KR20230055907A

KR20230055907A - 27-하이드록시콜레스테롤을 포함하는 골수성 백혈병 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Info

Publication number: KR20230055907A
Application number: KR1020220009248A
Authority: KR
Inventors: 이동준; 우수연
Original assignee: 부산대학교 산학협력단
Priority date: 2021-10-19
Filing date: 2022-01-21
Publication date: 2023-04-26

Abstract

본 발명은 27-하이드록시콜레스테롤을 포함하는 골수성 백혈병 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로, 조혈줄기세포의 활성산소를 증가시켜 연쇄적 소포체 스트레트를 활성화시킴으로써 조혈줄기세포의 증식을 억제하고, 혈액암 세포의 세포사멸(apoptosis)에 중요한 IRE1a, eIF2a, CHOP 신호전달 경로를 활성화함으로써 혈액암 세포의 세포사멸을 증진시킨 약학적 조성물에 관한 것이다.

Description

27-하이드록시콜레스테롤을 포함하는 골수성 백혈병 예방 또는 치료용 약학적 조성물{Pharmaceutical composition for preventing and treating myeloid leukemia comprising 27-Hydroxycholesterol}

본 발명은 27-하이드록시콜레스테롤을 포함하는 골수성 백혈병 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.

백혈병(leukemia)은 백혈구가 종양성으로 증식하는 질환을 총칭한다. 백혈병 종류는 백혈병이 기원하는 백혈구에 따라 골수성 백혈병과 림프성 백혈병으로 분류되고, 진행속도에 따라 급성 백혈병과 만성 백혈병으로 나뉜다. 백혈병의 임상양상은 질환의 유형과 침범된 세포의 성질에 따라 다양하다. 림프성 백혈병은 림프파계 혈액세포가, 골수성 백혈병은 골수계 혈액세포가, 그리고 만성 골수성 백혈병은 성숙기에 있는 세포가 변이해서 발생하며, 급성 골수성 백혈병은 비교적 초기단계의 조혈과정에서 분화를 시작하는 골수계 모세포의 장애로 초래된다.

이 중 급성 골수성 백혈병(Acute myeloid leukemia: AML)은 정상적인 백혈구의 생산을 방해하는 비정상적인 백혈병 세포가 적색 골수에서 생성, 축적되는 혈액암으로, 주로 성인, 고령자에게서 발병하며, 전체 급성 백혈병의 약 70%를 차지하는 것으로 알려져 있다. AML의 증상은 정상 골수가 백혈병 세포로 가득 차면서 혈구(적혈구, 혈소판, 정상 백혈구)의 수가 급감함으로써 나타난다. 주 증상은 피로감, 가쁜 호흡, 쉽게 멍이나 출혈이 일어나며 감염이 빈번하게 일어나는 것 등이다. AML의 원인으로 추정되는 여러가지 것들이 확인되었지만 확실한 AML의 원인은 밝혀지지 않았다. 급성 골수성 백혈병은 현재 세포유전학적 이상과 같은 임상적으로 더욱 중요한 정보를 포함하고 있는 세계보건기구(WHO)의 분류법을 사용하며 ⅰ) 유전적으로 비정상적인 급성 골수성 백혈병, ⅱ) 골수이형성증과 관련된 급성 골수성 백혈병, ⅲ) 치료와 관련된 급성 골수성 백혈병, ⅳ) 분류가 되지 않는 급성 골수성 백혈병, ⅴ) 골수성 육종으로 세분된다. 급성 골수성 백혈병으로 진단되면 항암 치료를 받게 되는데, 먼저 항암제를 이용한 완전 관해를 유도한다. 완전 관해란, 암 세포가 완전히 사라지는 단계이며, 부분 관해는 암 세포가 50% 이상 사라진 상태를 의미한다. 환자에게 항암제를 투여하면 골수에 있는 백혈병 세포가 사멸하게 되고, 동시에 정상 세포도 일시적 손상을 입어 빈혈과 혈소판 감소가 나타나며, 백혈구의 감소로 면역 능력이 급격하게 저하되어 외부로부터의 감염 위험이 증가하는 경우가 생긴다. 항암제에 의한 항암 치료가 끝나면 골수에서 백혈병 세포가 사라지고 정상 세포가 다시 골수에서 재생되어, 혈액 소견이 정상이 되면 완전 관해에 이르게 된다.

이러한 백혈병을 치료하기 위한 노력은 전 세계적으로 계속되고 있으나, 항암 치료 시 수반되는 정상 조혈모세포의 손상에 의한 백혈구감소, 혈소판 감소는 생명을 위협하는 심각한 감염 또는 출혈 합병증과 약제 내성에 의한 백혈병 재발은 여전히 백혈병 치료의 큰 장벽이다.

이에, 본 발명의 발명자들은 27-하이드록시콜레스테롤이 조혈줄기세포의 활성산소를 증가시켜 연쇄적 소포체 스트레트를 활성화시킴으로써 조혈줄기세포의 증식을 억제하고, 혈액암 세포의 세포사멸(apoptosis)에 중요한 IRE1a, eIF2a, CHOP 신호전달 경로를 활성화함으로써 혈액암 세포의 세포사멸을 증진시킬 수 있음을 확인하고, 골수성 백혈병의 치료에 응용할 수 있음에 착안하여 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

한국 등록특허 공보 제10-2293980호

본 발명은 상기와 같은 문제점을 고려하여 안출된 것으로, 본 발명의 목적은 27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 골수성 백혈병(myeloid leukemia, ML) 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하고자 하는 것이다.

본 발명이 해결하고자 하는 과제는 이상에서 언급한 과제(들)로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제(들)는 이하의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 골수성 백혈병(myeloid leukemia, ML) 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

상기 27-하이드록시콜레스테롤은 조혈줄기세포의 증식을 억제하는 것일 수 있다.

상기 조혈줄기세포의 증식 억제는 활성산소종(ROS) 생성에 의한 소포체 (endoplasmic reticulum, ER) 스트레스에 의한 것일 수 있다.

상기 27-하이드록시콜레스테롤은 혈액암 세포의 세포사멸(apoptosis)를 유도하는 것일 수 있다.

상기 혈액암 세포의 세포사멸은 IRE1α(inositolrequiring kinase 1α), Elf2α(eukaryotic translation initiation factor 2α) 및 CHOP(C/EBP homologous protein)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 유전자의 발현 증가로 인하여 유발되는 소포체 (endoplasmic reticulum, ER) 스트레스에 의한 것일 수 있다.

또한, 본 발명은 27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 골수성 백혈병(myeloid leukemia, ML) 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 골수성 백혈병(myeloid leukemia, ML) 예방 또는 개선용 사료 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 골수성 백혈병(myeloid leukemia, ML) 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 골수성 백혈병(myeloid leukemia, ML) 치료용 항암 보조제를 제공한다.

본 발명에 따르면, 27-하이드록시콜레스테롤은 이 조혈줄기세포의 활성산소를 증가시켜 연쇄적 소포체 스트레트를 활성화시킴으로써 조혈줄기세포의 증식을 억제하고, 혈액암 세포의 세포사멸(apoptosis)에 중요한 IRE1a, eIF2a, CHOP 신호전달 경로를 활성화함으로써 혈액암 세포의 세포사멸을 증진시킬 수 있으므로, 골수성 백혈병의 예방, 개선 또는 치료를 위한 다양한 의약, 식품, 화장료 사료 분야에 널리 활용될 수 있다.

본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

도 1은 27-하이드록시콜레스테롤의 조혈줄기·전구세포(hetmaotpoietc stem and progenitor cells, HSPC) 감소효과를 확인한 결과로, (A) LKS 세포, 조혈전구세포 (HPC), 조혈줄기세포 (HSC)의 비율을 나타낸 유세포분석 결과, (B) 골수 세포(BM cell)에 27-하이드록시콜레스테롤의 처리에 따른 Lin-Sca1+cKit+ 세포 (LKS), 조혈전구세포 (Lin-Sca1+cKit+CD48+), 조혈줄기세포 (Lin-Sca1+cKit+CD150+CD48-)의 비율 변화를 확인한 그래프, (C) 공통 골수성 전구 세포 (CMP), 과립구 대식 전구 세포 (GMP), 거대핵 적혈구 전구 세포 (MEP), 공통 림프구성 전구 세포 (CLP)의 비율을 나타낸 유세포분석 결과, (D) 골수 세포에 27-하이드록시콜레스테롤의 처리에 따른 공통 골수성 전구 세포 (Lin-Sca1-cKit+CD34+CD16/32-), 과립구 대식 전구 세포 (Lin-Sca1-cKit+CD34+CD16/32+), 거대핵 적혈구 전구 세포 (Lin-Sca1-cKit+CD34-CD16/32-), 공통 림프구성 전구 세포 (Lin- Sca1lowcKitlow CD127+)의 비율 변화를 확인한 그래프, (E) 단핵구 (Monocyte), 중성구 (Neutrophil), B 세포 (B cell), T 세포 (T cell)의 비율을 나타낸 유세포분석 결과, 및 (F) 골수 세포에 27-하이드록시콜레스테롤의 처리에 따른 단핵구 (CD11b+), 중성구 (CD11b+Gr1+), B 세포 (B220+), T 세포 (CD3+) 비율 변화를 확인한 그래프이다.
도 2는 27-하이드록시콜레스테롤의 조혈줄기·전구세포 (HSPC)에서의 세포사멸 (apoptosis) 및 활성산소종 (ROS, reacitve oxygen species) 증가효과를 확인한 결과로, (A) LKS 세포, 조혈전구세포 (HPC), 조혈줄기세포 (HSC)의 세포사멸 비율을 나타낸 유세포분석 결과, (B) 대조군 세포 대비 27-하이드록시콜레스테롤이 처리된 LKS 세포, 조혈전구세포 (HPC), 조혈줄기세포 (HSC)에서의 세포사멸 증가 비율을 나타낸 그래프, (C) LKS 세포, 조혈전구세포 (HPC), 조혈줄기세포 (HSC)의 활성산소종 비율을 나타낸 유세포분석 결과, 및 (D) 대조군 세포 대비 27-하이드록시콜레스테롤이 처리된 LKS 세포, 조혈전구세포 (HPC), 조혈줄기세포 (HSC)에서의 활성산소종 증가 비율을 나타낸 그래프이다.
도 3은 27-하이드록시콜레스테롤이 in vitro에서의 백혈병 세포 성장에 미치는 영향를 확인한 결과로, (A) 27-하이드록시콜레스테롤 처리에 따른 골수성 백혈병 세포(HL60, KG1a, K562 세포)의 세포 수를 변화를 확인한 그래프[Con(음성 대조군): HEK293T 세포], (B) 27-하이드록시콜레스테롤 처리에 따른 골수성 백혈병 세포(HL60, KG1a, K562 세포)의 세포 사멸 비율을 보여주는 유세포분석 결과, 및 (C) 대조군 세포 대비 27-하이드록시콜레스테롤이 처리된 골수성 백혈병 세포(HL60, KG1a, K562 세포)에서의 세포사멸 증가 비율을 나타낸 그래프이다
도 4는 27-하이드록시콜레스테롤이 in vitro에서의 백혈병 세포 성장에 미치는 영향를 확인한 결과로, (A) 27-하이드록시콜레스테롤을 처리한 골수성 백혈병 세포(HL60, KG1a, K562 세포)의 활성산소 종(ROS) 비율을 보여주는 유세포분석 결과, (B) 대조군 세포 대비 27-하이드록시콜레스테롤이 처리된 골수성 백혈병 세포(HL60, KG1a, K562 세포)에서의 활성산소종 증가 비율을 나타낸 그래프, (C) 27-하이드록시콜레스테롤 처리에 따른 골수성 백혈병 세포(HL60, KG1a, K562 세포)의 분화 (CD11b+) 비율을 보여주는 유세포분석 결과, 및 (D) 대조군 세포 대비 27-하이드록시콜레스테롤이 처리된 골수성 백혈병 세포(HL60, KG1a, K562 세포) 분화 (CD11b+) 비율을 나타낸 그래프이다
도 5는 27-하이드록시콜레스테롤이 in vitro에서의 백혈병 세포 성장에 미치는 영향를 확인한 결과로, (A) 27-하이드록시콜레스테롤의 THP1 세포에서의 소포체 스트레스 반응 경로(ER stress response pathway) 증가를 확인한 웨스턴블랏 이미지, 및 (B) 27-하이드록시콜레스테롤의 세포자멸사 유도 메커니즘을 나타낸 모식도이다.
도 6은 27-하이드록시콜레스테롤 처리에 따른 유전자 발현 수준을 확인한 결과로, (A) 27-하이드록시콜레스테롤 처리에 따른 LSK 세포와 조혈 전구 세포(HPC)에서의 암세포 성장과 관련된 Erα 유전자 발현 수준을 나타낸 그래프, (B) 27-하이드록시콜레스테롤 처리에 따른 LSK 세포와 조혈 전구 세포(HPC)에서의 세포 사멸과 관련된 Bax 유전자 발현 수준을 나타낸 그래프, 및 (C) 27-하이드록시콜레스테롤 처리에 따른 LSK 세포와 조혈 전구 세포(HPC)에서의 소포체 스트레스와 관련된 Chop, Ire1α, Xbp1s 유전자의 발현 수준을 나타낸 그래프이다.
도 7은 27-하이드시콜레스테롤의 마우스 주입에 따른 in vivo 실험 결과로, 마우스 복강 내 27-하이드록시콜레스테롤의 접종에 따른 (A) Lin-Sca1+cKit+ 세포 (LKS), 조혈줄기세포 (HSC, Lin-Sca1+cKit+CD150+CD48-), 조혈전구세포 (HPC, Lin-Sca1+cKit+CD48+), (B) 과립구 대식 전구 세포 (GMP, Lin-Sca1-cKit+CD34+CD16/32+), 공통 골수성 전구 세포 (CMP, Lin-Sca1-cKit+CD34+CD16/32-), 공통 림프구성 전구 세포 (CLP, Lin- Sca1lowcKitlow CD127+), 거대핵 적혈구 전구 세포 (MEP, Lin-Sca1-cKit+CD34-CD16/32-), 및 (C) 단핵구 (monocyte, CD11b+), 중성구 (neutrophil, CD11b+Gr1+), B 세포 (B220+), T 세포 (CD3+)의 비율 변화를 확인한 그래프이다.
도 8은 (A) HL60 세포, (B) K562 세포 및 (C) HEK293T 세포에서 27-하이드록시콜레스테롤과 7α-하이드록시콜레스테롤 사이의 백혈병 세포 성장을 비교한 결과 그래프이다.
도 9는 27-하이드록시콜레스테롤이 ex vivo에서의 조혈줄기세포의 재생능 및 증식에 미치는 영향을 확인한 (A) 실험과정 및 (B) 결과 그래프이다.
도 10은 혈액암 세포의 세포사멸(apoptosis)를 유도하는 신호전달 경로를 나타낸 모식도이다.

이하, 본 발명의 실 예를 첨부된 도면들을 참조하여 더욱 상세하게 설명한다. 본 발명의 실시예는 여러 가지 형태로 변형할 수 있으며, 본 발명의 범위가 아래의 실시예들로 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 더욱 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다. 따라서 도면에서의 요소의 형상은 보다 명확한 설명을 강조하기 위해 과장되었다.

본 발명은 27-하이드록시콜레스테롤(27-HC) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 골수성 백혈병(myeloid leukemia, ML) 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

상기 27-하이드록시콜레스테롤은 하기 화학식 1로 표시되는 화합물일 수 있다.

[화학식 1]

27-하이드록시콜레스테롤은 선택적 에스트로겐 수용체 조절제(SERM) 및 간 X 수용체(LXR)의 작용제로서의 활성을 포함하여 다양한 생물학적 기능을 갖는 내인성 옥시스테롤로서, 효소 CYP27A1에 의해 생성되는 콜레스테롤의 대사 산물로 알려져 있다. 본 발명에서는 27-하이드록시콜레스테롤이 골수성 백혈병 예방, 개선 또는 치료에 유효함을 확인하여, 27-하이드록시콜레스테롤을 유효성분으로 포함하는 골수성 백혈병 예방, 개선 또는 치료용 약학적 조성물로 응용하고자 한다.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 27-하이드록시콜레스테롤은 조혈줄기세포의 증식을 억제하는 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 조혈줄기세포의 증식 억제는 활성산소종(ROS) 생성에 의한 연쇄적 소포체 (endoplasmic reticulum, ER) 스트레스에 의한 것일 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 27-하이드록시콜레스테롤은 혈액암 세포의 세포사멸(apoptosis)를 유도하거나, 혈액암 줄기세포의 줄기세포능(stemness)을 억제하거나, 상기 혈액암 세포 또는 암 줄기세포의 전이를 억제하는 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 혈액암 세포의 세포사멸은 IRE1α(inositolrequiring kinase 1α), Elf2α(eukaryotic translation initiation factor 2α) 및 CHOP(C/EBP homologous protein)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 유전자의 발현 증가로 인하여 유발되는 소포체 (endoplasmic reticulum, ER) 스트레스에 의한 것일 수 있다. 보다 구체적으로, 상기 세포사멸은 IRE1a, eIF2a, CHOP 신호전달 경로의 활성화에 의해 유발되는 것일 수 있다. 이에 대해, 도 10을 참조하여 구체적으로 설명한다.

도 10을 참조하면, 소포체는 리보좀이 붙어있는 조면소포체와 리보좀이 없는 활면소포체 두 가지가 존재한다. 조면소포체에서 RNA가 다양한 과정을 거쳐 단백질로 변환된다. 그러나, 소포체가 처리할 수 있는 능력 이상의 미성숙 단백질이 소포체 내로 유입이 되면 소포체기능에 장애가 발생하는데 이러한 상태를 소포체 스트레스라고 한다. 소포체 스트레스가 발생하면 세포는 생존하기 위한 방어기전을 가진다. 소포체 스트레스가 발생하면 소포체 막에 존재하는 막단백질인 IRE1α, PERK, ATF-6이 세포사멸 경로를 활성화시켜 손상된 세포를 제거한다. 활성화된 IRE1α는 XBP1을 활성화시켜 세포 사멸을 유도하고, PERK와 ATF-6의 활성화는 각각 elF2α, ATF-4와 ATF-6을 활성화시켜 CHOP을 활성화함으로써 세포 사멸을 유도할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 농도는 1 내지 20 uM, 1 내지 10 uM, 3 내지 9 uM, 또는 5 내지 7 uM일 수 있다. 상기 범위 내에서, 27-하이드록시콜레스테롤에 의한 세포사멸 유도능, 활성산소종 생성능 및 조혈줄기세포 증식 억제능이 보다 향상되는 효과가 존재한다.

또한, 본 발명은 시험관내 (in vitro) 또는 생체외 (ex vivo)에서, 골수성 백혈병 세포와 27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 접촉시키는 단계를 포함하는 세포사멸을 유도하는 방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 시험관내 (in vitro) 또는 생체외 (ex vivo)에서, 골수성 백혈병 세포와 27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 접촉시키는 단계를 포함하는 활성산소종을 증가시키는 방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 시험관내 (in vitro) 또는 생체외 (ex vivo)에서, 골수성 백혈병 세포와 27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 접촉시키는 단계를 포함하는 조혈줄기세포의 증식을 억제하는 방법을 제공한다.

상기 세포사멸을 유도하는 방법, 활성산소종을 증가시키는 방법 및 조혈줄기세포의 증식을 억제하는 방법에서, 골수성 백혈병 세포와 접촉되는 27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 농도는 1 내지 20 uM, 1 내지 10 uM, 3 내지 9 uM, 또는 5 내지 7 uM일 수 있다. 상기 범위 내에서, 27-하이드록시콜레스테롤에 의한 세포사멸 유도능, 활성산소종 생성능 및 조혈줄기세포 증식 억제능이 보다 향상되는 효과가 존재한다.

본 발명에서 사용되는 용어 "예방"은 본 발명의 조성물의 투여로 조혈줄기세포 증식을 억제하거나, 혈액암 세포의 세포사멸을 유도하여 골수성 백혈병의 진행을 지연시키는 모든 행위를 의미한다.

본 발명에서 사용되는 용어 "치료"는 본 발명의 조성물의 투여로 조혈줄기세포 증식을 억제하거나, 혈액암 세포의 세포사멸을 유도하여 골수성 백혈병의 호전 또는 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미하며, 임상적 결과를 포함하는 유용한 결과 또는 바람직한 결과를 얻기 위한 시도를 의미한다. 유용한 또는 바람직한 임상적 결과는 검출 가능하거나 가능하지 않더라도, 하나 이상의 증상 또는 상태의 완화 또는 개선, 질병 범위의 축소, 질병 상태의 안정화, 질병 발생의 억제, 질병 확산의 억제, 질병 진행의 지연 또는 늦춤, 질병 발병의 지연 또는 늦춤, 질병 상태의 개선 또는 경감, 및 감퇴 (부분 또는 전체)를 포함할 수 있으며, 반드시 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, “치료”는 치료의 부재에서 예측되는 것 이상으로 환자의 생존이 연장되는 것을 의미할 수 있다. 또한, “치료”는 질병 진행의 억제, 일시적으로 질병 진행의 늦춤을 의미할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 질병의 진행을 영원히 정지시키는 것과 관련이 있다. 본 발명에서는 바람직하게는 혈액함, 특히, 골수성 백혈병을 증진시켜 환자의 생존을 향상시키는 것을 의미할 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 상기 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물의 투여량은 치료받을 대상의 연령, 성별, 체중과, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태, 질환 또는 병리 상태의 심각도, 투여경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 일반적으로 투여량은 0.01㎎/㎏/일 내지 대략 2000㎎/㎏/일의 범위이다. 더 바람직한 투여량은 0.1㎎/㎏/일 내지 1000㎎/㎏/일이다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

본 발명의 약학적 조성물은 쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 주사에 의해 투여될 수 있다.

본 발명에 있어서, 골수성 백혈병 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 유효성분 이외에, 항암 효과의 상승 및 보강을 위하여 이미 안전성이 검증되고 항암 활성을 갖는 것으로 공지된 임의의 화합물이나 천연 추출물을 추가로 포함할 수 있다.

또한, 본 발명은 27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 골수성 백혈병(myeloid leukemia, ML) 예방 또는 개선용 식품 조성물 또는 건강기능식품 조성물을 제공한다.

상기 식품 또는 건강기능식품 조성물은 향미제, 풍미제, 착색제, 충진제, 안정화제, 천연 탄수화물, 영양제, 비타민제, 증점제, pH 조절제, 방부제 및 이들의 혼합물로 이루어지는 군으로부터 선택되는 첨가제를 추가로 포함할 수 있다.

본 발명의 상기 식품 조성물은 기능성 식품(functional food), 영양 보조제(nutritional supplement), 건강식품(health food)및 식품 첨가제(food additives) 등의 모든 형태를 포함한다. 상기 유형의 식품 조성물은 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다.

예를 들면, 건강식품으로는 상기 조성물 자체를 차, 주스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용하도록 하거나, 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한 기능성 식품으로는 음료(알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품(예: 과일통조림, 병조림, 잼, 마말레이드 등), 어류, 육류, 및 그 가공식품(예: 햄, 소시지 콘비프 등), 빵류 및 면류(예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게티, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예: 버터, 치즈 등), 식용식물유지, 마아가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예: 된장, 간장, 소스 등)등에 추출물을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물을 식품 첨가제의 형태로 사용하기 위해서는 분말 또는 농축액 형태로 제조하여 사용할 수 있다.

본 발명의 식품용 조성물 중 27-하이드록시콜레스테롤의 바람직한 함량은 식품용 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 50% 일 수 있으며, 바람직하게는 0.01 내지 30% 범위로 함유될 수 있다.

본 발명의 일 구현예에서, 본 발명의 건강기능식품 조성물은 정제, 환제, 과립제, 분말제, 액제, 경질캅셀제, 연질캅셀제 등과 같은 일반적인 제형으로 제조될 수 있으며, 죽, 빵, 음료, 바, 초콜릿, 쿠키, 차, 드링크제, 비타민 복합제, 육류, 소시지, 캔디, 면, 젤리 등과 같은 임의의 형태로 제조될 수 있다.

상기와 같은 여러 제형 또는 형태를 제조하기 위해, 전술한 부형제들과 같은 식품학적으로 허용 가능한 담체 또는 첨가제를 사용할 수 있으며, 제조하고자 하는 제형 또는 형태의 제조에 당해 기술 분야에서 사용 가능한 것으로 공지되어 있는 임의의 담체 또는 첨가제가 이용될 수 있다.

본 발명의 27-하이드록시콜레스테롤이 사료 조성물 형태로 제공되는 경우, 상기 사료용 조성물은 공지의 사료 보조제, 식품 첨가제 또는 사료 첨가제를 추가적으로 포함할 수 있으며, 발효사료, 배합사료, 펠렛형태 및 사일리지 등의 형태로 제조될 수 있다.

본 발명의 27-하이드록시콜레스테롤이 화장료 조성물로 제공되는 경우, 상기 화장료 조성물은 상기 유효성분 이외에 통상적으로 허용되는 성분들을 제한 없이 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다. 상기 화장료 조성물은 피부 건강을 위한 다양한 소재를 제한없이 포함하는 의미로 해석될 수 있다.

또한, 본 발명은 27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 골수성 백혈병(myeloid leukemia, ML) 치료용 보조제를 제공한다.

본 명세서에서 사용된 용어, "골수성 백혈병 치료용 보조제"는 항암제에 의한 치료와 병행하여 적용 시 상기 항암제에 의한 부작용을 방지하여 항암 치료의 효과를 상승적으로 증가시키는 조성물을 의미한다. 따라서 상기 치료용 보조제는 항암 보조제로 항암제와 함께, 동시에 또는 순차적으로 투여 가능하다.

본 발명의 골수성 백혈병 치료용 보조제와 함께 사용될 수 있는 항암제의 종류는 특별히 한정되지 않는다. 항암제는 암세포의 종류, 항암제의 흡수 속도(치료기간과 항암제 투여 경로), 종양의 위치, 종양의 크기 등의 항암제 선택 시 고려하는 일반적인 원칙하에 선택될 수 있다.

이상의 설명은 본 발명의 기술 사상을 일 구현예를 이용하여 설명한 것으로서, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 갖는 자라면 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 다양한 수정 및 변형이 가능할 것이다. 따라서, 본 발명에서 설명된 실시예는 본 발명의 기술 사상을 한정하기 위한 것이 아니라 설명하기 위한 것이고, 이런 실시예에 의하여 본 발명의 기술 사상의 범위가 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 보호범위는 청구범위에 의하여 해석되어야 하며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 발명의 권리범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다.

실시예 1. 27-하이드록시콜레스테롤의 조혈줄기·전구세포 (hematopoietic stem and progenitor cells, HSPC) 감소 효과 확인

쥐의 정강뼈와 대퇴골에서 FACS staining buffer (phosphate-buffered saline, 2% FBS, penicillin/streptomycin)를 이용하여 골수를 추출한 후 ACK lysis buffer를 통해 적혈구를 용해시켜 골수 세포를 추출하여 6.2 uM 27-하이드록시 콜레스테롤을 48시간 처리하였다. 처리 후 항체를 붙여 FACSCanto2 장비로 세포를 분석하였다. 그 결과 27-하이드록시콜레스테롤의 조혈 줄기 전구세포(HSPC) 감소 효과를 확인하였고, 도 1에 나타내었다[Con: 아무것도 처리하지 않은 쥐 골수 세포, Chol: 콜레스테롤을 처리한 쥐 골수 세포, 27HC: 27-하이드록시콜레스테롤을 처리한 쥐 골수 세포].

도 1A 및 1B를 참조하면, 골수 세포(BM cell)에 27-하이드록시콜레스테롤을 처리함에 따라 Lin-Sca1+cKit+ 세포 (LKS), 조혈전구세포 (Lin-Sca1+cKit+CD48+), 조혈줄기세포 (Lin-Sca1+cKit+CD150+CD48-)의 비율이 감소함을 확인할 수 있다.

또한, 도 1C 및 1D를 참조하면, 골수 세포에 27-하이드록시콜레스테롤을 처리함에 따라 공통 골수성 전구 세포 (Lin-Sca1-cKit+CD34+CD16/32-), 과립구 대식 전구 세포 (Lin-Sca1-cKit+CD34+CD16/32+), 거대핵 적혈구 전구 세포 (Lin-Sca1-cKit+CD34-CD16/32-), 공통 림프구성 전구 세포 (Lin- Sca1lowcKitlow CD127+)의 비율이 감소함을 확인할 수 있다.

또한, 도 1E 내지 1F를 참조하면, 골수 세포에 27-하이드록시콜레스테롤을 처리함에 따라 단핵구 (CD11b+), 중성구 (CD11b+Gr1+), B 세포 (B220+), T 세포 (CD3+) 비율은 변화가 없음을 확인할 수 있다.

이를 통하여, 27-하이드록시콜레스테롤이 조혈줄기 전구세포에 특이적으로 세포독성 효과를 나타낸다는 것을 확인하였다.

실시예 2. 27-하이드록시콜레스테롤의 조혈줄기·전구세포 (HSPC)에서의 세포사멸 (apoptosis) 및 활성산소종 (ROS, reacitve oxygen species) 증가효과 확인

쥐의 정강뼈와 대퇴골에서 골수 세포를 추출하여 6.2 uM 27-하이드록시 콜레스테롤을 48시간 처리하였다. 세포 사멸을 확인하기 위해 27-하이드록시콜레스테롤을 처리한 세포를 모아 1x Annexin binding buffer에 세포를 풀어 Annexin V와 7AAD를 넣어 FACScanto2 장비로 분석하였고, 활성산소종을 확인하기 위해 세포를 FACS staining buffer에 풀어 DCFDA를 넣어준 후 37℃에서 30분간 염색하여 FACScanto2 장비로 분삭하였다. 그 결과 27-하이드록시콜레스테롤의 조혈줄기·전구세포 (HSPC)에서의 세포사멸 및 활성산소종 증가효과를 확인하여, 도 2에 나타내었다[Con 또는 Ctrl: 아무것도 처리하지 않은 쥐 골수 세포, Chol: 콜레스테롤을 처리한 쥐 골수 세포, 27HC: 27-하이드록시콜레스테롤을 처리한 쥐 골수 세포].

도 2A 내지 2B를 참조하면, 대조군 세포 대비 27-하이드록시콜레스테롤이 처리된 LKS 세포, 조혈전구세포 (HPC), 조혈줄기세포 (HSC)에서의 세포사멸이 증가하였음을 확인할 수 있다.

또한, 도 2C 및 2D를 참조하면, 대조군 세포 대비 27-하이드록시콜레스테롤이 처리된 LKS 세포, 조혈전구세포 (HPC), 조혈줄기세포 (HSC)에서의 활성산소종이 증가하였음을 확인할 수 있다.

이를 통하여, 27-하이드록시콜레스테롤은 조혈줄기·전구세포에서 세포사멸 및 활성산소종을 증가시킴을 확인하였다. 구체적으로, Cholesterol을 처리한 조혈 줄기 전구세포에서는 세포 사멸과 활성산소종의 비율이 아무것도 처리하지 않은 세포와 비슷한 반면, 27-하이드록시콜레스테롤을 처리한 세포에서 세포 사멸과 활성산소종의 비율이 증가하였다. 이를 통해 27-하이드록시콜레스테롤이 조혈 줄기 전구 세포에서 특이적으로 보이는 세포독성은 세포사멸과 활성산소종의 증가 때문이라는 것을 알 수 있다.

실시예 3. 27-하이드록시콜레스테롤이 in vitro 에서의 백혈병 세포 성장에 미치는 영향 확인

급성 골수성 백혈병 세포주인 HL60과 KG1 α, 만성 골수성 백혈병 세포주인 K562 세포에 6.2 uM 27-하이드록시콜레스테롤을 48시간 처리 후 trypan blue 염색을 하여 세포 수를 확인하였다. 또한 Annexin V와 7AAD을 넣어 FACScanto2 장비를 이용해 세포 사멸을 분석하였다. 그 결과 아무것도 처리하지 않은 세포(Con)와, 콜레스테롤을 처리한 백혈병 세포주(Chol)와 비교해 27-하이드록시콜레스테롤이 백혈병 세포주(27HC)의 세포 사멸을 증가시켜 세포 수를 감소시키는 것을 확인하여 도 3에 나타내었다[Con: 아무것도 처리하지 않은 백혈병 세포주, Chol: 콜레스테롤을 처리한 백혈병 세포주, 27HC: 27-하이드록시콜레스테롤을 처리한 백혈병 세포주].

다음으로, DCFDA 염색을 통해 세포 사멸과 활성산소종 비율을 분석하였다. 또한 27-Hydroxycholesterol이 백혈병 세포주의 분화에 미치는 영향을 확인하기 위해 분화 마커인 CD11b를 염색하여 FACScanto 2 장비로 분석하였다. 그 결과 27-하이드록시 콜레스테롤을 처리한 백혈병 세포주에서 활성산소종 비율이 높은 것을 확인하여 도 4에 나타내었다[Con: 아무것도 처리하지 않은 백혈병 세포주, Chol: 콜레스테롤을 처리한 백혈병 세포주, 27HC: 27-하이드록시콜레스테롤을 처리한 백혈병 세포주].

다음으로, 27-하이드록시콜레스테롤로 유도된 세포 사멸이 소포체 스트레스가 원인인지 알아보기 위해 급성 골수성 백혈병 세포주인 HL60 세포에서 소포체 스트레스 단백질 양을 확인하였다. 27-하이드록시콜레스테롤을 48시간 처리 후 lysis buffer로 세포를 용해하여 단백질을 추출한 뒤 10% SDS-PAGE gel에서 분리하여 멤브레인으로 옮겨 anti-pIRE1α, IRE1α, PERK, ATF4, elF2α, or anti-ACTIN 항체를 넣어 4℃에서 16시간 염색 후 2차 항체를 넣어 상온에서 1시간 염색하여 ECL에 반응시켜 화학발광이미지분석기로 측정하였다. 그 결과 27-하이드록시콜레스테롤이 소포체 스트레스를 증가시키는 것을 확인하여 도 5에 나타내었다.

도 3A를 참조하면, 27-하이드록시콜레스테롤을 처리함에 따라 골수성 백혈병 세포(HL60, KG1a, K562 세포)의 세포 수는 음성 대조군인 HEK293T 세포의 세포수에 비하여 현저히 감소하였음을 확인할 수 있다.

또한, 도 3B 및 3C를 참조하면, 27-하이드록시콜레스테롤이 처리된 골수성 백혈병 세포(HL60, KG1a, K562 세포)는 대조군 세포보다 세포사멸이 증가하였음을 확인할 수 있다.

또한, 도 4A 및 도 4B를 참조하면, 27-하이드록시콜레스테롤이 처리된 골수성 백혈병 세포(HL60, KG1a, K562 세포)는 대조군 세포보다 활성산소종이 증가하였음을 확인할 수 있다.

또한, 도 4C 및 도 4D를 참조하면, 27-하이드록시콜레스테롤이 처리된 골수성 백혈병 세포(HL60, KG1a, K562 세포)는 대조군 세포보다 분화 (CD11b+) 가 증가하였음을 확인할 수 있다.

또한, 도 5A를 참조하면, 27-하이드록시콜레스테롤은 THP1 세포에서의 소포체 스트레스 반응 경로(ER stress response pathway)를 증가시킴을 확인할 수 있다.

이를 통하여, 27-하이드록시콜레스테롤은 조혈줄기·전구세포에서 세포사멸 및 활성산소종을 증가시킴을 확인하였다. 구체적으로, 도 5B의 27-하이드록시콜레스테롤의 세포자멸사 유도 메커니즘을 참조하면, 27-하이드록시콜레스테롤은 ROS 반응을 증가시키고 소포체 스트레스 반응 경로를 통해 세포자멸사를 유도함을 확인할 수 있다.

실시예 4. 27-하이드록시콜레스테롤 처리에 따른 유전자 발현 수준의 확인

쥐의 정강뼈와 대퇴골에서 골수 세포를 추출하여 6.2 uM 27-하이드록시 콜레스테롤을 48시간 처리한다. 처리 후 PE-Cy5-CD3, PE-Cy5-CD4, PE-Cy5-CD8, PE-Cy5-CD19, PE-Cy5-B220, PE-Cy5-GR1, PE-Cy5-Ter119, PE-Sca1, APC-cKit, PE-Cy7-CD150, APC-Cy7-CD48 항체를 넣고 4℃에서 30분간 염색 후 FACSAria를 이용하여 LKS(Lin^-Sca1⁺cKit⁺)와 조혈전구세포 (Lin^-Sca1⁺cKit⁺CD48⁺)를 분리하였다. 그 후 RNA 추출 키트를 이용하여 세포에서 RNA를 추출하였고, cDNA 합성 키트를 이용하여 RNA에서 cDNA를 합성하였다. 합성된 cDNA를 세포 사멸과 소포체 스트레스와 관련된 프라이머 및 SYBR-green을 이용하여 qRT-PCR을 진행하였다. 그 결과 전체 골수 세포에서보다 미성숙한 세포인 LKS와 조혈 전구세포에서 27-하이드록시콜레스테롤 처리에 따른 세포 사멸과 소포체 스트레스와 관련된 유전자 발현이 증가함을 확인하여 도 6에 나타내었다.

도 6A를 참조하면, 27-하이드록시콜레스테롤을 처리함에 따라 LSK 세포와 조혈 전구 세포(HPC)에서의 암세포 성장과 관련된 Erα 유전자 발현이 증가하였음을 확인할 수 있다.

또한, 도 6B를 참조하면, 27-하이드록시콜레스테롤을 처리함에 따라 LSK 세포와 조혈 전구 세포(HPC)에서의 세포 사멸과 관련된 Bax 유전자 발현이 증가하였음을 확인할 수 있다.

또한, 도 6C를 참조하면, 27-하이드록시콜레스테롤을 처리함에 따라 LSK 세포와 조혈 전구 세포(HPC)에서의 소포체 스트레스와 관련된 Chop, Ire1α, Xbp1s 유전자의 발현이 증가하였음을 확인할 수 있다.

실시예 5. 27-하이드시콜레스테롤 in vivo 세포독성 실험

27-하이드록시콜레스테롤이 생체 내에서 세포 독성을 가지는지 확인하기 위해 에탄올, 콜레스테롤, 27-하이드록시콜레스테롤을 20 mg/kg농도로 쥐의 복강에 주입하였고, 24시간 후 쥐의 정강뼈와 대퇴골에서 FACS staining buffer를 이용하여 골수 세포를 추출하여 항체를 붙여 FACSCanto2 장비로 세포를 분석함. 그 결과 27-하이드록시콜레스테롤은 생체 내에서 유의미한 변화를 보이지 않았다. 이를 통해 27-하이드록시콜레스테롤이 생체 내에서 세포 독성을 나타내지 않음을 확인하여 도 7에 나타내었다.

실시예 6. 세포에서 27-하이드록시콜레스테롤과 7α-하이드록시콜레스테롤 사이의 백혈병 세포 성장 비교

급성 골수성 백혈병 세포주인 HL60과 만성 골수성 백혈병 세포주인 K562 세포에 6.2uM 콜레스테롤과 7α-하이드록시콜레스테롤, 27-하이드록시콜레스테롤을 48시간 처리 후 trypan blue 염색을 하여 세포 수를 확인하였다. 그 결과 7α-하이드록시콜레스테롤은 백혈병 세포주 수에 큰 영향을 미치지 않았고, 27-하이드록시콜레스테롤은 백혈병 세포주의 세포 수를 감소시키는 것을 확인하여 도 8에 나타내었다[Con: 아무것도 처리하지 않은 백혈병 세포주, Chol: 콜레스테롤을 처리한 백혈병 세포주, 27HC: 27-하이드록시콜레스테롤을 처리한 백혈병 세포주, 7aHC: 7α-하이드록시콜레스테롤을 처리한 백혈병 세포주].

도 8A 및 도 8B를 참조하면, 27-하이드록시콜레스테롤(27HC)를 처리한 군에서는 백혈병 세포(HL60 세포, K562 세포)의 성장이 억제된 반면, 7α-하이드록시콜레스테롤(7aHC)를 처리한 군에서는 백혈병 세포(HL60 세포, K562 세포)의 성장 억제 효과가 미미함을 확인할 수 있다.

또한, 도 8C를 참조하면, 같은 산화 콜레스테롤이지만 7α-하이드록시콜레스테롤은 만성 골수성 백혈병 세포에는 영향을 미치지 못하였고, 27-하이드록시콜레스테롤보다 급성 골수성 백혈병 세포주에 미치는 영향이 약한 것으로 보아 27-하이드록시 콜레스테롤이 백혈병 세포 성장을 억제함을 확인할 수 있다.

실시예 7. 27-하이드록시콜레스테롤이 ex vivo 에서의 조혈줄기세포의 재생능 및 증식에 미치는 영향 확인

ex vivo로 골수 세포를 꺼내 6.2uM 27-하이드록시콜레스테롤 (27-HC)를 처리 후 골수 이식을 진행하였다.

구체적으로, 도 9A를 참조하면, 기증자(Donor) CD45.1 쥐의 정강뼈와 대퇴골에서 골수 세포를 추출한 후 6.2 uM 27-하이드록시콜레스테롤을 48시간 처리하였다. CD45.2 쥐의 골수 세포와 1:1 비율로 섞어 4Gy로 방사선 조사를 진행한 수혜자(Recipient) CD45.2 쥐의 미정맥에 주입하여 골수 이식을 진행하였다. 1달 후 골수 이식을 받은 수혜자 쥐의 정맥에서 혈액을 추출해 기증자 쥐의 세포 비율을 분석하였다. 쥐의 경정맥에서 혈액을 뽑아 10mM EDTA에 넣어 혈액 응고를 방지하였고, ACK lysis buffer에 넣어 적혈구를 용해시켰다. CD45.1-APC, CD45.2-FITC 항체를 붙인 후 FACSCanto 2 장비를 이용해 기증자 쥐 CD45.1 세포를 분석 하였고 27-하이드록시콜레스테롤이 조혈줄기세포의 재생능과 증식을 억제함을 확인하여 도 9B에 나타내었다.

구체적으로, 도 9B를 참조하면, 1달 후 27-하이드록시콜레스테롤이 조혈줄기세포의 재생능 및 증식을 억제하였음을 혈액에서 확인하였다.

따라서, 본 발명에 따른 27-하이드록시콜레스테롤을 포함하는 약학적 조성물은 조혈줄기세포의 활성산소를 증가시켜 연쇄적 소포체 스트레트를 활성화시킴으로써 조혈줄기세포의 증식을 억제하고, 혈액암 세포의 세포사멸(apoptosis)에 중요한 IRE1a, eIF2a, CHOP 신호전달 경로를 활성화함으로써 혈액암 세포의 세포사멸을 증진시킬 수 있고, 이 결과 골수성 백혈병을 예방, 개선 또는 치료할 수 있음을 확인하였다.

이상의 상세한 설명은 본 발명을 예시하는 것이다. 또한 전술한 내용은 본 발명의 바람직한 실시 형태를 나타내어 설명하는 것이며, 본 발명은 다양한 다른 조합, 변경 및 환경에서 사용할 수 있다. 즉 본 명세서에 개시된 발명의 개념의 범위, 저술한 개시 내용과 균등한 범위 및/또는 당업계의 기술 또는 지식의 범위 내에서 변경 또는 수정이 가능하다. 저술한 실시예는 본 발명의 기술적 사상을 구현하기 위한 최선의 상태를 설명하는 것이며, 본 발명의 구체적인 적용 분야 및 용도에서 요구되는 다양한 변경도 가능하다. 따라서 이상의 발명의 상세한 설명은 개시된 실시 상태로 본 발명을 제한하려는 의도가 아니다. 또한 첨부된 청구 범위는 다른 실시 상태도 포함하는 것으로 해석되어야 한다.

Claims

27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 골수성 백혈병(myeloid leukemia, ML) 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항에 있어서,
상기 27-하이드록시콜레스테롤은 조혈줄기세포의 증식을 억제하는 것인, 약학적 조성물.
제2항에 있어서,
상기 조혈줄기세포의 증식 억제는 활성산소종(ROS) 생성에 의한 소포체 (endoplasmic reticulum, ER) 스트레스에 의한 것인, 약학적 조성물.
제1항에 있어서,
상기 27-하이드록시콜레스테롤은 혈액암 세포의 세포사멸(apoptosis)를 유도하는 것인, 약학적 조성물.
제4항에 있어서,
상기 혈액암 세포의 세포사멸은 IRE1α(inositolrequiring kinase 1α), Elf2α(eukaryotic translation initiation factor 2α) 및 CHOP(C/EBP homologous protein)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 유전자의 발현 증가로 인하여 유발되는 소포체 (endoplasmic reticulum, ER) 스트레스에 의한 것인, 약학적 조성물.
제1항에 있어서,
상기 27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 농도는 1 내지 20 uM인 약학적 조성물.
27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 골수성 백혈병(myeloid leukemia, ML) 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 골수성 백혈병(myeloid leukemia, ML) 예방 또는 개선용 사료 조성물.
27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 골수성 백혈병(myeloid leukemia, ML) 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
27-하이드록시콜레스테롤 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 골수성 백혈병(myeloid leukemia, ML) 치료용 항암 보조제.