KR20230024772A - 5-하이드록실퍼퍼럴(5-hmf)을 유효성분으로 포함하는 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품, 보조사료 사료첨가제 조성물 - Google Patents
5-하이드록실퍼퍼럴(5-hmf)을 유효성분으로 포함하는 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품, 보조사료 사료첨가제 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20230024772A KR20230024772A KR1020210106926A KR20210106926A KR20230024772A KR 20230024772 A KR20230024772 A KR 20230024772A KR 1020210106926 A KR1020210106926 A KR 1020210106926A KR 20210106926 A KR20210106926 A KR 20210106926A KR 20230024772 A KR20230024772 A KR 20230024772A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- hmf
- intestinal
- inflammation
- composition
- feed
- Prior art date
Links
- NOEGNKMFWQHSLB-UHFFFAOYSA-N 5-hydroxymethylfurfural Chemical compound OCC1=CC=C(C=O)O1 NOEGNKMFWQHSLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 72
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 title claims abstract description 46
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 46
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 title claims abstract description 43
- 230000008944 intestinal immunity Effects 0.000 title claims abstract description 37
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 title claims abstract description 27
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 27
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 title claims abstract description 24
- 230000036541 health Effects 0.000 title claims abstract description 23
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 title claims description 9
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 title claims description 5
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 title description 23
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 title description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 28
- 230000003405 preventing effect Effects 0.000 claims abstract description 25
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 claims abstract description 19
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims description 24
- 239000006166 lysate Substances 0.000 claims description 21
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 claims description 20
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 claims description 16
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims description 14
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 claims description 11
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 10
- 102100038280 Prostaglandin G/H synthase 2 Human genes 0.000 claims description 7
- 108050003267 Prostaglandin G/H synthase 2 Proteins 0.000 claims description 6
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 6
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 claims description 6
- 239000006052 feed supplement Substances 0.000 claims description 5
- 230000006872 improvement Effects 0.000 claims description 3
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 claims description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 2
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 claims 1
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 claims 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 claims 1
- 230000000153 supplemental effect Effects 0.000 claims 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 10
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 abstract description 7
- 230000003870 intestinal permeability Effects 0.000 abstract description 7
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 abstract description 6
- 102000004162 Claudin-1 Human genes 0.000 abstract description 5
- 108090000600 Claudin-1 Proteins 0.000 abstract description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 abstract description 5
- 102000003940 Occludin Human genes 0.000 abstract description 4
- 108090000304 Occludin Proteins 0.000 abstract description 4
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 abstract description 2
- BLFLLBZGZJTVJG-UHFFFAOYSA-N benzocaine Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 BLFLLBZGZJTVJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 23
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 18
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 18
- KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N mesalamine Chemical compound NC1=CC=C(O)C(C(O)=O)=C1 KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 229960004963 mesalazine Drugs 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 13
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 12
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 12
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 11
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 11
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 11
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 10
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 10
- 229960002086 dextran Drugs 0.000 description 10
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 10
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 10
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 9
- 230000036269 ulceration Effects 0.000 description 9
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 8
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 7
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 7
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 6
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 4
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 3
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 210000004534 cecum Anatomy 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 230000006749 inflammatory damage Effects 0.000 description 3
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 3
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 3
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 3
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 3
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 2
- 206010007269 Carcinogenicity Diseases 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 2
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 239000006180 TBST buffer Substances 0.000 description 2
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 2
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 230000007670 carcinogenicity Effects 0.000 description 2
- 231100000260 carcinogenicity Toxicity 0.000 description 2
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 2
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 2
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- -1 fructose Chemical compound 0.000 description 2
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 210000002490 intestinal epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000009263 intestinal permeability test Methods 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical class O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 2
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 2
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 235000006491 Acacia senegal Nutrition 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 208000031648 Body Weight Changes Diseases 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 239000001512 FEMA 4601 Substances 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 239000004378 Glycyrrhizin Substances 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 101000725401 Homo sapiens Cytochrome c oxidase subunit 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000605127 Homo sapiens Prostaglandin G/H synthase 2 Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 206010028116 Mucosal inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000005141 Otitis Diseases 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 239000012083 RIPA buffer Substances 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-SEAGSNCFSA-N Rebaudioside A Natural products O=C(O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)[C@@]1(C)[C@@H]2[C@](C)([C@H]3[C@@]4(CC(=C)[C@@](O[C@H]5[C@H](O[C@H]6[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)[C@@H](O[C@H]6[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)(C4)CC3)CC2)CCC1 HELXLJCILKEWJH-SEAGSNCFSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 230000003266 anti-allergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003276 anti-hypertensive effect Effects 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 210000000436 anus Anatomy 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 230000004579 body weight change Effects 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012241 calcium silicate Nutrition 0.000 description 1
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 235000014171 carbonated beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000006356 dehydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000010217 densitometric analysis Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 208000019258 ear infection Diseases 0.000 description 1
- 235000006694 eating habits Nutrition 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-UHFFFAOYSA-N entered according to Sigma 01432 Natural products C1CC2C3(C)CCCC(C)(C(=O)OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)C3CCC2(C2)CC(=C)C21OC(C1OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)OC(CO)C(O)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O HELXLJCILKEWJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N glycyrrhetinic acid glycoside Natural products C1CC(C2C(C3(CCC4(C)CCC(C)(CC4C3=CC2=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)C2C(C)(C)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N glycyrrhizic acid Natural products CC1(C)C(CCC2(C)C1CCC3(C)C2C(=O)C=C4C5CC(C)(CCC5(C)CCC34C)C(=O)O)OC6OC(C(O)C(O)C6OC7OC(O)C(O)C(O)C7C(=O)O)C(=O)O UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004949 glycyrrhizic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019410 glycyrrhizin Nutrition 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N glycyrrhizinic acid Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@@H]1C([C@H]2[C@]([C@@H]3[C@@]([C@@]4(CC[C@@]5(C)CC[C@@](C)(C[C@H]5C4=CC3=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)CC1)(C)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 description 1
- 150000002513 isocyanates Chemical class 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 1
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 1
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 230000007886 mutagenicity Effects 0.000 description 1
- 231100000299 mutagenicity Toxicity 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N pectic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 1
- 235000019203 rebaudioside A Nutrition 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 239000000892 thaumatin Substances 0.000 description 1
- 235000010436 thaumatin Nutrition 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- YFDSDPIBEUFTMI-UHFFFAOYSA-N tribromoethanol Chemical compound OCC(Br)(Br)Br YFDSDPIBEUFTMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 229960004914 vedolizumab Drugs 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
- A61K31/341—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide not condensed with another ring, e.g. ranitidine, furosemide, bufetolol, muscarine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/116—Heterocyclic compounds
- A23K20/121—Heterocyclic compounds containing oxygen or sulfur as hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/32—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the health of the digestive tract
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
5-(Hydroxymethyl)furfural(5-HMF)은 주로 식품을 굽는 과정에서주로 생성되며, 향미를 증가시키는 물질로 알려져 있다. 과거의 연구에서는 잠제적 위험을 가질 것으로 추정하였으나, 최근에는 5-HMF의 항산화, 항염증 등 다양한 효과가 보고되고 있다.
이번 발명에서는 5-HMF의 장관면역에 대한 효과와 기전를 in-vitro와 in-vivo 실험을 통하여 확인하였다.
Caco-2 세포을 이용한 5-HMF의 in-vitro 에서는 연접단백질인 오클루딘과 클라우딘1의 발현량의 증가와 p-ERK의 발현량의 감소가 농도 의존적으로 나타났다.
5-HMF의 in-vivo 실험에서 5-HMF의 투여가 장투과성을 현저하게 낮추는 효과를 확인하였다.
그리고 마우스 혈액에서 대표적인염증성사이토카인인 IL-6와 TNF-a의 발현을 측정한 결과도 5-HMF의 투여량 의존적으로 감소하였다.
또한 마우스의 장조직에서 western blot을 통해 측정한 COX2와 pERK의 발현도 5-HMF의 투여량에 따라 감소하는 것을 확인하였으며, 마우스의 장조직의 H&E 염색을 통한 조직병리학적 분석에서도 융모손상과 궤양의 정도도 5-HMF의 투여량 의존적으로 감소하였다.
이러한 실시예의 결과를 종합해 볼 때, 5-HMF가 마우스의 장관에서 염증을 완화하고, 장관벽을 강화시켰다. 이러한 결과를 바탕으로 5-HMF는 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품, 보조사료 사료첨가제 조성물로 활용할 것을 기대할 수 있다.
이번 발명에서는 5-HMF의 장관면역에 대한 효과와 기전를 in-vitro와 in-vivo 실험을 통하여 확인하였다.
Caco-2 세포을 이용한 5-HMF의 in-vitro 에서는 연접단백질인 오클루딘과 클라우딘1의 발현량의 증가와 p-ERK의 발현량의 감소가 농도 의존적으로 나타났다.
5-HMF의 in-vivo 실험에서 5-HMF의 투여가 장투과성을 현저하게 낮추는 효과를 확인하였다.
그리고 마우스 혈액에서 대표적인염증성사이토카인인 IL-6와 TNF-a의 발현을 측정한 결과도 5-HMF의 투여량 의존적으로 감소하였다.
또한 마우스의 장조직에서 western blot을 통해 측정한 COX2와 pERK의 발현도 5-HMF의 투여량에 따라 감소하는 것을 확인하였으며, 마우스의 장조직의 H&E 염색을 통한 조직병리학적 분석에서도 융모손상과 궤양의 정도도 5-HMF의 투여량 의존적으로 감소하였다.
이러한 실시예의 결과를 종합해 볼 때, 5-HMF가 마우스의 장관에서 염증을 완화하고, 장관벽을 강화시켰다. 이러한 결과를 바탕으로 5-HMF는 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품, 보조사료 사료첨가제 조성물로 활용할 것을 기대할 수 있다.
Description
본 발명은 5-하이드록실퍼퍼럴(5-HMF)를 유효성분으로 포함하는 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제기능을 가지는 약학 조성물 및 건강기능식품, 사료첨가제, 보조사료 조성물에 대한 것이다.
궤양성 대장염과 크론병은 대표적인 염증성대장염으로서 소화관의 염증과 조직손상을 동반하는 까다로운 질병이다. 궤양성 대장염과 크론병의 가장 큰 차이점은 궤양성 대장염는 주로 대장을 중심으로 증상을 나타내는 반면, 크론병은 구강 부터 항문까지 전체 소화기관에서 증상을 보인다. 염증성대장염의 근본적인 원인은 확실하지 않으나, 장내 미생물군 및 각종 대사물질에 대한 자가면역의 과잉반응으로 추정되고 있다.
염증성대장염의 주요 증상은 장 점막 및 표피층의 염증 및 조직손상이다. 이러한 염증과 조직손상은 장내세균, 유해물질 및 독소의 침투를 용이하게 하여, 염증성 사이토카인 생성을 증가시키는 악순환을 만들어 질환을 확대시키게 된다.
또한 염증성대장염의 원인은 유전적 요소가 강한 것으로 추정되지만, 유전적 요소외에도 식습관의 변화 및 인스턴트 식품의 증가와 같은 생황환경적 요인도 상당한 작용을 했을 것으로 추정된다.
일반적으로, 염증성대장염의 주요치료법으로는 약물치료와 수술요법이 병행되는데, 수술 후에도 다시 재발하는 빈도가 매우 높고, 수술 또한 상당히 복잡하고 어려워 환자들을 힘들게 하고 있다. 사용되는 약물로는 코티코스테로이드와 5-아마노살리실산와 같은 항염증제와 임플리시맙과 같은 관절염치료제가 대체치료ㅗ제로 사용되고 있으며, 최근 베돌리주맙이 항체지료제로 개발되고 있다. 그러나 이러한 약물은 점막 염증 등 관련된 증상을 감소시킬 수는 있으나, 장기적인 사용시 면역억제를 포함한 예상하지 못하는 부작용 때문에 제한적으로 사용되고 있다.
따라서, 장점막 및 상피세포의 변형을 치료하면서 안전하고 지속적으로 사용이 가능한 새로운 약를 개발할 필요가 있다.
5-하이드록실퍼퍼럴은 환원당의 탈수소화에 의해 형성된 유기물로 음식 및 허브등을 열처리하였을 때 얻어지는 물질로서 식품첨가제로 이용되는 향미물질이다. 과거의 연구결과에 따르면 5-하이드록실퍼퍼럴는 장점막, 피부에 대한 세포독성, 돌연변이유발, 발암가능성 등 잠제적 위험에 대해 보고되어 있었다. 그러나, 최근 연구들에서 항산화, 항염증, 항알러지, 항혈전, 항고혈압 효과에 긍정적인 영향을 미치는 것으로 보고되었다. 또한, 5-HMF의 급성독성 또는 발암가능성 및 돌연변이 유발에 대한 연구에서 안전성에 위험이 없는 것으로 보고되었다. 이러한 점은 질병 및 외부 영향으로 인해 산화가 부족해진 경우, 조직에 산화을 원활하게 하고 활성산소종에 의한 산화스트레스를 상쇄하여 염증을 감소시킨다. 5-HMF의 산화방응은 산소를 소비하고 수산화 또는 과산화 라디칼과 같은 활성산소종을 결합시키며, 헤모글로빈과 결합 구조는 산소와의 결합을 높여주어 드레파노사이트 빈혈의 치료법으로 개발되고 있다. 위에서 언급한 5-HMF의 긍정적인와 관련하여, 5-HMF는 현재 다양한 질환의 약물로 연구되고 있다.
이번 발명에서는 5-HMF의 장내면역에 대한 효과와 기전를 in-vitro와in-vivo 실험을 통하여 발명을 완성하였다.
Caco-2 세포을 이용한 5-HMF의 in-vitro실험에서는 연접단백질인 오클루딘과 클라우딘1의 발현의 증가와 p-ERK의 발형의 감소가 농도 의존적으로 나타났다.
5-HMF의 in-vivo실험을 위하여, 덱스트란황산염나트륨(DSS)를 마우스에게 경구투여 하여 만성 궤양성 대장염을 유도한 마우스 모델이 사용되었다. 결과는 5-HMF의 투여가 DSS 유도 궤양성대장염 마우스모델에서 마우스의 장투과성을 억제하고, 혈액에서 대표적인 염증성사이토카인인 IL-6와 TNF-α의 발현을 억제하였으며, COX2와 p-ERK의 발현도 억제하였다. 또한 장상피세포의 변형과 궤양도 감소한 결과를 얻었다.
이에 본 발명자들은 기존 장염 및 장관면역 기능개선의 성능을 획기적으로 개선하고, 장관면역 개선과 장관 염증 치료 및 개선 효과에 있어 우수한 천연물 유래 조성물을 개발하고자 예의 노력한 결과, 5-HMF가 장관 면역 개선과 장관 염증 치료 및 개선에 있어 뛰어난 효과를 가진다는 것을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
본 배경기술 부분에 기재된 상기 정보는 오직 본 발명의 배경에 대한 이해를 향상시키기 위한 것이며, 이에 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가지는 자에게 있어 이미 알려진 선행기술을 형성하는 정보를 포함하지 않을 수 있다.
본 발명의 목적은 장관 면역 개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품, 보조사료, 사료첨가제 조성물을 제공하는데 있다.
본 발명의 목적은 장관 면역 개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품 조성물을 제공하는데 있다. .
본 발명은 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과 갖는 5-HMF 및 이를 이용한 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품, 사료첨가제, 보조사료 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 5-HMF, 그 파쇄물 및 그 용해물은 기존 염증성대장염 및 장관면역개선을 위한 약학조성물 및 건강기능식품, 사료첨가제, 보조사료 조성물의 단점을 최소화하여 안전하면서도, 장관면역 저하 및 염증성 대장염으로 인해 초래되는 질환을 개선할 수 있다. 아울러, 효과적으로 연접단백질의 발현이 증가하게 하여 장관면역증강 및 개선에 있어 또한 유용하다.
도 1은 본 발명에 따른 5-하이드록실퍼퍼럴(5-HMF)의 화학식 구조도이다.
도 2는 본 발명에 따른 Caco-2세포를 이용한 in-vitro 실험에서 5-HMF의 염증성사이토카인인 IL-6의 발현량과 연접단백질인 오클루딘, 클라우딘1과 p-ERK의 발현량을 측정한 그림이다.
도 3는 본 발명위한 DSS유도 궤양성 대장염 마우스 모델의 확립을 체중변화를 통해 나타낸 그래프이다.
도 4은 본 발명에 따른 5-HMF가 DSS유도 궤양성 대장염 마우스 모델에서 5-HMF와 5-아미노살리실산(positive control)을 투여한 마우스 장조직의 사진과 장조직의 크립손상과 궤양정도를 나타낸 그림이다.
도 5는 본 발명에 따른 5-HMF가 DSS유도 궤양성 대장염 마우스 모델에서 5-HMF와 5-아미노살리실산(positive control)을 투여한 마우스 장조직의 조직병리학 평가점수를 나타낸 그래프이다.
도 6는 본 발명에 따른 5-HMF가 DSS유도 궤양성 대장염 마우스 모델에서 장투과성을 나타낸 그래프이다.
도 7은 수집된 실험용 마우스의 혈액내에 함유되어 있는 대표적인 염증성사이토카인 IL-6, TNF-a의 발현량을 각각의 군별로 측정한 그래프이다.
도 8은 수집된 실험용 마우스의 조직내 COX-2와 p-ERK를 웨스턴블롯을 통해 측정한 그래프이다.
도 2는 본 발명에 따른 Caco-2세포를 이용한 in-vitro 실험에서 5-HMF의 염증성사이토카인인 IL-6의 발현량과 연접단백질인 오클루딘, 클라우딘1과 p-ERK의 발현량을 측정한 그림이다.
도 3는 본 발명위한 DSS유도 궤양성 대장염 마우스 모델의 확립을 체중변화를 통해 나타낸 그래프이다.
도 4은 본 발명에 따른 5-HMF가 DSS유도 궤양성 대장염 마우스 모델에서 5-HMF와 5-아미노살리실산(positive control)을 투여한 마우스 장조직의 사진과 장조직의 크립손상과 궤양정도를 나타낸 그림이다.
도 5는 본 발명에 따른 5-HMF가 DSS유도 궤양성 대장염 마우스 모델에서 5-HMF와 5-아미노살리실산(positive control)을 투여한 마우스 장조직의 조직병리학 평가점수를 나타낸 그래프이다.
도 6는 본 발명에 따른 5-HMF가 DSS유도 궤양성 대장염 마우스 모델에서 장투과성을 나타낸 그래프이다.
도 7은 수집된 실험용 마우스의 혈액내에 함유되어 있는 대표적인 염증성사이토카인 IL-6, TNF-a의 발현량을 각각의 군별로 측정한 그래프이다.
도 8은 수집된 실험용 마우스의 조직내 COX-2와 p-ERK를 웨스턴블롯을 통해 측정한 그래프이다.
다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 일반적으로, 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.
본 발명의 상세한 설명 등에서 사용되는 주요 용어의 정의는 다음과 같다. 본 발명에서의 용어 "파쇄물"이란 5-HMF를 detergent 등을 이용한 화학적 방법 또는 물리적 방법 등으로 파쇄하여 얻은 것을 의미하며, 균주의 "용해물"이란 5-HMF를 물, 발효주정 등의 용액에 녹인 또는 희석시킨 것을 의미한다.
이하, 구체적으로 본 발명을 설명한다.
본 발명은 일 관점에서, 5-HMF에 관한 것이다. 본 발명의 5-HMF의 화학식은 C6H6O3로 표현되며, 분자량은 126.11로 주로 음식물을 굽는 과정에서 발생하는 향미물질이다.
본 발명의 일 실시예에서는, 본 발명에 따른 5-HMF가 장관 면역 개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가짐을 확인하였다. 먼저, 5-HMF가 장관 면역 개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가짐을 확인하기 위한 in-vitro실험에서 인간 대장세포 유래 Caco-2 세포를 이용하여 5-HMF가 염증성 사이토카인인 IL-6 발현을 측정한 결과 5-HMF의 농도 의존적으로 감소한 것을 확인 하였다. 또한 웨스턴 블롯을 이용한 COX-2와 p-ERK의 발현량 측정에서도 5-HMF의 농도 의존적으로 저감되는 것을 확인 하였다. 즉, 본 발명에 따른 5-HMF가 장관 면역 개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 약학 조성물 또는 건강기능식품, 사료첨가제, 보조사료 조성물로서 매우 유용한 것으로 확인되었다.
따라서, 본 발명은 다른 관점에서, 본 발명에 따른 5-HMF가 그 파쇄물 및 그 용해물 중 어느 하나 이상을 포함하는 장관 면역 개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 약학 조성물 또는 건강기능식품, 사료첨가제, 보조사료 조성물에 대한 것이다.
따라서, 본 발명은 다른 관점에서, 본 발명에 5-HMF 그 파쇄물 및 그 용해물 중 어느 하나 이상을 포함하는 약학 조성물 또는 건강기능식품, 사료첨가제, 보조사료 조성물에 대한 것이다. 이때, 본 발명에 따른 5-HMF 및 그 파쇄물이나 용해물은 사료첨가제 또는 보조사료의 형태로도 제공될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물 또는 건강기능식품, 사료첨가제, 보조사료 조성물은 다음에 의하여 제공될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물 또는 건강기능식품 조성물에 포함되는 성분은 상기 유효 성분 이외에 장관 면역 개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 약학 조성물 또는 건강기능식품, 사료첨가제, 보조사료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물 또는 건강기능식품 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 용액, 현탁액, 유탁액, 분말, 타정, 캡슐 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물 또는 건강기능식품, 사료첨가제, 보조사료 조성물은 단독 또는 중복하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 장관 면역 개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 약학 조성물 또는 건강기능식품, 사료첨가제, 보조사료 조성물과 중복하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 약학 조성물 또는 건강기능식품, 사료첨가제, 보조사료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 상태와 축종에 따라 그 사용량을 달리할 수 있다.
본 발명의 다른 실시 예에서는, 본 발명에 따른 덱스트란황산염나트륨(DSS)으로 만성 궤양성 대장염을 유도한 마우스 모델의 장조직을 이용하여 5-HMF의 장관 면역 개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 확인하였다. 이때 염증성대장염의 일반적인 치료제로 알려진 5-아미노살리실산을 양성대조군으로 사용하여 비교하였다. 마우스의 장조직을 염색하여 융모의 손상여부와 궤양의 정도를 측정한 결과, 5-HMF의 농도의존적으로 감소하여 5-HMF가 손상된 융모를 회복시키고, 궤양을 복구하는 것을 확인하였다.
본 발명의 다른 실시 예에서는, 본 발명에 따른 덱스트란황산염나트륨(DSS)으로 만성 궤양성 대장염을 유도한 마우스 모델과 FITC-덱스트란을 이용하여 장투과성을 측정함으로서 5-HMF의 장관 면역 개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 확인하였다. 이때 염증성대장염의 일반적인 치료제로 알려진 5-아미노살리실산을 양성대조군으로 사용하여 비교하였다. 일반적으로 장에 염증 또는 궤양이 발생하면, 장내의 다양한 물질이 혈관내로 보다 쉽게 흡수되는데 이는 또 다른 염증반응을 유발시키는 악순환을 하게 된다. 측정결과, 5-HMF가 장투과성을 급격하게 낮추는 효과를 확인하였으며 양성대조군보다 더 급격하게 낮추는 효과를 확인하였다.
본 발명의 다른 실시 예에서는, 본 발명에 따른 덱스트란황산염나트륨(DSS)으로 만성 궤양성 대장염을 유도한 마우스 모델의 혈액을 이용하여 5-HMF의 장관 면역 개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 확인하였다. 이때 염증성대장염의 일반적인 치료제로 알려진 5-아미노살리실산을 양성대조군으로 사용하여 비교하였다. 혈액내의 대표적인 염증성 사이토카인인 IL-6와 TNF-a의 발현량을 측정함으로서 유발된 염증의 정도를 간접적으로 확인한 결과, 5-HMF의 농도의존적으로 감소하여 IL-6와 TNF-a의 발현량이 줄어든 것을 확인하였다.
본 발명의 다른 실시 예에서는, 본 발명에 따른 덱스트란황산염나트륨(DSS)으로 만성 궤양성 대장염을 유도한 마우스 모델의 조직을 이용하여 5-HMF의 장관 면역 개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 확인하였다. 이때 염증성대장염의 일반적인 치료제로 알려진 5-아미노살리실산을 양성대조군으로 사용하여 비교하였다. 조직내의 대표적인 염증성 바이오마커인 COX-2와 p-ERK의 발현량을 웨스턴 블롯을 이용하여 측정함으로서 유발된 염증의 정도를 간접적으로 확인한 결과, 5-HMF의 농도 의존적으로 감소하여 COX-2와 p-ERK의 발현량이 줄어든 것을 확인하였다.
따라서, 본 발명은 또 다른 관점에서, 본 발명에 따른 5-HMF, 그 파쇄물 및 그 용해물 중 어느 하나 이상을 포함하는 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품, 보조사료 사료첨가제 조성물에 대한 것이다.
이때, 본 발명에 따른 5-HMF 및 그 파쇄물이나 용해물은 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품, 보조사료 사료첨가제의 형태로도 제공될 수 있다.
본 발명에 따른 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 보조사료 및 사료첨가제 조성물은 다음에 의하여 제공될 수 있다.
즉, 본 발명에 따르면, 상기 본 발명에 따른 5-HMF 및 그 파쇄물이나 용해물은 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 보조사료 및 사료첨가제 조성물의 전체 중량에 대해서 0.0001 ~ 99.0 중량% 함유될 수 있으며, 더욱 바람직하게는, 상기 5-HMF 등은 보조사료 및 사료첨가제 조성물의 전체 중량에 대해서 0.001 ~ 10 중량% 함유되는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 악취제거제 조성물에 포함되는 성분은 상기 유효 성분 이외에 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 보조사료 및 사료첨가제 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있다. 본 발명의 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 보조사료 및 사료첨가제 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 용액, 현탁액, 유탁액, 분말, 타정, 캡슐 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 보조사료 및 사료첨가제 조성물은 단독 또는 중복하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 보조사료 및 사료첨가제 조성물과 중복하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 보조사료 및 사료첨가제 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 가축의 상태 또는 축종에 따라 그 사용용량을 달리할 수 있다.
한편, 본 발명에 따른 약학 조성물은 다음에 의하여 제공될 수 있다.
즉, 본 발명에 따른 5-HMF, 그 파쇄물 및 그 용해물 중 어느 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 약학 조성물은 이들을 각각 단독으로 포함하거나 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하여 약학 조성물로 제공될 수 있으며, 상기 균주 등은 질환 및 이의 중증정도, 환자의 연령, 체중, 건강상태, 성별, 투여 경로 및 치료 기간 등에 따라 적절한 약학적으로 유효한 양으로 약학 조성물에 포함될 수 있다.
상기에서 "약학적으로 허용되는"이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 위장 장애, 현기증과 같은 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 조성물을 말한다. 상기 담체, 부형제 및 희석제의 예로는, 락토즈, 덱스트로즈, 슈크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리톤, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
상기 약학 조성물은 충진제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다. 또한 본 발명의 약학 조성물은 포유동물에 투여된 후 활성 성분의 신속, 지속 또는 지연된 방출을 제공할 수 있도록 당업계에 공지된 방법을 사용하여 제형화될 수 있다. 제형은 분말, 과립, 정제, 에멀젼, 시럽, 에어로졸, 연질 또는 경질 젤라틴 캅셀, 멸균 주사 용액, 멸균 분말의 형태일 수 있다.
아울러, 본원에서 '기능성 식품'이란, 일반 식품에 본 발명에 따른 균주 또는 그 파쇄물 및 그 배양물 중 어느 하나 이상을 첨가함으로써 식품의 기능성을 향상시킨 것을 의미한다.
본 발명의 기능성 식품은 약제, 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있다.
본 발명의 기능성 식품은, 예를 들어, 각종 식품류, 캔디, 초콜릿, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 보조 식품류 등이 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다.
이때, 식품 또는 음료 중의 상기 균주 등의 양은 일반적으로 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ml를 기준으로 0.02 내지 10 g, 바람직하게는 0.3 내지 1 g의 비율로 가할 수 있다.
본 발명의 건강 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 균주 등을 함유하는 것 외에 액체 성분에는 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등의 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등의 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 화합물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ml당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
실시예
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
5-HMF 및 시료의 준비
덱스트란황산염나트륨(DSS)는 MP바이오메디칼에서 구매하였으며, 5-HMF(5-(Hydroxymethyl)furfural)는 중국시안야연 바이오로지컬 테크널러지사에서 구매 되었다. 양성대조물질인 5-아미노살리실산(5-ASA)과 장투과성 실험을 위한 FTIC-덱스트란은 시그마알드리치사에서 구매되었다.
Caco-2 세포을 이용한 In-vitro 실험
2-1. 5-HMF의 염증조절과 연접단백질의 발현를 in-vitro 발현를 통하여 확인하였다. 우선 5-HMF의 염증조절에 대해서는 Caco-2 세포에 리포폴리사카라이드(LPS)와 5-HMF를 농도별로 동시에 처리하여 Caco-2 세포에서 발현되는 대표적인 염증성사이토카인인 인터루킨-6(IL-6)의 발현을 측정하였다. IL-6을 측정하기 위해 Caco-2 세포을 3 x 105 셀/웰의 밀도로 24웰 프레이트에 각각 담았다.
24시간 동안 각 실험군에 LPS(100ng/ml)로 처리한 후 배양액에서 원심분리기를 이용하여 상등액를 수집하였다. Caco-2세포가 배양된 상등액에서 발현된 IL-6은 제조자의 실험방법에 따라 competitive enzyme immunoassay kit(R&D systems, Minneapolis, MN, U.S.A)로 측정되었다.
2-2. 또한 5-HMF의 연접단백질의 발현에 대해서는 Caco-2 세포에 5-HMF를 농도별로 처리하여 Caco-2 세포에서 발현되는 대표적인 연접단백질인 클라우딘1과 오클루딘의 발현량을 측정하였다.
웨스턴블럿을 위해 Caco-2 세포를 RIPA 버퍼용액에서 용해시키고 단백질 농도를 BCA analysis kit (Pierce)로 평가했다. 10ug의 단백질을 SDS-PAGE로 분획하고 제조자의 실험방식 (Bio-Rad)에 따라 polyvinylidene difluoride membrane으로 옮겼다.
TBST(10mMTris, pH8.0, 150mMNaCl, 0.5%Tween20)에서 3% BSA로 배양한 후, 막을 TBST로 한 번 세척하고 클라우딘1(1:1,000)에 대한 안티바디(Invitrogen,55- 9000), 오클루딘(1:1,000)(Invitrogen, 33-1,500), β-액틴(1:5,000)(Santacruz, sc-47778), 4℃에서 16시간 반응시켰다.
막을 10분 동안 5회 세척하고 horseradish peroxidase-conjugated anti-mouse or anti-rabbit antibodies의 1:5000 용액과 함께 2시간 동안 배양했다. ECL Western Blotting Detection Reagents (Amersham Pharmacia Biotech)를 사용하여 blot을 개발했으며, 밴드의 밀도 측정 분석은 ImageMaster ™ 2D Elite software, version 3.1(Amersham Pharmacia Biotech, Buckinghamshire, UK)을 사용하여 수행되었다.
DSS를 이용한 만성 궤양성대장염 유발 마우스 모델
적응기간 이후 표1의 절차에 따라 6개의 실험그룹(n=4/group)에 24마리의 마우스를 무작위로 분배하였다. 1주차에 그룹 1을 제외한 5개 그룹에 1.5%(w/v) DSS 농도의 물를 공급하여 만성 궤양성 대장염를 유도하였고, 2주차 및 3주차에는 DSS 투여 없이 회복기를 가졌다. 4주차부터 9주차까지 양성대조군에는 5-ASA를 그룹 4-6에는 5-HMF를 매일 1회 경구투여 하였으며, 4주차와 7주차에는 1주차의 유도기와 같은 방법으로 DSS를 공급하였다. DSS 투여기간을 제외한 모든 주와 모든 그룹에 동일한 양의 증류수와 사료를 공급하였다. DSS를 이용한 만성 궤양성대장염 유발 마우스 모델 실험을 진행하는 동안 마우스의 체중은 매일 기록되었다.
| 만성 궤양성 대장염 모델 | ||
| 유도기 : 3주 DSS 1.5% (w/v) | ||
| DSS | DSS | (음수 혼합투여) |
| 5-ASA | (경구투여) | |
| 5-HMF | (경구투여) | |
| 투여 | DSS | 3주(21일) |
| 5-ASA | 3주(21일) | |
| 5-HMF | 3주(21일) | |
| 그룹 | Group 1) D.W | 대조군 |
| Group 2) DSS | 음성대조군 | |
| Group 3) DSS+5-ASA | 양성대조군 5-ASA 5 ㎎/㎖ | |
| Group 4) DSS+5-HMF | 5-HMF 1 ㎎/㎖ | |
| Group 5) DSS+5-HMF | 5-HMF 5 ㎎/㎖ | |
| Group 6) DSS+5-HMF | 5-HMF 10 ㎎/㎖ | |
체혈 및 대장조직 수집
4-1. 마우스를 희생시키는 당일, 마우스의 체중을 측정하고, 마우스의 마취를 위하여 아보틴(2,2,2-Tribromoethanol)을 0.2 ㎖/10g 비율로 주사기(26G 1/2 inch)를 복강에 투여하였다. 마취된 마우스의 복부를 절개하고 후대정맥에서 약 0.6-1 ㎖을 채혈하여, 항응고제가 처리된 진공튜브(K2 EDTA tube, BD Medical, NJ, US)로 처리하여 보관하였다.
4-2. 혈액 채취 이후, 마우스의 대장조직을 잘라내고, 대장을 따라 맹장까지 유착된 지방과 다른 장기를 분리한 후 맹장을 포함하여 적출하였다. 적출된 대장은 전체 길이를 측정하고 기록하였다.
맹장을 제거한 대장의 상부에 주사기를 이용하여 PBS(pH 7.4)를 흘려 넣어 장내의 분변을 제거하였다. 대장의 하부에서 부터 상부까지 가위로 절개하여, 좌우로 펼친 뒤, PBS로 세척하였다.
세척된 대장조직은 세 부분으로 나누었으며, 상부는 H&E stain과 조직병리학적 평가를 위해 스위스롤 형태로로 만들고, 10% 포르말린에 담아 냉장 보관되었다. *?*중부와 하부는 웨스턴블롯을 위해을 마으크로튜브에 넣고 -80℃에 보관되었다.
대장조직의 조직병리학적 평가
10% 포르말린에 고정된 대장조직는 전처리를 거쳐 파라핀으로 임배딩블럭로 제작되었고, 마이크로툼을 이용하여 고정된 조직의 절편으로 만들어졌다. *?*제작된 대장조직의 절편은 H&E 염색 과정을 거쳐 분석용 시료로 제작되었고, 제작된 시료는 현미경을 사용하여 표2 의 기준에 따라 대장조직에서의 염증 및 융모손상 와 궤양의 정도가 점수로 평가되었다.
| 점수 | 융모손상 | 궤양단계 |
| 0 | Intact crypt | 0 foci of ulceration |
| 1 | Loss of basal 1/3 of crypt | 1-2 foci of ulceration |
| 2 | Loss of basal 2/3 of crypt | 3-4 foci of ulceration |
| 3 | Loss of entire crypt | Confluent or extensive ulceration |
| 4 | Change in epithelial surface caused by erosion | - |
| 5 | Confluent erosion | - |
장투과성 검사
형광아이소시오시아네티트(FITC)-덱스트란은 구형의 거대분자인 덱스트란에 형광물질을 결합시킨 물질로 일반적인 항태에서는 장관벽을 통과하여 혈액으로 흡수되지 못한다.
이러한 FITC-덱스트란의 특징을 이용하여 DSS로 유도된 염증에 의해 장관의 손상에 따라 FITC-덱스트란이 장관벽을 통과하여 혈액에 흡수된 양을 측정하였다. 마우스의 희생 4시간 전에 각 실험그룹의 마우스에게 10 mg/kg FITC-덱스트란을 g당 10 ul씩 경구투여하였다. 이후 희생에서 채취된 혈액은 원심분리기로 15분간 5,000 rpm으로 혈장을 분리하고, 실험전까지 냉장 보관하였다.
멸균 PBS와 FITC-덱스트란으로 250 ug/ml 용약과 멸균 PBS와 FITC-덱스트란을 섭취하지 않은 일반 혈장로 33% 일반혈장용액을 만들었다. 각각의 용액을 혼합하여 만든 FITC-덱스트란 기준(6.25 ug/ml, 3.125 ug/ml, 1.563 ug/ml, 0.781 ug/ml, 0.390 ug/ml, 0.195 ug/ml)과 각 실험그룹의 혈장를 96 웰 플레이트에 50 ul씩 담아 Tecan Spark plate reader (Tecan, Switzerland)에서 530 nm 파장으로 측정하였다.
혈액내이 염증성 바이오마커
혈액내의 대표적인 염증성 사이토카인인 IL-6, TNF-α의 발현을 측정하기 위하여 Mulitplex assay가 사용되었다. 사용된 kit는 Mouse High Sensitivity T Cell Magnetic Bead Panel (Merck Millipore Co., Cat. No. MHSTCMAG-70K-03,MA, USA)이며, 결과는 Luminex(Luminex, Austin, TX, USA)로 측정 되었으며, MFI(Median Fluorescence Intensity)값으로 제공되었다
냉동보관된 마우스의 혈장들은 실험 직전 녹여서 잘 섞은 후 원심분리기를 이용하여 상등액을 분리하고 사용되었다.
standard, blank, control은 각2회 측정하되었으며, 시료는 세 번을 측정하여 진행하였고, 결과값 계산에는 희석 배수와 세 번 측정된 값의 평균 값이 반영되었다.
마우스의 혈장과 bead-AbMixture의 반응은 4℃에서 철야으로 수행하였으며, 모든 과정은 kit 제조사의 실험방법에 따라 수행되었다. standard와 blank, control 은 혈장과 유사한 반응조건을 위해, kit 제공 혈장 메트릭스를 적용하였다.
마우스의 혈장내 각 analyte들은 특정 번호 bead에 붙어있는 해당 항체와 각각 독립적으로 반응하고, 검출항체와 2'(streptavidin-PE) 반응(sandwich assay) 결과로 각 analyte 양에 비례한 해당 bed 표면에 붙은 PE(Phycoerythrin)의 형광을 측정하였다.
standard 농도 별 반응 측정값(MFI)을계산 s/w 'MasterPlex QT 2010 (MiraiBio, Hitachi, CA, USA)'에서 best fit 방법으로 standard curve를 구하였으며, 계산된 standard curve내의 농도 recovery 차이가 너무 심한 point는 제거, 조정하여 최적의 standard curve를 구하였다.
대장 조직의 염증성 바이오마커
-80℃에 보관된 대장 조직를 해동한 뒤, 각각의 조직을 마이크로튜브에 넣었다.*?*여기에 해리 버퍼용액(RIPAbuffer, Phosphatase Inhibitor Coctail 2&3, PhenylMethylSulfonyl Fluoride,Aproteinin)를 70 ㎕씩 넣고 가위로 잘게 잘라주고 7일간의 냉장 보관하면서 조직을 해리시켰다. 이후 원심분리기(13,000rpm; 20 min; 0-4℃)를 이용하여 상등액을 분리하였고, 웨스턴 블롯을 통하여 대장 조직내의 대표적인 염증성 바이오 마커인 COX-2와 p-ERK의 발현량을 측정하였으며, 이때 상등액내 단백질의 정량은 브래드포드 실험에 의해 이루어 졌다.
이러한 결과로 미루어 5-HMF가 in-vitro와 in-vivo에서 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과가 있음을 확인하였다.
이상으로 본 발명의 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
부호 없음
Claims (7)
- 5-하이드록실퍼퍼럴(5-HMF)을 유효성분으로 포함하는 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 치료용 약학 조성물
- 5-하이드록실퍼퍼럴(5-HMF)을 유효성분으로 포함하는 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 건강기능식품 조성물
- 5-하이드록실퍼퍼럴(5-HMF)을 유효성분으로 포함하는 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 보조사료 및 사료첨가제 조성물
- 제1항, 제2항 또는 제3항 중 어느 한 항의 5-HMF, 그 파쇄물 및 그 용해물 중 어느 하나 이상을 포함하는 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 약학 조성물, 건강기능식품, 사료첨가제 및 보조사료 조성물
- 제 1 항에 있어서, 상기 조성물는 IL-6, TNF-a, COX-2 p-ERK 중 선택되는 1종 이상의 염증 유발 인자 발현을 억제하는, 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 조성물.
- 제 1 항에 있어서, 상기 조성물은 만성 대장염으로 인한 장 질환의 개선, 예방 또는 치료를 위한 것인, 만성 대장염 예방 또는 억제용 조성물.
- 제 6 항에 있어서, 상기 만성 대장염은 염증성 대장염(IBD)인, 만성적인 대장염증 반응 예방 또는 억제용 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020210106926A KR20230024772A (ko) | 2021-08-12 | 2021-08-12 | 5-하이드록실퍼퍼럴(5-hmf)을 유효성분으로 포함하는 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품, 보조사료 사료첨가제 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020210106926A KR20230024772A (ko) | 2021-08-12 | 2021-08-12 | 5-하이드록실퍼퍼럴(5-hmf)을 유효성분으로 포함하는 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품, 보조사료 사료첨가제 조성물 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20230024772A true KR20230024772A (ko) | 2023-02-21 |
Family
ID=85328286
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020210106926A KR20230024772A (ko) | 2021-08-12 | 2021-08-12 | 5-하이드록실퍼퍼럴(5-hmf)을 유효성분으로 포함하는 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품, 보조사료 사료첨가제 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20230024772A (ko) |
-
2021
- 2021-08-12 KR KR1020210106926A patent/KR20230024772A/ko not_active Application Discontinuation
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| TWI380823B (zh) | 脂聯素（Ａｄｉｐｏｎｅｃｔｉｎ）濃度上升劑 | |
| US10639320B2 (en) | Pharmaceutical composition comprising gold-containing agent for preventing or treating liver fibrosis or liver cirrhosis | |
| EP3560506A1 (en) | Pharmaceutical composition comprising indigo pulverata levis extract or fraction thereof as effective ingredient for preventing or treating inflammatory bowel disease | |
| KR20210002032A (ko) | 장관면역 조절을 위한 신규한 프로바이오틱 조성물 | |
| KR102084973B1 (ko) | 엔테로코커스 패칼리스를 유효성분으로 포함하는 대장염 예방 또는 치료용 조성물 | |
| JPWO2002072123A1 (ja) | 腫瘍又はヒト乳頭腫ウイルス性疾患の予防剤又は治療剤 | |
| JP2005154432A (ja) | ポリフェノールおよび／またはビタミンｃを含有するアセロラ処理物 | |
| US10286021B2 (en) | Composition for prevention or treatment of arthritis, containing Sargassum serratifolium extract as active ingredient | |
| KR20210044382A (ko) | 목장 원유 유래 엑소좀을 포함하는 골밀도 강화 또는 골다공증 치료용 조성물 | |
| WO2005074961A1 (ja) | 体脂肪調整剤 | |
| KR20170027914A (ko) | 황칠 추출물 또는 황칠액 발효대사체를 포함하는 통풍 예방 또는 치료용 조성물 | |
| US20160129057A1 (en) | Lactobacillus brevis g-101 strain and use thereof | |
| JP5526320B2 (ja) | 腸管保護剤 | |
| JP2010111646A (ja) | 潰瘍性大腸炎治療剤 | |
| KR20230024772A (ko) | 5-하이드록실퍼퍼럴(5-hmf)을 유효성분으로 포함하는 장관 면역개선과 위, 장관 염증 예방 및 억제효과를 가지는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품, 보조사료 사료첨가제 조성물 | |
| KR102348782B1 (ko) | 대추나무 뿌리 추출물을 포함하는 신장 질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR20190024786A (ko) | 오메가-3 지방산 함유 들기름, 토마토 추출물 및 파프리카 추출물을 혼합한 혼합물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
| WO2010087150A1 (ja) | 胃酸分泌抑制剤及びカリウムチャンネル阻害剤 | |
| JP5156298B2 (ja) | 筋肉細胞糖輸送促進作用組成物 | |
| KR20200000956A (ko) | 프로피오니바크테리움 후레우덴레이키, 이의 배양액 또는 이의 사균체를 유효성분으로 함유하는 장질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| RU2780346C1 (ru) | Терапевтический агент против коронавируса, включающий экстракт elaeocarpus sylvestris | |
| KR102523928B1 (ko) | 바실러스 서브틸리스 낫또 배양균체 추출물을 포함하는 기억력 개선용 조성물 | |
| EP4248957A1 (en) | Method for treating non-alcoholic steatohepatitis through co-administration of curcumin derivative and tgf-? receptor inhibitor | |
| KR102087662B1 (ko) | 4-[[4-[3-(사이클로프로필메톡시)-4-(디플루오로메톡시)페닐]-2-티아졸릴]아미노]페놀 화합물을 유효성분으로 포함하는 만성폐쇄성 폐질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| CN117440805A (zh) | 通过联合给药姜黄素衍生物和TGF-β受体抑制剂的非酒精性脂肪性肝炎的治疗方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E601 | Decision to refuse application |