KR20230174030A - 피부 조직의 피부세포 분리용 비접촉식 초음파 장치 및 이를 이용한 피부세포 분리 방법 - Google Patents

피부 조직의 피부세포 분리용 비접촉식 초음파 장치 및 이를 이용한 피부세포 분리 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 초음파를 발진시키는 발진부(200); 발진부(200)에서 출력된 초음파에 의해 진동되는 진동부(300); 피부 조직이 주입되어 진동부(300)에 고정되는 용기(T); 및 용기(T)내에서 회전 가능하게 고정된 파쇄수단(410)을 회전시켜 피부 조직을 파쇄하는 파쇄 구동부(400); 를 포함하는 피부 조직의 피부세포 분리용 비접촉식 초음파 장치를 포함한다.

Description

피부 조직의 피부세포 분리용 비접촉식 초음파 장치 및 이를 이용한 피부세포 분리 방법{NON-CONTACT TYPE ULTRASONIC DEVICE FOR SEPARATING STROMAL VASCULAR FRACTION FROM SKIN TISSUE AND SEPARATING METHOD STROMAL VASCULAR FRACTION USING THE SAME}
본 발명은 피부 조직의 피부세포 분리용 비접촉식 초음파 장치 및 이를 이용한 피부세포 분리 방법에 관한 것이다.
기질혈관분획은 크론(Crohn's)병, 이식편 숙주 반응(graft-versus-host)병, 다발성 경화증과 염증 성장 질환(inflammatory bowel disease)과 같은 자가 면역 및 알러지 병리학, 급성 심근 경색(myocardial infarction), 하지 허혈, 불치성 만성 창상(chronic wounds), 방사선 장애(radiation injury), 요실금(urinary incontinence) 등의 증상에 대한 임상 시험, 및 여러 예비 질병 치료 모델에서 임상적 효과를 보임이 보고되고 있다. 또한, 기질혈관분획은 자가　지방　이식의 생존을 연장하여, 미용 및 재활 의약품으로의 활용이 기대된다.
현재까지는, 피부 조직 또는 지방 조직으로부터 세포를 추출할 때, 콜라게나아제 등의 효소를 이용하여 세포 분리를 진행하는 방식이 주로 사용되고 있다.
일례로, 대한민국 공개특허 제10-2018-0009435호에서는 세척한 지방 조직에 콜라게나아제, 디스파아제 및 아큐타아제로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 효소를 포함하는 조직해리용 효소제제를 처리하여, 지방 조직으로부터 기질혈관분획을 분리하는 방법에 대해 개시하고 있다.
그러나, 상기 특허에 개시된 바와 같은, 효소적 방식의 경우에는, 시간 및 비용이 많이 들어 경제적이지 못하며, 효소로 인한 오염 또는 효소로 인한 세포 파괴에 대한 문제가 있어, 그 사용이 제한되고 있는 추세이다.
이러한 문제를 해결하기 위해, 최근에는 접촉식 초음파를 이용하거나, 원심 분리를 이용하여, 조직으로부터 세포를 분리하고자 하는 다양한 시도들이 계속되고 있다.
그러나, 접촉식 초음파의 경우에는, 초음파 노즐과 피부 조직이 직접적으로 맞닿게 되어, 오염 및 세포 파괴가 쉬운 문제가 있다. 또한, 원심 분리의 경우에는 조직으로부터 분리되는 세포수가 현저히 적어, 효율성이 떨어지는 문제가 있다.
대한민국 공개특허 제10-2018-0009435호
본 발명은 상기와 같은 종래의 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로, 본 발명의 목적은 피부 조직에서 세포분리 시 세포수를 늘릴 수 있는 비접촉식 초음파 장치를 제공함에 있다.
또한, 본 발명은 비접촉식 초음파 장치를 이용한 피부 조직의 피부세포분리 방법을 제공함에 있다.
본 발명의 목적은 상기된 바와 같은 기술적 과제로 한정되지 않으며, 이하의 설명으로부터 또 다른 기술적 과제가 도출될 수 있다.
본 발명은 상기와 같은 목적을 달성하기 위하여 하기와 같은 실시예를 포함할 수 있다.
본 발명의 실시예는 초음파를 발진시키는 발진부와, 발진부에서 출력된 초음파에 의해 진동되는 진동부와, 피부 조직이 주입되어 진동부에 고정되는 용기 및 용기내에서 회전 가능하게 고정된 파쇄수단을 회전시켜 피부 조직을 파쇄하는 파쇄 구동부를 포함하는 피부 조직의 피부세포 분리용 비접촉식 초음파 장치를 제공할 수 있다.
위 실시예에서, 진동부는 상하로 연통되어 용기가 고정되는 복수의 고정공을 포함할 수 있다.
또한, 파쇄수단은 용기 내에서 회전 가능하게 고정되어 피부 조직을 파쇄하는 헤드 및 용기의 하측으로 하향 연장되어 파쇄 구동부에 연결되고, 파쇄 구동부에서 발생된 회전력으로 헤드를 작동시키는 연결축을 포함할 수 있다.
또한, 진동부는 발진부와 착탈 가능하다.
위 실시예에서 발진부는 일방향으로 연장되는 고정축을 포함하고, 진동부는 일면에서 고정축이 연결되는 체결공을 포함할 수 있다.
또한, 발진부는 주파수가 30 ~ 40 kHz인 초음파를 1 ~ 10 분 동안 조사하는 것; 을 특징으로 한다.
본 발명의 다른 실시예는 피부 조직을 용기의 내부 공간에 주입하고, 발진부에 연결되는 진동부의 고정구에 용기를 고정시키는 단계와, 용기 내에 회전 가능하게 고정된 파쇄수단이 피부 조직을 파쇄하고, 발진부가 초음파를 출력하여 진동부를 통해 용기에 주입 및 파쇄된 피부 조직으로 초음파를 출력하여 용기에서 기질혈관분획을 분리하는 단계 및 용기 내에서 피부 조직으로부터 분리된 피부세포를 추출 후 다른 용기로 보관 하는 단계를 포함할 수 있다.
그러므로 본 발명은 세포 오염 또는 파괴를 최소화시키면서 피부 조직으로부터 높은 효율로 피부세포를 추출할 수 있다.
또한, 본 발명은 비접촉식 초음파를 적용하여 효소를 투입하지 않기에 종래와 같은 원심분리 및/또는 세척과정이 필요하지 않아 공정이 단축될 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 피부 조직의 피부세포 분리용 비접촉식 초음파 장치를 간략 도시한 블럭도 이다.
도 2는 도 1의 비접촉식 초음파 장치를 도시한 도면이다.
도 3은 진동부 및 용기를 도시한 사시도이다.
도 4는 도 3의 요부 확대 도면이다.
도 5는 파쇄수단의 일예를 도시한 도면이다.
도 6은 본 발명에 따른 비접촉식 초음파 장치를 이용한 피부 조직의 피부세포 분리 방법을 도시한 순서도이다.
아래에서는 첨부한 도면을 참조하여 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예를 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다. 그리고 도면에서 본 발명을 명확하게 설명하기 위해서 설명과 관계없는 부분은 생략하였다.
본 발명의 명세서 및 청구범위에 사용된 용어 또는 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정 해석되지 아니하며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
본 발명의 명세서 전체에 있어서, 어떤 부분이 어떤 구성 요소를 "포함" 한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성 요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
본 발명의 명세서 전체에 있어서, "A 및/또는 B"는, A 또는 B, 또는 A 및 B를 의미한다.
이하에서 본 발명에 따른 피부 조직의 피부세포 분리용 비접촉식 초음파 장치의 바람직한 실시예를 설명한다.
도 1은 본 발명에 따른 피부 조직의 피부세포 분리용 비접촉식 초음파 장치를 간략 도시한 블럭도, 도 2는 도 1의 비접촉식 초음파 장치를 도시한 도면이다.
도 1 및 도 2를 참조하면, 본 발명은 초음파를 발진하는 발진부(200)와, 초음파에 의해 진동되는 진동부(300)와, 피부조직을 수용하는 용기(T)와, 파쇄수단(410)을 구동시키는 파쇄 구동부(400)와, 파쇄 구동부(400) 및/또는 발진부(200)를 제어하는 컨트롤러(100)를 포함한다.
발진부(200)는 컨트롤러(100)의 제어에 의하여 초음파를 발진한다. 여기서 발진부(200)는 30 ~ 40 kHz의 주파수를 갖는 초음파를 1~10분 발진시킨다.
예를 들면, 실험을 통하여 측정한 결과, 초음파의 주파수가 30 kHz 미만일 경우에는 피부 조직에서 피부세포 분리 효율이 저하될 수 있다.
만약, 상기 초음파의 주파수가 40 kHz 초과일 경우에는, 세포의 손상이 발생되어 피부세포 분리 효율이 저하될 수 있다.
그러나 33 ~ 37 kHz의 주파수를 갖는 초음파로서 피부세포를 분리할 경우에는 위 주파수 대역의 초음파 보다 효율이 높은 것으로 확인되었다. 이는 후술한다.
또한, 발진부(200)는 일방향으로 연장되는 고정축(210)을 포함하며, 고정축(210)은 진동부(300)에 억지 끼움 또는 나사 결합, 별도의 고정 치구에 의해 고정될 수 있다. 즉, 발진부(200)와 진동부(300)는 분리형 구조로서 상호 착탈이 용이하다.
고정축(210)은 일방향으로 연장되는 막대 또는 봉형상으로서 내측에 혼(Horn)이 설치될 수 있다. 그리소 고정축(210)은 선단이 진동부(300)의 몸체에 억지 끼움식 또는 나사 결합 방식으로 체결될 수 있다.
또는, 고정축(210)은 억지 끼움으로 체결된 이후에 별도의 나사나 고정 볼트에 의해 고정될 수 있다.
따라서 본 발명에서 발진부(200)는 32 ~ 38 kHz의 주파수로 1~10분동안 초음파를 발진시키는 것이 바람직하며, 보다 바람직하게로 33 ~ 37 kHz의 주파수를 갖는 초음파를 발진한다.
진동부(300)는 발진부(200)에서 출력된 초음파를 용기(T)를 진동시킨다. 이와 같은 진동부는 도 3을 참조하여 설명한다.
도 3은 진동부 및 용기를 도시한 사시도이다.
도 3을 참조하면, 진동부(300)는 진동체(310)와, 진동체(310)에서 상하로 관통되는 복수의 고정구(320)를 포함한다.
진동체(310)은 발진부에서 발진된 초음파를 용기에 전달한다. 즉, 진동체(310)는 초음파에 의해 진동되어 용기(T)를 진동시킨다.
고정구(320)는 용기(T)가 끼움식으로 고정되도록 진동체(310)의 상면에서 상하로 관통 형성된다.
또한, 진동부(300)는 진동체(310)의 일면에서 고정축(210)이 체결되는 체결공(330)이 포함된다.
여기서, 초음파에 의해 진동되는 혼(Horn)은 진동부(300)의 진동체(310) 내에 설치되거나, 발진부(200)에서 진동부(300)로 연장 및 체결되는 고정축(210) 내에 설치되어 진동부(300)를 진동시킬 수 있다.
따라서 진동부(300)는 초음파에 의해 발생된 진동을 용기(T)에 가한다.
그러므로 용기(T)는 직접적으로 초음파가 가해지는 것이 아닌, 진동부(300)를 통해 전달된다.
파쇄 구동부(400)는 파쇄수단(410)을 구동시킨다. 여기서 파쇄수단(410)은 용기(T) 내측에서 파쇄 구동부(400)에 의해 회전된다.
용기(T)와 파쇄수단(410)은 도 4 및 도 5를 참조하여 설명한다.
도 4는 도 3의 확대 도면, 도 5는 파쇄수단의 일예를 도시한 도면이다.
도 4 및 도 5를 참조하면, 용기(T)는 커버(T1)와, 수용부(T2)를 포함한다.
커버(T1)는 수용부(T2)의 상단에 분리 가능하게 결합된다. 여기서 커버(T1)는 주사기나 노즐이 연결될 수 있도록 하나 이상의 주입구(도시되지 않음)가 형성될 수 있다.
수용부(T2)는 상면이 개방되고, 내측에 피부 조직이 수용되는 공간을 이루어 하향 연장된다. 여기서 수용부(T2)의 개방된 상면은 커버(T1)에 의해 개폐되고, 피부 조직을 파쇄하는 파쇄수단(410)이 회전 가능하게 구비될 수 있다.
파쇄수단(410)은, 도면을 참조하여 예로서 설명하면, 용기(T)에 인입된 피부 조직과 물리적인 접촉하여 파쇄하는 헤드(411)와, 헤드(411)에 회전력을 전달하는 전달축을 포함한다.
여기서 헤드(411)는 수용부(T2)의 내측 하단에 회전 가능하게 고정된다. 아울러 헤드(411)는 복수의 날개로 이루어진 회전 날개(411)로 구성되며, 중심부에 관통된 끼움구(411a)가 형성된다.
또한, 헤드(411)는 위와 같은 실시예로 한정되는 것이 아니며, 복수의 마찰 돌기가 돌출되는 구형의 볼 형상, 상방 또는 측방으로 연장되는 복수의 블레이드 중 어느 하나일 수 있다.
위와 같은 설명은 예시적인 것으로서 피부 조직과 물리적인 접촉시에 이를 파쇄할 수 있는 모든 공지 기술이 적용 가능하다.
연결축(412)은 헤드(411)의 하측에서 하향 연장되어 파쇄 구동부(400)에 연결된다. 여기서 연결축(412)은 선단이 헤드(411)의 끼움구(411a)에 체결되며, 하단은 파쇄 구동부(400)에 연결된다.
또한, 헤드(411)는 용기(T) 내에 위치되고, 연결축(412)은 용기(T) 하면을 연통하여 하향 연장되어 하측의 파쇄 구동부(400)에 연결될 수 있다.
앞서 설명한 바와 같이 헤드(411)는 다양한 실시예로 구현될 수 있으며, 연결축(412) 역시 헤드(411)의 형상이나 구조에 따라 그 형상이 변형될 수 있다.
예를 들면, 헤드(411)는 별도의 회전체(도시되지 않음)에 의해 용기(T) 내에 설치되고, 회전체(도시되지 않음)는 용기(T)의 하면을 관통하여 외측으로 돌출된다. 여기서 회전체(도시되지 않음()의 하면은 연결축(412)과 체결되는 형상을 갖는다. 따라서 연결축(412)은 용기(T) 하면의 하측에서 파쇄 구동부(400)와 회전체(도시되지 않음) 사이에 연결되며, 파쇄 구동부(400)에 의해 발생된 힘으로 회전체(도시되지 d낳를 회전시킬 수 있다.
따라서 연결축(412)은 파쇄 구동부(400)에서 발생된 힘에 의해 회전되어 헤드(411)를 작동시킨다.
파쇄 구동부(400)는 컨트롤러(100)의 제어에 의하여 구동되어 파쇄수단(410)을 구동시킨다. 여기서 파쇄 구동부(400)는 모터 또는 자력에 의해 회전력을 발생시킬 수 있는 전자석 회전체(도시되지 않음)일 수 있다.
즉, 본 발명은 파쇄수단(410)에 의해 피부 조직을 물리적으로 파쇄함과 동시 또는 순차적으로 용기(T)가 설치된 진동부(300)를 통하여 용기(T)를 진동시켜 파쇄된 피부 조직으로부터 피부세포를 분리할 수 있다.
이와 같이 본 발명에 따른 피부조직의 피부세포 분리는 종래에 비하여 효소가 첨가되지 않음에 따라 세포 파괴가 일어나지 않아 분리 후 세척공정을 진행할 필요가 없다.
이하에서는 본 발명의 실시예와 기존의 효소 첨가 방식에 의한 비교예를 각각 설명하고, 실험에 따라 실시예와 비교예의 분리된 줄기세포수를 측정하였다.
[실시예]
실시예 1 : 피부 조직으로부터 기질혈관분획의 분리
실시예1은 도 6을 참조하여 설명한다. 도 6은 본 발명에 따른 비접촉식 초음파 장치를 이용한 피부세포 분리 방법을 도시한 순서도이다.
도 6을 참조하면, (A)피부 조직을 용기(T)에 주입하고, 용기(T)를 진동부(300)를 통해 파쇄 구동부(400)에 연결하였다.
(B)컨트롤러(100)에 구비된 조작 패널을 통하여 파쇄 구동부(400)를 작동시켜 용기(T)에 주입된 피부 조직을 물리적으로 파쇄하였다. 이때, 파쇄수단(410)은 용기(T) 내에서 회전되면서 피부 조직을 파쇄 하고, 발진부(200)를 작동시켰다. 따라서 발진부(200)는 33 ~ 37 kHz 주파수로 약 5 분 동안 진동부(300) 및/또는 용기(T)에 초음파를 조사하였다.
(C)초음파의 조사 및 파쇄수단(410)의 회전 후, 용기(T)에는 피부세포가 가장 아래쪽으로 존재되고, 나머지 용액은 상층부에 층을 이루게 된다. 따라서 작업자는 용기(T) 내에 수용된 피부세포만을 주사기로 추출한 다음, 이를 새로운 용기(T)로 추출하였다.
[비교예]
비교예 1
효소적 방식에 따라, 피부 조직으로부터 피부세포를 분리하였다.
구체적으로, 피부 조직 1 mL 및 콜라게나제 혹은 트립신 1 mL를 혼합하고 약 37 ℃ 에서 40 분간 반응시킨 뒤, 원심분리(1,500 rpm, 5분)하고, 침전된 피부세포를 추출하였다. 이를 세척 용액과 혼합하여 세척하고, 원심분리(1,500 rpm, 5분)한 뒤, 세척된 피부세포를 추출하였다.
비교예 2
실시예의 (B) 과정을 생략하였다. 다만, 직접 초음파 방식을 적용하였고, 초음파 출력 이후에 용기(T)를 원심 분리기에 장착한 뒤, 약 900 ~ 1,000 rpm 의 회전수로 3 분 동안 원심 분리를 실시하여 피부세포를 분리하였다. 그 외 실시예 1과 동일하게 실시하였다.
비교예 3 내지 6
상기 (B) 단계에서, 표 1과 같은 조건으로 초음파를 조사한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일하게 실시하였다.
비교예3 비교예4 비교예5 비교예6
초음파 주파수 20 ~ 25 kHz 45 ~ 50 kHz 33 ~ 37 kHz 33 ~ 37 kHz
조사 시간 5 분 5 분 30 초 15 분
위와 같은 실시예와, 비교예 1 내지 6에 의해 추출된 피부세포 수는 아래 표2와 같다. 여기서 실시예 및 비교예들로부터 추출된 피부세포를 수는 세포 자동 측정기기 NC-200으로 측정하였다. 측정 결과는 아래 표 2와 같다.
세포수 세포수
실시예1 65,800 비교예4 34,200
비교예1 41,800 비교예5 22,100
비교예2 37,000 비교예6 37,500
비교예3 19,000
표 2를 참조하면, 본 실시예에 의한 피부세포 수가 가장 많은 것을 알 수 있다. 즉, 본 실시예는 피부 조직으로부터 피부세포가 기존의 기술들에 비하여 높은 효율로 분리됨을 의미한다.
구체적으로, 본 실시예에 따르는 실시예 1은, 효소적 방식인 비교예 1 과 비교예 2의 직접 접촉식 초음파 처리 및 원심 분리 방식 보다, 피부세포의 분리 효율이 우수함을 알 수 있다.
또한, 실시예 1 및 비교예 3 내지 6을 비교하면, (B)단계에서 주파수가 30 ~ 40 kHz인 초음파를 1 ~ 10 분 동안 조사할 때 피부세포를의 분리 효율이 현저히 향상됨을 알 수 있다.
또한, 본 발명의 실시예와 비교예1의 생존율을 측정하였다. 관련 실험은 세포자동계수장비(Logos사 LUNA Stem 또는 Life technologies사 Countess Ⅱ automated cell counter)를 이용하였고, 실험결과는 아래 표 3과 같다.
생존율
실시예1 91.0%
비교예1 73.3%
측정결과, 본 발명에 따른 실시예는 비교예들에 비하여 높은 생존율을 갖는 것이 확인 된다.
따라서 본 발명은 위와 같은 구성 및 방법을 통하여 본 발명에서 달성하고자 하는 목적을 이룰 수 있는 것으로 확인되었다.
전술한 바와 같이, 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 기술을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며, 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.
본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허청구범위에 의하여 나타내어지며, 특허청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
100 : 컨트롤러
200 : 발진부
210 : 고정축
300 : 진동부
310 : 진동체
320 : 고정구
330 : 체결공
400 : 파쇄 구동부
410 : 파쇄수단
411 : 회전 날개
412 : 연결축
T : 용기
T1 : 커버
T2 : 수용부

Claims (8)

  1. 초음파를 발진시키는 발진부(200);
    발진부(200)에서 출력된 초음파에 의해 진동되는 진동부(300);
    피부 조직이 주입되어 진동부(300)에 고정되는 용기(T); 및
    용기(T)내에서 회전 가능하게 고정된 파쇄수단(410)을 회전시켜 피부 조직을 파쇄하는 파쇄 구동부(400); 를 포함하는 피부 조직의 피부세포 분리용 비접촉식 초음파 장치.
  2. 청구항 1에 있어서, 진동부(300)는
    상하로 연통되어 용기(T)가 고정되는 복수의 고정공;을 포함하는 피부 조직의 피부세포 분리용 비접촉식 초음파 장치.
  3. 청구항 1에 있어서, 파쇄수단(410)은
    용기(T) 내에서 회전 가능하게 고정되어 피부 조직을 파쇄하는 헤드(411); 및
    용기(T)의 하측으로 하향 연장되어 파쇄 구동부(400)에 연결되고, 파쇄 구동부(400)에서 발생된 회전력으로 헤드(411)를 작동시키는 연결축(412); 을 포함하는 피부 조직의 피부세포 분리용 비접촉식 초음파 장치.
  4. 청구항 1에 있어서, 진동부(300)는
    발진부(200)와 착탈 가능한 것; 을 특징으로 하는 피부 조직의 기질혈관 분획 분리용 비접촉식 초음파 장치.
  5. 청구항 4에 있어서, 발진부(200)는 일방향으로 연장되는 고정축(210); 을 포함하고,
    진동부(300)는 일면에서 고정축(210)이 연결되는 체결공(330);을 포함하는 피부 조직의 기질혈관 분획 분리용 비접촉식 초음파 장치.
  6. 청구항 1에 있어서, 발진부(200)는
    주파수가 30 ~ 40 kHz인 초음파를 조사하는 것; 을 특징으로 하는 피부 조직의 기질혈관 분획 분리용 비접촉식 초음파 장치.
  7. 청구항 1에 있어서, 발진부(200)는
    초음파를 1 ~ 10 분 동안 조사하는 것; 을 특징으로 하는 피부 조직의 피부세포 분리용 비접촉식 초음파 장치.
  8. 피부 조직을 용기(T)의 내부 공간에 주입하고, 발진부(200)에 연결되는 진동부(300)의 고정구(320)에 용기(T)를 고정시키는 단계;
    용기(T) 내에 회전 가능하게 고정된 파쇄수단(410)이 피부 조직을 파쇄하고, 발진부(200)가 초음파를 출력하여 진동부(300)를 통해 용기(T)에 주입 및 파쇄된 피부 조직으로 초음파를 출력하여 용기(T)내에서 피부세포를 분리하는 단계; 및
    용기(T) 내에 분리된 피부세포를 추출 후 다른 용기(T)로 보관 하는 단계; 를 포함하는 비접촉식 초음파 장치를 이용한 피부 조직의 피부세포 분리방법.


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