KR20230144804A - 머위와 붓꽃의 혼합 추출 발효물을 포함하는 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물 - Google Patents
머위와 붓꽃의 혼합 추출 발효물을 포함하는 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 머위와, 붓꽃 씨앗 및 뿌리를 혼합한 혼합 추출물의 버섯균사체 발효물을 유효성분으로 포함하여, 항염증 활성 및 피부재생 활성을 갖는 것을 특징으로 하는, 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물을 개시한다.
Description
본 발명은 머위와 붓꽃의 혼합 추출 발효물을 포함하여, 아토피 피부염, 알레르기, 습진, 무좀, 피부 가려움증, 비듬, 물집 등 피부염을 예방하고 피부상태를 개선하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부의 중요한 기능 중 하나는 외부 환경으로부터 신체를 보호하고, 내부 체액의 소실을 막는 장벽기능을 제공하는 것이다. 또한, 자외선, 독성 물질, 미생물 또는 물리적 자극 등의 외부 유해인자들에 대한 장벽기능도 수행하고 있다. 이러한 피부장벽 기능이 피부 내외부의 다양한 자극에 의해 손상되면 피부가 건조해지거나 가려움 및 염증반응을 일으키게 된다.
흔히 사용하는 화장품이나 세정제 등은 유화제 또는 계면활성제, 알코올, 보존제, 향 등으로 인해 피부자극을 유발할 수 있고, 최근에는 파라벤 프리 처방에 사용하는 대체원료 등이 자극을 유발하는 경우가 많다.
이러한 피부 자극은 각질형성세포의 구조적인 변화와 함께 interleukin-1α (IL-1α), tumor neurosis factor-α (TNF-α), interleukin-6 (IL-6), interleukin-8 (IL-8)와 같은 염증 유발 사이토카인(pro-inflammatory cytokines)의 분비를 유도하고, 심한 경우에는 피부염으로 악화될 수 있다. 특히 IL-1α와 TNF-α는 초기 자극에 대한 중요한 염증 유발인자로서 분비되고, 이어 IL-6과 IL-8의 발현을 유도하여 자극으로 인한 일련의 염증반응을 유도한다.
한편, inducible nitric oxide synthase (iNOS)와 cyclooxygenase-2 (COX-2)는 각각 nitric oxide (NO) 및 prostaglandin E2 (PGE2)를 생성하여 염증반응을 일으킨다. iNOS에 의해 생성된 NO는 조직 손상, 유전자 변이 등의 염증을 유발한다.
또한 피부 각질형성세포는 피부 재생과 상처치유 등 피부조직의 재형성 과정에서 매우 중요한 역할을 한다고 알려져 있다. 피부 각질형세포인 HaCaT 세포주는 화학적 또는 물리적 자극에 의한 손상을 받게 되면 다양한 케모카인(chemokine)과 사이토카인이 발현됨과 동시에 피부 손상 부위로 이동하여 피부 세포의 증식을 유도한다고 알려져 있다. 따라서 피부조직의 재 상피화 및 상처 치유에 각질 형성 세포의 증식은 매우 중요하다.
한편 아토피 피부염의 경우, 알레르겐과 같은 외부자극원이 아토피피부염 환자의 손상된 피부장벽을 투과하여 피부에 도달하게 되면, 알레르기 염증 반응이 일어나고, 염증 반응에 의해 만들어진 히스타민을 비롯한 여러 매개체들은 가려움증을 야기시킨다. 이렇게 시작된 가려움증은 긁는 행동을 유발시키고, 긁으면서 발생한 조직 손상 등의 결과 다시 피부염증이 악화되면서 소위 '가려움증 - 긁기' 악순환(itch-scratch vicious cycle)의 고리가 완성된다.
정상인에서는 피부장벽에 손상이 생기더라도 그것이 일시적인 장벽기능의 저하를 일으킨 다음 항상성 유지 차원에서 일어나는 생체 반응에 의해 장벽기능이 회복되며 정상화된다. 하지만, 아토피피부염 환자에서는 사소한 피부장벽의 손상이 일어나더라도 그것이 피부의 염증 반응에 불을 붙이고 그 염증 반응이 피부장벽 기능을 다시 손상시켜 생리적으로 일어나는 장벽기능 회복을 위한 항상성 유지 노력을 압도하며 '장벽손상 → 피부염증 → (다시) → 장벽손상 → …'으로 이어지는 악순환을 통해 정상궤도를 벗어난 '건조한 피부에 발생하는 피부의 염증 반응'으로 귀결되는 경우가 많다.
또한 임상적으로 가장 중요한 의미를 갖는 것은 피부염증으로부터 가려움증에 이르는 길이 하나가 아니라 다양한 갈래길로 존재한다는 점이다. 그리고 아토피피부염의 가려움증은 한번 발생하면 '가려움증 - 긁기'의 악순환에 의해 끊임없이 증폭되면서 질환의 만성화에 중요한 역할을 한다. 이처럼 아토피피부염의 가려움증은, 외부자극이 손상된 장벽을 뚫고 피부에 도달하면, 알레르기 염증 반응이 유발되고, 그 결과 발생한 가려움증이 '가려움증 → 긁기 → 염증 → (다시) → 가려움증 → …'의 악순환을 통해 걷잡을 수 없이 증폭된다.
따라서 아토피 피부염의 개선 또는 예방을 위해서는, 피부의 내재적인 장벽 회복기능을 활성화하여 피부 스스로 부족한 성분을 다시 만들어 내도록 하는 능동적 개념의 보습제도 필요하지만, 피부염증 반응을 억제하는 것이 매우 중요하다. 이를 위해 대부분의 아토피피부염 치료제로서 염증 반응을 억제하기 위한 스테로이드, 칼시뉴린 억제제 등이 현재 처방되고 있다.
이러한 피부염증 반응의 억제는 '가려움증 - 긁기'의 악순환의 고리만을 억제하는 것이 아니라 피부의 안(INSIDE)과 밖(OUTSIDE) 사이의 악순환의 고리도 효과적으로 차단할 수 있다. 즉, 피부염증 반응을 억제하는 것은 "INSIDE-OUTSIDE" 악순환에 의해 장벽기능이 회복되지 못하는 병적 상태에서 벗어나 정상적인 궤도로 회복되는 데 도움이 된다. 결론적으로, 피부의 염증 반응은 두 악순환(itch-scratch vicious cycle 및 INSIDE-OUTSIDE vicious cycle)의 연결고리에 해당되고, 염증 반응의 차단만으로 한꺼번에 두 가지 악순환이 차단할 수 있기 때문에 아토피피부염에 있어서는 염증억제가 효과적인 치료법이 될 수 있다.
그러므로 피부자극과 염증 발생을 억제하고 세포의 증식을 유도하는 천연물 유래의 소재는 피부염의 개선 및 예방을 위한 안전한 화장품 소재로서 많은 이점을 제공할 수 있다.
이에 본 발명자들은 상기와 같은 기술적 문제에 착안하여 피부 자극에 따른 초기 염증 유발 인자를 타겟으로 하면서 피부재생을 촉진하는 화장품 소재를 개발하기 위해 다양한 천연물 유래 소재에 대한 실험을 진행한 끝에, 머위와 붓꽃의 혼합 발효물이 피부염 유발을 억제하고, 민감성 피부 등을 위한 자극완화 및 피부 재생을 통하여, 피부염 예방 또는 피부개선용 화장품 소재로 활용할 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
따라서 본 발명은 머위와 붓꽃의 혼합 추출물의 발효물을 포함하는 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물을 제공하는 것을 기술적 해결과제로 한다.
또한 본 발명은 상기 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물을 포함하는 화장품 조성물을 제공하는 것을 다른 기술적 해결과제로 한다.
또한 본 발명은 상기 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물을 제조하는 방법을 제공하는 것을 또다른 기술적 해결과제로 한다.
상술한 기술적 과제를 해결하기 위하여 본 발명은,
머위와, 붓꽃 씨앗 및 뿌리를 혼합한 혼합 추출물의 버섯균사체 발효물을 유효성분으로 포함하여, 항염증 활성 및 피부재생 활성을 갖는 것을 특징으로 하는, 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물을 제공한다.
상기 본 발명의 조성물은 피부표피 세포 증식활성에 의한 피부 재생 활성과, NO 생성 또는 IL-6 생성 저해에 의한 항염증 활성을 나타내는 것을 특징으로 한다.
또한 본 발명에 있어서, 상기 버섯균사체는 영지버섯, 상황버섯 또는 동충하초 중에서 선택되는 것을 특징으로 한다.
또한 본 발명에 있어서, 상기 피부염은 아토피 피부염인 것을 특징으로 한다.
또한 상기 다른 기술적 과제를 해결하기 위한 본 발명은 상술한 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물을 포함하는 화장품 조성물을 제공한다.
또한 상기 또다른 기술적 과제를 해결하기 위한 본 발명은, 건조 및 파쇄하여 준비한 머위와, 붓꽃 씨앗 및 뿌리를 혼합 및 추출하는 단계; 상기 단계에서 혼합된 혼합 추출물을 배지에 첨가한 후 상기 배지를 멸균하는 단계; 상기 멸균된 배지에 버섯균사체를 접종하고 배양하는 단계; 및 상기 단계에서 배양된 배양물을 멸균 및 여과하여 발효물을 수득하는 단계를 포함하여 제조되는 것을 특징으로 하는, 항염증 활성 및 피부재생 활성을 갖는 것을 특징으로 하는, 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물의 제조방법을 제공한다.
상술한 본 발명에 따르면, 머위와, 붓꽃 씨앗 및 뿌리를 혼합한 혼합 추출물의 버섯균사체 발효물을 유효성분으로 포함함으로써, 염증 유발 사이토카인인 IL-6의 생성을 저해하고, 염증 유발 인자인 NO의 생성을 저해하는 항염증 활성과, 피부표피세포 증식을 통한 피부재생 활성을 나타낼 수 있다. 이에 따라 본 발명은 아토피 피부염, 알레르기, 습진, 무좀, 피부 가려움증, 비듬, 물집 등 피부염을 예방하고 피부상태를 개선할 수 있는 효과가 있다. 이를 통해 가려움증, 긁기, 염증의 악순환을 차단할 수 있는 효과가 있다.
따라서 본 발명은 피부 자극 완화, 피부염 예방 및 개선, 아토피 피부염 예방 및 개선, 여드름 개선 및 예방용 화장품 원료로서 효과적으로 적용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 머위와 붓꽃의 혼합 추출물을 제조하는 공정을 나타낸 모식도이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 머위와 붓꽃의 혼합 발효물을 제조하는 공정을 나타낸 모식도이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 각 추출물 및 발효물의 피부표피세포 증식활성을 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 각 추출물 및 발효물의 NO 생성활성(위) 및 IL-6 생성 활성(아래)을 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 일 제조예에 따른 화장품 조성물의 적용에 따른 아토피 피부염의 개선정도를 촬영한 사진이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 머위와 붓꽃의 혼합 발효물을 제조하는 공정을 나타낸 모식도이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 각 추출물 및 발효물의 피부표피세포 증식활성을 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 각 추출물 및 발효물의 NO 생성활성(위) 및 IL-6 생성 활성(아래)을 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 일 제조예에 따른 화장품 조성물의 적용에 따른 아토피 피부염의 개선정도를 촬영한 사진이다.
이하 본 발명에 따른 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물을 상세히 설명하기로 한다.
본 발명은 다양한 변경을 가할 수 있고 여러 가지 형태를 가질 수 있는바, 실시 예들을 본문에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나 이는 본 발명을 특정한 개시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
일 양태로서 본 발명은, 머위와, 붓꽃 씨앗 및 뿌리를 혼합한 혼합 추출물의 버섯균사체 발효물을 유효성분으로 포함하여, 항염증 활성 및 피부재생 활성을 갖는 것을 특징으로 하는, 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물을 제공한다.
다른 양태로서 본 발명은 건조 및 파쇄하여 준비한 머위와, 붓꽃 씨앗 및 뿌리를 혼합 및 추출하는 단계; 상기 단계에서 혼합된 혼합 추출물을 배지에 첨가한 후 상기 배지를 멸균하는 단계; 상기 멸균된 배지에 버섯균사체를 접종하고 배양하는 단계; 및 상기 단계에서 배양된 배양물을 멸균 및 여과하여 발효물을 수득하는 단계를 포함하여 제조되는, 항염증 활성 및 피부재생 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물의 제조방법을 제공한다.
본 발명에서 상기 "머위(Petasites japonicus)"는 중국, 일본 및 우리나라의 남부지방과 중부지방의 산야지 특히 햇볕이 잘 드는 산비탈의 숲이나 계곡 습지에서 자생하는 국화과(Compositae)에 속하는 다년생 초본식물이다. 머위는 30 cm의 높이로 자라고 꽃은 5, 6월에 피며 화경과 잎자루는 식용으로 사용하는데 특유한 향기와 쓴맛이 있으며, 한의학에서는 꽃봉오리를 관동화(款冬花)라 하여 한약재로 사용한다. 주요 성분으로는 뿌리 및 줄기에서 sesquiterpenoid인 eremopetasidione과 phenolic compound인 petasiphenone 및 eremophilenolide 등이 보고되었으며, 꽃에는 angelic acid, capronic acid, caprylic acid, procatechuic acid를 잎과 줄기에서는 petasin과 hemicellulose 등이 분리되었다고 알려져 있다. 또한 머위 잎의 에탄올 추출물은 폴리페놀이 풍부하고 농도 의존적으로 높은 SOD 유사활성과 항암 효능을 보였으며, 각질형성 세포에서 자외선에 의해 증가되는 IL-1 α 및 PGE2의 생합성을 저해하는 것으로 우수한 항염 효능을 나타내는 것으로 알려져 있다.
또한 본 발명에서 상기 "붓꽃"은 내한성이 강한 숙근성 다년초로 붓꽃과에 속하며 산기슭과 들의 습기가 많은 곳이나 메마른 땅에서 자란다. 한국, 일본, 중국 북동부, 시베리아 동부에 주로 분포한다. 온대지역에 200종 이상 있으며 한국에는 14종이 남아있다. 전체적인 높이는 60cm 정도이며, 잎은 길이 30∼50cm, 너비 5∼10mm정도이다. 꽃은 주로 5∼6월에 피고 색은 자주색을 띄며 꽃줄기 끝에 2,3개씩 달리며 지름은 5cm정도이다. 열매는 삭과로 양 끝이 뾰족한 원기둥 모양을 가지며 삭과의 끝이 터지면서 종자를 배출한다. 뿌리줄기는 옆으로 뻗으면서 새싹이 나오고 아래 부분에 붉은빛을 띄는 갈색 섬유를 보인다. 붓꽃은 민간에서 주로 인후염, 소화불량 및 폐렴 등에 사용이 되어왔고, 이탈리아의 피렌체 지방에서는 향수의 원료로도 사용이 된다고 알려져 있다.
본 발명에서 용어, "추출물"은 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "피부 개선"은 피부결 개선, 피부 노화 방지 또는 개선 및 피부 염증 개선으로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 이상을 의미할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "개선"이란 상태의 완화 또는 치료와 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 적어도 감소시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 추출에 있어서, 상기 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다.
바람직하게는 상기 머위와 붓꽃 씨앗 및 뿌리를 혼합한 혼합 추출물은 각 원료를 건조 및 분쇄하여 얻은 분말로부터 추출 처리를 통해 얻어진다.
이 때, 상기 머위는 잎, 줄기 및 이들의 혼합물을 사용하는 것이 바람직하다.
또한 상기 붓꽃은 전초에 비해 우수한 효능을 나타낼 수 있는 씨앗과 뿌리를 사용하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 머위와 붓꽃 씨앗 및 뿌리의 혼합 분말은 용매와 혼합하여 추출처리 하게 되는 바, 이 때 용매는 정제수를 포함한 물, 주정, C1~C4 저급 알콜, 염화메틸렌, 헥산, 초산에틸, 염화메틸렌 및 이들의 혼합용매를 사용하는 것이 바람직하다. 더 바람직하게는 정제수를 포함한 90~95% 에탄올을 포함하는 것이 더 바람직하다.
또한, 상기 머위와 붓꽃 씨앗 및 뿌리의 혼합분말은 머위와 붓꽃이 가지는 항염 또는 항산화 효능을 높일 수 있도록 1~3 : 1~3 : 1~3의 비율로 혼합되는 것이 바람직하다. 본 발명의 일 실시예에서는 동량으로 혼합하여 사용하였다.
한편, 상기 혼합 분말과 용매는 1 : 20의 중량비 비율로 혼합되는 것이 바람직한데, 이는 혼합 분말과 용매의 균일한 혼합 및 유효성분의 효율적 추출을 위함이다.
또한 추출방법으로는 열수추출, 환류추출 또는 초음파추출을 이용할 수 있다.
또한 본 발명에 있어서 상기 "버섯"은 고등균류의 일종인 담자균류에 속하며 그 생물학적 위치는 곰팡이류에 속한다. 버섯은 포자가 발아하여 균사체(Mycelium)를 이루고 자실체(fruit body)로 성장하여 버섯의 모습을 갖추며, 자실체는 다시 포자를 형성하는 생장과정을 되풀이한다. 버섯의 씨는 포자 형태로 자실체의 갓 아래쪽 주름진 살 속에 들어있고 포자가 배지에서 발아를 시작하면 무수한 팡이실을 뽑아내면서 주위 배지의 영양소를 흡수하며 계속 증식하여 약 3~4개월 후 쯤 버섯이 돋아나게 된다. 균사체와 자실체는 기능이나, 구조 그리고 성분 등에서 현저한 차이점이 있다.
상기 "버섯균사체"는 자실체(버섯)에 영양분을 공급하여 자실체를 성장시키는 에너지를 간직하고 있는 만큼 강한 활성성분을 갖고 있기 때문에 많은 유효성분을 함유하고 있고 이로 인해 그 효과도 뛰어나다. 균사체에는 자실체보다 각종 영양소가 약 4배정도 더 함유되어 있고 단백질, 아미노산, 비타민, 무기질, 효소 등 영양이 풍부하고 균사체는 우수한 흡수력과 번식력을 갖고 있으며 그로 인해 버섯 식용부분 보다 훨씬 많은 에너지를 보유하고 있다. 따라서 버섯의 에너지의 핵심은 균사체에 있다고 볼 수 있다.
이때, 상기 버섯균사체로는 영지버섯, 상황버섯, 동충하초, 치마버섯, 느타리버섯 및 표고버섯으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 버섯 균사체를 사용하며, 바람직하게는 영지버섯, 상황버섯 또는 동충하초 균사체를 사용하여 머위와, 붓꽃의 씨앗과 뿌리 혼합물을 발효시킨다.
본 발명에서는 상기 머위와 붓꽃의 혼합 추출물을 버섯균사체로 발효시킨 발효물을 유효성분으로 포함함으로써 버섯균사체에 의한 각 원료의 활성을 극대화할 수 있어 단일 추출물에 비해 현저한 피부염 예방 및 개선효과를 나타낼 수 있게 된다.
또한 상기 혼합 추출물의 발효물은 피부표피세포인 HaCaT 세포에 대하여 농도의존적인 증식활성을 나타냄을 확인할 수 있는 바, 피부조직의 재생 및 피부개선을 가져올 수 있음을 확인할 수 있었다.
더욱이 본 발명의 일 실시예에 따르면 머위와 붓꽃의 단일 추출물 또는 혼합 추출물에 비하여 상기 IL-6의 발현과 NO의 생성을 모두 현저히 억제함은 물론 피부표피세포의 증식활성을 모두 나타낼 수 있어 피부염의 예방 및 개선 효과가 있는 것을 확인할 수 있었다.
따라서 상기 본 발명의 조성물은 피부표피 세포 증식활성에 의한 피부 재생 활성과, NO 생성 또는 IL-6 생성을 저해에 의한 항염증 활성을 나타내는 것을 특징으로 한다.
또다른 양태로서 본 발명은 상기 화장료 조성물을 포함하는 화장품 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 화장품 조성물은 용액, 외용 연고, 크림, 리퀴드, 폼, 영양 화장수, 유연 화장수, 팩, 유연수, 바디워시, 유액, 메이크업 베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선스크린 크림, 선 오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 폼 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패치 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 화장품 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 화장품 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 화장료 조성물의 제형에 따라 다양하다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화 아연 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실리케이트, 폴리아미드 파우더 등이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로하이드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제 등이 이용될 수 있으며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일 등이 이용될 수 있고, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타하이드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합되어 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 피부에 직접 도포하거나 살포하는 등의 경피 투여 방법으로 사용될 수 있으며, 본 발명 조성물의 투여 경로는 목적조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물의 사용량은 연령, 병변의 정도 등의 개인 차이나 제형에 따라 적절하게 조절될 수 있으며, 1일 1회 내지 수회 적??량을 피부에 도포하여 1 주일 내지 수개월 사용될 수 있다.
이하에서는 본 발명의 실시예를 들어 더욱 상세하게 설명한다. 다만, 이하의 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 예시일 뿐, 이에 의하여 본 발명의 권리 범위가 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 붓꽃(씨앗/뿌리) 및 머위의 복합 추출물 제조
1-1 붓꽃(씨앗/뿌리) 및 머위의 복합 추출물 제조
붓꽃 씨앗과 뿌리, 머위, 병풀을 음건한 다음, 각각 마쇄하여 분말화한 후 혼합하였다. 이후 혼합한 분말 10 g에 60 % EtOH를 244 ml 첨가하여 이를 80℃에서 6시간 동안 환류 추출하였다. 추출 후 1 ㎛로 여과하여 시료로 사용하였다. 추출 공정은 도 1에 나타내었다.
1-2 버섯균사체 배양
버섯 균사체는 Cordyceps militaris (씨앗은행, 농촌진흥청, 40226), Ganoderma lucidum (씨앗은행, 농촌진흥청, 52352), Phellinus linteus (KCCM, 60261)을 사용하였다. 배지는 PDB 배지(BD Difco™, 254920)를 사용하였으며 25℃, 150rpm에서 진탕배양 하였다.
1-3. 버섯균사체 발효물의 제조
실시예 1에서 제조한 시료를 삼각플라스크에 분말 10 g을 취한 후 PDB 배지 90 ml을 첨가하였다. 121℃에 15분 동안 고압멸균하고 각각 영지 균사체(Ganoderma lucidum), 상황 균사체(Phellinus linteus), 동충하초 균사체(Cordyceps militaris)를 배지 대비 1 % 접종하여 150 rpm, 25℃에서 5일간 진탕배양하였다. 배양 후 121℃에서 10분간 고압 멸균하여 균주를 불활성화시키고 시료의 용매 비율이 60% EtOH이 되도록 95% EtOH 154ml를 첨가하였다. 이를 80℃에서 6 시간 동안 환류 추출한 후 1㎛으로 여과하여 시료로 사용하였다.
원료의 혼합비율 및 접종균사체는 하기 표 1에 나타내었다. 병풀 분말은 대조군 시료로서 준비하였다. 본 실시예에 따른 발효물 제조공정은 도 2에 나타내었다.
구분 | 원료분말의 혼합비 | 버섯균사체 발효 | |
시료 1 | 붓꽃 추출물 | 붓꽃 씨앗 : 붓꽃 뿌리 = 1:1 | - |
시료 2 | 머위 추출물 | 머위 분말 100 % | - |
시료 3 | 붓꽃+머위 추출물 | 붓꽃 씨앗 : 붓꽃 뿌리 : 머위 = 1:1:1 | - |
시료 4 | 붓꽃+머위 영지균사체 발효물 |
붓꽃 씨앗 : 붓꽃 뿌리 : 머위 = 1:1:1 | 영지균사체 발효 |
시료 5 | 붓꽃+머위 상황균사체 발효물 |
붓꽃 씨앗 : 붓꽃 뿌리 : 머위 = 1:1:1 | 상황균사체 발효 |
시료 6 | 붓꽃+머위 동충하초균사체 발효물 |
붓꽃 씨앗 : 붓꽃 뿌리 : 머위 = 1:1:1 | 동충하초균사체 발효 |
시료 7 | 병풀 추출물 | 병풀 분말 100 % | - |
시험예 1. 피부세포 재생 활성 시험
1-1 인간피부표피(HaCaT, Human keratinocyte) 배양
붓꽃 추출물 및 붓꽃 추출 발효물의 피부 재생활성을 알아보기 위해 인간유래 각질형성 세포주인 HaCaT 세포 (human epidermal keratinocytes)를 사용하였다.
배지는 10% Fetal Bovine Serum (FBS, Gibco, CA, USA) medium을 함유한 DMEM low (SH30021.01, HyCloneTM, Logan, UT, USA) 배지를 이용하였다. 세포주는 습도 95%, 5% CO2, 37℃로 조절된 배양기에서 배양하였으며, 이때 미생물의 오염이나 증식을 억제하기 위해 배지용 항생제(Penicillin streptomycin, Gibco, CA, USA)를 사용하였다. 세포가 80% 정도 dish를 덮으면 phosphated-buffered saline-EDTA (PBS-EDTA)로 세척한 후 0.05% Trypsin EDTA를 1ml 처리하여 dish 바닥에 부착되어 있는 세포를 계대 배양하였다. 배지는 48시간 마다 교환하여 세포를 배양하였다.
1-2 HaCaT 세포(인간피부표피세포)를 이용한 세포 증식 활성
HaCaT 세포주를 1×105 cells/㎖의 농도로 96 웰 플레이트에 100㎕ 분주하고, 24시간 동안 37℃, 습도 95%, CO2 5%로 조절된 CO2 배양기에서 배양하였다. 새로운 배지에 각 시료를 세포독성이 나타나지 않는 알맞은 농도 범위로 세포에 처리한 후 1, 2일 동안 배양하였다. 세포주의 생존율을 측정하기 위해 Cell Counting Kit-8 (CCK-8, Dojindo Mol. Tech., Rockville., MD, USA)를 이용하여 microplate reader (Molecular Devices, Versa Max ELISA Microplate Reader, USA)로 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포의 재생효능은 시료를 처리하지 않은 대조군에 대비한 시료 처리군의 흡광도로 표시하였다.
결과
하기 표 2에 세포증식활성 결과를 나타내었다.
이를 참고하면, 모든 시료는 0.005~0.1 % 농도에서 HaCaT 증식 활성을 나타내었다. 그러나 붓꽃 추출물 또는 머위 추출물의 혼합 추출물은, 붓꽃 추출물 또는 머위 추출물 단독과 비교해서도 세포증식활성이 저하되는 것으로 나타났다. 반면 버섯균사체 발효물에서는 비교 대조군인 병풀 추출물의 세포증식활성과 비교해서도 높은 세포증식활성을 나타내었고, 특히 영지균사체 발효물에서 가장 높은 세포증식활성을 나타내었다. 구체적으로, 붓꽃(씨앗/뿌리) +머위 추출물은 0.1% 농도에서 세포 증식 활성이 96.77%이었으나 이를 발효한 붓꽃(씨앗/뿌리) +머위 영지 발효물 및 상황 발효물, 동충하초 발효물은 각각 171.96%, 132.5%, 135.25%로 세포 증식 활성이 더욱 높은 것으로 나타났다. 이는 추출물을 균사체 발효를 하였을 때 피부세포 증식 활성의 개선 효과가 있음을 의미한다.
시료명 | 시료농도 (%) | HaCaT cell Proliferation (%) |
Control | - | 100.00 ± 3.06 |
시료 1 (붓꽃 추출물) |
0.005 | 87.34 ± 7.77 |
0.01 | 96.37 ± 22.10 | |
0.05 | 102.21 ± 17.69 | |
0.1 | 96.16 ± 15.75 | |
시료 2 (머위 추출물) |
0.005 | 115.18 ± 7.53* |
0.01 | 113.35 ± 14.77 | |
0.05 | 112.44 ± 13.29 | |
0.1 | 130.62 ± 8.45* | |
시료 3 (붓꽃+머위 추출물) |
0.005 | 85.96 ± 13.22 |
0.01 | 88.20 ± 16.32 | |
0.05 | 81.06 ± 6.25* | |
0.1 | 70.80 ± 6.30* | |
시료 4 (붓꽃+머위 영지균사체 발효물) |
0.005 | 139.96 ± 6.18* |
0.01 | 155.94 ± 16.73* | |
0.05 | 160.87 ± 22.85* | |
0.1 | 171.96 ± 16.28* | |
시료 5 (붓꽃+머위 상황균사체 발효물) |
0.005 | 96.93 ± 10.70 |
0.01 | 121.72 ± 13.57* | |
0.05 | 112.80 ± 17.74 | |
0.1 | 132.50 ± 6.45* | |
시료 6 (붓꽃+머위 동충하초균사체 발효물) |
0.005 | 122.55 ± 22.12 |
0.01 | 129.43 ± 27.37 | |
0.05 | 125.04 ± 18.52 | |
0.1 | 135.25 ± 16.43* | |
시료 7 (병풀 추출물) |
0.005 | 96.97 ± 29.26 |
0.01 | 90.03 ± 14.69 | |
0.05 | 101.17 ± 22.41 | |
0.1 | 93.06 ± 20.68 | |
* p<0.05 indicates a significant difference as compared to the control group. |
시험예 2. 항염증 활성 시험
2-1 대식세포 (RAW 264.7 cells) 배양
실험에 사용한 세포주 RAW 264.7은 한국세포주은행(KCLB, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였다. 배지는 10% FBS(Feral Bovine Serum)를 함유한 DMEM High glucose 성장배지를 사용하였다. 세포주는 습도 95%, 5% CO2, 37℃로 조절된 배양기에서 배양하였으며, 이 때 미생물의 오염이나 증식을 억제하기 위해 배지용 항생제 Penicillin streptomycin, Gibco, CA, USA)를 사용하였다.
2-2 대식세포 (RAW 264.7 cells) 독성
실험에 사용한 세포주 RAW264.7은 한국세포주은행(KCLB, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였다. 배지는 10% Fetal Bovine Serum (FBS, Lonza, Valais, Switzerland) medium을 함유한 성장배지를 이용하였다. 세포주는 습도 95%, 5% CO2, 37℃로 조절된 배양기에서 배양하였으며, 이때 미생물의 오염이나 증식을 억제하기 위해 배지용 항생제(Penicillin streptomycin, Gibco, CA, USA)를 사용하였다. 세포가 80% 정도 디쉬를 덮으면 phosphated-buffered saline-EDTA (PBS-EDTA)로 세척한 후 배지 1~2ml을 dish에 분주한 후 scrapper를 이용하여 dish 바닥에 부착되어있는 세포를 긁어 세포를 떼어내 계대 배양하였으며, 배지는 48 시간마다 교환하여 세포를 배양하였다.
세포주를 96 웰 플레이트에 5×104 cells/well 농도로 분주 후 습도 95%, 5% CO2, 37℃ 배양기에서 24시간 동안 배양 안정화였다. 배지 제거 후 새로운 배지로 희석한 시료를 100㎕씩 처리하여 습도 95%, 5% CO2, 37℃ 에서 24시간 동안 배양하였다.
세포주의 생존율 측정은 MTS (CellTiter 96ㄾ AQueous One Solution Cell Proliferation Assay, Promega, USA)시약을 이용하여 세포의 생존율을 측정하였다. 즉, 시약 1 ml에 배지(DMEM high glucose, free FBS) 9ml을 넣어 희석한 후 well 당 100㎕씩 처리하였다. 37℃에서 60분간 반응 후 microplate reader (Molecular Devices, VersaMax ELISA Microplate Reader, USA)로 490nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포의 생존율은 시료를 처리하지 않은 대조군에 대비한 시료 처리군의 흡광도로 표시하였다.
붓꽃 추출물의 RAW 264.7 세포 독성 측정 결과는 하기 표 3에 나타내었다. 모든 시료에서 RAW 264.7 세포에 대한 독성은 나타나지 않았다.
시료명 | 시료농도 (%) | RAW264.7 cell viability (%) |
Control | - | 100.00 ± 7.71 |
시료 1 (붓꽃 추출물) |
0.05 | 111.81 ± 8.18 |
0.1 | 132.34 ± 7.70* | |
0.5 | 130.34 ± 6.82* | |
시료 2 (머위 추출물) |
0.05 | 94.32 ± 3.81 |
0.1 | 92.98 ± 3.80 | |
0.5 | 96.65 ± 2.39 | |
시료 3 (붓꽃+머위 추출물) |
0.05 | 100.43 ± 9.55 |
0.1 | 113.16 ± 7.78* | |
0.5 | 124.98 ± 13.84* | |
시료 4 (붓꽃+머위 영지균사체 발효물) |
0.05 | 98.36 ± 4.35 |
0.1 | 99.41 ± 7.88 | |
0.5 | 94.97 ± 6.23 | |
시료 5 (붓꽃+머위 상황균사체 발효물) |
0.05 | 104.73 ± 4.95 |
0.1 | 107.26 ± 8.36 | |
0.5 | 88.28 ± 5.99 | |
시료 6 (붓꽃+머위 동충하초균사체 발효물) |
0.05 | 106.12 ± 12.45 |
0.1 | 104.58 ± 12.95 | |
0.5 | 127.53 ± 11.36* | |
시료 7 (병풀 추출물) |
0.05 | 92.40 ± 1.81 |
0.1 | 98.90 ± 1.62 | |
0.5 | 94.87 ± 2.99 | |
* p<0.05 indicates a significant difference as compared to the control group. |
2-3 대식세포(RAW264.7)에서의 NO 저해 활성
항염증 효능의 측정은 대식세포주에 LPS를 처리하여 LPS만을 처리한 군의 NO생성량과, LPS와 함께 시료를 처리한 군의 NO 생성량을 측정하여 시료가 NO 생성 저해 효능을 가지는 확인하였다. 이 때, NO 저해 활성은 세포독성이 없는 농도인 0.5%에서 측정하였다.
구체적으로 RAW 264.7 세포주를 96 웰 플레이트에 2×105 cells/well로 분주한 후 습도 95%, 5% CO2, 37℃에서 24시간 동안 안정화하였다. 염증을 유발하기 위하여 lipopolysaccharide (LPS, Sigma-Aldrich, MO, USA)를 1㎍/㎖의 농도로 처리하였으며 시료의 항염증 효능을 확인하기 위해 LPS와 함께 시료를 독성이 나타나지 않은 농도로 희석하여 각 well 당 200㎕씩 처리하였다. 시료 처리 후 습도 95%, 5% CO2, 37℃ 에서 24시간 동안 배양하였다.
NO 생성량은 Griess 시약을 사용하여 측정하였다. Griess 시약은 2.5%의 phosphate 용액에 1% sulfanilamide와 0.1% naphthylethylene-diamine-dihydrochloride를 혼합하여 만들었다. 위에 배양한 세포의 상등액 50 ㎕를 96 웰 플레이트에 취하고 여기에 Griess 시약 50㎕를 가해 15분 동안 실온에서 반응시킨 후 microplate reader (Molecular Devices, VersaMax ELISA Microplate Reader, USA)를 이용하여 540㎚에서 흡광도를 측정하였다.
NO 함량은 NaNO2를 이용하여 검량곡선을 작성한 후 대입하여 계산하였다. 시료를 처리하지 않은 대조군에 대비한 시료 처리군의 NO 함량으로 표시하였다.
2-4 대식세포(RAW264.7)에서의 IL-6 활성
항염증 효능의 측정은 대식세포주에 LPS를 처리하여 LPS 만을 처리한 군의 IL-6 생성량과, LPS와 함께 시료를 처리한 군의 IL-6 생성량을 측정하여 시료가 IL-6 생성 저해 효능을 가지는 확인하였다. 이 때, IL-6 저해 활성은 세포독성이 없는 농도인 0.5 %에서 측정하였다.
RAW 264.7 세포주를 96 웰 플레이트에 2×105 cells/well로 분주한 후 습도 95%, 5% CO2, 37℃에서 24시간 동안 안정화하였다. 염증을 유발하기 위하여 lipopolysaccharide (LPS, Sigma-Aldrich, MO, USA)를 1㎍/㎖의 농도로 처리하였으며 시료의 항염증 효능을 확인하기 위해 LPS와 함께 시료를 독성이 나타나지 않은 농도로 희석하여 각 well 당 200㎕씩 처리하였다. 시료 처리 후 습도 95%, 5% CO2, 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 세포 상등액을 이용하여 IL-6 저해 활성을 측정하였다.
Mouse IL-6 ELISA kit (Cat. ELM-IL6)는 RayBio사에서 구매하여 사용하였다. Plate에 배양액을 100㎕씩 분주한 후 2시간 30분 동안 상온에서 교반하였다. Plate를 wash buffer로 4회 세척 후 Antibody 100㎕를 처리하여 1시간 동안 상온에서 교반하였다. 4회 세척 후 HRP 100㎕를 처리하여 1시간 동안 상온에서 교반하였다. 4회 세척 후 TMB solution 100㎕를 처리하여 30분 동안 암실, 상온에서 교반하였다. 반응 후 STOP solution 50㎕를 분주하여 450nm에서 흡광하였다.
IL-6 함량은 Kit 내의 Standard를 사용하여 검량곡선을 작성한 후 대입하여 계산하였으며 시료를 처리하지 않은 대조군에 대비한 시료 처리군의 IL-6 함량으로 표시하였다.
결과
항염증 활성 관련 NO 생성 저해 활성 및 IL-6 생성 저해 활성 측정 결과는 하기 표 4에 나타내었다.
시료명 | 시료농도 (%) |
LPS 처리
(1 μg/ml) |
NO 생성(%) | IL-6 생성(%) |
Control | (-) | - | 0.00 ± 2.91* | 0.00 ± 1.25* |
(+) | + | 100.00 ± 3.01 | 100.00 ± 6.92 | |
시료 1 (붓꽃 추출물) |
0.05 | + | 64.22 ± 2.14* | 112.37 ± 9.74 |
시료 2 (머위 추출물) |
0.05 | + | 90.37 ± 1.69* | 81.97 ± 8.78* |
시료 3 (붓꽃+머위 추출물) |
0.05 | + | 77.21 ± 0.59* | 98.59 ± 8.40 |
시료 4 (붓꽃+머위 영지균사체 발효물) |
0.05 | + | 54.18 ± 5.08* | 77.60 ± 5.76* |
시료 5 (붓꽃+머위 상황균사체 발효물) |
0.05 | + | 46.58 ± 2.25* | 69.28 ± 6.89* |
시료 6 (붓꽃+머위 동충하초균사체 발효물) |
0.05 | + | 49.03 ± 5.25* | 74.96 ± 5.31* |
시료 7 (병풀 추출물) |
0.05 | + | 105.52 ± 0.93* | 105.95 ± 12.78 |
* p<0.05 indicates a significant difference as compared to the control group. |
표 4를 참고하면, 붓꽃 단일 추출물은 비교대조군인 병풀 추출물과 비교해서 NO 생성 저해 활성은 나타내었으나, IL-6의 생성은 오히려 증대되는 것으로 확인되었다. 머위 단일 추출물에서는 NO 생성 저해 활성 10.63%, IL-6 저해활성 18.03%로 비교대조군인 병풀 추출물과 비교해서 항염증 활성을 나타내는 것으로 나타내었다. 그러나 이러한 붓꽃과 머위의 혼합 추출물에서는 NO 생성 저해 활성 22.79%, IL-6 저해활성 1.41%로 나타나, 염증 유발 사이토카인인 IL-6에 의한 염증 반응에 대한 저해 활성이 거의 없는 것으로 나타났다.
시험예 3. 아토피 피부염 개선 시험
3-1 아토피 피부염 개선용 화장품 조성물 제조
상기에서 제조된 시료 4의 붓꽃과 머위의 영지균사체 발효물을 원액으로 하고 하기 표 5에 나타낸 함량으로 미스트 제형의 화장품 조성물을 제조하였다.
원료 | 함량(%) |
시료 4(붓꽃+머위 영지균사체 발효물) | 30 |
부틸렌글리콜 | 30 |
물 | 38 |
헥산디올 | 2 |
합계 | 100 |
3-2 아토피 피부염 개선능 임상 시험
아토피 피부염을 가지고 있는 18세 남성, 5세 남아, 16세 여성을 대상으로, 상기에서 제조된 화장품 조성물을 1일 3회이상 염증 부위를 적실 정도로 뿌려서 도포하고 부드럽게 마사지하듯 문질러주었다.
아토피 피부염에 대한 개선 효능을 확인하기 위하여, 피부장벽이 손상되고 염증이 발현되고 있는 부위에 대하여 사용 전, 2주 사용 후 육안으로 관찰하였다.
도 5에 시간 경과에 따른 염증 부위의 관찰 결과 사진을 나타내었다.
이를 참고하면, 아토피 피부염에 의해 발적된 염증부위가 사용 2주 후에는 상당히 호전되어, 발적 부위가 많이 가라앉아 아토피 피부염을 개선하고 있음을 확인할 수 있었다. 아토피 피부염이 심했던 5세 남아에서는 2주 사용만으로도 아토피 피부염 상태가 거의 치유되었고, 아토피 피부염이 심하지 않았던 16세 여성의 경우에는 2주 사용만으로도 피부상태가 거의 정상피부로 개선되었음을 확인할 수 있었다.
상기 실시예 및 시험예의 결과로부터, 버섯균사체 발효물에 대해서는, 영지균사체 발효물에서는 NO 생성 저해 활성 45.82%, IL-6 저해활성 22.40%로, 상황균사체 발효물에서는 NO 생성 저해 활성 53.42%, IL-6 저해활성 30.72%로 동충하체균사체 발효물에서는 NO 생성 저해 활성 50.97%, IL-6 저해활성 25.04%로 나타났다. 비교대조군인 병풀추출물과 비교해서도, 높은 NO 생성 저해 활성 및 IL-6 저해활성을 나타내었고, 특히 NO 생성 저해 활성은 거의 50% 수준으로 나타났으며, IL-6 저해 활성도 약 25% 수준으로 나타났는바, 이는 단일 추출물 또는 복합 추출물과 비교해서도 현저하게 높은 수준인 것으로 확인된다.
이와 같이 붓꽃 추출물, 머위 추출물 및 균사체 발효물의 항염증 활성을 측정한 결과 전체적으로 단순 추출물 및 혼합물에 비해 붓꽃(씨앗/뿌리) +머위 균사체 발효물에서 항염증 효과가 현저하게 우수한 것으로 확인되었다.
실제로 붓꽃(씨앗/뿌리) +머위 영지 균사체 발효물을 이용하여 임상시험을 실시한 결과 아토피 피부염이 상당히 치유되고 피부상태가 개선되는 것을 육안으로도 확인할 수 있었다.
결론적으로, 피부 자극은 각질형성세포의 구조적인 변화와 함께 IL-6 등의 염증 유발 사이토카인의 분비를 유도하고, NO 등 염증 유발 인자에 의하여 염증반응을 일으키게 되는 바, 본 발명의 조성물은 이러한 염증 반응을 억제하여 아토피 피부염을 비롯한 피부염의 개선 및 피부개선에 효능이 있다.
또한 본 발명의 상기 실시예 및 시험예의 결과로부터 본 발명 피부재생의 경우, 붓꽃 추출물, 머위 추출물의 단일 추출물 또는 혼합 추출물에 비하여 붓꽃과 머위 혼합물의 영지균사체 발효물, 상황균사체 발효물, 동충하초 균사체 발효물은 각각 171.96%, 132.5%, 135.25%로 세포 증식 활성이 더욱 높은 것으로 나타나 피부 재생에 효능이 현저한 효능을 가짐을 확인할 수 있었다.
즉, 외부 자극 및 염증 등으로 손상된 피부는 표피세포의 증식을 통한 피부재생을 통해 피부 개선이 이루어지게 되는 바, 본 발명의 조성물은 이러한 피부세포 증식활성을 가짐에 따라 피부 자극 완화, 피부염 예방 및 개선, 아토피 피부염 예방 및 개선, 여드름 개선 및 예방용 화장품 원료로서 효과적으로 적용될 수 있다.
따라서 본 발명의 조성물은 피부재생 및 항염증 효과가 탁월하여 피부염 예방 및 피부개선 화장품 원료로서 산업상 이용가능성이 높은 것으로 판단된다.
Claims (6)
- 머위와, 붓꽃 씨앗 및 뿌리를 혼합한 혼합 추출물의 버섯균사체 발효물을 유효성분으로 포함하여, 항염증 활성 및 피부재생 활성을 갖는 것을 특징으로 하는, 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물.
- 제1 항에 있어서,
상기 조성물은 피부표피 세포 증식활성에 의한 피부 재생 활성과,
NO 생성 또는 IL-6 생성 저해에 의한 항염증 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는, 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물. - 제1 항에 있어서,
상기 버섯균사체는 영지버섯, 상황버섯 또는 동충하초 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는, 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물. - 제1 항에 있어서,
상기 피부염은 아토피 피부염인 것을 특징으로 하는, 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물. - 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 화장료 조성물을 포함하는 화장품 조성물.
- 건조 및 파쇄하여 준비한 머위와, 붓꽃 씨앗 및 뿌리를 혼합 및 추출하는 단계;
상기 단계에서 혼합된 혼합 추출물을 배지에 첨가한 후 상기 배지를 멸균하는 단계;
상기 멸균된 배지에 버섯균사체를 접종하고 배양하는 단계; 및
상기 단계에서 배양된 배양물을 멸균 및 여과하여 발효물을 수득하는 단계를 포함하여 제조되는 것을 특징으로 하는,
항염증 활성 및 피부재생 활성을 갖는 것을 특징으로 하는, 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물의 제조방법.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020220043940A KR20230144804A (ko) | 2022-04-08 | 2022-04-08 | 머위와 붓꽃의 혼합 추출 발효물을 포함하는 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020220043940A KR20230144804A (ko) | 2022-04-08 | 2022-04-08 | 머위와 붓꽃의 혼합 추출 발효물을 포함하는 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물 |
Publications (1)
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KR20230144804A true KR20230144804A (ko) | 2023-10-17 |
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Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020220043940A KR20230144804A (ko) | 2022-04-08 | 2022-04-08 | 머위와 붓꽃의 혼합 추출 발효물을 포함하는 피부염 예방 또는 피부개선용 화장료 조성물 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
KR (1) | KR20230144804A (ko) |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20150011075A (ko) | 2013-07-22 | 2015-01-30 | 최시영 | 항알레르기 효과를 가지는 붓꽃 추출물 및 이의 제조방법 |
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2022
- 2022-04-08 KR KR1020220043940A patent/KR20230144804A/ko not_active Application Discontinuation
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20150011075A (ko) | 2013-07-22 | 2015-01-30 | 최시영 | 항알레르기 효과를 가지는 붓꽃 추출물 및 이의 제조방법 |
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E601 | Decision to refuse application |