wt% 내지 약 60 wt% (예를 들어, 약 0, 10, 20, 30, 40, 50, 60 wt%)의 난 생성물, 및 약 5 wt% 내지 약 25 wt% (예를 들어, 약 5, 10, 15, 20, 25 wt%)의 영양 트립신 억제제를 포함한다.
[00167] 안정화제는 위장 조건 및/또는 저장 조건과 관련하여 조성물을 안정화시키는 작용을 할 수 있다. 안정화제는 초유와 혼합되거나 배합되는 매트릭스 물질로 사용될 수 있고/있거나 매트릭스 조성물 또는 투여 형태에 대한 코팅 물질로서 사용될 수 있다. 안정화제 물질은 본원에 제공된 부형제 목록으로부터 선택될 수 있거나, 다음과 같이, 예를 들어 인지질(예를들어, 렉시틴, ADM), 렉시틴, 중간-쇄 트리글리세리드(MCT), 알긴산, 알기네이트, 초유 지방, 에틸 셀룰로스 수성 분산액(Surelease®, Colorcon), 옥수수 전분, 쉘락(예를 들어, 탈왁스 수성 기반 25%, Marcoat®, Emerson Resources), 중탄산나트륨, 슈도라텍스, 완두콩 전분, 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스(HPMC), 수용성 HPMC(예를 들어, Methocel® F4M 또는 K15M, Dupont), HPMC 아세테이트 숙시네이트, 말티톨 분말(예를 들어, SweetPearl®(예를 들어, Roquette), 말토덱스트린(예를 들어, Kleptose®, Roquette), 디사카라이드(예를들어, 트레할로스, Bolise® Treha), 카세인 또는 카세이네이트 염, 예를 들어, 칼슘 카세이네이트, 나트륨 카세이네이트, 칼륨 카세이네이트, 마그네슘 카세이네이트, 유장 단백질 농축물, 우유 단백질 농축물, 스위트 유장, 무지방 분유, 크산탄 검(예를 들어, ADM), 폴리덱스트로스(예를 들어, Tate and Lyle, DuPont), 옥수수 유래 프롤라민, 옥수수에서 단리한 수불용성 단백질(예를 들어, 제인, 플로제인(FloZein)), 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수분산액(예를 들어, Nutrateric®, Colorcon), 스테아린, 글리세릴 스테아레이트, 수소화된 식물성 오일, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스(예를 들어, Protect® EN, Sensient), 알기네이트 + 옥수수 전분(예를 들어, Eudraguard Natural, Evonik), 하이드록시프로필 완두콩 전분(예를 들어, LyCoat®, Roquette), 부분 수소화 대두 오일, 수소화된 대두 오일, 하이프로멜로스 아세테이트 숙시네이트(예를 들어, AQOAT®, Shin-Etsu), 수성 셀룰로스 아세테이트 프탈레이트 중합체(예를 들어, Aquacoat® CPD, Colorcon), 알기네이트 + 아크릴 중합체(예를 들어, Eudraguard® Control, Evonik) 또는 에틸 셀룰로스 수성 분산 콜로이드(예를 들어, Aquacoat® ECD, Colorcon)로부터 선택된다. 안정화제는 조성물의 총 중량에 비해 조성물에 약 0 wt% 내지 약 50 wt%, 약 0.5 wt% 내지 약 40 wt%, 약 5 wt% 내지 약 40 wt%, 약 1 wt% 내지 약 30 wt%, 또는 약 5 wt% 내지 약 25 wt%(예를 들어 약 0, 10, 20, 30, 40, 50 wt%)로 존재할 수 있다.
[00168] 안정화제는 매트릭스 안정화제일 수 있다. 일부 구현에에서, 매트릭스 안정화제는 안정화 지질일 수 있다. 일부 구현예에서, 안정화 지질은 인지질, 렉시틴, 중간-쇄 트리글리세리드, 수소화된 대두 오일, 부분적으로 수소화된 대두 오일, 스테아린, 외인성 카세인, 카세이네이트 또는 외인성 초유 지방일 수 있다. 일부 구현예에서, 매트릭스 안정화제는 폴리사카라이드 안정화제 또는 디사카라이드 안정화제일 수 있다. 예를 들어, 폴리사카라이드 안정화제는 전분, 알기네이트, 알긴산, 폴리덱스트로스, 구아검, 크산탄검, 말토덱스트린, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스(HPMC; 하이프로멜로스), 하이드록시프로필 셀룰로스, 메틸셀룰로스, 히드록시에틸 셀룰로스, 히드록시에틸 메틸셀룰로스, 카라기난 또는 펙틴일 수 있다. 디사카라이드 안정화제는 트레할로스, 말토스, 슈크로스, 락토스, 락툴로스 또는 셀로비오스일 수 있다. 안정화 디사카라이드는 환원 디사카라이드일 수 있다. 안정화 디사카라이드는 비환원 디사카라이드일 수 있다. 하나의 예에서, 안정화 디사카라이드는 트레할로스일 수 있다. 안정화제는 슈가 알코올 안정화제일 수 있다. 당 알코올 안정화제는 말티톨, 만니톨, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨일 수 있다. 안정화제는 안정화 단백질일 수 있다. 안정화 단백질은 카세인, 영양학적으로 허용되는 염, 예를 들어, 칼슘 카세이네이트, 마그네슘 카세이네이트, 나트륨 카세이네이트, 칼륨 카세이네이트, 유장 단백질 농축물, 유장 단백질 단리물, 우유 단백질 농축물, 스위트 유장 또는 무지방 분유일 수 있다.
[00169] 조성물은 산 억제제를 포함할 수 있다. 산 억제제는 pH 조정제일 수 있다. pH 조정제는 위 제산제일 수 있다. 위 제산제는 예를 들어 중탄산나트륨, 나트륨 세스퀴카보네이트, 중탄산칼륨, 수산화마그네슘, 탄산마그네슘, 산화마그네슘, 인산마그네슘, 탄산칼슘, 이염기성 인산칼슘, 삼염기성 인산칼슘, 수산화알루미늄, 인산알루미늄, 디하이드록시알루미늄 아미노아세테이트, 디히드록시알루미늄 탄산나트륨일 수 있다. pH 조정제는 수산화칼슘, 수산화칼륨, 수산화나트륨, 탄산나트륨일 수 있다. 일부 구현예에서, 안정화제는 매트릭스 안정화제일 수 있다. 매트릭스 안정화제는 트레할로스, 폴리덱스트로스 또는 말토덱스트린일 수 있다. 안정화제는 마이크로캡슐화 제제, 내산성 코팅 물질 및/또는 장용피 물질일 수 있다. 일부 구현예에서, 마이크로캡슐화제 또는 장용피 물질은 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액(예를 들어, Nutrateric®, Colorcon), 알기네이트 + 에틸 셀룰로스(예를 들어, Protect® EN, Sensient), 알기네이트 + 옥수수 전분(예를 들어, Eudraguard Natural, Evonik), 하이드록시프로필 완두콩 전분(예를 들어, LyCoat®, Roquette), 히프로멜로스 아세테이트 숙시네이트(예를 들어, AQOAT®, Shin-Etsu), 수성 셀룰로스 아세테이트 프탈레이트 중합체(예를 들어, Aquacoat® CPD, Colorcon), 알기네이트 + 아크릴 중합체(예를 들어, Eudraguard® Control, Evonik) 또는 에틸 셀룰로스 수성 분산 콜로이드(예를 들어, Aquacoat® ECD, Colorcon)일 수 있다. 산 억제제는 pH 조정제를 포함할 수 있다. pH 조정제는 영양학적 세린 프로테아제 억제제 활성을 크게 방해하지 않는 한 임의의 적절한 GRAS pH 조정제일 수 있다. 일부 구현예에서, pH 조정제는 중탄산나트륨, 나트륨 세스퀴카보네이트, 또는 중탄산칼륨으로부터 선택될 수 있다. pH 조정제는 중탄산나트륨일 수 있다. 일부 구현예에서, pH 조정제는 조성물에 약 0.5 wt% 내지 약 25 wt%, 또는 약 1 wt% 내지 약 10 wt% 범위로 첨가될 수 있다. 예를 들어, 중탄산나트륨과 같은 pH 조정제는 위에서 널리 퍼져 있는 일부 산을 중화할 수 있고 펩신 소화로 인한 분해로부터 회복 촉진 성장 인자를 보호하는 역할을 할 수 있다.
매트릭스 안정화
[00170] 일부 구현예에서, 안정화제는 동시 분무 건조 또는 본원 개시내용의 조성물과의 혼합을 위한 매트릭스 안정화를 위해 사용될 수 있다. 매트릭스 물질은 예를 들어 트레할로스, 폴리덱스트로스, 칼슘 카세이네이트, 나트륨 카세이네이트, 변형 완두콩 전분(예를 들어, LyCoat®, Roquette®), 크산탄 검, 에틸 셀룰로스 수성 분산액(예를 들어, Surelease®, Colorcon), 알기네이트 + 옥수수 전분 (예를 들어, Eudraguard Natural, Evonik) 및 하이드록시프로필 메틸셀룰로스(예를 들어, Methocel F4M 또는 K15M)을 포함한다.
[00171] 안정화제는 중간-쇄 트리글리세리드(MCT)를 포함할 수 있다. 중간-쇄 트리글리세리드는 2개 또는 3개의 지방산 에스테르를 갖는 트리글리세리드일 수 있고, 각각은 약 6 내지 약 12개의 탄소 원자를 갖는 중간-쇄 지방산의 지방족 꼬리를 갖는다. MCT는 팜핵유(palm kernel oil)와 코코넛 오일에서 발견되rh 분확화를 통해 분리할 수 있다. 지방족 꼬리는 직쇄 지방산 또는 분지쇄 지방산을 포함할 수 있다.
[00172] 안정화제는 인지질을 포함할 수 있다. 인지질은 난 인지질 또는 렉틴일 수 있다. 난 인지질은 포스파티딜콜린(PC), 포스파티딜에탄올아민(PE) 및 리소포스파티딜콜린(LPC)을 포함하는 난 노른자의 성분으로 발견될 수 있다. 인지질("PL")은 세포막의 중요한 생물학적 성분이다. 이들은 주로 글리세로인지질과 스핑고지질로 식이에서 발견된다. 식이성 글리세로인지질은 약 90% 이상의 높은 효율로 위장관에서 흡수된다. 미국 농무부에 따르면 닭 난의 PL 함량은 전체 지질의 약 28 wt%이고, 평균 닭 난 노른자는 약 1.3g의 Pl을 함유한다(U.S. Department of Agriculture, A.R.S. USDA National Nutrient Database for Standard Reference, Release 26. Nutrient Data Laboratory Home Page.　USDA; Washington, DC, USA: 2013). 닭 난의 PL은 잘 흡수된다.
[00173] 안정화제는 갈색 해양 마크로조류로부터 유래된 친수성 폴리사카라이드인 알긴산(또는 알긴)을 포함할 수 있다. 칼슘 또는 나트륨과 같은 미네랄과 알긴의 염을 알기네이트로 불리운다. 물에 노출된 경우, 알기네이트는 점성 검을 형성한다. 식품 및 약제학적 산업에서 알지네이트의 이러한 검밍 성질은 식품 질감을 부여하고, 벌크 농축을 제공하고, 겔화제 및 약제학적 활성제를 함유한 하이드로겔을 전달하기 위한 담체로서 사용된다. 알기네이트의 겔화 특성은 소화를 늦추고 위에서 산과 펩신에 대한 노출을 감소시킨다.
[00174] 안정화제는 초유 지방을 포함할 수 있다. 초유 지방은 상업용 소 초유 제조 과정의 부산물일 수 있다. 초유 지방은 우유지방에 비해 상승된 수준의 오메가-6 및 오메가-3 지방산(FA)과 콜레스테롤을 함유한다.
[00175] 안정화제는 카세인 또는 카세이네이트 염, 예를 들어, 칼슘 카세네이트를 포함할 수 있다. 우유 단백질은 수용성 단백질(유장 단백질)과 불용성 단백질(카세인)의 두 그룹으로 나눌 수 있고, 두 성분 모두 영양적 및 생활성 성질을 제공한다. 카세인은 우유와 치즈 단백질의 약 3/4를 차지하는 주요 인단백질이다. 연구에 따르면 카세인의 공존이 사람의 소화로부터 상피 성장 인자(EGF)를 부분적으로 보호할 수 있다는 것이 입증되었다. 카세인 및 카세네이트는 초유로부터 단리될 수 있다. 이론에 얽매이지 않고, 카세인 또는 칼슘 카세이네이트, 나트륨 카세이네이트 등과 같은 이의 염은 회복 촉진 인자를 보호하기 위한 경쟁적 효소 기질로서 작용할 수 있다.
마이크로캡슐화
[00176] 일부 구현예에서, 조성물은 마이크로캡슐화된다. 마이크로캡슐화는 외부 코팅을 갖는 입자를 코팅하는 과정이다. 생성된 마이크로입자는 약 1 μm 내지 약 1000 μm, 예를 들어 약 5 μm 내지 약 800 μm, 약 100 μm 내지 약 750 μm, 또는 약 150 μm 내지 약 600 μm의 마이크로미터 범위의 평균 직경을 가질 수 있다. 마이크로캡슐화는 단순한 코팅의 형태를 취하거나 리포좀 또는 마이셀 구조를 형성할 수 있다. 리포좀은 적어도 하나의 지질 이중층을 갖는 인지질 분자의 미세 주머니이다. 구조적으로 리포좀은 내부 수성 내용물을 구축된 수성 상으로부터 분리하는 지질 이중층을 갖는다. 마이셀은 또한 인지질 분자의 미세 주머니이지만 지방산 코어와 극성 표면(또는 역 마이셀의 경우 지방산 표면이 있는 극성 코어)이 있는 적어도 하나의 지질 단층을 갖는다. 리포좀 및 마이셀 둘다는 약물의 전달을 표적화하기 위해 사용되어 왔다. 일부 구현예에서, 리포좀 또는 마이셀은 소 초유, 특히 소장 내 회복 촉진 인자의 생체이용률을 개선시키기 위해 사용될 수 있다.
[00177] 본원 개시내용은 닭 난 인지질(PL)을 이용하여 소 초유 리포좀을 제조하는 방법을 제공한다. 소 초유 수용액은 특정 시간과 온도에서 난 PL과 혼합될 수 있다. 리포좀은 자발적으로 형성될 수 있고, 혼합물은 저온에서 분무 건조된다. 공정의 또 다른 구현예에서, 소 초유와 나트륨 또는 칼슘 알기네이트의 수성 혼합물을 난 PL과 혼합한다. 이어서 혼합물은 저온에서 분무 건조된다. 임의로, 조성물은 응집화되고/되거나 인스턴트화될 수 있다.
[00178] 난 PL 리포좀 형태의 영양 트립신 억제제와 소 초유를 포함하는 생성된 조성물은 위산 및 위장 효소적 분해로부터 회복 촉진 인자를 보호함에 의해 위 소화를 통해 시험관내, 또는 생체내 DSS 대장염 모델에서 성장 인자 생활성으로 측정한 바와 같이 소 초유의 생체이용률을 증진시킨다.
코팅 물질
[00179] 본원에 기재된 조성물은 코팅을 포함할 수 있다. 코팅은 보호 코팅일 수 있다. 일부 구현예에서, 보호 코팅은 장 코팅을 포함할 수 있다.
[00180] 임의의 적합한 보호 코팅이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 코팅은 일반적으로 안전한 것으로서 인지되는 (GRAS) 성분을 포함한다. 일부 구현예에서, 코팅은 장 코팅일 수 있다. 코팅은 내산성 코팅일 수 있다. 장 코팅은 시판되는 장 코팅일 수 있다. 보호 코팅은 선반 보관 시 조성물의 안정성을 증진시키고/시키거나 조성물의 생활성에 대한 안정성을 증진시킬 수 있다. 코팅 농도는 조성물의 총 중량의 약 1wt% 내지 약 25wt%, 약 3wt% 내지 약 20wt%, 또는 약 5wt% 내지 약 15wt%(예를 들어, 약 1, 5, 10, 15, 20, 25 wt%) 범위로 존재할 수 있다.
[00181] 코팅은 필름 형성제, 가소제, 탑코트, 케이킹 방지제, 착색제, 활택제 및/또는 향미제를 포함할 수 있다.
[00182] 대상체 조성물 및 방법에 사용하기에 적합한 필름 형성제는 예를 들어 pH 의존성 중합체, 수불용성 중합체 및 저융점 소수성 물질, 이들의 공중합체 및 이들의 혼합물을 포함한다. 일부 구현예에서, 필름 형성제는 미국 식품의약청(FDA)에 의해 일반적으로 안전한 것으로서 인지되는 ("GRAS") 화합물이다. 필름 형성제는 예를 들어, EP 2916828A1에 기재되어 있다.
[00183] 적합한 수불용성 중합체의 예는 에틸 셀룰로스, 폴리비닐 알코올, 폴리비닐 아세테이트, 폴리카프로락톤, 셀룰로스 아세테이트 및 이의 유도체, 아크릴레이트, 메타크릴레이트, 아크릴산 공중합체, 이들의 공중합체 및 이들의 혼합물을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 적합한 저융점 소수성 물질은 지방, 지방산 에스테르, 인지질, 왁스 및 이들의 혼합물을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 적합한 지방의 예는 수소화 식물성 오일, 예를 들어 코코아 버터, 수소화 팜핵유, 수소화 면실유, 수소화 해바라기유 및 수소화 대두 오일, 유리 지방산 및 이들의 염, 및 이들의 혼합물을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 적합한 지방산 에스테르의 예는 슈크로스 지방산 에스테르, 모노-, 디- 및 트리-글리세리드, 글리세릴 베헤네이트, 글리세릴 팔미토스테아레이트, 글리세릴 모노스테아레이트, 글리세릴 트리스테아레이트, 글리세릴 트리라우릴레이트, 글리세릴 미리스테이트, GlycoWax-932, 라우로일 마크로골-32 글리세리드, 스테아로일 마크로골-32 글리세리드 및 이들의 혼합물을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 적합한 인지질의 예는 포스포티딜 콜린, 포스포티딜 세렌, 포스포티딜 에노시톨, 포스포티드산 및 이들의 혼합물을 포함한다. 적합한 왁스의 예는 카나우바 왁스, 스퍼마세티 왁스, 밀랍, 칸데릴라 왁스, 쉘락 왁스, 미세결정질 왁스 및 파라핀 왁스; 초콜릿과 같은 지방 함유 혼합물 및 이들의 혼합물을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 하나의 바람직한 구현예에서, 필름 형성제는 에틸 셀룰로스이다. 필름 형성제로서 사용하기에 적합한 pH 의존성 중합체는 장용성 셀룰로스 유도체, 예를 들어 하이드록시프로필 메틸셀룰로스 프탈레이트, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스 아세테이트 숙시네이트, 셀룰로스 아세테이트 프탈레이트; 쉘락 및 제인과 같은 천연수지; 폴리비닐아세테이트 프탈레이트, 셀룰로스 아세테이트 프탈레이트, 아세트알데히드 디메틸셀룰로오스 아세테이트와 같은 장용성 아세테이트 유도체; 및 폴리(메타크릴산, 메틸 메타크릴레이트) 1:2(상표명 EUDRAGIT™으로 판매됨), 및 폴리(메타크릴산, 메틸 메타크릴레이트) 1:1(상표명 EUDRAGIT™으로 판매됨)과 같은 폴리메타크릴레이트계 중합체와 같은 장용성 아크릴레이트 유도체 및 이들의 혼합물을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
[00184] 조성물 또는 투여 형태는 위장관에서 지연 방출을 허용하는 pH 민감성 중합체를 사용하는 것을 포함하는 시판되는 영양 수성 장용피를 포함할 수 있다. 예를 들어, 장용피는 위에서와 같은 산성 환경(예를 들어, pH 1.5-3.5)에서 그대로 유지될 수 있고, 이는 캡슐화된 물질을 보호하는 데 도움이 될 수 있다. 위를 통과한 후 코팅은 보다 알칼리성의 환경(예를 들어, pH 6.5 - 7.6)을 갖는 소장(십이지장)에서 분해된다. Nutrateric®(Colorcon Inc.)은 위장관에서 지연 방출을 가능하게 하는 나트륨 알기네이트와 함께 수성 에틸셀룰로스를 포함하는 pH 민감성 중합체를 사용하는 것을 포함하는 시판되는 영양 수성 장용피이다. Protect™ EN (Sensient Pharmaceutical)은 수성 쉘락 및 나트륨 알기네이트를 포함하는 장용피이다.
[00185] 일부 구현예에서, 안정화제는 내산성 코팅 또는 캡슐 쉘을 포함할 수 있다. 적합한 내산성 코팅 또는 캡슐 쉘은 예를 들어, US 9,452,141에 기재되어 있다. 내산성 코팅 또는 캡슐 쉘은 수용성 장용 중합체를 포함할 수 있다. 수용성 장용 중합체는 내산성을 가질 수 있고, 즉, 위 조건(약 pH 1.2)에서는 불용성일 수 있고 장 조건(약 pH 6.8)에서는 가용성일 수 있다. 예를 들어, 수용성 장용 중합체는 펙틴, 프로필렌 글리콜 알기네이트 또는 크산탄 검일 수 있다. 내산성 코팅 또는 캡슐 쉘은 수용성 필름 형성 중합체를 포함할 수 있다. 수용성 필름 형성 중합체는 풀루란, 폴리비닐 알코올, 변형된 전분, 셀룰로스 에스테르 또는 겔라틴일 수 있다. 셀룰로스 에스테르는 하이드록시프로필 메틸셀룰로스(HPMC), 하이드록시프로필 셀룰로스, 메틸셀룰로스, 하이드록시에틸셀룰로스 또는 하이드록시에틸 메틸셀룰로스일 수 있다. 내산성 코팅 또는 캡슐 쉘은 겔화 보조제로서 겔란 검 또는 카라기난 및 염화나트륨, 염화칼슘 또는 염화칼륨과 같은 염을 포함할 수 있다. 본원에 제공된 바와 같이, 내산성 캡슐은 예를 들어, 도 8에 나타낸 바와 같이 기존의 비-내산성 캡슐과 비교했을 때 AGS 세포에서의 개선된 증식(%) 활성으로 나타난 바와 같이 산성 펩신 단계에서 장 소화 단계(트립신/키모트립신)까지 살아남는 보다 온전한 초유 활성을 전달할 수 있다.
[00186] 일부 구현예에서, 코팅 물질은 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액(예를 들어, Nutrateric®, Colorcon), 알기네이트 + 옥수수 전분(예를 들어, Eudraguard®, Evonik), 수소화된 대두 오일, 알기네이트 + 쉘락(예를 들어, Protect EN®, Sensient), 슈도라텍스를 함유한 에틸 셀룰로스 분산액(예를 들어, Surelease®, Colorcon), 하이드록시프로필 완두콩 전분(예: LCoat®, Roquette), 쉘락 수성계 25% 용액(예를 들어, Marcoat®, Emerson Resources) 및 하이드록시프로필 메틸셀룰로스 아세테이트 숙시네이트 (예를 들어, AQOAT®, Shin-Etsu)을 포함할 수 있다.
[00187] 임의로, 트리에틸 시트레이트 또는 폴리에틸렌 글리콜과 같은 가소제뿐만 아니라 글리세릴 모노스테아레이트 또는 활석과 같은 케이킹 방지제도 장용피 조성물에 포함될 수 있다.
[00188] 또 다른 구현예에서, 방법은 필름 형성제일 수 있는 탑코트를 장용피 조성물에 적용하는 단계를 추가로 포함한다. 하나의 구현예에서, 탑코트는 일반적으로 안전한 것으로서 인지되는 (GRAS) 필름 형성 성분일 수 있다. 또 다른 구현예에서, 탑코트는 하이드록시프로필메틸-셀룰로스(HMPC), 폴리비닐 알코올(PVA), 또는 Eudragit E와 같은 아미노 메타크릴레이트 공중합체로 이루어진 그룹으로부터 선택될 수 있다.
[00189] 일부 구현예에서, 대표적인 안정화된 초유 조성물은 표 1에 제공된다.
표 1. 안정화된 초유 조성물의 예
[00190] 일부 구현예에서, 본원 개시내용은 약 40 wt% 내지 약 95 wt%의 초유, 약 5 wt% 내지 약 30 wt%의 효소 활성 콩 생성물 및 약 0 wt% 내지 약 50 wt%의 안정화제를 포함하는 안정화된 조성물을 제공한다. 일부 구현예에서, 본원 개시내용은 약 40 wt% 내지 약 90 wt%의 초유, 약 5 wt% 내지 약 25 wt%의 효소 활성 콩 생성물 및 약 5 wt% 내지 약 40 wt%의 안정화제를 포함하는 안정화된 조성물을 제공한다. 일부 구현예에서, 본원 개시내용은 약 50 wt% 내지 약 90 wt%의 초유, 약 10 wt% 내지 약 20 wt%의 효소 활성 콩 생성물 및 약 5 wt% 내지 약 30 wt%의 안정화제를 포함하는 안정화된 조성물을 제공한다. 일부 구현예에서, 본원 개시내용은 약 40 wt% 내지 약 95 wt%의 초유, 약 0 wt% 내지 약 30 wt%의 효소 활성 콩 생성물 및 약 5 wt% 내지 약 50 wt%의 안정화제를 포함하는 안정화된 조성물을 제공한다.
[00191] 본원 개시내용은 정제된 락토페린, 안정화제 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물을 제공한다. 락토페린은 약 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 3.5, 4.0, 4.5, 5.0, 6.0, 7.0, 8.0, 9.0, 10.0 ng/ml 이상으로 존재할 수 있다. 락토페린은 약 0.1, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 3.5, 4.0, 4.5, 5.0, 6.0, 7.0, 8.0, 9.0, 10.0, 11.0, 12.0, 13.0, 14.0, 15.0 mg/ml로 존재할 수 있다. 락토페린은 최대 약 98 wt% (예를 들어, 약 2, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 75, 80, 90, 98 wt%)의 양으로 존재할 수 있다. 락토페린은 소, 양, 염소, 물소 또는 기타 포유류로부터 유래될 수 있다. 락토페린은 사람, 소, 양, 염소, 물소 또는 기타 포유동물 락토페린을 기반으로 한 재조합 락토페린일 수 있다. 안정화제 및 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제는 본원에 기재된 바와 같은 임의의 안정화제(예를 들어, 카세인, 카세이네이트 염, 폴리덱스트로스, 트레할로스, 외인성 초유 지방, 스테아린, 알기네이트, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스, 알기네이트 + 옥수수 전분, 알기네이트 + 아크릴 중합체, 매트릭스 안정화제, 지질 안정화제, 폴리사카라이드 안정화제, 디사카라이드 안정화제, 슈가 알코올 안정화제, 단백질 안정화제, 마이크로캡슐화제, 내산성 코팅 물질, 장용피 물질, 또는 이들의 조합)일 수 있다. 안정화제는 조성물의 약 2 wt% 내지 약 90 wt%(예를 들어, 약 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 50, 60, 70, 80, 90 wt% 이상 또는 약 2 wt% 내지 90 wt% 사이의 임의의 범위)일 수 있다. 일부 양상에서, 안정화제는 칼슘 카세이네이트, 나트륨 카세이네이트, 또는 초유로부터의 카세이네이트 단리물이다. 일부 구현예에서, 조성물은 약 2 wt% 내지 약 90 wt% (예를 들어, 약 2, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 75, 80, 90 wt%)의 칼슘 카세이네이트를 포함한다.
사용 방법
[00192] 구현예는 치료가 필요한 대상체에서 위장관의 염증과 연관된 질환 또는 장애를 치료, 완화 또는 예방하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 치료학적 유효량의 회복 촉진 인자, 면역 인자, 또는 이들의 조합; 영양 세린 프로테아제 억제제; 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물을 상기 대상체에게 투여함을 포함한다.
[00193] 본원에 기재된 구현예는 치료가 필요한 대상체에서 위장관의 염증과 연관된 질환 또는 장애를 치료, 완화 또는 예방하는 방법에 관한 것이고, 상기 방법은 치료학적 유효량의 회복 촉진 인자, 면역 인자, 또는 이들의 조합; 안정화제; 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물을 상기 대상체에게 투여함을 포함한다.
[00194] 특정 구현예에서, 방법은 추가로 안정화제를 포함하는 조성물의 용도를 포함한다. 일부 구현예에서, 안정화제는 카세인, 카세이네이트 염, 폴리덱스트로스, 트레할로스, 외인성 초유 지방, 스테아린, 알기네이트, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스, 알기네이트 + 옥수수 전분, 및 알기네이트 + 아크릴 중합체, 또는 이의 조합물이다.
[00195] 일부 구현예에서, 방법은 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 난 생성물, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 또는 기능식품적으로 허용되는 염 또는 이들의 조합물인 회복 촉진 인자를 사용한다. 일부 구현예에서, 초유는 소 초유이다. 일부 구현예에서, 소 초유는 탈지 소 초유, 후기 소 초유, 부분 탈지된 소 초유, 소 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 부분 탈지된 소 초유, 전체 소 초유, 또는 이들의 조합물이다.
[00196] 일부 구현예에서, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질이 상피 성장 인자(EGF), 형질전환 성장 인자 α(TGF-α), 형질전환 성장 인자 β(TGF-β), 인슐린 유사 성장 인자 I(IGF-I) 및 인슐린 유사 성장 인자 II(IGF-II), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 우유 지방구-상피 성장 인자 8(MFG-E8) 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 재조합 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질인 방법이 제공된다.
[00197] 일부 구현예에서, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염의 치료학적 유효량은 1일당 대상체의 체중 당 약 0.001 mg/kg 내지 약 10 mg/kg, 약 0.005 mg/kg 내지 약 5 mg/kg, 약 0.01mg/kg 내지 약 1mg/kg, 또는 약 20μg/kg 내지 약 200μg/kg(예를 들어 약 0.001, 0.01, 0.02, 0.1, 1.0, 2.0, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250 mg/kg)으로 투여된다. 일부 구현예에서, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염의 치료학적 유효량은 1일당 약 0.01 mg 내지 약 500 mg, 약 0.05 mg 내지 약 80 mg, 약 0.1 내지 약 50 mg/kg, 약 0.5 내지 약 10 mg 또는 1 mg 내지 약 5 mg(예를 들어, 하루 약 0.1, 1.0, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 400, 500, 600, 700 mg/kg)으로 투여된다.
[00198] 일부 구현예에서, 면역 인자가 면역글로불린, 사이토킨, 항미생물 펩타이드 또는 이들의 조합인 방법이 제공된다.
[00199] 일부 구현예에서, 영양 세린 프로테아제 억제제가 영양 트립신 억제제인 방법이 제공된다. 일부 구현예에서, 영양 트립신 억제제는 효소 활성 콩 생성물, 오보뮤코이드, 대두 트립신 억제제, 또는 이들의 조합물이다.
[00200] 일부 구현예에서, 조성물이 약 40 wt% 내지 약 95 wt%(예를 들어, 약 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 99 wt%)의 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 또는 초유 유장 농축물과 농축 유장 단백질의 혼합물; 및 약 5 wt% 내지 약 25 wt%(예를 들어, 약 5, 10, 15, 20 wt%)의 효소 활성 콩 생성물을 포함하는 방법이 제공된다.
[00201] 일부 구현예에서, 조성물이 안정화제를 포함하는 방법이 제공된다. 일부 구현예에서, 안정화제는 카세인, 카세이네이트 염, 폴리덱스트로스, 트레할로스, 외인성 초유 지방, 스테아린, 알기네이트, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스, 알기네이트 + 옥수수 전분, 알기네이트 + 아크릴 중합체, 또는 이의 조합물이다. 일부 구현예에서, 안정화제는 지질 안정화제, 폴리사카라이드 안정화제, 디사카라이드 안정화제, 슈가 알코올 안정화제, 또는 단백질 안정화제로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 매트릭스 안정화제일 수 있다. 안정화제는 마이크로캡슐화 제제, 내산성 코팅 물질 및/또는 장용피 물질일 수 있다. 일부 구현예에서, 조성물은 약 5 wt% 내지 약 40 wt% (예를 들어, 약 25, 20, 30, 또는 40 wt%)의 안정화제를 포함한다.
[00202] 일부 구현예에서, 조성물이 콩 렉틴, 중간-쇄 트리글리세리드, 유장 단백질 농축물, 무지방 분유, 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 추가로 포함하는 방법이 제공된다. 일부 구현예에서, 조성물은 최대 약 2 wt%(예를 들어, 약 0.01, 0.1, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0 wt%)의 콩 렉시틴, 최대 약 2 wt%(예를 들어, 약 0.01, 0.1, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0 wt%)의 중간-쇄 트리글리세리드, 최대 약 2 wt% (예를 들어, 약 0.01, 0.1, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0 wt%)의 방향제, 최대 약 50 wt%(예를 들어, 약 5, 10, 15, 20, 30 , 40, 50 wt%)의 유장 단백질 농축물, 최대 약 10 wt%(예를 들어, 약 1.0, , 2.0, 5.0, 7.0, 10 wt%)의 무지방 분유, 최대 약 10 wt%(예를 들어, 약 1.0, 2.0, 5.0, 7.0, 10 wt%)의 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 포함한다. 일부 구현예에서, 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율은 약 1:20 내지 약 20:1이다. 일부 구현예에서, 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율은 60:40이다.
[00203] 일부 구현예에서, 조성물이 조성물의 약 50 wt% 내지 약 80 wt%(예를 들어, 약 50, 60, 70, 80 wt%)의 총 단백질 함량을 포함하는 방법이 제공된다. 일부 구현예에서, 조성물은 조성물의 약 15 wt% 내지 약 60 wt%(예를 들어, 약 15, 20, 30, 40, 50, 60 wt%)의 양으로 면역글로불린 G를 포함한다.
[00204] 일부 구현예에서, 질환 또는 장애가 염증성 장 질환, 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID) 위장 장애, 화학치료요법 유발 점막염, 방사선 유발 점막염, 위막성 대장염, 위염, 소화성 궤양, 괴사성 장염, 과민성 장 증후군, 장 누수, 소장 세균 과증식(SIBO), 비궤양성 소화불량 또는 기능성 소화불량인 방법이 제공된다. 일부 구현예에서, 염증성 장 질환은 궤양성 대장염, 불확정 대장염, 또는 크론 질환이다.
[00205] 일부 구현예에서, 조성물이 대상체에서 미엘로퍼옥시다제(MPO) 수준을 감소시키는 데 효과적인 방법이 제공된다.
[00206] 일부 구현예에서, 조성물이 위액 또는 하이드로클로라이드(HCl)/펩신 소화 및 키모트립신/트립신 소화를 받을 때 동일한 조건하에서 회복 촉진 인자 또는 면역 인자 단독의 활성과 비교하여 회복 촉진 인자 또는 면역 인자의 활성을 유의적으로 보존하는데 효과적인 방법이 제공된다.
[00207] 일부 구현예에서, 방법은 대상체에게 유효량의 하나 이상의 추가 활성제를 동시 투여하는 것을 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 대상체는 신생아가 아닌 사람 대상체이다.
[00208] 본원에 기재된 구현예는 대상체에서 백신접종 항체 역가를 증진시키는 방법에 관한 것이고, 상기 방법은 a) 치료학적 유효량의 조성물을 대상체에게 경구 투여하는 단계로서, 상기 조성물이 i) 회복 촉진 인자, 면역 인자, 또는 이들의 조합; ii) 영양 세린 프로테아제 억제제; iii) 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제; 및 iv) 임의로 안정화제를 포함하는, 단계; 및 b) 대상체에게 백신을 투여하는 단계를 포함한다.
[00209] 특정 구현예에서, 백신은 COVID-19 백신, 인플루엔자 백신, 뉴모코커스성 백신, 파상풍 백신, 파상풍-디프테리아-백일해 백신, 홍역-볼거리-풍진 백신, 사람 파필로마바이러스 백신, A형 간염 백신, B형 간염 백신, 메닌고코커스성 백신, 헤모필러스 인플루엔자 b형 백신, 또는 조스터 백신이다.
[00210] 일부 구현예에서, 백신은 수의학 백신, 예를 들어, 홍역 백신, 광견병 백신, 파보바이러스 백신, 조류 인플루엔자 백신, 말 웨스트 나일 바이러스 백신, 말 인플루엔자 바이러스 백신, 고양이 백혈병 바이러스 백신, 림프구성 맥락수막염 바이러스 백신, 소 바이러스 설사 바이러스 백신, 고양이 면역결핍 바이러스 백신, 돼지 헤르페스 바이러스 백신, 구제역 바이러스 백신, 소 헤르페스 바이러스-1 관련 질환 백신 또는 뉴캐슬 질환 바이러스 백신이다.
투여 형태
[00211] 조성물은 장 조성물일 수 있다. 조성물은 경구 조성물일 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 제공된 조성물은 분말, 응집된 분말, 인스턴트화된 분말, 동결건조된 분말, 과립, 정제, 경구 붕해 정제, 캡슐, 트로키제 또는 로젠지제와 같은 고체 형태로 제공될 수 있다. 일부 구현예에서, 조성물은 영양바, 소프트 츄, 하이드로겔 또는 구미와 같은 고체 식품 형태, 요구르트와 같은 반고체 형태, 또는 액체 형태, 예를 들어 현탁액 또는 바로 마실 수 있는 음료와 같은 즉시 사용 가능한 형태일 수 있다. 일부 구현예에서, 조성물은 연고, 좌약 또는 영양 관장제 형태일 수 있다. 일부 구현예에서, 투여 형태는 분무 건조 분말일 수 있다. 일부 구현예에서, 투여 형태는 즉시 사용가능한 혼합 형태의 분무 건조된 인스턴트화된 분말일 수 있다.
[00212] 일부 구현예에서, 투여 형태는 분말, 캡슐, 정제, 트로키제, 액체 또는 캐플릿과 같은 경구 투여 형태이다. 분말은 캡슐 충전으로 활용되거나, 사과 소스 또는 요구르트와 같은 식품과 혼합하기 위한 단일 용량 패킷으로 판매될 수 있거나, 단일 용량 패킷으로 판매되고 액체에 현탁시키기 위한 발포성 분말 제형일 수 있다. 하나의 양상에서, 캡슐, 정제, 로젠지제는 삼킴에 의한 섭취를 위한 것이다. 또 다른 양상에서, 정제, 캡슐 또는 로젠지제는 경구 붕해 가능하다. 하나의 양상에서, 정제, 캡슐, 로젠지제 또는 트로키제는 서방형 조성물이다. 다른 양상에서, 정제, 로젠지제, 트로키제 또는 캡슐은 즉시 방출 조성물이다. 또 다른 양상에서, 경구용 조성물은 미리 팩키징된 액체 음료일 수 있으며, 여기서 제형은 향미가 있는 액체에 현탁되어 있다. 일부 양상에서, 조성물은 사과소스 또는 요구르트와 같은 식품과 혼합하기 위한 정제, 캡슐 또는 분말 형태이다. 본원 개시내용의 조성물은 주로 경구 형태이지만, 위루(gastrostomy) 형태와 같은 장내 형태 또는 항문 좌약과 같은 다른 투여 방식도 고려된다.
[00213] 본원 개시내용의 정제, 캡슐 및 캐플릿 형태는 상기 명시된 성분 외에도, 기타 다양한 첨가제, 예를 들어, 비히클, 결합제, 붕해제, 윤활제, 증점제, 계면활성제, 삼투압 조절제, 전해질, 감미제, 방향제, 향수, 색소, pH 조절제 등을 필요에 따라 적절하게 포함할 수 있다.
[00214] 또 다른 구현예에서, 본원 개시내용의 조성물 및 투여 형태는 임의로 하나 이상의 방향제를 추가로 포함할 수 있다. 환자의 수용성을 증가시키고 권장 투여 스케줄을 준수하기 위해 임의의 방향제를 첨가할 수 있다. 사용될 수 있는 방향제는 천연 방향제 및 인공 방향제와 같이 당업자에게 공지된 방향제를 포함한다. 이들 방향제는 합성 방향 오일 및 향미 방향족 및/또는 오일, 올레오레진 및 식물, 잎, 꽃, 과일 등으로부터 유래된 추출물, 및 이들의 조합물로부터 선택될 수 있다. 비제한적인 대표적인 방향 오일은 스피어민트 오일, 신나몬 오일, 윈터그린 오일(메틸 살리실레이트), 페퍼민트 오일, 정향 오일, 베이 오일, 아니스 오일, 유칼립투스 오일, 백리향 오일, 삼나무 잎 오일, 육두구 오일, 올스파이스 오일, 샐비어, 메이스, 쓴 아몬드 오일, 및 계수나무 오일을 포함한다. 다른 유용한 방향제는 바닐라와 같은 인공, 천연 및 합성 과일 방향제와 레몬, 오렌지, 라임, 자몽을 제한 없이 포함하는 감귤류 오일과 사과, 배, 복숭아, 포도, 딸기, 라즈베리, 체리, 자두, 파인애플, 살구 등을 포함하는 과일 에센스이다. 이들 방향제는 액체 또는 고체 형태로 사용할 수 있고 개별적으로 또는 혼합물로 사용할 수 있다. 일반적으로 사용되는 방향제는 페퍼민트, 멘톨, 인공 바닐라, 신나몬 유도체과 같은 민트 및 다양한 과일 향을 포함하고 이는 개별적으로 또는 혼합물로 사용된다. 다른 유용한 방향제는 신나밀 아세테이트, 신남알데히드, 시트랄 디에틸아세탈, 디히드로카르빌 아세테이트, 유게닐 포메이트, p-메틸아미솔 등과 같은 알데히드 및 에스테르를 포함한다. 특정 양상에서 방향제는 스피어민트 오일이다. 방향제는 임의로 항바이러스 조성물의 중량을 기준으로 약 0.1 wt% 내지 약 5 wt%(예를 들어, 약 0.1, 0.5, 1, 2, 3, 4, 5 wt%)로 존재한다.
[00215] 정제는 성형 정제 또는 압축 정제일 수 있다. 정제는 습식 과립화, 건식 과립화 및 직접 압축에 의해 형성될 수 있다. 이들 기술은 당업자에게 공지되어 있고, 예를 들어 미국 약전 국립 처방집 USP XXII, 1990, pp. 1696-1697에 기재되어 있다. 다양한 비타민이 조성물에 첨가될 수 있다. 정제는 임의로 방향제 또는 감미제를 추가로 포함할 수 있다. 하나의 양상에서, 감미된 방향 정제는 입안에서 용해되는 로젠지제로서 활용된다. 본원 개시내용의 조성물은 또한 츄어블(chewable) 형태 또는 발포 형태로 제조될 수 있다. 발포 제제의 경우, 본원 개시내용의 제조방법은 기본적으로 발포 정제와 같은 일반적인 발포 제제의 제조방법과 동일하다. 즉, 성분을 칭량하고, 혼합하고 분말 타정법, 건식 또는 습식 과립 타정법 등에 의해 직접 제조한다. 경구 붕해성 정제는 예를 들어 미국 특허 제7,431,942호에 기재되어 있다. 예를 들어, 미국 특허 제6,316,008호의 기술에 의해 경질의 캔디 베이스를 갖는 로젠지제가 제조될 수 있다.
[00216] 액체 조성물은 추가로 다른 영양물을 포함할 수 있다. 이러한 액체 조성물은 예를 들어 미국 특허 제6,037,375호에 기재된 바와 같이 제조될 수 있다. 본원 개시내용의 영양 액체 조성물은 초유 및 효소활성 콩 생성물을 포함할 수 있고, 일반 식품 및 음료와 동일하게 제조되며, 기타 식품소재를 적절히 첨가할 수 있다. 유기산 및 탄수화물과 같은 감미제가 또한 첨가될 수 있다. 유기산 성분은 예를 들어 시트르산, 타르타르산, 말산 및 숙신산을 포함한다. 이들 유기산은 일반적으로 약 100mg/100mL 내지 약 1500mg/100mL, 바람직하게는 약 250mg/100mL 내지 약 800mg/100mL(예를 들어, 약 100, 200, 250, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 mg/100 mL)의 범위로 첨가되고, 음료 형태의 물질의 조성물을 제조할 수 있다.
[00217] 다양한 감미제는 본원 개시내용의 정제, 액체, 캡슐, 로젠지제 또는 트로키제에 임의로 사용될 수 있다. 탄수화물 및 감미제의 예는 글루코스 및 프럭토스와 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 기타 통상의 슈가, 자일리톨, 소르비톨, 글리세린, 에리트리톨와 같은 슈가 알코올, 덱스트린 및 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 프럭토-올리고사카라이드, 갈락토-올리고사카라이드 및 락토-슈크로스와 같은 올리고뉴클레오타이드를 포함한다. 기타 감미제는 타우마틴, 스테비아 추출물, 레바우디오사이드 A, 글리시리진산 등의 천연 감미제 및 사카린, 아스파탐 등의 합성 감미제를 포함한다. 이들 탄수화물은 또한 이성체화된 슈가 및 정제된 슈가 등의 탄수화물 혼합물로서 첨가될 수 있다. 감미제는 고체 조성물의 중량을 기준으로 약 0.1% 내지 약 5%(예를 들어, 약 0.1, 0.5, 1, 2, 3, 4, 5)로 임의로 존재할 수 있다. 탄수화물의 블렌딩은 본원 개시내용의 음료 조성물 100mL 중에 약 1g 내지 100mL 중에 약 15g 또는 약 3g 내지 약 12g(예를 들어, 100mL 중에 약 1, 2, 3, 5, 7, 9, 10, 12, 15g)일 수 있다. 올리고사카라이드의 함량은 약 0.5 g 내지 약 10 g 또는 약 1 g 내지 약 3 g (예를 들어, 약 0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 g)일 수 있다.
[00218] 본원 개시내용의 액체 영양 조성물은 이들 성분을 블렌딩하여 제조할 수 있고, 제조방법은 특별히 제한되지 않으며, 모든 성분을 동시에 블렌딩할 수 있다. 하나의 구현예에서, 지용성 성분은 오일에 미리 용해시키고, 수용성 성분은 물에 미리 용해시킨 후, 용액을 유화제를 사용하여 유화시켜 본 발명의 조성물을 제조할 수 있다.
[00219] 유화는 호모 믹서나 고압균질화기 등의 적절한 유화기를 사용하여 완전 통과 방식이나 순환 방식으로 실시할 수 있다. 유화 후의 에멀젼은 통상적인 공정에 따라 여과하고, 적절한 용기에 붓고 멸균함으로써 목적하는 음료 생성물을 수득할 수 있다. 멸균은 저온살균의 영향을 받을 수 있다.
[00220] 본원 개시내용의 액체 조성물은 또한 발포 형태로 제조될 수 있다. 발포성 형태는 본원 개시내용의 필수 성분 외에, 발포 성분으로서 적당량의 탄산나트륨 및/또는 탄산수소나트륨 및 중화제를 함유해야 한다. 본원에 사용되는 중화제는 탄산나트륨 또는 탄산수소나트륨을 중화시켜 이산화탄소를 발생시킬 수 있는 산성 화합물일 수 있다. 이러한 화합물은 예를 들어 L-타르타르산, 시트르산, 푸마르산, 아스코르브산 및 기타 유기산을 포함한다. 아스코르브산은 중화제의 작용과 항산화제 작용 둘다를 갖고 있다.
[00221] 본원 개시내용의 조성물 및 투여 형태는 고열(UHT(초고온; 예를 들어, 2 내지 4초 동안 약 135℃ 내지 약 140℃)), HTST(고온, 단시간; 급속 저온살균, 예를 들어 15 내지 20초 동안 약 72°C 내지 약 74°C), LTLT(저온, 장시간, 예를 들어 30분 동안 약 63°C) 및/또는 고압 가공(HPP) 및/또는 기타 식품 또는 고열로 관련 공정을 보완(구미, 요구르트, RTD 음료, 구운 영양 바 등)을 포함하는 저온살균 공정에 적용될 수 있다.
백신접종 항체 역가의 개선
[00222] 일부 구현예에서, 본원 개시내용은 백신을 투여받은 대상체에서 백신접종 항체 역가를 증진시키는 방법을 제공한다. 예를 들어, 대상체에서 백신접종 항체 역가를 증진시키는 방법이 제공되고, 상기 방법은 상기 대상체에게 상기 조성물은 회복 촉진 인자 및/또는 면역 인자; 영양 세린 프로테아제 억제제; 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제; 및 임의로 안정화제를 포함하는 치료학적 유효량의 조성물을 경구 투여하고; 상기 대상체에 백신을 투여함을 포함한다. 본 실시예 1에 나타낸 바와 같이, 췌장 효소의 존재 하에, 영양 프로테아제 억제제는 BC 및/또는 난에서 회복 촉진 인자의 성장 인자 활성을 안정화시킨다. 또한, 개선된 면역 인자 안정성에 대한 증거가 실시예 4에 제공되고, 이는 프로토타입 초유 조성물 및 "수치 히트 맵" 표(도 7a 및 도 7b)를 개시하고 있고, 본원에 기재된 바와 같이 특정 안정화제, 또는 약 10 wt%의 영양 세린 프로테아제 억제제 효소 활성 콩가루를 사용하는 경우 IgG(μg/ml) 및 락토페린(ng/ml)로서 개선된 면역 생-안정성을 보여준다. 이론에 얽매이지 않고, 경구 투여된 회복 촉진 인자 및 면역 인자는 본원 개시내용의 조성물로 제형화되는 경우 안정화되기 때문에, 이들 조성물은 백신을 투여받는 대상체에서 백신접종 항체 역가를 증진시키는 데 활용될 수 있다.
[00223] 일부 구현예에서, 본원의 기재내용은 대상체에서 백신접종 항체 역가를 증진시키는 방법을 제공하고, 상기 방법은 a) 치료학적 유효량의 조성물을 상기 대상체에게 경구 투여하는 단계로서, 상기 조성물이 i) 회복 촉진 인자 및/또는 면역 인자; ii) 영양 세린 프로테아제 억제제; iii) 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제; 및 iv) 임의로 안정화제를 포함하는, 단계; 및 b) 상기 대상체에게 백신을 투여하는 단계를 포함한다. 백신은 COVID-19 백신, 인플루엔자 백신, 뉴모코커스성 백신, 파상풍 백신, 파상풍-디프테리아-백일해 백신, 홍역-볼거리-풍진 백신, 사람 파필로마바이러스 백신, A형 간염 백신, B형 간염 백신, 메닌고코커스성 백신, 헤모필러스 인플루엔자 b형 백신, 및 조스터 백신으로 이루어진 그룹으로부터 선택될 수 있다. 일부 구현예에서, 백신은 수의학 백신이다. 수의학 백신은 예를 들어, 홍역 백신, 광견병 백신, 파보바이러스 백신, 조류 인플루엔자 백신, 말 웨스트 나일 바이러스 백신, 말 인플루엔자 바이러스 백신, 고양이 백혈병 바이러스 백신, 림프구성 맥락수막염 바이러스 백신, 소 바이러스 설사 바이러스 백신, 고양이 면역결핍 바이러스 백신, 돼지 헤르페스 바이러스 백신, 구제역 바이러스 백신, 소 헤르페스 바이러스-1 관련 질환 백신 또는 뉴캐슬 질환 바이러스 백신일 수 있다.
안정성
[00224] 본원 개시내용의 조성물 및 투여 형태는 실시간의 안정성 시험(25°C 및 60%) 및 상이한 시간표(1 개월, 2 개월, 3 개월, 6 개월, 12 개월, 18 개월 등)에 걸친 가속화된 안정성 시험 (40°C 및 75% RH)에 적용될 수 있다.
투여
[00225] 본원 개시내용의 조성물은 장내 투여 경로로 투여될 수 있다. 투여 방법은 경구, 협측, 설하, 위 및 직장을 포함할 수 있다.
용량
[00226] 본원 개시내용의 조성물은 시간이 경과함에 따라 간헐적으로 또는 정기적으로 복용할 때 위장 장애의 치료, 완화, 증상의 중증도 감소, 발병 예방 또는 발병률 감소에 효과적일 수 있다. 이것은 매일, 한 번 또는 나누어 복용하거나 간헐적으로 복용할 수 있다. 예를 들어, 아직 위장 장애를 앓고 있지 않은 평균 체중 약 70kg의 15세 이상의 사람은 약 0.3g/일 내지 약 100g/일, 약 0.5g/일 내지 약 33g/일, 약 1g/일 내지 약 15g/일, 또는 약 2g/일 내지 약 10g/일(예를 들어, 약 0.1, 0.5, 1, 5, 10, 15, 20, 30, 33g/일 이상)의 분말 기준으로 단일 또는 다중 용량을 복용할 수 있다.
[00227] 본원 개시내용의 조성물은 기능성 식품 및 음료에서 식이 보충제에 효과적일 수 있고, 시간 경과에 따라 간헐적으로 또는 정기적으로 복용할 때 정상적인 위장 및 면역 기능을 지원하는 데 효과적일 수 있다. 이것은 매일, 한 번 또는 나누어 복용하거나 간헐적으로 복용할 수 있다. 예를 들어, 아직 위장 장애를 앓고 있지 않은 평균 체중 약 70kg의 15세 이상의 사람은 약 0.3g/일 내지 약 100g/일, 약 0.5g/일 내지 약 33g/일, 약 1g/일 내지 약 15g/일, 또는 약 2g/일 내지 약 10g/일(예를 들어, 약 0.1, 0.5, 1, 5, 10, 15, 20, 30, 33g/일 이상)의 분말 기준으로 단일 또는 다중 용량을 복용할 수 있다.
추가의 구현예
[00228] 구현예 A는 회복 촉진 인자, 영양 프로테아제 억제제; 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물에 관한 것이다.
[00229] 구현예 B에서, 구현예 A의 조성물은 추가로 안정화제를 포함한다.
[00230] 구현예 C에서, 구현예 B의 조성물은 안정화제가 카세인, 카세이네이트 염, 폴리덱스트로스, 트레할로스, 외인성 초유 지방, 스테아린, 알기네이트, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스, 알기네이트 + 옥수수 전분, 알기네이트 + 아크릴 중합체, 또는 이의 조합물이다.
[00231] 구현예 D에서, 구현예 A 내지 C 중 어느 하나의 조성물은 회복 촉진 인자가 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 난 생성물, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 기능식품적으로 허용되는 염 또는 이들의 조합물이다.
[00232] 구현예 E에서, 구현예 D의 조성물은 초유가 소 초유이다.
[00233] 구현예 F에서, 구현예 E의 조성물은 소 초유가 탈지 소 초유, 부분 탈지된 소 초유, 또는 전체 소 초유로부터 선택된다.
[00234] 구현예 G에서, 구현예 D의 조성물은 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질이 상피 성장 인자(EGF), 형질전환 성장 인자 α(TGF-α), 형질전환 성장 인자 β(TGF-β), 인슐린 유사 성장 인자 I(IGF-I) 및 인슐린 유사 성장 인자 II(IGF-II), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 우유 지방구-상피 성장 인자 8(MFG-E8) 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 재조합 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질이다.
[00235] 구현예 H에서, 구현예 A 내지 D 중 어느 하나의 조성물은 영양 프로테아제 억제제가 카세인이다.
[00236] 구현예 I에서, 구현예 A 내지 D 중 어느 하나의 조성물은 영양 프로테아제 억제제가 영양 트립신 억제제이다.
[00237] 구현예 J에서, 구현예 H의 조성물은 영양 트립신 억제제가 효소 활성 콩 생성물, 오보뮤코이드, 대두 트립신 억제제, 또는 이들의 조합물이다.
[00238] 구현예 K에서, 구현예 I의 조성물은 효소 활성 콩 생성물이 생 콩가루, 생 콩밀, 생 콩 생성물, 최소 가공 대두 생성물, 또는 이들의 조합물이다.
[00239] 구현예 L에서, 구현예 J의 조성물은 상기 효소 활성 콩 생성물이 효소 활성 콩가루이다.
[00240] 구현예 M에서, 구현예 K의 조성물은 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 또는 초유 유장 농축물 및 유장 단백질 농축물의 혼합물 대 효소 활성 콩 생성물의 약 1:1 내지 약 20:1, 임의로 약 5:1 내지 약 15:1의 중량비를 포함한다.
[00241] 하나의 구현예에서, 구현예 A 내지 K 중 어느 하나의 조성물은 약 40wt% 내지 약 95wt%의 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 또는 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물; 및 약 5 wt% 내지 약 25 wt%의 효소 활성 콩 생성물을 포함한다.
[00242] 구현예 O에서, 구현예 M의 조성물은 약 5 wt% 내지 약 40 wt%의 안정화제를 포함한다.
[00243] 구현예 P에서, 구현예 N의 조성물은 약 5 wt% 내지 약 40 wt%의 영양 프로테아제 억제제를 포함한다.
[00244] 구현예 Q에서, 구현예 M의 조성물은 약 2 wt% 내지 약 7 wt%의 카세인을 포함한다.
[00245] 구현예 R에서, 구현예 N의 조성물은 콩 렉틴, 중간-쇄 트리글리세리드, 유장 단백질 농축물, 무지방 분유, 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 추가로 포함한다.
[00246] 구현예 S에서, 구현예 R의 조성물은 최대 약 2 wt%의 콩 렉시틴, 최대 약 2 wt%의 중간-쇄 트리글리세리드, 최대 약 2 wt%의 방향제, 최대 약 50 wt%의 유장 단백질 농축물, 최대 약 10 wt%의 무지방 분유, 최대 약 10 wt%의 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 포함한다.
[00247] 구현예 T에서, 구현예 N의 조성물은 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율이 약 1:20 내지 약 20:1이다.
[00248] 구현예 U에서, 구현예 N의 조성물은 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율이 60:40이다.
[00249] 구현예 V에서, 구현예 N 내지 U 중 어느 하나의 조성물은 조성물이 조성물의 약 50 wt% 내지 약 80 wt%의 총 단백질 함량을 포함한다.
[00250] 구현예 W에서, 구현예 N 내지 U 중 어느 하나의 조성물은 조성물이 조성물의 약 15 wt% 내지 약 60 wt%의 양으로 면역글로불린 G를 포함한다.
[00251] 구현예 X는 회복 촉진 인자, 안정화제 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물에 관한 것이다.
[00252] 구현예 Y에서, 구현예 X의 조성물은 회복 촉진 인자가 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 난 생성물, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질 또는 기능식품적으로 허용되는 염 또는 이들의 조합물로부터 선택된다.
[00253] 구현예 Z에서, 구현예 Y의 조성물은 초유가 소 초유이다.
[00254] 구현예 AA에서, 구현예 Z의 조성물은 소 초유가 탈지 소 초유, 후기 소 초유, 부분 탈지된 소 초유, 소 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 전체 소 초유, 또는 이들의 조합물이다.
[00255] 구현예 BB에서, 구현예 Y의 조성물은 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질이 상피 성장 인자(EGF), 형질전환 성장 인자 α(TGF-α), 형질전환 성장 인자 β(TGF-β), 인슐린 유사 성장 인자 I(IGF-I) 및 인슐린 유사 성장 인자 II(IGF-II), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 우유 지방구-상피 성장 인자 8(MFG-E8) 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 재조합 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질이다.
[00256] 구현예 CC에서, 구현예 X 내지 BB 중 어느 하나의 조성물은 안정화제가 카세인, 카세이네이트 염, 폴리덱스트로스, 트레할로스, 외인성 초유 지방, 스테아린, 알기네이트, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스, 알기네이트 + 옥수수 전분, 및 알기네이트 + 아크릴 중합체로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
[00257] 구현예 DD에서, 구현예 X 내지 CC 중 어느 하나의 조성물은 약 40wt% 내지 약 95wt%의 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 또는 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물을 포함한다.
[00258] 구현예 EE에서, 구현예 DD의 조성물은 약 2 wt% 내지 약 40 wt%의 안정화제를 포함한다.
[00259] 구현예 FF에서, 구현예 DD의 조성물은 콩 렉틴, 중간-쇄 트리글리세리드, 유장 단백질 농축물, 무지방 분유, 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 추가로 포함한다.
[00260] 구현예 GG에서, 구현예 FF의 조성물은 최대 약 2 wt%의 콩 렉시틴, 최대 약 2 wt%의 중간-쇄 트리글리세리드, 최대 약 2 wt%의 방향제, 최대 약 50 wt%의 유장 단백질 농축물, 최대 약 10 wt%의 무지방 분유, 최대 약 10 wt%의 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 포함한다.
[00261] 구현예 HH에서, 구현예 DD의 조성물은 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율이 약 1:20 내지 약 20:1이다.
[00262] 구현예 II에서, 구현예 DD의 조성물은 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율이 60:40이다.
[00263] 구체예 JJ에서, 구현예 DD 내지 II 중 어느 하나의 조성물은 안정화제가 칼슘 카세이네이트, 나트륨 카세이네이트, 및 초유로부터 단리된 카세이네이트로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
[00264] 구현예 KK에서, 구현예 JJ의 조성물은 약 2 wt% 내지 약 7 wt%의 칼슘 카세이네이트를 포함한다.
[00265] 구현예 LL에서, 구현예 DD 내지 KK 중 어느 하나의 조성물은 조성물이 조성물의 약 50 wt% 내지 약 80 wt%의 총 단백질 함량을 포함한다.
[00266] 구현예 MM에서, 구현예 DD 내지 KK 중 어느 하나의 조성물은 조성물이 조성물의 약 15 wt% 내지 약 60 wt%의 양으로 면역글로불린 G를 포함한다.
[00267] 구현예 NN에서, 투여 형태는 구현예 A 내지 MM 중 어느 하나의 조성물을 포함한다.
[00268] 구현예 OO에서, 구현예 NN의 투여 형태는 상기 형태가 분말, 과립, 정제, 경구 붕해 정제, 캡슐, 내산성 캡슐, 트로키제, 로젠지제, 영양 바, 소프트 츄, 하이드로겔, 젤리, 요구르트, 현탁액 또는 즉석 음료이다.
[00269] 구현예 PP에서, 구현예 NN 내지 LL 중 어느 하나의 투여 형태는 형태가 내산성 캡슐이다.
[00270] 구현예 QQ는 치료가 필요한 대상체에서 위장관의 염증과 연관된 질환 또는 장애를 치료, 완화 또는 예방하는 방법에 관한 것이고, 상기 방법은 상기 대상체에게 조성물을 투여함을 포함하고, 상기 조성물은 a) 치료학적 유효량의 회복 촉진 인자, 면역 인자, 또는 이들의 조합; b) 영양 프로테아제 억제제; 및 c) 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함한다.
[00271] 구현예 RR에서, 구현예 Qq의 방법은 조성물이 추가로 안정화제를 포함한다.
[00272] 구현예 SS에서, 구현예 Rr의 방법은 안정화제가 카세인, 카세이네이트 염, 폴리덱스트로스, 트레할로스, 외인성 초유 지방, 스테아린, 알기네이트, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스, 알기네이트 + 옥수수 전분, 알기네이트 + 아크릴 중합체, 및 이의 조합물이다.
[00273] 구현예 TT에서, 구현예 QQ 내지 SS 중 어느 하나의 방법은 회복 촉진 인자가 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 난 생성물, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 기능식품적으로 허용되는 염 또는 이들의 조합물로부터 선택된다.
[00274] 구현예 UU에서, 구현예 TT의 방법은 초유가 소 초유이다.
[00275] 구현예 VV에서, 구현예 UU의 방법은 소 초유가 탈지 소 초유, 후기 소 초유, 부분 탈지된 소 초유, 소 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 부분 탈지된 소 초유, 전체 소 초유, 또는 이들의 조합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
[00276] 구현예 WW에서, 구현예 TT의 방법은 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질이 상피 성장 인자(EGF), 형질전환 성장 인자 α(TGF-α), 형질전환 성장 인자 β(TGF-β), 인슐린 유사 성장 인자 I(IGF-I) 및 인슐린 유사 성장 인자 II(IGF-II), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 우유 지방구-상피 성장 인자 8(MFG-E8) 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 재조합 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질이다.
[00277] 구현예 XX에서, 구현예 TT의 방법은 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염의 치료학적 유효량은 1일 대상체의 체중 kg 당 0.001 mg 내지 약 10 mg, 약 0.005 mg 내지 약 5 mg, 약 0.01 mg 내지 약 1 mg, 또는 약 20 μg 내지 약 200 μg으로 투여된다.
[00278] 구현예 YY에서, 구현예 TT의 방법은 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염의 치료학적 유효량은 1일 당 0.01 mg 내지 약 500 mg, 약 0.05 mg 내지 약 80 mg, 약 0.1 mg 내지 약 50 mg, 약 0.5 내지 약 10 mg 또는 약 1 mg 내지 약 5 mg으로 투여된다.
[00279] 구현예 ZZ에서, 구현예 QQ의 방법은 면역 인자가 면역글로불린, 사이토킨, 항미생물 펩타이드, 또는 이들의 조합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
[00280] 구현예 AAA에서, 구현예 QQ의 방법은 영양 프로테아제 억제제가 카세인이다.
[00281] 구현예 BBB에서, 구현예 QQ의 방법은 영양 프로테아제 억제제가 영양 트립신 억제제이다.
[00282] 구현예 CCC에서, 구현예 BBB의 방법은 영양 트립신 억제제가 효소 활성 콩 생성물, 오보뮤코이드, 대두 트립신 억제제, 또는 이들의 조합물이다.
[00283] 구현예 DDD에서, 구현예 CCC의 방법은 효소 활성 콩 생성물이 생 콩가루, 생 콩밀, 생 콩 생성물, 최소 가공 대두 생성물, 또는 이들의 조합물이다.
[00284] 구현예 EEE에서, 구현예 QQ 내지 DDD 중 어느 하나의 조성물은 조성물이 약 40wt% 내지 약 95wt%의 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 또는 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물; 및 약 5 wt% 내지 약 25 wt%의 효소 활성 콩 생성물을 포함한다.
[00285] 구현예 FFF에서, 구현예 EEE의 방법은 조성물이 약 5 wt% 내지 약 40 wt%의 안정화제를 포함한다.
[00286] 구현예 GGG에서, 구현예 EEE의 방법은 조성물이 약 5 wt% 내지 약 40 wt%의 카세인을 포함한다.
[00287] 구현예 HHH에서, 구현예 EEE의 방법은 조성물이 약 2 wt% 내지 약 7 wt%의 카세인을 포함한다.
[00288] 구현예 III에서, 구현예 EEE의 방법은 조성물이 추가로 콩 렉틴, 중간-쇄 트리글리세리드, 유장 단백질 농축물, 무지방 분유, 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 포함한다.
[00289] 구현예 JJJ에서, 구현예 EEE의 방법은 조성물이 최대 약 2 wt%의 콩 렉시틴, 최대 약 2 wt%의 중간-쇄 트리글리세리드, 최대 약 2 wt%의 방향제, 최대 약 50 wt%의 유장 단백질 농축물, 최대 약 10 wt%의 무지방 분유, 최대 약 10 wt%의 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 포함한다.
[00290] 구현예 KKK에서, 구현예 EEE의 방법은 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율이 약 1:20 내지 약 20:1이다.
[00291] 구현예 LLL에서, 구현예 EEE의 방법은 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율이 60:40이다.
[00292] 구현예 MMM에서, 구현예 YY 내지 EEE 중 어느 하나의 방법은 조성물이 조성물의 약 50 wt% 내지 약 80 wt%의 총 단백질 함량을 포함한다.
[00293] 구현예 NNN에서, 구현예 EEE 내지 MMM 중 어느 하나의 방법은 조성물이 조성물의 약 15 wt% 내지 약 60 wt%의 양으로 면역글로불린 G를 포함한다.
[00294] 구현예 OOO는 치료가 필요한 대상체에서 위장관의 염증과 연관된 질환 또는 장애를 치료, 완화 또는 예방하는 방법에 관한 것이고, 상기 방법은 상기 대상체에게 조성물을 투여함을 포함하고, 상기 조성물은 a) 치료학적 유효량의 회복 촉진 인자 및/또는 면역 인자; b) 안정화제; 및 c) 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함한다.
[00295] 구현예 PPP에서, 구현예 OOO의 방법은 안정화제가 카세인, 카세이네이트 염, 폴리덱스트로스, 트레할로스, 외인성 초유 지방, 스테아린, 알기네이트, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스, 알기네이트 + 옥수수 전분, 알기네이트 + 아크릴 중합체, 및 이의 조합물이다.
[00296] 구현예 QQQ에서, 구현예 OOO의 방법은 회복 촉진 인자가 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 난 생성물, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질 또는 기능식품적으로 허용되는 염 또는 이들의 조합물로부터 선택된다.
[00297] 구현예 RRR에서, 구현예 QQQ의 방법은 초유가 소 초유이다.
[00298] 구현예 SSS에서, 구현예 RRR의 방법은 소 초유가 탈지 소 초유, 후기 소 초유, 소 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 부분 탈지된 소 초유, 전체 소 초유, 또는 이들의 조합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
[00299] 구현예 TTT에서, 구현예 QQQ의 방법은 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질이 상피 성장 인자(EGF), 형질전환 성장 인자 α(TGF-α), 형질전환 성장 인자 β(TGF-β), 인슐린 유사 성장 인자 I(IGF-I) 및 인슐린 유사 성장 인자 II(IGF-II), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 우유 지방구-상피 성장 인자 8(MFG-E8) 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 재조합 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질이다.
[00300] 구현예 UUU에서, 구현예 TTT의 방법은 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염의 치료학적 유효량은 1일 대상체의 체중 kg 당 0.001 mg 내지 약 10 mg, 약 0.005 mg 내지 약 5 mg, 약 0.01 mg 내지 약 1 mg, 또는 약 20 μg 내지 약 200 μg으로 투여된다.
[00301] 구현예 VVV에서, 구현예 TTT의 방법은 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염의 치료학적 유효량이 1일 당 0.01 mg 내지 약 500 mg, 약 0.05 mg 내지 약 80 mg, 약 0.1 mg 내지 약 50 mg, 약 0.5 내지 약 10 mg 또는 약 1 mg 내지 약 5 mg으로 투여된다.
[00302] 구현예 WWW에서, 구현예 OOO의 방법은 면역 인자가 면역글로불린, 사이토킨, 항미생물 펩타이드, 또는 이들의 조합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
[00303] 구현예 XXX에서, 구현예 QQ 내지 WWW 중 어느 하나의 방법은 질환 또는 장애가 염증성 장 질환, 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID) 위장 장애, 화학치료요법 유발 점막염, 방사선 유발 점막염, 위막성 대장염, 위염, 소화성 궤양, 괴사성 장염, 과민성 장 증후군, 장 누수, 소장 세균 과증식(SIBO), 비궤양성 소화불량 또는 기능성 소화불량이다.
[00304] 구현예 YYY에서, 구현예 XXX의 방법은 염증성 장 질환이 궤양성 대장염, 불확정 대장염, 또는 크론 질환이다.
[00305] 구현예 ZZZ에서, 구현예 QQ 내지 YYY 중 어느 하나의 방법은 조성물이 대상체에서 미엘로퍼옥시다제 수준을 감소시키는데 효과적이다.
[00306] 구현예 AAAA에서, 구현예 QQ 내지 YYY 중 어느 하나의 방법은 조성물이 위액 또는 하이드로클로라이드/펩신 소화 및 키모트립신/트립신 소화를 받을 때 동일한 조건하에서 회복 촉진 인자 또는 면역 인자 단독의 활성과 비교하여 회복 촉진 인자 또는 면역 인자의 활성을 유의적으로 보존하는데 효과적이다.
[00307] 구현예 BBBB에서, 구현예 QQ 내지 YYY 중 어느 하나의 방법은 방법이 유효량의 하나 이상의 추가 활성제를 대상체에게 동시 투여하는 것을 추가로 포함한다.
[00308] 구현예 CCCC에서, 구현예 QQ 내지 BBBB 중 어느 하나의 방법은 대상체가 신생아가 아닌 사람 대상체이다.
[00309] 구현예 DDDD는 대상체에서 백신접종 항체 역가를 증진시키는 방법에 관한 것이고, 상기 방법은 a) 치료학적 유효량의 조성물을 대상체에게 경구 투여하는 단계로서, 상기 조성물이 i) 회복 촉진 인자, 면역 인자, 또는 이들의 조합물; ii) 영양 프로테아제 억제제; iii) 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제; 및 iv) 임의로 안정화제를 포함하는, 단계; 및 b) 상기 대상체에게 백신을 투여하는 단계를 포함한다.
[00310] 구현예 EEEE에서, 구현예 DDDD의 방법은 백신이 COVID-19 백신, 인플루엔자 백신, 뉴모코커스성 백신, 파상풍 백신, 파상풍-디프테리아-백일해 백신, 홍역-볼거리-풍진 백신, 사람 파필로마바이러스 백신, A형 간염 백신, B형 간염 백신, 메닌고코커스성 백신, 헤모필러스 인플루엔자 b형 백신, 또는 조스터 백신이다.
[00311] 구현예 FFFF에서, 구현예 DDDD의 방법은 백신이 수의학 백신이고, 임의로, 상기 수의학 백신이 홍역 백신, 광견병 백신, 파보바이러스 백신, 조류 인플루엔자 백신, 말 웨스트 나일 바이러스 백신, 말 인플루엔자 바이러스 백신, 고양이 백혈병 바이러스 백신, 림프구성 맥락수막염 바이러스 백신, 소 바이러스 설사 바이러스 백신, 고양이 면역결핍 바이러스 백신, 돼지 헤르페스 바이러스 백신, 구제역 바이러스 백신, 소 헤르페스 바이러스-1 관련 질환 백신 또는 뉴캐슬 질환 바이러스 백신이다.
[00312] 구현예 GGGG에서, 식이 보충물은 구현예 A 내지 MM 중 어느 하나의 조성물을 포함한다.
[00313] 구현예 HHHH는 정제된 락토페린, 안정화제 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물에 관한 것이다.
[00314] 구현예 III에서, 구현예 HHHH의 조성물은 안정화제가 카세인, 카세이네이트 염, 폴리덱스트로스, 트레할로스, 외인성 초유 지방, 스테아린, 알기네이트, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스, 알기네이트 + 옥수수 전분, 알기네이트 + 아크릴 중합체이다.
[00315] 본 명세서에 인용된 모든 특허, 특허 간행물 및 동료 심사 간행물(즉, "참고문헌")은 각각의 개별 참고문헌이 참조로 포함되는 것으로 구체적이고 개별적으로 표시된 것과 동일한 정도로 참조로 명시적으로 포함된다. 본원 개시내용과 인용된 참고문헌 사이에 상충되는 경우, 본원 개시내용이 우선한다.
실시예
실시예 1. 영양 세린 프로테아제 억제제는 회복 촉진 인자의 성장 인자 활성을 안정화시킨다.
[00316] 상기 일련의 실험에서는 영양 프로테아제 억제제인 오보뮤코이드(난에 존재) 또는 대두 트립신 억제제(SBTI, 콩 유래)를 투여하면 췌장 효소로 인해 소 초유(BC) 및/또는 난에 존재하는 성장 인자 생물학적 활성의 파괴를 감소시킬 수 있는지의 여부가 조사되었다. 또한, BC에 존재하는 성장인자의 예로서 재조합 상피성장인자(EGF)를 사용하는 경우 증식성 생활성이 보존될 수 있는지를 조사하였다. 생체 내 래트 DSS 유발된 대장염 모델을 사용하여 단독 투여된 오보뮤코이드 또는 SBTI가 (내인성 관강 성장 인자 보존을 통해) DSS 유발 손상을 줄일 수 있는지 여부와 경구 투여된 BC ± 난 또는 EGF의 보호 효과를 증진시킬 수 있는지 여부를 조사하였다.
재료 및 방법
[00317] 저온 살균된 BC 분말과 상업용 닭 전체 난 분말은 제조사(Pantheryx Inc.(Boulder, CO, USA)에 의해 제공되었다. 초유 분말은 분만 후 첫 24시간 이내에 수거되었고 후속 분말은 분말 100g당 단백질 48.32g, 지방 16.25g, 탄수화물 24.53g, 수분 4.5g 및 회분 6.4g을 포함하였다. 난 분말은 100g당 단백질 50.45g, 지방 42.71g, 탄수화물 1.25g, 수분 1.72g, 회분 3.87g을 포함하였다. BC+난 조합은 40:60의 wt 비율로 사용되었다.
[00318] 다른 펩타이드의 공급원은 다음과 같다: 사람 EGF (Peprotech, New Jersey, USA), SBTI (Roche, California, USA), 오보뮤코이드 (Sigma, USA), 및 BSA (Sigma). AGS 세포주는 54세 연령의 여성의 위선암종으로부터 유래되었다(ATCC, LGC Standards, UK).
[00319] 연구 1. 시험관내에서 성장 인자 보존에 대한 프로테아제 억제제의 효과.
[00320] 샘플의 소화
[00321] 위와 소장 내에서 펩타이드의 관내 노출을 재현하기 위해 도 1a에 나타낸 프로토콜을 사용하여 HCl/펩신 단독(1시간) 또는 HCl/펩신(1시간)에 노출시킨 후 키모트립신 및 트립신 노출(1시간) 후 샘플을 소화되지 않은 상태로 시험하였다. 간단히 말해서, BC 단독(400 mg), 난 단독(400 mg), BC + 난(60:40 비율로 총 중량 400 mg) 및 EGF(100 ug)의 분취량을 오보뮤코이드(500mg) 또는 SBTI(1g)의 존재 또는 부재하에 PBS 10ml에 구성하였고, 펩신, 키모트립신 또는 트립신(비소화 대조군)을 첨가하지 않고 37oC에서 항온처리하거나 회전식 항온처리기에서 37oC에서 1시간 동안 pH2의 펩신(1mg/ml)으로 항온처리한 후 NaOH를 사용하여 pH 7로 중화시킨다. 이어서 분취량의 절반을 제거하고(펩신 소화 샘플) 나머지를 키모트립신 및 트립신(1mg/ml)에서 1시간 동안 항온처리하였다(키모트립신/트립신 소화 샘플). 추가 샘플에서는 오보뮤코이드 또는 SBTI 단독의 소화 민감성을 조사하였다. 모든 샘플을 이어서 동일한 검정에서 증식성 생활성에 대해 분석하였다.
[00322] 증식 검정
[00323] 제조사의 지침에 따라 Alamar blue (Invitrogen, Paisley, UK)를 사용하여 세포 증식 검정을 수행하였다. 간략하게, 세포를 2000개 세포/웰로 씨딩하고, 96웰 플레이트에서 DMEM 배지 및 10% FCS에서 밤새 성장시켰다. 다음날, 세포를 무혈청 배지(SFM)로 세척하고 SFM 단독(음성 대조군)으로 항온처리하거나, 동일한 최종 농도로 희석된 소화되지 않거나 소화된 샘플의 존재하에 항온처리하였다. BC±난 구성성분을 1 mg 분말/ml, 1.25 mg/ml에서 오모뮤코이드, 0.25 ug/ml에서 EGF 및 2.5 mg/mL에서 SBTI에서 시험하였다. 이들 농도는 예비 용량 반응 비교를 기준으로 하였다.
[00324] 결과
[00325] 연구 1. 시험관내에서 성장 인자 보존에 대한 프로테아제 억제제의 효과.
[00326] 소 초유(BC) 단독 또는 난 단독 사용에서도 유사한 결과가 나타났고; HCl/펩신에 대한 노출은 생활성을 약 50% 감소시켰고, CT 노출 후 추가로 15% 감소하였다(도 1b). 오보모코이드 또는 SBTI의 동시 존재는 HCl/펩신 감수성에 영향을 미치지 않았지만 CT 소화를 약 80%까지 감소시켰다(모두 P<0.01). BC+난은 개별 인자 단독을 항온처리함으로써 HCl/펩신 및 CT 소화에 대해 유사한 감수성을 보여주었다. SBTI의 동시 존재는 소화성 HCl/펩신 감수성에 영향을 미치지 않았지만 CT 민감성을 감소시켰다. 오보뮤코이드의 동시 존재는 둘다를 감소시켰다. 영양 프로테아제 억제제 오보뮤코이드 또는 SBTI는 BS, 난, 또는 Bc+난의 증식성 활성을 CT 소화로부터 유의적으로 보호하였다. 오보뮤코이드는 또한 P 소화로부터 BC+난의 증식 활성을 상당히 보호하였다.
[00327] HCl/펩신과 함께 단독으로 항온처리된 EGF는 생활성의 76% 감소를 야기하였고, CT와 함께 항온처리 후 추가로 20% 감소하였다(도 1c). 오보뮤코이드의 동시 존재는 HCl/펩신 감수성에 영향을 미치지 않았지만 CT로 인한 생활성 손실을 유의적으로 감소시켰다. SBTI의 동시 존재는 HCl/펩신과 CT의 생물학적 활성 손실을 모두 감소시켰다. SBTI 단독은 단독으로 주어진 경우 증식을 자극하지 않았다. 오보뮤코이드 단독으로 증식을 자극했지만 이는 HCl/펩신 소화 후에 완전히 소실되었다. 영양 프로테아제 억제제인 오보뮤코이드 또는 SBTI는 P 및 CT 소화 둘다로부터 EGF의 증식 활성을 유의적으로 보호하였다.
[00328] 연구 2. 래트 DSS 대장염 모델
[00329] 동물 연구는 상업용 시험 시설의 표준 작동 절차 및 라이선스, 세계보건기구(WHO)의 기초 생물 의학 연구 품질 관행 지침에 따라 미국 콜로라도주 볼더에 있는 BolderBiopath 실험실 내에서 수행되었고 USDA 동물 복지법 9 CFR 파트 1-3(연방 등록 39129, 1993년 7월 22일)을 포함하는 모든 주 및 연방 규정을 준수하였다.
[00330] 암컷 스프라그-돌리(Sprague-Dawley) 래트(174~204g)를 제조사(Envigo RMS, Inc.(Indianapolis, USA))에서 구입하여 표준 케이지(케이지당 5마리)에 수용하고 Envigo Teklad 8640 사료와 수돗물을 자유롭게 공급하였다. 래트 덱스트란 설페이트 나트륨 (DSS) 대장염 모델을 위해 사용되는 방법은 문헌(참조: Playford, R.J., et al. “Pasteurized Chicken Egg Powder Stimulates Proliferation and Migration of AGS, RIE1, and Caco-2 Cells and Reduces NSAID-Induced Injury in Mice and Colitis in Rats,” The Journal of Nutrition, 2020, 150, 1434-1442)에 기재된 바와 같다. 8개 그룹을 시험하였다(그룹 당 N=10). 모든 래트에는 9일 동안 매일 단일 1ml 경구 위관 영양법(위산도를 중화하기 위해 3% 중탄산나트륨으로 구성)을 받도록하였다. 음성 대조군은 DSS를 받지 않았지만 소 혈청 알부민(20 mg/kg, BSA)을 매일 위관 영양법을 받도록하였다. 양성 대조군은 DSS 및 20 mg/kg의 BSA와 함께 위관 영양법을 받도록 하였다. 나머지 6개 그룹에는 BC + 난(40:60 비율, 20 mg/kg), EGF (100 μg/용량), 오보뮤코이드 (5000 μg/용량), 또는 SBTI (10.8 mg/용량) 단독을 투여하였다. 최종 2개 그룹은 EGF+SBTI 또는 BC+난 + 오보뮤코이드의 조합을 포함하였다. 이들 그룹은 BC+난에 대한 오보뮤코이드와 EGF에 대한 SBTI에서 최적의 보호 효과가 나타났기 때문에 연구 1의 결과를 기반으로 선택되었다.
[00331] 대장염은 시험 제품 영양 위관법 기간의 3일째부터 시작하여 7일 동안 식수에 5%(w/v) DSS(분자량, 40-50 kDa; Spectrum, 카탈로그 번호 DE136, 로트 번호. 1IG1103)를 첨가하여 유발하였다. 평균 DSS 및 음식 소비는 매일 케이지 당 기록하였다. 래트의 체중을 매일 측정하고 고통, 설사 및 직장 출혈의 징후가 있는지 육안으로 검사하였다. 질환 활성 지수 (DAI, 문헌(참조: Cooper, H.S., et al.“Clinicopathologic Study of Dextran Sulfate Sodium Experimental Murine Colitis,” Lab Invest, 1993, 69, 238-49)을 기준으로)는 대장염 유도 후 매일 평가하였다. DAI는 체중 감소, 대변의 일관성, 출혈 점수를 합산하여 3으로 나눈 값이다. 이어서 7일의 DSS 치료 기간에 걸쳐 누적 스코어를 결정하였다.
[00332] 연구 말기에 래트를 희생시키고 생화학적 및 조직병리학적 평가를 위해 결장 조직을 수거하였다. 미시적 손상은 문헌(참조: Williams, K.L. et al., “Enhanced Survival and Mucosal Repair after Dextran Sodium Sulfate-Induced Colitis in Transgenic Mice that Overexpress GrowthHhormone,” Gastroenterology, 120, 925-37 (2001))에 기재된 스코어링 시스템을 사용하여 평가하였다. 총 조직학적 대장염 스코어는 i) 염증 중증도, ii) 염증 정도, iii) 크립트 손상 및 iv) 침범 퍼센트의 4개 서브스코어의 합으로부터 유래한다. 조직은 또한 미엘로퍼옥시다제 (MPO) 활성 (호중구 침윤의 마커로서 사용되는).
[00333] 통계
[00334] 모든 결과는 평균 +/- SEM으로서 표현한다. 통계는 Graphpad Prism 8 버전 8.3.1을 사용하여 수행하였다. 샤피로 윌크스(Shapiro Wilks) 시험을 사용하여 데이터의 정규성에 대한 시험은 그룹 간에 균등한 분산을 보여주었다. 증식 및 생체내 연구는 일원 분산 분석(ANOVA)을 사용하여 분석하였다. 유의적인 효과가 나타난 경우(P<0.05), 반복 측정 분석과 동등한 방법인 ANOVA에서 수득된 그룹 평균, 잔류, 자유도를 바탕으로 한 t 시험을 이용하여 개별 비교를 수행하였다.
[00335] 결과
[00336] 연구 2: 래트 DSS 대장염 모델.
[00337] DSS를 투여받지 않은 래트는 9일 동안 총 체중이 11.8 +/- 1.9g 증가한 것으로 나타났다(도 3a). 대조적으로, DSS만을 투여받은 동물은 동일한 기간 동안 현저한 체중 감소(-10.2 +/- 1.5g)(DSS를 투여받지 않은 것과 비교하여 P< 0.01)를 보여주었다. DSS 처리된 동물에 오보뮤코이드 단독 투여는 체중 감소에 유의적인 영향을 미치지 않은 반면, BC+난은 DSS에 의해 유도된 체중 감소를 유의적으로 줄였다(DSS 단독에 비해 P<0.01). 체중에서 가장 큰 개선은 BC+난 + 오보뮤코이드를 함께 투여받은 동물에서 나타났다(P<0.01). 단독으로 투여받은 EGF 또는 SBTI는 DSS에 의해 유도된 체중 감소에 영향을 미치지 않았다. 대조적으로, EGF+SBTI의 조합은 DSS 단독에 비해 체중의 현저한 개선을 보여주었다(P<0.01).
[00338] 누적 질환 활성 지수(DAI) 스코어의 분석은 도 3b에 도시되어 있고 동물의 체중 변화에 따라 나타난 것들과 유사한 결과를 제공하였다. 단독으로 투여받은 오보뮤코이드는 DAI 스코어에 영향을 미치지 않았다. BC+난을 사용하여 이로운 효과가 나타났고, BC+난+오보뮤코이드의 조합을 사용하여 최상의 결과가 나타났다(DSS 단독 또는 DSS 처리 동물의 BC+난 대비 P<0.01). 단독으로 투여받은 EGF 또는 SBTI는 DAI에서 DSS 유도된 변화에 영향을 미치지 않은 반면 이의 조합은 DAI 스코어를 유의적으로 감소시켰다(P<0.01).
[00339] 도 2c에 도시된 바와 같은 미엘로퍼독시다제(MPO) 분석으로부터의 결과는 체중 변화와 DAI 스코어를 유지하였다. MPO는 호중구 침윤의 마커이고 면역 활성화 또는 감염을 나타낼 수 있다. DSS 단독의 투여는 결장 MPO에서 13배 증가를 유발하였다. DSS 처리된 동물에게 오보뮤코이드 단독 투여는 MPO 수준을 개선시키지 못한 반면, BC+난은 DSS에 의해 유발된 MPO 농도의 상승을 줄였다(P<0.01). BC+난이 오보뮤코이드와 함께 동시-투여된 경우 추가적인 이득이 나타났다(DSS 단독, DSS+오보뮤코이드 또는 DSS+BC+난 대비 P<0.01). 단독으로 투여받은 EGF 또는 SBTI는 MPO에서 DSS 유도된 변화를 미치지 않은 반면 이의 조합은 MPO 수준을 유의적으로 감소시켰다(P<0.01).
[00340] 형태학은 정상(DSS 없음) 대조군과 비교하여(도 3a), DSS 투여가 염증 세포의 주요 침윤과 결합된 정상적인 크립트 구조의 거의 완전한 손실을 야기했음을 보여주었다(도 3b). 오보뮤코이드 단독(도 3c), SBTI(도 3d) 또는 EGF 단독(도 3g)을 사용한 치료는 DSS의 손상 효과에 영향을 미치지 않았다. BC+난을 투여받은 동물에서는 염증성 침윤이 덜 뚜렷하고 크립트 구조가 부분적으로 유지되는 개선이 나타났다(도 3e). BC+난+오보뮤코이드(도 3f) 또는 EGF+SBTI(도 3h)의 조합을 투여받은 동물은 최소한의 염증성 침윤 및 크립트 구조의 유지로 주요 개선을 보여주었다. 공식적인 조직학적 스코어링(도 2d)은 형태학에서 나타난 것과 유사한 결과를 보여주었고; 오보뮤코이드 단독, SBTI 단독 또는 EGF 단독 사용에서는 이로운 효과가 발견되지 않았다. BC+난(DSS 단독 대비 P<0.05)을 사용하면 상당한 개선이 나타났고, BC+난+ 오보뮤코이드 또는 EGF+ SBTI(DSS 단독 대비 P<0.01)를 투여받은 동물에서 가장 큰 개선이 나타났다.
[00341] 본 실시예는 본원 개시내용의 조성물 및 방법이 NSAID 유발 소장 손상(산 억제제는 SI 손상에 영향을 미치지 않기 때문에), UC(결장 손상) 및 크론 질환(주로 말단 소장에 영향을 미치는)을 포함하는 다중 GI 병태에 대한 가치를 가질 수 있다는 결론을 뒷받침한다.
실시예 2. 초유를 갖는 효소 활성 콩가루는 질환 활성 지수를 상승작용적으로 감소시키고 생체 내 결장 염증 활성을 감소시킨다.
[00342] 마우스에서 덱스트란 나트륨 설페이트(DSS)로 유발된 대장염의 동물 모델을 사용하여 질환 활성 지수(DAI)에 대한 초유 및/또는 콩 가루의 효과를 결정하고 시험 생성물 9일 후 DAI 스코어를 결정하였고, 7일동안 DSS(3일차부터 개시하여)로 대장염을 유발하였다. 상기 검정에서 초유는 60-20 탈지 1차 초유(APS 60-20I 탈지 초유 분말, APS BioGroup)이고 콩은 효소 활성 전지방 생 밀가루(EASY100, Natural Products, Inc., Grinnell, Iowa)였다.
[00343] 상기 검정에서는 정상(대조군), DSS 단독(대장염 유발) 및 20mg/kg 및 7mg/kg 용량의 표준 초유(C7)를 투여받은 마우스에 대해 질환 활성 지수(DAI) 스코어를 측정하여 용량 반응을 보여준다. 콩가루 단독(C17)은 0.7 mg/kg 및 2 mg/kg에서 시험하였다. 동일한 용량(7 및 20 mg/kg에서 C12)으로 10% 콩가루를 함유한 초유의 혼합물을 시험하였다. 결과는 도 5a 내지 도 5c에 나타낸다. 도 5a는 DSS와의 동시 치료 7일에 걸친 총 체중 증가를 보여준다. 도 5b는 누적 질환 활성 지수(DAI) 스코어를 보여주고, 도 5b는 최종 DAI를 보여준다. 도 5c의 y축은 질환 활성 지수 스코어(동물 건강의 표준 측정)이다. DSS로 처리하면 7일 DSS 처리 동안 마우스의 체중 증가가 극적으로 느려졌다(도 5a). 초유 조성물(C7) 및 초유 + 콩가루 조성물(C12) 모두 DSS 유도된 체중 증가 감소를 구제할 수 있었다. 놀랍게도, C12 조성물은 동등한 초유 용량에서 C7 조성물보다 훨씬 더 양호한 성능을 수행하였다. 누적 DAI 스코어 및 최종 DAI와 관련하여 놀랍게도 10% 콩가루을 함유한 초유 혼합물(C12 6.3mg/kg 초유 + 0.7mg/kg 콩가루)의 저용량이 도 5a 및 5b에 나타낸 바와 같이 고용량만큼 효과적이고 초유 C7 단독의 고용량(초유 20 mg/kg)만큼 효과적이다. 따라서 초유 단독 사용보다 조합으로 사용 시 효능이 3배 더 높았다(C12 7mg/kg 대 C7 20mg/kg)($$ 기호가 있는 통계 참조, P < 0.05). C17 컬럼은 초유 + 대두 조합(즉, 0.7 및 2 mg/kg)과 동일한 양의 대두 단독(C17)을 제공하고 DSS로 인한 체중 증가 감소 또는 DAI 평가를 방지하는 데 실제 효과가 없음을 보여주었다. 따라서 초유 + 10% 콩가루 조합의 상승작용 반응은 체중 증가 및 질환 활성 지수(DAI) 스코어와 관련하여 입증된다.
[00344] 마우스의 결장 조직에서 미엘로퍼옥시다제(MPO) 활성도 염증의 지표로 측정되었다. 도 6a에 나타낸 바와 같이. C7(초유 단독)은 염증 감소 능력(MPO 수준)에 대한 용량 반응을 보여준다. C17 콩만으로는 효과를 보여주지 않는다. C12 초유 + 콩은 7 mg/kg의 복합 용량이 초유 단독 20 mg/kg만큼 효과적이므로 상당히 개선된 효과, 즉 3배 증진된 효과를 보여준다. 따라서 상승작용 반응은 영양 세린 프로테아제 억제제(효소 활성 콩가루)와 함께 회복 촉진 인자(초유)를 사용할 때 결장 염증 활성 감소와 관련하여 상승작용 반응이 입증되었다.
[00345] 도 6b는 동일한 변수 및 통계와 함께 도 6a의 DSS 유발 대장염 모델에서 결장당 조직학적 스코어의 막대 그래프를 보여준다. 어떤 DSS도 정상적인 조직학을 나타내지 않고 예상된 바와 같이 손상 스코어가 0이다. DSS만으로는 정상 구조의 사실상 완전한 손실과 염증 세포의 주요 유입을 보여준다. 이것은 그래프 상의 높은 스코어를 제공한다. C17(콩 단독)은 조직학 또는 조직학 스코어링에 대한 손상을 개선하지 않는다. C7 초유 단독은 조직학 스코어링 그래프에 반영된 바와 같이 7 mg/kg 용량에서 약간의 개선과 20 mg/kg 투여 시 더 큰 개선으로 양호한 용량 반응을 보여준다. C12 초유 + 대두는 7mg/kg과 20mg/kg 둘다 매우 양호한 보호 효과를 보여 외관이 훨씬 개선되었다. 공식 스코어링은 7mg/kg 및 20mg/kg 용량 둘다 DSS 단독에 비해 상당히 개선된 스코어를 제공했음을 보여준다. 7mg/kg 조합의 용량은 20mg/kg 초유 단독과 유사한 외관을 나타냈고, 따라서 중량/중량 기준으로 생활성이 대략 3배 증가함을 보여준다. 이들 발견은 도 6a에 나타낸 MPO의 결과와 일치한다.
[00346] DSS-유발 대장염 모델의 대표적인 현미경 사진은 도 7a 내지 도 7g에 도시되어 있다. 도 7a는 조직학이 정상이고 예상대로 손상 점수가 0인 DSS 부재 대조군에 대한 DSS 유발 대장염 모델에서 마우스 결장 조직의 대표적인 현미경 사진을 보여준다. 도 7b는 사실상 정상적인 구조의 완전한 손실 및 염증 세포의 주요 유입을 나타내는 DSS 단독에 대한 DSS-유발 대장염 모델에서 마우스 결장 조직의 대표적인 현미경 사진을 보여준다. 도 7c는 7 mg/kg 용량의 DSS + C7 초유에 대한 DSS 유발 대장염 모델에서 마우스 결장 조직의 대표적인 현미경 사진을 보여주고 일부 개선을 보여준다. 도 7d는 20 mg/kg 용량의 DSS + C7 초유에 대한 DSS 유발 대장염 모델에서 마우스 결장 조직의 대표적인 현미경 사진을 보여주고 7 mg/kg의 용량 보다 큰 개선을 보여준다. 도 7e는 C12 초유 + 대두에 대한 DSS 유발 대장염 모델에서 쥐의 결장 조직의 대표적인 현미경 사진을 보여주고, 7 mg/kg에서 매우 개선된 외관을 제공하는 매우 양호한 보호 효과를 보여준다. 도 7f는 C12 초유 + 대두에 대한 DSS 유발 대장염 모델에서 마우스의 결장 조직의 대표적인 현미경 사진을 보여주고, 20 mg/kg에서 매우 개선된 외관을 제공하는 매우 양호한 보호 효과를 보여준다. 도 7g는 C17(콩 단독)에 대한 DSS-유발 대장염 모델에서 마우스 결장 조직의 대표적인 현미경 사진이 DSS 단독에 비해 조직학 또는 조직학 스코어링에 대한 손상을 개선하지 않음을 보여준다.
실시예 3. 대두 트립신 억제제 활성 검정
[00347] 콩 생성물에서 트립신 억제제 활성 (TIA)을 결정하기 위해, 대두 트립신 억제제 검정은 문헌(참조: Liu, K., “Soybean Trypsin Inhibitor Assay: Further Improvement of the Standard Method Approved and Reapproved by American Oil Chemists’ Society and American Association of Cereal Chemists International,” J Am Chem Soc, 96:635-645 (2019))의 방법에 따라 수행될 수 있다.
[00348] 재료
[00349] 결정질 소 트립신(필수적으로 무염, 동결건조 분말), 합성 기질 N-α-벤조일-DL-아르기닌-p-니트로아닐리드 하이드로클로라이드(DL-BAPA), 트리스 염기(히드록시메틸) 아미노메탄 및 염화칼슘 탈수화물을 제조사(Sigma-Aldrich(St. Louis, MO, USA))로부터 구입한다. 탈이온수는 검정 전반에 걸쳐 사용되었다.
[00350] 시약
[00351] 검정 완충액(50mM Tris 완충액, pH 8.2, 20mM CaCl2 함유)은 6.05g Tris 염기와 2.94g 염화칼슘 이수화물을 900mL 물에 용해시키고 pH 8.2로 조정하고 1000mL로 희석하여 제조한다. 검정 완충액은 BAPA 작동 용액을 제조하기 위해 사용된다. HCl 용액 (1 mM, 5 mM CaCl2 함유)은 트립신 스톡 및 작동 용액을 제조하기 위해 사용된다. 트립신 반응을 멈추는 데 사용되는 아세트산 용액(30%v/v)은 빙초산 30mL와 물 70mL를 혼합하여 제조한다. BAPA 스톡 용액 (40 mg mL-1): 400 mg의 DL-BAPA를 10 mL의 디메틸 설폭사이드 중에 용해시킨다. 용액은 실온에서도 매우 안정하다. BAPA 작동 용액 (0.4 mg mL-1): 37°C에서 예비가온된 검정 완충액을 사용하여 0.5 mL의 BAPA 스톡 용액을 50 mL의 총 용적으로 희석시킨다. 새로운 BAPA 작동 용액은 TIA 검정을 위해 매일 제조한다. 트립신 스톡 용액 (0.2 mg mL-1): 50 mL의 상기 HCl 용액, pH 약 2.5 중에 10 mg의 소 트립신을 용해시킨다. 용액은 5°C에서 유지한다. 트립신 작동 용액 (20 μg mL-1): HCl 용액을 사용하여 2.5 mL의 트립신 스톡 용액을 25 mL로 희석시킨다.
[00352] 콩가루, 농축물 또는 단리물과 같은 콩 생성물 샘플을 미국 표준 100 체(직경 150um 체 구멍과 동등한)를 통과한다. 낮은 설정에서 자기 교반기를 사용하여 비이커내 10mM NaOH 50.0mL로 시료 1g을 1시간 동안 추출한다. 생 대두, 삶아 오븐에 구운 대두의 경우 커피 분쇄기로 갈아서 미국 표준 No. 50 체(직경 300um 체 구멍)를 통과시킨 후 상기와 같이 3시간 동안 추출할 수 있다. 샘플 현탁액은 희석된 샘플 2.0mL가 블랭크 판독 보정 후 트립신 억제를 30~70% 유발하도록 희석한다.
[00353] 시험 튜브 세트(예를 들어, 16mL 원심분리 튜브)에서, 하기의 순서에 따라 시약을 첨가한다: 희석 콩 추출물(2mL, mg/mL 단위로 다양함), DL-BAPA(5mL, 0.4mg/mL) 및 트립신(2mL, 20ug/mL). 전체 검정은 37°C에서 수조에서 수행한다. 즉시 혼합하면서 트립신 용액을 첨가한 후 정확히 10분 후에 30% 아세트산 용액 1.0mL를 첨가하여 발색 반응을 중단한다. 혼합물은 세정을 위해 원심분리하거나 여과한다. 410 nm에서의 샘플 판독값(A410S)에 대한 흡광도는 샘플 억제제 존재 하의 트립신 활성의 척도이다. 동시에, 반응은 또한 샘플 추출물을 동일한 양의 물로 대체하여 억제제 없이 수행한다. 상응하는 흡광도는 A410R로 기호화된 참조 판독값(일부 다른 문헌에서는 표준 판독값이라고도 함)이다. 또한 샘플 판독을 위한 시약 블랭크(샘플 블랭크, A410SB로 공지된) 및 참조 판독을 위한 시약 블랭크(참조 블랭크, A410RB로 공지된)도 트립신 용액 전에 아세트산 용액을 첨가하여 수행한다. 모든 흡광도 판독을 위해, 탈이온수는 참조로서 사용하였다. 샘플 판독 및 참조 판독은 2회 수행한다.
[00354] TIA 값의 계산은 10mL 검정 조건 하에서 수행될 수 있고, 여기서 트립신 유닛(TU)은 410nm에서 0.01 흡광도의 증가로 정의된다. 트립신 억제 활성은 샘플 mg당 억제된 트립신 유닛(TUI) 또는 트립신 억제제 유닛(TIU)으로 표시되고 다음과 같이 계산된다. 샘플 mg 당 TUI = {[(A410R-A410RB)-(A410S-A410SB× 100] ×mL 희석된 콩 추출물}/(검정을 위해 사용되는 mL 희석된 콩 추출물 당 샘플 mg).
[00355] 다수의 콩 생성물에서 전형적인 트립신 억제제는 문헌(참조: Liu 2019)에 의해 결정되었고, 다음과 같이 1 TU =0.01 A410이다. 대두 (원료) 46.84 ±0.06 TUI/샘플 mg; 콩가루 (효소 활성, 전체 지방) 48.24 ±0.14 TUI/샘플 mg; 콩가루 (탈지된, PDI =90) 65.70±0.14 TUI/샘플 mg; 콩가루 (탈지된, PDI =70) 49.46 ±0.17 TUI/샘플 mg; 콩가루 (저지방) 34.28 ±0.19 TUI/샘플 mg; 대두 (오븐으로 구운) 6.30 ±0.22 TUI/샘플 mg; 대두 (비등된) 3.18 ±0.18 TUI/mg 샘플; 콩가루 (구운, 전체 지방) 9.68 ±0.32 TUI/샘플 mg; 콩가루(탈지된, 구운, PDI=20) 11.99 ±0.23 TUI/샘플 mg; 콩 단백질 농축물 9.46 ±0.20 TUI/샘플 mg; 콩 단백질 단리물 8.03 ±0.36 TUI/샘플 mg. PDI = 단백질 분산도 지수. TUI = 억제된 트립신 유닛.
[00356] 일부 구현예에서, 효소 활성 콩 생성물은 본 실시예 3 또는 Liu 2019의 방법에 따라 검정할 때 10 TUI/mg 초과, 20 TUI/mg 초과, 30 TUI/mg 초과, 또는 40 TUI/mg 초과의 트립신 억제제 활성을 갖는다. 일부 구현예에서, 콩 생성물은 AOCS 표준 절차 Ba 10b-09에 따라 시험되는 경우 50 초과, 60 초과 또는 70 초과의 PDI를 갖는다.
실시예 4. 프로토타입 초유 조성물
[00357] 초응집, 마이크로캡슐화 또는 매트릭스 안정화를 위한 다양한 안정화제를 사용하여 프로토타입 안정화된 초유 조성물을 제조하였다. AOAC 932.06에 따라 총 지방이 1.8%, AOAC991.20에 따라 단백질(건조 기준)이 64%, AOAC 2010.01에 따라 IgG(HPLC) 단백질 G(건조 기준)가 31.6%인 대조군 조성물 A1에 상업용 6020I(인스턴트화된) 소 탈지 초유가 사용되었다. 다양한 추가 성분과 함께 동일한 초유를 활용한 프로토타입 조성물은 각각 표 2-4에 나타낸다.
[00358] 표 2에 나타낸 A2-A8 프로토타입은 초유를 처리하는 데 사용되는 정상적인 응집 단계를 변형시킴에 의해 만들어졌다. 응집 공정은 액체에 빠르게 용해될 수 있도록 입자 크기 점도를 보장하기 위해 인스턴스화하기 위해 수행된다. 응집 공정은 미세한 초유 분말을 분무 건조기 노즐을 통해 들어오는 액체 초유로 다시 전달하는 분무 건조기 공정으로 시작된다. 액체는 분말의 첫 번째 통과를 생성하는 노즐을 통해 건조 챔버로 전달된다. 이어서 해당 미세분은 백하우스 챔버에 수거되어 입자 크기가 유동층(FB)에 떨어질 수 있을 만큼 커질 때까지 분무 스트림으로 다시 전달된다. 이어서 FB는 수분을 줄이고 필요한 임의의 코팅, 예를 들어, 렉시틴, MCT 등을 첨가하기 위해 사용된다. 1X는 전형적인 응집량이다.
표 2. 초응집물 초유 조성물
ND = 결정되지 않음
[00359] 표 3에 나타낸 B1-B21 프로토타입은 분말 초유를 유동층 장치에 현탁시키고 해당 장치에서 시판되는 코팅 재료가 특정 중량%로 분사되어 제조되었다. 선택된 B 프로토타입을 스크리닝하고 입자 크기를 결정하였다. B 프로토타입 B5, B10, B16, 및 B21은 149-594 um 직경 범위의 입자 크기를 갖는다.
표 3. 마이크로캡슐화된 초유 조성물
[00360] 표 4에 나타낸 C1-C13 프로토타입은 사후 균질화된 초유에 첨가제를 혼합한 다음 분무 건조하였다. 각각의 첨가제에 대해 시험된 3개의 상이한 내포율이 있다.
표 4. 매트릭스 안정화 초유 조성물
[00361] 표 2-4의 프로토타입 조성물은 도 1a에 개괄된 소화 공정 프로토콜에 적용되었다. 증식 검정(% 소화되지 않은 대조군), EGF(ng/ml) 및 TGF 베타(pg/ml)로서 및 TGF 베타(pg/ml)로서의 성장 인자 구조적 안정성, 이. 콜라이 결합(A450 nm에서의 흡광도)으로서 시험관내 면역 인자 활성 검정, 및 IgG(ug/ml) 및 락토페린(ng/ml)으로서 면역 인자 구조적 안정성에 대한 각 프로토타입 조성에 대한 분석 결과의 수치 히트 맵은 표 9 및 표 10에 나타낸다. 도 1d 및 도 1e, 및 도 2a 내지 도 2d는 선택된 조성물을 그래프로 나타낸다. 도 1d 내지 도 2d의 각 조성에 대해, 언급된 조합 생성물은 10%로 포함된다. 따라서, “BC + 스테아린”은 BC + 10% 스테아린에 상응한다.
[00362] 트레할로스, 스테아린, 카세인 및 콩꽃을 각각 BC의 시험관내 안정성에 영향을 미치는 이들의 능력에 대해 평가하였다. 도 1d에 도시된 바와 같이, BC를 HCl/펩신에 단독으로 노출시키면 Alamar 블루 검정으로 측정한 바와 같이 BC의 증식 생활성이 감소되었고, CT 노출 후 증식이 보다 감소되었다. BC와 트레할로스, 스테아린 또는 카세인의 조합은 HCl/펩신 또는 CT에 대한 BC의 증식 생활성을 보존하지 못했다. 그러나 콩가루를 첨가하면 HCl/펩신과 CT 소화 둘다에 대한 BC의 증식 활성이 보존되었다. BC 안정성에 대한 추가 평가에서 소 IgG 이. 콜라이 결합을 평가하였다. 도 1e에 도시된 바와 같이, BC를 HCl/펩신에 단독으로 노출시키면 ELISA 검정을 통해 측정한 바와 같이 IgG:이. 콜라이 결합이 감소되었고, CT 노출 후 결합이 추가로 감소되었다. BC와 스테아린의 조합은 HCl/펩신 소화에 영향을 미치지 않았지만 CT 소화에 대한 안정성을 증진시켰다. BC와 트레할로스의 조합은 HCl/펩신 또는 CT에 대해 이로운 효과가 없었다. 그러나 BC와 카세인 또는 대두의 조합은 HCl/펩신 및 CT 소화 둘다에 대한 안정성을 유의적으로 증진시켰다.
[00363] 트레할로스, 스테아린, 카세인 및 콩꽃은 BC의 시험관내 안정성에 대한 영향의 척도로서 성장 인자 및 IgG 면역반응성에 영향을 미치는 능력을 각각 추가로 평가하였다. IgG 면역반응성 및 모든 성장 인자 면역반응성은 ELISA를 통해 측정하였다. 도 2a에 나타낸 바와 같이. BC를 HCl/펩신에 단독으로 노출시키면 IgG 면역반응성이 감소하였고, CT 존재하에 면역반응성이 추가로 감소하였다. BC와 트레할로스의 조합은 효과가 없었다. BC와 카세인의 조합은 HCl/펩신으로 인한 면역반응성 손실을 둔화시켰지만 CT로 인한 면역반응성 손실에는 영향을 미치지 않았다. 스테아린의 존재는 HCl/펩신 및 CT 매개 면역반응성 손실 둘다를 부분적으로 감소시켰다. BC와 콩가루의 조합은 HCl/펩신과 CT 둘다에 대한 IgG 면역반응성을 보존하는 데 가장 유익하였다.
[00364] 성장인자와 관련하여, 도 2b는 HCl/펩신에 노출된 BC 단독이 TGFβ 면역반응성의 상실을 야기하였고, BC 단독이 CT에 노출되었을 때 TGFβ 면역반응성이 완전히 상실되었음을 보여준다. 스테아린, 트레할로스 및 카세인 모두는 HCl/펩신에 대한 TGFβ 면역반응 안정성을 증진시켰지만 CT에는 효과가 없었다. 대조적으로, 콩가루의 존재하에 BC는 Hcl/펩신 및 CT 노출 후 이의 면역반응성을 > 90%로 유지하였다. 도 도 2c는 HCl/펩신에 노출된 BC 단독이 EGF 면역반응성의 상실을 야기하고, CT에 대한 노출이 EGF 면역반응성의 추가 감소를 야기했음을 보여준다. 스테아린은 CT 노출에 대해 BC를 부분적으로 보존했지만 HCl/펩신 노출에 대해서는 효과가 거의 또는 전혀 없었다. 트레할로스와 카세인은 둘다는 HCl/펩신과 CT에 대해 비효과적이었다. 그러나 콩가루는 HCl/펩신 및 CT 노출 시 EGF 면역반응성과 함께 활성을 보존하는 데 매우 효과적이었다. 도 2d는 HCl/펩신에 노출된 BC 단독이 락토페린 면역반응성의 상실을 야기하고, CT에 대한 노출이 락토페린 면역반응성의 추가 감소를 야기했음을 보여준다. 스테아린은 면역 반응성 손실을 줄이는 데 효과적이지 않은 반면, 트레할로스와 카세인은 CT 노출 후 면역반응성 손실을 줄였다. 그러나 둘 다 CT 노출 후 면역반응성을 보존하는 데 효과적이지 않았다. BC를 콩가루와 함께 팩키징하면 HCl/펩신 및 CT 노출 둘다에 대한 안정성이 증진되었다.
[00365] 또한, 표 2 내지 표 4의 조성물을 시험관내 생물학적 활성 및 BC의 구조적 안정성의 척도로서 다양한 검정으로 시험하였다. 결과는 표 5A 내지 표 5C에 제공된다.
표 5A. 조성물 A2-A8 및 B1-B8의 수치 히트맵. 시험관내 소화된 샘플의 성장 인자 및 면역 인자의 생물학적 활성 및 구조적 안정성.
표 5B. 조성물 B9-B21의 수치 히트맵. 시험관내 소화된 샘플의 성장 인자 및 면역 인자의 생물학적 활성 및 구조적 안정성.
표 5C. 조성물 C1-C13의 수치 히트맵. 시험관내 소화된 샘플의 성장 인자 및 면역 인자의 생물학적 활성 및 구조적 안정성.
[00366] 시험관내 성장 인자 활성 검정에서, 대조군 조성물 A1과 비교할 때 소화되지 않은 대조군(%)으로서 개선된 증식은 프로토타입 조성물 B17, B18, B20 및 B21(17 스테아린, 수소화된 대두 오일, 10%, 20%, 40%, 50%), C5, C6(폴리덱스트로스 15% 및 20%), C8, C9(칼슘 카세이네이트, 5% 및 10%) 및 C11, C12 및 C13(효소 활성 콩가루 5%, 10%, 15%)에 의해 나타났다.
[00367] 성장 인자 구조적 안정성 검정에서 대조군 초유 A1과 비교하여 증가된 EGF(mg/ml) 안정성은 프로토타입 조성물 A2, A3, A4(렉시틴/MCT 초응집물 1X, 2X, 3X), A7(초유 지방 초응집물 2X), B1, B2, B3(Nurateric®, 알기네이트 + 에틸 셀룰로오스 수성 분산액 10%, 20%, 30%), B6, B7, B8(Protect EN™, 알기네이트 + 쉘락, 10%, 20%, 30%), B13, B15(Eudraguard™, 알기네이트 + 옥수수 전분, 20%, 40%), B17, B18, B19, B21(스테아린 17, 수소화된 식물성 오일 10%, 20%, 30%, 50%), C1, C2, C3(트레할로스, 10%, 15%, 20%), C4, C5, C6(폴리덱스트로스, 10%, 15%, 20%), C8, C9, C10(칼슘 카세이네이트, 5%, 10%, 15%) 및 C11, C12, C13(효소 활성 콩가루, 5%, 10%, 15%)에 의해 나타났다.
[00368] 성장 인자 구조적 안정성 검정에서 대조군 초유 A1과 비교하여 증가된 TGF 베타(mg/ml) 안정성은 프로토타입 조성물 A2, A4(렉시틴/MCT 초 응집물 1X, 3X), A6, A7(초유 지방 초응집물, 1X, 2X), C1, C2, C3(트레할로스, 10%, 15%, 20%), C5(폴리덱스트로스, 15%), C11, C12, C13(효소 활성 콩가루, 5%, 10%, 15%)에 의해 나타났다.
[00369] 면역 인자 활성 시험관내 검정에서, 대조군 초유 A1과 비교하여 개선된 이. 콜라이 결합(A450 nm)은 프로토타입 조성물 A6, A7, A8(초유 지방 초응집물, 1X, 2X, 3X), B17(스테아린 마이크로캡슐화, 10%), C1, C2, C3(트레할로스 매트릭스 안정화, 10%, 15%, 20%), C4, C5(폴리덱스트로스 매트릭스 안정화, 10%, 15%), C8, C9, C10(칼슘 카세이네이트 매트릭스 안정화, 5%, 10%, 15%) 및 C12(효소 활성 콩가루 10%)에 의해 나타났다.
[00370] 면역 인자 구조적 안정성 검정에서 대조군 초유 A1과 비교하여 증가된 IgG(ug/ml) 구조적 안정성은 프로토타입 조성물 A8(초유 지방 초응집물, 3X), B17, B18(스테아린 마이크로캡슐화, 10%, 20%), C1(트레할로스 매트릭스 안정화, 10%), C4, C5(폴리덱스트로스 매트릭스 안정화, 10%, 15%), C8, C9(칼슘 카세이네이트 매트릭스 안정화, 5%, 10%), C11, C12(효소 활성 콩가루, 5%, 10%)에 의해 나타났다.
[00371] 인자 구조적 안정성 검정에서, 대조군 초유 A1과 비교하여 증가된 락토페린(ug/ml) 구조적 안정성은 프로토타입 조성물 A3(렉시틴/MCT 초응집물), A8(초유 지방 초응집물 3X), B3(Nutrateric, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액 30%), B8(Protect EN™ 마이크로캡슐화, 알기네이트 + 쉘락, 30%), C5(폴리덱스트로스 매트릭스 안정화, 15%), C8, C9(칼슘 카세이네이트, 5%, 10%) 및 C12 (효소 활성 콩가루, 10%)에 의해 나타났다.
실시예 5. 내산성 캡슐은 산/펩신 소화로부터 보호한다.
[00372] 상기된 바와 같은 전체 초유 단독, 초유 + 난 및 난 분말 단독을 내산성 캡슐(bioVXR 내산성 HPMC 캡슐, BioCaps, El Monte, CA) 또는 기존 캡슐(소 겔라틴)로 캡슐화하였다. 캡슐화된 조성물은 도 1a에 개괄된 소화 공정 프로토콜에 적용하였다. 간단히 말하면, 샘플을 회전식 항온처리기에서 1시간 동안 37℃에서 1mg/mL 산/펩신에 적용하였다. 샘플을 중화하기 위해 수산화나트륨을 첨가하고 샘플의 절반을 따로 보관한다(P). (P) 샘플의 나머지 절반은 회전 항온처리기에서 1시간 동안 37°C에서 1 mg/ml 키모트립신/트립신 분해에 적용한다. 상기 샘플은 표지화된 CT이다. 샘플(P) 및 (CT) 각각은 위에서 상세히 설명한 바와 같이 AGS 세포를 사용한 시험관내 증식 검정에서 소화되지 않은 샘플(U)과 비교한다.
[00373] 도 8에 도시된 바와 같이, 내산성 캡슐은 초유, 초유 + 난 및 난 분말 단독의 소장으로의 전달을 개선하였고(즉, 소화 후 생존율은 약 90% 대 상대적인 비-내산성 기존 캡슐의 약 50%), 이것은 트립신 키모트립신 단계로 보다 많이 전달되어 CT 소화 후 남은 양은 일반 비-내산성 캡슐보다 약 3X 더 높았다. 따라서, 내산성 캡슐은 기존의 비-내산성 캡슐과 비교했을 때 AGS 세포의 개선된 증식(%) 활성을 통해 알 수 있듯이 보다 온전한 초유를 장 소화 단계로 보다 많이 전달하여 더 많은 초유가 남게 되었다.
실시예 6. 트립신 억제제 검정
[00374] 문헌(Erlander et al.)의 방법에 기초한 표준 Na-벤조일-DL-아르기닌-p-니트로아닐리드(BAPNA) 트립신 억제제 검정을 사용하여 트립신 억제제 검정에 대해 모든 샘플을 평가하였다.
[00375] 초유 및 효소 활성 콩가루를 포함하는 조성물의 제조는 표 5에 나타낸다. 각각의 재료의 트립신 억제제 (TI) 활성을 조사하였다. 구체적으로, 회복 촉진 인자 초유(C7), 영양 세린 프로테아제 억제제 효소 활성 전체 지방 콩가루(C17) 및 안정화제인 칼슘 카세이네이트(C16)을 개별적으로 및 콩가루 및 초유의 다양한 조합에서 TI 활성에 대해 검정하였다.
[00376] 트립신 억제제 활성은 문헌(참조: Erlander et al., “The Preparation and Properties of Two New Chromogenic Substrates of Trypsin,” Archives of Biochemistry and Biophysics, 95: 2: Pages 271-278 (1961))의 방법에 기초한 표준 Na-벤조일-DL-아르기닌-p-니트로아닐리드 (BAPNA) 트립신 억제 검정을 사용하여 평가하였다. 검정은 170 ul의 샘플(검정 완충액, 50mM Tris-HCl, pH 8, 20mM CaCl2로 희석)과 20 ug의 트립신(100mM HCl, T9253, Merck Life Sciences에서 구성)을 혼합하고 0.3 mg/mL BAPNA 1mL(DMSO에 용해되고 37oC로 미리 예열된 검정 완충액, B4875, Merck Life Sciences에 희석)을 첨가함에 의해 수행하였다. 샘플은 10분동안 37oC에서 항온처리하고 반응은 143 ul의 30% 아세트산을 첨가하여 종료하였다. p-니트로아닐린의 형성은 마이크로플레이트 판독기를 사용하여 405 nm에서 측정되었다. 트립신 대신 100 mM HCl을 첨가하여 각 샘플에 대한 블랭크 대조군을 제조하였다.
[00377] 세 가지 다른 로트의 효소 활성 전체 지방 콩가루(Easy 100, Natural Products, Inc., Grinnell, Iowa) S1, S2 및 S3의 트립신 억제제 활성도 측정되었다. 초유/콩가루의 세 가지 혼합물은 5 wt% 콩가루/95 wt% 초유(C11), 10 wt% 콩가루/90wt% 초유(C12) 및 15wt% 콩가루/85wt% 초유(C13)를 포함하고, 표 6에 나타낸 바와 같이 제조하고 TI 검정 전에 분무 건조시켰다. 액체 초유의 고형분 %를 측정하고 첨가할 콩의 양을 총 고형분(초유 + 콩)의 퍼센트를 기준으로 계산하였다. 예를 들어, C12(실행 11)에는 총 800g의 고형분을 갖고, 콩가루는 ~80g이고 초유는 720g이다. 각 실행 규모에는 액체 초유 4.0kg을 사용하였고, 물은 82%이고, 고형분은 18%이고, 고형분은 0.72kg이다.
표 6. 초유 + 효소 활성 콩가루를 포함하는 조성물
[00378] 트립신 억제제 검정 결과는 표 7에 나타낸다. 샘플은 적당한 블랭크와 함께 2회 분석하였다. 샘플의 용량 반응 곡선은 결과의 선형성을 보여주었다.
표 7. 트립신 억제제 검정 결과
[00379] 이론적 결과는 별도로 첨가된 하위 성분의 예상 기여로부터 도출되었다. 표 7에서 알 수 있는 바와 같이, 대두와 초유를 조합할 때 예상되는 TI 활성의 약 25%라는 예상치 못한 상승작용 반응이 나타났고, 이는 2개 성분이 상호보완적인 방식으로 작용하여 트립신 억제 활성을 증진시킴을 시사한다.
[00380] 스테아린, 트레할로스, 카세인 및 콩가루의 조합 생성물에 대해서도 상기된 Erlander 방법을 기반으로 트립신 억제제 활성을 평가하였다. 결과는 표 8에 나타낸다.
표 8. 단독 및 조합으로 시험한 조합 생성물의 트립신 억제제 활성.
[00381] 표 8에서 알수 있는 바와 같이, 스테아린 및 트레할로스는 단독으로 시험되는 경우 무시할만한 TI 활성을 가졌다. mg 당 기준으로, 콩가루는 각 성분을 개별로 시험했을 때 카제인에 비해 TI 활성이 12배, BC 활성이 5배 높았다. 놀랍게도, BC가 카세인 또는 콩가루와 결합되었을 때 각각 약 21% 및 약 57%의 예상된 TI 활성의 예상치 못한 상승작용 반응이 나타났고, 이는 2개의 성분이 트립신 억제 활성을 증진시키기 위해 상호보완적인 방식으로 작용함을 시사한다.
[00382] 소 초유(BC), 난, BC+난, 오보뮤코이드 및 SBTI 샘플의 트립신 억제제 활성은 얼랜더 등(Erlander et al)의 방법에 기초한 표준 Na-벤조일-DL-아르기닌-p-니트로아닐리드(BAPNA) 트립신 억제 검정을 사용하여 평가되었다. 결과는 표 9에 나타낸다. 샘플은 적당한 블랭크와 함께 2회 분석하였다. 샘플의 용량 반응 곡선은 결과의 선형성을 보여주었다. 결과는 평균 +/- sem으로 나타냈다.
표 9. 트립신 억제제 검정의 추가 결과
[00383] 표 9에 나타낸 바와 같이, 영양 세린 프로테아제 억제제인 오보뮤코이드 및 SBTI는 강한 트립신 억제제 활성, 난 및 BC 중간 활성을 보유하였고, EGF는 실제로 트립신 억제 활성을 보유하지 않았다.
SEQUENCE LISTING <110> PanTheryx, Inc. Playford, Raymond John Weiser, Michael James Marchbank, Tania ten Bruggencate, Sandra Johanna Maria Stagnitti, George <120> STABILIZED COLOSTRUM COMPOSITIONS <130> 40735.0056USP1 <140> New FIling <141> 2021-02-26 <160> 25 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 181 <212> PRT <213> Glycine max <400> 1 Asp Phe Val Leu Asp Asn Glu Gly Asn Pro Leu Glu Asn Gly Gly Thr 1 5 10 15 Tyr Tyr Ile Leu Ser Asp Ile Thr Ala Phe Gly Gly Ile Arg Ala Ala 20 25 30 Pro Thr Gly Asn Glu Arg Cys Pro Leu Thr Val Val Gln Ser Arg Asn 35 40 45 Glu Leu Asp Lys Gly Ile Gly Thr Ile Ile Ser Ser Pro Tyr Arg Ile 50 55 60 Arg Phe Ile Ala Glu Gly His Pro Leu Ser Leu Lys Phe Asp Ser Phe 65 70 75 80 Ala Val Ile Met Leu Cys Val Gly Ile Pro Thr Glu Trp Ser Val Val 85 90 95 Glu Asp Leu Pro Glu Gly Pro Ala Val Lys Ile Gly Glu Asn Lys Asp 100 105 110 Ala Met Asp Gly Trp Phe Arg Leu Glu Arg Val Ser Asp Asp Glu Phe 115 120 125 Asn Asn Tyr Lys Leu Val Phe Cys Pro Gln Gln Ala Glu Asp Asp Lys 130 135 140 Cys Gly Asp Ile Gly Ile Ser Ile Asp His Asp Asp Gly Thr Arg Arg 145 150 155 160 Leu Val Val Ser Lys Asn Lys Pro Leu Val Val Gln Phe Gln Lys Leu 165 170 175 Asp Lys Glu Ser Leu 180 <210> 2 <211> 181 <212> PRT <213> Glycine max <400> 2 Asp Phe Val Leu Asp Asn Glu Gly Asn Pro Leu Glu Asn Gly Gly Thr 1 5 10 15 Tyr Tyr Ile Leu Ser Asp Ile Thr Ala Phe Gly Gly Ile Arg Ala Ala 20 25 30 Pro Thr Gly Asn Glu Arg Cys Pro Leu Thr Val Val Gln Ser Arg Asn 35 40 45 Glu Leu Asp Lys Gly Ile Gly Thr Ile Ile Ser Ser Pro Tyr Arg Ile 50 55 60 Arg Phe Ile Ala Glu Gly His Pro Leu Ser Leu Lys Phe Asp Ser Phe 65 70 75 80 Ala Val Ile Met Leu Cys Val Gly Ile Pro Thr Glu Trp Ser Val Val 85 90 95 Glu Asp Leu Pro Glu Gly Pro Ala Val Lys Ile Gly Glu Asn Lys Asp 100 105 110 Ala Met Asp Gly Trp Phe Arg Leu Glu Arg Val Ser Asp Asp Glu Phe 115 120 125 Asn Asn Tyr Lys Leu Val Phe Cys Pro Gln Gln Ala Glu Asp Asp Lys 130 135 140 Cys Gly Asp Ile Gly Ile Ser Ile Asp His Asp Asp Gly Thr Arg Arg 145 150 155 160 Leu Val Val Ser Lys Asn Lys Pro Leu Val Val Gln Phe Gln Lys Leu 165 170 175 Asp Lys Glu Ser Leu 180 <210> 3 <211> 181 <212> PRT <213> Glycine max <400> 3 Asp Phe Val Leu Asp Asn Glu Gly Asn Pro Leu Glu Asn Gly Gly Thr 1 5 10 15 Tyr Tyr Ile Leu Ser Asp Ile Thr Ala Phe Gly Gly Ile Arg Ala Ala 20 25 30 Pro Thr Gly Asn Glu Arg Cys Pro Leu Thr Val Val Gln Ser Arg Asn 35 40 45 Glu Leu Asp Lys Gly Ile Gly Thr Ile Ile Ser Ser Pro Tyr Arg Ile 50 55 60 Arg Phe Ile Ala Glu Gly His Pro Leu Ser Leu Lys Phe Asp Ser Phe 65 70 75 80 Ala Val Ile Met Leu Cys Val Gly Ile Pro Thr Glu Trp Ser Val Val 85 90 95 Glu Asp Leu Pro Glu Gly Pro Ala Val Lys Ile Gly Glu Asn Lys Asp 100 105 110 Ala Met Asp Gly Trp Phe Arg Leu Glu Arg Val Ser Asp Asp Glu Phe 115 120 125 Asn Asn Tyr Lys Leu Val Phe Cys Pro Gln Gln Ala Glu Asp Asp Lys 130 135 140 Cys Gly Asp Ile Gly Ile Ser Ile Asp His Asp Asp Gly Thr Arg Arg 145 150 155 160 Leu Val Val Ser Lys Asn Lys Pro Leu Val Val Gln Phe Gln Lys Leu 165 170 175 Asp Lys Glu Ser Leu 180 <210> 4 <211> 181 <212> PRT <213> Glycine max <400> 4 Asp Phe Val Leu Asp Asn Glu Gly Asn Pro Leu Glu Asn Gly Gly Thr 1 5 10 15 Tyr Tyr Ile Leu Ser Asp Ile Thr Ala Phe Gly Gly Ile Arg Ala Ala 20 25 30 Pro Thr Gly Asn Glu Arg Cys Pro Leu Thr Val Val Gln Ser Arg Asn 35 40 45 Glu Leu Asp Lys Gly Ile Glu Thr Ile Ile Ser Ser Pro Tyr Arg Ile 50 55 60 Arg Phe Ile Ala Glu Gly His Pro Leu Ser Leu Lys Phe Asp Ser Phe 65 70 75 80 Ala Val Ile Met Leu Cys Val Gly Ile Pro Thr Glu Trp Ser Val Val 85 90 95 Glu Asp Leu Pro Glu Gly Pro Ala Val Lys Ile Gly Glu Asn Lys Asp 100 105 110 Ala Met Asp Gly Trp Phe Arg Leu Glu Arg Val Ser Asp Asp Glu Phe 115 120 125 Asn Asn Tyr Lys Leu Val Phe Cys Pro Gln Gln Ala Glu Asp Asp Lys 130 135 140 Cys Gly Asp Ile Gly Ile Ser Ile Asp His Asp Asp Gly Thr Arg Arg 145 150 155 160 Leu Val Val Ser Lys Asn Lys Pro Leu Val Val Gln Phe Gln Lys Leu 165 170 175 Asp Lys Glu Ser Leu 180 <210> 5 <211> 210 <212> PRT <213> Gallus gallus <400> 5 Met Ala Met Ala Gly Val Phe Val Leu Phe Ser Phe Val Leu Cys Gly 1 5 10 15 Phe Leu Pro Asp Ala Ala Phe Gly Ala Glu Val Asp Cys Ser Arg Phe 20 25 30 Pro Asn Ala Thr Asp Lys Glu Gly Lys Asp Val Leu Val Cys Asn Lys 35 40 45 Asp Leu Arg Pro Ile Cys Gly Thr Asp Gly Val Thr Tyr Thr Asn Asp 50 55 60 Cys Leu Leu Cys Ala Tyr Ser Ile Glu Phe Gly Thr Asn Ile Ser Lys 65 70 75 80 Glu His Asp Gly Glu Cys Lys Glu Thr Val Pro Met Asn Cys Ser Ser 85 90 95 Tyr Ala Asn Thr Thr Ser Glu Asp Gly Lys Val Met Val Leu Cys Asn 100 105 110 Arg Ala Phe Asn Pro Val Cys Gly Thr Asp Gly Val Thr Tyr Asp Asn 115 120 125 Glu Cys Leu Leu Cys Ala His Lys Val Glu Gln Gly Ala Ser Val Asp 130 135 140 Lys Arg His Asp Gly Gly Cys Arg Lys Glu Leu Ala Ala Val Ser Val 145 150 155 160 Asp Cys Ser Glu Tyr Pro Lys Pro Asp Cys Thr Ala Glu Asp Arg Pro 165 170 175 Leu Cys Gly Ser Asp Asn Lys Thr Tyr Gly Asn Lys Cys Asn Phe Cys 180 185 190 Asn Ala Val Val Glu Ser Asn Gly Thr Leu Thr Leu Ser His Phe Gly 195 200 205 Lys Cys 210 <210> 6 <211> 208 <212> PRT <213> Gallus gallus <400> 6 Met Ala Met Ala Gly Val Phe Val Leu Phe Ser Phe Val Leu Cys Gly 1 5 10 15 Phe Leu Pro Asp Ala Ala Phe Gly Ala Glu Val Asp Cys Ser Arg Phe 20 25 30 Pro Asn Ala Thr Asp Lys Glu Gly Lys Asp Val Leu Val Cys Asn Lys 35 40 45 Asp Leu Arg Pro Ile Cys Gly Thr Asp Gly Val Thr Tyr Thr Asn Asp 50 55 60 Cys Leu Leu Cys Ala Tyr Ser Ile Glu Phe Gly Thr Asn Ile Ser Lys 65 70 75 80 Glu His Asp Gly Glu Cys Lys Glu Thr Val Pro Met Asn Cys Ser Ser 85 90 95 Tyr Ala Asn Thr Thr Ser Glu Asp Gly Lys Val Met Val Leu Cys Asn 100 105 110 Arg Ala Phe Asn Pro Val Cys Gly Thr Asp Gly Val Thr Tyr Asp Asn 115 120 125 Glu Cys Leu Leu Cys Ala His Lys Val Glu Gln Gly Ala Ser Val Asp 130 135 140 Lys Arg His Asp Gly Gly Cys Arg Lys Glu Leu Ala Ala Val Asp Cys 145 150 155 160 Ser Glu Tyr Pro Lys Pro Asp Cys Thr Ala Glu Asp Arg Pro Leu Cys 165 170 175 Gly Ser Asp Asn Lys Thr Tyr Gly Asn Lys Cys Asn Phe Cys Asn Ala 180 185 190 Val Val Glu Ser Asn Gly Thr Leu Thr Leu Ser His Phe Gly Lys Cys 195 200 205 <210> 7 <211> 210 <212> PRT <213> Gallus gallus <400> 7 Met Ala Met Ala Gly Val Phe Val Leu Phe Ser Phe Val Leu Cys Gly 1 5 10 15 Phe Leu Pro Asp Ala Val Phe Gly Ala Glu Val Asp Cys Ser Arg Phe 20 25 30 Pro Asn Ala Thr Asp Met Glu Gly Lys Asp Val Leu Val Cys Asn Lys 35 40 45 Asp Leu Arg Pro Ile Cys Gly Thr Asp Gly Val Thr Tyr Thr Asn Asp 50 55 60 Cys Leu Leu Cys Ala Tyr Ser Val Glu Phe Gly Thr Asn Ile Ser Lys 65 70 75 80 Glu His Asp Gly Glu Cys Lys Glu Thr Val Pro Met Asn Cys Ser Ser 85 90 95 Tyr Ala Asn Thr Thr Ser Glu Asp Gly Lys Val Met Val Leu Cys Asn 100 105 110 Arg Ala Phe Asn Pro Val Cys Gly Thr Asp Gly Val Thr Tyr Asp Asn 115 120 125 Glu Cys Leu Leu Cys Ala His Lys Val Glu Gln Gly Ala Ser Val Asp 130 135 140 Lys Arg His Asp Gly Gly Cys Arg Lys Glu Leu Ala Ala Val Ser Val 145 150 155 160 Asp Cys Ser Glu Tyr Pro Lys Pro Asp Cys Thr Ala Glu Asp Arg Pro 165 170 175 Leu Cys Gly Ser Asp Asn Lys Thr Tyr Gly Asn Lys Cys Asn Phe Cys 180 185 190 Asn Ala Val Val Glu Ser Asn Gly Thr Leu Thr Leu Ser His Phe Gly 195 200 205 Lys Cys 210 <210> 8 <211> 186 <212> PRT <213> Gallus gallus <400> 8 Ala Glu Val Asp Cys Ser Arg Phe Pro Asn Ala Thr Asp Lys Glu Gly 1 5 10 15 Lys Asp Val Leu Val Cys Asn Lys Asp Leu Arg Pro Ile Cys Gly Thr 20 25 30 Asp Gly Val Thr Tyr Asn Asn Glu Cys Leu Leu Cys Ala Tyr Ser Ile 35 40 45 Glu Phe Gly Thr Asn Ile Ser Lys Glu His Asp Gly Glu Cys Lys Glu 50 55 60 Thr Val Pro Met Asn Cys Ser Ser Tyr Ala Asn Thr Thr Ser Glu Asp 65 70 75 80 Gly Lys Val Met Val Leu Cys Asn Arg Ala Phe Asn Pro Val Cys Gly 85 90 95 Thr Asp Gly Val Thr Tyr Asp Asn Glu Cys Leu Leu Cys Ala His Lys 100 105 110 Val Glu Gln Gly Ala Ser Val Asp Lys Arg His Asp Gly Glu Cys Arg 115 120 125 Lys Glu Leu Ala Ala Val Ser Val Asp Cys Ser Glu Tyr Pro Lys Pro 130 135 140 Asp Cys Thr Ala Glu Asp Arg Pro Leu Cys Gly Ser Asp Asn Lys Thr 145 150 155 160 Tyr Gly Asn Lys Cys Asn Phe Cys Asn Ala Val Val Glu Ser Asn Gly 165 170 175 Thr Leu Thr Leu Ser His Phe Gly Lys Cys 180 185 <210> 9 <211> 208 <212> PRT <213> Gallus gallus <400> 9 Met Ala Met Ala Gly Val Phe Val Leu Phe Ser Phe Val Leu Cys Gly 1 5 10 15 Phe Leu Pro Asp Ala Ala Phe Gly Ala Glu Val Asp Cys Ser Arg Phe 20 25 30 Pro Asn Ala Thr Asp Lys Glu Gly Lys Asp Val Leu Val Cys Asn Lys 35 40 45 Asp Leu Arg Pro Ile Cys Gly Thr Asp Gly Val Thr Tyr Thr Asn Asp 50 55 60 Cys Leu Leu Cys Ala Tyr Ser Ile Glu Phe Gly Thr Asn Ile Ser Lys 65 70 75 80 Glu His Asp Gly Glu Cys Lys Glu Thr Val Pro Met Asn Cys Ser Ser 85 90 95 Tyr Ala Asn Thr Thr Ser Glu Asp Gly Lys Val Met Val Leu Cys Asn 100 105 110 Arg Ala Phe Asn Pro Val Cys Gly Thr Asp Gly Val Thr Tyr Asp Asn 115 120 125 Glu Cys Leu Leu Cys Ala His Lys Val Glu Gln Gly Ala Ser Val Asp 130 135 140 Lys Arg His Asp Gly Gly Cys Arg Lys Glu Leu Ala Ala Val Asp Cys 145 150 155 160 Ser Glu Tyr Pro Lys Pro Asp Cys Thr Ala Glu Asp Arg Pro Leu Cys 165 170 175 Gly Ser Asp Asn Lys Thr Tyr Gly Asn Lys Cys Asn Phe Cys Asn Ala 180 185 190 Val Val Glu Ser Asn Gly Thr Leu Thr Leu Ser His Phe Gly Lys Cys 195 200 205 <210> 10 <211> 210 <212> PRT <213> Gallus gallus <400> 10 Met Ala Met Ala Gly Val Phe Val Leu Phe Ser Phe Val Leu Cys Gly 1 5 10 15 Phe Leu Pro Asp Ala Ala Phe Gly Ala Glu Val Asp Cys Ser Arg Phe 20 25 30 Pro Asn Ala Thr Asp Lys Glu Gly Lys Asp Val Leu Val Cys Asn Lys 35 40 45 Asp Leu Arg Pro Ile Cys Gly Thr Asp Gly Val Thr Tyr Thr Asn Asp 50 55 60 Cys Leu Leu Cys Ala Tyr Ser Ile Glu Phe Gly Thr Asn Ile Ser Lys 65 70 75 80 Glu His Asp Gly Glu Cys Lys Glu Thr Val Pro Met Asn Cys Ser Ser 85 90 95 Tyr Ala Asn Thr Thr Ser Glu Asp Gly Lys Val Met Val Leu Cys Asn 100 105 110 Arg Ala Phe Asn Pro Val Cys Gly Thr Asp Gly Val Thr Tyr Asp Asn 115 120 125 Glu Cys Leu Leu Cys Ala His Lys Val Glu Gln Gly Ala Ser Val Asp 130 135 140 Lys Arg His Asp Gly Gly Cys Arg Lys Glu Leu Ala Ala Val Ser Val 145 150 155 160 Asp Cys Ser Glu Tyr Pro Lys Pro Asp Cys Thr Ala Glu Asp Arg Pro 165 170 175 Leu Cys Gly Ser Asp Asn Lys Thr Tyr Gly Asn Lys Cys Asn Phe Cys 180 185 190 Asn Ala Val Val Glu Ser Asn Gly Thr Leu Thr Leu Ser His Phe Gly 195 200 205 Lys Cys 210 <210> 11 <211> 209 <212> PRT <213> Meleagris gallopavo <400> 11 Met Ala Met Ala Gly Ile Phe Val Leu Phe Ser Phe Ala Leu Cys Gly 1 5 10 15 Phe Leu Pro Asp Ala Ala Phe Gly Val Glu Val Asp Cys Ser Arg Phe 20 25 30 Pro Asn Thr Thr Asn Glu Glu Gly Lys Asp Val Leu Val Cys Thr Glu 35 40 45 Asp Leu Arg Pro Ile Cys Gly Thr Asp Gly Val Thr His Ser Glu Cys 50 55 60 Leu Leu Cys Ala Tyr Asn Ile Glu Tyr Gly Thr Asn Ile Ser Lys Glu 65 70 75 80 His Asp Gly Glu Cys Arg Glu Ala Val Pro Met Asp Cys Ser Arg Tyr 85 90 95 Pro Asn Thr Thr Asn Glu Glu Gly Lys Val Met Ile Leu Cys Asn Lys 100 105 110 Ala Leu Asn Pro Val Cys Gly Thr Asp Gly Val Thr Tyr Asp Asn Glu 115 120 125 Cys Val Leu Cys Ala His Asn Leu Glu Gln Gly Thr Ser Val Gly Lys 130 135 140 Lys His Asp Gly Gly Cys Arg Lys Glu Leu Ala Ala Val Ser Val Asp 145 150 155 160 Cys Ser Glu Tyr Pro Lys Pro Ala Cys Thr Leu Glu Tyr Arg Pro Leu 165 170 175 Cys Gly Ser Asp Asn Lys Thr Tyr Gly Asn Lys Cys Asn Phe Cys Asn 180 185 190 Ala Val Val Glu Ser Asn Gly Thr Leu Thr Leu Ser His Phe Gly Lys 195 200 205 Cys <210> 12 <211> 185 <212> PRT <213> Meleagris gallopavo <400> 12 Val Glu Val Asp Cys Ser Arg Phe Pro Asn Thr Thr Asn Glu Glu Gly 1 5 10 15 Lys Asp Val Leu Val Cys Thr Glu Asp Leu Arg Pro Ile Cys Gly Thr 20 25 30 Asp Gly Val Thr His Ser Glu Cys Leu Leu Cys Ala Tyr Asn Ile Glu 35 40 45 Tyr Gly Thr Asn Ile Ser Lys Glu His Asp Gly Glu Cys Arg Glu Ala 50 55 60 Val Pro Met Asp Cys Ser Arg Tyr Pro Asn Thr Thr Ser Glu Glu Gly 65 70 75 80 Lys Val Met Ile Leu Cys Asn Lys Ala Leu Asn Pro Val Cys Gly Thr 85 90 95 Asp Gly Val Thr Tyr Asp Asn Glu Cys Val Leu Cys Ala His Asn Leu 100 105 110 Glu Gln Gly Thr Ser Val Gly Lys Lys His Asp Gly Glu Cys Arg Lys 115 120 125 Glu Leu Ala Ala Val Ser Val Asp Cys Ser Glu Tyr Pro Lys Pro Ala 130 135 140 Cys Thr Leu Glu Tyr Arg Pro Leu Cys Gly Ser Asp Asn Lys Thr Tyr 145 150 155 160 Gly Asn Lys Cys Asn Phe Cys Asn Ala Val Val Glu Ser Asn Gly Thr 165 170 175 Leu Thr Leu Ser His Phe Gly Lys Cys 180 185 <210> 13 <211> 208 <212> PRT <213> Numida meleagris <400> 13 Met Ala Met Ala Gly Val Phe Val Leu Phe Ser Phe Ala Leu Cys Gly 1 5 10 15 Phe Leu Pro Asp Ala Ala Phe Gly Val Glu Val Asp Cys Ser Arg Phe 20 25 30 Pro Asn Ala Thr Asn Glu Glu Gly Lys Asp Val Leu Val Cys Thr Glu 35 40 45 Asp Leu Arg Pro Ile Cys Gly Thr Asp Gly Val Thr Tyr Ser Asn Asp 50 55 60 Cys Leu Leu Cys Ala Tyr Asn Ile Glu Tyr Gly Thr Asn Ile Ser Lys 65 70 75 80 Glu His Asp Gly Glu Cys Arg Glu Ala Val Pro Val Asp Cys Ser Arg 85 90 95 Tyr Pro Asn Met Thr Ser Glu Glu Gly Lys Val Leu Ile Leu Cys Asn 100 105 110 Lys Ala Phe Asn Pro Val Cys Gly Thr Asp Gly Val Thr Tyr Asp Asn 115 120 125 Glu Cys Leu Leu Cys Ala His Asn Val Glu Gln Gly Thr Ser Val Gly 130 135 140 Lys Lys His Asp Gly Glu Cys Arg Lys Glu Leu Ala Ala Val Asp Cys 145 150 155 160 Ser Glu Tyr Pro Lys Pro Ala Cys Thr Met Glu Tyr Arg Pro Leu Cys 165 170 175 Gly Ser Asp Asn Lys Thr Tyr Asp Asn Lys Cys Asn Phe Cys Asn Ala 180 185 190 Val Val Glu Ser Asn Gly Thr Leu Thr Leu Ser His Phe Gly Lys Cys 195 200 205 <210> 14 <211> 171 <212> PRT <213> Anas platyrhynchos <400> 14 Gln Val Asp Cys Ser Arg Phe Pro Asn Thr Thr Asn Glu Glu Gly Lys 1 5 10 15 Glu Val Leu Leu Cys Thr Lys Glu Leu Ser Pro Val Cys Gly Thr Asp 20 25 30 Gly Val Thr Tyr Ser Asn Glu Cys Leu Leu Cys Ala Tyr Asn Ile Glu 35 40 45 Tyr Gly Thr Asn Ile Ser Lys Asp His Asp Gly Glu Cys Lys Glu Ala 50 55 60 Val Pro Ala Asp Cys Ser Met Tyr Pro Asn Met Thr Asn Glu Glu Gly 65 70 75 80 Lys Met Thr Leu Leu Cys Asn Lys Met Phe Ser Pro Val Cys Gly Thr 85 90 95 Asp Gly Val Thr Tyr Asp Asn Glu Cys Met Leu Cys Ala His Asn Val 100 105 110 Glu Gln Gly Thr Ser Val Gly Lys Lys Tyr Asp Gly Lys Cys Lys Lys 115 120 125 Glu Val Ala Thr Val Ser Val Asp Cys Ser Gly Tyr Pro Lys Pro Ala 130 135 140 Cys Thr Met Glu Tyr Met Pro Leu Cys Gly Ser Asp Asn Lys Thr Tyr 145 150 155 160 Gly Asn Lys Cys Asn Phe Cys Asn Ala Val Val 165 170 <210> 15 <211> 77 <212> PRT <213> Anas platyrhynchos <400> 15 Met Arg Thr Ala Gly Val Val Val Leu Leu Ala Leu Ala Leu Cys Cys 1 5 10 15 Cys Pro Asp Thr Val Ala Leu Lys Gly Tyr Cys Ser Asn Tyr Val Val 20 25 30 Pro Arg Asn Phe Cys Thr Leu Glu Tyr Ile Pro His Cys Gly Ser Asp 35 40 45 Gly Val Thr Tyr Ala Asn Lys Cys Leu Phe Cys Asn Ala Phe Leu Arg 50 55 60 Ser Arg Arg Thr Leu Arg Leu Leu Tyr Leu Arg Glu Cys 65 70 75 <210> 16 <211> 54 <212> PRT <213> Anas platyrhynchos <400> 16 Val Ala Thr Val Asp Cys Ser Gly Tyr Pro Lys Pro Ala Cys Thr Met 1 5 10 15 Glu Tyr Met Pro Leu Cys Gly Ser Asp Asn Lys Thr Tyr Gly Asn Lys 20 25 30 Cys Asn Phe Cys Asn Ala Val Val Asp Ser Asn Gly Thr Leu Thr Leu 35 40 45 Ser His Phe Gly Glu Cys 50 <210> 17 <211> 54 <212> PRT <213> Anas platyrhynchos <400> 17 Val Ala Thr Val Asp Cys Ser Gly Tyr Pro Lys Pro Ala Cys Thr Met 1 5 10 15 Glu Tyr Met Pro Leu Cys Gly Ser Asp Asn Lys Thr Tyr Gly Asn Lys 20 25 30 Cys Asn Phe Cys Asn Ala Val Val Asp Ser Asn Gly Thr Leu Thr Leu 35 40 45 Ser His Phe Gly Glu Cys 50 <210> 18 <211> 226 <212> PRT <213> Anas platyrhynchos <400> 18 Met Val Leu Ser Val Leu Pro Pro Phe Thr Gln Val Thr Leu Ala Gln 1 5 10 15 Gly His Gly Ala Leu Thr Cys Cys Pro Arg His Pro Glu Thr Cys Pro 20 25 30 Glu Leu Glu Arg Ser Thr Ser Trp Arg Gly Ile Lys Val Asp Cys Ser 35 40 45 Arg Phe Pro Asn Thr Thr Asn Glu Glu Gly Lys Glu Val Leu Leu Cys 50 55 60 Thr Lys Glu Leu Ser Pro Val Cys Gly Thr Asp Gly Val Thr Tyr Ser 65 70 75 80 Asn Glu Cys Leu Leu Cys Ala Tyr Asn Ile Glu Tyr Gly Thr Asn Ile 85 90 95 Ser Lys Asp His Asp Gly Glu Cys Lys Glu Ala Val Pro Ala Asp Cys 100 105 110 Ser Met Tyr Pro Asn Met Thr Asn Glu Glu Gly Lys Met Thr Leu Leu 115 120 125 Cys Asn Lys Met Phe Ser Pro Val Cys Gly Thr Asp Gly Val Thr Tyr 130 135 140 Asp Asn Glu Cys Met Leu Cys Ala His Asn Val Glu Gln Gly Thr Ser 145 150 155 160 Val Gly Lys Lys Tyr Asp Gly Lys Cys Lys Lys Glu Val Ala Thr Val 165 170 175 Asp Cys Ser Gly Tyr Pro Lys Pro Ala Cys Thr Met Glu Tyr Met Pro 180 185 190 Leu Cys Gly Ser Asp Asn Lys Thr Tyr Gly Asn Lys Cys Asn Phe Cys 195 200 205 Asn Ala Val Val Asp Ser Asn Gly Thr Leu Thr Leu Ser His Phe Gly 210 215 220 Glu Cys 225 <210> 19 <211> 245 <212> PRT <213> Anas platyrhynchos <400> 19 Met Ile Ser Thr Ser Ser Gly Gln Leu Gln Asp Asn Ile Ser Cys Ile 1 5 10 15 Thr Ser Lys Leu Pro Ser Leu Val Leu Pro Pro Phe Thr Gln Val Thr 20 25 30 Leu Ala Gln Gly His Gly Ala Leu Thr Cys Cys Pro Arg His Pro Glu 35 40 45 Thr Cys Pro Glu Leu Glu Arg Ser Thr Ser Trp Arg Gly Ile Lys Val 50 55 60 Asp Cys Ser Arg Phe Pro Asn Thr Thr Asn Glu Glu Gly Lys Glu Val 65 70 75 80 Leu Leu Cys Thr Lys Glu Leu Ser Pro Val Cys Gly Thr Asp Gly Val 85 90 95 Thr Tyr Ser Asn Glu Cys Leu Leu Cys Ala Tyr Asn Ile Glu Tyr Gly 100 105 110 Thr Asn Ile Ser Lys Asp His Asp Gly Glu Cys Lys Glu Ala Val Pro 115 120 125 Ala Asp Cys Ser Met Tyr Pro Asn Met Thr Asn Glu Glu Gly Lys Met 130 135 140 Thr Leu Leu Cys Asn Lys Met Phe Ser Pro Val Cys Gly Thr Asp Gly 145 150 155 160 Val Thr Tyr Asp Asn Glu Cys Met Leu Cys Ala His Asn Val Glu Gln 165 170 175 Gly Thr Ser Val Gly Lys Lys Tyr Asp Gly Lys Cys Lys Lys Glu Val 180 185 190 Ala Thr Val Asp Cys Ser Gly Tyr Pro Lys Pro Ala Cys Thr Met Glu 195 200 205 Tyr Met Pro Leu Cys Gly Ser Asp Asn Lys Thr Tyr Gly Asn Lys Cys 210 215 220 Asn Phe Cys Asn Ala Val Val Asp Ser Asn Gly Thr Leu Thr Leu Ser 225 230 235 240 His Phe Gly Glu Cys 245 <210> 20 <211> 42 <212> PRT <213> Glycine max <400> 20 Asp Asp Glu Ser Ser Lys Pro Cys Cys Asp Gln Cys Ala Cys Thr Lys 1 5 10 15 Ser Asn Pro Pro Gln Cys Arg Cys Ser Asp Met Arg Leu Asn Ser Cys 20 25 30 His Ser Ala Cys Lys Ser Cys Ile Cys Ala 35 40 <210> 21 <211> 35 <212> PRT <213> Glycine max <400> 21 Lys Ser Cys Ile Cys Ala Leu Ser Tyr Pro Ala Gln Cys Phe Cys Val 1 5 10 15 Asp Ile Thr Asp Phe Cys Tyr Glu Pro Cys Lys Pro Ser Glu Asp Asp 20 25 30 Lys Glu Asn 35 <210> 22 <211> 110 <212> PRT <213> Glycine max <400> 22 Met Val Val Leu Lys Val Cys Leu Val Leu Leu Phe Leu Val Gly Gly 1 5 10 15 Thr Thr Ser Ala Asn Leu Arg Leu Ser Lys Leu Gly Leu Leu Met Lys 20 25 30 Ser Asp His Gln His Ser Asn Asp Asp Glu Ser Ser Lys Pro Cys Cys 35 40 45 Asp Gln Cys Ala Cys Thr Lys Ser Asn Pro Pro Gln Cys Arg Cys Ser 50 55 60 Asp Met Arg Leu Asn Ser Cys His Ser Ala Cys Lys Ser Cys Ile Cys 65 70 75 80 Ala Leu Ser Tyr Pro Ala Gln Cys Phe Cys Val Asp Ile Thr Asp Phe 85 90 95 Cys Tyr Glu Pro Cys Lys Pro Ser Glu Asp Asp Lys Glu Asn 100 105 110 <210> 23 <211> 118 <212> PRT <213> Glycine max <400> 23 Met Gly Leu Lys Asn Asn Met Val Val Leu Lys Val Cys Leu Val Leu 1 5 10 15 Leu Phe Leu Val Gly Gly Thr Thr Ser Ala Asn Leu Arg Leu Ser Lys 20 25 30 Leu Gly Leu Leu Met Lys Ser Asp His His Gln His Ser Asn Asp Asp 35 40 45 Glu Ser Ser Lys Pro Cys Cys Asp Gln Cys Ala Cys Thr Lys Ser Asn 50 55 60 Pro Pro Gln Cys Arg Cys Ser Asp Met Arg Leu Asn Ser Cys His Ser 65 70 75 80 Ala Cys Lys Ser Cys Ile Cys Ala Leu Ser Tyr Pro Ala Gln Cys Phe 85 90 95 Cys Val Asp Ile Thr Asp Phe Cys Tyr Glu Pro Cys Lys Pro Ser Glu 100 105 110 Asp Asp Lys Glu Asn Tyr 115 <210> 24 <211> 217 <212> PRT <213> Glycine max <400> 24 Met Lys Ser Thr Ile Phe Phe Leu Phe Ala Leu Phe Cys Ala Phe Thr 1 5 10 15 Thr Ser Tyr Leu Pro Ser Ala Ile Ala Asp Phe Val Leu Asp Asn Glu 20 25 30 Gly Asn Pro Leu Glu Asn Gly Gly Thr Tyr Tyr Ile Leu Ser Asp Ile 35 40 45 Thr Ala Phe Gly Gly Ile Arg Ala Ala Pro Thr Gly Asn Glu Arg Cys 50 55 60 Pro Leu Thr Val Val Gln Ser Arg Asn Glu Leu Asp Lys Gly Ile Gly 65 70 75 80 Thr Ile Ile Ser Ser Pro Tyr Arg Ile Arg Phe Ile Ala Glu Gly His 85 90 95 Pro Leu Ser Leu Lys Phe Asp Ser Phe Ala Val Ile Met Leu Cys Val 100 105 110 Gly Ile Pro Thr Glu Trp Ser Val Val Glu Asp Leu Pro Glu Gly Pro 115 120 125 Ala Val Lys Ile Gly Glu Asn Lys Asp Ala Met Asp Gly Trp Phe Lys 130 135 140 Leu Glu Arg Val Ser Asp Asp Glu Phe Asn Asn Tyr Lys Leu Val Phe 145 150 155 160 Cys Pro Gln Gln Ala Glu Asp Asp Lys Cys Gly Asp Ile Gly Ile Ser 165 170 175 Ile Asp His Asp Asp Gly Thr Arg Arg Leu Val Val Ser Lys Asn Lys 180 185 190 Pro Leu Val Val Gln Phe Gln Lys Leu Asp Lys Glu Ser Leu Ala Lys 195 200 205 Lys Asn His Gly Leu Ser Arg Ser Glu 210 215 <210> 25 <211> 217 <212> PRT <213> Glycine soja <400> 25 Met Lys Ser Thr Ile Phe Phe Ala Leu Phe Leu Phe Cys Ala Phe Thr 1 5 10 15 Thr Ser Tyr Leu Pro Ser Ala Ile Ala Asp Phe Val Leu Asp Asn Glu 20 25 30 Gly Asn Pro Leu Glu Asn Gly Gly Thr Tyr Tyr Ile Leu Ser Asp Ile 35 40 45 Thr Ala Phe Gly Gly Ile Arg Ala Ala Pro Thr Gly Asn Glu Arg Cys 50 55 60 Pro Leu Thr Val Val Gln Ser Arg Asn Glu Leu Asp Lys Gly Ile Gly 65 70 75 80 Thr Ile Ile Ser Ser Pro Tyr Arg Ile Arg Phe Ile Ala Glu Gly His 85 90 95 Pro Leu Ser Leu Lys Phe Asp Ser Phe Ala Val Ile Met Leu Cys Ala 100 105 110 Gly Ile Pro Thr Glu Trp Ser Val Val Glu Asp Leu Pro Glu Gly Pro 115 120 125 Ala Val Lys Ile Gly Glu Asn Lys Asp Ala Met Asp Gly Trp Phe Arg 130 135 140 Leu Glu Arg Val Ser Asp Asp Glu Phe Asn Asn Tyr Lys Leu Val Phe 145 150 155 160 Cys Pro Gln Gln Ala Glu Asp Asp Lys Cys Gly Asp Ile Gly Ile Ser 165 170 175 Ile Asp His Asp Asp Gly Thr Arg Arg Leu Val Val Ser Lys Asn Lys 180 185 190 Pro Leu Val Val Gln Phe Gln Lys Leu Asp Lys Glu Ser Leu Ala Lys 195 200 205 Lys Asn His Gly Leu Ser Arg Ser Glu 210 215

Claims (87)

  1. 회복 촉진 인자(pro-reparative factor), 영양 프로테아제 억제제, 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 조성물이 추가로 안정화제를 포함하는, 조성물.
  3. 제2항에 있어서, 상기 안정화제가 카세인, 카세이네이트 염, 폴리덱스트로스, 트레할로스, 외인성 초유 지방, 스테아린, 알기네이트, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스, 알기네이트 + 옥수수 전분, 알기네이트 + 아크릴 중합체, 또는 이의 조합물인, 조성물.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 회복 촉진 인자가 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 난 생성물, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 기능식품적으로 허용되는 염 또는 이들의 조합물인, 조성물.
  5. 제4항에 있어서, 상기 초유가 소 초유인, 조성물.
  6. 제5항에 있어서, 상기 소 초유가 탈지 소 초유, 부분 탈지된 소 초유, 또는 전체 소 초유로부터 선택되는, 조성물.
  7. 제4항에 있어서, 상기 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질이 상피 성장 인자(EGF), 형질전환 성장 인자 α(TGF-α), 형질전환 성장 인자 β(TGF-β), 인슐린 유사 성장 인자 I(IGF-I) 및 인슐린 유사 성장 인자 II(IGF-II), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 우유 지방구(Milk fat globule)-상피 성장 인자 8(MFG-E8) 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염을 포함하는 재조합 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질인, 조성물.
  8. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 영양 프로테아제 억제제가 카세인인, 조성물.
  9. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 영양 프로테아제 억제제가 영양 트립신 억제제인, 조성물.
  10. 제9항에 있어서, 상기 영양 트립신 억제제가 효소 활성 콩 생성물, 오보뮤코이드, 대두 트립신 억제제, 또는 이들의 조합물인, 조성물.
  11. 제10항에 있어서, 상기 효소 활성 콩 생성물이 생 콩가루, 생 콩밀, 생 콩 생성물, 최소 가공 대두 생성물, 또는 이들의 조합물인, 조성물.
  12. 제11항에 있어서, 상기 효소 활성 콩 생성물이 효소 활성 콩가루인, 조성물.
  13. 제12항에 있어서, 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 또는 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물 대 효소 활성 콩 생성물의 약 1:1 내지 약 20:1, 임의로 약 5:1 내지 약 15:1의 중량비를 포함하는, 조성물.
  14. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서,
    약 40 wt% 내지 약 95 wt%의 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 또는 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물; 및
    약 5 wt% 내지 약 25 wt%의 효소 활성 콩 생성물을 포함하는, 조성물.
  15. 제14항에 있어서, 약 5 wt% 내지 약 40 wt%의 안정화제를 포함하는, 조성물.
  16. 제14항에 있어서, 약 5 wt% 내지 약 40 wt%의 영양 프로테아제 억제제를 포함하는, 조성물.
  17. 제14항에 있어서, 약 2 wt% 내지 약 7 wt%의 카세인을 포함하는, 조성물.
  18. 제14항에 있어서, 콩 렉틴, 중간-쇄 트리글리세리드, 유장 단백질 농축물, 무지방 분유, 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 추가로 포함하는, 조성물.
  19. 제18항에 있어서, 최대 약 2 wt%의 콩 렉시틴, 최대 약 2 wt%의 중간-쇄 트리글리세리드, 최대 약 2 wt%의 방향제, 최대 약 50 wt%의 유장 단백질 농축물, 최대 약 10 wt%의 무지방 분유, 최대 약 10 wt%의 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 포함하는, 조성물.
  20. 제14항에 있어서, 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율이 약 1:20 내지 약 20:1인, 조성물.
  21. 제14항에 있어서, 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율이 60:40인, 조성물.
  22. 제14항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 조성물의 약 50 wt% 내지 약 80 wt%의 총 단백질 함량을 포함하는, 조성물.
  23. 제14항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 조성물의 약 15 wt% 내지 약 60 wt%의 양으로 면역글로불린 G를 포함하는, 조성물.
  24. 회복 촉진 인자, 안정화제 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물.
  25. 제24항에 있어서, 상기 회복 촉진 인자가 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 난 생성물, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질 또는 기능식품적으로 허용되는 염 또는 이들의 조합물로부터 선택되는, 조성물.
  26. 제25항에 있어서, 상기 초유가 소 초유인, 조성물.
  27. 제26항에 있어서, 상기 소 초유가 탈지 소 초유, 후기 소 초유, 부분 탈지된 소 초유, 소 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 전체 소 초유, 또는 이들의 조합물인, 조성물.
  28. 제25항에 있어서, 상기 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질이 상피 성장 인자(EGF), 형질전환 성장 인자 α(TGF-α), 형질전환 성장 인자 β(TGF-β), 인슐린 유사 성장 인자 I(IGF-I) 및 인슐린 유사 성장 인자 II(IGF-II), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 우유 지방구(Milk fat globule)-상피 성장 인자 8(MFG-E8) 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염을 포함하는 재조합 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질인, 조성물.
  29. 제24항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 안정화제가 카세인, 카세이네이트 염, 폴리덱스트로스, 트레할로스, 외인성 초유 지방, 스테아린, 알기네이트, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스, 알기네이트 + 옥수수 전분, 알기네이트 + 아크릴 중합체, 또는 이의 조합물인, 조성물.
  30. 제24항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 약 40 wt% 내지 약 98 wt%의 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 또는 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물을 포함하는, 조성물.
  31. 제230항에 있어서, 약 2 wt% 내지 약 40 wt%의 안정화제를 포함하는, 조성물.
  32. 제30항에 있어서, 콩 렉틴, 중간-쇄 트리글리세리드, 유장 단백질 농축물, 무지방 분유, 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 추가로 포함하는, 조성물.
  33. 제32항에 있어서, 최대 약 2 wt%의 콩 렉시틴, 최대 약 2 wt%의 중간-쇄 트리글리세리드, 최대 약 2 wt%의 방향제, 최대 약 50 wt%의 유장 단백질 농축물, 최대 약 10 wt%의 무지방 분유, 최대 약 10 wt%의 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 포함하는, 조성물.
  34. 제30항에 있어서, 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율이 약 1:20 내지 약 20:1인, 조성물.
  35. 제30항에 있어서, 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율이 60:40인, 조성물.
  36. 제30항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 안정화제가 칼슘 카세이네이트, 나트륨 카세이네이트, 초유로부터의 카세이네이트 단리물 또는 이의 조합물인, 조성물.
  37. 제36항에 있어서, 약 2 wt% 내지 약 7 wt%의 칼슘 카세이네이트를 포함하는, 조성물.
  38. 제30항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 조성물의 약 50 wt% 내지 약 80 wt%의 총 단백질 함량을 포함하는, 조성물.
  39. 제30항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 조성물의 약 15 wt% 내지 약 60 wt%의 양으로 면역글로불린 G를 포함하는, 조성물.
  40. 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항의 조성물을 포함하는 투여 형태.
  41. 제40항에 있어서, 상기 투여 형태가 분말, 과립, 정제, 경구 붕해 정제, 캡슐, 내산성 캡슐, 트로키제, 로젠지제, 영양 바, 소프트 츄, 하이드로겔, 젤리, 요구르트, 현탁액 또는 즉석 음료인, 투여 형태.
  42. 제40항 또는 제41항에 있어서, 상기 투여 형태가 내산성 캡슐인, 투여 형태.
  43. 이를 필요로 하는 대상체에게 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체의 위장관 염증과 연관된 질환 또는 장애를 치료, 완화 또는 예방하는 방법으로서, 상기 조성물이:
    a) 치료학적 유효량의 회복 촉진 인자, 면역 인자 또는 이의 조합물;
    b) 영양 프로테아제 억제제; 및
    c) 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는, 방법.
  44. 제40항에 있어서, 상기 조성물이 추가로 안정화제를 포함하는, 방법.
  45. 제44항에 있어서, 상기 안정화제가 카세인, 카세이네이트 염, 폴리덱스트로스, 트레할로스, 외인성 초유 지방, 스테아린, 알기네이트, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스, 알기네이트 + 옥수수 전분, 알기네이트 + 아크릴 중합체, 또는 이의 조합물인, 방법.
  46. 제43항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 회복 촉진 인자가 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 난 생성물, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질 또는 기능식품적으로 허용되는 염 또는 이들의 조합물로부터 선택되는, 방법.
  47. 제46항에 있어서, 상기 초유가 소 초유인, 방법.
  48. 제47항에 있어서, 상기 소 초유가 탈지 소 초유, 후기 소 초유, 부분 탈지된 소 초유, 소 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 부분 탈지된 소 초유, 전체 소 초유, 또는 이들의 조합물인, 방법.
  49. 제46항에 있어서, 상기 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질이 상피 성장 인자(EGF), 형질전환 성장 인자 α(TGF-α), 형질전환 성장 인자 β(TGF-β), 인슐린 유사 성장 인자 I(IGF-I) 및 인슐린 유사 성장 인자 II(IGF-II), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 우유 지방구(Milk fat globule)-상피 성장 인자 8(MFG-E8) 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염을 포함하는 재조합 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질인, 방법.
  50. 제46항에 있어서, 상기 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염의 치료학적 유효량이 1일 대상체의 체중 kg 당 0.001 mg 내지 약 10 mg, 약 0.005 mg 내지 약 5 mg, 약 0.01 mg 내지 약 1 mg, 또는 약 20 μg 내지 약 200 μg으로 투여되는, 방법.
  51. 제46항에 있어서, 상기 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염의 치료학적 유효량이 1일 당 0.01 mg 내지 약 500 mg, 약 0.05 mg 내지 약 80 mg, 약 0.1 mg 내지 약 50 mg, 약 0.5 내지 약 10 mg 또는 약 1 mg 내지 약 5 mg으로 투여되는, 방법.
  52. 제43항에 있어서, 상기 면역 인자가 면역글로불린, 사이토킨, 항미생물 펩타이드 또는 이들의 조합인, 방법.
  53. 제43항에 있어서, 상기 영양 프로테아제 억제제가 카세인인, 방법.
  54. 제43항에 있어서, 상기 영양 프로테아제 억제제가 영양 트립신 억제제인, 방법.
  55. 제54항에 있어서, 상기 영양 트립신 억제제가 효소 활성 콩 생성물, 오보뮤코이드, 대두 트립신 억제제, 또는 이들의 조합물인, 방법.
  56. 제55항에 있어서, 상기 효소 활성 콩 생성물이 생 콩가루, 생 콩밀, 생 콩 생성물, 최소 가공 대두 생성물, 또는 이들의 조합물인, 방법.
  57. 제43항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이:
    약 40 wt% 내지 약 95 wt%의 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 또는 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물; 및
    약 5 wt% 내지 약 25 wt%의 효소 활성 콩 생성물을 포함하는, 방법.
  58. 제57항에 있어서, 상기 조성물이 약 5 wt% 내지 약 40 wt%의 안정화제를 포함하는, 방법.
  59. 제57항에 있어서, 상기 조성물이 약 5 wt% 내지 약 40 wt%의 카세인을 포함하는, 방법.
  60. 제57항에 있어서, 상기 조성물이 약 2 wt% 내지 약 7 wt%의 카세인을 포함하는, 방법.
  61. 제57항에 있어서, 상기 조성물이 콩 렉틴, 중간-쇄 트리글리세리드, 유장 단백질 농축물, 무지방 분유, 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 추가로 포함하는, 방법.
  62. 제57항에 있어서, 상기 조성물이 최대 약 2 wt%의 콩 렉시틴, 최대 약 2 wt%의 중간-쇄 트리글리세리드, 최대 약 2 wt%의 방향제, 최대 약 50 wt%의 유장 단백질 농축물, 최대 약 10 wt%의 무지방 분유, 최대 약 10 wt%의 우유 단백질 농축물, 또는 이들의 조합물을 포함하는, 방법.
  63. 제57항에 있어서, 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율이 약 1:20 내지 약 20:1인, 방법.
  64. 제57항에 있어서, 초유 유장 농축물 대 유장 단백질 농축물의 비율이 60:40인, 방법.
  65. 제51항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 조성물의 약 50 wt% 내지 약 80 wt%의 총 단백질 함량을 포함하는, 방법.
  66. 제57항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 조성물의 약 15 wt% 내지 약 60 wt%의 양으로 면역글로불린 G를 포함하는, 방법.
  67. 이를 필요로 하는 대상체에게 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체의 위장관 염증과 연관된 질환 또는 장애를 치료, 완화 또는 예방하는 방법으로서, 상기 조성물이:
    a) 치료학적 유효량의 회복 촉진 인자 및/또는 면역 인자;
    b) 안정화제; 및
    c) 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는, 방법.
  68. 제67항에 있어서, 상기 안정화제가 카세인, 카세이네이트 염, 폴리덱스트로스, 트레할로스, 외인성 초유 지방, 스테아린, 알기네이트, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스, 알기네이트 + 옥수수 전분, 알기네이트 + 아크릴 중합체, 또는 이의 조합물인, 방법.
  69. 제67항에 있어서, 상기 회복 촉진 인자가 초유, 후기 초유, 탈지 초유, 부분 탈지된 초유, 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 난 생성물, 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질 또는 기능식품적으로 허용되는 염 또는 이들의 조합물로부터 선택되는, 방법.
  70. 제69항에 있어서, 상기 초유가 소 초유인, 방법.
  71. 제70항에 있어서, 상기 소 초유가 탈지 소 초유, 후기 초유, 소 초유 유장 농축물과 유장 단백질 농축물의 혼합물, 부분 탈지된 소 초유, 전체 소 초유, 또는 이들의 조합물인, 방법.
  72. 제69항에 있어서, 상기 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질이 상피 성장 인자(EGF), 형질전환 성장 인자 α(TGF-α), 형질전환 성장 인자 β(TGF-β), 인슐린 유사 성장 인자 I(IGF-I) 및 인슐린 유사 성장 인자 II(IGF-II), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 우유 지방구(Milk fat globule)-상피 성장 인자 8(MFG-E8) 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염을 포함하는 재조합 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질인, 방법.
  73. 제72항에 있어서, 상기 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염의 치료학적 유효량이 1일 당 대상체의 체중 kg 당 0.001 mg 내지 약 10 mg, 약 0.005 mg 내지 약 5 mg, 약 0.01 mg 내지 약 1 mg, 또는 약 20 μg 내지 약 200 μg으로 투여되는, 방법.
  74. 제72항에 있어서, 상기 단리된 회복 촉진 펩타이드 또는 단백질, 또는 이의 기능식품적으로 허용되는 염의 치료학적 유효량이 1일 당 약 0.01 mg 내지 약 500 mg, 약 0.05 mg 내지 약 80 mg, 약 0.1 mg 내지 약 50 mg, 약 0.5 내지 약 10 mg 또는 약 1 mg 내지 약 5 mg으로 투여되는, 방법.
  75. 제67항에 있어서, 상기 면역 인자가 면역글로불린, 사이토킨, 항미생물 펩타이드 또는 이들의 조합물인, 방법.
  76. 제43항 내지 제75항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 질환 또는 장애가 염증성 장 질환, 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID) 위장 장애, 화학치료요법 유발 점막염, 방사선 유발 점막염, 위막성(pseudomembranous) 대장염, 위염, 소화성 궤양, 괴사성 장염, 과민성 장 증후군, 장 누수, 소장 세균 과증식(SIBO), 비궤양성 소화불량 또는 기능성 소화불량인, 방법.
  77. 제76항에 있어서, 상기 염증성 장 질환이 궤양성 대장염, 불확정 대장염, 또는 크론 질환인, 방법.
  78. 제43항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 대상체에서 미엘로퍼옥시다제 수준을 감소시키는데 효과적인, 방법.
  79. 제43항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 위액 또는 하이드로클로라이드/펩신 소화 및 키모트립신/트립신 소화를 받을 때 동일한 조건하에서 회복 촉진 인자 또는 면역 인자 단독의 활성과 비교하여 회복 촉진 인자 또는 면역 인자의 활성을 유의적으로 보존하는데 효과적인, 방법.
  80. 제43항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법이 유효량의 하나 이상의 추가 활성제를 대상체에게 동시 투여하는 것을 추가로 포함하는, 방법.
  81. 제43항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체가 신생아가 아닌 사람 대상체인, 방법.
  82. 대상체에서 백신접종 항체 역가를 증진시키는 방법으로서, 상기 방법이:
    a) 치료학적 유효량의 조성물을 상기 대상체에게 경구 투여하는 단계로서, 상기 조성물이:
    i) 회복 촉진 인자, 면역 인자 또는 이의 조합물;
    ii) 영양 프로테아제 억제제;
    iii) 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제; 및
    iv) 임의로 안정화제를 포함하는 단계; 및
    b) 상기 대상체에게 백신을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  83. 제82항에 있어서, 상기 백신이 COVID-19 백신, 인플루엔자 백신, 뉴모코커스성 백신, 파상풍 백신, 파상풍-디프테리아-백일해 백신, 홍역-볼거리-풍진 백신, 사람 파필로마바이러스 백신, A형 간염 백신, B형 간염 백신, 메닌고코커스성 백신, 헤모필러스 인플루엔자 b형 백신, 또는 조스터 백신인, 방법.
  84. 제82항에 있어서, 상기 백신이 수의학 백신이고, 임의로, 상기 수의학 백신이 홍역 백신, 광견병 백신, 파보바이러스 백신, 조류 인플루엔자 백신, 말 웨스트 나일 바이러스 백신, 말 인플루엔자 바이러스 백신, 고양이 백혈병 바이러스 백신, 림프구성 맥락수막염 바이러스 백신, 소 바이러스 설사 바이러스 백신, 고양이 면역결핍 바이러스 백신, 돼지 헤르페스 바이러스 백신, 구제역 바이러스 백신, 소 헤르페스바이러스-1 관련 질환 백신 또는 뉴캐슬 질환 바이러스 백신인, 방법.
  85. 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항의 조성물을 포함하는 식이 보충물.
  86. 정제된 락토페린, 안정화제 및 임의로 기능식품적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물.
  87. 제86항에 있어서, 상기 안정화제가 카세인, 카세이네이트 염, 폴리덱스트로스, 트레할로스, 외인성 초유 지방, 스테아린, 알기네이트, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스 수성 분산액, 알기네이트 + 에틸 셀룰로스, 알기네이트 + 옥수수 전분, 또는 알기네이트 + 아크릴 중합체인, 조성물.


KR1020237033082A 2021-02-26 2022-02-25 안정화된 초유 조성물 KR20240004268A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202163154495P 2021-02-26 2021-02-26
US63/154,495 2021-02-26
PCT/US2022/017937 WO2022183012A1 (en) 2021-02-26 2022-02-25 Stabilized colostrum compositions

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20240004268A true KR20240004268A (ko) 2024-01-11

Family

ID=83048482

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020237033082A KR20240004268A (ko) 2021-02-26 2022-02-25 안정화된 초유 조성물

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20220362303A1 (ko)
EP (1) EP4297589A1 (ko)
KR (1) KR20240004268A (ko)
CN (1) CN117750889A (ko)
AU (1) AU2022227009A1 (ko)
WO (1) WO2022183012A1 (ko)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11805995B1 (en) * 2022-11-22 2023-11-07 King Faisal University Saliva collection kit
WO2024178252A1 (en) * 2023-02-22 2024-08-29 Lactea Therapeutics Llc Purified lactoferrin compositions and methods of use

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AUPP327198A0 (en) * 1998-04-30 1998-05-21 Northfield Laboratories Pty Ltd A food composition and method of using same
JP6449771B2 (ja) * 2013-08-26 2019-01-09 株式会社明治 乳酸菌を用いた抗体価上昇剤
WO2019106147A1 (en) * 2017-12-01 2019-06-06 Nestec S.A. Human milk fortifier composition
US20220047646A1 (en) * 2019-02-26 2022-02-17 Pantheryx, Inc. Compositions for management of disorders of the gastrointestinal tract

Also Published As

Publication number Publication date
AU2022227009A1 (en) 2023-09-21
EP4297589A1 (en) 2024-01-03
CN117750889A (zh) 2024-03-22
WO2022183012A1 (en) 2022-09-01
US20220362303A1 (en) 2022-11-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20240245761A1 (en) Methods of treating celiac disease
KR20240004268A (ko) 안정화된 초유 조성물
US20150238573A1 (en) Nutritional food and feed, composition, processing and method of use
RU2723097C1 (ru) Способ получения яичного желтка с высоким содержанием af-16
JP2018531214A6 (ja) 高含量のａｆ−１６を有する卵黄の産生方法
RU2440129C2 (ru) Стимулирование пероральной толерантности гликозилированными белками
KR100460173B1 (ko) 헬리코박터 파일로리 정착 억제제
ES2827254T3 (es) Hidrolizado de proteína de la leche para su uso en el tratamiento de la diarrea
WO2017119476A1 (ja) 神経性疾患予防用組成物
ES2927738T3 (es) Hidrolizado de proteína marina con bajo contenido de flúor y trimetilamina
JP4474581B2 (ja) ヘリコバクター・ピロリ接着阻害剤
Playford et al. Bovine Colostrum: Its Constituents and Uses. Nutrients. 2021; 13: 265
US20230096487A1 (en) Undenatured Type II Collagen in Food and Beverage Applications and Uses Thereof
JP3255161B2 (ja) ヘリコバクター・ピロリ定着阻害剤
WO2021172546A1 (ja) 消化酵素剤
JP7417228B2 (ja) 卵アレルギーの予防剤等およびそれを含有する食品組成物
JP3597784B2 (ja) 消化性潰瘍抑制組成物及びそれを含有する飲食品
Losso et al. Egg Bioactives and Chronic Degenerative Diseases
JP2003206235A (ja) 消化器系疾患予防・治療用組成物