KR20230117982A

KR20230117982A - 칸나비노이드 추출물의 제조방법 및 칸나비노이드 추출물의 분석 방법

Info

Publication number: KR20230117982A
Application number: KR1020220014422A
Authority: KR
Inventors: 함정엽; 김정국
Original assignee: 주식회사 네오켄바이오; 자이언트코리아 주식회사
Priority date: 2022-02-03
Filing date: 2022-02-03
Publication date: 2023-08-10

Abstract

본 명세서는 칸나비스 식물 유래 물질 및 유기 용매의 혼합물을 준비하는 단계; 상기 혼합물의 주변 대기 분위기를 2 내지 100 기압으로 조절하는 전처리 단계; 상기 혼합물에 100W 내지 3kW의 세기로 마이크로웨이브를 조사하여 열처리하는 단계; 및 상기 혼합물로부터 상기 칸나비노이드 성분을 추출하는 단계를 포함하는 칸나비노이드 추출물의 제조방법 및 칸나비노이드 추출물의 분석 방법에 관한 것이다.

Description

칸나비노이드 추출물의 제조방법 및 칸나비노이드 추출물의 분석 방법{MANUFACTURING METHOD OF ISOLATING CANNABINOID ANALYSYS METHOD FOR ISOLATING CANNABINOID}

본 명세서는 칸나비노이드 추출물의 제조방법 및 칸나비노이드 추출물의 분석 방법에 관한 것이다.

대마(大麻, Cannabis sativa L.)는 중앙 아시아를 중심으로 12,000년 전부터 열대와 온대지방에서 널리 재배된 삼과(Cannabaceae) 대마속의 한해살이 식물로 야생삼을 포함하며, 의·약학적 성분으로 알려진 다양한 종류의 칸나비노이드 화합물을 함유하는 칸나비스 케모바스(cannabis chemovars)와 그의 변형체, 변종 var. indica 및 var. kafiristanica를 포함한 칸나비스 사티바 서브스페시스 사티바(Cannabis sativa subspecies sativa), 칸나비스 사티바 서브스페시스 인디카(Cannabis sativa subspecies indica), 칸나비스 사티바 서브스페시스 루데라리스(Cannabis sativa subspecies ruderalis) 및 유전 교배, 자기 교배 또는 그의 교잡 식물을 통칭해서 말한다.

중국을 비롯한 한국의 전통 의약서에서는 대마 종자의 껍질을 제거한 마자인(麻子仁) 또는 화마인(火麻仁)이 변비, 당뇨, 통증질환, 월경불순, 피부질환 및 이질 등에 사용되어 왔고, 삼잎인 대마초(大麻草, 마엽(麻葉))는 구충제, 모발보호, 천식, 진통작용, 마취, 이뇨제 등으로 사용한 바 있다. 또한 마근(麻根)은 난산 치료와 어혈 해소에, 마피(麻皮)는 타박상과 열림창동에, 마화(麻化)는 마비증상과 가려움증 등에 사용했으며, 마분(麻賁)은 난산, 변비, 통풍, 진관, 불면 등에 대마의 각 부위에 따라 병증에 맞게 사용한 기록들이 전해진다.

대마에는 약 400여 개의 화합물이 있으며, 그 중 대부분이 칸나비노이드(cannabinoids)와 테르펜(terpene), 페놀류 화합물(phenolic compounds)이고 이중 의·약학적 중요 천연 성분인 칸나비노이드류는 90여 가지로 대마에서만 발견되는 성분도 다수 있다.

대마의 칸나비노이드류 중 향정신성 성분은 테트라히드로칸나비놀(△⁹-THC)이고, 칸나비디올(cannabidiol, CBD)은 비향정신성 성분으로 아드레날린 수용체 및 칸나비노이드 수용체를 비롯한 인체 내 다양한 수용체를 통해 생리활성 효과를 나타내는 성분으로 알려져 있다.

특히, 과학자들이 대마의 향정신성 작용 기전을 연구하던 중 1988년 뇌에서 칸나비노이드가 선택적으로 결합하는 수용체를 발견하였다. 이는 우리 몸에서도 칸나비노이드와 유사한 분자가 만들어지고 있고 이러한 칸나비노이드류 분자는 뇌의 국소부위에서 만들어지는 지방산 형태의 신경전달물질로 아난다마이드(anandamide)라고 한다. 현재까지 알려진 칸나비스 수용체는 두 종류로 나뉜다. CB1 수용체는 대뇌피질, 해마, 소뇌, 기저핵 등 뇌의 전반에 걸쳐 분포하고 있다. CB2 수용체는 대식세포나 골수, 폐, 췌장, 평활근 등 말초조직에 주로 분포하여 면역계와 관련성이 깊다.

THC는 약용으로 사용되는 대마의 주요한 유효성분이다. THC는 CB1 수용체에 강한 친화력을 가진 작용제로 이것이 향정신성 작용을 나타내는 주요 기전으로 알려져 있다. CBD는 수많은 연구결과를 통해 항염증작용, 항간질작용, 진토작용, 항암작용 등 유익한 작용을 갖는다고 알려져 있다. CBD는 또한 THC로 인한 부작용을 줄이고, THC와 같은 CB1과 CB2 수용체의 작용제에 대한 길항작용을 통해 내인성 칸나비노이드인 아난다마이드의 재흡수 및 분해를 억제하는 동시에 세로토닌 수용체에 대하여 작용제로서 기능을 하는 것으로 알려져 있다. 이 밖에도 대마 성분 중 칸나비크로민(cannabichromene)은 항염증, 진정작용, 항진균작용 등이, 칸나비놀(cannabinol, CBN)은 CB1보다는 CB2 수용체와 결합하여 면역기능 향상에 도움이 된다고 밝혀지는 등 대마 함유 성분들에 대한 약학적 기전 연구가 매우 활발히 진행되고 있다.

미국에서 식품의약국(Food and Drug Administration, FDA)이 승인한 THC 경구용 약품인 드로나비놀(dronabinol, 상품명 Marinol)과 나빌론(nabilone, 상품명 Cesamet)이 항암치료 부작용 완화와 에이즈환자 식욕촉진제로 판매되고 있으며, CBD를 주성분으로 하는 액상 약물인 에피디오렉스(Epidiolex)가 소아 간질에, CB2 수용체 결합 합성 칸나비노이드 제제인 레수납(Resunab)이 전신 홍반성 루푸스(systemic lupus erythematosus) 치료에, 단일 THC와 CBD 약물이 아닌 대마 추출물 형태의 칸나도르(Cannador, THC:CBD=2:1)가 다발성 경화증 및 심각한 만성 통증 질환에 대한 임상실험을 하는 등 광범위하고 활발히 연구가 진행 중이다.

대한민국 공개 특허 제10-2017-0080608호(2027.07.10. 공개)

본 발명의 일 실시상태는 칸나비스 식물 유래 물질 및 유기 용매의 혼합물을 준비하는 단계; 상기 혼합물의 주변 대기 분위기를 2 내지 100 기압으로 조절하는 전처리 단계; 상기 혼합물에 100W 내지 3kW의 세기로 마이크로웨이브를 조사하여 열처리하는 단계; 및 상기 혼합물로부터 상기 칸나비노이드 성분을 추출하는 단계를 포함하는 칸나비노이드 추출물의 제조방법을 제공한다.

또한, 본 발명의 일 실시상태는 상술한 제조방법에 따라 칸나비노이드 추출물을 제조하는 단계; 및 액체 크로마토그래피를 수행하여 칸나비노이드 성분을 분석하는 단계를 포함하는 칸나비노이드 추출물의 분석 방법을 제공한다.

본 발명의 일 실시상태에 따른 칸나비노이드 추출물의 제조방법은 간편하고, 칸나비디올로의 전화 수율이 우수한 효과가 있다.

또한, 본 발명의 일 실시상태에 칸나비노이드 추출물의 분석 방법은 측정 결과의 오차 범위가 적어 신뢰도가 높은 효과가 있다.

도 1은 실시예 1 내지 3의 UPLC 크로마토그램이다.

이하, 본 명세서에 대해 상세히 설명한다.

종래의 칸나비노이드 추출물은 칸나비스 식물 유래 물질에 열처리를 하는 방법으로 제조되는데, 열처리가 충분하지 않은 경우 칸나비노이드 추출물의 수율이 낮은 문제가 있었으며, 수율을 향상시키기 위해 열처리가 과도한 경우 원료가 손상되는 문제가 있었다. 또한, 칸나비스 식물에는 원하는 칸나비노이드 성분이 존재하는 부분과 존재하지 않는 부분이 혼재되어 있는데, 성분 분석이 종료된 이후에 이를 확인하기 때문에 제조에 시행착오가 생겨나는 문제가 있었다.

본 발명자는 상술한 문제를 해결하기 위한 방법으로, 본 발명을 완성하였으며, 마이크로웨이브 외에 별도의 열처리가 수행되지 않아도 칸나비노이드 추출물의 수율이 향상될 수 있었다. 또한, 열처리에 필요한 에너지와 시간이 단축됨으로써, 칸나비스 식물에 칸나비노이드 성분이 존재하는 지 확인하는 데 필요한 시간이 절약되므로, 칸나비스 식물의 일부 샘플만을 취하여 칸나비노이드 성분의 존재 여부를 확인할 수 있으므로, 시행착오가 줄어드는 효과가 있었다.

본 발명의 일 실시상태에 따른 칸나비노이드 추출물의 제조방법은 칸나비스 식물 유래 물질 및 유기 용매의 혼합물을 준비하는 단계를 포함한다. 구체적으로, 상기 칸나비스 식물 유래 물질을 유기 용매에 혼합하는 방법으로 준비할 수 있다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 칸나비스 식물 유래 물질은 칸나비스 식물 또는 칸나비스 식물의 분쇄물일 수 있다. 상기 칸나비스 식물은 대마초 잎, 대마초 뿌리, 대마초 줄기 또는 대마초 뿌리일 수 있다.

본 발명의 일 실시상태에 따른 칸나비노이드 추출물의 제조방법은 상기 혼합물의 주변 대기 분위기를 2 내지 100 기압으로 조절하는 전처리 단계를 포함한다. 상기 전처리 단계는 후술하는 열처리 단계에서 열처리가 더욱 효과적으로 되기 위해 처리하는 단계이다. 구체적으로, 상기 혼합물의 주변 대기 분위기를 1기압보다 높은 2 내지 100 기압으로 조절하여, 혼합물의 끓는점을 상승시킴으로써, 열처리 단계에서 충분히 열처리되기 전에 혼합물의 상이 변하는 것을 방지할 수 있다. 이를 통해, 열처리 효율을 증가시켜 짧은 시간 내에 충분한 열처리 공정이 수행될 수 있다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 전처리 단계의 주변 대기 분위기는 2 내지 100기압, 2 내지 50 기압 또는 2 내지 10기압일 수 있다. 상기 수치 범위에서 혼합물의 끓는점을 상승시키고, 열처리 효율을 향상시킬 수 있다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 전처리 단계의 주변 대기 분위기는 상기 혼합물의 인접한 대기 분위기를 의미한다. 상기 혼합물이 챔버에 보관된 경우, 챔버 내의 대기 압력을 의미할 수 있다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 전처리 단계는 상기 혼합물에 기체를 공급하는 방법으로 수행될 수 있다. 구체적으로, 상기 기체는 헬륨, 아르곤, 질소, 공기, 및 산소의 어느 하나 또는 이들의 혼합 기체일 수 있다. 기체의 유량과 투입량을 조절하기 위해, 상기 혼합물이 보관된 챔버에 연결된 기체 공급장치, 유량조절밸브를 사용할 수 있다.

본 발명의 일 실시상태에 따른 칸나비노이드 추출물의 제조방법은 상기 혼합물에 100W 내지 3kW의 세기로 마이크로웨이브를 조사하여 열처리하는 단계를 포함한다. 상기 마이크로웨이브는 주파수가 300MHz~300 GHz인 전자기파를 말하며 물체에 조사되면 성분의 쌍극자 모멘트를 유도하여 급속한 유전가열을 발생시키는 특성을 가지며, 혼합물 내의 목적 성분만을 선택하여 가열할 수 있어, 에너지 효율이 높은 장점이 있다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 열처리하는 단계는 상기 혼합물에포함된 칸나비노이드 성분을 탈카르복실화하는 단계일 수 있다. 상기 칸나비노이드 성분은 카르복실산기(-COOH)를 포함하는 CBDA, THCA와 같은 성분을 포함하는데, 향정신성 효과를 나타내기 위해서는 카르복실산기를 이탈시키는 것이 필요하다. 이를 탈카르복실화라고 명명할 수 있으며, 카르복실산기를 포함하는 칸나비노이드 성분은 생합성 전구체로 기능할 수 있다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 열처리하는 단계의 마이크로웨이브는 300 MHz 내지 300 GHz, 예를 들면, 1000 MHz 내지 100 GHz, 1000 MHz 내지 50 GHz, 1000 MHz 내지 10 GHz, 또는 1000 MHz 내지 5 GHz의 주파수를 갖는 마이크로웨이브일 수 있다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 열처리하는 단계의 마이크로웨이브의 세기는 50W 내지 6kW 또는 100W 내지 3Kw일 수 있다. 상기 범위에 미달하면 탈카르복실화 반응이 제대로 되지 않고 상기 범위를 초과하면 원료가 손상될 수 있으므로, 상기 범위로 조절하는 것이 바람직하다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 열처리하는 단계는 60℃내지 150℃에서 수행될 수 있다. 상기 온도는 60℃내지 120℃또는 70℃℃내지 100℃에서 수행될 수 있다. 상기 범위에 미달하면 탈카르복실화 반응이 제대로 되지 않고 상기 범위를 초과하면 원료가 손상될 수 있으므로, 상기 범위로 조절하는 것이 바람직하다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 열처리하는 단계는 30분 내지 24시간 동안 수행될 수 있다. 바람직하게는 30분 내지 10시간 또는 30분 내지 2시간 동안 수행될 수 있다. 상기 범위에 미달하면 탈카르복실화 반응이 제대로 되지 않을 수 있으므로 상기 범위로 조절하는 것이 바람직하다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 열처리하는 단계는 2 내지 100 기압 하에서 수행될 수 있다. 바람직하게는 2 내지 50 기압 또는 2 내지 15기압으로 수행될 수 있다. 상기 기압은 상기 원료들이 포함되는 반응기 내부의 압력을 조절하여 달성할 수 있다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 열처리하는 단계는 닫힌 계(closed system)에서 수행될 수 있다. 상기 닫힌 계는 열처리 공간 내부와 외부의 공기 순환이 없는 상태를 의미하는 것으로서, 열처리를 상기 닫힌 계에서 수행하는 경우 증발된 유기 용매가 계 외부로 이동하지 않고, 계 내부에 머무르게 된다. 즉, 증발된 용매가 계 내부에 머무르게 되면서, 계 내부의 공기 조성과 혼합물의 조성이 유사한 형태를 갖는다. 이로 인해 계 내부의 공기와 혼합물이 서로 잘 섞이게 되고, 열처리 효율이 증가할 수 있다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 열처리하는 단계는 닫힌 계(closed system)에서 수행되고, 상기 혼합물의 부피와 닫힌 계의 부피비율이 1:1,000 내지 1:5,000일 수 있다. 또한, 바람직한 수치 범위로는 1:2,000 내지 1:4,000, 더욱 바람직하게는 1:2,500 내지 1:3,500일 수 있다. 상기 수치 범위를 초과하는 경우, 닫힌 계의 부피가 과도하게 커서 닫힌 계의 공기에 증발된 용매가 많이 포함되지 않게 되고, 닫힌 계 내부의 공기와 혼합물의 조성이 상이하게 되어, 열처리 효율이 떨어지는 문제가 있다. 반면에, 상기 수치 범위보다 작은 경우 열처리 자체가 충분하지 않은 문제가 있다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 유기 용매는 물, C1-C12의 알콜 또는 그 수용액을 포함할 수 있다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 유기 용매는 에탄올, 이소프로판올, 부탄올 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 칸나비노이드 성분은 테트라히드로칸나비놀산(THCa), 칸나비디올산(CBDa), 칸나비놀산(CBNa) 칸나비크로멘산(CBCa), 테트라히드로칸나비놀(THC), 칸나비놀(CBN), 칸나비디올(CBD) 및 칸나비크로멘(CBC)으로 이루어진 군에서 선택된 2종 이상의 성분을 포함할 수 있다. 또한, 상기 칸나비노이드 성분은 THCa 및 CBDa와, CBNa, CBCa, THC, CBN 및 CBC에서 선택된 둘 이상의 칸나비노이드일 수 있다. 바람직한 구체예에서, 칸나비노이드는 THC, CBN, CBC 및 CBD이다. 또다른 바람직한 구체예에서, 칸나비노이드는 THCa, CBDa, CBNa 및 CBCa이다. 또다른 바람직한 구체예에서, 칸나비노이드는 THCa, CBDa, THC, CBN, 및 CBC일 수 있다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 칸나비노이드 성분은 테트라히드로칸나비놀산(THCa), 칸나비디올산(CBDa), 칸나비놀산(CBNa) 칸나비크로멘산(CBCa), 테트라히드로칸나비놀(THC), 칸나비놀(CBN), 칸나비디올(CBD) 및 칸나비크로멘(CBC)으로 이루어진 군에서 선택된 2종 이상의 성분을 포함하는 것인 칸나비노이드 추출물의 제조방법.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 THC, CBD, CBN, CBC, CBG, CBND, CBL, CBV, THCV, CBDV, CBCV, CBGV 및 CBGM은 칸나비노이드의 탈카르복실화된 형태를 지칭한다. 반면, THCa, CBDa, CBNa, CBCa, CBGa, CBNDa, CBLa, CBVa, THCVa, CBDVa, CBCVa, CBGVa 및 CBGM은 칸나비노이드의 산 형태를 지칭한다.

상기 테트라히드로칸나비놀(THC)은 대마초 식물의 주된 향정신성 성분이다. THC는 탈카르복실화된 상태에서만 향정신성을 띈다. 카르복실산 형태(THCa)는 비-향정신성이다.

상기 델타-9-테트라히드로칸나비놀(△⁹-THC, THC) 및 델타-8-테트라히드로칸나비놀(△⁸-THC)은, 아난다미드, 즉 체내 자연 생성되는 신경전달물질의 작용을 모사한다. 이러한 2종의 THC는 뇌에서 CB1 칸나비노이드 수용체에 결합함으로써 대마초와 관련된 효과를 생성한다. THC는 중간 통증(진통제)을 덜어주고 신경보호적이 되는 것으로 여겨지지만, 또한 신경세포염증을 감소시키고 신경발생을 자극하는 잠재성을 제공한다. THC는 CB1 및 CB2 수용체에 대해 대략 동일한 친화력을 갖는다.

상기 칸나비디올(CBD)은 향정신성이 아니고, THC의 향정신성에 영향을 주지 않는 것으로 알려져 있다. 그러나, 최근 연구에 따르면 더 높은 CBD/THC 비율을 갖는 대마초 흡연자들은 조현병-유사 증상을 경험할 가능성이 더 적은 것으로 확인된다. 이는 정맥주사된 THC가 CBD와 동시 투여되었을 때 (PANSS 테스트에 의해 측정된 바와 같이) 참가자들이 덜 극심한 정신병 유사 효과를 경험하는 심리테스트에 의해 지지된다. 칸나비디올은 CB1 및 CB2 수용체에 대해 친화력이 거의 없지만 칸나비노이드 작용제의 간접적 길항제로서 작용한다. 최근 들어, 이는, 후보 핵 및 내과피(putamen)에서 발현되는 추정상 신규 칸나비노이드 수용체, GPR55, GPCR에서 길항제가 되는 것으로 밝혀졌다. 칸나비디올은 또한 5-HT1A 수용체 작용제로서, 이의 항울성, 불안완화성, 및 신경보호성 효과와 관련되어 작용하는 것으로 확인되었다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 칸나비노이드 성분을 탈카르복실화하는 단계에서 상기 혼합물은 마이크로웨이브 투과성 소재의 반응 용기에 보관된 상태에서 수행될 수 있다. 상기 마이크로웨이브 투과성 소재는 유리, 도자기, 합성수지일 수 있다. 상기 합성수지는 폴리프로필렌(PP)일 수 있다.

본 발명의 일 실시상태는 상기 제조방법에 따라 칸나비노이드 추출물을 제조하는 단계; 및 액체 크로마토그래피를 수행하여 칸나비노이드 성분을 분석하는 단계를 포함하는 칸나비노이드 추출물의 분석 방법을 제공한다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 액체 크로마토그래피는 고압 액체 크로마토그래피(High Pressure Liquid Chromatography, HPLC) 또는 초고성능 액체 크로마토그래피(Ultra Performance Liquid Chromatography, UPLC)일 수 있다.

본 발명의 일 실시상태에 있어서, 상기 액체 크로마토그래피의 이동상은 포름산(Formic acid, FA), 물, 아세토니트릴 및 인산으로 이루어지는 군으로부터 선택된 1종 또는 2종 이상일 수 있다.

이하, 실시예를 통해 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다.

<실시예>

실시예 1

스마트팜에서 107일간 재배한 Hemp의 암꽃을 수확하여 건조 및 세절한 후, 에탄올 유기 용매와 혼합여 혼합물을 준비하였다.

상기 혼합물을 40mL의 용기에 담아 마이크로웨이브 조사 장치의 챔버로 이동시켰다.

챔버를 밀폐하여 닫힌 계(closed system)으로 형성하고, 외부와의 기체 순환을 방지하였다. 챔버에 아르곤 기체를 주입하여 챔버 내부의 압력을 3기압으로 조절하였으며, 30분간 방치하였다.

이후, 상기 챔버에 300W, 주파수 2,500 MHz에서 30분간 마이크로웨이브를 조사하여 열처리를 수행하였으며, 상온에 30분간 방치하여 냉각시켰다. 위 열처리 및 냉각을 2회 반복하여 충분히 열처리되게 하였다. 마이크로웨이브 조사시 압력이 5기압이었으며, 온도는 120℃이었다. 또한, 상기 혼합물의 부피가 30mL이고 챔버의 부피가 50L로, 챔버의 부피비가 1:1,666이었다.

실시예 2

스마트팜에서 107일간 재배한 Hemp의 줄기 길이의 절반을 기준으로 위쪽에 위치한 잎 중 일부를 사용한 것 외에는 실시예 1과 동일한 방법으로 실험을 수행하였다.

실시예 3

스마트팜에서 107일간 재배한 Hemp의 줄기 길이의 절반을 기준으로 아래쪽에 위치한 잎 중 일부를 사용한 것 외에는 실시예 1과 동일한 방법으로 실험을 수행하였다.

<실험예>

(1)실험 방법

실시예에서 제조된 추출물에 대해 UPLC를 사용한 성분 분석을 수행하였다. UPLC (Ultra Performance Liquid Chromatography)에서 사용한 용출 용매인 A는 물이고 용출 용매 B는 아세토니트릴이며, 2개의 펌프를 이용하여 각각 펌핑하여 사용하였다. 상기 표준 수용액 3 ㎕를 시린지(syringe)를 이용하여 분석용 역상 컬럼 (Phenomenex Omega 1.6 μm Pola C18 150 x 2.1 mm)에 주입시키고, 70 부피 %의 A, 30 부피 %의 B의 조성을 갖는 용출 용매를 0.3 mL/분의 유속으로 흘렸다. 그 후, 용출 용매 B의 부피 %를 70 % (1 분), 85 % (10 분)으로 점차적으로 변화시켰다. 상기 과정 후 컬럼에서 분리된 각 성분을 UV 스펙트럼을 통하여 분석하였다.

(2)실험 결과

UPLC 크로마토그램에서 계산된 칸나비노이드 성분의 함량을 추출물 1g당 mg수로 환산하여 아래 표 1에 기재하였다. 또한, UPLC 크로마토그램을 도 1에 나타내었다.

구분	추출물 무게	칸나비노이드 성분 함량(추출물 1g당 mg수)
구분	추출물 무게	CBDA	CBD	CBD /(CBCA+CBD)*100	THCA	△⁹-THC	Total
실시예 1	49 mg	0.6 mg	0.3 mg	33%	162.8 mg	1 mg	164.7 mg
실시예 2	17 mg	0.6 mg	0.2 mg	25%	125.4 mg	1.1 mg	127.4 mg
실시예 3	73 mg	1.8 mg	0.5 mg	22%	124.5 mg	4.4 mg	131.2 mg

상기 결과로부터, 본 발명의 칸나비노이드 추출물의 제조방법을 사용하는 경우, CBDA의 CBD로의 전환율이 높아, CBD의 함량이 높은 것을 확인할 수 있었다.

Claims

칸나비스 식물 유래 물질 및 유기 용매의 혼합물을 준비하는 단계;
상기 혼합물의 주변 대기 분위기를 2 내지 100 기압으로 조절하는 전처리 단계;
상기 혼합물에 100W 내지 3kW의 세기로 마이크로웨이브를 조사하여 열처리하는 단계; 및
상기 혼합물로부터 상기 칸나비노이드 성분을 추출하는 단계를 포함하는 칸나비노이드 추출물의 제조방법.
청구항 1에 있어서,
상기 열처리하는 단계는 60℃내지 150℃에서 수행되는 것인 칸나비노이드 추출물의 제조방법.
청구항 1에 있어서,
상기 열처리하는 단계는 30분 내지 24시간 동안 수행되는 것인 칸나비노이드 추출물의 제조방법.
청구항 1에 있어서,
상기 열처리하는 단계는 2 내지 100 기압 하에서 수행되는 것인 칸나비노이드 추출물의 제조방법.
청구항 1에 있어서,
상기 열처리하는 단계는 닫힌 계(closed system)에서 수행되는 것인 칸나비노이드 추출물의 제조방법.
청구항 1에 있어서,
상기 열처리하는 단계는 닫힌 계(closed system)에서 수행되고,
상기 혼합물의 부피와 닫힌 계의 부피비율이 1:1,000 내지 1:5,000인 것인 칸나비노이드 추출물의 제조방법.
청구항 1에 있어서,
상기 유기 용매는 물, C1-C12의 알콜 또는 그 수용액을 포함하는 것인 칸나비노이드 추출물의 제조방법.
청구항 1에 있어서,
상기 유기 용매는 에탄올, 이소프로판올, 부탄올 또는 이들의 혼합물을 포함하는 것인 칸나비노이드 추출물의 제조방법.
청구항 1에 있어서,
상기 칸나비노이드 성분은 테트라히드로칸나비놀산(THCa), 칸나비디올산(CBDa), 칸나비놀산(CBNa) 칸나비크로멘산(CBCa), 테트라히드로칸나비놀(THC), 칸나비놀(CBN), 칸나비디올(CBD) 및 칸나비크로멘(CBC)으로 이루어진 군에서 선택된 2종 이상의 성분을 포함하는 것인 칸나비노이드 추출물의 제조방법.
청구항 1에 있어서,
상기 열처리하는 단계는 상기 혼합물은 마이크로웨이브 투과성 소재의 반응 용기에 보관된 상태에서 수행되는 것인 칸나비노이드 추출물의 제조방법.
청구항 1 내지 10 중 어느 한 항에 따른 제조방법에 따라 칸나비노이드 추출물을 제조하는 단계; 및
액체 크로마토그래피를 수행하여 칸나비노이드 성분을 분석하는 단계를 포함하는 칸나비노이드 추출물의 분석 방법.