KR20230135378A - 싸이아다이아졸 화합물 및 이를 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 - Google Patents

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진정욱
타라만카다얏
조성진
전용현
김진아
권수경
황하영
이재언
정경진
김신애
황지선
김나연
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재단법인 대구경북첨단의료산업진흥재단
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Abstract

본 개시는 신규한 싸이아다이아졸 유도체 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 일 구현예에 따른 상기 화합물은 효과적인 PPARδ 작용제로서 염증성 인자 및 산화질소의 생성을 효과적으로 억제할 수 있으며, 염증 부위로의 대식세포의 침윤을 막는데 효과적이므로, 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로서 유용하게 이용될 수 있다.

Description

싸이아다이아졸 화합물 및 이를 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물{Thiadiazole compounds and pharmaceutical composition for preventing or treating inflammatory diseases comprising the same}
본 개시는 싸이아다이아졸 화합물 및 이를 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
과산화소체 증식인자-활성 수용체(Peroxisome proliferator-activated receptors, PPARs)는 핵수용체의 리간드 활성 전사 인자의 구성원이다. 리간드 특이성, 생리학적 역할 및 조직 분포에 따라 PPAR은 PPARα, PPARγ 및 PPARδ의 세 가지형으로 분류된다. 특히, PPARδ(PPARβ라고도 함)는 여러 생물학적 기능에 필수적인 PPAR 전사 인자 중 하나이며, PPARα 및 PPARγ와 달리 PPARδ은 도처에서 발현된다. 따라서 약물개발 분야에서 그 기능과 적용에 대한 내용은 PPAR 중에서 가장 적게 알려져 있다. 그러나 GW0742 및 GW501516과 같은 높은 친화성을 가진 PPARδ 작용제의 발견 이후 여러 연구자들은 비만 및 당뇨병뿐만 아니라 암, 신경계 장애, 염증, 이상지질혈증, 심장질환, 간질환과 같은 질환에서 PPARδ의 역할을 연구해왔다.
일 구현예는 신규한 싸이아다이아졸(thiadiazole) 유도체 화합물을 제공하고자 한다.
다른 일 구현예는 싸이아다이아졸 유도체 화합물을 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하고자 한다.
다른 일 구현예는 싸이아다이아졸 유도체 화합물을 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하고자 한다.
다른 일 구현예는 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 이를 필요로 하는 개체나 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 염증성 질환의 치료방법을 제공하고자 한다.
다른 일 구현예는 염증성 질환의 치료에 사용하기 위한 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공하고자 한다.
다른 일 구현예는 염증성 질환의 치료용 약제의 제조에 사용하기 위한 상기 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도(use)를 제공하고자 한다.
일 구현예는 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 염을 제공한다.
[화학식 1]
상기 화학식 1에서,
R1은 각각 독립적으로 -H, 할로겐, C1- 5알킬, C1- 5할로알킬, C1- 5알콕시 또는 C1-5할로알콕시이고;
R2는 각각 독립적으로 -H, C1- 5알킬 또는 -O-R21이고,
상기 R21은 사이아노C1 - 5알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 8원자의 헤테로아릴C1 - 5알킬 또는 이고,
상기 R211 및 R212는 각각 독립적으로 -H 또는 C1- 5알킬이고, 상기 R213은 -OH, -NH2, -NHOR214 또는 -NHCN이고,
상기 R214는 -H 또는 C1- 5알킬이고; 및
x 및 y는 각각 독립적으로 1 내지 5의 정수이다.
다른 일 구현예는 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
다른 일 구현예는 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
다른 일 구현예는 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 이를 필요로 하는 개체나 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 염증성 질환의 치료방법을 제공한다.
다른 일 구현예는 염증성 질환의 치료에 사용하기 위한 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다.
다른 일 구현예는 염증성 질환의 치료용 약제의 제조에 사용하기 위한 상기 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도(use)를 제공한다.
본 개시는 신규한 싸이아다이아졸 유도체 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 일 구현예에 따른 상기 화합물은 효과적인 PPARδ 작용제로서 염증성 인자 및 산화질소의 생성을 효과적으로 억제할 수 있으며, 염증 부위로의 대식세포의 침윤을 막는데 효과적이므로, 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로서 유용하게 이용될 수 있다.
도 1은 실시예 1 화합물의 세포 독성을 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 2는 실시예 1 화합물의 산화질소(NO) 생성 억제 효과를 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 3은 실시예 1 화합물의 산화질소 합성 효소 iNOS 단백질 발현 억제 효과를 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 4는 실시예 1 화합물의 염증성 인자 TNF-α 및 IL-6 생성 억제 효과를 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 5는 실시예 1 화합물의 염증성 인자 NF-κ 활성 억제 효과를 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 6은 실시예 1 화합물의 염증 관련 p-IKKαβ 단백질 발현 감소 효과를 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
도 7은 실험예 1 화합물을 이용하여 수행한 대식세포 추적 실험 과정을 나타낸 도면이다.
도 8 및 도 9는 급성 염증이 유도된 마우스를 이용하여 실험예 1 화합물의 대식세포 침윤 억제 효과를 분석한 결과를 나타낸 도면이다.
본 명세서에 기재된 실시 형태는 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 일 구현예에 따른 기술이 이하 설명하는 실시 형태로 한정되는 것은 아니다. 또한, 일 구현예의 실시 형태는 당해 기술분야에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 더욱 완전하게 설명하기 위해서 제공되는 것이다. 나아가, 명세서 전체에서 어떤 구성요소를 "포함"한다는 것은 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있다는 것을 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 수치 범위는 하한치와 상한치와 그 범위 내에서의 모든 값, 정의되는 범위의 형태와 폭에서 논리적으로 유도되는 증분, 이중 한정된 모든 값 및 서로 다른 형태로 한정된 수치 범위의 상한 및 하한의 모든 가능한 조합을 포함한다. 일 예로써 조성의 함량이 10% 내지 80% 또는 20% 내지 50%으로 한정된 경우 10% 내지 50% 또는 50% 내지 80%의 수치범위도 본 명세서에 기재된 것으로 해석되어야 한다. 본 명세서에서 특별한 정의가 없는 한 실험 오차 또는 값의 반올림으로 인해 발생할 가능성이 있는 수치범위 외의 값 역시 정의된 수치범위에 포함된다.
이하 본 명세서에서 특별한 정의가 없는 한, “약”은 명시된 값의 30%, 25%, 20%, 15%, 10% 또는 5% 이내의 값으로 고려될 수 있다.
일 구현예는 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 염을 제공한다.
[화학식 1]
상기 화학식 1에서,
R1은 각각 독립적으로 -H, 할로겐, C1- 5알킬, C1- 5할로알킬, C1- 5알콕시 또는 C1-5할로알콕시이고;
R2는 각각 독립적으로 -H, C1- 5알킬 또는 -O-R21이고,
상기 R21은 사이아노C1 - 5알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 8원자의 헤테로아릴C1 - 5알킬 또는 이고,
상기 R211 및 R212는 각각 독립적으로 -H 또는 C1- 5알킬이고, 상기 R213은 -OH, -NH2, -NHOR214 또는 -NHCN이고,
상기 R214는 -H 또는 C1- 5알킬이고; 및
x 및 y는 각각 독립적으로 1 내지 5의 정수이다.
일 실시예에서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화학식 2로 표시되는 화합물일 수 있다.
[화학식 2]
상기 화학식 2에서,
R11, R12 및 R13은 각각 독립적으로 -H, 할로겐, C1- 5알킬, C1- 5할로알킬 또는 C1-5할로알콕시이고;
R22은 -H 또는 C1- 5알킬이고; 및
R21은 사이아노C1 - 5알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 8원자의 헤테로아릴C1 - 5알킬 또는 이고,
상기 R211 및 R212는 각각 독립적으로 -H 또는 C1- 5알킬이고, 상기 R213은 -OH, -NH2, -NHOR214 또는 -NHCN이고,
상기 R214는 -H 또는 C1- 5알킬이다.
일 실시예에서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화학식 3으로 표시되는 화합물일 수 있다.
[화학식 3]
상기 화학식 3에서,
R11, R12 및 R13은 각각 독립적으로 -H, 할로겐, C1- 5알킬, C1- 5할로알킬 또는 C1-5할로알콕시이고;
R211 및 R212는 각각 독립적으로 -H 또는 C1- 5알킬이고; 및
R213은 -OH, -NH2, -NHOR214 또는 -NHCN이고, 상기 R214는 -H 또는 C1- 5알킬이다.
일 실시예에서, 상기 R1, R11, R12, 및 R13은 각각 독립적으로 C1- 4알킬, C1- 3알킬, C1- 2알킬, -CH3, C1- 4할로알킬, C1- 3할로알킬, C1- 2할로알킬, C1할로알킬, -CF3, C1-4할로알콕시, C1-3할로알콕시, C1-2할로알콕시, C1할로알콕시 또는 -OCF3일 수 있다.
일 실시예에서, 상기 R2는 각각 독립적으로 C1- 4알킬, C1- 3알킬, C1- 2알킬, -CH3일 수 있다.
일 실시예에서, 상기 R21은 사이아노C1 - 4알킬, 사이아노C1 - 3알킬, 사이아노C1 - 2알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 6원자의 헤테로아릴C1 - 4알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 6원자의 헤테로아릴C1 - 3알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 6원자의 헤테로아릴C1 - 2알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 6원자의 헤테로아릴C1알킬, , , , , , , 또는 일 수 있다.
일 실시예에서, 상기 R211 및 R212는 각각 독립적으로 C1- 4알킬, C1- 3알킬, C1- 2알킬, -CH3일 수 있다.
일 실시예에서, 상기 R214는 각각 독립적으로 C1- 4알킬, C1- 3알킬, C1- 2알킬, -CH3일 수 있다.
일 실시예에서, 상기 x 및 y는 각각 독립적으로 1 내지 4, 1 내지 3의 정수일 수 있다.
일 실시예에서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화합물 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있다.
(1) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산;
(2) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산;
(3) 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산;
(4) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세토나이트릴;
(5) 2-(((4-((2H-테트라졸-5-일)메톡시)-3-메틸페닐)싸이오)메틸)-5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸;
(6) N-하이드록시-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트아마이드;
(7) N-메톡시-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트아마이드;
(8) N-사이아노-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트아마이드;
(9) 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산;
(10) 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산;
(11) 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산;
(12) 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산;
(13) 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산;
(14) 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산;
(15) 2-(2-메틸-4-(((5-(3,4,5-트리플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산;
(16) 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산;
(17) 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산;
(18) 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산;
(19) 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산;
(20) 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산;
(21) 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산;
(22) 2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산;
(23) 2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산;
(24) 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산;
(25) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산;
(26) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산; 및
(27) 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산.
일 실시예에서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 약학적으로 허용가능한 염의 형태로 사용할 수 있으며, 염으로는 약학적으로 허용가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산 부가염이 유용하다. 산 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요드화수소산, 아질산, 아인산 등과 같은 무기산류, 지방족 모노 및 디카르복실레이트, 페닐-치환된 알카노에이트, 하이드록시 알카노에이트 및 알칸디오에이트, 방향족 산류, 지방족 및 방향족 설폰산류 등과 같은 무독성 유기산, 트리플루오로아세트산, 아세테이트, 안식향산, 구연산, 젖산, 말레인산, 글루콘산, 메탄설폰산, 4-톨루엔설폰산, 주석산, 푸마르산 등과 같은 유기산으로부터 얻는다. 이러한 약학적으로 무독한 염의 종류로는 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트, 니트레이트, 포스페이트, 모노하이드로겐 포스페이트, 디하이드로겐 포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 플루오라이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 석시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥산-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로 벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 벤젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, β-하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트, 만델레이트 등을 포함한다.
일 실시예는 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염뿐만 아니라, 이로부터 제조될 수 있는 용매화물, 광학 이성질체, 수화물 등을 모두 포함한다.
일 구현예는 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
상기 화학식 1에서,
R1은 각각 독립적으로 -H, 할로겐, C1- 5알킬, C1- 5할로알킬, C1- 5알콕시 또는 C1-5할로알콕시이고;
R2는 각각 독립적으로 -H, C1- 5알킬 또는 -O-R21이고,
상기 R21은 사이아노C1 - 5알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 8원자의 헤테로아릴C1 - 5알킬 또는 이고,
상기 R211 및 R212는 각각 독립적으로 -H 또는 C1- 5알킬이고, 상기 R213은 -OH, -NH2, -NHOR214 또는 -NHCN이고,
상기 R214는 -H 또는 C1- 5알킬이고; 및
x 및 y는 각각 독립적으로 1 내지 5의 정수이다.
일 실시예에서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화학식 2로 표시되는 화합물일 수 있다.
[화학식 2]
상기 화학식 2에서,
R11, R12 및 R13은 각각 독립적으로 -H, 할로겐, C1- 5알킬, C1- 5할로알킬 또는 C1-5할로알콕시이고;
R22은 -H 또는 C1-5알킬이고; 및
R21은 사이아노C1 - 5알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 8원자의 헤테로아릴C1 - 5알킬 또는 이고,
상기 R211 및 R212는 각각 독립적으로 -H 또는 C1- 5알킬이고, 상기 R213은 -OH, -NH2, -NHOR214 또는 -NHCN이고,
상기 R214는 -H 또는 C1-5알킬이다.
일 실시예에서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화학식 3으로 표시되는 화합물일 수 있다.
[화학식 3]
상기 화학식 3에서,
R11, R12 및 R13은 각각 독립적으로 -H, 할로겐, C1- 5알킬, C1- 5할로알킬 또는 C1-5할로알콕시이고;
R211 및 R212는 각각 독립적으로 -H 또는 C1-5알킬이고; 및
R213은 -OH, -NH2, -NHOR214 또는 -NHCN이고, 상기 R214는 -H 또는 C1-5알킬이다.
일 실시예에서, 상기 R1, R11, R12, 및 R13은 각각 독립적으로 C1- 4알킬, C1- 3알킬, C1- 2알킬, -CH3, C1- 4할로알킬, C1- 3할로알킬, C1- 2할로알킬, C1할로알킬, -CF3, C1- 4할로알콕시, C1-3할로알콕시, C1-2할로알콕시, C1할로알콕시 또는 -OCF3일 수 있다.
일 실시예에서, 상기 R2는 각각 독립적으로 C1- 4알킬, C1- 3알킬, C1- 2알킬, -CH3일 수 있다.
일 실시예에서, 상기 R21은 사이아노C1 - 4알킬, 사이아노C1 - 3알킬, 사이아노C1 - 2알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 6원자의 헤테로아릴C1 - 4알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 6원자의 헤테로아릴C1 - 3알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 6원자의 헤테로아릴C1 - 2알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 6원자의 헤테로아릴C1알킬, , , , , , , 또는 일 수 있다.
일 실시예에서, 상기 R211 및 R212는 각각 독립적으로 C1- 4알킬, C1- 3알킬, C1- 2알킬, -CH3일 수 있다.
일 실시예에서, 상기 R214는 각각 독립적으로 C1- 4알킬, C1- 3알킬, C1- 2알킬, -CH3일 수 있다.
일 실시예에서, 상기 x 및 y는 각각 독립적으로 1 내지 4, 1 내지 3의 정수일 수 있다.
일 실시예에서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화합물 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있다.
(1) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산;
(2) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산;
(3) 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산;
(4) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세토나이트릴;
(5) 2-(((4-((2H-테트라졸-5-일)메톡시)-3-메틸페닐)싸이오)메틸)-5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸;
(6) N-하이드록시-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트아마이드;
(7) N-메톡시-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트아마이드;
(8) N-사이아노-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트아마이드;
(9) 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산;
(10) 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산;
(11) 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산;
(12) 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산;
(13) 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산;
(14) 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산;
(15) 2-(2-메틸-4-(((5-(3,4,5-트리플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산;
(16) 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산;
(17) 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산;
(18) 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산;
(19) 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산;
(20) 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산;
(21) 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산;
(22) 2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산;
(23) 2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산;
(24) 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산;
(25) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산;
(26) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산; 및
(27) 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산.
일 실시예에서, 상기 염증성 질환은 염증성 질환이라면 특별히 제한되지 않는다. 염증성 질환의 예로는 염증성 장질환, 골관절염, 기관지염, 류마티스 관절염, 퇴행성 관절염, 천식, 아토피, 당뇨, 심근경색, 크론병 또는 건선 등이 있지만, 이에 한정되지는 않는다.
상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 임상 투여시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.
상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효 성분으로 하는 약학적 조성물은 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여는 피하주사, 정맥주사, 근육 내 주사 또는 흉부 내 주사를 주입하는 방법에 의한다.
이때, 비경구 투여용 제형으로 제제화하기 위하여 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 안정제 또는 완충제와 함께 물에 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고, 이를 앰플 또는 바이알 단위 투여형으로 제조할 수 있다. 상기 조성물은 멸균되고/되거나 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 보조제, 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 함유할 수 있으며, 통상적인 방법인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제제화할 수 있다.
경구 투여용 제형으로는 예를 들면 정제, 환제, 경/연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제, 엘릭시르제, 트로키제 등이 있는데, 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로즈 및/또는 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및/또는 폴리에틸렌 글리콜)를 함유하고 있다. 정제는 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및/또는 폴리비닐피롤리딘 등과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염 등과 같은 붕해제 또는 비등 혼합물 및/또는 흡수제, 착색제, 향미제, 및 감미제를 함유할 수 있다.
일 구현예는 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
일 실시예에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강식품 중의 상기 화합물의 양은 전체 식품 중량의 0.1 내지 90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
또한, 일 실시예에 따른 건강기능식품 조성물은 상기 화합물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
나아가, 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.
일 구현예는 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 이를 필요로 하는 개체나 대상에 투여하는 단계를 포함하는, 염증성 질환의 치료방법을 제공한다.
일 구현예는 염증성 질환의 치료에 사용하기 위한 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다.
일 구현예는 염증성 질환의 치료용 약제의 제조에 사용하기 위한 상기 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도(use)를 제공한다.
이하, 실시예 및 실험예를 하기에 구체적으로 예시하여 설명한다. 다만, 후술하는 실시예 및 실험예는 일부를 예시하는 것일 뿐, 본 명세서에 기재된 기술이 이에 한정되는 것은 아니다.
< 실시예 1> 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산(2-(2-methyl-4-(((5-(4-(trifluoromethyl)phenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)phenoxy)acetic acid)의 제조
단계 1: 4-(트리플루오로메틸)벤조하이드라자이드(b-1)의 제조
에틸-4-(트리플루오로메틸)벤조네이트 (2.033 mL, 11.46 mmol)을 MeOH (10 mL)에 녹이고 0 ℃에서 하이드라진 수화물 (1.671 mL, 27.5 mmol)을 가한 후 25 ℃에서 5시간 교반한 뒤, 70 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 종결된 후 차가운 물을 넣어 고체화하여 화합물 b-1 (2.21 g, 10.83 mmol)을 얻었다.
단계 2: 에틸 2-옥소-2-(2-(4-(트리플루오로메틸)벤조일)하이드라진일)아세테이트(c-1)의 제조
화합물 b-1 (2.21 g, 10.83 mmol)를 다이클로로메탄 (20 mL)에 녹이고 0 ℃에서 TEA (1.521 mL, 10.83 mmol)를 적가한 뒤 에틸 2-클로로-2-옥소아세테이트 (1.210 mL, 10.83 mmol)를 서서히 첨가하였다. 혼합물을 상온에서 1시간 교반하였다. 반응이 종결된 후 물로 퀀칭하고 다이클로로메탄으로 추출한 후 무수 Na2SO4로 건조한 뒤 감압 농축하여 화합물 c-1 (2.8 g, 수득율 85%)를 얻었다. 이는 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용된다.
단계 3: 에틸 5-(3,4,5-트리플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-카복실레이트(d-1)의 제조
THF (1 mL)에 화합물 c-1 (1 g, 3.29 mmol)을 녹인 후 Lawesson’s Reagent (1.99 g, 4.93 mmol)를 넣은 뒤 혼합물을 55 ℃에서 12시간 가열하였다. 반응이 종결된 후 셀라이트(celite)로 여과하고 NaHCO3로 세척한 뒤, 유기층을 무수 MgSO4로 건조하였다. 얻은 잔사를 감압 농축 후 MPLC (silica gel, 0~25%, EtOAc/Hexane)로 정제하여 화합물 d-1 (0.88 g, 수득율 89 %)를 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C12H10F3N2O2S [M+H]+: 303.04; found 303.1. 1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ8.31 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.91 (d, J = 7.44 Hz, 2H), 4.55 (q, J = 6.64 Hz, 2H), 1.47 (t, J = 6.1 Hz, 3H).
단계 4: 5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메탄올(e-1)의 제조
화합물 d-1 (0.8 g, 2.64 mmol)을 메탄올에 녹이고 0 ℃에서 소듐 보로하이드라이드 (0.31 g, 7.94 mmol)을 천천히 첨가한 뒤 상온에서 1시간 교반하였다. 반응이 종결된 후 NH4Cl 수용액으로 퀀칭하고 감압 농축한 뒤, 에틸아세테이트로 추출한 후 무수 Na2SO4로 건조한다. 얻은 잔사를 감압 농축 후 MPLC (silica gel, 5~30%, EtOAc/Hexane)로 정제하여 감압 농축하여 연한 노란색 고체의 화합물 e-1 (0.61 g, 수득율 89%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C10H8F3N2OS [M+H]+: 261.03; found 261.11. 1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ8.19 (d, J = 8.12 Hz, 2H), 7.86 (d, J = 8.24 Hz, 2H), 5.03 (s, 2H). 13C NMR (CD3OD, 100MHz) 174.77, 167.79, 133.38, 132.17, 128.06, 127.63, 126.03, 125.91, 122.49, 58.61.
단계 5: 2-(클로로메틸)-5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸(f-1)의 제조
화합물 e-1 (1 g, 3.84 mmol)을 CH2Cl2 (10 mL)에 녹인 뒤 트리페닐포르핀 (1.2 g, 4.61 mmol), 아이오싸이오사이아네이트(NCS) (0.616 g, 4.61 mmol)을 넣고 상온에서 2시간 교반하였다. 반응이 종결된 후 물과 식염수로 세척하고 무수 MgSO4로 건조하였다. 감압 농축하여 휘발성 물질을 제거하고 얻은 잔사를 MPLC (silica gel, 0~20%, EtOAc/Hexane)로 정제하여 화합물 f-1 (0.203 g, 수득율 19%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C10H7ClF3N2S [M+H]+: 279.01; found 279.1. 1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ8.22 (d, J = 8.12 Hz, 2H), 7.87 (d, J = 8.24 Hz, 2H), 5.17 (s, 2H). 13C NMR (CD3OD, 100MHz) δ169.38, 168.29, 133.05, 132.48, 128.20, 128.06, 125.98, 125.14, 122.45, 37.42.
단계 6: 2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페놀(g-1)의 제조
아세토나이트릴 (8 mL)에 4-머캅토-2-메틸페놀 (0.27 g, 1.97 mmol)을 녹인 후 세슘 카보네이트 (0.64 g, 1.97 mmol), 화합물 f-1 (0.5 g, 1.97 mmol)을 적가하여 상온에서 2시간 동안 교반하였다. 감압 농축하여 용매를 제거한 뒤, 에틸 아세테이트로 추출한 후 무수 Na2SO4로 건조하였다. 얻은 잔사를 감압 농축 후 MPLC (silica gel, 5~20%, EtOAc/Hexane)로 정제하고 감압 농축하여 화합물 g-1 (0.64 g, 수득율 85%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C17H14F3N2OS2 [M+H]+: 383.04; found 383.1. 1H NMR (DMSO-d6, 400MHz) δ9.63 (s, 1H), 8.15 (d, J = 8.12 Hz, 2H), 7.91 (d, J = 8.28 Hz, 2H), 7.20 (s, 1H), 7.09 (d, J = 8.24 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 8.28 Hz, 2H), 4.57 (s, 2H), 2.06 (s, 3H). 13C NMR (DMSO-d 6, 100MHz) δ171.03, 167.61, 156.28, 135.19, 133.72, 131.59, 128.85, 126.86, 126.83, 125.71, 121.19, 115.81, 34.02, 16.28.
단계 7: 메틸 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세테이트(h-1)의 제조
화합물 g-1 (0.3 g, 0.78 mmol)을 아세토나이트릴 (5 mL)에 녹이고 세슘 카보네이트 (0.38 g, 1.17 mmol)와 메틸 2-브로모아세테이트 (0.9 mL, 0.94 mmol)를 적가하여 상온에서 1시간 30분 동안 교반하였다. 반응이 종결된 후 감압 농축하여 아세토나이트릴을 제거한 뒤 물과 식염수로 세척하고 EtOAc로 추출하여 무수 Na2SO4로 건조하였다. 얻은 잔사를 감압 농축 후 MPLC (silica gel, 5~20%, EtOAc/Hexane)로 정제하고 감압 농축하여 화합물 h-1 (0.32 g, 수득율 96%)을 얻었다.
단계 8: 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산(1)의 제조
화합물 h-1 (0.32 g, 0.7 mmol)을 테트라하이드로퓨란에 녹인 뒤, 0 ℃에서 2 M 리튬 하이드록사이드 수용액 (1.5 mL)을 가하여 상온에서 1시간 교반하였다. 반응이 종결된 후 물로 퀀칭하고 1N HCl로 산성화하였다. 이 후 감압 농축하여 용매를 제거한 뒤, EtOAc로 추출하고 무수 Na2SO4로 건조하여 화합물 1 (0.25 g, 수득율 93%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C19H16F3N2O3S2 [M+H]+: 441.06; found 441.1. 1H NMR (DMSO-d 6, 400MHz) δ8.14 (d, J = 8.08 Hz, 2H), 7.88 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.21 (dd, J = 8.44, 1.92 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 8.56 Hz, 1H), 4.67 (s, 2H), 4.64 (s, 2H), 2.13 (s, 3H). 13C NMR (DMSO-d 6, 400MHz) δ170.69, 170.29, 167.41, 156.01, 133.83, 133.44, 130.34, 128.61, 127.44, 126.59, 126.55, 123.78, 112.28, 64.88, 33.03, 16.12.
< 실시예 2> 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산(2-(2-methyl-4-(((5-(4-(trifluoromethyl)phenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)phenoxy)propanoic acid)의 제조
단계 1: 에틸 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오페녹시)프로파노에이트(i-1)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 메틸 2-브로모아세테이트 대신에 에틸 2-브로모프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 i-1 (59 mg, 수득율 94%)을 얻었다.
단계 2: 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오페녹시)프로판산(2)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 i-1을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 2 (46 mg, 수득율 83%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C20H18F3N2O3S2 [M+H]+: 455.07; found 455.1. 1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ8.08 (d, J = 8.16 Hz, 2H), 7.80 (d, J = 8.24 Hz, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.19 (dd, J = 8.44, 2.02 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 8.48 Hz, 1H), 4.78 (q, J = 6.76 Hz, 1H), 4.46 (s, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.59 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 13C NMR (CD3OD, 100MHz) δ175.57, 172.53, 169.61, 157.85, 136.35, 132.69, 132.56, 129.89, 129.50, 127.46, 127.42, 125.23, 113.57, 73.65, 35.09, 19.01, 16.47.
< 실시예 3> 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산(2-methyl-2-(2-methyl-4-(((5-(4-(trifluoromethyl)phenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)phenoxy)propanoic acid)의 제조
단계 1: 에틸 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로파노에이트(j-1)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 메틸 2-브로모아세테이트 대신에 에틸-2-브로모-2-메틸프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 j-1 (18 mg, 수득율 28%)을 얻었다.
단계 2: 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산(3)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 j-1을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 3 (9 mg, 수득율 64%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C21H20F3N2O3S2 [M+H]+: 469.09; found 469.12. 1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ8.11 (d, J = 8.12 Hz, 2H), 7.82 (d, J = 8.24 Hz, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.16 (dd, J = 8.48, 1.99 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 8.52 Hz, 1H), 4.51 (s, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.56 (s, 6H), 13C NMR (CD3OD, 100MHz) δ177.71, 172.53, 169.65, 155.73, 136.30, 131.93, 131.88, 129.51, 127.49, 127.45, 125.90, 118.15, 80.33, 34.91, 25.83, 16.87
< 실시예 4> 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세토나이트릴(2-(2-methyl-4-(((5-(4-(trifluoromethyl)phenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)phenoxy)acetonitrile)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 메틸 2-브로모아세테이트 대신에 2-브로모아세토나이트릴을사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 4 (0.163 g, 수득율 67%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ8.04 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.27-7.24 (m, 2H), 6.82 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.45 (s, 2H), 2.20 (s, 3H).
< 실시예 5> 2-(((4-((2H-테트라졸-5-일)메톡시)-3-메틸페닐)싸이오)메틸)-5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸(2-(((4-((2H-tetrazol-5-yl)methoxy)-3-methylphenyl)thio)methyl)-5-(4-(trifluoromethyl)phenyl)-1,3,4-thiadiazole)의 제조
화합물 4 (21 mg, 0.050 mmol), NaN3 (3.9 mg, 0.060 mmol), ZnCl2 (6.8 mg, 0.050 mmol)를 0.4 mL의 n-뷰탄올에 녹여 120 ℃에서 12시간 반응시켰다. 반응 혼합물을 감압 증류한 뒤 Prep-HPLC를 이용해 분리하여 화합물 5 (9.5 mg, 수득율 41%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ7.99 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.13-7.12 (m, 2H), 6.82 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.38 (s, 2H), 4.37 (s, 2H), 1.99 (s, 3H).
< 실시예 6> N-하이드록시-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트아마이드(N-hydroxy-2-(2-methyl-4-(((5-(4-(trifluoromethyl)phenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)phenoxy)acetamide)의 제조
화합물 1 (3.7 mg, 0.008 mmol)을 1 mL의 THF에 녹인 뒤 1,1'-카보닐다이이미다졸 (3.4 mg, 0.021 mmol)을 첨가하여 실온에서 1시간 반응시켰다. 반응 혼합물에 하이드록실아민 하이드로클로라이드 (1.5 mg, 0.021 mmol)를 첨가하여 실온에서 16시간 더 반응시켰다. 상기 혼합물에 포타슘 황산 수소염 (5.7 mg, 0.042 mmol)를 첨가한 뒤 0.5 mL의 증류수를 첨가하여 실온에서 1시간 더 반응시켰다. 감압증류를 통해 용매를 제거한 뒤 Prep-HPLC를 이용해 분리해 화합물 6 (2.7 mg, 수득율 69%)를 얻었다.
1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ8.14 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.85 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.26 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.56 (s, 2H), 4.53 (s, 2H), 2.24 (s, 3H).
< 실시예 7> N-메톡시-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트아마이드(N-methoxy-2-(2-methyl-4-(((5-(4-(trifluoromethyl)phenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)phenoxy)acetamide)의 제조
상기 실시예 6에서 하이드록실아민 하이드로클로라이드 대신에 O-메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드를 사용한 것으로 제외하고 동일한 방법으로 화합물 7 (9.2 mg, 수득율 85%)을 얻었다.
1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ8.12 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.84 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.26 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.56 (s, 2H), 4.52 (s, 2H), 3.71 (s, 3H), 2.24 (s, 3H).
< 실시예 8> N-사이아노-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트아마이드(N-cyano-2-(2-methyl-4-(((5-(4-(trifluoromethyl)phenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)phenoxy)acetamide)의 제조
상기 실시예 6에서 하이드록실아민 하이드로클로라이드 대신에 사이안아마이드를 사용한 것으로 제외하고 동일한 방법으로 화합물 8 (14 mg, 수득율 42%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ8.11 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.83 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.30-7.22 (m, 2H), 6.81-6.75 (m, 1H), 4.69 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 2.23 (s, 3H).
< 실시예 9> 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산(2-(4-(((5-(4-fluorophenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)-2-methylphenoxy)acetic acid)의 제조
단계 1: 4-플루오로벤조하이드라자이(b-2)의 제조
상기 실시예 1의 단계 1에서 화합물 a-1 대신에 화합물 a-2를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 b-2 (1.03 g, 수득율 67%)을 얻었다.
단계 2: 에틸 2-(2-(4-플루오로벤조일)하이드라진일)-2-옥소아세테이트(c-2)의 제조
상기 실시예 1의 단계 2에서 화합물 b-1 대신에 화합물 b-2를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 c-2 (0.236 g, 수득율 93%)을 얻었다.
단계 3: 에틸 5-(4-플로오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-카복실레이트(d-2)의 제조
상기 실시예 1의 단계 3에서 화합물 c-1 대신에 화합물 c-2을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 d-2 (0.256 g, 수득율 78%)을 얻었다.
단계 4: (5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메탄올(e-2)의 제조
상기 실시예 1의 단계 4에서 화합물 d-1 대신에 화합물 d-2을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 e-2 (0.185 g, 수득율 88%)을 얻었다.
단계 5: (5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메탄올(f-2)의 제조
상기 실시예 1의 단계 5에서 화합물 e-1 대신에 화합물 e-2을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 f-2 (0.178 g, 수득율 78%)을 얻었다.
단계 6: 4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오-2-메틸페놀(g-2)의 제조
상기 실시예 1의 단계 6에서 화합물 f-1 대신에 화합물 f-2을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 g-2 (0.332 g, 수득율 97%)을 얻었다.
단계 7: 메틸 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세테이트(h-2)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-2을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 h-2 (0.340 g, 수득율 84%)을 얻었다.
단계 8: 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산(9)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 h-2을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 9 (0.363 g, 수득율 93%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C18H16FN2O3S2 [M+H]+: 391.06; found 391. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.84 (dd, J = 8.5, 5.3 Hz, 2H), 7.13 - 7.07 (m, 4H), 6.54 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.47 (s, 2H), 4.33 (s, 2H), 2.12 (s, 3H) ; 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ171.38, 169.49, 168.57, 164.44 (d, JCF = 251.2 Hz), 156.14, 134.76, 130.75, 129.85, 128.60, 126.11, 124.51, 116.28, 112.21, 60.50, 34.28, 16.13, 14.20.
< 실시예 10> 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산(2-(4-(((5-(4-fluorophenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)-2-methylphenoxy)propanoic acid)의 제조
단계 1: 에틸 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로파노에이트(i-2)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-2를 사용하고, 메틸 2-브로모아세테이트 대신에 에틸 2-브로모프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 i-2 (0.320 g, 수득율 74%)을 얻었다.
단계 2: 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산(10)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 i-2를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 10 (0.259 g, 수득율 64%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C19H18FN2O3S2 [M+H]+: 405.08; found 405. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8.01 - 7.97 (m, 2H), 7.38 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.20 (dd, J = 8.5, 1.8 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.77 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 4.61 (s, 2H), 2.13 (s, 3H), 1.49 (d, J = 6.7 Hz, 3H). 13C NMR (DMSO-d6, 100 MHz) δ 173.56, 169.86, 167.97, 164.19 (d, JCF = 248.0 Hz), 156.09, 134.09, 130.45, 127.87, 126.64, 123.96, 116.91, 112.98, 72.42, 49.07, 33.30, 18.83, 16.41.
< 실시예 11> 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산(2-(4-(((5-(4-fluorophenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)-2-methylphenoxy)-2-methylpropanoic acid)의 제조
단계 1: 에틸 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로파노에이트(j-2)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-2를 사용하고, 메틸 2-브로모아세테이트 대신에 에틸 2-브로모-2-메틸프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 j-2 (0.174 g, 수득율 39%)을 얻었다.
단계 2: 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산(11)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 j-2를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 11 (0.167 g, 수득율 40%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C20H20FN2O3S2 [M+H]+: 419.09; found 419. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.89 (dd, J = 8.4, 5.2 Hz, 2H), 7.21 (s, 1H), 7.15 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 7.10 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.40 (s, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.25 (s, 3H). 13C NMR (CDCl3, 100 MHz) δ171.34, 169.42, 168.50, 164.45 (d, JCF = 250.9 Hz), 153.60, 134.55, 131.01, 129.87, 126.25, 125.33, 117.79, 116.28, 79.52, 60.49, 34.15, 25.27, 16.75.
< 실시예 12> 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산(2-(4-(((5-(3,4-difluorophenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)-2-methylphenoxy)acetic acid)의 제조
단계 1: 3,4-다이플루오로벤조하이드라자이드(b-3)의 제조
상기 실시예 1의 단계 1에서 화합물 a-1 대신에 화합물 a-3을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 b-3 (0.34 g, 수득율 73.5%)을 얻었다.
단계 2: 에틸 2-(2-(3,4-다이플루오로벤조일)하이드라진일)-2-옥소아세테이트(c-3)의 제조
상기 실시예 1의 단계 2에서 화합물 b-1 대신에 화합물 b-3을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 c-3 (0.36 g, 수득율 67%)을 얻었다.
단계 3: 에틸 5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-카복실레이트(d-3)의 제조
상기 실시예 1의 단계 3에서 화합물 c-1 대신에 화합물 c-3을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 d-3 (54 mg, 수득율 34%)을 얻었다.
단계 4: (5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메탄올(e-3)의 제조
상기 실시예 1의 단계 4에서 화합물 d-1 대신에 화합물 d-3을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 e-3 (45 mg, 수득율 99%)을 얻었다.
단계 5: 2-(클로로메틸)-5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸(f-3)의 제조
상기 실시예 1의 단계 5에서 화합물 e-1 대신에 화합물 e-3을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 f-3 (36 mg, 수득율 74%)을 얻었다.
단계 6: 4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페놀(g-3)의 제조
상기 실시예 1의 단계 6에서 화합물 f-1 대신에 화합물 f-3을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 g-3 (50 mg, 수득율 98%)을 얻었다.
단계 7: 메틸 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸)페녹시)아세테이트(h-3)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-3을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 h-3 (64 mg, 수득율 99%)울 얻었다.
단계 8: 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산(12)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 h-3을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 12 (25 mg, 수득율 39.8%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C18H15F2N2O3S2 [M+H]+: 409.05; found 409. 1H NMR (DMSO, 400MHz) δ 8.07 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.64 (d, J = 7.28 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 4.62 (s, 2H), 4.43 (s, 2H), 2.13 (d, J = 7.3 Hz, 3H).
< 실시예 13> 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산(2-(4-(((5-(3,4-difluorophenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)-2-methylphenoxy)propanoic acid)의 제조
단계 1: 에틸 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로파노에이트(i-3)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-3을 사용하고, 메틸 2-브로모아세테이트 대신에 2-브로모프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 i-3 (67 mg, 수득율 97%)을 얻었다.
단계 2: 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산(13)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 i-3을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 13 (3 mg, 수득율 5%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C19H18FN2O3S2 [M+H]+: 423.07; found 423. 1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ 7.93 (m, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.47 (m, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.22 (d, J = 8.44 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 4.47 (s, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.61 (d, J = 6.72 Hz, 3H).
< 실시예 14> 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산(2-(4-(((5-(3,4-difluorophenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)-2-methylphenoxy)-2-methylpropanoic acid)의 제조
단계 1: 에틸 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로파노에이트(j-3)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-3을 사용하고, 메틸 2-브로모아세테이트 대신에 에틸 2-브로모-2-메틸프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 j-3 (33 mg, 수득율 50%)을 얻었다.
단계 2: 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산(14)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 j-3을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 14 (12 mg, 수득율 38%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C19H18FN2O3S2 [M+H]+: 437.08; found 437.1. 1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ 7.93 (m, 1H), 7.74 (m, 1H), 7.47 (m, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.18 (dd, J = 2.12 Hz, 6.40 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 8.52 Hz, 1H), 4.49 (s, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.58 (s, 6H). 13C NMR (CD3OD, 100 MHz) δ15.37, 24.33, 33.37, 78.81, 116.08, 116.28, 116.61, 118.07, 118.25, 124.39, 124.71, 130.38, 134.76, 154.20, 170.68, 176.20.
< 실시예 15> 2-(2-메틸-4-(((5-(3,4,5-트리플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산(2-(2-methyl-4-(((5-(3,4,5-trifluorophenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)phenoxy)acetic acid)의 제조
단계 1: 3,4,5-트리플루오로벤조하이드라자이드(b-4)의 제조
상기 실시예 1의 단계 1에서 화합물 a-1 대신에 화합물 a-4을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 b-4 (0.74 g, 수득율 39%)을 얻었다.
단계 2: 에틸 2-옥소-2-(2-(3,4,5-트리플루오로벤조일)하이드라진일)아세테이트(c-4)의 제조
상기 실시예 1의 단계 2에서 화합물 b-1 대신에 화합물 b-4을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 c-4 (0.209 g, 수득율 72%)을 얻었다.
단계 3: 에틸 5-(3,4,5-트리플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-카복실레이트(d-4)의 제조
상기 실시예 1의 단계 3에서 화합물 c-1 대신에 화합물 c-4을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 d-4 (0.21 g, 수득율 56%)을 얻었다.
단계 4: (5-3,4,5-트리플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메탄올(e-4)의 제조
상기 실시예 1의 단계 4에서 화합물 d-1 대신에 화합물 d-4을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 e-4 (0.24 g, 수득율 99%)을 얻었다.
단계 5: 2-(클로로메틸)-5-(3,4,5-트리플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸(f-4)의 제조
상기 실시예 1의 단계 5에서 화합물 e-1 대신에 화합물 e-4를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 f-4 (0.18 g, 수득율 68%)을 얻었다.
단계 6: 2-메틸-4-(((5-(3,4,5-트리플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페놀(g-4)의 제조
상기 실시예 1의 단계 6에서 화합물 f-1 대신에 화합물 f-4를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 g-4 (0.368 g, 수득율 99%)을 얻었다.
단계 7: 메틸 2-(2-메틸-4-(((5-(3,4,5-트리플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세테이트(h-4)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-4을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 h-4 (0.247 g, 수득율 56%)을 얻었다.
단계 8: 2-(2-메틸-4-(((5-(3,4,5-트리플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산(15)
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 h-4를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 15 (64 mg, 수득율 15%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C18H14F3N2O3S2 [M+H]+: 427.04; found 427. 1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ 7.67 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.15 - 7.09 (m, 2H), 6.63 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.37 (s, 2H), 3.55 (s, 2H), 2.10 (s, 3H).
< 실시예 16> 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산(2-(4-(((5-(3-chloro-4-fluorophenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)-2-methylphenoxy)acetic acid)의 제조
단계 1: 3-클로로-4-플루오로벤조하이드라자이드(b-5)의 제조
상기 실시예 1의 단계 1에서 화합물 a-1 대신에 화합물 a-5을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 b-5 (0.60 g, 수득율 88%)을 얻었다.
단계 2: 에틸 2-(2-(3-클로로-4-플루오로벤조일)하이드라진일)-2-옥소아세테이트(c-5)의 제조
상기 실시예 1의 단계 2에서 화합물 b-1 대신에 화합물 b-5을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 c-5 (0.60 g, 수득율 88%)을 얻었다.
단계 3: 에틸 5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-카복실레이트(d-5)의 제조
상기 실시예 1의 단계 3에서 화합물 c-1 대신에 화합물 c-5을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 d-5 (0.556 g, 수득율 60%)을 얻었다.
단계 4: (5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메탄올(e-5)의 제조
상기 실시예 1의 단계 4의 화합물 d-1 대신에 화합물 d-5을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 e-5 (0.451 g, 수득율 87%)을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.06 (dd, J = 6.9, 2.2 Hz, 1H), 7.84 (ddd, J = 8.6, 4.4, 2.2 Hz, 1H), 7.27 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 5.14 (s, 2H), 2.72 (brs, 1H)
단계 5: 2-(3-클로로-4-플루오로페닐)-5-(클로로메틸)-1,3,4-싸이아다이아졸(f-5)의 제조
상기 실시예 1의 단계 5에서 화합물 e-1 대신에 화합물 e-5을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 f-5 (0.259 g, 수득율 53%)을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.07 (dd, J = 6.8, 2.2 Hz, 1H), 7.84 (ddd, J = 8.6, 4.4, 2.3 Hz, 1H), 7.28 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 4.99 (s, 2H)
단계 6: 4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페놀(g-5)의 제조
상기 실시예 1의 단계 6에서 화합물 f-1 대신에 화합물 f-5을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 g-5 (69 mg, 수득율 97%)을 얻었다.
단계 7: 메틸 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세테이트(h-5)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-5을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 h-5 (74 mg, 수득율 89%)을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.01 (dd, J = 6.9, 2.2 Hz, 1H), 7.79 (ddd, J = 8.6, 4.5, 2.2 Hz, 1H), 7.26 - 7.21 (m, J = 5.3 Hz, 2H), 7.18 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 6.61 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.63 (s, 2H), 4.41 (s, 2H), 3.79 (s, 3H), 2.25 (s, 3H).
단계 8: 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산(16)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 h-5을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 16 (44 mg, 수득율 88%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C18H15ClFN2O3S2 [M+H]+: 425.02; found 425. 1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ8.12 - 8.04 (m, 1H), 7.91 - 7.82 (m, 1H), 7.41 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.23 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.60 (s, 2H), 4.48 (s, 2H), 2.23 (s, 3H). 13C NMR (CD3OD, 100 MHz) δ172.21, 170.76, 167.23, 159.62, 156.92, 134.75, 131.26, 129.36, 128.22, 128.16, 127.32, 123.52, 121.68, 117.35, 111.57, 65.45, 33.65, 14.94.
< 실시예 17> 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산(2-(4-(((5-(3-chloro-4-fluorophenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)-2-methylphenoxy)propanoic acid)의 제조
단계 1: 에틸 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로파노에이트(i-5)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-5을 사용하고, 메틸 2-브로모아세테이트 대신에 화합물 에틸 2-브로모프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 i-5 (74.8 mg, 수득율 70.2%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.01 (dd, J = 6.9, 2.2 Hz, 1H), 7.79 (ddd, J = 8.6, 4.5, 2.2 Hz, 1H), 7.25 - 7.21 (m, 2H), 7.15 (dd, J = 8.5, 2.2 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.69 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.40 (s, 2H), 4.19 (qd, J = 7.1, 1.3 Hz, 2H), 2.23 (s, 3H), 1.62 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.22 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
단계 2: 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산(17)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 i-5을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 17 (33 mg, 수득율 85%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ7.99 (dd, J = 6.8, 1.9 Hz, 1H), 7.81 - 7.71 (m, 1H), 7.34 (brs, 1H), 7.23 (m, 2H), 7.15 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.73 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 4.41 (s, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.65 (d, J = 6.8 Hz, 3H). 13C NMR (CDCl3, 100 MHz) δ176.05, 170.12, 167.17, 159.73, 155.89, 134.86, 130.73, 130.06, 128.93, 127.84, 127.22, 124.40, 122.28, 117.44, 112.53, 72.43, 34.34, 18.49, 16.25.
< 실시예 18> 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산(2-(4-(((5-(3-chloro-4-fluorophenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)-2-methylphenoxy)-2-methylpropanoic acid)의 제조
단계 1: 에틸 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로파노에이트(j-5)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-5을 사용하고, 메틸 2-브로모아세테이트 대신에 화합물 에틸 2-브로모-2-메틸프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 j-5 (12 mg, 수득율 13%)을 얻었다.
단계 2: 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산(18)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 j-5을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 18 (3 mg, 수득율 26%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C20H19ClFN2O3S2 [M+H]+: 453.05; found 453. 1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ8.15 - 8.03 (m, 1H), 7.93 - 7.83 (m, 1H), 7.42 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.18 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.49 (s, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.58 (s, 6H). 13C NMR (CD3OD, 400 MHz) δ170.69, 170.62, 167.27, 159.65 (d, J = 253.4 Hz), 154.39, 134.78, 130.45, 130.29, 129.40, 128.13, 127.32, 124.14, 121.69, 117.37, 116.67, 79.08, 33.44, 24.43, 15.37.
< 실시예 19> 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산(2-(4-(((5-(3-fluoro-4-(trifluoromethyl)phenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)-2-methylphenoxy)acetic acid)의 제조
단계 1: 3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤조하이드라자이드(b-6)의 제조
상기 실시예 1의 단계 1에서 화합물 a-1 대신에 화합물 a-6을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 b-6 (2.044 g, 수득율 92%)을 얻었다.
단계 2: 에틸 2-(2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤조일)하이드라진일)-2-옥소아세테이트(c-6)의 제조
상기 실시예 1의 단계 2에서 화합물 b-1 대신에 화합물 b-6을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 c-6 (0.139 g, 수득율 43%)을 얻었다.
단계 3: 에틸 5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-카복실레이트(d-6)의 제조
상기 실시예 1의 단계 3에서 화합물 c-1 대신에 화합물 c-6을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 d-6 (0.371 g, 수득율 89%)을 얻었다.
단계 4: (5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메탄올(e-6)의 제조
상기 실시예 1의 단계 4에서 화합물 d-1 대신에 화합물 d-6을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 e-6 (0.253 g, 수득율 91%)을 얻었다.
단계 5: 2-(클로로메틸)-5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸(f-6)의 제조
상기 실시예 1의 단계 5에서 화합물 e-1 대신에 화합물 e-6을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 f-6 (0.234 g, 수득율 79%)을 얻었다.
단계 6: 4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페놀(g-6)의 제조
상기 실시예 1의 단계 6에서 화합물 f-1 대신에 화합물 f-6을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 g-6 (0.401 g, 수득율 97%)을 제조하였다.
단계 7: 메틸 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세테이트(h-6)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-6을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 h-6 (0.421 g, 수득율 89%)을 얻었다.
단계 8: 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산(19)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 h-6을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 19 (0.264 g, 수득율 60%)을 얻었다.
1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ 7.97 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 7.92 - 7.85 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.24 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.67 (s, 2H), 4.52 (s, 2H), 2.23 (s, 3H). 13C NMR (DMSO-d6, 100 MHz) δ 171.74, 170.62, 166.53, 159.52 (d, JCF = 253.5 Hz), 156.42, 136.22, 134.06, 130.59, 129.04, 127.69, 124.63, 123.84, 122.76 (q, JCF = 271.4 Hz), 116.32, 112.57, 65.46, 33.32, 16.38.
< 실시예 20> 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산(2-(4-(((5-(3-fluoro-4-(trifluoromethyl)phenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)-2-methylphenoxy)propanoic acid)의 제조
단계 1: 에틸 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로파노에이트(i-6)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-6을 사용하고, 화합물 메틸 2-브로모아세테이트 대신에 화합물 에틸 2-브로모프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 i-6 (0.360 g, 72%)을 얻었다.
단계 2: 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산(20)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 i-6을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 20 (0.300 g, 수득율 66%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ7.81 - 7.68 (m, 3H), 7.22 (s, 1H), 7.15 (dd, J = 8.5, 1.9 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.73 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.42 (s, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.65 (d, J = 6.8 Hz, 3H). 13C NMR (CDCl3, 100 MHz) δ176.22, 171.02, 166.72, 159.89 (d, JCF = 254.5 Hz), 155.96, 135.47, 134.94, 130.83, 128.99, 128.16, 124.24, 123.43, 119.53(q, JCF = 246.2 Hz), 115.87, 112.50, 72.39, 34.40, 18.48, 16.23.
< 실시예 21> 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산(2-(4-(((5-(3-fluoro-4-(trifluoromethyl)phenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)-2-methylphenoxy)-2-methylpropanoic acid)의 제조
단계 1: 에틸 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로파노에이트(j-6)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-6을 사용하고, 메틸 2-브로모아세테이트 대신에 에틸 2-브로모-2-메틸프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 j-6 (52 mg, 수득율 10%)을 얻었다.
단계 2: 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산(21)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 j-6을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 21 (80 mg, 수득율 17%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ7.81 - 7.69 (m, 3H), 7.21 (s, 1H), 7.09 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 2.17 (s, 3H), 0.88 (s, 6H).
< 실시예 22> 2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산(2-(2-methyl-4-(((5-(p-tolyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)phenoxy)acetic acid)의 제조
단계 1: 4-메틸벤조하이드라자이드(b-7)의 제조
상기 실시예 1의 단계 1에서 화합물 a-1 대신에 화합물 a-7을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 b-7 (0.78 g, 수득율 85%)을 얻었다.
단계 2: 에틸 2-(2-(4-메틸벤조일)하이드라진일)-2-옥소아세테이트(c-7)의 제조
상기 실시예 1의 단계 2에서 화합물 b-1 대신에 화합물 b-7을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 c-7 (1.25 g, 수득율 96%)을 얻었다.
단계 3: 에틸 5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-카복실레이트(d-7)의 제조
상기 실시예 1의 단계 3에서 화합물 c-1 대신에 화합물 c-7을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 d-7 (0.840 g, 수득율 67.7%)을 얻었다.
단계 4: (5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메탄올(e-7)의 제조
상기 실시예 1의 단계 4에서 화합물 d-1 대신에 화합물 d-7을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 e-7 (0.690 g, 수득율 99%)을 얻었다.
단계 5: 2-(클로로메틸)-5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸(f-7)의 제조
상기 실시예 1의 단계 5에서 화합물 e-1 대신에 화합물 e-7을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 f-7 (0.359 g, 수득율 47.8%)을 얻었다.
단계 6: 2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페놀(g-7)의 제조
상기 실시예 1의 단계 6에서 화합물 f-1 대신에 화합물 f-7을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 g-7 (0.560 g, 수득율 97%)을 얻었다.
단계 7: 메틸 2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세테이트(h-7)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-7을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 h-7 (70 mg, 수득율 97%)을 얻었다.
단계 8: 2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산(22)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 h-7을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 22 (34 mg, 수득율 96%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C19H19N2O3S2 [M+H]+: 387.09; found 386.8. 1H NMR (DMSO, 400MHz) δ 7.80 (d, J = 7.96 Hz, 2H), 7.34 (d, J = 7.84 Hz, 2H), 7.24 (s, 1H), 7.19 (d, J = 8.28 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 8.56 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.47 (s, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.12 (s, 3H).
< 실시예 23> 2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산(2-(2-methyl-4-(((5-(p-tolyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)phenoxy)propanoic acid)의 제조
단계 1: 에틸 2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로파노에이트(i-7)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-7을 사용하고, 메틸 2-브로모아세테이트 대신에 에틸 2-브로모프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 i-7 (0.100 g, 수득율 97%)을 얻었다.
단계 2: 2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산(23)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 i-7을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 23 (34 mg, 수득율 35%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C20H21N2O3S2 [M+H]+: 401.10; found 401.1. 1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ 7.78 (d, J = 7.84 Hz, 2H), 7.33 (d, J = 7.76 Hz, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.21 (d, J = 8.44 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 4.81 (m, 1H), 4.44 (s, 1H), 2.40 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 1.63 (d, J = 6.76 Hz, 3H). 13C NMR (CD3OD, 100 MHz) δ15.00, 17.56, 20.07, 33.64, 60.71, 72.35, 112.03, 123.76, 126.84, 127.65(2C), 128.29, 129.64 (2C), 131.19, 134.87, 141.99, 156.37, 169.57, 170.04.
< 실시예 24> 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산(2-methyl-2-(2-methyl-4-(((5-(p-tolyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)phenoxy)propanoic acid)의 제조
단계 1: 에틸 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로파노에이트(j-7)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-7을 사용하고, 메틸 2-브로모아세테이트 대신에 에틸 2-브로모-2-메틸프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 j-7 (94 mg, 수득율 97%)을 얻었다.
단계 2: 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산(24)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 j-7을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 24 (2 mg, 수득율 3%)을 얻었다.
1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ 7.76 (d, J = 8.20 Hz, 2H), 7.32 (d, J = 8.04 Hz, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.17 (dd, J = 2.32 Hz, 6.20 Hz 1H), 6.72 (d, J = 8.48 Hz, 1H), 4.45 (s, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 1.57 (s, 6H). 13C NMR (CD3OD, 100 MHz) δ15.42, 20.08, 24.35(2C), 78.82, 116.68, 124.53, 126.82, 127.31 (2C), 129.64 (2C), 130.34, 134.79, 142.01, 154.16, 169.46, 170.05, 176.24.
< 실시예 25> 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산(2-(2-methyl-4-(((5-(4-(trifluoromethoxy)phenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)phenoxy)acetic acid)의 제조
단계 1: 4-(트리플루오로메틸)벤조하이드라자이드(b-8)의 제조
상기 실시예 1의 단계 1에서 화합물 a-1 대신에 화합물 a-8을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 b-8 (1.16 g, 53%)을 얻었다.
단계 2: 에틸 2-(2-(4-(플루오로옥시)벤조일)하이드라진일)-2-옥소아세테이트(c-8)의 제조
상기 실시예 1의 단계 2에서 화합물 b-1 대신에 화합물 b-8을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 c-8 (0.275 g, 수득율 86%)을 얻었다.
단계 3: 에틸 5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-카복실레이트(d-8)의 제조
상기 실시예 1의 단계 3에서 화합물 c-1 대신에 화합물 c-8을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 d-8 (0.352 g, 수득율 85%)을 얻었다.
단계 4: (5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메탄올(e-8)의 제조
상기 실시예 1의 단계 4에서 화합물 d-1 대신에 화합물 d-8을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 e-8 (0.249 g, 수득율 90%)을 얻었다.
단계 5: 2-(클로로메틸)-5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸(f-8)의 제조
상기 실시예 1의 단계 5에서 화합물 e-1 대신에 화합물 e-8을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 f-8 (0.206 g, 수득율 70%)을 얻었다.
단계 6: 2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페놀(g-8)의 제조
상기 실시예 1의 단계 6에서 화합물 f-1 대신에 화합물 f-8을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 g-8 (0.398 g, 수득율 97%)을 얻었다.
단계 7: 메틸 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세테이트(h-8)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-8을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 h-8 (0.409 g, 수득율 87%)을 얻었다.
단계 8: 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산(25)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 h-8을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 25 (0.393 g, 수득율 86%)을 얻었다.
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ8.09 - 8.05 (m, 2H), 7.54 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.21 (dd, J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.69 (s, 2H), 4.64 (s, 2H), 2.14 (s, 3H); 13C NMR (DMSO-d6, 100 MHz) δ170.55, 170.39, 167.64, 156.26, 150.55, 134.09, 130.60, 130.21, 129.17, 127.68, 124.06, 122.90 (q, JCF = 239.8 Hz), 122.30, 112.53, 65.17, 33.30, 16.38.
< 실시예 26> 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산(2-(2-methyl-4-(((5-(4-(trifluoromethoxy)phenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)phenoxy)propanoic acid)의 제조
단계 1: 에틸 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로파노에이트(i-8)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-8을 사용하고, 메틸 2-브로모아세테이트 대신에 화합물 에틸 2-브로모프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 i-8 (0.379 g, 수득율 76%)을 얻었다.
단계 2: 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산(26)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 i-8을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 26 (0.409 g, 수득율 87%)을 얻었다.
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ8.09 - 8.05 (m, 2H), 7.54 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.21 (dd, J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.80 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 4.63 (s, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.50 (d, J = 6.8 Hz, 3H). 13C NMR (DMSO-d6, 100 MHz) δ173.44, 170.38, 167.64, 156.03, 150.57, 134.13, 130.56, 130.21, 129.17, 127.92, 124.03, 122.30, 120.42 (q, JCF = 255.7 Hz), 112.98, 72.26, 33.29, 18.79, 16.39.
< 실시예 27> 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산(2-methyl-2-(2-methyl-4-(((5-(4-(trifluoromethoxy)phenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)methyl)thio)phenoxy)propanoic acid)의 제조
단계 1: 에틸 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로파노에이트(j-8)의 제조
상기 실시예 1의 단계 7에서 화합물 g-1 대신에 화합물 g-8을 사용하고, 메틸 2-브로모아세테이트 대신에 화합물 에틸 2-브로모-2-메틸프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 j-8 (0.179 g, 수득율 35%)을 얻었다.
단계 2: 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)메틸)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산(27)의 제조
상기 실시예 1의 단계 8에서 화합물 h-1 대신에 화합물 j-8을 사용한 것을 제외하고 동일한 방법으로 화합물 27 (0.170 g, 수득율 35%)을 얻었다.
ESI LC/MS: m/z calcd. for C21H20F3N2O4S2 [M+H]+: 485.08; found 485. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ7.92 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.18 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.68 (s, 1H), 4.41 (s, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.25 (s, 6H). 13C NMR (CDCl3, 100 MHz) δ169.86, 168.17, 160.90, 151.16, 142.81, 134.57, 134.52, 129.89, 129.47, 128.46, 121.60, 121.38, 119.03, 34.13, 29.72, 25.19, 16.74.
상기 실시예 1 내지 실시예 27의 화합물을 하기 표 1에 정리하였다.
No. 화학식 No. 화학식
1
Figure pat00126
 2
Figure pat00127
3
Figure pat00128
 4
Figure pat00129
5
Figure pat00130
 6
Figure pat00131
7
Figure pat00132
 8
Figure pat00133
9
Figure pat00134
 10
Figure pat00135
11
Figure pat00136
 12
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13
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 14
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15
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 16
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17
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 18
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19
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 20
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21
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 22
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23
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 24
Figure pat00149
25
Figure pat00150
 26
Figure pat00151
27
Figure pat00152
<실험 방법>
1. 동물
SLC, Inc. (Shizuoka, Japan 소재)로부터 특정 무균, 6-주령의 면역적격(immonocompetent) C57BL/6 마우스를 수득하였다. 모든 동물 실험 절차는 동물 연구에 대한 적정 기관의 지침을 엄격히 준수하여 실시하였다. 프로토콜은 국립 경북대학교의 동물실험윤리위원회의 승인을 받았다 (승인 번호: KNU 2012-43).
2. 세포 배양
대식세포인 RAW 264.7 세포는 한국세포주은행에서 분양받아 사용하였으며, DMEM에 100 mg/mL 비활성화된 소 태아 혈청(inactivated fetal bovine serum)과 10 mg/mL 페니실린-스트렙토마이신(penicillin-streptomycin)을 첨가한 배지를 배양액으로 37 ℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다. 실험과정의 모든 세포는 80% 내지 90% 정도의 밀도로 자랐을 때 계대 배양하였고, 20 passages를 넘기지 않은 세포만 사용하였다.
3. 세포 독성 측정
시료의 세포독성을 평가하기 위해 세포 계수 키트 [CCK-8; Dojindo Laboratories (Tokyo, Japan 소재)]를 이용하여 세포 증식을 검사하였다. RAW 264.7 cell 1 × 104 cells/mL를 웰 플레이트에 분주하고 20시간 전배양 후, 1 μg/mL의 LPS와 실시예 화합물을 농도별로 첨가하여 37 ℃, 5% CO2 인큐베이터에서 24시간 배양하였다. 배양 후, 10 μL CCK-8 시약을 첨가하여 1시간 내지 2시간 재배양 하고 흡광도를 측정하였다. 흡광도는 450 nm에서 마이크로플레이트 판독기 [BMG Labtech (Offenburg, Germany 소재)]를 이용하여 측정하였다.
4. 산화질소(Nitric Oxide, NO) 생성량 측정
NO의 농도는 배양액 내의 아질산염(nitrite) 농도를 griess reagent system (promega)를 이용하여 측정하였다. Raw264.7 cell은 DMEM 배지를 이용하여 2.5 × 105 cells/mL로 조절한 후 24 웰 플레이트에 접종하고 5% CO2 인큐베이터에서 20시간 전배양하였다. 세포에 1 μg/mL의 LPS와 다양한 농도의 실시예 화합물을 처리하여 24시간 재배양하였다. 배양액의 상층액을 얻은 후, griess reagent system를 이용하여 제조사에서 제공하는 프로토콜을 따라 NO 농도를 측정하였다. 흡광도는 마이크로플레이트 판독기 [BMG Labtech (Offenburg, Germany 소재)]를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포 배양액 내 NO의 농도는 아질산나트륨(sodium nitrite, NaNO2)의 농도별 표준곡선과 비교하여 산출하였다
5. 염증 관련 사이토카인 분비량 측정
NO를 측정한 방법과 동일한 방법으로 상층액을 분주하였다. 상층액에서 다량의 TNF-α 및 IL-6를 멀티플렉스 비드 기반 면역 분석 기법 (BDTM Cytometric Bead Array) 시스템과 유세포 분석법 (BD Biosciences)으로 정량화하였다.
6. 루시퍼라아제(Luciferase) 분석
NO를 측정한 방법과 동일한 방법으로 1 mg/mL LPS와 다양한 농도의 화합물을 Raw264.7/NF-kb-luc 세포에 처리하였다. 16시간 뒤 D-luciferin 용액을 세포에 첨가한 후 IVIS Lummina III를 이용하여 발광영상을 얻었다. 발광영상 정량은 Living imaging software를 이용하여 수행하였다.
7. 웨스턴 블롯(Western blot)
세포들을 차가운 PBS로 2회 세척하였으며, 완전한 프로테아제 저해제 칵테일을 함유하는 RIPA 버퍼 (Roche)로 용균시켰다. 단백질 농도는 BCA protein assay kit (Pierce, IL, USA)를 사용하여 정량하였으며, 30 μL의 용해물을 10% SDS-PAGE로 분리하였다. 분리된 단백질은 폴리비닐리덴 디플루오라이드(PVDF) 멤브레인 (Biorad, CA, USA)에 70 mA에서 1시간 30분 동안 전사시킨 후, 50 mg/mL skim milk가 포함된 TBST(tris buffered saline; pH7.5) 용액으로 상온에서 2시간 동안 블로킹하였다. iNOS, pIKKαβ의 발현 양을 검토하기 위한 항체로 anti-iNOS, pIKKαβ를 사용하여 1:1000으로 희석하고 상온에서 2시간 반응시킨 후 TBST로 3회 세정하였다. 2차 항체로 HRP(horse radish peroxidase)가 결합된 anti-mouse IgG 및 anti-rabbit IgG를 1:2000으로 희석하여 상온에서 1시간 반응시킨 후, TBST로 3회 세정하였다. 제조자 프로토콜에 따라 ECL-Plus를 이용하여 퍼옥시다아제 활성을 검출하였다.
8. 대식세포 영상 분석
C57Bl/6 마우스의 복강에 2 mL의 thioglycollate medium (BD, USA)를 주사하고 3일 후에 마우스를 경추탈골한 후 복강에서 8 mL의 Dulbecco's modified Eagle's medium(DMEM)을 주사하여 세포를 수집하였다. 원심분리 후 10% fetal bovine serum(FBS)와 1% 페니실린-스트렙토마이신(penicillin-streptomycin)이 함유된 DMEM에 현탁시킨 후 2시간 동안 37 ℃, 5% CO₂인큐베이터에 배양하였다. Non-adherent cell을 제거한 후 세포 실험에 사용하였다.
실시예 화합물의 급성염증억제능을 형광 영상을 이용한 대식세포 추적 기술을 이용하여 평가하였다. 마우스 복강에서 추출한 대식세포를 Vybrant™ DiD Cell-Labeling Solution으로 표지한 후 정맥주사로 마우스에 전달하였다. 다음날 실시예 화합물 50 mg/kg을 경구투여 후 1시간 뒤 0.1% Carrageenan(CG) 용액 또는 PBS를 마우스의 오른쪽 또는 왼쪽 발바닥 피하에 주사하였다. 지정된 시간에 맞춰 IVIS Lumina III를 이용하여 형광 영상을 얻었다.
9. 통계 분석
모든 데이터는 적어도 3 회의 독립된 시험으로부터의 평균±표준편차(SD)로서 표시되었으며, 차이의 통계적 유의성은 GrahPad Prism 5를 이용하여 단일 스튜던트 검정(unpaired Student's test)에 의하여 결정하였다. 0.05 미만의 P 값은 통계적으로 유의한 것으로 간주되었다.
< 실험예 1> 효소 활성 (EC 50 ) 분석
실시예 화합물의 PPARδ 활성화 효과를 확인하기 위하여, 다음과 같이 실험하였다. 먼저, 실시예 화합물을 최종 농도 기준으로 100X가 되도록 DMSO에 희석한 후 1/50을 시험용 완충용액(assay buffer)에 희석하고 384 웰 플레이트에 각각 10 μL씩 넣어 주었다. 이후 GST가 결합된 PPARδ LBD(ligand-binding domain)를 최종농도 5 nM, fluorescien-conjugated C33 coactivator peptide와 Tb-α-GST antibody가 각각 100 nM과 10 nM이 되도록 첨가해 주었다. 각 시험계의 최종 부피는 20 μL가 되도록 하였으며, 각 농도별 시험은 2번 반복하여 진행하였고, 반응 후 결합 활성(binding activity)은 TR-FRET방식으로 측정하였다. 즉, 340 nm에서 여기(excitation)시키고, 495 nm와 520 nm에서 각각 방출 값을 측정한 후, 결과 분석은 490 nm 측정값/520 nm 측정값으로 하였으며 EC50 값 산출은 분석프로그램 Prism 6를 사용하였다. 결과를 하기 표 2에 정리하였다.
본 시험법의 원리는 다음과 같다. PPARδ LBD에 융합되어 있는 GST에 GST 항체가 결합함으로써 비활성 상태가 유지되며, 작용제가 결합됨으로써 LBD 단백질의 구조 변화가 유도된다. 이때 GST 항체에 결합되어 있는 형광 에너지-donor가 PPARδ 기질(C33 펩타이드)에 결합된 형광 에너지-acceptor(fluorescine)에 에너지를 전달해줌으로써 형광 에너지가 발산되며, 이 값을 측정하여 PPARδ를 활성화시키는 정도를 측정할 수 있다.
한편, 테스트 물질로서 기존에 알려진 PPARδ 작용제 화합물 GW501516를 사용하였으며, 실험 별과 GW501516의 경우 EC50 값이 15.5 nM이었다.
No. 효소 활성
(EC50, μM)		 No. 효소 활성
(EC50, μM)
1 0.0399 2 0.42
3 0.374 8 0.504
9 2.437 12 0.663
13 6.157 14 2.099
15 4.014 16 1.349
18 2.21 19 0.289
20 2.356 21 2.66
22 0.574 23 5.697
24 1.252 25 0.042
26 1.243 27 0.595
< 실험예 2> 세포 독성 분석
실시예 1의 화합물의 세포독성을 평가하기 위하여 대식세포주인 Raw264.7 세포에 실시예 1 화합물을 각각 0, 12 μM, 25 μM, 50 μM의 농도로 처리한 후 상기 <실험 방법> 3에 따라 CCK8 assay를 수행하였다. CCK8 assay 분석 결과 모든 농도에서 세포 독성이 나타나지 않았다 (도 1). 구체적으로 최대 50 μM의 농도에서도 vehicle군과 유사한 세포증식을 보였으며 유의성이 검출되지 않았다.
< 실험예 3> 산화질소(Nitric Oxide, NO) 생성량 분석
NO는 각종의 조직에 존재하는 산화질소 합성 효소(nitric oxide synthase, NOS)에 의해 L-알지닌(L-arginine)으로부터 생성된다. NOS로는 Neuronal NOS, endothelial NOS, 그리고 inducible NOS (iNOS) 등 3종의 NOS가 존재하며, 이 중 NOS-2라고도 불리는 iNOS는 세균 감염 시 세균내 독소와 각종 염증성 사이토카인 등의 염증성 자극에 의해 대식세포를 포함한 다양한 세포에서 발현되며, iNOS가 일단 발현되면 장기간 다량의 NO가 생성되어 염증 시의 세포 독성에 관여하게 된다. 실시예 1 화합물에 의한 산화질소 생성량을 분석하기 위하여 다음과 같이 실험하였다.
1 mg/mL 지질다당류(lipopolysaccharide, LPS)와 0, 12 μM, 25 μM, 50 μM 농도의 실시예 1 화합물을 Raw264.7 세포에 가하여 24시간 배양하고 배양 상층내의 NO 농도 변화를 분석하였다. 분석 결과, 실시예 화합물 1의 농도 의존적으로 LPS-stimulated Raw264.7에서 분비되는 NO 농도가 감소하였으며, 구체적으로, LPS-stimulated Raw26.7 + 0 μM, LPS-stimulated Raw26.7 + 12.5 μM, LPS-stimulated Raw26.7 + 25 μM 및 LPS-stimulated Raw26.7 + 50 μM에서 각각 생성된 NO 농도는, 22.8±1.3 μM, 18.9±0.3 μM, 14.8±0.54 μM 및 2.41±0.24 μM이었다 (도 2).
< 실험예 4> iNOS 단백질 발현 억제 효과 분석 ( 웨스턴 블롯 )
실시예 1 화합물의 NO 생성 억제 효과가 iNOS 단백질 발현의 억제에 의한 것인지 확인하기 위하여, 1 mg/mL LPS와 0, 12 μM, 25 μM, 50 μM 농도의 실시예 1 화합물을 Raw264.7세포에 가한 후 상기 <실험 방법> 7의 방법으로 iNOS 단백질의 발현에 미치는 영향을 평가하였다. 그 결과, LPS를 가하지 않은 Raw264.7 세포는 iNOS 단백질을 발현하지 않았고, 1 mg/mL LPS를 가한 Raw264.7 세포에서는 높은 iNOS 단백질 발현이 확인되었다. 또한 실시예 1의 화합물을 처리한 경우 LPS-stimulated Raw264.7의 iNOS 단백질 발현이 현저히 억제됨을 확인할 수 있었다 (도 3).
< 실험예 5> 염증 관련 인자 생성 억제 효과 분석
그람 음성균의 세포외막에 존재하는 내독소로 잘 알려진 LPS는 대식세포 또는 단핵구를 자극하여 tumor necrosis factor-α(TNF-α), interleukin-1β(IL-1β) 및 interleukin-6(IL-6)와 같은 염증 매개성 사이토카인(cytokine)들의 분비를 촉진한다. 이에 실시예 1 화합물의 상기 사이토카인 분비 억제 효과를 분석하기 위하여, 1 mg/mL의 LPS와 0, 12 μM, 25 μM, 50 μM 농도의 실시예 1 화합물을 가하여 24시간 RAW264.7 세포를 배양하고, 배양 상층액 내의 IL-6와 TNFα 농도를 측정하였다. 그 결과, 실시예 1 화합물은 농도 의존적으로 LPS-stimulated Raw264.7세포에서 TNFα와 IL-6 생성을 효과적으로 억제하였으며 vehicle군 대비 통계적 유의성이 확인되었다 (도 4).
염증 반응에서 중요한 역할을 하는 nuclear factor-kappa B(NF-κB)는 다양한 사이토카인, 케모카인(chemokine), 성장인자의 합성을 조절하는 전사 인자이다. NFκB는 p50과 p65로 구성되어 핵 안으로 들어가 전사 인자로서 작용하여 iNOS, COX-2 및 염증 관련 사이토카인을 합성하며, 일반적으로 세포질에서 inhibitor NF-κBα(IκBα)와 결합함으로 NF-κB의 작용이 억제된다. Raw264.7세포에서 유발된 NF-κb 관련 세포신호전달이 실시예 1 화합물에 의해 영향을 받는지 확인하기 위하여 1 mg/mL LPS와 0, 12 μM, 25 μM, 50 μM 농도의 실시예 1 화합물을 이용하여 Raw264.7 세포에서 NF-κb promoter-luciferase 분석 및 pIKKαβ 발현 변화 분석을 실시하였다. 그 결과 1 mg/ml LPS를 Raw264.7/NF-κb-luciferase 세포에 처리할 경우 강한 발광 신호(luminescent signals)가 발생하지만, 실시예 1 화합물을 처리할 경우 농도 의존적으로 발광 신호가 감소하였으며, vehicle군과 비교할 때 통계적 유의성이 확인되었다 (도 5). 또한 실시예 1 화합물에 의해 pIKKαβ 단백질 발현 효과적으로 감소함을 확인하였다 (도 6).
이를 통해 실시예 1 화합물은 PPARδ 작용제로서 대식세포의 NF-κb 세포신호전달을 조절하여 염증 사이토카인을 조절하는데 효과적임을 알 수 있다.
< 실험예 6> 대식세포 영상 분석
마우스 족 부위에 λ-carrageenan에 의하여 유발한 염증 모델은 급성 관절염 모델로서 골관절염에 따른 부종 억제 작용을 확인하고자 할 때 유용하게 사용된다. 실시예 1 화합물의 급성 염증 억제능을 확인하기 위하여 대식세포 추적 기술 (도 7)및 상기 <실험 방법> 8에 따라 실험하였다.
그 결과, 염증 유도 전에는 0.1% CG를 주사한 모든 실험군의 발바닥에서 형광 신호를 확인할 수 없었다. 반면 염증 유도 후 6시간에는 Vehicle군의 0.1% CG 주사한 발바닥에서 강한 형광 신호를 확인하였다. 한편 50 mg/kg 실시예 1 화합물을 처리한 군의 0.1% CG 주사한 발바닥에서는 vehicle군보다 낮은 형광 신호를 확인하였으며 통계적 유의성 또한 검출되었다 (도 8 및 도 9).
이를 통해 PPARδ 작용제인 실시예 1 화합물은 세포 독성이 없으며 대식세포의 NF-κb 세포신호전달을 조절하여 염증 사이토카인 및 NO 생성을 억제하는데 효과적임을 확인할 수 있었다. 또한 급성염증부위로의 대식세포 침윤을 막는데 효과적임을 확인할 수 있었다.
이상, 본 발명을 바람직한 실시예 및 실험예를 통해 상세히 설명하였으나, 본 발명의 범위는 특성 실시예에 한정되는 것은 아니며, 첨부된 특허 청구범위에 의하여 해석되어야 할 것이다. 또한, 이 기술분야에서 통상의 지식을 습득한 자라면, 본 발명의 범위에서 벗어나지 않으면서도 많은 수정과 변형이 가능함을 이해하여야 할 것이다.

Claims (14)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 염:
    [화학식 1]
    Figure pat00153

    상기 화학식 1에서,
    R1은 각각 독립적으로 -H, 할로겐, C1- 5알킬, C1- 5할로알킬, C1- 5알콕시 또는 C1-5할로알콕시이고;
    R2는 각각 독립적으로 -H, C1- 5알킬 또는 -O-R21이고,
    상기 R21은 사이아노C1 - 5알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 8원자의 헤테로아릴C1 - 5알킬 또는
    Figure pat00154
    이고,
    상기 R211 및 R212는 각각 독립적으로 -H 또는 C1- 5알킬이고, 상기 R213은 -OH, -NH2, -NHOR214 또는 -NHCN이고,
    상기 R214는 -H 또는 C1- 5알킬이고; 및
    x 및 y는 각각 독립적으로 1 내지 5의 정수이다.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화학식 2로 표시되는 화합물인, 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 염:
    [화학식 2]
    Figure pat00155

    상기 화학식 2에서,
    R11, R12 및 R13은 각각 독립적으로 -H, 할로겐, C1- 5알킬, C1- 5할로알킬 또는 C1-5할로알콕시이고;
    R22은 -H 또는 C1- 5알킬이고; 및
    R21은 사이아노C1 - 5알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 8원자의 헤테로아릴C1 - 5알킬 또는 이고,
    상기 R211 및 R212는 각각 독립적으로 -H 또는 C1- 5알킬이고, 상기 R213은 -OH, -NH2, -NHOR214 또는 -NHCN이고,
    상기 R214는 -H 또는 C1- 5알킬이다.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화학식 3으로 표시되는 화합물인, 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 염:
    [화학식 3]
    Figure pat00157

    상기 화학식 3에서,
    R11, R12 및 R13은 각각 독립적으로 -H, 할로겐, C1- 5알킬, C1- 5할로알킬 또는 C1-5할로알콕시이고;
    R211 및 R212는 각각 독립적으로 -H 또는 C1- 5알킬이고; 및
    R213은 -OH, -NH2, -NHOR214 또는 -NHCN이고, 상기 R214는 -H 또는 C1- 5알킬이다.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 R21은
    Figure pat00158
    ,
    Figure pat00159
    ,
    Figure pat00160
    ,
    Figure pat00161
    ,
    Figure pat00162
    ,
    Figure pat00163
    ,
    Figure pat00164
    또는
    Figure pat00165
    인, 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 염.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 R1은 각각 독립적으로 -H, 할로겐, -CH3, -CF3 또는 -OCF3인, 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 염.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화합물 군으로부터 선택되는 어느 하나인, 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 염:
    (1) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산;
    (2) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산;
    (3) 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산;
    (4) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세토나이트릴;
    (5) 2-(((4-((2H-테트라졸-5-일)메톡시)-3-메틸페닐)싸이오)메틸)-5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸;
    (6) N-하이드록시-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트아마이드;
    (7) N-메톡시-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트아마이드;
    (8) N-사이아노-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트아마이드;
    (9) 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산;
    (10) 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산;
    (11) 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산;
    (12) 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산;
    (13) 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산;
    (14) 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산;
    (15) 2-(2-메틸-4-(((5-(3,4,5-트리플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산;
    (16) 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산;
    (17) 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산;
    (18) 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산;
    (19) 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산;
    (20) 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산;
    (21) 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산;
    (22) 2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산;
    (23) 2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산;
    (24) 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산;
    (25) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산;
    (26) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산; 및
    (27) 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산.
  7. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
    [화학식 1]

    상기 화학식 1에서,
    R1은 각각 독립적으로 -H, 할로겐, C1- 5알킬, C1- 5할로알킬, C1- 5알콕시 또는 C1-5할로알콕시이고;
    R2는 각각 독립적으로 -H, C1- 5알킬 또는 -O-R21이고,
    상기 R21은 사이아노C1 - 5알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 8원자의 헤테로아릴C1 - 5알킬 또는 이고,
    상기 R211 및 R212는 각각 독립적으로 -H 또는 C1- 5알킬이고, 상기 R213은 -OH, -NH2, -NHOR214 또는 -NHCN이고,
    상기 R214는 -H 또는 C1- 5알킬이고; 및
    x 및 y는 각각 독립적으로 1 내지 5의 정수이다.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화학식 2로 표시되는 화합물인, 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
    [화학식 2]

    상기 화학식 2에서,
    R11, R12 및 R13은 각각 독립적으로 -H, 할로겐, C1- 5알킬, C1- 5할로알킬 또는 C1-5할로알콕시이고;
    R22은 -H 또는 C1- 5알킬이고; 및
    R21은 사이아노C1 - 5알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 8원자의 헤테로아릴C1 - 5알킬 또는 이고,
    상기 R211 및 R212는 각각 독립적으로 -H 또는 C1- 5알킬이고, 상기 R213은 -OH, -NH2, -NHOR214 또는 -NHCN이고,
    상기 R214는 -H 또는 C1- 5알킬이다.
  9. 제7항에 있어서,
    상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화학식 3으로 표시되는 화합물인, 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
    [화학식 3]

    상기 화학식 3에서,
    R11, R12 및 R13은 각각 독립적으로 -H, 할로겐, C1- 5알킬, C1- 5할로알킬 또는 C1-5할로알콕시이고;
    R211 및 R212는 각각 독립적으로 -H 또는 C1- 5알킬이고; 및
    R213은 -OH, -NH2, -NHOR214 또는 -NHCN이고, 상기 R214는 -H 또는 C1- 5알킬이다.
  10. 제7항에 있어서,
    상기 R21은 , , , , , , 또는 인, 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  11. 제7항에 있어서,
    상기 R1은 각각 독립적으로 -H, 할로겐, -CH3, -CF3 또는 -OCF3인, 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  12. 제7항에 있어서,
    상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화합물 군으로부터 선택되는 어느 하나인, 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
    (1) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산;
    (2) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산;
    (3) 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산;
    (4) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세토나이트릴;
    (5) 2-(((4-((2H-테트라졸-5-일)메톡시)-3-메틸페닐)싸이오)메틸)-5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸;
    (6) N-하이드록시-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트아마이드;
    (7) N-메톡시-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트아마이드;
    (8) N-사이아노-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트아마이드;
    (9) 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산;
    (10) 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산;
    (11) 2-(4-(((5-(4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산;
    (12) 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산;
    (13) 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산;
    (14) 2-(4-(((5-(3,4-다이플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산;
    (15) 2-(2-메틸-4-(((5-(3,4,5-트리플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산;
    (16) 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산;
    (17) 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산;
    (18) 2-(4-(((5-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산;
    (19) 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)아세트산;
    (20) 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)프로판산;
    (21) 2-(4-(((5-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산;
    (22) 2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산;
    (23) 2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산;
    (24) 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(p-톨릴)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산;
    (25) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)아세트산;
    (26) 2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산; 및
    (27) 2-메틸-2-(2-메틸-4-(((5-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1,3,4-싸이아다이아졸-2-일)메틸)싸이오)페녹시)프로판산.
  13. 제7항에 있어서,
    상기 염증성 질환은 염증성 장질환, 골관절염, 기관지염, 류마티스 관절염, 퇴행성 관절염, 천식, 아토피, 당뇨, 심근경색, 크론병 또는 건선인, 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  14. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물:
    [화학식 1]

    상기 화학식 1에서,
    R1은 각각 독립적으로 -H, 할로겐, C1- 5알킬, C1- 5할로알킬, C1- 5알콕시 또는 C1-5할로알콕시이고;
    R2는 각각 독립적으로 -H, C1- 5알킬 또는 -O-R21이고,
    상기 R21은 사이아노C1 - 5알킬, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 5 내지 8원자의 헤테로아릴C1 - 5알킬 또는 이고,
    상기 R211 및 R212는 각각 독립적으로 -H 또는 C1- 5알킬이고, 상기 R213은 -OH, -NH2, -NHOR214 또는 -NHCN이고,
    상기 R214는 -H 또는 C1- 5알킬이고; 및
    x 및 y는 각각 독립적으로 1 내지 5의 정수이다.
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