KR20220163468A

KR20220163468A - 혈액학적 장애 및/또는 관련 질환을 치료 또는 예방하기 위한 15-hepe를 포함하는 조성물

Info

Publication number: KR20220163468A
Application number: KR1020227038593A
Authority: KR
Inventors: 존 클라이맥스; 모아예드 함자; 마르쿠스 바이스바흐; 데이비드 코글랜
Original assignee: 애피뮨 리미티드
Priority date: 2020-04-03
Filing date: 2020-04-03
Publication date: 2022-12-09
Also published as: CN115715192A; IL297114A; JP2023528562A; MX2022012404A; EP4125854A1; AU2020440809A1; WO2021197639A1; BR112022020012A2; CA3179158A1

Abstract

본 발명은 15-HEPE 또는 이의 조성물의 투여에 의해 혈액학적 장애를 치료 또는 예방하는 방법에 관한 것이다.

Description

혈액학적 장애 및/또는 관련 질환을 치료 또는 예방하기 위한 15-HEPE를 포함하는 조성물

본 출원은 일반적으로 15-HEPE를 포함하는 조성물, 및 이의 사용 방법에 관한 것이다.

서열 목록

본 발명은 EFS-웹을 통해 ASCII 형식으로 제출되고 본 명세서에 전체적으로 참고로 포함된 서열 목록을 포함한다. 2020년 4월 1일에 생성된 ASCII 사본은 명칭이 Sequence Listing 124318-8014.US00_ST25.txt이고, 크기가 3 킬로바이트이다.

혈액학적 장애는 적혈구 장애 및 혈전성향증을 포함한다. 적혈구 장애는 적혈구(RBC) 및 이의 산소 운반 분자의 생성, 수명, 및 형상에 영향을 미치는 병태의 부류이다. 이러한 병태는 폐로부터 신체의 나머지 부분으로의 산소의 운반을 억제한다. 혈전성향증은 정맥과 동맥에서 혈전이 생길 대상의 위험을 증가시키는 장애의 부류이다. 이 혈전은 혈관에서 떨어져 나와 혈류를 통해 장기로 이동하여 해당 장기로의 혈류를 방해하여 허혈을 유발할 수 있다. 이러한 병태는 뇌졸중 및/또는 폐색전증의 증가된 위험을 초래한다.

본 출원은 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE)을 포함하는 조성물 및 다양한 질환 및 장애의 치료에 이러한 조성물을 사용하는 방법에 관한 것이다.

일부 태양에서, 본 발명은 혈액학적 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈액학적 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.

일부 태양에서, 본 발명은 혈액학적 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈액학적 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

또 다른 태양에서, 본 발명은 혈액학적 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈액학적 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하며, 대상은 (a) 적혈구 수 증가; (b) 적혈구 분포 폭 감소; 및/또는 (c) 망상적혈구 수 감소 중 하나 이상을 나타낸다.

다양한 실시 형태에서, 혈액학적 장애는 유전성 용혈성 빈혈, 후천성 용혈성 빈혈, 판코니 빈혈, 철 결핍성 빈혈, 엽산 결핍, B12 결핍, 및 골수이형성 증후군으로 이루어진 군으로부터 선택된다.

일부 태양에서, 본 발명은 헤모글로빈 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 헤모글로빈 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.

다른 태양에서, 본 발명은 적혈구 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 적혈구 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 태양에서, 본 발명은 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

또 다른 태양에서, 본 발명은 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하며, 대상은 (a) 적혈구 수 증가; (b) 적혈구 분포 폭 감소; 및/또는 (c) 망상적혈구 수 감소 중 하나 이상을 나타낸다.

다양한 실시 형태에서, 혈액학적 장애, 헤모글로빈 장애, 및/또는 적혈구 장애는 유전성 용혈성 빈혈, 후천성 용혈성 빈혈, 판코니 빈혈, 철 결핍성 빈혈, 엽산 결핍, B12 결핍, 및 골수이형성 증후군으로 이루어진 군으로부터 선택된다.

또 다른 태양에서, 본 발명은 용혈성 빈혈의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 용혈성 빈혈을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 용혈성 빈혈은 유전성 용혈성 빈혈 또는 후천성 용혈성 빈혈이다. 다른 실시 형태에서, 후천성 용혈성 빈혈은 일차 감염에 이차적인 것으로, 의약으로부터, 혈액학적 악성종양으로부터, 자가면역 질환으로부터, 비기능항진증으로부터, 기계적 심장 판막의 배치 후에, 수혈 후에, 또는 이들의 조합으로 획득된다. 또 다른 실시 형태에서, 겸상 적혈구 질환 및 겸상 적혈구 빈혈은 겸상 적혈구 위기, 혈관-폐색 위기, 비장 격리, 또는 이들의 조합과 관련이 있다.

일부 실시 형태에서, 대상은 적혈구 수 증가, 적혈구 분포 폭 감소, 및 망상적혈구 수 감소를 나타낸다. 일부 태양에서, 본 발명은 혈전성향증 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈전성향증 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.

다른 태양에서, 본 발명은 혈전성향증의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈전성향증을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

다른 태양에서, 본 발명은 혈전성향증의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈전성향증을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하며, 대상은 (a) 프로트롬빈 시간 증가; (b) 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간 증가; 및/또는 (c) 피브리노겐 농도 감소 중 하나 이상을 나타낸다.

또 다른 태양에서, 본 발명은 정맥 혈전색전증의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 정맥 혈전색전증을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일 태양에서, 본 발명은 동맥 혈전증의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 동맥 혈전증을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

다른 태양에서, 본 발명은 색전증의 예방을 필요로 하는 대상에서 색전증을 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 대상은 프로트롬빈 시간 증가, 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간 증가, 및 피브리노겐 농도 감소를 나타낸다.

다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 유리산 형태, 에스테르화된 형태, 또는 염 형태이다. 또 다른 실시 형태에서, 에스테르화된 형태는 알킬 에스테르 형태 또는 트라이글리세라이드 형태이다. 일부 실시 형태에서, 15-HEPE는 15(S)-HEPE, 15(R)-HEPE, 또는 이들의 조합을 포함한다.

일부 실시 형태에서, 15-HEPE는 에틸 에스테르(15-HEPE EE)의 형태이거나, 15-HEPE는 광학 활성 에스테르(15(S)-HEPE EE)의 형태이다.

일부 실시 형태에서, 조성물은 약 10 mg 내지 약 10,000 mg의 15-HEPE를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 조성물은 약 1 g 내지 약 2 g의 15-HEPE를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 조성물은 약 2 g 이상의 15-HEPE를 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 조성물은 대상에게 체중 1 ㎏당 약 5 mg(약 5 mg/㎏), 약 50 mg/㎏, 약 250 mg/㎏ 또는 약 500 mg/㎏의 15-HEPE를 제공하도록 제형화된다. 다양한 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물에 존재하는 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 15-HEPE는 경구 투여된다. 다양한 실시 형태에서, 조성물은 1일 1 내지 8개의 캡슐로 투여된다.

도 1은 실시예 1에 기재된 연구 및 그의 지속기간의 개략도이다.
도 2는 실시예 1에 기재된 연구에 따른 동물의 체중 변화를 나타낸다.
도 3은 실시예 1에 기재된 연구에 따른 동물의 희생 당일 체중을 나타낸다.
도 4a 내지 도 4d는 실시예 1에 기재된 연구에 따른 희생 당일 동물의 신장 중량 및 신장 중량 대 체중 비를 나타낸다.
도 5는 실시예 1에 기재된 연구에 따른 동물에 대한 신장 하이드록시프롤린 함량을 나타낸다.
도 6a 내지 도 6g는 실시예 1에 기재된 연구에 따른 동물의 시리우스 레드(Sirius red) 염색을 나타낸다.
도 7은 실시예 1에 기재된 연구에 따른 동물의 시리우스 레드-포지티브 면적(%)을 도시하는 플롯을 나타낸다.
도 8a 내지 도 8d는 각각 실시예 1에 기재된 연구에 따른 동물의 α-SMA, TIMP-1, TGF-β 및 콜라겐 유형 1에 대한 유전자 발현 분석을 나타낸다.
도 9는 실시예 2에 기재된 연구 및 그의 지속기간의 개략도이다.
도 10은 실시예 2에 기재된 연구에 따른 동물의 체중 변화를 나타낸다.
도 11은 실시예 2에 기재된 연구에 따른 동물의 희생 당일 체중을 나타낸다.
도 12a 및 도 12b는 각각 실시예 2에 기재된 연구에 따른 희생 당일 동물의 간 중량 및 간 중량 대 체중 비를 나타낸다.
도 13은 실시예 2에 기재된 연구에 따른 동물의 혈청 ALT 수준의 변화를 나타낸다.
도 14는 실시예 2에 기재된 연구에 따른 동물의 혈청 총 빌리루빈 수준의 변화를 나타낸다.
도 15a 내지 도 15e는 실시예 2에 기재된 연구에 따른 동물의 시리우스 레드 염색 및 섬유증 영역을 나타낸다.
도 16은 실시예 2에 기재된 연구에 따른 동물의 시리우스 레드-포지티브 면적(%)을 도시하는 플롯을 나타낸다.
도 17a 내지 도 17d는 각각 실시예 2에 기재된 연구에 따른 동물의 α-SMA, TIMP-1, TGF-β 및 콜라겐 유형 1에 대한 유전자 발현 분석을 나타낸다.
도 18a 및 도 18b는 실시예 3에 기재된 연구에 따른 TGF-β 의 DS102(15-HEPE) 유도된 억제를 나타낸다.
도 18c 내지 도 18g는 각각 실시예 3에 기재된 연구에 따른 유형 I TGF-β 수용체, 유형 II TGF-β 수용체, 유형 III TGF-β 수용체, EGFR 및 카베올린-1의 막 전좌 및 분해에 대한 DS102 효과를 나타낸다.
도 19는 실시예 4에 기재된 연구 및 그의 지속기간의 개략도이다.
도 20은 실시예 4에 기재된 연구에 따른 환자의 기준선 지질체학 프로파일(baseline lipidomic profile)을 나타낸다.
도 21a 내지 도 21c는 각각 에펠류톤(Epeleuton)(15-HEPE) 및 위약을 투여 받은 환자에서 인슐린, 글루코스 및 유리 지방산 수준의 변화를 도시하는 플롯이다.
도 22a 및 도 22b는 각각 에펠류톤 및 위약을 투여 받은 환자에서 HOMA-IR 및 아피도-IR 수준의 변화를 도시하는 플롯이다.
도 23a 및 도 23b는 각각 환자의 평균 HbA1C 수준의 변화 및 에펠류톤 및 위약을 투여 받은 16주차에 HbA1C 수준이 6.5% 이상인 환자의 비율을 도시하는 플롯이다.
도 24a 및 도 24b는 각각 에펠류톤 및 위약을 투여 받은 환자의 지질 프로파일의 평균 변화 및 중앙값(%) 변화를 도시하는 플롯이다.
도 25a 내지 도 25c는 각각 에펠류톤 및 위약을 투여 받은 환자에서 콜레스테롤, 트라이글리세라이드, 및 VLDL-C 수준의 변화를 도시하는 플롯이다.
도 26은 DS102를 투여 받은 환자의 간독성 지질 프로파일의 변화를 도시하는 차트이다.
도 27은 OWL 간 케어 시험을 사용하여 투여 DS102가 NASH를 해결한다는 것을 검증하는 플롯이다.
도 28은 DS102 및 위약을 투여 받은 환자에서 CAP에 의한 간 지방 함량의 변화를 도시하는 플롯이다.
도 29a 내지 도 29c는 DS102 및 위약을 투여 받은 환자에서 염증성 및 전구섬유화(pro-fibrotic) 단백질 수준의 변화를 도시하는 차트이다.
도 30은 DS102 및 위약을 투여 받은 환자에서 NASH 발달 표적을 포함하는 단백질 발현의 변화를 도시하는 플롯이다.
도 31은 DS102 및 위약을 투여 받은 환자에서 염증성 및 전구섬유화 단백질의 감소를 도시하는 볼케이노 플롯(volcano plot)이다.
도 32는 DS102 및 위약을 투여 받은 환자에서 혈관 유착 분자의 변화를 도시하는 플롯이다.
도 33은 DS102 및 위약을 투여 받은 환자에서 심혈관 위험 단백질의 변화를 도시하는 플롯이다.
도 34는 DS102 및 위약을 투여 받은 환자에서 케모카인의 변화를 도시하는 플롯이다.
도 35는 DS102 및 위약을 투여 받은 환자에서 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원의 변화를 도시하는 플롯이다.
도 36a 및 도 36b는 DS102 및 위약을 투여 받은 환자에서 ALP 수준의 감소를 도시하는 플롯이다.
도 37은 15-HEPE 에틸 에스테르 최저 혈장 상대 농도의 박스플롯이다.
도 38a 내지 도 38c는 각각 15(S)-HEPE EE 및 위약을 투여 받은 래트에서 적혈구 수, 적혈구 분포 폭, 및 망상적혈구 수의 평균 변화 및 표준 편차를 도시하는 막대 그래프이다.
도 39a 내지 도 39c는 각각 15(S)-HEPE EE 및 위약을 투여 받은 래트에서 프로트롬빈 시간, 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간, 및 피브리노겐 농도의 평균 변화 및 표준 편차를 도시하는 막대 그래프이다.

본 발명은 다양한 형태로 구현될 수 있지만, 본 개시내용은 본 발명의 예시로서 간주되어야 하고 본 발명을 예시된 특정 실시 형태로 제한하려는 것은 아님을 이해하면서 여러 실시 형태의 하기 설명이 이루어진다. 제목은 단지 편의상 제공되며 본 발명을 어떠한 방식으로든 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 임의의 제목 아래에 예시된 실시 형태는 임의의 다른 제목 아래에 예시된 실시 형태와 조합될 수 있다.

달리 명시적으로 표시되지 않는 한, 본 출원에 명시된 다양한 정량적 값에서의 수치의 사용은 언급된 범위 내의 최솟값 및 최댓값이 모두 단어 "약"이 선행하는 것처럼 근사치로서 언급된다 이러한 방식으로, 언급된 값으로부터의 약간의 변화가 명시된 값과 실질적으로 동일한 결과를 달성하는 데 사용될 수 있다. 또한, 범위의 개시는 언급된 최솟값과 최댓값 사이의 모든 값뿐만 아니라 이러한 값에 의해 형성될 수 있는 임의의 범위를 포함하는 연속적인 범위로서 의도된다. 인용된 수치를 임의의 다른 인용된 수치로 나눔으로써 형성될 수 있는 임의의 모든 비(및 임의의 이러한 비의 범위)가 또한 본 명세서에 개시된다. 따라서, 당업자는 많은 이러한 비, 범위 및 비의 범위가 본 명세서에 제시된 수치로부터 명확하게 유도될 수 있고; 모든 경우에, 이러한 비, 범위 및 비의 범위는 본 발명의 다양한 실시 형태를 나타낸다는 것을 인식할 것이다.

달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에 사용되는 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 분야의 당업자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본 명세서에 기재된 것과 유사하거나 동등한 방법 및 재료가 본 발명의 실시에 사용될 수 있지만, 적합한 방법 및 재료가 하기에 기재된다. 본 명세서에 언급된 모든 간행물, 특허 출원, 특허 및 다른 참고문헌은 그 전체가 명백하게 참고로 포함된다. 상충되는 경우, 정의를 포함하는 본 명세서가 우선할 것이다. 또한, 본 명세서에 기재된 재료, 방법 및 예는 단지 예시적인 것이며 제한하려는 의도가 아니다.

정의

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "15-HEPE"는 15-하이드록시-에이코사-5Z,8Z,11Z,13E,17Z-펜타엔산이다. 때때로 15-OHEPA라고도 지칭되는 15-HEPE는 당업계에 공지된 방법에 따라 에이코사펜타엔산("EPA", 에이코사-5,8,11,14,17-펜타엔산 또는 20:5n-3), 오메가-3 지방산으로부터 합성될 수 있다. 예를 들어, 15-HEPE는 효소 15-리폭시게나제에 대한 EPA의 노출에 의해 합성될 수 있다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "15-HEPE"는 그의 유리산 형태의 15-HEPE(예를 들어, 15-하이드록시-에이코사-5Z,8Z,11Z,13E,17Z-펜타엔산) 및/또는 약제학적으로 허용가능한 에스테르, 접합체 또는 이의 염, 또는 이들 중 임의의 것의 혼합물을 지칭한다. 15-HEPE의 유도체가 대신 사용될 수 있지만, 이는 15-HEPE의 하이드록시 기가 부재하는 임의의 유도체 화합물을 포함하지 않는다. 일부 실시 형태에서, 15-HEPE는 유리산 형태로 사용된다. 대안적으로, 약제학적으로 허용가능한 에스테르 또는 15-HEPE의 염이 본 발명에 사용된다. 일부 실시 형태에서, 15-HEPE는 메틸 에스테르, 에틸 에스테르, 또는 메틸 에스테르와 에틸 에스테르의 조합과 같은 C_1-4 알킬 에스테르의 형태이다. 또 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 글리세라이드(예를 들어, 다이글리세라이드 또는 트라이글리세라이드)의 형태이다. 또 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 에틸 에스테르(본 명세서에서 E-15-HEPE, 15-HEPE EE, 또는 에틸-15-HEPE로도 지칭됨)의 형태이다.

15-HEPE는 키랄 분자이고 (S)- 또는 (R)-거울상 이성질체 형태, 또는 라세미 혼합물로서 사용될 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 "15-HEPE"는 입체특이성에 대한 제한 없이 모든 이러한 형태를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 (S) 형태: 15(S)-하이드록시-(5Z,8Z,11Z,13E,17Z)-에이코사펜타엔산 또는 (R) 형태: 15(R)-하이드록시-(5Z,8Z,11Z,13E,17Z)-에이코사펜타엔산을 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 15-HEPE EE는 (S) 형태: 15(S)-HEPE EE를 포함한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "DS102"는 15-HEPE, 15-HEPE EE, 15-HEPE를 포함하는 조성물, 15-HEPE EE를 포함하는 조성물, 또는 15-HEPE와 15-HEPE EE를 포함하는 조성물을 지칭한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "에펠류톤"은 15-HEPE, 15-HEPE EE, 15-HEPE를 포함하는 조성물, 15-HEPE EE를 포함하는 조성물, 또는 15-HEPE와 15-HEPE EE를 포함하는 조성물을 지칭한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 질환, 장애 또는 병태를 "치료하는" 또는 그의 "치료"는 적어도 부분적으로: (1) 질환, 장애 또는 병태를 억제하는 것, 즉, 질환, 장애 또는 병태 또는 이의 임상 증상의 발달을 저지하거나 감소시키는 것; 또는 (2) 질환, 장애 또는 병태를 완화시키는 것, 즉, 질환, 장애 또는 병태 또는 이의 임상 증상의 퇴행을 야기하는 것을 포함한다. 주어진 질환 또는 장애와 관련하여 용어 "예방"은: 아무것도 일어나지 않았다면 질환 발달의 개시를 예방하는 것, 장애 또는 질환에 취약할 수 있지만 아직 장애 또는 질환을 갖는 것으로 진단되지 않은 대상에서 질환 또는 장애가 발생하는 것을 예방하는 것, 및/또는 이미 존재하는 경우 추가의 질환/장애 발달을 예방하는 것을 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "유효량"은 대상에 치료 효과를 부여하는 데 필요한 활성 조성물의 양을 지칭한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, "치료적 유효량"은 치료될 질환, 장애 또는 병태의 증상 중 하나 이상을 어느 정도 완화할 투여되는 충분한 양의 작용제 또는 화합물을 지칭한다. 일부 실시 형태에서, 그 결과는 질환의 징후, 증상 또는 원인의 감소 및/또는 완화, 또는 생물학적 시스템의 임의의 다른 원하는 변경이다. 예를 들어, 일부 실시 형태에서, 치료적 사용을 위한 "유효량"은 과도한 유해 부작용 없이 질환 증상의 임상적으로 유의한 감소를 제공하는 데 필요한 본 명세서에 개시된 바와 같은 화합물을 포함하는 조성물의 양이다. 일부 실시 형태에서, 임의의 개별 경우에 적절한 "유효량"은 용량 증가 연구와 같은 기술을 사용하여 결정된다. 용어 "치료적 유효량"은 예를 들어 예방적 유효량을 포함한다. 다른 실시 형태에서, 본 명세서에 개시된 화합물, 예컨대 화학식 (A) 또는 화학식 (I)의 화합물의 "유효량"은 과도한 유해 부작용 없이 원하는 약리학적 효과 또는 치료적 개선을 달성하는 데 효과적인 양이다. 다른 실시 형태에서, "유효량" 또는 "치료적 유효량"은 대상의 대사, 연령, 체중, 전반적인 상태(general condition), 치료되는 병태, 치료되는 병태의 중증도, 및 처방의의 판단의 변화로 인해 대상마다 달라지는 것으로 이해된다. 본 맥락에서 용어 "약제학적으로 허용가능한"은 해당 물질이 대상에 허용불가능한 독성 또는 조성물의 다른 성분과의 상호작용을 생성하지 않음을 의미한다.

본 발명의 다른 특징 및 이점은 하기 상세한 설명으로부터 명백해질 것이다.

조성물

일 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 활성 성분으로서 15-HEPE를 포함한다. 본 맥락에서 용어 "약제학적으로 허용가능한"은 해당 물질이 대상에 허용불가능한 독성 또는 조성물의 다른 성분과의 상호작용을 생성하지 않음을 의미한다.

일 실시 형태에서, 15-HEPE는 에스테르(본 명세서에서 E-15-HEPE, 에틸-15-HEPE, 또는 15-HEPE EE로도 지칭됨)의 형태이다. 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 15-HEPE의 C₁ ― C₅ 알킬 에스테르를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 15-HEPE 메틸 에스테르, 15-HEPE 프로필 에스테르, 또는 15-HEPE 부틸 에스테르를 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 광학 활성 15(S)-하이드록시-(5Z,8Z,11Z,13E,17Z)-에이코사펜타엔산을 포함한다. 이러한 이성질체는 상기에 논의된 임의의 형태로 사용될 수 있다.

다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 리튬 15-HEPE, 모노, 다이- 또는 트라이글리세라이드 15-HEPE, 또는 15-HEPE의 임의의 다른 에스테르 또는 염, 또는 15-HEPE의 유리산 형태를 포함한다.

다양한 실시 형태에서, 본 발명은 15-를 포함하는 약제학적 조성물, 예를 들어 경구 전달 가능한 조성물을 제공한다. 일 실시 형태에서, 조성물은 치료적 유효량의 15-HEPE를 포함한다. 일 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 약 0.1 중량% 내지 약 99 중량%, 약 1 중량% 내지 약 95 중량%, 약 5 중량% 내지 약 90 중량%의 15-HEPE를 포함한다. 본 명세서에 제공된 바와 같이, "조성물" 및 어구 "약제학적 조성물"은 상호교환적으로 사용된다.

일 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 적어도 약 70 중량%, 적어도 약 80 중량%, 또는 적어도 약 90 중량%의 15-HEPE를 포함한다. 일 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 적어도 약 50 중량%, 적어도 약 60 중량%, 적어도 약 70 중량%, 적어도 약 80 중량% 또는 적어도 약 90 중량%의 15-HEPE를 포함한다.

다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 약 1 mg 내지 약 10,000 mg, 약 25 mg 내지 약 7500 mg, 약 25 mg 내지 약 5000 mg, 약 50 mg 내지 약 5000 mg, 약 50 mg 내지 약 3000 mg, 약 75 mg 내지 약 2500 mg, 또는 약 100 mg 내지 약 1000 mg, 예를 들어 약 1 mg, 약 2 mg, 약 3 mg, 약 4 mg, 약 5 mg, 약 6 mg, 약 7 mg, 약 8 mg, 약 9 mg, 약 10 mg, 약 11 mg, 약 12 mg, 약 13 mg, 약 14 mg, 약 15 mg, 약 16 mg, 약 17 mg, 약 18 mg, 약 19 mg, 약 20 mg, 약 21 mg, 약 22 mg, 약 23 mg, 약 24 mg, 약 25mg, 약 50 mg, 약 75 mg, 약 100 mg, 약 125 mg, 약 150 mg, 약 175 mg, 약 200 mg, 약 225 mg, 약 250 mg, 약 275 mg, 약 300 mg, 약 325 mg, 약 350 mg, 약 375 mg, 약 400 mg, 약 425 mg, 약 450 mg, 약 475 mg, 약 500 mg, 약 525 mg, 약 550 mg, 약 575 mg, 약 600 mg, 약 625 mg, 약 650 mg, 약 675 mg, 약 700 mg, 약 725 mg, 약 750 mg, 약 775 mg, 약 800 mg, 약 825 mg, 약 850 mg, 약 875 mg, 약 900 mg, 약 925 mg, 약 950 mg, 약 975 mg, 약 1000 mg, 약 1025 mg, 약 1050 mg, 약 1075 mg, 약 1100 mg, 약 1025 mg, 약 1050 mg, 약 1075 mg, 약 1200 mg, 약 1225 mg, 약 1250 mg, 약 1275 mg, 약 1300 mg, 약 1325 mg, 약 1350 mg, 약 1375 mg, 약 1400 mg, 약 1425 mg, 약 1450 mg, 약 1475 mg, 약 1500 mg, 약 1525 mg, 약 1550 mg, 약 1575 mg, 약 1600 mg, 약 1625 mg, 약 1650 mg, 약 1675 mg, 약 1700 mg, 약 1725 mg, 약 1750 mg, 약 1775 mg, 약 1800 mg, 약 1825 mg, 약 1850 mg, 약 1875 mg, 약 1900 mg, 약 1925 mg, 약 1950 mg, 약 1975 mg, 약 2000 mg, 약 2025 mg, 약 2050 mg, 약 2075 mg, 약 2100 mg, 약 2125 mg, 약 2150 mg, 약 2175 mg, 약 2200 mg, 약 2225 mg, 약 2250 mg, 약 2275 mg, 약 2300 mg, 약 2325 mg, 약 2350 mg, 약 2375 mg, 약 2400 mg, 약 2425 mg, 약 2450 mg, 약 2475 mg, 약 2500 mg, 2525 mg, 약 2550 mg, 약 2575 mg, 약 2600 mg, 약 2625 mg, 약 2650 mg, 약 2675 mg, 약 2700 mg, 약 2725 mg, 약 2750 mg, 약 2775 mg, 약 2800 mg, 약 2825 mg, 약 2850 mg, 약 2875 mg, 약 2900 mg, 약 2925 mg, 약 2950 mg, 약 2975 mg, 약 3000 mg, 약 3025 mg, 약 3050 mg, 약 3075 mg, 약 3100 mg, 약 3125 mg, 약 3150 mg, 약 3175 mg, 약 3200 mg, 약 3225 mg, 약 3250 mg, 약 3275 mg, 약 3300 mg, 약 3325 mg, 약 3350 mg, 약 3375 mg, 약 3400 mg, 약 3425 mg, 약 3450 mg, 약 3475 mg, 약 3500 mg, 약 3525 mg, 약 3550 mg, 약 3575 mg, 약 3600 mg, 약 3625 mg, 약 3650 mg, 약 3675 mg, 약 3700 mg, 약 3725 mg, 약 3750 mg, 약 3775 mg, 약 3800 mg, 약 3825 mg, 약 3850 mg, 약 3875 mg, 약 3900 mg, 약 3925 mg, 약 3950 mg, 약 3975 mg, 약 4000 mg, 약 4025 mg, 약 4050 mg, 약 4075 mg, 약 4100 mg, 약 4125 mg, 약 4150 mg, 약 4175 mg, 약 4200 mg, 약 4225 mg, 약 4250 mg, 약 4275 mg, 약 4300 mg, 약 4325 mg, 약 4350 mg, 약 4375 mg, 약 4400 mg, 약 4425 mg, 약 4450 mg, 약 4475 mg, 약 4500 mg, 약 4525 mg, 약 4550 mg, 약 4575 mg, 약 4600 mg, 약 4625 mg, 약 4650 mg, 약 4675 mg, 약 4700 mg, 약 4725 mg, 약 4750 mg, 약 4775 mg, 약 4800 mg, 약 4825 mg, 약 4850 mg, 약 4875 mg, 약 4900 mg, 약 4925 mg, 약 4950 mg, 약 4975 mg, 약 5000 mg, 약 5025 mg, 약 5050 mg, 약 5075 mg, 약 5100 mg, 약 5125 mg, 약 5150 mg, 약 5175 mg, 약 5200 mg, 약 5225 mg, 약 5250 mg, 약 5275 mg, 약 5300 mg, 약 5325 mg, 약 5350 mg, 약 5375 mg, 약 5400 mg, 약 5425 mg, 약 5450 mg, 약 5475 mg, 약 5500 mg, 약 5525 mg, 약 5550 mg, 약 5575 mg, 약 5600 mg, 약 5625 mg, 약 5650 mg, 약 5675 mg, 약 5700 mg, 약 5725 mg, 약 5750 mg, 약 5775 mg, 약 5800 mg, 약 5825 mg, 약 5850 mg, 약 5875 mg, 약 5900 mg, 약 5925 mg, 약 5950 mg, 약 5975 mg, 약 6000 mg, 약 6025 mg, 약 6050 mg, 약 6075 mg, 약 6100 mg, 약 6125 mg, 약 6150 mg, 약 6175 mg, 약 6200 mg, 약 6225 mg, 약 6250 mg, 약 6275 mg, 약 6300 mg, 약 6325 mg, 약 6350 mg, 약 6375 mg, 약 6400 mg, 약 6425 mg, 약 6450 mg, 약 6475 mg, 약 6500 mg, 약 6525 mg, 약 6550 mg, 약 6575 mg, 약 6600 mg, 약 6625 mg, 약 6650 mg, 약 6675 mg, 약 6700 mg, 약 6725 mg, 약 6750 mg, 약 6775 mg, 약 6800 mg, 약 6825 mg, 약 6850 mg, 약 6875 mg, 약 6900 mg, 약 6925 mg, 약 6950 mg, 약 6975 mg, 약 7000 mg, 약 7025 mg, 약 7050 mg, 약 7075 mg, 약 7100 mg, 약 7125 mg, 약 7150 mg, 약 7175 mg, 약 7200 mg, 약 7225 mg, 약 7250 mg, 약 7275 mg, 약 7300 mg, 약 7325 mg, 약 7350 mg, 약 7375 mg, 약 7400 mg, 약 7425 mg, 약 7450 mg, 약 7475 mg, 약 7500 mg, 약 7525 mg, 약 7550 mg, 약 7575 mg, 약 7600 mg, 약 7625 mg, 약 7650 mg, 약 7675 mg, 약 7700 mg, 약 7725 mg, 약 7750 mg, 약 7775 mg, 약 7800 mg, 약 7825 mg, 약 7850 mg, 약 7875 mg, 약 7900 mg, 약 7925 mg, 약 7950 mg, 약 7975 mg, 약 8000 mg, 약 8025 mg, 약 8050 mg, 약 8075 mg, 약 8100 mg, 약 8125 mg, 약 8150 mg, 약 8175 mg, 약 8200 mg, 약 8225 mg, 약 8250 mg, 약 8275 mg, 약 8300 mg, 약 8325 mg, 약 8350 mg, 약 8375 mg, 약 8400 mg, 약 8425 mg, 약 8450 mg, 약 8475 mg, 약 8500 mg, 약 8525 mg, 약 8550 mg, 약 8575 mg, 약 8600 mg, 약 8625 mg, 약 8650 mg, 약 8675 mg, 약 8700 mg, 약 8725 mg, 약 8750 mg, 약 8775 mg, 약 8800 mg, 약 8825 mg, 약 8850 mg, 약 8875 mg, 약 8900 mg, 약 8925 mg, 약 8950 mg, 약 8975 mg, 약 9000 mg, 약 9025 mg, 약 9050 mg, 약 9075 mg, 약 9100 mg, 약 9125 mg, 약 9150 mg, 약 9175 mg, 약 9200 mg, 약 9225 mg, 약 9250 mg, 약 9275 mg, 약 9300 mg, 약 9325 mg, 약 9350 mg, 약 9375 mg, 약 9400 mg, 약 9425 mg, 약 9450 mg, 약 9475 mg, 약 9500 mg, 약 9525 mg, 약 9550 mg, 약 9575 mg, 약 9600 mg, 약 9625 mg, 약 9650 mg, 약 9675 mg, 약 9700 mg, 약 9725 mg, 약 9750 mg, 약 9775 mg, 약 9800 mg, 약 9825 mg, 약 9850 mg, 약 9875 mg, 약 9900 mg, 약 9925 mg, 약 9950 mg, 약 9975 mg, 또는 약 10,000 mg의 양으로 본 발명의 조성물에 존재한다.

일 실시 형태에서, 본 발명의 조성물에 존재하는 15-HEPE는 적어도 약 90 중량% 15-HEPE(용어 "15-HEPE"는 본 명세서에 정의되고 예시됨)를 포함한다. 15-HEPE 조성물은 훨씬 더 높은 순도의 15-HEPE, 예를 들어 적어도 약 95 중량% 15-HEPE 또는 적어도 약 97 중량% 15-HEPE를 포함할 수 있으며, 여기서 15-HEPE는 본 명세서에 제시된 바와 같은 15-HEPE의 임의의 형태이다. 15-HEPE의 순도는 본 명세서에 제공된 15-HEPE의 임의의 설명에 의해 추가로 정의될 수 있다(예를 들어, 불순물 프로파일).

상기는 약제학적 조성물 내의 15-HEPE의 양 및 이의 순도를 논의한다. 필수 지방산의 특성 및 이의 합성은 15-HEPE 조성물이 필수 지방산 대사 캐스케이드에서 다른 필수 지방산으로부터의 모이어티(moiety)를 포함할 수 있도록 한다.

일 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 알파 리놀렌산, 스테아리돈산, 도코사헥사엔산(DHA) 또는 이들의 유도체를 포함하는 다른 오메가-3 지방산을 약 10 중량% 이하, 약 9 중량% 이하, 약 8 중량% 이하, 약 7 중량% 이하, 약 6 중량% 이하, 약 5 중량% 이하, 약 4 중량% 이하, 약 3 중량% 이하, 약 2 중량% 이하, 약 1 중량% 이하, 또는 약 0.5 중량% 이하로 함유한다. 다른 실시 형태에서, 그러한 다른 오메가-3 지방산은 실질적으로 존재하지 않거나 전혀 존재하지 않는다.

다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 본 발명의 조성물에 존재하는 모든 지방산의 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99%, 또는 100%에 해당한다.

일 실시 형태에서, 본 발명의 조성물에 존재하는 15-HEPE의 염 형태는 적어도 90 중량%의, 15-HEPE의 염 형태를 포함한다. 15-HEPE의 염 형태를 함유하는 조성물은 훨씬 더 높은 순도, 예를 들어 적어도 91 중량%, 적어도 92 중량%, 적어도 93 중량%, 적어도 94 중량%, 적어도 95 중량%, 적어도 96 중량% 또는 적어도 97 중량%의, 15-HEPE의 염 형태를 포함할 수 있다.

15-HEPE의 합성으로부터의 일부 잔류 에이코사펜타엔산이 존재할 수 있다. 약 10 중량% 이하, 약 9 중량% 이하, 약 8 중량% 이하, 약 7 중량% 이하, 약 6 중량% 이하, 약 5 중량%이하, 약 4 중량% 이하, 약 3 중량% 이하, 약 2 중량% 이하, 약 1 중량% 이하, 또는 약 0.5 중량% 이하의 EPA가 존재할 수 있다. 대안적으로, 하이드록실 형태로 변형되지 않은 형태의 EPA는 실질적으로 없거나 전혀 없다.

일 실시 형태에서, 본 발명은 캡슐 쉘 내에 캡슐화된 15-HEPE 또는 이의 유도체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 일 실시 형태에서, 조성물은 1일 약 1 g, 약 2 g, 약 3 g, 약 4 g, 약 5 g, 약 6 g, 약 7 g, 약 8 g, 약 9 g, 또는 약 10 g의 15-HEPE E 또는 이의 유도체를 제공하기에 충분한 양으로 대상에게 투여된다. 일 실시 형태에서, 조성물은 1일 약 4 g 내지 약 8 g, 약 1 g 내지 약 2 g, 약 2 g 내지 약 4 g, 약 3 g 내지 약 8 g, 약 4 g 내지 약 6 g의 15-HEPE 또는 이의 유도체를 제공하기에 충분한 양으로 대상에게 투여된다. 일 실시 형태에서, 약 500 mg 내지 약 1 g의 15-HEPE 또는 이의 유도체가 캡슐 쉘 내에 캡슐화된다.

일 실시 형태에서, 캡슐 쉘은 젤라틴(예를 들어, 젤라틴 RXL 또는 더 낮은 분자량을 갖는 석회 골 젤라틴(lime bone gelatin))을 포함한다. 다른 실시 형태에서, 캡슐 쉘은, 젤라틴 패턴을 절단하고 이의 분자량을 효과적으로 감소시키기 위해 단백질 분해 효소에 의해 처리된 젤라틴 RXL을 포함한다. 다른 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 D-소르비톨 및 1,4-소르비탄의 15-HEPE 에스테르를 포함한다. 일 실시 형태에서, 캡슐 쉘은 (a) 젤라틴 및 (b) D-소르비톨 및 1,4-소르비탄 중 하나 이상으로부터 선택되는 가소제를 포함한다. 일 실시 형태에서, 젤라틴은 미국 특허 제7,485,323호에 기재된 바와 같으며 이는 본 명세서에 전체적으로 참고로 포함된다.

일 실시 형태에서, 가소제는 약 20% 내지 약 30%, 예를 들어 약 24% 내지 약 28%, 24% 또는 28% (건조 기준)의 양의 1,4-소르비탄을 포함하고, 약 30% 내지 약 50%, 예를 들어, 약 35% 내지 약 45%(건조 기준)의 D-소르비톨 함량을 포함한다.

일부 실시 형태에서, 캡슐은 경질 젤라틴 캡슐이다. 다른 실시 형태에서, 캡슐은 연질 젤라틴 캡슐이다.

일부 실시 형태에서, 캡슐 쉘은 변성 전분, 카라기난(예를 들어, 적조류의 추출물), 다이소듐 포스페이트, 글리세롤 및/또는 소르비톨을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 캡슐 쉘은 물을 추가로 포함한다. 일부 실시 형태에서, 캡슐 쉘은 약 65℃의 온도 및/또는 약 12의 pH까지 안정하다.

일부 실시 형태에서, 캡슐 쉘은 무취이고 중성색(예를 들어, 무색, 백색 또는 투명)을 갖는다.

일부 실시 형태에서, 캡슐 쉘은 글리세롤, 정제수, 이산화티타늄, 중쇄 트라이글리세라이드 및 레시틴을 추가로 포함한다.

추가적인 활성제

일 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 하나 이상의 추가 활성제(들)를 추가로 포함한다. 일 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 해당 제제에 대해 일반적으로 인식되는 치료적 유효량보다 적은 양의 추가 활성제를 포함한다. 일 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 해당 제제에 대해 일반적으로 인식되는 치료적 유효량과 동일하거나 그보다 많은 양의 추가 활성제를 포함한다. 추가 활성제가 사용되는 경우, 15-HEPE는 단일 투여량 단위로서 공동-제형화될 수 있거나, 조화, 병용 또는 동시 투여를 위해 2개 내지 복수의 투여량 단위로 제형화될 수 있다.

EPA 자체는 지방간 질환 및/또는 심혈관 질환을 치료하는 데 유익한 특성을 가지며, 대안적인 실시 형태에서 15-HEPE를 EPA와 조합하는 것이 가능하다.

일 실시 형태에서, 15-HEPE 및 1종 이상의 활성제(들)가 본 발명의 조성물에 존재하거나, 또는 약 1:1000 내지 약 1000:1, 약 1:500 내지 약 500:1, 약 1:100 내지 약 100:1, 약 1:50 내지 약 50:1, 약 1:25 내지 약 25:1, 약 1:10 내지 약 10:1, 약 1:5 내지 약 5:1, 약 1:4 내지 약 4:1 약 1:3 내지 약 3:1, 약 1:2 내지 약 2:1 또는 약 1:1의 15-HEPE: 추가 제제의 중량비로 공동-투여된다.

투여 형태

본 발명에 따라 사용하기 위한 조성물은 하나 이상의 투여량 단위로서 제형화될 수 있다. 본 명세서에서 용어 "용량 단위" 및 "투여량 단위"는 치료 효과를 제공하기 위해 단일 투여에 적합한 양의 치료제를 함유하는 조성물의 분량을 지칭한다. 이러한 투여량 단위는 1일 1회 내지 복수의 횟수(예를 들어, 1 내지 약 10회, 1 내지 8회, 1 내지 6회, 1 내지 4회 또는 1 내지 2회)로, 또는 치료 반응을 유도하기 위해 필요한 만큼 다회로 투여될 수 있다.

일부 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 경구로 전달 가능한 투여 형태 또는 투여량 단위의 형태이다. 적합한 투여 형태의 비제한적인 예는 정제(예를 들어, 현탁 정제, 바이트 현탁 정제, 급속 분산 정제, 츄어블 정제 등), 캐플릿(caplet), 캡슐(예를 들어, 연질 또는 경질 젤라틴 캡슐 또는 HPMC 캡슐), 로젠지, 사셰(sachet), 카셰(cachet), 트로키, 펠렛, 현탁액, 엘릭시르, 시럽 또는 경구 투여를 위해 합리적으로 적응된 임의의 다른 고체 투여 형태를 포함한다. 본 명세서에서 용어 "경구 전달" 및 "경구 투여"는 제제 또는 조성물이, 삼킬 수 있는지 여부에 관계없이, 치료 중인 대상의 입 안에 놓이는 임의의 형태의 전달을 포함한다. 따라서, 이는 협측 및 설하 투여뿐만 아니라 식도 투여를 포함한다.

대안적으로, 본 발명의 조성물은 또한 직장, 국소 또는 비경구(예를 들어, 피하, 근육내, 정맥내 및 피내 또는 주입) 전달을 위해 제형화될 수 있다.

본 발명의 조성물에서 15-HEPE의 양을 논의하는 데 있어서, 이는 여러 투여 형태에 걸쳐 분할될 수 있다. 경구 투여 크기에 대한 한계가 존재한다. 대상에게 1일 약 1 내지 약 4 g의 15-HEPE가 투여되는 경우, 이는 각각 약 1 g의 15-HEPE를 제공하는 최대 4개의 캡슐에 의해 투여될 수 있다.

본 발명의 조성물은 직접 섭취될 액체 투여 형태 또는 용량 단위의 형태일 수 있거나, 또는 섭취 전에 식품 또는 음료와 혼합될 수 있다. 적합한 액체 투여 형태의 비제한적인 예는 용액, 현탁액, 엘릭시르, 시럽, 액체 에어로졸 제형 등을 포함한다.

다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함한다. 본 명세서에서 용어 "약제학적으로 허용가능한 부형제"는 치료제를 대상에게 전달하기 위한 담체 또는 비히클로서 사용되거나 또는 조성물에 첨가되어 그의 취급 또는 저장 특성을 개선하거나 조성물의 단위 용량의 형성을 촉진하며, 조성물의 다른 성분들과 허용불가능한 독성 또는 상호작용을 생성하지 않는, 그 자체로 치료제가 아닌 임의의 물질을 의미한다. 단지 예로서, 본 발명에 따른 약제학적 조성물은 산화방지제, 계면활성제, 보존제, 향미제, 공용매, 점도 보조제, 현탁 보조제, 및 친유성 상 중 하나 이상을 포함할 수 있다.

일 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 하나 이상의 산화방지제, 예컨대 아스코르브산, 팔미트산, 아스코르빌 팔미테이트, α-토코페롤, 이데베논, 유비퀴논, 페룰산, 조효소 Q10, 라이코펜, 녹차, 카테킨, 에피갈로카테킨 3-갈레이트(EGCG), 녹차 폴리페놀(GTP), 실리마린, 커피베리, 레스베라트롤, 포도씨, 석류 추출물, 제니스텐, 피크노제놀, 나이아신아미드 등을 포함한다. 일 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 약 0.01 중량% 내지 약 2 중량%의 산화방지제, 예를 들어 약 0.01 중량%, 약 0.02 중량%, 약 0.03 중량%, 약 0.04 중량%, 약 0.05 중량%, 약 0.06 중량%, 약 0.07 중량%, 약 0.08 중량%, 약 0.09 중량%, 약 0.1 중량%, 약 0.11 중량%, 약 0.12 중량%, 약 0.13 중량%, 약 0.14 중량%, 약 0.15 중량%, 약 0.16 중량%, 약 0.17 중량%, 약 0.18 중량%, 약 0.19 중량%, 약 0.2 중량%, 약 0.21 중량%, 약 0.22 중량%, 약 0.23 중량%, 약 0.24 중량%, 약 0.25 중량%, 약 0.26 중량%, 약 0.27 중량%, 약 0.28 중량%, 약 0.29 중량%, 약 0.3 중량%, 약 0.31 중량%, 약 0.32 중량%, 약 0.33 중량%, 약 0.34 중량%, 약 0.35 중량%, 약 0.36 중량%, 약 0.37 중량%, 약 0.38 중량%, 약 0.39 중량%, 약 0.4 중량%, 약 0.41 중량%, 약 0.42 중량%, 약 0.43 중량%, 약 0.44 중량%, 약 0.45 중량%, 약 0.46 중량%, 약 0.47 중량%, 약 0.48 중량%, 약 0.49 중량%, 약 0.5 중량%, 약 0.51 중량%, 약 0.52 중량%, 약 0.53 중량%, 약 0.54 중량%, 약 0.55 중량%, 약 0.56 중량%, 약 0.57 중량%, 약 0.58 중량%, 약 0.59 중량%, 약 0.6 중량%, 약 0.61 중량%, 약 0.62 중량%, 약 0.63 중량%, 약 0.64 중량%, 약 0.65 중량%, 약 0.66 중량%, 약 0.67 중량%, 약 0.68 중량%, 약 0.69 중량%, 약 0.7 중량%, 약 0.71 중량%, 약 0.72 중량%, 약 0.73 중량%, 약 0.74 중량%, 약 0.75 중량%, 약 0.76 중량%, 약 0.77 중량%, 약 0.78 중량%, 약 0.79 중량%, 약 0.8 중량%, 약 0.81 중량%, 약 0.82 중량%, 약 0.83 중량%, 약 0.84 중량%, 약 0.85 중량%, 약 0.86 중량%, 약 0.87 중량%, 약 0.88 중량%, 약 0.89 중량%, 약 0.9 중량%, 약 0.91 중량%, 약 0.92 중량%, 약 0.93 중량%, 약 0.94 중량%, 약 0.95 중량%, 약 0.96 중량%, 약 0.97 중량%, 약 0.98 중량%, 약 0.99 중량%, 약 1 중량%, 약 1.1 중량%, 약 1.2 중량%, 약 1.3 중량%, 약 1.4 중량%, 약 1.5 중량%, 약 1.6 중량%, 약 1.7 중량%, 약 1.8 중량%, 약 1.9 중량%, 또는 약 2 중량%의 하나 이상의 산화방지제를 포함한다.

치료 방법

본 명세서에 개시된 조성물 및 제제는 혈액학적 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈액학적 장애의 치료 및/또는 예방에 사용될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 혈액학적 장애는 헤모글로빈 장애, 적혈구 장애, 용혈성 빈혈, 혈전성향증 장애, 정맥 혈전색전증, 동맥 혈전증, 색전증, 또는 이들의 조합이다. 일부 실시 형태에서, 본 방법은 대상에게 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE) 또는 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE)을 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.

본 명세서에 개시된 조성물 및 제형은 혈액학적 장애, 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애의 치료 및/또는 예방에 사용될 수 있다. 혈액학적 장애는 혈액 및 혈액 형성 장기에 영향을 미치는 병태의 부류를 지칭한다. 헤모글로빈 장애 및 적혈구 장애는 혈액학적 장애와 유사하지만, 헤모글로빈 장애 및 적혈구 장애는 둘 모두 더 좁은 부류의 장애를 정의한다. 구체적으로, 헤모글로빈 장애는 적혈구에서 산소 운반 단백질인 헤모글로빈의 결함을 지칭한다. 그리고 적혈구 장애는 적혈구 자체의 결함을 지칭한다. 혈액학적 장애, 헤모글로빈 장애 및 적혈구 장애의 위험 인자의 비제한적인 예는 적혈구 수 감소, 적혈구 분포 폭 증가 및 망상적혈구 수 증가를 포함한다. 혈액학적 장애, 헤모글로빈 장애 및 적혈구 장애의 비제한적인 예는 빈혈(영양성 혈청 및 비영양성 빈혈, 유전성 용혈성 빈혈, 예컨대 겸상 적혈구 질환, 겸상 적혈구 빈혈, β-지중해빈혈, 유전성 구상적혈구증, 후천성 용혈성 빈혈, 예컨대 감염, 의약, 혈액학적 악성종양, 자가면역 질환, 비기능항진증, 기계적 심장 판막, 및 수혈에 이차적인 것, 판코니 빈혈, 철 결핍성 빈혈), 혈액암(림프종, 백혈병, 및 골수종), 응고 결함(혈전성향증, 혈우병, 폰 빌레브란트 병, 및 혈소판 감소증), 엽산 결핍, B12 결핍, 및 골수이형성 증후군을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 겸상 적혈구 질환 및 겸상 적혈구 빈혈은 겸상 적혈구 위기, 혈관-폐색 위기 및/또는 비장 격리와 관련이 있다.

일부 실시 형태에서, 대상은 정상보다 적어도 10% 낮은, 정상보다 적어도 15% 낮은, 정상보다 적어도 20% 낮은, 정상보다 적어도 25% 낮은, 또는 정상보다 적어도 30% 낮은, 감소된 적혈구 수를 갖는다.

일부 실시 형태에서, 대상은 증가된 적혈구 분포 폭을 가지며, 여기서 적혈구는 크기가 약 15 내지 20%, 약 20 내지 25%, 약 25 내지 30%, 약 30 내지 35%, 또는 약 35 내지 40%만큼 변한다.

다른 실시 형태에서, 대상은 적혈구의 총량의 적어도 약 5%, 적혈구의 총량의 적어도 약 10%, 적혈구의 총량의 적어도 약 15%, 또는 적혈구의 총량의 적어도 약 20%의 증가된 망상적혈구 수를 갖는다.

일부 실시 형태에서, 대상은 약 135 mg/dL 내지 약 2000 mg/dL, 예를 들어 약 135 mg/dL 내지 약 500 mg/dL, 약 150 mg/dL 내지 약 500 mg/dL, 약 200 mg/dL 내지 약 499 mg/dL, 약 200 mg/dL 내지 <500 mg/dL, 약 300 mg/dL 내지 약 1800 mg/dL, 약 500 mg/dL 내지 약 1500 mg/dL, 약 500 mg/dL 내지 약 <2000 mg/dL, 또는 약 500 mg/dL 내지 약 2000 mg/dL의 상승된 기준선 트라이글리세라이드 수준을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 대상은 약 50 mg/dL 내지 약 2000 mg/dL, 예를 들어 약 50 mg/dL 내지 약 1500 mg/dL, 약 80 mg/dL 내지 약 1500 mg/dL, 약 50 mg/dL 내지 약 190 mg/dL, 약 80 mg/dL 내지 약 190 mg/dL, 약 190 mg/dL 내지 약 250 mg/dL, 약 250 mg/dL 내지 약 1400 mg/dL, 약 500 mg/dL 내지 약 1200 mg/dL, 약 500 mg/dL 내지 약 1500 mg/dL, 약 500 mg/dL 내지 약 <2000 mg/dL, 또는 약 500 mg/dL 내지 약 2000 mg/dL의 공복 기준선 트라이글리세라이드 수준을 갖는다. 일 실시 형태에서, 대상은 약 80 mg/dL 내지 약 1400 mg/dL의 공복 기준선 트라이글리세라이드 수준을 갖는다. 일 실시 형태에서, 대상 또는 대상 그룹은 약 50 mg/dL, 약 55 mg/dL, 약 60 mg/dL, 약 65 mg/dL, 약 70 mg/dL, 약 75 mg/dL, 약 80 mg/dL, 약 85 mg/dL, 약 90 mg/dL, 약 95 mg/dL, 약 100 mg/dL, 약 105 mg/dL, 약 110 mg/dL, 약 115 mg/dL, 약 120 mg/dL, 약 125 mg/dL, 약 130 mg/dL, 약 135 mg/dL, 약 140 mg/dL, 약 145 mg/dL, 약 150 mg/dL, 약 155 mg/dL, 약 160 mg/dL, 약 165 mg/dL, 약 170 mg/dL, 약 175 mg/dL, 약 180 mg/dL, 약 185 mg/dL, 약 190 mg/dL, 약 195 mg/dL, 약 200 mg/dL, 약 205 mg/dL, 약 210 mg/dL, 약 215 mg/dL, 약 220 mg/dL, 약 225 mg/dL, 약 230 mg/dL, 약 235 mg/dL, 약 240 mg/dL, 약 245 mg/dL, 약 250 mg/dL, 약 255 mg/dL, 약 260 mg/dL, 약 265 mg/dL, 약 270 mg/dL, 약 275 mg/dL, 약 280 mg/dL, 약 285 mg/dL, 약 290 mg/dL, 약 295 mg/dL, 약 300 mg/dL, 약 305 mg/dL, 약 310 mg/dL, 약 315 mg/dL, 약 320 mg/dL, 약 325 mg/dL, 약 330 mg/dL, 약 335 mg/dL, 약 340 mg/dL, 약 345 mg/dL, 약 350 mg/dL, 약 355 mg/dL, 약 360 mg/dL, 약 365 mg/dL, 약 370 mg/dL, 약 375 mg/dL, 약 380 mg/dL, 약 385 mg/dL, 약 390 mg/dL, 약 395 mg/dL, 약 400 mg/dL, 약 405 mg/dL, 약 410 mg/dL, 약 415 mg/dL, 약 420 mg/dL, 약 425 mg/dL, 약 430 mg/dL, 약 435 mg/dL, 약 440 mg/dL, 약 445 mg/dL, 약 450 mg/dL, 약 455 mg/dL, 약 460 mg/dL, 약 465 mg/dL, 약 470 mg/dL, 약 475 mg/dL, 약 480 mg/dL, 약 485 mg/dL, 약 490 mg/dL, 약 495 mg/dL, 약 500 mg/dL, 약 1000 mg/dL, 약 1100 mg/dL, 약 1200 mg/dL, 약 1300 mg/dL, 약 1400 mg/dL, 약 1500 mg/dL, 약 2000 mg/dL, 약 2500 mg/dL, 약 3000 mg/dL, 약 3500 mg/dL, 약 4000 mg/dL, 약 4500 mg/dL, 약 5000 mg/dL, 또는 약 5000 mg/dL 초과의 식후 또는 공복 기준선 트라이글리세라이드 수준 (또는 대상 그룹의 경우에 중앙값 기준선 트라이글리세라이드 수준)을 갖는다. 일부 실시 형태에서, 대상 또는 대상 그룹은 80 mg/dL 이상, 약 100 mg/dL 이상, 약 120 mg/dL 이상, 약 150 mg/dL 이상, 약 175 mg/dL 이상, 약 250 mg/dL 이상, 또는 약 500 mg/dL 이상, 예를 들어 약 190 mg/dL 내지 약 250 mg/dL, 약 80 mg/dL 내지 약 190 mg/dL, 약 250 mg/dL 내지 약 1400 mg/dL, 약 200 mg/dL 내지 약 500 mg/dL, 약 300 mg/dL 내지 약 1800 mg/dL, 약 500 mg/dL 내지 약 1500 mg/dL, 약 80 mg/dL 내지 약 1500 mg/dL, 약 80 mg/dL 내지 약 2000 mg/dL 미만, 약 80 mg/dL 내지 약 2000 mg/dL, 약 500 mg/dL 내지 약 2000 mg/dL 미만 또는 약 500 mg/dL 내지 약 2000 mg/dL의 식후 또는 공복 기준선 트라이글리세라이드 수준 (또는 대상 그룹의 경우에 중앙값 기준선 트라이글리세라이드 수준)을 갖는다.

또 다른 실시 형태에서, 대상은 적어도 약 100 mmHg, 적어도 약 115 mmHg, 적어도 약 120 mmHg, 적어도 약 125 mmHg, 적어도 약 130 mmHg, 적어도 약 135 mmHg, 적어도 약 140 mmHg, 적어도 약 145 mmHg, 적어도 약 150 mmHg, 적어도 약 155 mmHg, 적어도 약 160 mmHg, 적어도 약 165 mmHg, 또는 적어도 약 170 mmHg의 상승된 기준선 혈압을 갖는다.

일부 실시 형태에서, 대상은 적어도 약 100 mg/dL, 적어도 약 115 mg/dL, 적어도 약 120 mg/dL, 적어도 약 125 mg/dL, 적어도 약 130 mg/dL, 적어도 약 135 mg/dL, 적어도 약 140 mg/dL, 적어도 약 145 mg/dL, 적어도 약 150 mg/dL, 적어도 약 155 mg/dL, 적어도 약 160 mg/dL, 적어도 약 165 mg/dL, 또는 적어도 약 170 mg/dL의 상승된 기준선 공복 글루코스 수준을 갖는다.

일부 실시 형태에서, 대상은 약 60 mg/dL 미만, 약 55 mg/dL 미만, 약 50 mg/dL 미만, 약 45 mg/dL 미만, 약 40 mg/dL 미만, 약 35 mg/dL 미만, 약 30 mg/dL 미만, 약 25 mg/dL 미만, 약 20 mg/dL 미만, 약 15 mg/dL 미만, 약 10 mg/dL 미만, 또는 약 5 mg/dL 미만의 감소된 기준선 HDL-C 수준을 갖는다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 대상에서 혈액학적 질환을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 최대 약 8 g의 15-HEPE를 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 대상에서 혈액학적 질환을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 약 8 g의 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 혈액학적 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈액학적 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE) 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 대상에서 혈액학적 질환을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계 전에 대상이 혈액학적 질환에 대한 적어도 하나의 위험 인자를 갖는다는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 투여하는 단계 전에 대상의 기준선 적혈구 수, 적혈구 분포 폭 및/또는 망상적혈구 수를 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일 실시 형태에서, 대상은 적혈구 수 증가, 적혈구 분포 폭 감소, 및/또는 망상적혈구 수 감소를 나타낸다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 약 8 g의 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 혈액학적 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈액학적 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE) 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계 전에 대상이 혈액학적 질환에 대한 적어도 하나의 위험 인자를 갖는다는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 투여하는 단계 전에 대상의 기준선 적혈구 수, 적혈구 분포 폭 및/또는 망상적혈구 수를 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일 실시 형태에서, 대상은 적혈구 수 증가, 적혈구 분포 폭 감소, 및/또는 망상적혈구 수 감소를 나타낸다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 헤모글로빈 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 헤모글로빈 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE) 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 헤모글로빈 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 헤모글로빈 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE) 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계 전에 대상이 헤모글로빈 장애에 대한 적어도 하나의 위험 인자를 갖는다는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 투여하는 단계 전에 대상의 기준선 적혈구 수, 적혈구 분포 폭 및/또는 망상적혈구 수를 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일 실시 형태에서, 대상은 적혈구 수 증가, 적혈구 분포 폭 감소, 및/또는 망상적혈구 수 감소를 나타낸다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 적혈구 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 적혈구 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 적혈구 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 적혈구 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계 전에 대상이 적혈구 장애에 대한 적어도 하나의 위험 인자를 갖는다는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 투여하는 단계 전에 대상의 기준선 적혈구 수, 적혈구 분포 폭 및/또는 망상적혈구 수를 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일 실시 형태에서, 대상은 적혈구 수 증가, 적혈구 분포 폭 감소, 및/또는 망상적혈구 수 감소를 나타낸다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 혈액학적 장애, 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈액학적 장애, 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 혈액학적 장애, 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈액학적 장애, 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계 전에 대상이 혈액학적 장애, 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애에 대한 적어도 하나의 위험 인자를 갖는다는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 위험 인자는 적혈구 수를 감소시키고/시키거나, 적혈구 분포 폭을 증가시키고/시키거나, 망상적혈구 수 증가를 감소시킨다. 일부 실시 형태에서, 대상은 적혈구 수 증가, 적혈구 분포 폭 감소 및/또는 망상적혈구 수 감소 중 하나 이상을 나타낸다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 혈액학적 장애, 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈액학적 장애, 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다. 다른 실시 형태에서, 혈액학적 장애, 헤모글로빈 장애, 및/또는 적혈구 장애는 유전성 용혈성 빈혈, 후천성 용혈성 빈혈, 판코니 빈혈, 철 결핍성 빈혈, 엽산 결핍, B12 결핍, 및 골수이형성 증후군으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계 전에 대상이 유전성 용혈성 빈혈, 후천성 용혈성 빈혈, 판코니 빈혈, 철 결핍성 빈혈, 엽산 결핍, B12 결핍, 및/또는 골수이형성 증후군에 대한 적어도 하나의 위험 인자를 갖는다고 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 투여하는 단계 전에 대상의 기준선 적혈구 수, 적혈구 분포 폭 및/또는 망상적혈구 수를 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일 실시 형태에서, 대상은 적혈구 수 증가, 적혈구 분포 폭 감소, 및/또는 망상적혈구 수 감소를 나타낸다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 용혈성 빈혈의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 용혈성 빈혈을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 용혈성 빈혈의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 용혈성 빈혈을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계 전에 대상이 용혈성 빈혈에 대한 적어도 하나의 위험 인자를 갖는다는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 위험 인자는 적혈구 수를 감소시키고/시키거나, 적혈구 분포 폭을 증가시키고/시키거나, 망상적혈구 수 증가를 감소시킨다. 일부 실시 형태에서, 대상은 적혈구 수 증가, 적혈구 분포 폭 감소 및/또는 망상적혈구 수 감소 중 하나 이상을 나타낸다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 용혈성 빈혈의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 용혈성 빈혈을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다. 일부 실시 형태에서, 용혈성 빈혈은 유전성 용혈성 빈혈 또는 후천성 용혈성 빈혈이다. 다른 실시 형태에서, 유전성 용혈성 빈혈은 겸상 적혈구 질환, 겸상 적혈구 빈혈, β-지중해빈혈, 및 유전성 구상적혈구증으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 실시 형태에서, 후천성 용혈성 빈혈은 감염, 의약, 혈액학적 악성종양, 자가면역 질환, 비기능항진증, 기계적 심장 판막, 및 수혈에 이차적인 것으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 다양한 실시 형태에서, 겸상 적혈구 질환 및 겸상 적혈구 빈혈은 겸상 적혈구 위기, 혈관-폐색 위기 및/또는 비장 격리와 관련이 있다. 일부 실시 형태에서, 대상은 투여 후에 적혈구 수 증가, 적혈구 분포 폭 감소, 및 망상적혈구 수 감소를 나타낸다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 용혈성 빈혈의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 용혈성 빈혈을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다. 일부 실시 형태에서, 용혈성 빈혈은 유전성 용혈성 빈혈 또는 후천성 용혈성 빈혈이다. 다른 실시 형태에서, 유전성 용혈성 빈혈은 겸상 적혈구 질환, 겸상 적혈구 빈혈, β-지중해빈혈, 및 유전성 구상적혈구증으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계 전에 대상이 선천성 용혈성 빈혈 또는 후천성 용혈성 빈혈에 대한 적어도 하나의 위험 인자를 갖는다는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 후천성 용혈성 빈혈은 감염, 의약, 혈액학적 악성종양, 자가면역 질환, 비기능항진증, 기계적 심장 판막, 및 수혈에 이차적인 것으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 다양한 실시 형태에서, 겸상 적혈구 질환 및 겸상 적혈구 빈혈은 겸상 적혈구 위기, 혈관-폐색 위기 및/또는 비장 격리와 관련이 있다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 투여하는 단계 전에 대상의 기준선 적혈구 수, 적혈구 분포 폭 및/또는 망상적혈구 수를 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일 실시 형태에서, 대상은 적혈구 수 증가, 적혈구 분포 폭 감소, 및/또는 망상적혈구 수 감소를 나타낸다.

본 명세서에 개시된 조성물 및 제형은 혈전성향증 장애의 치료 및/또는 예방에 추가로 사용될 수 있다. 혈전성향증 장애는 혈전증의 위험을 증가시키는 비정상적인 혈액 응고를 특징으로 하는 병태의 부류를 지칭한다. 혈전성향증 장애의 위험 인자의 비제한적인 예는 감소된 프로트롬빈 시간, 감소된 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간, 및 증가된 피브리노겐 농도를 포함한다.

일부 실시 형태에서, 대상은 정상보다 적어도 10% 낮은, 정상보다 적어도 15% 낮은, 정상보다 적어도 20% 낮은, 정상보다 적어도 25% 낮은, 또는 정상보다 적어도 30% 낮은, 감소된 프로트롬빈 시간을 갖는다.

일부 실시 형태에서, 대상은 정상보다 적어도 10% 낮은, 정상보다 적어도 15% 낮은, 정상보다 적어도 20% 낮은, 정상보다 적어도 25% 낮은, 또는 정상보다 적어도 30% 낮은, 감소된 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간을 갖는다.

일부 실시 형태에서, 대상은 정상보다 적어도 10% 낮은, 정상보다 적어도 15% 낮은, 정상보다 적어도 20% 낮은, 정상보다 적어도 25% 낮은, 또는 정상보다 적어도 30% 낮은, 증가된 피브리노겐 농도를 갖는다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 혈전성향증 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈전성향증 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE) 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 혈전성향증 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈전성향증 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계 전에 대상이 혈전성향증 장애에 대한 적어도 하나의 위험 인자를 갖는다는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 위험 인자는 감소된 프로트롬빈 시간, 감소된 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간, 및/또는 증가된 피브리노겐 농도이다. 일부 실시 형태에서, 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계 후에 대상은 프로트롬빈 시간 증가, 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간 증가 및/또는 피브리노겐 농도 감소 중 하나 이상을 나타낸다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 정맥 혈전색전증의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 정맥 혈전색전증을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE) 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 정맥 혈전색전증의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 정맥 혈전색전증을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계 전에 대상이 정맥 혈전색전증에 대한 적어도 하나의 위험 인자를 갖는다는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 위험 인자는 감소된 프로트롬빈 시간, 감소된 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간, 및/또는 증가된 피브리노겐 농도이다. 일부 실시 형태에서, 대상은 프로트롬빈 시간 증가, 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간 증가, 및 피브리노겐 농도 감소 중 하나 이상을 나타낸다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 동맥 혈전증의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 동맥 혈전증을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE) 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 동맥 혈전증의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 동맥 혈전증을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계 전에 대상이 동맥 혈전증에 대한 적어도 하나의 위험 인자를 갖는다는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 위험 인자는 감소된 프로트롬빈 시간, 감소된 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간, 및/또는 증가된 피브리노겐 농도이다. 일부 실시 형태에서, 대상은 프로트롬빈 시간 증가, 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간 증가, 및 피브리노겐 농도 감소 중 하나 이상을 나타낸다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 색전증의 예방을 필요로 하는 대상에서 색전증을 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE) 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 색전증의 예방을 필요로 하는 대상에서 색전증을 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계 전에 대상이 색전증 발생에 대한 적어도 하나의 위험 인자를 갖는다는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시 형태에서, 적어도 하나의 위험 인자는 감소된 프로트롬빈 시간, 감소된 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간, 및/또는 증가된 피브리노겐 농도이다. 일부 실시 형태에서, 대상은 프로트롬빈 시간 증가, 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간 증가, 및 피브리노겐 농도 감소 중 하나 이상을 나타낸다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 대상에서 내피 기능이상을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 최대 약 8 g의 15-HEPE를 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 대상에서 내피 기능이상을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 약 8 g의 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 대상에서 세포 스트레스 아폽토시스를 치료하거나, 예방하거나 또는 감소시키는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 대상은 아폽토시스와 관련된 마커, 예컨대 Bcl-2 패밀리로부터의 단백질, 카스파제의 활성화된 단편 및/또는 절단된 PARP-1의 감소를 나타낸다.

일부 실시 형태에서, 본 발명은 염증을 치료, 예방 및/또는 감소시키는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 대상은 T 세포 활성화, B 세포 활성화 및/또는 주화성의 감소를 나타낸다.

본 명세서에 개시된 조성물 및 제형은 심혈관 질환 또는 장애의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다. 일 실시 형태에서, 심혈관 질환 또는 장애는 이상지혈증, 고지혈증, 고콜레스테롤혈증, 고중성지방혈증, 일차 고콜레스테롤혈증, 일차 고지혈증, 일반 일차 고지혈증, 일반 고콜레스테롤혈증, 가족성 고지혈증, 가족성 일차 고지혈증, 가족성 고콜레스테롤혈증, 가족성 고중성지방혈증, 가족성 복합 고지혈증, 가족성 결핍성 아포지질단백질 b-100, 이차 고지혈증, 혼합 고지혈증, 심혈관 질환, 잔여 심혈관 위험, 죽상경화판 형성/진행의 예방, 미세혈관 질환, 거대혈관 질환, 죽상동맥경화증, 관상동맥 죽상경화증, 이완기 기능장애, 심혈관 위험의 감소, 주요 관상동맥 사건의 예방, 주요 유해 관상동맥 사건의 예방, 허혈성 사건의 예방, 심혈관 사건의 이차/일차 예방, 심혈관 사망의 예방, 심근경색증, 뇌졸중, 협심증, 정상적인 내피 기능의 회복, 당뇨병, 진성 당뇨병, 인슐린 저항성, 고인슐린혈증, 고혈당증, 이상혈당증, 혈당 제어의 유도, 내당능 장애, 및 공복 혈당 장애로부터 선택된다. 미세혈관 질환의 비제한적인 예는 망막병증, 신장병증, 및 신경병증을 포함한다. 거대혈관 질환의 비제한적인 예는 뇌졸중, 말초 혈관 질환, 사지 허혈, 및 심장 질환을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 대상은 비알코올성 간 질환, 담즙정체성 간 질환, 신장 질환 또는 대사 증후군을 갖는다. 심혈관 질환의 임의의 전술한 예는 또한 심장대사 질환의 비제한적인 예를 지칭할 수 있다.

일 실시 형태에서, 본 발명은 대상에서 심혈관 질환을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 투여하는 단계를 포함한다.

일 실시 형태에서, 본 발명은 대상에서 심혈관 질환을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.

다른 실시 형태에서, 본 발명은 당뇨병(예를 들어, 유형 I 또는 유형 II)을 갖는 대상에서 혈액학적 장애를 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 투여하는 단계 전에 대상이 당뇨병을 갖는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 대상의 중량당 약 10 mg(약 10 mg/㎏), 약 50 mg/㎏, 약 250 mg/㎏ 또는 약 500 mg/㎏의 15-HEPE를 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

다른 실시 형태에서, 본 발명은 당뇨병(예를 들어, 유형 I 또는 유형 II)을 갖는 대상에서 혈액학적 장애를 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계 전에 대상이 당뇨병을 갖는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 대상의 중량당 약 10 mg(약 10 mg/㎏), 약 50 mg/㎏, 약 250 mg/㎏ 또는 약 500 mg/㎏의 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

다른 실시 형태에서, 본 발명은 심혈관 질환을 갖는 대상에서 혈액학적 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 투여하는 단계 전에 대상이 심혈관 질환을 갖는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 대상의 중량당 약 10 mg(약 10 mg/㎏), 약 50 mg/㎏, 약 250 mg/㎏ 또는 약 500 mg/㎏의 15-HEPE를 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

다른 실시 형태에서, 본 발명은 심혈관 질환을 갖는 대상에서 혈액학적 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계 전에 대상이 심혈관 질환을 갖는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 대상의 중량당 약 10 mg(약 10 mg/㎏), 약 50 mg/㎏, 약 250 mg/㎏ 또는 약 500 mg/㎏의 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

다른 실시 형태에서, 본 발명은 고혈압을 갖는 대상에서 혈액학적 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE를 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE를 투여하는 단계 전에 대상이 고혈압을 갖는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시 형태에서, 대상은 적어도 약 130 mmHg, 적어도 약 135 mmHg, 적어도 약 140 mmHg, 적어도 약 145 mmHg, 적어도 약 150 mmHg, 적어도 약 155 mmHg, 적어도 약 160 mmHg, 적어도 약 165 mmHg, 또는 적어도 약 170 mmHg의 고혈압을 갖는다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 약 10 mg/㎏, 약 50 mg/㎏, 약 250 mg/㎏ 또는 약 500 mg/㎏의 15-HEPE를 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

다른 실시 형태에서, 본 발명은 고혈압을 갖는 대상에서 혈액학적 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 상기 방법은 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계 전에 대상이 고혈압을 갖는다는 것을 결정하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시 형태에서, 대상은 적어도 약 130 mmHg, 적어도 약 135 mmHg, 적어도 약 140 mmHg, 적어도 약 145 mmHg, 적어도 약 150 mmHg, 적어도 약 155 mmHg, 적어도 약 160 mmHg, 적어도 약 165 mmHg, 또는 적어도 약 170 mmHg의 고혈압을 갖는다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 약 10 mg/㎏, 약 50 mg/㎏, 약 250 mg/㎏ 또는 약 500 mg/㎏의 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 대상에게 투여하는 단계를 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당한다.

본 명세서에 개시된 조성물 및 제형은 또한 심혈관 질환 및/또는 혈액학적 질환을 갖는 대상에서 사이토카인 및/또는 케모카인을 감소시키는 데 사용될 수 있다. 비제한적인 사이토카인 및/또는 케모카인은 α-평활근 작용)α-SMA), 메탈로펩티다제 억제제-1(TIMP-1), 형질전환 성장 인자 베타-β(TGF-β), 및 콜라겐 유형 1을 포함한다.

다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물로 치료할 때, 대상 또는 대상 그룹은 하기 결과들 중 하나 이상을 나타낸다:

(a) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 혈청 아미노트랜스퍼라제(ALT) 및/또는 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제(AST) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(b) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 빌리루빈(BUN) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(c) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 섬유증 면적의 증가 없음 또는 감소;

(d) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 공복 글루코스 수준의 증가 없음 또는 감소;

(e) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 인슐린 수준의 증가 없음 또는 감소;

(f) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 알칼리성 포스페이트(ALP) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(g) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 헤모글로빈 A1C(HbA1C) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(h) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 인슐린 저항성(HOMA-IR) 수준의 항상성 모델 평가의 증가 없음 또는 감소;

(i) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 지방 조직 인슐린 저항성(아디포-IR) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(j) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 총 콜레스테롤 수준의 증가 없음 또는 감소;

(k) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 트라이글리세라이드 수준의 증가 없음 또는 감소;

(l) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 다이글리세라이드 수준의 증가 없음 또는 감소;

(m) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 초저밀도 지질단백질 콜레스테롤(VLDL-C) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(n) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 렘넌트-유사 입자 콜레스테롤(remnant-like particle cholesterol, RLP-C) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(o) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 비고밀도 지질단백질 콜레스테롤(비-HDL-C) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(p) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 고밀도 지질단백질 콜레스테롤(HDL-C) 수준의 감소 없음 또는 증가;

(q) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 저밀도 지질단백질 콜레스테롤(LDL-C) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(r) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 신장 하이드록시프롤린 수준의 증가 없음 또는 감소;

(s) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 인터류킨-33(IL-33) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(t) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 인터류킨-17(IL-17) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(u) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 아릴 탄화수소 수용체(AhR) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(v) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 TNF-유사 리간드 1A(TL1A) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(w) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 종양 괴사 인자(TNF-α) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(x) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 인터류킨-13(IL-13) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(y) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 인터류킨-6(IL-6) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(z) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 인터류킨 1 베타-β(IL-1β) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(aa) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 콜라겐 유형 1 수준의 증가 없음 또는 감소;

(bb) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 형질전환 성장 인자-β(TGF-β) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(cc) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 α-평활근 작용(α-SMA) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(dd) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 종양 괴사 인자 리간드 슈퍼패밀리 구성원 11A(TNRSF11A) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(ee) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 세린 프로테아제 2(PRSS2) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(ff) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 아민 옥시다제, 구리 함유 3(AOC3) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(gg) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 백혈구 면역글로불린 유사 수용체 B1(LILBR1) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(hh) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 트랜스페린 수용체 단백질 1(TR) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(ii) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 엘라핀(PI3) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(jj) 기준선, 위약 대조군, 및/또는 비치료된 환자에 비해 혈청 아밀로이드 A4(SAA4) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(kk) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 단핵구 화학유인 단백질-1(MCP-1) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(ll) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 케모카인(C-C 모티프) 리간드 16(CCL16) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(mm) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 trem-유사 전사물 2(TLT2) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(nn) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 다이펩티딜 펩티다제 4(DPP4) 수준의 증가 없음 또는 감소; 및

(oo) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 메탈로프로테이나제 억제제-1(TIMP-1) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(pp) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 플라스미노겐 활성화 인자 억제제-1(PAI-1) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(qq) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 NAFLD 점수(NFS)의 증가 없음 또는 감소; 및

(rr) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 섬유증-4(FIB-4) 수준의 증가 없음 또는 감소;

(ss) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 간경직도 수준의 증가 없음 또는 감소;

(tt) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 간 지방 함량의 증가 없음 또는 감소;

(uu) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 글리세로인지질 수준의 감소 없음 또는 증가;

(vv) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 혈압의 증가 없음 또는 감소;

(ww) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 증강된 간 섬유증(ELF) 점수의 증가 없음 또는 감소;

(xx) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 폐 및/또는 진피 섬유아세포에서 콜라겐 생성의 증가 없음 또는 감소;

(yy) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 글루코스 흡수의 감소 없음 또는 증가;

(zz) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 폐 및/또는 진피 섬유아세포 생존력의 증가;

(ab) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 인터류킨-8(IL-8) 수준의 변화 없음 또는 감소;

(ac) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 인터류킨-23(IL-23) 수준의 변화 없음 또는 감소;

(ad) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비교해 인터류킨-11(IL-11) 수준의 변화 없음 또는 감소; 및/또는

(ae) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 인터페론 γ(IFNγ) 수준의 변화 없음 또는 감소;

(af) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 T 및/또는 B 세포 활성화의 변화 없음 또는 감소;

(ag) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 주화성의 변화 없음 또는 감소;

(ah) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 인산화 B세포 림프종 2(Bcl-2) 패밀리 구성원의 변화 없음 또는 감소;

(ai) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 카스파제의 활성화된 단편 수준의 변화 없음 또는 감소;

(aj) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비교해 절단된 폴리 (ADP-리보스) 폴리머라제-1(PARP-1) 수준의 변화 없음 또는 감소;

(ak) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 허리 둘레의 변화 없음 또는 감소;

(al) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 AST 대 혈소판 비 지수(ARPI)의 변화 없음 또는 감소;

(am) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 간 염증 및 섬유증(LIF) 점수의 변화 없음 또는 감소;

(an) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 Lok 점수의 변화 없음 또는 감소;

(ao) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 섬유증 점수의 변화 없음 또는 감소;

(ap) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 킹(King) 점수의 변화 없음 또는 감소;

(aq) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 보나치니(Bonacini) 점수의 변화 없음 또는 감소;

(ar) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 순간 탄성영상술(transient elastography, TE) 점수의 변화 없음 또는 감소.

(as) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 혈관 유착 분자의 증가 없음 또는 감소;

(at) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 심혈관 위험 단백질의 증가 없음 또는 감소;

(au) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 케모카인의 증가 없음 또는 감소;

(av) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원의 증가 없음 또는 감소;

(aw) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적혈구 수의 변화 없음 또는 증가;

(ax) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 백혈구 수의 변화 없음 또는 증가;

(ay) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 혈소판 수의 변화 없음 또는 증가;

(az) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 프로트롬빈 시간의 변화 없음 또는 증가;

(ba) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간의 변화 없음 또는 증가;

(bc) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 헤모글로빈 생성의 변화 없음 또는 증가;

(bd) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 헤모글로빈 사량체의 베타 글로빈 사슬의 합성의 변화 없음 또는 증가;

(be) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적혈구 용혈의 변화 없음 또는 감소;

(bf) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 숨가쁨(shortness of breath)의 변화 없음 또는 감소;

(bg) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 심박수의 변화 없음 또는 감소;

(bh) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 비장 크기의 변화 없음 또는 감소;

(bi) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 간 크기의 변화 없음 또는 감소;

(bj) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 지염의 변화 없음 또는 감소;

(bk) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 통증 위기의 변화 없음 또는 감소;

(bl) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 비정상적인 혈전 발달의 변화 없음 또는 감소;

(bm) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적혈구 분포 폭의 변화 없음 또는 감소;

(bn) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 망상적혈구 수의 변화 없음 또는 감소; 및/또는

(bo) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 피브리노겐 농도의 변화 없음 또는 감소.

일 실시 형태에서, 본 발명의 방법은 대상 또는 대상 그룹에 투여하기 전에 상기 (a) 내지 (bo)에 제시된 하나 이상의 마커 또는 파라미터의 기준선 수준을 측정하는 단계를 포함한다. 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 (a) 내지 (bo)에 제시된 하나 이상의 마커 또는 파라미터의 기준선 수준이 결정된 후, 본 명세서에 개시된 바와 같은 조성물을 대상에게 투여하는 단계, 및 후속하여 상기 하나 이상의 마커를 추가로 측정하는 단계를 포함한다.

다른 실시 형태에서, 예를 들어 약 1 내지 약 12주, 약 1 내지 약 8주, 또는 약 1 내지 약 4주의 기간에 걸쳐, 본 발명의 조성물로 치료할 때, 대상 또는 대상 그룹은 직전에 기재된 결과 (a) 내지 (bo) 중 임의의 5개 이상, 임의의 10개 이상, 임의의 15개 이상, 임의의 20개 이상, 임의의 25개 이상, 임의의 30개 이상, 임의의 35개 이상, 임의의 40개 이상, 임의의 45개 이상, 임의의 50개 이상, 임의의 55개 이상, 임의의 60개 이상, 임의의 65개 이상, 임의의 70개 이상, 임의의 75개 이상, 임의의 80개 이상, 임의의 85개 이상, 임의의 90개 이상, 또는 91개 모두를 나타낸다.

(a) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 혈청 ALT 및/또는 AST 수준의 증가 없음 또는 감소;

(b) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 BUN 수준의 증가 없음 또는 감소;

(c) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 섬유증 면적의 증가 없음 또는 감소;

(d) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 공복 글루코스 수준의 증가 없음 또는 감소;

(e) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 인슐린의 증가 없음 또는 감소;

(f) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 ALP 수준의 증가 없음 또는 감소;

(g) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 HB1Ac 수준의 증가 없음 또는 감소;

(h) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 HOMA-IR 수준의 증가 없음 또는 감소;

(i) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 아디포-IR 수준의 증가 없음 또는 감소;

(j) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 총 콜레스테롤 수준의 증가 없음 또는 감소;

(k) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 트라이글리세라이드 수준의 증가 없음 또는 감소;

(l) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 다이글리세라이드 수준의 증가 없음 또는 감소;

(m) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 VLDL-C 수준의 증가 없음 또는 감소;

(n) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 RLP-C 수준의 증가 없음 또는 감소;

(o) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 비-HDL-C 수준의 증가 없음 또는 감소;

(p) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 HDL-C 수준의 감소 없음 또는 증가;

(q) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 LDL-C 수준의 증가 없음 또는 감소;

(r) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 신장 하이드록시프롤린 수준의 증가 없음 또는 감소;

(s) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 IL-33 수준의 증가 없음 또는 감소;

(t) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 IL-17 수준의 증가 없음 또는 감소;

(u) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 AhR 수준의 증가 없음 또는 감소;

(v) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 TL1A 수준의 증가 없음 또는 감소;

(w) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 TNF-α 수준의 증가 없음 또는 감소;

(x) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 IL-13 수준의 증가 없음 또는 감소;

(y) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 IL-6 수준의 증가 없음 또는 감소;

(z) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 IL-1β 수준의 증가 없음 또는 감소;

(aa) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 콜라겐 유형 1 수준의 증가 없음 또는 감소;

(bb) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 TGF-β 수준의 증가 없음 또는 감소;

(cc) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 α-SMA의 증가 없음 또는 감소;

(dd) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 TNRSF11A의 증가 없음 또는 감소;

(ee) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 PRSS2 수준의 증가 없음 또는 감소;

(ff) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 AOC3 수준의 증가 없음 또는 감소;

(gg) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 LILBR1 수준의 증가 없음 또는 감소;

(hh) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 TR 수준의 증가 없음 또는 감소;

(ii) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 PI3의 증가 없음 또는 감소;

(jj) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 SAA4 수준의 증가 없음 또는 감소;

(kk) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 MCP-1 수준의 증가 없음 또는 감소;

(ll) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 CCL16 수준의 증가 없음 또는 감소;

(mm) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 TLT2 수준의 증가 없음 또는 감소;

(nn) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 DPP4 수준의 증가 없음 또는 감소;

(oo) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 TIMP-1 수준의 증가 없음 또는 감소;

(pp) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 PAI-1 수준의 증가 없음 또는 감소;

(qq) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 NFS의 증가 없음 또는 감소;

(rr) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 FIB-4 수준의 증가 없음 또는 감소;

(ss) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 간경직도의 증가 없음 또는 감소;

(tt) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 간 지방 함량의 증가 없음 또는 감소;

(uu) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 글리세로인지질 수준의 감소 없음 또는 증가;

(vv) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 혈압의 증가 없음 또는 감소;

(ww) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 ELF 점수의 증가 없음 또는 감소;

(zz) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 폐 및/또는 진피 섬유아세포에서 콜라겐 생성 점수의 증가 없음 또는 감소;

(yy) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 글루코스 흡수의 감소 없음 또는 증가;

(zz) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 폐 및/또는 진피 섬유아세포 생존력의 증가;

(ab) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 IL-8 수준 점수의 변화 없음 또는 감소;

(ac) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 IL-23 수준의 변화 없음 또는 감소;

(ad) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 IL-11 수준 점수의 변화 없음 또는 감소;

(ae) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 IFNγ 수준의 변화 없음 또는 감소;

(af) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 T 및/또는 B 세포 활성화의 변화 없음 또는 감소;

(ag) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 주화성의 변화 없음 또는 감소;

(ah) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 Bcl-2 패밀리 구성원의 변화 없음 또는 감소;

(ai) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 카스파제의 활성화된 단편 수준의 변화 없음 또는 감소;

(aj) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 절단된 PARP-1 수준의 변화 없음 또는 감소;

(ak) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 허리 둘레의 변화 없음 또는 감소;

(al) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 ARPI의 변화 없음 또는 감소;

(am) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 LIF 점수의 변화 없음 또는 감소;

(an) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 Lok 점수의 변화 없음 또는 감소;

(ao) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 섬유증 점수의 변화 없음 또는 감소;

(ap) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 킹 점수의 변화 없음 또는 감소;

(aq) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 보나치니 점수의 변화 없음 또는 감소; 및/또는

(ar) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 TE 점수의 변화 없음 또는 감소;

(as) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 혈관 유착 분자의 증가;

(at) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 심혈관 위험 단백질의 증가;

(au) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 케모카인의 증가;

(av) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원의 증가;

(aw) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 적혈구 수의 변화 없음 또는 증가;

(ax) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 백혈구 수의 변화 없음 또는 증가;

(ay) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 혈소판 수의 변화 없음 또는 증가;

(az) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 프로트롬빈 시간의 변화 없음 또는 증가;

(ba) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간의 변화 없음 또는 증가;

(bc) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 헤모글로빈 생성의 변화 없음 또는 증가;

(bd) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 헤모글로빈 사량체의 베타 글로빈 사슬의 합성의 변화 없음 또는 증가;

(be) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 적혈구 용혈의 변화 없음 또는 감소;

(bf) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 숨가쁨의 변화 없음 또는 감소;

(bg) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 심박수의 변화 없음 또는 감소;

(bh) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 비장 크기의 변화 없음 또는 감소;

(bi) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 간 크기의 변화 없음 또는 감소;

(bj) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 지염의 변화 없음 또는 감소;

(bk) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 통증 위기의 변화 없음 또는 감소;

(bl) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 비정상적인 혈전 발달의 변화 없음 또는 감소;

(bm) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 적혈구 분포의 변화 없음 또는 감소;

(bn) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 망상적혈구 수의 변화 없음 또는 감소;

(bo) 기준선, 위약 대조군 및/또는 비치료된 환자에 비해 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 피브리노겐 농도의 변화 없음 또는 감소.

추가 설명 없이, 당업자는 이전의 설명 및 하기의 예시적인 실시예를 사용하여 본 발명의 제제를 제조 및 이용하고 청구된 방법을 실시할 수 있는 것으로 여겨진다. 하기 실시예는 본 발명의 실시를 용이하게 하기 위해 제공되며, 어떤 식으로든 본 개시내용의 나머지 부분을 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다.

실시예

실시예 1: 편측성 요관 폐쇄-유도된 신장 간질 섬유증

이 연구의 목적은 UUO-유도된 신장 간질 섬유증에서 DS109(15-HETrE) 및 DS102(15-HEPE)의 효과를 실험하는 것이었다.

도 1은 수술 및 치료로부터 연구 14일차까지의 연구 설계를 도시한다.

1.1 재료 및 방법

시험 물질: 이 연구에 대한 시험 물질은 DS109(15-HETrE) 및 DS102(15-HEPE)였다. 각각의 물질의 투약 용액을 제조하기 위해, DS109를 먼저 칭량한 다음 0.5% 하이드록시프로필 메틸 셀룰로오스(HPMC)의 비히클에 용해시키고, DS102를 0.5% HPMC의 비히클에서 희석하였다.

UUO 수술: 연구의 0일차에, 펜토바르비탈 나트륨 마취 하에 마우스에서 UUO 수술을 수행하였다. 마우스의 털을 먼저 면도하고, 이어서 복부 절개 개방하여 마우스의 좌측 요관을 밖으로 꺼내었다. 요관을 두 지점에서 4-0 나일론 봉합사로 결찰하였다. 이어서 마우스의 복막 및 피부를 봉합사로 폐쇄하고 마취에서 회복될 때까지 마우스를 깨끗한 케이지로 옮겼다. 샴 수술된(sham operated) 마우스에서는 좌측 요관을 노출시켰지만 결찰하지 않았다.

약물 투여: DS109 및 DS102를 10 밀리리터(mL)/킬로그램(Kg)의 부피로 마우스에 경구 투여하였다.

치료 용량: DS109는 연구 0일차부터 13일차까지 1일 1회 5, 50 및 250 밀리그램(mg)/Kg의 3가지 용량 수준으로 투여되었다. DS102는 연구 0일차부터 13일차까지 1일 1회 50 및 500 mg/㎏의 2가지 용량 수준으로 투여하였다.

동물: 7주령 암컷 C57BL/6 마우스(즉, 동물)를 재팬 에스엘씨, 인크.(Japan SLC, Inc.)(일본 소재)로부터 입수하였고, 제어된 조건 하에서 수용하고 정상 식이(CE-2; 일본 소재의 클레아 재팬(CLEA Japan))를 먹였다. 동물을 무특이병원체(SPF) 시설에서 온도(예를 들어, 23 ± 2℃), 습도(예를 들어, 45 ± 10%), 조명(예를 들어, 12시간 인공 명암 주기; 8:00에서 20:00까지 조명) 및 환기의 제어된 조건 하에 유지하였다. 시설의 오염을 방지하기 위해 실험실 내에서 고압을 유지하였다. 동물을 TPX 케이지(클레아 재팬)에 케이지당 최대 4마리의 마우스로 수용하였다. 멸균 페이퍼-클린(Paper-Clean)(재팬 에스엘씨(Japan SLC))을 베딩에 사용하고 일주일에 한 번 교체하였다. 케이지의 상부의 금속 덮개에 놓인 멸균 고형 정상 식이를 자유식(ad libitum)으로 제공하였다. 고무 마개 및 시퍼 튜브(sipper tube)가 장착된 물병으로부터의 순수한 물을 또한 자유식으로 제공하였다. 물병을 일주일에 한 번 교체하고, 세정하고, 오토클레이브에서 멸균하고 재사용하였다. 귀 펀치에 의해 마우스를 식별하였고 각각의 케이지에 특정 식별 코드를 표지하였다.

신장 생화학의 측정: 신장 하이드록시프롤린 함량을 정량화하기 위해, 냉동된 좌측 신장 샘플을 하기와 같이 알칼리 산 가수분해 방법에 의해 처리하였다: 신장 샘플을 65℃에서 2 노르말(N)의 수산화나트륨(NaOH)에 용해시키고 121℃에서 20분 동안 오토클레이빙하였다. 용해된 샘플(400 μL)을 121℃에서 20분 동안 400 μL의 6 N 염산(HCl)으로 산-가수분해하고, 10 mg/mL의 활성탄을 함유하는 400 μL의 4N NaOH로 중화시켰다. AC 완충액(예를 들어, 2.2 M 아세트산/0.48 M 시트르산, 400 μL)을 샘플에 첨가한 후에 원심분리하여 상청액을 수집하였다. 16 ㎍/mL에서 시작하여 트랜스-4-하이드록시-L-프롤린(미국 소재의 시그마-알드리치(Sigma-Aldrich))의 연속 희석으로 하이드록시프롤린의 표준 곡선을 작성하였다. 제조된 샘플 및 표준물(예를 들어, 각각 400 μL)을 400 μL 클로라민 T 용액(일본 소재의 와코 퓨어 케미칼 인더스트리즈(Wako Pure Chemical Industries))과 혼합하고, 실온에서 25분 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 샘플을 에를리히(Ehrlich) 용액(예를 들어, 400 μL)과 혼합하고 65℃에서 20분 동안 가열하여 색을 발현시켰다. 샘플을 얼음 상에서 냉각시키고 원심분리하여 침전물을 제거한 후, 각각의 상청액의 광학 밀도를 560 나노미터(nm)에서 측정하였다. 하이드록시프롤린 표준 곡선으로부터 하이드록시프롤린의 농도를 계산하였다. 비신코닌산(BCA) 단백질 분석 키트(미국 소재의 써모 피셔 사이언티픽(Thermo Fisher Scientific))를 사용하여 신장 샘플의 단백질 농도를 결정하고, 계산된 하이드록시프롤린 값을 정규화하는 데 사용하였다. 신장 하이드록시프롤린 함량을 단백질 1 mg당 마이크로그램(㎍)으로 표시하였다.

조직병리학적 분석: 콜라겐 침착을 시각화하기 위해, 피크로-시리우스 레드(picro-Sirius red) 용액(독일 소재의 발데크(Waldeck))을 사용하여 신장 절편을 염색하였다. 간질 섬유증 면적의 정량화를 위해, 디지털 카메라(예를 들어, DFC295; 독일 소재의 라이카 마이크로시스템즈(Leica Microsystems))를 200배 배율로 사용하여 피질수질 영역의 명시야 이미지를 캡처하고, 이미지제이(ImageJ) 소프트웨어(미국 소재의 내셔널 인스티튜트 오브 헬스(National Institute of Health))를 사용하여 5개의 필드/섹션에서 포지티브 면적을 측정하였다.

정량적 RT-PCR: 제조업체의 지침에 따라 RNAiso(일본 소재의 타카라 바이오(Takara Bio))를 사용하여 신장 샘플로부터 총 리보핵산(RNA)을 추출하였다. 4.4 마이크로몰(mM)의 염화마그네슘(MgCl₂)(스위스 소재의 에프. 호프만-라 로셰(F. Hoffmann-La Roche)), 40 U RNase 억제제(일본 소재의 토요보(Toyobo)), 0.5 mM dNTP(미국 소재의 프로메가(Promega)), 6.28 μM 랜덤 헥사머(프로메가), 5 × 제1 가닥 완충액(프로메가), 10 mM 다이티오트레이톨(미국 소재의 인비트로겐(Invitrogen)) 및 200 U MMLV-RT(인비트로겐)를 함유하는 반응 혼합물을 20 μL의 최종 부피로 사용하여 1 ㎍의 RNA를 역전사시켰다. 반응을 37℃에서 1시간 동안 수행한 다음 99℃에서 5분 동안 수행하였다. 실시간 PCR DICE 및 TB 그린(Green)™ 프리믹스(Premix) Ex Taq™ II(타카라 바이오(Takara Bio))를 사용하여 실시간 PCR을 수행하였다. 상대적 마이크로RNA(mRNA) 발현 수준을 계산하기 위해, 각각의 유전자(예를 들어, α-SMA, TIMP-1, TGF-β 및 콜라겐 유형 1)의 발현을 참조 유전자 36B4(유전자 부호: Rplp0)의 발현에 대해 정규화하였다. PCR-프라이머 세트 및 플레이트 레이아웃에 관한 정보가 표 1 및 표 2에 기재되어 있다.

[표 1]

[표 2]

샘플 수집: 혈청 샘플의 경우, 직접 심장 천자를 통해 항응고제가 없는 혈청 분리 튜브에 비-공복 혈액을 수집하고 4℃에서 4분 동안 3,500 × g로 원심분리하였다. 상청액을 수집하고 운송을 위해 -80℃에서 저장하였다. 신장 샘플의 경우, 좌측 신장을 수집하고 수평으로 2개의 조각으로 절단하였다. 좌측 신장의 상측 부분을 부앙(Bouin) 용액에서 고정시킨 다음 파라핀 중에 포매하였다. 조직학적 분석을 위해 파라핀 블록을 실온에서 저장하였다. 좌측 신장의 하측 부분을 관상으로 2개의 조각으로 절단하였다. 좌측 신장의 전측 부분을 액체 질소 중에서 스냅 동결시키고 유전자 발현 분석을 위해 -80℃에서 저장하였다. 좌측 신장의 후측 부분을 액체 질소에서 스냅 동결시키고 신장 생화학을 위해 -80℃에서 저장하였다.

통계적 검정: 그래프패드 프리즘(GraphPad Prism) 6(미국 소재의 그래프패드 소프트웨어 인크.(GraphPad Software Inc.))에서 본페로니 다중 비교 검정(Bonferroni Multiple Comparison Test)을 사용하여 통계 분석을 수행하였다. P 값 <0.05가 통계적으로 유의한 것으로 간주되었다. 단측 t-검정이 P 값 <0.1을 반환할 때 추세 또는 경향을 가정하였다. 결과를 평균 ±SD로 표시하였다.

1.2 실험 설계 및 치료

연구 설계는 하기 연구 그룹을 포함하였다:

그룹 1(샴 대조군): 8마리의 샴-수술된 마우스를 희생될 때까지 어떠한 치료도 없이 유지하였다.

그룹 2(비히클): 8마리의 UUO 마우스에 0일차부터 13일차까지 1일 1회 10 mL/㎏의 부피로 비히클[0.5% HPMC]을 경구 투여하였다.

그룹 3(저 DS109): 8마리의 UUO 마우스에 0일차부터 13일차까지 1일 1회 5 mg/㎏의 용량으로 DS109가 보충된 비히클을 경구 투여하였다.

그룹 4(중간 DS109): 8마리의 UUO 마우스에 0일차부터 13일차까지 1일 1회 50 mg/㎏의 용량으로 DS109가 보충된 비히클을 경구 투여하였다.

그룹 5(고 DS109): 8마리의 UUO 마우스에 0일차부터 13일차까지 1일 1회 250 mg/㎏의 용량으로 DS109가 보충된 비히클을 경구 투여하였다.

그룹 6(저 DS102): 8마리의 UUO 마우스에 0일차부터 13일차까지 1일 1회 50 mg/㎏의 용량으로 DS102가 보충된 비히클을 경구 투여하였다.

그룹 7(고 DS102): 8마리의 UUO 마우스에 0일차부터 13일차까지 1일 1회 500 mg/㎏의 용량으로 DS102가 보충된 비히클을 경구 투여하였다.

표 3은 연구 동안 그룹 1 내지 그룹 7의 각각에 대한 치료 일정을 요약한다.

[표 3]

동물 모니터링 및 희생: 마우스에 대해 생존력, 임상 징후 및 거동을 매일 모니터링하였다. 치료 기간 동안 매일 치료 전에 개체 체중을 측정하였다. 각각의 투여 대략 60분 후에 독성의 유의한 임상 징후, 빈사 상태(moribundity) 및 사망률에 대해 마우스를 관찰하였다. 14일차에 아이소플루란 마취(화이자 인크.(Pfizer Inc.)) 하에서 직접 심장 천자를 통한 방혈에 의해 동물을 희생시켰다.

1.3 결과

체중 변화 및 일반적인 고려사항: 도 2는 모든 동물에 대한 체중 변화를 나타낸다. 모든 동물에서, 수술 후 체중이 감소하였고 치료 기간 동안 점진적으로 회복되었다. 2일차부터 5일차까지 그리고 10일차부터 11일차까지 비히클 그룹의 평균 체중은 샴 대조군 그룹의 평균 체중보다 유의하게 더 낮았다. 비히클 그룹과 치료 그룹 사이에서 치료 기간 동안 어떠한 날에도 평균 체중의 유의한 변화는 없었다. 치료 기간 동안 모든 그룹에서 죽은 동물은 없었다. 본 연구에서, 어떠한 동물도 전반적인 상태의 악화를 나타내지 않았다.

희생 당일의 체중 및 신장 중량: 도 3 및 표 4는 희생 당일 동물의 체중을 나타낸다. 샴 대조군 그룹과 비히클 그룹 사이에는 희생 당일 평균 체중의 유의한 차이가 없었다. 비히클 그룹과 치료 그룹 사이에는 희생 당일 평균 체중의 유의한 차이가 없었다.

[표 4]

도 4a 내지 도 4d 및 표 4는 희생 당일 동물의 신장 중량 및 신장 중량 대 체중 비를 나타낸다. 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 평균 우측 신장 중량의 유의한 증가를 나타내었다. 그러나, 비히클 그룹과 치료 그룹 사이에는 평균 우측 신장 중량의 유의한 차이가 없었다. 비히클 그룹은 또한 샴 대조군 그룹과 비교하여 평균 우측 신장 중량 대 체중 비의 유의한 증가를 나타내었다. 비히클 그룹과 치료 그룹 사이에는 평균 우측 신장 중량 대 체중 비의 유의한 차이가 없었다. 비히클 그룹은 또한 샴 대조군 그룹과 비교하여 평균 좌측 신장 중량의 유의한 증가를 나타내었다. 비히클 그룹과 치료 그룹 사이에는 평균 좌측 신장 중량의 유의한 차이가 없었다. 마지막으로, 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 평균 좌측 신장 중량 대 체중 비의 유의한 증가를 나타내었지만, 비히클 그룹과 치료 그룹 사이에는 평균 좌측 신장 중량 대 체중 비의 유의한 차이가 없었다.

신장 화학: 도 5 및 표 5는 동물의 신장 하이드록시프롤린 함량을 나타낸다. 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 신장 하이드록시프롤린 함량의 유의한 증가를 나타내었다. 저 DS109 그룹, 고 DS109 그룹, 저 DS102 그룹 및 고 DS102 그룹은 비히클 그룹과 비교하여 신장 하이드록시프롤린 함량의 유의한 감소를 나타내었다. 비히클 그룹과 중간 DS109 그룹 사이의 신장 하이드록시프롤린 함량에는 유의한 차이가 없었다.

[표 5]

조직학적 분석: 도 6a 내지 도 6g 및 표 6은 시리우스 레드 염색을 나타내고 도 7은 동물의 섬유증 면적을 나타낸다. 도 6a는 시리우스 레드-염색된 신장 절편의 대표적인 현미경 사진을 나타낸다. 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 섬유증 면적(시리우스 레드-포지티브 면적)의 백분율의 유의한 증가를 나타내었다. 본페로니 다중 비교는 중간 DS109 그룹에서의 섬유증 면적이 비히클 그룹과 비교하여 감소하는 경향이 있음을 밝혀내었다. 비히클 그룹과 다른 치료 그룹 사이에는 섬유증 면적의 유의한 차이가 없었다. 주목할 만한 이상치의 존재로 인해 만-휘트니(Mann-Whitney) U 검정을 수행하였고 이는 저 DS109 그룹, 중간 DS109 그룹, 고 DS109 그룹, 저 DS102 그룹 및 고 DS102 그룹의 섬유증 면적이 비히클 그룹과 비교하여 감소하는 경향(p<0.1)이 있음을 밝혀내었다.

[표 6]

유전자 발현 분석: 알파-SMA, TIMP-1, TGF-β, 콜라겐 유형 1에 대한 유전자 발현 분석이 도 8a 내지 도 8d 및 표 7에 나타나 있다.

[표 7]

알파-SMA: 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 α-SMA mRNA 발현 수준의 유의한 증가를 나타내었다. 비히클 그룹과 치료 그룹 사이에는 α-SMA mRNA 발현 수준의 유의한 차이가 없었다.

TIMP-1: 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 TIMP-1 mRNA 발현 수준의 유의한 증가를 나타내었다. 비히클 그룹과 치료 그룹 사이에는 TIMP-1 mRNA 발현 수준의 유의한 차이가 없었다.

TGF-β: 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 TGF-β mRNA 발현 수준의 유의한 증가를 나타내었다. 비히클 그룹과 치료 그룹 사이에는 TGF-β mRNA 발현 수준의 유의한 차이가 없었다.

콜라겐 유형 1: 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 콜라겐 유형 1 mRNA 발현 수준의 유의한 증가를 나타내었다. 비히클 그룹과 치료 그룹 사이에는 콜라겐 유형 1 mRNA 발현 수준의 유의한 차이가 없었다.

1.4 요약

시리우스-레드 염색 및 신장 하이드록시프롤린 함량에 의해 나타나는 바와 같이, 본 연구에서 비히클 그룹에서 신장 섬유증이 확립되었다.

DS109: 저용량의 DS109를 사용한 치료는 비히클 그룹과 비교하여 신장 하이드록시프롤린 함량의 유의한 감소(p<0.05) 및 섬유증 면적의 감소 추세(p<0.1)를 나타내었다. 중간 용량의 DS109를 사용한 치료는 비히클 그룹과 비교하여 섬유증 면적의 감소 추세(p<0.1)를 나타내었다. 마지막으로, 고용량의 DS109를 사용한 치료는 비히클 그룹과 비교하여 신장 하이드록시프롤린 함량의 유의한 감소(p<0.05) 및 섬유증 면적의 감소 추세(p<0.1)를 나타내었다.

DS102: 저용량의 DS102를 사용한 치료는 비히클 그룹과 비교하여 신장 하이드록시프롤린 함량의 유의한 감소(p<0.05) 및 섬유증 면적의 감소 추세(p<0.1)를 나타내었다. 고용량의 DS102를 사용한 치료는 비히클 그룹과 비교하여 신장 하이드록시프롤린 함량의 유의한 감소(p<0.05) 및 섬유증 면적의 감소 추세(p<0.1)를 나타내었다.

결론적으로, 이 연구로부터의 결과는 DS109 및 DS102가 신장 섬유화에 대한 억제 효과, 및 섬유증으로 진행하는 만성 신장 질환에 대한 치료제로서의 잠재력을 가짐을 시사한다.

실시예 2: 담즙정체성 간 질환 및/또는 간 섬유증 담관 결찰(BDL) 연구

이 연구의 목적은 BDL에 의해 유도된 담즙정체증에 대한 DS012의 효과를 실험하는 것이었다.

도 9는 수술 및 치료로부터 연구 14일차까지의 연구 설계를 도시한다.

1.1 재료 및 방법

시험 물질: 이 연구에 대한 시험 물질은 DS102였다. 각각의 물질의 투약 용액을 제조하기 위해, DS102를 0.5% 하이드록시프로필 메틸 셀룰로오스(HPMC)의 비히클에 희석하였다.

BDL 수술: 연구 0일차에, 펜토바르비탈(일본 소재의 쿄리츠 세이야쿠(Kyoritsu Seiyaku)) 마취 하에 BDL 수술을 수행하였다. 마우스의 털을 먼저 면도하고, 복강 절개 개방하고, 총담관을 7-0 수술용 실크(surgical silk)로 2회 결찰하였다. 마우스의 복막 및 피부를 봉합사로 폐쇄하고 마취에서 회복될 때까지 마우스를 깨끗한 케이지(예를 들어, 휴식 케이지)로 옮겼다. 샴 수술된 마우스에서는 총담관을 노출시켰지만 결찰하지 않았다.

약물 투여: DS102를 10 밀리리터(mL)/킬로그램(Kg)의 부피로 경구 투여하였다.

치료 용량: DS102는 연구 0일차부터 13일차까지 1일 1회 50, 250 및 500 밀리그램(mg)/Kg의 3가지 용량 수준으로 투여되었다.

동물: 무병원체 6주령 수컷 C57BL/6J 마우스를 재팬 에스엘씨, 인크.(일본 소재)로부터 입수하였다. 동물을 무특이병원체(SPF) 시설에서 온도(예를 들어, 23 ± 2℃), 습도(예를 들어, 45 ± 10%), 조명(예를 들어, 12시간 인공 명암 주기; 8:00에서 20:00까지 조명) 및 환기의 제어된 조건 하에 유지하였다. 시설의 오염을 방지하기 위해 실험실 내에서 고압을 유지하였다. 동물을 TPX 케이지(클레아 재팬)에 케이지당 최대 4마리의 마우스로 수용하였다. 멸균 페이퍼-클린(재팬 에스엘씨)을 베딩에 사용하고 일주일에 한 번 교체하였다. 케이지의 상부의 금속 덮개에 놓인 멸균 고형 정상 식이를 자유식(ad libitum)으로 제공하였다. 고무 마개 및 시퍼 튜브가 장착된 물병으로부터의 순수한 물을 또한 자유식으로 제공하였다. 물병을 일주일에 한 번 교체하고, 세정하고, 오토클레이브에서 멸균하고 재사용하였다. 귀 펀치에 의해 마우스를 식별하였고 각각의 케이지에 특정 식별 코드를 표지하였다.

혈청 생화학 측정: 콜라겐 침착을 시각화하기 위해, 피크로-시리우스 레드 용액(독일 소재의 발데크)을 사용하여 부앙 고정된 간 절편을 염색하였다. 섬유증 면적의 정량적 분석을 위해, 디지털 카메라(DFC295; 독일 소재의 라이카)를 100배 배율로 사용하여 시리우스 레드-염색된 절편의 명시야 이미지를 캡처하고, 이미지제이 소프트웨어(미국 소재의 내셔널 인스티튜트 오브 헬스)를 사용하여 5개의 필드/섹션에서 포지티브 면적을 측정하였다.

조직학적 분석: 콜라겐 침착을 시각화하기 위해, 피크로-시리우스 레드 용액(독일 소재의 발데크)을 사용하여 신장 절편을 염색하였다. 간질 섬유증 면적의 정량화를 위해, 디지털 카메라(예를 들어, DFC295; 독일 소재의 라이카 마이크로시스템즈)를 200배 배율로 사용하여 피질수질 영역의 명시야 이미지를 캡처하고, 이미지제이 소프트웨어(미국 소재의 내셔널 인스티튜트 오브 헬스)를 사용하여 5개의 필드/섹션에서 포지티브 면적을 측정하였다.

정량적 RT-PCR: 제조업체의 지침에 따라 RNAiso(일본 소재의 타카라 바이오)를 사용하여 간 샘플로부터 총 리보핵산(RNA)을 추출하였다. 4.4 mM의 염화마그네슘(MgCl₂)(스위스 소재의 에프. 호프만-라 로셰), 40 U RNase 억제제(일본 소재의 토요보), 0.5 mM dNTP(미국 소재의 프로메가), 6.28 μM 랜덤 헥사머(프로메가), 5 × 제1 가닥 완충액(프로메가), 10 mM 다이티오트레이톨(미국 소재의 인비트로겐) 및 200 U MMLV-RT(인비트로겐)을 함유하는 반응 혼합물을 20 μL의 최종 부피로 사용하여 1 ㎍의 RNA를 역전사시켰다. 반응을 37℃에서 1시간 동안 수행한 다음 99℃에서 5분 동안 수행하였다. 실시간 PCR DICE 및 TB 그린™ 프리믹스 Ex Taq™ II(타카라 바이오)를 사용하여 실시간 PCR을 수행하였다. 상대적 mRNA 발현 수준을 계산하기 위해, 각각의 유전자(α-SMA, TIMP-1, TGF-β 및 콜라겐 유형 1)의 발현을 참조 유전자 36B4(유전자 부호: Rplp0)의 발현에 대해 정규화하였다. PCR-프라이머 세트 및 플레이트 레이아웃에 관한 정보가 표 8 및 표 9에 기재되어 있다.

[표 8]

[표 9]

샘플 수집: 혈청 샘플의 경우, 직접 심장 천자를 통해 항응고제가 없는 혈청 분리 튜브에 비-공복 혈액을 수집하고 4℃에서 4분 동안 3,500 × g로 원심분리하였다. 상청액을 수집하고 생화학(30 μL) 및 운송(나머지 모두)을 위해 -80℃에서 저장하였다. 간 샘플의 경우, 좌측 횡엽을 수집하고 6개의 조각으로 절단하였다. 2 조각의 좌측 횡엽을 부앙 용액에서 고정시킨 다음 파라핀 중에 포매하였다. 조직학적 분석을 위해 샘플을 실온에서 저장하였다. 다른 2 조각의 좌측 횡엽을 O.C.T. 화합물 중에 포매하고 액체 질소 중에서 빠르게 동결시켰다. 샘플을 -80℃에서 저장하였다. 나머지 조각의 좌측 횡엽을 액체 질소 중에서 스냅 동결시키고, 유전자 발현 분석을 위해 -80℃에서 저장하였다. 우내엽, 좌내엽, 우측엽 및 미상엽을 액체 질소 중에서 스냅 동결시키고 운송을 위해 -80℃에서 저장하였다.

통계적 검정: 그래프패드 프리즘 6(미국 소재의 그래프패드 소프트웨어 인크.)에서 본페로니 다중 비교 검정을 사용하여 통계 분석을 수행하였다. P 값 <0.05가 통계적으로 유의한 것으로 간주되었다. 단측 t-검정이 P 값 <0.1을 반환할 때 추세 또는 경향을 가정하였다. 결과를 평균 ±SD로 표시하였다.

1.2 실험 설계 및 치료

연구 설계는 하기 연구 그룹을 포함하였다:

그룹 2(비히클): 15마리의 BDL-수술된 마우스에 0일차부터 13일차까지 1일 1회 10 mL/㎏의 부피로 비히클[0.5% HPMC]을 경구 투여하였다.

그룹 3(저 DS102): 15마리의 BDL-수술된 마우스에 0일차부터 13일차까지 1일 1회 50 mg/㎏의 용량으로 DS102가 보충된 비히클을 경구 투여하였다.

그룹 4(중간 DS102): 15마리의 BDL-수술된 마우스에 0일차부터 13일차까지 1일 1회 250 mg/㎏의 용량으로 DS102가 보충된 비히클을 경구 투여하였다.

그룹 5(고 DS102): 15마리의 BDL-수술된 마우스에 0일차부터 13일차까지 1일 1회 500 mg/㎏의 용량으로 DS102가 보충된 비히클을 경구 투여하였다.

표 10은 연구 동안 그룹 1 내지 그룹 5의 각각에 대한 치료 일정을 요약한다.

[표 10]

동물 모니터링 및 희생: 마우스에 대해 생존력, 임상 징후 및 거동을 매일 모니터링하였다. 치료 기간 동안 매일 치료 전에 개체 체중을 측정하였다. 각각의 투여 대략 60분 후에 독성의 유의한 임상 징후, 빈사 상태 및 사망률에 대해 마우스를 관찰하였다. BDL 수술 후 14일차에 아이소플루란 마취(화이자 인크.) 하에서 직접 심장 천자를 통한 방혈에 의해 동물을 희생시켰다.

1.3 결과

체중 변화 및 일반적인 고려사항: 도 10은 모든 동물에 대한 체중 변화를 나타낸다. 샴 대조군 그룹을 제외한 모든 그룹에서 연구 기간 동안 평균 체중이 점차 감소하였다. 2일차부터 14일차까지 비히클 그룹의 평균 체중은 샴 대조군 그룹의 평균 체중보다 유의하게 더 낮았다. 비히클 그룹과 DS102 치료 그룹 사이에서 연구 기간 동안 어떠한 날에도 평균 체중의 유의한 변화는 없었다.

치료 기간 동안, 14일차에 도달하기 전에 죽은 채로 발견된 마우스는 다음과 같다: 비히클 그룹에서 15마리의 마우스 중 3마리가 죽은 채로 발견되었고; 저 DS102, 중간 DS102 및 고 DS102 그룹에서는 15마리의 마우스 중 7 마리의 마우스가 죽은 채로 발견되었다. 이 모델에서, 사망 백분율은 단순히 질환으로 인한 것으로 예상되며, 관찰된 사망률은 과거(historical) 데이터와 일치한다.

희생 당일의 체중 및 간 중량: 도 11 및 표 11은 희생 당일 동물의 체중을 나타낸다. 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 희생 당일 평균 체중의 유의한 감소를 나타내었다. 비히클 그룹과 DS102 치료 그룹 사이에는 희생 당일 평균 체중의 유의한 차이가 없었다.

[표 11]

도 12a 내지 도 12d 및 표 11은 희생 당일 동물의 간 중량 및 간 중량 대 체중 비를 나타낸다. 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 평균 간 중량의 유의한 증가를 나타내었다. 고 DS102 그룹의 평균 간 중량은 비히클 그룹과 비교하여 감소하는 경향이 있었다. 비히클 그룹과 다른 치료 그룹 사이에는 평균 간 중량의 유의한 차이가 없었다. 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 평균 간 중량 대 체중 비의 유의한 증가를 나타내었다. 고 DS102 그룹의 평균 간 중량 대 체중은 비히클 그룹과 비교하여 감소하는 경향이 있었다. 비히클 그룹과 다른 치료 그룹 사이에는 평균 간 중량 대 체중 비의 유의한 차이가 없었다.

생화학: 도 13 및 표 12는 동물에 대한 혈청 아미노트랜스퍼라제(ALT)를 나타낸다. 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 혈청 ALT 수준의 유의한 증가를 나타내었다. 비히클 그룹과 DS102 치료 그룹 사이에는 혈청 ALT 수준의 유의한 차이가 없었다. 그러나, 이 모델에 대한 과거 데이터로부터, ALT 수준이 치료 없이 14일차에 감소함을 알 수 있다. 이와 같이, 이는 그룹 간의 차이를 감지하는 능력에 영향을 미칠 수 있다.

[표 12]

도 14 및 표 12는 동물에 대한 혈청 총 빌리루빈을 나타낸다. 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 혈청 총 빌리루빈 수준의 유의한 증가를 나타내었다. 비히클 그룹과 DS102 치료 그룹 사이에는 혈청 총 빌리루빈 수준의 유의한 차이가 없었다.

조직학적 분석: 도 15a 내지 도 14e 및 표 13은 시리우스 레드 염색을 나타내고 도 16은 동물의 섬유증 면적을 나타낸다. 도 14a는 시리우스 레드-염색된 간 절편의 대표적인 현미경 사진을 나타낸다. 비히클 그룹으로부터의 간 절편은 샴 대조군 그룹과 비교하여 증가된 간엽의 문맥에서의 콜라겐 침착 및 PV-CV 또는 PV-PV 가교 섬유증을 나타내었다. 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 섬유증 면적(시리우스 레드-포지티브 면적)의 유의한 증가를 나타내었다. 중간 DS102 그룹은 비히클 그룹과 비교하여 섬유증 면적에서 유의한 감소를 나타내었다. 고 DS102 그룹의 섬유증 면적은 비히클 그룹과 비교하여 감소하는 경향이 있었다. 비히클 그룹과 저 DS102 그룹 사이에는 섬유증 면적의 유의한 차이가 없었다.

[표 13]

유전자 발현 분석: α-SMA, TIMP-1, TGF-β, 및 콜라겐 유형 1에 대한 유전자 발현 분석이 도 17a 내지 도 17d 및 표 14에 나타나 있다.

[표 14]

α-SMA:비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 α-SMA mRNA 발현 수준의 유의한 증가를 나타내었다. 고 DS102 그룹의 α-SMA mRNA 발현 수준은 비히클 그룹과 비교하여 감소하는 경향이 있었다. 비히클 그룹과 DS102 치료 그룹 사이에는 α-SMA mRNA 발현 수준의 유의한 차이가 없었다.

TIMP-1: 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 TIMP-1 mRNA 발현 수준의 유의한 증가를 나타내었다. 고 DS102 그룹의 TIMP-1 mRNA 발현 수준은 비히클 그룹과 비교하여 감소하는 경향이 있었다. 비히클 그룹과 DS102 치료 그룹 사이에는 TIMP-1 mRNA 발현 수준의 유의한 차이가 없었다.

TGF-β: 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 TGF-β mRNA 발현 수준의 유의한 증가를 나타내었다. 고 DS102 그룹은 비히클 그룹과 비교하여 TGF-β mRNA 발현 수준의 유의한 감소를 나타내었다. 비히클 그룹과 DS102 치료 그룹 사이에는 TGF-β mRNA 발현 수준의 유의한 차이가 없었다.

콜라겐 유형 1: 비히클 그룹은 샴 대조군 그룹과 비교하여 콜라겐 유형 1 mRNA 발현 수준의 유의한 증가를 나타내었다. 고 DS102 그룹의 콜라겐 유형 1 mRNA 발현 수준은 비히클 그룹과 비교하여 감소하는 경향이 있었다. 비히클 그룹과 DS102 치료 그룹 사이에는 콜라겐 유형 1 mRNA 발현 수준의 유의한 차이가 없었다.

1.4 요약

이 연구에서는, 비히클 그룹의 생화학적 파라미터(예를 들어, ALT 및 총 빌리루빈), 조직학적 콜라겐 침착(예를 들어, 섬유증 면적) 및 유전자 발현 수준(예를 들어, α-SMA, TIMP-1, TGF-β, 콜라겐 유형 1)가 샴 대조군 그룹과 비교하여 유의하게 증가하였다. 이러한 결과는 비히클 그룹에서 담즙정체증 및 간 섬유증이 확립되었음을 시사하였다.

중간 용량의 DS102를 사용한 치료는 비히클 그룹과 비교하여 섬유증 면적의 유의한 감소(p<0.05)를 나타내었다. 고용량의 DS102를 사용한 치료는 비히클 그룹과 비교하여 TGF-β mRNA 발현 수준의 유의한 감소(p<0.05), 및 섬유증 면적, 간 중량, 간 중량 대 체중 비, α-SMA, TIMP-1 및 콜라겐 유형 1 mRNA 발현 수준의 감소에 대해 유의성(p<0.01)에 근접한 추세를 나타내었다. 이러한 결과는 DS102가 간에서 다수의 전구섬유화 사이토카인의 생성을 억제하고, 간 섬유증에 대해 억제 효과를 가지며, 담즙정체성 간 질환에 대한 치료제로서 잠재력을 갖는다는 것을 나타낸다.

실시예 3: TGF-β 수용체, 신호전달 및 유도된 전구섬유화 단백질에 대한 DS102의 효과

이 연구의 목적은 TGF-β 수용체, TGF-β 유도된 세포내 신호전달 및 전구섬유화 상피 중간엽 전이 단백질의 발현에 대한 15-HEPE 및 15-HEPE EE의 효과를 실험하는 것이었다.

1.1 재료 및 방법

세포독성 시험: 시험 시스템의 농도 범위를 이해하기 위해 다양한 간(간종양) 세포주에서 15-HEPE 유리산과 에틸 에스테르의 세포독성을 시험하였다.

전사 활성: 프로모터(루시페라제) 분석을 수행하여, 15-HEPE의 투여 후의 TGFβ-유도된 전사 활성화를 측정하였다.

수크로스 구배 초원심분리 및 공초점 현미경 검사를 사용하여 수크로스에 의한 TGF-β 수용체의 15-HEPE 유도된 마이크로도메인 전위를 확인하였다. 0, 1, 4, 및 24시간 동안 37℃에서 100 μM의 15-HEPE 및 동일한 부피의 DMSO(다이메틸 설폭사이드)로 처리된 Mv1Lu 세포(밍크 폐 상피 세포)의 원형질막에서 TGF-β 수용체의 수크로스 밀도 구배 분석을 수행하고, 이러한 처리된 세포로부터의 세포 용해물을 수크로스 밀도 구배 초원심분리에 적용하였다. 이어서, 항-TβR-I(유형 I TGF-β 수용체), 항-TβR-II(유형 II TGF-β 수용체), 항-TβR-III(유형 III TGF-β 수용체, 베타글리칸), 항-EGFR(표피 성장 인자 수용체) 및 항-카베올린-1 항체를 사용하여 웨스턴 블롯(Western blot) 분석에 의해 수크로스 구배 분획을 분석하였다. 미처리 세포 또는 15-HEPE로 처리된 세포의 원형질막에서 TβR-I, TβR-II, TβR-III, EGFR 및 카베올린-1의 지질 래프트(lipid raft)/카베올라(caveolae), 및 비-지질 래프트 마이크로도메인 국소화를 평가하여, TGF-β 수용체의 막 마이크로도메인 국소화에 대한 15-HEPE의 효과를 결정하였다.

1.2 결과

TGF-β-유도된 신호전달 및 세포 반응에 대한 15-HEPE의 효과를 결정하였다. TGF-β-유도된 신호전달에 대한 15-HEPE의 효과를 시험하기 위해, TGF-β-자극된 Smad2 인산화 및 핵 전좌(둘 모두 TGF-β-유도된 세포 반응으로 이어지는 핵심 신호전달 사건임)를 조절하는 15-HEPE의 활성을 시험하였다. TGF-β의 한 가지 중요한 생물학적 활성은 상처 치유, 조직 섬유증 및 암 진행에서 중요한 사건인 상피-중간엽 전이(EMT)를 담당하는 유전자의 전사 활성화이다. HepG2 및 LXR 세포에서 TGFβ-유도된 상피 중간엽 전이 관련 단백질(예컨대 피브로넥틴, PAI-1, 및 N-카드헤린 등) 발현에 대한 15-HEPE의 효과를 평가하였다. HepG2 세포(인간 간종양 세포주)를 0.1%의 FBS를 함유하는 DMEM 중 15-HEPE 스테이지 II의 증가하는 용량으로 1시간 동안 처리하고, 200 피코몰(pM)의 TGF-β을 사용하거나 사용하지 않고서 48 시간 동안 계속 자극하였다.

도 18a 및 도 18b에 도시된 바와 같이 15-HEPE는 TGF-β 신호전달을 직접 억제하였다. 구체적으로, 도 18a는 15-HEPE가 유형 II TGF-β 수용체의 분해를 유도하고 TGF-β 유도된 상피 중간엽 전이(EMT)(즉, 전구섬유화) 단백질 생성을 차단함을 나타낸다. HepG2 세포(인간 간종양 세포주)를 0.1%의 FBS를 함유하는 DMEM 중 15-HEPE 스테이지 II의 증가하는 용량으로 1시간 동안 처리하고, 200 피코몰(pM)의 TGF-β을 사용하거나 사용하지 않고서 48 시간 동안 계속 자극하였다. 도 18a에 도시된 2개의 패널은 동일한 실험 조건 하에서 실행된 2개의 별개의 실험이다. 이러한 별개의 실험으로부터의 결과는 15-HEPE가 TGF-β 유도된 EMT 단백질 생성을 차단하고 유형 II TGF-β 수용체의 분해를 유도하였음을 나타낸다. 도 18a는 또한 TGF-β에 의해 유도되며 심혈관 위험 증가와 관련된 단백질인 플라스미노겐 활성화제 억제제-1(PA-1)에 대한 15-HEPE의 효과를 나타낸다. 도 18b는 15-HEPE가 간 성상 세포에서 TGF-β-자극된 세포내 신호전달(예를 들어, SMAD2/3 인산화)을 억제함을 나타낸다. 도 18b에서 수행된 실험은 LX2 세포(인간 간 성상 세포)를 24시간 동안 0 μM 내지 100 μM 사이에서 증가하는 농도의 DS102에 이어서 30분의 TGF-β 자극으로 전처리하는 것을 포함하였다. 실험 결과는 15-HEPE가 TGF-β 자극을 억제함을 나타내었다.

0, 1, 4, 및 24시간 동안 37℃에서 100 μM의 15-HEPE 및 동일한 부피의 다이메틸 설폭사이드(DMSO)로 처리된 밍크 폐 상피 세포(Mv1Lu 세포)의 원형질막에서 TGF-β 수용체의 15-HEPE 수크로스 밀도 구배 분석을 수행하고, 이러한 처리된 세포로부터의 세포 용해물을 수크로스 밀도 구배 초원심분리에 적용하였다. 이어서, 항-TβR-I(유형 I TGF-β 수용체 - 도 18c), 항-TβR-II(유형 II TGF-β 수용체 - 도 18d), 항-TβR-III(유형 III TGF-β 수용체, 베타글리칸 - 도 18e), 항-EGFR(표피 성장 인자 수용체 - 도 18f) 및 항-카베올린-1 항체(도 18g)를 사용하여 웨스턴 블롯 분석에 의해 수크로스 구배 분획을 분석하였다. 분획 4 내지 분획 5는 지질 래프트/카베올라를 함유하는 반면, 분획 7 내지 분획 10은 비-지질 래프트 분획이었다. 15-HEPE를 사용한 치료는 TβR-I 단백질의 풍부도에 영향을 미치지 않았지만 24시간 치료에서 지질 래프트로의 TβR-I의 전좌를 유도하였다(도 18c). 별표(★)는 대조군 및 더 짧은 치료 기간과 비교하여 분획에서 15-HEPE가 TβR-I의 풍부도(24시간)를 증가시켰음을 나타낸다(도 18c). 15-HEPE는 1 내지 4시간에 TβR-II 전좌를 유도하였고 24시간 치료에서 추가로 분해를 유도하였다(도 18d). 삼각형(▼)은 대조군 세포와 비교하여 분획에서 TβR-II의 전좌 및 감소된 풍부도를 나타낸다(도 18d). 도 18e, 18f 및 18g에서, 15-HEPE는 TβR-III, EGFR 및 카베올린-1의 국소화 및 풍부도를 변화시키지 않았다.

1.3 요약

따라서, 종합하면, 이들 결과는 유리산 또는 에틸 에스테르 형태 둘 모두의 15-HEPE가 유형 II TGF-β 수용체의 전좌 및 분해를 유도하고, TGF-β 유도된 전구섬유화 단백질 생성을 차단하고, 간 성상 세포에서 TGF-β 유도된 세포내 신호전달(SMAD2/3)을 억제하였음을 입증한다. 이와 같이, 15-HEPE 및 15-HEPE EE는 TGF-β 신호전달을 직접 억제할 수 있으며, 이러한 결과는 비-알코올성 지방간염(NASH), 기타 섬유화 질환, 심장대사 질환을 포함하는 다수의 섬유화 질환뿐만 아니라 암에 대한 다수의 적응증을 치료하는 데 있어서 15-HEPE 및 15-HEPE EE에 대한 치료적 잠재력을 뒷받침한다.

실시예 4: NAFLD 환자에서 경구 투여된 DS102의 효능

본 연구의 목적은 비-알코올성 지방간 질환(NAFLD)을 갖는 성인 환자의 치료에 있어서 위약에 대비하여 경구 투여된 DS102 캡슐의 안전성 및 효능을 평가하는 것이었다.

1.1 연구 평가변수

1차 평가변수: 이 연구에 대한 1차 평가변수는 DS102 투여에 대한 효능뿐만 아니라 안전성을 포함하였다. 효능은 기준선부터 16주차까지의 혈청 알라닌 아미노트랜스퍼라제(ALT)의 변화 및 기준선부터 16주차까지의 순간 탄성영상술에 의해 측정된 간경직도의 변화에 기초하여 평가하였다. 안전성은 치료 중단을 초래하는 각각의 치료 그룹에서의 치료 후 발생 유해 사건(treatment emergent adverse event, TEAE)의 수에 대해 평가하였다.

2차 평가변수: 이 연구에 대한 2차 평가변수는 다음 중 어느 하나의 변화를 포함하였다: 기준선부터 2주차, 4주차, 8주차 및 12주차까지의 혈청 ALT; 기준선부터 2주차, 4주차, 8주차, 12주차 및 16주차까지의 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제(AST); 기준선부터 2주차, 4주차, 8주차, 12주차 및 16주차까지의 AST:ALT 비; 기준선부터 16주차까지의 섬유종-4(FIB-4) 지수; 기준선부터 16주차까지의 NAFLD 섬유증 점수(NFS); 기준선부터 16주차까지의 제어된 감쇠 파라미터(CAP)에 의해 측정된 간 지방의 변화; 기준선부터 16주차까지의 증강된 간 섬유증(ELF) 점수; 및 기준선부터 2주차, 4주차, 8주차, 12주차 및 16주차까지의 항상성 모델 평가 인슐린 저항성(HOMA-IR) 및 지방 조직 인슐린 저항성(아디포-IR).

탐색적 분석: 탐색적 분석은 총 콜레스테롤, 트라이글리세라이드, 초저밀도 지질단백질 콜레스테롤(VLDL-C), 저밀도 지질단백질 콜레스테롤(LDL-C), 고밀도 지질단백질 콜레스테롤(HDL-C), 비-고밀도 지질단백질 콜레스테롤(비-HDL-C), 렘넌트-유사 입자 콜레스테롤(RLP-C), 공복 글루코스, 인슐린, 유리 지방산 및 헤모글로빈 A1C(HbA1C)를 포함하는 지질 및 대사 파라미터의 분석을 포함하였다. 추가적인 탐색적 분석은 고처리량 지질체학 및 단백질체학을 포함하였다.

1.2 연구 설계

이것은 18 내지 75세의 NAFLD 환자에서 경구 투여된 DS102 캡슐의 안전성 및 효능 및 2 용량의 DS102와 위약 사이의 용량-반응 관계를 조사하기 위한 무작위화, 위약-대조군, 이중 맹검, 병렬 그룹, 다기관 탐색 IIa상 연구였다. NAFLD가 확인된 환자의 3개의 병렬 그룹을 본 연구에서 조사하여 16주 치료 기간에 걸쳐 2가지 상이한 용량의 DS102와 위약을 비교하였다. 연구는 치료 그룹당 32명의 환자가 무작위화된 96명의 평가가능한 환자를 포함하도록 계획되었다.

연구는 28일의 스크리닝 기간, 16주 치료 기간 및 4주 추적 조사 기간으로 이루어졌다. 스크리닝 방문 시, 스크리닝 검사를 사용하여 환자를 평가하였다. 포함 기준을 충족하고 배제 기준을 충족하지 않는 환자를 등록하였다.

연구의 전체 기간의 개략도가 도 19에 제공되어 있다. 일단 환자가 연구에 등록되면, NAFLD에 대한 임의의 다른 치료의 사용이 제한되었다. 환자에게 필요한 것으로 여겨지고 연구자의 의견상 안전성 및 효능 평가를 방해하지 않는 임의의 의약(예를 들어, 처방뿐만 아니라 비처방(over the counter, OTC) 약물) 또는 치료적 개입은, 이들이 하기에 제공된 '병용 의약'의 목록에 포함되지 않는 한, 계속되었다.

비교 치료 기간이 시작되기 전에, 환자는 자신의 질환의 기준선 평가를 위해 사이트(site)로 되돌아갔고 적격 환자는 1:1:1 무작위화로 세 가지 병렬 그룹 치료 요법 중 하나에 무작위로 할당되었다:

치료 그룹 A: 16주 동안 1일 2회 경구 투여된 2 × 위약 500 mg 캡슐 (1일 4개의 캡슐).

치료 그룹 B: 16주 동안 1일 2회 경구 투여된 1 × DS102 500 mg 캡슐 및 1 × 위약 500 mg 캡슐 (1일 4개의 캡슐).

치료 그룹 C: 16주 동안 1일 2회 경구 투여된 2 × DS102 500 mg 캡슐 (1일 4개의 캡슐).

이중 맹검 조건을 유지하기 위해, DS102 캡슐과 위약 캡슐은 외관이 동일하였다.

1.3 환자 및 스크리닝

이 연구에 참여하기 위해, 환자는 다음의 포함 기준을 모두 충족해야 하며 다음의 배제 기준 중 어느 것도 충족하지 않아야 한다. 포함 기준 및 배제 기준은 스크리닝 방문(방문 1) 시에 그리고 치료/기준선 방문(방문 2)의 시작 시에 확인되었다.

이 연구에 대한 포함 기준은 다음과 같았다:

임의의 2차 원인이 없는 이미징 또는 조직학에 대한 간지방증의 존재에 의해 NAFLD로 진단된 환자.

스크리닝 중 7일 이상의 간격으로 2회 ALT ≥ 1.5 ULN 및 < 5 ULN을 갖는 환자.

스크리닝 3개월 이내에 NASH 및/또는 ≥ F1 섬유증 또는 NFS ≥ -1.455 또는 Fib-4 ≥ 1.3 또는 피브로스캔(Fibroscan) ≥ 8 ㎪을 나타내는 과거 간 생검을 갖는 환자.

25.0 내지 40.0 ㎏/m²의 체질량 지수(BMI)를 갖는 환자. 제어된 비만 또는 제어된 당뇨병의 병력을 갖는 환자가 연구에 허용되었다.

연구 전 임상 실험실 소견이 연구자의 의견상 연구 참여를 방해하지 않는 환자.

18 내지 75세 사이의 환자.

여성 환자 및 가임 여성 파트너가 있는 남성 환자는 연구 기간 동안 적절한 피임법을 사용하거나 파트너가 불임 시술 받았어야 한다. 적절한 피임법은 다음으로 정의된다: 전신 호르몬 피임약; 살정제와 함께 사용되는 차단 피임법 또는 자궁내 장치; 또는 바람직하고 통상적인 라이프스타일에 따라 그리고 연구 치료와 관련된 위험의 전체 기간 동안 이성애 성교를 삼가는 환자로서 정의된 성적 금욕에 대한 동의. 호르몬 피임약은 기준선 전에 적어도 1개월 동안 안정한 용량이어야 하였다.

연구자와 잘 소통할 수 있고 연구의 요건을 이해하고 준수할 수 있고 서면 사전 동의를 이해하고 이에 서명할 수 있는 환자.

이 연구에 대한 배제 기준은 다음과 같았다:

포함 전 3개월에 5% 초과의 체중 변화와 같은 불안정한 대사 병태를 갖는 환자.

위 우회술, 동소 간 이식(OLT)의 의료/수술 병력을 갖거나 OLT 목록에 있는 환자.

제어되지 않은 2형 진성 당뇨병을 갖는, 즉 스크리닝 시에 HbA1c ≥ 9% (75 mmol/mol)인 환자.

다음 중 하나 이상에 의해 입증되는 바와 같은 비대상성 또는 중증 간질환을 갖는 환자: 확진된 간경변 또는 간경변 의심, 식도 정맥류, 복수, 문맥압 항진증 의심, 스크리닝 60일 이내에 간질환으로 입원, 빌리루빈 ≥ 2 × ULN, 또는 ALT 또는 AST ≥ 5 × ULN. 길버트 증후군(Gilbert's syndrome)을 갖는 환자는 포합형 빌리루빈이 1.5 × ULN 이하인 경우에 적격이었다.

활성이거나 의학적 요법을 필요로 하는 염증성 장 질환을 갖는 환자.

전신 홍반성 루푸스(SLE) 및/또는 류마티스 관절염(RA)과 같은 진단되거나 의심되는 자가면역 질환을 갖는 환자.

치료제로 치료된 피부암(기저 세포 또는 편평 세포 암종) 이외의 비-간 악성종양의 병력 또는 활성을 갖는 환자.

관상 동맥 질환, 뇌혈관 질환, 폐 질환, 신부전, 중증 정신 질환, 호흡기 또는 고혈압 질환을 포함하는, 간 질환 이외의 중대한 전신 질환 또는 주요 질환뿐만 아니라 연구자의 의견상 환자가 연구에 참여하고 완료하는 것이 배제된 당뇨병 및 관절염을 갖는 환자.

항당뇨병 치료(인슐린 감작제 포함) 및/또는 지질 저하 치료를 필요로 하고, 스크리닝 전 적어도 3개월 동안 안정한 용량을 받지 않은 환자는 제외되었다. 환자가 인슐린 의존성인 경우, 이러한 치료는 스크리닝 적어도 3개월 전에 시작했어야 했지만, 용량 변화는 허용되었다.

연구 치료의 임의의 성분에 대해 알려진 과민증을 갖는 환자.

스크리닝에서 인간 면역결핍 바이러스(HIV) 항체, B형 간염 표면 항원 또는 C형 간염 항체에 대해 양성 검사를 받은 환자.

약물-유도, 자가면역 간염, 원발성 담즙성 담관염(PBC), 원발성 경화성 담관염(PSC), 혈색소증, 알파-1 항트립신(A1AT) 결핍 또는 윌슨병(Wilson's disease)과 같은 다른 병인의 간 질환을 갖는 환자.

연구자의 의견상 약물/솔벤트 남용의 상당한 병력이 있는 환자.

연구자의 의견상 알코올 남용 병력을 갖거나 주당 21 유닛(남성) 또는 주당 14 유닛(여성)을 초과하여 음주하는 환자(유닛은 10 ml 또는 8 mg의 순수한 알코올로 이루어짐).

기준선 전 4주 동안 오메가-3 또는 오메가-6 지방산이 풍부한 식이 보충제를 사용한 환자.

연구 치료제를 투여 첫날 전 3개월 이내에 조사용 약물을 사용한 임의의 다른 임상 연구에 참여한 환자.

임신 중, 임신 계획 중, 모유 수유 중이고/이거나 시험 동안 적절한 피임법을 사용하는 것을 꺼리는 환자.

연구자의 의견상, 연구에 참여하기에 적합하지 않은 환자.

1.4 연구 수행

연구 동안, 스크리닝 방문 후 10회의 클리닉 방문을 예정하였다: 비교 치료 기간/기준선의 시작 시 1회(0일차/방문 2) 및 비교 치료 기간 중 8회(2주차/방문 3, 4주차/방문 4, 6주차/방문 5, 8주차/방문 6, 10주차/방문 7, 12주차/방문 8, 14주차/방문 9, 16주차/방문 10). 방문 10으로부터 4주 후에 또는 환자가 연구를 완료하지 않은 경우 최종 방문으로부터 2주 후에 최종 안전성 추적 조사 방문(방문 11)을 수행하였다. 표 17은 연구를 위한 임상 방문을 기술한다.

[표 17]

스크리닝 방문(방문 1): 스크리닝 방문 시 하기를

스크리닝 방문(방문 1): 일단 사전 동의가 얻어지면, 환자는 특허 스크린 번호(Patent Screen Number)를 할당받았다. 이상적으로 환자는 금식하였다. 하기 스크리닝 평가/샘플 수집을 수행하였다: 포함/배제 기준의 검증; 인구통계학적 데이터; 의학적 병력; 신체 검사; 12-리드 심전도(ECG); 활력 징후(혈압, 심박수 및 체온); 임상 실험실 안전성 시험(혈액학, 혈청 생화학 및 응고 시험)을 위한 샘플; 바이러스학; 임신 진단 검사 (가임 여성 환자의 경우); ALT, AST 시험(스크리닝 동안 2회 측정된 ALT); 및 병용 의약 평가. 환자가 유해 사건(AE), 연구 프로토콜 요건 준수의 어려움, 또는 질환 상태의 중대한 변화로 인해 예정된 방문 날짜들 사이에 방문해야 하는 경우, 예정에 없던 방문이 발생하였다. 의학적으로 필요한 모든 절차를 따랐다. 자격이 있는 경우, 클리닉을 떠나기 전에 환자에게 최소 8시간의 공복 기간을 허용하기 위해 다음 방문 전에 아침 식사를 하지 않도록 지시하였다.

치료 기간: 성공적인 스크리닝 방문의 완료 후, 환자는 비교 치료 기간(16주)을 시작하였다. 비교 치료 기간의 시작 시, 지속적인 적격성의 확인 후, 환자에게 3가지 치료 요법 중 하나를 무작위로 배정하였다. 환자는 비교 치료 기간 전체에 걸쳐 1일 2회 DS102 캡슐 또는 위약 캡슐의 할당된 조사용 의약품(investigation medicinal product, IMP)을 복용하였다. IMP의 각각의 자가 투여는 환자 일지 카드에 기록되었다. 환자는 아침 및 저녁에 식사와 함께 또는 식후에 DS102를 복용하도록 지시받았다(환자가 방문 전에 DS102를 복용하는 것을 삼가고 클리닉 방문 후에 가능한 한 빨리 DS102를 복용하도록 지시 받은 경우, 클리닉 방문 3, 방문 4, 방문 6, 방문 8 및 방문 10의 아침 제외). 기준선(방문 2), 2주차(방문 3), 4주차(방문 4), 8주차(방문 6), 12주차(방문 8), 16주차(방문 10) 및 20주차(방문 11)의 시작 시, 환자에게 방문 전 최소 8시간 동안 금식하도록 요청하였다. 그렇지 않은 경우, 공복 지속 시간을 기록하였으며, 환자에게 공복 기간의 지속에 대해 다시 지시하였다. 이어서, 환자에게 가벼운 아침식사(예를 들어 차 또는 오렌지 주스 및 토스트)를 제공하였다. 기준선(방문 2), 8주차(방문 8) 및 16주차(방문 10)에, 환자가 가벼운 아침을 먹기 전에 혈액 샘플링 평가를 수행하였다. 환자가 유해 사건(AE), 연구 프로토콜 요건 준수의 어려움, 또는 질환 상태의 중대한 변화로 인해 예정된 방문 날짜들 사이에 방문해야 하는 경우, 예정에 없던 방문이 발생하였다. 의학적으로 필요한 모든 절차를 따랐다. 연구를 조기에 중단한 환자는 모든 연구 관련 정보가 기록될 수 있도록 환자 철회 후 가능한 한 빨리 방문 10에 대해 예정된 연구 절차를 수행하였다. 연구자의 재량으로, 시험 수행 동안 임의의 시점에 소변 DOA 및 음주 측정 시험(alcohol breath test)을 수행하였다.

기준선(방문 2): 환자는 방문 2에 조사 사이트(investigational site)에 참석하였다. 혈액 샘플링이 수행된 첫 번째 평가였다. 혈액 샘플링 후, 하기 평가들을 수행하였다: 포함/배제 기준의 검증 의학적 병력; 신체 검사; 12-리드 ECG; 약동학적 샘플링; 활력 징후(혈압, 심박수 및 체온); 임상 실험실 안전성 시험(혈액학, 혈청 생화학 및 응고 시험)을 위한 샘플; 지질 프로파일; 요검사; 임신 진단 검사 (가임 여성 환자의 경우); ALT, AST 시험; HOMA-IR/아디포-IR; ELF; 간경직도 및 CAP; FIB-4; NFS (BMI 포함); 바이오마커 혈액 샘플; 탐색적 혈액 샘플; 환자 무작위화; 연구 약물/위약 투여; AE 평가; 및 병용 의약 평가. 모든 연구 참가 기준이 충족되면 연구자는 환자를 무작위화하고 환자 치료 팩 중 하나로부터의 지정된 IMP 또는 위약을 환자에게 제공하였다. 일단 모든 기준선 평가가 완료되면 IMP 또는 위약의 제1 용량을 사이트에서 투여하였다. 환자는 0일차의 저녁에 IMP 또는 위약의 제2 용량을 복용하였다. 이어서, 캡슐을 1일 2회 투여하였다. 환자는 사이트 재방문(방문 3)의 아침에 IMP 또는 위약을 복용하지 않았다. 클리닉을 떠나기 전에 환자에게 최소 8시간의 공복 기간을 허용하기 위해 다음 방문 전에 아침 식사를 하지 않도록 지시하였다.

2주차(방문 3): 환자는 방문 3에 조사 사이트로 복귀하였다. 환자는 방문 3의 아침에 IMP 또는 위약을 복용하지 않았다. 하기 평가들을 수행하였다: 신체 검사; 약동학적 샘플링; 활력 징후(예를 들어 혈압, 심박수 및 체온); ALT, AST 시험; HOMA-IR/아디포-IR; AE 평가; 및 병용 의약 평가. IMP 또는 위약이 반환되었고, 추가의 IMP 또는 위약이 환자에게 공급되었다. 환자는 모든 방문 평가가 완료되자마자 이들의 다음 용량의 IMP 또는 위약을 복용하였다. 캡슐을 계속해서 1일 2회 투여하였다. 이 방문의 완료 시, 환자에게 2주 후 방문 4에 조사 사이트로 복귀해야 한다고 권고하였다. 환자는 사이트 재방문(방문 4)의 아침에 IMP 또는 위약을 복용하지 않았다. 클리닉을 떠나기 전에 환자에게 최소 8시간의 공복 기간을 허용하기 위해 다음 방문 전에 아침 식사를 하지 않도록 지시하였다.

4주차(방문 4): 환자는 방문 4에 조사 사이트로 복귀하였다. 환자는 방문 4의 아침에 IMP 또는 위약을 복용하지 않았다. 하기 평가들을 수행하였다: 신체 검사; 약동학적 샘플링; 활력 징후(혈압, 심박수 및 체온); 임상 실험실 안전성 시험(혈액학, 혈청 생화학 및 응고 시험)을 위한 샘플; 임신 진단 검사 (가임 여성 환자의 경우); ALT, AST 시험; HOMA-IR/아디포-IR; AE 평가; 및 병용 의약 평가. IMP 또는 위약이 반환되었고, 추가의 IMP 또는 위약이 환자에게 공급되었다. 환자는 모든 방문 평가가 완료되자마자 이들의 다음 용량의 IMP 또는 위약을 복용하였다. 캡슐을 계속해서 1일 2회 투여하였다. 이 방문의 완료 시, 환자에게 2주 후 방문 5에 조사 사이트로 복귀해야 한다고 권고하였다. 환자는 사이트 재방문(방문 5)의 아침에 IMP 또는 위약을 복용하지 않았다.

6주차(방문 5): 환자는 방문 5에 조사 사이트로 복귀하였다. 하기 평가들을 수행하였다: AE 평가 및 병용 의약 평가. IMP 또는 위약이 반환되었고, 추가의 IMP 또는 위약이 환자에게 공급되었다. 환자는 모든 방문 평가가 완료되자마자 이들의 다음 용량의 IMP 또는 위약을 복용하였다. 캡슐을 계속해서 1일 2회 투여하였다. 이 방문의 완료 시, 환자에게 2주 후 방문 6에 조사 사이트로 복귀해야 한다고 권고하였다. 환자는 사이트 재방문(방문 6)의 아침에 IMP 또는 위약을 복용하지 않았다. 클리닉을 떠나기 전에 환자에게 최소 8시간의 공복 기간을 허용하기 위해 다음 방문 전에 아침 식사를 하지 않도록 지시하였다.

8주차(방문 6): 환자는 방문 6에 조사 사이트로 복귀하였다. 환자는 방문 6의 아침에 IMP 또는 위약을 복용하지 않았다. 혈액 샘플링이 수행된 첫 번째 평가였다. 혈액 샘플링 후, 하기 평가들을 수행하였다: 신체 검사; 약동학적 샘플링; 활력 징후(혈압, 심박수 및 체온); 임상 실험실 안전성 시험(혈액학, 혈청 생화학 및 응고 시험)을 위한 샘플; 지질 프로파일; 임신 진단 검사 (가임 여성 환자의 경우); ALT, AST 시험; HOMA-IR/아디포-IR; 바이오마커 혈액 샘플; AE 평가; 및 병용 의약 평가. IMP 또는 위약이 반환되었고, 추가의 IMP 또는 위약이 환자에게 공급되었다. 환자는 모든 방문 평가가 완료되자마자 이들의 다음 용량의 IMP 또는 위약을 복용하였다. 캡슐을 계속해서 1일 2회 투여하였다. 이 방문의 완료 시, 환자에게 2주 후 방문 7에 조사 사이트로 복귀해야 한다고 권고하였다. 환자는 사이트 재방문(방문 7)의 아침에 IMP 또는 위약을 복용하지 않았다.

10주차(방문 7): 환자는 방문 7에 조사 사이트로 복귀하였다. 하기 평가들을 수행하였다: AE 평가 및 병용 의약 평가. IMP 또는 위약이 반환되었고, 추가의 IMP 또는 위약이 환자에게 공급되었다. 환자는 모든 방문 평가가 완료되자마자 이들의 다음 용량의 IMP 또는 위약을 복용하였다. 캡슐을 계속해서 1일 2회 투여하였다. 이 방문의 완료 시, 환자에게 2주 후 방문 8에 조사 사이트로 복귀해야 한다고 권고하였다. 환자는 사이트 재방문(방문 8)의 아침에 IMP 또는 위약을 복용하지 않았다. 클리닉을 떠나기 전에 환자에게 최소 8시간의 공복 기간을 허용하기 위해 다음 방문 전에 아침 식사를 하지 않도록 지시하였다.

12주차(방문 8): 환자는 방문 8에 조사 사이트로 복귀하였다. 환자는 방문 8의 아침에 IMP 또는 위약을 복용하지 않았다. 하기 평가들을 수행하였다: 신체 검사; 약동학적 샘플링; 활력 징후(혈압, 심박수 및 체온); 임상 실험실 안전성 시험(혈액학, 혈청 생화학 및 응고 시험)을 위한 샘플; 임신 진단 검사 (가임 여성 환자의 경우); ALT, AST 시험; HOMA-IR/아디포-IR; AE 평가; 및 병용 의약 평가. IMP 또는 위약이 반환되었고, 추가의 IMP 또는 위약이 환자에게 공급되었다. 환자는 모든 방문 평가가 완료되자마자 이들의 다음 용량의 IMP 또는 위약을 복용하였다. 캡슐을 계속해서 1일 2회 투여하였다. 이 방문의 완료 시, 환자에게 2주 후 방문 9에 조사 사이트로 복귀해야 한다고 권고하였다. 환자는 사이트 재방문(방문 9)의 아침에 IMP 또는 위약을 복용하지 않았다.

14주차(방문 9): 환자는 방문 9에 조사 사이트로 복귀하였다. 하기 평가들을 수행하였다: AE 평가 및 병용 의약 평가. IMP 또는 위약이 반환되었고, 추가의 IMP 또는 위약이 환자에게 공급되었다. 환자는 모든 방문 평가가 완료되자마자 이들의 다음 용량의 IMP 또는 위약을 복용하였다. 캡슐을 계속해서 1일 2회 투여하였다. 이 방문의 완료 시, 환자에게 2주 후 방문 10에 조사 사이트로 복귀해야 한다고 권고하였다. 환자는 사이트 재방문(방문 10)의 아침에 IMP 또는 위약을 복용하지 않았다. 클리닉을 떠나기 전에 환자에게 최소 8시간의 공복 기간을 허용하기 위해 다음 방문 전에 아침 식사를 하지 않도록 지시하였다.

16주차(방문 10) 또는 조기 철회: 환자는 방문 10에 조사 사이트로 복귀하였다. 환자는 방문 10의 아침에 IMP 또는 위약을 복용하지 않았다. 혈액 샘플링이 수행된 첫 번째 평가였다. 혈액 샘플링 후, 하기 평가들을 수행하였다: 신체 검사; 12-리드 ECG; 약동학적 샘플링; 활력 징후(혈압, 심박수 및 체온); 임상 실험실 안전성 시험(혈액학, 혈청 생화학 및 응고 시험)을 위한 샘플; 요검사; 지질 프로파일; 임신 진단 검사 (가임 여성 환자의 경우); ALT, AST 시험; HOMA-IR/아디포-IR; ELF; 간경직도 및 CAP; FIB-4; NFS [BMI 포함]; 바이오마커 혈액 샘플; 탐색적 혈액 샘플; AE 평가; 및 병용 의약 평가. IMP 또는 위약이 반환되었다. IMP 또는 위약 블리스터 팩 또는 환자 일지 카드는 더 이상 지급되지 않았다. 이 방문에서 연구 평가의 완료 후, 연구 제한이 계속되었다. 이 방문의 완료 시, 환자에게 이 방문 이후의 임의의 AE를 평가하고 안전성 및 효능 평가를 수행하기 위해 4주 후 방문 11에 조사 사이트로 복귀해야 한다고 권고하였다. 클리닉을 떠나기 전에 환자에게 최소 8시간의 공복 기간을 허용하기 위해 다음 방문 전에 아침 식사를 하지 않도록 지시하였다.

추적 조사 방문(20주차/방문 11): 환자는 방문 10으로부터 4주 후에 (또는 초기 철회 방문으로부터 2주 후에) 조사 사이트로 복귀하였다. 하기 평가들을 수행하였다: 신체 검사; 약동학적 샘플링; 활력 징후(혈압, 심박수 및 체온); 임상 실험실 안전성 시험(혈액학, 혈청 생화학 및 응고 시험)을 위한 샘플; 임신 진단 검사 (가임 여성 환자의 경우); ALT, AST 시험; HOMA-IR/아디포-IR; 바이오마커; AE 평가; 및 병용 의약 평가.

1.5 평가

효능 평가는 하기를 포함하였다: ALT, AST, ALT:AST 비; HOMA-IR/아디포-IR; ELF; 간경직도 및 CAP; FIB-4 지수; 및 NFS. 각각의 상세한 설명이 하기에 제공된다.

ALT, AST, ALT:AST 비: 증가된 간 효소(ALT 및 AST)는 간 손상의 마커이며 방문 1/스크리닝(스크리닝 중 7일 이상의 간격으로 2회), 방문 2/기준선, 방문 3/2주차, 방문 4/4주차, 방문 6/8주차, 방문 8/12주차, 방문 10/16주차 및 추적 조사 방문 11/20주차에 평가되었다.

HOMA-IR/아디포-IR: HOMA-IR/아디포-IR 수준은 인슐린 저항성을 측정하는 방법이다. HOMA-IR은 공복 혈장 인슐린(FPI)과 공복 혈장 글루코스(FPG)를 곱한 다음 상수 405로 나눔으로써 계산된다. 아디포-IR은 공복 비-에스테르화 지방산(NEFA)과 공복 인슐린을 곱함으로써 계산된다. 방문 2/기준선, 방문 3/2주차, 방문 4/4주차, 방문 6/8주차, 방문 8/12주차, 방문 10/16주차 및 추적 조사 방문 11/20주차에 혈액 샘플을 취하여 HOMA-IR 및 아디포-IR을 평가하였다. 모든 대상이 혈액 샘플링 전 최소 8시간 동안 금식해야 했다. 대상이 최소 8시간 동안 금식하지 않은 경우, 공복 지속 시간을 기록하였고, 대상에게 다음 임상 방문을 위해 적절하게 금식하도록 권장하였다.

ELF: ELF 점수는 메탈로프로테이나제 1(TIMP-1)의 조직 억제제, 유형 III 프로콜라겐(PIIINP)의 아미노-말단 프로펩티드 및 하이알루론산(HA)으로 이루어진 세포외 기질 마커 세트이다. 기준선(방문 2) 및 16주차(방문 10)에 혈액 샘플을 취하여 이 평가를 수행하였다.

간경직도 및 CAP: 간경직도 및 CAP는 순간 탄성영상술(예를 들어, 피브로스캔(등록상표) 502 터치(Touch) 모델 또는 등가물)을 사용하여 평가하였다. 환자를 금식시키고, 가능하다면, 기준선(0주차) 및 방문 10(16주차) 동안 하루 중 같은 시간에 스캔하였다. 이러한 평가를 위해, 하기 조건들이 충족되었다: 환자는 간 생검(LB)에 사용된 것과 유사한 자세로 머리 뒤에서 최대 외전으로 오른팔을 사용하여 등 대고 누운 자세로 누웠다; 변환기의 팁이 간우엽 위의 갈비뼈들 사이의 피부 상에 배치되었다(의사는 늑간 공간에 프로브를 배치하여 측정을 수행하였다); 피브로스캔(등록상표) 검사 동안, 자동 프로브 선택 도구(Automatic Probe Selection tool) (APS)에 의해 M+ 또는 XL+ 프로브의 선택이 결정되었다(APS 도구가 "XL+ 프로브"를 사용하거나 "M+ 및 XL+ 프로브" 사이에서 계속 "전환"하도록 권고하는 경우, XL+ 프로브만 사용되었다); 그리고 수술자는, 초음파 시간 모션 이미지에 의해 보조를 받아서, 큰 혈관 구조가 없는 간의 부분의 위치를 찾았다(측정 깊이는 XL+ 프로브의 경우 35 내지 75 mm였고 M+ 프로브의 경우 25 내지 65 mm였고, 탐구된 부피는 3 ㎤일 것이다). 각각의 환자에 대해, 수술자는 동일한 스폿(spot)에서 XL+ 또는 M+ 프로브로 적어도 10회의 유효 측정 또는 최대 20회의 시도를 포함하는 검사를 수행하였다. 전체 검사는 10 내지 15분 이하로 지속되었다. 최종 경직도 및 CAP 값을 유효 측정의 중앙값으로서 기록하였다.

FIB-4 인덱스: FIB-4 지수는 연령, 혈소판 수, ALT 수준 및 AST 수준을 기반으로 하며 기준선(방문 2) 및 16주차(방문 10)에 평가되었다. FIB-4 점수는 하기 식에 의해 나타나는 바와 같이 결정된다.

NFS: NFS는 연령, 고혈당증, BMI, 혈소판 수, 알부민 수준 및 AST/ALT 비를 기반으로 한다. NAFLD 섬유증 점수 = -1.675 + 0.037 × 연령 (세) + 0.094 × BMI (㎏/m2) + 1.13 × IFG/당뇨병 (예 = 1, 아니오 = 0) + 0.99 × AST/ALT 비 ― 0.013 × 혈소판 (×109/l) ― 0.66 × 알부민 (g/dl). NFS를 기준선(방문 2) 및 16주차(방문 10)에 평가하였다.

안전성 평가는 다음을 포함하였다: 의학적 병력; 신체 검사; ECG; 활력 신호; 임상 실험실 안전성 시험(예를 들어, 혈액학, 혈청 생화학, 응고, 지질 프로파일, 및 요검사); 바이러스학; 임신 진단 검사; 혈액 샘플링; 약동학적 샘플링; 탐색적 혈액 수집; 바이오마커 혈액 수집; 소변 DOA 및 음주 측정 시험; 유해 사건 평가; 병용 의약; 생분석; 샘플링, 저장, 취급; 및 운송; 및 제한. 각각의 상세한 설명이 하기에 제공된다.

의학적 병력: 배제 기준이 충족되지 않도록 보장하기 위해 스크리닝 방문(방문 1) 및 기준선(방문 2)에 연구자 또는 피지명자에 의해 환자의 의학적 병력에 대한 완전한 검토를 수행하였다. 연구자에 의해 연구와 관련이 있는 것으로 간주되든 그렇지 않든 임의의 수반되는 질병이 보고되었다. 가능한 경우 병태의 진단일 또는 지속 시간을 기록하였다.

신체 검사: 방문 1/스크리닝, 방문 2/기준선, 방문 3/2주차, 방문 4/4주차, 방문 6/8주차, 방문 8/12주차, 방문 10/16주차 및 추적 조사 방문 11/20주차에 현지 관행에 따라서 표 19의 연구 흐름도에 따라 연구자에 의해 신체 검사(키 및 체중 포함)를 수행하였다. 이 검사는 기준선에서 완전히 완료되었고, 그 후에 증상-지향적이었다(즉, 환자에 의해 지시되지 않는 한 신체 시스템의 표준 패널을 평가하지 않았다). 예를 들어, 환자는 '발진'의 존재를 연구자에게 보고한 다음 피부를 평가하여야 한다. 임상적으로 보증되지 않는 한 추가적인 신체 시스템을 평가하는 것은 필요하지 않았다. 임의의 비정상적인 결과를 기록하였다. 기준선 검사와 비교하여 신체 검사의 소견의 변화를 AE로서 기록하였다.

ECG: 10초 리드 II 리듬 스트립을 갖는 12-리드 ECG 10 mm/1 mv, 25 mm/s를 각각의 시점에서 기록하였다. ECG를 GE Mac 1200 또는 등가 모델을 사용하여 기록하였다. 환자는 ECG를 측정하기 전에 5분 동안 완전히 누운 자세로 조용히 휴식하였다. 방문 1/스크리닝, 방문 2/기준선 및 방문 10/16주차에 표 19의 연구 흐름도에 표시된 날에 기록을 수행하였다.

활력 징후: 방문 1/스크리닝, 방문 2/기준선, 방문 3/2주차, 방문 4/4주차, 방문 6/8주차, 방문 8/12주차, 방문 10/16주차 및 추적 조사 방문 11/20주차에 표 19의 연구 흐름도에 따라 활력 징후 측정을 수행하였다. 임의의 혈액 샘플을 취하기 전에 활력 징후 측정을 수행하였다. 환자가 서명한 후 발견이 이루어졌다면 임상적으로 유의한 것으로 간주되는 모든 새로운 발견 또는 이전의 발견에 대한 변화를 AE로서 기록하였다. 활력 징후 측정은 하기를 포함하였다: 누운 자세(예를 들어, 적어도 5분 휴식 후) 수축기 및 이완기 혈압으로서 수행된 혈압(mmHg); 분당 맥박수(bpm) 단위의 휴식 시 심박수; 및 임상 관행에 따라 취한 체온.

임상 실험실 안전성 시험: 혈액학, 혈청 생화학, 응고, 지질 프로파일, 및 요검사를 위해 안전성 시험을 수행하였다: 일상적인 혈액학, 혈청 생화학, 응고 및 요검사 시험과 함께 지질 프로파일을 위해 표 19의 연구 흐름도에 따라 혈액 및 소변 샘플을 취하였다. 모든 샘플을 중앙 실험실에서 분석하였다. 모든 대상이 혈액 샘플링 전 최소 8시간 동안 금식하였다. 대상이 최소 8시간 동안 금식하지 않은 경우, 공복 지속 시간을 기록하였고, 대상에게 다음 임상 방문을 위해 적절하게 금식하도록 권장하였다.

혈액학: 적혈구 수, 헤모글로빈, 헤마토크릿, 백혈구 수, 감별 백혈구 카운트, 혈소판 수 및 망상적혈구 수를 포함하는 전 혈구 수;

혈청 생화학: 요소 (혈액 요소 질소; BUN), 크레아티닌, 요산, 총 빌리루빈, 간접 및 직접 빌리루빈, 나트륨, 중탄산칼륨, 인, 염화칼슘, 알칼리 포스파타제(ALP), 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제(AST), 알라닌 아미노트랜스퍼라제(ALT), ALT/AST 비, 락테이트 탈수소효소(LDH), 크레아틴 포스포키나제(CPK), 알부민, 총 단백질, 콜레스테롤, 트라이글리세라이드, 글루코스, C-반응성 단백질(CRP).

응고: 프로트롬빈 시간(PT), 국제 표준화 비율(INR) 및 활성화된 부분 프로트롬빈 시간(APTT).

지질 프로파일: LDL, HDL, 및 VLDL-C.

요검사: pH, 단백질, 글루코스, 혈액, 케톤, 백혈구, 백혈구 에스테라제, 빌리루빈, 비중, 우로빌리노겐 및 질산염. 혈액, 단백질, 백혈구 에스테라제 또는 질산염/아질산염이 존재하는 경우 리플렉스 마이크로(Reflex micro).

바이러스학: 표 19의 연구 흐름도에서 상세히 설명된 바와 같이 HIV, Hep C 및 Hep B 를 포함하는 바이러스학 시험을 수행하기 위해 혈액 샘플을 취하였다.

임신 진단 검사: 가임 여성의 경우, 방문 1/스크리닝, 방문 2/기준선, 방문 4/4주차, 방문 6/8주차, 방문 8/12주차, 방문 10/16주차 및 방문 11/20주차에 표 19의 연구 흐름도에 따라 임신 진단 검사를 수행하였다.

혈액 샘플링: 혈액 샘플을 얻고, 샘플 분석 및 검증에 따라 각각의 연구자에 의해 임상적으로 유의한 값에 대해 실험실 결과를 검토하였다. 안전성 실험실 시험의 반복을 위해 추가적인 혈액이 필요할 수 있다.

약동학적(PK) 샘플링: 방문 2/기준선, 방문 3/2주차, 방문 4/4주차, 방문 6/8주차, 방문 8/12주차, 방문 10/16주차 및 추적 조사 방문 11/20주차에 표 19의 연구 흐름도에 따라 직접 정맥천자를 통해 PK 분석용 혈액 샘플을 수집하였다. 각 시점에 1 mL의 혈액 샘플을 취하였다. 원심분리 후, 혈장 샘플을 둘로 나누고 생분석학적 분석이 완료될 때까지 백업 샘플을 중앙 실험실에 보관하였다.

탐색적 혈액 수집: 기준선(0주차) 및 방문 10/16주차에 표 19의 연구 흐름도에 따라 혈액을 수집하고 추후의 잠재적인 유전자 어레이 분석 또는 추가적인 탐색적 시험을 위해 저장하였다.

바이오마커 혈액 수집: 기준선(0주차), 방문 6/8주차, 방문 10/16주차 및 추적 조사 방문 11/20주차에 표 19의 연구 흐름도에 따라 혈액을 수집하고 잠재적 바이오마커 분석을 위해 저장하였다.

소변 DOA 및 음주 측정 시험: 연구자의 재량으로 임상적으로 적절할 때, 음주 측정 시험을 수행하였고, 시험 수행 동안 임의의 시점에 환자로부터 소변 샘플을 취하고 시험을 수행하여 다음을 검출하였다: 암페타민, 바르비투레이트, 벤조다이아제핀, 코카인, 칸나비노이드, 및 아편제.

병용 의약: 환자는 스크리닝 전 적어도 3개월 동안 안정한 용량의 임의의 병용 의약을 받았고, 용량은 전체 연구 지속 시간 동안 안정하게 유지되어야 한다. 환자가 인슐린 의존성인 경우, 이러한 치료는 스크리닝 적어도 3개월 전에 시작했어야 했지만, 용량 변화는 허용되었다.

제한: 연구는 식이, 알코올, 카페인 및 신체적 활동 제한을 포함한다. 식이의 경우, 환자는 연구 동안 그리고 기준선 이전 4주 동안 오메가-3 또는 오메가-6 지방산이 풍부한 식품 보충제(예를 들어, 대구 간유 캡슐) 섭취를 피하였다. 알코올의 경우, 환자는 주당 21 유닛(남성) 또는 주당 14 유닛(여성)을 초과하여 알코올을 섭취하는 것을 피하였고, 유닛은 10 ml 또는 8 mg의 순수한 알코올로 이루어진다. 연구 전 또는 연구 동안 카페인 제한은 없었다. 신체 활동의 경우, 환자는 안전성 실험실 시험(예를 들어, 생화학) 전에 적어도 3 내지 4시간 동안 운동 및 격렬한 신체 활동을 피해야 했다.

1.6 조사용 약물

DS102 캡슐은 점도 개질제로서 5% w/w의 콜로이드성 이산화규소와 함께 500 mg의 15-HEPE 에틸 에스테르(EE)를 함유하는 백색의 불투명한 경질-쉘 캡슐(크기 0)이었다.

DS102 위약(파라핀 오일)은 점도 개질제로서 1% w/w의 콜로이드성 이산화규소와 함께 당량 충전 중량의 액체 파라핀을 함유하는 백색의 불투명한 경질-쉘 캡슐(크기 0)이었다.

DS102 및 위약 캡슐은 의도하지 않은 사용으로부터 보호된 보안 영역(예를 들어, 잠금 캐비닛 또는 약물 저장실) 내에 2 내지 8℃에서 저장되었다. 표지는 용량에 대해 맹검이었고 무작위화 번호를 포함하였다.

투여량 및 투여: 이 연구는 16주의 총 지속 시간 동안 1일 2회 경구 투여되는 DS102와 위약의 비교를 포함하였다. 마지막 연구 약물 투여는 16주차 방문/조기 종결(ET) 방문 날에 일어났다. 환자는 식사와 함께 또는 식후에 캡슐을 복용해야 했다. 연구에서 허용되는 다른 병태에 대한 의약(들)은 평소와 같이 복용되었다. 지갑형 블리스터 팩은 7일분 4개의 캡슐로 구성되었고, 마지막으로 환자는 배정된 의약을 연속 16주 동안 복용하였다.

1.7 유해 사건 및 중증 유해 사건

이 연구에 대한 유해 사건(AE) 및 중증 유해 사건(serious adverse event, SAE)은 다음과 같이 정의되었다.

유해 사건(AE): 조사용 IMP(들)와 관련된 것으로 간주되든 그렇지 않든, 제1 용량의 연구 약물을 복용한 환자에게 발생하는 임의의 바람직하지 않은 경험. IMP 및 중증도에 대한 관계를 정의하는 사례 보고서 형태로 AE를 기록하였다.

중증 유해 사건(SAE): 환자가 제1 용량의 연구 약물 후 심각한 유해 사건을 경험한 경우, 사건을 SAE로서 기록하였다. SAE는 다음 중 임의의 것을 포함하도록 임의의 용량에서의 부적절한 의학적 발생을 특징으로 한다: 사망을 초래하거나, 생명을 위협하거나, 환자의 입원 또는 기존 입원의 연장을 필요로 하거나, 또는 지속적이거나 상당한 장애/불능 상태를 초래한다. 용어 "생명을 위협하는"은 환자가 사건 시점에 사망할 위험이 있었던 사건을 지칭한다. 이는 더 심각했다면 가설적으로 사망을 야기했을 수 있는 사건을 지칭하지는 않는다. 중요하지만 생명을 위협하지 않는 사건의 예는 응급실에서의 집중 치료, 알레르기성 기관지 경련, 입원을 초래하지 않은 혈액 질환 또는 경련, 또는 약물 의존성 또는 약물 남용의 발달을 포함하였다.

예상외의 유해 사건(Unexpected Adverse Event, UAE): 이전에 연구자의 브로셔 또는 유사한 제품 정보 시트, 예컨대 제품 특성 요약(Summary of Products Characteristics, SPC)에 보고되지 않은 경험.

AE의 강도는 연구자에 의해 자신의 임상 경험에 기초하여 이루어진 사건의 상대적 중증도의 추정치이다. 하기 정의를 사용하여 AE의 중증도를 평가하였다:

경증: 유해 사건이 일시적이고 쉽게 용인되었다.

중등도: 유해 사건이 환자에게 불편함을 야기하고 환자의 일상 활동을 방해하였다.

중증: 유해 사건이 환자의 일상 활동의 상당한 지장을 초래하였고, 무력화하거나 생명을 위협할 수 있다.

실험적 치료에 대한 AE의 인과성은 환자의 병력, 가장 최근의 신체 검사 소견 및 병용 의약을 고려하여 확립되었다. 하기 정의를 사용하여 AE의 인과성을 결정하였다:

관련 없음: 실험적 치료와 관련하여, AE 개시의 시간적 관계가 합리적이지 않았거나 다른 원인이 AE의 발생을 설명할 수 있었다.

관련 있음: 실험적 치료와 관련하여, AE 개시의 시간적 관계가 합리적이었고, 치료에 대한 알려진 반응 패턴을 따랐고, 대안적인 원인이 있을 것 같지 않았다.

추적 조사 기간까지의 전체 연구 기간 동안 모든 AE가 보고되었다.

1.8 약물-유도 간 손상

중증 약물-유도 간 손상(DILI): 인지된 인과관계와 관계없이, 중증 DILI의 경우에 에피소드가 해결된 것으로 간주될 때까지 조사용 약물을 중단하였다. 조사용 약물이 간 손상의 원인인 것으로 간주된 경우, 환자를 해당 약물로 재시험하지 않았다. 중증 DILI는 총 빌리루빈 > 2× ULN 또는 INR > 1.5에 의해 입증되는 바와 같은 간 장애의 증거를 규정한다.

비정상적인 기준선 간 생화학을 갖는 환자: 비정상적인 기준선 간 생화학을 결정하는 데 있어서, ULN을 사용하는 대신 기준선 수준에 대한 배수 증가를 계산하였다. 따라서, 3× 기준선 ALT 또는 AST(또는 >200 IU/L)의 수치 후에, 생화학적 변화가 개선되고 있는지 또는 악화되고 있는지를 확인/결정하기 위해 72시간 이내에 반복 시험이 이어졌다. AE 정보는 철저한 신체 검사와 함께 수집되었다. 간 병인 스크린 및/또는 다른 적절한 시험을 수행하였다. 간 기능장애의 경우, 환자는 중증 DILI로서 관리되었다. 중증 DILI에 해당하는 임의의 기준이 발생하면 약물 치료의 일시 중지가 고려되었다.

1.9 중증 유해 반응 및 예상외의 유해 반응

유해 반응: 임의의 용량과 관련된 의약품에 대한 모든 유독하고 의도치 않은 반응이 유해한 약물 반응으로 간주되었다. 어구 "의약품에 대한 반응"은 의약품과 AE 사이의 인과관계가 적어도 합리적인 가능성이었음(즉, 관계를 배제할 수 없음)을 의미한다. 시판 의약품의 경우, 유해 반응은 질병의 예방, 진단 또는 치료를 위해 또는 생리학적 기능의 변경을 위해 인간에서 일반적으로 사용되는 용량에서 발생하며 유독하고 의도치 않은, 약물에 대한 반응이다.

예상외의 유해 반응: 해당 제품 정보와 성질 또는 중증도가 일치하지 않는 유해 반응.

의심되는 예상외의 중증 유해 반응(Suspected Unexpected Serious Adverse Reaction, SUSAR): IMP와 관련되었을 수 있고 상기 정의에 따라 예상되지 않는 임의의 중증 유해 반응.

1.10 통계 방법론 및 데이터 관리

이 임상 시험은 무작위화, 이중 맹검, 위약-대조군 병렬 그룹 설계를 사용하였다. 무작위화는 배정 편향을 최소화하고, 알려진 환자 속성과 미지의 환자 속성(예를 들어, 인구통계학적 특징)이 치료 그룹들에 걸쳐 고르게 균형을 이룰 가능성을 증가시키기 위해 사용되었다. 맹검은 데이터 수집 및 안전성 및 효능의 평가 동안 잠재적인 편향을 줄이기 위해 사용되었다. 비교 대상으로 위약을 사용하는 것은 짧은 연구 기간 및 위약 치료의 결과이었을 수 있는 임의의 가능한 장기간 비가역적 손상의 부재에 기초하여 환자에서 안전성 및 효능을 평가하기 위한 합리적인 설계로서 정당화되었다.

샘플 크기의 추정: 활성 약물과 위약 아암(arm) 사이의 백분율 반응에서 20% 델타, 25%의 표준 편차 및 20%의 탈락률(dropout rate)을 가정하면, 이는 5% 유의 수준 및 80% 검정력을 갖는 통계 시험을 위해 그룹당 32명의 환자가 필요하였다. 샘플 크기는 비맹검으로부터의 권장사항에 기초하여 중간 분석에서 재추정되었다. 샘플 크기는 1차 평가변수에 대해 80%의 조건부 검정력을 달성하기 위해 총 최대 150명의 환자까지 증가할 수 있었다.

맹검 및 암호 해독 지침: 모든 연구 현장 직원뿐만 아니라 연구의 모니터링 또는 수행에 관련된 직원은 개별 환자 치료 배정에 대해 맹검이었다. 무작위화 세부사항은 공식적인 비맹검 시점까지, 권한이 있는 사람이 비상시에만 접근 가능하게, 엄격하게 기밀로 유지되었다. 모든 환자 데이터가 기록 및 검증되고 데이터베이스가 잠긴 후에만 시험에 대한 맹검 코드가 파괴되었다.

중간 분석 및 데이터 모니터링: 안정성 중간 분석은 환자의 적어도 50% 가 16주차 방문을 완료했을 때의 조건부 검정력을 추정하기 위해 수행되었다. 중간 분석은 1차 및 공동-1차 효능 평가변수뿐만 아니라 2차 평가변수에 대해 수집된 데이터에 기초하였고, 1차 연구 목적을 달성하고, 샘플 크기를 잠재적으로 재추정하고, 덜 효과적인 치료 아암을 잠재적으로 중단하기 위해 조건부 검정력을 추정하는 데 사용되었다.

임상적으로 의미 있는 반응: 위약과 비교하여 ALT 또는 간경직도의 적어도 20%의 더 높은 평균 또는 중앙값 감소 및 위약과 비교하여 ALT와 간경직도 둘 모두의 적어도 10%의 더 높은 평균 또는 중앙값 감소

분석 세트는 등록된 세트, 전체 분석 세트(FAS), 프로토콜별 세트(PPS), 안전성 분석 세트(SAS), 및 약동학적(PK) 세트를 포함하였다. 각각의 분석 세트에 대한 상세한 설명이 하기에 제공된다.

등록된 세트: 사전 동의 양식에 서명한 환자. 스크린 실패는 적격성 요건을 충족하지 않고 무작위화 전에 연구로부터 철회된 등록된 집단으로부터의 환자였다.

FAS: 연구 치료제를 적어도 1회 투여 받고 적어도 1회의 기준선-후 측정을 받은 무작위화된 환자. 환자는 실제로 어떤 치료를 받았는지에 관계없이 무작위화 시에 배정된 치료에 따라 분석되었다.

PPS: 주요 프로토콜 위반이 없는 FAS 환자로 이루어진 FAS의 하위세트. 모든 프로토콜 편차는 데이터베이스 잠금 전에 사례별로 평가 및 문서화되었고, 효능 결과에 심각한 영향을 미치는 것으로 간주되는 주요 편차는 관련 환자가 PPS로부터 제외되게 한다.

SAS: 연구 치료제를 적어도 1회 복용한 환자. 환자는 실제로 받은 치료에 따라 분석되었다.

PK 세트: 적어도 하나의 DS102 PK 농도를 갖는 SAS에서의 환자. 환자는 실제로 받은 치료에 따라 분석되었다.

안전성 분석: 각각의 환자에 대해 인구통계학적, 의학적 병력 및 신체 검사 데이터가 열거되고 설명적으로 요약되었다. 연구 동안 기록된 모든 AE는 국제의약용어(Medical Dictionary for Regulatory Activities, MedDRA)의 최신 버전을 사용하여 기관계 분류(system organ class) 및 바람직한 용어로 코딩되었다. AE는 표로 작성되고, 치료, 치료와의 관계, 심각성 및 중증도별로 요약되었다. 임상 실험실 값(예를 들어, 혈액학, 생화학, 및 요검사)은 치료 및 날짜별로 각 환자에 대해 열거되었다. 실험실 정상 범위를 벗어난 값은 이들의 임상적 중요성과 관련된 주석과 함께 별도로 열거되었으며, 이때 잠재적으로 임상적으로 유의한 비정상(abnormality)은 치료에 의해 강조되고 요약되었다. 투여 전에 수득된 임상 실험실 값은 기준선 값으로 정의되었다. 음주 측정 시험 및 DOA 시험 결과는 각각의 환자에 대해 열거되었다. 활력 징후의 개별 값은 각각의 치료 및 날짜에 대해 열거되고 설명적으로 요약되었다. 12 리드 ECG 평가는 모든 관련 주석과 함께 각각의 환자에 대해 열거되었고 치료 및 날짜별로 요약되었다. 세계 건강 기구(World Health Organization) 약물 사전의 최신 버전에 따른 의약 그룹 및 하위그룹에 의해 분류된 병용 의약(존재하는 경우)은 치료별로 열거되고 요약되었다. 일반적으로, 변수의 특성에 따른 적절한 기술 통계가 적용되었다. 범주형 변수는 개수 및 백분율을 사용하여 제시된 반면, 연속형 변수는 평균, 표준 편차, 중앙값, 최솟값, 최댓값, 변동 계수 및 환자 수를 사용하여 제시되었다.

약동학적 분석: 15(S)-HEPE의 혈장 농도는 표로 작성되고 설명적으로 요약되었다. 15(S)-HEPE의 개별 및 평균 혈장 농도-시간 프로파일을 그래프로 제시하였다.

1차 변수: 1차 효능 변수는 16주차(방문 10)에 혈청 ALT의 기준선으로부터의 변화였다. 공변량으로서의 상응하는 기준선 값을 포함하는 공분산 분석(ANCOVA) 모델을 통해 활성 치료 그룹을 위약과 비교하였다. 위약 대비 비교는 던넷(Dunnett) 다중 검정(Dunnett's multiple testing) 절차에 따라 수행되었다. 16주차 값의 누락의 경우, 이용 가능한 마지막 값을 이월하였다(LOCF). 유사한 방법을 간경직도에 적용하였다. ALT의 경우, 종방향 모델링을 추가로 고려하였다.

2차 변수: 2차 효능 변수 및 기준선부터 16주차(방문 10)까지의 그의 변화는 치료 그룹 및 방문당 기술 통계로 요약되었다. 이것은 AST, AST:ALT 비, CAP에 의해 측정된 간 지방, 순간 탄성영상술에 의한 간경직도 측정, FIB-4, NFS, ELF 및 HOMA-IR/아디포-IR에 적용되었다. 활성 치료 그룹에 대한 기준선으로부터의 변화는 중심 효과에 대한 용어를 포함하여 ANOVA 모델을 통해 위약과 비교되었다. 5% 유의 수준이 모든 치료 비교에 사용되었다.

1.11 결과

이 연구는 NAFLD로 진단 받고 1일 1 g 또는 2 g의 용량으로 DS102를 투여 받은 환자가 대사 과부하 마커의 통계적으로 유의한 감소 및 인슐린 감수성 및 혈당 조절의 개선을 나타내었음을 입증하였다.

도 20은 3개의 치료 그룹이 기준선에서 균형이 잘 잡혀 있고 유사한 지질학적 및 대사체적 프로파일을 가졌음을 보여준다. 환자의 기준선 특징이 표 18에 나타나 있으며, 여기서, 환자의 10 내지 13%는 기준선에서 스타틴 요법을 받았다.

[표 18]

도 21a 내지 도 21c는 위약과 비교할 때 1일 1 g 또는 2 g의 DS102를 투여 받은 환자에서 기준선부터 16주차까지 인슐린, 글루코스 및 유리 지방산 수준의 변화를 나타낸다. DS102의 투여 시 인슐린, 글루코스 및 유리 지방산 수준의 감소는 포도당, 탄수화물 및 유리 지방산을 포함하는 대사 기질이 NASH의 발병을 유도하기 때문에 임상적으로 유의하다.

도 22a 및 도 22b는 위약과 비교할 때 1일 1 g 또는 2 g의 DS102를 투여 받은 환자에서 기준선부터 16주차까지 HOMA-IR 및 아디포-IR 수준의 변화를 나타낸다. 환자는 16주차에 인슐린 저항성 지수(예를 들어, HOMA-IR 및 아디포-IR 수준의 감소)의 개선을 나타내었으며, 이때 2 g의 DS102를 투여 받은 환자에 대해 계획서 순응군(Per Protocol Set, PPS)에서 유의한 개선이 관찰되었다.

도 23a 및 도 23b는 위약과 비교할 때 1일 1 g 또는 2 g의 DS012를 투여 받은 환자에서 기준선부터 16주차까지 글리코실화 헤모글로빈(예를 들어, HbA1c) 수준의 변화를 나타낸다. 구체적으로, 도 23a는 HbA1c 수준의 변화를 나타내고, 도 23b는 기준선에서 HbA1c 수준이 높았지만 16주차에는 정상 수준에 도달한 환자의 비율에서 HbA1c 수준의 변화를 나타낸다. Hb1Ac는 신체의 적혈구에 부착된 글루코스 양의 척도이고 장기간 혈당 제어를 위한 대리자이기 때문에, 이러한 결과는 DS102의 투여가 임상적으로 유의한 개선을 제공하고 혈당 제어를 용량-의존적 방식으로 정규화한다는 것을 나타낸다.

도 24a 및 24b는 안전성 분석 세트(SAS)에서 16주차에 환자의 지질 프로파일의 평균 변화 및 중앙값(%) 변화를 나타낸다. 이러한 결과는 도 25a 내지 도 25c에 추가로 도시되어 있으며, DS102의 투여가 환자에서 총 콜레스테롤, VLDL-C, 비-HDL-C, 렘넌트-유사 입자(RLP) 콜레스테롤 및 트라이글리세라이드 수준을 유지하거나 감소시킴으로써 환자의 지질 프로파일을 유의하게 개선하였음을 예시한다. 유의하게, 감소는 16주차에 평탄하지 않았으며, 이는 DS102의 투여가 더 긴 기간의 연구에서 훨씬 더 큰 변화를 유도할 수 있음을 시사한다.

도 26에 도시된 바와 같이, DS102의 투여는 또한 NASH의 간독성 지질 특징을 역전시키고, NASH로 진단 받은 환자에서 변경된 다수의 지질 부류를 개선한다. 구체적으로, 2 g의 DS102의 투여는 다수의 간독성 다이글리세라이드의 수준을 유의하게 감소시켰고, 다수의 글리세로인지질 기의 수준을 유의하게 증가시켰다. NASH를 갖는 환자에서는 간 및 혈장 글리세로인지질의 수준이 낮기 때문에 이러한 발견은 중요하다.

도 27은 DS102의 투여가 NASH에 대한 OWL 간 케어 비침습적 진단 검사와 같은 검증된 진단 검사에 기초하여 NASH를 또한 해결함을 보여준다. OWL 간 케어는, 생검-확인된 NASH 환자에서 혈장 지질학에 기초하여 개발된 시험이며 높은 예측 값을 제공한다. OWL 간 케어는 NAFLD 및 정상 간 환자를 구별하기 위한 곡선 아래 면적(AUC)이 0.88이고, 지방간염이 없는 NAFLD 및 NASH 환자를 구별하기 위한 AUC가 0.79이다. DS102의 투여는 16주차에 위약과 비교하여 용량 의존적 방식으로 OWL 간 케어 진단된 NASH를 유의하게 개선하고 정상화하였다. 표 19는 각 치료 그룹에 대한 기준선에서의 시험 진단을 나타내며 대부분의 환자가 기준선에서 NASH 또는 NAFLD로 분류되었고 2 g DS102 그룹에서 환자의 백분율이 더 낮음을 나타낸다.

[표 19]

DS102의 투여는 또한 도 28에 나타낸 바와 같이 NAFLD로 진단 받은 환자에서 CAP에 의해 평가된 바와 같은 간 지방 함량을 감소시켰다. DS102는 더 긴 기간의 연구에서 그리고 더 민감한 방법에 의해 평가될 때 간 함량의 더 큰 변화를 유도할 것으로 예상된다는 것이 추가로 고려된다.

DS102의 투여는 표 20에 나타낸 바와 같이 환자에서 트라이글리세라이드 수준을 낮추며, 따라서 DS102는 심혈관 위험을 낮추는 데 또한 효과적일 것으로 고려된다.

[표 20]

도 29a 내지 도 29c는 DS102의 투여가 염증성 및 전구섬유화 단백질을 감소시킴을 보여준다. 이러한 평가를 위해, DS102를 이용한 치료 전 및 후의 혈액 샘플을 350개 초과의 상이한 단백질 바이오마커의 패널에 대해 분석하였다. 2 g의 DS102를 사용한 치료는 염증, 섬유증, 지질 대사, 아폽토시스 및 주화성과 관련된 150개 초과의 마커의 발현을 유의하게 하향조절하였다. 대사 과부하 및 지질독성의 해결은 후속 세포 스트레스, 염증 및 섬유증을 예방하는 DS102로 치료한 후 관찰되었다. 염증성 및 전구섬유화 단백질의 감소는 NASH에 대한 해결 및 섬유증의 예방을 제공하는 DS102의 잠재력을 시사한다.

DS102의 투여는 또한 도 30에 나타낸 바와 같이 다수의 NASH 발달 표적의 발현을 감소시켰다. 특히, 2 g의 DS102의 투여는 NASH 약물 발달 표적을 감소시켜 CCR2/5 신호전달(새니크리비록(Cenicriviroc)-알러간(Allergan)), 갈렉틴(Galectin)3 (GR-MD-02-갈렉틴), 및 AOC3(베링거 잉겔하임(Boehringer Ingelheim))을 포함하도록 하였다.

도 31(본페로니 및 벤자미니-호크베르크(Benjamini-Hochberg) 시험을 사용한 데이터)의 볼케이노 플롯은 2 g의 DS102의 투여가 단백질 발현의 변화에 기초하여 염증성 및 전구섬유화 단백질을 감소시켰음을 보여준다. 표 21은 본페로니 검정에 기초한 가장 유의한 염증성 및 전구섬유화 단백질 감소를 나타낸다.

[표 21]

1 g의 DS102의 투여는 또한 TR에 대한 유의한 감소를 나타내었다. 표 22는 선형 모델을 이용한 분석에 기초한 가장 유의한 염증성 및 전구섬유화 단백질 감소를 나타낸다.

[표 22]

이 분석은 또한 1 g DS107 그룹에서 1개의 단백질 및 위약 그룹에서 0개의 단백질이 벤자미니-호크베르크 검정에 기초한 1차 임계값을 통과하였음을 나타내었다.

DS102의 투여는 또한 도 32에 나타낸 바와 같이 다수의 혈관 유착 분자의 발현을 감소시켰다. 혈관 유착 분자는 죽상동맥경화증과 관련이 있으며, 이의 순환 수준은 심혈관 위험과 관련이 있다

DS102의 투여는 또한 도 33에 나타낸 바와 같이 증가된 심혈관 위험과 관련되는 다수의 단백질의 발현을 감소시켰다.

DS102의 투여는 또한 도 34에 나타낸 바와 같이 다수의 순환 케모카인의 발현을 감소시켰다. 케모카인은 죽상경화증의 만성 염증의 중요한 동인이다.

DS102의 투여는 도 35에 나타낸 바와 같이 다수의 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원의 발현을 또한 감소시켰다. 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원은 염증 및 죽상경화증과 관련된다.

DS102는 또한 위약과 비교하여 관찰된 안전성 및 내성 차이 없이 안전하고 내약성이 우수한 것으로 입증되었다. 약물 관련 중증 유해 사건(SAE)은 없었고 유해 사건(AE)의 발생률은 낮았으며, 이는 모든 치료 그룹에 걸쳐 일관되었다. 대부분의 AE는 일시적일 뿐만 아니라 경증 내지 중등도였으며, 치료 중단으로 이어지는 AE를 경험한 환자는 없었다. 각 치료 그룹에 걸친 안전성 프로파일이 표 23에 나타나 있다.

[표 23]

도 36a 및 도 36b에 도시된 바와 같이 관련 적응증, 원발성 담즙성 간경변(PBC) 및 원발성 경화성 담관염(PSC)을 개선하는 데 있어서 잠재적인 효능에 대해 DS102를 또한 평가하였다. 중요하게는, 2 g의 DS102의 투여는 알칼리 포스페이트(ALP)뿐만 아니라 간 섬유증에 대한 다수의 마커를 감소시켰으며, 이는 DS102가 또한 PBC 및 PSC를 치료하는 데 효과적임을 시사한다.

도 37은 15-HEPE 에틸 에스테르(EE) 최저 혈장 상대 농도의 박스플롯이며, 이는 예상된 대로 8주차 및 16주차에 DS102 치료 그룹에서 더 높은 전신 노출이 있었음을 나타낸다.

1.12 요약

전반적으로, 이들 결과는 DS102가 대사 부하를 유의하게 감소시키고 인슐린 감수성을 개선함으로써 NASH 병리의 다수의 단계를 표적화함을 나타낸다. DS102 투여는 또한 NASH와 연관된 지질 축적 수준을 역전시킴으로써 환자의 지질 프로파일을 개선하였다. 구체적으로, DS102를 투여 받은 이들 환자는 총 콜레스테롤, 비-HDL 콜레스테롤, RLP 콜레스테롤, 트라이글리세라이드, 다이글리세라이드 및 VLDL-C를 포함하는 간독성 지질 수준의 축적의 감소뿐만 아니라 글리세로인지질 수준의 증가를 나타내었다. NASH로 진단 받은 환자는 높은 총 콜레스테롤, 트라이글리세라이드, 다이글리세라이드, 및 VLDL-C 수준 및 낮은 글리세로인지질 및 오메가-3 PUFA 수준을 특징으로 하기 때문에 이러한 효과는 중요하다. 또한, 다수의 지질에 대한 변화는 심혈관 위험의 감소 및 대사 증후군의 여러 측면의 개선을 제공할 것으로 예상된다.

결과는 또한 위약과 비교하여 크고 통계적으로 유의한 개선과 함께 2 g 이상의 DS102의 투여에 유리한 용량 의존적 효과가 존재함을 시사하였다.

결론적으로, DS102는 NASH 치료를 위한 단독 요법으로서 또는 병용 요법의 일부로서 매우 적합하며 NASH 또는 대사 증후군을 포함하는 심장대사 질환으로 진단 받은 환자를 포함하여 심혈관 위험을 감소시키는 것으로 고려된다.

실시예 5: 4주 회복 기간을 갖는 래트에서 경구 위관 영양법에 의한 15(S)-HEPE EE의 26주 독성 연구

이 연구의 목적은 (1) 임의의 결과의 잠재적 가역성을 평가하기 위해, 래트에게 26주 동안 경구 위관 영양법으로 주어질 때, 간 및 폐 질환 치료에 사용되는 오메가-3 지방산인 15(S)-HEPE EE의 잠재적 독성; 및 (2) 15(S)-HEPE EE의 독성역학 특성을 결정하는 것이었다.

1.1 연구 설계

시험 및 대조군 항목을 1일 1회 경구 위관 영양법에 의해 최소 26주 동안 주 7일 적절한 동물에게 투여하였다. 각 동물의 부피는 가장 최근의 체중 측정에 기초하였다. 용량은 부착된 위관 캐뉼러를 갖는 주사기를 사용하여 주어졌다. 투약 첫날을 1일차로 지정하였다. 투약 제형을 냉장고에서 꺼내고 투약 전 적어도 30분 동안 교반하였다. 투약 제형을 또한 투약 동안 계속 교반하였다.

구부린 자세, 곤두선 털과 비정상적인 보행 및 체중 감소를 포함하는 임상 징후의 개시로 인해, 동물 3206M, 3515F 및 3703F는 45일차부터 투약을 쉬었고 나머지 그룹 3 동물은 48일차부터 투약을 쉬었다. 동물은 64일차부터 더 낮은 용량 수준(3000 mg/㎏/일)의 투약을 시작할 것이다. 하기 표는 연구에 사용된 치료(표 23) 및 동물 그룹화(표 24)를 예시한다.

[표 24]

[표 25]

회복 기간: 투약 기간의 완료 시, 지정된 회복 동물을 최소 4주의 회복 기간 동안 유지하였다.

경로 및 투여량 수준의 정당화: 경구 투여 경로가 인간 투약의 의도된 경로이기 때문에 이 연구를 위해 이러한 경로를 선택하였다. 1일 1회 투약된 래트에서 이전 26주 경구 독성은 시험된 최고 용량(1 mg/㎏/일)에서 유해 효과를 나타내지 않았다. 문헌[Warren, H (2017). A 26 Week Study of 15(S)-HEPE EE by Oral (Gavage) in Rats with a 4 Week Recovery Period. Charles River Study No. 529123]을 참조한다. 해당 연구에서 용량-제한 독성이 나타나지 않았다는 점을 고려할 때, 추가 28일 용량 범위 연구는 6 g/㎏/일의 경구 최대 허용 용량(MTD)을 결정하였다. 문헌[Murie, E (ongoing). A Pilot 28-Day Study of DS102 by Oral Gavage in Rats. Charles River Study No. 506611]을 참조한다. 이러한 현재 연구는 ICH M3(R2)를 준수하기 위해 이 MTD에서 15(S)-HEPE EE(DS102)의 만성 독성 잠재력을 평가하기 위해 수행되었다. 문헌[ICH Harmonised Tripartite Guideline M3 (R2). Nonclinical Safety Studies for the Conduct of Human Clinical Trials and Marketing Authorisation for Pharmaceuticals]을 참조한다.

1.2 생존 중 절차(In-Life Procedure), 관찰 및 측정:

생존 중 절차, 관찰 및 측정은 모든 주요 연구 및 회복 동물에 대해 수행되었다. 독성역학 동물을 칭량하였고, 이러한 동물은 주요 연구 동물과 동일한 시점에 기록된 임상 관찰을 가졌다.

사망률/빈사 상태 검사를 매일 수행하였다. 동물을 전반적인 건강/사망률 및 빈사 상태에 대해 관찰하였다. 가능한 발견의 식별 또는 확인에 필요하지 않는 한, 관찰 동안 케이지로부터 동물을 꺼내지 않았다.

임상 관찰:

케이지 측면 관찰을 매일 수행하였다. 가능한 발견의 식별 또는 확인을 위한 것이 아닌 한, 관찰 동안 케이지에서 동물을 꺼내지 않았다.

상세한 임상 관찰을 매주 수행하였다. 검사를 위해 케이지에서 동물을 꺼냈다.

투여-후 관찰은 하루 종일 규칙적으로 수행되었다. 모든 동물을 치료에 대한 반응에 대해 검사하였다. 이들 징후의 개시, 강도 및 지속 시간을 기록하였다; 투약 동안 및 투약 후 처음 1시간 동안 동물에게 특별한 주의를 기울였다.

체중 측정을 전처리 기간 동안 2회; 투약 기간 동안 1일 1회; 및 회복 기간 동안 매주 2회 수행하였다. 동물을 개별적으로 칭량하였다. 예정된 부검 첫날에 체중을 기록하였다(주요 및 회복 동물에 대해서만).

1주차에 시작하여 투약 및 회복 기간을 통해 매주 음식 소비를 정량적으로 측정하였다.

물병의 시각적 조사에 의해 연구 전반에 걸쳐 정기적으로 물 소비가 이루어졌다.

산동제(1% 트로피카미드(Tropicamide), 미드리아시(Mydriacy)) 도포 후 간접 검안경을 사용하여 안과 검사를 수행하였다. 전처리 동안, 모든 주요 연구 및 회복 동물을 검사하였다. 13주차 및 26주차에, 주요 연구 동물(대조군 및 고용량)을 검사하였다. 30주차에 모든 회복 동물을 검사하였다.

1.3 실험실 평가:

임상 병리학

샘플 수집: 부검 직전에, 회복 불가능한 아이소플루란 마취 하에 안와로부터 혈액을 수집하는 경우 외에는, 꼬리 정맥을 통해 혈액을 수집하였다. 안락사 지시가 뒤따르는 부검 전에 샘플을 수집하는 경우 외에는, 동물의 오름차순으로 혈액을 수집하였다. 허용가능한 샘플링 빈도 및 혈액량이 초과되지 않은 경우, 추가적인 혈액 샘플이 (예를 들어, 비-혈청 샘플의 응고로 인해) 수득되었다. 수집 후, 샘플을 처리를 위해 적절한 실험실로 옮겼다. 하기 표에 따라 샘플을 수집하였다.

[표 26]

혈액학: 항응고제 K₂EDTA를 사용하여 0.5 mL 혈액 샘플을 수집하였다. 혈액 번짐을 표지하고, 염색하고, 저장하였다. 혈액 번짐을 하기 파라미터에 따라 분석하였다.

[표 27]

응고: 혈장에 대한 처리를 위해 항응고제 3.8% (w/v) 시트르산삼나트륨을 사용하여 0.5 mL 혈액 샘플을 수집하였다. 응고를 평가하기 위해, 하기 응고 파라미터를 측정하였다.

[표 28]

임상 화학: 혈장에 대한 처리를 위해 항응고제 리튬 헤파린을 사용하여 0.7 mL 혈액 샘플을 수집하였다. 임상 화학을 평가하기 위해, 하기 파라미터를 측정하였다:

[표 29]

요검사: 음식의 부재 및 물의 존재로 6시간(+/- 30분)의 기간에 걸쳐 동물로부터 소변을 수집하였다. 수집 후, 샘플을 처리를 위해 적절한 실험실로 옮겼다. 요검사를 평가하기 위해, 하기 파라미터를 측정하였다:

[표 30]

골수 도말 분석: 모든 동물로부터 골수를 수집하고 10% 중성 완충 포르말린 중에서 보존하였다.

생분석학적 및 독성역학적 평가

생분석학적 샘플 수집: 멸균 바늘과 일회용 주사기를 사용하여 경정맥(또는 경정맥을 평가할 수 없는 경우 꼬리 정맥)을 통해 항응고제 K₂EDTA를 사용하여 0.5 mL 혈액 샘플을 수집하였다. 혈액 수집 일정이 완료되면, 독성역학 동물을 안락사 시키고 사체는 검사 없이 폐기하였다. 하기 표에 따라 샘플을 수집하였다.

[표 31]

생분석학적 샘플 처리: 샘플을 부드럽게 혼합하고, 혈액 회수 60분 이내에 원심분리할 때까지 분쇄된 젖은 얼음 상에 유지하였다. 샘플을 4℃에서 10분 동안 1500 g로 원심분리하였다. 생성된 혈장을 분리하고, 고유하게 표지된 투명 폴리프로필렌 튜브로 옮기고, 드라이아이스 위에서 또는 -20℃를 유지하도록 설정된 냉동고 내에서 가능한 한 빨리 동결시켰다.

생분석학적 샘플 분석: 검증된 분석 절차를 사용하여 에스테르화되지 않은 HEPE 및 총 HEPE의 농도에 대해 혈장 샘플을 분석하였다. 하기를 결정하였다:

a) 에스테르화되지 않음 (혈장에서 유리 지방산으로서 발생하거나 혈장 알부민에 결합된 HEPE).

b) 각각의 샘플링 시점에 총 (에스테르화 되지 않은 HEPE 및 에스테르화된 HEPE(예를 들어, 트라이글리세라이드, 콜레스테롤 에스테르로서)를 정량화) 농도.

생분석학적 실험실의 적절한 표준 작동 절차(들)에 따라 이 연구를 위해, 에스테르화되지 않은 HEPE에 대한 검체 검증 분석(Incurred sample reanalysis, ISR)을 수행하였다. ISR은 시험 시설 연구(Test Facility Study) 번호 527943 동안 상기에 언급된 분석 절차를 사용하여 래트 혈장 샘플에서 총 HEPE를 결정하기 위해 성공적으로 수행되었으며 이 연구에서 반복될 필요가 없다.

임의의 잔류/보유 생분석학적 샘플은 보고서 초안(Draft Report) 발행 후 최소 6개월 동안 유지되었으며 그 후 샘플은 폐기되었다. 대안적으로, 6개월 보유 기간의 종료 전에 최종 보고서(Final Report)가 발행된다면, 잔류/보유 샘플은 6개월 기간 전에 폐기되었다. 이러한 잔류/보유 샘플의 조기 폐기는 또한 연구 책임자(Study Director)에 요청 및 승인될 수 있다.

독성역학적 평가: 독성역학 파라미터는 피닉스(Phoenix) 약동학 소프트웨어를 사용하여 추정되었다. 경구 투여 경로와 일치하는 비-구획 접근법을 파라미터 추정에 사용하였다. 모든 파라미터는, 실현가능할 때는 언제든지, 1일차 및 26주차부터 혈장 내 15(S)-HEPE EE 조성 농도의 총 유리산 및 비결합 유리산으로부터 생성되었다. 하기 파라미터가 추정되었다.

[표 32]

(임의의 주어진 샘플링 시점들 사이의) 부분 AUC가 해석을 돕기 위해 도출되고 보고될 수 있다. 피닉스를 사용하여 적절한 그룹화 및 정렬 변수에 대한 기술 통계(AUC(0-t) 및 Cmax에 대한 표준 오차)를 생성하였다. TK 표 및 그래프가 또한 생성되었다.

1.4 최종 절차

하기 표는 연구에 사용된 최종 절차를 요약한다.

[표 33]

예정되지 않은 사망: 주요 연구 또는 회복 동물이 연구 중에 사망한 경우, 부검을 수행하고 특정 조직을 저장하였다. 필요한 경우, 동물을 냉장하여 자가분해를 최소화하였다. 주요 연구 또는 회복 동물은 시험 설비(Test Facility) SOP에 따라 인도적인 이유로 안락사되었다. 체중을 기록하였고, 가능한 경우, 임상 병리학 파라미터의 평가를 위한 샘플을 얻었다. 이러한 동물을 부검하고, 특정 조직을 유지하였다. 필요한 경우, 동물을 냉장하여 자가분해를 최소화하였다. 연구 중 사망했거나 인도적 이유로 안락사된 독성역학 동물은 제한된 부검 검사를 받았다. 검사는 흉부, 복부 및 골반강에 있는 장기와 조직에 대한 평가로 이루어졌으며 조직은 유지되지 않았다. 제한된 부검 검사 동안, 가능한 위관 외상의 증거에 특별한 주의를 기울였다. 체중을 기록하고 독성역학 분석의 평가를 위한 샘플을 수집하였다.

예정된 안락사: 예정된 안락사까지 살아남은 주요 연구 및 회복 동물은 증가하는 이산화탄소 수준에 동물을 노출시킴으로써 안락사 시켰다; 최종 체중을 기록하고, 후속하여 동물을 방혈시켰다. 가능한 경우, 대조군을 포함하여 각 그룹에서 유사한 수의 동물이 하루 종일 부검되도록 동물을 용량 그룹에 걸쳐 회전하는 순서로 안락사 시켰다. 동물을 예정된 부검 전에 금식시키지 않았다. 예정된 안락사까지 생존한 독성역학 동물은 승인된 방법으로 안락사되었다. 부검은 수행되지 않았고 조직도 수집되지 않았다.

부검: 주요 연구 및 회복 동물은 사체 및 근골격계; 모든 외부 표면 및 오리피스; 두개강 및 뇌의 외부 표면; 및 관련 장기 및 조직을 갖는 흉부, 복부 및 골반강의 평가를 포함하는 완전한 부검 검사를 받았다. 부검 절차는 동물 해부학 및 육안 병리학에서 적절한 훈련과 경험을 갖는 적격인 인력에 의해 수행되었다.

장기 중량: 조직 수집 및 보존(Tissues Collection and Preservation) 표에서 칭량을 위해 확인된 장기는 모든 예정된 안락사 동물에 대해 (달리 명시되지 않는 한) 부검 시 칭량되었다. 열악한 상태나 극한 상태에서 죽거나 안락사된 동물에 대해서는 장기 무게를 기록하지 않았다. 쌍을 이룬 장기는 함께 칭량하였다. 육안 비정상(gross abnormality)의 경우, 합계 중량 이외에, 쌍의 각각의 장기의 중량을 취하여 조직 코멘트로 입력하였다. 장기 중량 분석을 위해 최종 체중 및 뇌 중량을 사용하였다.

조직 수집 및 보존: 하기 표에 따라 수집된 조직을 10% 중성 완충 포르말린 중에 보존하였다.

[표 34]

1.5 용량 제형 및 분석

대조군 항목: 이 연구의 대조군 항목은 Milli-Q 물 중 0.5% HPMC였다. 대조군 항목을 필요에 따라 제조하고, 사용 중이 아닐 때 4℃를 유지하도록 설정된 냉장고에 보관하였다. 제조된 대조군 항목을 냉장고에서 꺼내고 투약 전 적어도 30분 동안 교반하였다. 대조군 항목을 또한 투약 동안 계속 교반하였다.

시험 항목: 이 연구의 시험 항목은 DS102 또는 15(S)-HEPE EE였다. 시험 항목 투여 제형은 투여 수준 요건을 충족시키기 위해 적절한 농도로 시험 설비에서 확립된 방법에 기초하여 제조되었다. 투약 제형을 매주 제조하고, 4℃를 유지하도록 설정된 냉장고에 저장하고 매일 분배하였다. 투약 제형을 냉장고에서 꺼내고 투약 전 적어도 30분 동안 교반하였다. 투약 제형을 또한 투약 동안 계속 교반하였다.

샘플 수집 및 분석

분석된 샘플을 확립된 안정성 기간 내에 제출하였다. 모든 분석된 샘플을 주위 온도에서 시험 시설의 분석 실험실로 옮겼다. 임의의 잔류/보유 분석 샘플은 보고서 초안 발행 후 최소 6개월 동안 유지되었으며 그 후 샘플은 폐기될 것이다. 대안적으로, 6개월 보유 기간의 종료 전에 최종 보고서(Final Report)가 발행되는 상황에서는 잔류/보유 샘플이 6개월 기간 전에 폐기되었다. 이러한 잔류/보유 샘플의 조기 폐기는 또한 후원자와 협의한 후 연구 책임자에 의해 승인될 수 있습니다. 하기 표에 나타낸 바와 같이 분석을 위해 투여 제형 샘플을 수집하였다. 연구 책임자의 재량에 따라 추가 샘플을 수집하고 분석할 수 있다.

[표 35]

분석 방법

하기 기재된 분석은 검증된 분석 절차를 사용하여 UV 검출과 함께 UPLC에 의해 수행되었다.

농도 분석:

분석을 위한 샘플: 이중의 상부, 중간 및 하부 샘플(대조군에 대해서만 이중 중간)을 분석을 위해 보냈다. 농도만 평가되는 경우, 이중 중간 샘플만 수집하였다.

백업 샘플: 시험 시설에서 유지되는, 삼중의 상부, 중간 및 하부 샘플(대조군에 대해서만 3중 중간). 연구 책임자의 재량에 따라 백업 샘플을 분석할 수 있다. 농도만 평가되는 경우, 삼중 중간 샘플만 수집할 것이다.

샘플링 용기: 적절한 크기의 정량 플라스크.

샘플 부피:

그룹 1: 50 mL 정량 플라스크 내에 0.5 mL.

그룹 2: 50 mL 정량 플라스크 내에 0.25 mL.

그룹 3: 50 mL 정량 플라스크 내에 0.25 mL.

모든 샘플의 중량을 기록하였다.

저장 조건: 4℃를 유지하도록 설정된 냉장고에 보관.

허용 기준: 허용 기준은 이론 농도의 ±10%인 또는 그 이내의 평균 샘플 농도 결과였다. 동일성의 경우, 허용 기준은 각 그룹에 대해 ≤10% 농도의 상대 표준 편차(RSD)였다.

안정성 분석: 시험 설비 연구 번호 439414와 함께 이전에 수행된 안정성 분석은 시험 항목이 본 연구에서 사용된 농도를 포함하는 농도에서 동일한 조건 하에 제조되고 저장될 때 비히클 중에서 안정하다는 것을 입증하였다. 문헌[Rogers, E (2018). Validation of an Ultra High-Performance Liquid Chromatographic Method for the Determination of 15(S) HEPE EE in oral (Gavage) Dosing Formulations. Charles River Study No. 439414]을 참조한다. 안정성 데이터는 상기와 동일한 시험 설비 연구 번호 439414에 대한 연구 기록에 유지되었다.

1.6 시험 시스템

동물: 이 연구는 찰스 리버 유케이 리미티드(Charles River UK Limited, 영국 켄트주 마게이트 소재)로부터 구입한 수컷 및 암컷 스프라그 다우리(Sprague Dawley) 래트를 사용하였다. 초기 투약 시 목표 연령은 7 내지 8주령이었다. 초기 투약 시 목표 체중은 175 내지 300 g(수컷) 및 120 내지 250 g(암컷)이었다. 각각의 동물은 피하 이식된 전자 원통형 "유리 밀봉" 트로반(TROVAN) 마이크로칩을 사용하여 식별되었다.

1.7 사양관리(Husbandry)

하우징: 동물을 투약 시작 전 최대 3주의 기간 동안 시험 시설 설치류 독성학 수용 시설에 익숙해지게 하였다. 동물을 그룹에 무작위로 배정하였다. 수컷 및 암컷을 별도로 무작위화하였다. 건강이 불량한 동물은 그룹에 배정하지 않았다. 스테인리스 강 격자 상부와 단단한 바닥이 있는 적절한 크기의 매달린 폴리카르보네이트/폴리프로필렌 케이지에 성별에 따라 케이지당 2 또는 3마리씩 동물을 수용하였다. 멸균된 백색 나무 부스러기를 베딩 재료로 사용하였다.

환경 조건: 동물 실내 환경에 대한 목표 조건은 다음과 같았다: 온도 19 내지 23℃; 습도 40 내지 70%; 통기, 시간당 최소 10회의 환기; 12시간의 명 및 12시간의 암의 광주기. 광, 온도, 습도의 제어가 자동으로 제어되고 지속적으로 모니터링되고 기록되었다.

식이: 확장된 SDS 래트 및 마우스(변형됨) 번호 1 식이 SQC가 자유식으로 제공되었다. 공공 공급으로부터의 물이 자유식으로 물병으로부터 제공되었다. 시험 시설에 의해 사용되는 물을 용해된 물질, 중금속, 잔류 농약, pH, 질산염 및 아질산염에 대해 규칙적인 간격으로 분석하였다. 미생물학적 스크리닝을 또한 수행하였다.

동물 풍부화: 동물은 심리적/환경적 풍부화를 위해 사회적으로 수용되었고, 연구 절차/활동에 의해 중단된 경우를 제외하고, 은신용 장치 및 저작용 물체와 같은 물품이 제공되었다.

수의학적 케어: 연구 과정 전반에 걸쳐 수의학적 관리가 가능했으며 임상 징후 또는 다른 변화가 있는 경우, 임상 징후 또는 다른 변화에 의해 보장되는 바와 같이 동물은 수의과 직원에 의해 검사되었다. 모든 수의학적 검사 및 권장되는 치료적 처리는, 존재하는 경우, 연구 기록에 문서화되었다.

1.8 조직학 및 조직병리학

조직학: 조직 수집 및 보존 표에서 확인된 조직을 파라핀 중에 포매하고, 절편화하고, 유리 슬라이드에 장착하고, 헤마톡실린 및 에오신으로 염색하였다.

조직병리학: 조직병리학적 평가는 면허가 있는 수의 병리학자 또는 실험실 동물 병리학에 대한 훈련 및 경험이 있는 수의학적 병리학자에 의해 수행되었다. 주요 연구 대조군 및 고용량 동물로부터의 조직, 예정되지 않은 사망 및 심한 병변(주요 연구 저용량 그룹 및 회복 동물 포함)에 대해 현미경 검사를 수행하였다. 주요 연구 고용량 그룹에서 치료 효과가 존재하는 경우, 프로토콜 수정에 의해 후원자 및 연구 책임자와의 합의 후, 주요 연구 저용량 그룹 및 회복 동물로부터의 표적 조직의 현미경 검사를 수행하였다.

1.9 컴퓨터화 시스템

컴퓨터화 시스템: 컴퓨터화 시스템의 하기 표는 연구에 사용하기 위해 이용 가능하였다:

[표 36]

1.10 통계 분석

투여 전 기간 동안 수집된 데이터를 표로 작성하고 요약하고 통계적으로 분석하였다. 달리 언급되지 않는 한, 모든 통계 분석은 각각의 연구 단계 내에서 수행되었다. 예정된 경우에 수집된 수치 데이터(독성역학 동물로부터의 데이터 제외)를 성별 및 경우에 따라 하기에 표시된 바와 같이 요약하고 통계적으로 분석하였다.

구성된 변수: 각각의 예정된 간격 사이에서 체중 변화를 계산하였다. 체중 대비 장기 중량은 예정된 간격 동안 최종 체중에 대비하여 계산되었다. 뇌 중량 대비 장기 중량은 예정된 간격 동안 뇌 중량에 대비하여 계산되었다.

기술 통계 분석: 평균, 표준 편차(또는 적절하다고 간주되는 경우 % 변동 계수 또는 표준 오차), 백분율, 수치 및/또는 발생률은 데이터 세트별로 적절하게 보고될 것이다.

추론적 통계 분석: 모든 통계 분석은 5% 유의 수준에서 수행되었다. 모든 쌍별 비교는 양측 검정을 사용하여 수행되었고, 달리 언급되지 않는 한 1% 및 5% 수준으로 보고되었다. 관심 쌍별 비교가 하기에 열거되어 있다:

그룹 2 대 그룹 1

그룹 3 대 그룹 1

분석은 가능한 경우 하기 매트릭스에 따라 수행되었지만, 3개 미만의 관찰을 갖는 임의의 그룹을 제외하였다.

[표 37]

파라미터/비-파라미터: 레벤 검정(Levene's Test)을 사용하여 그룹 분산의 동질성을 평가하였다. 레벤 검정이 유의하지 않거나 크러스칼-왈리스(Kruskal-Wallis) 검정이 유의하지 않은 경우, 전체 일원 ANOVA F-검정을 사용하여 그룹들을 비교하였다. 전체 F-검정 또는 크러스칼-왈리스 검정이 유의한 것으로 밝혀진 경우, 각각 던넷 검정 또는 듄 검정(Dunn's test)을 사용하여 쌍별 비교를 수행하였다.

1.11 결과

적혈구 수, 적혈구 분포 폭 및 망상적혈구 수의 변화: 도 38a 내지 도 38c는 15(s)-HEPE EE 또는 위약을 투여 받은 래트에 대한 적혈구 수(RBC), 적혈구 분포 폭(RDW) 및 망상적혈구 수(RETIC)의 변화를 나타낸다. 15(S)-HEPE EE 및 위약을 최소 26주 동안 주 7일 경구 위관 영양법으로 1일 1회 투여하였다. 각 동물의 부피는 가장 최근의 체중 측정에 기초하였다. 표 38에 언급된 바와 같이, 6 g/㎏/일의 최고 용량은 내약성이 좋지 않았고, 더 낮은 3 g/㎏/일로 대체되었다.

[표 38]

RBC의 변화: 도 38a 및 표 38은 대조군과 비교하여 3 g/㎏/일 용량의 투여가 RBC의 유의한 증가를 초래하였음을 보여준다.

RDW의 변화: 도 38b 및 표 38은 대조군과 비교하여 2 g/㎏/일 용량 및 3 g/㎏/일 용량의 투여 둘 모두가 RDW의 유의한 감소를 초래하였음을 보여준다.

RETIC의 변화: 도 38c 및 표 38은 대조군과 비교하여 2 g/㎏/일 용량 및 3 g/㎏/일 용량의 투여 둘 모두가 RETIC의 유의한 감소를 초래하였음을 보여준다.

이러한 결과는 15-HEPE가 헤모글로빈 및 적혈구에 영향을 미치는 다수의 병태에 대해 치료적 잠재력을 가짐을 시사한다.

프로트롬빈 시간, 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간 및 피브리노겐 농도의 변화: 도 39a 내지 도 39c는 15(s)-HEPE EE 또는 위약을 투여 받은 래트에 대한 프로트롬빈 시간(PT), 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간(APTT) 및 피브리노겐(FIB) 농도의 변화를 나타낸다. 15(S)-HEPE EE 및 위약을 최소 26주 동안 주 7일 경구 위관 영양법으로 1일 1회 투여하였다. 각 동물의 부피는 가장 최근의 체중 측정에 기초하였다. 표 39에 언급된 바와 같이, 6 g/㎏/일의 최고 용량은 내약성이 좋지 않았고, 더 낮은 3 g/㎏/일로 대체되었다.

[표 39]

PT의 변화: 도 38a 및 표 39는 대조군과 비교하여 2 g/㎏/일 용량 및 3 g/㎏/일 용량의 투여 둘 모두가 PT의 유의한 증가를 초래하였음을 보여준다.

APTT의 변화: 도 38b 및 표 39는 대조군과 비교하여 2 g/㎏/일 용량 및 3 g/㎏/일 용량의 투여 둘 모두가 APTT의 유의한 증가를 초래하였음을 보여준다.

FIB 농도의 변화: 도 39c 및 표 39는 대조군과 비교하여 2 g/㎏/일 용량 및 3 g/㎏/일 용량의 투여 둘 모두가 FIB 농도의 유의한 감소를 초래하였음을 보여준다.

이러한 결과는 15-HEPE가 항응고 효과 및 항혈전 효과를 가짐을 시사한다.

본 발명의 다양한 실시 형태가 하기에 제시된다:

단락 A. 대사 증후군의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 대사 증후군을 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE, 15-HETrE, 또는 15-HEPE 및/또는 HETrE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.

단락 B. 심장대사 질환의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 심장대사 질환을 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE, 15-HETrE, 또는 15-HEPE 및/또는 HETrE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.

단락 C. 대사 증후군 및/또는 심장대사 질환의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 대사 증후군 및/또는 심장대사 질환을 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE 및/또는 15-HETrE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE 및/또는 15-HETrE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하는, 방법.

단락 D. 대사 증후군 및/또는 심장대사 질환의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 대사 증후군 및/또는 심장대사 질환을 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하고, 대상은 다이글리세라이드, 글리세로인지질, 간 지방, 혈압, 허리 둘레 및/또는 유리 지방산 수준의 감소; 및/또는 글리세로인지질 수준의 증가 중 하나 이상을 나타내는, 방법.

단락 E. 대상에서 비-알코올성 지방간염(NASH)의 1기가 NASH의 2기로 진행하는 것을 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하는, 방법.

단락 F. 1기는 대사 과부하, 증가된 간 지방 함량 및 지질독성, 세포 스트레스 아폽토시스, 염증, 및/또는 섬유화 리모델링인, 단락 E의 방법.

단락 G. 2기는 증가된 간 지방 함량 및 지질독성, 세포 스트레스 아폽토시스, 염증, 및/또는 섬유화 리모델링인, 단락 E 또는 단락 F에서와 같은 방법.

단락 H. 비알코올성 지방간 장애(NAFLD), 대사 증후군, 및/또는 심장대사 질환을 갖는 대상에서 심혈관 질환의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 심혈관 질환을 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE, 15-HETrE, 또는 15-HEPE 및/또는 HETrE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.

단락 I. 비알코올성 지방간 장애(NAFLD), 대사 증후군, 및/또는 심장대사 질환을 갖는 대상에서 심혈관 질환의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 심혈관 질환을 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하는, 방법.

단락 J. 대상은 α-평활근 작용)α-SMA), 메탈로펩티다제 억제제-1(TIMP-1), 형질전환 성장 인자 베타-β(TGF-β), 및/또는 콜라겐 유형 1 수준 중 하나 이상의 감소를 나타내는, 단락 A 내지 단락 I 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 K. 대상은 다이글리세라이드, 간 지방, 혈압, 허리 둘레 및/또는 유리 지방산 수준의 감소 및/또는 글리세로인지질 수준의 증가의 감소를 나타내는, 단락 A 내지 단락 C 또는 단락 E 내지 단락 J 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 L. 대상은 알칼리성 포스페이트(ALP) 수준의 감소를 나타내는, 단락 A 내지 단락 K 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 M. 대상은 혈청 알라닌 아미노트랜스퍼라제(ALT), 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제(AST), 및/또는 빌리루빈(BUN) 수준의 감소를 나타내는, 단락 A 내지 단락 L 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 N. 대상은 섬유증 면적의 감소를 나타내는, 단락 A 내지 단락 M 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 O. 대상은 헤모글로빈 A1C(HbA1C), 인슐린 저항성의 항상성 모델 평가(HOMA-IR), 및/또는 지방 조직 인슐린 저항성(아디포-IR) 수준의 감소를 나타내는, 단락 A 내지 단락 N 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 P. NAFLD는 비-알코올성 지방간염(NASH)인, 단락 H 내지 단락 O 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 Q. 심장대사 질환 또는 심혈관 질환은 이상지혈증, 고지혈증, 고콜레스테롤혈증, 고중성지방혈증, 일차 고콜레스테롤혈증, 일차 고지혈증, 일반 일차 고지혈증, 일반 고콜레스테롤혈증, 가족성 고지혈증, 가족성 일차 고지혈증, 가족성 고콜레스테롤혈증, 가족성 고중성지방혈증, 가족성 복합 고지혈증, 가족성 결핍성 아포지질단백질 b-100, 이차 고지혈증, 혼합 고지혈증, 심혈관 질환, 잔여 심혈관 위험, 죽상경화판 형성/진행의 예방, 미세혈관 질환, 거대혈관 질환, 죽상동맥경화증, 관상동맥 죽상경화증, 이완기 기능장애, 심혈관 위험의 감소, 주요 관상동맥 사건의 예방, 주요 유해 관상동맥 사건의 예방, 허혈성 사건의 예방, 심혈관 사건의 이차/일차 예방, 심혈관 사망의 예방, 심근경색증, 뇌졸중, 협심증, 정상적인 내피 기능의 회복, 당뇨병, 진성 당뇨병, 인슐린 저항성, 고인슐린혈증, 고혈당증, 이상혈당증, 혈당 제어의 유도, 내당능 장애, 및 공복 혈당 장애 중 하나 이상인, 단락 B 내지 단락 D 또는 단락 F 내지 단락 P 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 R. 미세혈관 질환은 망막병증, 신장병증, 신경병증, 또는 이들의 조합인, 단락 Q의 방법.

단락 S. 거대혈관 질환은 뇌졸중, 말초 혈관 질환, 사지 허혈, 심장 질환, 또는 이들의 조합인, 단락 Q의 방법.

단락 T. 대상은 초저밀도 지질단백질 콜레스테롤(VLDL-C), 비-고밀도 지질단백질 콜레스테롤(비-HDL-C), 및/또는 렘넌트-유사 입자 콜레스테롤(RLP-C) 및/또는 고밀도 지질단백질 콜레스테롤(HDL-C) 수준의 감소를 나타내는, 단락 A 내지 단락 S 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 U. 대상은 간경직도, 섬유종-4(FIB-4), 증강된 간 섬유증(ELF) 점수 및/또는 NAFLD 점수(NFS)의 감소를 나타내는, 단락 A 내지 단락 T 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 V. 대상은 플라스미노겐 활성자 억제제-1(PAI-1), 메탈로펩티다제 억제제-1(TIMP-1), 다이펩티딜 펩티다제 4(DPP4), trem-유사 전사물 2(TLT2), 케모카인(C-C 모티프) 리간드 16(CCL16), 단핵구 화학유인 단백질-1(MCP-1), 혈청 아밀로이드 A4(SAA4), 포스포이노시티드 3(PI3), 티오레독신 리덕타제(TR), 백혈구 면역글로불린 유사 수용체 B1(LILBR1), 아민 옥시다제, 구리 함유 3(AOC3), 세린 프로테아제 2(PRSS2), 및 종양 괴사 인자 리간드 슈퍼패밀리 구성원 11A(TNRSF11A)로 이루어진 군으로부터 선택되는 염증성 및 전구섬유화 단백질의 감소를 나타내는, 단락 A 내지 단락 U 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 W. 대상에서 담즙정체성 간 질환을 치료 또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE, 15-HETrE, 또는 15-HEPE 및/또는 15-HETrE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.

단락 X. 담즙정체성 간 질환은 원발성 담즙성 담관염(PBC), 원발성 경화성 담관염(PSC), 진행성 가족성 간내 담즙정체증, 또는 이들의 조합인, 단락 W의 방법.

단락 Y. 담즙정체성 간 질환은 약물 유도된 간 손상, 총 비경구 영양(TPN), 바이러스성 및 알코올성 간염, 전신 질환에 2차적인 담즙정체증, 이식편 기능장애, 간 이식 후 담즙정체증, 췌장염, 총담관결석증, 미리지(Mirizzi) 증후군, 유전 질환, 악성종양, 또는 이들의 조합에 의해 야기되는, 단락 W 또는 단락 X의 방법.

단락 Z. 악성종양은 간세포 암종, 담관 종양, 췌장 암종, 또는 이들의 조합인, 단락 Y의 방법.

단락 AA. 대상은 α-평활근 작용)α-SMA), 메탈로펩티다제 억제제-1(TIMP-1), 형질전환 성장 인자 베타-β(TGF-β), 및 콜라겐 유형 1 수준으로 이루어진 군으로부터 선택되는 사이토카인 및/또는 케모카인의 감소를 나타내는, 단락 W 내지 단락 Z 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 BB. 대상에서 신장 질환을 치료 또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE 및/또는 15-HETrE, 또는 15-HEPE 및/또는 15-HETrE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하며, 대상은 신장 질환에 대한 적어도 하나의 위험 인자를 갖는, 방법.

단락 CC. 신장 질환은 신장 섬유증, 요세관간질성 섬유증, 만성 신장 질환, 중증 간질성 섬유증, 신장 간질성 섬유증, 및 말기 신장 질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단락 BB의 방법.

단락 DD. 신장 질환은 섬유증을 초래하는, 단락 CC의 방법.

단락 EE. 신장 질환에 대한 적어도 하나의 위험 인자는 당뇨병, 고혈압, 심혈관 질환, 사구체신염, 및 다낭성 신장 질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단락 BB 내지 단락 DD 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 FF. 대상은 신장 하이드록시프롤린 수준의 감소를 나타내는, 단락 BB 내지 단락 EE 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 GG. 대상은 α-SMA, TIMP-1, TGF-β, 및/또는 콜라겐 유형 1 수준의 증가 없음을 나타내는, 단락 BB 내지 단락 FF 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 HH. 대상은 α-SMA, TIMP-1, TGF-β, 및/또는 콜라겐 유형 1 수준의 감소를 나타내는, 단락 BB 내지 단락 GG 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 II. 대상은 간에서 전구섬유화 사이토카인의 감소를 나타내는, 단락 AA 내지 단락 HH 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 JJ. 전구섬유화 사이토카인은 α-SMA, TIMP-1, TGF-β, 콜라겐 유형 1, 인터류킨 1β(IL-1β), 인터류킨-6(IL-6), 인터류킨-6(IL-8), 인터류킨-13(IL-13), 종양 괴사 인자(TNF-α), TNF-유사 리간드 1A(TL1A), 아릴 탄화수소 수용체(AhR), 인터류킨-17(IL-17), 인터류킨-23(IL-23), 인터류킨-11(IL-11), 및/또는 인터류킨-33(IL-33) 중 하나 이상인, 단락 II의 방법.

단락 KK. 대상은 혈관 유착 분자 및/또는 케모카인 및/또는 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원의 감소를 나타내는, 단락 A 내지 단락 JJ 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 LL. 15-HEPE, 15-HETrE, 또는 15-HEPE 및/또는 15-HETrE를 포함하는 조성물은 경구 투여되는, 단락 A 내지 단락 KK 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 MM. 15-HEPE 및/또는 15-HETrE는 유리산 형태, 에스테르화된 형태, 또는 염 형태인, 단락 A 내지 단락 LL 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 NN. 에스테르화된 형태는 알킬 에스테르 형태 또는 트라이글리세라이드 형태인, 단락 MM의 방법.

단락 OO. 15-HEPE는 15(S)-HEPE, 15(R)-HEPE, 또는 이들의 조합을 포함하고/하거나 15-HETrE는 15(S)-HETrE, 15(R)-HETrE, 또는 이들의 조합을 포함하는, 단락 A 내지 단락 NN 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 PP. 조성물은 약 1 g 내지 약 2 g의 15-HEPE 및/또는 15-HETrE를 포함하는, 단락 A 내지 단락 OO 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 QQ. 조성물은 약 2 g 이상의 15-HEPE 및/또는 15-HETrE를 포함하는, 단락 A 내지 단락 PP 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 RR. 조성물은 약 1 g 또는 약 2 g의 15-HEPE 및/또는 15-HETrE를 포함하는, 단락 A 내지 단락 QQ 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 SS. 조성물은 약 10 mg 내지 약 10,000 mg의 15-HEPE 및/또는 15-HETrE를 포함하는, 단락 A 내지 단락 RR 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 TT. 조성물은 약 5 mg/㎏, 약 50 mg/㎏, 약 250 mg/㎏, 또는 약 500 mg/㎏의 15-HEPE 및/또는 15-HETrE를 포함하는, 단락 A 내지 단락 SS 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 UU. 15-HEPE 및/또는 15-HETrE는 조성물에 존재하는 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하는, 단락 A 내지 단락 TT 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 VV. 조성물은 1일 1 내지 8개의 캡슐로 투여되는, 단락 A 내지 단락 UU 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 WW. 방법은 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 단락 A 내지 단락 C 또는 단락 H 내지 단락 VV 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 XX. 방법은 대상에게 15-HETrE 또는 15-HETrE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 단락 A 내지 단락 C 또는 단락 H 내지 단락 VV 중 어느 하나에서와 같은 방법.

단락 YY. 혈액학적 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈액학적 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE) 또는 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE)을 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.

단락 ZZ. 혈액학적 장애는 빈혈, 혈액암, 및 응고 결함으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단락 YY의 방법.

단락 AB. 빈혈은 영양성 빈혈 및 비영양성 빈혈로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단락 ZZ의 방법.

단락 AC. 혈액암은 림프종, 백혈병, 및 골수종으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단락 ZZ의 방법.

단락 AD. 응고 결함은 혈전성향증, 혈우병, 폰 빌레브란트 병, 및 혈소판 감소증으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단락 ZZ의 방법.

단락 AE. 헤모글로빈 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 헤모글로빈 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE 또는 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE)를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.

단락 AF. 적혈구 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 적혈구 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE 또는 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE)을 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.

단락 AG. 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하는, 방법.

단락 AH. 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하며, 대상은

(a) 적혈구 수 증가;

(b) 적혈구 분포 폭 감소; 및/또는

(c) 망상적혈구 수 감소 중 하나 이상을 나타내는, 방법.

단락 AI. 대상은 조성물을 받지 않은 대조군 대상과 비교하여 적어도 10%, 적어도 15%, 적어도 20%, 적어도 25%, 또는 적어도 30%의 적혈구 수 증가를 갖는, 단락 AH의 방법.

단락 AJ. 대조군 대상은 약 4 x 10¹² 적혈구/L의 적혈구 수를 갖는, 단락 AI의 방법.

단락 AK. 대상은 조성물을 받지 않은 대조군 대상과 비교하여 약 15 내지 20%, 약 20 내지 25%, 약 25 내지 30%, 약 30 내지 35%, 또는 약 35 내지 40%의 적혈구 분포 폭의 감소를 갖는, 단락 AH의 방법.

단락 AL. 대조군 대상은 15% 초과의 적혈구 분포 폭을 갖는, 단락 AK의 방법.

단락 AM. 대상은 조성물을 받지 않은 대조군 대상과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 또는 적어도 약 20%의 망상적혈구 수 감소를 갖는, 단락 AH의 방법.

단락 AN. 대조군 대상은 적혈구 세포의 총 수의 5% 초과의 망상적혈구 수를 갖는, 단락 AM의 방법.

단락 AO. 용혈성 빈혈의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 용혈성 빈혈을 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하는, 방법.

단락 AP. 용혈성 빈혈은 유전성 용혈성 빈혈 또는 후천성 용혈성 빈혈인, 단락 AO의 방법.

단락 AQ. 유전성 용혈성 빈혈은 겸상 적혈구 질환, 겸상 적혈구 빈혈, β-지중해빈혈, 및 유전성 구상적혈구증으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단락 AP의 방법.

단락 AR. 후천성 용혈성 빈혈은 감염, 의약, 혈액학적 악성종양, 자가면역 질환, 비기능항진증, 기계적 심장 판막, 및 수혈에 이차적인 것으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단락 AP의 방법.

단락 AS. 겸상 적혈구 질환 및 겸상 적혈구 빈혈은 겸상 적혈구 위기, 혈관-폐색 위기 및/또는 비장 격리와 관련이 있는, 단락 AQ의 방법.

단락 AT. 15-HEPE는 에틸 에스테르(15-HEPE EE)의 형태이거나, 15-HEPE는 광학 활성 에스테르(15(S)-HEPE EE)의 형태인, 선행 단락 YY 내지 단락 AS 중 어느 하나의 방법.

단락 AU. 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애는 유전성 용혈성 빈혈, 후천성 용혈성 빈혈, 판코니 빈혈, 철 결핍성 빈혈, 엽산 결핍, B12 결핍, 및 골수이형성 증후군으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단락 AE 내지 단락 AN 중 어느 하나의 방법.

단락 AV. 대상은 적혈구 수 증가, 망상적혈구 수 감소, 및 적혈구 분포 폭 감소를 나타내는, 단락 YY 내지 단락 AG, 또는 단락 AO 내지 단락 AT 중 어느 하나의 방법.

단락 AW. 혈액학적 장애 및/또는 혈액 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈액학적 장애 및/또는 혈액 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하는, 방법.

단락 AX. 15-HEPE는 에틸 에스테르(15-HEPE EE)의 형태이거나, 15-HEPE는 광학 활성 에스테르(15(S)-HEPE EE)의 형태인, 단락 AW의 방법.

단락 AY. 혈액학적 장애 및/또는 혈액 장애는 유전성 용혈성 빈혈, 후천성 용혈성 빈혈, 판코니 빈혈, 철 결핍성 빈혈, 엽산 결핍, B12 결핍, 및 골수이형성 증후군으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단락 AW의 방법.

단락 AZ. 용혈성 빈혈은 유전성 용혈성 빈혈 또는 후천성 용혈성 빈혈인, 단락 AY의 방법.

단락 BA. 유전성 용혈성 빈혈은 겸상 적혈구 질환, 겸상 적혈구 빈혈, β-지중해빈혈, 및 유전성 구상적혈구증으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단락 AZ의 방법.

단락 BC. 후천성 용혈성 빈혈은 감염, 의약, 혈액학적 악성종양, 자가면역 질환, 비기능항진증, 기계적 심장 판막, 및 수혈에 이차적인 것으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단락 AZ의 방법.

단락 BD. 겸상 적혈구 질환 및 겸상 적혈구 빈혈은 겸상 적혈구 위기, 혈관-폐색 위기 및/또는 비장 격리와 관련이 있는, 단락 BA의 방법.

단락 BE. 대상은 적혈구 수 증가, 망상적혈구 수 감소, 및 적혈구 분포 폭 감소를 나타내는, 단락 AW 내지 단락 BD 중 어느 하나의 방법.

단락 BF. 혈전성향증 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈전성향증 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE 또는 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE)를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.

단락 BG. 혈전성향증의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈전성향증을 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하는, 방법.

단락 BH. 혈전성향증의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈전성향증을 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하며, 대상은

(a) 프로트롬빈 시간 증가;

(b) 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간 증가; 및/또는

(c) 피브리노겐 농도 감소 중 하나 이상을 나타내는, 방법.

단락 BI. 정맥 혈전색전증의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 정맥 혈전색전증을 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하는, 방법.

단락 BJ. 동맥 혈전증의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 동맥 혈전증을 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하는, 방법.

단락 BK. 색전증의 예방을 필요로 하는 대상에서 색전증을 예방하는 방법으로서, 대상에게 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE)을 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하고, 15-HEPE는 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하는, 방법.

단락 BL. 1기는 혈전의 형성인, 단락 BI 내지 단락 BK의 방법.

단락 BM. 대상은 프로트롬빈 시간 증가, 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간 증가, 및 피브리노겐 농도 감소를 나타내는, 단락 BF 내지 단락 BG 또는 단락 BI 내지 단락 BL 중 어느 하나의 방법.

단락 BN. 15-HEPE는 경구 투여되는, 단락 YY 내지 단락 BM 중 어느 하나의 방법.

단락 BO. 조성물은 1일 1 내지 8개의 캡슐로 투여되는, 단락 YY 내지 단락 BN 중 어느 하나의 방법.

단락 BP. 15-HEPE는 유리산 형태, 에스테르화된 형태, 또는 염 형태인, 단락 YY 내지 단락 BO 중 어느 하나의 방법.

단락 BQ. 조성물은 약 1 g 내지 약 2 g의 15-HEPE를 포함하는, 단락 YY 내지 단락 BP 중 어느 하나의 방법.

단락 BR. 조성물은 약 2 g 이상의 15-HEPE를 포함하는, 단락 YY 내지 단락 BQ 중 어느 하나의 방법.

단락 BS. 조성물은 약 5 mg/㎏, 약 50 mg/㎏, 약 250 mg/㎏, 또는 약 500 mg/㎏의 15-HEPE를 포함하는, 단락 YY 내지 단락 BR 중 어느 하나의 방법.

SEQUENCE LISTING <110> AFIMMUNE LIMITED CLIMAX, John WEISSBACH, Markus COUGHLAN, David HAMZA, Moayed <120> COMPOSITIONS COMPRISING 15-HEPE AND METHODS OF TREATING OR PREVENTING HEMATOLOGIC DISORDERS, AND/OR RELATED DISEASES <130> 124318-8014.WO00 <160> 10 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 36B4 MA057856 forward primer <400> 1 ttccaggctt tgggcatca 19 <210> 2 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 36B4 MA057856 reverse primer <400> 2 atgttcagca tgttcagcag tgtg 24 <210> 3 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Alpha-SMA MA057911 forward primer <400> 3 aagagcatcc gacactgctg ac 22 <210> 4 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Alpha-SMA MA057911 reverse primer <400> 4 agcacagcct gaatagccac atac 24 <210> 5 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> TIMP-1 MA098519 forward primer <400> 5 tgagccctgc tcagcaaaga 20 <210> 6 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> TIMP-1 MA098519 reverse primer <400> 6 gaggacctga tccgtccaca a 21 <210> 7 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> TGF-beta MA030397 forward primer <400> 7 gtgtggagca acatgtggaa ctcta 25 <210> 8 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> TGF-beta MA030397 reverse primer <400> 8 ttggttcagc cactgccgta 20 <210> 9 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Collagen Type 1 MA075477 forward primer <400> 9 ccaacaagca tgtctggtta ggag 24 <210> 10 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Collagen Type 1 MA075477 reverse primer <400> 10 gcaatgctgt tcttgcagtg gta 23

Claims

혈액학적 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈액학적 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 상기 대상에게 15-하이드록시에이코사펜타엔산(15-HEPE) 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
헤모글로빈 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 헤모글로빈 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 상기 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
적혈구 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 적혈구 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 상기 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
용혈성 빈혈의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 용혈성 빈혈을 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 상기 대상에게 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 혈액학적 장애는 빈혈, 혈액암, 및 응고 결함으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
제5항에 있어서, 상기 빈혈은 영양성 빈혈, 비영양성 빈혈, 또는 이들의 조합인, 방법.
제5항에 있어서, 상기 혈액암은 림프종, 백혈병, 및 골수종으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
제5항에 있어서, 상기 응고 결함은 혈전성향증, 혈우병, 폰 빌레브란트 병, 및 혈소판 감소증으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상은 상기 15-HEPE 또는 상기 조성물을 받지 않은 대조군 대상과 비교하여 적혈구 수 증가, 적혈구 분포 폭 감소, 및/또는 망상적혈구 수 감소를 갖는, 방법.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상은 상기 15-HEPE 또는 상기 조성물을 받지 않은 대조군 대상과 비교하여 적어도 10%, 적어도 15%, 적어도 20%, 적어도 25%, 또는 적어도 30%의 적혈구 수 증가를 갖는, 방법.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상은 상기 15-HEPE 또는 상기 조성물을 받지 않은 대조군 대상과 비교하여 약 15% 내지 약 20%, 약 20% 내지 약 25%, 약 25% 내지 약 30%, 약 30% 내지 약 35%, 또는 약 35% 내지 약 40%의 적혈구 분포 폭 감소를 갖는, 방법.
제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대조군 대상은 15% 초과의 적혈구 분포 폭을 갖는, 방법.
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상은 상기 15-HEPE 또는 상기 조성물을 받지 않은 대조군 대상과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 또는 적어도 약 20%의 망상적혈구 수 감소를 갖는, 방법.
제9항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대조군 대상은 적혈구 세포의 총 수의 5% 초과의 망상적혈구 수를 갖는, 방법.
제2항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 헤모글로빈 장애 및/또는 적혈구 장애는 유전성 용혈성 빈혈, 후천성 용혈성 빈혈, 판코니 빈혈, 철 결핍성 빈혈, 엽산 결핍, B12 결핍, 및 골수이형성 증후군으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
제15항에 있어서, 상기 유전성 용혈성 빈혈은 겸상 적혈구 질환, 겸상 적혈구 빈혈, β-지중해빈혈, 및 유전성 구상적혈구증으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
제15항에 있어서, 상기 후천성 용혈성 빈혈은 일차 감염, 의약, 혈액학적 악성종양, 자가면역 질환, 비기능항진증, 기계적 심장 판막의 위치 설정, 및 수혈에 이차적인 병태로 이루어진 군으로부터 선택되는 장애 또는 병태로부터 획득되는, 방법.
제16항에 있어서, 상기 겸상 적혈구 질환 및 겸상 적혈구 빈혈은 겸상 적혈구 위기, 혈관-폐색 위기 및/또는 비장 격리와 관련이 있는, 방법.
혈전성향증 장애의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈전성향증 장애를 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 상기 대상에게 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
혈전성향증의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 혈전성향증을 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 상기 대상에게 15-HEPE를 투여하거나 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
정맥 혈전색전증의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 정맥 혈전색전증을 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 상기 대상에게 15-HEPE를 투여하거나 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
동맥 혈전증의 치료 및/또는 예방을 필요로 하는 대상에서 동맥 혈전증을 치료 및/또는 예방하는 방법으로서, 상기 대상에게 15-HEPE를 투여하거나 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
색전증의 예방을 필요로 하는 대상에서 색전증을 예방하는 방법으로서, 상기 대상에게 15-HEPE를 투여하거나 15-HEPE를 포함하는 조성물을 최대 약 8 g으로 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
제19항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상은 상기 조성물을 받지 않은 대조군 대상과 비교하여 프로트롬빈 시간 증가, 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간 증가, 및/또는 피브리노겐 농도 감소를 갖는, 방법.
제1항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 15-HEPE는 유리산 형태, 에스테르화된 형태, 접합체 형태, 또는 염 형태인, 방법.
제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 15-HEPE는 상기 조성물 내의 모든 지방산의 적어도 약 90 중량%에 해당하는, 방법.
제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 최대 약 2 g의 15-HEPE를 포함하는, 방법.
제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 1일 1 내지 8개의 캡슐로 투여되는, 방법.
제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 적어도 2 g의 15-HEPE를 포함하는, 방법.
제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 상기 대상에게 체중 1 ㎏당 약 5 mg(약 5 mg/㎏), 약 50 mg/㎏, 약 250 mg/㎏ 또는 약 500 mg/㎏의 15-HEPE를 제공하도록 제형화되는, 방법.
제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 15-HEPE 또는 15-HEPE를 포함하는 상기 조성물은 경구 투여되는, 방법.
제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 15-HEPE는 유리산 형태, 에스테르화된 형태, 접합체 형태, 또는 염 형태인, 방법.
제1항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 15-HEPE의 상기 에스테르화된 형태는 메틸 에스테르, 에틸 에스테르, 또는 이들의 조합인, 방법.