KR20230077926A - 천연추출물을 이용한 항균성 플라스틱 프리 물티슈 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 도라지 추출물 및 자몽씨 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 항균력이 강화된 물티슈에 관한 것으로, 도라지 추출물 또는 자몽씨 추출물만을 포함하는 물티슈보다 강화된 항균력을 가지며, 미세플라스틱을 생산하지 않아 보다 친환경적이고 안전한 물티슈로 사용할 수 있다.
Description
본 발명은 천연추출물을 이용한 항균성 플라스틱 프리 물티슈에 관한 것이다.
물티슈(wet tissue)는 적셔진 휴지로, 장소에 관계없이 사용자의 손과 얼굴을 닦을 수 있고, 근래에는 영유아의 기저귀 교체시 영유아의 피부를 닦거나, 청소용으로도 널리 사용되고 있다.
물티슈는 액체에 적셔져 있는 만큼, 제조과정에서 살균을 하여도 공기에 노출되면 세균, 곰팡이 등이 번식하기 쉽기 때문에 소독약품을 물티슈에 첨가하게 된다. 이 때문에, 물티슈는 끊임없이 화학성분에 대한 논란이 일고 있다. 2014년에는 일부 물티슈 제품에 '세트리모늄 브로마이드'란 독성물질이 들어있다는 기사에 대규모 반품 사태까지 일어났으며, 2016년에는 가습기 살균제 성분이 들어간 물티슈가 시중에 유통중이라는 기사가 나오면서 다시 물티슈의 유해성 논란이 일어나기도 하였다. 이에 따라 천연물 유래의 항균 물질, 특히 생체 안전성이 확인되고 항균활성을 갖는 식물 추출물에 관한 관심이 증가하고 있다.
또한 최근 전 세계에서 환경 이슈가 사회적인 화두로 부상하면서 특히 합성섬유로부터 유래되는 미세 플라스틱이 화두로 떠오르고 있다. 이 가운데, 물티슈의 섬유재질이 대부분 플라스틱 계열의 폴리에스테르 소재인 점에서 재활용도 되지 않고 소각 또는 매립으로 처리해야 하는 물티슈에 대한 우려가 커지고 있는 실정이다.
이에 따라 매년 사용량이 급증하고 있는 물티슈의 섬유소재와 항균 첨가물에 관한 관심이 높아지고 있으며, 보다 안전하고 환경친화적인 물티슈에 관한 연구가 필요하다.
한편, 도라지(Platycodon grandiflorus)는 초롱꽃과 도라지속(Platycodon)에 속하는 여러해살이풀이다. 길경(桔梗)이라고도 부르며, 또 다른 한자 이름으로 화상모(和尙帽), 명엽채(明葉菜), 도랍기(道拉基)라고도 한다. 한방에서는 신경통과 편도선염 등의 약재로 사용한다. 도라지 뿌리는 사포닌이 많이 포함되어 있어서 생약(桔梗根)으로 이용되고 칼슘, 섬유질, 철분, 무기질, 단백질, 비타민 등이 함유되어 있다. 또한, 거담, 진해, 진통, 진정, 해열 작용이 있으며, 소염진통, 진해거담제로 사용된다.
그레이프프루트(grapefruit) 또는 자몽은 운향과의 과일 나무로, 당귤나무(C. × sinensis)와 포멜로(C. maxima)의 자연교잡을 통해 처음 생겨났다. 자몽 열매는 쓴맛, 단맛, 신맛이 조합되어 있으며, 다양한 비타민과 미네랄 뿐만 아니라 섬유질과 강력한 항산화성분을 함유하고 있어 주로 주스나 과일스무디, 에이드 등으로 사용된다. 자몽 껍질은 기름을 얻는 데 사용되며, 자몽 종자 추출물은 Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Listeria monocytogenes와 그람 음성균인 Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Serratia marcescem에 대하여 저해 활성을 나타낸다는 보고가 있으며(박 등, 2006), 천연 방부제로 화장료로도 사용되고 있어 이를 이용한 항균 제품들이 등장하고 있다.
박헌국, 김상범, Antimicrobial Activity of Grapefruit Seed Extract, The Korean journal of food and nutrition v.19 no.4 , 2006, pp.526- 531
본 발명의 목적은 도라지추출물 및 자몽씨 추출물을 일정 비율로 포함하여 항균력이 강화된 물티슈를 제공하는 데 있다.
본 발명은 도라지 추출물 및 자몽씨 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 항균력이 강화된 물티슈를 제공한다.
본 발명에서 정의된 ‘추출물’은 적절한 용매를 이용하여 도라지 또는 자몽씨로부터 추출한 것이며, 예를 들어, 도라지 또는 자몽씨의 열수추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성용매 가용 추출물을 모두 포함할 수 있다.
도라지 또는 자몽씨로부터 추출물을 추출하기 위한 적절한 용매로는 당업계에서 허용되는 용매라면 어느 것을 사용해도 무방하며, 물 또는 유기용매를 사용할 수 있다. 예를 들어, 정제수, 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol) 등을 포함하는 탄소수 1 내지 4의 알코올, 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane) 및 시클로헥산(cyclohexane) 등의 각종 용매를 단독으로 혹은 혼합하여 사용할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 추출 방법으로는 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법,압착법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있다. 또한, 목적하는 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다. 본 발명의 도라지 추출물의 제조방법에는 제한이 없으며, 공지되어 있는 어떠한 방법도 이용될 수 있다.
예를 들면, 본 발명의 조성물에 포함되는 도라지 추출물은 상기한 열수 추출 또는 용매 추출법으로 추출된 1차 추출물을, 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조할 수 있다. 또한 상기 1차 추출물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 박층 크로마토그래피(thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography) 등과 같은 다양한 크로마토그래피를 이용하여 추가로 정제된 분획을 얻을 수도 있다.
따라서 본 발명에 있어서 도라지 또는 자몽씨 추출물은 따로 용매와 추출방법을 제한하지 않는 한, 추출, 분획 또는 정제의 각 단계에서 얻어지는 모든 추출액, 분획 및 정제물, 그들의 희석액, 농축액 또는 건조물을 모두 포함하는 개념이다.
본 발명의 일측면에 있어서 도라지 추출물은, 도라지의 에탄올 추출물이다. 이때 도라지의 에탄올 추출물은 헥산(MtOH-H), 에틸아세테이트(MtOH-E), 클로로포름(MtOH-C) 및 n-부탄올(MtOH-B) 순으로, 순차적으로 더 분획한 후, 수득한 도라지 에탄올 추출물의 헥산(MtOH-H), 에틸아세테이트(MtOH-E), 클로로포름(MtOH-C) 및 n-부탄올(MtOH-B) 분획물일 수 있으며, 바람직하게는 도라지 에탄올 추출물의 헥산 분획물이다.
상기 도라지 추출물 및 자몽씨 추출물은 중량비 1~3 : 1로 혼합된 것일 수 있다. 도라지 추출물 및 자몽씨 추출물 중량비가 1 : 1 보다 도라지 추출물이 적게 포함되는 경우, 또는 도라지 추출물 및 자몽씨 추출물 중량비가 3 : 1 보다 도라지 추출물이 적게 포함되는물티슈의 항균활성이 현저히 떨어질 수 있다. 바람직하게는 도라지 추출물 : 자몽씨 추출물은 중량비 2 : 1로 혼합된 것일 수 있다.
상기 도라지 추출물 및 자몽씨 추출물은 물티슈의 액체 조성물 중 도라지 추출물을 기준으로 1~5 %(w/v) 포함된 것일 수 있으며, 도라지 추출물이 물티슈의 액체 조성물 중 1 %(w/v) 보다 적게 포함되는 경우 항균활성이 떨어지며, 5 %(w/v) 보다 많이 포함되는 경우, 역시 항균활성이 떨어지거나 경제적으로 불리하다. 이에 따라 자몽씨 추출물은 물티슈의 액체 조성물 중 0.3~2.5 %(w/v) 포함될 수 있다. 바람직하게는 자몽씨 추출물은 물티슈의 액체 조성물 중 0.5~2.5 %(w/v) 포함될 수 있다.
본 발명에 따른 물티슈는 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 대장균(E. coli), 아스퍼질러스 나이거(A. niger), 라이조푸스 오리재(R. oryzae), 뉴로스포라 종(Neurospora sp.), 바실러스 파란트라시스(B. paranthracis), 바실러스 서브틸리스(B. subtilis), 부르크홀데리아 세파시아(B. cepacia), 슈도모나스 애루기노사(P. aeruginosa) 및 바실러스 세레우스(B. cereus)에 대하여 항균활성을 나타내는 것일 수 있으며, 더욱 구체적으로는 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 대장균(E. coli)에 대하여 항균활성을 나타내는 것일 수 있다.
본 발명은 도라지추출물 및 자몽씨추출물을 일정 비율로 포함하는 항균력이 강화된 물티슈에 관한 것으로, 도라지추출물 또는 자몽씨추출물을 단독으로 포함하는 물티슈보다 황색포도상구균 및 대장균에 대하여 항균력이 강화되면서도 환경친화적이고 사람에게 안전하게 사용할 수 있다.
도 1은 도라지추출물 농도를 달리한 용액의 황색포도상구균 및 대장균 배지에서의 항균 활성을 보여주는 사진이다.
도 2는 본 발명에 따른 도라지 추출물 2 %(w/v), 자몽씨 추출물 1 %(w/v)을 포함하는 물티슈의 제조 과정 및 제작된 물티슈를 보여주는 사진이다.
도 3은 본 발명에 따른 도라지추출물 및 자몽씨추출물을 포함하는 물티슈의 항균활성을 보여주는 사진이다.
도 2는 본 발명에 따른 도라지 추출물 2 %(w/v), 자몽씨 추출물 1 %(w/v)을 포함하는 물티슈의 제조 과정 및 제작된 물티슈를 보여주는 사진이다.
도 3은 본 발명에 따른 도라지추출물 및 자몽씨추출물을 포함하는 물티슈의 항균활성을 보여주는 사진이다.
도라지 추출물은 한방에서는 진해, 거담작용, 중추신경억제작용 (진정, 진통, 해열효과), 급만성 염증에 대한 항염증작용에 사용하여 왔다. 또한, 최근에는 도라지 추출물이 콜라겐 합성을 촉진하고 활성 산소종의 억제 효과를 나타내어 피부노화 방지 및 주를 생성을 억제하는 것으로 알려졌다. 그러나 실제로 도라지 추출물을 포함하는 물티슈를 제작하는 경우, 도라지 추출물 만으로는 항균활성이 충분하지 않아 공기와의 접촉 또는 사용자와의 빈번한 접촉으로 쉽게 오염되는 것을 확인였으며, 이는 도라지 추출물의 농도를 높이더라도 해결되지 않았다. 도라지 추출물의 농도를 높이는 경우, 오히려 오염이 잘 일어나는 점도 관찰됨에 따라 피부 사용에 유익한 도라지 추출물의 항균효과를 높이고 물티슈에서 최적의 항균효과를 나타내는 방법을 연구하는 과정에서 본 발명을 안출하였다.
이하 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 그러나 본 발명은 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화될 수도 있다. 오히려, 여기서 소개되는 내용이 철저하고 완전해지고, 당업자에게 본 발명의 사상을 충분히 전달하기 위해 제공하는 것이다.
<
실시예
1. 도라지 추출물의 제조>
건조된 도라지를 구입한 후, 분말화하여 시료 중량의 다섯배 중량의 100% 메탄올로 24시간 정치하여 추출하는 방법을 3회 반복한 다음, 그 추출물 합한 후 감압 농축하였다(MtOH). 상기의 농축물을 헥산(MtOH-H), 에틸아세테이트(MtOH-E), 클로로포름(MtOH-C) 및 n-부탄올(MtOH-B) 순으로, 순차적으로 분획한 후, 각각의 용매 분획물을 여과포로 여과하고 여액을 감압 농축한 후 건조하여 추출물을 얻었다.
대조군으로 사용하기 위한 도라지 에탄올 추출물은 건조된 도라지를 분말화하여 시료 중량의 다섯배 중량의 100% 에탄올로 24시간 정치하여 추출하는 방법을 3회 반복한 다음, 그 추출물 합한 후 감압 농축하였다(EtOH).
<
실시예
2. 도라지 추출물의 항균활성 확인>
도라지 추출물 및 분획물의 항균 활성을 측정하기 위하여 24시간 전배양한 황색포도상구균 농도가 1.5 ~ 3.0 × 105 CFU/5mL이 되도록 황색포도상구균 선택배지(Baird-Parker Agar)0.6% agar 배양액에 희석한 뒤 plate count agar에 균일하게 도포하였다. 그 위에 상기 도라지 추출물 및 분획물 각 50 mg/ml 200μl을 흡수시킨 8mm paper disc를 포셉으로 올린 뒤 37℃에서 24시간 배양하였다. 그 후 clear zone을 측정하여 항균 효능을 확인하여 표 1에 나타내었다.
구분 | clear zone (mm) |
대조군(DMSO) | 0 |
EtOH | 2 |
MtOH | 4 |
MtOH-H | 2 |
MtOH-E | 5.5 |
MtOH-C | 2 |
MtOH-B | 1 |
표 1에서 보는 바와 같이, 도라지 메탄올 추출물(MtOH)은 황색포도상구균에 대하여 도라지 에탄올 추출물(EtOH)보다 높은 항균활성을 나타내었으며, 특히 에틸아세테이트 분획물(MtOH-E)에서 가장 높은 항균활성을 나타내었다.
<
실시예
3. 도라지 추출물 혼합물의 항균활성 확인>
도라지 추출물과 같이, 항균활성을 가지면서도 피부 상태 개선에 도움이 되며 도라지 추출물과 함께 항균활성을 증가시킬 수 있는 천연물을 선별하여 다음과 같이 준비하였다.
감초는 모든 약의 독성을 풀어 주고 기침과 담을 삭이며 모든 약을 중화하는 것으로 알려져 있다. 동의보감에는 감초는 5장 6부의 한열과 사기를 다스리며 눈, 코, 입, 귀와 대소변의 생리를 정상으로 되게 하고, 모든 혈맥을 소통시키며, 근육과 뼈를 튼튼하게 하고 영양 상태를 좋게 하고 또 모든 약의 독성을 해독하고 72가지 석약과 1200가지 초약을 서로 조화하여 약효를 잘 나타나게 하므로 별명을 국노라 한다고 기재되어 있다.
감잎은 위를 열어주고, 술 열독을 식혀주며, 간을 보하는데 특효하다고 <동의보감>은 소개하고 있으며 아스트라갈린(astragalin), 미리시트린(myricitrin)과 같은 플라보노이드 배당체, 탄닌, 폴리페놀류, 수지, 쿠마린(coumarin)류 화합물, 베툴산(betulic acid)등이 항균활성을 나타낼 수 있음이 알려져 있다.
당귀는 한방에서 보혈, 구어혈, 조경. 진경 등의 효능이 있어 신체허약, 관절통, 두통, 현기증, 복통, 변비, 타박상 등의 질환에 이용하며, 데쿠르신(decursin), 데쿠르시놀(decursinol), 노다케닌(nodakenin), 알파-피넨(α-pinene), 리모넨(limonen), 엘레몰(elemol) 등을 함유하는 것으로 보고 되어 있다.
감초(Glycyrrhiza uralensis) 건조물, 건조 감잎, 건조 당귀 각각을 증류수와 1 : 10 ~ 12 중량비로 혼합하여 100℃에서 2 ~ 6 시간 동안 가열 추출하고, 2,000 ~ 4,000rpm으로 10 ~ 20 분 동안 원심분리하여 찌꺼기를 제거하고 상층액을 수득한 후, 상기 상층액을 감압여과장치에서 여과한 다음, 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축 후 건조하여 각각 감초, 감잎, 당귀 추출물을 제조하였다.
더덕은 특유의 풍미와 탄수화물, 단백질 외에도 칼슘, 인, 철분 등 무기질과 비타민 B1, 비타민 B2가 풍부하여 식용으로도 널리 이용되어 온 안전한 천연물로, 한방에서는 가래를 없애주는 약재로 이용되어 강장, 해열, 거담, 폐결핵 등의 치료 목적으로 사용되어 왔다.
결명자는 두과(荳科)에 속하는 1년생 초본으로서 전통적으로 잎은 식용으로 이용되고 종자는 주로 약용으로 사용되어 왔으며, 주성분으로서 비타민 C, 크리소판올(chrysophanol), 에모딘(emodin), 카로틴(carotin), 캠페롤(kaempherol), 레인(rhein), 옵스투신(obstusin), 루보-푸사린 겐티오비오사이드(rubrofusarin gentiobioside), 안트라퀴논 글리코사이드(anthraquinone glycosides) 등이 함유되어 있으며 항균활성을 갖는 것으로 알려져 있다.
메밀은 단백질과 필수아미노산, 나이아신, 각종 비타민류, 칼슘, 철분 등이 풍부한 영양 생화학적 가치가 높아 오랫동안 식품으로 이용되어 온 안전한 천연물로, 최근 항염, 항균 작용을 나타내는 것이 알려지고 있다.
고삼은 콩과의 여러해살이 풀로 양지 바른 풀밭에서 주로 자란다. 고삼 뿌리를 끓여만성 간염에 복용하면 효능이 있는 것으로 알려져 있다.
더덕(Codonopsis lanceolata), 결명자(Casssia tora L.), 메밀(Fagopyrum esculentum) 및 고삼(Sophora flavescens) 건조물을 각가 메탄올과 1 : 20 ~ 22 중량비로 혼합하여 환류식 추출기에 투입하여 추출기 상단의 콘덴서(condenser)에 냉각수를 공급하면서 58 ~ 62 ℃에서 3 시간씩 3 회 반복하여 추출물을 수득하고, 상기 추출물을 감압여과장치에서 여과한 다음, 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하고, 동결건조기(Freeze dryer)를 이용하여 2 ~ 4 일 동안 건조시킨 후, 균질기를 이용하여 30 ~ 50 mesh로 분쇄하여 더덕, 결명자, 메밀 및 고삼 추출물을 각각 제조하였다.
자몽씨는 Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Listeria monocytogenes와 그람 음성균인 Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Serratia marcescem에 대하여 저해 활성을 나타낸다는 보고가 있으며(박 등, 2006), 천연 방부제로 화장료로도 사용되고 있어 이를 이용한 항균 제품들이 등장하고 있다.
녹차잎은 녹차(Green tea, Camellia teaceac)는 비타민과 무기질의 영양소를 공급하는 기능, 맛과 향 등의 기호를 충족시키는 기능이 있는 것으로 알려져 있다. 특히 카테킨류는 혈중의 LDL 콜레스테롤을 감소시킴으로서 혈전의 생성억제 및 동맥경화를 예방하고, 과산화지질의 생성을 억제하고 지방 산화를 방지하는 한편 항균작용으로도 알려져 있다.
인동초는 쌍떡잎식물 인동과의 반상록 덩굴식물로 꽃의 색이 흰색에서 노란색으로 변하기 때문에 '금은화(金銀花)’라고도 한다. 꽃을 포함하는 전초가 해열, 해독, 항균, 항바이러스 항진균, 항염증, 수렴, 이뇨작용을 하는 것으로 알려져 있다.
자몽씨(Citrus aurantium), 녹차잎(Camellia sinensis L.), 인동초(Lonicera japonica)와 에탄올을 1 : 5 ~ 10 중량비로 혼합한 후, 60 ~ 62℃의 온도 조건에서 2 ~ 3 시간 동안 환류냉각시킨 다음 10,000×g에서 20 ~ 40 분간 원심분리하고, 여과한 추출물을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축하고, 동결건조기(Freeze dryer)를 이용하여 2 ~ 4 일 동안 건조시킨 후, 균질기를 이용하여 30 ~ 50 mesh로 분쇄한 분말형태인 것을 사용하였다.
포도씨는 피부에 막을 형성하여 보습성을 유지함과 아울러 피부 트러블의 진정 효과도 발휘하는 것으로 알려져 있다.
포도씨 분말시료 300g에 10배의 MeOH를 가하여 Shaker로 6시간씩 3회 반복 추출한 뒤 추출액을 여과지(Watman No.2)로 여과하고 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축하고, 동결건조기(Freeze dryer)를 이용하여 2 ~ 4 일 동안 건조시킨 후, 균질기를 이용하여 30 ~ 50 mesh로 분쇄한 분말형태인 것을 사용하였다.
병풀은 미나리과에 속하는 다년생 식물로서, 해열, 치독 또는 근골연축, 백대하 등에 효과가 있다고 알려져 있었다. 병풀로부터 분리된 배당체인 아시아티코사이드 또는 그의 유도체는 피부궤양, 광범한 외상치료, 피부정맥, 노장성궤양, 미란성피부궤양, 한성원형탈모증 등에 효과가 있다고 알려져 있다.
황금은 꿀풀과에 속하는 다년생 초본식물인 속썩은 풀이라고도 한다. 황금의 주요 flavonoid 물질은 baicalein, baicalin, wogonin, wogonoside, neobaicalein 등으로 항균, 항암, 항간장독, 함염증 및 항히스타민 효과 등의 약리작용이 알려져 있다.
세절하여 음건한 병풀(Centella asiatica) 전초 및 황금(Scutellaria baicalensis Georgi)와 물을 1 : 5 ~ 10 중량비로 혼합한 후, 초음파 처리하여 실온에서 2 ~ 3 시간 동안 방치시킨 다음 10,000×g에서 20 ~ 40 분간 원심분리하고, 여과한 추출물을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축하고, 동결건조기(Freeze dryer)를 이용하여 2 ~ 4 일 동안 건조시킨 후, 균질기를 이용하여 30 ~ 50 mesh로 분쇄하여 병풀 및 황금 추출물을 제조하였다.
아마는 중앙아시아 원산 한해살이풀로 아마씨는 단백질과 식이섬유가 풍부하여 신진대사를 원활하게 하여 체중감량에 도움이 되며, 혈액순환을 개선하는 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 또한, 오메가-3의 함량이 높고 리그난 성분이 풍부하여 항염 및 항노화 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
아마씨(Linum usitatissimum) 200g에 메탄올(MeOH) 4000ml을 가하여 초음파 처리하여 5시간씩 3회 추출하고, 추출액을 여과지(Watman No.2)로 여과하고 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축하고, 동결건조기(Freeze dryer)를 이용하여 2 ~ 4 일 동안 건조시킨 후, 균질기를 이용하여 30 ~ 50 mesh로 분쇄한 분말형태인 것을 사용하였다.
24시간 전배양한 황색포도상구균 농도가 1.5 ~ 3.0 × 105 CFU/5mL이 되도록 0.6% agar 배양액에 희석한 뒤 plate count agar에 균일하게 도포하고 그 위에 상기 도라지 추출물(MtOH-E) 50 mg/ml : 상기 천연 추출물 50 mg/ml을 동량 혼합한 혼합물 각 200 μl을 흡수시킨 8mm paper disc를 포셉으로 올린 뒤 37℃에서 24시간 배양하였다. 그 후 clear zone을 측정하여 항균 효능을 확인하여 표 2에 나타내었다.
구분 | clear zone (mm) | 구분 | clear zone (mm) |
대조군(DMSO) | 0 | MtOH-E + 고삼 추출물 | 5 |
MtOH-E | 5 | MtOH-E + 자몽씨 추출물 | 8.5 |
MtOH-E + 감초 추출물 | 4 | MtOH-E + 녹차잎 추출물 | 6.5 |
MtOH-E + 감잎 추출물 | 3 | MtOH-E + 인동초 추출물 | 4 |
MtOH-E + 당귀 추출물 | 3 | MtOH-E + 포도씨 추출물 | 3 |
MtOH-E + 더덕 추출물 | 2 | MtOH-E + 병풀 추출물 | 3 |
MtOH-E + 결명자 추출물 | 3 | MtOH-E + 황금 추출물 | 2 |
MtOH-E + 메밀 추출물 | 4 | MtOH-E + 아마씨 추출물 | 3 |
상기 표 2에서 보듯이, 도라지 추출물과 자몽씨 추출물 또는 녹차잎 추출물을 혼합하였을 때 황색포도상구균에 대한 항균효과가 증가하였으며, 특히 자몽씨 추출물을 혼합하였을 때 항균효과가 현저히 증가하는 것을 확인하였다.
<
실시예
4. 도라지 추출물 및 자몽씨 추출물의 혼합비율 결정>
상기 실시예 3에서 확인한 도라지 추출물 및 자몽씨 추출물의 항균 최적 혼합비율을 확인하였다. 하기 표 3과 같이 도라지 추출물 및 자몽씨 추출물을 혼합하고 황색포도상구균 및 대장균에 대한 항균 효과를 상기 실시예 3과 동일한 방법으로 확인하고 그 결과를 표 3에 나타내었다.
구분 | 도라지 추출물 (50 mg/ml) |
자몽씨 추출물 (50 mg/ml) |
황색포도상구균 clear zone (mm) |
대장균 clear zone (mm) |
대조군(DMSO) 200 μl |
- | - | 0 | 0 |
0 : 1 | - | 200 μl | 4 | 4 |
1 : 2 | 67 μl | 133 μl | 4 | 4 |
1 : 3 | 50 μl | 150 μl | 5.5 | 5 |
1 : 1 | 100 μl | 100 μl | 8 | 7 |
2 : 1 | 133 μl | 67 μl | 8.5 | 7 |
3 : 1 | 150 μl | 50 μl | 7 | 6 |
1 : 0 | 200 μl | - | 6 | 4.5 |
<
실시예
5. 도라지 추출물 농도 결정>
실제 물티슈를 사용하는 경우, 다양한 제조시, 섬유조직은 물티슈용 조성물에 적셔지게 된다. 실제로 물티슈를 제작하는 경우, 도라지 추출물의 최적 농도를 결정하기 위하여 도라지 추출물 농도에 따른 황색포도상구균배지 및 대장균배지에서 항균 최적 농도를 결정하였다.
도라지추출물 1, 2, 5 %(w/v) 용액을 제조하고 레이온 10 × 10 mm disc를 상기 용액에 적셔 놓는다. 황색포도상구균 배지(Baird Parker Agar, BPA) 및 대장균 배지(Desoxycholate Lactose Agar, DCLA) 위를 손가락으로 고르게 문지른 다음, 도라지추출물 1, 2, 5 %(w/v) 용액이 흡수된 paper disc를 각 배지 위에 올리고 37℃에서 24시간 배양하였다. 그 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1에서 보는 바와 같이, 황색포도상구균 배지에서는 도라지 추출물 1~2%가, 대장균 배지에서는 도라지 추출물 2~5 %(w/v)가 항균성이 더 좋았다.
<
실시예
6. 물티슈의 항균성 확인>
상기 결과를 바탕으로 하기 표 4와 같이 도라지추출물 10 g, 자몽씨 추출물 5 g, desylglucoside이 포함된 100% 레이온 물티슈를 제작하였다. 도 2는 도라지 추출물 2 %(w/v), 자몽씨 추출물 1 %(w/v)을 포함하는 본 발명에 따른 물티슈의 제조 과정 및 제작된 물티슈를 보여주는 사진이다.
구 분 | |
도라지 추출물 | 10 g |
자몽씨 추출물 | 5 g |
5 %Desylglucoside | 4.5 ml |
Citric Acid | 2 ml |
정제수 | 500 ml 맞춤 |
레이온 원단 | 17×15 cm |
상기에서 제작된 물티슈의 사용시 항균성을 확인하기 위하여 상기 실시예 5와 동일한 방법을 사용하였다. 황색포도상구균 배지(Baird Parker Agar, BPA) 및 대장균 배지(Desoxycholate Lactose Agar, DCLA) 위를 손가락으로 고르게 문지른 다음, 상기에서 제작된 물티슈 disc를 각 배지 위에 올리고 37℃에서 24시간 배양하고, 그 결과를 도 3에 나타내었다
도 3에서 보는 바와 같이, 물티슈 disc 주변으로 일정하게 균이 배양되지 않는 것을 보여주어 본 발명에 따른 물티슈의 항균활성을 확인하였다.
Claims (6)
- 도라지 추출물 및 자몽씨 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 항균력이 강화된 물티슈.
- 제1항에 있어서,
상기 도라지 추출물은, 도라지의 에탄올 추출물인 것을 특징으로 하는 항균력이 강화된 물티슈. - 제1항에 있어서,
상기 도라지 추출물은, 도라지의 에탄올 추출물을 헥산(MtOH-H), 에틸아세테이트(MtOH-E), 클로로포름(MtOH-C) 및 n-부탄올(MtOH-B) 순으로, 순차적으로 분획한 후, 수득한 도라지 에탄올 추출물의 헥산 분획물인 것을 특징으로 하는 항균력이 강화된 물티슈. - 제1항에 있어서,
상기 도라지 추출물 및 자몽씨 추출물은 중량비 1~3 : 1로 혼합된 것을 특징으로 하는 항균력이 강화된 물티슈. - 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 도라지 추출물은 물티슈의 액체 조성물 중 1~5%(w/v) 포함된 것을 특징으로 하는 항균력이 강화된 물티슈. - 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 물티슈는 황색포도상구균 또는 대장균에 대하여 항균작용을 나타내는 것을 특징으로 하는 항균력이 강화된 물티슈.
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-
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