KR20220158773A

KR20220158773A - 항염증 및 성장 촉진 활성을 갖는 데스아세틸글루코사민 무라밀 디펩티드의 친지성 거울상이성질체

Info

Publication number: KR20220158773A
Application number: KR1020227036717A
Authority: KR
Inventors: 호레이스 디스톤 주니어 날레; 베른하르드 칼텐버크
Original assignee: 뉴트리버트 엘엘씨
Priority date: 2020-03-26
Filing date: 2021-03-25
Publication date: 2022-12-01
Also published as: EP4126040A1; BR112022019202A2; CN115605226A; MX2022011751A; AU2021241625A1; CA3172936A1; JP2023518973A; WO2021195372A1; US20230174577A1; EP4126040A4; ZA202210586B

Abstract

친지성 무라밀 디펩티드 (MDP)의 N-아세틸글루코사민 모이어티를 함유하지 않는 친지성 무라밀 디펩티드 유도체 (즉, 데스무라밀 디펩티드)의 거울상 분자 (거울상이성질체)를 함유하는 조성물의 유효량을 투여함으로써 척추동물에서의 염증을 감소시키고 동물의 성장 및 사료 전환을 촉진하는 물질의 조성물 및 방법.

Description

항염증 및 성장 촉진 활성을 갖는 데스아세틸글루코사민 무라밀 디펩티드의 친지성 거울상이성질체

우선권 출원에 대한 상호 참조

본 출원은 "항염증 및 성장 촉진 활성을 갖는 데스아세틸글루코사민 무라밀 디펩티드의 친지성 거울상이성질체"라는 명칭으로 2020년 3월 26일에 출원된 미국 가출원 번호 제63/000,364호의 이익을 주장하며, 이 가출원의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.

기술분야

본 발명의 기술분야는 인간을 비롯한 동물에서의 염증을 감소시키고, 성장을 촉진하고, 사료 전환을 증진시키기 위한 친지성 무라밀 디펩티드 거울상이성질체 조성물 및 방법에 관한 것이다.

무라밀 디펩티드 (MDP)는 모든 박테리아 펩티도글리칸 (PGN)에서 보존되는 최소 구조이다. 이는 L-알라닌 및 D-γ-글루타메이트 또는 D-이소글루타민에 펩티드 결합으로 연결된 N-아세틸 무람산 (N-아세틸글루코사민 및 D-락트산의 에테르)으로 이루어진다 (MacDonald 2005).

PGN은 염증 반응을 촉진하는 것으로 오랫동안 알려져 왔다. PGN의 MDP 하위성분은 염증을 유발하는데 요구되는 최소 화학 구조인 것으로 밝혀졌다. MDP는 또한 미코박테리아 추출물의 에멀젼인 프로인트 (Freund) 완전 아주반트의 아주반트 활성에 필요하다 (MacDonald 2005). 아주반트로서, MDP는 백신 항원과 함께 주사될 때 백신의 효과를 높이는데 사용되는 강한 면역 반응을 촉진한다.

장외 염증을 자극하는 동안, MDP는 장관에서 항염증 효과를 가지며, 실험적으로 유도된 대장염으로부터 마우스를 보호한다 (Watanabe 2008; Watanabe 2014).

MDP의 장 항염증 특성은 치료 용도를 위한 기회를 제공한다 (Strober 2013). 그러나, MDP는 친수성이고, 순환계로부터 신장 배설을 통해 신속하게 제거되며, 따라서 비특이적 내감염성 또는 아주반트 활성을 매개하기 위해서는 고용량 및 반복 투여가 필요하다 (Fogler 1985).

이러한 불리한 약동학 및 심각한 부작용은 이러한 단점을 수정하기 위해 MDP의 많은 화학적 변형을 촉발시켰다. 이들 중에서 가장 성공적인 것은 MDP의 효력 및 반감기 둘 다를 증가시킨 MDP의 지질 변형이었다 (Parant 1980; Matsumoto 1983; Fogler 1985).

따라서, 공유 지질 MDP 접합체는 개선된 경구 생체이용률, 증진된 종양 표적화 및 치료 효력, 감소된 독성, 및 리포솜과 같은 전달 담체 내로의 증진된 약물 로딩을 포함하는 여러 이점을 입증하였다 (Fidler 1987; Irby 2017).

놀랍게도, 친지성 접합된 MDP에 의한 생물학적 활성을 위해 완전한 무라밀 디펩티드 분자가 요구되지는 않는다. 심지어 N-아세틸 무람산이 없는 L-알라닌-D-이소글루타민 디펩티드 MDP 모이어티도, 친지성 모이어티에 공유접합될 때 MDP의 면역조정 활성을 보유한다. 예를 들어, 문헌 [Gobec (2016)]은 아실-글리신-L-알라닌-D-글루타메이트 MDP 유사체에서 N-아세틸 무라밀을 아실 모이어티로 성공적으로 대체했다. 문헌 [Penney (1999)]는 강한 면역조정 활성을 여전히 보유하면서 옥타데실 L-알라닌-D-이소글루타민에서 무라밀 모이어티를 완전히 제거하였다.

또한, 문헌 [Penney (1999)] 및 [Gobec (2016)] 둘 다는 D-이소글루타민이 친지성 데스무라밀 디펩티드에서 기능의 손실 없이 D-글루타민 또는 D-글루타메이트로 대체될 수 있음을 입증하였다.

동물에서의 증진된 성장은 시간 단위당 성장 질량에 의해 또는 영양 단위당 성장 질량에 의해 측정되며; 후자는 때때로 사료 전환으로 지칭된다. 어느 한 측정에 따른 성장의 촉진은 체질량의 동일한 증가를 얻는데 요구되는 시간 또는 사료의 양을 감소시키기 때문에 인간 및 다른 동물 소비용 동물 단백질의 생산에 경제적으로 유용하다.

억제 용량 미만으로 공급된 항생제는 농업 생산 동물에서 성장을 증진시키기 위한 성장 촉진제로서 오랫동안 사용되어 왔다. 이들은 아마도 장관 내의 염증을 억제하는 MDP를 비롯한 장 박테리아로부터의 성분 (포스트바이오틱)을 방출함으로써 작용한다. 이 메카니즘은 수조 마리의 장-체류 박테리아에 대한 손상 반응으로부터 동물들을 보호하기 위해 진화해왔을 가능성이 가장 크다.

성장 촉진제로서의 항생제 사용에 의한 박테리아에서의 항생제 내성의 광범위한 유도로 인해, 성장 촉진제로서의 항생제를 대체하는 것이 매우 바람직하다. 문헌 [Nalle 및 Kaltenboeck]는 강력한 친지성 MDP 유사체의 저용량 경구 투여가 추정하건대 무증상 장 염증, 및 이에 따른 전신성 염증 상태의 감소로 인해 동물에서 성장 속도 및 사료 전환을 개선시킨다고 교시한다 (Nalle 2017).

다단계 화학적 합성에 의한 N-아세틸 무람산 MDP 중간체의 제조는 어렵고, 이로 인해 친지성 MDP 유사체를 가축에서 성장 촉진제로서 사용하기에는 지나치게 고가이다. 이는 면역조정 친지성 데스무라밀 디펩티드를 동물에서의 비-항생제 성장 촉진을 위한 주요 후보로 만든다.

문헌 [Sidwell (1995)] 및 [Penney (1999)]는 친지성 옥타데실 L-알라닌-D-글루타민 데스무라밀 디펩티드의 입체화학적 거울상 분자 (거울상이성질체)인 옥타데실 D-알라닌-L-글루타민이 옥타데실 L-알라닌-D-글루타민보다 훨씬 더 강한 면역조정제임을 보여준다.

상식에 반하는 것으로 여겨지지만, 문헌 [Zhou (2002)]는 천연 수용체-결합 L-펩티드의 거울상이성질체 거울상 D-펩티드가 천연 펩티드에 비해 그의 동족 수용체에 강하게, 또는 훨씬 더 강하게 결합함을 보여준다. 추가로, 이러한 D-펩티드 거울상이성질체는 그의 L-대응물보다 훨씬 더 안정하고, 자연 분해 효소의 부재로 분해에 대한 저항이 있기 때문에 생물학적으로 고도로 활성이다.

동족 수용체에 대한 거울상이성질체 펩티드의 결합 및 이러한 자연적으로 발생하지 않는 펩티드의 증가된 안정성은 옥타데실 D-알라닌-L-글루타민 데스무라밀 디펩티드 (BCH-527)의 강한 생물학적 효과를 설명한다. 이 디펩티드는 또한 N-아세틸 무람산의 비등방성 고리형 탄수화물 모이어티의 복잡한 합성을 피하고, 따라서 동물에서의 성장 촉진제로서 사용하기 위한 주요 비용 효과적인 MDP 유사체 후보이다.

친지성 데스무라밀 MDP 거울상이성질체로서, 옥타데실 D-알라닌-L-글루타민 데스무라밀 디펩티드는 2가지 단점을 갖는다: i) 이는 무람산의 N-아세틸글루코사민 모이어티를 디펩티드에 연결시키는 N-아세틸 무람산의 락트산 모이어티가 결여되어 있고 (Jeanloz 1970), 따라서 그의 동족 수용체에 대한 일부 결합 강도를 상실할 수 있다; ii) 이는 세포막 삽입 (세포 표적화), 막내 수송, 및 세포내 방출에 대해 준최적인 고융점 옥타데실 지방족 지질을 함유하고 (Spector 1985; van Meer 2008), 따라서 옥타데실 D-알라닌-L-글루타민의 활성 디펩티드 성분을 세포내 방출하는 디펩티드와 지질 사이의 에스테르 결합의 세포내 에스테라제 절단을 불리하게 한다 (Hatfield 2016).

따라서, 친지성 데스무라밀 MDP 거울상이성질체의 면역조정 활성을 최대화하는 화합물이 필요하다.

L-락테이트-D-알라닌-L-글루타민 모이어티를 포함하는 MDP의 올리고펩티드 유사체 (본원에서 올리고펩티드 또는 화합물로도 지칭된다)가 본원에 기재된다. 일부 경우에, 유사체는 MDP의 N-아세틸글루코사민 모이어티를 함유하지 않는다. 본원에 기재된 올리고펩티드는 하기 화학식을 가질 수 있다:

또는 그의 제약상 허용되는 산 또는 염, 여기서 R¹은 치환 또는 비치환된 알킬 또는 치환 또는 비치환된 아릴이고; R², R³, R⁴, 및 R⁵는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 알킬, 및 치환 또는 비치환된 아릴로부터 선택되고; X는 O 또는 NR⁶이고, 여기서 R⁶는 수소, 치환 또는 비치환된 알킬, 또는 치환 또는 비치환된 아릴이다. 임의로, X는 O이다. 임의로, R¹은 C₁-C₁₈ 선형 알킬 또는 아미노산이다. 일부 경우에, 올리고펩티드는 하기 구조 중 하나를 갖는다:

일부 경우에, 올리고펩티드는 하기 구조 중 하나를 갖는다:

여기서 R⁷은 치환 또는 비치환된 알킬 또는 치환 또는 비치환된 아릴이고; Y는 O 또는 NR⁸이고, 여기서 R⁸은 수소, 치환 또는 비치환된 알킬, 또는 치환 또는 비치환된 아릴이다. 임의로, 올리고펩티드는 L-락테이트-D-알라닌-L-글루타민-헥사데실 에스테르이다.

또한, 본원에 기재된 바와 같은 화합물을 포함하는 조성물이 본원에 기재된다. 임의로, 상기 조성물은 본원에 기재된 적어도 하나의 올리고펩티드 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물이다. 일부 경우에, 상기 조성물은 본원에 기재된 적어도 하나의 올리고펩티드 및 동물 사료를 포함하는 조성물이다. 적어도 하나의 올리고펩티드는 약 0.01 mg/kg 내지 5 mg/kg의 양으로 조성물에 존재할 수 있다. 임의로, 상기 조성물은 동물 식이에 사용되는 첨가제를 추가로 포함한다 (예를 들어, 효소, 프로바이오틱, 프리바이오틱, 항산화제, 성장촉진용 항생제, 착색제, 또는 그들의 조합).

인간에서의 장 염증을 감소시키는 방법이 본원에 추가로 기재되며, 상기 방법은 장 염증을 갖는 인간에게 본원에 기재된 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 여기서 투여는 장 염증을 감소시킨다. 상기 방법은 장 염증과 연관된 질환 또는 상태 (예를 들어, 염증성 장 질환, 과민성 장 증후군, 크론병, 궤양성 대장염, 또는 박테리아 감염)를 갖는 인간을 선택하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 동물의 성장을 촉진하는 방법이 또한 본원에 제공되며, 상기 방법은 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 여기서 투여는 동물의 성장을 증진시킨다. 또한, 동물의 사료 전환을 증진시키는 방법이 본원에 제공되며, 상기 방법은 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 조성물을 투여하는 것 포함하고, 여기서 투여는 동물에서의 사료 전환을 증진시킨다.

하나 이상의 실시양태의 세부사항이 하기 도면 및 설명에 나와 있다. 다른 특징, 목적, 및 장점은 설명 및 도면으로부터, 그리고 청구범위로부터 명백할 것이다.

도 1은 L-락테이트-D-알라닌-L-글루타민 팔미틸 에스테르 (락테이트-디펩티드-팔미틸 에스테르, LDPP)의 합성을 도시하는 개략도이다.
도 2는 육용계(broiler chicken)에서 L-락테이트-D-알라닌-L-글루타민 팔미틸 에스테르 (LDPP)의 성장 촉진 효과의 평가를 보여주는 막대 그래프를 함유한다. (A) 실험 식이를 제21일의 시작부터 제44일의 종료까지 공급하였다 (24일의 일정 시간). (B) 일정 시간에 대한 닭 마리당 체중 증가. 도시된 데이터는 평균 ± 95% 신뢰 구간 (95% CI)이다. (C) 일정 시간에 대한 닭 마리당 소비된 총 사료, 평균 ± 95% CI. (D) 각 군의 일정 시간에 대한 총 소비된 사료를 모든 닭의 총 체중 증가로 나눔으로써 결정된 사료 전환율. 오차 막대는 개별 우리(pen)의 계산된 사료 전환율의 25-75 백분위수를 나타낸다. (E) 비처리 대조군과 동일한 체중 증가 (1,653 g의 일정 체중 증가)에 필요한 공급 시간의 모델링. (F) 일정 체중 증가에 대한 닭 마리당 체중 증가, 평균 ± 95% CI. (G) 일정 체중 증가에 대한 닭 마리당 소비된 총 사료, 평균 ± 95% CI. (H) 각 처리군의 일정 체중 증가에 대한 사료 전환율. 이환율 및 사망률은 군들 간에 유의하게 상이하지 않았다. 처리군 사이의 관련 차이는 파선 괄호 및 상응하는 p 값에 의해 표시된다.
도 3은 사육장 돼지 (nursery pig)에서 L-락테이트-D-알라닌-L-글루타민 팔미틸 에스테르 (LDPP)의 성장 촉진 효과의 평가를 보여주는 막대 그래프를 함유한다. (A) 실험 식이를 제0일의 시작부터 제42일의 종료까지 공급하였다 (42일의 일정 시간). (B) 일정 시간에 대한 돼지 마리당 체중 증가. 도시된 데이터는 평균 ± 95% 신뢰 구간 (95% CI)이다. (C) 일정 시간에 대한 돼지 마리당 소비된 총 사료, 평균 ± 95% CI. (D) 각 군의 일정 시간에 대한 총 소비된 사료를 모든 돼지의 총 체중 증가로 나눔으로써 결정된 사료 전환율. 오차 막대는 개별 우리의 계산된 사료 전환율의 25-75 백분위수를 나타낸다. (E) 비처리 대조군과 동일한 체중 증가 (22.076 kg의 일정 체중 증가)에 필요한 공급 시간의 모델링. (F) 일정 체중 증가에 대한 돼지 마리당 체중 증가, 평균 ± 95% CI. (G) 일정 체중 증가시 돼지 마리당 소비된 총 사료, 평균 ± 95% CI. (H) 각 처리군의 일정 체중 증가에 대한 사료 전환율. 이환율 및 사망률은 군들 간에 유의하게 상이하지 않았다. 처리군 사이의 유의한 차이는 굵은 p 값으로 표시된다.

데스아세틸글루코사민 무라밀 디펩티드 (MDP)의 친지성 거울상이성질체 (예를 들어 L-락테이트-D-알라닌-L-글루타민-헥사데실 에스테르)를 함유하는 조성물이 본원에 제공된다. 이 화합물은 i) 추가의 거울 L-락테이트 모이어티를 통해 디펩티드를 확대시킴으로써 동족 세포내 수용체(들)에 대한 결합 강도를 개선시키고; ii) 저융점 헥사데실 (팔미틸) 지방족 지질에 의해 제공되는 증가된 막 유동성을 통해 세포내 표적화 및 활성 디펩티드 방출을 최대화한다.

인간 또는 동물에게 투여되는 경우, MDP의 친지성 거울상이성질체를 함유하는 조성물은 염증을 감소시키고, 성장을 촉진하고, 사료 전환을 개선시킨다. 따라서, 인간 및 동물에서의 염증을 감소시키는 방법, 및 동물에서의 성장을 촉진하고 사료 전환을 증진시키는 방법이 제공된다. 상기 방법에 따라, MDP의 친지성 거울상이성질체는 제약상 허용되는 산 또는 그의 부가염, 제약 담체, 또는 동물 사료와 조합되고, 이어서 이는 원하는 염증 감소, 성장 촉진, 또는 사료 전환 개선을 달성하기에 충분한 양으로 동물 또는 인간에게 투여된다.

I. 화합물

데스아세틸글루코사민 무라밀 디펩티드 (MDP)의 올리고펩티드 유사체가 본원에 기재된다. 유사체는 유기 지질 분자에 결합된 L-락테이트-D-알라닌-L-글루타민 모이어티, 및 그의 임의의 제약상 허용되는 산 또는 염을 포함할 수 있다. 일부 경우에, 유사체는 MDP의 N-아세틸글루코사민 모이어티를 함유하지 않는다.

일부 경우에, 본원에 기재된 화합물은 하기 화학식 I을 포함한다:

화학식 I에서, R¹은 치환 또는 비치환된 알킬 또는 치환 또는 비치환된 아릴이다. 임의로, R¹은 C₁-C₁₈ 선형 알킬이다. 임의로, R¹은 리신 기 (D-리신 또는 L-리신)와 같은 아미노산이다.

또한 화학식 I에서, R², R³, R⁴, 및 R⁵는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 알킬, 및 치환 또는 비치환된 아릴로부터 선택된다.

추가로 화학식 I에서, X는 O 또는 NR⁶이고, 여기서 R⁶은 수소, 치환 또는 비치환된 알킬, 또는 치환 또는 비치환된 아릴이다.

임의로, 화학식 I의 화합물은 구조 I-A에 따른 화합물을 포함할 수 있다:

구조 I-A에서, R¹은 화학식 I에와 같이 정의된다.

임의로, 화학식 I의 화합물은 구조 I-B에 따른 화합물을 포함할 수 있다:

구조 I-B에서, R¹은 화학식 I에와 같이 정의된다.

임의로, 화학식 I의 화합물은 구조 I-C 또는 구조 I-D에 따른 화합물을 포함할 수 있다:

구조 I-C 및 구조 I-D에서, R⁷은 치환 또는 비치환된 알킬 또는 치환 또는 비치환된 아릴이다. 또한 구조 I-C 및 구조 I-D에서, Y는 O 또는 NR⁸이고, 여기서 R⁸은 수소, 치환 또는 비치환된 알킬, 또는 치환 또는 비치환된 아릴이다.

상기 알킬은 직쇄 알킬 또는 분지쇄 알킬일 수 있다. 일부 경우에, 직쇄 알킬은 C₁-C₁₈ 알킬 (예를 들어, C₂-C₁₇ 알킬 또는 C₃-C₁₆ 알킬)일 수 있다. 적합한 알킬 기의 예는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 데실, 운데실, 도데실, 트리데실, 테트라데실, 펜타데실, 헥사데실, 헵타데실, 또는 옥타데실을 포함한다. 일부 경우에, 올리고펩티드는 L-락테이트-D-알라닌-L-글루타민-헥사데실 에스테르이며, 이는 또한 본원에서 L-락테이트-D-알라닌-L-글루타민 팔미틸 에스테르 (락테이트-디펩티드-팔미틸 에스테르, LDPP) 또는 헥사데실 (2S)-5-아미노-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-히드록시프로파노일]아미노]프로파노일]아미노]-5-옥소-펜타노에이트로 지칭된다.

임의로, 상기 아릴 기는 페닐 기를 포함한다. 임의로, 아릴 기는 추가의 융합된 고리, 예를 들어 나프탈렌, 안트라센, 및 피렌을 포함할 수 있다. 아릴 및 헤테로아릴 기는 달리 나타내지 않는 한, 고리 상의 임의의 위치에서 부착될 수 있다.

본원에 사용된 알킬 및 아릴 기는 치환 또는 비치환될 수 있다. 본원에 사용된 용어 치환은 알킬 또는 아릴 기의 주쇄에 부착된 위치로의 관능기의 부가, 예를 들어 이들 분자 중 하나에 의한 수소의 대체를 포함한다. 치환 기의 예는 히드록시, 할로겐 (예를 들어, F, Br, Cl, 또는 I), 및 카르복실 기를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 반대로, 본원에 사용된 용어 비치환은 상기 알킬 또는 아릴 기가 수소의 완전한 보완, 즉 치환 없이 그의 포화 수준에 상응하는 완전한 보완을 갖는다는 것을 나타낸다 (예를 들어, 선형 헥사데실 (-(CH₂)₁₅-CH₃)).

II. 화합물의 제조 방법

본원에 기재된 화합물은 다양한 방식으로 제조될 수 있다. 상기 화합물은 다양한 합성 방법을 사용하여 합성될 수 있다. 이들 방법 중 적어도 일부는 합성 유기 화학 업계에 공지되어 있다. 본원에 기재된 화합물은 용이하게 입수가능한 출발 물질로부터 제조될 수 있다. 최적의 반응 조건은 사용되는 특정 반응물 또는 용매에 따라 달라질 수 있지만, 이러한 조건은 통상의 기술자에 의해 결정될 수 있다.

본원에 기재된 화학식 I 및 화합물에 대한 변형은 각각의 화합물에 대해 기재된 바와 같은 다양한 구성성분의 첨가, 빼기, 또는 이동을 포함한다. 유사하게, 하나 이상의 키랄 중심이 분자에 존재하는 경우, 모든 가능한 키랄 변이체가 포함된다. 추가로, 화합물 합성은 다양한 화학기(chemical group)의 보호 및 탈보호를 포함할 수 있다. 보호 및 탈보호의 사용, 및 적절한 보호기의 선택은 통상의 기술자에 의해 결정될 수 있다. 보호기의 화학은, 예를 들어 그 전문이 본원에 참조로 포함되는, 문헌 [Wuts, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis, 5th. Ed., Wiley & Sons, 2014]에서 찾아볼 수 있다.

본원에 기재된 화합물을 제조하는 반응은 유기 합성 업계의 통상의 기술자에 의해 선택될 수 있는 용매 중에서 수행될 수 있다. 용매는 반응이 수행되는 조건, 즉 온도 및 압력 하에, 출발 물질 (반응물), 중간체, 또는 생성물과 실질적으로 비반응성일 수 있다. 반응은 하나의 용매 또는 하나 초과의 용매의 혼합물 중에서 수행될 수 있다. 생성물 또는 중간체 형성은 관련 기술분야에 공지된 임의의 적합한 방법에 따라 모니터링될 수 있다. 예를 들어, 생성물 형성은 분광학적 수단, 예를 들어 핵 자기 공명 분광분석법 (예를 들어 ¹H-NMR 또는 ¹³C-NMR), 적외선 분광분석법 (IR), 분광 광도측정법 (예를 들어 UV-가시광), 또는 질량 분광측정법 (MS), 또는 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC) 또는 박층 크로마토그래피 (TLC)와 같은 크로마토그래피에 의해 모니터링될 수 있다.

본원에 기재된 바와 같은 화합물을 합성하기 위한 예시적인 방법은 LDPP의 합성을 예로서 도시하는 하기 실시예 1에 제공된다.

III. 제제

또한 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I의 화합물 (예를 들어 MDP의 적어도 하나의 올리고펩티드 유사체) 및 담체를 포함하는 조성물이 본원에 기재된다. 임의로, 상기 조성물은 L-락테이트-D-알라닌-L-글루타민 팔미틸 에스테르 (LDPP) 및 담체를 포함한다.

일부 경우에, 상기 조성물은 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I의 화합물, 예를 들어 LDPP, 및 동물 사료를 포함한다. 옥수수, 수수, 밀, 보리, 귀리, 대두박, 어분, 및/또는 유청 중 하나 이상을 포함하는 동물 사료를 비롯한 임의의 적합한 동물 사료가 사용될 수 있다. 임의로, 화학식 I의 화합물은 약 0.01 mg/kg 내지 5 mg/kg (예를 들어, 0.05 mg/kg 내지 4.5 mg/kg, 0.1 mg/kg 내지 4 mg/kg, 0.15 mg/kg 내지 3.5 mg/kg, 또는 0.2 mg/kg 내지 3 mg/kg)의 양으로 상기 조성물에 포함될 수 있다. 일부 예에서, LDPP와 같은 화학식 I의 화합물은 동물 사료를 포함하는 상기 조성물에 0.01 mg/kg, 0.05 mg/kg, 0.1 mg/kg, 0.15 mg/kg, 0.2 mg/kg, 0.25 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.35 mg/kg, 0.4 mg/kg, 0.45 mg/kg, 0.5 mg/kg, 0.55 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.65 mg/kg, 0.7 mg/kg, 0.75 mg/kg, 0.8 mg/kg, 0.85 mg/kg, 0.9 mg/kg, 0.95 mg/kg, 1.0 mg/kg, 1.5 mg/kg, 2.0 mg/kg, 2.5 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.5 mg/kg, 4.0 mg/kg, 4.5 mg/kg, 또는 5.0 mg/kg의 양으로 포함될 수 있다. 동물 사료 조성물은 효소, 프로바이오틱, 프리바이오틱, 항산화제, 성장 촉진용 항생제, 및 착색제를 포함하는, 동물 식이에 사용되는 첨가제를 추가로 포함할 수 있다.

본원에 기재된 조성물은 경구, 비경구, 흡입 스프레이, 국소, 직장, 비강, 협측, 질, 또는 이식된 저장소 투여에 적합할 수 있다. 본원에 사용된 용어 비경구는 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 관절내, 활액막내, 흉골내, 경막내, 간내, 병변내, 및 두개내 주사 또는 주입 기술을 포함한다. 임의로, 본원에 기재된 조성물은 경구로, 국소로, 비강내로, 정맥내로, 피하로, 피내로, 경피로, 점막내로, 근육내로, 흡입 스프레이에 의해, 직장으로, 비강으로, 설하로, 협측으로, 질로, 또는 이식된 저장소를 통해 투여될 수 있다.

본원에 기재된 화합물 또는 그의 유도체는 제약 조성물로 제공될 수 있다. 일부 경우에, 상기 조성물은 화학식 I의 화합물 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물이다. 의도된 투여 방식에 따라, 상기 제약 조성물은 고체, 반고체, 또는 액체 투여 형태, 예를 들어 정제, 좌제, 환제, 캡슐, 분말, 액체, 또는 현탁액의 형태, 바람직하게는 정확한 투여량의 단일 투여에 적합한 단위 투여 형태일 수 있다. 상기 조성물은 치료 유효량의 본원에 기재된 화합물 또는 그의 유도체를 제약상 허용되는 담체와 조합하여 포함할 것이고, 또한 다른 의약 작용제, 제약 작용제, 담체, 또는 희석제를 포함할 수 있다. 제약상 허용되는이란, 생물학적으로 또는 달리 바람직하지 않은 것이 아닌 물질을 의미하며, 이는 허용되지 않는 생물학적 효과를 유발하거나 또는 그것이 함유된 제약 조성물의 다른 성분과 유해한 방식으로 상호작용하지 않으면서, 선택된 화합물과 함께 개체에 투여될 수 있다.

상기 조성물은 본원에 기재된 하나 이상의 화합물 및 제약상 허용되는 담체를 포함할 수 있다. 본원에 사용된 용어 담체는 임의의 부형제, 희석제, 충전제, 염, 완충제, 안정화제, 가용화제, 지질, 안정화제, 또는 제약 제제에 사용하기 위한 관련 기술분야에 널리 공지된 다른 물질을 포괄한다. 조성물에 사용하기 위한 담체의 선택은 조성물의 의도된 투여 경로에 따라 달라질 것이다. 상기 제약상 허용되는 담체 및 이들 물질을 함유하는 제제의 제조는, 예를 들어 문헌 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Adeboye Adejare ed., 23rd Ed., Academic Press (2021)]에 기재되어 있다. 생리학적으로 허용되는 담체의 예는 포스페이트 완충제, 시트레이트 완충제, 및 다른 유기 산 함유 완충제와 같은 완충제; 아스코르브산을 포함하는 항산화제; 저분자량 (약 10개 미만의 잔기) 폴리펩티드; 혈청 알부민, 젤라틴, 또는 이뮤노글로불린과 같은 단백질; 폴리비닐피롤리돈과 같은 친수성 중합체; 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 아르기닌, 또는 리신과 같은 아미노산; 글루코스, 만노스, 또는 덱스트린을 포함하는, 단당류, 이당류, 및 다른 탄수화물; EDTA와 같은 킬레이팅제; 만니톨 또는 소르비톨과 같은 당 알콜; 나트륨과 같은 염-형성 반대이온; 및/또는 트윈(TWEEN®) (ICI, Inc.; 뉴저지주 브리지워터), 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), 및 플루로닉스(PLURONICS^TM) (바스프(BASF); 뉴저지주 플로햄 파크)와 같은 비이온성 계면활성제를 포함한다.

비경구 주사에 적합한 본원에 기재된 화합물 또는 그의 유도체를 함유하는 조성물은 생리학적으로 허용되는 멸균 수성 또는 비수성 용액, 분산액, 현탁액 또는 에멀젼, 및 멸균 주사가능한 용액 또는 분산액으로 재구성하기 위한 멸균 분말을 포함할 수 있다. 적합한 수성 및 비수성 담체, 희석제, 용매, 또는 비히클의 예는 물, 에탄올, 폴리올 (프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 글리세롤 등), 그들의 적합한 혼합물, 식물성 오일 (예를 들어 올리브 오일) 및 에틸 올레에이트와 같은 주사가능한 유기 에스테르를 포함한다. 적절한 유동성은, 예를 들어 레시틴과 같은 코팅의 사용에 의해, 분산액의 경우에 요구되는 입자 크기의 유지에 의해, 및 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다.

이들 조성물은 또한 보존제, 습윤제, 유화제, 및 분배제와 같은 아주반트를 함유할 수 있다. 미생물 작용의 방지는 다양한 항박테리아제 및 항진균제, 예를 들어 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르브산 등에 의해 촉진될 수 있다. 등장화제, 예를 들어 당, 염화 나트륨 등이 또한 포함될 수 있다. 주사가능한 제약 형태의 장기간 흡수는 흡수를 지연시키는 작용제, 예를 들어 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴의 사용에 의해 유발될 수 있다.

본원에 기재된 화합물 또는 그의 유도체의 경구 투여를 위한 고체 투여 형태는 캡슐, 정제, 환제, 분말, 및 과립을 포함한다. 이러한 고체 투여 형태에서, 본원에 기재된 화합물 또는 그의 유도체는 시트르산나트륨 또는 인산이칼슘과 같은 적어도 하나의 불활성 통상적인 부형제 (또는 담체), 또는 (a) 충전제 또는 증량제, 예를 들어 전분, 락토스, 수크로스, 글루코스, 만니톨, 및 규산, (b) 결합제, 예를 들어 카르복시메틸셀룰로스, 알기네이트, 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈, 수크로스, 및 아카시아, (c) 습윤제, 예를 들어 글리세롤, (d) 붕해제, 예를 들어 한천-한천, 탄산칼슘, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산, 특정 복합 실리케이트, 및 탄산나트륨, (e) 용해 지연제, 예를 들어 파라핀, (f) 흡수 촉진제, 예를 들어 4급 암모늄 화합물, (g) 습윤제, 예를 들어 세틸 알콜 및 글리세롤 모노스테아레이트, (h) 흡착제, 예를 들어 카올린 및 벤토나이트, 및 (i) 윤활제, 예를 들어 활석, 스테아르산칼슘, 스테아르산마그네슘, 고체 폴리에틸렌 글리콜, 소듐 라우릴 술페이트, 또는 그들의 혼합물과 혼합된다. 캡슐, 정제, 및 환제의 경우에, 투여 형태는 또한 완충제를 포함할 수 있다.

유사한 유형의 고체 조성물은 또한 락토스 또는 유당 뿐만 아니라 고분자량 폴리에틸렌글리콜 등과 같은 부형제를 사용하여 연질 및 경질-충전된 젤라틴 캡슐에서 충전제로서 사용될 수 있다.

정제, 당의정, 캡슐, 환제, 및 과립과 같은 고체 투여 형태는 장용 코팅 및 관련 기술분야에 공지된 다른 것과 같은 코팅 및 쉘을 사용하여 제조될 수 있다. 이들은 불투명화제를 함유할 수 있고, 또한 이들이 장관의 특정 부분에서 활성 화합물 또는 화합물들을 지연된 방식으로 방출하는 그러한 조성을 가질 수 있다. 사용될 수 있는 매립 조성물의 예는 중합체 물질 및 왁스이다. 활성 화합물은 또한 적절한 경우, 상기 언급된 부형제 중 하나 이상과 함께 마이크로-캡슐화된 형태일 수 있다.

본원에 기재된 화합물 또는 그의 유도체의 경구 또는 정맥내 투여를 위한 액체 투여 형태는 제약상 허용되는 에멀젼, 용액, 현탁액, 시럽, 및 엘릭시르를 포함한다. 활성 화합물 이외에, 상기 액체 투여 형태는 물 또는 다른 용매와 같은 관련 기술분야에서 통상적으로 사용되는 불활성 희석제, 가용화제, 및 유화제, 예를 들어, 에틸 알콜, 이소프로필 알콜, 에틸 카르보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 디메틸포름아미드, 오일, 특히, 면실유, 땅콩유, 옥수수 배아유, 올리브유, 피마자유, 참깨유, 글리세롤, 테트라히드로푸르푸릴 알콜, 폴리에틸렌글리콜, 및 소르비탄의 지방산 에스테르, 또는 이들 물질의 혼합물 등을 함유할 수 있다.

이러한 불활성 희석제 이외에, 상기 조성물은 또한 습윤제, 유화제, 현탁제, 감미제, 향미제, 또는 방향제와 같은 추가의 작용제를 포함할 수 있다.

현탁액은, 활성 화합물 이외에, 추가의 작용제, 예를 들어 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 및 소르비탄 에스테르, 미세결정질 셀룰로스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 한천-한천 및 트라가칸트, 또는 이들 물질의 혼합물 등을 함유할 수 있다.

상기 기재된 바와 같이, 본원에 기재된 하나 이상의 화합물에는 네뷸라이저가 제공될 수 있으며, 이는 기체 중에서 실질적으로 균일한 크기의 매우 미세한 액체 입자를 생성하는 기기이다. 본원에 기재된 하나 이상의 화합물을 함유하는 액체는 미스트의 형태로 직경이 약 5 mm 이하인 액적으로서 분산될 수 있다. 작은 액적들은 네뷸라이저의 출구 튜브를 통해 공기 또는 산소의 흐름에 의해 운반될 수 있다. 생성된 미스트는 환자의 기도로 침투할 수 있다.

본원에 기재된 화합물의 전달에 유용한 추가의 흡입제는 구강내 스프레이, 미스트, 계량 용량 흡입기, 및 건조 분말 생성기를 포함한다 (문헌 [Gonda, J. Pharm. Sci. 89:940-945, 2000] 참조, 적어도 그 안에 교시된 흡입 전달 방법에 대해 그 전문이 본원에 참조로 포함된다). 예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 화합물을, 윤활제, 담체, 또는 추진제와 함께 또는 이들 없이 함유하는 분말 조성물은 환자에게 투여될 수 있다. 분말 형태의 하나 이상의 화합물의 전달은 흡입에 의해 분말 제약 조성물을 투여하기 위한 통상적인 장치를 사용하여 수행될 수 있다.

직장 투여를 위한 본원에 기재된 화합물 또는 그의 유도체의 조성물은 임의로 좌제이며, 이는 화합물을 적합한 비-자극성 부형제 또는 담체, 예를 들어 코코아 버터, 폴리에틸렌글리콜, 또는 좌제 왁스와 혼합함으로써 제조될 수 있고, 이는 상온에서는 고체이지만 체온에서는 액체이고, 따라서 직장 또는 질강에서 용융되어 활성 성분을 방출한다.

본원에 기재된 화합물 또는 그의 유도체의 국소 투여를 위한 투여 형태는 연고, 분말, 스프레이, 및 흡입제를 포함한다. 본원에 기재된 화합물 또는 그의 유도체는 멸균 조건 하에 생리학적으로 허용되는 담체 및 필요할 수 있는 임의의 보존제, 완충제, 또는 추진제와 혼합된다. 안과용 제제, 연고, 분말, 및 용액이 또한 상기 조성물의 범주 내에 있는 것으로 고려된다.

상기 언급된 바와 같이, 상기 조성물은 본원에 기재된 하나 이상의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함할 수 있다. 본원에 사용된 용어 제약상 허용되는 염은, 분별있는 의학적 판단의 범주 내에서, 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 등 없이 대상체의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합하고, 합리적인 이익/위험 비에 상응하고, 그의 의도된 용도에 효과적인, 본원에 기재된 화합물의 염 또는 그의 유도체 뿐만 아니라 가능한 경우에 본원에 기재된 화합물의 쯔비터이온 형태를 지칭한다. 용어 염은 본원에 기재된 화합물의 비교적 비독성인 무기 및 유기 산 부가염을 지칭한다. 이들 염은 화합물의 단리 및 정제 동안 계내 제조될 수 있거나, 또는 유리 염기 형태의 정제된 화합물을 적합한 유기 또는 무기 산과 별도로 반응시키고, 이와 같이 형성된 염을 단리함으로써 제조될 수 있다. 대표적인 염은 히드로브로마이드, 히드로클로라이드, 술페이트, 비술페이트, 니트레이트, 아세테이트, 옥살레이트, 발레레이트, 올레에이트, 팔미테이트, 스테아레이트, 라우레이트, 보레이트, 벤조에이트, 락테이트, 포스페이트, 토실레이트, 시트레이트, 말레에이트, 푸마레이트, 숙시네이트, 타르트레이트, 나프틸레이트 메실레이트, 글루코헵토네이트, 락토비오네이트, 메탄 술포네이트, 및 라우릴술포네이트 염 등을 포함한다. 이들은 나트륨, 리튬, 칼륨, 칼슘, 마그네슘과 같은 알칼리 및 알칼리 토금속 등을 기초로 하는 양이온 뿐만 아니라 비독성 암모늄, 4급 암모늄, 및 암모늄, 테트라메틸암모늄, 테트라에틸암모늄, 메틸아민, 디메틸아민, 트리메틸아민, 트리에틸아민, 에틸아민 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는 아민 양이온을 포함할 수 있다 (문헌 [S.M. Barge et al., J. Pharm. Sci. (1977) 66, 1] 참조, 적어도 그 안에 교시된 조성물에 대해 그 전문이 본원에 참조로 포함된다).

본원에 기재된 화합물 및 조성물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 투여는 장애를 치료하기에 효과적인 기간 동안 치료 유효량의 본원에 기재된 화합물 및 조성물 또는 본원에 기재된 바와 같은 그의 제약상 허용되는 염을 사용하여 수행될 수 있다. 본원에 기재된 화합물 및 조성물 또는 본원에 기재된 바와 같은 그의 제약상 허용되는 염의 유효량은 통상의 기술자에 의해 결정될 수 있고, 활성 화합물을 1일에 약 0.01 x (BW/20)³ ^/4 μg와 10,000 x (BW/20)³ ^/4 μg 사이의 양으로 대상체에게 투여하는 용량으로의 동물 또는 인간에 대한 예시적인 투여를 포함하며, 여기서 BW는 대상체의 체중 (그램)이다. 이 양은 단일 용량으로 또는 1일 1 내지 4회와 같은 개별 분할 용량의 형태로 투여될 수 있다.

통상의 기술자는 임의의 특정한 대상체에 대한 구체적 용량 수준 및 투여 빈도가 달라질 수 있고, 사용되는 구체적 화합물의 활성, 그 화합물의 대사 안정성 및 작용 시간, 대상체의 종, 연령, 체중, 전반적 건강, 성별 및 식이, 투여 방식 및 시간, 배설률, 약물 조합, 및 특정한 상태의 중증도를 포함한 다양한 인자에 따라 달라질 것임을 이해할 것이다.

제제에 사용될 정확한 용량은 또한 투여 경로, 및 질환 또는 장애의 심각성에 따라 달라질 것이고, 진료의의 판단 및 각각의 대상체의 상황에 따라 결정되어야 한다. 유효 용량은 시험관내 또는 동물 모델 시험 시스템으로부터 유도된 용량-반응 곡선으로부터 외삽될 수 있다. 또한, 투여 경로에 따라, 통상의 기술자는 대상체의 세포, 조직, 및/또는 기관에서 원하는 수준의 반응을 위한 혈장 농도를 초래하는 용량을 결정하는 방법을 알 것이다.

IV. 사용 방법

대상체에게 유효량의 본원에 기재된 하나 이상의 화합물 또는 제약 조성물, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 제공된다. "유효량"이라는 표현은, 방법에서 화합물의 양을 기술하기 위해 사용될 때, 원하는 약리학적 효과 또는 다른 효과를 달성하는 화합물의 양, 예를 들어 증진된 성장 또는 사료 전환을 초래하는 양을 지칭한다.

동물에서 사료 전환을 증진시키는 방법과 함께, 동물에서 성장을 촉진시키는 방법이 본원에 제공된다. 상기 방법은 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 조성물을 동물에게 투여하는 것을 포함한다. 상기 투여는 대조군 (본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 조성물을 투여하지 않은 동물)과 비교하여 동물의 성장을 증진시키고/거나 동물의 사료 전환을 증진시킬 수 있다.

본원에 기재된 화합물 및 조성물 또는 그의 제약상 허용되는 염은 장 염증과 연관된 질환 또는 상태를 치료 및/또는 예방하는데 유용하다. 이로써, 본원에 기재된 바와 같은 조성물 (예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 제약 조성물)을 장 염증을 갖는 인간에게 투여하는 것을 포함하는, 인간에서의 장 염증을 감소시키는 방법이 본원에 제공되며, 여기서 상기 투여는 장 염증을 감소시킨다. 임의로, 인간은 염증성 장 질환, 과민성 장 증후군, 크론병, 궤양성 대장염, 또는 박테리아 감염 (예를 들어 클로스트리듐 디피실레 감염)을 갖거나 또는 그의 발생 위험이 있다. 상기 방법은 장 염증과 연관된 질환 또는 상태 (예를 들어, 염증성 장 질환, 과민성 장 증후군, 크론병, 궤양성 대장염, 또는 박테리아 감염)를 갖는 인간을 선택하는 것을 추가로 포함할 수 있다.

본원에 기재된 방법은 소아 및 노인 집단을 포함하나 이에 제한되지는 않는 인간에서, 및 동물 (예를 들어 수의학적 적용)에서, 본원에 기재된 질환 및 상태를 치료하는데 유용하다.

V. 키트

동물에서의 사료 전환을 증진시키기 위한 방법과 함께, 동물에서의 성장을 촉진시키기 위한 키트가 또한 본원에 제공된다. 키트는 본원에 기재된 임의의 화합물 또는 조성물을 포함할 수 있다. 예를 들어, 키트는 화학식 I의 화합물을 포함할 수 있다. 키트는 하나 이상의 추가의 작용제, 예를 들어 동물 사료 및/또는 동물 사료 보충제를 추가로 포함할 수 있다. 키트는 본원에 기재된 임의의 화합물 또는 조성물의 경구제를 포함할 수 있다. 키트는 키트의 사용에 대한 지침서 (예를 들어 대상체의 치료에 대한 지침서), 용기, 화합물 또는 조성물을 투여하기 위한 수단, 및/또는 담체를 추가로 포함할 수 있다.

또한, 대상체에서 장 염증과 연관된 질환 또는 상태를 치료 또는 예방하기 위한 키트가 본원에 제공된다. 키트는 본원에 기재된 임의의 화합물 또는 조성물을 포함할 수 있다. 예를 들어, 키트는 화학식 I의 화합물을 포함할 수 있다. 키트는 하나 이상의 추가의 작용제, 예를 들어 항염증제를 추가로 포함할 수 있다. 키트는 본원에 기재된 임의의 화합물 또는 조성물의 경구제를 포함할 수 있다. 키트는 키트의 사용에 대한 지침서 (예를 들어 대상체의 치료에 대한 지침서), 용기, 화합물 또는 조성물을 투여하기 위한 수단, 및/또는 담체를 추가로 포함할 수 있다.

본원에 사용된 용어 치료, 치료하는, 또는 치료하는 것은 질환 또는 상태의 하나 이상의 증상을 감소시키는 방법을 지칭한다. 따라서 개시된 방법에서, 치료는 질환 또는 상태의 하나 이상의 증상의 중증도의 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 또는 100% 감소를 지칭할 수 있다. 예를 들어, 질환을 치료하는 방법은 대조군과 비교하여 대상체에서 질환의 하나 이상의 증상 또는 징후에서 10% 감소가 존재하는 경우에 치료인 것으로 간주된다. 본원에 사용된 바와 같이, 대조군은 처리되지 않은 상태를 지칭한다. 따라서, 감소는 천연 또는 대조군 수준과 비교하여 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 또는 10%와 100% 사이의 임의의 퍼센트 감소일 수 있다. 치료가 반드시 질환, 상태, 또는 질환 또는 상태의 증상의 치유 또는 완전한 제거를 지칭하는 것은 아니라는 것이 이해된다.

본원에 사용된 용어 질환 또는 장애의 예방하는, 예방하는 것, 및 예방은 대상체가 질환 또는 장애의 하나 이상의 증상을 나타내기 시작하기 전에 또는 거의 동시에 일어나는 작용, 예를 들어 조성물 또는 치료제의 투여를 지칭하며, 이는 하나 이상의 질환 또는 장애의 증상의 개시 또는 중증도를 억제하거나 지연시킨다.

본원에 사용된 바와 같이, 감소 또는 저하, 또는 억제에 대한 언급은 대조군 수준과 비교하여 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 이상의 변화를 포함한다. 이러한 용어는 완전한 제거를 포함할 수 있지만, 반드시 포함하는 것은 아니다.

전반에 걸쳐 사용된 바와 같이, 대상체는 개체를 의미한다. 바람직하게는, 대상체는 영장류와 같은 포유동물, 보다 바람직하게는 인간이다. 비-인간 영장류 또한 대상체이다. 용어 대상체는 고양이, 개 등과 같은 가축, 가축 (예를 들어, 소, 말, 돼지, 양, 염소 등), 농장 조류 (닭, 칠면조, 비둘기, 거위 등), 및 실험실 동물 (예를 들어, 페렛, 친칠라, 마우스, 토끼, 래트, 저빌, 기니 피그 등)을 포함한다. 따라서, 수의학적 용도 및 의료제가 본원에서 고려된다. 비-인간 대상체는 또한 본 발명에서 동물로 지칭된다.

본 출원 전체에 걸쳐, 다양한 간행물이 참조된다. 이들 간행물의 개시내용은 그 전문이 본 출원에 참조로 포함된다.

하기 실시예는 본 발명을 추가로 예시하는 역할을 할 것이지만, 동시에 그의 어떠한 제한도 구성하지 않는다. 반대로, 본 명세서에서의 설명을 읽은 후에, 본 발명의 사상으로부터 벗어나지 않고 통상의 기술자에게 자신을 제안할 수 있는 다양한 실시예, 수정 및 그 등가물에 의지할 수 있다는 것을 명확히 이해해야 한다.

실시예

실시예 1: L- 락테이트 -D-알라닌-L-글루타민 팔미틸 에스테르 ( LDPP )의 합성

L-락테이트-D-알라닌-L-글루타민 팔미틸 에스테르 (LDPP)를 하기에 상술되고 도 1에 도시된 방법에 따라 합성하였다.

tert-부틸옥시카르보닐 (BOC) L-글루타민의 헥사데실 에스테르를 단계 a에서 디시클로헥실 카르보디이미드의 존재 하에 테트라히드로푸란 중에서 BOC-글루타민 ( 1 )과 1-헥사데칸올 ( 2 )의 에스테르화 반응에 의해 제조하여 헥사데실 BOC-L-글루타민 ( 3 )을 수득하였다. BOC 보호기를 단계 b에서 메틸렌 클로라이드에 용해된 중간체 ( 3 )를 염화수소 기체로 처리하여 제거하여 헥사데실 L-글루타민의 히드로클로라이드 염 ( 4 )을 수득하였다. 중간체 ( 4 )를 N,N-디메틸포름아미드 중에 용해시키고, N,N-디이소프로필에틸아민을 첨가하고, 이어서 BOC D-알라닌 ( 5 ) 및 커플링제 벤조트리아졸-1-일옥시트리스(피롤리디노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트 (PyBOP)를 첨가하여, 단계 c에서 BOC-보호된 헥사데실 디펩티드 ( 6 )를 수득하였다. 중간체 ( 6 )를 칼럼 크로마토그래피로 정제하고, BOC 기를 단계 d에서 생성물을 염화수소 기체로 처리하여 제거하여 헥사데실 디펩티드 ( 7 )를 수득하였다. N,N-디이소프로필에틸아민 및 2-(1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (헥사플루오로포스페이트 벤조트리아졸 테트라메틸 우로늄, HBTU)의 존재 하에 N,N-디메틸포름아미드 중에 용해된 중간체 ( 7 )에, 리튬 L-락테이트 ( 8 )를 첨가하고, 단계 e로 최종 생성물 L-락테이트-D-알라닌-L-글루타민 헥사데실 에스테르 ( 9 )를 수득하였다. MW가 513.72 g/mol인 백색 L-락테이트-D-알라닌-L-글루타민 팔미틸 에스테르는 ¹H-핵 자기 공명 분석에 의해 측정시 98% 초과의 순도였다.

실시예 2: 닭에서의 성장 속도 및 사료 전환에 대한 LDPP의 영향

본 실험의 목적은 0.2 mg/kg 사료의 L-락테이트-D-알라닌-L-글루타민 팔미틸 에스테르 (LDPP)에 의한 사료의 보충이 육용계에서 성장 속도를 증가시키고/거나 사료 전환을 개선시키는지, 즉 육용계가 더 빠르게 성장하게 함으로써 성장을 촉진하고/거나 동일한 양의 체중 증가를 위해 보다 적은 사료를 필요로 하는지를 평가하는 것이었다. 2차 목적은 LDPP의 효과를 산업-표준 성장 촉진용 항생제인 바시트라신의 효과와 비교하는 것이었다.

실험 설계

새로 부화된 암컷 로스(Ross) 708 육용계를 사용된 침구가 있는 바닥 우리 상에서 21일 동안 단일 무리로서 가두였다. 모든 닭은 이 시간 동안 80% 권장 조(crude) 단백질을 함유하고 항-콕시듐(coccidial) 보충제를 함유하지 않은 분쇄 비처리 표준 아비아젠(Aviagen) 708 스타터 사료 및 그로워 사료를 제공받았다. 3주 후, 닭을 새로운 침구가 있는 25마리의 닭의 38개의 복제 바닥 우리로 그룹화하였다. 닭에게 제21일부터 제44일의 종료까지 24일 동안 100% 단백질 및 0.0125% 암프롤륨 항-콕시듐 내포물을 함유하는 표준 분쇄 피니셔 아비아젠 708 피니셔 사료를 공급하였다. 사료 및 물은 시험 전반에 걸쳐 임의로 이용가능하였다. 13개의 우리를 각각 비처리된 대조군 (보충제 없는 사료) 및 LDPP-처리 (0.2 mg LDPP/kg 사료)에 할당하고, 12개의 우리를 바시트라신 처리 (50 mg 바시트라신/kg 사료)에 할당하였다. 실험 단위는 개별 닭보다는 우리였다. 우리의 닭 체중을 제21일 및 제44일에 결정하였다. 피니셔 사료 섭취량을 기록하고, 제44일에 잔류 사료를 결정하고, 실험을 종료하였다.

통계적 분석

식이 실험의 완전한 24일 기간의 일정 시간 분석의 경우, 각각의 처리군에 대한 전체 (진정한) 사료 전환을, 각각의 처리군의 모든 우리의 총 소비 사료를 총 체중 증가로 나눔으로써 결정하였다.

일정 체중 증가 분석의 경우, 비처리 대조군의 체중 증가와 일치하도록 바시트라신 및 LDPP 처리군의 공급 시간을 모델링하였다. 표준 암컷 로스 708 육용계의 근접하게 일치되는 체중 및 체중 증가에 기초하여, 실험의 마지막 제44일에 닭 마리당 체중 증가는 제21-44일의 우리 체중 증가/우리당 생존 닭으로 0.04781 분율이 계산되었다. 대조군과 일치하는 체중 증가를 나타내는 단일 분율의 날이 관측될 때까지, 처리군의 모든 우리의 계산된 제44일의 체중 증가의 동일한 분율을 반복적으로 차감함으로써 각각의 처리군의 평균 체중 증가를 대조군 평균으로 조정하였다. 유사하게, 제44일의 닭 마리당 사료 소비가 제21-44일의 우리 사료 섭취량/우리당 생존 닭으로 0.05867 분율이 계산되었다. 이어서, 각각의 우리로부터 이전에 관측된 분율의 1일 사료 섭취량을 차감함으로써 처리군당 평균 사료 섭취량을 계산하였다.

다중 비교를 위해 일원 ANOVA 및 터키 정확한 실제 차이(Tukey Honest True Difference) 보정에 의해 체중 증가 및 사료 소비 데이터를 분석하였다. 비-파라미터 만 휘트니 U 검정에 의해 우리 FCR 데이터로부터 사료 전환율의 군 차이를 평가하였다.

결과 및 결론

0.2 mg/kg 사료의 보충된 LDPP는 미처리 대조군 닭의 1,653 g 체중 증가와 비교하여 LDPP-처리된 닭의 체중 증가를 1,725 g으로 4.4% 증가시킴으로써 육용계의 성장 속도를 상당히 개선시킨다. 이는 대조군에 비해 LDPP-처리된 닭의 매우 유의한, 거의 1일 더 신속한 성장을 가져왔다 (23.13 대 24일). LDPP-처리 닭 대 비처리 닭의 사료 전환율은 일정 시간에서 1.818에서 1.805로 개선되고, 일정 체중 증가에서 1.787로 1.7% 더 강하게 개선된다. LDPP의 성장 촉진 효과는 산업-표준 성장 촉진용 항생제인 바시트라신의 효과보다 상당히 더 강하며, 이는 일정 체중 증가에서 1.827의 상당히 더 높은 사료 전환율을 나타내었다. 결과를 도 2에 나타내었다.

실시예 3: 돼지에서의 성장 속도 및 사료 전환에 대한 LDPP의 영향

본 실험의 목적은 0.2 mg/kg 사료의 L-락테이트-D-알라닌-L-글루타민 팔미틸 에스테르 (LDPP)에 의한 사료의 보충이 갓 이유된 사육장 돼지에서 성장 속도를 증가시키고/거나 사료 전환을 개선시키는지 여부를 평가하는 것이었다.

실험 설계

수컷 돼지 (거세 돼지)를 본 연구에 사용하였다. 돼지를 대략 3주령에 이유하고, 사육장으로 옮기고, 우리당 4마리의 돼지로 24개의 사육장 우리에 무작위로 할당하였다. 2가지 식이 처리 중 하나, 비처리된 대조군 (보충제 없는 사료) 또는 LDPP-처리 (0.2 mg LDPP/kg 사료)를 각각의 우리에 할당하여, 4마리의 돼지의 12개 우리를 사용하여 각각의 식이의 효과를 평가하였다. 처리 화합물의 예비 혼합물을 혼합된 식이에 0.1%로 첨가하고, 이어서 이를 펠릿화하였다. 제1상 식이를 이유 후 제0일부터 대략 제8일까지 6 lb/돼지로 공급하였다. 이유 후 제8일에, 돼지를 대략 제18일에 만료되는 12 lb/돼지의 제2상 식이로 전환하였다. 제2상 식이가 소비되면, 돼지를 제3상 식이로 교체하고, 제42일에 연구 종료시까지 유지시켰다. 어떤 식이에도 항생제를 첨가하지 않았다. 2012 NRC 사양들에 기초하여 모든 영양소 요건들을 충족시키거나 초과하도록 식이를 제조하였다. 돼지는 식이 및 물을 임의로 받았다. 실험 제0일 및 제42일에 돼지의 체중을 개별적으로 측정하였다. 우리당 사료 섭취량을 체중 측정 기간 동안 모니터링하였다. 개별 돼지 체중이 얻어졌지만, 우리가 실험 단위였다. 제42일에, 연구를 종료하고, 처리된 돼지를 안락사시킨 반면, 처리되지 않은 돼지는 먹이 사슬에 유지시켰다.

통계적 분석

우리 데이터를 돼지의 수로 나눔으로써 개별 돼지 데이터로 변환하였다. 돼지가 안락사된 3개의 우리에 대해, 시간-분율 돼지 수를 사용하였다. 체중 증가 및 계산된 사료 소비 데이터를 대응표본 T-검정으로 분석하였다. 각각의 처리에 대한 전체 (진정한) 사료 전환을 각각의 처리의 모든 우리의 총 소비 사료를 총 체중 증가로 나눔으로써 결정하였다. 사료 전환에서의 처리 차이를 우리 사료 전환 데이터의 비-파라미터 만 휘트니 U 검정으로 통계적으로 평가하였다.

일정 체중 증가 분석의 경우, LDPP 처리군의 공급 시간을 비처리 대조군의 체중 증가와 일치하도록 모델링하였다. 1일 체중 및 체중 증가를 제0일과 제42일 체중 사이의 선형 내삽으로 모델링하였다. 계산된 제42일 및 제41일 체중 증가를 차감하고, 이어서 대조군과 일치하는 체중 증가를 나타내는 단일 분율의 날이 관측될 때까지 LDPP 처리의 모든 우리의 계산된 제40일 체중 증가의 동일한 분율을 반복적으로 차감함으로써 LDPP 처리군의 평균 체중 증가를 대조군 평균으로 조정하였다. 보간된 1일 체중 데이터로부터, 1일 사료 소비가 먼저 체중의 5%로서 계산되었다. 이어서, 이들 1일 사료 섭취량의 합을 각각의 우리의 실제 계량된 사료 섭취량으로 나누고, 1일 사료 섭취량에 이 분율을 곱하여 정확한 계량된 우리당 사료 섭취량에 도달하였다. 이들 계산된 1일 사료 섭취량을 사용하여 LDPP 처리군에 대한 변경된 공급 시간에 의해 사료 섭취량을 계산하였다. 이어서, LDPP 처리군의 평균 사료 섭취량을 각각의 우리에 대해 이전에 관측된 제42일 및 제41일 및 분율의 제40일 사료 섭취량을 차감함으로써 계산하였다.

체중 증가 및 사료 소비 데이터를 일원 ANOVA 및 스튜던트 T-검정으로 분석하였다. 비-파라미터 만 휘트니 U 검정에 의해 우리 FCR 데이터로부터 사료 전환율의 차이를 평가하였다.

결과 및 결론

0.2 mg/kg 사료의 보충된 LDPP는 비처리된 사육장 돼지의 22.076 kg 체중 증가와 비교하여 LDPP-처리된 돼지의 체중 증가를 23.826 kg으로 7.9% 증가시킴으로써 사육장 돼지의 성장 속도를 상당히 개선시킨다. 이는 대조군과 비교하여 LDPP-처리된 돼지의 매우 유의한 2.1일 더 신속한 성장을 가져왔다 (39.921 대 42일). LDPP-처리된 돼지 대 비처리된 돼지의 사료 전환율은 일정 시간에서 1.479에서 1.423로 3.8% 개선되었고, 일정 체중 증가에서는 1.396로 5.5% 더 강하게 개선되었다. 결과를 도 3에 나타내었다.

본원에 인용된 모든 참고문헌은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

참고문헌

하나 이상의 예시적인 실시양태가 도면을 참조하여 설명되었지만, 형태 및 세부사항의 다양한 변경이 하기 청구범위에 의해 규정된 바와 같은 본 발명의 개념의 사상 및 범주로부터 벗어나지 않고 그 안에서 이루어질 수도 있다는 것이 통상의 기술자에 의해 이해될 수 있을 것이다.

Claims

하기 화학식의 올리고펩티드 또는 그의 제약상 허용되는 산 또는 염:

여기서 R¹은 치환 또는 비치환된 알킬 또는 치환 또는 비치환된 아릴이고;
R², R³, R⁴, 및 R⁵는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 알킬, 및 치환 또는 비치환된 아릴로부터 선택되고;
X는 O 또는 NR⁶이고, 여기서 R⁶는 수소, 치환 또는 비치환된 알킬, 또는 치환 또는 비치환된 아릴이다.
제1항에 있어서, X가 O인 올리고펩티드.
제1항에 있어서, R¹이 C₁-C₁₈ 선형 알킬 또는 아미노산인 올리고펩티드.
제1항에 있어서, 하기 구조를 갖는 올리고펩티드:
제1항에 있어서, 하기 구조를 갖는 올리고펩티드:

여기서 R⁷은 치환 또는 비치환된 알킬 또는 치환 또는 비치환된 아릴이고;
Y는 O 또는 NR⁸이고, 여기서 R⁸은 수소, 치환 또는 비치환된 알킬, 또는 치환 또는 비치환된 아릴이다.
제1항에 있어서, L-락테이트-D-알라닌-L-글루타민-헥사데실 에스테르인 올리고펩티드.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 적어도 하나의 올리고펩티드 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 적어도 하나의 올리고펩티드 및 동물 사료를 포함하는 조성물.
제8항에 있어서, 적어도 하나의 올리고펩티드가 약 0.01 mg/kg 내지 5 mg/kg의 양으로 조성물에 존재하는 것인 조성물.
제8항 또는 제9항에 있어서, 동물 식이에 사용되는 첨가제를 추가로 포함하는 조성물.
제10항에 있어서, 첨가제가 효소, 프로바이오틱, 프리바이오틱, 항산화제, 성장촉진용 항생제, 착색제, 또는 그들의 조합을 포함하는 것인 조성물.
장 염증을 갖는 인간에게 제7항의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 여기서 투여는 장 염증을 감소시키는 것인, 인간에서의 장 염증을 감소시키는 방법.
제12항에 있어서, 장 염증과 연관된 질환 또는 상태를 갖는 인간을 선택하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제13항에 있어서, 장 염증과 연관된 질환 또는 상태가 염증성 장 질환, 과민성 장 증후군, 크론병, 궤양성 대장염, 또는 박테리아 감염을 포함하는 것인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 올리고펩티드를 동물에게 투여하는 것을 포함하고, 여기서 투여는 동물의 성장을 증진시키는 것인, 동물의 성장을 촉진하는 방법.
제8항 내지 제11항 중 어느 한 항의 조성물을 동물에게 투여하는 것을 포함하고, 여기서 투여는 동물의 성장을 증진시키는 것인, 동물의 성장을 촉진하는 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 올리고펩티드를 동물에게 투여하는 것을 포함하고, 여기서 투여는 동물의 사료 전환을 증진시키는 것인, 동물의 사료 전환을 증진시키는 방법.
제8항 내지 제11항 중 어느 한 항의 조성물을 동물에게 투여하는 것을 포함하고, 여기서 투여는 동물의 사료 전환을 증진시키는 것인, 동물의 사료 전환을 증진시키는 방법.