KR20230056513A - 딱지꽃, 서양민들레잎, 산수유열매, 수선화비늘줄기를 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 화장료 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 딱지꽃 추출물, 서양민들레잎 추출물, 산수유열매 추출물, 및 수선화비늘줄기 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는, 딱지꽃 추출물, 서양민들레잎 추출물, 산수유열매 추출물, 및 수선화비늘줄기 추출물을 유효성분으로 함유함으로써, 피부 보습, 피부 스트레스로부터의 보호, 피부 장벽 기능 강화개선, 자외선으로부터의 피부 보호, 블루라이트로부터의 피부 보호, 항염, 항산화, 항노화, 모공축소, 피지억제 등의 기능을 가진 화장료 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 딱지꽃, 서양민들레잎, 산수유열매, 및 수선화비늘줄기를 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 화장료 조성물; 및 상기 피부 개선용 화장료 조성물을 제조하는 방법에 관한 것이다.
피부는 무게를 기준으로 몸에서 가장 큰 기관이며 각질화된 바깥쪽 표피와 혈관이 풍부하게 발단된 내부 결합조직인 진피, 그리고 가장 안쪽의 피하조직의 3 층으로 되어 있으며, 피부와 연관된 여러 부속기구 (털, 손발톱, 감각수용기, 분비샘)와 함께 피부계 (integumentary system)를 이룬다. 피부는 몸 안의 여러 기관의 주요한 기능 수행을 위해 몸의 안과 밖의 경계를 이룬다.
피부는 항상성 (homeostasis) 유지에 필수적이며 보호기능 외에도 체온조절, 수분손실 억제, 감각수용기 함유, 다양한 생화학물질 합성 및 소량의 노폐물 배출 등 다양한 기능을 수행하는 중요한 기관이다.
그러나 다른 기관과 비교하여 피부는 외부로부터의 자극이나 여러 병원체와 직접 접촉하는 기회가 많으며, 특히 피부에 자외선이 흡수될 경우 광화학 반응을 일으킴으로써 피부 병변을 야기하게 된다. 뿐만 아니라 정신적인 스트레스, 비만, 술, 담배 등 현대사회에서 일반적으로 발생하는 요소들에 의한 피부질환 환자가 급격히 늘고 있는 추세이다.
이에 따라 피부 손상을 억제하고 피부세포를 보호하기 위한 다양한 피부 보호제에 대한 개발이 활발히 이루어지고 있으나, 개발된 피부 보호제는 주로 합성 화합물을 유효성분으로 하고 있어, 피부에 손상을 유발시키거나 가려움 및 반점 등 부작용이 발생한다는 단점이 있다.
이러한 배경 하에서, 본 발명자들은 다양한 피부 상태의 개선에 유용한 천연 화장료 소재를 개발하기 위해 예의 연구 노력한 결과, 딱지꽃, 서양민들레잎, 산수유열매, 및 수선화비늘줄기를 포함하는 조성물이 다양한 피부 상태의 개선 효과를 나타냄을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 전술한 문제 및 이와 연관된 다른 문제를 해결하는 것을 목적으로 한다.
본 발명자들은, 피부 보습, 피부 노화 방지, 항염, 피부 장벽 기능 강화, 피부 진정, 자외선 또는 청색광으로부터의 피부 보호, 모공 축소, 항산화, 항피부스트레스, 상처 치유, 피부재생, 여드름 또는 피지 개선, 모공축소 등 다양한 기능성을 가진 소재를 발굴하고자 예의 노력한 결과, 딱지꽃, 서양민들레잎, 산수유열매, 및 수선화비늘줄기를 함유하는 조성물이 이러한 다양한 피부 개선 효과가 있어, 다양한 기능성 화장료 소재가 될 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 딱지꽃 추출물, 서양민들레잎 추출물, 산수유열매 추출물, 및 수선화비늘줄기 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물을 제공하는데 있다.
본 발명의 다른 목적은, 상기 딱지꽃 추출물, 서양민들레잎 추출물, 산수유열매 추출물, 및 수선화비늘줄기 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물의 제조방법을 제공하는데 있다.
본 명세서에 개시된 발명의 기술적 사상에 따라 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 문제점을 해결하기 위한 과제로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제는 아래의 기재로부터 통상의 기술자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 출원에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 출원에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 출원의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 출원의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
이하, 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다.
상기 목적을 달성하기 위한 일 양태로서, 본 발명은 딱지꽃 추출물, 서양민들레잎 추출물, 산수유열매 추출물, 및 수선화비늘줄기 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다. 구체적으로는, 상기 추출물은 그 함량에 제한없으나, 조성물의 총 중량에 대하여 0.1 내지 10 중량%로 함유할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 딱지꽃 추출물, 서양민들레잎 추출물, 산수유열매 추출물, 및 수선화비늘줄기 추출물은 각각 30~50 중량부, 10~20 중량부, 10~20중량부, 및 1~5중량부 일 수 있다.
본 발명에 있어서, 유효성분이 되는 각각의 추출물의 식물에 대한 설명은 다음과 같다.
(1) 딱지꽃
딱지꽃은 학명은 Potentilla Chinensis이며, 장미과(Rosaceae)의 일종이다. 직사광선이 내리쬐는 아주 건조한 하천 상류의 계류구간이나 해변의 자갈모래땅 바닥에 붙어사는 하원초본식생을 특징짓는 종이다. 드물게 주 서식지 주변의 인공 제방이나 길바닥에서도 관찰되는 식물이다. 잎 뒷면에 백색 솜털이 빼곡히 나 있어 복사열로 인한 극단적 건조를 이겨낸다.
(2) 서양민들레잎
서양민들레 학명은 Taraxacum officinale이며, 초롱꽃목에 속한다. 유럽 원산지인 귀화식물로 흔히 길가에서 볼 수 있다.
(3) 산수유열매
산수유 학명은 Cornus officinalis로, 산형목에 속한다. 층층나무과의 낙엽교목인 산수유나무의 열매를 칭한다. 타원형의 핵과로 처음에는 녹색이었다가 8-10월에 붉게 익는다. 종자는 긴 타원형이다.
(4) 수선화
수선화는 백합목 수선화과 여러해살이 풀이다. 학명은 Narcissus Tazetta 이고, 수선화의 뿌리는 겹쳐진 비늘줄기이며, 난상 구형이다. 수선화비늘 줄기추출물의 영문명칭은 Narcissus Tazetta Bulb Extract 이다.
본 발명에 있어서, "피부 개선"이란 본 발명의 딱지꽃 추출물, 서양 민들레잎 추출물, 산수유열매 추출물, 및 수선화비늘줄기 추출물을 사용하여 피부가 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 상기 피부 개선은 일 예시로, 피부 보습, 피부 장벽 개선, 피부 노화 방지, 피부 재생 또는 상처치유 개선, 피부 면역개선 및 방어력 증진, 피부 염증완화 또는 개선, 피부 진정, 자외선 또는 청색광으로부터의 피부 보호, 항산화, 피부 스트레스로부터의 피부 보호, 피부 세포 에너지 증진, 피부 모공 축소, 피지억제, 또는 여드름 개선을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 용어 "피부 보습"은 피부에 수분감을 증가시켜주고 촉촉한 상태를 유지시키는 것을 의미한다. 피부 보습 효과를 높일 경우 피부의 주름 개선, 탄력도 증가에도 이로운 영향을 미칠 수 있다.
본 발명의 용어 "피부 장벽 개선, 강화"는 각질세포로 이루어진 피부 장벽에서 각질형성세포의 분화를 촉진하여 표피층의 두께를 두껍게 개선시키는 것을 말한다.
본 발명의 용어 "피부 노화"는 내인성/외인성 노화를 모두 포함하는 개념이다. 이러한 피부 노화는 주름 개선, 주름 예방, 탄력 개선 등은 각종 피부노화로부터 발생하는 현상에 대한 개선, 예방, 방지를 또한 포함한다.
본 발명의 용어 "자외선 또는 청색광으로부터의 피부 보호"은 피부가 자외선에 노출됨에 따라 발생하는 손상 또는 증상, 예를 들어 자외선에 의한 주름 생성, 피부 탄력 저하, 광노화 또는 피부 각화에 대한 방지 또는 개선을 의미하며, 청색광은 흔히 블루라이트라고 칭하는 것으로, 생활속 전자기기에서 많이 발생하며 눈으로 지각할 수 있는 가시광선의 일종으로 380 ~ 550nm 영역의 단파장을 말하고, 눈의 피로를 증가시키며 피부를 칙칙하게 만들고, 피부 노화를 유도할 수 있는 것으로 알려져 있는데, 이러한 청색광 자극으로부터의 피부 보호를 의미한다.
본 발명의 용어 "모공 축소"는 피부 표면에 존재하는 털이 자라나는 구멍의 크기를 감소시키는 것을 의미한다. 모공이 커지면 노폐물과 세균이 신체 안으로 쉽게 침투하여 세균감염 및 여드름 생성이 쉽게 일어날 수 있으므로, 모공을 축소함으로써 깨끗한 피부 상태의 유지 및 세균 감염으로부터 보호 효과를 얻을 수 있다.
본 발명의 용어 "피지 억제"는 피부에서 스며나오는 기름의 분비량을 감소시키는 것을 말한다. 피지가 지나치게 분비될 경우 피부 표면에 염증 및 여드름이 발생하므로, 피지 분비를 억제함으로써 피부의 건강 상태를 향상시키고 산뜻한 피부 상태를 유지할 수 있다.
본 발명의 용어 "여드름 억제 또는 개선"은 피지 분비 과다와 모공 폐쇄로 인해 발생하는 여드름의 발생을 감소시키거나, 발생한 여드름이 가라앉는 것을 의미한다.
본 발명의 용어 "피부 세포 손상 보호"란 피부 세포가 손상될 수 있는 원인을 차단함으로써 세포 손상으로부터 보호하는 것을 의미하며, 예를 들어 피부 세포를 손상시키는 원인 중 하나인 스트레스에 대한 내성이 증가하는 유전자의 발현이 증가하는 것을 들 수 있으나, 이로 제한되지 않는다. 예컨대, 각종 환경 스트레스로부터 피부 노화를 억제하거나, 피부를 보호하는 것을 의미하며, 이러한 환경 스트레스로는 자외선, 공해, 바람, 또는 온도 등을 포함할 수 있다. 본 발명에서는, 스트레스에 대한 세포 손상을 보호하는 것으로 알려진 LEA(Late embryogenesis abundant)의 발현 변화를 통해 LEA 발현양 증가시킴으로 확인할 수 있다.
본 발명의 용어 "유효성분으로 포함하는"의 의미는, 피부 화장료 조성물로써 상기와 같은 다양한 피부 개선 효과를 나타낼 수 있는 정도의 유효량을 포함하는 것을 말한다.
구체적으로, 본 발명의 실험예에서는 딱지꽃 추출물, 서양민들레잎 추출물, 산수유열매 추출물, 및 수선화비늘줄기 추출물의 다양한 피부 개선 효과를 확인하였는데, 구체적으로, 수분/글리세롤 수송체인 AQP3 (Aquaporin 3)와 자연보습인자로 알려진 FLG(Filaggrin), CLDN6(Claudin 6), IVL(Involucrin)의 발현양 증가를 확인하고, 항노화 관련 유전자인 TERT (Telomerase Reverse Transcriptase) 유전자의 발현량이 증가하는 것을 확인하였다. 또한 피부 면역과 방어력 증진을 확인하기 위해, LL37 및 hBD-2 발현 증가함을 확인하였고, LC-3 발현 증가를 통해 자가포식 활성화함을 확인하였다. COX-2 유전자 발현 및 iNOS 유전자 발현 감소를 통해 염증 억제에 효과가 있음을 알 수 있으며, 피험자를 대상으로 한 피부 진정 효과 확인에서도 우수한 피부 진정능을 가짐을 알 수 있었다. 자외선, 및 청색광 조사에서도 피부 세포들로부터 본 조성물이 우수한 피부 보호 효과를 가짐을 확인할 수 있었다. 또한 우수한 항산화 효과를 가지며, 발현 정도가 높을수록 스트레스에 대한 내성이 증가하는 LEA 단백질의 발현량 증가에 의해 세포손상보호 효과를 확인하였으며, 상처치유 효과 및 헤모글로빈의 침전에 의한 모공 축소 효과, 피지 억제 효과 및 ATP 농도 증가에 따른 세포 에너지 증진 효과를 확인하였다. 또한, 딱지꽃 추출물, 서양민들레잎 추출물, 산수유열매 추출물, 및 수선화비늘줄기 추출물을 함유한 화장수를 바른 피시험자에게서 여드름 개선 효과가 나타남을 확인하였다. 이러한 시험예를 바탕으로 본 발명의 화장료 조성물은 피부 보습, 피부 장벽 강화, 항스트레스에 의한 세포 손상 보호, 피부면역개선, 방어력 증진, 창상치유에 의한 항노화, 상처 치유, 흉터개선, 모공 축소, 피지 억제, 세포 에너지 증진 및 여드름 억제 등 우수한 효과가 있어 피부 개선 용도로 유용하게 사용될 수 있음을 확인하였다.
본 발명은 다른 일 양태로서, (a) 딱지꽃 추출물, 서양민들레잎 추출물, 산수유열매 추출물, 및 수선화비늘줄기 추출물을 준비하는 단계; 및 (b) 상기 (a)단계에서 얻어진 추출물을 함유하는 조성물을 제조하는 단계를 포함하는 피부개선용 화장료 조성물의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명은 다른 일 양태로서, (a) 딱지꽃, 서양민들레잎, 산수유열매, 및 수선화비늘줄기를 준비하여 추출물을 얻는 단계; 및 (b) 상기 (a)단계에서 얻어진 추출물을 함유하는 조성물을 제조하는 단계를 포함하는 피부개선용 화장료 조성물의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명에 있어서, "추출물"은 냉수추출법, 열수추출법, 에탄올 추출법 등 종래 알려진 다양한 추출법에 의해 수득한 추출물을 의미한다.
본 발명에서 추출 방법은 특별히 제한되지 않고, 예를 들어 냉침 추출, 초음파 추출, 환류 추출, 열수 추출 등이 있다. 여기서, 열수추출의 경우, 열탕증류기에서 8~48시간동안, 80~100℃ 로 가열하여 열수 추출물을 얻는다.
또는, 물, 유기 용매, 또는 이의 혼합 용매를 사용하여 추출하는 방법으로 제조될 수 있다. 추출한 액은 바로 사용하거나 또는 농축 및/또는 건조하여 사용할 수 있다. 유기용매를 사용하여 추출하는 경우, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 부탄올, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, N, N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합용매인 유기용매를 사용하며 생약의 유효 성분이 파괴되지 않거나 최소화된 조건에서 실온 또는 가온하여 추출할 수 있다. 추출하는 유기용매에 따라 약제의 유효성분의 추출정도와 손실정도가 차이가 날 수 있으므로, 알맞은 유기용매를 선택하여 사용하도록 한다.
본 발명에 있어서, 상기 추출물은 농축, 또는 희석하여 사용할 수 있고, 추출물의 증류액을 사용할 수도 있다.
본 발명에 있어서, 상기 화장료 조성물은 화장품 제제에 있어서 수용가능한 담체를 포함할 수 있다. 여기서, "화장품 제제에 있어서 수용가능한 담체"란 화장품 제제에 포함될 수 있는 이미 공지되어 사용되고 있는 화합물 또는 조성물이거나 앞으로 개발될 화합물 또는 조성물로서 피부와의 접촉시 인체가 적응 가능한 이상의 독성, 불안정성 또는 자극성이 없는 것을 말한다. 상기 담체는 본 발명의 화장료 조성물에 그것의 전체 중량에 대하여 약 1 중량 % 내지 약 99.99 중량 %, 바람직하게는 조성물의 중량의 약 90 중량% 내지 약 99.99 중량 %로 포함될 수 있다. 그러나 상기 비율은 본 발 명의 화장료 조성물이 제조되는 제형에 따라 또 그것의 구체적인 적용 부위 (얼굴, 목 등)나 그것의 바람직한 적용량 등에 따라 달라지는 것이기 때문에, 상기 비율은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 안 된다.
상기 담체로서는 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선산란제, 자외선흡수제, 발색제, 향료 등이 예시될 수 있다. 상기 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선산란제, 자외선흡수제, 발색제, 향료로 사용될 수 있는 화합물 또는 조성물 등은 이미 당업계에 공지되어 있기 때문에 당업자라면 적절한 해당 물질 또는 조성물을 선택하여 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 다양한 형태로 제조될 수 있는데, 예컨대, 화장수, 에센스, 젤, 에멀젼, 로션, 크림 (수중유적형, 유중수적형, 다중상), 용액, 현탁액 (무수 및 수계), 무수 생성물 (오일 및 글리콜계), 젤, 마스크, 팩, 분말, 또는 젤라틴 등의 피막이 있는 캅셀 (소프트 캅셀, 하드 캅셀) 제형 등의 형태로 제조될 수 있다.
또한, 적합한 화장품의 제형으로는, 예를 들면 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형 (리포좀), 비이온형의 소낭 분산제의 형태, 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 포말 (foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산 화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또 는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 그리고, 상기의 성분들은 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.
본 발명에 있어서의 피부는 얼굴 뿐만 아니라, 두피, 전신도 포함되는 개념으로, 이러한 두피에 적용될 수 있는 화장료 조성물로써, 샴푸, 린스, 트리트먼트, 발모제 등이 있고, 전신에 적용될 수 있는 바디클렌져 등의 용도로써 다양한 형태로 제조될 수 있다.
따라서, 본 발명에 따른 화장료 조성물은 다양한 피부 상태 개선을 위한 기능성 화장품의 형태를 포함하는데, 예를 들어, 피부 보습, 피부 면역력 증진, 피부 장벽기능 강화/개선, 청색광 또는 자외선에 의한 세포 보호, 항노화, 항스트레스에 의한 세포 손상 보호, 피부 진정, 피부 재생, 창상치유, 항염, 모공 축소, 피지 억제, 세포 에너지 증진 및 여드름 억제 등의 효능을 가진 기능성 화장품의 형태를 포함한다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은, 딱지꽃 추출물, 서양민들레잎 추출물, 산수유열매 추출물, 및 수선화비늘줄기 추출물을 유효성분으로 함유함으로써, 피부 보습, 피부 스트레스로부터의 보호, 피부 장벽 기능 강화개선, 자외선으로부터의 피부 보호, 블루라이트로부터의 피부 보호, 항염, 항산화, 항노화, 모공축소, 피지억제 등의 기능을 가겨, 다양한 기능성 화장품의 소재로 활용될 수 있다.
다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 일반적으로, 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.
실시예 1: 본 발명에 따른 조성물 제조
경상남도 진주에서 재배한 건조된 딱지꽃 500 g, 서양민들레잎 200 g, 산수유열매 200 g 및 수선화비늘줄기 50 g 을 정제수로 여러 차례 수세한 후, 20L의 정제수를 이용하여 6~8시간, 65~90℃로 감압 추출하여 추출물을 얻었다.
실험예 1: 피부세포 배양을 통한 무자극 효과 확인 시험
본 발명의 조성물이 피부 세포에서 독성을 일으켜 피부자극이 유발되는지 알아보기 위해, MTT assay를 진행하였다. 이를 위하여 HaCaT 세포(keratinocyte, 각질형성세포), Detroit 세포(fibroblast, 섬유아세포)를 각각 10 % FBS(Fetal Bovine Serum), 1 % Antibiotic-Antimycotic이 함유된 DMEM(Dubelcco's Modified Eagle's Medium)과 함께 96-well plate에 분주하고, 5 % CO2, 37 ℃의 조건인 항온기에서 24시간 배양하였다. 이후 정제수를 첨가한 대조군과 시험물질인 조성물을 세포에 처리하고, 24시간 동안 추가 배양하였다. 이어 5 mg/mL MTT(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) 용액을 각 well에 4 μL씩 첨가하고, 4시간 동안 배양하여 반응시켰다. 배양액을 제거한 다음 DMSO(Dimethyl sulfoxide) 용액 100 μL씩 첨가하여 세포를 용해시킨 후, 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
< HaCaT 세포에서의 본 발명의 조성물 처리 농도 별 세포 생존률 측정 결과 >
< Detroit 세포에서의 본 발명의 조성물 처리 농도 별 세포 생존률 측정 결과 >
그 결과, 본 발명의 조성물 0.1 ~ 5 % 처리 농도에서 keratinocyte(HaCaT)와 fibroblast(Detroit) 세포 내 독성을 보이지 않을 뿐만 아니고 세포생존율이 증가함을 확인함으로서 자극이 없어 피부 자극 유발 가능성이 낮은 안전한 물질임을 확인하였다.
실험예 2: 보습 및 피부장벽 개선 확인 시험
본 발명에 따른 조성물의 보습과 피부장벽 개선의 효능을 알아보고자, 수분/glycerol 수송체인 AQP3(Aquaporin 3), 자연보습인자로 알려진 FLG(Filaggrin) 및 CLDN6(Claudin 6), IVL(Involucrin)의 발현양 변화를 알아보았다. 이를 위하여 HaCaT 세포를 96-well plate에 분주한 후, 세포 배양 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 정제수를 첨가한 대조군과 시험물질인 조성물을 세포에 처리하고, 24시간 동안 추가 배양하였다. AQP3, FLG의 발현을 유전자 수준에서 확인하기 위해 Real-time PCR 법을 수행하였으며, 그 시험 순서는 다음과 같다. RNA isolation과 cDNA 합성을 위해 SuperPrep™ cell lysis & RT Kit for qPCR (TOYOBO 社, Cat. SCQ-101)을 사용하였다. 배지를 제거한 세포를 PBS로 한 번 세척하고, 50 μL cell lysis mixture 를 넣고 5분간 반응시킨 후, 10 μL stop solution을 첨가하였다. RT reaction mixture 32 μL에 앞서 추출한 lysate 8 μL를 첨가하고 PCR을 이용하여 37 ℃ 15분, 50 ℃ 5분, 95 ℃ 5분 조건에서 cDNA를 합성하였다. 유전자의 발현을 비교분석하기 위하여 상기에서 합성한 cDNA를 template로 하고, Thunderbird™ SYBR qPCR Mix (TOYOBO 社, Cat. QPS-201)를 이용하여 Real-time PCR 분석을 진행하였다. 실험에 사용한 primer는 Qiagen 社의 QuantiTect primer assays (AQP3; Cat. QT00212996, FLG; Cat. QT02448138, CLDN6; Cat. QT01679195, IVL; Cat. QT00082586)이며 시료의 AQP3, FLG, CLDN6, IVL mRNA 발현량은 GADPH(Cat. QT01192646)로 정량하였다. Real-time qPCR 조건은 먼저 95 ℃ 1분 반응 시킨 후에, 1 사이클 당 94 ℃ 15초, 60 ℃ 30초, 72 ℃ 30초로 하여 총 40 사이클로 진행하였다.
그 결과, 본 발명의 조성물 1% 처리에 의하여, 대조군 대비 피부 보습인자로 알려진 AQP3 발현이 30% 증가하였고, 피부장벽강화와 관련된 인자인 FLG의 경우 20% 증가, CLDN6의 경우 30% 증가, IVL의 경우 30% 증가를 확인하여 보습과 피부장벽 강화에 기여하는 조성물임을 확인하였다.
실험예 3: TERT 발현 증가에 따른 노화 방지 효과 확인 시험
본 발명에 따른 조성물의 노화 방지 효능을 살펴보기 위하여, DNA 가닥 끝의 텔로미어의 길이를 연장하는 효소로 알려진 TERT(Telomerase reverse transcriptase)의 발현양 변화를 알아보았다. DNA 가닥 끝의 텔로미어의 길이를 연장하는 효소로 알려진 TERT(Telomerase reverse transcriptase)의 발현양 변화를 알아보았다.
HaCaT 세포를 96-well plate에 분주한 후, 세포 배양 조건에서 24시간 배양하였다. 이 후 대조군과 시험물질인 조성물을 세포에 처리하고, 24시간 동안 추가 배양하였다. TERT의 유전자 수준에서 확인하기 위해 Real-time PCR 법을 수행하였으며, 그 시험 순서는 다음과 같다.
RNA isolation과 cDNA합성을 위해 SuperPrep™celllysis&RTKitforqPCR(TOYOBO,Cat.SCQ-101)을 사용하였다. 배지를 제거한 세포를 PBS로 한 번 세척하고, 50 μL cell lysis mixture 를 넣고 5분간 반응시킨 후, stop solution을 첨가하였다. RT reaction mixture 32 μL에 앞서 추출한 lysate 8 μL를 첨가하고 PCR을 이용하여 37 ℃ 15분, 50 ℃ 5분, 95 ℃ 5분 조건에서 cDNA를 합성하였다. 유전자의 발현을 비교분석하기 위하여 상기에서 합성한 cDNA를 template로 하고, Thunderbird™SYBRqPCRMix(TOYOBO,Cat.QPS-201)를 이용하여 Real-time PCR 분석을 진행하였다. 실험에 사용한 primer는 Qiagen사의 QuantiTect primer assays (GAPDH; Cat. QT01192646, TERT; Cat. QT00073409)이며 시료의 TERT mRNA 발현량은 GADPH로 정량하였다. Real-time qPCR 조건은 먼저 95 ℃ 1분 반응 후, 1 사이클 당 94 ℃ 15초, 60 ℃ 30초, 72 ℃ 30초로 하여 총 40 사이클로 진행하였다.
그 결과, 본 발명의 조성물은 대조군과 비교하여 TERT의 mRNA 발현양이 증가하여 노화 방지에 효과가 있는 것으로 확인하였다.
실험예 4: 피부 면역 개선 및 방어력 증진 확인 시험
본 발명의 조성물이 항균 효능을 가진 펩타이드 LL37(CAMP, Cathelicidin-related antimicrobial peptides) 및 hBD-2(human β-Defensin-2)의 활성을 통해 피부 면역과 방어력을 증진시키는 지 확인하였다. 이를 위하여 HaCaT 세포를 96-well plate에 분주한 후, 세포 배양 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 정제수를 첨가한 대조군과 시험 물질인 조성물을 세포에 처리하고, 24시간 동안 추가 배양하였다. LL37과 hBD-2의 유전자 수준에서 확인하기 위해 Real-time PCR 법을 수행하였으며, 그 시험 순서는 다음과 같다. RNA isolation과 cDNA 합성을 위해 SuperPrep™ cell lysis & RT Kit for qPCR (TOYOBO 社, Cat. SCQ-101)을 사용하였다. 배지를 제거한 세포를 PBS로 한 번 세척하고, 50 μL cell lysis mixture 를 넣고 5분간 반응시킨 후, 10 μL stop solution을 첨가하였다. RT reaction mixture 32 μL에 앞서 추출한 lysate 8 μL를 첨가하고 PCR을 이용하여 37 ℃ 15분, 50 ℃ 5분, 95 ℃ 5분 조건에서 cDNA를 합성하였다. 유전자의 발현을 비교분석하기 위하여 상기에서 합성한 cDNA를 template로 하고, Thunderbird™ SYBR qPCR Mix (TOYOBO 社, Cat. QPS-201)를 이용하여 Real-time PCR 분석을 진행하였다. 실험에 사용한 primer는 Qiagen 社의 QuantiTect primer assays (LL37; Cat. QT00010458, hBD-2; Cat. QT00204617)이며 시료의 LL37, hBD-2 mRNA 발현량은 GADPH (Cat. QT01192646)로 정량하였다. Real-time qPCR 조건은 먼저 95 ℃ 1분 반응 시킨 후에, 1 사이클 당 94 ℃ 15초, 60 ℃ 30초, 72 ℃ 30초로 하여 총 40 사이클로 진행하였다.
그 결과, 본 발명의 조성물은 대조군과 비교하여 LL37과 hBD-2의 발현을 증가시켜 피부 면역과 방어력 증진에 기여하는 것을 확인하였다.
실험예 5: 자가 포식 활성 발현 확인 시험
본 발명의 조성물의 세포 내 조절과정에서 불필요하거나 기능하지 않는 자신의 소기관이나 세포 구성성분을 자연적으로 분해하는 자가 포식 활성 효능을 알아보고자, 오토파지 형성에 관여하는 LC-3(Microtubule-associated protein 1A/1B-light chain 3)의 발현양 변화를 조사하였다. 이를 위하여 HaCaT 세포를 96-well plate에 분주한 후, 세포 배양 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 정제수를 첨가한 대조군과 시험 물질인 조성물을 세포에 처리하고, 24시간 동안 추가 배양하였다. LC-3의 유전자 수준에서 확인하기 위해 Real-time PCR 법을 수행하였으며, 그 시험 순서는 다음과 같다. RNA isolation과 cDNA 합성을 위해 SuperPrep™ cell lysis & RT Kit for qPCR (TOYOBO 社, Cat. SCQ-101)을 사용하였다. 배지를 제거한 세포를 PBS로 한 번 세척하고, 50 μL cell lysis mixture 를 넣고 5분간 반응시킨 후, 10 μL stop solution을 첨가하였다. RT reaction mixture 32 μL에 앞서 추출한 lysate 8 μL를 첨가하고 PCR을 이용하여 37 ℃ 15분, 50 ℃ 5분, 95 ℃ 5분 조건에서 cDNA를 합성하였다. 유전자의 발현을 비교분석하기 위하여 상기에서 합성한 cDNA를 template로 하고, Thunderbird™ SYBR qPCR Mix (TOYOBO 社, Cat. QPS-201)를 이용하여 Real-time PCR 분석을 진행하였다. 실험에 사용한 primer는 Qiagen 社의 QuantiTect primer assays (LC-3; Cat. QT00055069)이며 시료의 LC-3 mRNA 발현량은 GADPH (Cat. QT01192646)로 정량하였다. Real-time qPCR 조건은 먼저 95 ℃ 1분 반응 시킨 후에, 1 사이클 당 94 ℃ 15초, 60 ℃ 30초, 72 ℃ 30초로 하여 총 40 사이클로 진행하였다.
그 결과, 본 발명의 조성물은 대조군과 비교하여 LC-3 발현을 증가시켜 자가 포식 활성화에 기여하는 것을 확인하였다.
실험예 6: 염증 억제 효과 확인 시험
본 발명의 조성물이 피부 염증 억제 효능이 있는지 알아보고자, 염증 반응에 관여하는 COX-2(Cyclooxygenase-2), iNOS(Inducible nitric oxide synthase)의 발현양 변화를 조사하였다. 이를 위하여 HaCaT 세포를 96-well plate에 분주한 후, 세포 배양 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 UVB 조사를 통해 염증 반응을 유도하고, 정제수를 첨가한 대조군과 시험 물질인 조성물을 세포에 처리하여 4시간 동안 추가 배양하였다. COX-2, iNOS의 유전자 수준에서 확인하기 위해 Real-time PCR 법을 수행하였으며, 그 시험 순서는 다음과 같다. RNA isolation과 cDNA 합성을 위해 SuperPrep™ cell lysis & RT Kit for qPCR (TOYOBO 社, Cat. SCQ-101)을 사용하였다. 배지를 제거한 세포를 PBS로 한 번 세척하고, 50 μL cell lysis mixture 를 넣고 5분간 반응시킨 후, 10 μL stop solution을 첨가하였다. RT reaction mixture 32 μL에 앞서 추출한 lysate 8 μL를 첨가하고 PCR을 이용하여 37 ℃ 15분, 50 ℃ 5분, 95 ℃ 5분 조건에서 cDNA를 합성하였다. 유전자의 발현을 비교분석하기 위하여 상기에서 합성한 cDNA를 template로 하고, Thunderbird™ SYBR qPCR Mix (TOYOBO 社, Cat. QPS-201)를 이용하여 Real-time PCR 분석을 진행하였다. 실험에 사용한 primer는 Qiagen 社의 QuantiTect primer assays (COX-2; Cat. QT00040586, iNOS; Cat. QT01323189)이며 시료의 COX-2, iNOS mRNA 발현량은 GADPH (Cat. QT01192646)로 정량하였다. Real-time qPCR 조건은 먼저 95 ℃ 1분 반응 시킨 후에, 1 사이클 당 94 ℃ 15초, 60 ℃ 30초, 72 ℃ 30초로 하여 총 40 사이클로 진행하였다.
그 결과, 본 발명의 조성물은 대조군과 비교하여 COX-2와 iNOS의 발현을 감소시켜 염증 반응의 완화 효과를 확인하였다.
실험예 7: 피부 진정 효과 확인 시험
본 발명에 의한 조성물을 적용한 에센스 제형의 피부 온도 감소율에 따른 피부 진정 효과를 알아보기 위하여, 피험자 25명의 전완부에 정사각형(2cm X 2cm)을 구획하고 제품을 각각 50 μL 양으로 도포한 뒤, 시험 전 20분간 직사광선에 노출시켰다. 측정은 컴퓨터 적외선체열감지기(Digital Infrared Thermographic Imaging; DITI)를 이용하여 0분(시료 도포 전), 5분(시료 도포 후), 10분(시료 도포 후) 간격으로 체열을 측정하고, 온도 감소율을 계산하였다.
그 결과, 본 발명의 조성물에 의하여 열 감소율이 지속적으로 유지되어 피부 진정 효과가 있음을 확인하였다.
실험예 8: 자외선 자극으로부터 피부세포 보호 효과 확인 시험
본 발명의 조성물이 자외선 자극으로부터 피부세포 보호 효과를 살펴보기 위해, 세포생존율의 변화를 알아보았다. 이를 위하여 HaCaT 세포를 96-well plate에 분주한 후, 세포 배양 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 UVB를 조사하고, 정제수를 첨가한 대조군과 시험물질인 조성물을 세포에 처리하여 24시간 동안 추가 배양하였다. UV 조사에 사용할 광원으로는 302 nm 파장의 자외선을 방출하는 ultraviolet crosslinker (Ultra-Violet Products 社, Cat No. CL-1000)을 사용하였다. 이어 자외선 유도에 의한 피부세포의 손상을 보호하는지 확인하고자 MTT assay를 이용하여 세포 생존율을 측정하였다.
그 결과, 본 발명의 조성물에 의하여, 자외선이 조사된 대조군과 비교하여 세포생존율이 증가하여 자외선조사에 의한 세포 보호 효과를 확인하였다.
실험예 9: Blue Light(청색광)에 의한 피부세포 보호 효과 시험
본 발명의 조성물이 사람이 볼 수 있는 가시광선 중 가장 파장이 짧고 강한 에너지를 갖고 있는 Blue Light의 조사로부터 피부세포를 보호하는지 알아보고자, 460 nm 파장을 방출하는 Topview 5450 SMD LED (ITSWELL 社, Cat No. IWS-L5056-VRI-K3)를 사용하여 세포생존율을 측정하였다. 이를 위하여 HaCaT 세포를 96 well plate에 분주한 후, 세포 배양 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 460 nm 파장을 10 mJ/cm2 로 조사하고, 정제수를 첨가한 대조군과 시험 물질인 조성물을 세포에 처리하여 24시간 동안 추가 배양하였다. 이어 Blue Light 유도 후의 피부세포의 생존률을 측정하기 위해 MTT assay를 진행하였다.
그 결과, 본 발명에서와 같이, 본 발명에 의한 조성은 가시광선 영역대인 Blue Light 영역대의 빛을 특이적으로 반사시켜 차단하는 것이 가능하여 피부를 보호할 수 있음을 확인하였다.
실험예 10: H
2
O
2
산화 독성으로부터 항산화 효과 확인 시험
본 발명에 따른 조성물의 H2O2산화 독성으로부터 항산화효과를 살펴보기 위하여, H2O2에 의한 세포생존률의 변화를 알아보았다.
이를 위하여 HaCaT 세포를 48-well plate에 분주한 후, 세포 배양 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 1 mM H2O2를 조사하고, 대조군과 시험물질인 조성물을 세포에 처리하여 12~16시간 동안 추가 배양하였다. 이후 H2O2산화 독성 유도에 의한 피부세포의 손상을 보호하는지 확인하고자 MTT assay를 이용하여 세포 생존율을 측정하였다.
그 결과, 본 발명의 조성물을 처리한 세포에서 양성대조군(H2O2 처리) 대비 H2O2처리에 의한 세포 사멸이 저해되어 H2O2 산화 독성으로부터 항산화 효과가 있는 것으로 확인하였다.
실험예 11: 항스트레스 단백질 활성화 효과 확인 시험
본 발명의 조성물이 세포 내 스트레스에 의한 방어 효능이 있는지 알아보고자 LEA(Late embryogenesis abundant) 단백질의 활성 정도를 조사하였다. LEA는 발현 정도가 높을수록 스트레스에 대한 내성이 증가하여 세포 손상으로부터 보호하는 것으로 알려졌다. 이를 위하여 HaCaT 세포를 6-well plate에 분주한 후, 세포 배양 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 정제수를 첨가한 대조군과 시험 물질인 조성물을 세포에 처리하고, 이후 24시간 동안 세포를 추가 배양하고, LEA 단백질 발현양을 측정하기 위해 In-Cell ELISA Colorimetric Detection kit(Invitrogen 社, Cat No. 62200)를 사용하였다. 배양이 끝난 세포의 배지를 제거하고, 100 μL fixing solution으로 15분간 상온에서 배양하여 세포를 고정시켰다. 이후 PBS로 세척하고, 100 μL의 Permeabilization solution을 넣고 15분간 상온에서 반응 시켰다. 이후 PBS로 세척하고, 100 μL Quenching solution을 넣고 20분간 상온에서 반응 시켰다. 이후 PBS로 세척하고, 100 μL Blocking solution을 넣고 30분간 상온에서 반응 시켰다. 용액을 제거하고 LEA 1차 항체 50 μL를 첨가하여 4℃에서 24시간 반응시켰다. 항체 제거 후 PBS로 세척하고, HRP conjugated 2차 항체 50 μL를 첨가하여 1시간 동안 반응시켰다. 이후 항체 제거하여 PBS로 세척을 한 뒤, 100 μL의 TMB substrate solution을 첨가하고 차광한 상태에서 15분간 실온에서 반응시켰다. 이후 100 μL stop solution (1 N H2SO4)을 첨가하고, 450 nm에서의 흡광도를 측정하였다.
그 결과, 본 발명의 조성물 농도별 처리에 의하여, LEA 단백질의 발현양을 증가시켜 세포 손상을 보호함을 확인하였다.
실험예 12: 상처 치유 효과 확인 시험
본 발명의 조성물이 세포 증식 및 이동성 촉진에 의한 상처 치유능이 있는지 알아보고자 Wound healing assay를 진행하였다. 이를 위하여 24-well plate 각 well에 wound healing assay 용 culture insert를 첨가하고, HaCaT 세포를 90 % < confluence로 insert 내에 70 μL씩 분주한 후 24시간 배양하였다. 이후 insert를 제거하여 0시간대에 세포 양상을 현미경 사진으로 획득하고, 정제수를 첨가한 대조군과 시험물질인 조성물을 세포에 처리하였다. 16시간 동안 추가배양 후, 배지를 제거하고 4 % PFA(Paraformaldehyde)을 넣고 15분간 상온에서 반응시켰다. 고정 과정 후에 PBS로 3번 washing 하고, 16시간동안 추가 배양 후에 세포 양상을 현미경 사진으로 측정하였다. 치유면적의 증가율은 Image J라는 프로그램을 통해 0시간 대 및 16시간 대 세포 간격 간 면적을 측정하여 산정하였다.
그 결과, 본 발명의 조성물에 의하여, 치유 면적율이 증가하여 간접적으로 상처 치유에 기여하는 것을 확인하였다.
실험에 13: 세포의 에너지 증진 효과 확인 시험
본 발명의 조성물이 세포 에너지 증진 효과가 있는지 알아보고자 세포가 대사과정에서 방출하는 ATP의 활성 정도를 측정하였다. 이를 위하여 Detroit 세포를 12-well plate에 분주한 후, 세포 배양 조건에서 24시간 배양하였다. 이후 정제수를 첨가한 대조군과 시험 물질인 조성물을 세포에 처리하고, 24시간 동안 세포를 추가 배양하였다. 상기 과정을 통해 배양한 세포의 용해물을 희석한 일부 50 μL를 취해 ATP assay kit (Abcam 社, Cat. ab83355) 내 ATP 표준물질 50 μL와 함께 각각 96-well plate에 넣고 50 μL의 ATP reaction mix 용액을 또한 각 well에 첨가하여 차광한 상태에서 30분간 실온 반응시켰다. 반응이 끝난 후 570 nm에서 흡광도를 측정하고, ATP 표준농도곡선을 작성하여 시료 내 ATP 양을 산정하였다.
그 결과, 본 발명의 조성물 처리에 의하여, ATP 양이 증가하여 에너지 활성 증진 효과가 있음을 확인하였다.
실험예 14: 모공 축소 효과 확인 시험 (in vitro)
본 발명의 조성물이 모공 축소 효과가 있는지 알아보고자, 피부를 대신할 단백질로 헤모글로빈을 사용하여 시험하였다. 이를 위하여 1 mg/mL 헤모글로빈 용액 2 mL에 정제수를 첨가한 대조군과 시험물질인 조성물 및 양성대조군(Tannic acid)을 2 mL씩 가한 후, 30초 동안 진탕 혼합한 다음 3,500 rpm에서 10분 동안 원심분리 하였다. 그 상등액 1 mL에 정제수 2 mL을 가하여 407 nm에서 흡광도를 측정하였다.
그 결과, 본 발명의 조성물에 의해 헤모글로빈의 침전률이 증가하여 간접적으로 모공 수축 효과를 확인할 수 있었다.
실험예 15: 피지 억제 효과 확인 시험
본 발명에 의한 조성물을 적용한 에센스 제형의 피지 억제 효과를 확인하기 위하여, 피부 유분 측정기 (Sebum meter SM810)를 이용하여 피시험자 10명의 4주 후 피부의 피지분비량을 측정하였다. 시험은 22±2 ℃, 40±5 % humidity에서 이루어졌다. 지성 피부인 경우 측정값이 220 μg/cm2 이상이고, 정상 피부인 경우 100~220 μg/cm2이다.
그 결과, 대조군의 경우 4주 사용 후, 피지 유분량의 변화가 미비하였으나, 본 발명의 조성물에 의해서는 감소된 피부 유분량을 나타내어 피지 억제 효과가 있음을 확인하였다.
실험예 16: 여드름 개선 효과 확인 시험
본 발명의 조성물을 적용한 화장수 제형의 여드름 개선 효과를 확인하기 위하여, 여드름이 발생한 남녀 10명을 대상으로 아침, 저녁으로 4주간 화장수를 얼굴 전체에 고르게 바르도록 하였다. 여드름 개선 효과의 판정은 실험에 참가한 본인이 느끼는 정도에 따라 하기 판정기준을 참고로 1-3점으로 시험 전 상태를 평가한 뒤 여드름 치유 효과를 평가하도록 하여 그 결과를 표에 나타내었다.
<시험 전 상태의 평가>
1 = 여드름 조금 있음 2 = 여드름 약간 있음 3 = 여드름 심함
<여드름 효과 판정>
- : 효과 거의 없음, + : 약간의 효과 있음, ++ : 많이 완화, +++ : 완전히 치유됨
그 결과, 2주, 4주 사용 후, 본 발명의 조성물에 의해서 대다수 피험자들에게서 여드름이 개선된 효과를 확인하였다.
실시예 2: 화장료 조성물 제조
본 발명에 따른 본 발명의 조성물을 유효 성분으로 포함하는 다양한 형태의 화장료 조성물을 제조하기 위하여, 아래 표의 조성비에 따라 화장수, 에센스, 로션, 크림 및 젤을 각각 제조하였다.
화장수 제조
에센스 제조
로션 제조
크림 제조
젤 제조
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
Claims (13)
- 딱지꽃 추출물, 서양민들레잎 추출물, 산수유열매 추출물, 및 수선화비늘줄기 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 장벽 기능 보호 또는 강화용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 보습용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 자외선 또는 청색광으로부터의 피부 보호용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부재생용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 항노화 또는 항산화용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 스트레스 예방 또는 완화용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 진정용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 염증 완화 또는 방지용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 미세먼지로부터의 피부 보호용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 모공 축소용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피지억제 또는 여드름 개선용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 다음의 단계를 포함하는, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 화장료 조성물의 제조방법:
(a) 딱지꽃 추출물, 서양민들레잎 추출물, 산수유열매 추출물, 및 수선화비늘줄기 추출물을 준비하는 단계; 또는, (a) 딱지꽃, 서양민들레잎, 산수유열매, 및 수선화비늘줄기를 준비하여 추출물을 얻는 단계; 및
(b) 상기 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 제조하는 단계.
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| KR1020210141027A KR20230056513A (ko) | 2021-10-20 | 2021-10-20 | 딱지꽃, 서양민들레잎, 산수유열매, 수선화비늘줄기를 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 화장료 조성물 |
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| KR101811411B1 (ko) | 2017-03-02 | 2017-12-21 | (주)지에프씨 | 딱지꽃 발효 추출물을 포함하는 화장료 조성물 및 이의 제조 방법 |
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