KR20230030689A - 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물 - Google Patents

염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 핑거루트와 초두구 열수추출물이 함유되어 이루어진다.
상기와 같이 핑거루트와 초두구 열수추출물이 함유되면, Cardarmonin이 함유되어 염증완화의 효과를 나타낼 뿐만 아니라, GABA가 함유되어 미백효능을 나타내며, MMP-9이 함유되어 주름개선 효과를 나타낸다.

Description

염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물{COSMETIC COMPOSITION SHOWING INFLMMATION, WHITEN AND WRINKLE IMPROVEMENT EFFECTS}
본 발명은 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 함유되어 Cardarmonin, GABA 및 MMP-9이 함유되기 때문에, 우수한 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물에 관한 것이다.
염증(Inflammation)이란 외부 감염원(박테리아, 곰팡이, 바이러스, 다양한 종류의 알레르기 유발물질)의 침입에 의하여 형성되는 농양의 병리적 상태를 뜻한다. 즉, 염증은 생체 내 면역 반응 중 하나로 생체 내로 외부인자가 침입 시 작동하는데 피부에서는 자극이나 상처가 생길 경우 또는 화농성 여드름 주변부에 보면 부어오르며 붉어지는 현상을 관찰할 수 있는데 이것들이 면역 반응에 의해 염증이 생긴 것이다. 구체적으로, 외부 세균이 특정조직에 침입하여 증식을 하게 되면 생체의 백혈구가 이를 인지하여 증식된 외부 세균을 활발히 공격하게 되는데, 이 과정 중 발생되는 백혈구의 사해가 균에 의하여 침입받은 조직에 축적됨과 동시에 백혈구에 의하여 사멸된 침입균의 세포 파괴물이 침입받은 조직 내로 융해되어 농양이 형성된다. 염증에 의한 농양의 치료는 소염작용을 통하여 촉진될 수 있는데, 소염작용이란 항균제를 이용하여 침입균의 증식을 억제하거나 농양 중에 축적된 이물질들을 탐식하는 대식세포(Macrophage)를 활성화하여 이물질들을 소화 및 배설하는 대식세포의 기능을 항진시키는 등의 염증 치료 촉진작용이다.
일반적으로 염증 반응은 생체의 세포나 조직에 기질적 변화를 가져오는 침습으로 인한 손상을 수복 및 재생하기 위한 생체방어 반응과정이고, 이 반응과정에는 국소의 혈관, 체액의 각종 조직세포 및 면역세포 등이 작용한다.
정상적으로 외부 침입균에 의하여 유도되는 염증 반응은 생체를 보호하기 위한 방어 시스템인 반면, 비정상적으로 과도한 염증반응이 유도되면 다양한 질환들이 나타나게 되는데, 이러한 질환들을 염증 질환이라 한다. 염증질환은 외부자극에 의하여 활성화된 표적세포로부터 분비되는 다양한 염증 매개물질이 염증을 증폭 및 지속시켜 인체의 생명을 위협하는 질환으로서 급성염증, 류마티스 관절염과 같은 관절 내에서의 질환, 건선 등의 형태로 나타나는 피부질환 및 기관지 천식 등의 알레르기성 염증질환 등을 포함한다.
여러 면역 반응 요소 중에 대식세포(Macrophage)는 거의 모든 조직에 존재하는 면역계 세포로 단핵구와 함께 선천성 면역 반응뿐만 아니라 후천성 면역반응에도 관여하여 생체 방어에 중요한 역할을 한다. LPS(Lipo poly saccharide)는 그람음성균 세포외막이 구성성분으로 인체가 세균에 감염되었을 때 폐혈성 쇼크상태를 야기하는 내독소로 알려져 있다. 생쥐 유래 RAW 2647 대식세포에 LPS를 처리하면 IL-1β, IL-6, TNF-α 및 IL-13와 같은 전염증성 사이토카인의 합성이 증가되고, iNOS 및 COX-2 단백질 발현이 유도된다. 그리고 LPS에 의한 전염증성 사이토카인 및 염증 매개 단백질의 발현인자인 NF-kB 및 MAPK의 활성화 경로를 통해 일어나서 산화질소를 생성한다. 따라서, 대식세포는 LPS에 의해 염증반응을 유도하기 때문에 염증 개선 소재 탐색에 광범위하게 사용되고 있다.
한편, 인체에 주름이 형성되는 원인은 자연적 노화에 의한 주름의 생성과 자외선 노출(광노화)에 의한 주름의 생성으로 크게 나눌 수 있는데, 두 가지 원인에 의한 주름 형성 메커니즘은 아직까지 정확하게 밝혀져 있지 않은 상태이다. 자연적 노화와 광노화에 의한 피부변화와 관련되어 발견되는 공통적인 현상은 진피 내의 주 구성단백질인 콜라겐 및 엘라스틴의 감소 및 변형, 진피의 기질인 히알루론산의 감소에 의한 피부 탄력 감소이다. 특히 지금까지의 연구결과 의하면 진피 내 주 단백질인 콜라겐 및 엘라스틴의 감소 및 변형이 주름의 생성 및 피부의 탄력저하에 직접적으로 관여하는 것으로 알려져 있다. 콜라겐은 피부의 섬유아세포에서 생성되는 주요 기질 단백질로서 세포외 간질에 존재하고, 중요한 기능으로는 피부의 기계적 견고성, 결합조직의 저항력과 조직의 결합력, 세포 접착의 지탱, 세포분할과 분화(유기체의 성장 혹인 상처 치유시)의 유도 등이 알려져 있다. 이러한 콜라겐은 연령 및 자외선 조사에 의한 광노화에 의해 감소하며, 이는 피부의 주름 형성과 밀접한 연관이 있다고 알려져 있다.
한편, 사람의 피부색은 피부 내부의 멜라닌(Melanin)의 함량, 분포에 따라 결정되는데, 유전적인 요인 외에도 태양 자외선이나 피로, 스트레스 등의 환경적 또는 생리적 조건에 의해서도 영향을 받는다. 멜라닌은 피부 표피층에 있는 멜라노사이트(Melanocyte)에서 합성되는데, 멜라노사이트 내 소기관인 멜라노좀(Melanosome)에서 아미노산의 일종인 티로신(Tyrosine)에 티로시나제(Tyrosinase)라는 효소가 작용하여 도파(DOPA), 도파퀴논(Dopaquinone)으로 바뀐 후 비효소적인 산화반응을 거쳐 만들어진다. 이와 같은 멜라닌의 합성이 피부 내에서 과도하게 일어나면, 피부 톤을 어둡게 하고, 기미, 주근깨, 노인성 흑자, 모반 등을 발생시킨다. 따라서, 피부 내의 티로시나제 활성을 저해하여 멜라닌 색소의 합성을 저해시키면, 피부 톤을 밝게 하여 피부 미백을 실현할 수 있을 뿐만 아니라 자외선, 호르몬 및 유전적인 원인에 기인하여 발생하는 기미, 주근깨 등의 피부 과색소 침착증을 개선시킬 수 있다.
한국특허등록 제10-1342485호(2013.12.11) 한국특허등록 제10-2025633호(2019.09.25)
본 발명의 목적은 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 함유되어 Cardarmonin, GABA 및 MMP-9이 함유되기 때문에, 우수한 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 목적은 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 함유되는 것을 특징으로 하는 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물을 제공함에 의해 달성된다.
본 발명의 바람직한 특징에 따르면, 상기 화장료 조성물은 GABA 100㎍/mL, Cardamonin 75 내지 80㎍/mL 및 MMP-9 45 내지 55ng/mL가 함유되는 것으로 한다.
본 발명의 더 바람직한 특징에 따르면, 상기 화장료 조성물은 크림, 미스트 , 선스틱 및 마스크팩으로 이루어진 그룹에서 선택된 하나의 제형으로 제공되는 것으로 한다.
본 발명에 따른 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물은 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 함유되어 Cardarmonin, GABA 및 MMP-9이 함유되기 때문에, 우수한 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물을 제공하는 탁월한 효과를 나타낸다.
도 1은 본 발명에서 사용되는 핑거루트와 초두구의 열수추출물에 함유된 Cardamonin의 구조식을 나타낸 것이다.
도 2 내지 4는 본 발명에서 사용되는 핑거루트와 초두구의 열수추출물에 함유된 Cardamonin의 농도를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 5 내지 9는 본 발명에서 사용되는 핑거루트와 초두구의 열수추출물의 염증억제 효과를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 10은 본 발명에서 사용되는 핑거루트와 초두구의 열수추출물의 DPPH assay를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 11은 본 발명에서 사용되는 핑거루트와 초두구의 열수추출물의 ABTs assay를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 12는 본 발명에서 사용되는 핑거루트와 초두구의 열수추출물의 8-OHdG와 4-HNE의 Immunofluorescence Assay를 측정하여 나타낸 사진이다.
도 13은 본 발명에서 사용되는 핑거루트와 초두구의 열수추출물의 MTT Assay(좌)와 Tyrosinase Inhibition Assay(우)를 나타낸 그래프이다.
도 14는 본 발명에서 사용되는 핑거루트와 초두구의 열수추출물의 Melanin Contents Assay를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 15는 본 발명에서 사용되는 핑거루트와 초두구의 열수추출물의 Western Blot(좌)과 Real-time PCR(우)을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 16은 본 발명에서 사용되는 핑거루트와 초두구의 열수추출물의 MTT Assay(좌)와 Luciuferase Assay(우)를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 17은 본 발명에서 사용되는 핑거루트와 초두구의 열수추출물의 Western Blot을 측정하여 나타낸 사진이다.
이하에는, 본 발명의 바람직한 실시예와 각 성분의 물성을 상세하게 설명하되, 이는 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 발명을 용이하게 실시할 수 있을 정도로 상세하게 설명하기 위한 것이지, 이로 인해 본 발명의 기술적인 사상 및 범주가 한정되는 것을 의미하지는 않는다.
본 발명에 따른 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물은 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 함유되는 것을 특징으로 한다.
상기의 핑거루트와 초두구의 열수추출물에는 GABA, Cardamonin 및 MMP-9이 함유되며, 더욱 상세하게는 GABA 100㎍/mL, Cardamonin 75 내지 80㎍/mL 및 MMP-9 45 내지 55ng/mL가 함유되는데, 상기 GABA는 미백효능을 부여하며, 상기 Cardarmonin은 염증완화의 효과를 부여하고, 상기 MMP-9은 주름개선 효과를 부여하는 역할을 한다.
상기와 같이 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 함유되어 GABA, Cardamonin 및 MMP-9이 함유된 화장료 조성물은 크림, 미스트 및 마스크팩 등과 같은 다양한 제형의 화장품으로 제공될 수 있다.
상기 Cardamonin은 아래 도 1에 나타낸 바와 같은 구조식을 나타내며, 이명은 (2E)-1-(2,4-dihydroxy-6-methoxyphenyl)-3-phenyl-2-propen-1-one이다.
핑거루트와 초두구의 열수추출물은 아래 표 1에 나타낸 것처럼, 물과 메탄올을 단독 또는 혼합하여 용매로 사용할 수 있으며, 추출물에 함유된 Cardamonin의 함량 결과는 아래 도 2 내지 4에 나타낸 것처럼, 75 내지 80㎍/mL 범위에 포함된다.
<표 1>
Figure pat00001
또한, 핑거루트와 초두구의 열수추출물(복합기능성 소재)의 효과를 검증하였다.
마우스 대식세포인 RAW264.7 세포를 이용하여 염증억제 효과 실험을 진행 하여 아래 도 5에 나타내었다. 아래 도 5에 나타낸 것처럼, RAW264.7 세포에 대한 복합 기능성 소재의 독성여부를 판단하기 위해서 MTT Assay를 실행한 결과 RAW264.7 세포에 대한 세포독성은 나타나지 않는 것을 확인 할 수 있었다.
또한, 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 LPS에 의한 RAW264.7 세포의 염증 활성을 억제할 수 있는지 확인하여 아래 도 6에 나타내었다.
아래 도 6에 나타낸 것처럼, RAW264.7 세포에 LPS를 처리하여 염증을 유발시킨 후 복합 기능성 소재를 농도 의존적으로 처리하여 NO(Nitric oxide) 생성 실험과 Western blot 실험을 진행 한 결과, 농도 의존적으로 NO 생성이 줄어드는 것을 확인할 수 있었으며 염증반응에 중요한 역할을 하는 COX-2 및 iNOS 단백질의 발현이 억제되는 것을 확인 할 수 있었다.
또한, 아래 도 7에 나타낸 것처럼, Real-time PCR assay를 통해 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 COX-2와 iNOS의 mRNA에 영향을 미치는지를 확인한 결과 핑거루트와 초두구의 열수추출물은 LPS에 의해 증가된 COX-2와 iNOS의 mRNA level을 감소시키는 것을 확인할 수 있었다.
또한, 아래 도 8에 나타낸 것처럼, 핑거루트와 초두구의 열수추출물에 의해 pro-inflammatory cytokine들의 생성이 억제되는지 알아보기 위해 Real-time PCR assay를 실시한 결과 TSLP, TNF-α, IL-6의 mRNA의 level이 감소하는 것을 확인할 수 있었다.
또한, 아래 도 9에 나타낸 것처럼, 핑거루트와 초두구의 열수추출물의 in vitro 환경에서의 활성산소 제거 및 세포내 활성산소 제거 능력을 알아보기 위하여 DPPH assay를 실시한 결과 1 mg/ml의 농도에서 활성산소 제거 능력이 65% 나타 나는 것을 확인 할 수 있었다(티트리 추출물 활성 산소 제거 능력의 97% 수준을 나타냄).
또한, 아래 도 10에 나타낸 것처럼, 활성산소 제거 검증 방법인 ABTs assay를 시행한 결과 1mg/ml의 농도에서 44% 활성산소 제거 능력을 보이는 것을 확인 할 수 있었다(티트리 추출물 보다 더 높은 능력을 보임).
또한, 아래 도 11에 나타낸 것처럼, 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 세포내에서 활성 산소에 의해 발생하는 DNA damage를 억제 하는지 검증하기 위해 RAW264.7 세포에 핑거루트와 초두구의 열수추출물을 전처리 하고 LPS(2ug/ml)로 활성 산소를 유발한 이후 대표적 산화적 DNA 손상 마커단백질인 4-Hydroxynonenal(4-HNE)와 8-hydroxy deoxyguanosine (8-OHdG)을 immunofluorescence 기법을 이용하여 측정한 결과, 핑거루트와 초두구의 열수추출물을 함께 처리한 세포에서 8-OHdG 및 4-HNE의 단백질 level이 감소하는 양상을 나타내는 것을 확인 할 수 있었으며, 이는 복합기능성 소재가 세포에 가해지는 산화적 DNA damage를 억제한다는 것임을 알 수 있었다.
또한, 멜라닌의 생성 능력이 뛰어난 것으로 알려진 B16F10(마우스 흑색종) 세포를 이용하여 복합 기능성 소재가 미백 효능을 가지고 있는지를 검증 하였다.
또한, B16F10 세포에 대한 핑거루트와 초두구의 열수추출물의 독성여부를 판단하기 위해서 MTT Assay를 실행한 결과 B16F10 세포에 대한 핑거루트와 초두구의 열수추출물의 세포독성은 나타나지 않는 것을 확인 할 수 있었다.
또한, 아래 도 12에 나타낸 것처럼, 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 Tyrosinase의 활성에 영향을 미치는지를 알아보기 위하여 Tyrosinase inhibition assay를 실시한 결과 1mg/ml의 농도에서 Tyrosinase의 활성을 48% 억제하는 효과를 나타내는 것을 알 수 있다(상지추출물의 Tyrosinase 활성억제 효과의 약 85% 효과를 나타냄).
또한, 아래 도 13에 나타낸 것처럼, 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 멜라닌 생성에 영향을 나타내는지를 확인하기 위해 멜라닌 함량 assay를 시행한 결과 복합기능성 소재 1mg/ml의 농도에서 멜라닌 생성을 약 33% 정도 억제하는 것을 확인 할 수 있었다(상지추출물의 멜라닌 합성 저해 효과의 약 92% 수준을 나타냄).
또한, 아래 도 14에 나타낸 것처럼, 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 Tyrosinase gene family 단백질의 발현과 mRNA Level에 영향을 나타내는지를 알아보기 위해 Western Blot 과 Real-time RT-PCR 실험을 진행 한 결과 복합기능성 소재는 Tyrosinase gene family 단백질의 발현을 억제 하며 mRNA Level 또한 억제하는 현상을 볼 수 있어 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 미백 작용 기전에 효과가 있다는 것을 알 수 있다.
또한, 아래 도 15에 나타낸 것처럼, 핑거루트와 초두구의 열수추출물의 주름 완화 효과를 기전을 검증하기 위해 사람 섬유아세포인 CCD-986sk를 이용하여 실험 을 진행 하였다.
또한, 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 CCD-986sk 세포에 독성을 나타내는지를 확인하기 위해 MTT Assay를 시행한 결과 독성을 나타내지 않는 것을 알 수 있었다.
CCD-986sk-MMP9-luciferase 세포를 이용하여 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 MMP9의 활성에 영향을 나타내는지를 확인하기 위하여 Luciferase Assay를 시행한 결과 1mg/ml의 농도에서 40% 활성을 억제하는 것을 확인 할 수 있었다(빈랑자추출물 활성 억제 효과의 98%수준을 나타냄).
또한, 아래 도 16에 나타낸 것처럼, 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 MMP-9 단백질의 발현에 영향을 나타내는지를 확인하기위해 Western Blot을 시행한 결과 MMP-9 발현을 저하시키는 것을 알 수 있었다.
또한, 아래 도 17에 나타낸 것처럼, 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 콜라겐 합성에 영향을 나타내는지를 판단하기 위해서 ELAISA kit를 이용하여 콜라겐 합성량을 측정한 결과 Control에 비하여 콜라겐 합성을 증가 시키는 것을 알 수 있었다(빈랑자 추출물의 콜라겐 합성 증가 효과와 동일한 수준을 나타냄).
또한, 엘라스타제 활성 감소가 피부의 탄력감소 및 주름생성에 있어 중요한 역할을 하는점에 주목하여 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 엘라스타제의 활성 감소에 영향을 미치는 지를 확인하기 위해 Elastase Activity Assay를 시행한 결과 핑거루트와 초두구의 열수추출물은 엘라스타제 활성을 45% 감소시키는 것을 알 수 있었다(빈랑자 추출물의 엘라스타제 활성 감소 효과의 86% 수준을 나타냄).
또한, 본 발명에 따른 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물을 액정유화 크림의 제형으로 제조하는 경우에는 아래 표 2에 나타낸 성분을 혼합하여 제조되는데, 핑거루트와 초두구의 열수추출물(복합기능성 소재)의 함량 결정을 위해 0.1% 단위로 첨가하여 2%까지 첨가한 제형을 체크하고, 2.5%, 3.0%, 3.5%, 4.0%, 4.5%, 5.0%까지의 고함량 제형에 대해서도 안정성 및 자극도 여부를 체크하였다.
{이때, 유화온도는 75℃(Part A, B:75ㅀC, Part D:상온)이며, Homogenize Speed:3,500rpm, 유화시간:3분, Part C:40℃에서 혼합, Homogenize Speed:1,500 rpm 1 분, part D 첨가 후 35℃ 까지 냉각 후 24시간 숙성의 과정으로 제조하였다.}
<표 2>
Figure pat00002
또한, 본 발명에 따른 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물은 상기 아래 표 3에 기재된 성분으로 이루어진 미스트에 적용할 수도 있다.
<표 3>
Figure pat00003
또한, 본 발명에 따른 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물은 상기 아래 표 4에 기재된 성분으로 이루어진 마스크팩에 적용할 수도 있다.
<표 4>
Figure pat00004
따라서, 본 발명에 따른 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물은 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 함유되어 Cardarmonin, GABA 및 MMP-9이 함유되기 때문에, 우수한 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물을 제공한다.

Claims (3)

  1. 핑거루트와 초두구의 열수추출물이 함유되는 것을 특징으로 하는 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물.
  2. 청구항 1에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 GABA 100㎍/mL, Cardamonin 75 내지 80㎍/mL 및 MMP-9 45 내지 55ng/mL가 함유되는 것을 특징으로 하는 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물.
  3. 청구항 1 또는 2에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 크림, 미스트, 선스틱 및 마스크팩으로 이루어진 그룹에서 선택된 하나의 제형으로 제공되는 것을 특징으로 하는 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물.
KR1020210112205A 2021-08-25 2021-08-25 염증, 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 화장료 조성물 KR20230030689A (ko)

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR101342485B1 (ko) 2012-02-29 2013-12-17 미원상사주식회사 트리펩타이드 및 이를 함유하는 노화방지, 주름개선, 미백 및 항염효능의 화장료 조성물
KR102025633B1 (ko) 2017-04-27 2019-10-04 명지대학교 산학협력단 시쿠아사 종자 오일 및 이를 포함하는 피부개선용 화장료 조성물

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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