KR20230166089A - Sirp 알파-기반 키메라 단백질을 이용하는 병용 요법 - Google Patents

Sirp 알파-기반 키메라 단백질을 이용하는 병용 요법 Download PDF

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테일러 슈라이버
실바 수레쉬 데
조지 프롬
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샤턱 랩스 인코포레이티드
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Abstract

본 개시내용은 특히 질환의 치료 방법, 예컨대, 암에 대한 면역요법에서의 용도를 발견한 키메라 단백질을 포함하는 조성물의 조합물에 관한 것이다.

Description

SIRP 알파-기반 키메라 단백질을 이용하는 병용 요법
기술분야
본 개시내용은 특히 질환을 치료하기 위한 방법, 예컨대, 암에 대한 면역요법에서의 용도를 발견한 키메라 단백질을 포함하는 조성물의 조합물에 관한 것이다.
우선권
본 출원은 2022년 2월 9일자로 출원된 미국 특허 가출원 제63/308,304호; 및 2021년 3월 5일자로 출원된 제63/157,324호의 우선권의 유익을 주장하며, 이들 각각의 내용은 이들의 전문이 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
전자적으로 제출된 텍스트 파일의 설명
본 출원은 서열목록을 포함한다. 이는 EFS-Web을 통해 파일명 "SHK-045PC_116981-5045_ST25"의 ASCII 텍스트 파일로서 전자적으로 제출되었다. 서열목록은 용량이 57,499 바이트이고, 2022년 3월 2일자로 생성되었다. 서열목록은 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용된다.
병용 요법(또는 조합 요법: combination therapy)은 현대 암 치료에서 매우 흔하다. 그러나, 병용 요법은 상당히 예측 불가능하다. 예를 들어, 병용 요법은 약물 표적 쌍이 검증된 경우에도 효능이 없을 수도 있다. 병용 요법이 직면한 장애물에는 효능 결여, 바람직하지 않은 약물-약물 상호작용, 조합물의 약물 독성, 통상적인 근본적 내성 메커니즘의 발생(예를 들어, 약물 배출 펌프), 치료 효능을 예측하는 것의 불능, 추가 바이오마커에 대한 요구 등을 포함한다. 일부 조합은 치료적 이점을 나타내지만, 효능은 선택된 암 그룹에서만 관찰되며, 보통 해당 암을 앓고 있는 소수의 환자에서 관찰된다. 따라서, 암을 치료하기 위한 신규한 병용 요법을 찾기 위한 더 많은 작업이 필요하다.
따라서, 일 양상에서, 본 개시내용은, (a) SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부(여기서 일부는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있음)를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L의 세포외 도메인의 일부(여기서 일부는 CD40L 수용체에 결합할 수 있음), OX40L의 세포외 도메인의 일부(여기서 일부는 OX40L 수용체에 결합할 수 있음) 또는 LIGHT의 세포외 도메인의 일부(여기서 일부는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있음)를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화(neddylation) 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다.
실시형태에서, 제1 약제학적 조성물과 제2 약제학적 조성물은 동시에 투여된다. 실시형태에서, 제1 약제학적 조성물은 제2 약제학적 조성물이 투여된 후에 투여된다. 실시형태에서, 제1 약제학적 조성물은 제2 약제학적 조성물이 투여되기 전에 투여된다. 실시형태에서, 제1 약제학적 조성물의 용량은 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 없거나 받고 있지 않은 대상체에게 투여되는 제1 약제학적 조성물의 용량보다 적다. 실시형태에서, 투여되는 제2 약제학적 조성물의 용량은 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 없거나 받고 있지 않은 대상체에게 투여되는 제2 약제학적 조성물의 용량보다 적다. 실시형태에서, 대상체는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료만을 받은 적이 있거나 이러한 치료만을 받고 있는 대상체에 비해 위장 염증 및 체중감소 없이 증가된 생존 기회, 및/또는 종양 크기 또는 암 유병률의 감소를 갖는다. 실시형태에서, 대상체는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료만을 받은 적이 있거나 이러한 치료만을 받고 있는 대상체에 비해 위장 염증 및 체중감소 없이 증가된 생존 기회, 및/또는 종양 크기 또는 암 유병률의 감소를 갖는다.
일 양상에서, 본 개시내용은, (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체의 암 치료 방법을 제공하되; 상기 대상체는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 이용하는 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다.
실시형태에서, 대상체에게 투여되는 약제학적 조성물의 용량은 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 없거나 받고 있지 않은 대상체에게 투여되는 약제학적 조성물의 용량보다 적다.
일 양상에서, 본 개시내용은 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체의 암 치료 방법을 제공하되; 대상체는 (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 이용하는 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다.
실시형태에서, 대상체에게 제공되는 약제학적 조성물의 용량은 이종성 키메라 단백질에 의한 치료를 받은 적이 없거나 받고 있지 않은 대상체에게 제공되는 약제학적 조성물의 용량보다 적다.
본 명세서에 개시된 임의의 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 저메틸화제/후성 조절자를 포함한다. 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자는 아자시티딘, 5-아자-2'-데옥시사이티딘, 수베로일아닐라이드 하이드록삼산(saha), 로미뎁신, 벨리노스탓, 파노비노스탓 및 키다마이드로부터 선택된다. 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자는 아자시티딘이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 프로테아좀 저해제를 포함한다. 실시형태에서, 프로테아좀 저해제는 보르테조밉, 카르필조밉 및 익사조밉으로부터 선택된다. 실시형태에서, 프로테아좀 저해제는 보르테조밉이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 항대사물질을 포함한다. 실시형태에서, 항대사물질은 5-플루오로유라실(5-FU), 카페시타빈, 플록수리딘, 사이타라빈(ARA-C), 겜시타빈, 데시타빈 및 비다자(vidaza)로부터 선택된다. 실시형태에서, 항대사물질은 사이타라빈(ARA-C)이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 DNA 합성 저해제를 포함한다. 실시형태에서, DNA 합성 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU), 카페시타빈, 플록수리딘, 사이타라빈(ARA-C), 겜시타빈, 데시타빈 및 비다자로부터 선택된다. 실시형태에서, DNA 합성 저해제는 사이타라빈(ARA-C) 또는 5-플루오로유라실(5-FU)이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 면역관문 저해제를 포함한다. 실시형태에서, 면역관문 저해제는 CTLA-4, PD-1 및 PD-L1로부터 선택된 경로를 저해하는 제제를 포함한다. 실시형태에서, 면역관문 저해제는 항-PD-L1 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-PD-L1 항체는 아테졸리주맙, 더발루맙, 아벨루맙, 엔바폴리맙(envafolimab), BMS-936559, CK-301, CS-1001, SHR-1316(HTI-1088), CBT-502(TQB-2450) 및 BGB-A333으로부터 선택된다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 안트라사이클린을 포함한다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 다우노루비신, 독소루비신, 에피루비신, 이다루비신, 미톡산트론 및 발루비신으로부터 선택된다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 독소루비신이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 토포아이소머라제 II 저해제를 포함한다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 II 저해제는 독소루비신, 에피루비신, 발루비신, 다우노루비신, 이다루비신, 피톡산트론, 픽산트론, 에토포사이드, 테니포사이드, 및 암사크린으로부터 선택된다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 II 저해제는 독소루비신이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 선천성 면역관문 저해제를 포함한다. 실시형태에서, 선천성 면역관문 저해제는 CD47-SIRPα 상호작용을 표적화하는 제제를 포함한다. 실시형태에서, 선천성 면역관문 저해제는 마그롤리맙, CC-90002(Celgene), CC-95251(Celgene), TTI-621(Trillium Therapeutics), TTI-622(Trillium Therapeutics), ALX148(ALX Oncology), SRF231(Surface Oncology), IBI188(Innovent), AO-176(Arch Oncology), BI 765063/OSE-172(Boehringer Ingelheim/OSE Immunotherapeutics), TG-1801/NI_1701(TG Therapeutics/Novimmune), TJC4(I-Mab) 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질로부터 선택된다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 Bcl2 저해제를 포함한다. 실시형태에서, Bcl2 저해제는 오블리메르센, 나비토클락스(ABT-263), 베네토클락스(ABT-199), 오바토클락스 메실레이트(GX15-070) 및 AT-101로부터 선택된다. 실시형태에서, Bcl2 저해제는 베네토클락스이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 단백질 네딜화 저해제를 포함한다. 실시형태에서, 단백질 네딜화 저해제는 페보네디스탓(MLN4924)이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 미세소관-표적화제를 포함한다. 실시형태에서, 미세소관-표적화제는 파클리탁셀, 에포틸론, 도세탁셀, 디스코덜모라이드, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 비노렐빈, 빈플루닌, 돌라스타틴, 할리콘드린, 헤미아스텔린 및 크립토피신 52로부터 선택된다. 실시형태에서, 미세소관-표적화제는 파클리탁셀이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 티미딜산 합성효소(TS) 저해제를 포함한다. 실시형태에서, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU), 6-머캅토퓨린(6-MP), 카페시타빈, 사이타라빈, 플록수리딘, 플루다라빈, 겜시타빈, 하이드록시카바마이드, 메토트렉세이트, 페메트렉세드, 포토트렉세이트, 랄티트렉세드, 놀라트렉세드(nolatrexed), ZD9331 및 GS7904L로부터 선택된다. 실시형태에서, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU)이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 백금 약물을 포함한다. 실시형태에서, 백금 약물은 시스플라틴, 카보플라틴, 옥살리플라틴, 네다플라틴, 헵타플라틴 및 로바플라틴으로부터 선택된다. 실시형태에서, 백금 약물은 시스플라틴이다. 실시형태에서, 백금 약물은 옥살리플라틴이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 토포아이소머라제 I 저해제를 포함한다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 I 저해제는 캠프토테신, 벨로테칸 토포테칸 및 이리노테칸으로부터 선택된다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 I 저해제는 이리노테칸이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 항-BCMA 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-BCMA 항체는 벨란타맙 마포도틴이다. 실시형태에서, 항-BCMA 항체는 벨란타맙 또는 C12A3.2이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 항-CD38 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-CD38 항체는 다라투무맙 및 이사툭시맙으로부터 선택된다. 실시형태에서, 항-CD38 항체는 다라투무맙이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 면역조절 이미드 약물(IMiD)을 포함한다. 실시형태에서, 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 아프레밀라스트, 탈리도마이드, 레날리도마이드 및 포말리도마이드로부터 선택된다. 실시형태에서, 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 레날리도마이드 또는 포말리도마이드이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 항-SLAMF7 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-SLAMF7 항체는 엘로투주맙이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 항-CD123 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-CD123 항체는 탈라코투주맙이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 돌연변이된 p53의 재활성화제를 포함한다. 실시형태에서, 돌연변이된 p53의 재활성화제는 Prima-1 또는 APR-246이다. 실시형태에서, 돌연변이된 p53의 재활성화제는 APR-246이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 항-FOLR1 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-FOLR1 항체는 파레투주맙 또는 미르베툭시맙 소라브탄신을 포함하는 미르베툭시맙이다. 실시형태에서, 항-FOLR1 항체는 파레투주맙이다.
추가로 또는 대안적으로, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 아자시티딘 및/또는 베네토클락스를 포함하되, 선택적으로 아자시티딘 및 베네토클락스는 함께 또는 별도로 투여되는 2개의 별도의 투약 단위에 함유된다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 저메틸화제/후성 조절자를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자는 아자시티딘, 5-아자-2'-데옥시사이티딘, 수베로일아닐라이드 하이드록삼산(saha), 로미뎁신, 벨리노스탓, 파노비노스탓 및 키다마이드로부터 선택된다. 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자는 아자시티딘이다.
본 명세서에 개시된 임의의 실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 SIRPα(CD172a)의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제1 도메인, 및/또는 CD40L, OX40L 또는 LIGHT의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제2 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은, (a) SIRPα(CD172a)의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L, OX40L 또는 LIGHT의 일부를 포함하는 제2 도메인, 및 (c) 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함하는 링커를 포함한다.
본 명세서에 개시된 임의의 실시형태에서, 링커는 가요성 아미노산 서열, IgG 힌지 영역 및 항체 서열로부터 선택되는 폴리펩타이드이다. 실시형태에서, 링커는 이황화 결합을 형성할 수 있는 적어도 하나의 시스테인 잔기를 포함하고/하거나 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 링커는 IgG1 또는 IgG4, 예를 들어, 인간 IgG4 또는 인간 IgG4로부터 유래된 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 링커는 서열번호 1, 서열번호 2 또는 서열번호 3의 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함한다.
실시형태에서, 제1 도메인은 서열번호 57의 아미노산 서열과 적어도 90%, 또는 적어도 93%, 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다.
실시형태에서, 제2 도메인은 서열번호 58, 서열번호 59 또는 서열번호 62의 아미노산 서열과 적어도 90%, 또는 적어도 93%, 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 제2 도메인은 서열번호 58의 아미노산 서열과 적어도 90%, 또는 적어도 93%, 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 서열번호 60, 서열번호 61 또는 서열번호 63의 아미노산 서열과 적어도 90%, 또는 적어도 93%, 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 서열번호 60의 아미노산 서열과 적어도 90%, 또는 적어도 93%, 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시형태에서, 암은 기저세포암종, 담도암; 방광암; 뼈암; 뇌 및 중추 신경계암; 유방암; 복막암; 자궁경부암; 융모암; 결장 및 직장암; 결합 조직암; 소화계의 암; 자궁내막암; 식도암; 눈암; 두경부암; 위암(위장암 포함); 교모세포종; 간암종; 간암; 상피내 신생물; 신장 또는 신세포암; 후두암; 백혈병; 간암; 폐암(예를 들어, 소세포 폐암, 비소세포 폐암, 폐의 선암종, 및 폐의 편평상피암종); 흑색종; 골수종; 신경아세포종; 구강암(입술, 혀, 입 및 인두); 난소암; 췌장암; 전립선암; 망막모세포종; 횡문근육종; 직장암; 호흡계의 암; 침샘 암종; 육종; 피부암; 편평세포암; 위암; 고환암; 갑상선암; 자궁 또는 자궁내막암; 비뇨기계의 암; 외음부암; 호지킨 및 비호지킨 림프종뿐만 아니라 B-세포 림프종을 포함하는 림프종(저등급/소포 비호지킨 림프종(NHL); 소형 림프구성(SL) NHL; 중간 등급/소포 NHL; 중간 등급 미만성 NHL; 고등급 면역아세포 NHL; 고등급 림프아구성 NHL; 고등급 소형 비절단 세포 NHL; 거대 종양 NHL; 맨틀 세포 림프종; AIDS-관련 림프종; 및 발덴스트롬 마크로글로불린혈증; 만성 림프구성 백혈병(CLL); 급성 림프아구성 백혈병(ALL); 털세포 백혈병; 만성 골수아구성 백혈병뿐만 아니라 다른 암종 및 육종; 및 이식 후 림프증식성 장애(PTLD)뿐만 아니라 모반증, 부종(예컨대, 뇌 종양과 관련) 및 메이그 증후군과 관련된 비정상적 혈관증식이거나, 이들과 관련된다.
도 1A 내지 도 1D는 I형 막관통 단백질(도 1A 및 도 1B, 좌측 단백질) 및 II형 막관통 단백질(도 1A 및 도 1B, 우측 단백질)의 개략적 도시를 나타낸다. I형 막관통 단백질 및 II형 막관통 단백질은, 이들의 막관통 도메인과 세포내 도메인이 생략되고 막관통 단백질의 세포외 도메인이 링커 서열을 이용해서 연결되어 단일 키메라 단백질을 생성하도록 조작될 수 있다. 도 1C 및 도 1D에 나타낸 바와 같이, I형 막관통 단백질, 예를 들어, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인, 및 II형 막관통 단백질, 예를 들어, CD40L 및 OX40L의 세포외 도메인은 단일 키메라 단백질에 조합된다. 도 1C는 각 단백질의 막관통 및 세포외 도메인의 생략에 의한 I형 막관통 단백질 및 II형 막관통 단백질의 연결을 도시하며, 각 단백질로부터의 유리된 세포외 도메인은 링커 서열에 의해 연결되었다. 이 도시의 세포외 도메인은 전형적으로 세포막 외부에 국재화된 I형 단백질(예를 들어, SIRPα(CD172a)) 및/또는 II형 단백질(예를 들어, CD40L, OX40L, LIGHT)의 전체 아미노산 서열, 또는 의도된 수용체 또는 리간드에 대한 결합을 보유하는 이의 임의의 부분을 포함할 수 있다. 또한, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은, 제1 세포외 도메인(도 1C 및 도 1D에서 키메라 단백질의 좌측 끝에 나타냄)이 이의 수용체/리간드에 입체적으로 결합할 수 있고/있거나 제2 세포외 도메인(도 1C 및 도 1D에서 키메라 단백질의 우측 끝에 나타냄)이 이의 수용체/리간드에 입체적으로 결합할 수 있도록, 도메인 사이에 충분한 전반적 가요성 및/또는 물리적 거리를 포함한다. 도 1D는 선형 키메라 단백질에서 연결된 세포외 도메인을 도시하되, 키메라 단백질의 각 세포외 도메인은 "바깥쪽"으로 향한다.
도 2A 및 도 2B는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 시험관내 식균작용-자극 활성에 대한 아자시티딘(저메틸화제)의 효과를 나타낸다. 유세포 분석에 의해 측정할 때, 인간 대식세포에 의한 K652 인간 만성 골수성 백혈병(CML) 세포(도 2A) 또는 Kasumi-3 인간 급성 골수세포 백혈병(AML) 세포(도 2B)의 식균작용 정도의 막대 그래프를 나타낸다. 점선은 완충제 단독 대조군으로 처리한 암세포의 식균작용 정도를 나타낸다.
도 3A 및 도 3B는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 시험관내 식균작용-자극 활성에 대한 보르테조밉(프로테아좀 저해제(PSI))의 효과를 나타낸다. 유세포 분석에 의해 측정할 때, MM1R 인간 다발성 골수종(MM) 세포(도 3A), 또는 ARD1 인간 다발성 골수종(MM) 세포(도 3B)의 인간 대식세포의 식균작용 정도의 막대 그래프를 나타낸다. 점선은 완충제 단독 대조군으로 처리한 암세포의 식균작용 정도를 나타낸다.
도 4는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 시험관내 식균작용-자극 활성에 대한 베네토클락스(Bcl-2 저해제)의 효과를 나타낸다. 유세포 분석에 의해 측정할 때, 인간 대식세포에 의한 K652 인간 만성 골수성 백혈병(CML) 세포의 인간 대식세포의 식균작용 정도의 막대 그래프를 나타낸다. 점선은 완충제 단독 대조군으로 처리한 암세포의 식균작용 정도를 나타낸다.
도 5A 및 도 5B는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 시험관내 식균작용-자극 활성에 대한 항-BCMA 항체(클론 C12A3.2)의 효과를 나타낸다. 유세포 분석에 의해 측정할 때, KM28PE 인간　다발성 골수종(MM) 세포(도 5A) 또는 KM12B 인간　다발성 골수종(MM) 세포(도 5B)의 인간 대식세포의 인간 대식세포의 식균작용 정도의 막대 그래프를 나타낸다. 점선은 완충제 단독 대조군으로 처리한 암세포의 식균작용 정도를 나타낸다.
도 6은 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 시험관내 식균작용-자극 활성에 대한 다라투무맙(항-CD38 항체)의 효과를 나타낸다. 세포 분석에 의해 측정할 때, 인간 대식세포에 의한 ARD1 인간 다발성 골수종(MM) 세포의 인간 대식세포의 식균작용 정도의 막대 그래프를 나타낸다. 점선은 완충제 단독 대조군으로 처리한 암세포의 식균작용 정도를 나타낸다.
도 7은 포말리도마이드의 시험관내 식균작용-자극 활성에 대한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 효과를 나타낸다. 세포 분석에 의해 측정할 때, 인간 대식세포에 의한 KMS12B 인간　다발성 골수종(MM) 세포의 인간 대식세포의 식균작용 정도의 막대 그래프를 나타낸다. 점선은 활성화된 T 세포 없이 처리한 암세포의 식균작용 정도를 나타낸다.
도 8은 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 시험관내 식균작용-자극 활성에 대한 엘로투맙(항-SLAM7 항체)의 효과를 나타낸다. 세포 분석에 의해 측정할 때, 인간 대식세포에 의한 ARD1 인간 다발성 골수종(MM) 세포의 인간 대식세포의 식균작용 정도의 막대 그래프를 나타낸다. 점선은 완충제 단독 대조군으로 처리한 암세포의 식균작용 정도를 나타낸다.
도 9는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 시험관내 식균작용-자극 활성에 대한 항-FOLR1 항체의 효과를 나타낸다. 세포 분석에 의해 측정할 때, 인간 대식세포에 의한 ARD1 인간 다발성 골수종(MM) 세포의 인간 대식세포의 식균작용 정도의 막대 그래프를 나타낸다. 점선은 완충제 단독 대조군으로 처리한 암세포의 식균작용 정도를 나타낸다.
도 10A 내지 도 10F는 CT26 결장직장 암종 마우스 동종이식편 모델에서 다양한 화학치료제와 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합물의 생체내 항-종양 효능을 나타낸다. 도 10A는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질, 파클리탁셀 또는 이들의 조합물의 생체내 항-종양 효능을 나타낸다. 도 10B는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질, 5-플루오로유라실 또는 이들의 조합물의 생체내 항-종양 효능을 나타낸다. 도 10C는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질, 이리노테칸 또는 이들의 조합물의 생체내 항-종양 효능을 나타낸다. 도 10D는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질, 독소루비신 또는 이들의 조합물의 생체내 항-종양 효능을 나타낸다. 도 10E는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질, 시스플라틴 또는 이들의 조합물의 생체내 항-종양 효능을 나타낸다. 도 10F는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질, 옥살리플라틴 또는 이들의 조합물의 생체내 항-종양 효능을 나타낸다.
도 11A 내지 도 11D는 유세포 분석에 의해 측정할 때, K652 인간 만성 골수성 백혈병(CML) 세포(도 11A 및 도 11C), 또는 Kasumi-3 인간 급성 골수세포 백혈병(AML) 세포(도 11B 및 도 11D)에서 CD47의 표면 발현에 대한 아자시티딘 또는 페보네디스탓(MLN4924)(도 11A 및 도 11B) 또는 칼레티쿨린(도 11C 및 도 11D)의 효과를 나타낸다.
도 12A 및 도 12B는 p53(도 12A) 및 칼레티쿨린(도 12B)의 표면 발현에 대한 APR-246의 효과를 나타낸다.
도 13A 내지 도 13C는 A20 림프종 세포 동종이식 마우스 모델에서 다양한 약물과 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합물의 생체내 항-종양 효능을 나타낸다. 도 13A는 항-PD-L1 항체와 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합물의 생체내 항-종양 효능을 나타낸다. 도 13B는 사이타라빈과 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합물의 생체내 항-종양 효능을 나타낸다. 도 13C는 아자시티딘 및/또는 페보네디스탓(MLN4924)과 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합물의 생체내 항-종양 효능을 나타낸다.
도 14A는 아자시티딘과 베네토클락스가 Kasumi-3 AML 세포에서 세포자멸사 마커 아넥신-V의 발현을 증가시켰다는 것을 나타낸다. 도 14B는 아자시티딘과 베네토클락스가 Kasumi-3 AML 세포에서 칼레티쿨린의 발현을 증가시켰다는 것을 나타낸다. 도 14C는 아자시티딘 및 베네토클락스와 조합된 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질이 AML 세포의 대식세포-매개 식균작용을 향상시켰다는 것을 나타낸다.
본 개시내용은 세포외, 또는 효과기, 신호 조절 단백질 α(SIRPα(CD172a))의 영역 및 CD40 리간드(CD40L), OX40 리간드(OX40L) 또는 LIGHT를 포함하는 키메라 단백질이 특정 특이적 항암제와 병용하여 투여될 때 암을 치료하는 데 상승 효과를 나타낸다는 발견에 부분적으로 기반한다. 또한, 이러한 제제는 본 명세서에 개시된 SIRPα-기반 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성을 강력하게 한다. 더 나아가, 이러한 제제는 CD47 및/또는 식작용 전 신호의 유도를 야기한다. 이러한 효과를 야기하는 구체적인 항암제는 저메틸화제/후성 조절자, 예컨대, 아자시티딘, 프로테아좀 저해제, 예컨대, 보르테조밉, 항대사물질, 예컨대, 사이타라빈(ARA-C) 또는 5-플루오로유라실(5-FU), DNA 합성 저해제, 예컨대, 사이타라빈(ARA-C) 또는 5-플루오로유라실(5-FU), 면역관문 저해제, 예컨대, 항-PD-L1 항체, 안트라사이클린, 예컨대, 독소루비신, 토포아이소머라제 II 저해제, 예컨대, 독소루비신, 선천성 면역관문 저해제, 예컨대, 항-CD47, Bcl2 저해제, 예컨대, 베네토클락스, 단백질 네딜화 저해제, 예컨대, 페보네디스탓, 미세소관-표적화제, 예컨대, 파클리탁셀, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 예컨대, 5-플루오로유라실, 백금 약물, 예컨대, 시스플라틴 또는 옥살리플라틴, 토포아이소머라제 I 저해제, 예컨대, 이리노테칸, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 예컨대, 다라투무맙, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 예컨대, 포말리다마이드 또는 레놀리다마이드, 항-SLAMF7 항체, 예컨대, 엘로투주맙, 항-CD123 항체, 및 돌연변이된 p53의 재활성화제, 예컨대, APR-246, 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물을 포함한다.
따라서, 일 양상에서, 본 개시내용은, (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다.
일 양상에서, 본 개시내용은, (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체의 암 치료 방법을 제공하되; 상기 대상체는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 이용하는 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다.
일 양상에서, 본 개시내용은 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체의 암 치료 방법을 제공하되; 대상체는 (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 이용하는 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다.
중요하게는, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은, 예를 들어, 이의 검출 및/또는 파괴를 피하려는 시도를 하는 암 세포로부터 유래된 면역 저해 신호의 전달을 붕괴, 차단, 감소, 저해 및/또는 격리시키고/시키거나 항암 면역 세포까지 면역 자극 신호의 전달을 향상, 증가 및/또는 자극하기 때문에, 상기 방법은 여러 별도의 경로에 의해 항종양 효과를 제공할 수 있다. 여러 별도의 경로를 통해 암을 치료함으로써, 본 개시내용의 방법은 환자에서 항-종양 효과를 제공하고/하거나 환자에서 향상된 항-종양 효과를 제공할 가능성이 더 크다. 또한, 상기 방법은 여러 별도의 경로에 의해 작동하기 때문에, 이들은 적어도, 경로 중 하나를 표적화하는 치료에 반응하지 않거나, 불량하게 반응하거나 또는 내성이 있는 환자에서 효능이 있을 수 있다. 따라서, 두 경로 중 하나를 통해 작용하는 치료에 대한 불량한 반응자인 환자는 여러 경로를 표적화함으로써 치료적 유익을 받을 수 있다.
이론에 의해 구속되는 일 없이, 본 개시내용의 SIRPα(CD172a)-Fc-CD40L 키메라 단백질 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 SIRPα(CD172a)-Fc-CD40L 키메라 단백질은 다음의 메커니즘에 따라 작동할 수 있다. 첫째로, SIRPα(CD172a)-Fc-CD40L 키메라 단백질은 APC 상의 CD40에 결합함으로써 항원 제시 세포를 직접 활성화시킬 수 있다. 본 명세서에서, 이점은 항원-특이적 CD8 자극 및/또는 면역 기억의 프로그래밍일 수 있다. 병용하여 사용될 때, 관문 분자에 관한 항체는 SIRPα(CD172a)-Fc-CD40L 공자극 및 항원 제시 기작의 상향조절을 위해 CD40 표적 밀도를 증가시킬 수 있다. 둘째로, SIRPα(CD172a)-Fc-CD40L 키메라 단백질은 종양 세포 상에서 종양 세포 상에서 CD47을 차단 및 격리시키는 종양 세포에 의해 CD47 저해를 직접 차단시킬 수 있다. 본 명세서에서, 이점은 향상된 종양 식균작용 및 증가된 항원 교차-제시일 수 있다. 병용하여 사용될 때, 항원-의존적 세포의 세포독성-관련 항체는 표적화된 종양 식균작용, 항원 교차 제시 및 항-종양 반응을 증가시킨다.
실시형태에서, 본 개시내용의 키메라 단백질 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 SIRP1α/CD47 신호전달 축을 붕괴시키는 것과 관련된 부작용을 제거하거나 감소시킨다. 실시형태에서, 본 키메라 단백질 또는 이를 이용하는 방법은 혈액학적 부작용을 제거하거나 감소시킨다. 실시형태에서, 본 키메라 단백질 또는 이를 이용하는 방법은 순환 적혈구 및 혈소판의 수, 용혈작용, 적혈구 응집반응, 혈소판 감소증 및/또는 빈혈의 감소 정도를 제거하거나 감소시킨다. 실시형태에서, 본 키메라 단백질 또는 이를 이용하는 방법은 항-CD47 항체보다 비교적 더 적은 혈액학적 부작용을 입증한다.
제1 약제학적 조성물
본 개시내용의 방법은, 실시형태에서, 면역 저해 신호 및/또는 자극 면역 활성화 신호를 차단시킬 수 있는 키메라 단백질을 포함하는 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료 방법을 포함한다.
일 양상에서, 본 개시내용은, (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법에 관한 것이다.
막관통 단백질은 전형적으로 세포외 도메인, 하나 또는 일련의 막관통 도메인, 및 세포내 도메인으로 이루어진다. 이론에 의해 구속되는 일 없이, 막관통 단백질의 세포외 도메인은 세포외 환경에서 가용성 수용체 또는 리간드 또는 막-결합 수용체 또는 리간드(즉, 인접 세포의 막)와의 상호작용을 초래한다. 이론에 의해 구속되는 일 없이, 막관통 도메인(들)은 막관통 단백질을 혈장막에 국재화시키는 역할을 한다. 이론에 의해 구속되는 일 없이, 막관통 단백질의 세포내 도메인은 세포외 환경과의 세포내 반응을 조정하기 위해 세포 신호전달 분자와의 상호작용을 조정하는 역할을 한다(또는 반대임).
실시형태에서, 본 명세서에 개시된 방법에서 유용한 키메라 단백질은 SIRP1α/CD47 신호전달 축을 붕괴시키는 것과 관련된 부작용을 제거하거나 또는 감소시킨다. 실시형태에서, 본 키메라 단백질 또는 이를 이용하는 방법은 혈액학적 부작용을 제거하거나 감소시킨다. 실시형태에서, 본 키메라 단백질 또는 이를 이용하는 방법은 순환 적혈구 및 혈소판의 수, 용혈작용, 적혈구 응집반응, 혈소판 감소증 및/또는 빈혈의 감소 정도를 제거하거나 감소시킨다. 실시형태에서, 본 키메라 단백질 또는 이를 이용하는 방법은 항-CD47 항체보다 비교적 더 적은 혈액학적 부작용을 입증한다.
실시형태에서, 세포외 도메인은 리간드 또는 수용체에 결합하기에 충분하고 신호를 세포에 전송하는 데 효과적인 막관통 단백질의 일부를 지칭한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 정상적으로는 세포의 외부 또는 세포막의 외부에 존재하는 막관통 단백질의 전체 아미노산 서열이다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 세포 또는 세포막의 외부이고 당업계에 공지된 방법(예를 들어, 시험관내 리간드 결합 및/또는 세포 활성화 분석)을 이용하여 분석될 수 있는 신호 전달 및/또는 리간드 결합에 필요한 막관통 단백질의 아미노산 서열의 해당 부분이다.
실시형태에서, 세포외 도메인은 리간드 또는 수용체에 결합하기에 충분하고 신호를 세포에 전송하는 데 효과적인 막관통 단백질의 일부를 지칭한다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 정상적으로는 세포의 외부 또는 세포막의 외부에 존재하는 막관통 단백질의 전체 아미노산 서열이다. 실시형태에서, 세포외 도메인은 세포 또는 세포막의 외부이고 당업계에 공지된 방법(예를 들어, 시험관내 리간드 결합 및/또는 세포 활성화 분석)을 이용하여 분석될 수 있는 신호 전달 및/또는 리간드 결합에 필요한 막관통 단백질의 아미노산 서열의 해당 부분이다.
일반적으로 2가지 유형의 단일-패스 막관통 단백질이 있다: 세포외 아미노 말단 및 세포내 카복시 말단을 갖는 I형 막관통 단백질(도 1A, 좌측 단백질 참조) 및 세포외 카복시 말단 및 세포내 아미노 말단을 갖는 II형 막관통 단백질(도 1A, 우측 단백질 참조). I형 및 II형 막관통 단백질은 수용체 또는 리간드 중 하나일 수 있다. I형 막관통 단백질(예를 들어, SIRPα(CD172a))의 경우, 단백질의 아미노 말단은 세포 밖에서 접하며, 따라서, 세포외 환경에서 다른 결합 상대(리간드 또는 수용체)와 상호작용하는 역할을 하는 기능성 도메인을 포함한다(도 1B, 좌측 단백질 참조). I형 막관통 단백질(예를 들어, CD40L OX40L 및 LIGHT)의 경우, 단백질의 카복시 말단은 세포 밖에서 접하며, 따라서, 세포외 환경에서 다른 결합 상대(리간드 또는 수용체)와 상호작용하는 역할을 하는 기능성 도메인을 포함한다(도 1B, 우측 단백질 참조). 따라서, 막관통 단백질 중 이러한 두 유형은 세포막에 대해 서로 반대 배향을 갖는다.
본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 I형 막관통 단백질, 예를 들어, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인, 및 CD40L, OX40L 및 LIGHT로부터 선택된 II형 막관통 단백질의 세포외 도메인을 포함한다. 따라서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은, 적어도, CD40L, OX40L 또는 LIGHT의 세포외 도메인을 포함하는 제2 도메인에 - 직접적으로 또는 링커를 통해 - 연결되는 SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인을 포함하는 제1 도메인을 포함한다. 도 1C 및 도 1D에 도시된 바와 같이, 도메인이 아미노-말단에서 카복시-말단 배향으로 연결될 때, 제1 도메인은 키메라 단백질의 "좌"측 상에 위치되고, "바깥쪽으로 향하며", 제2 도메인은 키메라 단백질의 "우"측 상에 위치되고 "바깥쪽으로 향한다".
제1 도메인 및 제2 도메인의 다른 입체배치가 생각되며, 예를 들어, 제1 도메인은 안쪽으로 향하고 제2 도메인은 바깥쪽으로 향하며, 제1 도메인은 바깥쪽으로 향하고 제2 도메인은 안쪽으로 향하며, 제1 도메인과 제2 도메인 둘 다 안쪽으로 향한다. 도메인 둘 다 "안쪽으로 향할 때", 키메라 단백질은 II형 막관통 단백질의 세포외 도메인, 링커 및 I형 막관통 단백질의 세포외 도메인을 포함하는 아미노-말단에서 카복시-말단으로의 입체배치를 가질 것이다. 이러한 입체배치에서, 키메라 단백질의 도메인이 이의 수용체/리간드 중 하나 또는 둘 다에 결합하는 것을 가능하게 하도록 본 명세서의 다른 곳에 기재된 바와 같은 추가 "슬랙(slack)"을 포함하기 위해 키메라 단백질이 필요할 수 있다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 리간드에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함한다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 SIRPα(CD172a)의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제1 도메인, 및/또는 CD40L의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제2 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제1 도메인은 SIRPα(CD172a)의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 도메인은 CD40L의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함한다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) OX40L 리간드에 결합할 수 있는 OX40L의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함한다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 SIRPα(CD172a)의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제1 도메인, 및/또는 OX40L의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제2 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제1 도메인은 SIRPα(CD172a)의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 도메인은 OX40L의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함한다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) LIGHT 리간드에 결합할 수 있는 LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함한다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 SIRPα(CD172a)의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제1 도메인, 및/또는 LIGHT의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제2 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제1 도메인은 SIRPα(CD172a)의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제2 도메인은 LIGHT의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함한다.
제1 도메인
실시형태에서, 제1 도메인은 신호 조절 단백질 α(SIRPα)의 일부를 포함한다. 실시형태에서, 제1 도메인은 SIRPα의 세포외 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 제1 도메인은 SIRPα의 CD47-결합 부분을 포함한다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 다음의 아미노산 서열을 포함하는 인간 SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인을 포함한다:
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 변이체를 포함한다. 예로서, 변이체는 서열번호 57과 적어도 약 60%, 또는 적어도 약 61%, 또는 적어도 약 62%, 또는 적어도 약 63%, 또는 적어도 약 64%, 또는 적어도 약 65%, 또는 적어도 약 66%, 또는 적어도 약 67%, 또는 적어도 약 68%, 또는 적어도 약 69%, 또는 적어도 약 70%, 또는 적어도 약 71%, 또는 적어도 약 72%, 또는 적어도 약 73%, 또는 적어도 약 74%, 또는 적어도 약 75%, 또는 적어도 약 76%, 또는 적어도 약 77%, 또는 적어도 약 78%, 또는 적어도 약 79%, 또는 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 81%, 또는 적어도 약 82%, 또는 적어도 약 83%, 또는 적어도 약 84%, 또는 적어도 약 85%, 또는 적어도 약 86%, 또는 적어도 약 87%, 또는 적어도 약 88%, 또는 적어도 약 89%, 또는 적어도 약 90%, 또는 적어도 약 91%, 또는 적어도 약 92%, 또는 적어도 약 93%, 또는 적어도 약 94%, 또는 적어도 약 95%, 또는 적어도 약 96%, 또는 적어도 약 97%, 또는 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99% 서열 동일성을 가질 수 있다.
실시형태에서, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 변이체는 서열번호 57과 적어도 약 95% 서열 동일성을 갖는다.
당업자는, 예를 들어, 문헌[LEE, et al., "Novel Structural Determinants of SIRPα that Mediate Binding of CD47," The Journal of Immunology, 179, 7741-7750, 2007 및 HATHERLEY, et al., "The Structure of the Macrophage Signal Regulatory Protein a (SIRPα) Inhibitory Receptor Reveals a Binding Face Reminiscent of That Used by T Cell Receptors," The Journal Of Biological Chemistry, Vol. 282, No. 19, pp. 14567-14575, 2007]을 참고함으로써 SIRPα(CD172a)의 공지된 아미노산 서열의 변이체를 선택할 수 있으며, 이들 참고문헌 각각은 전문이 참조에 의해 원용된다.
제2 도메인
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 다음의 아미노산 서열을 포함하는 인간 CD40L의 세포외 도메인을 포함한다:
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 CD40L의 세포외 도메인의 변이체를 포함한다. 예로서, 변이체는 서열번호 58과 적어도 약 60%, 또는 적어도 약 61%, 또는 적어도 약 62%, 또는 적어도 약 63%, 또는 적어도 약 64%, 또는 적어도 약 65%, 또는 적어도 약 66%, 또는 적어도 약 67%, 또는 적어도 약 68%, 또는 적어도 약 69%, 또는 적어도 약 70%, 또는 적어도 약 71%, 또는 적어도 약 72%, 또는 적어도 약 73%, 또는 적어도 약 74%, 또는 적어도 약 75%, 또는 적어도 약 76%, 또는 적어도 약 77%, 또는 적어도 약 78%, 또는 적어도 약 79%, 또는 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 81%, 또는 적어도 약 82%, 또는 적어도 약 83%, 또는 적어도 약 84%, 또는 적어도 약 85%, 또는 적어도 약 86%, 또는 적어도 약 87%, 또는 적어도 약 88%, 또는 적어도 약 89%, 또는 적어도 약 90%, 또는 적어도 약 91%, 또는 적어도 약 92%, 또는 적어도 약 93%, 또는 적어도 약 94%, 또는 적어도 약 95%, 또는 적어도 약 96%, 또는 적어도 약 97%, 또는 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99% 서열 동일성을 가질 수 있다.
실시형태에서, CD40L의 세포외 도메인의 변이체는 서열번호 58과 적어도 약 95% 서열 동일성을 갖는다.
당업자는, 문헌, 예를 들어, 전문이 참조에 의해 원용된 문헌[An, et al. "Crystallographic and Mutational Analysis of the CD40-CD154 Complex and Its Implications for Receptor Activation", The Journal of Biological Chemistry 286, 11226-11235]을 참고함으로써 CD40L의 공지된 아미노산 서열의 변이체를 선택할 수 있다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 다음의 아미노산 서열을 포함하는 인간 OX40L의 세포외 도메인을 포함한다:
실시형태에서, 키메라 단백질은 OX40L의 세포외 도메인의 변이체를 포함한다. 예로서, 변이체는 서열번호 59와 적어도 약 60%, 또는 적어도 약 61%, 또는 적어도 약 62%, 또는 적어도 약 63%, 또는 적어도 약 64%, 또는 적어도 약 65%, 또는 적어도 약 66%, 또는 적어도 약 67%, 또는 적어도 약 68%, 또는 적어도 약 69%, 또는 적어도 약 70%, 또는 적어도 약 71%, 또는 적어도 약 72%, 또는 적어도 약 73%, 또는 적어도 약 74%, 또는 적어도 약 75%, 또는 적어도 약 76%, 또는 적어도 약 77%, 또는 적어도 약 78%, 또는 적어도 약 79%, 또는 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 81%, 또는 적어도 약 82%, 또는 적어도 약 83%, 또는 적어도 약 84%, 또는 적어도 약 85%, 또는 적어도 약 86%, 또는 적어도 약 87%, 또는 적어도 약 88%, 또는 적어도 약 89%, 또는 적어도 약 90%, 또는 적어도 약 91%, 또는 적어도 약 92%, 또는 적어도 약 93%, 또는 적어도 약 94%, 또는 적어도 약 95%, 또는 적어도 약 96%, 또는 적어도 약 97%, 또는 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99% 서열 동일성을 가질 수 있다.
실시형태에서, OX40L의 세포외 도메인의 변이체는 서열번호 59와 적어도 약 95% 서열 동일성을 갖는다.
당업자는, 예를 들어, 문헌[CROFT, et al., "The Significance of OX40 and OX40L to T cell Biology and Immune Disease," Immunol Rev., 229(1), PP. 173-191, 2009 및 BAUM, et al., "Molecular characterization of murine and human OX40/OX40 ligand systems: identification of a human OX40 ligand as the HTL V-1-regulated protein gp34," The EMBO Journal, Vol. 13, No. 77, PP. 3992-4001, 1994]을 참고함으로써 OX40L의 공지된 아미노산 서열의 변이체를 선택할 수 있으며, 이들 참고문헌 각각은 전문이 참조에 의해 원용된다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 다음의 아미노산 서열을 포함하는 인간 LIGHT의 세포외 도메인을 포함한다:
실시형태에서, 키메라 단백질은 LIGHT의 세포외 도메인의 변이체를 포함한다. 예로서, 변이체는 서열번호 62와 적어도 약 60%, 또는 적어도 약 61%, 또는 적어도 약 62%, 또는 적어도 약 63%, 또는 적어도 약 64%, 또는 적어도 약 65%, 또는 적어도 약 66%, 또는 적어도 약 67%, 또는 적어도 약 68%, 또는 적어도 약 69%, 또는 적어도 약 70%, 또는 적어도 약 71%, 또는 적어도 약 72%, 또는 적어도 약 73%, 또는 적어도 약 74%, 또는 적어도 약 75%, 또는 적어도 약 76%, 또는 적어도 약 77%, 또는 적어도 약 78%, 또는 적어도 약 79%, 또는 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 81%, 또는 적어도 약 82%, 또는 적어도 약 83%, 또는 적어도 약 84%, 또는 적어도 약 85%, 또는 적어도 약 86%, 또는 적어도 약 87%, 또는 적어도 약 88%, 또는 적어도 약 89%, 또는 적어도 약 90%, 또는 적어도 약 91%, 또는 적어도 약 92%, 또는 적어도 약 93%, 또는 적어도 약 94%, 또는 적어도 약 95%, 또는 적어도 약 96%, 또는 적어도 약 97%, 또는 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99% 서열 동일성을 가질 수 있다.
실시형태에서, LIGHT의 세포외 도메인의 변이체는 서열번호 62와 적어도 약 95% 서열 동일성을 갖는다.
당업자는 문헌, 예를 들어, 문헌[Mauri, et al., "LIGHT, a new member of the TNF superfamily, and lymphotoxin alpha are ligands for herpesvirus entry mediator." Immunity 8(1), 21-30 (1998); Tamada et al., "LIGHT, a TNF-like molecule, costimulates T cell proliferation and is required for dendritic cell-mediated allogeneic T cell response." J. Immunol. 164 (8), 4105-4110 (2000); Liu et al., "Mechanistic basis for functional promiscuity in the TNF and TNF receptor superfamilies: structure of the LIGHT:DcR3 assembly" Structure 22 1252-62(2014); Faustman et al., "Structural principles of tumor necrosis factor superfamily signaling." Sci Signal 11(2018); Sudhamsu et al., "Dimerization of LTβR by LTα1β2 is necessary and sufficient for signal transduction" Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 110 19896-19901(2013); Savvides et al., "Mechanisms of immunomodulation by mammalian and viral decoy receptors: insights from structures. Felix J, SN. Nat Rev Immunol 17 112-129 (2017)"; Ward-Kavanagh et al., "The TNF Receptor Superfamily in Co-stimulating and Co-inhibitory Responses." Immunity 44 1005-1019 (2016); 및 Wajant "Principles of antibody-mediated TNF receptor activation." Cell Death Differ 22 1727-1741(2015)]을 참고함으로써 LIGHT의 알려진 아미노산 서열의 변이체를 선택할 수 있으며, 이들 각각은 전문이 참고에 의해 원용된다.
임의의 본 명세서에 개시된 양상 및 실시형태에서, 키메라 단백질은 본 명세서에 개시된 임의의 단백질에 대해 하나 이상의 아미노산 돌연변이를 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다. 실시형태에서, 하나 이상의 아미노산 돌연변이는 치환, 삽입, 결실 및 절단으로부터 독립적으로 선택될 수 있다.
실시형태에서, 아미노산 돌연변이는 아미노산 치환이고, 보존적 및/또는 비보존적 치환을 포함할 수 있다. "보존적 치환"은, 예를 들어, 관련된 아미노산 잔기의 극성, 전하, 용량, 용해도, 소수성, 친수성 및/또는 양극성 특성의 유사성에 기반하여 이루어질 수 있다. 20개의 천연 유래 아미노산은 다음의 6개의 표준 아미노산 그룹으로 그룹화될 수 있다: (1) 소수성: Met, Ala, Val, Leu, Ile; (2) 중성 친수성: Cys, Ser, Thr; Asn, Gln; (3) 산성: Asp, Glu; (4) 염기성: His, Lys, Arg; (5) 쇄 배향에 영향을 미치는 잔기: Gly, Pro; 및 (6) 방향족: Trp, Tyr, Phe. 본 명세서에서 사용되는 "보존적 치환"은 아미노산을 위에 나타낸 6개의 표준 아미노산 그룹의 동일 그룹 내에 열거된 다른 아미노산으로 교환하는 것으로 정의된다. 예를 들어, Asp의 Glu에 의한 교환은 이렇게 변형된 폴리펩타이드에서 하나의 음전하를 보유한다. 또한, 글리신 및 프롤린은 α-나선을 붕괴시키는 이들의 능력에 기반하여 서로 치환될 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 "비-보존적 치환"은 아미노산을 위에 나타낸 6개의 표준 아미노산 그룹 (1) 내지 (6)의 상이한 그룹에서 열거된 다른 아미노산으로 교환하는 것으로 정의된다.
실시형태에서, 치환은 또한 비고전적 아미노산(예를 들어, 일반적으로, 셀레노시스테인, 피롤라이신, N-폼일메티오닌 β-알라닌, GABA 및 δ-아미노레불린산, 4-아미노벤조산(PABA), 공통 아미노산의 D-이성질체, 2,4-다이아미노뷰티르산, α-아미노 아이소뷰티르산, 4-아미노뷰티르산, Abu, 2-아미노 뷰티르산, γ-Abu, ε-Ahx, 6-아미노 헥산산, Aib, 2-아미노 아이소뷰티르산, 3-아미노 프로피온산, 오르니틴, 노르류신, 노르발린, 하이드록시프롤린, 사르코스메(sarcosme), 시트룰린, 호모시트룰린, 시스테인산, t-뷰틸글리신, t-뷰틸알라닌, 페닐글리신, 사이클로헥실알라닌, β-알라닌, 플루오로-아미노산, 디자이너 아미노산, 예컨대, β 메틸 아미노산, C α-메틸 아미노산, N α-메틸 아미노산 및 아미노산 유사체)를 포함할 수 있다.
돌연변이는 또한 코돈 축퇴를 고려하는 것을 포함하여, 유전자 암호를 참조로 하여 키메라 단백질의 뉴클레오타이드 서열로 이루어질 수 있다.
실시형태에서, 키메라 단백질은 뮤린 리간드(들)/수용체(들)에 결합할 수 있다.
실시형태에서, 키메라 단백질은 인간 리간드(들)/수용체(들)에 결합할 수 있다.
실시형태에서, 키메라 단백질의 각 세포외 도메인(또는 이의 변이체)은 약 1nM 내지 약 5nM, 예를 들어, 약 1nM, 약 1.5nM, 약 2nM, 약 2.5nM, 약 3nM, 약 3.5nM, 약 4nM, 약 4.5nM, 또는 약 5nM의 KD로 이의 동족 수용체 또는 리간드에 결합한다. 실시형태에서, 키메라 단백질은 약 5nM 내지 약 15nM, 예를 들어, 약 5nM, 약 5.5nM, 약 6nM, 약 6.5nM, 약 7nM, 약 7.5nM, 약 8nM, 약 8.5nM, 약 9nM, 약 9.5nM, 약 10nM, 약 10.5nM, 약 11nM, 약 11.5nM, 약 12nM, 약 12.5nM, 약 13nM, 약 13.5nM, 약 14nM, 약 14.5nM, 또는 약 15nM의 KD로 동족 수용체 또는 리간드에 결합한다.
실시형태에서, 키메라 단백질의 각 세포외 도메인(또는 이의 변이체)은 (예를 들어, 표면 플라즈몬 공명 또는 생물층 간섭계로 측정할 때) 약 1μM, 약 900nM, 약 800nM, 약 700nM, 약 600nM, 약 500nM, 약 400nM, 약 300nM, 약 200nM, 약 150nM, 약 130nM, 약 100nM, 약 90nM, 약 80nM, 약 70nM, 약 60nM, 약 55nM, 약 50nM, 약 45nM, 약 40nM, 약 35nM, 약 30nM, 약 25nM, 약 20nM, 약 15nM, 약 10nM, 또는 약 5nM, 또는 약 1nM 미만의 KD로 이의 동족 수용체 또는 리간드에 결합한다. 실시형태에서, 키메라 단백질은 (예를 들어, 표면 플라스몬 공명 또는 생물층 간섭계로 측정할 때) 약 1nM, 약 900pM, 약 800pM, 약 700pM, 약 600pM, 약 500pM, 약 400pM, 약 300pM, 약 200pM, 약 100pM, 약 90pM, 약 80pM, 약 70pM, 약 60pM 약 55pM 약 50pM 약 45pM, 약 40pM, 약 35pM, 약 30pM, 약 25pM, 약 20pM, 약 15pM, 또는 약 10pM, 또는 약 1pM 미만의 KD로 인간 CD47 및/또는 CD40에 결합한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 세포외 도메인의 변이체는 천연 세포외 도메인의 수용체/리간드에 결합할 수 있다. 예를 들어, 변이체는 이의 수용체/리간드에 대한 결합 친화도에 영향을 미치지 않는 세포외 도메인에 하나 이상의 돌연변이를 포함할 수 있고; 대안적으로, 세포외 도메인에서 하나 이상의 돌연변이는 수용체/리간드에 대한 결합 친화도를 개선시킬 수 있거나; 또는 세포외 도메인에서 하나 이상의 돌연변이는 수용체/리간드에 대한 결합 친화도를 감소시킬 수 있지만, 결합을 완전히 제거하지는 않는다. 실시형태에서, 세포외 도메인이 이의 수용체/리간드와 상호작용하는 결합 포켓 외부에 하나 이상의 돌연변이가 위치된다. 실시형태에서, 돌연변이가 결합을 완전히 제거하지 않는 한, 세포외 도메인이 이의 수용체/리간드와 상호작용하는 결합 포켓 내부에 하나 이상의 돌연변이가 위치된다. 당업자의 지식 및 수용체-리간드 결합에 관한 당업계의 지식에 기반하여, 돌연변이가 결합을 가능하게 하고 결합을 제거한다는 것을 알게 될 것이다.
실시형태에서, 키메라 단백질은 향상된 안정성, 높은 결합활성 결합 특징, 단일-도메인 융합 단백질 또는 항체 대조군에 비해 표적 결합에 대한 연장된 오프-속도 및 단백질 반감기를 나타낸다.
본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 2개 초과의 세포외 도메인을 포함할 수 있다. 예를 들어, 키메라 단백질은 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 이상의 세포외 도메인을 포함할 수 있다. 제2 세포외 도메인은 본 명세서에 개시된 바와 같이 링커를 통해 제3 세포외 도메인으로부터 분리될 수 있다. 대안적으로, 제2 세포외 도메인은 제3 세포외 도메인에 직접(예를 들어, 펩타이드 결합을 통해) 연결될 수 있다. 실시형태에서, 키메라 단백질은, 본 명세서에 개시된 바와 같이, 직접 연결된 세포외 도메인 및 링커를 통해 간접적으로 연결된 세포외 도메인을 포함한다.
본 개시내용의 키메라 단백질 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 이의 리간드/수용체에 입체적으로 결합할 수 있는 제1 도메인 및/또는 이의 리간드/수용체에 입체적으로 결합할 수 있는 제2 도메인을 갖는다. 이는 세포외 도메인의 리간드/수용체 결합 도메인이 이의 리간드/수용체에 결합하는 것으로부터 입체적으로 방해되지 않도록 키메라 단백질의 전반적 가요성 및/또는 세포외 도메인(또는 이의 일부)과 키메라 단백질의 나머지 사이의 물리적 거리가 충분하다는 것을 의미한다. 이러한 가요성 및/또는 물리적 거리(본 명세서에서 "슬랙"으로 지칭됨)는 세포외 도메인(들)에서 정상적으로 존재하고/하거나, 링커에 정상적으로 존재하고/하거나 키메라 단백질에 (전체로서) 정상적으로 존재할 수 있다. 대안적으로, 또는 추가적으로, 키메라 단백질은 하나 이상의 추가 아미노산 서열(예를 들어, 아래에 기재하는 결합 링커) 또는 입체 장애를 피하는 데 필요한 추가적인 슬랙을 제공하는 합성 링커(예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 링커)를 포함함으로써 변형될 수 있다.
링커
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 링커를 포함한다.
실시형태에서, 링커는 이황화 결합을 형성할 수 있는 적어도 하나의 시스테인 잔기를 포함한다. 적어도 하나의 시스테인 잔기는 한 쌍(이상)의 키메라 단백질 사이에 이황화 결합을 형성할 수 있다. 이론으로 구속되는 일 없이, 이러한 이황화 결합 형성은 키메라 단백질의 유용한 다량체 상태를 유지하는 것을 초래한다. 이는 키메라 단백질의 효율적인 생성을 가능하게 하고; 시험관내 및 생체내에서 목적하는 활성을 가능하게 한다.
중요하게는, 특히, 하나 이상의 이황화 결합을 포함하는 링커 영역의 안정화는 안정적이고 생산 가능한 다량체 상태를 유지할 수 있는 개선된 키메라 단백질을 제공한다.
본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질에서, 링커는 가요성 아미노산 서열, IgG 힌지 영역 또는 항체 서열로부터 선택되는 폴리펩타이드이다.
실시형태에서, 링커는 천연 유래 다중 도메인 단백질로부터 유래되거나, 예를 들어, 문헌[Chichili et al., (2013), Protein Sci. 22(2):153-167, Chen et al., (2013), Adv Drug Deliv Rev. 65(10):1357-1369]에 기재된 바와 같은 경험적 링커이고, 이의 전문은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 실시형태에서, 링커는 문헌[Chen et al., (2013), Adv Drug Deliv Rev. 65(10):1357-1369 및 Crasto et. al., (2000), Protein Eng. 13(5):309-312]에 기재된 것과 같은 링커 설계 데이터베이스 및 컴퓨터 프로그램을 이용하여 설계될 수 있으며, 이의 전문은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
실시형태에서, 링커는 폴리펩타이드를 포함한다. 실시형태에서, 폴리펩타이드는 약 500개의 아미노산 길이, 약 450개의 아미노산 길이, 약 400개의 아미노산 길이, 약 350개의 아미노산 길이, 약 300개의 아미노산 길이, 약 250개의 아미노산 길이, 약 200개의 아미노산 길이, 약 150개의 아미노산 길이, 또는 약 100개 미만의 아미노산 길이이다. 예를 들어, 링커는 약 100, 약 95, 약 90, 약 85, 약 80, 약 75, 약 70, 약 65, 약 60, 약 55, 약 50, 약 45, 약 40, 약 35, 약 30, 약 25, 약 20, 약 19, 약 18, 약 17, 약 16, 약 15, 약 14, 약 13, 약 12, 약 11, 약 10, 약 9, 약 8, 약 7, 약 6, 약 5, 약 4, 약 3 또는 약 2개 미만의 아미노산 길이일 수 있다.
실시형태에서, 링커는 가요성이다.
실시형태에서, 링커는 강성이다.
실시형태에서, 링커는 글리신 및 세린 잔기(예를 들어, 약 30%, 또는 약 40%, 또는 약 50%, 또는 약 60%, 또는 약 70%, 또는 약 80%, 또는 약 90%, 또는 약 95%, 또는 약 97%, 또는 약 98%, 또는 약 99%, 또는 약 100% 글리신 및 세린)로 실질적으로 이루어진다.
실시형태에서, 링커는 항체의(예를 들어, IgG, IgA, IgD 및 IgE(하위부류(예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4, 및 IgA1 및 IgA2) 포함)의) 힌지 영역을 포함한다. IgG, IgA, IgD 및 IgE 부류 항체에서 발견된 힌지 영역은 가요성 스페이서로서 작용하여, Fab 부분은 공간에서 자유롭게 움직이게 된다. 불변 영역과 대조적으로, 힌지 도메인은 구조적으로 다양하여, 면역글로불린 부류와 하위부류에서 서열과 길이가 둘 다 변화된다. 예를 들어, 힌지 영역의 길이 및 가요성은 IgG 하위부류에서 달라진다. IgG1의 힌지 영역은 아미노산 216 내지 231을 포괄하며, 이것이 자유롭게 가요성이기 때문에, Fab 단편은 이들의 대칭 축에 관해 회전할 수 있고, 2개의 중쇄간 다이설파이드 브리지 중 첫 번째에 집중된 구체 내에서 움직인다. IgG2는 12개의 아미노산 잔기 및 4개의 다이설파이드 브리지를 갖는 IgG1보다 더 짧은 힌지를 갖는다. IgG2의 힌지 영역은 글리신 잔기가 없으며, 상대적으로 짧고, 여분의 중쇄간 다이설파이드 브리지에 의해 안정화된 강성의 폴리-프롤린 나선을 함유한다. 이런 특성들은 IgG2 분자의 가요성을 제한한다. IgG3은 62개의 아미노산(21개의 프롤린 및 11개의 시스테인 포함)을 함유하는 고유한 연장된 힌지 영역(길이가 IgG1 힌지의 약 4배)에 의해 다른 하위 부류와 다르며, 비가요성의 폴리-프롤린 이중 나선을 형성한다. IgG3에서, Fab 단편은 Fc 단편으로부터 상대적으로 멀리 떨어져서, 분자에 더 큰 가요성을 제공한다. IgG3의 신장된 힌지는 또한 다른 하위부류에 비해 더 큰 분자량을 초래한다. IgG4의 힌지 영역은 IgG1보다 더 짧으며, 이의 가요성은 IgG1과 IgG2 사이의 중간이다. 힌지 영역의 가요성은 알려진 바에 의하면 IgG3>IgG1>IgG4>IgG2의 순서로 감소된다. 실시형태에서, 링커는 인간 IgG4로부터 유래될 수 있고, 이량체화(S228P 포함) 또는 FcRn 결합을 향상시키기 위해 하나 이상의 돌연변이를 포함한다.
결정학적 연구에 따르면, 면역글로불린 힌지 영역은 추가로 3개의 영역: 상부 힌지 영역, 코어 영역 및 하부 힌지 영역으로 다시 나누어질 수 있다. 문헌[Shin et al., 1992 Immunological Reviews 130:87] 참조. 상부 힌지 영역은 CH1의 카복실 단부에서 움직임을 제한하는 힌지의 제1 잔기까지, 일반적으로 2개의 중쇄 사이에 쇄간 이황화결합을 형성하는 제1 시스테인 잔기까지 아미노산을 포함한다. 상부 힌지 영역의 길이는 항체 세그먼트의 가요성과 상관관계가 있다. 코어 힌지 영역은 중쇄간 이황화 브리지를 함유하고, 보다 하부의 힌지 영역은 CH2 도메인의 아미노 말단 단부에 결합하고, CH2에 잔기를 포함한다. 이하 참조. 야생형 인간 IgG1의 코어 힌지 영역은, 이황화 결합 형성에 의해 이량체화될 때, 중심축으로서 작용하는 것으로 여겨진 환식 옥타펩타이드를 초래하고, 따라서 가요성을 부여하는 서열 CPPC(서열번호 24)를 포함한다. 실시형태에서, 본 링커는 상부 힌지 영역, 코어 영역, 및 임의의 항체의(예를 들어, IgG, IgA, IgD 및 IgE(하위부류(예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4, 및 IgA1 및 IgA2) 포함)의) 하부 힌지 영역 중 하나 또는 둘 또는 셋을 포함한다. 힌지 영역은 또한 탄수화물 부착을 위한 다수의 구조적으로 별개 유형의 부위를 포함하는 하나 이상의 글리코실화 부위를 함유할 수 있다. 예를 들어, IgA1은 힌지 영역의 17개 아미노산 세그먼트 내에 5개의 글리코실화 부위를 포함하여, 분비 면역글로불린에 대한 유리한 특성으로 간주되는 장 프로테아제에 대한 힌지 영역 폴리펩타이드의 내성을 부여한다. 실시형태에서, 본 개시내용은 하나 이상의 글리코실화 부위를 포함한다.
실시형태에서, 링커는 항체의(예를 들어, IgG, IgA, IgD 및 IgE(하위부류(예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4, 및 IgA1 및 IgA2) 포함)의) Fc 도메인을 포함한다.
본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질에서, 링커는 IgG4로부터 유래된 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 링커는 인간 IgG4로부터 유래된 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 링커는 서열번호 1 내지 서열번호 3 중 어느 하나의 아미노산 서열과 적어도 95% 동일하고, 예를 들어, 서열번호 2의 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 링커는 하나 이상의 결합 링커, 예컨대, 서열번호 4 내지 서열번호 50(또는 이의 변이체)으로부터 독립적으로 선택된 결합 링커를 포함한다. 실시형태에서, 링커는 둘 이상의 결합 링커를 포함하며, 각각의 결합 링커는 서열번호 4 내지 50(또는 이의 변이체)으로부터 독립적으로 선택되되; 1개의 결합 링커는 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인에 대해 N 말단에 있으며, 다른 결합 링커는 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인에 대해 C 말단에 있다.
실시형태에서, 링커는 인간 IgG1 항체로부터 유래된 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함한다. 실시형태에서, Fc 도메인은 신생아 Fc 수용체(FcRn)에 대해 증가된 친화도 및 향상된 결합을 나타낸다. 실시형태에서, Fc 도메인은 FcRn에 대해 친화도를 증가시키고 결합을 향상시키는 하나 이상의 돌연변이를 포함한다. 이론에 의해 구속되는 일 없이, FcRn에 대한 증가된 친화도 및 향상된 결합은 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질의 생체내 반감기를 증가시키는 것으로 여겨진다.
실시형태에서, 링커 내 Fc 도메인은 아미노산 잔기 250, 252, 254, 256, 308, 309, 311, 416, 428, 433 또는 434(본 명세서에 명백히 참조에 의해 원용된 문헌[Kabat, et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)]에서와 같은 Kabat 넘버링에 따름), 또는 이들의 동등물에서 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다. 실시형태에서, 아미노산 잔기 250에서의 아미노산 치환은 글루타민과의 치환이다. 실시형태에서, 아미노산 잔기 252에서의 아미노산 치환은 타이로신, 페닐알라닌, 트립토판 또는 트레오닌과의 치환이다. 실시형태에서, 아미노산 잔기 254에서의 아미노산 치환은 트레오닌과의 치환이다. 실시형태에서, 아미노산 잔기 256에서의 아미노산 치환은 세린, 아르기닌, 글루타민, 글루탐산, 아스파르트산 또는 트레오닌과의 치환이다. 실시형태에서, 아미노산 잔기 308에서의 아미노산 치환은 트레오닌과의 치환이다. 실시형태에서, 아미노산 잔기 309에서의 아미노산 치환은 프롤린과의 치환이다. 실시형태에서, 아미노산 잔기 311에서의 아미노산 치환은 세린과의 치환이다. 실시형태에서, 아미노산 잔기 385에서의 아미노산 치환은 아르기닌, 아스파르트산, 세린, 트레오닌, 히스티딘, 라이신, 알라닌 또는 글리신과의 치환이다. 실시형태에서, 아미노산 잔기 386에서의 아미노산 치환은 트레오닌, 프롤린, 아스파르트산, 세린, 라이신, 아르기닌, 아이소류신 또는 메티오닌과의 치환이다. 실시형태에서, 아미노산 잔기 387에서의 아미노산 치환은 아르기닌, 프롤린, 히스티딘, 세린, 트레오닌 또는 알라닌과의 치환이다. 실시형태에서, 아미노산 잔기 389에서의 아미노산 치환은 프롤린, 세린 또는 아스파라긴과의 치환이다. 실시형태에서, 아미노산 잔기 416에서의 아미노산 치환은 세린과의 치환이다. 실시형태에서, 아미노산 잔기 428에서의 아미노산 치환은 류신과의 치환이다. 실시형태에서, 아미노산 잔기 433에서의 아미노산 치환은 아르기닌, 세린, 아이소류신, 프롤린 또는 글루타민과의 치환이다. 실시형태에서, 아미노산 잔기 434에서의 아미노산 치환은 히스티딘, 페닐알라닌 또는 타이로신과의 치환이다.
실시형태에서, Fc 도메인 링커(예를 들어, IgG 불변 영역 포함)는 아미노산 잔기 252, 254, 256, 433, 434 또는 436에서의 치환과 같은 하나 이상의 돌연변이를 포함한다(본 명세서에서 명백히 참조에 의해 원용된 문헌[Kabat, et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)]에서와 같은 Kabat 넘버링에 따름). 실시형태에서, IgG 불변 영역은 삼중 M252Y/S254T/T256E 돌연변이 또는 YTE 돌연변이를 포함한다. 실시형태에서, IgG 불변 영역은 삼중 H433K/N434F/Y436H 돌연변이 또는 KFH 돌연변이를 포함한다. 실시형태에서, IgG 불변 영역은 조합하여 YTE 및 KFH 돌연변이를 포함한다.
실시형태에서, 링커는 아미노산 잔기 250, 253, 307, 310, 380, 428, 433, 434 및 435번에서 하나 이상의 돌연변이를 포함하는 IgG 불변 영역을 포함한다(본 명세서에서 명백히 참조에 의해 원용된 문헌[Kabat, et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)]에서와 같은 Kabat 넘버링에 따름). 예시적인 돌연변이는 T250Q, M428L, T307A, E380A, I253A, H310A, M428L, H433K, N434A, N434F, N434S 및 H435A를 포함한다. 실시형태에서, IgG 불변 영역은 M428L/N434S 돌연변이 또는 LS 돌연변이를 포함한다. 실시형태에서, IgG 불변 영역은 T250Q/M428L 돌연변이 또는 QL 돌연변이를 포함한다. 실시형태에서, IgG 불변 영역은 N434A 돌연변이를 포함한다. 실시형태에서, IgG 불변 영역은 T307A/E380A/N434A 돌연변이 또는 AAA 돌연변이를 포함한다. 실시형태에서, IgG 불변 영역은 I253A/H310A/H435A 돌연변이 또는 IHH 돌연변이를 포함한다. 실시형태에서, IgG 불변 영역은 H433K/N434F 돌연변이를 포함한다. 실시형태에서, IgG 불변 영역은 M252Y/S254T/T256E 및 H433K/N434F 돌연변이를 조합하여 포함한다.
IgG 불변 영역의 추가적인 예시적 돌연변이는, 예를 들어, 문헌[Robbie, et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy (2013), 57(12):6147-6153, Dall'Acqua et al., JBC (2006), 281(33):23514-24, Dall'Acqua et al., Journal of Immunology (2002), 169:5171-80, Ko et al. Nature (2014) 514:642-645, Grevys et al. Journal of Immunology. (2015), 194(11):5497-508], 및 미국 특허 제7,083,784호에 기재되며, 이의 전문은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
예시적인 Fc 안정화 돌연변이체는 S228P이다. 예시적인 Fc 반감기 연장 돌연변이체는 T250Q, M428L, V308T, L309P 및 Q311S이고, 본 링커는 이들 돌연변이체 중 1, 또는 2, 또는 3, 또는 4, 또는 5개를 포함할 수 있다.
실시형태에서, 키메라 단백질은 고친화도로 FcRn에 결합한다. 실시형태에서, 키메라 단백질은 약 1nM 내지 약 80nM의 KD로 FcRn에 결합할 수 있다. 예를 들어, 키메라 단백질은 약 1nM, 약 2nM, 약 3nM, 약 4nM, 약 5nM, 약 6nM, 약 7nM, 약 8nM, 약 9nM, 약 10nM, 약 15nM, 약 20nM, 약 25nM, 약 30nM, 약 35nM, 약 40nM, 약 45nM, 약 50nM, 약 55nM, 약 60nM, 약 65nM, 약 70nM, 약 71nM, 약 72nM, 약 73nM, 약 74nM, 약 75nM, 약 76nM, 약 77nM, 약 78nM, 약 79nM, 또는 약 80nM의 KD로 FcRn에 결합할 수 있다. 실시형태에서, 키메라 단백질은 약 9nM의 KD로 FcRn에 결합할 수 있다. 실시형태에서, 키메라 단백질은 효과기 기능을 갖는 다른 Fc 수용체(즉, FcRn 이외)에 실질적으로 결합하지 않는다.
실시형태에서, 링커에서 Fc 도메인은 서열번호 1의 아미노산 서열(아래의 표 1 참조), 또는 이에 대해 적어도 90%, 또는 93%, 또는 95%, 또는 97%, 또는 98%, 또는 99% 동일성을 갖는다. 실시형태에서, 돌연변이는 안정성 및/또는 반감기를 증가시키기 위해 서열번호 1로 이루어진다. 예를 들어, 실시형태에서, 링커에서 Fc 도메인은 서열번호 2의 아미노산 서열(아래의 표 1 참조), 또는 이에 대해 적어도 90%, 또는 93%, 또는 95%, 또는 97%, 또는 98%, 또는 99% 동일성을 포함한다. 예를 들어, 실시형태에서, 링커에서 Fc 도메인은 서열번호 3의 아미노산 서열(아래의 표 1 참조), 또는 이에 대해 적어도 90%, 또는 93%, 또는 95%, 또는 97%, 또는 98%, 또는 99% 동일성을 포함한다.
추가로, 하나 이상의 결합 링커는 링커의 Fc 도메인(예를 들어, 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3 중 하나 또는 이에 대해 적어도 90%, 또는 93%, 또는 95%, 또는 97%, 또는 98%, 또는 99% 동일성) 및 세포외 도메인을 연결하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6, 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 9 중 어느 하나, 또는 이들의 변이체는 본 명세서에 개시된 바와 같은 세포외 도메인을 본 명세서에 개시된 바와 같은 링커의 Fc 도메인과 연결할 수 있다. 선택적으로, 서열번호 4 내지 서열번호 50 중 어느 하나, 또는 이의 변이체는 본 명세서에 개시된 바와 같은 세포외 도메인과 본 명세서에 개시된 바와 같은 Fc 도메인 사이에 위치된다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 아래의 표 1에 개시된 연결 링커의 변이체를 포함할 수 있다. 예를 들어, 링커는 서열번호 4 내지 서열번호 50 중 어느 하나의 아미노산 서열과 적어도 약 60%, 또는 적어도 약 61%, 또는 적어도 약 62%, 또는 적어도 약 63%, 또는 적어도 약 64%, 또는 적어도 약 65%, 또는 적어도 약 66%, 또는 적어도 약 67%, 또는 적어도 약 68%, 또는 적어도 약 69%, 또는 적어도 약 70%, 또는 적어도 약 71%, 또는 적어도 약 72%, 또는 적어도 약 73%, 또는 적어도 약 74%, 또는 적어도 약 75%, 또는 적어도 약 76%, 또는 적어도 약 77%, 또는 적어도 약 78%, 또는 적어도 약 79%, 또는 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 81%, 또는 적어도 약 82%, 또는 적어도 약 83%, 또는 적어도 약 84%, 또는 적어도 약 85%, 또는 적어도 약 86%, 또는 적어도 약 87%, 또는 적어도 약 88%, 또는 적어도 약 89%, 또는 적어도 약 90%, 또는 적어도 약 91%, 또는 적어도 약 92%, 또는 적어도 약 93%, 또는 적어도 약 94%, 또는 적어도 약 95%, 또는 적어도 약 96%, 또는 적어도 약 97%, 또는 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99% 서열 동일성을 가질 수 있다.
실시형태에서, 제1 및 제2 결합 링커는 상이할 수 있거나 또는 이들은 동일할 수 있다.
이론에 의해 구속되는 일 없이, 키메라 단백질에서 Fc 도메인의 적어도 일부를 포함하는 링커를 포함하는 것은 불용성 및, 가능하게는, 비-기능성 단백질 연접(concatenated) 올리고머 및/또는 응집물의 형성을 피하게 한다. 이는 부분적으로, 키메라 단백질 사이에 이황화 결합을 형성할 수 있는 Fc 도메인에서의 시스테인의 존재로 인한 것이다.
실시형태에서, 키메라 단백질은 본 명세서에 개시된 바와 같은 하나 이상의 연결 링커를 포함할 수 있고, 본 명세서에 개시된 바와 같은 Fc 도메인 링커를 결여할 수 있다.
실시형태에서, 제1 및/또는 제2 연결 링커는 독립적으로 서열번호 4 내지 서열번호 50의 아미노산 서열로부터 선택되고, 아래의 표 1에 제공된다:
실시형태에서, 결합 링커는 글리신 및 세린 잔기(예를 들어, 약 30%, 또는 약 40%, 또는 약 50%, 또는 약 60%, 또는 약 70%, 또는 약 80%, 또는 약 90%, 또는 약 95%, 또는 약 97%, 또는 약 98%, 또는 약 99%, 또는 약 100% 글리신 및 세린)를 실질적으로 포함한다. 예를 들어, 실시형태에서, 결합 링커는 (Gly4Ser)n이되, n은 약 1 내지 약 8, 예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8(각각 서열번호 25 내지 서열번호 32)이다. 실시형태에서, 결합 링커 서열은 GGSGGSGGGGSGGGGS(서열번호 33)이다. 추가적인 예시적 연결 링커는 서열 LE, (EAAAK)n(n=1 내지 3)(서열번호 36 내지 서열번호 38), A(EAAAK)nA(n = 2 내지 5)(서열번호 39 내지 서열번호 42), A(EAAAK)4ALEA(EAAAK)4A(서열번호 43), PAPAP(서열번호 44), KESGSVSSEQLAQFRSLD(서열번호 45), GSAGSAAGSGEF(서열번호 46) 및 (XP)n을 갖는 링커를 포함하지만, 이들로 제한되지 않으며, X은 임의의 아미노산, 예를 들어, Ala, Lys 또는 Glu를 표기한다. 실시형태에서, 결합 링커는 GGS이다. 실시형태에서, 결합 링커는 서열(Gly)n을 갖고, 여기서, n은 1 내지 100의 임의의 수이며, 예를 들어, (Gly)8(서열번호 34) 및 (Gly)6(서열번호 35)이다.
실시형태에서, 결합 링커는 GGGSE(서열번호 47), GSESG(서열번호 48), GSEGS(서열번호 49), GEGGSGEGSSGEGSSSEGGGSEGGGSEGGGSEGGS(서열번호 50) 및 4개의 아미노산 간격마다 무작위로 위치된 G, S 및 E의 결합 링커 중 하나 이상이다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질이 제1 막관통 단백질의 세포외 도메인(ECD), Fc 도메인 앞에 1개의 연결 링커, Fc 도메인 다음에 제2 연결 링커 및 제2 막관통 단백질의 ECD를 포함하는 경우, 키메라 단백질은 다음의 구조를 포함할 수 있다:
ECD - 연결 링커 1 - Fc 도메인 - 연결 링커 2 - ECD.
제1 연결 링커, Fc 도메인 링커 및 제2 연결 링커의 조합은 본 명세서에서 "모듈 링커"로 지칭된다. 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 표 2에 나타내는 바와 같은 모듈 링커를 포함한다:
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 위의 표 2에 개시된 모듈 링커의 변이체를 포함할 수 있다. 예를 들어, 링커는 서열번호 51 내지 서열번호 56 중 어느 하나의 아미노산 서열과 적어도 약 60%, 또는 적어도 약 61%, 또는 적어도 약 62%, 또는 적어도 약 63%, 또는 적어도 약 64%, 또는 적어도 약 65%, 또는 적어도 약 66%, 또는 적어도 약 67%, 또는 적어도 약 68%, 또는 적어도 약 69%, 또는 적어도 약 70%, 또는 적어도 약 71%, 또는 적어도 약 72%, 또는 적어도 약 73%, 또는 적어도 약 74%, 또는 적어도 약 75%, 또는 적어도 약 76%, 또는 적어도 약 77%, 또는 적어도 약 78%, 또는 적어도 약 79%, 또는 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 81%, 또는 적어도 약 82%, 또는 적어도 약 83%, 또는 적어도 약 84%, 또는 적어도 약 85%, 또는 적어도 약 86%, 또는 적어도 약 87%, 또는 적어도 약 88%, 또는 적어도 약 89%, 또는 적어도 약 90%, 또는 적어도 약 91%, 또는 적어도 약 92%, 또는 적어도 약 93%, 또는 적어도 약 94%, 또는 적어도 약 95%, 또는 적어도 약 96%, 또는 적어도 약 97%, 또는 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99% 서열 동일성을 가질 수 있다.
실시형태에서, 링커는 고도의 가요성을 포함하지만, 이것으로 제한되지 않는 가요성일 수 있다. 실시형태에서, 링커는 강성의 알파 나선을 포함하지만, 이것으로 제한되지 않는 강성일 수 있다. 예시적인 연결 링커의 특징은 아래의 표 3에 나타낸다:
실시형태에서, 링커는 기능성일 수 있다. 예를 들어, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 링커는 폴딩 및/또는 안정성을 개선시키고/시키거나, 발현을 개선시키고/시키거나, 약물동력학을 개선시키고/시키거나, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질의 생활성을 개선시키는 작용을 할 수 있다. 다른 예에서, 링커는 특정 세포 유형 또는 위치에 키메라 단백질을 표적화하는 작용을 할 수 있다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 하나의 연결 링커만을 포함한다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 연결 링커를 결여한다.
실시형태에서, 링커는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)과 같은 합성 링커이다.
실시형태에서, 키메라 단백질은 이의 리간드/수용체에 입체적으로 결합할 수 있는 제1 도메인 및/또는 이의 리간드/수용체에 입체적으로 결합할 수 있는 제2 도메인을 갖는다. 따라서, 세포외 도메인의 리간드/수용체 결합 도메인이 이의 리간드/수용체에 결합하는 것으로부터 입체적으로 방해되지 않도록 키메라 단백질의 전반적 가요성 및/또는 세포외 도메인(또는 이의 일부)과 키메라 단백질의 나머지 사이의 물리적 거리는 충분하다. 이러한 가요성 및/또는 물리적 거리("슬랙"으로 지칭됨)는 세포외 도메인(들)에 정상적으로 존재하고/하거나, 링커에 정상적으로 존재하고/하거나 키메라 단백질에 (전체로서) 정상적으로 존재할 수 있다. 대안적으로, 또는 추가적으로, 아미노산 서열(예를 들어)은 하나 이상의 세포외 도메인에 그리고/또는 링커에 첨가되어 입체 장애를 피하는 데 필요한 슬랙을 제공할 수 있다. 슬랙을 제공하는 임의의 아미노산 서열이 첨가될 수 있다. 실시형태에서, 첨가된 아미노산 서열은 서열 (Gly)n을 포함하며, 여기서, n은 1 내지 100의 임의의 수이다. 첨가 가능한 아미노산 서열의 추가적인 예는 표 1 및 표 3에 기재된 연결 링커를 포함한다. 실시형태에서, 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 링커는 입체 장애를 피하는 데 필요한 슬랙을 제공하기 위해 세포외 도메인과 링커 사이에 첨가될 수 있다. 이러한 PEG 링커는 당업계에 잘 알려져 있다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 SIRPα(CD172a)의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L의 일부를 포함하는 제2 도메인 및 링커를 포함한다. 실시형태에서, 링커는 가요성 아미노산 서열, IgG 힌지 영역 및 항체 서열로부터 선택되는 폴리펩타이드이다. 실시형태에서, 링커는 이황화 결합을 형성할 수 있는 적어도 하나의 시스테인 잔기를 포함하고/하거나 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 링커는, 예를 들어, 인간 IgG1 또는 IgG4를 비롯한 IgG1 또는 IgG4로부터의 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 링커는 서열번호 1, 서열번호 2 또는 서열번호 3의 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 따라서, 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 이종성 키메라 단백질이 SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인(또는 이의 변이체), 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함하는 링커 및 CD40L의 세포외 도메인(또는 이의 변이체)을 포함할 때, 본 명세서에서 "SIRPα(CD172a)-Fc-CD40L"로 지칭될 수 있다.
실시형태에서, 본 개시내용의 SIRPα(CD172a)-Fc-CD40L 키메라 단백질 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 다음의 아미노산 서열을 갖는다:
실시형태에서, 키메라 단백질은 SIRPα(CD172a)-Fc-CD40L 키메라 단백질의 변이체를 포함한다. 예로서, 변이체는 서열번호 60과 적어도 약 60%, 또는 적어도 약 61%, 또는 적어도 약 62%, 또는 적어도 약 63%, 또는 적어도 약 64%, 또는 적어도 약 65%, 또는 적어도 약 66%, 또는 적어도 약 67%, 또는 적어도 약 68%, 또는 적어도 약 69%, 또는 적어도 약 70%, 또는 적어도 약 71%, 또는 적어도 약 72%, 또는 적어도 약 73%, 또는 적어도 약 74%, 또는 적어도 약 75%, 또는 적어도 약 76%, 또는 적어도 약 77%, 또는 적어도 약 78%, 또는 적어도 약 79%, 또는 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 81%, 또는 적어도 약 82%, 또는 적어도 약 83%, 또는 적어도 약 84%, 또는 적어도 약 85%, 또는 적어도 약 86%, 또는 적어도 약 87%, 또는 적어도 약 88%, 또는 적어도 약 89%, 또는 적어도 약 90%, 또는 적어도 약 91%, 또는 적어도 약 92%, 또는 적어도 약 93%, 또는 적어도 약 94%, 또는 적어도 약 95%, 또는 적어도 약 96%, 또는 적어도 약 97%, 또는 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99% 서열 동일성을 가질 수 있다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 SIRPα(CD172a)의 일부를 포함하는 제1 도메인, OX40L의 일부를 포함하는 제2 도메인 및 링커를 포함한다. 실시형태에서, 링커는 가요성 아미노산 서열, IgG 힌지 영역 및 항체 서열로부터 선택되는 폴리펩타이드이다. 실시형태에서, 링커는 이황화 결합을 형성할 수 있는 적어도 하나의 시스테인 잔기를 포함하고/하거나 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 링커는, 예를 들어, 인간 IgG1 또는 IgG4를 비롯한 IgG1 또는 IgG4로부터의 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 링커는 서열번호 1, 서열번호 2 또는 서열번호 3의 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 따라서, 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 이종성 키메라 단백질이 SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인(또는 이의 변이체), 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함하는 링커 및 OX40L의 세포외 도메인(또는 이의 변이체)을 포함할 때, 본 명세서에서 "SIRPα(CD172a)-Fc-OX40L"로 지칭될 수 있다.
실시형태에서, 본 개시내용의 SIRPα(CD172a)-Fc-OX40L 키메라 단백질 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 다음의 아미노산 서열을 갖는다:
실시형태에서, 키메라 단백질은 SIRPα(CD172a)-Fc-OX40L 키메라 단백질의 변이체를 포함한다. 예로서, 변이체는 서열번호 61과 적어도 약 60%, 또는 적어도 약 61%, 또는 적어도 약 62%, 또는 적어도 약 63%, 또는 적어도 약 64%, 또는 적어도 약 65%, 또는 적어도 약 66%, 또는 적어도 약 67%, 또는 적어도 약 68%, 또는 적어도 약 69%, 또는 적어도 약 70%, 또는 적어도 약 71%, 또는 적어도 약 72%, 또는 적어도 약 73%, 또는 적어도 약 74%, 또는 적어도 약 75%, 또는 적어도 약 76%, 또는 적어도 약 77%, 또는 적어도 약 78%, 또는 적어도 약 79%, 또는 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 81%, 또는 적어도 약 82%, 또는 적어도 약 83%, 또는 적어도 약 84%, 또는 적어도 약 85%, 또는 적어도 약 86%, 또는 적어도 약 87%, 또는 적어도 약 88%, 또는 적어도 약 89%, 또는 적어도 약 90%, 또는 적어도 약 91%, 또는 적어도 약 92%, 또는 적어도 약 93%, 또는 적어도 약 94%, 또는 적어도 약 95%, 또는 적어도 약 96%, 또는 적어도 약 97%, 또는 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99% 서열 동일성을 가질 수 있다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 SIRPα(CD172a)의 일부를 포함하는 제1 도메인, LIGHT의 일부를 포함하는 제2 도메인 및 링커를 포함한다. 실시형태에서, 링커는 가요성 아미노산 서열, IgG 힌지 영역 및 항체 서열로부터 선택되는 폴리펩타이드이다. 실시형태에서, 링커는 이황화 결합을 형성할 수 있는 적어도 하나의 시스테인 잔기를 포함하고/하거나 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 링커는, 예를 들어, 인간 IgG1 또는 IgG4를 비롯한 IgG1 또는 IgG4로부터의 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 링커는 서열번호 1, 서열번호 2 또는 서열번호 3의 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 따라서, 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 이종성 키메라 단백질이 SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인(또는 이의 변이체), 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함하는 링커 및 LIGHT의 세포외 도메인(또는 이의 변이체)을 포함할 때, 본 명세서에서 "SIRPα(CD172a)-Fc-LIGHT"로 지칭될 수 있다.
실시형태에서, 본 개시내용의 SIRPα(CD172a)-Fc-LIGHT 키메라 단백질 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 다음의 아미노산 서열을 갖는다:
실시형태에서, 키메라 단백질은 SIRPα(CD172a)-Fc-LIGHT 키메라 단백질의 변이체를 포함한다. 예로서, 변이체는 서열번호 63과 적어도 약 60%, 또는 적어도 약 61%, 또는 적어도 약 62%, 또는 적어도 약 63%, 또는 적어도 약 64%, 또는 적어도 약 65%, 또는 적어도 약 66%, 또는 적어도 약 67%, 또는 적어도 약 68%, 또는 적어도 약 69%, 또는 적어도 약 70%, 또는 적어도 약 71%, 또는 적어도 약 72%, 또는 적어도 약 73%, 또는 적어도 약 74%, 또는 적어도 약 75%, 또는 적어도 약 76%, 또는 적어도 약 77%, 또는 적어도 약 78%, 또는 적어도 약 79%, 또는 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 81%, 또는 적어도 약 82%, 또는 적어도 약 83%, 또는 적어도 약 84%, 또는 적어도 약 85%, 또는 적어도 약 86%, 또는 적어도 약 87%, 또는 적어도 약 88%, 또는 적어도 약 89%, 또는 적어도 약 90%, 또는 적어도 약 91%, 또는 적어도 약 92%, 또는 적어도 약 93%, 또는 적어도 약 94%, 또는 적어도 약 95%, 또는 적어도 약 96%, 또는 적어도 약 97%, 또는 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99% 서열 동일성을 가질 수 있다.
제2 약제학적 조성물
일 양상에서, 본 개시내용은, (i) 본 명세서에 개시된 임의의 실시형태의 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 (ii) 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법에 관한 것이다. 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제를 포함한다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 저메틸화제/후성 조절제
실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 저메틸화제/후성 조절자를 포함한다. 후성적 교대(epigenetic alternation)는 유전자 활성을 조절하는 히스톤 또는 DNA 변형, 예컨대, DNA 메틸화, 히스톤 아세틸화 및 히스톤 메틸화의 변화에 관한 것이다. 후성 조절장애는 암을 포함하는 인간 질환과 관련된다. 전문이 본 명세서에 참조에 의해 원용되는 문헌[Cheng et al., Targeting epigenetic regulators for cancer therapy: mechanisms and advances in clinical trials, Signal Transduction and Targeted Therapy 4: 62(2019)]에 의해 검토된다. 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자는 DNA 메틸트랜스퍼라제(DNMT, 예를 들어, DNMT1, DNMT2, DNMT3a, DNMT3b 및 DNMT3L), 히스톤 메틸트랜스퍼라제, 히스톤 아세틸라제, 히스톤 데아세틸라제(HDAC)(예를 들어, HDAC1 내지 HDNAC11 및 Sirt1-7 중 하나 이상), DNA-탈메틸화 효소 및 히스톤-탈메틸화 효소로부터 선택된 효소의 조절제이다. 실시형태에서, 조절제는 저해제이다. 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자는 아자시티딘, 5-아자-2'-데옥시사이티딘, 수베로일아닐라이드 하이드록삼산(saha), 로미뎁신, 벨리노스탓, 파노비노스탓 및 키다마이드로부터 선택된다. 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자는 아자시티딘이다. 아자시티딘의 다양한 적합한 형태 및 제형은 미국 특허 제4,684,630호; 제6,887,855호; 제6,943,249호; 제7,078,518호; 제7,772,199호; 제9,393,255호; 제9,765,108호에 개시되며, 이들 각각의 전문은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 프로테아좀 저해제
유비퀴틴-매개 프로테아좀 경로는 축적 유해 단백질을 방지하는 것을 포함하는 항상성의 필수 기능을 갖는 세포 단백질-분해 기작의 중심 구성성분이다. 암세포는 세포 생존과 증식을 둘 다 촉진시키고/시키거나, 세포사의 메커니즘을 저해하는 단백질을 생성한다. 놀라울 것도 없이, 연구는 프로테아좀 저해제가 다수 유형의 암세포에서 세포자멸사를 강력하게 유도한다는 것을 나타냈다. 따라서, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 프로테아좀 저해제를 포함한다. 실시형태에서, 프로테아좀 저해제는 프로테아좀의 20S 코어 서브유닛에 존재하는 키모트립신-유사 활성, 트립신-유사 활성 및 펩타이딜글루타밀 가수분해 활성 중 하나 이상을 저해한다. 실시형태에서, 프로테아좀 저해제는 보르테조밉, 카르필조밉 및 익사조밉으로부터 선택된다. 실시형태에서, 프로테아좀 저해제는 보르테조밉이다. 보르테조밉 및 보르테조밉의 제형은 미국 특허 제5,780,454호; 제6,958,319호; 제6,713,446호; 제8,962,572호에 개시되어 있으며, 이들 각각의 전체 내용은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 항-대사물질
항-대사물질은 암 치료에서 통상적으로 사용된다. 따라서, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 항대사물질을 포함한다. 실시형태에서, 항대사물질은 대사물질의 대사를 방해한다. 실시형태에서, 항대사물질은 DNA 복제를 방해하고, 이에 의해 세포분열 및 종양 성장을 저해한다. 실시형태에서, 항대사물질은 티미딜산 합성효소, DNA 중합효소, RNA 중합효소 및 뉴클레오타이드 환원효소로부터 선택된 1종 이상의 효소를 저해한다. 실시형태에서, 항대사물질은 5-플루오로유라실(5-FU), 카페시타빈, 플록수리딘, 사이타라빈(ARA-C), 겜시타빈, 데시타빈 및 비다자로부터 선택된다. 실시형태에서, 항대사물질은 5-플루오로유라실(5-FU) 또는 사이타라빈(ARA-C)이다. 5-플루오로유라실(5-FU) 및 이의 제형은 미국 특허 제2,802,005호; 제4,481,203호; 제4,622,325호; 제6,670,335호에 개시되며, 이들 각각의 전체 내용은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 사이타라빈 및 이의 제형은 미국 특허 제3,116,282호; 및 제8,431,806호에 개시되며, 이들 각각의 전체 내용은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 DNA 합성 저해제
실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 DNA 합성 저해제를 포함한다. 실시형태에서, DNA 합성 저해제는 DNA 복제를 방해하고, 이에 의해 세포분열 및 종양 성장을 저해한다. 실시형태에서, DNA 합성 저해제는 티미딜산 합성효소, DNA 중합효소 및 뉴클레오타이드 환원효소로부터 선택된 1종 이상의 효소를 저해한다. 실시형태에서, DNA 합성 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU), 카페시타빈, 플록수리딘, 사이타라빈(ARA-C), 겜시타빈, 데시타빈 및 비다자로부터 선택된다. 실시형태에서, DNA 합성 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU) 또는 사이타라빈(ARA-C)이다. 5-플루오로유라실(5-FU) 및 이의 제형은 미국 특허 제2,802,005호; 제4,481,203호; 제4,622,325호; 제6,670,335호에 개시되며, 이들 각각의 전체 내용은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 사이타라빈 및 이의 제형은 미국 특허 제3,116,282호; 및 제8,431,806호에 개시되며, 이들 각각의 전체 내용은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 면역관문 저해제
실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 면역관문 저해제를 포함한다. 실시형태에서, 면역관문 저해제는 면역관문 분자에 결합할 수 있는 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항체는 단클론성 항체, 다클론성 항체, 항체 단편, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2, Fv, 단일쇄 Fv, 다이어바디, 선형 항체, 이중특이성 항체, 다중특이성 항체, 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 항체, 및 항체의 항원-결합 부분을 포함하는 융합 단백질 중 하나 이상으로부터 선택될 수 있다. 실시형태에서, 항체는 단클론성 항체, 예를 들어, 인간화 단클론성 항체이다. 실시형태에서, 면역관문 저해제는 CTLA-4, PD-1 및 PD-L1로부터 선택된 경로를 저해하는 제제를 포함한다. 실시형태에서, 면역관문 저해제는 항-PD-L1 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-PD-L1 항체는 아테졸리주맙, 더발루맙, 아벨루맙, 엔바폴리맙, BMS-936559, CK-301, CS-1001, SHR-1316(HTI-1088), CBT-502(TQB-2450) 및 BGB-A333으로부터 선택된다. 실시형태에서, 면역관문 저해제는 항-CTLA-4 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-CTLA-4 항체는 이필리무맙이다. 실시형태에서, 면역관문 저해제는 펨브롤리주맙, 니불로맙 및 세미플리맙으로부터 선택된 항-PD-1 항체를 포함한다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 안트라사이클린
실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 안트라사이클린을 포함한다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 개재에 의해 DNA와 상호작용하고, 거대분자 생합성을 저해한다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 토포아이소머라제 II를 저해한다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 DNA 쇄 절단된 후에 토포아이소머라제 II 복합체를 안정화시킨다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 퀴논형 자유 라디칼 생산을 증가시켜, 이의 세포독성에 기여한다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 전사적으로 활성인 염색질로부터 히스톤 축출(eviction)을 유도한다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 DNA 손상 반응 및/또는 후성유전체 및 전사체의 조절이상을 유도한다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 다우노루비신, 독소루비신, 에피루비신, 이다루비신, 미톡산트론 및 발루비신으로부터 선택된다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 독소루비신이다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 토포아이소머라제 II 저해제
핵 효소 DNA 토포아이소머라제 II는 다양한 암의 치료에서 사용되는 항신생물제에 대한 주요 표적이다. 따라서, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 토포아이소머라제 II 저해제를 포함한다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 II 저해제는 독소루비신, 에피루비신, 발루비신, 다우노루비신, 이다루비신, 피톡산트론, 픽산트론, 에토포사이드, 테니포사이드, 및 암사크린으로부터 선택된다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 II 저해제는 독소루비신이다. 실시형태에서, 독소루비신은 개재에 의해 DNA와 상호작용하고, 거대분자 생합성을 저해한다. 실시형태에서, 독소루비신은 DNA 쇄 절단된 후에 토포아이소머라제 II 복합체를 안정화시킨다. 실시형태에서, 독소루비신은 퀴논형 자유 라디칼 생산을 증가시켜, 이의 세포독성에 기여한다. 실시형태에서, 독소루비신은 전사적으로 활성인 염색질로부터 히스톤 축출(eviction)을 유도한다. 실시형태에서, 독소루비신은 DNA 손상 반응 및/또는 후성유전체 및 전사체의 조절이상을 유도한다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 선천성 면역관문 저해제
실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 선천성 면역관문 저해제를 포함한다. 실시형태에서, 선천성 면역관문 저해제는 CD47-SIRPα 상호작용을 표적화하는 제제를 포함한다. 실시형태에서, 선천성 면역관문 저해제는 마그롤리맙, CC-90002(Celgene), CC-95251(Celgene), TTI-621(Trillium Therapeutics), TTI-622(Trillium Therapeutics), ALX148(ALX Oncology), SRF231(Surface Oncology), IBI188(Innovent), AO-176(Arch Oncology), BI 765063/OSE-172(Boehringer Ingelheim/OSE Immunotherapeutics), TG-1801/NI_1701(TG Therapeutics/Novimmune), TJC4(I-Mab) 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질로부터 선택된다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 Bcl2 저해제
Bcl2 저해제는 악성 세포에서 세포자멸사를 선택적으로 유도하는 것으로 나타났고, 여러 악성종양에서 단일 제제로서 그리고 다른 약물과 병용하여 광범위하게 연결되었다. 따라서, 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 Bcl2 저해제를 포함한다. 실시형태에서, Bcl2 저해제는 오블리메르센, 나비토클락스(ABT-263), 베네토클락스(ABT-199), 오바토클락스 메실레이트(GX15-070) 및 AT-101로부터 선택된다. 실시형태에서, Bcl2 저해제는 베네토클락스이다. 다른 적합한 Bcl2 저해제는 미국 특허 제8,546,399호; 제8,722,657호; 제9,174,982호; 제9,238,649호; 제9,539,251호; 제9,840,502호; 및 제10,730,873호에 기재되어 있으며, 이들 각각의 전체 내용은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 단백질 네딜화 저해제
NEDD8은 제한된 수의 세포 단백질에 공유적으로 접합된 유비퀴틴-유사 단백질(ULP)이고, 이들의 안정성, 세포하 국재화 및 기능을 변경시킨다. NEDD8-활성화 효소(NAE)는 NEDD8 접합("네딜화")에서 필수적인 역할을 한다. 네딜화는 종양 세포를 유도하고, 또한 종양 미세환경(TME)의 다수의 중요한 구성성분의 기능에 영향을 미친다.　실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 단백질 네딜화 저해제를 포함한다. 실시형태에서, 단백질 네딜화 저해제는 유비퀴틴 리가제의 쿨린-RING 하위유형의 활성을 제어한다. 실시형태에서, 단백질 네딜화 저해제는 프로테아좀 상류에서 단백질의 서브세트의 전환(turnover)을 조절한다. 실시형태에서, 단백질 네딜화 저해제는 암세포에서 세포자멸사, 노화 및/또는 자가포식을 유도한다. 적합한 단백질 네딜화 저해제는 미국 특허 제8,207,177호에 개시되어 있으며, 이들의 전문은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 실시형태에서, 단백질 네딜화 저해제는 페보네디스탓이다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 미세소관 표적화제
미세소관-표적화제(MTA)는 조혈과 고형 종양 둘 다에서 치료적 이점을 갖는 매우 성공적인 부류의 암 약물이다. 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 미세소관-표적화제를 포함한다. 실시형태에서, 미세소관-표적화제는 미세소관 안정화제이다. 실시형태에서, 미세소관-표적화제는 탈안정화제이다. 실시형태에서, 미세소관-표적화제는 스핀들 기능을 차단한다. 실시형태에서, 미세소관-표적화제는 주로 유사분열을 차단함으로써 세포 증식에 대한 이의 저해 효과를 발휘한다. 실시형태에서, 미세소관-표적화제는 AKT/mTOR 신호전달 경로의 저해를 야기하고, 따라서 암세포 증식을 저해한다. 실시형태에서, 미세소관-표적화제는 파클리탁셀, 에포틸론, 도세탁셀, 디스코덜모라이드, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 비노렐빈, 빈플루닌, 돌라스타틴, 할리콘드린, 헤미아스텔린 및 크립토피신 52로부터 선택된다. 실시형태에서, 미세소관-표적화제는 파클리탁셀이다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 티미딜산 합성효소(TS) 저해제
실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 티미딜산 합성효소(TS) 저해제를 포함한다. 실시형태에서, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제는 DNA 복제를 방해하고, 이에 의해 세포분열 및 종양 성장을 저해한다. 실시형태에서, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU), 6-머캅토퓨린(6-MP), 카페시타빈, 사이타라빈, 플록수리딘, 플루다라빈, 겜시타빈, 하이드록시카바마이드, 메토트렉세이트, 페메트렉세드, 포토트렉세이트, 랄티트렉세드, 놀라트렉세드, ZD9331 및 GS7904L로부터 선택된다. 실시형태에서, DNA 합성 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU) 또는 사이타라빈(ARA-C)이다. 5-플루오로유라실(5-FU) 및 이의 제형은 미국 특허 제2,802,005호; 제4,481,203호; 제4,622,325호; 제6,670,335호에 개시되며, 이들 각각의 전체 내용은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 사이타라빈 및 이의 제형은 미국 특허 제3,116,282호; 및 제8,431,806호에 개시되며, 이들 각각의 전체 내용은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 백금 약물
백금 약물은 다양한 암의 치료에서 널리 사용된다. 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 백금 약물을 포함한다. 실시형태에서, 백금 약물은 시스플라틴, 카보플라틴, 옥살리플라틴, 네다플라틴, 헵타플라틴 및 로바플라틴으로부터 선택된다. 실시형태에서, 백금 약물은 시스플라틴이다. 실시형태에서, 백금 약물은 옥살리플라틴이다. 다른 적합한 백금 약물 및 이들의 제형은 미국 특허 제4,322,391호; 제4,915,956호; 제5,290,961호; 제5,338,874호; 제5,420,319호; 제5,716,988호; 제6,306,902호; 및 제10,383,823호에 기재되어 있으며, 이들 각각의 전체 내용은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 토포아이소머라제 I 저해제
실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 토포아이소머라제 I 저해제를 포함한다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 I 저해제는 캠프토테신, 벨로테칸 토포테칸 및 이리노테칸으로부터 선택된다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 I 저해제는 이리노테칸이다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 항-BCMA 항체
실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 항-BCMA 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-BCMA 항체는 항체 의존적 세포의 식균작용(ADCP)을 할 수 있다. 실시형태에서, 항-BCMA는 단클론성 항체, 다클론성 항체, 항체 단편, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2, Fv, 단일쇄 Fv, 다이어바디, 선형 항체, 이중특이성 항체, 다중특이성 항체, 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 항체, 및 항체의 항원-결합 부분을 포함하는 융합 단백질 중 하나 이상으로부터 선택될 수 있다. 실시형태에서, 항-BCMA는 단클론성 항체, 예를 들어, 인간화 단클론성 항체이다. 적합한 항-BCMA 항체는 WO 2010/104949호에 개시되어 있으며, 이들 각각의 전문은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 실시형태에서, 항-BCMA 항체는 C12A3.2, 벨란타맙(벨란타맙 마포도틴 포함)이다. 실시형태에서, 항-BCMA 항체는 C12A3.2이다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 항-CD38 항체
실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 항-CD38 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-CD38 항체는 항체 의존적 세포의 식균작용(ADCP)을 할 수 있다. 실시형태에서, 항-CD38 항체는 단클론성 항체, 다클론성 항체, 항체 단편, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2, Fv, 단일쇄 Fv, 다이어바디, 선형 항체, 이중특이성 항체, 다중특이성 항체, 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 항체, 및 항체의 항원-결합 부분을 포함하는 융합 단백질 중 하나 이상으로부터 선택될 수 있다. 실시형태에서, 항-CD38 항체는 단클론성 항체, 예를 들어, 인간화 단클론성 항체이다. 실시형태에서, 항-CD38 항체는 다라투무맙 및 이사툭시맙으로부터 선택된다. 실시형태에서, 항-CD38 항체는 다라투무맙이다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 면역조절 이미드 약물(IMiD)
실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 면역조절 이미드 약물(IMiD)을 포함한다. 실시형태에서, 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 종양 괴사 인자, 인터류킨 6 및 면역글로불린 G 및 VEGF의 생성을 저해한다. 실시형태에서, 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 T 세포 및 NK 세포를 공동 자극한다. 실시형태에서, 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 인터페론 감마 및 인터류킨 2 생성을 증가시킨다. 실시형태에서, 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 아프레밀라스트, 탈리도마이드, 레날리도마이드 및 포말리도마이드로부터 선택된다. 실시형태에서, 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 레날리도마이드 또는 포말리도마이드이다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 항-SLAMF7 항체
실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 항-SLAMF7 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-SLAMF7 항체는 항체 의존적 세포의 식균작용(ADCP)을 할 수 있다. 실시형태에서, 항-SLAMF7 항체는 단클론성 항체, 다클론성 항체, 항체 단편, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2, Fv, 단일쇄 Fv, 다이어바디, 선형 항체, 이중특이성 항체, 다중특이성 항체, 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 항체, 및 항체의 항원-결합 부분을 포함하는 융합 단백질 중 하나 이상으로부터 선택될 수 있다. 실시형태에서, 항-SLAMF7 항체는 단클론성 항체, 예를 들어, 인간화 단클론성 항체이다. 실시형태에서, 항-SLAMF7 항체는 엘로투주맙이다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 돌연변이된 p53의 재활성화제
종양 억제 유전자 TP53의 돌연변이는 암에서 매우 통상적이다. 다수의 TP53 돌연변이는 비활성 p53 단백질의 생성을 야기한다. 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 돌연변이된 p53의 재활성화제를 포함한다. 실시형태에서, 돌연변이된 p53의 재활성화제는 Prima-1 또는 APR-246이다. 실시형태에서, APR-246은 돌연변이체 p53에서 시스테인 잔기에 공유 결합하는 활성종 메틸렌 퀴뉴클리딘(MQ)으로 자발적으로 전환된다. 실시형태에서, APR-246은 돌연변이체 p53의 열역학적 안정화를 생성한다. 실시형태에서, APR-246은 평형상태를 기능적 입체구조로 향해 이동시킨다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 항-CD123 항체
실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 항-CD123 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-CD123 항체는 항체 의존적 세포의 식균작용(ADCP)을 할 수 있다. 실시형태에서, 항-CD123 항체는 단클론성 항체, 다클론성 항체, 항체 단편, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2, Fv, 단일쇄 Fv, 다이어바디, 선형 항체, 이중특이성 항체, 다중특이성 항체, 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 항체, 및 항체의 항원-결합 부분을 포함하는 융합 단백질 중 하나 이상으로부터 선택될 수 있다. 실시형태에서, 항-CD123 항체는 단클론성 항체, 예를 들어, 인간화 단클론성 항체이다. 실시형태에서, 항-CD123 항체는 탈라코투주맙이다.
본 명세서에 개시된 방법에 적합한 항-FOLR1 항체
실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 항-FOLR1 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-FOLR1 항체는 항체 의존적 세포의 식균작용(ADCP)을 할 수 있다. 실시형태에서, 항-FOLR1 항체는 단클론성 항체, 다클론성 항체, 항체 단편, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2, Fv, 단일쇄 Fv, 다이어바디, 선형 항체, 이중특이성 항체, 다중특이성 항체, 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 항체, 및 항체의 항원-결합 부분을 포함하는 융합 단백질 중 하나 이상으로부터 선택될 수 있다. 실시형태에서, 항-FOLR1 항체는 단클론성 항체, 예를 들어, 인간화 단클론성 항체이다. 실시형태에서, 항-FOLR1 항체는 파레투주맙 또는 미르베툭시맙 소라브탄신이다. 실시형태에서, 항-FOLR1 항체는 파레투주맙이다.
아자시티딘 및 베네토클락스
실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은 아자시티딘 및/또는 베네토클락스를 포함하되, 선택적으로 아자시티딘 및 베네토클락스는 함께 또는 별도로, 선택적으로, 순차적으로 투여되는 2개의 별도의 투약 단위에 함유된다.
질환, 치료 방법 및 환자 선택
상기 방법은 유효량의, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물; 및/또는 1종 이상의 키메라 단백질로부터 선택된 항암제를 (동시에 또는 순차적으로) 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하며, 이때 각각의 키메라 단백질은 면역 저해 신호 및/또는 자극 면역 활성화 신호를 차단시킬 수 있다.
종종 면역 저해 신호의 전달을 붕괴, 파괴, 감소, 저해 및/또는 격리시키고, 동시에 또는 같은 시기에, 항암 면역 세포에 대한 면역 자극 신호의 전달을 향상, 증가 및/또는 자극하고, 면역 반응을 신장시키고, 예를 들어, 환자의 항-종양 면역 반응을 향상시키는 것이 바람직하다.
실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택되는 항암제, 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 면역 반응 규모를 조절하고, 예를 들어, 효과기 생산 수준을 조절할 수 있고, 조절하는 단계를 포함하는 방법에서 사용될 수 있다.
실시형태에서, 예를 들어, 암 치료에 대해 사용될 때, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 증가된 수준의 사이토카인 생성 자극, 증식 또는 표적 사멸 가능성을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 T 세포 반응의 규모를 증가시키는 면역 저해에 비해 면역 자극 정도를 변경시킨다. 실시형태에서, 환자의 T 세포는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질에 의해 활성화 및/또는 자극되며, 활성화된 T 세포는 사이토카인을 분열 및/또는 분비할 수 있다.
암 또는 종양은 신체 기관 및 시스템의 정상적 기능을 방해하는 세포의 제어되지 않는 성장 및/또는 비정상적으로 증가된 세포 생존 및/또는 세포자멸사의 저해를 지칭한다. 양성 및 악성암, 용종, 과형성뿐만 아니라 잠복성 종양 또는 미세전이가 포함된다. 또한, 면역계(예를 들어, 바이러스-감염 세포)에 의해 방해되지 않는 비정상적 증식을 갖는 세포가 포함된다. 암은 원발성 암 또는 전이 암일 수 있다. 원발성 암은 임상적으로 검출 가능하게 되는 본래의 부위에서의 암세포 영역일 수 있고, 원발성 종양일 수 있다. 대조적으로, 전이성 암은 하나의 기관 또는 일부로부터 다른 비인접 기관 또는 부분까지의 질환의 확산일 수 있다. 전이성 암은 암 세포가 국소 영역 주변의 정상 조직에 침투하고 침윤하여 새로운 종양을 형성하는 능력을 획득함으로써 야기될 수 있고, 이는 국소 전이일 수 있다. 암은 또한 림프관 및/또는 혈관 벽을 관통하는 능력을 획득하는 암 세포에 의해 야기될 수 있고, 이 후에, 암 세포는 혈류를 통해 신체 내 다른 부위 및 조직으로 순환할 수 있다(이에 의해 순환 종양 세포가 됨). 암은 림프 또는 혈행성 확산과 같은 과정으로 인한 것일 수 있다. 암은 또한 다른 부위에 머무르다가, 혈관 또는 벽을 통해 다시 침투하여, 계속해서 증식하고, 결국 다른 임상적으로 검출 가능한 종양을 형성하는 종양 세포에 의해 야기될 수 있다. 암은 이런 새로운 종양일 수 있으며, 이는 전이성(또는 2차적) 종양일 수 있다.
암은 전이된 종양 세포에 의해 야기될 수 있으며, 이는 2차 또는 전이성 종양일 수 있다. 종양 세포는 본래의 종양의 종양 세포와 같을 것이다. 예로서, 유방암 또는 결장암이 간으로 전이된다면, 간에 존재하는 동안에 2차 종양은 비정상적 간 세포가 아닌 비정상적 유방 또는 결장 세포를 구성한다. 따라서 간에서의 종양은 간암이 아닌 전이성 유방암 또는 전이성 결장암일 수 있다.
암은 임의의 조직으로부터의 유래를 가질 수 있다. 암은 흑색종, 결장, 유방 또는 전립선으로부터 유래될 수 있고; 따라서, 암은 본래 각각 피부, 결장, 유방 또는 전립선 조직인 세포를 포함할 수 있다. 암은 또한 백혈병 또는 림프종일 수 있는 혈액 악성종양일 수 있다. 암은 간, 폐, 방광 또는 장과 같은 조직을 침윤할 수 있다.
본 개시내용의 대표적인 암 및/또는 종양은 기저세포암종, 담도암; 방광암; 뼈암; 뇌 및 중추 신경계암; 유방암; 복막암; 자궁경부암; 융모암; 결장 및 직장암; 결합 조직암; 소화계의 암; 자궁내막암; 식도암; 눈암; 두경부암; 위암(위장암 포함); 교모세포종; 간암종; 간암; 상피내 신생물; 신장 또는 신세포암; 후두암; 백혈병; 간암; 폐암(예를 들어, 소세포 폐암, 비소세포 폐암, 폐의 선암종, 및 폐의 편평상피암종); 흑색종; 골수종; 신경아세포종; 구강암(입술, 혀, 입 및 인두); 난소암; 췌장암; 전립선암; 망막모세포종; 횡문근육종; 직장암; 호흡계의 암; 침샘 암종; 육종; 피부암; 편평세포암; 위암; 고환암; 갑상선암; 자궁 또는 자궁내막암; 비뇨기계의 암; 외음부암; 호지킨 및 비호지킨 림프종뿐만 아니라 B-세포 림프종을 포함하는 림프종(저등급/소포 비호지킨 림프종(NHL); 소형 림프구성(SL) NHL; 중간 등급/소포 NHL; 중간 등급 미만성 NHL; 고등급 면역아세포 NHL; 고등급 림프아구성 NHL; 고등급 소형 비절단 세포 NHL; 거대 종양 NHL; 맨틀 세포 림프종; AIDS-관련 림프종; 및 발덴스트롬 마크로글로불린혈증; 만성 림프구성 백혈병(CLL); 급성 림프아구성 백혈병(ALL); 털세포 백혈병; 만성 골수아구성 백혈병뿐만 아니라 다른 암종 및 육종; 및 이식 후 림프증식성 장애(PTLD)뿐만 아니라 모반증, 부종(예컨대, 뇌 종양과 관련) 및 메이그 증후군과 관련된 비정상적 혈관증식을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제는 난치성 암을 갖는 대상체를 치료한다. 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 1종 이상의 면역 조절제에 난치성인 대상체를 치료한다. 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 치료에 반응을 제공하지 않거나 또는 심지어 치료 12주 정도까지 진행되지 않는 대상체를 치료한다. 예를 들어, 실시형태에서, 대상체는, 예를 들어, 니볼루맙(ONO-4538/BMS-936558, MDX1106, OPDIVO, BRISTOL MYERS SQUIBB), 펨브롤리주맙(KEYTRUDA, MERCK), MK-3475(MERCK), BMS 936559(BRISTOL MYERS SQUIBB), 이브루티닙(PHARMACYCLICS/ABBVIE), 아테졸리주맙(TECENTRIQ, GENENTECH)　및/또는 MPDL328OA(ROCHE)-난치성 환자를 포함하는, PD-1 및/또는 PD-L1 및/또는 PD-L2 제제에 난치성이다. 예를 들어, 실시형태에서, 대상체는 항-CTLA-4 제제에 난치성, 예를 들어, 이필리무맙(YERVOY)-난치성 환자(예를 들어, 흑색종 환자)이다. 따라서, 실시형태에서, 본 개시내용은 하나 이상의 면역-조절제의 단일요법을 포함하는 다양한 요법에 비반응성인 환자를 구하는 암 치료 방법을 제공한다.
실시형태에서, 본 개시내용은 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물, 및/또는 종양 미세환경 내에서 세포 또는 조직을 표적화하는 키메라 단백질로부터 선택된 항암제를 제공한다. 실시형태에서, 종양 미세환경 내의 세포 또는 조직은 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택되는 항암제, 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질의 하나 이상의 표적 또는 결합 상태를 발현시킨다. 종양 미세환경은 종양이 존재하는 세포, 분비된 단백질, 생리학적 소분자 및 혈관을 포함하는 세포 환경을 지칭한다. 실시형태에서, 종양 미세환경 내의 세포 또는 조직은 종양 혈관; 종양-침윤성 림프구; 섬유아세포 섬유아세포 망상세포; 혈과낸피 전구세포(EPC); 암-관련 섬유아세포; 주피세포; 다른 기질 세포; 세포외 기질의 구성성분(ECM); 수지상 세포; 항원 제시 세포; T-세포; 조절 T 세포; 대식세포; 호중구; 및 종양 근위에 위치된 다른 면역 세포 중 하나 이상이다. 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 암 세포를 표적화한다. 실시형태에서, 암 세포는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택되는 항암제, 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질의 하나 이상의 표적 또는 결합 상태를 발현시킨다.
실시형태에서, 본 방법은 추가 제제에 난치성인 환자에서 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질에 의한 치료를 제공하며, 이러한 "추가적인 제제"는 본 명세서의 다른 곳에 개시되며, 본 명세서에 개시된 다양한 화학치료제를 포함하지만, 이것으로 제한되지 않는다.
조절 T 세포의 활성화는 공자극 및 공동저해 신호에 의해 결정적으로 영향받는다. 공자극 분자의 두 주요 패밀리는 B7 및 종양 괴사 인자(TNF) 패밀리를 포함한다. 이들 분자는 각각 CD28 또는 TNF 수용체 패밀리에 속하는 T 세포 상의 수용체에 결합한다. 다수의 잘 규정된 공동저해제 및 이들의 수용체는 B7 및 CD28 패밀리에 속한다.
실시형태에서, 면역 자극 신호는 면역 반응을 향상시키는 신호를 지칭한다. 예를 들어, 종양학과 관련하여, 이러한 신호는 항종양 면역을 향상시킬 수 있다. 예를 들어, 제한 없이, 면역 자극 신호는 증식, 사이토카인 생성, 사멸 활성 또는 백혈구의 탐식능을 직접 자극함으로써 확인될 수 있다. 구체적인 예는 수용체 작용제 항체를 이용하거나 또는 이러한 수용체(각각 OX40L, CD40L 및 HVEM)에 대한 리간드를 포함하는 키메라 단백질을 이용하는 TNF 슈퍼패밀리 수용체, 예컨대, OX40, CD40 및 LIGHT의 직접 자극을 포함한다. 이들 수용체 중 어느 하나로부터의 자극은 개개 T 세포 서브세트의 증식 및 사이토카인 생성을 직접 자극할 수 있다. 다른 예는 이러한 면역 억제 세포의 활성을 저해하는 수용체를 통한 면역 저해 세포의 직접 자극을 포함한다. 다른 예에서, 이는 CD40 작용제 항체 또는 CD40L을 함유하는 키메라 단백질을 이용한 항원 제시 세포 표면 상에서의 CD40의 자극을 포함하여, B7 또는 TNF 슈퍼패밀리의 분자를 비롯하여 적절한 천연 공자극 분자와 관련하여 항원을 제시하는 해당 세포의 향상된 능력을 포함하는 항원 제시 세포의 활성화를 야기한다. 다른 예에서, 이는 LIGHT 함유 키메라 단백질을 이용한 림프 또는 기질 세포의 표면 상에서의 LTBR의 자극을 포함하여, 면역 반응, 선택적으로 종양 내에서 면역 반응을 추가로 자극하도록 림프 세포의 활성화 및/또는 전염증 사이토카인 또는 케모카인의 생성을 야기한다.
실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 자극 면역 조절을 수반하고/하거나, 향상시키고/시키거나, 회복하고/회복하거나, 촉진시키고 그리고/또는 자극할 수 있거나, 이러한 방법에서의 용도를 찾는다. 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 T 세포, 세포독성 T 림프구, T 헬퍼 세포, 자연 살해(NK) 세포, 자연 살해 T(NKT) 세포, 항-종양 대식세포(예를 들어, M1 대식세포), B 세포 및 수지상 세포를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 종양 세포에 대해 하나 이상의 면역 세포의 활성 또는 활성화를 회복시키고/시키거나, 촉진시키고/시키거나 자극한다. 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택되는 항암제 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 비제한적 예로서, 생존전 신호; 자가분비 또는 파라크린 성장 신호; p38 MAPK-, ERK-, STAT-, JAK-, AKT- 또는 PI3K-매개 신호; 항-세포자멸사 신호; 및/또는 전염증 사이토카인 생성 또는 T 세포 이동 또는 T 세포 종양 침윤 중 하나 이상을 촉진시키고/시키거나 이들에 필요한 신호를 포함하는, 하나 이상의 T-세포 신호를 활성화 및/또는 자극하는 것을 포함하는, T 세포의 활성 및/또는 활성화를 향상시키고/시키거나 회복하고/하거나 촉진시키고/시키거나 자극한다.
실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 종양 또는 종양 미세환경에 T 세포(세포독성 T 림프구, T 헬퍼 세포, 자연 살해 T(NKT) 세포를 포함하지만, 이들로 제한되지 않음), B 세포, 자연 살해(NK) 세포, 자연 살해 T(NKT) 세포, 수지상 세포, 단핵구 및 대식세포(예를 들어, M1 및 M2 중 하나 이상) 중 하나 이상의 증가를 야기할 수 있거나, 또는 야기하는 것을 수반하는 방법에서의 용도를 발견한다. 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 CD8+ T 세포, 특히 종양 미세환경에 침윤된 해당 T 세포에 의한 종양 항원의 인식을 향상시킨다. 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 CD19 발현을 유도하고/하거나 CD19 양성 세포(예를 들어, CD19 양성 B 세포)의 수를 증가시킨다. 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 IL-15Rα 발현을 유도하고/하거나 IL-15Rα 양성 세포(예를 들어, IL-15Rα 양성 수지상 세포)의 수를 증가시킨다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 면역억제 세포(예를 들어, 골수-유래 억제 세포(MDSC), 조절 T 세포(Treg), 종양 관련 호중구(TAN), M2 대식세포, 및 종양 관련 대식세포(TAM))에서, 그리고 특히 종양 및/또는 종양 미세환경(TME) 내에서 저해하고/하거나 감소를 야기할 수 있거나, 이를 수반하는 방법에서의 용도를 발견한다. 실시형태에서, 본 요법은 M1 대식세포를 선호하도록 종양 부위 및/또는 TME에서 M1 대 M2 대식세포의 비를 변경시킬 수 있다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 IFNγ, TNFα, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-9, IL-10, IL-13, IL-15, IL-17A, IL-17F, IL-22, CCL2, CCL3, CCL4, CXCL8, CXCL9, CXCL10, CXCL11 및 CXCL12 중 하나 이상을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 다양한 사이토카인 또는 케모카인의 혈청 수준을 증가시킬 수 있다. 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 치료되는 대상체의 혈청에서 IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-13, IL-17A, IL-22, TNFα 또는 IFNγ를 향상시킬 수 있다. 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질의 투여는 TNFα 분비를 향상시킬 수 있다. 구체적 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질의 투여는 백혈구에 의한 초항원 매개 TNFα 분비를 향상시킬 수 있다. 이러한 사이토카인 반응의 검출은 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 표시된 항암제 및/또는 키메라 단백질에 대한 최적의 투약 요법을 결정하는 방법을 제공한다.
본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제에 관한 항체 및/또는 키메라 단백질은 CD4+ 및/또는 CD8+ T 세포의 하위 집단에서의 감소를 증가시키거나 또는 방지할 수 있다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질의 투여는 T 세포에 의한 종양-사멸 활성을 향상시킬 수 있다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 항-종양 CD8+ 및/또는 CD4+ T 세포의 세포사를 저해하고/하거나 차단하고/하거나 감소시키거나; 또는 전 종양 T 세포의 세포사를 자극하고/하거나, 유도하고/하거나 증가시킨다. T 세포 고갈은 증식성 및 효과기 기능의 진행성 상실로 클론 고갈로 끝나는 것을 특징으로 하는 T 세포 기능장애 상태이다. 따라서, 종양 전 T 세포는 다수의 만성 감염 염증성 질환 및 암 동안 생기는 T 세포 기능장애 상태를 지칭한다. 이 기능장애는 불량한 증식성 및/또는 효과기 기능, 기능성 효과기 또는 기억 T 세포와 별개인 저해 수용체의 지속적 발현 및 전사 상태로 정의된다. 고갈은 감염 및 종양의 최적의 제어를 막는다. 예시적인 종양 전 T 세포는 Treg, 하나 이상의 관문 저해 수용체를 발현시키는 CD4+ 및/또는 CD8+ T 세포, Th2 세포 및 Th17 세포를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 관문 저해 수용체는 제어되지 않는 면역 반응을 방지하거나 저해하는 면역 세포 상에서 발현된 수용체를 지칭한다. 대조적으로, 항-종양 CD8+ 및/또는 CD4+ T 세포는 종양에 대한 면역 반응을 시작할 수 있는 T 세포를 지칭한다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질의 투여는 효과기 T 세포 대 조절 T 세포의 비를 증가시킬 수 있고, 이를 증가시키는 단계를 포함하는 방법에서 사용될 수 있다. 예시적인 효과기 T 세포는 ICOS+ 효과기 T 세포; 세포독성 T 세포(예를 들어, αβ TCR, CD3+, CD8+, CD45RO+); CD4+ 효과기 T 세포(예를 들어, αβ TCR, CD3+, CD4+, CCR7+, CD62Lhi, IL-7R/CD127+); CD8+ 효과기 T 세포(예를 들어, αβ TCR, CD3+, CD8+, CCR7+, CD62Lhi, IL-7R/CD127+); 효과기 기억 T 세포(예를 들어, CD62Llow, CD44+, TCR, CD3+, IL-7R/CD127+, IL-15R+, CCR7low); 중심 기억 T 세포(예를 들어, CCR7+, CD62L+, CD27+; 또는 CCR7hi, CD44+, CD62Lhi, TCR, CD3+, IL-7R/CD127+, IL-15R+); CD62L+ 효과기 T 세포; 초기 효과기 기억 T 세포(CD27+ CD62L-) 및 후기 효과기 기억 T 세포(CD27- CD62L-)(각각 TemE 및 TemL)를 비롯한 CD8+ 효과기 기억 T 세포(TEM); CD127(+)CD25(low/-) 효과기 T 세포; CD127(-)CD25(-) 효과기 T 세포; CD8+ 줄기 세포 기억 효과기 세포(TSCM)(예를 들어, CD44(low)CD62L(high)CD122(high)sca(+)); TH1 효과기 T-세포(예를 들어, CXCR3+, CXCR6+ 및 CCR5+; 또는 αβ TCR, CD3+, CD4+, IL-12R+, IFNγR+, CXCR3+), TH2 효과기 T 세포(예를 들어, CCR3+, CCR4+ 및 CCR8+; 또는 αβ TCR, CD3+, CD4+, IL-4R+, IL-33R+, CCR4+, IL-17RB+, CRTH2+); TH9 효과기 T 세포(예를 들어, αβ TCR, CD3+, CD4+); TH17 효과기 T 세포(예를 들어, αβ TCR, CD3+, CD4+, IL-23R+, CCR6+, IL-1R+); CD4+CD45RO+CCR7+ 효과기 T 세포, CD4+CD45RO+CCR7(-) 효과기 T 세포; 및 효과기 T 세포 분비 IL-2, IL-4 및/또는 IFN-γ를 포함한다. 예시적인 조절 T 세포는 ICOS+ 조절 T 세포, CD4+CD25+FOXP3+ 조절 T 세포, CD4+CD25+ 조절 T 세포, CD4+CD25- 조절 T 세포, CD4+CD25high 조절 T 세포, TIM-3+PD-1+ 조절 T 세포, 림프구 활성화 유전자-3(LAG-3)+ 조절 T 세포, CTLA-4/CD152+ 조절 T 세포, 뉴로필린-1(Nrp-1)+ 조절 T 세포, CCR4+CCR8+ 조절 T 세포, CD62L (L-셀렉틴)+ 조절 T 세포, CD45RBlow 조절 T 세포, CD127low 조절 T 세포, LRRC32/GARP+ 조절 T 세포, CD39+ 조절 T 세포, GITR+ 조절 T 세포, LAP+ 조절 T 세포, 1B11+ 조절 T 세포, BTLA+ 조절 T 세포, 1형 조절 T 세포(Tr1 세포),T 헬퍼 3형(Th3) 세포, 자연 살해 T 세포 표현형의 조절 세포(NKTregs), CD8+ 조절 T 세포, CD8+CD28- 조절 T 세포 및/또는 조절 T-세포 분비 IL-10, IL-35, TGF-β, TNF-α, 갈렉틴-1, IFN-γ 및/또는 MCP1을 포함한다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 효과기 T 세포(예를 들어, CD4+CD25- T 세포)의 증가를 야기한다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 조절 T 세포(예를 들어, CD4+CD25+ T 세포)의 감소를 야기한다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 재발을 방지하거나 또는 동물을 재발로부터 보호하고/하거나 전이를 방지하거나, 전이 가능성을 감소시킬 수 있는 기억 반응을 생성한다. 따라서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제, 및/또는 키메라 단백질로 치료되는 동물은 이후에 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택되는 항암제, 및/또는 키메라 단백질에 의한 초기 치료 후 재시험감염될 때 종양 세포를 공격하고/하거나 종양 발생을 방지한다. 따라서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 재발을 방지할 수 있는 기억 반응을 프로그래밍하는 데 필수적인 종양 항원의 면역 인식과 활성 종양 파괴를 둘 다 자극한다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 항원 제시 세포의 활성화를 야기할 수 있다. 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 항원을 제시하는 항원 제시 세포의 능력을 향상시킬 수 있다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질의 투여는 약 12시간, 약 24시간, 약 48시간, 약 72시간 또는 약 96시간 또는 약 1주 또는 약 2주 이상 동안 효과기 T 세포를 일시적으로 자극할 수 있거나, 일시적으로 자극하는 단계를 포함하는 방법에서 사용될 수 있다. 실시형태에서, 효과기 T 세포의 일시적 자극은 실질적으로 환자의 혈류에서 또는 림프구 조직, 예를 들어, 골수, 림프절, 비장, 흉선, 점막-관련 림프구 조직(MALT), 비-림프종 조직을 포함하는 특정 조직/위치에서 또는 종양 미세환경에서 일어난다.
본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 예상치 못하게 세포외 도메인 구성성분이 이들의 각각의 결합 상태에 느린 속도(Kd 또는 Koff)로 결합하는 것을 제공한다. 실시형태에서, 이는 예상치 못하게 리간드에 대한 수용체의 긴 상호작용 및 그 반대를 제공한다. 이러한 효과는 더 긴 양의 신호 효과, 예를 들어, 면역 자극 신호의 증가 또는 활성화를 가능하게 한다. 예를 들어, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은, 예를 들어, 긴 오프 속도 결합을 통해, 충분한 신호 전달을 가능하게 하여 면역 세포 증식을 제공하고, 항-종양 공격을 가능하게 하며, 충분한 신호 전달을 가능하게 하여 자극 신호, 예를 들어, 사이토카인의 방출을 제공한다.
본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 세포 사이에서 안정적인 시냅스를 형성할 수 있다. (예를 들어, 음의 신호를 보유하는 세포 사이에서) 키메라 단백질에 의해 촉진되는 세포의 안정적인 시냅스는 종양 세포를 공격하는 T 세포를 위치시키고/시키거나 키메라 단백질에 의해 마스킹된 것 이상의 음의 신호를 포함하여 종양 세포가 음의 신호를 전달하는 것을 입체적으로 방지하는 것과 같이 종양 감소에 유리하도록 공간적 배향을 제공한다. 실시형태에서, 이는 키메라 단백질의 혈청 t1/2에 비해 더 긴 표적 상(on-target)(예를 들어, 종양 내) 반감기(t1/2)를 제공한다. 이러한 특성은 키메라 단백질의 전신 분포와 관련되는 비표적 독성을 감소시키는 조합된 이점을 가질 수 있었다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 지속된 면역조절 효과를 제공할 수 있다.
본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 두 면역치료제의 개선된 부위-특이적 상호작용을 허용하기 때문에 상승적 치료 효과(예를 들어, 항-종양 효과)를 제공한다. 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 떨어져 있는 그리고/또는 전신 독성을 감소시키는 가능성을 제공한다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 향상된 안전성 프로파일을 나타낸다. 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 감소된 독성 프로파일을 나타낸다. 예를 들어, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질의 투여는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질 세포외 도메인에 의해 표적화된 리간드(들)/수용체(들)로 향하는 항체의 투여 후에 일어나는 설사, (예를 들어, 장의) 염증, 또는 체중감소 중 하나 이상과 같은 감소된 부작용을 초래할 수 있다. 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 또한 효능을 희생시키지 않고, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질의 세포외 도메인에 의해 표적화된 리간드(들)/수용체(들)에 관한 항체와 비교할 때 개선된 안전성을 제공한다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 현재의 면역요법, 예를 들어, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질의 세포외 도메인에 의해 표적화된 리간드(들)/수용체(들)로 향하는 항체에 비해 감소된 부작용, 예를 들어, GI 합병증을 제공한다. 예시적인 GI 합병증은 복통, 식욕 상실, 자가면역 효과, 변비, 크램핑, 탈수, 설사, 섭식 문제, 피로, 고창, 복부 내 유체 또는 복수, 위장(GI) 장내 세균 불균형, GI 점막염, 염증성 장질환, 과민성 대장 증후군(IBS-D 및 IBS-C), 구역, 통증, 대변 또는 소변 변화, 궤양성 대장염, 구토, 유체 보유로부터의 체중 증가 및/또는 쇠약을 포함한다.
다양한 양상에서, 본 개시내용은 암 면역요법에 유용한 조성물 및 방법을 제공한다. 예를 들어, 본 개시내용은, 부분적으로, (동시에 또는 순차적으로) 본 명세서에 개시된 키메라 단백질 및 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제를 투여하는 단계를 포함하는 암 치료 방법에 관한 것이다.
실시형태에서, 본 개시내용의 키메라 단백질 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 SIRP1α/CD47 신호전달 축을 붕괴시키는 것과 관련된 부작용을 제거하거나 감소시킨다. 실시형태에서, 본 키메라 단백질 또는 이를 이용하는 방법은 혈액학적 부작용을 제거하거나 감소시킨다. 실시형태에서, 본 키메라 단백질 또는 이를 이용하는 방법은 순환 적혈구 및 혈소판의 수, 용혈작용, 적혈구 응집반응, 혈소판 감소증 및/또는 빈혈의 감소 정도를 제거하거나 감소시킨다. 실시형태에서, 본 키메라 단백질 또는 이를 이용하는 방법은 항-CD47 항체보다 비교적 더 적은 혈액학적 부작용을 입증한다.
본 개시내용의 양상은 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암을 치료하는 방법이다. 상기 방법은 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 제공하는 단계 및 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 제공하는 단계를 포함한다. 제1 약제학적 조성물은, (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함한다. 제2 약제학적 조성물은 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제를 포함한다.
실시형태에서, 제1 약제학적 조성물과 제2 약제학적 조성물은 동시에 투여된다. 실시형태에서, 제1 약제학적 조성물은 제2 약제학적 조성물이 투여된 후에 투여된다. 실시형태에서, 제1 약제학적 조성물은 제2 약제학적 조성물이 투여되기 전에 투여된다. 실시형태에서, 제1 약제학적 조성물의 용량은 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 없거나 받고 있지 않은 대상체에게 투여되는 제1 약제학적 조성물의 용량보다 적다. 실시형태에서, 투여되는 제2 약제학적 조성물의 용량은 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 없거나 받고 있지 않은 대상체에게 투여되는 제2 약제학적 조성물의 용량보다 적다. 실시형태에서, 대상체는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료만을 받은 적이 있거나 이러한 치료만을 받고 있는 대상체에 비해 위장 염증 및 체중감소 없이 증가된 생존 기회, 및/또는 종양 크기 또는 암 유병률의 감소를 갖는다. 실시형태에서, 대상체는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료만을 받은 적이 있거나 이러한 치료만을 받고 있는 대상체에 비해 위장 염증 및 체중감소 없이 증가된 생존 기회, 및/또는 종양 크기 또는 암 유병률의 감소를 갖는다.
실시형태에서, 제1 약제학적 조성물 및 제2 약제학적 조성물은 동시에 제공되고, 제1 약제학적 조성물은 제2 약제학적 조성물이 제공된 후에 제공되거나, 또는 제1 약제학적 조성물은 제2 약제학적 조성물이 제공되기 전에 제공된다.
실시형태에서, 제1 약제학적 조성물의 용량은 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 없거나 받고 있지 않은 대상체에게 제공되는 제1 약제학적 조성물의 용량보다 적다.
실시형태에서, 제2 약제학적 조성물의 용량은 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 없거나 받고 있지 않은 대상체에게 제공되는 제2 약제학적 조성물의 용량보다 적다.
실시형태에서, 대상체는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료만을 받은 적이 있거나 이러한 치료만을 받고 있는 대상체에 비해 위장 염증 및 체중감소 없이 증가된 생존 기회, 및/또는 종양 크기 또는 암 유병률의 감소를 갖는다.
실시형태에서, 대상체는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료만을 받은 적이 있거나 이러한 치료만을 받고 있는 대상체에 비해 위장 염증 및 체중감소 없이 증가된 생존 기회, 및/또는 종양 크기 또는 암 유병률의 감소를 갖는다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 SIRPα(CD172a)의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제1 도메인, 및/또는 CD40L의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제2 도메인을 포함한다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 SIRPα(CD172a)의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제1 도메인, 및/또는 OX40L의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제2 도메인을 포함한다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 SIRPα(CD172a)의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제1 도메인, 및/또는 LIGHT의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제2 도메인을 포함한다.
본 명세서에 개시된 임의의 실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 SIRPα(CD172a)의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제1 도메인, 및/또는 CD40L, OX40L 또는 LIGHT의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제2 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은, (a) SIRPα(CD172a)의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L, OX40L 또는 LIGHT의 일부를 포함하는 제2 도메인, 및 (c) 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함하는 링커를 포함한다.
본 명세서에 개시된 임의의 실시형태에서, 링커는 가요성 아미노산 서열, IgG 힌지 영역 및 항체 서열로부터 선택되는 폴리펩타이드이다. 실시형태에서, 링커는 이황화 결합을 형성할 수 있는 적어도 하나의 시스테인 잔기를 포함하고/하거나 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 링커는 IgG1 또는 IgG4, 예를 들어, 인간 IgG4 또는 인간 IgG4로부터 유래된 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 링커는 서열번호 1, 서열번호 2 또는 서열번호 3의 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함한다.
실시형태에서, 제1 도메인은 서열번호 57의 아미노산 서열과 적어도 90%, 또는 적어도 93%, 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다.
실시형태에서, 제2 도메인은 서열번호 58, 서열번호 59 또는 서열번호 62의 아미노산 서열과 적어도 90%, 또는 적어도 93%, 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 제2 도메인은 서열번호 58의 아미노산 서열과 적어도 90%, 또는 적어도 93%, 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 서열번호 60, 서열번호 61 또는 서열번호 63의 아미노산 서열과 적어도 90%, 또는 적어도 93%, 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은 서열번호 60의 아미노산 서열과 적어도 90%, 또는 적어도 93%, 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다.
실시형태에서, 링커는 가요성 아미노산 서열, IgG 힌지 영역 및 항체 서열로부터 선택되는 폴리펩타이드이다.
실시형태에서, 링커는 이황화 결합을 형성할 수 있는 적어도 하나의 시스테인 잔기를 포함하고/하거나 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 링커는 IgG4, 예를 들어, 인간 IgG4로부터 유래된 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함한다. 실시형태에서, 링커는 서열번호 1, 서열번호 2 또는 서열번호 3의 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함한다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은
(a) SIRPα(CD172a)의 일부를 포함하는 제1 도메인,
(b) CD40L의 일부를 포함하는 제2 도메인, 및
(c) 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함하는 링커
를 포함한다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은
(a) SIRPα(CD172a)의 일부를 포함하는 제1 도메인,
(b) OX40L의 일부를 포함하는 제2 도메인, 및
(c) 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함하는 링커
를 포함한다.
실시형태에서, 이종성 키메라 단백질은
(a) SIRPα(CD172a)의 일부를 포함하는 제1 도메인,
(b) LIGHT의 일부를 포함하는 제2 도메인, 및
(c) 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함하는 링커
를 포함한다.
실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자는 아자시티딘, 5-아자-2'-데옥시사이티딘, 수베로일아닐라이드 하이드록삼산(saha), 로미뎁신, 벨리노스탓, 파노비노스탓 및 키다마이드로부터 선택된다. 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자는 아자시티딘이다.
실시형태에서, 프로테아좀 저해제는 보르테조밉, 카르필조밉 및 익사조밉으로부터 선택된다. 실시형태에서, 프로테아좀 저해제는 보르테조밉이다.
실시형태에서, 항대사물질은 티미딜산 합성효소, DNA 중합효소, RNA 중합효소 및 뉴클레오타이드 환원효소로부터 선택된 1종 이상의 효소를 저해한다. 실시형태에서, 항대사물질은 5-플루오로유라실(5-FU), 카페시타빈, 플록수리딘, 사이타라빈(ARA-C), 겜시타빈, 데시타빈 및 비다자로부터 선택된다. 실시형태에서, 항대사물질은 5-플루오로유라실(5-FU) 또는 사이타라빈(ARA-C)이다.
실시형태에서, DNA 합성 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU), 카페시타빈, 플록수리딘, 사이타라빈(ARA-C), 겜시타빈, 데시타빈 및 비다자로부터 선택된다. 실시형태에서, DNA 합성 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU) 또는 사이타라빈(ARA-C)이다.
실시형태에서, 면역관문 저해제는 CTLA-4, PD-1 및 PD-L1로부터 선택된 경로를 저해하는 제제를 포함한다. 실시형태에서, 면역관문 저해제는 항-PD-L1 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-PD-L1 항체는 아테졸리주맙, 더발루맙, 아벨루맙, 엔바폴리맙, BMS-936559, CK-301, CS-1001, SHR-1316(HTI-1088), CBT-502(TQB-2450) 및 BGB-A333으로부터 선택된다. 실시형태에서, 면역관문 저해제는 항-CTLA-4 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-CTLA-4 항체는 이필리무맙이다. 실시형태에서, 면역관문 저해제는 펨브롤리주맙, 니불로맙 및 세미플리맙으로부터 선택된 항-PD-1 항체를 포함한다.
실시형태에서, 안트라사이클린은 다우노루비신, 독소루비신, 에피루비신, 이다루비신, 미톡산트론 및 발루비신으로부터 선택된다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 독소루비신이다.
실시형태에서, 토포아이소머라제 II 저해제는 독소루비신, 에피루비신, 발루비신, 다우노루비신, 이다루비신, 피톡산트론, 픽산트론, 에토포사이드, 테니포사이드, 및 암사크린으로부터 선택된다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 II 저해제는 독소루비신이다.
실시형태에서, 선천성 면역관문 저해제는 CD47-SIRPα 상호작용을 표적화하는 제제를 포함한다. 실시형태에서, 선천성 면역관문 저해제는 마그롤리맙, CC-90002(Celgene), CC-95251(Celgene), TTI-621(Trillium Therapeutics), TTI-622(Trillium Therapeutics), ALX148(ALX Oncology), SRF231(Surface Oncology), IBI188(Innovent), AO-176(Arch Oncology), BI 765063/OSE-172(Boehringer Ingelheim/OSE Immunotherapeutics) 및 TG-1801/NI_1701(TG Therapeutics/Novimmune), TJC4(I-Mab)로부터 선택된다.
실시형태에서, Bcl2 저해제는 오블리메르센, 나비토클락스(ABT-263), 베네토클락스(ABT-199), 오바토클락스 메실레이트(GX15-070) 및 AT-101로부터 선택된다. 실시형태에서, Bcl2 저해제는 베네토클락스이다.
실시형태에서, 단백질 네딜화 저해제는 페보네디스탓이다.
실시형태에서, 미세소관-표적화제는 파클리탁셀, 에포틸론, 도세탁셀, 디스코덜모라이드, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 비노렐빈, 빈플루닌, 돌라스타틴, 할리콘드린, 헤미아스텔린 및 크립토피신 52로부터 선택된다. 실시형태에서, 미세소관-표적화제는 파클리탁셀이다.
실시형태에서, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU), 6-머캅토퓨린(6-MP), 카페시타빈, 사이타라빈, 플록수리딘, 플루다라빈, 겜시타빈, 하이드록시카바마이드, 메토트렉세이트, 페메트렉세드, 포토트렉세이트, 랄티트렉세드, 놀라트렉세드, ZD9331 및 GS7904L로부터 선택된다. 실시형태에서, DNA 합성 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU) 또는 사이타라빈(ARA-C)이다.
실시형태에서, 백금 약물은 시스플라틴, 카보플라틴, 옥살리플라틴, 네다플라틴, 헵타플라틴 및 로바플라틴으로부터 선택된다. 실시형태에서, 백금 약물은 시스플라틴이다. 실시형태에서, 백금 약물은 옥살리플라틴이다.
실시형태에서, 토포아이소머라제 I 저해제는 캠프토테신, 벨로테칸 토포테칸 및 이리노테칸으로부터 선택된다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 I 저해제는 이리노테칸이다.
실시형태에서, 항-BCMA 항체는 C12A3.2이다.
실시형태에서, 항-CD38 항체는 다라투무맙 및 이사툭시맙으로부터 선택된다. 실시형태에서, 항-CD38 항체는 다라투무맙이다.
실시형태에서, 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 아프레밀라스트, 탈리도마이드, 레날리도마이드 및 포말리도마이드로부터 선택된다. 실시형태에서, 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 레날리도마이드 또는 포말리도마이드이다.
실시형태에서, 항-SLAMF7 항체는 엘로투주맙이다.
실시형태에서, 돌연변이된 p53의 재활성화제는 Prima-1 또는 APR-246이다.
실시형태에서, 항-CD123 항체는 탈라코투주맙이다.
실시형태에서, 항-FOLR1 항체는 파레투주맙 또는 미르베툭시맙이다.
일부 실시형태에서, 암은 기저세포암종, 담도암; 방광암; 뼈암; 뇌 및 중추 신경계암; 유방암; 복막암; 자궁경부암; 융모암; 결장 및 직장암; 결합 조직암; 소화계의 암; 자궁내막암; 식도암; 눈암; 두경부암; 위암(위장암 포함); 교모세포종; 간암종; 간암; 상피내 신생물; 신장 또는 신세포암; 후두암; 백혈병; 간암; 폐암(예를 들어, 소세포 폐암, 비소세포 폐암, 폐의 선암종, 및 폐의 편평상피암종); 흑색종; 골수종; 신경아세포종; 구강암(입술, 혀, 입 및 인두); 난소암; 췌장암; 전립선암; 망막모세포종; 횡문근육종; 직장암; 호흡계의 암; 침샘 암종; 육종; 피부암; 편평세포암; 위암; 고환암; 갑상선암; 자궁 또는 자궁내막암; 비뇨기계의 암; 외음부암; 호지킨 및 비호지킨 림프종뿐만 아니라 B-세포 림프종을 포함하는 림프종(저등급/소포 비호지킨 림프종(NHL); 소형 림프구성(SL) NHL; 중간 등급/소포 NHL; 중간 등급 미만성 NHL; 고등급 면역아세포 NHL; 고등급 림프아구성 NHL; 고등급 소형 비절단 세포 NHL; 거대 종양 NHL; 맨틀 세포 림프종; AIDS-관련 림프종; 및 발덴스트롬 마크로글로불린혈증; 만성 림프구성 백혈병(CLL); 급성 림프아구성 백혈병(ALL); 털세포 백혈병; 만성 골수아구성 백혈병뿐만 아니라 다른 암종 및 육종; 및 이식 후 림프증식성 장애(PTLD)뿐만 아니라 모반증, 부종(예컨대, 뇌 종양과 관련) 및 메이그 증후군과 관련된 비정상적 혈관증식이거나, 이들과 관련된다.
실시형태에서, 대상체는 PD-1에 결합하거나 PD-1 리간드에 결합할 수 있는 항체를 포함하는 치료에 불량하게 반응성이거나 난치성인 암을 갖는다. 실시형태에서, 암은 이러한 치료의 12주 정도 후에 PD-1에 결합하거나 PD-1 리간드에 결합할 수 있는 항체에 의한 치료에 불량하게 반응성이거나 비반응성이다. 실시형태에서, PD-1에 결합하거나 PD-1 리간드에 결합할 수 있는 항체는 니볼루맙(ONO-4538/BMS-936558, MDX1106, OPDIVO, BRISTOL MYERS SQUIBB), 펨브롤리주맙(KEYTRUDA, MERCK), RMP1-14, AGEN2034(AGENUS), 세미플리맙(REGN-2810), MK-3475(MERCK), BMS 936559(BRISTOL MYERS SQUIBB), 이브루티닙(PHARMACYCLICS/ABBVIE), 아테졸리주맙(TECENTRIQ, GENENTECH) 및 MPDL328OA(ROCHE)로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본 개시내용의 다른 양상은 이종성 키메라 단백질을 포함하는 약제학적 조성물을 대상체에게 제공하는 단계를 포함하는, 대상체의 암 치료 방법이다. (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질. 본 양상에서, 대상체는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다.
실시형태에서, 대상체에게 제공되는 약제학적 조성물의 용량은 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제에 의한 치료를 받은 적이 없거나 받고 있지 않은 대상체에게 제공되는 약제학적 조성물의 용량보다 더 적다.
본 개시내용의 또 다른 양상은 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제를 포함하는 약제학적 조성물을 대상체에게 제공하는 단계를 포함하는 대상체의 암을 치료하는 방법이다. 본 양상에서, 대상체는 (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 이용하는 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다.
실시형태에서, 대상체에게 제공되는 약제학적 조성물의 용량은 이종성 키메라 단백질에 의한 치료를 받은 적이 없거나 받고 있지 않은 대상체에게 제공되는 약제학적 조성물의 용량보다 적다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 저메틸화제/후성 조절자를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자는 아자시티딘, 5-아자-2'-데옥시사이티딘, 수베로일아닐라이드 하이드록삼산(saha), 로미뎁신, 벨리노스탓, 파노비노스탓 및 키다마이드로부터 선택된다. 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자는 아자시티딘이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 저메틸화제/후성 조절자를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자는 아자시티딘, 5-아자-2'-데옥시사이티딘, 수베로일아닐라이드 하이드록삼산(saha), 로미뎁신, 벨리노스탓, 파노비노스탓 및 키다마이드로부터 선택된다. 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자는 아자시티딘이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 프로테아좀 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 프로테아좀 저해제는 보르테조밉, 카르필조밉 및 익사조밉으로부터 선택된다. 실시형태에서, 프로테아좀 저해제는 보르테조밉이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 프로테아좀 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 프로테아좀 저해제는 보르테조밉, 카르필조밉 및 익사조밉으로부터 선택된다. 실시형태에서, 프로테아좀 저해제는 보르테조밉이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 프로테아좀 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 프로테아좀 저해제는 보르테조밉, 카르필조밉 및 익사조밉으로부터 선택된다. 실시형태에서, 프로테아좀 저해제는 보르테조밉이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 항대사물질을 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 항대사물질은 5-플루오로유라실(5-FU), 카페시타빈, 플록수리딘, 사이타라빈(ARA-C), 겜시타빈, 데시타빈 및 비다자로부터 선택된다. 실시형태에서, 항대사물질은 사이타라빈(ARA-C)이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 항대사물질을 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 항대사물질은 5-플루오로유라실(5-FU), 카페시타빈, 플록수리딘, 사이타라빈(ARA-C), 겜시타빈, 데시타빈 및 비다자로부터 선택된다. 실시형태에서, 항대사물질은 사이타라빈(ARA-C)이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 항대사물질을 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 항대사물질은 5-플루오로유라실(5-FU), 카페시타빈, 플록수리딘, 사이타라빈(ARA-C), 겜시타빈, 데시타빈 및 비다자로부터 선택된다. 실시형태에서, 항대사물질은 사이타라빈(ARA-C)이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 DNA 합성 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, DNA 합성 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU), 카페시타빈, 플록수리딘, 사이타라빈(ARA-C), 겜시타빈, 데시타빈 및 비다자로부터 선택된다. 실시형태에서, DNA 합성 저해제는 사이타라빈(ARA-C) 또는 5-플루오로유라실(5-FU)이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 DNA 합성 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, DNA 합성 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU), 카페시타빈, 플록수리딘, 사이타라빈(ARA-C), 겜시타빈, 데시타빈 및 비다자로부터 선택된다. 실시형태에서, DNA 합성 저해제는 사이타라빈(ARA-C) 또는 5-플루오로유라실(5-FU)이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 DNA 합성 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, DNA 합성 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU), 카페시타빈, 플록수리딘, 사이타라빈(ARA-C), 겜시타빈, 데시타빈 및 비다자로부터 선택된다. 실시형태에서, DNA 합성 저해제는 사이타라빈(ARA-C) 또는 5-플루오로유라실(5-FU)이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 면역관문 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 면역관문 저해제는 CTLA-4, PD-1 및 PD-L1로부터 선택된 경로를 저해하는 제제를 포함한다. 실시형태에서, 면역관문 저해제는 항-PD-L1 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-PD-L1 항체는 아테졸리주맙, 더발루맙, 아벨루맙, 엔바폴리맙, BMS-936559, CK-301, CS-1001, SHR-1316(HTI-1088), CBT-502(TQB-2450) 및 BGB-A333으로부터 선택된다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 면역관문 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 면역관문 저해제는 CTLA-4, PD-1 및 PD-L1로부터 선택된 경로를 저해하는 제제를 포함한다. 실시형태에서, 면역관문 저해제는 항-PD-L1 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-PD-L1 항체는 아테졸리주맙, 더발루맙, 아벨루맙, 엔바폴리맙, BMS-936559, CK-301, CS-1001, SHR-1316(HTI-1088), CBT-502(TQB-2450) 및 BGB-A333으로부터 선택된다.
일 양상에서, 본 개시내용은 면역관문 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 면역관문 저해제는 CTLA-4, PD-1 및 PD-L1로부터 선택된 경로를 저해하는 제제를 포함한다. 실시형태에서, 면역관문 저해제는 항-PD-L1 항체를 포함한다. 실시형태에서, 항-PD-L1 항체는 아테졸리주맙, 더발루맙, 아벨루맙, 엔바폴리맙, BMS-936559, CK-301, CS-1001, SHR-1316(HTI-1088), CBT-502(TQB-2450) 및 BGB-A333으로부터 선택된다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 안트라사이클린을 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 다우노루비신, 독소루비신, 에피루비신, 이다루비신, 미톡산트론 및 발루비신으로부터 선택된다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 독소루비신이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 안트라사이클린을 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 다우노루비신, 독소루비신, 에피루비신, 이다루비신, 미톡산트론 및 발루비신으로부터 선택된다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 독소루비신이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 안트라사이클린을 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 다우노루비신, 독소루비신, 에피루비신, 이다루비신, 미톡산트론 및 발루비신으로부터 선택된다. 실시형태에서, 안트라사이클린은 독소루비신이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 토포아이소머라제 II 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 II 저해제는 독소루비신, 에피루비신, 발루비신, 다우노루비신, 이다루비신, 피톡산트론, 픽산트론, 에토포사이드, 테니포사이드, 및 암사크린으로부터 선택된다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 II 저해제는 독소루비신이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 토포아이소머라제 II 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 II 저해제는 독소루비신, 에피루비신, 발루비신, 다우노루비신, 이다루비신, 피톡산트론, 픽산트론, 에토포사이드, 테니포사이드, 및 암사크린으로부터 선택된다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 II 저해제는 독소루비신이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 토포아이소머라제 II 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 II 저해제는 독소루비신, 에피루비신, 발루비신, 다우노루비신, 이다루비신, 피톡산트론, 픽산트론, 에토포사이드, 테니포사이드, 및 암사크린으로부터 선택된다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 II 저해제는 독소루비신이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 선천성 면역관문 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 선천성 면역관문 저해제는 CD47-SIRPα 상호작용을 표적화하는 제제를 포함한다. 실시형태에서, 선천성 면역관문 저해제는 마그롤리맙, CC-90002(Celgene), CC-95251(Celgene), TTI-621(Trillium Therapeutics), TTI-622(Trillium Therapeutics), ALX148(ALX Oncology), SRF231(Surface Oncology), IBI188(Innovent), AO-176(Arch Oncology), BI 765063/OSE-172(Boehringer Ingelheim/OSE Immunotherapeutics), TG-1801/NI_1701(TG Therapeutics/Novimmune), TJC4(I-Mab) 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질로부터 선택된다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 선천성 면역관문 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 선천성 면역관문 저해제는 CD47-SIRPα 상호작용을 표적화하는 제제를 포함한다. 실시형태에서, 선천성 면역관문 저해제는 마그롤리맙, CC-90002(Celgene), CC-95251(Celgene), TTI-621(Trillium Therapeutics), TTI-622(Trillium Therapeutics), ALX148(ALX Oncology), SRF231(Surface Oncology), IBI188(Innovent), AO-176(Arch Oncology), BI 765063/OSE-172(Boehringer Ingelheim/OSE Immunotherapeutics), TG-1801/NI_1701(TG Therapeutics/Novimmune), TJC4(I-Mab) 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질로부터 선택된다.
일 양상에서, 본 개시내용은 선천성 면역관문 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 선천성 면역관문 저해제는 CD47-SIRPα 상호작용을 표적화하는 제제를 포함한다. 실시형태에서, 선천성 면역관문 저해제는 마그롤리맙, CC-90002(Celgene), CC-95251(Celgene), TTI-621(Trillium Therapeutics), TTI-622(Trillium Therapeutics), ALX148(ALX Oncology), SRF231(Surface Oncology), IBI188(Innovent), AO-176(Arch Oncology), BI 765063/OSE-172(Boehringer Ingelheim/OSE Immunotherapeutics), TG-1801/NI_1701(TG Therapeutics/Novimmune), TJC4(I-Mab) 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질로부터 선택된다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 Bcl2 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, Bcl2 저해제는 오블리메르센, 나비토클락스(ABT-263), 베네토클락스(ABT-199), 오바토클락스 메실레이트(GX15-070) 및 AT-101로부터 선택된다. 실시형태에서, Bcl2 저해제는 베네토클락스이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 Bcl2 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, Bcl2 저해제는 오블리메르센, 나비토클락스(ABT-263), 베네토클락스(ABT-199), 오바토클락스 메실레이트(GX15-070) 및 AT-101로부터 선택된다. 실시형태에서, Bcl2 저해제는 베네토클락스이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 Bcl2 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, Bcl2 저해제는 오블리메르센, 나비토클락스(ABT-263), 베네토클락스(ABT-199), 오바토클락스 메실레이트(GX15-070) 및 AT-101로부터 선택된다. 실시형태에서, Bcl2 저해제는 베네토클락스이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 단백질 네딜화 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 단백질 네딜화 저해제는 페보네디스탓(MLN4924)이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 단백질 네딜화 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 단백질 네딜화 저해제는 페보네디스탓(MLN4924)이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 단백질 네딜화 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 단백질 네딜화 저해제는 페보네디스탓(MLN4924)이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 미세소관-표적화제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 미세소관-표적화제는 파클리탁셀, 에포틸론, 도세탁셀, 디스코덜모라이드, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 비노렐빈, 빈플루닌, 돌라스타틴, 할리콘드린, 헤미아스텔린 및 크립토피신 52로부터 선택된다. 실시형태에서, 미세소관-표적화제는 파클리탁셀이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 미세소관-표적화제를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 미세소관-표적화제는 파클리탁셀, 에포틸론, 도세탁셀, 디스코덜모라이드, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 비노렐빈, 빈플루닌, 돌라스타틴, 할리콘드린, 헤미아스텔린 및 크립토피신 52로부터 선택된다. 실시형태에서, 미세소관-표적화제는 파클리탁셀이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 미세소관-표적화제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 미세소관-표적화제는 파클리탁셀, 에포틸론, 도세탁셀, 디스코덜모라이드, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 비노렐빈, 빈플루닌, 돌라스타틴, 할리콘드린, 헤미아스텔린 및 크립토피신 52로부터 선택된다. 실시형태에서, 미세소관-표적화제는 파클리탁셀이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 티미딜산 합성효소(TS) 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU), 6-머캅토퓨린(6-MP), 카페시타빈, 사이타라빈, 플록수리딘, 플루다라빈, 겜시타빈, 하이드록시카바마이드, 메토트렉세이트, 페메트렉세드, 포토트렉세이트, 랄티트렉세드, 놀라트렉세드, ZD9331 및 GS7904L로부터 선택된다. 실시형태에서, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU)이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 티미딜산 합성효소(TS) 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU), 6-머캅토퓨린(6-MP), 카페시타빈, 사이타라빈, 플록수리딘, 플루다라빈, 겜시타빈, 하이드록시카바마이드, 메토트렉세이트, 페메트렉세드, 포토트렉세이트, 랄티트렉세드, 놀라트렉세드, ZD9331 및 GS7904L로부터 선택된다. 실시형태에서, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU)이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 티미딜산 합성효소(TS) 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU), 6-머캅토퓨린(6-MP), 카페시타빈, 사이타라빈, 플록수리딘, 플루다라빈, 겜시타빈, 하이드록시카바마이드, 메토트렉세이트, 페메트렉세드, 포토트렉세이트, 랄티트렉세드, 놀라트렉세드, ZD9331 및 GS7904L로부터 선택된다. 실시형태에서, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU)이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 백금 약물을 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 백금 약물은 시스플라틴, 카보플라틴, 옥살리플라틴, 네다플라틴, 헵타플라틴 및 로바플라틴으로부터 선택된다. 실시형태에서, 백금 약물은 시스플라틴이다. 실시형태에서, 백금 약물은 옥살리플라틴이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 백금 약물을 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 백금 약물은 시스플라틴, 카보플라틴, 옥살리플라틴, 네다플라틴, 헵타플라틴 및 로바플라틴으로부터 선택된다. 실시형태에서, 백금 약물은 시스플라틴이다. 실시형태에서, 백금 약물은 옥살리플라틴이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 백금 약물을 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 백금 약물은 시스플라틴, 카보플라틴, 옥살리플라틴, 네다플라틴, 헵타플라틴 및 로바플라틴으로부터 선택된다. 실시형태에서, 백금 약물은 시스플라틴이다. 실시형태에서, 백금 약물은 옥살리플라틴이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 토포아이소머라제 I 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 I 저해제는 캠프토테신, 벨로테칸 토포테칸 및 이리노테칸으로부터 선택된다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 I 저해제는 이리노테칸이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 토포아이소머라제 I 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 I 저해제는 캠프토테신, 벨로테칸 토포테칸 및 이리노테칸으로부터 선택된다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 I 저해제는 이리노테칸이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 토포아이소머라제 I 저해제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 I 저해제는 캠프토테신, 벨로테칸 토포테칸 및 이리노테칸으로부터 선택된다. 실시형태에서, 토포아이소머라제 I 저해제는 이리노테칸이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 항-BCMA 항체를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 항-BCMA 항체는 C12A3.2이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 항-BCMA 항체를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 항-BCMA 항체는 벨란타맙 또는 C12A3.2이다. 실시형태에서, 항-BCMA 항체는 C12A3.2이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 항-BCMA 항체를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 항-BCMA 항체는 벨란타맙이다. 실시형태에서, 항-BCMA 항체는 벨란타맙 또는 C12A3.2이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 항-CD38 항체를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 항-CD38 항체는 다라투무맙 및 이사툭시맙으로부터 선택된다. 실시형태에서, 항-CD38 항체는 다라투무맙이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 항-CD38 항체를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 항-CD38 항체는 다라투무맙 및 이사툭시맙으로부터 선택된다. 실시형태에서, 항-CD38 항체는 다라투무맙이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 항-CD38 항체를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 항-CD38 항체는 다라투무맙 및 이사툭시맙으로부터 선택된다. 실시형태에서, 항-CD38 항체는 다라투무맙이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 면역조절 이미드 약물(IMiD)을 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 아프레밀라스트, 탈리도마이드, 레날리도마이드 및 포말리도마이드로부터 선택된다. 실시형태에서, 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 레날리도마이드 또는 포말리도마이드이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 면역조절 이미드 약물(IMiD)을 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 아프레밀라스트, 탈리도마이드, 레날리도마이드 및 포말리도마이드로부터 선택된다. 실시형태에서, 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 레날리도마이드 또는 포말리도마이드이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 면역조절 이미드 약물(IMiD)을 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 아프레밀라스트, 탈리도마이드, 레날리도마이드 및 포말리도마이드로부터 선택된다. 실시형태에서, 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 레날리도마이드 또는 포말리도마이드이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 항-SLAMF7 항체를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 항-SLAMF7 항체를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다.
일 양상에서, 본 개시내용은 항-SLAMF7 항체를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 항-SLAMF7 항체는 엘로투주맙이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 항-CD123 항체를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 항-CD123 항체는 탈라코투주맙이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 항-CD123 항체를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 항-CD123 항체는 탈라코투주맙이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 항-CD123 항체를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 항-CD123 항체는 탈라코투주맙이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 돌연변이된 p53의 재활성화제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 돌연변이된 p53의 재활성화제는 Prima-1 또는 APR-246이다. 실시형태에서, 돌연변이된 p53의 재활성화제는 APR-246이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 돌연변이된 p53의 재활성화제를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 돌연변이된 p53의 재활성화제는 Prima-1 또는 APR-246이다. 실시형태에서, 돌연변이된 p53의 재활성화제는 APR-246이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 돌연변이된 p53의 재활성화제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 돌연변이된 p53의 재활성화제는 Prima-1 또는 APR-246이다. 실시형태에서, 돌연변이된 p53의 재활성화제는 APR-246이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 항-FOLR1 항체를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 항-FOLR1 항체는 파레투주맙 또는 미르베툭시맙이다. 실시형태에서, 항-FOLR1 항체는 파레투주맙이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계 포함하는, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 항-FOLR1 항체를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 항-FOLR1 항체는 파레투주맙 또는 미르베툭시맙이다. 실시형태에서, 항-FOLR1 항체는 파레투주맙이다.
일 양상에서, 본 개시내용은 항-FOLR1 항체를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는 제1 도메인, CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다. 실시형태에서, 항-FOLR1 항체는 파레투주맙 또는 미르베툭시맙이다. 실시형태에서, 항-FOLR1 항체는 미르베툭시맙이다.
병용 요법 및 접합
실시형태에서, 본 개시내용은 키메라 단백질을 제공하고, 추가 제제를 대상체에게 투여하는 단계를 더 포함하는 방법을 제공한다. 실시형태에서, 본 개시내용은 공동 투여 및/또는 공동 제형에 관한 것이다. 본 명세서에 개시된 임의의 조성물은 공동 제형화 및/또는 공동 투여될 수 있다.
일 양상에서, 본 개시내용은, (i) (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 (ii) 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체의 암 치료 방법을 제공한다.
일 양상에서, 본 개시내용은, (i) (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체의 암 치료 방법을 제공하되; 상기 대상체는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 이용하는 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다.
일 양상에서, 본 개시내용은, (i) 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체의 암 치료 방법을 제공하되; 대상체는 (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는 이종성 키메라 단백질을 포함하는 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있다.
실시형태에서, 본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택되는 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질을 포함하는 제2 약제학적 조성물은 다른 제제와 공동 투여될 때 그리고 이러한 제제가 단일요법으로서 사용될 때 통상적으로 사용되는 용량보다 낮은 용량으로 투여될 때 상승적으로 작용한다. 실시형태에서, 본 명세서에 언급되는 임의의 제제는 본 명세서에 개시된 임의의 키메라 단백질과 병용하여 사용될 수 있다.
실시형태에서, 본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질로부터 선택된 항암제를 포함하는 제2 약제학적 조성물은 본 명세서에 개시된 임의의 항암 요법과 병용하여 사용될 수 있다.
실시형태에서, 본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질을 포함하는 제2 약제학적 조성물은 서로 상승적으로 작용한다. 실시형태에서, 본 명세서에 개시된 바와 같은 키메라 단백질은 공동 투여된 제2 약제학적 조성물의 투여 수를 감소시킨다.
본 개시내용의 양상 및 실시형태에서, 본 명세서에 개시된 바와 같이, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질을 포함하는 제2 약제학적 조성물을 포함하는 암 치료를 필요로 하는 환자는 본 명세서에 개시된 바와 같은 면역요법, 예를 들어, 항암 면역요법에 불량하게 반응성이거나 비반응성이거나, 이렇게 예측된다. 또한, 실시형태에서, 본 명세서에 개시된 바와 같은 항암제를 필요로 하는 환자는 면역관문 면역요법에 불량하게 반응성이거나 또는 비반응성이거나 이렇게 예측될 수 있다. 면역관문 분자는 PD-1, PD-L1, PD-L2, ICOS, ICOSL 및 CTLA-4로부터 선택될 수 있다. 또한, 실시형태에서, 본 명세서에 개시된 바와 같은 항암제를 필요로 하는 환자는 표피 성장 인자 수용체(EGFR), 인간 표피 성장 인자 수용체 2(Her2) 및 CD20 중 하나 이상에 관한 요법에 불량하게 반응성이거나 비반응성이거나, 또는 이러한 것으로 예측될 수 있다.
실시형태에서, 본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)은 공유 부착이 조성물의 활성을 막지 않도록 변형된, 즉, 조성물에 대한 임의의 유형의 분자의 공유 부착에 의한 유도체를 포함한다. 예를 들어, 이하로 제한되는 것 없이, 유도체는 특히, 글리코실화, 지질화, 아세틸화, 페길화, 인산화, 아마이드화, 알려진 보호기/차단기에 의한 유도체화, 단백질 분해 절단, 세포 리간드 또는 다른 단백질에 대한 연결 등에 의해 변형된 조성물을 포함한다. 임의의 수많은 화학적 변형은 구체적인 화학적 절단, 아세틸화, 폼일화, 튜니카마이신의 대사 합성 등을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 알려진 기법에 의해 수행될 수 있다. 추가로, 유도체는 하나 이상의 비고전적 아미노산을 함유할 수 있다.
따라서, 본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 다른 항암 요법)은 효과기 모이어티, 예컨대, 화학 링커, 검출 가능한 모이어티, 예컨대, 형광 염료, 효소, 기질, 생발광 물질, 방사성 물질, 및 화학발광 모이어티 또는 기능성 모이어티, 예를 들어, 스트렙타비딘, 아비딘, 바이오틴, 사이토톡신, 세포독성제 및 방사성 물질을 첨가하기 위해 번역 후에 변형될 수 있다.
실시형태에서, 본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 공유 부착이 조성물의 활성을 막지 않도록 변형된, 즉, 조성물에 대한 임의의 유형의 분자의 공유 부착에 의한 유도체를 포함한다. 예를 들어, 이하로 제한되는 것 없이, 유도체는 특히, 글리코실화, 지질화, 아세틸화, 페길화, 인산화, 아마이드화, 알려진 보호기/차단기에 의한 유도체화, 단백질 분해 절단, 세포 리간드 또는 다른 단백질에 대한 연결 등에 의해 변형된 조성물을 포함한다. 임의의 수많은 화학적 변형은 구체적인 화학적 절단, 아세틸화, 폼일화, 튜니카마이신의 대사 합성 등을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 알려진 기법에 의해 수행될 수 있다. 추가로, 유도체는 하나 이상의 비고전적 아미노산을 함유할 수 있다.
따라서, 본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 효과기 모이어티, 예컨대, 화학 링커, 검출 가능한 모이어티, 예컨대, 형광 염료, 효소, 기질, 생발광 물질, 방사성 물질, 및 화학발광 모이어티 또는 기능성 모이어티, 예를 들어, 스트렙타비딘, 아비딘, 바이오틴, 사이토톡신, 세포독성제 및 방사성 물질을 첨가하기 위해 번역 후에 변형될 수 있다.
약제학적 조성물
본 개시내용의 방법은 본 명세서에 개시되는 바와 같이, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질을 포함하는 적어도 하나의 제2 약제학적 조성물의 유효량을 포함하는 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)은 무기 또는 유기산, 또는 카복실기와 반응하고, 무기 또는 유기 염기와 반응하여 약제학적으로 허용 가능한 염을 형성할 수 있는 충분히 염기성인 작용기를 가질 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 산 부가염은 당업계에 잘 공지된 바와 같이 약제학적으로 허용 가능한 산으로부터 형성된다. 이러한 염은, 예를 들어, 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용된 문헌[Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2-19 (1977) 및 The Handbook of Pharmaceutical Salts; Properties, Selection, and Use. P. H. Stahl and C. G. Wermuth (eds.), Verlag, Zurich (Switzerland) 2002]에 열거된 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함한다.
실시형태에서, 본 명세서에 개시된 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 염의 형태이다.
추가로, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 명세서에 기재된 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함하는 제2 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 비히클을 포함하는 조성물, 예를 들어, 약제학적 조성물의 구성성분으로서 대상체에게 투여될 수 있다. 이러한 약제학적 조성물은 선택적으로 적절한 투여를 위한 형태를 제공하기 위해 적합한 양의 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함할 수 있다. 약제학적 부형제는 석유, 동물, 식물성 또는 합성 유래, 예컨대, 땅콩유, 대두유, 광유, 참깨유 등을 포함하는 오일 및 물과 같은 액체일 수 있다. 약제학적 부형제는, 예를 들어, 식염수, 아카시아검, 젤라틴, 전분 페이스트, 활석, 케라틴, 콜로이드 실리카, 유레아 등일 수 있다. 또한, 보조제, 안정제, 증점제, 윤활제 및 착색제가 사용될 수 있다. 실시형태에서, 대상체에게 투여될 때 약제학적으로 허용 가능한 부형제는 멸균이다. 본 명세서에 개시된 임의의 제제가 정맥내로 투여될 때 물은 유용한 부형제이다. 식염수 용액 및 수성 덱스트로스 및 글리세롤 용액은 또한 액체 부형제로서, 구체적으로는 주사용 용액용으로 사용될 수 있다. 적합한 약제학적 부형제는 또한 전분, 글루코스, 락토스, 수크로스, 젤라틴, 맥아, 벼, 밀가루, 백악, 실리카겔, 스테아르산나트륨, 글리세롤 모노스테아레이트, 활석, 염화나트륨, 건조탈지유, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 물, 에탄올 등을 포함한다. 본 명세서에 개시된 임의의 제제는, 원한다면, 또한 소량의 습윤제 또는 유화제 또는 pH 완충제를 포함할 수 있다.
실시형태에서, 본 명세서에 개시된 조성물, 예를 들어, 약제학적 조성물은 식염수 완충제(TBS, PBS 등을 포함하지만, 이들로 제한되지 않음) 중에서 재현탁된다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제 및/또는 키메라 단백질은 반감기를 연장시키거나 또는 약력학 및 약물동력학 특성을 개선시키기 위해 다른 제제와 접합 및/또는 융합될 수 있다. 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질로부터 선택된 항암제는 PEG, XTEN(예를 들어, rPEG로서), 폴리시알산 (POLYXEN), 알부민(예를 들어, 인간 혈청 알부민 또는 HAS), 엘라스틴-유사 단백질(ELP), PAS, HAP, GLK, CTP, 트랜스페린 등 중 하나 이상과 융합 또는 접합될 수 있다. 실시형태에서, 개개 키메라 단백질의 각각은 전문이 본 명세서에 참조에 의해 원용된 문헌[BioDrugs (2015) 29:215-239]에 기재된 제제 중 하나 이상에 융합된다.
본 개시내용은 약제학적 조성물의 다양한 제형에 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함한다. 본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함하는 제2 약제학적 조성물은 용액, 현탁액, 에멀션, 점적, 정제, 알약, 펠릿, 캡슐, 액체를 함유하는 캡슐, 분말, 지속 방출 제형, 좌약, 에멀션, 에어로졸, 스프레이, 현탁액의 형태, 또는 사용에 적합한 임의의 다른 형태를 취할 수 있다. 단백질 서열을 암호화하는 DNA 또는 RNA 작제물이 또한 사용될 수 있다. 실시형태에서, 조성물은 캡슐 형태이다(예를 들어, 미국 특허 제5,698,155호 참조). 적합한 약제학적 부형제의 다른 예는 본 명세서에 참조에 의해 원용된 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences 1447-1676(Alfonso R. Gennaro eds., 19th ed. 1995)]에 기재되어 있다.
필요한 경우, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함하는 약제학적 조성물은 또한 가용화제를 포함할 수 있다. 또한, 제제는 당업계에 공지된 바와 같은 적합한 비히클 또는 전달 장치에 의해 전달될 수 있다. 본 명세서에 약술된 병용 요법은 단일 전달 비히클 또는 전달 장치에서 공동 전달될 수 있다. 투여를 위한 조성물은 선택적으로, 예를 들어, 주사 부위에서 통증을 줄이기 위해 리그노카인과 같은 국소 마취제를 포함할 수 있다.
저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 본 개시내용의 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함하는 약제학적 조성물은 단위 투약 형태로 편리하게 제시될 수 있고, 약학 분야에 잘 공지된 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 이러한 방법은 일반적으로 치료제를 하나 이상의 부속 성분을 구성하는 담체와 합치는 단계를 포함한다. 전형적으로, 약제학적 조성물은 액체 담체, 미세하게 분할된 고체 담체, 또는 둘 다와 균일하게 그리고 친밀하게 합치고, 이어서, 필요하다면, 생성물을 목적하는 제형(예를 들어, 습식 또는 건식 과립, 분말 배합물 등, 다음에 당업계에 공지된 통상적인 방법을 이용하여 정제화)의 투약 형태로 성형함으로써 제조된다.
실시형태에서, 본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함하는 제2 약제학적 조성물은 본 명세서에 기재된 투여 방식에 적합한 약제학적 조성물로서 일상적인 절차에 따라 제형화된다.
일 양상에서, 본 개시내용은, (i) (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 (ii) 아자시티딘 및/또는 베네토클락스를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체의 암 치료 방법을 제공한다.
일 양상에서, 본 개시내용은, (i) (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 아자시티딘 및/또는 베네토클락스를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 치료를 받고 있다.
일 양상에서, 본 개시내용은, (i) 아자시티딘 및/또는 베네토클락스를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체의 암 치료 방법을 제공하되; 대상체는 (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 이종성 키메라 단백질을 포함하는 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 치료를 받고 있다.
일 양상에서, 본 개시내용은, (i) (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 (ii) 아자시티딘을 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계; 및 (iii) 베네토클락스를 포함하는 제3 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체의 암 치료 방법을 제공한다. 실시형태에서, 제1 약제학적 조성물과 제2 약제학적 조성물은 동시에 투여된다. 실시형태에서, 제1 약제학적 조성물과 제3 약제학적 조성물은 동시에 투여된다. 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물과 제3 약제학적 조성물은 동시에 투여된다. 실시형태에서, 제1 약제학적 조성물, 제2 약제학적 조성물 및 제3 약제학적 조성물은 동시에 투여된다. 실시형태에서, 제1 약제학적 조성물은, 제2 약제학적 조성물 및/또는 제3 약제학적 조성물이 투여된 후에 투여된다. 실시형태에서, 제2 약제학적 조성물은, 제1 약제학적 조성물 및/또는 제3 약제학적 조성물이 투여된 후에 투여된다. 실시형태에서, 제3 약제학적 조성물은, 제1 약제학적 조성물 및/또는 제2 약제학적 조성물이 투여된 후에 투여된다.
일 양상에서, 본 개시내용은, (i) (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 아자시티딘를 포함하는 제2 약제학적 조성물 및/또는 베네토클락스를 포함하는 제3 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 치료를 받고 있다. 실시형태에서, 대상체는 제3 약제학적 조성물 후 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 치료를 받고 있다. 실시형태에서, 대상체는 제2 약제학적 조성물 후 제3 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 치료를 받고 있다.
일 양상에서, 본 개시내용은 (i) 아자시티딘을 포함하는 제2 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체의 암 치료 방법을 제공하되, 대상체는 제1 약제학적 조성물 및/또는 베네토클락스를 포함하는 제3 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 또는 치료를 받고 있고, 제1 약제학적 조성물은 (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함한다. 실시형태에서, 대상체는 제3 약제학적 조성물 후 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 치료를 받고 있다. 실시형태에서, 대상체는 제1 약제학적 조성물 후 제3 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 치료를 받고 있다.
일 양상에서, 본 개시내용은, (i) 베네토클락스를 포함하는 제3 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 대상체의 암 치료 방법을 제공하며, 대상체는 아자시티딘을 포함하는 제1 약제학적 조성물 및/또는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있되, 제1 약제학적 조성물은 (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인, (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및 (c) 제1 도메인을 제2 도메인과 연결하는 링커를 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함하는, 이종성 키메라 단백질을 포함한다. 실시형태에서, 대상체는 제2 약제학적 조성물 후 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 치료를 받고 있다. 실시형태에서, 대상체는 제1 약제학적 조성물 후 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 치료를 받고 있다.
투여, 투약 및 치료 요법
투여 경로는, 특히 귀, 코, 눈 또는 피부에, 예를 들어, 진피내, 종양내, 근육내, 복막내, 정맥내, 피하, 비강내, 경막외, 경구, 설하, 비강내, 대뇌내, 질내, 경피, 직장으로, 흡입에 의해 또는 국소를 포함한다.
예로서, 투여는 혈류에 (장 또는 비경구 투여를 통한) 본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)의 방출을 초래하고, 또는 대안적으로, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)은 활성 질환의 부위에 직접 투여된다.
본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함하는 제2 약제학적 조성물은 경구 투여될 수 있다. 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 이러한 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)은 또한 임의의 다른 편리한 경로에 의해, 예를 들어, 정맥내 주입 또는 볼루스 주사에 의해, 상피 또는 점막 내벽(예를 들어, 경점막, 직장 및 장 점막 등)을 통한 흡수에 의해 투여될 수 있고, 다른 생물학적 활성제와 함께 투여될 수 있다. 투여는 전신 또는 국소일 수 있다. 다양한 전달 시스템, 예를 들어, 리포솜에서의 캡슐화, 마이크로캡슐, 캡슐 등이 알려져 있으며, 투여를 위해 사용될 수 있다.
구체적 실시형태에서, 치료를 필요로 하는 영역에 투여하는 것이 바람직할 수 있다. 실시형태에서, 예를 들어, 암 치료에서, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)은 종양 미세환경(예를 들어, 세포, 분자, 세포외 기질 및/또는 종양 세포를 둘러싸고/싸거나 공급하는 혈관, 예를 들어, 종양 혈관; 종양-침윤성 림프구; 섬유아세포 망상세포; 혈과내피 전구세포(EPC); 암 관련 섬유아세포; 주피세포; 다른 기질 세포; 세포외 기질(ECM)의 구성성분; 수지상 세포; 항원 제시 세포; T-세포; 조절 T 세포; 대식세포; 호중구; 및 종양에 근위에 위치된 다른 면역 세포를 포함) 또는 림프절에 투여되고/되거나 종양 미세환경 또는 림프절에 표적화된다. 실시형태에서, 예를 들어, 암 치료에서, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)이 종양내로 투여된다.
실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 통상적인 면역요법(예를 들어, OPDIVO, KEYTRUDA, YERVOY 및 TECENTRIQ 중 하나 이상에 의한 치료)에서 보이는 부작용을 더 적게 제공하는 이중 효과를 가능하게 한다. 예를 들어, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 피부, 위장관, 신장, 말초 및 신경계, 간, 림프절, 눈, 췌장 및 내분비계; 예컨대, 뇌하수체염, 결장염, 간염, 폐렴, 발진 및 류마티스 질환을 포함하는 다양한 조직 및 기관에 영향을 미치는 통상적으로 관찰되는 면역-관련 이상반응을 감소시키거나 또는 방지한다. 추가로, 예를 들어, 종양 내로의 본 국소 투여는 통상적인 면역요법(예를 들어, OPDIVO, KEYTRUDA, YERVOY 및 TECENTRIQ 중 하나 이상에 의한 치료)과 함께 사용된 바와 같은 표준 전신 투여, 예를 들어, IV 주입에 의해 보이는 이상반응을 제거한다.
비경구 투여(예를 들어, 정맥내, 근육내, 복막내, 피하 및 관절내 주사 및 주입)에 적합한 투약형태는, 예를 들어, 용액, 현탁액, 분산액, 에멀션 등을 포함한다. 이들은 또한 사용 직전에 멸균 주사 매질 중에 용해 또는 현탁될 수 있는 멸균 고체 조성물(예를 들어, 동결건조 조성물)의 형태로 제작될 수 있다. 이들은, 예를 들어, 당업계에 공지된 현탁제 또는 분산제를 함유할 수 있다.
본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함하는 제2 약제학적 조성물의 투약량뿐만 아니라 투약 스케줄은 치료 중인 질환, 대상체의 일반적 건강상태 및 투여하는 의사의 재량을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 다양한 파라미터에 따를 수 있다. 본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질을 포함하는 제2 약제학적 조성물은 추가 제제의 투여 전에(예를 들어, 5분, 15분, 30분, 45분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 12시간, 24시간, 48시간, 72시간, 96시간, 1주, 2주, 3 주, 4 주, 5 주, 6 주, 8 주 또는 12주 전에), 추가 제제의 투여와 병행하여 또는 후속적으로(예를 들어, 5분, 15분, 30분, 45분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 12시간, 24시간, 48시간, 72시간, 96시간, 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 8주 또는 12주 후에) 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 수 있다.
실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질 및 추가 제제(들)를 포함하는 제2 약제학적 조성물은 1분 간격, 10분 간격, 30분 간격, 1시간 미만의 간격, 1시간 간격, 1시간 내지 2시간 간격, 2 시간 내지 3시간 간격, 3 시간 내지 4시간 간격, 4 시간 내지 5시간 간격, 5 시간 내지 6시간 간격, 6 시간 내지 7시간 간격, 7 시간 내지 8시간 간격, 8 시간 내지 9시간 간격, 9 시간 내지 10시간 간격, 10시간 내지 11시간 간격, 11 시간 내지 12시간 간격, 1일 간격, 2일 간격, 3일 간격, 4일 간격, 5일 간격, 6일 간격, 1주 간격, 2주 간격, 3주 간격 또는 4주 간격으로 투여된다.
실시형태에서, 본 개시내용은 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제로부터 선택된 항암제; 및/또는 선천성 면역 반응을 유도하는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질 및 면역관문 분자로 향하는 다른 항체; 및/또는 적응 면역 반응을 유도하는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질을 포함하는 제2 약제학적 조성물의 공동 투여에 관한 것이다. 이러한 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 선천성 면역 반응을 유도하는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질을 포함하는 제2 약제학적 조성물은 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 적응 면역 반응을 유도하는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질을 포함하는 제2 약제학적 조성물의 투여 전에, 병행하여 또는 후속하여 투여될 수 있다. 예를 들어, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은1분 간격, 10분 간격, 30분 간격, 1시간 미만의 간격, 1시간 간격, 1시간 내지 2시간 간격, 2 시간 내지 3시간 간격, 3 시간 내지 4시간 간격, 4 시간 내지 5시간 간격, 5 시간 내지 6시간 간격, 6 시간 내지 7시간 간격, 7 시간 내지 8시간 간격, 8 시간 내지 9시간 간격, 9 시간 내지 10시간 간격, 10시간 내지 11시간 간격, 11 시간 내지 12시간 간격, 1일 간격, 2일 간격, 3일 간격, 4일 간격, 5일 간격, 6일 간격, 1주 간격, 2주 간격, 3주 간격 또는 4주 간격으로 투여될 수 있다. 예시적 실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택되는 항암제; 및/또는 선천성 면역 반응을 유도하는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질을 포함하는 제2 약제학적 조성물 및 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 적응 면역을 유도하는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질을 포함하는 제2 약제학적 조성물은 1주 간격으로 투여되거나, 또는 격주로 투여된다(즉, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택되는 항암제; 및/또는 선천성 면역 반응을 유도하는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질을 포함하는 제2 약제학적 조성물의 투여는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택되는 항암제; 및/또는 적응 면역 반응을 유도하는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질 등을 포함하는 제2 약제학적 조성물의 투여 1주 후에 이어진다).
본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택되는 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함하는 제2 약제학적 조성물의 투약량은 병태의 중증도, 병태가 치료 또는 예방되는지의 여부, 및 치료될 대상체의 연령, 체중 및 건강상태를 포함하는 여러 인자에 따라 다를 수 있다. 추가적으로, 특정 대상체에 관한 약물유전체학(약물동태학, 약력학 또는 치료제의 효능 프로파일에 대한 게놈형의 효과) 정보는 사용된 투약량에 영향을 미칠 수 있다. 더 나아가, 정확한 개개 투약량은 투여 중인 제제, 투여 시간, 투여 경로, 제형의 특성, 배설 속도, 치료 중인 특정 질환, 장애의 중증도, 및 장애의 해부학적 위치의 구체적 조합을 포함하는 다양한 인자에 따라 다소 조절될 수 있다. 투약량의 일부 변화가 예상될 수 있다.
비경구 주사에 의한 본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함하는 제2 약제학적 조성물의 투여의 경우, 투약량은 1일당 약 0.1㎎ 내지 약 250㎎, 1일당 약 1㎎ 내지 약 20㎎, 또는 1일당 약 3㎎ 내지 약 5㎎일 수 있다. 일반적으로, 경구 또는 비경구로 투여될 때, 본 명세서에 개시된 임의의 제제의 투약량은 1일당 약 0.1㎎ 내지 약 1500㎎, 또는 1일당 약 0.5㎎ 내지 약 10㎎, 또는 1일당 약 0.5㎎ 내지 약 5㎎, 또는 1일당 약 200 내지 약 1,200㎎(예를 들어, 1일당 약 200㎎, 약 300㎎, 약 400㎎, 약 500㎎, 약 600㎎, 약 700㎎, 약 800㎎, 약 900㎎, 약 1,000㎎, 약 1,100㎎, 약 1,200㎎)이다.
실시형태에서, 본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함하는 제2 약제학적 조성물의 투여는 치료당 약 0.1㎎ 내지 약 1500㎎, 치료당 또는 약 0.5㎎ 내지 약 10㎎, 또는 치료당 약 0.5㎎ 내지 약 5㎎, 또는 치료당 약 200 내지 약 1,200㎎(예를 들어, 치료당 약 200㎎, 약 300㎎, 약 400㎎, 약 500㎎, 약 600㎎, 약 700㎎, 약 800㎎, 약 900㎎, 약 1,000㎎, 약 1,100㎎, 약 1,200㎎)의 투약량으로 비경구 주사에 의한다.
실시형태에서, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함하는 제2 약제학적 조성물의 적합한 투약량은 약 0.01㎎/㎏ 내지 약 100㎎/대상체의 체중(㎏) 또는 약 0.01㎎/㎏ 내지 약 10㎎/대상체의 체중(㎏), 예를 들어, 약 0.01㎎/㎏, 약 0.02㎎/㎏, 약 0.03㎎/㎏, 약 0.04㎎/㎏, 약 0.05㎎/㎏, 약 0.06㎎/㎏, 약 0.07㎎/㎏, 약 0.08㎎/㎏, 약 0.09㎎/㎏, 약 0.1㎎/㎏, 약 0.2㎎/㎏, 약 0.3㎎/㎏, 약 0.4㎎/㎏, 약 0.5㎎/㎏, 약 0.6㎎/㎏, 약 0.7㎎/㎏, 약 0.8㎎/㎏, 약 0.9㎎/㎏, 약 1㎎/㎏, 약 1.1㎎/㎏, 약 1.2㎎/㎏, 약 1.3㎎/㎏, 약 1.4㎎/㎏, 약 1.5㎎/㎏, 약 1.6㎎/㎏, 약 1.7㎎/㎏, 약 1.8㎎/㎏, 1.9㎎/㎏, 약 2㎎/㎏, 약 3㎎/㎏, 약 4㎎/㎏, 약 5㎎/㎏, 약 6㎎/㎏, 약 7㎎/㎏, 약 8㎎/㎏, 약 9㎎/㎏, 약 10㎎/체중(㎏)의 범위(이 사이의 모든 값 및 범위를 포함)에 있다.
다른 실시형태에서, 전달은 소수포, 특히 리포솜일 수 있다(문헌[Langer, 1990, Science 249:1527-1533; Treat et al., in Liposomes in therapy of Infectious Disease and Cancer, Lopez-Berestein and Fidler (eds.), Liss, New York, pp. 353-365 (1989)] 참조).
본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함하는 제2 약제학적 조성물은 제어 방출 또는 지속 방출 수단에 의해 또는 당업자에게 잘 알려진 전달 장치에 의해 투여될 수 있다. 예는 미국 특허 제3,845,770호; 제3,916,899호; 제3,536,809호; 제3,598,123호; 제4,008,719호; 제5,674,533호; 제5,059,595호; 제5,591,767호; 제5,120,548호; 제5,073,543호; 제5,639,476호; 제5,354,556호; 및 제5,733,556호에 기재된 것을 포함하지만, 이들로 제한되지 않으며, 이들 각각은 이의 전문이 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 이러한 투약 형태는 다양한 비율로 목적하는 방출 프로파일을 제공하기 위해, 예를 들어, 하이드로프로필메틸 셀룰로스, 다른 중합체 기질, 겔, 침투성 막, 삼투 시스템, 다중층 코팅, 마이크로입자, 리포솜, 마이크로스피어, 또는 이들의 조합물을 이용하여 1종 이상의 활성 성분의 제어 또는 지속 방출을 제공하는 데 유용할 수 있다. 활성 성분의 제어 또는 지속 방출은 pH의 변화, 온도 변화, 적절한 파장의 광에 의한 자극, 효소의 농도 또는 이용 가능성, 물의 농도 또는 이용 가능성 또는 다른 생리적 조건 또는 화합물을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 다양한 조건에 의해 자극될 수 있다.
다른 실시형태에서, 중합체 물질이 사용될 수 있다(문헌[Medical Applications of Controlled Release, Langer and Wise (eds.), CRC Pres., Boca Raton, Florida (1974); Controlled Drug Bioavailability, Drug Product Design and Performance, Smolen and Ball (eds.), Wiley, New York (1984); Ranger and Peppas, 1983, J. Macromol. Sci. Rev. Macromol. Chem. 23:61; 또한 Levy et al., 1985, Science 228:190; During et al., 1989, Ann. Neurol. 25:351; Howard et al., 1989, J. Neurosurg. 71:105] 참조).
다른 실시형태에서, 제어 방출 시스템은 치료될 표적 영역의 근위에 위치될 수 있고, 치료될 표적 영역의 근위에 위치될 수 있고, 따라서, 전신 용량의 분획만을 필요로 한다(예를 들어, 문헌[Goodson, in Medical Applications of Controlled Release, supra, vol. 2, pp. 115-138(1984)] 참조). 문헌[Langer, 1990, Science 249:1527-1533]에 의한 검토에 논의된 다른 제어 방출 시스템이 사용될 수 있다.
본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함하는 제2 약제학적 조성물의 투여는 독립적으로 1일 1회 내지 4회 또는 1개월당 1회 내지 4회 또는 1년당 1회 내지 6회 또는 2, 3, 4, 또는 5년마다 1회일 수 있다. 투여는 1일 또는 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 1년, 2년, 3년의 지속기간 동안일 수 있고, 심지어 대상체의 수명 동안 일 수 있다.
본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함하는 제2 약제학적 조성물을 이용하는 투약 요법은 대상체의 유형, 종, 연령, 체중, 성별 및 의학적 병태; 치료될 병태의 중증도; 투여 경로; 대상체의 신장 또는 간 기능; 개체의 약물유전체학 구성; 및 사용한 본 개시내용의 구체적 화합물을 포함하는 다양한 인자에 따라 선택될 수 있다. 본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함하는 제2 약제학적 조성물은 단일의 1일 용량으로 투여될 수 있거나, 또는 총 1일 투약량은 1일에 2, 3 또는 4회의 분할 용량으로 투여될 수 있다. 더 나아가, 본 명세서에 개시된, 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)을 포함하는 제2 약제학적 조성물은 투약 요법 내내 간헐적이기보다는 지속적으로 투여될 수 있다.
융합 단백질, 핵산 및 세포
본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 재조합 융합 단백질, 예를 들어, 본 명세서에 개시된 세포외 도메인을 갖는 단일 폴리펩타이드일 수 있다. 예를 들어, 실시형태에서, 키메라 단백질은 원핵 세포, 진핵 세포 또는 무세포 발현 시스템에 단일 단위로서 번역된다.
실시형태에서, 키메라 단백질은, 예를 들어, 시험관내에서 (예를 들어, 본 명세서에 개시된 하나 이상의 합성 링커에 의해) 단일 단위를 수득하도록 (공유 또는 비공유 결합을 통해) 조합되는 다중 폴리펩타이드, 예를 들어, 본 명세서에 개시된 다중 세포외 도메인을 포함하는 재조합 단백질이다.
실시형태에서, 키메라 단백질은 하나의 폴리펩타이드로서 화학적으로 합성되거나 또는 각각의 도메인은 화학적으로 별개로 합성될 수 있고, 이어서, 조합될 수 있다. 실시형태에서, 키메라 단백질의 일부는 번역되고, 일부는 화학적으로 합성된다.
작제물은 이들 3개의 단편(I형 막관통 단백질의 세포외 도메인, 다음에 링커 서열, 다음에 II형 막관통 단백질의 세포외 도메인)을 암호화하는 핵산을 벡터(플라스미드, 바이러스 또는 기타)에 클로닝함으로써 생성될 수 있되, 완전한 서열의 아미노 말단은 I형 막관통 단백질의 세포외 도메인을 함유하는 분자의 '좌'측에 대응하고, 완전한 서열의 카복시 말단은 II형 막관통 단백질의 세포외 도메인을 함유하는 분자의 '우'측에 대응한다. 실시형태에서, 본 명세서의 다른 곳에 기재된 바와 가타은 다른 입체배치 중 하나를 갖는 키메라 단백질 중에서, 생성된 번역된 키메라 단백질이 목적하는 입체배치, 예를 들어, 이중 안쪽으로 향하는 키메라 단백질을 갖도록 작제물은 3개의 핵산을 포함할 것이다. 따라서, 실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 이렇게 해서 조작된다.
본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 발현 벡터에 클로닝되는 핵산에 의해 암호화될 수 있다. 실시형태에서, 발현 벡터는 DNA 또는 RNA를 포함한다. 실시형태에서, 발현 벡터는 포유류 발현 벡터이다.
원핵 벡터와 진핵 벡터 둘 다 키메라 단백질의 발현을 위해 사용될 수 있다. 원핵 벡터는 이콜라이(E. coli) 서열에 기반한 작제물을 포함한다(예를 들어, 문헌[Makrides, Microbiol Rev 1996, 60:512-538] 참조). 이콜라이에서 발현을 위해 사용될 수 있는 조절 영역의 비제한적 예는 lac, trp, lpp, phoA, recA, tac, T3, T7 및 λPL을 포함한다. 원핵 발현 벡터의 비제한적 예는 λgt 벡터 시리즈, 예컨대, λgt11(Huynh 등의 "DNA Cloning Techniques, Vol. I: A Practical Approach," 1984, (D. Glover, ed.), pp. 49-78, IRL Press, Oxford), 및 pET 벡터 시리즈(Studier et al., Methods Enzymol 1990, 185:60-89)를 포함할 수 있다. 그러나, 원핵 숙주-벡터 시스템은 포유류 세포의 번역 후 가공 중 대부분을 수행할 수 없다. 따라서, 진핵 숙주-벡터 시스템이 특히 유용할 수 있다. 포유류 숙주 세포에서 키메라 단백질의 발현을 위해 다양한 조절 영역이 사용될 수 있다. 예를 들어, SV40 초기 및 후기 프로모터, 거대세포바이러스(CMV) 급초기 프로모터 및 라우스 육종 바이러스 긴 말단 반복부(RSV-LTR) 프로모터가 사용될 수 있다. 포유류 세포에서 유용할 수 있는 유도성 프로모터는 메탈로티오네인 II 유전자와 관련된 프로모터, 마우스 유선 종양 바이러스 글루코코르티코이드 반응성 긴 말단 반복부(MMTV-LTR), β-인터페론 유전자, 및 hsp70 유전자를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다(문헌[Williams et al., Cancer Res 1989, 49:2735-42; 및 Taylor et al., Mol Cell Biol 1990, 10:165-75] 참조). 열 충격 프로모터 또는 스트레스 프로모터는 또한 재조합 숙주 세포에서 키메라 단백질의 발현을 유도하는 데 유리할 수 있다.
실시형태에서, 발현 벡터는 포유류 세포에서 기능성인 발현 제어 영역, 또는 이의 보체에 작동 가능하게 연결된 키메라 단백질을 암호화하는 핵산 또는 이의 보체를 포함한다. 발현 제어 영역은 차단제 및/또는 자극제가 발현 벡터에 의해 형질전환된 인간 세포에서 생성되도록, 작동 가능하게 연결된 차단제 및/또는 자극제-암호화 핵산의 발현을 유도할 수 있다.
실시형태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질은 분비 가능하고 완전히 기능성인 단일 폴리펩타이드 쇄로서 포유류 숙주 세포에서 생산 가능하다.
발현 제어 영역은 작동 가능하게 연결된 핵산의 발현에 영향을 미치는 조절 폴리뉴클레오타이드(때때로 본 명세서에서 요소로 지칭됨), 예컨대, 프로모터 및 인핸서이다. 본 개시내용의 발현 벡터의 발현 제어 영역은 인간 세포에서 작동 가능하게 연결된 암호화 핵산을 발현시킬 수 있다. 실시형태에서, 세포는 종양 세포이다. 다른 실시형태에서, 세포는 비종양 세포이다. 실시형태에서, 발현 제어 영역은 작동 가능하게 연결된 핵산에 조절 가능한 발현을 부여한다. 신호(때때로 자극으로 지칭됨)는 이러한 발현 제어 영역에 작동 가능하게 연결된 핵산의 발현을 증가 또는 감소시킬 수 있다. 신호에 반응하여 발현을 증가시키는 이러한 발현 제어 영역은 종종 유도성으로 지칭된다. 신호에 반응하여 발현을 감소시키는 이러한 발현 제어 영역은 종종 억제성으로 지칭된다. 전형적으로, 이러한 요소에 의해 부여되는 증가 또는 감소의 양은 존재하는 신호의 양에 비례하며; 신호의 양이 클수록, 발현의 증가 또는 감소는 커진다.
실시형태에서, 본 개시내용은 신호에 반응하여 일시적으로 고수준의 발현을 달성할 수 있는 유도성 프로모터의 용도를 상정한다. 예를 들어, 종양 세포의 근위에 있을 때, 이러한 발현 제어 서열을 포함하는 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)에 대한 발현 벡터로 형질전환된 세포는 형질전환 세포를 적절한 단서에 노출시킴으로써 고수준의 제제를 일시적으로 생성하도록 유도된다. 예시적인 유도성 발현 제어 영역은 소분자 화학물질 화합물과 같이 신호로 자극되는 유도성 프로모터를 포함하는 것을 포함한다. 다른 예에서, 키메라 단백질은, 세포에 의한 항원 인식에 민감한 프로모터의 제어 하에서 세포 또는 시험관내 확장된 종양 침윤성 림프구를 함유하는 키메라 항원 수용체에 의해 발현되며, 종양 항원 인식에 반응하여 키메라 단백질의 국소 분비를 야기한다. 특정 예는, 예를 들어, 미국 특허 제5,989,910호, 제5,935,934호, 제6,015,709호 및 제6,004,941호에서 찾을 수 있으며, 이들 각각은 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용된다.
발현 제어 영역 및 좌위 제어 영역은 전장 프로모터 서열, 예컨대, 천연 프로모터 및 인핸서 요소뿐만 아니라 전장 또는 비변이체 기능의 모두 또는 일부를 보유하는 하위서열 또는 폴리뉴클레오타이드 변이체를 포함한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같은 용어 "기능성" 및 이의 문법적 변형은, 핵산 서열, 하위서열 또는 단편과 관련하여 사용될 때, 서열이 천연 핵산 서열(예를 들어, 비변이체 또는 비변형 서열)의 하나 이상의 기능을 갖는다는 것을 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "작동 가능한 연결"은 이들의 의도된 방식으로 작동하는 것을 허용하기 위한 기재된 구성성분의 물리적 병치를 지칭한다. 핵산과 작동 가능하게 연결된 발현 제어 요소의 예에서, 관계는 제어 요소가 핵산의 발현을 조절하는 것이다. 전형적으로, 전사를 조절하는 발현 제어 영역은 전사된 핵산의 5' 단부 근처에(즉, "상류에") 병치된다. 발현 제어 영역은 또한 전사된 서열의 3' 단부에(즉, "하류에") 또는 전사체 내에(예를 들어, 인트론에) 위치될 수 있다. 발현 제어 요소는 전사된 서열로부터 먼 거리에(예를 들어, 핵산으로부터 100 내지 500, 500 내지 1000, 2000 내지 5000개 이상의 뉴클레오타이드) 위치될 수 있다. 발현 제어 요소의 구체적인 예는 전사된 서열의 5'에 보통 위치된 프로모터이다. 발현 제어 요소의 다른 예는 전사된 서열의 5' 또는 3'에, 또는 전사된 서열 내에 위치될 수 있는 인핸서이다.
인간 세포에서 기능성인 발현 시스템은 당업계에 잘 알려져 있으며; 이들은 바이러스 시스템을 포함한다. 일반적으로, 인간 세포에서 기능성인 프로모터는 포유류 RNA 중합효소에 결합하고 mRNA에 암호 서열의 하류(3') 전사를 개시할 수 있는 임의의 DNA 서열이다. 프로모터는 보통 암호화 서열의 5' 단부에 대해 근위에 위치된 전사-개시 영역, 및 전형적으로, 전사 개시 부위 상류의 25 내지 30개 염기 쌍에 위치된 TATA 박스를 가질 것이다. TATA 박스는 RNA 중합효소 II가 정확한 부위에서 RNA 합성을 개시하도록 지시하는 것으로 여겨진다. 프로모터는 또한, 전형적으로 TATA 박스 상류의 100 내지 200개 염기쌍 이내에 위치된 상류의 프로모터 요소(인핸서 요소)를 함유할 것이다. 상류의 프로모터 요소는 전사가 개시되는 속도를 결정하고, 배향 중 하나에서 작용할 수 있다. 물론 프로모터로서의 용도는 포유류 바이러스 유전자로부터의 프로모터인데, 바이러스 유전자가 종종 고도로 발현되고 넓은 숙주 범위를 갖기 때문이다. 예는 SV40 초기 프로모터, 마우스 유방 종양 바이러스 LTR 프로모터, 아데노바이러스 주요 후기 프로모터, 단순 포진 바이러스 프로모터 및 CMV 프로모터를 포함한다.
전형적으로, 포유류 세포에 의해 인식되는 전사 종결 및 폴리아데닐화 서열은 번역 중단 코돈에 대해 3'에 위치된 조절 영역이고, 따라서, 프로모터 요소와 함께 암호화 서열에 측접한다. 성숙 mRNA의 3' 말단은 부위-특이적 번역 후 절단 및 폴리아데닐화에 의해 형성된다. 전사 종결자 및 폴리아데닐화 신호의 예는 SV40으로부터 유래된 것을 포함한다. 발현 작제물에 인트론이 또한 포함될 수 있다.
생세포에 핵산을 도입하는 데 이용 가능한 다양한 기법이 있다. 시험관내 포유류 세포에 핵산을 전달하는 데 적합한 기법은 리포좀, 전기천공법, 미량주사법, 세포 융합, 중합체-기반 시스템, DEAE-덱스트란, 바이러스 형질도입, 인산칼슘 침전 방법 등의 사용을 포함한다. 생체내 유전자 전달을 위해, 리포좀을 포함하는 다수의 기법 및 시약이 또한 이용될 수 있고; 천연 중합체-기반 전달 비히클, 예컨대, 키토산 및 젤라틴; 바이러스 벡터가 또한 생체내 형질도입에 적합하다. 일부 상황에서, 종양 세포 표면막 단백질에 특이적인 항체 또는 리간드와 같은 표적화제를 제공하는 것이 바람직하다. 리포좀이 사용되는 경우, 내포작용과 관련된 세포 표면 막 단백질에 결합하는 단백질은 표적화를 위해 그리고/또는, 예를 들어, 특정 세포 유형에 향성인 캡시드 단백질 또는 이의 단편, 순환에서 내재화를 겪는 단백질에 대한 항체, 세포내 국재화를 표적화하고 세포내 반감기를 향상시키는 단백질의 흡수를 용이하게 하기 위해 사용될 수 있다. 수용체-매개 내포작용의 기법은, 예를 들어, 문헌[Wu et al., J. Biol. Chem. 262, 4429-4432(1987); 및 Wagner et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87, 3410-3414 (1990)]에 의해 기재된다.
적절한 경우, 유전자 전달제, 예컨대, 통합 서열이 또한 사용될 수 있다. 수많은 통합 서열이 당업계에 알려져 있다(예를 들어, 문헌[Nunes-Duby et al., Nucleic Acids Res. 26:391-406, 1998; Sadwoski, J. Bacteriol., 165:341-357, 1986; Bestor, Cell, 122(3):322-325, 2005; Plasterk et al., TIG 15:326-332, 1999; Kootstra et al., Ann. Rev. Pharm. Toxicol., 43:413-439, 2003] 참조). 이들은 재조합효소 및 트랜스포사제를 포함한다. 예에는 Cre(Sternberg and Hamilton, J. Mol. Biol., 150:467-486, 1981), 람다(Nash, Nature, 247, 543-545, 1974), FIp(Broach, et al., Cell, 29:227-234, 1982), R (Matsuzaki, et al., J. Bacteriology, 172:610-618, 1990), cpC31(예를 들어, 문헌[Groth et al., J. Mol. Biol. 335:667-678, 2004] 참조), 잠자는 미녀, 뱃사람 가족의 트랜스포사제(transposases of the mariner family)(Plasterk et al., supra), 및 AAV, 레트로바이러스 및 바이러스 통합을 제공하는 구성성분, 예컨대, 레트로바이러스 또는 렌티바이러스의 LTR 서열 및 AAV의 ITR 서열을 갖는 항바이러스를 통합하기 위한 구성성분(Kootstra et al., Ann. Rev. Pharm. Toxicol., 43:413-439, 2003)을 포함한다. 또한, CRISPR/CAS9, 아연 핑거, TALEN 및 메가뉴클레아제 유전자-편집 기법을 포함하는 직접 및 표적화된 유전자 통합 전략은 키메라 융합 단백질을 암호화하는 핵산 서열을 삽입하는 데 사용될 수 있다.
실시형태에서, 키메라 단백질(및/또는 추가 제제)의 발현을 위한 발현 벡터는 바이러스 벡터이다. 유전자 요법에 유용한 다수의 바이러스 벡터는 공지되어 있다(예를 들어, Lundstrom, Trends Biotechnol., 21: 1 17, 122, 2003. 예시적인 바이러스 벡터는 항바이러스(LV), 레트로바이러스(RV), 아데노바이러스(AV), 아데노-연관 바이러스(AAV) 및 α 바이러스로부터 선택된 것을 포함하지만, 다른 바이러스 벡터도 사용될 수 있다. 생체내 사용을 위해, α 바이러스 및 아데노바이러스와 같은 숙주 게놈에 통합되지 않는 바이러스 벡터가 사용하기에 적합하다. 예시적 유형의 α 바이러스는 신드비스 바이러스, 베네수엘라 말뇌염(VEE) 바이러스 및 셈리키 삼림열 바이러스(SFV)를 포함한다. 시험관내 용도를 위해, 숙주 게놈에 통합되는 바이러스 벡터, 예컨대, 레트로바이러스, AAV 및 항바이러스가 적합하다. 실시형태에서, 본 개시내용은 생체내 공형 종양을 본 개시내용의 바이러스 벡터와 접촉시키는 단계를 포함하는, 생체내 인간 세포를 형질도입하는 방법을 제공한다.
발현 벡터는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질을 생성하기 위해 숙주 세포에 도입될 수 있다. 세포는, 예를 들어, 시험관내에서 배양되거나 유전자 조작될 수 있다. 유용한 포유류 숙주 세포는 인간, 원숭이 및 설치류로부터 유래된 세포를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다(예를 들어, 문헌[Kriegler in "Gene Transfer and Expression: A Laboratory Manual," 1990, New York, Freeman & Co.] 참조). 이들은 SV40에 의해 형질전환된 원숭이 신장 세포주(예를 들어, COS-7, ATCC CRL 1651); 인간 배아 신장 계통 (예를 들어, 현탁 배양물에서의 성장을 위해 서브클로닝한 293, 293-EBNA, 또는 293 세포, 문헌[Graham et al., J Gen Virol 1977, 36:59]); 새끼 햄스터 신장 세포(예를 들어, BHK, ATCC CCL 10); 중국 햄스터 난소 세포-DHFR(예를 들어, CHO, Urlaub 및 Chasin, Proc Natl Acad Sci USA 1980, 77:4216); DG44 CHO 세포, CHO-K1 세포, 마우스 세르톨리 세포(Mather, Biol Reprod 1980, 23:243-251); 마우스 섬유아세포(예를 들어, NIH-3T3), 원숭이 신장 세포(예를 들어, CV1 ATCC CCL 70); 아프리카 그린 원숭이 신장 세포(예를 들어, VERO-76, ATCC CRL-1587); 인간 자궁경부 암종 세포(예를 들어, HELA, ATCC CCL 2); 개 신장 세포(예를 들어, MDCK, ATCC CCL 34); 버팔로 래트 간 세포(예를 들어, BRL 3A, ATCC CRL 1442); 인간 폐 세포(예를 들어, W138, ATCC CCL 75); 인간 간 세포(예를 들어, Hep G2, HB 8065); 및 마우스 유방 종양 세포(예를 들어, MMT 060562, ATCC CCL51)를 포함한다. 본 명세서에 개시된 키메라 단백질을 발현시키기 위한 예시적인 암 세포 유형은 마우스 섬유아세포주, NIH3T3, 마우스 마우스 루이스 폐암종 세포주, LLC, 마우스 비만세포종 세포주, P815, 마우스 림프종 세포주, EL4 및 이의 오발부민 형질감염체, E.G7, 마우스 흑색종 세포주, B16F10, 마우스 섬유육종 세포주, MC57, 및 인간 소세포 폐암종 세포주, SCLC#2 및 SCLC#7을 포함한다.
숙주 세포는 건강한 인간, 암 환자 및 감염성 질환을 갖는 환자를 포함하는 정상 또는 영향받은 대상체, 사설 실험실 기탁물, 공공 배양 수집물, 예컨대, 미국 미생물 보존센터(ATCC)로부터, 또는 상업적 공급업자로부터 얻을 수 있다.
시험관내, 생체외 및/또는 생체내에서 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질의 생성을 위해 사용될 수 있는 세포는 상피 세포, 내피 세포, 각질세포, 섬유아세포, 근세포, 간세포; 혈액 세포, 예컨대, T 림프구, 키메라 항원 수용체 발현 T 세포, 종양 침윤성 림프구, B 림프구, 단핵구, 대식세포, 호중구, 호산구, 거핵세포, 과립구; 다양한 줄기 또는 전구체 세포, 특히 조혈 줄기 또는 조상 세포(예를 들어, 골수로부터 얻은 바와 같음), 제대혈, 말초 혈액 및 태아 간을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 세포 유형의 선택은 치료 또는 예방 중인 종양 또는 감염성 질환의 유형에 따르며, 당업자에 의해 결정될 수 있다.
Fc-함유 거대분자(예컨대, 단클론성 항체)의 생성 및 정제는 생성물 간에 약간 변형을 한 표준화된 과정이다. 예를 들어, 다수의 Fc 함유 거대분자는 인간 배아 신장(HEK) 세포(또는 이의 변이체) 또는 중국 햄스터 난소(CHO) 세포(또는 이의 변이체)에 의해 또는 일부 경우에 박테리아 또는 합성 방법에 의해 생성된다. 생성 후에, HEK 또는 CHO 세포에 의해 분비되는 Fc 함유 거대분자는 단백질 A 칼럼에 대한 결합을 통해 정제되고, 후속적으로 다양한 방법을 이용해서 '폴리싱'된다. 일반적으로 말해서, 정제된 Fc 함유 거대분자는 일정 기간 동안 액체 형태로 보관되고, 장기간의 시간 동안 냉동되거나, 일부 경우에 동결건조된다. 실시형태에서, 본 명세서에 상정된 키메라 단백질의 생성은 전통적인 Fc 함유 거대분자에 비해 독특한 특징을 가질 수 있다. 특정 예에서, 키메라 단백질은 특정 크로마토그래피 수지를 이용하거나 또는 단백질 A 포획에 의존하지 않는 크로마토그래피 방법을 이용하여 정제될 수 있다. 실시형태에서, 키메라 단백질은 올리고머 상태로, 또는 다중 올리고머 상태로 정제될 수 있고, 특정 방법을 이용해서 특정 올리고머 상태가 풍부화된다. 이론으로 구속되는 일 없이, 이러한 방법은 명시된 염 농도, pH 및 첨가 조성물을 포함하는 특정 완충제에 의한 처리를 포함할 수 있었다. 다른 예에서, 이러한 방법은 하나의 올리고머 상태를 다른 상태보다 더 선호하는 처리를 포함할 수 있었다. 본 명세서에서 얻은 키메라 단백질은 당업계에 명시된 방법을 이용해서 추가로 '폴리싱'될 수 있다. 실시형태에서, 키메라 단백질은 상당히 안정적이며, 광범위한 pH 노출(pH 3 내지 12)을 용인할 수 있고, 매우 다수의 냉동/해동 스트레스(3회 초과의 냉동/해동 주기)를 용인할 수 있으며, 고온에서 장기간의 인큐베이션을 (40 도C에서 2주보다 길게) 용인할 수 있다. 실시형태에서, 키메라 단백질은 이러한 스트레스 조건 하에서 분해, 탈아마이드화 등의 증거 없이 무손상으로 남아있는 것으로 나타난다.
대상체 및/또는 동물
실시형태에서, 대상체 및/또는 동물은 포유류, 예를 들어, 인간, 마우스, 래트, 기니피그, 고양이, 말, 소, 돼지, 토끼, 양 또는 비인간 영장류, 예컨대, 원숭이, 침팬지 또는 개코원숭이이다. 실시형태에서, 대상체 및/또는 동물은 비포유류, 예컨대, 제브라피쉬이다. 실시형태에서, 대상체 및/또는 동물은 (예를 들어, GFP에 의해) 형광 태그된 세포를 포함할 수 있다. 실시형태에서, 대상체 및/또는 동물은 형광 세포를 포함하는 유전자이식 동물이다.
실시형태에서, 대상체 및/또는 동물은 인간이다. 실시형태에서, 인간은 소아 인간이다. 실시형태에서, 인간은 성인 인간이다. 실시형태에서, 인간은 노인 인간이다. 실시형태에서, 인간은 환자로 지칭될 수 있다.
특정 실시형태에서, 인간은 약 0개월 내지 약 6개월령, 약 6 내지 약 12개월령, 약 6 내지 약 18개월령, 약 18 내지 약 36개월령, 약 1 내지 약 5세, 약 5 내지 약 10세, 약 10 내지 약 15세, 약 15 내지 약 20세, 약 20 내지 약 25세, 약 25 내지 약 30세, 약 30 내지 약 35세, 약 35 내지 약 40세, 약 40 내지 약 45세, 약 45 내지 약 50세, 약 50 내지 약 55세, 약 55 내지 약 60세, 약 60 내지 약 65세, 약 65 내지 약 70세, 약 70 내지 약 75세, 약 75 내지 약 80세, 약 80 내지 약 85세, 약 85 내지 약 90세, 약 90 내지 약 95세 또는 약 95 내지 약 100세 범위의 연령을 갖는다.
실시형태에서, 대상체는 비인간 동물이고, 따라서, 본 개시내용은 수의학적 용도에 관한 것이다. 구체적 실시형태에서, 비인간 동물은 반려동물이다. 다른 구체적 실시형태에서, 비인간 동물은 가축 동물이다.
실시형태에서, 대상체는 PD-1에 결합하거나 PD-1 리간드에 결합할 수 있는 항체를 포함하는 치료에 불량하게 반응성이거나 난치성인 암을 갖는다. 실시형태에서, 대상체는 이러한 치료의 12주 정도 후에 PD-1에 결합하거나 PD-1 리간드에 결합할 수 있는 항체에 의한 치료에 불량하게 반응성이거나 비반응성인 암을 갖는다.
키트 및 의약
본 개시내용의 양상은 본 명세서에 개시된 약제학적 조성물 및/또는 키메라 단백질의 투여를 단순화시킬 수 있는 키트를 제공한다.
본 개시내용의 예시적인 키트는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택된 임의의 항암제; 및/또는 본 개시내용의 방법에서 사용되는 키메라 단백질 및/또는 단위 투약 형태로 본 명세서에 개시된 약제학적 조성물을 포함한다. 실시형태에서, 단위 투약 형태는 본 명세서에 개시된 임의의 제제 및 약제학적으로 허용 가능한 담체, 희석제, 부형제 또는 비히클을 함유하는, 멸균일 수 있는 용기, 예컨대 사전 충전 주사기이다. 키트는 본 명세서에 개시된 임의의 제제의 사용을 지시하는 라벨 또는 인쇄된 지침을 더 포함할 수 있다. 키트는 또한 투여 위치에 대해 개검기(lid speculum), 국부 마취제 및 킬레이트제를 포함할 수 있다. 키트는 또한 본 명세서에 개시된 1종 이상의 추가적인 제제를 더 포함할 수 있다. 실시형태에서, 키트는 유효량의 본 개시내용의 조성물 및 유효량의 다른 조성물, 예컨대, 본 명세서에 개시된 것을 함유하는 용기를 포함한다.
본 개시내용의 양상은 의약, 예를 들어, 암 치료용 의약의 제조에서 본 명세서에 개시된 바와 같은 키메라 단백질의 용도를 포함한다.
본 명세서에 개시된 임의의 양상 또는 실시형태는 본 명세서에 개시된 바와 같은 임의의 다른 양상 또는 실시형태와 조합될 수 있다.
본 개시내용은 청구범위에 기재된 본 개시내용의 범주를 제한하지 않는 다음의 실시예에서 추가로 기재될 것이다.
실시예
본 명세서의 실시예는 본 개시내용의 이점 및 유익을 예시하고, 본 개시내용의 키메라 단백질을 제조하거나 이용해서 당업자를 추가로 돕기 위해 제공한다. 본 명세서의 실시예는 본 개시내용의 바람직한 양상을 더욱 완전히 예시하기 위해 제시된다. 실시예는 첨부하는 청구범위에 의해 규정된다면 결코 본 개시내용의 범주를 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 실시예는 상기 기재된 본 개시내용의 임의의 변형, 양상 또는 실시형태를 포함하거나 원용할 수 있다. 상기 기재된 변화, 양상 또는 실시형태는 또한 추가로 각각 본 개시내용의 임의의 또는 모든 다른 변화, 양상 또는 실시형태를 포함하거나 원용할 수 있다.
실시예 1: 저메틸화제/후성 조절자에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 증폭
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성에 대한 저메틸화제/후성 조절자에 의한 암세포의 치료 효과를 결정하였다.
간략히 말해서, K652 인간 만성 골수성 백혈병(CML) 세포를 녹색 형광 추적자로 표지하고, 비히클 단독 대조군 또는 0.1μM 아자시티딘으로 밤새 처리하였다. 다음 날, 종양 세포를 PBS에서 세척하였고, 이어서, 5% CO2의 존재 하에 37℃에서 4시간 동안 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 유무와 상관없이 인간 대식세포와 함께 공동 배양시켰다. 이 인큐베이션 후에, 세포를 채취하고, 항-CD11b 항체(대식세포 마커)로 치료하고, 유세포분석을 이용해서 분석하였다. 종양 신호의 중첩(녹색 형광 추적자) 및 대식세포(항-CD11b 항체 염색)에 의해 양의 식균작용을 결정하였다. 최대 식균작용 값을 1로 설정하고, 이어서, 모든 다른 복제물을 그에 따라 정규화함으로써 식균지수를 계산하였다. 식균지수를 표시된 치료에 대해 플롯팅하였다. 도 2A에 나타내는 바와 같이, 비히클 단독 대조군으로 밤새 처리하고, 이어서, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질(대조군 K652 세포)의 부재 하에 인간 대식세포와 함께 공동 배양시킨 K652 세포는 배경 수준에서 인간 대식세포에 의해 식균되었다. 아자시티딘(밤새) 단독 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질(4시간) 단독에 의한 치료는 대조군 K652 세포에 비해 증가된 수준의 식균작용을 초래하였다(도 2A). 흥미롭게도, 도 2A에 나타내는 바와 같이, 아자시티딘으로 (밤새) 처리한 K652 세포 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질은 (4시간 동안) 대조군 K652 세포(p < 0.001), 아자시티딘 단독으로 (밤새) 처리한 K652 세포(p < 0.05), 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독으로 (4시간 동안) 처리한 K652 세포(p < 0.01)보다 통계적으로 유의미하게 증가된 수준의 식균작용을 나타냈다.
다른 실험에서, Kasumi-3 인간 급성 골수세포 백혈병(AML) 세포를 녹색 형광 추적자로 표지하였고 비히클 단독 대조군 또는 0.1μM 아자시티딘으로 밤새 처리하였다. 다음 날, 종양 세포를 PBS에서 세척하였고, 이어서, 5% CO2의 존재 하에 37℃에서 4시간 동안 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 유무와 상관없이 인간 대식세포와 함께 공동 배양시켰다. 이 인큐베이션 후에, 세포를 채취하고, 항-CD11b 항체(대식세포 마커)로 치료하고, 유세포분석을 이용해서 분석하였다. 종양 신호의 중첩(녹색 형광 추적자) 및 대식세포(항-CD11b 항체 염색)에 의해 양의 식균작용을 결정하였다. 최대 식균작용 값을 1로 설정하고, 이어서, 모든 다른 복제물을 그에 따라 정규화함으로써 식균지수를 계산하였다. 식균지수를 표시된 치료에 대해 플롯팅하였다. 도 2B에 나타내는 바와 같이, 비히클 단독 대조군으로 밤새 처리하고, 이어서, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질(대조군 Kasumi-3 세포)의 부재 하에 인간 대식세포와 함께 공동 배양시킨 Kasumi-3 세포는 배경 수준에서 인간 대식세포에 의해 식균되었다. 아자시티딘(밤새) 단독 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질(4시간) 단독에 의한 치료는 대조군 Kasumi-3 세포에 비해 식균작용 수준의 약간의 증가를 초래하였다(도 2B). 흥미롭게도, 도 2B에 나타내는 바와 같이, 아자시티딘으로 (밤새) 처리한 Kasumi-3 세포 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질은 (4시간 동안) 대조군 Kasumi-3 세포(p < 0.0001), 아자시티딘 단독으로 (밤새) 처리한 Kasumi-3 세포(p < 0.0001), 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독으로 (4시간 동안) 처리한 Kasumi-3 세포(p < 0.0001)보다 통계적으로 유의미하게 증가된 수준의 식균작용을 나타냈다.
총괄적으로, 이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L과 저메틸화제, 예컨대, 아자시티딘의 조합이 혈액학적 종양, 예컨대, CML 및 AML의 식균작용을 향상시킨다는 것을 나타낸다. 이러한 결과는 저메틸화제 아자시티딘이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성을 강력하게 한다는 것을 입증한다. 따라서, 이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 및 저메틸화제/후성 조절자를 이용하는 암의 병용 요법이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 저메틸화제/후성 조절자 둘 다에 비해 우수한 효능을 생성할 가능성이 있다는 것을 나타낸다.
실시예 2: 프로테아좀 저해제에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 증폭
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성에 대한 프로테아좀 저해제에 의한 암세포의 치료 효과를 결정하였다.
간략히 말해서, MM1R 인간　다발성 골수종(MM) 세포를 녹색 형광 추적자로 표지하였고, 비히클 단독 대조군 또는 1μM 보르테조밉으로 밤새 처리하였다. 다음 날, 종양 세포를 PBS에서 세척하였고, 이어서, 5% CO2의 존재 하에 37℃에서 4시간 동안 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 유무와 상관없이 인간 대식세포와 함께 공동 배양시켰다. 이 인큐베이션 후에, 세포를 채취하고, 항-CD11b 항체(대식세포 마커)로 치료하고, 유세포분석을 이용해서 분석하였다. 종양 신호의 중첩(녹색 형광 추적자) 및 대식세포(항-CD11b 항체 염색)에 의해 양의 식균작용을 결정하였다. 최대 식균작용 값을 1로 설정하고, 이어서, 모든 다른 복제물을 그에 따라 정규화함으로써 식균지수를 계산하였다. 식균지수를 표시된 치료에 대해 플롯팅하였다. 도 3A에 나타내는 바와 같이, 비히클 단독 대조군으로 밤새 처리하고, 이어서, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질(대조군 MM1R 세포)의 부재 하에 인간 대식세포와 함께 공동 배양시킨 MM1R 세포는 배경 수준에서 인간 대식세포에 의해 식균되었다. 보르테조밉(밤새) 단독 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질(4시간) 단독에 의한 치료는 대조군 MM1R 세포에 비해 증가된 수준의 식균작용을 초래하였다(도 3A). 흥미롭게도, 도 3A에 나타내는 바와 같이, 보르테조밉(밤새) 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질(4시간 동안)로 처리한 MM1R 세포는 대조군 MM1R 세포(p < 0.0001), 보르테조밉 단독으로 치료한 MM1R 세포(밤새), 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독으로 치료한 MM1R 세포(4시간 동안)에 비해 증가된 수준의 식균작용을 나타냈다.
다른 실험에서, ARD1 인간　다발성 골수종(MM) 세포를 녹색 형광 추적자로 표지하였고, 비히클 단독 대조군 또는 1μM 보르테조밉으로 밤새 처리하였다. 다음 날, 종양 세포를 PBS에서 세척하였고, 이어서, 5% CO2의 존재 하에 37℃에서 4시간 동안 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 유무와 상관없이 인간 대식세포와 함께 공동 배양시켰다. 이 인큐베이션 후에, 세포를 채취하고, 항-CD11b 항체(대식세포 마커)로 치료하고, 유세포분석을 이용해서 분석하였다. 종양 신호의 중첩(녹색 형광 추적자) 및 대식세포(항-CD11b 항체 염색)에 의해 양의 식균작용을 결정하였다. 최대 식균작용 값을 1로 설정하고, 이어서, 모든 다른 복제물을 그에 따라 정규화함으로써 식균지수를 계산하였다. 식균지수를 표시된 치료에 대해 플롯팅하였다. 도 3B에 나타내는 바와 같이, 비히클 단독 대조군으로 밤새 처리하고, 이어서, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질(대조군 ARD1 세포)의 부재 하에 인간 대식세포와 함께 공동 배양시킨 ARD1 세포는 배경 수준에서 인간 대식세포에 의해 식균되었다. 보르테조밉(밤새) 단독 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질(4시간) 단독에 의한 치료는 대조군 ARD1 세포에 비해 증가된 수준의 식균작용을 초래하였다(도 3B). 흥미롭게도, 도 3B에 나타내는 바와 같이, 보르테조밉(밤새) 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질(4시간 동안)로 처리한 ARD1 세포는 대조군 ARD1 세포(p < 0.0001), 보르테조밉 단독으로 치료한 ARD1 세포(밤새), 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독으로 치료한 ARD1 세포(4시간 동안)에 비해 증가된 수준의 식균작용을 나타냈다.
이러한 결과는 프로테아좀 저해제 보르테조밉이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성을 강력하게 한다는 것을 입증한다. 따라서, 이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 및 프로테아좀 저해제에 의한 암의 병용 요법이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 프로테아좀 저해제 둘 다에 비해 우수한 효능을 생성할 가능성이 있다는 것을 나타낸다.
실시예 3: Bcl2 저해제에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 증폭
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성에 대한 Bcl2 저해제에 의한 암세포의 치료 효과를 결정하였다.
다른 실험에서, K652 인간 만성 골수성 백혈병(CML) 세포를 녹색 형광 추적자로 표지하고, 비히클 단독 대조군 또는 1μM 베네토클락스로 밤새 처리하였다. 다음 날, 종양 세포를 PBS에서 세척하였고, 이어서, 5% CO2의 존재 하에 37℃에서 4시간 동안 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 유무와 상관없이 인간 대식세포와 함께 공동 배양시켰다. 이 인큐베이션 후에, 세포를 채취하고, 항-CD11b 항체(대식세포 마커)로 치료하고, 유세포분석을 이용해서 분석하였다. 종양 신호의 중첩(녹색 형광 추적자) 및 대식세포(항-CD11b 항체 염색)에 의해 양의 식균작용을 결정하였다. 최대 식균작용 값을 1로 설정하고, 이어서, 모든 다른 복제물을 그에 따라 정규화함으로써 식균지수를 계산하였다. 식균지수를 표시된 치료에 대해 플롯팅하였다. 도 4에 나타내는 바와 같이, 비히클 단독 대조군으로 밤새 처리하고, 이어서, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질(대조군 K562 세포)의 부재 하에 인간 대식세포와 함께 공동 배양시킨 K562 세포는 배경 수준에서 인간 대식세포에 의해 식균되었다. 베네토클락스(밤새) 단독 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질(4시간) 단독에 의한 치료는 대조군 K562 세포에 비해 증가된 수준의 식균작용을 초래하였다(도 4). 흥미롭게도, 도 4에 나타내는 바와 같이, 베네토클락스(밤새) 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질(4시간 동안)로 처리한 K562 세포는 대조군 K562 세포(p < 0.0001), 베네토클락스 단독으로 치료한 K562 세포(밤새), 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독으로 치료한 K562 세포(4시간 동안)에 비해 증가된 수준의 식균작용을 나타냈다.
이러한 결과는 Bcl2 저해제 베네토클락스가 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성을 강력하게 한다는 것을 입증한다. 따라서, 이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 및 Bcl2 저해제에 의한 암의 병용 요법이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 Bcl2 저해제 둘 다에 비해 우수한 효능을 생성할 가능성이 있다는 것을 나타낸다.
실시예 4: 항-BCMA 항체에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 증폭
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성에 대해 항원-의존적 세포의 식균작용(ADCP) 활성을 갖는 항-BCMA 항체(클론 C12A3.2)에 의한 암세포의 처리 효과를 결정하였다.
간략히 말해서, KM28PE 인간　다발성 골수종(MM) 세포를 녹색 형광 추적자로 표지하고, 인간 대식세포와 함께 공동 배양시키고, (1) 비히클 단독 대조군, (2) 10㎍/㎖의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질, (3) 1㎍/㎖의 항-BCMA 항체, 또는 (4) 1㎍/㎖의 항-BCMA 항체 및 10㎍/㎖의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질로 치료하고, 37℃에서 5% CO2의 존재 하에 4시간 동안 인큐베이션시켰다. 인큐베이션 후에, 세포를 채취하고, 항-CD11b 항체(대식세포 마커)로 치료하고, 유세포분석을 이용해서 분석하였다. 종양 신호의 중첩(녹색 형광 추적자) 및 대식세포(항-CD11b 항체 염색)에 의해 양의 식균작용을 결정하였다. 최대 식균작용 값을 1로 설정하고, 이어서, 모든 다른 복제물을 그에 따라 정규화함으로써 식균지수를 계산하였다. 식균지수를 표시된 치료에 대해 플롯팅하였다. 도 5A에 나타낸 바와 같이, 비히클 단독 대조군으로 처리한 KM28PE 세포는 배경 수준에서 인간 대식세포에 의해 식균되었다. 항-BCMA 항체 단독 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독에 의한 치료는 비히클 단독 처리 KM28PE 세포에 비해 증가된 수준의 식균작용을 초래하였다(도 5A). 흥미롭게도, 도 5A에 나타낸 바와 같이, 항-BCMA 항체 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질로 처리한 KM28PE 세포는 비히클 단독-처리 KM28PE 세포(p < 0.01), 항-BCMA 항체 단독으로 치료한 KM28PE 세포(p < 0.05), 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독으로 치료한 KM28PE 세포(p < 0.05)에 비해 증가된 수준의 식균작용을 나타냈다.
다른 실험에서, KM12B 인간　다발성 골수종(MM) 세포를 녹색 형광 추적자로 표지하고, 인간 대식세포와 함께 공동 배양시키고, (1) 비히클 단독 대조군, (2) 10㎍/㎖의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질, (3) 1㎍/㎖의 항-BCMA 항체, 또는 (4) 1㎍/㎖의 항-BCMA 항체 및 10㎍/㎖의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질로 치료하고, 37℃에서 5% CO2의 존재 하에 4시간 동안 인큐베이션시켰다. 인큐베이션 후에, 세포를 채취하고, 항-CD11b 항체(대식세포 마커)로 치료하고, 유세포분석을 이용해서 분석하였다. 종양 신호의 중첩(녹색 형광 추적자) 및 대식세포(항-CD11b 항체 염색)에 의해 양의 식균작용을 결정하였다. 최대 식균작용 값을 1로 설정하고, 이어서, 모든 다른 복제물을 그에 따라 정규화함으로써 식균지수를 계산하였다. 식균지수를 표시된 치료에 대해 플롯팅하였다. 도 5B에 나타낸 바와 같이, 비히클 단독 대조군으로 처리한 KM12B 세포는 배경 수준에서 인간 대식세포에 의해 식균되었다. 항-BCMA 항체 단독 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독에 의한 치료는 비히클 단독 처리 KM12B 세포에 비해 증가된 수준의 식균작용을 초래하였다(도 5B). 흥미롭게도, 도 5B에 나타낸 바와 같이, 항-BCMA 항체 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질로 처리한 KM12B 세포는 비히클 단독-처리 KM12B 세포(p < 0.01), 항-BCMA 항체 단독으로 치료한 KM12B 세포(p < 0.05), 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독으로 치료한 KM12B 세포(p < 0.05)에 비해 증가된 수준의 식균작용을 나타냈다.
이러한 결과는 항-BCMA 항체가 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성을 강력하게 한다는 것을 입증한다. 따라서, 이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 및 항-BCMA 항체에 의한 암의 병용 요법이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 항-BCMA 항체 둘 다에 비해 우수한 효능을 생성할 가능성이 있다는 것을 나타낸다. 이러한 데이터는 또한 종양 특이적 항원 표적(제한 없이, 예를 들어, PD-L1, CD47, CD38, FOLR1, CD123, SLAMF7 및 BCMA)에 대한 ADCC/ADCP 적격 항체와 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 항체 그 자체 둘 다에 비해 우수한 효능을 생성할 가능성이 있다는 것을 시사한다.
실시예 5: 항-CD38 항체에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 증폭
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성에 대한 항-CD38 항체에 의한 암세포의 치료 효과를 결정하였다.
간략히 말해서, ARD1 인간　다발성 골수종(MM) 세포를 IncuCyte phRodo Red 세포 표지 키트로 표지하였고, 인간 대식세포와 함께 공동 배양시키고 나서, (1) 비히클 단독 대조군, (2) 10㎍/㎖의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질, (3) 1㎍/㎖ of 다라투무맙(항원-의존적 세포의 식균작용(ADCP)-능숙 항-CD38 항체), 또는 (4) 1㎍/㎖의 다라투무맙 및 10㎍/㎖의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질로 처리하였고, 37℃에서 5% CO2의 존재 하에 2시간 동안 인큐베이션시켰다. IncuCyte 저속 촬영 현미경 시스템을 이용해서 배양물을 영상화하였다, 적색 표지 종양 세포를 산성 대식세포 파고솜에 내재화시킬 때 생기는 적색 형광 강도의 증가에 따라 양의 식균작용을 결정하였다. 최대 식균작용 값을 1로 설정하고, 이어서, 모든 다른 복제물을 그에 따라 정규화함으로써 식균지수를 계산하였다. 식균지수를 표시된 치료에 대해 플롯팅하였다. 도 6에 나타낸 바와 같이, 비히클 단독 대조군으로 처리한 ARD1 세포는 배경 수준에서 인간 대식세포에 의해 식균되었다. 다라투무맙 단독 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독에 의한 치료는 비히클 단독 처리 ARD1 세포에 비해 증가된 수준의 식균작용을 초래하였다(도 6). 흥미롭게도, 도 6에 나타낸 바와 같이, 다라투무맙 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질로 처리한 ARD1 세포는 비히클 단독-처리 ARD1 세포(p < 0.0001), 다라투무맙 단독으로 치료한 ARD1 세포(p < 0.0001), 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독으로 치료한 ARD1 세포(p < 0.05)에 비해 증가된 수준의 식균작용을 나타냈다.
이러한 결과는 항-CD38 항체 다라투무맙이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성을 강력하게 한다는 것을 입증한다. 따라서, 이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 및 항-CD38 항체에 의한 암의 병용 요법이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 항-CD38 항체 둘 다에 비해 우수한 효능을 생성할 가능성이 있다는 것을 나타낸다. 이러한 데이터는 또한 종양 특이적 항원 표적(제한 없이, 예를 들어, PD-L1, CD47, CD38, FOLR1, CD123, SLAMF7 및 BCMA)에 대한 ADCC/ADCP 적격 항체와 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 항체 그 자체 둘 다에 비해 우수한 효능을 생성할 가능성이 있다는 것을 시사한다.
실시예 6: 면역조절 이미드 약물(IMiD)에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 증폭
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성에 대한 면역조절 이미드 약물(IMiD)에 의한 암세포의 치료 효과를 결정하였다.
간략히 말해서, CD14+ 단핵구를 인간 공여자 PBMC로부터 단리시켰고, 6일 동안 m-CSF(100ng/㎖)와 함께 배양시켰다. 제6일에, IFNγ(100ng/㎖) 및 LPS(10ng/㎖)를 추가 24시간 동안 세포에 첨가하여, M1 분극화된 대식세포를 생성하였다. 대식세포 분화의 제5일에, 동일한 인간 공여자로부터의 PBMC의 다른 바이알을 해동시키고, 자기 비드 단리 키트를 이용해서 CD3 T 세포를 단리시켰다. 이러한 T 세포를 CD3/CD28 T 세포 자기 활성화 비드로 2일 동안 활성화시켰다. 대식세포와 T 세포가 둘 다 활성화되고 준비된 때인 제7일에, 이들을 50㎍/㎖의 SIPRα-Fc-CD40L 키메라 단백질 유무와 상관없이 녹색 형광 추적자로 표지하고, 10μM 포말리도마이드로 표지한 KMS12B 다발성 골수종 세포와 조합하였다. KMS12B 세포를 T 세포 없이 대식세포 및 10μM 포말리도마이드와 함께 인큐베이션시키고, 음성 대조군으로서 사용하였다. 이런 공동 배양물을 4시간 동안 37℃, 5% CO2에서 인큐베이션시켰다. 이 인큐베이션 후에, 세포를 채취하고, 항-CD11b 항체(대식세포 마커)로 치료하고, 유세포분석을 이용해서 분석하였다. 종양 신호의 중첩(녹색 형광 추적자) 및 대식세포(항-CD11b 항체 염색)에 의해 양의 식균작용을 결정하였다. 최대 식균작용 값을 1로 설정하고, 이어서, 모든 다른 복제물을 그에 따라 정규화함으로써 식균지수를 계산하였다. 식균지수를 표시된 치료에 대해 플롯팅하였다. 포말리도마이드의 존재 하에 대식세포를 종양 세포와 합할 때, 기준선 식균작용 신호가 생성되었다(검정 막대; 도 7). 도 7에 나타낸 바와 같이, T 세포, 대식세포 및 포말리도마이드와 함께 인큐베이션시킨 KMS12B 세포는 T 세포 없이 인큐베이션시킨 KMS12B 세포(음성 대조군)에 비해 증가된 식균작용을 나타냈다. 추가로, 도 7에 나타낸 바와 같이, KMS12B 세포 처리된 포말리도마이드 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질은 SIPRα-Fc-CD40L 키메라 단백질 없이 처리한 KMS12B 세포에 비해 추가 식균작용을 나타냈다.
포말리도마이드와 같은 IMiD는 면역 세포를 조절하고 효과기 기능을 향상시키는 것으로 나타났다. 이론으로 구속되는 일 없이, CD3/CD28 활성화된 T 세포가 또한 존재할 때, 식균작용은 T 세포가 종양 세포 상에서 갖는 세포 독성 효과로 인해 잠재적으로 증가되어, 이들을 대식세포 매개 식균작용에 대해 더 양호한 표적으로 만들 가능성이 있다. 이 시스템에 대한 SIRPα-Fc-CD40L의 첨가는 식균작용을 추가로 강력하게 하였다. 따라서, 이러한 데이터는 식균작용을 향상시키는 제제와 면역 세포 활성제의 조합이 제대로 상승작용을 나타낸다는 것을 입증한다. 따라서, 이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 및 IMiD 중 하나에 의한 암의 병용 요법이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 항-CD38 항체 둘 다에 비해 우수한 효능을 생성할 가능성이 있다는 것을 나타낸다.
실시예 7: 항-SLAMF7 항체에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 증폭
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성에 대한 항-SLAMF7 항체에 의한 암세포의 치료 효과를 결정하였다.
간략히 말해서, ARD1 인간 다발성 골수종 세포를 녹색 형광 추적자로 표지하고, 인간 대식세포와 공동 배양시키고, (1) 비히클 단독 대조군, (2) 10㎍/㎖의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질, (3) 1㎍/㎖의 엘로투주맙(항원-의존적 세포의 식균작용 (ADCP)-능숙 항-SLAMF7 항체), 또는 (4) 1㎍/㎖의 엘로투주맙 및 10㎍/㎖의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질로 치료하고, 4시간 동안 5% CO2의 존재 하에 37℃에서 인큐베이션시켰다. 이 인큐베이션 후에, 세포를 채취하고, 항-CD11b 항체(대식세포 마커)로 치료하고, 유세포분석을 이용해서 분석하였다. 종양 신호의 중첩(녹색 형광 추적자) 및 대식세포(항-CD11b 항체 염색)에 의해 양의 식균작용을 결정하였다. 최대 식균작용 값을 1로 설정하고, 이어서, 모든 다른 복제물을 그에 따라 정규화함으로써 식균지수를 계산하였다. 식균지수를 표시된 치료에 대해 플롯팅하였다. 도 8에 나타낸 바와 같이, 비히클 단독 대조군으로 처리한 ARD1 세포는 배경 수준에서 인간 대식세포에 의해 식균되었다. 엘로투주맙 단독 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독에 의한 치료는 비히클 단독 처리 ARD1 세포에 비해 증가된 수준의 식균작용을 초래하였다(도 8). 흥미롭게도, 도 8에 나타낸 바와 같이, 엘로투주맙 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질로 처리한 ARD1 세포는 비히클 단독-처리 ARD1 세포(p < 0.05), 엘로투주맙 단독으로 치료한 ARD1 세포, 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독으로 치료한 ARD1 세포에 비해 증가된 수준의 식균작용을 나타냈다.
이러한 결과는 항-SLAMF7 항체 엘로투주맙이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성을 강력하게 한다는 것을 입증한다. 따라서, 이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 및 항-SLAMF7 항체에 의한 암의 병용 요법이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 항-SLAMF7 항체 둘 다에 비해 우수한 효능을 생성할 가능성이 있다는 것을 나타낸다. 이러한 데이터는 또한 종양 특이적 항원 표적(제한 없이, 예를 들어, PD-L1, CD47, CD38, FOLR1, CD123, SLAMF7 및 BCMA)에 대한 ADCC/ADCP 적격 항체와 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 항체 그 자체 둘 다에 비해 우수한 효능을 생성할 가능성이 있다는 것을 시사한다.
실시예 8: 항-FOLR1 항체에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 증폭
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성에 대한 항-FOLR1 항체에 의한 암세포의 치료 효과를 결정하였다.
간략히 말해서, SKOV3 난소암 세포를 녹색 형광 추적자로 표지하고, 인간 대식세포와 공동 배양시키고, (1) 비히클 단독 대조군, (2) 10㎍/㎖의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질, (3) 1㎍/㎖의 항-FOLR1 항체, 또는 (4) 1㎍/㎖의 항-FOLR1 항체 및 10㎍/㎖의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질로 치료하고, 4시간 동안 5% CO2의 존재 하에 37℃에서 인큐베이션시켰다. 이 인큐베이션 후에, 세포를 채취하고, 항-CD11b 항체(대식세포 마커)로 치료하고, 유세포분석을 이용해서 분석하였다. 종양 신호의 중첩(녹색 형광 추적자) 및 대식세포(항-CD11b 항체 염색)에 의해 양의 식균작용을 결정하였다. 최대 식균작용 값을 1로 설정하고, 이어서, 모든 다른 복제물을 그에 따라 정규화함으로써 식균지수를 계산하였다. 식균지수를 표시된 치료에 대해 플롯팅하였다. 도 9에 나타낸 바와 같이, 비히클 단독 대조군으로 처리한 SKOV3 세포는 배경 수준에서 인간 대식세포에 의해 식균되었다. 항-FOLR1 항체 단독 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독에 의한 치료는 비히클 단독 처리 SKOV3 세포에 비해 증가된 수준의 식균작용을 초래하였다(도 9). 흥미롭게도, 도 9에 나타낸 바와 같이, 항-FOLR1 항체 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질로 처리한 SKOV3 세포는 비히클 단독-처리 SKOV3 세포(p < 0.0001), 항-FOLR1 항체 단독으로 치료한 SKOV3 세포, 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독으로 치료한 SKOV3 세포에 비해 증가된 수준의 식균작용을 나타냈다.
이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L과 ADCC/ADCP 적격 FOLR1 항체의 조합이 난소 종양 세포의 식균작용을 향상시킨다는 것을 입증한다. 따라서, 이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 및 항-FOLR1 항체에 의한 암의 병용 요법이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 항-FOLR1 항체 둘 다에 비해 우수한 효능을 생성할 가능성이 있다는 것을 나타낸다. 이러한 데이터는 또한 종양 특이적 항원 표적(제한 없이, 예를 들어, PD-L1, CD47, CD38, FOLR1, CD123, SLAMF7 및 BCMA)에 대한 ADCC/ADCP 적격 항체와 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 항체 그 자체 둘 다에 비해 우수한 효능을 생성할 가능성이 있다는 것을 시사한다.
실시예 9: 파클리탁셀과 병용한 SIRPα(CD172a)-Fc-CD40L 키메라 단백질의 생체내 항-종양 활성
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 효능을 스핀들 독소와 병용하여 평가하였다. 이를 위해, 생체내 종양 용적을 표적화하고 감소시키는 파클리탁셀 및 키메라 단백질의 능력을 결정하였다. 간략히 말해서, BALB/C 마우스에 500,000개의 CT26 종양 세포를 접종하였다. 종양 용적이 대략 50 내지 60㎣일 때(제0일), 마우스를 다음의 처리군에서 무작위로 분포시켰다: (1) 비히클 단독 대조군, (2) 300㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독, (3) 24㎎/㎏ 파클리탁셀 단독, 및 (4) 300㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 24㎎/㎏ 파클리탁셀의 조합물. 마우스에 복강내 주사를 통해 제0일, 제3일 및 제6일에 투약하였다. 제14일에 전자식 캘리퍼를 이용해서 종양을 측정하였고, GraphPad Prism 소프트웨어를 이용해서 플롯팅하였다. 도 10A에 나타낸 바와 같이, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독 및 파클리탁셀 단독에 의한 치료는 종양 크기의 감소를 야기하였다. 흥미롭게도, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 파클리탁셀에 의한 조합 치료(combination treatment)는 종양 크기의 추가 감소를 야기하였다(도 10A).
이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 튜불린 동역학 저해제의 조합물(제한 없이, 예를 들어, 파클리탁셀, 에포틸론, 도세탁셀, 디스코덜모라이드, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 비노렐빈, 빈플루닌, 돌라스타틴, 할리콘드린, 헤미아스텔린 및 크립토피신 52)이 단일 치료보다 유리할 수 있고, 따라서, 본 명세서에 개시된 방법에서 유용할 수 있다는 것을 입증한다.
실시예 10: 5-플루오로유라실과 병용한 SIRPα(CD172a)-Fc-CD40L 키메라 단백질의 생체내 항-종양 활성
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 효능을 항대사물질과 병용하여 평가하였다. 이를 위해, 생체내 종양 용적을 표적화하고 감소시키는 5-플루오로유라실 및 키메라 단백질의 능력을 결정하였다. 간략히 말해서, BALB/C 마우스에 500,000개의 CT26 종양 세포를 접종하였다. 종양 용적이 대략 50 내지 60㎣일 때(제0일), 마우스를 다음의 처리군에서 무작위로 분포시켰다: (1) 비히클 단독 대조군, (2) 300㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독, (3) 20㎎/㎏ 5-플루오로유라실 단독, 및 (4) 300㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 20㎎/㎏ 5-플루오로유라실의 조합물. 마우스에 다음과 같은 복강내 주사를 투약하였다: SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질을 제0일, 제3일 및 제6일에 투여하였고; 5-플루오로유라실을 제0일, 제2일 및 제4일에 투여하였다. 제11일에 전자식 캘리퍼를 이용해서 종양을 측정하였고, GraphPad Prism 소프트웨어를 이용해서 플롯팅하였다. 도 10B에 나타낸 바와 같이, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독 및 5-플루오로유라실 단독에 의한 치료는 종양 크기의 감소를 야기하였다. 흥미롭게도, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 및 5-플루오로유라실에 의한 조합 치료는 비히클 단독 대조군(p<0.01), SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독, 및 20㎎/㎏ 5-플루오로유라실 단독(p<0.05)에 비해 종양 크기의 추가 감소를 야기하였다(도 10B).
이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 및 항대사물질 및/또는 티미딜산 합성효소 저해제의 조합물(제한 없이, 예를 들어, 5-플루오로유라실(5-FU), 6-머캅토퓨린(6-MP), 카페시타빈, 사이타라빈, 플록수리딘, 플루다라빈, 겜시타빈, 하이드록시카바마이드, 메토트렉세이트, 페메트렉세드, 포토트렉세이트, 랄티트렉세드, 놀라트렉세드, ZD9331 및 GS7904L)은 단일 치료보다 유리할 수 있고, 따라서, 본 명세서에 개시된 방법에서 유용할 수 있다는 것을 입증한다.
실시예 11: 이리노테칸과 병용한 SIRPα(CD172a)-Fc-CD40L 키메라 단백질의 생체내 항-종양 활성
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 효능을 토포아이소머라제 I 저해제와 병용하여 평가하였다. 이를 위해, 생체내 종양 용적을 표적화하고 감소시키는 이리노테칸 및 키메라 단백질의 능력을 결정하였다. 간략히 말해서, BALB/C 마우스에 500,000개의 CT26 종양 세포를 접종하였다. 종양 용적이 대략 50 내지 60㎣일 때(제0일), 마우스를 다음의 처리군에서 무작위로 분포시켰다: (1) 비히클 단독 대조군, (2) 300㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독, (3) 25㎎/㎏ 이리노테칸 단독, 및 (4) 300㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 25㎎/㎏ 이리노테칸의 조합물. 마우스에 복강내 주사를 통해 제0일 및 제2일에 투약하였다. 제4일에 전자식 캘리퍼를 이용해서 종양을 측정하였고, GraphPad Prism 소프트웨어를 이용해서 플롯팅하였다. 도 10C에 나타낸 바와 같이, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독 및 이리노테칸 단독에 의한 치료는 종양 크기의 감소를 야기하였다. 흥미롭게도, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 이리노테칸에 의한 조합 치료는 종양 크기의 추가 감소를 야기하였다(도 10C).
이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 토포아이소머라제 I 저해제의 조합물(제한 없이, 예를 들어, 캠프토테신, 벨로테칸 토포테칸 및 이리노테칸)이 단일 치료보다 유리할 수 있고, 따라서, 본 명세서에 개시된 방법에서 유용할 수 있다는 것을 입증한다.
실시예 12: 독소루비신과 병용한 SIRPα(CD172a)-Fc-CD40L 키메라 단백질의 생체내 항-종양 활성
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 효능을 안트라사이클린과 병용하여 평가하였다. 이를 위해, 생체내 종양 용적을 표적화하고 감소시키는 독소루비신 및 키메라 단백질의 능력을 결정하였다. 간략히 말해서, BALB/C 마우스에 500,000개의 CT26 종양 세포를 접종하였다. 종양 용적이 대략 50 내지 60㎣일 때(제0일), 마우스를 다음의 처리군에서 무작위로 분포시켰다: (1) 비히클 단독 대조군, (2) 300㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독, (3) 8㎎/㎏ 독소루비신 단독, 및 (4) 300㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 8㎎/㎏ 독소루비신의 조합물. 마우스에 복강내 주사를 통해 제0일, 제3일 및 제6일에 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질을 투약하고, 꼬리 정맥을 통해 독소루비신을 3회 투약하였다. 제7일에 전자식 캘리퍼를 이용해서 종양을 측정하였고, GraphPad Prism 소프트웨어를 이용해서 플롯팅하였다. 도 10D에 나타낸 바와 같이, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독 및 독소루비신 단독에 의한 치료는 종양 크기의 감소를 야기하였다. 흥미롭게도, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 독소루비신에 의한 조합 치료는 종양 크기의 추가 감소를 야기하였다(도 10D).
이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 안트라사이클린의 조합물(제한 없이, 예를 들어, 다우노루비신, 독소루비신, 에피루비신, 이다루비신, 미톡산트론 및 발루비신) 또는 토포아이소머라제 II 저해제(제한 없이, 예를 들어, 독소루비신, 에피루비신, 발루비신, 다우노루비신, 이다루비신, 피톡산트론, 픽산트론, 에토포사이드, 테니포사이드, 및 암사크린)가 단일 치료보다 유리할 수 있고, 따라서, 본 명세서에 개시된 방법에서 유용할 수 있다는 것을 입증한다.
실시예 13: 백금 약물과 병용한 SIRPα(CD172a)-Fc-CD40L 키메라 단백질의 생체내 항-종양 활성
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 효능을 백금 화합물과 병용하여 평가하였다. 이를 위해, 생체내 종양 용적을 표적화하고 감소시키는 시스플라틴 및 키메라 단백질의 능력을 결정하였다. 간략히 말해서, BALB/C 마우스에 500,000개의 CT26 종양 세포를 접종하였다. 종양 용적이 대략 50 내지 60㎣일 때(제0일), 마우스를 다음의 처리군에서 무작위로 분포시켰다: (1) 비히클 단독 대조군, (2) 300㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독, (3) 200㎍의 시스플라틴 단독, 및 (4) 300㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 200㎍의 시스플라틴의 조합물. 마우스에 복강내 주사를 통해 제0일 및 제3일에 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질을 투약하였고, 제0일에 시스플라틴을 투약하였다. 제4일에 전자식 캘리퍼를 이용해서 종양을 측정하였고, GraphPad Prism 소프트웨어를 이용해서 플롯팅하였다. 도 10E에 나타낸 바와 같이, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독 및 시스플라틴 단독에 의한 치료는 종양 크기의 감소를 야기하였다. 흥미롭게도, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 시스플라틴에 의한 조합 치료는 종양 크기의 추가 감소를 야기하였다(도 10E).
다른 실험에서, 생체내 종양 용적을 표적화하고 감소시키는 옥살리플라틴 및 키메라 단백질의 능력을 결정하였다. 간략히 말해서, BALB/C 마우스에 500,000개의 CT26 종양 세포를 접종하였다. 종양 용적이 대략 50 내지 60㎣일 때(제0일), 마우스를 다음의 처리군에서 무작위로 분포시켰다: (1) 비히클 단독 대조군, (2) 300㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독, (3) 10㎎/㎏ 옥살리플라틴 단독, 및 (4) 300㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 10㎎/㎏ 옥살리플라틴의 조합물. 마우스에 복강내 주사를 통해 제0일 및 제3일에 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질을 투약하였고, 제0일에 옥살리플라틴을 투약하였다. 제4일에 전자식 캘리퍼를 이용해서 종양을 측정하였고, GraphPad Prism 소프트웨어를 이용해서 플롯팅하였다. 도 10F에 나타낸 바와 같이, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독 및 옥살리플라틴 단독에 의한 치료는 종양 크기의 감소를 야기하였다. 흥미롭게도, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 옥살리플라틴에 의한 조합 치료는 종양 크기의 추가 감소를 야기하였다(도 10F).
이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 백금 약물(제한 없이, 예를 들어, 시스플라틴, 카보플라틴 및 옥살리플라틴) 이 단일 치료보다 유리할 수 있고, 따라서, 본 명세서에 개시된 방법에서 유용할 수 있다는 것을 입증한다.
실시예 14: 면역관문 저해제와 병용한 SIRPα(CD172a)-Fc-CD40L 키메라 단백질의 생체내 항-종양 활성
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 효능을 면역관문 저해제와 병용하여 평가하였다. 이를 위해, 생체내 종양 용적을 표적화하고 감소시키는 항-PD-L1 항체 및 키메라 단백질의 능력을 결정하였다. 간략히 말해서, BALB/C 마우스에 1×106개의 A20 림프종 세포를 접종하였다. 종양 용적이 대략 75 내지 80㎣일 때(제0일), 마우스를 다음의 처리군에서 무작위로 분포시켰다: (1) 비히클 단독 대조군, (2) 200㎍의 마우스 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독, (3) 100㎍의 항-PD-L1 항체(클론 10F.9G2), 및 (4) 200㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 100㎍의 항-PD-L1 항체의 조합물. 마우스에 복강내 주사를 통해 제0일, 제3일 및 제6일에 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질을 투약하였다. 제12일에 전자식 캘리퍼를 이용해서 종양을 측정하였고, GraphPad Prism 소프트웨어를 이용해서 플롯팅하였다. 점선을 비히클 대조군의 평균에 그리고 mSIRPα-Fc-CD40L 그룹의 평균에 도시한다. 도 13A에 나타낸 바와 같이, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독 및 항-PD-L1 항체에 의한 처리는 종양 크기의 감소를 야기하였다. 흥미롭게도, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 항-PD-L1 항체에 의한 조합 치료는 종양 크기의 추가 감소를 야기하였다(도 13A).
이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 면역관문 저해제(제한 없이, 예를 들어, 항-PD-1, 항-PD-L1 및 항-CTLA 항체)가 단일 치료보다 유리할 수 있고, 따라서, 본 명세서에 개시된 방법에서 유용할 수 있다는 것을 입증한다.
실시예 15: 항대사물질/DNA 합성 저해제와 병용한 SIRPα(CD172a)-Fc-CD40L 키메라 단백질의 생체내 항-종양 활성
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 효능을 항대사물질/DNA 합성 저해제와 병용하여 평가하였다. 이를 위해, 생체내 종양 용적을 표적화하고 감소시키는 사이타라빈 및 키메라 단백질의 능력을 결정하였다. 간략히 말해서, BALB/C 마우스에 1×106개의 A20 림프종 세포를 접종하였다. 종양 용적이 대략 75 내지 80㎣일 때(제0일), 마우스를 다음의 처리군에서 무작위로 분포시켰다: (1) 비히클 단독 대조군, (2) 200㎍의 마우스 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독, (3) 50㎎/㎏ 사이타라빈, 및 (4) 200㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 및 50㎎/㎏ 사이타라빈의 조합물. 마우스에 복강내 주사를 통해 제0일, 제3일 및 제6일에 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질을 투약하였고, 제0일, 제1일, 제2일 및 제3일에 사이타라빈을 투약하였다. 제12일에 전자식 캘리퍼를 이용해서 종양을 측정하였고, GraphPad Prism 소프트웨어를 이용해서 플롯팅하였다. 점선을 비히클 대조군의 평균에 그리고 mSIRPα-Fc-CD40L 그룹의 평균에 도시한다. 도 13B에 나타낸 바와 같이, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독 및 항-PD-L1 항체에 의한 처리는 종양 크기의 감소를 야기하였다. 흥미롭게도, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 항-PD-L1 항체에 의한 조합 치료는 종양 크기의 추가 감소를 야기하였다(도 13B).
이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 항대사물질/DNA 합성 저해제(제한 없이, 예를 들어, 5-플루오로유라실(5-FU), 카페시타빈, 플록수리딘, 사이타라빈(ARA-C), 겜시타빈, 데시타빈 및 비다자)가 단일 치료보다 유리할 수 있고, 따라서, 본 명세서에 개시된 방법에서 유용할 수 있다는 것을 입증한다.
실시예 16: 저메틸화제/후성 조절자 및/또는 단백질 네딜화 저해제와 병용한 SIRPα(CD172a)-Fc-CD40L 키메라 단백질의 생체내 항-종양 활성
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 효능을 저메틸화제/후성 조절자 및/또는 단백질 네딜화 저해제와 병용하여 평가하였다. 이를 위해, 생체내 종양 용적을 표적화하고 감소시키는 항-PD-L1 항체 및 키메라 단백질의 능력을 결정하였다. 간략히 말해서, BALB/C 마우스에 1×106개의 A20 림프종 세포를 접종하였다. 종양 용적이 대략 75 내지 80㎣일 때(제0일), 마우스를 다음의 처리군에서 무작위로 분포시켰다: (1) 비히클 단독 대조군, (2) 1㎎/㎏ 아자시티딘 단독, (3) 4㎎/㎏ 페보네디스탓(MLN4924) 단독, (4) 1㎎/㎏ 아자시티딘과 4㎎/㎏ 페보네디스탓(MLN4924)의 조합물, (5) 200㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독, (6) 1㎎/㎏ 아자시티딘과 200㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합물, (7) 4㎎/㎏ 페보네디스탓(MLN4924)과 200㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합물, 및 (8) 1㎎/㎏ 아자시티딘, 4㎎/㎏ 페보네디스탓(MLN4924)과 200㎍의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합물. 마우스에 복강내 주사를 통해 제0일, 제3일 및 제6일에 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질을 투약하였고, 제0일, 제1일, 제2일 및 제3일에 페보네디스탓(MLN4924)을 투약하고, 제0일, 제1일, 제2일, 제3일 및 제4일에 아자시티딘을 투약하였다. 제12일에 전자식 캘리퍼를 이용해서 종양을 측정하였고, GraphPad Prism 소프트웨어를 이용해서 플롯팅하였다. 점선을 비히클 대조군의 평균에 그리고 mSIRPα-Fc-CD40L 그룹의 평균에 도시한다.
도 13C에 나타낸 바와 같이, 아자시티딘 단독, 페보네디스탓(MLN4924) 단독, 및 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독에 의한 치료는 종양 크기의 감소를 야기하였다. 흥미롭게도, 도 13C에 나타낸 바와 같이, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 아자시티딘 및 페보네디스탓(MLN4924) 중 하나의 조합물에 의해 야기되는 종양 감소 정도는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독, 아자시티딘 단독 및 페보네디스탓(MLN4924) 단독 각각에 의해 야기되는 것보다 더 크다. 대조적으로, 아자시티딘과 페보네디스탓(MLN4924)의 조합물에 의해 야기되는 종양 감소 정도는 아자시티딘 단독 또는 페보네디스탓(MLN4924) 단독에 의해 야기되는 것보다 더 크지 않았다(도 13C). 흥미롭게도, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질, 아자시티딘과 페보네디스탓(MLN4924)에 의한 조합 치료는 모든 다른 처리에 의해 야기되는 것보다 더 큰 종양 크기의 추가적인 감소를 야기하였다(도 13B). 따라서, 아자시티딘과 페보네디스탓(MLN4924)의 조합물에 의해 야기되는 종양 감소 정도는 아자시티딘 단독 또는 페보네디스탓(MLN4924) 단독에 의해 야기되는 것보다 크지 않지만, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질, 아자시티딘과 페보네디스탓(MLN4924)의 조합물에 의해 야기되는 종양 감소 정도는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 아자시티딘의 조합물, 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 페보네디스탓(MLN4924) 단독의 조합물에 의해 야기되는 것보다 더 크다.
아자시티딘과 페보네디스탓(MLN4924)의 조합물에 의해 야기되는 것과 같이, 항암 의약의 조합물이 항상 유리한 효과를 생성하지는 않는다. 그러나, 이러한 결과는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 저메틸화제/후성 조절자(제한 없이, 예를 들어, 아자시티딘, 5-아자-2'-데옥시사이티딘, 수베로일아닐라이드 하이드록삼산(saha), 로미뎁신, 벨리노스탓, 파노비노스탓 및 키다마이드)의 조합물이 단일 치료보다 유리할 수 있고, 따라서 본 명세서에 개시된 방법에서 유용할 수 있다는 것을 입증한다. 이러한 결과는 또한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 단백질 네딜화 저해제(제한 없이, 예를 들어, 페보네디스탓(MLN4924))의 조합물이 암에 대해 효과적일 수 있고 단일 치료보다 유리할 수 있으며, 따라서, 본 명세서에 개시된 방법에서 유용할 수 있다는 것을 입증한다. 추가로, 이러한 결과는 또한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합물, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 및 저메틸화제/후성 조절자(제한 없이, 예를 들어, 아자시티딘, 5-아자-2'-데옥시사이티딘, 수베로일아닐라이드 하이드록삼산(saha), 로미뎁신, 벨리노스탓, 파노비노스탓 및 키다마이드)과 단백질 네딜화 저해제(제한 없이, 예를 들어, 페보네디스탓(MLN4924))의 조합물이 암에 대해 효과적일 수 있고, 단일 치료 또는 이중 치료보다 유리할 수 있으며, 따라서, 본 명세서에 개시된 방법에서 유용할 수 있다는 것을 입증한다.
실시예 17: 화학치료제에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 증폭은 CD47 및/또는 식균작용 전 신호의 유도와 상관관계가 있다.
화학치료제에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 관찰된 강화작용에 대한 분자적 기초, 전- 및 항-식균 신호의 표면 발현을 연구하였다.
간략히 말해서, K652 인간 만성 골수성 백혈병 세포를 비히클 단독 대조군, 1μM 아자시티딘 또는 1μM 페보네디스탓의 존재 하에 밤새 인큐베이션시켰다. 다음 날, K652 세포를 CD47 또는 칼레티쿨린(CRT)의 표면 발현에 대해 유세포분석에 의해 분석하였다. 도 11A에 나타낸 바와 같이, 아자시티딘과 페보네디스탓(MLN4924) 둘 다 비히클 단독-처리 K652 세포에 비해 K652 세포에서 CD47의 발현을 유도하였다. 이러한 결과는 아자시티딘에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 관찰된 강화작용이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 표적인 CD47의 유도와 상관관계가 있다는 것을 입증한다.
흥미롭게도, 도 11C에 나타낸 바와 같이, 아자시티딘과 페보네디스탓(MLN4924) 둘 다 비히클 단독-처리 K652 세포에 비해 K652 세포에서 식균작용 전 마커인 칼레티쿨린의 발현을 유도하였다. 이러한 결과는 아자시티딘에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 관찰된 강화작용이 세포자멸사 전 단백질인 칼레티쿨린의 유도와 상관관계가 있다는 것을 입증한다.
다른 실험에서, Kasumi-3 인간 급성 골수세포 백혈병(AML) 세포를 비히클 단독 대조군, 1μM 페보네디스탓(MLN4924) 또는 1μM 페보네디스탓의 존재 하에 밤새 인큐베이션시켰다. 다음 날, Kasumi-3 세포를 CD47 또는 칼레티쿨린(CRT)의 표면 발현에 대해 유세포분석에 의해 분석하였다. 도 11B에 나타낸 바와 같이, 페보네디스탓(MLN4924)과 페보네디스탓(MLN4924) 둘 다 비히클 단독-처리 Kasumi-3 세포에 비해 Kasumi-3 세포에서 CD47의 발현을 유도하였다. 이러한 결과는 페보네디스탓(MLN4924)에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 관찰된 강화작용이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 표적인 CD47의 유도와 상관관계가 있다는 것을 입증한다.
추가로, 도 11D에 나타낸 바와 같이, 페보네디스탓(MLN4924)과 페보네디스탓(MLN4924) 둘 다 비히클 단독-처리 Kasumi-3 세포에 비해 Kasumi-3 세포에서 식균작용전 마커인 칼레티쿨린의 발현을 유도하였다. 이러한 결과는 페보네디스탓(MLN4924)에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 관찰된 강화작용이 세포자멸사 전 단백질인 칼레티쿨린의 유도와 상관관계가 있다는 것을 입증한다.
총괄적으로, 이러한 결과는 화학치료제에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 관찰된 강화작용이 CD47 및/또는 식균작용 전 신호의 유도와 상관관계가 있다는 것을 입증한다. 따라서, 이러한 결과는 CD47 및/또는 식균작용 전 신호의 유도가 본 명세서에 개시된 요법을 위한 환자를 선택하는 반응 또는 방법을 예측하는 방법에서 사용될 수 있다는 것을 나타낸다.
실시예 18: 돌연변이된 p53의 재활성화제인 APR-246은 p53 및 식균작용 전 신호를 유도한다.
APR-246에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 관찰된 강화작용에 대한 분자적 기초, p53 및 항-식균 신호의 표면 발현을 연구하였다.
간략히 말해서, Kasumi-1 인간 급성 골수세포 백혈병(AML) 세포를 비히클 단독 대조군, 15μM APR-246, 또는 50μM APR-246의 존재 하에 밤새 인큐베이션시켰다. 다음 날, Kasumi-1 세포를 p53 및 칼레티쿨린(CRT)의 표면 발현에 대해 유세포분석에 의해 분석하였다. 도 12A에 나타낸 바와 같이, APR-246은 비히클 단독-처리 Kasumi-1 세포에 비해 Kasumi-1 세포에서 p53의 발현의 용량-의존적 유도를 야기하였다.
흥미롭게도, 도 12B에 나타낸 바와 같이, APR-246은 비히클 단독-처리 Kasumi-1 세포에 비해 Kasumi-1 세포에서 식균작용 전 마커인 칼레티쿨린의 발현을 유도하였다. 이러한 결과는 아자시티딘에 의한 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성의 관찰된 강화작용이 세포자멸사 전 단백질인 칼레티쿨린의 유도와 상관관계가 있다는 것을 입증한다.
앞의 실시예와 함께 이러한 결과는 화학치료제가 식균작용 전 신호를 유도한다는 것을 입증한다. 따라서, 이러한 결과는 식균작용 전 신호의 유도가 본 명세서에 개시된 요법을 위한 환자를 선택하는 반응 또는 방법을 예측하는 방법에서 사용될 수 있다는 것을 나타낸다.
실시예 19: 아자시티딘 및 베네토클락스는 세포자멸사 전 마커의 발현을 증가시켰고, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성을 증폭시킨다.
세포자멸사 마커 아넥신 3 또는 세포자멸사 전 단백질 칼레티쿨린(CRT)의 표면 발현을 연구하였다. 간략히 말해서, Kasumi-3 세포를 비히클 단독 대조군, 증가된 양의 아자시티딘 또는 베네토클락스, 또는 아자시티딘과 베네토클락스의 조합물의 존재 하에 밤새 인큐베이션시켰다. 다음 날, 세포를 아넥신 또는 칼레티쿨린(CRT)의 표면 발현에 대해 유세포분석에 의해 분석하였다. 도 14A에 나타낸 바와 같이, 아자시티딘과 베네토클락스 둘 다 비히클 단독-처리 Kasumi-3 세포에 비해 용량-의존적 방식으로 Kasumi-3 세포에서 아넥신 V의 발현을 유도하였다. 또한, 매우 고농도의 아자시티딘 및 베네토클락스(각각 100μM)를 제외하고, 아자시티딘 및 베네토클락스에 의해 유도되는 세포자멸사는 대응하는 신호 처리에 비해 상가적이 아니었다(도 14A). 도 14B에 나타낸 바와 같이, 아자시티딘과 베네토클락스 둘 다 비히클 단독-처리 Kasumi-3 세포에 비해 용량-의존적 방식으로 Kasumi-3 세포에서 칼레티쿨린의 발현을 유도하였다. 또한, 매우 고농도의 아자시티딘 및 베네토클락스(각각 100μM)를 제외하고, 아자시티딘 및 베네토클락스에 의해 유도되는 세포자멸사는 대응하는 신호 처리에 비해 상가적이 아니었다(도 14B).
이러한 결과는 특히 아자시티딘과 베네토클락스가 둘 다 Kasumi-3 세포에서 세포자멸사 및 세포자멸사 전 단백질 칼레티쿨린을 유도하였다는 것을 입증한다.
SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 식균작용-자극 활성에 대한 아자시티딘 및/또는 베네토클락스에 의한 암세포의 치료 효과를 결정하였다.
간략히 말해서, Kasumi-3 AML 세포를 녹색 형광 추적자로 표지하였고, 인간 대식세포와 함께 공동 배양시켰고, (1) 비히클 단독 대조군, (2) 50㎍/㎖의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질, (3) 10μM 아자시티딘, (4) 50㎍/㎖의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 + 10μM 아자시티딘, (5) 1μM 베네토클락스, (6) 50㎍/㎖의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 + 1μM 베네토클락스, 또는 (7) 50㎍/㎖의 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 + 1μM 베네토클락스 + 10μM 아자시티딘으로 처리하였다. 세포를 37℃에서 5% CO2의 존재 하에 4시간 동안 인큐베이션시켰다. 이 인큐베이션 후에, 세포를 채취하고, 항-CD11b 항체(대식세포 마커)로 치료하고, 유세포분석을 이용해서 분석하였다. 종양 신호의 중첩(녹색 형광 추적자) 및 대식세포(항-CD11b 항체 염색)에 의해 양의 식균작용을 결정하였다. 최대 식균작용 값을 1로 설정하고, 이어서, 모든 다른 복제물을 그에 따라 정규화함으로써 식균지수를 계산하였다. 식균지수를 표시된 치료에 대해 플롯팅하였다. 도 14C에 나타낸 바와 같이, 비히클 단독 대조군로 처리한 Kasumi-3 세포는 배경 수준에서 인간 대식세포에 의해 식균되었다. 비히클 단독-처리 Kasumi-3 세포에 비해, SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독(p < 0.05), 아자시티딘 단독(p < 0.0001), 또는 베네토클락스 단독(p < 0.05)으로 처리한 Kasumi-3 세포는 증가된 수준의 식균작용을 나타냈다(도 14C). 도 14C에 나타낸 바와 같이, 아자시티딘과 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합물로 처리한 세포는 비히클 단독-처리 세포(p < 0.0001), 아자시티딘 단독으로 치료한 세포(p < 0.05), 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독으로 치료한 세포(p < 0.0001)에 비해 증가된 식균작용 수준을 나타냈다. 추가로, 도 14C에 나타낸 바와 같이, 베네토클락스와 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합물로 처리한 세포는 비히클 단독-처리 세포(p < 0.0001), 베네토클락스 단독으로 치료한 세포(p < 0.05), 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독으로 치료한 세포(p < 0.001)에 비해 증가된 식균작용 수준을 나타냈다. 흥미롭게도, 도 14C에 나타낸 바와 같이, 아자시티딘, 베네토클락스와 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합물로 처리한 세포는 비히클 단독-처리 세포(p < 0.0001), 아자시티딘 단독으로 치료한 세포(p < 0.001), 베네토클락스 단독으로 치료한 세포(p < 0.0001), 또는 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질 단독으로 치료한 세포(p < 0.0001), 아자시티딘과 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합물로 처리한 세포, 또는 베네토클락스와 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질의 조합물로 처리한 세포(p < 0.001)에 비해 증가된 식균작용 수준을 나타냈다.
이러한 결과는 종양 아자시티딘 및/또는 베네토클락스와 SIRPα-Fc-CD40L의 조합물이 세포의 식균작용을 하였다는 것을 입증한다. 따라서, 이러한 결과는 특히 (1) SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 아자시티딘에 의한 암의 병용 요법이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 아자시티딘 둘 다에 비해 우수한 효능을 생성할 가능성이 있고; (2) SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 베네토클락스에 의한 암의 병용 요법이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질과 베네토클락스 둘 다에 비해 우수한 효능을 생성할 가능성이 있으며, 그리고 (3) SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질, 아자시티딘 및 베네토클락스에 의한 암의 병용 요법이 SIRPα-Fc-CD40L 키메라 단백질, 아자시티딘 및 베네토클락스 각각에 비해 우수한 효능을 생성할 가능성이 있다는 것을 나타낸다.
참조에 의한 원용
본 명세서에 언급된 모든 특허 및 간행물은 이들의 전문이 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
본 명세서에서 논의된 간행물은 본 출원의 출원일 전에 이들의 개시내용에 대해서만 제공된다. 본 명세서의 어떤 것도 본 개시내용이 선행 개시내용에 의해 이러한 간행물에 선행한다는 자격을 부여하지 않는다는 용인으로서 해석되어서는 안 된다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 모든 표제는 단순히 조직화를 위한 것이고, 임의의 방식으로 본 개시내용을 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 임의의 개개 부문의 내용은 모든 부문에 동일하게 적용 가능할 수 있다.
균등론
본 개시내용은 구체적 실시형태와 관련하여 개시하였지만, 추가 수정이 가능하고, 본 출원이 일반적으로 본 개시내용의 원리를 따르고, 본 개시내용이 속하는 기술분야에서 공지되거나 관례적인 관행 내에 있고, 본 명세서에서 전술한 필수 특징에 적용될 수 있는 바와 같고 그리고 첨부된 청구범위의 범주 내에 따르는 바와 같이, 본 개시내용의 이러한 벗어남을 포함하여, 본 개시내용의 임의의 변화, 용도 또는 각색을 아우르는 것으로 의도된다는 것이 이해될 것이다.
당업자는 단지 일상적인 실험을 이용하여, 본 명세서에 구체적으로 개시된 구체적 실시형태에 대한 수많은 균등물을 인식하거나, 확인할 수 있다. 이러한 균등물은 다음의 청구범위의 범주 내에 포괄되는 것으로 의도된다.
SEQUENCE LISTING <110> Shattuck Labs, Inc. <120> COMBINATION THERAPIES WITH SIRP ALPHA-BASED CHIMERIC PROTEINS <130> WO/2022/187584 <140> PCT/US2022/018853 <141> 2022-03-04 <150> US 63/308,304 <151> 2022-02-09 <150> US 63/157,324 <151> 2021-03-05 <160> 63 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 217 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Polypeptide <400> 1 Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 1 5 10 15 Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 20 25 30 Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr 35 40 45 Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 50 55 60 Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 65 70 75 80 Gln Asp Trp Leu Ser Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Ser Lys 85 90 95 Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Asn Ala Thr Gly Gln 100 105 110 Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met 115 120 125 Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 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Gly 130 135 140 Phe Ser Pro Arg Asp Ile Thr Leu Lys Trp Phe Lys Asn Gly Asn Glu 145 150 155 160 Leu Ser Asp Phe Gln Thr Asn Val Asp Pro Val Gly Glu Ser Val Ser 165 170 175 Tyr Ser Ile His Ser Thr Ala Lys Val Val Leu Thr Arg Glu Asp Val 180 185 190 His Ser Gln Val Ile Cys Glu Val Ala His Val Thr Leu Gln Gly Asp 195 200 205 Pro Leu Arg Gly Thr Ala Asn Leu Ser Glu Thr Ile Arg Val Pro Pro 210 215 220 Thr Leu Glu Val Thr Gln Gln Pro Val Arg Ala Glu Asn Gln Val Asn 225 230 235 240 Val Thr Cys Gln Val Arg Lys Phe Tyr Pro Gln Arg Leu Gln Leu Thr 245 250 255 Trp Leu Glu Asn Gly Asn Val Ser Arg Thr Glu Thr Ala Ser Thr Val 260 265 270 Thr Glu Asn Lys Asp Gly Thr Tyr Asn Trp Met Ser Trp Leu Leu Val 275 280 285 Asn Val Ser Ala His Arg Asp Asp Val Lys Leu Thr Cys Gln Val Glu 290 295 300 His Asp Gly Gln Pro Ala Val Ser Lys Ser His Asp Leu Lys Val Ser 305 310 315 320 Ala His Pro Lys Glu Gln Gly Ser Asn Thr Ala Ala Glu Asn Thr Gly 325 330 335 Ser Asn Glu Arg Asn Ile Tyr Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro 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545 550 555 560 Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys Ile Glu Gly Arg Met 565 570 575 Asp Leu Gln Leu His Trp Arg Leu Gly Glu Met Val Thr Arg Leu Pro 580 585 590 Asp Gly Pro Ala Gly Ser Trp Glu Gln Leu Ile Gln Glu Arg Arg Ser 595 600 605 His Glu Val Asn Pro Ala Ala His Leu Thr Gly Ala Asn Ser Ser Leu 610 615 620 Thr Gly Ser Gly Gly Pro Leu Leu Trp Glu Thr Gln Leu Gly Leu Ala 625 630 635 640 Phe Leu Arg Gly Leu Ser Tyr His Asp Gly Ala Leu Val Val Thr Lys 645 650 655 Ala Gly Tyr Tyr Tyr Ile Tyr Ser Lys Val Gln Leu Gly Gly Val Gly 660 665 670 Cys Pro Leu Gly Leu Ala Ser Thr Ile Thr His Gly Leu Tyr Lys Arg 675 680 685 Thr Pro Arg Tyr Pro Glu Glu Leu Glu Leu Leu Val Ser Gln Gln Ser 690 695 700 Pro Cys Gly Arg Ala Thr Ser Ser Ser Arg Val Trp Trp Asp Ser Ser 705 710 715 720 Phe Leu Gly Gly Val Val His Leu Glu Ala Gly Glu Lys Val Val Val 725 730 735 Arg Val Leu Asp Glu Arg Leu Val Arg Leu Arg Asp Gly Thr Arg Ser 740 745 750 Tyr Phe Gly Ala Phe Met Val 755

Claims (82)

  1. 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암 치료 방법으로서,
    (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인,
    (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및
    (c) 상기 제1 도메인을 상기 제2 도메인과 연결하는 링커
    를 포함하는 이종성 키메라 단백질을 포함하는 제1 약제학적 조성물을 상기 대상체에게 투여하는 단계; 및
    저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화(neddylation) 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 상기 대상체에게 투여하는 단계
    를 포함하는, 암 치료 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 제1 약제학적 조성물과 상기 제2 약제학적 조성물은 동시에 투여되는, 암 치료 방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 제1 약제학적 조성물은 상기 제2 약제학적 조성물이 투여된 후에 투여되는, 암 치료 방법.
  4. 제1항에 있어서, 상기 제1 약제학적 조성물은 상기 제2 약제학적 조성물이 투여되기 전에 투여되는, 암 치료 방법.
  5. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 약제학적 조성물의 용량은 상기 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 없거나 받고 있지 않은 대상체에게 투여되는 상기 제1 약제학적 조성물의 용량보다 적은, 암 치료 방법.
  6. 제1항, 제2항 및 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 투여되는 상기 제2 약제학적 조성물의 용량은 상기 제1 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 없거나 받고 있지 않은 대상체에게 투여되는 상기 제2 약제학적 조성물의 용량보다 적은, 암 치료 방법.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 상기 제1 약제학적 조성물에 의한 치료만을 받은 적이 있거나 이러한 치료만을 받고 있는 대상체에 비해 위장 염증 및 체중감소 없이 증가된 생존 기회, 및/또는 종양 크기 또는 암 유병률의 감소를 갖는, 암 치료 방법.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 상기 제2 약제학적 조성물에 의한 치료만을 받은 적이 있거나 이러한 치료만을 받고 있는 대상체에 비해 위장 염증 및 체중감소 없이 증가된 생존 기회, 및/또는 종양 크기 또는 암 유병률의 감소를 갖는, 암 치료 방법.
  9. 대상체의 암 치료 방법으로서,
    (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인,
    (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및
    (c) 상기 제1 도메인을 상기 제2 도메인과 연결하는 링커
    를 포함하는 이종성 키메라 단백질을 포함하는 약제학적 조성물을 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하되,
    상기 대상체는 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제를 포함하는 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있는, 암 치료 방법.
  10. 제9항에 있어서, 상기 대상체에게 투여되는 약제학적 조성물의 용량은 상기 제2 약제학적 조성물에 의한 치료를 받은 적이 없거나 받고 있지 않은 대상체에게 투여되는 약제학적 조성물의 용량보다 적은, 암 치료 방법.
  11. 대상체의 암 치료 방법으로서,
    저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체 또는 이들의 조합물로부터 선택된 항암제를 포함하는 제2 약제학적 조성물을 상기 대상체에게 투여하는 단계
    를 포함하되,
    상기 대상체는
    (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인,
    (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및
    (c) 상기 제1 도메인을 상기 제2 도메인과 연결하는 링커
    를 포함하는 이종성 키메라 단백질에 의한 치료를 받은 적이 있거나 받고 있는, 암 치료 방법.
  12. 제11항에 있어서, 상기 대상체에게 제공되는 상기 약제학적 조성물의 용량은 상기 이종성 키메라 단백질에 의한 치료를 받은 적이 없거나 받고 있지 않은 대상체에게 제공되는 상기 약제학적 조성물의 용량보다 적은, 암 치료 방법.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 저메틸화제/후성 조절자를 포함하는, 암 치료 방법.
  14. 제13항에 있어서, 상기 저메틸화제/후성 조절자는 아자시티딘, 5-아자-2'-데옥시사이티딘, 수베로일아닐라이드 하이드록삼산(saha), 로미뎁신, 벨리노스탓, 파노비노스탓 및 키다마이드로부터 선택되는, 암 치료 방법.
  15. 제14항에 있어서, 상기 저메틸화제/후성 조절자는 아자시티딘인, 암 치료 방법.
  16. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 프로테아좀 저해제를 포함하는, 암 치료 방법.
  17. 제16항에 있어서, 상기 프로테아좀 저해제는 보르테조밉, 카르필조밉 및 익사조밉으로부터 선택되는, 암 치료 방법.
  18. 제17항에 있어서, 상기 프로테아좀 저해제는 보르테조밉인, 암 치료 방법.
  19. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 항대사물질을 포함하는, 암 치료 방법.
  20. 제19항에 있어서, 상기 항대사물질은 5-플루오로유라실(5-FU), 카페시타빈, 플록수리딘, 사이타라빈(ARA-C), 겜시타빈, 데시타빈 및 비다자(vidaza)로부터 선택되는, 암 치료 방법.
  21. 제20항에 있어서, 상기 항대사물질은 사이타라빈(ARA-C)인, 암 치료 방법.
  22. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 DNA 합성 저해제를 포함하는, 암 치료 방법.
  23. 제22항에 있어서, 상기 DNA 합성 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU), 카페시타빈, 플록수리딘, 사이타라빈(ARA-C), 겜시타빈, 데시타빈 및 비다자로부터 선택되는, 암 치료 방법.
  24. 제23항에 있어서, 상기 DNA 합성 저해제는 사이타라빈(ARA-C) 또는 5-플루오로유라실(5-FU)인, 암 치료 방법.
  25. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 면역관문 저해제를 포함하는, 암 치료 방법.
  26. 제25항에 있어서, 상기 면역관문 저해제는 CTLA-4, PD-1 및 PD-L1로부터 선택된 경로를 저해하는 제제를 포함하는, 암 치료 방법.
  27. 제26항에 있어서, 상기 면역관문 저해제는 항-PD-L1 항체를 포함하는, 암 치료 방법.
  28. 제27항에 있어서, 상기 항-PD-L1 항체는 아테졸리주맙, 더발루맙, 아벨루맙, 엔바폴리맙, BMS-936559, CK-301, CS-1001, SHR-1316(HTI-1088), CBT-502(TQB-2450) 및 BGB-A333으로부터 선택되는, 암 치료 방법.
  29. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 안트라사이클린을 포함하는, 암 치료 방법.
  30. 제29항에 있어서, 상기 안트라사이클린은 다우노루비신, 독소루비신, 에피루비신, 이다루비신, 미톡산트론 및 발루비신으로부터 선택되는, 암 치료 방법.
  31. 제30항에 있어서, 상기 안트라사이클린은 독소루비신인, 암 치료 방법.
  32. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 토포아이소머라제 II 저해제를 포함하는, 암 치료 방법.
  33. 제32항에 있어서, 상기 토포아이소머라제 II 저해제는 독소루비신, 에피루비신, 발루비신, 다우노루비신, 이다루비신, 피톡산트론, 픽산트론, 에토포사이드, 테니포사이드 및 암사크린으로부터 선택되는, 암 치료 방법.
  34. 제33항에 있어서, 상기 토포아이소머라제 II 저해제는 독소루비신인, 암 치료 방법.
  35. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 Bcl2 저해제를 포함하는, 암 치료 방법.
  36. 제35항에 있어서, 상기 Bcl2 저해제는 오블리메르센, 나비토클락스(ABT-263), 베네토클락스(ABT-199), 오바토클락스 메실레이트(GX15-070) 및 AT-101로부터 선택되는, 암 치료 방법.
  37. 제36항에 있어서, 상기 Bcl2 저해제는 베네토클락스인, 암 치료 방법.
  38. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 단백질 네딜화 저해제를 포함하는, 암 치료 방법.
  39. 제38항에 있어서, 상기 단백질 네딜화 저해제는 페보네디스탓(MLN4924)인, 암 치료 방법.
  40. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 미세소관-표적화제를 포함하는, 암 치료 방법.
  41. 제40항에 있어서, 상기 미세소관-표적화제는 파클리탁셀, 에포틸론, 도세탁셀, 디스코덜모라이드, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 비노렐빈, 빈플루닌, 돌라스타틴, 할리콘드린, 헤미아스텔린 및 크립토피신 52로부터 선택되는, 암 치료 방법.
  42. 제41항에 있어서, 상기 미세소관-표적화제는 파클리탁셀인, 암 치료 방법.
  43. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 티미딜산 합성효소(TS) 저해제를 포함하는, 암 치료 방법.
  44. 제43항에 있어서, 상기 티미딜산 합성효소(TS) 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU), 6-머캅토퓨린(6-MP), 카페시타빈, 사이타라빈, 플록수리딘, 플루다라빈, 겜시타빈, 하이드록시카바마이드, 메토트렉세이트, 페메트렉세드, 포토트렉세이트, 랄티트렉세드, 놀라트렉세드(nolatrexed), ZD9331 및 GS7904L로부터 선택되는, 암 치료 방법.
  45. 제44항에 있어서, 상기 티미딜산 합성효소(TS) 저해제는 5-플루오로유라실(5-FU)인, 암 치료 방법.
  46. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 백금 약물을 포함하는, 암 치료 방법.
  47. 제46항에 있어서, 상기 백금 약물은 시스플라틴, 카보플라틴, 옥살리플라틴, 네다플라틴, 헵타플라틴 및 로바플라틴으로부터 선택되는, 암 치료 방법.
  48. 제47항에 있어서, 상기 백금 약물은 시스플라틴인, 암 치료 방법.
  49. 제47항에 있어서, 상기 백금 약물은 옥살리플라틴인, 암 치료 방법.
  50. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 토포아이소머라제 I 저해제를 포함하는, 암 치료 방법.
  51. 제50항에 있어서, 상기 토포아이소머라제 I 저해제는 캠프토테신, 벨로테칸 토포테칸 및 이리노테칸으로부터 선택되는, 암 치료 방법.
  52. 제50항에 있어서, 상기 토포아이소머라제 I 저해제는 이리노테칸인, 암 치료 방법.
  53. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 항-BCMA 항체를 포함하는, 암 치료 방법.
  54. 제53항에 있어서, 상기 항-BCMA 항체는 C12A3.2인, 암 치료 방법.
  55. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 항-CD38 항체를 포함하는, 암 치료 방법.
  56. 제55항에 있어서, 상기 항-CD38 항체는 다라투무맙 및 이사툭시맙으로부터 선택되는, 암 치료 방법.
  57. 제56항에 있어서, 상기 항-CD38 항체는 다라투무맙인, 암 치료 방법.
  58. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 면역조절 이미드 약물(IMiD)을 포함하는, 암 치료 방법.
  59. 제58항에 있어서, 상기 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 아프레밀라스트, 탈리도마이드, 레날리도마이드 및 포말리도마이드로부터 선택되는, 암 치료 방법.
  60. 제59항에 있어서, 상기 면역조절 이미드 약물(IMiD)은 레날리도마이드 또는 포말리도마이드인, 암 치료 방법.
  61. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 항-SLAMF7 항체를 포함하는, 암 치료 방법.
  62. 제61항에 있어서, 상기 항-SLAMF7 항체는 엘로투주맙인, 암 치료 방법.
  63. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 항-CD123 항체를 포함하는, 암 치료 방법.
  64. 제63항에 있어서, 상기 항-CD123 항체는 탈라코투주맙인, 암 치료 방법.
  65. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 돌연변이된 p53의 재활성화제를 포함하는, 암 치료 방법.
  66. 제65항에 있어서, 돌연변이된 p53의 상기 재활성화제는 Prima-1 또는 APR-246인, 암 치료 방법.
  67. 제66항에 있어서, 돌연변이된 p53의 상기 재활성화제는 APR-246인, 암 치료 방법.
  68. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 약제학적 조성물은 항-FOLR1 항체를 포함하되, 선택적으로 상기 항-FOLR1 항체는 파레투주맙 및 미르베툭시맙으로부터 선택되는, 암 치료 방법.
  69. 제68항에 있어서, 상기 항-FOLR1 항체는 파레투주맙인, 암 치료 방법.
  70. 제1항 내지 제69항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 이종성 키메라 단백질은 SIRPα(CD172a)의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제1 도메인, 및/또는 CD40L, OX40L 또는 LIGHT의 실질적으로 전체의 세포외 도메인을 포함하는 제2 도메인을 포함하는, 암 치료 방법.
  71. 제1항 내지 제70항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 이종성 키메라 단백질은,
    (a) SIRPα(CD172a)의 일부를 포함하는 제1 도메인,
    (b) CD40L, OX40L 또는 LIGHT의 일부를 포함하는 제2 도메인, 및
    (c) 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함하는 링커
    를 포함하는, 암 치료 방법.
  72. 제1항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 링커는 가요성 아미노산 서열, IgG 힌지 영역 및 항체 서열로부터 선택되는 폴리펩타이드인, 암 치료 방법.
  73. 제1항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 링커는 이황화 결합을 형성할 수 있는 적어도 하나의 시스테인 잔기를 포함하고/하거나 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함하는, 암 치료 방법.
  74. 제73항에 있어서, 상기 링커는 IgG1 또는 IgG4, 예를 들어, 인간 IgG4 또는 인간 IgG4로부터 유래된 힌지-CH2-CH3 Fc 도메인을 포함하는, 암 치료 방법.
  75. 제74항에 있어서, 상기 링커는 서열번호 1, 서열번호 2 또는 서열번호 3의 아미노산 서열과 적어도 95% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 암 치료 방법.
  76. 제1항 내지 제75항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 도메인은 서열번호 57의 아미노산 서열과 적어도 90%, 또는 적어도 93%, 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 암 치료 방법.
  77. 제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 도메인은 서열번호 58, 서열번호 59 또는 서열번호 62의 아미노산 서열과 적어도 90%, 또는 적어도 93%, 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 암 치료 방법.
  78. 제77항에 있어서, 상기 제2 도메인은 서열번호 58의 아미노산 서열과 적어도 90%, 또는 적어도 93%, 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 암 치료 방법.
  79. 제1항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 이종성 키메라 단백질은 서열번호 60, 서열번호 61 또는 서열번호 63의 아미노산 서열과 적어도 90%, 또는 적어도 93%, 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 암 치료 방법.
  80. 제78항 또는 제79항에 있어서, 상기 이종성 키메라 단백질은 서열번호 60의 아미노산 서열과 적어도 90%, 또는 적어도 93%, 적어도 95%, 또는 적어도 96%, 또는 적어도 98%, 또는 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 암 치료 방법.
  81. 제1항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 암은 기저세포암종, 담도암; 방광암; 뼈암; 뇌 및 중추 신경계암; 유방암; 복막암; 자궁경부암; 융모암; 결장 및 직장암; 결합 조직암; 소화계의 암; 자궁내막암; 식도암; 눈암; 두경부암; 위암(위장암 포함); 교모세포종; 간암종; 간암; 상피내 신생물; 신장 또는 신세포암; 후두암; 백혈병; 간암; 폐암(예를 들어, 소세포 폐암, 비소세포 폐암, 폐의 선암종, 및 폐의 편평상피암종); 흑색종; 골수종; 신경아세포종; 구강암(입술, 혀, 입 및 인두); 난소암; 췌장암; 전립선암; 망막모세포종; 횡문근육종; 직장암; 호흡계의 암; 침샘 암종; 육종; 피부암; 편평세포암; 위암; 고환암; 갑상선암; 자궁 또는 자궁내막암; 비뇨기계의 암; 외음부암; 호지킨 및 비호지킨 림프종뿐만 아니라 B-세포 림프종을 포함하는 림프종(저등급/소포 비호지킨 림프종(NHL); 소형 림프구성(SL) NHL; 중간 등급/소포 NHL; 중간 등급 미만성 NHL; 고등급 면역아세포 NHL; 고등급 림프아구성 NHL; 고등급 소형 비절단 세포 NHL; 거대 종양 NHL; 맨틀 세포 림프종; AIDS-관련 림프종; 및 발덴스트롬 마크로글로불린혈증; 만성 림프구성 백혈병(CLL); 급성 림프아구성 백혈병(ALL); 털세포 백혈병; 만성 골수아구성 백혈병뿐만 아니라 다른 암종 및 육종; 및 이식 후 림프증식성 장애(PTLD)뿐만 아니라 모반증, 부종(예컨대, 뇌 종양과 관련) 및 메이그 증후군과 관련된 비정상적 혈관증식이거나, 이들과 관련되는, 암 치료 방법.
  82. 암 치료를 위한 의약으로서, 상기 의약은 제1 약제학적 조성물 및 제2 약제학적 조성물을 포함하되, 상기 제1 약제학적 조성물 및 상기 제2 약제학적 조성물은 병용하여 동시에 또는 순차적으로 투여되되,
    상기 제1 약제학적 조성물은,
    (a) SIRPα(CD172a) 리간드에 결합할 수 있는, SIRPα(CD172a)의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제1 도메인,
    (b) CD40L 수용체에 결합할 수 있는, CD40L의 세포외 도메인의 일부, OX40L 수용체에 결합할 수 있는, OX40L의 세포외 도메인의 일부 또는 LIGHT 수용체에 결합할 수 있는, LIGHT의 세포외 도메인의 일부를 포함하는, 제2 도메인, 및
    (c) 상기 제1 도메인을 상기 제2 도메인과 연결하는 링커
    를 포함하는 이종성 키메라 단백질을 포함하고,
    상기 제2 약제학적 조성물은 저메틸화제/후성 조절자, 프로테아좀 저해제, 항대사물질, DNA 합성 저해제, 면역관문 저해제, 안트라사이클린, 토포아이소머라제 II 저해제, 선천성 면역관문 저해제, Bcl2 저해제, 단백질 네딜화 저해제, 미세소관-표적화제, 티미딜산 합성효소(TS) 저해제, 백금 약물, 토포아이소머라제 I 저해제, 항-BCMA 항체, 항-CD38 항체, 면역조절 이미드 약물(IMiD), 항-SLAMF7 항체, 항-CD123 항체, 돌연변이된 p53의 재활성화제 및 항-FOLR1 항체, 또는 이들의 조합물로부터 선택되는 항암제를 포함하는, 의약.
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