KR20230130038A - 항-gprc5d 단클론성 항체 및 이의 용도 - Google Patents

항-gprc5d 단클론성 항체 및 이의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20230130038A
KR20230130038A KR1020237026526A KR20237026526A KR20230130038A KR 20230130038 A KR20230130038 A KR 20230130038A KR 1020237026526 A KR1020237026526 A KR 1020237026526A KR 20237026526 A KR20237026526 A KR 20237026526A KR 20230130038 A KR20230130038 A KR 20230130038A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
ser
gly
thr
tyr
leu
Prior art date
Application number
KR1020237026526A
Other languages
English (en)
Inventor
룬솅 리
웬타오 후앙
Original Assignee
라노바 메디신즈 디벨롭먼트 컴퍼니 리미티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 라노바 메디신즈 디벨롭먼트 컴퍼니 리미티드 filed Critical 라노바 메디신즈 디벨롭먼트 컴퍼니 리미티드
Priority claimed from PCT/CN2022/070287 external-priority patent/WO2022148370A1/en
Publication of KR20230130038A publication Critical patent/KR20230130038A/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2809—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against the T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/14—Blood; Artificial blood
    • A61K35/15—Cells of the myeloid line, e.g. granulocytes, basophils, eosinophils, neutrophils, leucocytes, monocytes, macrophages or mast cells; Myeloid precursor cells; Antigen-presenting cells, e.g. dendritic cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/14—Blood; Artificial blood
    • A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/68031—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being an auristatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6875—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody being a hybrid immunoglobulin
    • A61K47/6879—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody being a hybrid immunoglobulin the immunoglobulin having two or more different antigen-binding sites, e.g. bispecific or multispecific immunoglobulin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/734—Complement-dependent cytotoxicity [CDC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/77—Internalization into the cell
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Abstract

인간 GPRC5D 단백질에 대해 결합 특이성을 갖는 항체 또는 이의 단편이 제공된다. 상기 항체 또는 이의 단편은 GPRC5D를 발현하는 암 세포를 표적으로 할 수 있어서, 암, 특히 혈액암을 치료하는 데 사용될 수 있다.

Description

항-GPRC5D 단클론성 항체 및 이의 용도
G-단백질-연결 수용체 패밀리 C 그룹 5 멤버 D(G-protein-coupled receptor family C group 5 member D: GPRC5D)는 G 단백질-연결 수용체 패밀리의 구성원이다. GPRC5D는 막관통 단백질이다. 다발성 골수종을 갖는 환자에서 GPRC5D의 과발현이 발견되었다. 특히, 이의 높은 발현은 질환 및 치료의 불량한 결과와 상당한 관련성을 가졌다.
악성 세포에서의 이의 특이적 고발현을 고려하여, GPRC5D에 특이적인 항체가 예컨대, 이중특이적 T-세포-재지향 항체를 통해서 또는 항체-의존적 세포 세포독성(ADCC)을 통해서 악성종양의 치료에 유용할 수 있다는 것이 제안되었다.
인간 GPRC5D 단백질에 대해서 높은 친화도를 갖는 인간화 유도체를 비롯한 항-GPRC5D 항체가 본 명세서에서 발견되었다. 이러한 항체 또는 이의 단편은 GPRC5D를 발현하는 암 세포를 표적으로 할 수 있어서, 암, 특히 혈액암을 치료하는 데 사용될 수 있다.
본 개시내용의 일 실시형태는 인간 G-단백질-연결 수용체 패밀리 C 그룹 5 멤버 D(GPRC5D) 단백질에 대해 결합 특이성을 갖는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공하되, 항체 또는 이의 단편은 중쇄 상보성 결정 영역 CDRH1, CDRH2 및 CDRH3을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH) 및 상보성 결정 영역 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)을 포함한다. 일부 실시형태에서, CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각 (a) 서열번호 29 내지 34의 아미노산 서열; (b) 서열번호 42 내지 47의 아미노산 서열; (c) 서열번호 54 내지 59의 아미노산 서열; 또는 (d) 서열번호 68 내지 73의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시형태에서, CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각 서열번호 29 내지 34의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, VH는 서열번호 7 및 35 내지 37로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하고, VL은 서열번호 8 및 38 내지 41로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, VH는 서열번호 35의 아미노산 서열을 포함하고, VL은 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시형태에서, CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각 서열번호 42 내지 47의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, VH는 서열번호 9 및 48 내지 50으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하고, VL은 서열번호 10 및 51 내지 53으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, VH는 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하고, VL은 서열번호 51의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시형태에서, CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각 서열번호 54 내지 59의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, VH는 서열번호 61 내지 64로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하고, VL은 서열번호 16 및 65 내지 67로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, VH는 서열번호 61의 아미노산 서열을 포함하고, VL은 서열번호 65의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, VH는 서열번호 63의 아미노산 서열을 포함하고, VL은 서열번호 65의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시형태에서, CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각 서열번호 68 내지 73의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, VH는 서열번호 1 및 74 내지 79로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하고, VL은 서열번호 2 및 80 내지 86으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, VH는 서열번호 76의 아미노산 서열을 포함하고, VL은 서열번호 82의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, VH는 서열번호 77의 아미노산 서열을 포함하고, VL은 서열번호 82의 아미노산 서열을 포함한다.
일부 실시형태에서, 항체 또는 이의 단편은 인간화된다. 일부 실시형태에서, 항체 또는 이의 단편은 ADCC-적격이다.
또한, 일부 실시형태에서, 제공된 항체 또는 이의 단편은 항체 또는 이의 단편에 접합된 세포독성 약물을 추가로 포함한다.
또한 본 개시내용의 항원 결합 단편 및 제2 표적 단백질에 대한 특이성을 갖는 제2 항원 결합 단편을 포함하는 이중특이적 항체가 제공된다. 일부 실시형태에서, 제2 표적 단백질은 CD3, CD16, CD19, CD28, CD64 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 제2 표적 단백질은 CD3이다. 일부 실시형태에서, 제2 표적 단백질은 4-1BB이다.
또한 암의 치료를 필요로 하는 환자에서 암을 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 환자에게 본 개시내용의 항체 또는 이의 단편을 투여하는 단계를 포함한다. 또한 암의 치료를 필요로 하는 환자에서 암을 치료하는 방법이 제공되며, 이 방법은 (a) T 세포, 자연 살해(NK) 세포 또는 대식세포를 시험관내에서 본 개시내용의 항체 또는 이의 단편으로 처리하는 단계 및 (b) 처리된 세포를 환자에게 투여하는 단계를 포함한다.
일부 실시형태에서, 암은 혈액암, 예컨대, GPRC5D-발현 B 세포암(예를 들어, 다발성 골수종)이다.
도 1은 CHO-K1 세포 상에서 발현된 GPRC5D에 대한 하이브리도마 상청액으로부터 수집된 뮤린 항체의 결합을 도시한다.
도 2는 CHO-K1 세포 상에서 발현된 GPRC5D에 대한 키메라 항체의 결합을 도시한다.
도 3은 항체 결합 유도 엔도사이토시스(endocytosis)를 도시한다.
도 4는 항체가 ADCC-적격이었음을 나타낸다.
도 5 내지 도 8은 6G10D9, 58F9G10, 34D3H1 및 37B9C4 각각으로부터 유래된 인간화 항체의 친화도 시험 결과를 도시한다.
도 9는 CHO-K1 세포 상에서 발현된 GPRC5D에 대한 선택된 인간화 항체의 결합을 도시한다.
도 10은 NCI-H929 세포 상에서 발현된 GPRC5D에 대한 선택된 인간화 항체의 결합을 도시한다.
도 11은 시험된 인간화 항체의 ADCC 효능을 도시한다.
도 12는 시험된 인간화 항체의 내재화 유도 활성을 도시한다.
도 13은 시험된 항체-약물 접합체의 세포 사멸 활성을 도시한다.
도 14는 시험된 항체의 종양 저해 활성을 도시한다.
정의
용어 단수형("a" 또는 "an") 대상물은 그 대상물 중 하나 이상을 지칭한다는 점에 유의해야 한다; 예를 들어, "하나의 항체"는 하나 이상의 항체를 나타내는 것으로 이해된다. 이와 같이, 용어 단수형("a" 또는 "an"), "하나 이상", 및 "적어도 하나"는 본 명세서에서 상호교환적으로 사용될 수 있다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "폴리펩티드"는 단수의 "폴리펩티드" 및 복수의 "폴리펩티드"를 포괄하는 의도이며, 아미드 결합(펩티드 결합으로도 알려져 있음)에 의해 선형으로 결합되는 단량체(아미노산)로 이루어진 분자를 나타낸다. 용어 "폴리펩티드"는 둘 이상의 아미노산의 임의의 쇄 또는 쇄들을 지칭하며, 특정 길이의 생성물을 지칭하지는 않는다. 따라서, 펩티드, 디펩티드, 트리펩티드, 올리고펩티드, "단백질", "아미노산쇄", 또는 2개 이상의 아미노산의 쇄 또는 쇄들을 나타내기 위해 이용되는 임의의 다른 용어가 "폴리펩티드"의 정의 내에 포함되며, "폴리펩티드"라는 용어는 임의의 이러한 용어 대신, 또는 이와 상호 교환적으로 이용될 수 있다. 용어 "폴리펩티드"는 또한 비제한적으로 글리코실화, 아세틸화, 인산화, 아미드화, 공지된 보호기/차단기에 의한 유도체화, 단백분해 절단, 또는 비-자연적 생성 아미노산에 의한 변형을 포함하는, 폴리펩티드의 발현-후 변형 산물을 나타내려는 것으로 의도된다. 폴리펩티드는 자연적인 생물학적 공급원에서 유도되거나 재조합 기술에 의해 제조될 수 있지만, 반드시 지정된 핵산 서열로부터 번역되지는 않는다. 이는 화학적 합성에 의한 것을 포함하는 임의의 방식으로 생성될 수 있다.
"상동성" 또는 "동일성" 또는 "유사성"은 2개의 펩티드 사이 또는 2개의 핵산 분자 사이의 서열 동일성을 지칭한다. 상동성은 비교 목적을 위해서 정렬될 수 있는 각각의 서열에서 위치를 비교함으로써 결정될 수 있다. 비교된 서열 내의 위치가 동일한 염기 또는 아미노산에 의해서 점유되는 경우, 분자는 해당 위치에서 상동성이다. 서열들 사이의 상동성 정도는 서열에 의해서 공유되는 매칭 또는 상동성 위치의 수의 함수이다. "미관련" 또는 "비-상동성" 서열은 본 개시내용의 서열의 것과 40% 미만의 동일성, 바람직하게는 25% 미만의 동일성을 공유한다.
폴리뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드 영역(또는 폴리펩티드 또는 폴리펩티드 영역)이 또 다른 서열과 특정 백분율(예를 들어, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 99%)의 "서열 동일성"을 갖는다는 것은, 정렬되는 경우 염기(또는 아미노산)의 백분율이 두 서열을 비교할 때 동일하다는 것을 의미한다.
용어 "등가 핵산 또는 폴리뉴클레오티드"는 핵산 또는 이의 상보체의 뉴클레오티드 서열과 특정 정도의 상동성 또는 서열 동일성을 갖는 뉴클레오티드 서열을 갖는 핵산을 지칭한다. 이중 가닥 핵산의 동족체는 이의 상보체와 특정 정도의 상동성을 갖는 뉴클레오티드 서열을 핵산을 포함하도록 의도된다. 일 양상에서, 핵산의 동족체는 핵산 또는 이의 상보체에 혼성화할 수 있다. 마찬가지로, "등가 폴리펩티드"는 참조 폴리펩티드의 아미노산 서열과 특정 정도의 상동성 또는 서열 동일성을 갖는 폴리펩티드를 지칭한다. 일부 양상에서, 서열 동일성은 적어도 약 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 99%이다. 일부 양상에서, 등가 폴리펩티드 또는 폴리뉴클레오티드는 참조 폴리펩티드 또는 폴리뉴클레오티드와 비교할 때 1개, 2개, 3개, 4개 또는 5개의 부가, 결실, 치환 및 이들의 조합을 갖는다. 일부 양상에서, 등가 서열은 참조 서열의 활성(예를 들어, 에피토프-결합) 또는 구조(예를 들어, 염-다리)를 보유한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "항체" 또는 "항원 결합 폴리펩티드"는 항원을 특이적으로 인식하고 이에 결합하는 폴리펩티드 또는 폴리펩티드 복합체를 지칭한다. 항체는 전체 항체 및 임의의 이의 항원 결합 단편 또는 이의 단일 쇄일 수 있다. 따라서 용어 "항체"는 항원에 대한 결합의 생물학적 활성을 갖는 면역글로불린 분자의 적어도 일부를 포함하는 분자를 함유하는 임의의 단백질 또는 펩티드를 포함한다. 이의 예는 중쇄 또는 경쇄의 상보성 결정 영역(CDR) 또는 이의 리간드 결합 부분, 중쇄 또는 경쇄 가변 영역, 중쇄 또는 경쇄 불변 영역, 프레임워크(FR) 영역 또는 이의 임의의 부분 또는 결합 단백질의 적어도 한 부분을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같은 용어 "항체 단편" 또는 "항원 결합 단편"은 항체, 예컨대, F(ab')2, F(ab)2, Fab', Fab, Fv, scFv 등의 일부이다. 구조에 관계없이, 항체 단편은 온전한 항체에 의해서 인식되는 동일한 항원과 결합한다. 용어 "항체 단편"은 압타머, 스피겔머(spiegelmer) 및 디아바디를 포함한다. 용어 "항체 단편"은 또한 특정 항원에 결합하여 복합체를 형성함으로써 항체와 같이 작용하는 임의의 합성 또는 유전자 조작 단백질을 포함한다.
"단일 쇄 가변 단편" 또는 "scFv"는 면역글로불린의 중쇄(VH) 및 경쇄(VL)의 가변 영역의 융합 단백질을 지칭한다. 일부 양상에서, 이러한 영역은 10개 내지 약 25개 아미노산의 짧은 링커 펩티드와 연결된다. 링커는 가요성을 위해서 글리신이 풍부하거나 가용성을 위해 세린 또는 트레오닌이 풍부할 수 있고, VH의 N-말단을 VL의 C-말단과 연결할 수 있거나 그 역도 가능하다. 이러한 단백질은 불변 영역의 제거와 링커의 도입에도 불구하고, 원래 면역글로불린의 특이성을 유지한다. ScFv 분자는 당업계에 알려져 있으며 예를 들어, 미국 특허 제5,892,019호에 개시된다.
용어 항체는 생화학적으로 구별될 수 있는 폴리펩티드의 다양한 넓은 부류를 포함한다. 당업자는 중쇄가 이들 중 일부 서브클래스(예컨대, γ1 내지 γ4)를 가지며, 감마, 뮤, 알파, 델타 또는 엡실론(γ, μ, α, δ, ε)으로 분류됨을 이해할 것이다. 항체의 "클래스"를 각각 IgG, IgM, IgA IgG 또는 IgE로 결정하는 것은 상기 쇄의 성질이다. 면역글로불린 하위클래스(이소타입), 예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgG5 등은 잘 특징규명되어 있으며, 기능적 특화를 부여하는 것으로 알려져 있다. 각각의 이러한 클래스 및 이소타입의 변형된 버전은 본 개시내용의 측면에서 당업자에게 쉽게 식별 가능하며, 따라서 본 개시내용의 범위 내이다. 모든 면역글로불린 클래스는 명확하게 본 개시내용의 범위 내에 있으며, 하기 논의는 일반적으로 면역글로불린 분자의 IgG 클래스에 관한 것일 것이다. IgG에 있어서, 표준 면역글로불린 분자는 분자량 대략 23,000달톤의 2개의 동일한 경쇄 폴리펩티드 및 분자량 53,000~70,000의 2개의 동일한 중쇄 폴리펩티드를 포함한다. 4개 쇄는 전형적으로 "Y" 배치로 이황화 결합에 의해 연결되며, 여기서 경쇄는 "Y"의 입구에서 시작하여 가변 영역을 통해 계속 중쇄를 둘러싼다.
본 개시내용의 항체, 이의 항원 결합 폴리펩티드, 변이체 또는 유도체는 다클론성, 단클론성, 다중특이적, 인간, 인간화, 영장류화, 또는 키메라 항체, 단일 쇄 항체, 에피토프-결합 단편, 예를 들어 Fab, Fab' 및 F(ab')2, Fd, Fv, 단일 쇄 Fv(scFv), 단일 쇄 항체, 이황화-결합 Fv(sdFv), VK 또는 VH 도메인을 포함하는 단편, Fab 발현 라이브러리에 의해 제조된 단편, 항-이디오타입(항-Id) 항체(예를 들어, 본 명세서에 개시된 LIGHT 항체에 대한 항-Id 항체 포함)를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 본 개시내용의 면역글로불린 또는 항체 분자는 임의의 유형(예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA 및 IgY), 부류(예를 들어, IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgAl 및 IgA2) 또는 면역글로불린 분자의 하위부류일 수 있다.
경쇄는 카파 또는 람다(κ, λ)로 분류된다. 각각의 중쇄 클래스에는 카파 또는 람다 경쇄가 결합될 수 있다. 일반적으로, 경쇄 및 중쇄는 서로 공유 결합되며, 2개 중쇄의 "꼬리" 부분은 공유 이황화 결합 또는 면역글로불린이 하이브리도마, B 세포 또는 유전적으로 조작된 숙주 세포에 의해 생성되는 경우 비-공유 결합에 의해 서로 결합된다. 중쇄에서, 아미노산 서열은 Y 배치의 포크형 말단에서의 N-말단으로부터 각 쇄의 하부에서의 C-말단으로 진행된다.
경쇄 및 중쇄는 모두 구조적 및 기능적 상동성 영역으로 구분된다. 용어 "불변" 및 "가변"은 기능적으로 이용된다. 이에 관해, 경쇄(VK) 및 중쇄(VH) 부분 둘 다의 가변 도메인이 항원 인식 및 특이성을 결정함이 이해될 것이다. 반대로, 경쇄의 불변 도메인(CK) 및 중쇄(CH1, CH2 또는 CH3)의 불변 도메인은 중요한 생물학적 특성, 예컨대, 분비, 태반통과 이동성, Fc 수용체 결합, 보체 결합 등을 부여한다. 관례 상, 불변 영역 도메인의 넘버링은 이들이 항체의 항원 결합 부위 또는 아미노-말단에서 더 멀어짐에 따라 증가한다. N-말단 부분은 가변 영역이며 C-말단 부분은 불변 영역이고; CH3 및 CK 도메인은 실제로 중쇄 및 경쇄 각각의 카르복시-말단을 포함한다.
상기에 나타낸 바와 같이, 가변 영역은 항체가 항원 상의 에피토프를 선택적으로 인식하고 특이적으로 결합하도록 허용한다. 즉, 항체의 VK 도메인 및 VH 도메인, 또는 상보성 결정 영역(CDR)의 하위세트가 조합되어 3차원 항원 결합 자리를 정의하는 가변 영역을 형성한다. 4차 항체 구조는 Y의 각 팔의 말단에 존재하는 항원 결합 자리를 형성한다. 보다 상세하게, 항원 결합 자리는 VH 및 VK 쇄(즉, CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3) 각각의 3개의 CDR에 의해 정의된다. 일부 경우, 예를 들어, 낙타 종으로부터 유래된 또는 낙타 면역글로불린에 기반하여 조작된 특정한 면역글로불린 분자에서, 완전 면역글로불린 분자는 경쇄 없이 중쇄만으로 구성될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Hamers-Casterman et al., Nature 363:446-448 (1993)]을 참조한다.
자연 발생 항체에서, 각각의 항원 결합 도메인에 존재하는 6개의 "상보성 결정 영역" 또는 "CDR"은 항체가 수성 환경에서 그 3차원 배치를 취함에 따라 특이적으로 배치되어 항원 결합 도메인을 형성하는 짧은, 비-근접 아미노산 서열이다. "프레임워크" 영역으로 불리는 항원 결합 도메인 내의 나머지 아미노산은 더 적은 분자-간 가변성을 나타낸다. 골격 영역은 대부분 β-시트 형태를 채용하고 CDR은 β-시트 구조에 연결되고 일부 경우 β-시트 구조의 일부를 형성하는 루프를 형성한다. 따라서, 프레임워크 영역은 쇄-간, 비-공유 상호작용에 의해 정확한 배향으로 CDR 배치를 제공하는 골격을 형성하는 작용을 한다. 배치된 CDR에 의해 형성된 항원 결합 도메인은 면역반응성 항원 상의 에피토프에 상보적인 표면을 정의한다. 상기 상보적 표면은 이의 동족 에피토프에 대한 항체의 비-공유 결합을 촉진한다. CDR 및 골격 영역을 각각 포함하는 아미노산은 임의의 주어진 중쇄 또는 경쇄 가변 영역에 대하여 당업자에 의해 용이하게 식별될 수 있는데, 이는 아미노산이 정확하게 정의되어 있기 때문이다(문헌["Sequences of Proteins of Immunological Interest," Kabat, E., et al., U.S. Department of Health and Human Services, (1983); 및 Chothia and Lesk, J. MoI. Biol., 196:901-917 (1987)] 참조).
당분야에서 이용되고/되거나 허용되는 용어의 2개 이상의 정의가 존재하는 경우, 본 명세서에서 이용되는 용어의 정의는 달리 명시적으로 반대로 언급되지 않는 한, 이러한 모든 의미를 포함하려는 것이다. 구체적인 예는 중쇄 및 경쇄 폴리펩티드 둘 모두의 가변 영역 내에서 발견되는 비인접 항원 조합 부위를 기술하기 위하여 용어 "상보성 결정 영역"("CDR")을 사용하는 것이다. 이러한 특정 영역은 전문이 참조에 의해 본 명세서에 포함된 문헌[Kabat et al., U.S. Dept. of Health and Human Services, "Sequences of Proteins of Immunological Interest" (1983) 및 Chothia et al., J. MoI. Biol. 196:901-917 (1987)]에 기재되어 있다. Kabat 및 Chothia에 따른 CDR 정의는 서로에 대해서 비교되는 경우 아미노산 잔기의 중첩 또는 하위세트를 포함한다. 그럼에도 불구하고, 항체 또는 이의 변이체의 CDR을 지칭하기 위한 어느 하나의 정의의 적용은 본 명세서에서 정의되고 사용되는 바와 같은 용어의 범위 내에 있는 것으로 의도된다. 상기 인용된 참고문헌 각각에 의해 정의되는 바와 같은 CDR을 포괄하는 적절한 아미노산 잔기는 비교로서 하기 표 2에 기재되어 있다. 특정 CDR을 포괄하는 정확한 잔기 수는 CDR의 서열 및 크기에 따라 달라질 것이다. 해당 분야의 숙련자는 항체의 가변 영역 아미노산 서열이 주어졌을 때 어떤 잔기가 특정 CDR을 구성하는지 통상적으로 결정할 수 있다.
Kabat 등은 또한, 임의의 항체에 적용될 수 있는 가변 도메인 서열에 대한 넘버링 시스템도 정의하였다. 해당 분야의 숙련자는 서열 자체를 벗어난 임의의 실험 데이터에 의존하지 않으면서 이러한 "Kabat 넘버링" 시스템을 임의의 가변 도메인 서열에 명확히 배정할 수 있다. 본 명세서에서 이용되는 "Kabat 넘버링"은 문헌[Kabat et al., U.S. Dept. of Health and Human Services, "Sequence of Proteins of Immunological Interest" (1983)]에 나타낸 넘버링 시스템을 나타낸다.
상기 표에 더하여, Kabat 넘버 시스템은 하기와 같은 CDR 영역을 기재한다: CDR-H1은 대략 아미노산 31(즉, 첫 번째 시스테인 잔기 후 대략 9개 잔기)에서 시작되며, 대략 5개 내지 7개 아미노산을 포함하고, 다음 트립토판 잔기에서 끝난다. CDR-H2는 CDR-H1의 종료 후 15번째 잔기에서 시작되며, 대략 16개 내지 19개 아미노산을 포함하고, 다음 아르기닌 또는 리신 잔기에서 끝난다. CDR-H3은 CDR-H2의 종료 후 대략 33번째 아미노산 잔기에서 시작되며; 3개 내지 25개 아미노산을 포함하고; 서열 W-G-X-G에서 끝나며, 식 중 X는 임의의 아미노산이다. CDR-L1은 대략 잔기 24(즉, 시스테인 잔기 뒤)에서 시작되며, 대략 10개 내지 17개 잔기를 포함하고, 다음 트립토판 잔기에서 끝난다. CDR-L2는 CDR-L1의 종료 후 대략 16번째 잔기에서 시작되며, 대략 7개 잔기를 포함한다. CDR-L3은 CDR-L2의 종료 후(즉, 시스테인 잔기 뒤) 대략 33번째 잔기에서 시작되며; 대략 7개 내지 11개 잔기를 포함하고; 서열 F 또는 W-G-X-G에서 끝나며, 식 중 X는 임의의 아미노산이다.
본 명세서에 개시된 항체는 조류 및 포유동물을 포함하는 임의의 동물 기원에서 유래할 수 있다. 바람직하게는, 항체는 인간, 뮤린, 당나귀, 토끼, 염소, 기니피그, 낙타, 라마, 말 또는 닭 항체이다. 또 다른 실시형태에서, 가변 영역은 콘드릭토이드 기원(예를 들어, 상어 유래)일 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "중쇄 불변 영역"은 면역글로불린 중쇄로부터 유래된 아미노산 서열을 포함한다. 중쇄 불변 영역을 포함하는 폴리펩티드는 CH1 도메인, 힌지(예를 들어, 상부, 중앙, 및/또는 하부 힌지 영역) 도메인, CH2 도메인, CH3 도메인, 또는 이의 변이체 또는 단편 중 적어도 하나를 포함한다. 예를 들어, 본 개시내용에서 사용하기 위한 항원 결합 폴리펩티드는 CH1 도메인을 포함하는 폴리펩티드쇄; CH1 도메인, 적어도 일부 힌지 도메인 및 CH2 도메인을 포함하는 폴리펩티드쇄; CH1 도메인 및 CH3 도메인을 포함하는 폴리펩티드쇄; CH1 도메인, 적어도 일부 힌지 도메인 및 CH3 도메인을 포함하는 폴리펩티드쇄, 또는 CH1 도메인, 적어도 일부 힌지 도메인, CH2 도메인 및 CH3 도메인을 포함하는 폴리펩티드쇄를 포함할 수 있다. 또 다른 실시형태에서, 본 개시내용의 폴리펩티드는 CH3 도메인을 포함하는 폴리펩티드쇄를 포함한다. 추가로, 본 개시내용에 사용하기 위한 항체는 적어도 일부 CH2 도메인(예를 들어, CH2 도메인의 전부 또는 일부)이 없을 수 있다. 상기에 나타낸 바와 같이, 중쇄 부분 불변 영역은 이들이 자연 발생 면역글로불린 분자로부터의 아미노산 서열에서 변화하도록 변형될 수 있음이 당업자에게 이해될 것이다.
본 명세서에 개시된 항체의 중쇄 불변 영역은 상이한 면역글로불린 분자로부터 유래될 수 있다. 예를 들어, 폴리펩티드의 중쇄 불변 영역은 IgGl 분자로부터 유래된 CH1 도메인 및 IgG3 분자로부터 유래된 힌지 영역을 포함할 수 있다. 또 다른 예에서, 중쇄 불변 영역은 부분적으로 IgGl 분자로부터, 그리고 부분적으로 IgG3 분자로부터 유래된 힌지 영역을 포함할 수 있다. 또 다른 예에서, 중쇄 부분은 부분적으로 IgGl 분자로부터, 그리고 부분적으로 IgG4 분자로부터 유래된 키메라성 힌지를 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "경쇄 불변 영역"은 항체 경쇄로부터 유래된 아미노산 서열을 포함한다. 바람직하게는, 경쇄 불변 영역은 불변 카파 도메인 또는 불변 람다 도메인 중 적어도 하나를 포함한다.
"경쇄-중쇄 쌍"은 경쇄의 CL 도메인과 중쇄의 CH1 도메인 간의 이황화 결합을 통해서 이량체를 형성할 수 있는 경쇄와 중쇄의 집합을 지칭한다.
이전에 나타낸 바와 같이, 다양한 면역글로불린 클래스의 불변 영역의 소단위 구조 및 3차원 배치는 널리 공지되어 있다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "VH 도메인"은 면역글로불린 중쇄의 아미노 말단 가변 도메인을 포함하며, 용어 "CH1 도메인"은 면역글로불린 중쇄의 제1(가장 아미노 말단의) 불변 영역 도메인을 포함한다. CH1 도메인은 VH 도메인에 인접하며, 면역글로불린 중쇄 분자의 힌지 영역에 대해 아미노 말단이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "CH2 도메인"은 예를 들어, 통상적 넘버링 방식을 이용해서 항체의 대략 잔기 244 내지 잔기 360(잔기 244 내지 360, Kabat 넘버링 시스템; 및 잔기 231~340, EU 넘버링 시스템; 문헌[Kabat et al., U.S. Dept. of Health and Human Services, "Sequences of Proteins of Immunological Interest" (1983)] 참조)으로부터 연장되는 중쇄 분자 부분을 포함한다. CH2 도메인은 이것이 또 다른 도메인과 밀접하게 페어링되지 않는다는 점에서 독특하다. 오히려, 2개의 N-결합 분기형 탄수화물쇄가 온전한 원상태 IgG 분자의 2개 CH2 도메인 사이에 개입된다. 또한 CH3 도메인은 IgG 분자의 CH2 도메인에서 C-말단으로 연장되며 대략 108개 잔기를 포함함이 잘 보고되어 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "힌지 영역"은 CH1 도메인을 CH2 도메인으로 결합시키는 중쇄 분자 부분을 포함한다. 상기 힌지 영역은 대략 25개 잔기를 포함하며, 가요성이므로 2개의 N-말단 항원 결합 영역이 독립적으로 움직일 수 있도록 한다. 힌지 영역은 3개의 별개의 도메인, 즉, 상부, 중간 및 하부 힌지 도메인으로 세분될 수 있다(Roux et al., J. Immunol 161:4083 (1998)).
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "이황화 결합"은 2개의 황 원자 사이에 형성되는 공유 결합을 포함한다. 아미노산 시스테인은 제2 티올기와 이황화 결합 또는 가교를 형성할 수 있는 티올기를 포함한다. 대부분의 자연 발생 IgG 분자에서, CH1 및 CK 영역은 이황화 결합에 의해 연결되며, 2개의 중쇄는 Kabat 넘버링 시스템을 이용해서 239 및 242에 대응하는 위치(위치 226 또는 229, EU 넘버링 시스템)에서 2개의 이황화 결합에 의해 연결된다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "키메라 항체"는 면역반응성 영역 또는 부위가 제1종으로부터 수득되거나 유도되고, 불변 영역(본 개시에 따라 온전하거나, 부분적이거나, 변형될 수 있음)이 제2 종으로부터 수득되는 임의의 항체를 의미하기 위해 이용될 것이다. 특정 실시형태에서, 표적 결합 영역 또는 부위는 비-인간 공급원(예를 들어, 마우스 또는 영장류) 유래일 것이며 불변 영역은 인간 유래이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "백분율 인간화"는 인간화 도메인과 생식계열 도메인 간의 프레임워크 아미노산 차이(즉, 비-CDR 차이)의 수를 결정하고, 그 수를 아미노산의 총 수로부터 차감하고, 그 다음 그것을 아미노산의 총 수로 나누고 100을 곱하여 계산된다.
"특이적으로 결합하는" 또는 "에 대한 특이성을 갖는"이란, 일반적으로 항체가 그 항원 결합 도메인을 통해 에피토프에 결합하며, 결합에 항원 결합 도메인 및 에피토프 간 일부 상보성이 수반됨을 의미한다. 이 정의에 따르면, 항체가 무작위의 관련 없는 에피토프에 결합하는 것보다 더 용이하게 이의 항원 결합 도메인을 통해 에피토프에 결합할 때, 항체가 이러한 에피토프에 "특이적으로 결합한다"고 한다. 용어 "특이성"은 특정한 항체가 특정한 에피토프에 결합하는 상대 친화도를 정량하기 위해 본 명세서에서 사용된다. 예를 들어, 항체 "A"는 항체 "B"에 비해 주어진 에피토프에 대해 더 높은 특이성을 갖는 것으로 간주될 수도 있고, 또는 항체 "A"는 이것이 관련된 에피토프 "D"에 대해 갖는 것보다 높은 특이성으로 에피토프 "C"에 결합하는 것으로 언급될 수도 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "치료하다" 또는 "치료"와 같은 용어는 치료적 처치 및 예방적 또는 방지적 조치를 모두 나타내며, 여기서 목적은 원치 않는 생리적 변화 또는 장애, 예컨대, 암의 진행을 예방하거나 지연하는(경감하는) 것이다. 유리한 또는 원하는 임상 결과는 검출 가능하든 검출 불가능하든 관계없이 증상의 완화, 질환 정도의 감소, 질환의 안정화된(즉, 악화되지 않는) 상태, 질환 진행의 지연 또는 둔화, 병태의 개선 또는 경감, 및 (부분적이든지 전체적이든지) 관해를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. "치료"는 또한 치료를 제공받지 않는 경우 예상되는 생존과 비교하여 생존을 연장하는 것을 의미할 수 있다. 치료를 필요로 하는 대상체는 질환 또는 장애를 이미 갖는 대상체뿐만 아니라 상기 질환 또는 장애를 갖기 쉬운 대상체, 또는 상기 질환 또는 장애가 예방되어야 할 대상체를 포함한다.
"대상체" 또는 "개체" 또는 "동물" 또는 "환자" 또는 "포유동물"은 진단, 예후 또는 치료가 요구되는 임의의 대상체, 특히 포유동물 대상체를 의미한다. 포유동물 대상체는 인간, 가축 동물, 농장 동물; 및 동물원, 스포츠, 또는 애완 동물, 예컨대, 개, 고양이, 기니피그, 토끼, 래트, 마우스, 말, 양, 소 등을 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "치료를 필요로 하는 환자에게" 또는 "치료를 필요로 하는 대상체"와 같은 구는 예를 들어, 검출, 진단 절차 및/또는 치료를 위해서 사용되는 본 개시내용의 항체 또는 조성물의 투여로부터 이익을 얻을 대상체, 예컨대, 포유동물 대상체를 포함한다.
항-GPRC5D 항체
하이브리도마 기술을 사용하여, 첨부된 실험 실시예는 다수의 뮤린 항체가 얻어졌음을 나타내었다. 뮤린 항체 중 14개를 서열결정하고, 인간화 항체를 만들었다. 이들 인간화 항체는 강력한 GPRC5D-결합 활성을 나타내었고, 수용체-매개 엔도사이토시스를 유도할 수 있다. 생체내 시험은 이들 항체가 ADCC를 유도하고 종양 발달을 저해하는 데 활성이었음을 나타내었다.
뮤린 항체 중 4개, 즉, 34D3H1, 37B9C4, 58F9G10 및 6G10D9는 인간화 과정을 거쳤다. 6-H3L3, 6-H4L3(둘 다 6G10D9로부터 유래됨), 58-H1L1, 58-H3L1(둘 다 58F9G10으로부터 유래됨), 34-H1L1(34D3H1로부터 유래됨) 및 37-H1L1(37B9C4로부터 유래됨)을 비롯한 인간화 항체 중 일부는 지속적인 임상 개발 가능성을 추가로 나타내었다.
따라서, 본 개시내용의 일 실시형태에 따르면, 인간 G-단백질-연결 수용체 패밀리 C 그룹 5 멤버 D(GPRC5D) 단백질에 대해 결합 특이성을 갖는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 제공된다. 항체 또는 이의 단편은 중쇄 상보성 결정 영역 CDRH1, CDRH2 및 CDRH3을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH) 및 상보성 결정 영역 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)을 포함한다.
일부 실시형태에서, CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각 (a) 서열번호 29 내지 34의 아미노산 서열; (b) 서열번호 42 내지 47의 아미노산 서열; (c) 서열번호 54 내지 59 또는 서열번호 54, 60 및 56 내지 59의 아미노산 서열; 또는 (d) 서열번호 68 내지 73의 아미노산 서열을 포함한다.
일 실시형태에서, CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각 서열번호 29 내지 34의 아미노산 서열을 포함한다. VH에 대한 예시적인 서열은 서열번호 7 및 35 내지 37, 또는 서열번호 7 및 35 내지 37 중 임의의 것과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다. VL에 대한 예시적인 서열은 서열번호 8 및 38 내지 41, 또는 서열번호 8 및 38 내지 41 중 임의의 것과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다.
일 실시형태에서, VH는 서열번호 35의 아미노산 서열, 또는 서열번호 35와 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다. 일 실시형태에서, VL은 서열번호 38의 아미노산 서열, 또는 서열번호 38과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다.
또한 일부 실시형태에서, 이들 항체 중 임의의 것과 동일한 FAPα 상의 에피토프에 결합하는 항체 및 이의 항원 결합 단편이 제공된다. 또한 일부 실시형태에서, FAPα에 대한 결합에서 이들 항체 중 어느 하나, 예컨대, 서열번호 35의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 갖는 것과 경쟁하는 항체 및 이의 항원 결합 단편이 제공된다.
일 실시형태에서, CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각 서열번호 42 내지 47의 아미노산 서열을 포함한다. VH에 대한 예시적인 서열은 서열번호 9 및 48 내지 50, 또는 서열번호 9 및 48 내지 50 중 임의의 것과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다. VL에 대한 예시적인 서열은 서열번호 10 및 51 내지 53, 또는 서열번호 10 및 51 내지 53 중 임의의 것과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다.
일 실시형태에서, VH는 서열번호 48의 아미노산 서열, 또는 서열번호 48과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다. 일 실시형태에서, VL은 서열번호 51의 아미노산 서열, 또는 서열번호 51과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다.
또한 일부 실시형태에서, 이들 항체 중 임의의 것과 동일한 FAPα 상의 에피토프에 결합하는 항체 및 이의 항원 결합 단편이 제공된다. 또한 일부 실시형태에서, FAPα에 대한 결합에서 이들 항체 중 어느 하나, 예컨대, 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호 51의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 갖는 것과 경쟁하는 항체 및 이의 항원 결합 단편이 제공된다.
일 실시형태에서, CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각 서열번호 54 내지 59의 아미노산 서열을 포함한다. VH에 대한 예시적인 서열은 서열번호 61 내지 64, 또는 서열번호 61 내지 64 중 임의의 것과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다. VL에 대한 예시적인 서열은 서열번호 16 및 65 내지 67, 또는 서열번호 16 및 65 내지 67 중 임의의 것과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다.
일 실시형태에서, VH는 서열번호 61의 아미노산 서열, 또는 서열번호 61과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다. 일 실시형태에서, VL은 서열번호 65의 아미노산 서열, 또는 서열번호 65와 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다.
또한 일부 실시형태에서, 이들 항체 중 임의의 것과 동일한 FAPα 상의 에피토프에 결합하는 항체 및 이의 항원 결합 단편이 제공된다. 또한 일부 실시형태에서, FAPα에 대한 결합에서 이들 항체 중 어느 하나, 예컨대, 서열번호 61의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호 65의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 갖는 것과 경쟁하는 항체 및 이의 항원 결합 단편이 제공된다.
일 실시형태에서, VH는 서열번호 63의 아미노산 서열, 또는 서열번호 63과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다. 일 실시형태에서, VL은 서열번호 65의 아미노산 서열, 또는 서열번호 65와 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다.
또한 일부 실시형태에서, 이들 항체 중 임의의 것과 동일한 FAPα 상의 에피토프에 결합하는 항체 및 이의 항원 결합 단편이 제공된다. 또한 일부 실시형태에서, FAPα에 대한 결합에서 이들 항체 중 어느 하나, 예컨대, 서열번호 63의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호 65의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 갖는 것과 경쟁하는 항체 및 이의 항원 결합 단편이 제공된다.
일 실시형태에서, CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각 서열번호 54, 60 및 56 내지 59의 아미노산 서열을 포함한다. VH에 대한 예시적인 서열은 서열번호 15, 또는 서열번호 15 중 임의의 것과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다. VL에 대한 예시적인 서열은 서열번호 16 및 65 내지 67, 또는 서열번호 16 및 65 내지 67 중 임의의 것과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다.
일 실시형태에서, CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각 서열번호 68 내지 73의 아미노산 서열을 포함한다. VH에 대한 예시적인 서열은 서열번호 1 및 74 내지 79, 또는 서열번호 1 및 74 내지 79 중 임의의 것과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다. VL에 대한 예시적인 서열은 서열번호 2 및 80 내지 86 또는 서열번호 2 및 80 내지 86 중 임의의 것과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다.
일 실시형태에서, VH는 서열번호 76의 아미노산 서열, 또는 서열번호 76과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다. 일 실시형태에서, VL은 서열번호 82의 아미노산 서열, 또는 서열번호 82와 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다.
또한 일부 실시형태에서, 이들 항체 중 임의의 것과 동일한 FAPα 상의 에피토프에 결합하는 항체 및 이의 항원 결합 단편이 제공된다. 또한 일부 실시형태에서, FAPα에 대한 결합에서 이들 항체 중 어느 하나, 예컨대, 서열번호 76의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호 82의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 갖는 것과 경쟁하는 항체 및 이의 항원 결합 단편이 제공된다.
일 실시형태에서, VH는 서열번호 77의 아미노산 서열, 또는 서열번호 77과 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다. 일 실시형태에서, VL은 서열번호 82의 아미노산 서열, 또는 서열번호 82와 적어도 85%, 90% 또는 95% 서열 동일성을 갖는 서열을 포함한다.
또한 일부 실시형태에서, 이들 항체 중 임의의 것과 동일한 FAPα 상의 에피토프에 결합하는 항체 및 이의 항원 결합 단편이 제공된다. 또한 일부 실시형태에서, FAPα에 대한 결합에서 이들 항체 중 어느 하나, 예컨대, 서열번호 77의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호 82의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 갖는 것과 경쟁하는 항체 및 이의 항원 결합 단편이 제공된다.
일부 실시형태에서, 항체 또는 이의 단편은 ADCC-적격이다. 예컨대, 적절한 Fc 단편을 사용하거나 푸코실화를 감소/제거하여 항체를 ADCC-적격으로 만들기에 적합한 방법 및 물질은 당업계에 공지되어 있다.
일부 실시형태에서, CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각 (a) 서열번호 29 내지 34의 아미노산 서열; (b) 서열번호 42 내지 47의 아미노산 서열; (c) 서열번호 54 내지 59, 또는 서열번호 54, 60 및 56 내지 59의 아미노산 서열; 또는 (d) 서열번호 68 내지 73의 아미노산 서열을 포함하며, 언급된 CDR 서열 각각은 1개, 2개 또는 3개의 보존적 아미노산 치환을 포함한다.
"보존적 아미노산 치환"은 아미노산 잔기가 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기로 교체되는 것이다. 염기성 측쇄(예를 들어, 리신, 아르기닌, 히스티딘), 산성 측쇄(예를 들어, 아스파르트산, 글루탐산), 하전되지 않은 극성 측쇄(예를 들어, 글리신, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시스테인), 비극성 측쇄(예를 들어, 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌, 트립토판), 베타-분지형 측쇄(예를 들어, 트레오닌, 발린, 이소류신) 및 방향족 측쇄(예를 들어, 티로신, 페닐알라닌, 트립토판, 히스티딘)를 포함한, 유사한 측쇄를 갖는 아미노산의 패밀리가 당해 분야에 정의되어 있다. 따라서, 면역글로불린 폴리펩티드에서 비필수 아미노산 잔기는 바람직하게는 동일한 측쇄 패밀리로부터의 또 다른 아미노산 잔기로 대체된다. 또 다른 실시형태에서, 아미노산의 스트링은 순서 및/또는 측쇄 과 구성원의 조성이 상이한, 구조적으로 유사한 스트링으로 대체될 수 있다.
보존적 아미노산 치환의 비제한적인 예는 하기 표에 제공되어 있고, 0 또는 그보다 더 높은 유사성 점수는 두 아미노산 간의 보존적 치환을 나타낸다.
[표 A]
[표 B]
당업자는 또한 본 명세서에 개시된 바와 같은 항체가 이들이 유래된 자연 발생 결합 폴리펩티드로부터의 아미노산 서열에서 달라지도록 변형될 수 있다는 것을 이해할 것이다. 예를 들어, 지정된 단백질로부터 유래된 폴리펩티드 또는 아미노산 서열은 유사할 수 있고, 예를 들어, 출발 서열과 특정 백분율 동일성을 가질 수 있고, 예를 들어, 그것은 출발 서열과 60%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 99% 동일할 수 있다.
일부 실시형태에서, 항-CCR8 항체는 비변형된 mAb와 비교하여 향상된 ADCC를 매개하는 활성화 Fcg 수용체에 대해 더 높은 친화도로 결합하는 변형된 중쇄 불변 영역, 예컨대, 비푸코실화된(afucosylated) 중쇄를 포함하는 변형된 mAb이다. 일부 실시형태에서, 항-CCR8 항체는 ADCC 기능을 향상시키는 L234Y, L235Q, G236W, S239D/M, F243L, H268D, D270E, R292P, S298A, Y300L, V305I, K326D, A330L/M, I332E, K334A/E, P396L(모두 EU 넘버링) 단일 또는 이들의 조합을 포함하는 인간 IgG1 변이체를 갖는 중쇄를 포함한다.
특정 실시형태에서, 항체는 아미노산 서열, 또는 항체와 일반적으로 회합되지 않는 하나 이상의 모이어티를 포함한다. 예시적인 변형을 하기에 상세하게 기재한다. 예를 들어, 본 개시내용의 항체는 가요성 링커 서열을 포함할 수 있거나, 기능성 모이어티(예를 들어, PEG, 약물, 독소 또는 표지)를 부가하도록 변형될 수 있다.
본 개시내용의 항체, 이의 변이체 또는 유도체는, 즉, 공유 부착이 항체가 에피토프에 결합하는 것을 방지하지 않도록 항체에 대한 임의의 유형의 분자의 공유 부착에 의해서, 변형되는 유도체를 포함한다. 예를 들어, 비제한적으로, 항체는 예를 들어, 글리코실화, 아세틸화, 페길화, 인산화, 인산화, 아미드화, 공지된 보호기/차단기에 의한 유도체화, 단백질분해 절단, 세포 리간드 또는 다른 단백질에 대한 연결에 의해서 변형될 수 있다. 다수의 화학적 변형 중 임의의 것은 특이적 화학 절단, 아세틸화, 포르밀화, 튜니카마이신의 대사 합성 등을 포함하지만 이들로 제한되지 않는 공지된 기술에 의해서 수행될 수 있다. 추가로, 항체는 하나 이상의 비-고전 아미노산을 함유할 수 있다.
항체-약물 접합체
GPRC5D는 특정 악성 혈액 세포, 예컨대, 다발성 골수종 세포에서 과발현된다. 따라서, 본 개시내용의 항체 및 단편은 저해, 불활성화 또는 파괴를 위해 악성 세포를 표적화하는 데 사용될 수 있다. 일례에서, 항체 또는 단편은 악성 세포를 저해, 불활성화 또는 파괴하는 데 도움이 되는 작용제에 접합된다. 항체가 GPRC5D-매개 엔도사이토시스를 유도할 수 있다는 것이 본 명세서에서 제시된다.
일부 실시형태에서, 항체 또는 단편은 치료제, 전구약물, 펩티드, 단백질, 효소, 바이러스, 지질, 생물학적 반응 변형제, 약학 제제, 또는 PEG에 접합될 수 있다. 일부 실시형태에서, 접합된 작용제는 짧은 간섭 RNA(siRNA) 또는 선천적 조절자, 예컨대, 인터페론 유전자의 STimulator(STING) 효능제 또는 TLR7/8 효능제일 수 있다.
일 실시형태에서, 본 개시내용의 항체 또는 단편은 약물 모이어티에 공유 부착된다. 약물 모이어티는 항체 상의 접합점과 반응성인 기일 수 있거나 이를 포함하도록 변형될 수 있다. 예를 들어, 약물 모이어티는 알킬화(예를 들어, 항체의 엡실론-아미노기 리신 또는 N-말단에서), 산화된 탄수화물의 환원적 아민화, 히드록실과 카르복실기 사이의 에스테르교환반응, 아미노기 또는 카르복실기에서의 아미드화 및 티올에 대한 접합에 의해서 부착될 수 있다.
일부 실시형태에서, 항체 분자당 접합된 약물 모이어티의 수 p는 평균 1 내지 8; 1 내지 7, 1 내지 6, 1 내지 5, 1 내지 4, 1 내지 3 또는 1 내지 2 범위이다. 일부 실시형태에서, p는 평균 2 내지 8, 2 내지 7, 2 내지 6, 2 내지 5, 2 내지 4 또는 2 내지 3 범위이다. 다른 실시형태에서, p는 평균 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8이다. 일부 실시형태에서, p는 평균 약 1 내지 약 20, 약 1 내지 약 10, 약 2 내지 약 10, 약 2 내지 약 9, 약 1 내지 약 8, 약 1 내지 약 7, 약 1 내지 약 6, 약 1 내지 약 5, 약 1 내지 약 4, 약 1 내지 약 3 또는 약 1 내지 약 2 범위이다. 일부 실시형태에서, p는 약 2 내지 약 8, 약 2 내지 약 7, 약 2 내지 약 6, 약 2 내지 약 5, 약 2 내지 약 4 또는 약 2 내지 약 3 범위이다.
예를 들어, 단백질의 화학적 활성화가 유리 티올기를 형성하는 경우, 단백질은 설프히드릴 반응제와 접합될 수 있다. 일 양상에서, 작용제는 유리 티올기에 대해 실질적으로 특이적인 것이다. 이러한 작용제는 예를 들어, 말레이미드, 할로아세트아미드(예를 들어, 아이오도, 브로모 또는 클로로), 할로에스테르(예를 들어, 아이오도, 브로모 또는 클로로), 할로메틸 케톤(예를 들어, 아이오도, 브로모 또는 클로로), 벤질 할라이드(예를 들어, 아이오다이드, 브로마이드 또는 클로라이드), 비닐 설폰 및 피리딜티오를 포함한다.
약물은 링커에 의해 항체 또는 단편에 연결될 수 있다. 적합한 링커는 예를 들어, 절단 가능한 링커 및 절단 불가능한 링커를 포함한다. 절단 가능한 링커는 전형적으로 세포내 조건 하에서 절단되기 쉽다. 적합한 절단 가능한 링커는 예를 들어, 리소좀 프로테아제 또는 엔도좀 프로테아제와 같은 세포내 프로테아제에 의해 절단 가능한 펩티드 링커를 포함한다. 예시적인 실시형태에서, 링커는 디펩티드 링커, 예컨대, 발린-시트룰린(val-cit), 페닐알라닌-리신(phe-lys) 링커 또는 말레이미도카프로닉-발린-시트룰린-p-아미노벤질옥시카르보닐(mc-Val-Cit-PABA) 링커일 수 있다. 또 다른 링커는 설포석신이미딜-4-[N-말레이미도메틸]시클로헥산-1-카르복실레이트(smcc)이다. 설포-smcc 접합은 설프히드릴(티올, -SH)과 반응하는 말레이미드기를 통해 발생하는 반면, 설포-NHS 에스테르는 1차 아민(리신 및 단백질 또는 펩티드 N-말단에서 발견됨)에 대해 반응성이다. 또 다른 링커는 말레이미도카프로일(mc)이다. 다른 적합한 링커는 히드라존 링커와 같은 특정 pH 또는 pH 범위에서 가수분해 가능한 링커를 포함한다. 추가의 적합한 절단 가능한 링커는 이황화 링커를 포함한다. 링커, 예를 들어, mc 링커 등은 약물이 방출되기 위해서 항체가 세포내에서 분해되어야 하는 정도로 항체에 공유 결합될 수 있다.
링커는 항체에 연결하기 위한 기를 포함할 수 있다. 예를 들어, 링커는 아미노, 히드록실, 카르복실 또는 설프히드릴 반응성기(예를 들어, 말레이미드, 할로아세트아미드(예를 들어, 아이오도, 브로모 또는 클로로), 할로에스테르(예를 들어, 아이오도, 브로모 또는 클로로), 할로메틸 케톤(예를 들어, 아이오도, 브로모 또는 클로로), 벤질 할라이드(예를 들어, 아이오다이드, 브로마이드 또는 클로라이드), 비닐 설폰 및 피리딜티오)를 포함할 수 있다.
일부 실시형태에서, 약물 모이어티는 세포독성제 또는 세포증식억제제(cytostatic agent), 면역억제제, 방사성동위원소, 독소 등이다. 접합체는 종양 세포 또는 암 세포의 증식을 저해하거나, 종양 또는 암 세포에서 아폽토시스를 유발하거나, 환자에서 암을 치료하기 위해 사용될 수 있다. 따라서 접합체는 동물 암의 치료를 위한 다양한 환경에서 사용될 수 있다. 접합체는 종양 세포 또는 암세포에 약물을 전달하는 데 사용될 수 있다. 이론에 얽매이고자 함은 아니지만, 일부 실시형태에서, 접합체는 GPRC5D를 발현하는 암 세포에 결합하거나 회합하고, 접합체 및/또는 약물은 수용체-매개 엔도사이토시스를 통해 종양 세포 또는 암 세포 내부로 흡수될 수 있다.
일단 세포 내부에 존재하면, 접합체(예를 들어, 링커) 내의 하나 이상의 특정 펩티드 서열이 하나 이상의 종양 세포 또는 암 연관 프로테아제에 의해 가수분해 절단되어 약물이 방출된다. 그 다음 방출된 약물은 세포 내에서 자유롭게 이동하여 세포독성 또는 세포증식억제 또는 기타 활동을 유도한다. 일부 실시형태에서, 약물은 종양 세포 또는 암 세포 외부에서 항체로부터 절단되고, 이어서 약물은 세포에 침투하거나 세포 표면에서 작용한다.
약물 모이어티 또는 페이로드의 예는 DM1(메이탄신, N2'-데아세틸-N2'-(3-메르캅토-1-옥소프로필)- 또는 N2'-데아세틸-N2'-(3-메르캅토-1-옥소프로필)-메이탄신), mc-MMAD(6-말레이미도카프로일-모노메틸오리스타틴-D 또는 N-메틸-L-발릴-N-[(1S,2R)-2-메톡시-4-[(2S)-2-[(1R,2R)-1-메톡시-2-메틸-3-옥소-3-[[(1S)-2-페닐-1-(2-티아졸릴)에틸]아미노]프로필]-1-피롤리딘일]-1-[(1S)-1-메틸프로필]-4-옥소부틸]-N-메틸-(9Cl)-L-발린아미드), mc-MMAF(말레이미도카프로일-모노메틸오리스타틴 F 또는 N-[6-(2,5-디히드로-2,5-디옥소-1H-피롤-1-일)-1-옥소헥실]-N-메틸-L-발릴-L-발릴-(3R,4S,5S)-3-메톡시-5-메틸-4-(메틸아미노)헵타노일-(αR,βR,2S)-β-메톡시-α-메틸-2-피롤리딘프로판오일-L-페닐알라닌) 및 mc-Val-Cit-PABA-MMAE(6-말레이미도카프로일-ValcCit-(p-아미노벤질옥시카르보닐)-모노메틸오리스타틴 E 또는 N-[[[4-[[N-[6-(2,5-디히드로-2,5-디옥소-1H-피롤-1-일)-1-옥소헥실]-L-발릴-N5-(아미노카르보닐)-L-오르니틸]아미노]페닐]메톡시]카르보닐]-N-메틸-L-발릴-N-[(1S,2R)-4-[(2S)-2-[(1R,2R)-3-[[(1R,2S)-2-히드록시-1-메틸-2-페닐에틸]아미노]-1-메톡시-2-메틸-3-옥소프로필]-1-피롤리딘일]-2-메톡시-1-[(1S)-1-메틸프로필]-4-옥소부틸]-N-메틸-L-발린아미드)로 이루어진 군으로부터 선택된다. DM1은 튜불린 저해제인 메이탄신의 유도체인 반면 MMAD, MMAE 및 MMAF는 오리스타틴 유도체이다. 일부 실시형태에서, 약물 모이어티는 mc-MMAF 및 mc-Val-Cit-PABA-MMAE로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 약물 모이어티는 메이탄시노이드 또는 오리스타틴이다.
항체 또는 단편은 치료제에 접합 또는 융합될 수 있고, 이것은 검출 가능한 표지, 예컨대, 방사성 표지, 면역조절제, 호르몬, 효소, 올리고뉴클레오티드, 광활성 치료제 또는 진단제, 세포독성제를 포함할 수 있고, 이것은 약물 또는 독소, 초음파 증강제, 비방사성 표지, 이들의 조합 및 당업계에 공지된 이러한 다른 작용제일 수 있다.
항체는 화학발광 화합물에 커플링됨으로써 검출 가능하게 표지될 수 있다. 이어서 화학발광제-태그화 항원 결합 펩티드의 존재는 화학 반응 과정 동안 일어나는 발광의 존재를 검출함으로써 결정된다. 특히 유용한 화학발광 표지화 화합물의 예는 루미놀, 이소루미놀, 테로마틱 아크리디늄 에스테르, 이미다졸, 아크리디늄 염 및 옥살레이트 에스테르이다.
항체는 또한 형광 방출 금속, 예컨대, 152Eu 또는 다른 란탄족 시리즈를 사용하여 검출 가능하게 표지될 수 있다. 이들 금속은 디에틸렌트리아민펜트아세트산(DTPA) 또는 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA)과 같은 금속 킬레이트화기를 이용해서 항체에 부착될 수 있다. 항체에 다양한 모이어티를 접합하기 위한 기술은 널리 공지되어 있고, 예를 들어, 문헌[Arnon et al., "Monoclonal Antibodies For Immunotargeting Of Drugs In Cancer Therapy", in Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy, Reisfeld et al. (eds.), pp. 243-56 (Alan R. Liss, Inc. (1985); Hellstrom et al., "Antibodies For Drug Delivery", in Controlled Drug Delivery (2nd Ed.), Robinson et al., (eds.), Marcel Dekker, Inc., pp. 623- 53 (1987); Thorpe, "Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review", in Monoclonal Antibodies '84: Biological And Clinical Applications, Pinchera et al. (eds.), pp. 475-506 (1985); "Analysis, Results, And Future Prospective Of The Therapeutic Use Of Radiolabeled Antibody In Cancer Therapy", in Monoclonal Antibodies For Cancer Detection And Therapy, Baldwin et al. (eds.), Academic Press pp. 303-16 (1985) 및 Thorpe et al., "The Preparation And Cytotoxic Properties Of Antibody-Toxin Conjugates", Immunol. Rev. (52:119-58 (1982)]을 참조한다.
이작용성 분자 및 병용 요법
GPRC5D는 특정 악성 혈액 세포, 예컨대, 다발성 골수종 세포에서 과발현된다. 따라서, 본 개시내용의 항체 및 단편은 저해, 불활성화 또는 파괴를 위해 악성 세포를 표적화하는 데 사용될 수 있다. 일부 실시형태에서, GPRC5D 단백질 및 면역 세포 둘 다를 표적으로 하는 이작용성 또는 이중특이적 분자/항체가 제공된다.
일부 실시형태에서, 면역 세포는 T 세포, B 세포, 단핵구, 대식세포, 호중구, 수지상 세포, 식세포, 자연 살해 세포, 호산구, 호염구 및 비만 세포로 이루어진 군으로부터 선택된다. 표적화될 수 있는 면역 세포 상의 분자는 예를 들어, CD3, CD16, CD19, CD28, CD64 및 4-1BB(CD137이라고도 알려짐)를 포함한다. 다른 예는 PD-1, CTLA-4, LAG-3(CD223이라고도 알려짐), CD28, CD122, TIM3, OX-40 또는 OX40L, CD40 또는 CD40L, LIGHT, ICOS/ICOSL, GITR/GITRL, TIGIT, CD27, VISTA, B7H3, B7H4, HEVM 또는 BTLA(CD272라고도 알려짐), 살해-세포 면역글로불린-유사 수용체(KIR) 및 CD47을 포함한다. 이중특이체의 구체적인 예는 비제한적으로 GPRC5D/CD3을 포함한다.
이중특이적 항체의 상이한 형식이 또한 제공된다. 일부 실시형태에서, 각각의 항-PD-L1 단편 및 제2 단편은 각각 Fab 단편, 단일 쇄 가변 단편(scFv) 또는 단일 도메인 항체로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시형태에서, 이중특이적 항체는 Fc 단편을 추가로 포함한다.
항체를 암호화하는 폴리뉴클레오티드 및 항체의 제조 방법
본 개시내용은 또한 본 개시내용의 항체, 이의 변이체 또는 유도체를 암호화하는 단리된 폴리뉴클레오티드 또는 핵산 분자를 제공한다. 본 개시내용의 폴리뉴클레오티드는 동일한 폴리뉴클레오티드 분자 또는 별개의 폴리뉴클레오티드 분자 상의 항원 결합 폴리펩티드, 이의 변이체 또는 유도체의 전체 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 암호화할 수 있다. 추가로, 본 개시내용의 폴리뉴클레오티드는 동일한 폴리뉴클레오티드 분자 또는 별개의 폴리뉴클레오티드 분자 상의 항원 결합 폴리펩티드, 이의 변이체 또는 유도체의 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 일부를 암호화할 수 있다.
항체 제조 방법은 당업계에 널리 공지되어 있고 본 명세서에 기재되어 있다. 특정 실시형태에서, 본 개시내용의 항원 결합 폴리펩티드의 가변 영역 및 불변 영역은 둘 다 완전 인간이다. 완전 인간 항체는 당업계에 기재된 바와 같은 기술 및 본 명세서에 기재된 바와 같은 기술을 사용하여 제조될 수 있다. 예를 들어, 특정 항원에 대한 완전 인간 항체는 항원 시험감염에 응답하여 이러한 항체를 생산하도록 변형되었지만 내인성 유전자좌가 기능 상실된 트랜스제닉 동물에게 항원을 투여함으로써 제조될 수 있다. 이러한 항체를 제조하는 데 사용될 수 있는 예시적인 기술은 미국 특허 제6,150,584호; 제6,458,592호; 제6,420,140호에 기재되어 있고, 상기 특허는 이들의 전문이 참조에 의해 포함된다.
치료 방법
본 명세서에 기재된 바와 같이, 본 개시내용의 항체, 변이체 또는 유도체는 특정 치료 또는 진단 방법에 사용될 수 있다.
본 개시내용은 추가로 본 명세서에 기재된 장애 또는 병태 중 하나 이상을 치료하기 위해서 본 개시내용의 항체를 환자, 예컨대, 동물, 포유동물 및 인간에게 투여하는 것을 포함하는 항체-기반 요법에 관한 것이다. 본 개시내용의 치료용 화합물은 본 개시내용의 항체(본 명세서에 기재된 바와 같은 이의 변이체 및 유도체 포함) 및 본 개시내용의 항체를 암호화하는 핵산 또는 폴리뉴클레오티드(본 명세서에 기재된 바와 같은 이의 변이체 및 유도체 포함)를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
본 개시내용의 항체는 또한 암을 치료 또는 저해하는 데 사용될 수 있다. 상기에 제공된 바와 같이, GPRC5D는 암 세포, 특히 다발성 골수종에서 과발현될 수 있다. GPRC5D의 저해는 암을 치료하는 데 유용하다고 밝혀져 있다.
따라서, 일부 실시형태에서, 암의 치료를 필요로 하는 환자에서 암을 치료하는 방법이 제공된다. 일 실시형태에서, 이 방법은 환자에게 유효량의 본 개시내용의 항체를 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, 환자에서 암 세포 중 적어도 하나는 GPRC5D를 과발현한다. 일부 실시형태에서, 항체 또는 단편은 ADCC-적격이다. 일부 실시형태에서, 항체 또는 단편은 세포독성제를 추가로 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체는 면역 세포, 예컨대, 세포독성 T 세포를 추가로 표적으로 하는 이중특이적이다.
세포 요법, 예컨대, 키메라 항원 수용체(CAR) T-세포(또는 NK 세포, 대식세포) 요법이 또한 본 개시내용에 제공된다. 본 개시내용의 항-GPRC5D 항체와 접촉하는(또는 대안적으로는 본 개시내용의 항-GPRC5D 항체를 발현하도록 조작된) 적합한 세포가 사용될 수 있다. 이러한 접촉 또는 조작 시, 그 다음 세포는 치료를 필요로 하는 암 환자에게 도입될 수 있다. 암 환자는 본 명세서에 개시된 바와 같은 임의의 유형의 암을 가질 수 있다. 세포(예를 들어, T 세포)는 예를 들어, 비제한적으로 종양-침윤 T 림프구, CD4+ T 세포, CD8+ T 세포, 자연 살해(NK) 세포, 대식세포 또는 이들의 조합일 수 있다.
일부 실시형태에서, 세포는 암 환자 자체로부터 단리될 수 있다. 일부 실시형태에서, 세포는 공여자에 의해서 또는 세포 은행으로부터 제공되었다. 세포가 암 환자로부터 단리되는 경우, 바람직하지 않은 면역 반응이 최소화될 수 있다.
암의 비제한적인 예는 혈액암, 예컨대, 다발성 골수종을 포함한다. 다른 예는 백혈병(급성 백혈병(예를 들어, 급성 림프구성 백혈병, 급성 골수구성 백혈병(골수모구, 전골수구성, 골수단핵구성, 단구성 및 적백혈병 포함) 포함) 및 만성 백혈병(예를 들어, 만성 골수구성(과립구성) 백혈병 및 만성 림프구성 백혈병)) 및 림프종(예를 들어, 호지킨병 및 비호지킨병), 및 다발성 골수종을 포함한다.
임의의 특정 환자에 대한 특정 투여량 및 치료 요법은 사용된 특정 항체, 이의 변이체 또는 유도체, 환자의 연령, 체중, 일반 건강, 성별 및 식이, 및 투여 시간, 배설 속도, 약물 조합, 치료할 특정 질환의 중증도를 포함하는 다양한 인자에 따라 좌우될 것이다. 의료 간병인(medical caregiver)에 의한 이러한 인자의 판단은 당업계의 통상의 기술 범위 내에 있다. 이러한 양은 또한 치료할 개별 환자, 투여 경로, 제형 유형, 사용되는 화합물의 특징, 질환의 중증도 및 원하는 효과에 좌우될 것이다. 사용되는 양은 당업계에 잘 알려진 약리학적 및 약동학적 원리에 의해 결정될 수 있다.
항체 또는 변이체의 투여 방법은 피부내, 근육내, 복강내, 정맥내, 피하, 비강내, 경막외 및 경구 경로를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 항원 결합 폴리펩티드 또는 조성물은 임의의 편리한 경로에 의해서, 예를 들어, 주입 또는 볼러스(bolus) 주사에 의해, 상피 또는 점막피부 내막(예컨대, 구강 점막, 직장 및 장 점막 등)을 통한 흡수에 의해 투여될 수 있으며, 기타 생물학적 활성제와 함께 투여될 수 있다. 따라서, 본 개시내용의 항원 결합 폴리펩티드를 함유하는 약제학적 조성물은 경구로, 직장으로, 비경구로, 수조내로, 질내로, 복강내로, 국소로(분말, 연고, 점적제 또는 경피 패치에 의해서), 협측으로, 또는 경구 또는 비강 스프레이로 투여될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같은 용어 "비경구"는 정맥내, 근육내, 복강내, 흉골내, 피하 및 관절내 주사 및 주입을 포함하는 투여 모드를 지칭한다.
투여는 전신적이거나 국소적일 수 있다. 또한, 본 개시내용의 항체를 뇌실내 및 척수강내 주사를 포함하는 임의의 적합한 경로에 의해서 중추신경계에 도입하는 것이 바람직할 수 있고; 뇌실내 주입은 예를 들어, 저장소, 예컨대, 오마야 저장소(Ommaya reservoir)에 부착된 뇌실내 카테터에 의해 촉진될 수 있다. 예컨대, 흡입기 또는 분무기(nebulizer) 및 에어로졸화제를 가지는 제형의 사용에 의한 폐 투여도 또한 채용될 수 있다.
본 개시내용의 항원 결합 폴리펩티드 또는 조성물을 치료를 필요로 하는 부위에 국소로 투여하는 것이 바람직할 수 있고; 이는 예를 들어 비제한적으로 수술 중 국소 주입, 예를 들어, 수술 후 상처 드레싱과 함께 국소 적용, 주사, 카테터, 좌약 또는 임플란트에 의해 달성될 수 있고, 상기 임플란트는 막, 예컨대, 시알라스틱 막 또는 섬유를 포함하는 다공성, 비다공성 또는 젤라틴성 물질이다. 바람직하게는, 본 개시내용의 항체를 포함하는 단백질을 투여할 때 단백질이 흡수하지 않는 물질을 사용하도록 주의하여야 한다.
염증성, 면역 또는 악성 질환, 장애 또는 병태의 치료, 저해 및 예방에 효과적인 본 개시내용의 항체의 양은 표준 임상 기술에 의해 결정될 수 있다. 또한, 최적의 투여량 범위를 확인하는 데 도움이 되도록 선택적으로 시험관내 검정을 사용할 수 있다. 제형에 사용될 정확한 용량은 또한 투여 경로 및 질환, 장애 또는 병태의 심각도에 좌우될 것이고, 의사의 판단 및 각 환자의 상황에 따라 결정되어야 한다. 유효 용량은 시험관 내 또는 동물 모델 시험 시스템으로부터 유래된 용량 반응 곡선으로부터 외삽될 수 있다.
일반적인 명제로서, 본 개시내용의 항원 결합 폴리펩티드의 환자에게 투여되는 투여량은 전형적으로 0.1 ㎎/㎏ 환자 체중 내지 100 ㎎/㎏ 환자 체중, 0.1 ㎎/㎏ 환자 체중 내지 20 ㎎/㎏ 환자 체중 또는 1 ㎎/㎏ 환자 체중 내지 10 ㎎/㎏ 환자 체중이다. 일반적으로, 외부 폴리펩티드에 대한 면역 반응으로 인해, 인간 항체는 인체에서 다른 종으로부터 유래된 항체보다 더 긴 반감기를 가진다. 따라서, 더 낮은 투여량의 인간 항체 및 덜 빈번한 투여가 종종 가능하다. 추가로, 본 개시내용의 항체의 투여량 및 투여 빈도는 예를 들어, 지질화와 같은, 변형에 의해 항체의 (예를 들어, 뇌 내로의) 흡수 및 조직 투과를 증진시킴으로써 감소될 수 있다.
추가 실시형태에서, 본 개시내용의 조성물은 사이토카인과 조합하여 투여된다. 본 개시내용의 조성물과 조합하여 투여될 수 있는 사이토카인은 IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-10, IL-12, IL-13, IL-15, 항-CD40, CD40L 및 TNF-α를 포함하지만 이들로 제한되지 않는다.
추가 실시형태에서, 본 개시내용의 조성물은 예를 들어, 방사선 요법과 같은 다른 치료 또는 예방 요법과 조합하여 투여된다.
진단 방법
GPRC5D의 과발현은 특정 종양 샘플에서 관찰되며, GPRC5D 과발현 세포를 갖는 환자는 본 개시내용의 항-GPRC5D 항체를 사용한 치료에 반응할 가능성이 있다. 따라서, 본 개시내용의 항체는 또한 진단 및 예후 목적을 위해 사용될 수 있다.
바람직하게는 세포를 포함하는 샘플은 암 환자 또는 진단을 원하는 환자일 수 있는 환자로부터 얻을 수 있다. 세포는 종양 조직 또는 종양 블록, 혈액 샘플, 소변 샘플 또는 환자로부터의 임의의 샘플의 세포일 수 있다. 샘플의 선택적 전처리 시, 샘플은 항체가 샘플에 잠재적으로 존재하는 GPRC5D 단백질과 상호작용하도록 허용하는 조건 하에서 본 개시내용의 항체와 함께 인큐베이션될 수 있다. 샘플에서 GPRC5D 단백질의 존재를 검출하기 위해서, 항-GPRC5D 항체를 이용하는 ELISA와 같은 방법이 사용될 수 있다.
샘플 내의 GPRC5D 단백질의 존재(선택적으로 양 또는 농도와 함께)는 환자가 항체를 사용한 치료에 적합하다는 표시로서 또는 환자가 암 치료에 반응하였다(또는 반응하지 않았다)는 표시로서 암의 진단에 사용될 수 있다. 예후적 방법의 경우, 검출은 치료의 진행을 나타내기 위해 암 치료 개시 시 특정 단계에서 1회, 2회 또는 그 초과로 수행될 수 있다.
조성물
본 개시내용은 또한 약제학적 조성물을 제공한다. 이러한 조성물은 유효량의 항체, 및 허용 가능한 담체를 포함한다. 일부 실시형태에서, 조성물은 제2 항암제(예를 들어, 면역 관문 저해제)를 추가로 포함한다.
구체적인 실시형태에서, 용어 "약제학적으로 허용 가능한"은 연방 정부 또는 주 정부의 규제 기관에 의해 승인되었거나 미국 약전 또는 기타 동물용, 더욱 상세하게는 인간용의, 일반적으로 인정되는 약전에 열거되었음을 의미한다. 추가로, "약제학적으로 허용 가능한 담체"는 일반적으로 비독성 고체, 반고체 또는 액체 충전제, 희석제, 캡슐화 물질 또는 임의의 유형의 제형 보조제일 것이다.
용어 "담체"는 치료제와 함께 투여되는 희석제, 아주반트, 부형제 또는 비히클을 나타낸다. 이러한 약제학적 담체는 멸균 액체, 예컨대, 석유, 동물유, 식물유 또는 합성유, 예컨대, 땅콩유, 대두유, 광유, 참깨유 등을 포함하는 물 및 오일일 수 있다. 약제학적 조성물이 정맥 내 투여될 때 물이 바람직한 담체이다. 식염수 및 수용성 덱스트로스 및 글리세롤 용액이 또한 특히 주사용액을 위한 액체 담체로서 이용될 수 있다. 적합한 약제학적 부형제는, 전분, 글루코스, 락토스, 자당, 젤라틴, 맥아, 쌀, 밀가루, 백악, 실리카겔, 스테아르산나트륨, 글리세롤 모노스테아레이트, 탈크, 염화나트륨, 건조 탈지유, 글리세롤, 프로필렌, 글리콜, 물, 에탄올 등을 포함한다. 바람직한 경우 조성물은 또한 적은 양의 습윤제 또는 유화제, 또는 pH 완충제, 예컨대, 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트를 함유할 수 있다. 항박테리아제, 예컨대, 벤질 알코올 또는 메틸 파라벤; 항산화제, 예컨대, 아스코르브산 또는 아황산수소나트륨; 킬레이팅제, 예컨대, 에틸렌디아민테트라아세트산; 및 긴장성을 조정하기 위한 작용제, 예컨대, 염화나트륨 또는 덱스트로스가 또한 고려된다. 이러한 조성물은 용액, 현탁액, 에멀션, 정제, 알약, 캡슐, 분말, 서방성 제형 등의 형태를 취할 수 있다. 조성물은 전통적인 결합제 및 담체, 예컨대, 트리글리세리드를 사용하여 좌제로서 제형화될 수 있다. 경구 제형은 제약 등급의 만니톨, 락토스, 전분, 스테아르산 마그네슘, 사카린나트륨, 셀룰로스, 탄산마그네슘 등의 표준 담체를 포함할 수 있다. 적합한 약제학적 담체의 예는 본 명세서에 참조에 의해 포함된 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences by E. W. Martin]에 기재되어 있다. 이러한 조성물은 치료적 유효량의 항원 결합 폴리펩티드를, 바람직하게는 정제된 형태로, 적절한 양의 담체와 함께 함유하여, 환자에게 적절하게 투여하기 위한 형태를 제공한다. 제형은 투여 방식에 적합해야 한다. 비경구 제제는 앰플, 일회용 주사기 또는 유리 또는 플라스틱으로 제조된 다용량 바이알 내에 동봉될 수 있다.
실시형태에서, 조성물은 인간에 대한 정맥내 투여에 적합한 약제학적 조성물로서 일상적인 절차에 따라서 제형화된다. 전형적으로, 정맥내 투여를 위한 조성물은 멸균 등장성 수성 완충제 중 용액이다. 필요한 경우, 조성물은 또한 가용화제 및 국소 마취제, 예컨대, 주사 부위의 통증을 완화하기 위한 리그노케인을 포함할 수 있다. 일반적으로, 성분은 별도로 또는 단위 투여 형태, 예를 들어, 활성 성분의 양을 나타낸 앰플 또는 샤세와 같은 기밀하게 밀봉된 용기 내 건조 동결 분말, 또는 무수 농축물로 함께 혼합되어 공급된다. 조성물이 주입에 의해 투여되는 경우, 멸균된 약제학적 등급의 물 또는 염수를 함유하는 주입병으로 분배될 수 있다. 조성물이 주사에 의해 투여되는 경우, 주사용 멸균수 또는 식염수의 앰플이 제공될 수 있으며, 성분들이 투여 전에 혼합될 수 있다.
본 개시내용의 화합물은 중성 또는 염 형태로 제형화될 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 염은 염산, 인산, 아세트산, 옥살산, 타르타르산 등으로부터 유래된 것 등의 음이온으로 형성된 염 및 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘, 수산화제이철, 이소프로필아민, 트리에틸아민, 2-에틸아미노에탄올, 히스티딘, 프로카인 등으로부터 유래된 것과 같은 양이온으로 형성된 염을 포함한다.
실시예
실시예 1: 인간 GPRC5D에 대한 뮤린 단클론성 항체의 생성
인간 GPRC5D 단백질을 사용하여 상이한 마우스의 균주를 면역화시켰고 이에 따라 하이브리도마를 생성시켰다. 20개 초과의 하이브리도마 클론을 추가 분석을 위해서 수집하였다.
하이브리도마의 상청액으로부터 수거된 항체를 CHO K1 세포 상에서 발현된 인간 GPRC5D 단백질에 대한 결합에 대해서 시험하였다. 인간 GPRC5D를 안정적으로 발현한 CHO-K1 세포를 플라스크로부터 수거하였다. 100 ㎕의 1×106개 세포/㎖의 세포를 얼음에서 30분 동안 3배 연속 희석물에서 뮤린 항체와 함께 인큐베이션시켰다. 200 ㎕의 FACS 완충제로 2회 세척한 후, 세포를 얼음에서 30분 동안 2차 항체와 함께 인큐베이션시켰다. 세포를 200 ㎕의 FACS 완충제로 2회 세척하고, BD Falcon 5 ㎖ 튜브로 옮기고, FACS로 분석하였다. 연구 결과는 뮤린 항체가 높은 EC50으로 인간 GPRC5D에 결합할 수 있다는 것을 나타내었다(도 1). 결과를 하기 표에 나타낸다. 이들 모두는 양호한 결합 활성을 나타내었다.
14개의 하이브리도마를 서브클로닝하고, VH/VL 서열을 결정하였다(표 1 참조).
[표 1]
실시예 2. GPRC5D에 대한 키메라 항체의 결합
뮤린 VH 및 VK 유전자를 합성에 의해 생성시켰고, 그 다음 각각 인간 감마 1 및 인간 카파 불변 도메인을 함유하는 벡터에 클로닝하였다. 정제된 키메라 항체를 형질주입된 CHO 세포로부터 생산하였다.
인간 GPRC5D를 안정적으로 발현한 CHO-K1 세포를 플라스크로부터 수거하였다. 100 ㎕의 1×106개 세포/㎖의 세포를 얼음에서 30분 동안 300 nM에서 시작하여 0.001 nM까지 3배 연속 희석물에서 1차 키메라 항체와 함께 인큐베이션시켰다. 200 ㎕의 FACS 완충제로 2회 세척한 후, 세포를 얼음에서 30분 동안 2차 항체와 함께 인큐베이션시켰다. 세포를 200 ㎕의 FACS 완충제로 2회 세척하고, BD Falcon 5 ㎖ 튜브로 옮기고, FACS로 분석하였다. 연구 결과는 키메라 항체가 높은 EC50으로 인간 GPRC5D에 결합할 수 있다는 것을 나타내었다(도 2).
결과를 하기 표에 나타낸다.
실시예 3. CHO-GPRC5D 세포에 대한 키메라 GPRC5D 항체의 내재화의 EC50
pHAb 염료는, 7 초과의 pH에서 매우 낮은 형광을 갖고 용액의 pH가 산성이 됨에 따라서 형광의 극적인 증가를 갖는 pH 센서 염료이다. pHAb 염료는 532 nm에서 여기 최대값(Ex) 및 560 nm에서 방출 최대값(Em)을 갖는다. pHAb 염료-접합된 항체를 수용체-매개 항체 내재화를 모니터링하기 위해서 사용할 수 있다. 항체-pHAb 염료 접합체가 세포막 상의 이의 수용체에 결합하는 경우, 그것은 최소 형광을 나타낸다. 그러나, 수용체-매개 내재화 시, 항체-pHAb 염료 접합체는 pH가 산성인 엔도좀 및 리소좀 소포로 이동하여, pHAb Dye 염료가 형광을 내도록 한다. 이 형광은 세포 영상화, 유세포 분석법 및 적절한 필터가 있는 형광판-기반 판독기를 포함한 다양한 기술을 사용하여 검출될 수 있다.
안정적으로 형질주입된 인간 GPRC5D CHO 세포를 0.05% 트립신/EDTA(Gibco, 25300-054)로 수거하고 96-웰 블랙 플레이트(Thermo Scientific #165305)에 웰당 90㎕당 10 K의 밀도로 플레이팅하였다. 플레이트를 pHAb 표지된 항체로 처리하기 전에 20 내지 24시간 동안 인큐베이션시켰다.
내재화를 위해, pHAb 접합된 키메라 GPRC5D 항체를 상이하게 세포에 첨가하고, 플레이트 믹서에서 1 내지 2분 동안 부드럽게 혼합한 다음 내재화를 허용하도록 밤새 인큐베이션시켰다(내재화는 몇 시간 내에 검출될 수 있음). Tecan Infinity M1000 Pro에서 Ex/Em:532 nm/560 nm에서 형광 플레이트 판독기에서 플레이트를 판독하였다. 더 높은 감도를 달성하기 위해, 매질을 PBS로 교체한 후 플레이트를 판독하였다.
DAR로 정규화된 결과를 도 3에 도시한다. 도 3에 도시된 바와 같이, 시험된 키메라 항체는 강력한 내재화 활성을 갖는다.
실시예 4. 항체-의존적 세포 세포독성(ADCC)의 시험
ADCC Reporter Bioassay는 ADCC MOA 경로 활성화의 초기 시점에서 대체 판독값: 효과기 세포에서 NFAT(활성화된 T 세포의 핵 인자) 경로를 통한 유전자 전사의 활성화를 사용한다. 또한 ADCC Reporter Bioassay는 FcγRIIIa 수용체, V158(고친화도) 변이체 및 반딧불이 루시퍼라제의 발현을 유도하는 NFAT 반응 요소를 안정적으로 발현하는 조작된 Jurkat 세포를 효과기 세포로서 사용한다. ADCC MOA에서 항체 생물학적 활성을 NFAT 경로 활성화의 결과로 생성된 루시퍼라제를 통해 정량화하고; 효과기 세포에서 루시퍼라제 활성을 발광 판독으로 정량화한다. 신호는 높고 검정 배경은 낮다.
GPRC5D 키메라 단클론성 항체의 연속 희석물을 ADCC Bioassay Target Cell(GPRC5D)와 함께 또는 이것 없이, 조작된 Jurkat 효과기 세포(ADCC Bioassay Effector Cells)와 함께 37℃에서 6시간 동안 유도 동안 인큐베이션시켰다. 루시퍼라제 활성을 Bio-Glo™ Reagent를 사용하여 정량화하였다(도 4). 시험된 항체 모두는 ADCC 유도에서 강력한 능력을 나타내었다.
실시예 5. 마우스 mAb의 인간화
뮤린 항체 가변 영역 유전자를 사용하여 인간화 mAb를 생성하였다. 이 과정의 첫 번째 단계에서, mAb의 VH 및 VL의 아미노산 서열을 인간 Ig 유전자 서열의 이용 가능한 데이터베이스에 대해서 비교하여 전체적으로 가장 일치하는 인간 생식계열 Ig 유전자 서열을 찾았다.
인간화 항체의 아미노산 서열을 하기에 제공한다.
인간화 서열
A. 34D3H1
[표 2A]
[표 2B]
[표 2C]
[표 2D]
[표 2E]
B. 37B9C4
[표 3A]
[표 3B]
[표 3C]
[표 3D]
[표 3E]
C. 58F9G10
[표 4A]
[표 4B]
[표 4C]
[표 4D]
[표 3E]
D. 6G10D9
[표 5A]
[표 5B]
[표 5C]
[표 5D]
[표 5E]
실시예 6. 인간화 항체의 시험
본 실시예는 인간화 항체 중 일부를 CHO-K1 세포에서 발현된 GPRC5D에 결합하는 능력에 대해서 시험하였다.
시험된 것 중에서 6G10D9, 6-H2L1 및 6-H3L3으로부터 유래된 인간화 항체는 다른 것을 능가하였다(도 5, 표 6).
[표 6]
도 6 및 표 7에 제시된 바와 같이, 58F9G10의 인간화 버전 모두는 양호한 성능을 나타내는 것으로 나타났다.
[표 7]
마찬가지로, 도 7 및 표 8에 제시된 바와 같이, 34D3H1의 모든 인간화 버전은 키메라 항체와 대등한 양호한 성능을 갖는 것으로 나타났다.
[표 8]
또한, 도 8 및 표 9에 제시된 바와 같이, 37B9C4의 인간화 버전 모두는 키메라 카운터파트와 대등한 양호한 성능을 갖는 것으로 나타났다.
[표 9]
상기 데이터에 기초하여, 인간화 항체 6-H3L3, 6-H4L3, 58-H1L1, 58-H3L1, 34-H1L1 및 37-H1L1을 추가 확증적 시험을 위해서 선택하였다.
실시예 7. 선택된 인간화 항체의 확증적 시험
본 실시예는 인간화 항체 중 일부(6-H3L3, 6-H4L3, 58-H1L1, 58-H3L1, 34-H1L1 및 37-H1L1)를 CHO-K1 및 NCI-H929 세포에서 발현된 인간 GPRC5D 단백질에 결합하는 능력에 대해서 시험하였다.
CHO-K1에 대한 결합 데이터를 도 9에 차트로 나타내고, 하기 표 10에 요악한다.
[표 10]
[표 11]
따라서 이들 데이터는 이러한 선택된 인간화 항체가 추가 임상 개발에 적합하다는 것을 확인해 준다.
실시예 8. 인간화 항체의 ADCC
ADCC Reporter Bioassay는 ADCC MOA 경로 활성화의 초기 시점에서 대체 판독값: 효과기 세포에서 NFAT(활성화된 T 세포의 핵 인자) 경로를 통한 유전자 전사의 활성화를 사용한다. 또한 ADCC Reporter Bioassay는 FcγRIIIa 수용체, V158(고친화도) 변이체 및 반딧불이 루시퍼라제의 발현을 유도하는 NFAT 반응 요소를 안정적으로 발현하는 조작된 Jurkat 세포를 효과기 세포로서 사용한다. ADCC MOA에서 항체 생물학적 활성을 NFAT 경로 활성화의 결과로 생성된 루시퍼라제를 통해 정량화하고; 효과기 세포에서 루시퍼라제 활성을 발광 판독으로 정량화한다. 신호는 높고 검정 배경은 낮다.
GPRC5D hu Ab의 연속 희석물을 ADCC Bioassay Target Cell(GPRC5D 발현)과 함께, 조작된 Jurkat 효과기 세포(ADCC Bioassay Effector Cells)와 함께 37℃에서 6시간 동안 유도 동안 인큐베이션시켰다. 루시퍼라제 활성을 Bio-GloTM Reagent를 사용하여 정량화하였다.
결과를 도 11에 제시하고, 이것은 이들 인간화 항체가 GPRC5D-과발현 세포주 및 내인성 MM(다발성 골수종) 세포주 상에서 강한 ADCC 활성을 유도하였다는 것을 나타낸다.
실시예 9. 인간화 항체의 내재화
본 실시예는 인간화 항체를 내재화 유도 활성에 대해 시험하였다. 본 실시예는 중성 pH에서는 형광이 없지만 내재화로 산성 pH에서는 높은 형광성이 되는 새로운 친수성 및 밝은 pH 센서 염료(pHAb 염료)를 사용하였다. 그것을 사용하여 내재화 과정을 검출할 수 있다. NCI-H929 및 MM.1R 세포는 표적 세포로서 인간 GPRC5D를 내인성으로 발현하고, pHAb 염료로 표지된 검출 항체를 첨가하여 시험관내에서 GPRC5D hu 항체의 내재화를 평가하였다.
GPRC5D hu 항체의 연속 희석물을 37℃에서 24시간 동안 인큐베이션시켰다. 루시퍼라제 활성을 검출하였다. 도 12의 결과는, 이들 인간화 항체가 GPRC5D-과발현 세포주 및 내인성 MM 세포주 둘 다에 대해 매우 강한 내재화 활성을 가짐을 나타낸다.
실시예 10. GPRC5D ADC의 사멸 활성
본 실시예는 2개의 항체-약물 접합체(ADC)를 표적 세포의 사멸 활성에 대해 시험하였다. 이들 ADC는 각각 독성 약물 모노메틸 오리스타틴 E(MMAE)에 접합된 37B9C4 및 58F9G10을 포함하였다.
인간 GPRC5D 발현 HEK293 및 NCI-H929 조작 세포(HEK293/H_GPRC5D 및 NCI-H929/H_GPRC5D), GPRC5D 내인성 발현 NCI-H929 및 MM.1R 세포를 3000~4000개 세포/웰로 96-웰 플레이트에 시딩하였다. 세포를 각각의 농도로 5일 동안 37B9C4-MMAE 및 58F9G10-MMAE로 처리하였다. 세포 생존율을 r-Glo 시약을 사용하여 3000~4000개 세포/웰로 96-웰 플레이트에서 CellTiteseed로 측정하였다. 루시퍼라제 활성을 Envison에 의해 검출하였다. 도 13 및 표 12에서의 결과는 이들 인간화 항체가 매우 강한 사멸 활성을 가짐을 나타낸다.
[표 12]
실시예 11. 생체내 항-종양 활성
본 실시예는 CDX 동물 모델을 사용하여 항체 37B9C4(H1L1)의 항종양 활성을 시험하였다.
본 연구에서, 6 내지 8주령의 암컷 NCG 마우스(Jiangsu Jicui Yaokang Biotechnology Co., Ltd)를 사용하였다. 종양 발생을 위해 마트리겔(V:V=1:1)을 포함하는 PBS 0.1 ㎖ 중의 MM.1R 종양 세포(2×106개)를 각각의 마우스에 오른쪽 겨드랑이(측면)에 피하 접종하였다. 종양 부피가 약 60 ㎣에 도달하면 동물을 무작위로 그룹화한 다음 효능 연구를 위해 치료를 시작하였다. 1 ㎎/㎏, 3 ㎎/㎏ 및 10 ㎎/㎏ 용량의 37B9C4를 제0일, 제7일, 제14일에 정맥(i.v.)을 통해 투여하였다. 제19일에 비히클군의 평균 종양 부피가 2000 ㎣를 초과하였을 때 실험을 종료하였다. PBS군, 37B9C4(1 ㎎/㎏)군, 37B9C4(3 ㎎/㎏)군 및 37B9C4(10 ㎎/㎏)군의 평균 종양 부피는 각각 2498.58 ㎣, 1196.15 ㎣, 0.00 ㎣(6/6 CR) 및 0.00 ㎣(6/6 CR)였다. 종양 크기를 캘리퍼를 사용하여 주 3회 2차원으로 측정하였고, 부피를 다음 공식을 사용하여 ㎣로 표현하였다: V = 0.5 a × b2, 식 중, a 및 b는 각각 종양의 긴 직경 및 짧은 직경이었다. 데이터 지점은 군(n=6) 평균을 나타내고, 오차 막대는 평균의 표준 오차(SEM)를 나타낸다.
MM.1R 종양 보유 마우스의 체중을 간접적인 독성 척도로서 정기적으로 모니터링하였다. 도 14a는 37B9C4 투여 후 MM.1R 종양 보유 마우스의 종양 성장 곡선을 나타낸다. 항체는 이 종양 모델에서 용량 의존적으로 종양 성장을 저해하였고, 3 ㎎/㎏ 이상에서 완전한 종양 저해를 달성하였다.
투여 후 MM.1R 종양 보유 마우스의 체중의 상세한 변화 및 체중의 상대 변화를 도 14b에 도시한다. 투여 기간 동안, 마우스군 모두에서 유의한 체중 감소가 없었고, 투여군의 마우스는 내약성이 양호하였는데, 이는 치료의 안전성을 입증하였다.
* * *
본 개시내용은 본 개시내용의 개별 양상의 일례로서 의도되는 기재된 특정 실시형태에 의해 범위가 제한되지 않으며, 기능적으로 동등한 임의의 조성물 또는 방법은 본 개시내용의 범위 내에 있다. 본 개시내용의 사상 또는 범위를 벗어나지 않고 본 개시내용의 방법 및 조성물에 다양한 변형 및 변경이 이루어질 수 있음이 당업자에게 명백할 것이다. 따라서, 본 개시내용은 첨부된 청구범위 및 그 등가물의 범위 내에 있는 한 본 개시내용의 변형 및 변경을 포함하는 것으로 의도된다.
본 명세서에서 언급된 모든 공보 및 특허 출원은 각각의 개별 공보 또는 특허 출원이 참조로 포함됨을 구체적이고 개별적으로 나타낸 것과 같은 정도로 본 명세서에 참조로 포함된다.
SEQUENCE LISTING <110> LaNova Medicines Development Co., Ltd. <120> ANTI-GPRC5D MONOCLONAL ANTIBODIES AND USES THEREOF <130> 70LG-325887-WO2 <150> PCT/CN2021/070314 <151> 2021-01-05 <160> 86 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 1 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Thr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Gly Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ser Leu Arg Ser Arg Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Leu Thr Val Ser Ser 115 <210> 2 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 2 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Thr Phe Met Ser Thr Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Arg Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala 20 25 30 Val Val Trp Tyr Gln Gln Lys Thr Gly Gln Ser Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Met Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Asp Phe Phe Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 3 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 3 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Thr 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ile Asn Tyr 20 25 30 Leu Ile Glu Trp Ile Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Met Ile Asn Pro Gly Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Asp Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Asn Trp Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser 100 105 110 Ser <210> 4 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 4 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Asp Gln Ala Ser Val Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser 20 25 30 Thr Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser 85 90 95 Thr His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 5 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 5 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Met Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr 20 25 30 Thr Met His Trp Val Lys Gln Ser His Gly Glu Asn Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Leu Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Leu Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Arg Trp Gly Leu Arg Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Ser Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 6 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 6 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Ser Asn 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Ala Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Asn Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Glu Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Ser Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 7 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 7 Glu Val His Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Asn 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Gly Gly Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 8 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 8 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Asp Ser Val Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Asn Asn 20 25 30 Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser His Glu Ser Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ser Ile Asn Ser Val Glu Thr 65 70 75 80 Glu Asp Phe Gly Met Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Asn Ser Arg Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 <210> 9 <211> 124 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 9 Glu Val Asn Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Met Lys Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ser Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Glu Ile Arg Leu Lys Ser Asn Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Glu 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Ser 65 70 75 80 Val Tyr Leu Gln Met Asn Asn Leu Arg Ala Glu Asp Thr Gly Ile Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Arg Pro Leu Leu Trp Phe Arg Arg Tyr Tyr Ala Met Asp 100 105 110 Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 10 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 10 Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Asp Arg Ile Thr Ile Ser Cys Ser Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Ser Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Pro 65 70 75 80 Ala Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Lys Leu Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 11 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 11 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Thr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Gly Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ser Leu Arg Ser Arg Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Arg Gly Thr 100 105 110 Thr Leu Thr Val Ser Ser 115 <210> 12 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 12 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Leu Ser Thr Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Met Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Gly Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 13 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 13 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Asn 20 25 30 Ile Met His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Tyr Asn Ala Gly Ser Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Ile Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Glu Val Tyr Tyr Arg Tyr Gly Ala Trp Phe Ala Tyr Trp 100 105 110 Gly His Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 115 120 <210> 14 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 14 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Thr Ser 20 25 30 Ser Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Ser Trp 85 90 95 Glu Ile Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 15 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 15 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Thr Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr 20 25 30 Tyr Ile His Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Ser Cys Tyr Asn Gly Ala Thr Ser Phe Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Phe Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Phe Asn Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Thr Glu Leu Arg Gly Pro Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 115 <210> 16 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 16 Gln Thr Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Thr Ser Pro Lys Arg Trp Ile Tyr 35 40 45 Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Met Glu Ala Glu 65 70 75 80 Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Asn Asn Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 <210> 17 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 17 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Thr 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ile Asn Tyr 20 25 30 Leu Ile Glu Trp Ile Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Met Ile Asn Pro Gly Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Asp Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Asn Trp Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser 100 105 110 Ser <210> 18 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 18 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Asp Gln Ala Ser Val Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser 20 25 30 Thr Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser 85 90 95 Thr His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 19 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 19 Gln Val His Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Thr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Asn Ser Ala Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Arg Val Leu Leu Leu Arg Val Leu Asp Phe Phe Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 20 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 20 Asp Val Gln Ile Thr Gln Ser Pro Ser Tyr Leu Ala Ala Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Thr Ile Thr Ile Asn Cys Arg Ala Ser Lys Ser Ile Asn Lys Tyr 20 25 30 Leu Thr Trp Tyr Gln Glu Lys Pro Gly Lys Thr Asn Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Gly Ser Thr Leu Gln Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ser Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Met Tyr Tyr Cys Gln Gln His Asn Glu Tyr Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 <210> 21 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 21 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Met Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr 20 25 30 Thr Met Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Asn Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Leu Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Gly Ile Arg Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Leu Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Trp Gly Leu Arg Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Ser Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 22 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 22 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Asn 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Ala Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Glu Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Ser Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 23 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 23 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Met Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr 20 25 30 Thr Met Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Asn Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Leu Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Ala Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Asp Leu Leu Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Arg Trp Gly Leu Arg Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Ser Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 24 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 24 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Ser Asn 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Ala Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Glu Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Ser Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 25 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 25 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Met Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr 20 25 30 Thr Met His Trp Val Lys Gln Ser His Gly Glu Asn Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Leu Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Leu Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Arg Trp Gly Leu Arg Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Ser Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 26 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 26 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Met Ser Thr Ser Ile Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Ser Asn 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Ala Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Asn Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Glu Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Ser Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 27 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 27 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Thr 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ile Ser Tyr 20 25 30 Leu Ile Glu Trp Ile Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Met Ile Asn Pro Gly Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Asp Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Asn Trp Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser 100 105 110 Ser <210> 28 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 28 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Asp Gln Ala Ser Val Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser 20 25 30 Thr Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser 85 90 95 Thr His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 29 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 29 Ser Tyr Gly Met Ser 1 5 <210> 30 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 30 Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 31 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 31 Gln Gly Gly Asp Ala Met Asp Tyr 1 5 <210> 32 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 32 Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Asn Asn Leu His 1 5 10 <210> 33 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 33 Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser 1 5 <210> 34 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 34 Gln Gln Ser Asn Ser Arg Leu Thr 1 5 <210> 35 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 35 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Gly Gly Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 36 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 36 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Gly Gly Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 37 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 37 Glu Val His Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Gly Lys Arg Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Asn 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Gly Gly Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 38 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 38 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Asn Asn 20 25 30 Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn Ser Arg Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 39 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 39 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Asn Asn 20 25 30 Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Asn Ser Arg Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 40 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 40 Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Asn Asn 20 25 30 Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Asn Ser Arg Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 41 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 41 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Val Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Asn Asn 20 25 30 Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Asn Ser Arg Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 42 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 42 Asp Tyr Trp Met Asn 1 5 <210> 43 <211> 19 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 43 Glu Ile Arg Leu Lys Ser Asn Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Glu Ser 1 5 10 15 Val Lys Gly <210> 44 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 44 Pro Leu Leu Trp Phe Arg Arg Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 45 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 45 Ser Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr Leu Asn 1 5 10 <210> 46 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 46 Tyr Thr Ser Ser Leu His Ser 1 5 <210> 47 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 47 Gln Gln Tyr Ser Lys Leu Pro Phe Thr 1 5 <210> 48 <211> 124 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 48 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Glu Ile Arg Leu Lys Ser Asn Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Glu 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Ala Arg Pro Leu Leu Trp Phe Arg Arg Tyr Tyr Ala Met Asp 100 105 110 Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 49 <211> 124 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 49 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Glu Ile Arg Leu Lys Ser Asn Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Glu 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Ser 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Arg Pro Leu Leu Trp Phe Arg Arg Tyr Tyr Ala Met Asp 100 105 110 Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 50 <211> 124 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 50 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Glu Ile Arg Leu Lys Ser Asn Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Glu 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Ser 65 70 75 80 Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Arg Pro Leu Leu Trp Phe Arg Arg Tyr Tyr Ala Met Asp 100 105 110 Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 51 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 51 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Ser Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Lys Leu Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 52 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 52 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Thr Val Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Ser Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Lys Leu Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 53 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 53 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Ile Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Thr Val Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Ser Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Lys Leu Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 54 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 54 Gly Tyr Tyr Ile His 1 5 <210> 55 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 55 Tyr Ile Ser Ser Tyr Asn Ala Ala Thr Ser Phe Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 56 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 56 Thr Glu Leu Arg Gly Pro Trp Phe Ala Tyr 1 5 10 <210> 57 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 57 Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met Asn 1 5 10 <210> 58 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 58 Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser 1 5 <210> 59 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 59 Gln Gln Trp Ser Asn Asn Pro Leu Thr 1 5 <210> 60 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 60 Tyr Ile Ser Cys Tyr Asn Gly Ala Thr Ser Phe Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 61 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 61 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr 20 25 30 Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Tyr Ile Ser Ser Tyr Asn Ala Ala Thr Ser Phe Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Thr Glu Leu Arg Gly Pro Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 62 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 62 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr 20 25 30 Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Ser Ser Tyr Asn Ala Ala Thr Ser Phe Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Thr Glu Leu Arg Gly Pro Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 63 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 63 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr 20 25 30 Tyr Ile His Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Ser Ser Tyr Asn Ala Ala Thr Ser Phe Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Phe Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Phe Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Thr Glu Leu Arg Gly Pro Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 64 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 64 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr 20 25 30 Tyr Ile His Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Ser Ser Tyr Asn Ala Ala Thr Ser Phe Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Ala Thr Phe Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Phe Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Thr Glu Leu Arg Gly Pro Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 65 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 65 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr 35 40 45 Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Asn Asn Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 66 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 66 Asp Thr Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr 35 40 45 Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Asn Asn Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 67 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 67 Asp Thr Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Met Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 20 25 30 Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr 35 40 45 Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Met Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Asn Asn Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 68 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 68 Thr Tyr Thr Met His 1 5 <210> 69 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 69 Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Asp <210> 70 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 70 Leu Arg Ser Arg Gly Tyr Phe Asp Tyr 1 5 <210> 71 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 71 Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala Val Val 1 5 10 <210> 72 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 72 Ser Ala Ser Asn Arg Tyr Thr 1 5 <210> 73 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 73 Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Tyr Thr 1 5 <210> 74 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 74 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Arg Leu Arg Ser Arg Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 75 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 75 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Leu Arg Ser Arg Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 76 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 76 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Ala Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Thr Met His Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ser Leu Arg Ser Arg Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 77 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 77 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Ala Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Thr Met His Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ser Leu Arg Ser Arg Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Leu Thr Val Ser Ser 115 <210> 78 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 78 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Val Ala Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Thr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ser Leu Arg Ser Arg Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Leu Thr Val Ser Ser 115 <210> 79 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 79 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Val Ala Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Thr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Arg Ala Thr Leu Thr Ala Gly Lys Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ser Leu Arg Ser Arg Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Leu Thr Val Ser Ser 115 <210> 80 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 80 Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala 20 25 30 Val Val Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 81 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 81 Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Thr Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala 20 25 30 Val Val Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Phe Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 82 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 82 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Thr Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala 20 25 30 Val Val Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Met Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Phe Phe Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 83 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 83 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Thr Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala 20 25 30 Val Val Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Met Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Phe Phe Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 84 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 84 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala 20 25 30 Val Val Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 85 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 85 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Thr Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala 20 25 30 Val Val Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Phe Phe Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 86 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 86 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Thr Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Val Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Ala 20 25 30 Val Val Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Met Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Phe Phe Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105

Claims (29)

  1. 인간 G-단백질-연결 수용체 패밀리 C 그룹 5 멤버 D(G-protein-coupled receptor family C group 5 member D: GPRC5D) 단백질에 대해 결합 특이성을 갖는 항체 또는 이의 항원 결합 단편으로서, 상기 항체 또는 이의 단편은 중쇄 상보성 결정 영역 CDRH1, CDRH2 및 CDRH3을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH) 및 상보성 결정 영역 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하되, 상기 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각
    (a) 서열번호 42 내지 47의 아미노산 서열;
    (b) 서열번호 29 내지 34의 아미노산 서열;
    (c) 서열번호 54 내지 59의 아미노산 서열; 또는
    (d) 서열번호 68 내지 73의 아미노산 서열
    을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  2. 제1항에 있어서, 상기 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각 서열번호 42 내지 47의 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  3. 제2항에 있어서, 상기 VH는 서열번호 9 및 48 내지 50으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하고, 상기 VL은 서열번호 10 및 51 내지 53으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  4. 제2항에 있어서, 상기 VH는 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 VL은 서열번호 51의 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  5. 제1항에 있어서, 상기 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각 서열번호 29 내지 34의 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  6. 제5항에 있어서, 상기 VH는 서열번호 7 및 35 내지 37로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하고, 상기 VL은 서열번호 8 및 38 내지 41로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  7. 제5항에 있어서, 상기 VH는 서열번호 35의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 VL은 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  8. 제1항에 있어서, 상기 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각 서열번호 54 내지 59의 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  9. 제8항에 있어서, 상기 VH는 서열번호 61 내지 64로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하고, 상기 VL은 서열번호 16 및 65 내지 67로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  10. 제8항에 있어서, 상기 VH는 서열번호 61의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 VL은 서열번호 65의 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  11. 제8항에 있어서, 상기 VH는 서열번호 63의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 VL은 서열번호 65의 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  12. 제1항에 있어서, 상기 CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 및 CDRL3은 각각 서열번호 68 내지 73의 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  13. 제12항에 있어서, 상기 VH는 서열번호 1 및 74 내지 79로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하고, 상기 VL은 서열번호 2 및 80 내지 86으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  14. 제12항에 있어서, 상기 VH는 서열번호 76의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 VL은 서열번호 82의 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  15. 제12항에 있어서, 상기 VH는 서열번호 77의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 VL은 서열번호 82의 아미노산 서열을 포함하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 인간화된, 항체 또는 이의 단편.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, ADCC-적격인, 항체 또는 이의 단편.
  18. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체 또는 이의 단편에 접합된 세포독성 약물을 더 포함하는, 항체 또는 이의 단편.
  19. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항의 항원 결합 단편 및 제2 표적 단백질에 대한 특이성을 갖는 제2 항원 결합 단편을 포함하는 이중특이적 항체.
  20. 제19항에 있어서, 상기 제2 표적 단백질은 CD3, CD16, CD19, CD28, CD64 및 4-1BB로 이루어진 군으로부터 선택되는, 이중특이적 항체.
  21. 제19항에 있어서, 상기 제2 표적 단백질은 CD3인, 이중특이적 항체.
  22. 암의 치료를 필요로 하는 환자에서 암을 치료하는 방법으로서, 상기 환자에게 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항의 항체 또는 이의 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  23. 암의 치료를 필요로 하는 환자에서 암을 치료하는 방법으로서, (a) T 세포, 자연 살해(NK) 세포 또는 대식세포를 시험관내에서 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항의 항체 또는 이의 단편으로 처리하는 단계 및 (b) 처리된 상기 세포를 상기 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  24. 제23항에 있어서, 단계 (a) 이전에, 상기 T 세포, 상기 NK 세포 또는 상기 대식세포를 개체로부터 단리시키는 단계를 더 포함하는, 방법.
  25. 제24항에 있어서, 상기 T 세포, 상기 NK 세포 또는 상기 대식세포는 상기 환자로부터 단리되는 것인, 방법.
  26. 제23항에 있어서, 상기 T 세포는 종양-침윤 T 림프구, CD4+ T 세포, CD8+ T 세포 또는 이들의 조합인, 방법.
  27. 제22항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 암은 혈액암인, 방법.
  28. 제27항에 있어서, 상기 혈액암은 GPRC5D-발현 B 세포암인, 방법.
  29. 제28항에 있어서, 상기 GPRC5D-발현 B 세포암은 다발성 골수종인, 방법.
KR1020237026526A 2021-01-05 2022-01-05 항-gprc5d 단클론성 항체 및 이의 용도 KR20230130038A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2021070314 2021-01-05
CNPCT/CN2021/070314 2021-01-05
PCT/CN2022/070287 WO2022148370A1 (en) 2021-01-05 2022-01-05 Anti-gprc5d monoclonal antibodies and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20230130038A true KR20230130038A (ko) 2023-09-11

Family

ID=82322751

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020237026526A KR20230130038A (ko) 2021-01-05 2022-01-05 항-gprc5d 단클론성 항체 및 이의 용도

Country Status (11)

Country Link
US (2) US11485783B2 (ko)
EP (1) EP4274851A4 (ko)
JP (1) JP2024503617A (ko)
KR (1) KR20230130038A (ko)
CN (3) CN115038720B (ko)
AU (2) AU2022201736B2 (ko)
CA (1) CA3206645A1 (ko)
CO (1) CO2023010353A2 (ko)
CR (1) CR20230374A (ko)
IL (1) IL304052A (ko)
MX (1) MX2023008044A (ko)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116003598B (zh) * 2022-08-30 2024-04-26 苏州缔码生物科技有限公司 靶向人gprc5d的重组人源化单克隆抗体及其应用

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2725819C2 (ru) * 2014-12-05 2020-07-06 Мемориал Слоан-Кеттеринг Кэнсер Сентер Антитела, нацеленные на рецептор, связанный с g-белками, и способы их применения
TWI781108B (zh) * 2016-07-20 2022-10-21 比利時商健生藥品公司 抗ｇｐｒｃ５ｄ抗體、結合ｇｐｒｃ５ｄ與ｃｄ３之雙特異性抗原結合分子及其用途
KR20190133160A (ko) 2017-02-07 2019-12-02 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 항-gprc5d 항체 및 항-gprc5d 항체를 포함하는 분자
TWI829667B (zh) 2018-02-09 2024-01-21 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 結合gprc5d之抗體
AU2019374103A1 (en) 2018-11-01 2021-05-20 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors specific for G Protein-Coupled Receptor Class C Group 5 Member D (GPRC5D)
AU2020209257A1 (en) * 2019-01-18 2021-08-05 Janssen Biotech, Inc. GPRC5D chimeric antigen receptors and cells expressing the same

Also Published As

Publication number Publication date
AU2022201736A1 (en) 2022-07-21
CR20230374A (es) 2023-10-05
EP4274851A1 (en) 2023-11-15
IL304052A (en) 2023-08-01
CN116789824A (zh) 2023-09-22
US11485783B2 (en) 2022-11-01
AU2023203704A1 (en) 2023-08-10
CN115038720B (zh) 2023-07-04
MX2023008044A (es) 2023-07-14
US20220220203A1 (en) 2022-07-14
EP4274851A4 (en) 2024-05-15
US20230203160A1 (en) 2023-06-29
CN115038720A (zh) 2022-09-09
JP2024503617A (ja) 2024-01-26
AU2022201736B2 (en) 2023-03-16
CA3206645A1 (en) 2022-07-14
CN116574184A (zh) 2023-08-11
CO2023010353A2 (es) 2023-08-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11873342B2 (en) Anti-CCR8 monoclonal antibodies and uses thereof
KR102649942B1 (ko) 클라우딘 18.2를 표적화하는 항체-약물 콘쥬게이트
KR20200058322A (ko) 항-pd-l1 항체 및 il-7 융합체
JP2024042083A (ja) 抗ＳＩＲＰαモノクローナル抗体およびその使用
CN115038720B (zh) 抗gprc5d单克隆抗体及其用途
WO2022148370A1 (en) Anti-gprc5d monoclonal antibodies and uses thereof
WO2022206961A1 (en) Anti-cd24 monoclonal antibodies and uses thereof
WO2023155796A1 (en) Anti-il-13ra2 monoclonal antibodies and uses thereof
TW202330593A (zh) 抗ｇｐｒｃ５ｄ單株抗體及其用途
TW202330599A (zh) 抗ｃｃｒ８單株抗體及其用途
OA21300A (en) Anti-ccr8 monoclonal antibodies and uses thereof.
TW202409076A (zh) 抗slc34a2單株抗體及其用途

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination