KR20220131923A

KR20220131923A - 안정한 항체 제형

Info

Publication number: KR20220131923A
Application number: KR1020227025939A
Authority: KR
Inventors: 위안 카오; 딩지앙 리우; 롱 쑤
Original assignee: 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드
Priority date: 2020-01-24
Filing date: 2021-01-22
Publication date: 2022-09-29
Also published as: WO2021150829A1; JP2023511080A; CA3162569A1; CN115243718A; MX2022008949A; US20210252146A1; IL294375A; CL2023002560A1; CO2022010254A2; BR112022014240A2; AU2021210942A1; EP4093435A1; CL2022001989A1

Abstract

본 개시는 에볼라 바이러스(EBOV)에 특이적으로 결합하는 인간 항체를 포함하는 안정한 약학적 제형을 제공한다. 소정의 구현예에서, 제형은 항-EBOV 항체에 추가하여 완충액, 아미노산, 비이온성 계면활성제, 및 안정화제를 함유한다. 본 개시의 약학적 제형은 운송 도중의 교반과 같은 응력에 대해, 및 보관 시(예를 들어 40℃를 초과하는 온도에서의 보관 시) 상당한 정도의 항체 안정성을 나타낸다.

Description

안정한 항체 제형

정부 라이선스 권리

본 발명은 미국 보건복지부(U.S. Department of Health and Human Services)에서 수여한 계약 HHS0100201500013C 및 HHS0100201700016C에 의거한 정부 지원을 통해 이루어졌다. 미국 정부는 본 발명에서 소정의 권리를 갖는다.

서열 목록

서열 목록의 공식 사본은 2021년 1월 22일자로 생성되고 "10668WO01_Sequence_Listing_ST25.txt"의 파일명을 가진 약 36 KB 크기의 ASCII 형식의 서열 목록으로서, EFS-Web을 통해 전자 방식으로 명세서와 함께 동시에 제출된다. 본 ASCII 형식의 문헌에 포함된 서열 목록은 본 명세서의 일부이며 그 전체가 참조로서 본원에 통합된다.

기술분야

본 개시는 치료 항체 제형 분야에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 개시는 에볼라 바이러스(EBOV)에 특이적으로 결합하는 하나 이상의 인간 항체를 포함하는 약학적 제형 분야에 관한 것이다.

치료 거대분자(예를 들어 항체)는 이들 분자를 환자에게 투여하기에 적합하게 만드는 것 뿐만 아니라 보관하고 후속해서 사용하는 동안 안정성을 유지하는 방식으로 제형화되어야 한다. 예를 들어, 액체 용액 중의 치료 항체는 용액이 적절히 제형화되지 않는 한 분해, 응집, 또는 원하지 않는 화학적 변형이 발생하기 쉽다. 액체 제형 중 항체의 안정성은 제형에 사용된 부형제의 종류뿐만 아니라, 부형제의 양 및 부형제 간의 상대 비율에 따라서도 달라진다. 또한, 액체 항체 제형을 제조할 때는 안정성 이외의 다른 고려 사항을 감안해야만 한다. 이러한 추가 고려사항의 예는, 주어진 제형에 담길 수 있는 용액의 점도와 항체의 농도, 및 제형의 시각적 품질 또는 매력(appeal)을 포함한다. 따라서, 치료 항체를 제형화할 때, 제형이 안정하게 유지되고, 적절한 농도의 항체를 함유하고, 적절한 점도 뿐만 아니라 환자에게 편리하게 투여될 수 있는 다른 특성도 갖도록 하기 위해서는 상당한 주의를 기울여야 한다. 에볼라 바이러스(EBOV)에 대한 항체는 적절한 제형화가 요구되는 치료적으로 관련된 거대분자의 일 예이다. 항-EVBV 항체는 에볼라 바이러스 감염증의 예방 및/또는 치료에 임상적으로 유용하다. 예시적인 항-EBOV 항체는 특히 미국 특허/공개 제10,501,526호, 제10,081,670호, 제9,771,414호, 제6,630,144호, 제6,875,433호, 제7,335,356호, 및 제8,513,391호, 및 WO 2016/123019, EP1539238, EP2350270, 및 EP8513391에 기술되어 있다.

항-EBOV 항체가 알려져 있긴 하지만, 원격 환경에 위치하거나 치료제를 위한 냉장 시설에 접근할 수 없는 환경에 위치한 환자를 포함하여, 환자에게 투여하기에 충분히 안정적이고 적합한 항-EBOV 항체를 포함하는 신규한 약학적 제형에 대한 필요성이 여전히 당업계에 존재한다.

본 개시는 에볼라 바이러스(EBOV)에 특이적으로 결합하는 인간 항체를 포함하는 안정한 약학적 제형을 제공함으로써 전술한 요구를 충족시킨다.

일 양태에서, 다음을 포함하는 액체 약학적 제형이 제공된다: (a) 당류를 포함하는 안정화제; (b) 히스티딘을 포함하는 완충액; (c) 폴리소르베이트를 포함하는 유기 공용매; 및 (d) 에볼라 바이러스(EBOV)에 특이적으로 결합하는 적어도 하나의 항체.

다양한 구현예에서, EBOV에 특이적으로 결합하는 적어도 하나의 항체는 약 5 ± 0.75 mg/mL 내지 약 250 ± 37.5 mg/mL의 농도로 제공된다. 일부 구현예에서, 250 mg/mL는 제형 중 최대 단백질 농도이다. 일부 양태에서, 250 mg/mL의 단백질은 최대 3개의 항체를 포함한다. 일부 양태에서, 3개의 항체를 포함하는 제형 중 최대 단백질 농도는 약 5 ± 0.75 mg/mL 내지 약 250 mg/mL ± 37.5 mg/mL의 범위일 것이다.

제형에 존재하는 2개 또는 3개의 항체의 비율은 결과 측정치에 따라 변형될 수 있다. 일부 양태에서, 2개의 항체는 1:1 비율로 존재한다. 일부 양태에서, 항체들은 1:2 비율로 존재한다. 일부 양태에서, 2개의 항체는 약 1:1 내지 약 10:1 비율로 존재한다. 일부 양태에서, 3개의 항체는 1:1:1 비율로 존재한다. 일부 양태에서, 3개의 항체는 1:2:1 비율로 존재한다. 일부 양태에서, 3개의 항체는 2:1:1 비율로 존재한다. 일부 양태에서, 3개의 항체는 1:1:2 비율로 존재한다. 일부 양태에서, 항체들는 약 1:1 내지 약 10:1 내지 10:1 내지 10:10 비율로 존재한다.

일부 구현예에서, 투여량은 약 3000 mg, 약 2000 mg, 약 1500 mg, 1000 mg, 약 800 mg, 약 750 mg, 약 500 mg, 약 250 mg, 약 200 mg, 약 150 mg, 약 100 mg, 약 75 mg, 약 50 mg, 또는 약 25 mg이다. 일부 양태에서, 투여량은 1개의 항-EBOV 항체를 포함한다. 일부 양태에서, 투여량은 2개의 항-EBOV 항체를 포함한다. 일부 양태에서, 투여량은 3개의 항-EBOV 항체를 포함한다. 일 구현예에서, 공동 제형화된 항체는 약 2시간에 걸쳐 정맥 내로 전달된다.

일 구현예에서, 적어도 하나의 항체는 12.5 mg/mL ± 1.85 mg/mL, 또는 약 12.5 mg/mL의 농도로 제공된다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 항체는 25 mg/mL ± 3.75 mg/mL, 또는 약 25 mg/mL의 농도로 제공된다. 또 다른 구현예에서, 적어도 하나의 항체는 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL, 또는 약 50 mg/mL의 농도로 제공된다. 또 다른 구현예에서, 적어도 하나의 항체는 100 mg/mL ± 15 mg/mL, 또는 약 100 mg/mL의 농도로 제공된다. 또 다른 구현예에서, 적어도 하나의 항체는 125 mg/mL ± 18.75 mg/mL, 또는 약 125 mg/mL의 농도로 제공된다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 항체는 150 mg/mL ± 22.5 mg/mL, 또는 약 150 mg/mL의 농도로 제공된다. 또 다른 구현예에서, 적어도 하나의 항체는 175 mg/mL ± 26.25 mg/mL, 또는 약 175 mg/mL의 농도로 제공된다. 또 다른 구현예에서, 적어도 하나의 항체는 200 mg/mL ± 30 mg/mL, 또는 약 200 mg/mL의 농도로 제공된다. 또 다른 구현예에서, 적어도 하나의 항체는 250 mg/mL ± 37.5 mg/mL, 또는 약 250 mg/mL의 농도로 제공된다.

일부 구현예에서, 각각의 항체는 50 mg/kg(체중)으로 투여된다. 일 구현예에서, 3개의 항체는 최종 제형이 50 mg/kg(체중)으로 투여될 각 항체를 제공할 수 있도록 공동 제형화된다. 따라서, 환자에게 투여될 최종 투여량은 150 mg/kg(체중)이며, 제형 내의 3개의 항체는 1:1:1 비율이다. 일 구현예에서, 공동 제형화된 항체는 약 2시간에 걸쳐 정맥 내로 전달된다.

소정의 구현예에서, 제형은 미국 특허 출원 공개 제2016/0215040호에 개시된 항-EBOV 항체 중 임의의 하나 이상을 포함하며, 동 문헌은 그 전체가 본원에 통합된다. 소정의 구현예에서, 항-EBOV 항체는 (a) 각각 서열번호 4, 서열번호 6, 및 서열번호 8의 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1, 2, 및 3(HCDR1-HCDR2-HCDR3)을 각각 포함하는 중쇄 가변영역(HCVR) 및 (b) 각각 서열번호 12, 서열번호 14, 및 서열번호 16의 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1, 2, 및 3(LCDR1-LCDR2-LCDR3)을 각각 포함하는 경쇄 가변 영역(LCVR)을 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 서열번호 2와 적어도 90%의 서열 동일성을 갖는 HCVR을 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 서열번호 10과 적어도 90%의 서열 동일성을 갖는 LCVR을 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 서열번호 2와 적어도 95%의 서열 동일성을 갖는 HCVR 및 서열번호 10과 적어도 95%의 서열 동일성을 갖는 LCVR을 포함한다.

소정의 구현예에서, 항-EBOV 항체는 (a) 각각 서열번호 22, 서열번호 24, 및 서열번호 26의 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1, 2, 및 3(HCDR1-HCDR2-HCDR3)을 각각 포함하는 중쇄 가변영역(HCVR) 및 (b) 각각 서열번호 30, 서열번호 32, 및 서열번호 34의 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1, 2, 및 3(LCDR1-LCDR2-LCDR3)을 각각 포함하는 경쇄 가변 영역(LCVR)을 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 서열번호 35의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 36의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 서열번호 20과 90%의 서열 동일성을 갖는 HCVR을 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 서열번호 28과 90%의 서열 동일성을 갖는 LCVR을 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 서열번호 20과 95%의 서열 동일성을 갖는 HCVR 및 서열번호 28과 95%의 서열 동일성을 갖는 LCVR을 포함한다.

소정의 구현예에서, 항-EBOV 항체는 (a) 각각 서열번호 40, 서열번호 42, 및 서열번호 44의 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1, 2, 및 3(HCDR1-HCDR2-HCDR3)을 각각 포함하는 중쇄 가변영역(HCVR) 및 (b) 각각 서열번호 48, 서열번호 50, 및 서열번호 52의 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1, 2, 및 3(LCDR1-LCDR2-LCDR3)을 각각 포함하는 경쇄 가변 영역(LCVR)을 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 서열번호 53의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 서열번호 38과 90%의 서열 동일성을 갖는 HCVR을 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 서열번호 46과 90%의 서열 동일성을 갖는 LCVR을 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 서열번호 38과 95%의 서열 동일성을 갖는 HCVR 및 서열번호 46과 95%의 서열 동일성을 갖는 LCVR을 포함한다.

일 구현예에서, 액체 제형의 pH는 pH 6.0 ± 0.5, pH 6.0 ± 0.4, pH 6.0 ± 0.3, pH 6.0 ± 0.2, pH 6.0 ± 0.1, pH 6.0 ± 0.05, pH 6.0 ± 0.01, 또는 pH 6.0이다. 일 구현예에서, 액체 제형의 pH는 약 pH 6.0 ± 0.3이다.

일 구현예에서, 완충액은 히스티딘을 포함한다. 소정의 구현예에서, 히스티딘 완충액은 5 mM ± 1 mM 내지 50 mM ± 10 mM, 또는 5 mM ± 1 mM 내지 25 mM ± 5 mM의 농도이다. 일 구현예에서, 히스티딘 완충액은 10 mM ± 2 mM 또는 약 10 mM의 농도이다. 일 구현예에서, 히스티딘 완충액은 20 mM ± 4 mM 또는 약 20 mM의 농도이다. 일 구현예에서, 히스티딘 완충액은 40 nM ± 8 mM 또는 약 40 nM의 농도이다. 소정의 구현예에서, 히스티딘 완충액은 L-히스티딘 및 L-히스티딘 모노하이드로클로라이드 일수화물을 포함한다. 일 구현예에서, L-히스티딘은 2 mM ± 0.4 mM 내지 25 mM ± 5 mM, 바람직하게는 4 mM ± 0.8 mM 내지 20 mM ± 4 mM의 농도이다. 일 구현예에서, L-히스티딘 모노하이드로클로라이드 일수화물은 2 mM ± 0.4 mM 내지 25 mM ± 5 mM, 바람직하게는 4 mM ± 0.8 mM 내지 20 mM ± 4 mM의 농도이다. 일 구현예에서, 완충액은 4.8 mM ± 0.96 mM 농도의 L-히스티딘 및 5.2 mM ± 1.04 mM 농도의 L-히스티딘 모노하이드로클로라이드 일수화물을 포함한다. 일 구현예에서, 완충액은 10 mM ± 2 mM 농도의 히스티딘을 포함하되, 히스티딘은 4.8 mM ± 0.96 mM 농도의 L-히스티딘 및 5.2 mM ± 1.04 mM 농도의 L-히스티딘 모노하이드로클로라이드 일수화물을 포함한다.

소정의 구현예에서, 유기 공용매는 폴리옥시에틸렌 모이어티를 함유하는 비이온성 중합체이다. 일 구현예에서, 유기 공용매는 계면활성제이다. 일부 구현예에서, 유기 공용매는 폴리소르베이트, 폴록사머 188, 및 폴리에틸렌 글리콜 3350 중 임의의 하나 이상이다. 일 구현예에서, 유기 공용매는 폴리소르베이트 80이다. 일 구현예에서, 유기 공용매는 폴리소르베이트 20이다.

일 구현예에서, 유기 공용매는 약 0.01% ± 0.005% 내지 약 1% ± 0.5% “중량/부피” 또는 “w/v”의 농도(예를 들어, 0.1 g/ml = 10%이고 0.01 g/ml = 1%임)이다. 소정의 구현예에서, 유기 공용매는 0.05% ± 0.025% 내지 0.5% ± 0.25%(w/v) 농도의 폴리소르베이트이다. 일 구현예에서, 유기 공용매는 0.2% ± 0.1% w/v, 또는 약 0.2% 농도의 폴리소르베이트 80이다. 또 다른 구현예에서, 유기 공용매는 0.1% ± 0.05% w/v 또는 약 0.1% w/v 농도의 폴리소르베이트 80이다. 일 구현예에서, 유기 공용매는 0.2% ± 0.1% w/v, 또는 약 0.2% 농도의 폴리소르베이트 20이다. 또 다른 구현예에서, 유기 공용매는 0.1% ± 0.05% w/v, 또는 약 0.1% 농도의 폴리소르베이트 20이다.

소정의 구현예에서, 안정화제는 당이다. 일 구현예에서, 당은 수크로오스이다. 다양한 구현예에서, 안정화제는 1% ± 0.2% w/v 내지 20% ± 4% w/v, 5% ± 1% w/v 내지 15% ± 3% w/v, 또는 1% ± 0.2% 내지 10% ± 2% w/v의 농도이다. 일 구현예에서, 안정화제는 5% ± 1% w/v 또는 약 5% w/v의 농도이다. 또 다른 구현예에서, 안정화제는 9% ± 1.8% w/v 또는 약 9% w/v 농도의 수크로오스이다. 또 다른 구현예에서, 안정화제는 10% ± 2% w/v 또는 약 10% w/v 농도의 수크로오스이다.

소정의 구현예에서, 제형은 점도 조절제를 필요로 하지 않는다. 즉, 제형에는 점도 조절제가 결여되어 있다. 소정의 구현예에서, 제형은 점도 조절제를 포함한다. 일 구현예에서, 제형은 점도 조절제를 포함하고, 점도 조절제는 아미노산 또는 염이다. 일 구현예에서, 점도 조절제는 L-프롤린이다. 소정의 구현예에서, 점도 조절제는 1% ± 0.2% 내지 5% ± 1% w/v의 농도이다. 일 구현예에서, 점도 조절제는 1.5% ± 0.3% 또는 약 1.5% 농도의 프롤린이다. 일 구현예에서, 점도 조절제는 3% ± 0.6%, 또는 약 3% 농도의 프롤린이다.

소정의 구현예에서, 25℃에서 액체 약학적 제형의 점도는 약 15 cPoise ± 10% 이하이다. 소정의 구현예에서, 25℃에서의 점도는 1.0 cPoise ± 10% 내지 20 cPoise ± 10%이다. 소정의 구현예에서, 액체 약학적 제형의 점도는 약 ≤ 20 cPoise이다. 소정의 구현예에서, 액체 약학적 제형의 점도는 약 ≤ 15 cPoise이다. 소정의 구현예에서, 액체 약학적 제형의 점도는 약 ≤ 10 cPoise이다. 소정의 구현예에서, 액체 약학적 제형의 점도는 약 ≤ 5 cPoise이다. 소정의 구현예에서, 액체 약학적 제형의 점도는 약 ≤ 2.5 cPoise이다. 소정의 구현예에서, 25℃에서의 점도는 약 2 cPoise ± 10%, 5 cPoise ± 10%, 6.0 cPoise ± 10%, 7.0 cPoise ± 10%, 7.1 cPoise ± 10%, 7.2 cPoise ± 10%, 7.9 cPoise ± 10%, 8.3 cPoise ± 10%, 9.0 cPoise ± 10%, 9.6 cPoise ± 10%, 10.0 cPoise ± 10%, 10.6 cPoise ± 10%, 11.4 cPoise ± 10%, 11.6 cPoise ± 10%, 11.8 cPoise ± 10%, 12.0 cPoise ± 10%,13.0 cPoise ± 10%, 14.0 cPoise ± 10%, 15.0 cPoise ± 10%, 또는 16 cPoise ± 10%이다. 소정의 구현예에서, 25℃에서의 점도는 약 2.2 cPoise이다.

일 양태에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공된다: (a) 5% ± 1% 내지 15% ± 3% w/v의 수크로오스, (b) 5 mM ± 1 mM 내지 20 mM ± 4 mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.01% ± 0.005% 내지 0.5% ± 0.25% w/v의 폴리소르베이트, 예를 들어 약 0.05% ± 0.025% 내지 약 0.2% ± 0.1% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 항-EBOV 항체 (pH 6.0 ± 0.3). 또 다른 양태에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공된다: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 항체 (pH 6.0 ± 0.3). 또 다른 양태에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공된다: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 5 mg/mL의 총 항체 (pH 6.0 ± 0.3).

일 양태에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공된다: (a) 5% ± 1% 내지 15% ± 3% w/v의 수크로오스, (b) 5 mM ± 1 mM 내지 20 mM ± 4 mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.01% ± 0.005% 내지 0.5% ± 0.25% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 항체 (pH 6.0 ± 0.3). 또 다른 양태에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공된다: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 항체 (pH 6.0 ± 0.3). 또 다른 양태에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공된다: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 10 mg/mL의 총 항체 (pH 6.0 ± 0.3).

항-EBOV 항체는 (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46으로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 가변 영역/경쇄 가변 영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)(HCDR1, HCDR2 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2 및 LCDR3)을 포함하는 적어도 하나의 항체를 포함한다. 일부 양태에서, 제형은 다음을 포함하고: (i), (ii), (iii), (i)+(ii), (i)+(iii), (ii)+(iii), 또는 (i)+(ii)+(iii), 제형에 존재하는 총 항-EBOV 항체는 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL이다. 일부 양태에서, 제형은 다음을 포함하고: (i), (ii), (iii), (i)+(ii), (i)+(iii), (ii)+(iii), 또는 (i)+(ii)+(iii), 제형에 존재하는 총 항-EBOV 항체는 100 mg/mL ± 15 mg/mL이다.

일부 구현예에서, 적어도 하나의 항-EBOV 항체는, HCVR/LCVR 조합이 서열번호 4-6-8/12-14-16 각각, 서열번호 22-24-26/30-32-34 각각, 및 서열번호 40-42-44/48-50-52 각각으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 경쇄 상보성 결정 영역(HCDR1-HCDR2-HCDR3/LCDR1-LCDR2-LCDR3)을 포함하도록 중쇄 가변 영역(HCVR) 및 경쇄 가변 영역(LCVR)을 포함한다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 2/10, 20/28, 및 38/46으로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 가변 영역(HCVR)/경쇄 가변 영역(LCVR) 아미노산 서열 쌍을 포함한다. 소정의 구현예에서, 항-EBOV 항체는 인간 IgG1, IgG2, IgG3, 및 IgG4 이소형으로 이루어진 군으로부터 선택된 Fc 영역을 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 인간 IgG1 이소형을 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 서열번호 17, 35, 및 53으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄; 및 서열번호 18, 36, 및 54로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일 구현예에서, 항체는 145 kDa ± 15 kDa, 예를 들어 144,804 Da, 145,905 Da, 또는 143,689 Da의 분자량을 갖는다.

소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공되며: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) EBOV에 특이적으로 결합하는 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 항체(pH 6.0 ± 0.3); 여기서, 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함한다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.

소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공되며: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) EBOV에 특이적으로 결합하는 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 항체(pH 6.0 ± 0.3); 여기서, 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함한다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 35의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 36의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.

소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공되며: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) EBOV에 특이적으로 결합하는 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 항체(pH 6.0 ± 0.3); 여기서, 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함한다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 53의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.

소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공되며: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) EBOV에 특이적으로 결합하는 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 항체(pH 6.0 ± 0.3); 여기서, 제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제2 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함한다. 일 구현예에서, 제1 항-EBOV 항체는 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하고; 제2 항-EBOV 항체는 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다.

소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공되며: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) EBOV에 특이적으로 결합하는 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 항체(pH 6.0 ± 0.3); 여기서, 제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제2 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함한다. 일 구현예에서, 제1 항-EBOV 항체는 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하고; 제2 항-EBOV 항체는 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다. 46.

소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공되며: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) EBOV에 특이적으로 결합하는 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 항체(pH 6.0 ± 0.3); 여기서, 제1 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제2 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함한다. 일 구현예에서, 제1 항-EBOV 항체는 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하고; 제2 항-EBOV 항체는 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다. 46.

소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공되며: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) EBOV에 특이적으로 결합하는 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 항체(pH 6.0 ± 0.3); 여기서, 제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제2 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제3 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함한다. 일 구현예에서, 제1 항-EBOV 항체는 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하고; 제2 항-EBOV 항체는 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하고; 제3 항-EBOV 항체는 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다. 46.

소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공되며: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) EBOV에 특이적으로 결합하는 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 항체(pH 6.0 ± 0.3); 여기서, 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함한다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다. 10. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 18.

소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공되며: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) EBOV에 특이적으로 결합하는 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 항체(pH 6.0 ± 0.3); 여기서, 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함한다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다. 28. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 35의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 36의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 36.

소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공되며: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) EBOV에 특이적으로 결합하는 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 항체(pH 6.0 ± 0.3); 여기서, 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함한다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 53의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.

소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공되며: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) EBOV에 특이적으로 결합하는 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 항체(pH 6.0 ± 0.3); 여기서, 제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제2 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함한다. 일 구현예에서, 제1 항-EBOV 항체는 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하고; 제2 항-EBOV 항체는 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다.

소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공되며: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) EBOV에 특이적으로 결합하는 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 항체(pH 6.0 ± 0.3); 여기서, 제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제2 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함한다. 일 구현예에서, 제1 항-EBOV 항체는 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하고; 제2 항-EBOV 항체는 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다.

소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공되며: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) EBOV에 특이적으로 결합하는 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 항체(pH 6.0 ± 0.3); 여기서, 제1 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제2 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함한다. 일 구현예에서, 제1 항-EBOV 항체는 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하고; 제2 항-EBOV 항체는 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다.

소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공되며: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) EBOV에 특이적으로 결합하는 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 항체(pH 6.0 ± 0.3); 여기서, 제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제2 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제3 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함한다. 일 구현예에서, 제1 항-EBOV 항체는 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하고; 제2 항-EBOV 항체는 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하고; 제3 항-EBOV 항체는 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다.

소정의 구현예에서, 전술한 양태 중 어느 하나의 제형은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 속성을 갖는다: (i) 제형은 본원에 기술된 바와 같이 60℃, 55℃, 50℃, 45℃, 40℃, 35℃, 30℃, 25℃, 5℃, -20℃, -30℃, 및 -80℃에서의 장기 보관에 대해 안정함; (ii) 제형은 본원에 기술된 바와 같이 교반 응력에 대해 안정함; (iii) 제형은 본원에 기술된 바와 같이 열 스트레스에 대해 안정함; (iv) 제형은 점도가 낮음(점도가 20 cPoise 미만, 바람직하게는 15 cPoise 미만임); (v) 제형은 본원에 기술된 바와 같은 제형 부형제 농도의 최대 ± 50%의 변동에도 안정함; (vi) 제형은 생리학적 조건과 등장성(iso-osmolar)임; (vii) 제형은 정맥 내 전달 장치 및 절차에 대해 안정적이고 이와 호환될 수 있음; 및 (viii) 제형은 유리 바이알 또는 사전 충전된 주사기에 장기간 보관하기에 안정함.

소정의 구현예에서, 전술한 양태 중 어느 하나의 제형은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 속성을 갖는다: (i) 제형은 10 cP 미만의 점도를 가짐; (ii) 제형은 5 cP 미만의 점도를 가짐; (iii) 제형은 약 2.5 미만의 점도를 가짐; (iv) 45℃에서 28일 후, 항체의 적어도 90%가 고유 종임; (v) 45℃에서 28일 후, 항체의 적어도 18%가 항체의 주요 전하 변이체임; (vi) 25℃에서 3개월 후, 항체의 적어도 96%가 고유 종임; (vii) 25℃에서 3개월 후 항체의 적어도 30%가 항체의 주요 전하 변이체임; (viii) 5℃에서 36개월 후, 항체의 적어도 96%의 고유 종임; (ix) 5℃에서 36개월 후, 항체의 적어도 34%가 항체의 주요 전하 변이체임; (x) 120분 동안 교반한 후 항체의 적어도 97%가 고유 종임; (xi) 120분 동안 교반 한 후 항체의 적어도 35%가 항체의 주요 전하 변이체임; (xii) 8회의 동결 해동 사이클 후 항체의 적어도 97%가 고유 종임; 및/또는 (xiii) 8회의 동결 해동 사이클 후 항체의 적어도 35%가 항체의 주요 전하 변이체임.

소정의 구현예에서, 전술한 양태 중 어느 하나의 제형 내의 항체는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 속성을 갖는다: (i) 항체는 -80℃에서 12개월 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 ADCC 활성에 비해 적어도 약 90%의 활성을 유지함; (ii) 항체는 -30℃에서 12개월 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 ADCC 활성에 비해 적어도 약 80% 또는 적어도 약 90%의 활성을 유지함; (iii) 항체는 -20℃에서 3개월 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 ADCC 활성에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함; (iv) 항체는 5℃에서 56일 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 ADCC 활성에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함; (v) 항체는 25℃/60% 상대 습도(RH)에서 28일 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 ADCC 활성에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함; (vi) 항체는 40℃/75%RH에서 28일 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 ADCC 활성에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함; (vii) 항체는 120분 동안 교반한 후 또는 8회의 동결/해동 사이클 이후, 각각의 교반 또는 동결/해동 이전의 동일한 항체의 ADCC 활성에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함.

소정의 구현예에서, 전술한 양태 중 어느 하나의 제형 내의 항체는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 속성을 갖는다: (i) 항체는 -80℃에서 12개월 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 슈도바이러스 중화(pseudovirus neutralization) 활성에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함; (ii) 항체는 -30℃에서 12개월 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 슈도바이러스 중화 활성에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함; (iii) 항체는 -20℃에서 3개월 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 슈도바이러스 중화 활성에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함; (iv) 항체는 5℃에서 56일 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 슈도바이러스 중화 활성에 비해 적어도 약 80% 또는 적어도 85% 또는 적어도 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함; (v) 항체는 25℃/60% 상대 습도(RH)에서 28일 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 슈도바이러스 중화 활성에 비해 적어도 약 80% 또는 적어도 약 85% 또는 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함; (vi) 항체는 40℃/75%RH에서 28일 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 슈도바이러스 중화 활성에 비해 적어도 약 80% 또는 적어도 약 85% 또는 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함; (vii) 항체는 120분 동안 교반한 후 또는 8회의 동결/해동 사이클 이후, 각각의 교반 또는 동결/해동 이전의 동일한 항체의 슈도바이러스 중화 활성에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함.

본 양태의 소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 제형이 제공된다: (a) EBOV에 특이적으로 결합하는 적어도 하나의 항체로서, (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46으로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 가변 영역/경쇄 가변영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 포함하고, 총 항체는 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL를 포함하는, 적어도 하나의 항체, (b) 10 mM ± 2 mM의 히스티딘 완충액 (pH 6.0 ± 0.3), (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트 80, 및 (d) 10% ± 2% w/v의 수크로오스. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 5℃에서 36개월 후, 항체의 적어도 96%는 고유 종이다. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 120분 동안 교반한 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종이다. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 8회의 동결 해동 사이클 후 항체의 적어도 97%는 고유 종이다. 일부 양태에서, 약학적 제형은 다음으로 이루어진다: pH 6.0 ± 0.3의 물 중 (a) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 항체, (b) 10 mM ± 2 mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트 80, 및 (d) 10% ± 2% w/v의 수크로오스.

본 양태의 소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 제형이 제공된다: (a) EBOV에 특이적으로 결합하는 적어도 2개의 항체로서, (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46으로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 가변 영역/경쇄 가변영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 포함하고, 총 항체는 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL를 포함하는, 적어도 2개의 항체, (b) 10 mM ± 2 mM의 히스티딘 완충액 (pH 6.0 ± 0.3), (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트 80, 및 (d) 10% ± 2% w/v의 수크로오스. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 5℃에서 12개월 후, 항체의 적어도 96%는 고유 종이다. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 120분 동안 교반한 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종이다. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 8회의 동결 해동 사이클 후 항체의 적어도 97%는 고유 종이다. 일부 양태에서, 약학적 제형은 다음으로 이루어진다: pH 6.0 ± 0.3의 물 중 (a) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 항체, (b) 10 mM ± 2 mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트 80, 및 (d) 10% ± 2% w/v의 수크로오스.

본 양태의 소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 제형이 제공된다: (a) EBOV에 특이적으로 결합하는 3개의 항체의 조합으로서, (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46의 중쇄 가변 영역/경쇄 가변영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 포함하고, 총 항체는 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL를 포함하는, 3개의 항체의 조합, (b) 10 mM ± 2 mM의 히스티딘 완충액 (pH 6.0 ± 0.3), (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트 80, 및 (d) 10% ± 2% w/v의 수크로오스. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 5℃에서 12개월 후, 항체의 적어도 96%는 고유 종이다. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 120분 동안 교반한 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종이다. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 8회의 동결 해동 사이클 후 항체의 적어도 97%는 고유 종이다. 일부 양태에서, 약학적 제형은 다음으로 이루어진다: pH 6.0 ± 0.3의 물 중 (a) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 항체, (b) 10 mM ± 2 mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트 80, 및 (d) 10% ± 2% w/v의 수크로오스.

본 양태의 소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 제형이 제공된다: (a) EBOV에 특이적으로 결합하는 적어도 하나의 항체로서, (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46으로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 가변 영역/경쇄 가변영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 포함하고, 총 항체는 100 mg/mL ± 15 mg/mL를 포함하는, 적어도 하나의 항체, (b) 10 mM ± 2 mM의 히스티딘 완충액 (pH 6.0 ± 0.3), (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트 80, 및 (d) 10% ± 2% w/v의 수크로오스. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 5℃에서 12개월 후, 항체의 적어도 96%는 고유 종이다. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 120분 동안 교반한 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종이다. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 8회의 동결 해동 사이클 후 항체의 적어도 97%는 고유 종이다. 일부 양태에서, 약학적 제형은 다음으로 이루어진다: pH 6.0 ± 0.3의 물 중 (a) 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 항체, (b) 10 mM ± 2 mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트 80, 및 (d) 10% ± 2% w/v의 수크로오스.

본 양태의 소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 제형이 제공된다: (a) EBOV에 특이적으로 결합하는 적어도 2개의 항체로서, (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46으로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 가변 영역/경쇄 가변영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 포함하고, 총 항체는 100 mg/mL ± 15 mg/mL를 포함하는, 적어도 2개의 항체, (b) 10 mM ± 2 mM의 히스티딘 완충액 (pH 6.0 ± 0.3), (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트 80, 및 (d) 10% ± 2% w/v의 수크로오스. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 5℃에서 12개월 후, 항체의 적어도 96%는 고유 종이다. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 120분 동안 교반한 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종이다. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 8회의 동결 해동 사이클 후 항체의 적어도 97%는 고유 종이다. 일부 양태에서, 약학적 제형은 다음으로 이루어진다: pH 6.0 ± 0.3의 물 중 (a) 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 항체, (b) 10 mM ± 2 mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트 80, 및 (d) 10% ± 2% w/v의 수크로오스.

본 양태의 소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 제형이 제공된다: (a) EBOV에 특이적으로 결합하는 3개의 항체의 조합으로서, (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46의 중쇄 가변 영역/경쇄 가변영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 포함하고, 총 항체는 100 mg/mL ± 15 mg/mL를 포함하는, 3개의 항체의 조합, (b) 10 mM ± 2 mM의 히스티딘 완충액 (pH 6.0 ± 0.3), (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트 80, 및 (d) 10% ± 2% w/v의 수크로오스. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 5℃에서 12개월 후, 항체의 적어도 96%는 고유 종이다. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 120분 동안 교반한 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종이다. 본 양태에 따른 일 구현예에서, 8회의 동결 해동 사이클 후 항체의 적어도 97%는 고유 종이다. 일부 양태에서, 약학적 제형은 다음으로 이루어진다: pH 6.0 ± 0.3의 물 중 (a) 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 항체, (b) 10 mM ± 2 mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트 80, 및 (d) 10% ± 2% w/v의 수크로오스.

일 구현예에서, 안정한 액체 제형은, EBOV에 특이적으로 결합하고 25℃에서 3 cP 미만의 점도를 갖는 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 항체를 포함한다. 일 구현예에서, 항체의 90% 이상은 146 kDa ± 5 kDa, 예를 들어 144,804 Da, 145,905 Da, 또는 143,689 Da의 분자량을 갖는다. 일 구현예에서, 약학적 제형은 25℃에서 5 cP 미만, 4 cP 미만, 또는 3 cP 미만의 점도를 갖는다. 일 구현예에서, 45℃에서 28일 후 항체의 적어도 90%는 고유 종이다. 일 구현예에서, 45℃에서 28일 후 항체의 적어도 18%는 항체의 주요 전하 변이체이다. 일 구현예에서, 25℃에서 3개월 일 후 항체의 적어도 96%는 고유 종이다. 일 구현예에서, 25℃에서 3개월 후 항체의 적어도 30%는 항체의 주요 전하 변이체이다. 일 구현예에서, 5℃에서 12개월 후 항체의 적어도 96%는 고유 종이다. 일 구현예에서, 5℃에서 12개월 후 항체의 적어도 34%는 항체의 주요 전하 변이체이다. 일 구현예에서, 120분 동안 교반한 후 항체의 적어도 97%는 고유 종이다. 일 구현예에서, 120분 동안 교반한 후 항체의 적어도 35%는 항체의 주요 전하 변이체이다. 일 구현예에서, 8회의 동결 해동 사이클 후 항체의 적어도 97%는 고유 종이다. 일 구현예에서, 8회의 동결 해동 사이클 후 항체의 적어도 35%는 항체의 주요 전하 변이체이다.

일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 항체를 포함하고 20℃에서 5 cP 미만의 점도를 갖는다. 일 구현예에서, 항체의 90% 이상은 145 kDa ± 2 kDa, 예를 들어 144,804 Da, 145,905 Da, 또는 143,689 Da의 분자량을 갖는다. 일 구현예에서, 약학적 제형은 20℃에서 6 cP 미만 또는 5 cP 미만의 점도를 갖는다. 일 구현예에서, 45℃에서 28일 후 항체의 적어도 90%는 고유 종이다. 일 구현예에서, 45℃에서 28일 후 항체의 적어도 18%는 항체의 주요 전하 변이체이다. 일 구현예에서, 25℃에서 3개월 일 후 항체의 적어도 96%는 고유 종이다. 일 구현예에서, 25℃에서 3개월 후 항체의 적어도 30%는 항체의 주요 전하 변이체이다. 일 구현예에서, 5℃에서 12개월 후 항체의 적어도 96%는 고유 종이다. 일 구현예에서, 5℃에서 12개월 후 항체의 적어도 34%는 항체의 주요 전하 변이체이다. 일 구현예에서, 120분 동안 교반한 후 항체의 적어도 97%는 고유 종이다. 일 구현예에서, 120분 동안 교반한 후 항체의 적어도 35%는 항체의 주요 전하 변이체이다. 일 구현예에서, 8회의 동결 해동 사이클 후 항체의 적어도 97%는 고유 종이다. 일 구현예에서, 8회의 동결 해동 사이클 후 항체의 적어도 35%는 항체의 주요 전하 변이체이다.

본 양태의 소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 제형이 제공된다: (a) EBOV에 특이적으로 결합하는 3개의 항체의 조합으로서, (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46의 중쇄 가변 영역/경쇄 가변영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 포함하고, 총 항체는 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL를 포함하는, 3개의 항체의 조합, (b) 10 mM ± 2 mM의 히스티딘 완충액 (pH 6.0 ± 0.3), (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트 80, 및 (d) 10% ± 2% w/v의 수크로오스. 이러한 특정 제형의 일 구현예에서, 점도는 3 cPoise 미만이다.

본 양태의 소정의 구현예에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 제형이 제공된다: (a) EBOV에 특이적으로 결합하는 3개의 항체의 조합으로서, (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46의 중쇄 가변 영역/경쇄 가변영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 포함하고, 총 항체는 100 mg/mL ± 15 mg/mL를 포함하는, 3개의 항체의 조합, (b) 10 mM ± 2 mM의 히스티딘 완충액 (pH 6.0 ± 0.3), (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트 80, 및 (d) 10% ± 2% w/v의 수크로오스. 이러한 특정 제형의 일 구현예에서, 점도는 5 cPoise 미만이다.

일 양태에서, 본 개시는 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형을 제공한다: (a) 5% ± 1% 내지 15% ± 3% w/v의 수크로오스, (b) 5 mM ± 1 mM 내지 20 mM ± 4 mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.01% ± 0.005% 내지 0.5% ± 0.25% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 최대 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 항-EBOV 항체 (pH 6.0 ± 0.3). 또 다른 양태에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공된다: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 항-EBOV 항체 (pH 6.0 ± 0.3). 본 양태에 따른 항-EBOV 항체는, EBOV에 특이적으로 결합하는 3개의 항체의 조합으로서, (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46의 중쇄 가변 영역/경쇄 가변 영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 포함하는 3개의 항체의 조합을 포함한다.

일 양태에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공된다: (a) 5% ± 1% 내지 15% ± 3% w/v의 수크로오스, (b) 5 mM ± 1 mM 내지 20 mM ± 4 mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.01% ± 0.005% 내지 0.5% ± 0.25% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 항-EBOV 항체 (pH 6.0 ± 0.3). 또 다른 양태에서, 다음을 포함하는 안정한 액체 약학적 제형이 제공된다: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 항체 (pH 6.0 ± 0.3). 본 양태에 따른 항-EBOV 항체는, EBOV에 특이적으로 결합하는 3개의 항체의 조합으로서, (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46의 중쇄 가변 영역/경쇄 가변 영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 포함하는 3개의 항체의 조합을 포함한다.

일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 150 mg/mL의 총 항-EBOV 항체를 포함한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 100 mg/mL의 총 항-EBOV 항체를 포함한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 50 mg/mL의 총 항-EBOV 항체를 포함한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 10 mM ± 2 mM의 히스티딘 완충액을 포함한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 10% 수크로오스를 포함한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 9% 수크로오스를 포함한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 8% 수크로오스를 포함한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 5% 수크로오스를 포함한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 0.1% 폴리소르베이트를 포함한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 0.2% 폴리소르베이트를 포함한다. 일 구현예에서, 폴리소르베이트는 폴리소르베이트 80 또는 폴리소르베이트 20이다.

일 구현예에서, 안정한 액체 제형은, 서열번호 2/10의 중쇄 가변 영역/경쇄 가변 영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 포함하는 33.3 mg/mL 항체, 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍을 포함하는 33.3 mg/mL 항체, 및 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍을 포함하는 33.3 mg/mL 항체를 10 mM L-히스티딘, 10% (w/v) 수크로오스, 및 0.1% (w/v) 폴리소르베이트 80이 담긴 pH 6.0의 수성 완충액에 포함한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 5℃에서 6개월 동안 보관한 후의 ADCC 생물검정에서, 5℃에서 6개월 동안 보관하기 전의 동일한 액체 제형에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 ADCC 효능을 유지한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 5℃에서 6개월 동안 보관한 후에, 5℃에서 6개월 동안 보관하기 전의 동일한 액체 제형에 비해 적어도 약 95%의 슈도바이러스 중화 활성을 유지한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 25℃/60% RH에서 6개월 동안 보관한 후의 ADCC 생물검정에서, 25℃/60% RH에서 6개월 동안 보관하기 전의 동일한 액체 제형에 비해 적어도 약 80% 또는 적어도 약 85%의 ADCC 효능을 유지한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 25℃/60% RH에서 6개월 동안 보관한 후에, 25℃/60% RH에서 6개월 동안 보관하기 전의 동일한 액체 제형에 비해 적어도 약 95%의 슈도바이러스 중화 활성을 유지한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 40℃/75% RH에서 6개월 동안 보관한 후에, 40℃/75% RH에서 6개월 동안 보관하기 전의 동일한 액체 제형에 비해 적어도 약 95%의 슈도바이러스 중화 활성을 유지한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 120분 동안 교반한 후의 ADCC 생물검정에서, 120분 동안 교반하기 전의 동일한 액체 제형에 비해 적어도 약 95%의 ADCC 효능을 유지한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 8회의 동결/해동 사이클 후의 ADCC 생물검정에서, 8회의 동결/해동 사이클 전의 동일한 액체 제형에 비해 적어도 약 85%의 ADCC 효능을 유지한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 120분 동안 교반한 후에, 120분 동안 교반하기 전의 동일한 액체 제형에 비해 적어도 약 95%의 슈도바이러스 중화 활성을 유지한다. 일 구현예에서, 안정한 액체 제형은 8회의 동결/해동 사이클 후에, 8회의 동결/해동 사이클 전의 동일한 액체 제형에 비해 적어도 약 95%의 슈도바이러스 중화 활성을 유지한다.

일 양태에서, 전술한 양태 중 어느 하나의 안정한 액체 약학적 제형은 용기에 제공된다. 일 구현예에서, 용기는 바이알이다. 일 구현예에서, 용기는 폴리카보네이트 바이알이다. 일 구현예에서, 용기는 유리 바이알이다. 일 구현예에서, 유리 바이알은 1형 투명 유리 바이알이다. 일 구현예에서, 유리 바이알은 플루오르화탄소-코팅된 부틸 고무 마개가 구비된 1형 붕규산염 유리 바이알이다. 일 구현예에서, 용기는 마이크로인퓨저(microinfuser)이다. 일 구현예에서, 용기는 주사기이다. 일 구현예에서, 주사기는 사전 충진식 주사기이다. 일 구현예에서, 주사기는 저-텅스텐 유리를 포함한다. 일 구현예에서, 주사기는 자가주사기를 포함한다. 일 구현예에서, 주사기는 플루오르화탄소-코팅된 플런저를 포함한다. 소정의 구현예에서, 주사기는 27-G 바늘, 플루오르화탄소-코팅된 부틸 고무 마개, 및 라텍스-무함유 비-세포독성 고무 팁 캡이 구비되고, 약 500 ppm 미만의 텅스텐을 함유하는 1 mL 또는 2.25 mL 용량의 긴 유리 주사기이다. 일 구현예에서, 주사기는 27-G 박벽 바늘(thin wall needle), FLUROTEC-코팅된 4023/50 고무 마개, 및 FM 27 고무 팁 캡이 구비된, 1 mL 용량의 긴 유리 주사기이다. 일 구현예에서, 주사기는 바늘이 끼워진 1 mL, 2 mL, 3 mL, 5 mL, 또는 10 mL 용량의 플라스틱 주사기이다.

일 양태에서, 전술한 양태 중 어느 하나의 안정한 약학적 조성물, 용기, 및 지침을 포함하는 키트가 제공된다. 일 구현예에서, 용기는 유리 바이알이다. 일 구현예에서, 주사기는 사전 충진식 주사기이다. 일 구현예에서, 용기는 자가주사기이다. 일 구현예에서, 주사기는 27-G 박벽 바늘, FLUROTEC-코팅된 4023/50 고무 마개, 및 FM 27 고무 팁 캡이 구비된, 1 mL 또는 2.25 mL 용량의 긴 유리 주사기이다. 일 구현예에서, 주사기는 바늘이 끼워진 1 mL, 2 mL, 3 mL, 5 mL, 또는 10 mL 용량의 플라스틱 주사기이다.

소정의 구현예에서, 본 개시는 안정한 액체 약학적 제형을 포함하는 미리 충진된 주사기를 제공하며, 상기 안정한 액체 약학적 제형은 다음을 포함하되: (i) EBOV에 특이적으로 결합하는 5 ± 0.75 mg/ml 내지 250 ± 37.5 mg/ml의 적어도 하나의 인간 항체; (ii) 5 mM ± 1 mM 내지 20 ml ± 4 mM 히스티딘 완충액; (iii) 0.05% ± 0.025% 내지 0.3% ± 0.15% (w/v) 폴리소르베이트 80; 및 (iv) 1% ± 0.2% 내지 10% ± 2% (w/v) 수크로오스 (pH 6.0 ± 0.3), 적어도 하나의 인간 항-EBOV 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 제1 항체, (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 제2 항체, 및 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 제3 항체를 포함한다. 일부 양태에서, 제형은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 속성을 갖는다: 45℃에서 28일 후, 항체의 적어도 90%는 고유 종임; 45℃에서 28일 후, 항체의 적어도 18%는 항체의 주요 전하 변이체임; 25℃에서 3개월 후, 항체의 적어도 96%는 고유 종임; 25℃에서 3개월 후, 항체의 적어도 96%는 고유 종임; 25℃에서 3개월 후, 항체의 적어도 30%는 항체의 주요 전하 변이체임; 5℃에서 12개월 후 항체의 적어도 96%는 고유 종임; 5℃에서 12개월 후 항체의 적어도 34%는 항체의 주요 전하 변이체임; 120분의 교반 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종임; 120분의 교반 후, 항체의 적어도 35%는 항체의 주요 전하 변이체임; 8회의 동결/해동 사이클 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종임; 8회의 동결/해동 사이클 후, 항체의 적어도 35%는 항체의 주요 전하 변이체임; 항체의 90% 초과는 145 kDa ± 2 kDa, 예를 들어 144,804 Da, 145,905 Da, 또는 143,689 Da의 분자량을 가짐; 및 약학적 제형은 20 cP 미만, 15 cP 미만, 10 cP 미만, 5 cP 미만, 또는 3 cP 미만의 점도를 가짐.

소정의 구현예에서, 본 개시는 안정한 액체 약학적 제형을 포함하는 유리 바이알을 제공하며, 상기 안정한 액체 약학적 제형은 다음을 포함하되: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10 mM ± 2 mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트 (pH 6.0 ± 0.3); 적어도 하나의 항-EBOV 항체는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다: (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 제1 항체, (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 제2 항체, 및 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 제3 항체. 일부 양태에서, 제형은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 속성을 갖는다: 제형은 유리 바이알에서의 보관 및 응력에 안정함; 제형은 IV 전달 장치에 대해 안정하고 IV 전달 장치에서 사용하기에 양립가능함; 제형은 당업계에 알려진 표준 희석제(예: 0.9% 염화나트륨 또는 5% 덱스트로스 또는 젖산 링거 용액)로 희석하는 것에 대해 화학적으로 및 물리적으로 안정함; 제형은 유리 또는 중합체 플라스틱(예: 염화폴리비닐, 프탈레이트, 폴리올레핀, 또는 폴리프로필렌)으로 만들어진 IV 백에 대해 안정함; 제형은 표준 주입 펌프(예: 연동 펌프, 유체 변위 펌프)와 양립 가능함; 45℃에서 28일 후, 항체의 적어도 90%는 고유 종임; 45℃에서 28일 후, 항체의 적어도 18%는 항체의 주요 전하 변이체임; 25℃에서 3개월 후, 항체의 적어도 96%는 고유 종임; 25℃에서 3개월 후, 항체의 적어도 30%는 항체의 주요 전하 변이체임; 5℃에서 12개월 후, 항체의 적어도 96%는 고유 종임; 5℃에서 12개월 후, 항체의 적어도 34%는 항체의 주요 전하 변이체임; 120분 교반한 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종임; 120분 교반한 후, 항체의 적어도 35%는 항체의 주요 전하 변이체임; 8회의 동결 해동 사이클 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종임; 8회의 동결 해동 사이클 후, 항체의 적어도 35%는 항체의 주요 전하 변이체임; 항체의 90% 초과는 145 kDa ± 2 kDa, 예를 들어 144,804 Da, 145,905 Da, 또는 143,689 Da의 분자량을 가짐; 및 약학적 제형은 20 cP 미만, 15 cP 미만, 10 cP 미만, 5 cP 미만, 또는 3 cP 미만의 점도를 가짐. 일부 양태에서, 제형은 약 2℃ 내지 약 8℃의 온도에서 배송하기에 안정하다. 일부 양태에서, 제형은 약 2℃ 내지 약 8℃에서 보관될 때 안정하다. 안정성 연구는 보관 조건으로부터의 잠재적 이탈을 뒷받침하기 위해 수행하였다. 일부 양태에서, 제형은 적어도 약 6개월 동안 실온에서 안정하다. 일부 양태에서, 제형은 교반 및 동결/해동 사이클에 대해 물리적 및 화학적으로 안정하다. 일부 양태에서, 제형 내의 항체는 최대 25℃ 또는 최대 30℃의 온도에 노출된 후, 또는 교반 또는 동결/해동 사이클 후, 생물학적 활성, 예를 들어 ADCC 활성 또는 슈도바이러스 중화 활성을 유지한다.

다른 구현예는 다음의 상세한 설명을 검토함으로써 명백해질 것이다.

도 1은 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P로부터의 RP-UPLC 크로마토그램의 오버레이를 보여준다.
도 2는 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P SE-UPLC 크로마토그램의 오버레이를 보여준다.

생물학적 제제와 같은 치료제는 일반적으로 저온 장기 보관용 치료제의 안정성을 제공하는 제형 내 개별 약물로서 제형화된다. 포장된 생물학적 제제는 주의해서 다뤄지며, 큰 분자에 대한 손상이나 응집을 최소화하기 위해 종종 사용 직전까지 동결 건조된 형태로 유지된다. 동결 건조된 제형은 통상적으로 액체 제형보다 더 안정하다. 또한, 포장된 생물학적 제제는 운송 및 보관 중에 냉동되거나, 그렇지 않으면 저온으로 유지된다.

에볼라 바이러스(EBOV) 감염증의 치료 또는 EBOV 노출에 대한 예방적 치료를 위한 항체를 포함하는 안정한 약학적 제형이 본원에 제공된다. 이들 제형은 안정성을 유지하면서 혹독한 수송 및 보관을 견디도록 제조된 안정한 액체 항체 제형이다. 치료제는 콩고 및 수단과 같이 에볼라가 발생하는 외진 지역에서의 사용하기에 용이한 방식으로 제조된다. 이와 같이, 제형은 동결 건조된 형태의 약물을 사용하기 전에 필요한 재구성 단계를 피함으로써 완제 의약품의 가능한 오염을 피하는 액체 형태이다. 액체 약학적 제형은 장거리로 수송될 때 및 제조 시설로부터 에볼라 노출이 발생하였고/하였거나 에볼라 환자가 있는 원격 현장 클리닉으로의 수송 중에 치료제가 노출될 수 있는 응력 조건, 예를 들어 온도 변화, 극한 온도, 운송 중 교반 등이 가해질 때에도 안정하다.

일부 양태에서, 안정한 액체 제형은 하나 이상의 항체를 포함하며, 예를 들어 상기 제형은 예를 들어 2개 또는 3개의 항-EBOV 항체를 포함하는 칵테일이다. 안정한 항체 칵테일을 제형화하는 것은 어렵다. IV 백에 담긴 단백질 치료제가 주변 온도 및 가시광에 노출되는 것은 단기적이므로, 이러한 경미한 조건은 일반적으로 제품을 분해시키지는 않는다. 그러나, 장기 보관하는 동안, 개별 단백질은 강화된 이끌림성 분자간 단백질-단백질 상호작용, 점도 증가, 및 손상된 구조적 완전성을 포함하는 약간의 분해 과정을 일반적으로 거친다. 공-제형을 제조하고, 수송하고, 보관하고, 취급하고, 환자에게 투여하는 중에 존재하는 응력 조건은 응집, 탈아미드화, 산화 등과 같은 중요한 제조물 책임이 되는 것에 영향을 미칠 수 있다. 또한, 공제형화 조건은 이종 응집체의 형성을 초래할 수 있다. Svitel 등의 문헌[BioProcess International, 2019]; Patel 등의 문헌[Journal of Pharmaceutical Sciences, 107: 3032-3046, 2018]; 및 Mueller 등의 문헌[Journal of Pharmacy and Pharmacology, 70: 666-674, 2018] 참조.

본 발명의 방법을 설명하기 전에, 방법과 실험 조건이 다양할 수 있으므로, 본 발명은 기술된 특정 방법 및 실험 조건에 제한되지 않는 것으로 이해해야 한다. 또한 본 개시의 범위는 첨부된 청구항에 의해서만 한정되므로 본원에서 사용된 용어는 단지 특정 구현예를 기술하기 위한 목적이며, 한정하는 것으로 의도되지 않음을 이해해야 한다.

달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속한 당해 기술분야의 통상의 기술을 가진 자에 의해 널리 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 본원에서 사용되는 용어 "약"은 인용된 특정 수치와 관련하여 사용될 때, 이러한 값이 인용된 값 또는 값의 범위와 1% 이내에서 다를 수 있음을 의미한다. 예를 들어 본 설명에 사용된 바와 같이, 표현 "약 100"은 99와 101을 포함하고 그 사이의 모든 값(예, 99.1, 99.2, 99.3, 99.4 등)을 포함한다. 본 개시에 기재된 방법 및 물질과 유사 또는 동등한 어떠한 방법 및 물질 또한 본 개시의 실시 또는 검사에 사용될 수 있으나, 바람직한 방법 및 물질을 지금부터 설명한다. 본 발명에 언급된 모든 문헌은 그 전체가 본 발명에 참조로 인용되어 있다.

본원에서 사용되는 바와 같이, “약학적 제형”이라는 표현은, 활성 성분 (예를 들어 인간 또는 비인간 동물에서 생물학적 효과를 발휘할 수 있는 소분자, 거대 분자, 화합물 등) 및 하나 이상의 비활성 성분의 조합을 의미하며, 여기서 비활성 성분은 활성 성분 또는 하나 이상의 추가 비활성 성분과 조합될 때 인간 또는 비인간 동물에 대한 치료적 투여에 적합하다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “제형(formulation)”은 구체적으로 달리 명시되지 않는 한 “약학적 제형”을 의미한다. 본 개시는 적어도 하나의 치료 폴리펩티드를 포함하는 약학적 제형을 제공한다. 본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 치료 폴리펩티드는 에볼라 바이러스(EBOV)에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이다. 보다 구체적으로, 본 개시는 다음을 포함하는 안정한 약학적 제형을 포함한다: (i) EBOV에 특이적으로 결합하는 하나 이상의 인간 항체; (ii) 히스티딘 완충액; (iii) 비이온성 계면활성제인 유기 공용매; 및 (iv) 탄수화물인 안정화제. 특정 일 구현예에서, 안정한 약학적 제형은 다음을 포함한다: (i) EBOV에 특이적으로 결합하는 3개의 인간 항체; (ii) 히스티딘 완충액; (iii) 비이온성 계면활성제인 유기 공용매; 및 (iv) 탄수화물인 안정화제. 본 개시에 포함된 특정 예시적인 성분 및 제형은 이하에서 상세히 기술된다.

EBOV에 특이적으로 결합하는 항체

본 개시의 약학적 제형은 EBOV에 특이적으로 결합하는 인간 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함할 수 있다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “EBOV”는 에볼라 바이러스를 의미한다. EBOV에 대한 항체는, 예를 들어 미국 특허/특허 공개 제10,501,526호, 제10,081,670호, 제9,771,414호, 제6,630,144호, 제6,875,433호, 제7,335,356호, 및 제8,513,391호, 및 WO 2016/123019, EP1539238, EP2350270, 및 EP8513391에 기술되어 있다.

본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "항체(antibody)"는 일반적으로 4개의 폴리펩티드 사슬, 즉 이황화 결합에 의해 상호 연결된 2개의 중쇄(H) 및 2개의 경쇄(L)를 포함하는 면역글로불린 분자뿐만 아니라 이의 다량체(예를 들어 IgM)를 지칭하도록 일반적으로 의도되지만; 중쇄로만 이루어진 (즉 경쇄가 결여됨) 면역글로불린 분자도 용어 "항체"의 정의 내에 포함된다. 각각의 중쇄는 중쇄 가변 영역(본원에서 HCVR 또는 V_H로 약칭됨) 및 중쇄 불변 영역을 포함한다. 중쇄 불변 영역은 3개의 도메인 CH1, CH2 및 CH3을 포함한다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변 영역(본원에서 LCVR 또는 V_L로 약칭됨) 및 경쇄 불변 영역을 포함한다. 경쇄 불변 영역은 하나의 도메인을 포함한다(CL1). V_H 영역 및 V_L 영역은, 더 보존적인 영역(프레임워크 영역(FR)으로 지칭됨)이 중간에 끼어 있는 초가변 영역(상보성 결정 영역(CDR)으로 지칭됨)으로 추가로 세분화될 수 있다. 각각의 V_H 및 V_L은 아미노 말단에서 카르복시 말단의 방향으로 다음 순서로 배열된 3개의 CDR과 4개의 FR을 포함한다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.

구체적으로 달리 언급되지 않는 한, 본원에서 사용되는 용어 "항체"는 완전한 항체 분자뿐만 아니라 이의 항원 결합 단편도 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 본원에서 사용되는 용어 항체의 "항원 결합 부분" 또는 "항원 결합 단편"(또는 간단히 “항체 부분” 또는 “항체 단편”)은 EBOV 또는 이의 에피토프에 특이적으로 결합하는 능력을 보유하는 항체의 하나 이상의 단편을 지칭한다.

본원에서 사용되는 "단리된 항체"는 상이한 항원 특이성을 갖는 다른 항체가 실질적으로 없는 항체를 지칭한다(예를 들어 EBOV에 특이적으로 결합하는 단리된 항체는 EBOV 이외의 항원에 특이적으로 결합하는 항체가 실질적으로 없음).

"특이적으로 결합하는(specifically binds)” 또는 이와 유사한 용어는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 항원과 생리학적 조건 하에서 비교적 안정한 복합체를 형성하는 것을 의미한다. 특이적 결합은 적어도 약 1x10^-8 M 이상의 해리 상수를 특징으로 할 수 있다. 2개의 분자가 특이적으로 상호 간에 결합하는지 여부를 결정하는 방법은 당업계에 잘 알려져 있고, 예를 들어, 평형 투석, 표면 플라스몬 공명 등을 포함한다. 본 개시의 맥락에서, EBOV에 결합하는 다중특이적(예: 이중특이적) 항체뿐만 아니라 하나 이상의 추가 항원은 EBOV에 “특이적으로 결합하는” 것으로 간주된다. 또한, 단리된 항체는 다른 세포 물질 또는 화학 물질을 실질적으로 갖지 않을 수 있다.

본 개시의 약학적 제형에 포함될 수 있는 예시적인 항-EBOV 항체는 특허 출원 공개 제US 2016/0215040호 및 WO 2016/123019호에 기술되어 있으며, 그 개시 내용은 그 전체가 참조로서 통합된다. 특히 관심을 가져야 할 것은, 독립적으로 또는 임의의 조합으로 안정한 약학적 제형으로 제형화되는, 상기 문헌에 기술된 3개의 항체 즉 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P이다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 4의 중쇄 상보성 결정 영역(HCDR) 1, 서열번호 6의 HCDR2, 및 서열번호 8의 HCDR3을 포함한다. 소정의 구현예에서, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 2의 HCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 12의 경쇄 상보성 결정 영역(LCDR) 1, 서열번호 14의 LCDR2, 및 서열번호 16의 LCDR3을 포함한다. 소정의 구현예에서, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 10의 LCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 2와 90%, 95%, 98%, 또는 99%의 서열 동일성을 갖는 HCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 10과 90%, 95%, 98%, 또는 99%의 서열 동일성을 갖는 LCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 5개 이하의 아미노산 치환을 갖는 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 2개 이하의 아미노산 치환을 갖는 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 22의 중쇄 상보성 결정 영역(HCDR) 1, 서열번호 24의 HCDR2, 및 서열번호 26의 HCDR3을 포함한다. 소정의 구현예에서, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 20의 HCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 30의 경쇄 상보성 결정 영역(LCDR) 1, 서열번호 32의 LCDR2, 및 서열번호 34의 LCDR3을 포함한다. 소정의 구현예에서, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 28의 LCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 20과 90%, 95%, 98%, 또는 99%의 서열 동일성을 갖는 HCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 28과 90%, 95%, 98%, 또는 99%의 서열 동일성을 갖는 LCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 5개 이하의 아미노산 치환을 갖는 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 2개 이하의 아미노산 치환을 갖는 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 40의 중쇄 상보성 결정 영역(HCDR) 1, 서열번호 42의 HCDR2, 및 서열번호 44의 HCDR3을 포함한다. 소정의 구현예에서, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 38의 HCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 48의 경쇄 상보성 결정 영역(LCDR) 1, 서열번호 50의 LCDR2, 및 서열번호 52의 LCDR3을 포함한다. 소정의 구현예에서, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 46의 LCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 38과 90%, 95%, 98%, 또는 99%의 서열 동일성을 갖는 HCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 46과 90%, 95%, 98%, 또는 99%의 서열 동일성을 갖는 LCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 5개 이하의 아미노산 치환을 갖는 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 2개 이하의 아미노산 치환을 갖는 서열번호 46의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 안정한 액체 약학적 제형은 전술한 바와 같은 항-EBOV 항체 또는 이의 항원 결합 단편 중 하나 이상을 포함한다.

서열 동일성은 당업계에 공지된 임의의 방법(예를 들어 GAP, BESTFIT, 및 BLAST)에 의해 측정될 수 있다.

본 개시는 또한 항-EBOV 항체를 포함하는 안정한 액체 제형을 포함하며, 여기서 항-EBOV 항체는 하나 이상의 아미노산 치환, 예를 들어 보존적 아미노산 치환을 갖는 본원에 개시된 HCVR, LCVR, 및/또는 CDR 아미노산 서열 중 어느 하나의 변이체를 포함한다. 예시적으로, 본 개시는 항-EBOV 항체를 포함하는 제형을 포함하며, 상기 항-EBOV 항체는 본원에 개시된 HCVR, LCVR, 및/또는 CDR 아미노산 서열에 비해, 예를 들어 10개 이하, 8개 이하, 6개 이하, 4개 이하 등의 아미노산 치환(예: 보존적 아미노산 치환)을 갖는 HCVR, LCVR, 및/또는 CDR 아미노산 서열을 갖는다.

소정의 구현예에서, 항-EBOV 항체는 인간 IgG1, IgG2, IgG3, 및 IgG4 이소형으로 이루어진 군으로부터 선택된 Fc 영역을 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 17의 중쇄 및 서열번호 18의 경쇄를 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 35의 중쇄 및 서열번호 36의 경쇄를 포함한다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 항-EBOV 또는 이의 항원 결합 단편은 서열번호 53의 중쇄 및 서열번호 54의 경쇄를 포함한다.

아미노산의 말단 절단은 항체의 생산 중에 발생할 수 있다는 것은 당업계에 잘 알려져 있다(예를 들어, Wang 등의 문헌[2007, J. Pharma. Sci. 96: 1-26] 참조). 따라서, 소정의 구현예에서, 항-EBOV 항체는 중쇄 및 경쇄를 포함하되, 중쇄는 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하고, 중쇄는 서열번호 35의 아미노산 서열을 포함하거나, 중쇄는 서열번호 53의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 양태에서, 중쇄는 서열번호 17의 아미노산 서열에 비해 C-말단 리신이 없다. 일부 양태에서, 중쇄는 서열번호 35의 아미노산 서열에 비해 C-말단 리신이 없다. 일부 양태에서, 중쇄 아미노는 서열번호 53의 아미노산 서열에 비해 C-말단 리신이 없다. 소정의 구현예에서, 본 개시의 제형은 C-말단 리신이 없는 항-EBOV 항체의 약 50%, 약 60%, 약 70%, 약 80%, 약 90%, 약 95%, 약 98% 또는 그 이상을 함유한다.

본 개시의 안정한 액체 약학적 제형 내에 함유된 항체, 항체 조합, 또는 이의 항원 결합 단편(들)의 양은 제형의 원하는 특이적 특성뿐만 아니라 제형이 사용되도록 의도된 특정 환경 및 목적에 따라 달라질 수 있다. 예를 들어, 하나 이상의 항-EBOV 항체를 포함하는 제형을 제조 현장에서 세계의 먼 지역, 예를 들어 콩고 또는 아프리카의 다른 지역으로 배송하는 것이 필요할 수 있으며, 이 때 제형은 수송 중에 교반에 노출되고/되거나 수송 중 또는 치료 시점에 고온에 노출될 수 있다.

소정의 구현예에서, 약학적 제형은 5 ± 0.75 mg/mL 내지 250 ± 37.5 mg/mL 총 항체; 10 ± 1.5 mg/mL 내지 240 ± 36 mg/mL 총 항체; 20 ± 3.0 mg/mL 내지 230 ± 34.5 mg/mL 총 항체; 25 ± 3.75 mg/mL 내지 240 ± 36 mg/mL 총 항체; 50 ± 7.5 mg/mL 내지 230 ± 34.5 mg/mL 총 항체; 60 ± 9 mg/mL 내지 240 ± 36 mg/mL 총 항체; 70 ± 10.5 mg/mL 내지 230 ± 34.5 mg/mL 총 항체; 80 ± 12 mg/mL 내지 220 ± 33 mg/mL 총 항체; 90 ± 13.5 mg/mL 내지 210 ± 31.5 mg/mL 총 항체; 100 ± 15 mg/mL 내지 200 ± 30 mg/mL 총 항체; 110 ± 16.5 mg/mL 내지 190 ± 28.5 mg/mL 총 항체; 120 ± 18 mg/mL 내지 180 ± 27 mg/mL 총 항체; 130 ± 19.5 mg/mL 내지 170 ± 25.5 mg/mL 총 항체; 140 ± 21 mg/mL 내지 160 ± 24 mg/mL 총 항체; 150 ± 22.5 mg/mL 총 항체; 또는 175 ± 26.25 mg/ml를 함유할 수 있는 안정한 액체 제형이다. 예를 들어, 본 개시의 제형은 EBOV에 특이적으로 결합하는 약 5 mg/mL; 약 10 mg/mL; 약 15 mg/mL; 약 20 mg/mL; 약 25 mg/mL; 약 30 mg/mL; 약 35 mg/mL; 약 40 mg/mL; 약 45 mg/mL; 약 50 mg/mL; 약 55 mg/mL; 약 60 mg/mL; 약 65 mg/mL; 약 70 mg/mL; 약 75 mg/mL; 약 80 mg/mL; 약 85 mg/mL; 약 90 mg/mL; 약 95 mg/mL; 약 100 mg/mL; 약 105 mg/mL; 약 110 mg/mL; 약 115 mg/mL; 약 120 mg/mL; 약 125 mg/mL; 약 130 mg/mL; 약 135 mg/mL; 약 140 mg/mL; 약 145 mg/mL; 약 150 mg/mL; 약 155 mg/mL; 약 160 mg/mL; 약 165 mg/mL; 약 170 mg/mL; 약 175 mg/mL; 약 180 mg/mL; 약 185 mg/mL; 약 190 mg/mL; 약 195 mg/mL; 약 200 mg/mL; 약 205 mg/mL; 약 210 mg/mL; 약 215 mg/mL; 약 220 mg/mL; 약 225 mg/mL; 약 230 mg/mL; 약 235 mg/mL; 약 240 mg/mL; 약 245 mg/mL; 또는 약 250 mg/mL의 총 항체 또는 이의 항원 결합 단편(들)을 포함할 수 있다.

부형제 및 pH

본 개시의 약학적 제형은 하나 이상의 부형제를 포함한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “부형제(excipient)”는 원하는 일관성, 점도, 또는 안정화 효과를 제공하기 위해 제형에 첨가되는 임의의 비-치료제를 의미한다.

소정의 구현예에서, 본원에 개시된 약학적 제형은, 예를 들어 와동, 궤도 진탕, 및 충격과 같은 거친 취급 또는 교반의 조건 하에서 EBOV 항체를 안정화시키는 유형 및 양으로 적어도 하나의 유기 공용매를 포함한다. 일부 구현예에서, “안정화(stabilize)”는 거친 취급 과정에 걸쳐 응집된 항체가 형성되는 것을 방지하는 것, 예를 들어 (몰 기준으로) 항체의 총량 중 0% 초과의 응집된 항체, 또는 1% 초과의 응집된 항체, 또는 3% 초과의 응집된 항체가 형성되는 것을 방지하는 것을 의미한다. 일부 구현예에서, 공용매는 0% 내지 3%의 응집된 항체가 형성되는 것을 방지하도록 제형을 안정화시킨다. 일부 구현예에서, 공용매는 0% 초과의 응집된 항체가 형성되는 것을 방지하도록 제형을 안정화시킨다. 일부 구현예에서, 거친 취급은 항체 및 유기 공용매를 함유하는 용액을 약 60분 또는 약 120분 동안 와동하는 것이다.

소정의 구현예에서, 유기 공용매는 알킬 폴리(에틸렌 옥사이드)와 같은 비이온성 계면활성제이다. 본 개시의 제형에 포함될 수 있는 특이적 비이온성 계면활성제는, 예를 들어 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 28, 폴리소르베이트 40, 폴리소르베이트 60, 폴리소르베이트 65, 폴리소르베이트 80, 폴리소르베이트 81, 및 폴리소르베이트 85와 같은 폴리소르베이트; 폴록사머 181, 폴록사머 188, 폴록사머 407과 같은 폴록사머; 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 포함한다. 폴리소르베이트 20은 TWEEN 20, 소르비탄 모노라우레이트, 및 폴리옥시에틸렌소르비탄 모노라우레이트로도 알려져 있다. 폴록사머 188은 PLURONIC F68로도 알려져 있다.

본 개시의 약학적 제형 내에 함유된 비-이온성 계면활성제의 양은 제형의 원하는 특정 특성뿐만 아니라 제형이 사용되도록 의도된 특정 환경 및 목적에 따라 달라질 수 있다. 소정의 구현예에서, 제형은 0.01% ± 0.005% 내지 0.5% ± 0.25%의 계면활성제를 함유할 수 있다. 예를 들어, 본 개시의 제형은 약 0.005%; 약 0.01%; 약 0.02%; 약 0.03%; 약 0.04%; 약 0.05%; 약 0.06%; 약 0.07%; 약 0.08%; 약 0.09%; 약 0.1%; 약 0.11%; 약 0.12%; 약 0.13%; 약 0.14%; 약 0.15%; 약 0.16%; 약 0.17%; 약 0.18%; 약 0.19%; 약 0.20%; 약 0.21%; 약 0.22%; 약 0.23%; 약 0.24%; 약 0.25%; 약 0.26%; 약 0.27%; 약 0.28%; 약 0.29%; 약 0.30%; 약 0.35%; 약 0.40%; 약 0.45%; 약 0.46%; 약 0.47%; 약 0.48%; 약 0.49%; 약 0.50%; 약 0.55%; 또는 약 0.575%의 폴리소르베이트 20 또는 폴리소르베이트 80을 포함할 수 있다.

본 개시의 약학적 제형은 열 응력 조건 하에서 EBOV 항체를 안정화시키는 유형 및 양으로 하나 이상의 안정화제를 포함할 수도 있다. 일부 구현예에서, “안정화”가 의미하는 것은 항체 및 열 안정화제를 함유하는 용액이 적어도 약 28일 동안 약 45℃로 유지될 때, 항체의 약 91% 초과를 고유 형태로 유지하는 것이다. 일부 구현예에서, “안정화”가 의미하는 것은 항체 및 열 안정화제를 함유하는 용액이 적어도 약 28일 동안 약 45℃로 유지될 때, 항체의 약 6% 미만이 응집되는 것이다. 본원에서 사용되는 바와 같이, “고유한(native)”은 크기 배제에 의한 항체의 주된 형태를 의미하는데, 이는 일반적으로 항체의 온전한 단량체이다. 용어 “고유한”은 항체의 응집되지 않고 분해되지 않은 형태를 또한 지칭한다.

일부 구현예에서, 열 안정화제는 폴리올이다. 일부 구현예에서, 열 안정화제는 아미노산이다. 일부 양태에서, 열 안정화제는 수크로오스와 같은 당이다. 제형 내에 함유된 안정화제의 양은 제형이 사용되는 특정 환경 및 의도된 목적에 따라 달라질 수 있다. 소정의 구현예에서, 제형은 약 1% 내지 약 15%의 당; 약 2% 내지 약 14%의 당; 약 3% 내지 약 13%의 당류; 약 4% 내지 약 12%의 당; 약 5% 내지 약 12%의 당; 약 6% 내지 약 11%의 당; 약 7% 내지 약 10%의 당; 약 8% 내지 약 11%의 당; 또는 약 9% 내지 약 11%의 당을 함유할 수 있다. 예를 들어, 본 개시의 약학적 제형은 4% ± 0.8%; 5% ± 1%; 6% ± 1.2%; 7% ± 1.4%; 8% ± 1.6%; 9% ± 1.8%; 10% ± 2%; 11% ± 2.2%; 12% ± 2.4%; 13% ± 2.6%; 또는 약 14% ± 2.8%의 당(예: 수크로오스)을 포함할 수 있다.

본 개시의 약학적 제형은 또한, 안정한 pH를 유지하고 EBOV 항체를 안정화시키는 데 도움을 주는 역할을 하는 완충액 또는 완충 시스템을 포함할 수 있다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “완충액(buffer)”은 안정한 pH를 유지하거나 용액의 pH 변화에 저항하는 약학적으로 허용 가능한 완충액을 나타낸다. 바람직한 구현예에서, 완충액은 히스티딘을 포함한다. 본 개시의 맥락에서, “히스티딘 완충액” 또는 “히스티딘을 포함하는 완충액”은 아미노산 히스티딘을 포함하는 완충액이다. 히스티딘 완충액의 예는 염화히스티딘, 아세트산히스티딘, 인산히스티딘, 및 황산히스티딘을 포함한다. 일 구현예에서, 히스티딘 완충액은 L-히스티딘 및 (예를 들어 일수화물로서의) L-히스티딘 염산염을 정의된 양 및 비율로 용해시킴으로써 제조된다. 일 구현예에서, 히스티딘 완충액은 희석된 염산으로 L-히스티딘(유리 염기, 고형분)을 적정함으로써 제조된다. 용어 “히스티딘”은 본 개시 전체에 걸쳐 “히스티딘 완충액”과 상호 교환적으로 사용된다. 일부 구현예에서, “안정화”가 의미하는 것은 항체 및 완충액을 함유하는 용액이 적어도 약 28일 동안 약 45℃로 유지될 때, 항체의 약 10% ± 0.5% 미만이 응집되는 것이다. 일부 구현예에서, “안정화”가 의미하는 것은 항체 및 완충액을 함유하는 용액이 적어도 약 3개월 동안 약 25℃로 유지될 때, 항체의 약 5% ± 0.5% 미만 또는 4% ± 0.5% 미만이 응집되는 것이다. 일부 구현예에서, “안정화”가 의미하는 것은 항체 및 완충액을 함유하는 용액이 적어도 약 36개월 동안 약 5℃로 유지될 때, 항체의 약 5% ± 0.5% 미만 또는 4% ± 0.5% 미만이 응집되는 것이다. 일부 구현예에서, “안정화”가 의미하는 것은 항체 및 완충액을 함유하는 용액이 적어도 약 28일 동안 약 45℃로 유지될 때, 크기 배제 크로마토그래피에 의해 결정했을 때 항체의 적어도 90% ± 0.5% 또는 적어도 94% ± 0.5%가 그의 고유 형태로 유지되는 것을 의미한다. 일부 구현예에서, “안정화”가 의미하는 것은 항체 및 완충액을 함유하는 용액이 적어도 약 3개월 동안 약 25℃로 유지될 때, 크기 배제 크로마토그래피에 의해 결정했을 때 항체의 적어도 95% ± 0.5% 또는 적어도 96% ± 0.5%가 그의 고유 형태로 유지되는 것을 의미한다. 일부 구현예에서, “안정화”가 의미하는 것은 항체 및 완충액을 함유하는 용액이 적어도 약 12개월 동안 약 5℃로 유지될 때, 크기 배제 크로마토그래피에 의해 결정했을 때 항체의 적어도 95% ± 0.5% 또는 적어도 96% ± 0.5%가 그의 고유 형태로 유지되는 것을 의미한다. “고유” 또는 “고유 형태”가 의미하는 것은, 응집되거나 분해되지 않은 항체 분획을 의미한다. 이는 일반적으로, 크기 배제 크로마토그래피 검정과 같이 항체 엔티티의 상대 크기를 측정하는 검정에 의해 결정된다. 응집되지 않고 분해되지 않은 항체는 고유 항체와 동일한 분획으로 용리되며, 일반적으로 주요 용리 분획이다. 응집된 항체는 고유 항체보다 큰 크기를 나타내는 분획으로 용리된다. 분해된 항체는 고유 항체보다 작은 크기를 나타내는 분획으로 용리된다.

일부 구현예에서, “안정화”가 의미하는 것은 항체 및 완충액을 함유하는 용액이 적어도 약 28일 동안 약 45℃로 유지될 때, 양이온 교환 크로마토그래피에 의해 결정했을 때 항체의 적어도 18% ± 0.5%가 그의 주요 전하 형태로 유지되는 것을 의미한다. 일부 구현예에서, “안정화”가 의미하는 것은 항체 및 완충액을 함유하는 용액이 적어도 약 3개월 동안 약 25℃로 유지될 때, 양이온 교환 크로마토그래피에 의해 결정했을 때 항체의 적어도 30% ± 0.5% 또는 적어도 35% ± 0.5%가 그의 주요 전하 형태로 유지되는 것을 의미한다. 일부 구현예에서, “안정화”가 의미하는 것은 항체 및 완충액을 함유하는 용액이 적어도 약 12개월 동안 약 5℃로 유지될 때, 양이온 교환 크로마토그래피에 의해 결정했을 때 항체의 적어도 30% ± 0.5% 또는 적어도 34% ± 0.5%가 그의 주요 전하 형태로 유지되는 것을 의미한다. “주요 전하(main charge)” 또는 “주요 전하 형태”가 의미하는 것은, 일반적으로 일측에 더 많은 “염기성” 피크가 위치하고 타측에 더 많은 “산성” 피크가 위치하는 주 피크에서 이온 교환 수지로부터 용리되는 항체의 분획이다.

본 개시의 약학적 제형은 약 5.2 내지 약 6.4의 pH를 가질 수 있다. 예를 들어, 본 개시의 제형은 약 5.5; 약 5.6; 약 5.7; 약 5.8; 약 5.9; 약 6.0; 약 6.1; 약 6.2; 약 6.3; 약 6.4; 또는 약 6.5의 pH를 가질 수 있다. 일부 구현예에서, pH는 6.0 ± 0.4; 6.0 ± 0.3; 6.0 ± 0.2; 6.0 ± 0.1; 약 6.0; 또는 6.0이다.

일부 구현예에서, 완충액 또는 완충액 시스템은 pH 5.5 내지 7.4의 범위와 완전히 또는 부분적으로 중첩되는 완충 범위를 갖는 적어도 하나의 완충액을 포함한다. 소정의 구현예에서, 완충액은 히스티딘 완충액을 포함한다. 소정의 구현예에서, 히스티딘 완충액은 5 mM ± 1 mM 내지 15 mM ± 3 mM; 6 mM ± 1.2 mM 내지 14 mM ± 2.8 mM; 7 mM ± 1.4 mM 내지 13 mM ± 2.6 mM; 8 mM ± 1.6 mM 내지 12 mM ± 2.4 mM; 9 mM ± 1.8 mM 내지 11 mM ± 2.2 mM; 10 mM ± 2 mM; 또는 약 10 mM의 농도로 존재한다. 소정의 구현예에서, 완충액 시스템은 6.0 ± 0.3의 pH에서 10 mM ± 2 mM의 히스티딘을 포함한다. 소정의 구현예에서, 히스티딘 완충액은 L-히스티딘 및 L-히스티딘 모노하이드로클로라이드 일수화물을 포함한다. 일 구현예에서, 히스티딘 완충액은 4.8 mM ± 0.96 mM 농도의 L-히스티딘을 포함한다. 일 구현예에서, 히스티딘 완충액은 5.2 mM ± 1.04 mM 농도의 L-히스티딘 모노하이드로클로라이드 모노하이드레이트를 포함한다. 일 구현예에서, 히스티딘 완충액은 4.8 mM ± 0.96 mM 농도의 L-히스티딘 및 5.2 mM ± 1.04 mM 농도의 L-히스티딘 모노하이드로클로라이드 모노하이드레이트를 포함한다.

본 개시의 약학적 제형은 고농도의 항-EBOV 항체 원료 의약품(예를 들어 일반적으로 ≥ 150 mg/ml의 항체)을 함유하는 제형의 감소된 점도를 유지시키거나 점도를 낮추는 역할을 하는 하나 이상의 부형제를 포함할 수도 있다. 소정의 구현예에서, 점도 조절제는 프롤린 또는 히스티딘과 같은 아미노산이다.

항체 정제 공정 동안, 적절한 부형제 농도, 항체 농도, pH 등을 달성하기 위해 하나의 완충액을 다른 완충액으로 교환하는 것이 바람직하거나 필요할 수 있다. 완충액 교환은, 예를 들어 반투과성 접선 유동 여과막을 사용하는 한외여과/투석여과(UF/DF)에 의해 달성될 수 있다. 그러나, 이러한 기술의 사용은 깁스-도난 효과(Gibbs-Donnan effect)를 유발할 가능성이 있다(Bolton 등의 문헌[2011, Biotechnol. Prog. 27(1):140-152] 참조). 단백질이 농축되는 동안 막의 생성물 측에 양전하가 축적되면, 막의 반대측으로 양 이온이 우선적으로 이동함으로써 전기적으로 균형을 이룬다. 이러한 현상의 잠재적인 결과는 특정 성분(예를 들어 히스티딘 등)의 최종 농도가 이들 성분의 의도된 목표 농도보다 낮을 수 있다는 것인데, 이는 UF/DF 단계 동안 양으로 하전된 항체 단백질에 대한 양으로 하전된 투석여과 완충액 부형제의 정전기 반발로 인한 것이다. 따라서, 본 개시는, 예를 들어 히스티딘의 농도가 깁스-도난 효과로 인해 본원에 인용된 양 또는 범위와 다른 제형을 포함한다.

부피 배제는 고도로 농축된 샘플의 거동을 기술한 것으로서, 용액의 총 부피의 상당 부분이 용질, 특히 단백질과 같은 큰 분자에 의해 흡수되어 이러한 공간으로부터 공용매를 배제하는 것이다. 그러면, 다른 용질이 용해될 수 있는 공용매의 총 부피가 감소하여, 한외여과막 전반에 불균등한 분배가 발생할 수 있다. 따라서, 본 개시는, 예를 들어 히스티딘의 농도가 부피 배제 효과로 인해 본원에 인용된 양 또는 범위와 다를 수 있는 제형을 포함한다.

본 개시의 제형을 제조하는 동안, 제형의 조성에 있어서 변화가 발생할 수 있다. 이러한 변화는 활성 성분의 농도, 부형제의 농도, 및/또는 제형의 pH를 포함할 수 있다. 이들 파라미터 중 어느 하나의 변화가 잠재적으로 완제 의약품의 안정성 또는 효능에 영향을 미칠 수 있기 때문에, 정의된 범위 내에서 조성의 변화가 항체의 안정성 또는 효능에 영향을 미치는지 여부를 평가하기 위해 제형 완건성 연구를 수행하였다. 따라서, 본 개시는, 항-EBOV 항체를 포함하는 제형으로서, 최대 50%의 부형제 농도 변화에도 안정하고 효능을 유지하는 제형을 포함한다. 예를 들어, 항-EBOV 항체 제형이 본원에 포함되며, 여기서 상기 제형의 안정성 및 효능은 항체, 수크로오스, 히스티딘 완충액, 및/또는 폴리소르베이트의 농도에 있어서 ±10%, ±20%, ±30%, ±40%, 또는 ±50% 변화에 의해 영향을 받지 않는다.

약제학적 제형의 안정성 및 점도

아래 실시예에 예시된 바와 같이, 본 발명자들은, 항체를 약 0.1% 폴리소르베이트 80, 약 10% 수크로오스, 및 약 10 mM 히스티딘 완충액과 함께 제형화함으로써 고농도의 (예를 들어, 약 50 mg/mL 또는 약 100 mg/mL의) 하나 이상의 항-EBOV 항체를 포함하는 안정한 액체 제형을 수득할 수 있다는 놀라운 발견을 하였다. 일부 양태에서, 안정한 액체 제형은 50 mg/mL 또는 100 mg/mL의 총 항체 농도의 3개의 항-EBOV 항체, 0.1% 폴리소르베이트 80, 10% 수크로오스, 및 약 10 nM의 히스티딘 완충액(약 6의 pH)을 포함한다. 이러한 제형은, 3개의 상이한 항체를 함유하는 것들조차도, 거칠게 취급하는 동안의 응력 및 -80℃ 내지 45℃ 범위의 온도, 예컨대 본원에 나타낸 -30℃, -20℃, 5℃, 25℃(본원에 도시됨)에서의 보관에 대해 안정하고 낮은 점도(5 cP 미만의 점도)를 갖는다.

본 개시의 약학적 제형은 일반적으로 높은 수준의 안정성을 나타낸다. 약학적 제형과 관련하여 본원에서 사용되는 용어 “안정한”은 약학적 제형을 정의된 조건 하에 보관한 후 약학적 제형 내의 항체가 허용 가능한 정도의 화학적 구조 또는 생물학적 기능을 유지함을 의미한다. 제형은, 정의된 시간 동안 제형을 보관한 후 제형 내에 함유된 항체가 그 화학적 구조 또는 생물학적 기능의 100%를 유지하지 않더라도 안정할 수 있다. 소정의 환경 하에서, 정의된 시간 동안 보관한 후 항체의 구조 또는 기능의 약 90%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98%, 또는 약 99%가 유지되는 것을 “안정한” 것으로서 간주할 수 있다.

안정성은 특히, 정의된 온도에서 정의된 시간 동안 보관한 후 제형에 남아 있는 고유 항체의 백분율을 결정함으로써 측정될 수 있다. 고유 항체의 백분율은 특히, 크기 배제 크로마토그래피(예를 들어 크기 배제 초고성능 액체 크로마토그래피[SE-UPLC])에 의해 결정될 수 있어서, 고유(native)는 비응집 및 비분해를 의미한다. 본원에서 사용되는 바와 같이 “허용 가능한 정도의 안정성”이란 문구는, 항체의 고유 형태의 적어도 90%가 주어진 온도에서 정의된 시간 동안 보관한 후 제형에서 검출될 수 있음을 의미한다. 소정의 구현예에서, 항체의 고유 형태의 적어도 약 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100%가 정의된 온도에서 정의된 시간 동안 보관한 후 제형에서 검출될 수 있다. 안정성을 측정하기 전의 정의된 시간은 적어도 14일, 적어도 28일, 적어도 1개월, 적어도 2개월, 적어도 3개월, 적어도 4개월, 적어도 5개월, 적어도 6개월, 적어도 7개월, 적어도 8개월, 적어도 9개월, 적어도 10개월, 적어도 11개월, 적어도 12개월, 적어도 18개월, 적어도 24개월, 또는 그 이상일 수 있다. 안정성을 평가할 때 약학적 제형이 보관될 수 있는 정의된 온도는 약 -80℃ 내지 약 60℃의 임의의 온도, 예를 들어, 약 -80℃, 약 -30℃, 약 -20℃, 약 0℃, 약 4℃~8℃, 약 5℃, 약 25℃, 약 35℃, 약 37℃, 약 40℃, 또는 약 45℃에서 보관하는 것일 수 있다. 예를 들어, 40℃/75% 습도(RH)에서 28일 동안 보관한 후, SE-UPLC에 의해 고유 항체의 약 95%, 96%, 97%, 또는 98% 초과가 검출되는 경우, 약학적 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다. 5℃에서 12개월 동안 보관한 후, SE-UPLC에 의해 고유 항체의 약 95%, 96%, 97%, 또는 98% 초과가 검출되는 경우, 약학적 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다. 25℃에서 3개월 동안 보관한 후, SE-UPLC에 의해 고유 항체의 약 95%, 96%, 97%, 또는 98% 초과가 검출되는 경우에도, 약학적 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다. 45℃에서 28일 동안 보관한 후, SE-UPLC에 의해 고유 항체의 약 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 또는 96% 초과가 검출되는 경우에도, 약학적 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다. -20℃에서 12개월 동안 보관한 후, SE-UPLC에 의해 고유 항체의 약 96%, 97%, 또는 98% 초과가 검출되는 경우에도, 약학적 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다. -30℃에서 12개월 동안 보관한 후, SE-UPLC에 의해 고유 항체의 약 96%, 97%, 또는 98% 초과가 검출되는 경우에도, 약학적 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다. -80℃에서 12개월 동안 보관한 후, SE-UPLC에 의해 고유 항체의 약 96%, 97%, 또는 98% 초과가 검출되는 경우에도, 약학적 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다.

안정성은 특히, 정의된 온도에서 정의된 시간 동안 보관한 후 제형 내에서 응집체를 형성되는 항체의 백분율을 결정함으로써 측정될 수 있으며, 여기서 안정성은 형성되는 응집체의 백분율에 반비례한다. 응집된 항체의 백분율은 특히, 크기 배제 크로마토그래피(예를 들어 크기 배제 초고성능 액체 크로마토그래피[SE-UPLC])에 의해 결정될 수 있다. 본원에서 사용되는 바와 같이 “허용 가능한 정도의 안정성”이란 문구는, 주어진 온도에서 정의된 시간 동안 보관한 후 항체의 최대 5%가 응집된 형태(고분자량 - HMW - 형태로도 지칭됨)로 제형에서 검출됨을 의미한다. 소정의 구현예에서, 허용 가능한 정도의 안정성은, 주어진 온도에서 정의된 시간 동안 보관한 후 항체의 최대 약 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 또는 0.1%가 응집체로 제형에서 검출될 수 있음을 의미한다. 안정성을 측정하기 전의 정의된 시간은 적어도 2주, 적어도 28일, 적어도 1개월, 적어도 2개월, 적어도 3개월, 적어도 4개월, 적어도 5개월, 적어도 6개월, 적어도 7개월, 적어도 8개월, 적어도 9개월, 적어도 10개월, 적어도 11개월, 적어도 12개월, 적어도 18개월, 적어도 24개월, 또는 그 이상일 수 있다. 안정성을 평가할 때 약학적 제형이 보관될 수 있는 온도는 약 -80℃ 내지 약 45℃의 임의의 온도, 예를 들어, 약 -80℃, 약 -30℃, 약 -20℃, 약 0℃, 약 4℃~8℃, 약 5℃, 약 25℃, 약 35℃, 약 37℃, 약 40℃, 또는 약 45℃에서 보관하는 것일 수 있다. 예를 들어, 5℃에서 12개월 동안 보관한 후, 항체의 약 2%, 1%, 0.5%, 또는 0.1% 미만이 응집된 형태로 검출되는 경우, 약학적 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다. 25℃에서 3개월 동안 보관한 후, 항체의 약 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 또는 0.1% 미만이 응집된 형태로 검출되는 경우에도 약학적 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다. 40℃/75% RH에서 28일 동안 보관한 후, 항체의 약 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 또는 0.1% 미만이 응집된 형태로 검출되는 경우에도 약학적 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다. 45℃에서 28일 동안 보관한 후, 항체의 약 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 또는 0.5% 미만이 응집된 형태로 검출되는 경우에도 약학적 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다. -20℃, -30℃, 또는 -80℃에서 3개월 동안 보관한 후, 항체의 약 3%, 2%, 1%, 0.5%, 또는 0.1% 미만이 응집된 형태로 검출되는 경우에도 약학적 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다.

안정성은 특히, 이온 교환 동안 항체의 주요 분획(“주요 전하 형태”)보다 더 산성인 분획(“산성 형태”)으로 이동하는 항체의 백분율을 결정함으로써 측정될 수 있으며, 여기서 안정성은 항체의 산성 형태 분획에 반비례한다. 이론에 구속되고자 하는 것은 아니지만, 항체의 탈아미드화는 항체가 음으로 더 많이 하전되게 하여, 탈아미드화되지 않은 항체에 비해 더 산성이 되게 할 수 있다(예를 들어 Robinson, N.의 문헌[Protein Deamidation, PNAS, April 16, 2002, 99(8):5283-5288] 참조). “산성화된” 항체의 백분율은 특히, 이온 교환 크로마토그래피(예를 들어 양이온 교환 초고성능 액체 크로마토그래피[CEX-UPLC])에 의해 결정될 수 있다. 본원에서 사용되는 바와 같이 “허용 가능한 정도의 안정성”이란 문구는, 정의된 온도에서 정의된 시간 동안 보관한 후 항체의 최대 45%가 더 산성인 형태로 제형에서 검출될 수 있음을 의미한다. 소정의 구현예에서, 허용 가능한 정도의 안정성은, 주어진 온도에서 정의된 시간 동안 보관한 후 항체의 최대 약 40%, 35%, 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 또는 0.1%가 산성인 형태로 제형에서 검출될 수 있음을 의미한다. 일 구현예에서, 허용 가능한 정도의 안정성은, 주어진 온도에서 정의된 시간 동안 보관한 후 항체의 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 또는 0.1% 미만이 산성인 형태로 제형에서 검출될 수 있음을 의미한다. 안정성을 측정하기 전의 정의된 시간은 적어도 2주, 적어도 28일, 적어도 1개월, 적어도 2개월, 적어도 3개월, 적어도 4개월, 적어도 5개월, 적어도 6개월, 적어도 7개월, 적어도 8개월, 적어도 9개월, 적어도 10개월, 적어도 11개월, 적어도 12개월, 적어도 18개월, 적어도 24개월, 또는 그 이상일 수 있다. 안정성을 평가할 때 약학적 제형이 보관될 수 있는 온도는 약 -80℃ 내지 약 45℃의 임의의 온도, 예를 들어, 약 -80℃, 약 -30℃, 약 -20℃, 약 0℃, 약 4℃~8℃, 약 5℃, 약 25℃, 또는 약 45℃에서 보관하는 것일 수 있다. 예를 들어, -80℃, -30℃, 또는 -20℃에서 3개월 동안 보관한 후, 항체의 약 30%, 29%, 28%, 27%, 26%, 25%, 24%, 23%, 22%, 21%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 또는 0.1% 미만이 더 산성 형태인 경우, 약학적 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다. 5℃에서 12개월 동안 보관한 후, 항체의 약 32%, 31%, 30%, 29%, 28%, 27%, 26%, 25%, 24%, 23%, 22%, 21%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 또는 0.1% 미만이 더 산성 형태인 경우에도 약학적 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다. 25℃에서 3개월 동안 보관한 후, 항체의 약 43%, 42%, 41%, 40%, 39%, 38%, 37%, 36%, 35%, 34%, 33%, 32%, 31%, 30%, 29%, 28%, 27%, 26%, 25%, 24%, 23%, 22%, 21%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 또는 0.1% 미만이 더 산성 형태인 경우에도 약학적 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다. 45℃에서 28일 동안 보관한 후, 항체의 약 49%, 48%, 47%, 46%, 45%, 44%, 43%, 42%, 41%, 40%, 39%, 38%, 37%, 36%, 35%, 34%, 33%, 32%, 31%, 30%, 29%, 28%, 27%, 26%, 25%, 24%, 23%, 22%, 21%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 또는 0.1% 미만이 더 산성 형태로 검출될 수 있는 경우에도 약학적 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다.

예를 들어 열 안정성을 결정하기 위한 시차주사 열량측정(DSC), 기계적 안정성을 결정하기 위한 조절된 교반, 및 용액 혼탁도를 결정하기 위한 약 350 nm 또는 약 405 nm에서의 흡광도와 같은 다른 방법이 본 개시의 제형의 안정성을 평가하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 약 5℃ 내지 약 25℃에서 6개월 이상 보관한 후, 제형의 OD₄₀₅의 변화가 0시점의 제형의 OD₄₀₅에 비해 약 0.05 미만(예를 들어 0.04, 0.03, 0.02, 0.01 또는 그 이하)인 경우, 본 개시의 제형은 안정적인 것으로 간주될 수 있다.

항체의 생물학적 활성 또는 표적에 대한 결합 친화도를 측정하는 것이 안정성을 평가하는 데 사용될 수도 있다. 예를 들어 5℃, 25℃, 45℃ 등에서 정의된 기간 (예: 1 내지 36개월) 동안 보관한 후, 제형 내에 함유된 항-EBOV 항체가 상기 보관 이전의 항체의 결합 친화도의 적어도 90%, 95% 또는 그 이상인 친화도로 EBOV에 결합하는 경우, 본 개시의 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다. 결합 친화도는, 예를 들어 ELISA 또는 표면 플라스몬 공명에 의해 결정될 수 있다. 생물학적 활성은, 예를 들어 EBOV에 감염된 세포를 항-EBOV 항체를 포함하는 제형과 접촉시키는 것과 같은 EBOV 활성 검정에 의해 결정될 수 있다. 이러한 세포에 대한 항체의 결합은, 예를 들어 FACS 분석을 통해 직접적으로 측정될 수 있다. 대안적으로, 항체의 활성은 시험관 내 또는 생체 내에서 바이러스 부하의 감소에 의해, 또는 EBOV에 감염된 포유동물의 생존률 증가에 의해 결정될 수 있다.

추가로, 항체 의존성 세포 세포독성 검정(ADCC 분석)에서 항체의 상대 효능을 측정하는 것이 안정성을 평가하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어 -80℃, -30℃, -20℃, 5℃, 25℃, 40℃, 45℃ 등에서 정의된 기간 (예: 1 내지 36개월) 동안 보관한 후, 제형 내에 함유된 항-EBOV 항체가 상기 보관 이전의 항체와 비교해 90%, 95% 또는 그 이상의 상대 ADCC 효능을 유지하는 경우, 본 개시의 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다.

유사하게, 슈도바이러스 중화 검정에서 항체의 상대 효능을 측정하는 것이 안정성을 평가하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어 -80℃, -30℃, -20℃, 5℃, 25℃, 40℃, 45℃ 등에서 정의된 기간 (예: 1 내지 36개월) 동안 보관한 후, 제형 내에 함유된 항-EBOV 항체가 상기 보관 이전의 항체와 비교해 90%, 95% 또는 그 이상의 상대 슈도바이러스 중화를 유지하는 경우, 본 개시의 제형은 안정한 것으로 간주될 수 있다.

제형에서 항체의 안정성을 평가하기 위한 추가 방법이 아래에 제시된 실시예에 나타나 있다.

본 개시의 액체 약학적 제형은, 소정의 구현예에서, 낮은 수준 내지 중간 수준의 점도를 나타낼 수 있다. 본원에서 사용되는 바와 같이, “점도(viscosity)”는 “동적 점도(kinematic viscosity)” 또는 “절대 점도(absolute viscosity)”일 수 있다. “동적 점도”는 중력의 영향을 받는 유체의 저항 흐름의 척도이다. 동일한 부피의 2개의 유체가 동일한 모세관 점도계에 배치되고 중력에 의해 흐를 수 있게 하면, 점성 유체는 점성이 더 낮은 유체보다 모세관을 통해 흐르는 데 더 오래 걸린다. 예를 들어, 하나의 유체가 완전히 흐르는 데 200초가 소요되고 다른 유체의 경우 400초가 소요되는 경우, 동적 점도 스케일 상에서 두 번째 유체는 첫 번째 유체보다 점성이 2배이다. 때때로 동점도 또는 단순 점도로 불리는 "절대 점도"는 동적 점도와 유체 밀도를 곱한 것이다(절대 점도 = 동적 점도 x 밀도). 동적 점도의 크기는 L²/T이며, 여기서 L은 길이이고 T는 시간이다. 일반적으로, 동적 점도는 센티스토크(cSt)로 표현된다. 동적 점도의 SI 단위는 mm²/s이고, 이는 1 cSt이다. 절대 점도는 센티푸아즈(cP) 단위로 표현된다. 절대 점도의 SI 단위는 밀리파스칼-초(mPa-s)이고, 여기서 1 cP = 1 mPa-s이다.

본원에서 사용되는 바와 같이, 본 개시의 유체 제형과 관련하여 낮은 수준의 점도는 약 20 cPoise(cP) 미만의 절대 점도를 나타낼 것이다. 예를 들어, 표준 점도 측정 기술을 사용하여 측정했을 때, 제형이 약 20 cP, 약 19 cP, 약 18 cP, 약 15 cP, 약 12 cP, 약 10 cP, 약 9 cP, 약 8 cP 또는 그 이하의 절대 점도를 나타내는 경우, 본원에 개시된 유체 제형은 “낮은 점도”를 갖는 것으로 간주될 것이다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 본 개시의 유체 제형과 관련하여 중간 수준의 점도는 약 35 cP 내지 약 20 cP의 절대 점도를 나타낼 것이다. 예를 들어, 표준 점도 측정 기술을 사용하여 측정했을 때, 제형이 약 34 cP, 약 33 cP, 약 32 cP, 약 31 cP, 약 30 cP, 약 29 cP, 약 28 cP, 약 27 cP, 약 26 cP, 약 25 cP, 약 24 cP, 약 23 cP, 약 22 cP, 약 21 cP, 약 20 cP, 약 19 cP, 18 cP, 약 17 cP, 약 16 cP, 또는 약 15 cP의 절대 점도를 나타내는 경우, 본원에 개시된 유체 제형은 “중간 점도”를 갖는 것으로 간주될 것이다. 본원에서 제공된 제형은 낮은 점도, 예를 들어 약 2cP의 점도를 가질 수 있다.

예시적인 제형

본 개시의 일 양태에 따르면, 약학적 제형은 안정하고, 점도가 낮으며, 일반적으로 생리학적으로 등장성인 액체 제형으로서, 다음을 포함한다: (i) EBOV에 특이적으로 결합하는 최대 250 mg/mL ± 45 mg/mL 농도의 인간 항체(예: H1H17203P, H1H17139P, 및/또는 H1H17161P); (ii) 충분한 완충을 제공하는 약 pH 6 ± 0.3의 히스티딘 완충액 시스템; (iii) 항체의 구조적 완전성을 보호하는 유기 공용매; 및 (iv) 당인 안정화제.

일 구현예에 따르면, 안정한 액체 약학적 제형은 pH 6.0 ± 0.3이고, 다음을 포함하며: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 항-EBOV 항체, 여기서 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDRL(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 4의 HCDR1, 서열번호 6의 HCDR2, 서열번호 8의 HCDR3, 서열번호 12의 LCDR1, 서열번호 14의 LCDR2, 및 서열번호 16의 LCDR3을 포함한다.

일 구현예에 따르면, 안정한 액체 약학적 제형은 pH 6.0 ± 0.3이고, 다음을 포함하며: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 항-EBOV 항체, 여기서 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDRL(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 22의 HCDR1, 서열번호 24의 HCDR2, 서열번호 26의 HCDR3, 서열번호 30의 LCDR1, 서열번호 32의 LCDR2, 및 서열번호 34의 LCDR3을 포함한다.

일 구현예에 따르면, 안정한 액체 약학적 제형은 pH 6.0 ± 0.3이고, 다음을 포함하며: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 항-EBOV 항체, 여기서 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDRL(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 40의 HCDR1, 서열번호 42의 HCDR2, 서열번호 44의 HCDR3, 서열번호 48의 LCDR1, 서열번호 50의 LCDR2, 및 서열번호 52의 LCDR3을 포함한다.

일 구현예에 따르면, 안정한 액체 약학적 제형은 pH 6.0 ± 0.3이고, 다음을 포함하며: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항-EBOV 항체, 여기서 제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이고, 제2 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이다. 일 구현예에서, 제1 항-EBOV 항체는 서열번호 4의 HCDR1, 서열번호 6의 HCDR2, 서열번호 8의 HCDR3, 서열번호 12의 LCDR1, 서열번호 14의 LCDR2, 및 서열번호 16의 LCDR3을 포함하고; 제2 항-EBOV 항체는 서열번호 22의 HCDR1, 서열번호 24의 HCDR2, 서열번호 26의 HCDR3, 서열번호 30의 LCDR1, 서열번호 32의 LCDR2, 및 서열번호 34의 LCDR3을 포함한다.

일 구현예에 따르면, 안정한 액체 약학적 제형은 pH 6.0 ± 0.3이고, 다음을 포함하며: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항-EBOV 항체, 여기서 제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이고, 제2 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이다. 일 구현예에서, 제1 항-EBOV 항체는 서열번호 4의 HCDR1, 서열번호 6의 HCDR2, 서열번호 8의 HCDR3, 서열번호 12의 LCDR1, 서열번호 14의 LCDR2, 및 서열번호 16의 LCDR3을 포함하고; 제2 항-EBOV 항체는 서열번호 40의 HCDR1, 서열번호 42의 HCDR2, 서열번호 44의 HCDR3, 서열번호 48의 LCDR1, 서열번호 50의 LCDR2, 및 서열번호 52의 LCDR3을 포함한다.

일 구현예에 따르면, 안정한 액체 약학적 제형은 pH 6.0 ± 0.3이고, 다음을 포함하며: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항-EBOV 항체, 여기서 제1 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이고, 제2 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이다. 일 구현예에서, 제1 항-EBOV 항체는 서열번호 22의 HCDR1, 서열번호 24의 HCDR2, 서열번호 26의 HCDR3, 서열번호 30의 LCDR1, 서열번호 32의 LCDR2, 및 서열번호 34의 LCDR3을 포함하고; 제2 항-EBOV 항체는 서열번호 40의 HCDR1, 서열번호 42의 HCDR2, 서열번호 44의 HCDR3, 서열번호 48의 LCDR1, 서열번호 50의 LCDR2, 및 서열번호 52의 LCDR3을 포함한다.

일 구현예에 따르면, 안정한 액체 약학적 제형은 pH 6.0 ± 0.3이고, 다음을 포함하며: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항-EBOV 항체, 여기서 제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이고, 제2 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이며, 제3 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이다. 일 구현예에서, 제1 항-EBOV 항체는 서열번호 4의 HCDR1, 서열번호 6의 HCDR2, 서열번호 8의 HCDR3, 서열번호 12의 LCDR1, 서열번호 14의 LCDR2, 및 서열번호 16의 LCDR3을 포함하고; 제2 항-EBOV 항체는 서열번호 22의 HCDR1, 서열번호 24의 HCDR2, 서열번호 26의 HCDR3, 서열번호 30의 LCDR1, 서열번호 32의 LCDR2, 및 서열번호 34의 LCDR3을 포함하며; 제3 항-EBOV 항체는 서열번호 40의 HCDR1, 서열번호 42의 HCDR2, 서열번호 44의 HCDR3, 서열번호 48의 LCDR1, 서열번호 50의 LCDR2, 및 서열번호 52의 LCDR3을 포함한다.

일 구현예에 따르면, 안정한 액체 약학적 제형은 pH 6.0 ± 0.3이고, 다음을 포함하며: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 항-EBOV 항체, 여기서 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDRL(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 4의 HCDR1, 서열번호 6의 HCDR2, 서열번호 8의 HCDR3, 서열번호 12의 LCDR1, 서열번호 14의 LCDR2, 및 서열번호 16의 LCDR3을 포함한다.

일 구현예에 따르면, 안정한 액체 약학적 제형은 pH 6.0 ± 0.3이고, 다음을 포함하며: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 항-EBOV 항체, 여기서 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDRL(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 22의 HCDR1, 서열번호 24의 HCDR2, 서열번호 26의 HCDR3, 서열번호 30의 LCDR1, 서열번호 32의 LCDR2, 및 서열번호 34의 LCDR3을 포함한다.

일 구현예에 따르면, 안정한 액체 약학적 제형은 pH 6.0 ± 0.3이고, 다음을 포함하며: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 항-EBOV 항체, 여기서 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDRL(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이다. 일 구현예에서, 항-EBOV 항체는 서열번호 40의 HCDR1, 서열번호 42의 HCDR2, 서열번호 44의 HCDR3, 서열번호 48의 LCDR1, 서열번호 50의 LCDR2, 및 서열번호 52의 LCDR3을 포함한다.

일 구현예에 따르면, 안정한 액체 약학적 제형은 pH 6.0 ± 0.3이고, 다음을 포함하며: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항-EBOV 항체, 여기서 제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이고, 제2 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이다. 일 구현예에서, 제1 항-EBOV 항체는 서열번호 4의 HCDR1, 서열번호 6의 HCDR2, 서열번호 8의 HCDR3, 서열번호 12의 LCDR1, 서열번호 14의 LCDR2, 및 서열번호 16의 LCDR3을 포함하고; 제2 항-EBOV 항체는 서열번호 22의 HCDR1, 서열번호 24의 HCDR2, 서열번호 26의 HCDR3, 서열번호 30의 LCDR1, 서열번호 32의 LCDR2, 및 서열번호 34의 LCDR3을 포함한다.

일 구현예에 따르면, 안정한 액체 약학적 제형은 pH 6.0 ± 0.3이고, 다음을 포함하며: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항-EBOV 항체, 여기서 제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이고, 제2 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이다. 일 구현예에서, 제1 항-EBOV 항체는 서열번호 4의 HCDR1, 서열번호 6의 HCDR2, 서열번호 8의 HCDR3, 서열번호 12의 LCDR1, 서열번호 14의 LCDR2, 및 서열번호 16의 LCDR3을 포함하고; 제2 항-EBOV 항체는 서열번호 40의 HCDR1, 서열번호 42의 HCDR2, 서열번호 44의 HCDR3, 서열번호 48의 LCDR1, 서열번호 50의 LCDR2, 및 서열번호 52의 LCDR3을 포함한다.

일 구현예에 따르면, 안정한 액체 약학적 제형은 pH 6.0 ± 0.3이고, 다음을 포함하며: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항-EBOV 항체, 여기서 제1 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이고, 제2 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이다. 일 구현예에서, 제1 항-EBOV 항체는 서열번호 22의 HCDR1, 서열번호 24의 HCDR2, 서열번호 26의 HCDR3, 서열번호 30의 LCDR1, 서열번호 32의 LCDR2, 및 서열번호 34의 LCDR3을 포함하고; 제2 항-EBOV 항체는 서열번호 40의 HCDR1, 서열번호 42의 HCDR2, 서열번호 44의 HCDR3, 서열번호 48의 LCDR1, 서열번호 50의 LCDR2, 및 서열번호 52의 LCDR3을 포함한다.

일 구현예에 따르면, 안정한 액체 약학적 제형은 pH 6.0 ± 0.3이고, 다음을 포함하며: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항-EBOV 항체, 여기서 제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이고, 제2 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이며, 제3 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는 인간 IgG1 항체이다. 일 구현예에서, 제1 항-EBOV 항체는 서열번호 4의 HCDR1, 서열번호 6의 HCDR2, 서열번호 8의 HCDR3, 서열번호 12의 LCDR1, 서열번호 14의 LCDR2, 및 서열번호 16의 LCDR3을 포함하고; 제2 항-EBOV 항체는 서열번호 22의 HCDR1, 서열번호 24의 HCDR2, 서열번호 26의 HCDR3, 서열번호 30의 LCDR1, 서열번호 32의 LCDR2, 및 서열번호 34의 LCDR3을 포함하며; 제3 항-EBOV 항체는 서열번호 40의 HCDR1, 서열번호 42의 HCDR2, 서열번호 44의 HCDR3, 서열번호 48의 LCDR1, 서열번호 50의 LCDR2, 및 서열번호 52의 LCDR3을 포함한다.

본 개시에 포함된 약학적 제형의 추가적인 비제한적인 예는 아래에 제시된 작업 실시예를 포함하여 본원의 다른 곳에 제시되어 있다.

용기 및 투여 방법

본 개시의 약학적 제형은 약물 및 다른 치료 조성물의 보관에 적합한 임의의 용기 내에 담길 수 있다. 예를 들어, 약학적 제형은 정의된 부피를 갖는 시일되고 밀봉된 플라스틱 또는 유리 용기, 예컨대 바이알, 앰플, 주사기, 카트리지, 또는 병에 담길 수 있다. 예를 들어 투명한 유리 또는 플라스틱 바이알 및 불투명한(예를 들어호박색) 유리 또는 플라스틱 바이알을 포함하여, 상이한 유형의 바이알이 본 개시의 제형을 담는 데 사용될 수 있다. 마찬가지로, 임의의 유형의 주사기가 본 개시의 약학적 제형을 담거나 투여하는 데 사용될 수 있다.

본 개시의 약학적 제형은 “표준 텅스텐” 주사기 또는 “저 텅스텐” 주사기에 담길 수 있다. 당업자에 의해 이해되는 바와 같이, 유리 주사기의 제조 방법은 일반적으로, 유리를 천공하여 액체가 주사기에 흡인되고 방출될 수 있는 구멍을 생성하도록 작용하는 뜨거운 텅스텐 로드를 사용하는 것을 포함한다. 이 방법은 주사기의 내부 표면 상에 미량의 텅스텐을 증착시킨다. 주사기에서 텅스텐의 양을 감소시키기 위해 후속 세척 단계 및 다른 처리 단계가 사용될 수 있다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “표준 텅스텐(normal tungsten)”은 주사기가 500 ppb(10억분의 1) 이상의 텅스텐을 함유하는 것을 의미한다. 용어 “저 텅스텐(low tungsten)”은 주사기가 500 ppb 미만의 텅스텐을 함유하는 것을 의미한다. 예를 들어, 본 개시에 따른 저 텅스텐 주사기는 약 490, 480, 470, 460, 450, 440, 430, 420, 410, 390, 350, 300, 250, 200, 150, 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10 ppb 또는 그 이하의 텅스텐을 함유할 수 있다.

주사기에 사용되는 고무 플런저, 및 바이알의 개구를 폐쇄하는 데 사용되는 고무 마개는 주사기 또는 바이알의 의약 내용물의 오염을 방지하거나 안정성을 보존하기 위해 코팅될 수 있다. 따라서, 특정 구현예에 따라, 본 개시의 약학적 제형은 코팅된 플런저를 포함하는 주사기 내에 담기거나, 코팅된 고무 마개로 시일되는 바이알에 담길 수 있다. 예를 들어, 플런저 또는 마개는 탄화플루오르 필름으로 코팅될 수 있다. 본 개시의 약학적 제형이 담기는 바이알 및 주사기와 함께 사용하기에 적합한 코팅된 마개 또는 플런저의 예는, 예를 들어 미국 특허 제4,997,423호; 제5,908,686호; 제6,286,699호; 제6,645,635호; 및 제7,226,554호에 언급되어 있으며, 이들 문헌의 내용은 그 전체가 참조로서 본원에 통합된다. 본 개시의 맥락에서 사용될 수 있는 특정 예시적인 코팅된 고무 마개 및 플런저는 “FluroTec®”의 상표명으로 상업적으로 입수 가능하며, West Pharmaceutical Services, Inc.(Lionville, PA)로부터 입수 가능하다. FluroTec®은 완제 의약품이 고무 표면에 부착되는 것을 최소화하거나 방지하는 데 사용되는 탄화플루오르 코팅의 예이다.

본 개시의 소정의 구현예에 따르면, 약학적 제형은 탄화플루오르 코팅된 플런저를 포함하는 저 텅스텐 주사기 내에 담길 수 있다.

약학적 제형은 주사(예를 들어 피하, 정맥내, 근육내, 복강내 등) 또는 경피, 점막, 비강, 폐와 같은 비경구 의해 환자에게 투여되거나 경구 투여될 수 있다. 다수의 재사용 가능한 펜 전달 장치 또는 자가주사 전달 장치가 본 개시의 약학적 제형을 피하 전달하는 데 사용될 수 있다. 예로는 AUTOPEN™(Owen Mumford, Inc., Woodstock, UK), DISETRONIC™ 펜(Disetronic Medical Systems, Bergdorf, Switzerland), HUMALOG MIX 75/25™ 펜, HUMALOG™ 펜, HUMALIN 70/30™ 펜(Eli Lilly and Co., Indianapolis, IN), NOVOPEN™ I, II 및 III(Novo Nordisk, Copenhagen, Denmark), NOVOPEN JUNIOR™(Novo Nordisk, Copenhagen, Denmark), BD™ 펜(Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ), OPTIPEN™, OPTIPEN PRO™, OPTIPEN STARLET™, 및 OPTICLIK™(sanofi-aventis, Frankfurt, Germany)이 포함되지만, 이들로 한정되지는 않는다. 본 개시의 약학적 조성물을 피하 전달하는 데 적용되는 일회용 펜 전달 장치 또는 자가주사기 전달 장치의 예로는 SOLOSTAR™ 펜(sanofi-aventis), FLEXPEN™(Novo Nordisk), 및 KWIKPEN™(Eli Lilly), SURECLICK™ Autoinjector(Amgen, Thousand Oaks, CA), PENLET™(Haselmeier, Stuttgart, Germany), EPIPEN(Dey, L.P.), 및 HUMIRA™ 펜(Abbott Labs, Abbott Park, IL)이 포함되지만, 이들로 한정되지는 않는다.

본 개시의 약학적 제형을 전달하기 위한 마이크로인퓨저의 사용도 본원에서 고려된다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “마이크로인퓨저(microinfuser)”는 큰 부피(예를 들어 최대 약 2.5 mL 이상)의 치료 제형을 장기간(예를 들어 약 10, 15, 20, 25, 30분 이상)에 걸쳐 서서히 투여하도록 설계된 피하 전달 장치를 의미한다. 예를 들어 U.S. 6,629,949; US 6,659,982; 및 Meehan 등의 문헌[J. Controlled Release 46:107-116 (1996)] 참조. 마이크로인퓨저는 고농도(예를 들어 약 100, 125, 150, 175, 200 mg/mL 또는 그 이상) 용액 또는 점성 용액 내에 함유된 많은 투여량의 치료 단백질를 전달하는 데 특히 유용하다.

소정의 구현예에서, 전술한 양태 중 어느 하나의 안정한 액체 약학적 제형은 멸균 유리 바이알에 담기고 IV 주입으로서 투여된다. 예시적인 투여량은 30,000 mg, 25,000 mg, 20,000 mg, 15,000 mg, 13,500 mg, 12,500 mg, 10,000 mg, 7,500 mg, 5000 mg, 2500 mg, 1450 mg, 1000 mg, 725 mg, 600 mg, 500 mg, 250 mg, 200 mg, 150 mg, 100 mg, 75 mg, 50 mg, 또는 25 mg을 포함한다.

일 구현예에서, 용기는 20 mL 1형 투명 붕규산염 유리 바이알이다. 소정의 구현예에서, 용기는 FluroTec^® 코팅된 클로로부틸 마개를 갖는 2 mL, 5mL, 또는 10 mL 1형 붕규산염 유리 바이알이다.

일 구현예에서, 약 25 mg/mL, 50 mg/mL, 100 mg/mL, 또는 150 mg/mL의 항-EBOV 항체를 포함하는 본 개시의 액체 약학적 제형은 정맥 내 투여되고 유리 바이알에 담길 수 있다. 일부 구현예에서, 본 개시는 50 mg/mL, 100 mg/mL, 또는 150 mg/mL의 총 항-EBOV 항체, 10 mM의 히스티딘(약 6.0의 pH), 10% 수크로오스, 및 0.1% 폴리소르베이트 80을 포함하는 안정한 액체 제형을 포함하는 유리 바이알을 제공한다.

일부 구현예에서, 각각의 항체는 50 mg/kg(체중)으로 투여된다. 일 구현예에서, 최종 제형이 각각의 항체를 50 mg/kg(체중)으로 투여할 수 있도록 2개의 항체가 공동 제형화된다. 따라서, 환자에게 투여될 최종 투여량은 100 mg/kg(체중)이며, 제형 내의 2개의 항체는 1:1 비율이다. 일 구현예에서, 공동 제형화된 항체는 약 2시간에 걸쳐 정맥 내로 전달된다.

일부 구현예에서, 최종 제형이 각각의 항체를 50 mg/kg(체중)으로 투여할 수 있도록 3개의 항체가 공동 제형화된다. 따라서, 환자에게 투여될 최종 투여량은 150 mg/kg(체중)이며, 제형 내의 3개의 항체는 1:1:1 비율이다. 일 구현예에서, 공동 제형화된 항체는 약 2시간에 걸쳐 정맥 내로 전달된다.

일부 양태에서, 150 mg/kg의 투여량이 투여되는 약 90 kg 체중의 환자에게는 약 13,500 mg의 투여량이 투여될 것이다. 일부 양태에서, 150 mg/kg의 투여량이 투여되는 약 45 kg 체중의 환자에게는 약 6,750 mg의 투여량이 투여될 것이다. 일부 양태에서, 환자는 많게는 30,000 mg을 투여받을 수 있다.

소정의 구현예에서, 3개의 항체는 유리 바이알로 제조된다. 소정의 구현예에서, 각각의 바이알에 725 mg의 총 항체, 즉 1:1:1 비율의 3개의 항체가 14.5 mL의 부피로 담겨, 50 mg/mL의 최종 항체 농도를 제공할 수 있다. 이는 2시간 동안 환자에게 정맥 내 투여될 수 있다.

소정의 구현예에서, 3개의 항체는 유리 바이알로 제조된다. 소정의 구현예에서, 각각의 바이알에 1450 mg의 총 항체, 즉 1:1:1 비율의 3개의 항체가 14.5 mL의 부피로 담겨, 100 mg/mL의 최종 항체 농도를 제공할 수 있다. 이는 2시간 동안 환자에게 정맥 내 투여될 수 있다.

소정의 구현예에서, 본 개시는 본원에 기술된 액체 제형 중 어느 하나를 포함하는 자가주사기를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시는 약 50 mg/mL, 약 100 mg/mL, 약 150 mg/mL, 또는 175 mg/mL의 총 항-EBOV 항체, 약 10 mM의 히스티딘(약 6.0의 pH), 10% 수크로오스, 및 0.1% 폴리소르베이트 80을 포함하는 안정한 액체 제형을 포함하는 자가주사기를 제공한다.

소정의 구현예에서, 본 개시는 본원에 기술된 액체 제형 중 어느 하나를 포함하는 자가주사기를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시는 50 mg/mL 또는 100 mg/mL의 총 항-EBOV 항체, 10 mM의 히스티딘(약 6.0의 pH), 10% 수크로오스, 및 0.1% 폴리소르베이트 80을 포함하는 안정한 액체 제형을 포함하는 자가주사기를 제공한다.

소정의 구현예에서, 본 개시는 본원에 기술된 액체 제형 중 어느 하나를 포함하는 미리 충진된 주사기를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시는 약 50 mg/mL, 약 100 mg/mL, 약 150 mg/mL, 또는 175 mg/mL의 항-EBOV 항체, 약 10 mM의 히스티딘(약 6.0의 pH), 10% 수크로오스, 및 0.1% 폴리소르베이트 80을 포함하는 안정한 액체 제형을 포함하는 미리 충진된 주사기를 제공한다. 소정의 구현예에서, 주사기는 27-게이지 박벽 바늘, 탄화플루오르 코팅된 고무 플런저, 및 고무 바늘 차폐부가 구비된 1 mL 또는 2.25 mL 부피의 긴 유리 주사기이다.

일 구현예에서, 약 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항-EBOV 항체를 함유하는 액체 약학적 제형은 사전 충진된 주사기에 담겨 최대 약 2 mL의 부피로 투여된다. 소정의 구현예에서, 주사기는 27-게이지 박벽 바늘, 탄화플루오르 코팅된 고무 플런저, 및 고무 바늘 차폐부가 구비된 1 mL 또는 2.25 mL 부피의 긴 유리 주사기이다. 일 구현예에서, 주사기는 27-게이지 바늘, FM 고무 바늘 치폐부, 및 FLUROTEC® 코팅된 4023/50 고무 플런저가 구비된 OMPI 1 mL 부피의 긴 유리 주사기이다.

일 구현예에서, 약 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 항-EBOV 항체를 함유하는 액체 약학적 제형은 사전 충진된 주사기에 담겨 최대 약 2 mL의 부피로 투여된다. 일 구현예에서, 주사기는 27-게이지 박벽 바늘, 탄화플루오르 코팅된 고무 플런저, 및 고무 바늘 차폐부가 구비된 1 mL 또는 2.25 mL 부피의 긴 유리 주사기이다. 일 구현예에서, 주사기는 27-게이지 바늘, FM 고무 바늘 치폐부, 및 FLUROTEC® 코팅된 4023/50 고무 플런저가 구비된 OMPI 1 mL 부피의 긴 유리 주사기이다.

적합성 (compatibility)

일 구현예에서, 안정한 제형은 50 mg/mL 총 항-EBOV 항체(H1H17203P, H1H17139P, 및/또는 H1H17161P의 각각 16.7 mg/mL; 또는 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 중 어느 2개의 각각 약 25 mg/mL)를 함유하는 IV 투여용 용액이다. 일부 양태에서, IV 혼합물 용액은 0.9% 염화나트륨, 5% 덱스트로스 또는 젖산 링거 용액, PVC(폴리염화비닐), 및 폴리에틸렌을 포함하여, 투여 시스템(IV 백, 세트, 및 필터)에 사용되는 희석제 및 물질과 적합성(사용 중 안정성 포함)을 갖는다.

예시적인 투여량은 10 mg/kg, 30 mg/kg, 50 mg/kg, 및 150 mg/kg을 포함한다. IV 전달 동안 항-EBOV 제형의 사용 중 안정성은 임상 투여량의 투여를 뒷받침한다. 일부 구현예에서, 희석된 항체가 담긴 0.9% 염화나트륨 PVC IV 백은 초기에 5℃에서 24시간 동안 유지된 다음, 25℃에서 적어도 8시간 동안 인큐베이션될 수 있다. 이러한 인큐베이션 후, 주입 세트의 각각을 IV 백에 연결하고, 희석된 DP로 프라이밍하고, 주변 실온에서 1시간 동안 유지할 수 있다. 그런 다음, 희석된 DP 용액을 각각의 주입 세트를 통해 25 mL/시간 및 500 mL/시간으로 펌핑할 수 있다. 이들 주입 세트는, 임상적 용도로 항체 조합의 IV 전달에 사용되는 주입 세트를 포함하는 염기성 물질(DEHP가 포함된 PVC, TOTM이 포함된 PVC, 및 폴리에틸렌)을 함유한다. 주입 세트는 0.2 μm 폴리에테르설폰 인라인 필터를 함유할 수 있다.

일부 양태에서, 0.9% 염화나트륨 주사액에서 2.2 mg/mL 또는 23.7 mg/mL의 농도로 희석된 적어도 하나의 항-EBOV 항체를 포함하는 50 mg/mL 항-EBOV 제형은, 이러한 조건 하에 제안된 투여량 범위 및 투여 조건 내에서 시험했을 때 물리적으로 및 화학적으로 안정하다. 일부 양태에서, 항-EBOV 제형을 IV 백에 희석한 후, 2~8℃에서 24시간 동안 및 25℃에서 적어도 8시간 동안 IV 백에 보관하고, 주입 세트를 1시간 동안 유지시키고, 25 mL/시간 내지 500 mL/시간의 펌핑 속도로 전달한 후, 항-EBOV 제형은 품질 속성에 있어서 의미 있는 변화를 나타내지 않을 수 있다.

일부 양태에서, 공동 제형화된 항체 제형의 투여량을 제조하고, IV 투여 중에 발생할 수 있는 온도 이탈(25℃ 초과)을 견디기 위해 상이한 희석제를 사용하는 추가의 유연성이 제공된다. 항-EBOV 항체를 40℃에서 0.9% 염화나트륨, 5% 덱스트로오스 또는 젖산 링거 용액으로 희석할 때, 제형은 계속하여 안정성을 나타낸다. 희석된 항체가 담긴 IV 백은 초기에 5℃에서 24시간 동안 유지된 다음; 40℃에서 적어도 6시간 동안 인큐베이션될 수 있다. 인큐베이션 후, 주입 세트의 각각을 IV 백에 연결하고, 희석된 항체로 프라이밍하고, 주변 실온에서 1시간 동안 유지할 수 있다. 그런 다음, 희석된 항체 용액을 각각의 주입 세트를 통해 펌핑할 수 있다.

일부 양태에서, 0.9% 염화나트륨 주사액, 5% 덱스트로스, 또는 젖산 링거 용액에서 1.6 mg/mL 또는 27.9 mg/mL의 농도로 희석된 적어도 하나의 항-EBOV 항체를 포함하는 50 mg/mL 항-EBOV 항체 제형은, 시험된 조건 하에 제안된 투여량 범위 및 투여 조건 내에서 물리적으로 및 화학적으로 안정할 수 있다. 일부 양태에서, 항-EBOV 제형을 IV 백에 희석한 후, 2~8℃에서 24시간 동안 및 40℃에서 적어도 6시간 동안 IV 백에 보관하고, 주입 세트를 1시간 동안 유지시킨 후, 항-EBOV 제형은 품질 속성에 있어서 의미 있는 변화를 나타내지 않을 수 있다.

안정한 액체 약학적 제형의 IV 적합성 특성(사용 중 안정성 포함)은 투여량 제조 및 IV 투여(50 mg/mL)에 관한 다음의 결론을 뒷받침한다:

0.9% 염화나트륨 주사액, 5% 덱스트로오스 주사액, 및 PVC로 만들어진 젖산 링거 IV 백은 적어도 하나의 항-EBOV 항체를 함유하는 제형의 IV 투여에 적합함;

항-EBOV 항체 제형은 0.9% 염화나트륨, 5% 덱스트로스, 또는 IV 투여용 젖산 링거 용액으로 이루어진 IV 희석제가 담긴 PVC IV 백에서 낮게는 2.2 mg/mL 및 높게는 23.7 mg/mL의 항체 농도로 희석될 수 있음;

0.9% 염화나트륨 주사액과 함께 제조한 희석된 공동 제형화된 항체는, 제조 시점부터 주입 종료 시까지 최대 25℃의 실온에서 적어도 약 8시간 동안, 또는 제조 시점부터 주입 종료 시까지 2℃ 내지 8℃에서 적어도 약 24시간 동안 보관될 수 있음;

5% 덱스트로스 또는 젖산 링거 용액과 함께 제조한 희석된 공동 제형화된 항체는, 제조 시점부터 주입 종료 시까지 최대 25℃의 실온에서 적어도 약 4시간 동안, 또는 제조 시점부터 주입 종료 시까지 2℃ 내지 8℃에서 적어도 약 24시간 동안 보관될 수 있음;

0.9% 염화나트륨, 5% 덱스트로스, 또는 젖산 링거 용액과 함께 제조한 희석된 공동 제형화된 항체(2.2 mg/mL 내지 23.7 mg/mL)는 40℃에서 6시간 동안 안정함;

희석된 공동 제형화된 항체는 DEHP를 함유하는 PVC, TOTM을 함유하는 PVC, 또는 폴리에틸렌 라이닝된 PVC로 이루어진 주입 세트로 투여될 수 있음;

희석된 공동 제형화된 항체는 인라인 0.2 μm 폴리에테르설폰 필터의 사용에 적합함.

약학적 제형의 치료적 용도

본 개시의 약학적 제형은 특히, EBOV 또는 이와 관련된 임의의 증상의 치료, 예방 또는 완화에 유용하다.

실시예

다음 예들은 당업자에게 본원에 개시된 방법 및 조성물을 제조하고 사용하는 방법의 완전한 개시 및 설명을 제공하기 위해 제시된 것으로서, 본 발명자들이 발명으로서 간주하는 것의 범위를 제한하고자 하는 것이 아니다. 사용된 숫자(예를 들어, 양, 온도 등)와 관련하여 정확성을 보장하기 위한 노력을 기울였으나 약간의 실험 오차와 편차에 대해서는 설명되어야 한다. 달리 표시되지 않는 한, 부(parts)는 몰부(parts by mole)이고, 분자량은 평균 분자량이며, 온도는 섭씨 온도이고, 압력은 대기압이거나 거의 대기압이다.

실시예 1: 항-EBOV 항체 제형의 개발

제형화 활동의 목표는 다음의 속성을 갖는 제형을 개발하는 것이었다:

제조 시설로부터 에볼라 노출이 발생하였고/하였거나 에볼라 환자가 있는 원격 현장 클리닉으로의 수송 중에 치료제가 노출될 수 있는 응력 조건, 예를 들어 온도 변화, 극한 온도, 운송 중 교반 등이 가해진 후에도 안정한 액체 제형;

25 mg 내지 30,000 mg의 투여량, 예를 들어, 약 7500 mg, 약 5000 mg, 약 3000 mg, 약 2000 mg, 약 1500 mg, 1000 mg, 약 800 mg, 약 750 mg, 약 500 mg, 약 250 mg, 약 200 mg, 약 150 mg, 약 100 mg, 약 75 mg, 약 50 mg, 또는 약 25 mg의 투여량을 정맥 내 주입에 의해 전달하기에 충분한 농도의 항-EBOV 항체의 액체 제형;

흔히 사용되는 희석제, 예를 들어, 0.9% 염화나트륨 주사액 또는 5% 덱스트로스 주사액 또는 젖산 링거 주사액으로 희석 시 안정한 정맥내 주입용 등장성(iso-osmolar) 제형;

1형 투명 유리 바이알 및 포장으로서의 표준 혈청 마개를 사용하기에 적합하고 안정한 제형; 및

장기 안정성을 뒷받침하는 멸균 완제 의약품(DP) 용액;

취급 및 열 응력을 받을 때 항체 고분자량(HMW) 종을 최소화하는 제형;

열 응력을 받을 때 항체 하전된 종의 상대 분포 변화를 최소화하는 제형; 및

극한 환경에서 거친 수송 및 열 응력을 받을 때 생물학적 활성을 유지하는 제형.

제형 개발 전반에 걸쳐, 항체 제형을 개발 및 최적화하기 위해, 및 세계의 먼 지역에서 사용되는 완제 의약품의 안정성에 잠재적 실제 응력이 미치는 영향을 평가하기 위해 3개의 일차 단백질 응력 조건(항체 완제 의약품을 취급하고, 제조하고, 배송하고, 보관하고, 라벨링하는 중에 가해질 수 있는 극단적인 취급 조건을 나타냄)을 사용하였다. 이러한 응력 조건에는 다음이 포함된다:

실온에서 단백질 용액을 교반(와동)하는 것. 단백질의 취급 및 제조 중에 발생하는 교반을 초과하도록 유리 바이알에서 와동하는 것.

제안된 DP 보관 조건(2℃~8℃)에 비해 상승된 온도(37℃, 40℃, 또는 45℃)에서 단백질 용액을 인큐베이션하는 것.

단백질을 대상으로 다수의 동결 해동 사이클을 수행하는 것. DP 제조 중에 단백질은 적어도 1회의 동결 해동 사이클을 거치게 되므로, 다수의 동결 해동 사이클은 단백질이 겪을 것으로 예상되는 실제 응력 및 이를 초과하는 응력을 시뮬레이션한다.

초기 제형 개발 작업에는 몇 가지 주요 목표가 있었다:

1. 3개의 항-EBOV 항체 각각에 대한 완충액 및 pH의 선택: 완충액 및 pH의 선택은 단백질의 안정성에 큰 영향을 미칠 수 있으므로, 최적의 완충액 종 및 pH를 결정하는 것은 중요한 과정이다. 각 항체에 대한 최적의 완충액 및 pH를 선택하는 이론적 근거를 보여주는 연구가 이들 섹션에 제시되어 있다.

2. 3개의 항-EBOV 항체 각각에 대한 계면활성제 또는 유기 공용매의 선택: 계면활성제 또는 유기 공용매, 예컨대 폴리소르베이트는 일반적으로 교반할 때 단백질의 침전 또는 응집을 방지할 필요가 있다. 가용성 단백질은 취급, 여과, 혼합, 제조, 배송, 및 투여 시 교반될 수 있다. 단순 완충액 중의 항체 원료 의약품은 교반이 과도할 때 가시적으로 혼탁해질 수 있다. 따라서, 취급 및 교반에 대해 각각의 단백질을 안정화하는 것이 중요하다고 결정하였다.

3. 안정화/긴장화 부형제의 식별/선택: 열 응력에 대한 3개의 항체 각각의 안정성을 개선하고 완제 의약품(DP)의 저장 수명을 증가시키는 능력에 대해 당류, 염, 및 아미노산의 첨가를 조사하였다. 이들 열 안정화제를 포함하는 것에 대한 이론적 근거를 비롯하여, 최종 제형에서 최적의 농도를 식별하는 연구가 본원에 제시된다.

4. 항체 농도의 선택: 선택된 부형제가 사용된 완제 의약품의 안정성에 항체 농도가 미치는 영향을 조사하였다.

5. 3개의 항-EBOV 항체의 공동 제형화: 3개의 항-EBOV 항체를 2가지 농도의 액체 제형으로 공동 제형화하고, 이 조합에 맞는 완충액 및 pH를 선택하고, 계면활성제 또는 유기 공용매를 선택하고, 추가 부형제를 시험하고, 안정화제를 식별하고 선택하였다.

초기 제형 개발 활동은 개별적으로 제형화된 100 mg/mL의 각각의 항-EBOV 항체를 사용하여 수행하였으며, 항-EBOV 항체 각각의 액체 중 유기 공용매, 열 안정화제, 및 완충제를 스크리닝하여, 정맥내 및 피하 주사를 위한 근접한 생리학적 오스몰농도 및 낮는 점도를 유지하면서 단백질에 적합하고 이의 안정성을 향상시키는 부형제를 식별하는 단계를 포함하였다. 완충액 조건을 또한 조사하여 최대 단백질 안정성을 위한 최적의 pH를 결정하였다(본원의 실시예 6에 기술됨).

이러한 초기 제형 개발 작업의 결과를 사용하여 임상 연구에 적합한 초기 제형을 개발하였다.

초기 제형 개발로부터 얻은 지식에 기초하여, 후기 단계 제형 개발 활동은 3개의 항체를 2가지 농도로 공동 제형화하는 단계; pH, 계면활성제 농도, 및 안정화제를 확인하여 낮은 단백질 농도 및 높은 단백질 농도 모두에서 및 고온 및 교반과 같은 응력에 노출될 때 단백질 안정성을 향상시키는 부형제를 식별하는 단계를 포함하였다.

제형 개발 전반에 걸쳐, 제형을 응력 및 보관 안정성에 대해 평가하였다. 제형 개발 연구에서 안정성을 평가하는 데 사용된 방법은 본원의 실시예 3에 기술되어 있다. 실시예 4 내지 9는 제형의 보관 및 응력 안정성을 기술한다.

이들 연구로부터 생성된 결과를 사용해 임상적 용도에 적합한 정맥내(IV) 투여를 위한 안정한 액체 제형을 개발하였다. 이러한 제형은 열 또는 교반 응력에 노출될 때 안정성을 나타냈다.

제형의 다른 속성은 본원의 설명으로부터 명백해질 것이다.

항-EBOV 항체:

항-EBOV 항체는 그 전체가 본원에 통합된 US 2016/0215040에 기술되어 있다. 아래의 실시예에 사용된 예시적인 항체는 위에서 상세하게 기술된 서열을 포함하는 완전한 인간 항-EBOV 항체 H1H17203P(REGN3470; 서열번호 2의 HCVR 아미노산 서열 및 서열번호 10의 LCVR 아미노산 서열을 가짐), H1H17139P(REGN3471; 서열번호 20의 HCVR 아미노산 서열 및 서열번호 28의 LCVR 아미노산 서열을 가짐), 및 H1H17161P(REGN3479; 서열번호 38의 HCVR 아미노산 서열 및 서열번호 46의 LCVR 아미노산 서열을 가짐)이다.

실시예 2: 예시적인 제형

소정의 구현예에서, 항-EBOV 항체는 개별적으로 제형화되거나 다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 수성 완충 제형으로서 공동 제형화된다: (a) 5% ± 1% 내지 15% ± 3% w/v 수크로오스, (b) 5 mM ± 1 mM 내지 20 mM ± 4 mM 히스티딘 완충액, (c) 0.01% ± 0.005% 내지 0.5% ± 0.25% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항-EBOV 항체. 소정의 구현예에서, 항-EBOV 항체는 개별적으로 제형화되거나 다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 수성 완충 제형으로서 공동 제형화된다: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10 mM ± 2 mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항체. 공동 제형화될 때, 항-EBOV 항체들은 1:1:1 비율로 존재한다.

소정의 구현예에서, 항-EBOV 항체는 개별적으로 제형화되거나 다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 수성 완충 제형으로서 공동 제형화된다: (a) 5% ± 1% 내지 15% ± 3% w/v 수크로오스, (b) 5 mM ± 1 mM 내지 20 mM ± 4 mM 히스티딘 완충액, (c) 0.01% ± 0.005% 내지 0.5% ± 0.25% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항체. 소정의 구현예에서, 항-EBOV 항체는 개별적으로 제형화되거나 다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 수성 완충 제형으로서 공동 제형화된다: (a) 10% ± 2% w/v 수크로오스, (b) 10 mM ± 2 mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항체. 공동 제형화될 때, 항-EBOV 항체들은 1:1:1 비율로 존재한다.

예시적인 제형은 다음을 포함한다:

다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 안정한 액체 약학적 제형: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 H1H17203P 항-EBOV 항체.

다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 안정한 액체 약학적 제형: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 H1H17139P 항-EBOV 항체.

다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 안정한 액체 약학적 제형: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 H1H17161P 항-EBOV 항체.

다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 안정한 액체 약학적 제형: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 H1H17203P 및 H1H17139P 항-EBOV 항체.

다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 안정한 액체 약학적 제형: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 H1H17203P 및 H1H17161P 항-EBOV 항체.

다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 안정한 액체 약학적 제형: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 H1H17139P 및 H1H17161P 항-EBOV 항체.

다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 안정한 액체 약학적 제형: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL의 총 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 항-EBOV 항체.

다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 안정한 액체 약학적 제형: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 10 mg/mL의 H1H17203P 항-EBOV 항체.

다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 안정한 액체 약학적 제형: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 H1H17139P 항-EBOV 항체.

다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 안정한 액체 약학적 제형: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 H1H17161P 항-EBOV 항체.

다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 안정한 액체 약학적 제형: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 H1H17203P 및 H1H17139P 항-EBOV 항체.

다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 안정한 액체 약학적 제형: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 H1H17203P 및 H1H17161P 항-EBOV 항체.

다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 안정한 액체 약학적 제형: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 H1H17139P 및 H1H17161P 항-EBOV 항체.

다음을 포함하는 pH 6.0 ± 0.3의 안정한 액체 약학적 제형: (a) 10% ± 2% w/v의 수크로오스, (b) 10mM ± 2mM의 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v의 폴리소르베이트, 및 (d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL의 총 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 항-EBOV 항체.

실시예 3: 제형 안정성을 평가하는 데 사용되는 방법

제형 안정성을 평가하기 위해 다음 검정을 적용하였다:

육안 검사에 의한 색상 및 성상

pH

405 nm에서의 OD 증가에 의하거나 비탁법(nephelometry)에 의해 측정한 탁도

미세유동 영상화(MFI)(그대로 수득된 입자 계수로서 보고됨), 및 광 차폐(HIAC)에 의해 수행되는 미립자 물질 분석

역상-초고성능 액체 크로마토그래피(RP-UPLC)에 의한 단백질 농도

크기 배제-초고성능 액체 크로마토그래피(SE-UPLC)에 의하거나, 환원 및 비환원 마이크로칩 모세관 전기영동 도데실 황산나트륨(MCE-SDS) PAGE에 의한 순도

양이온 교환 크로마토그래피-초고성능 액체 크로마토그래피(CEX-UPLC)에 의하거나, 영상화된 모세관 등전점 전기영동(iCIEF)에 의한 전하 변이체 분석

생물검정에 의한 효능: 각 샘플의 상대 효능은 생물검정을 사용하여 결정되며, 다음과 같이 정의된다: (IC₅₀ 기준 샘플/IC₅₀ 샘플)*100%. 보관 안정성 샘플의 측정된 효능은 기준 표준물질의 측정된 효능의 50% 내지 150% 이내여야 한다.

제형의 물리적 안정성은 색상, 성상, pH, 탁도, 및 단백질 농도와 같은 특성을 지칭한다. 용액 중의 가시적인 미립자의 존재는 육안 검사로 검출될 수 있다. 용액이 투명 내지 약간 유백색이고, 본질적으로 가시적인 미립자가 없고, 무색 내지 옅은 황색인 경우 육안 검사를 통과한다. 추가로, 405 nm에서 OD로 측정한 탁도를 용액 중 미립자를 검출하는 데 사용할 수도 있다. 405 nm에서 OD의 증가는 미립자의 존재, 유백광의 증가, 또는 시험 물품의 색상 변화를 나타낼 수 있다. MFI는 크기가 ≥ 2 μm인 육안으로 보이지 않는 미립자를 측정하는 데 사용된다. 항-EBOV 항체 단백질 농도는 RP-UPLC 검정에 의해 측정되고, 출발 물질에 대한 단백질 회수 백분율로서 보고된다. RP-UPLC 검정에서, 항-EBOV 항체는 단일 피크로서의 RP 컬럼에서 용리된다. 단백질 농도는 항체 표준물질을 사용하여 생성된 검량 곡선과 항체 총 피크 면적을 비교함으로써 항체 총 피크 면적으로부터 결정한다. 회수 백분율은 출발 단백질 농도 대비 측정된 단백질 농도를 기준으로 계산된다.

화학적 안정성은 단백질의 공유 변형된 형태(예를 들어 공유 응집체, 절단 산물, 또는 전하 변이체 형태) 및 비공유 변형된 형태(예를 들어 비공유 응집체)가 형성되는 것을 지칭한다. 더 높은 분자량의 분해 산물 및 더 낮은 분자량의 분해 산물은 SE-UPLC 및 MCE-SDS 방법에 의해 고유 항체로부터 분리할 수 있다. SE-UPLC 및 MCE-SDS 방법에서, 분해된 항-EBOV 항체의 백분율은 모든 항-EBOV 항체 피크의 총 면적에 대한 모든 비-고유 피크의 면적의 비로부터 계산된다. 항-EBOV 항체의 전하 변이체 형태는 CEX-UPLC 및 iCIEF를 사용하여 용해시킨다. CEX-UPLC 방법에서, 유지 시간이 주 피크의 유지 시간보다 더 이른 피크는 “산성” 피크로서 표지되고; 유지 시간이 주 피크의 유지 시간보다 늦은 피크는 “염기성” 피크로서 표지된다. iCIEF 방법에서, 주 피크의 pI보다 낮은 pI에 집중된 피크는 “산성” 피크로서 표지되는 반면, 주 피크의 pI보다 높은 pI에 집중된 피크는 “염기성” 피크로서 표지된다.

실시예 4: 항-EBOV 항체의 수성 제형에 대한 안정성 연구

본 실시예의 본 섹션에 개략된 모든 연구는 H1H17203P 완제 의약품(DP), H1H17139P DP, 및 H1H17161P DP에 대해 수행된 리서치 안정성 연구를 지칭한다. 각 DP를 제형화하고 별도로 충진하여 실시간, 가속 및 응력 안정성 조건 하에서 안정성 데이터를 제공하였다. 이들 연구에 사용된 원료 의약품(Drug Substance, DS) 로트는 임상적 용도로 제조된 DS를 대표한다.

제형 개발

H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 항체는 최초 인체 적용 연구를 위해 정맥내(IV) 주사에 의해 전달되도록 제형화된다. 개별적으로 제형화되고 충진된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 완제 의약품의 안정성은 임상 제형에서 평가하였으며; 분석적 특성 분석 결과는 이러한 제형이 조사된 모든 조건 하에서 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 항체에 적절한 안정성을 제공하였음을 나타냈다. H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 항체 제형은 10 mM 히스티딘(pH 6.0), 0.1%(w/v) 폴리소르베이트 80, 및 10%(w/v) 수크로오스를 함유한다.

리서치 안정성

본 섹션에서 개략된 모든 FDS(제형화된 원료 의약품) 및 DP(완제 의약품) 연구는 개발 용도로 제조된 개별적으로 제형화되고 충진된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 항체에 대해 수행된 리서치 안정성 연구를 지칭한다. 임상 용도로 제조된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 항체를 조사하는 공식 안정성 연구가 아래에서 논의된다.

개별적으로 제형화되고 충진된 50 mg/mL H1H17203P DP, 50 mg/mL H1H17139P DP, 및 50 mg/mL H1H17161P DP의 리서치 로트의 보관, 가속, 및 응력 안정성을 결정하기 위해 안정성 연구를 개시하였다. 이들 연구에 사용된 DS 로트는 임상적 용도로 제조된 DS를 대표한다. DP를 보관 온도 조건에 비해 상승된 여러 가지 온도 조건 하에서 인큐베이션하였다. 이러한 가속 조건은 제조 및 취급 도중에 DP가 겪을 수 있는 조건보다 가혹한 조건을 시뮬레이션하고, H1H17203P DP, H1H17139P DP, 및 H1H17161P DP에 대한 분해 경로를 밝히기 위해 선택하였다. H1H17203P DP, H1H17139P DP, 및 H1H17161P DP에 대한 보관, 가속, 및 응력 안정성 조건의 개요는 표 1에 제시되어 있고, 분석 계획은 표 2에 제시되어 있다.

50 mg/mL H1H17203P DP에 대한 리서치 안정성

50 mg/mL H1H17203P DP에 대한 리서치 보관 안정성

50 mg/mL H1H17203P DP에 대한 3개월의 리서치 안정성 데이터가 도시되어 있다. 50 mg/mL H1H17203P DP는 5℃에서 3개월 동안 보관했을 때 물리적으로 및 화학적으로 안정하였다(표 3). 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다.

50 mg/mL H1H17203P DP에 대한 리서치 가속 안정성

가속 조건 하에 인큐베이션한 후 50 mg/mL H1H17203P DP의 분석 결과는 표 6에 제공되어 있다. H1H17203P DP를 45℃에서 28일 동안 인큐베이션한 후, CEX-UPLC 및 iCIEF에 의해 결정했을 때, HMW 및 LMW 종의 상대량에 있어서 2.1% 및 1.6%의 증가(SE-UPLC), 및 산성 전하 변이체 종의 백분율에 있어서 15.1% 및 13.5%의 증가가 각각 관찰되었다. H1H17203P DP를 25℃에서 3개월 동안 인큐베이션한 후, CEX-UPLC 및 iCIEF에 의해 결정했을 때, HMW 및 LMW 종 모두의 양에 있어서 0.3%의 증가(SE-UPLC), 및 산성 전하 변이체 종의 백분율에 있어서 2.9% 및 3.0%의 증가가 각각 관찰되었다. 가속 안정성 시험의 결과는, HMW 및 총 LMW 종의 상대량에 있어서의 증가 및 산성 전하 변이체의 형성이 50 mg/mL H1H17203P DP에 대한 주된 분해 분해 경로였음을 입증하였다.

50 mg/mL H1H17203P DP에 대한 리서치 응력 안정성

리서치 응력 안정성 연구의 결과는 표 9에 제시되어 있다. H1H17203P DP는 120분 동안 교반했을 때(주변 온도에서 와동했을 때) 물리적으로 및 화학적으로 안정하였다. 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다. 8회의 동결/해동 사이클(-80℃에서 동결시키고 실온에서 해동함)을 거쳤을 때 H1H17203P DP는 물리적으로 및 화학적으로 안정하였다. 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다.

50 mg/mL H1H17139P DP에 대한 리서치 안정성

50 mg/mL H1H17139P DP에 대한 리서치 보관 안정성

50 mg/mL H1H17139P DP에 대한 3개월의 리서치 안정성 데이터가 도시되어 있다. 50 mg/mL H1H17139P DP는 5℃에서 3개월 동안 보관했을 때 물리적으로 및 화학적으로 안정하였다(표 4). 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다. 50 mg/mL H1H17139P DP는 생물검정 분석에 의해 결정했을 때 3개월 평가 간격에 걸쳐 효능을 유지하였다.

50 mg/mL H1H17139P DP에 대한 리서치 가속 안정성

가속 조건 하에 인큐베이션한 후 50 mg/mL H1H17139P DP의 분석 결과는 표 7에 제공되어 있다. H1H17139P DP를 45℃에서 28일 동안 인큐베이션한 후, CEX-UPLC 및 iCIEF에 의해 결정했을 때, HMW 및 LMW 종의 상대량에 있어서 0.8% 및 1.8%의 증가(SE-UPLC), 및 산성 전하 변이체 종의 백분율에 있어서 13.8% 및 12.9%의 증가가 각각 관찰되었다. H1H17139P DP를 25℃에서 3개월 동안 인큐베이션한 후, CEX-UPLC 및 iCIEF에 의해 결정했을 때, HMW 및 LMW 종의 양에 있어서 0.4% 및 0.5%의 증가(SE-UPLC), 및 산성 전하 변이체 종의 백분율에 있어서 2.6% 및 3.1%의 증가가 각각 관찰되었다. 각각의 가속 조건 하에 인큐베이션한 후 생물검정에 의해 결정했을 때 H1H17139P는 효능을 유지하였다. 가속 안정성 시험의 결과는, HMW 및 총 LMW 종의 상대량에 있어서의 증가 및 산성 전하 변이체의 형성이 50 mg/mL H1H17139P DP에 대한 주된 분해 분해 경로였음을 입증하였다.

50 mg/mL H1H17139P DP에 대한 리서치 응력 안정성

리서치 응력 안정성 연구의 결과는 표 10에 제시되어 있다. H1H17139P DP는 120분 동안 교반했을 때(주변 온도에서 와동했을 때) 물리적으로 및 화학적으로 안정하였다. 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다. 8회의 동결/해동 사이클(-80℃에서 동결시키고 실온에서 해동함)을 거쳤을 때 H1H17139P DP는 물리적으로 및 화학적으로 안정하였다. 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다.

50 mg/mL H1H17161P DP에 대한 리서치 안정성

50 mg/mL H1H17161P DP에 대한 리서치 보관 안정성

50 mg/mL H1H17161P DP에 대한 3개월의 리서치 안정성 데이터가 도시되어 있다. 50 mg/mL H1H17161P DP는 5℃에서 3개월 동안 보관했을 때 물리적으로 및 화학적으로 안정하였다(표 5). 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다. 50 mg/mL H1H17161P DP는 생물검정 분석에 의해 결정했을 때 3개월 평가 간격에 걸쳐 효능을 유지하였다.

50 mg/mL H1H17161P DP에 대한 리서치 가속 안정성

가속 조건 하에 인큐베이션한 후 50 mg/mL H1H17161P DP의 분석 결과는 표 8에 제공되어 있다. H1H17161P DP를 45℃에서 28일 동안 인큐베이션한 후, CEX-UPLC 및 iCIEF에 의해 결정했을 때, HMW 및 LMW 종의 상대량에 있어서 1.0% 및 1.8%의 증가(SE-UPLC), 및 산성 전하 변이체 종의 백분율에 있어서 15.6% 및 13.2%의 증가가 각각 관찰되었다. H1H17161P DP를 25℃에서 3개월 동안 인큐베이션한 후, CEX-UPLC 및 iCIEF에 의해 결정했을 때, HMW 및 LMW 종의 양에 있어서 0.7% 및 0.5%의 증가(SE-UPLC), 및 산성 전하 변이체 종의 백분율에 있어서 4.2% 및 3.4%의 증가가 각각 관찰되었다. 각각의 가속 조건 하에 인큐베이션한 후 생물검정에 의해 결정했을 때 H1H17161P는 효능을 유지하였다. 가속 안정성 시험의 결과는, HMW 및 총 LMW 종의 상대량에 있어서의 증가 및 산성 전하 변이체의 형성이 50 mg/mL H1H17161P DP에 대한 주된 분해 분해 경로였음을 입증하였다.

50 mg/mL H1H17161P DP에 대한 리서치 응력 안정성

리서치 응력 안정성 연구의 결과는 표 11에 제시되어 있다. H1H17161P DP는 120분 동안 교반했을 때(주변 온도에서 와동했을 때) 물리적으로 및 화학적으로 안정하였다. 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다. 8회의 동결/해동 사이클(-80℃에서 동결시키고 실온에서 해동함)을 거쳤을 때 H1H17161P DP는 물리적으로 및 화학적으로 안정하였다. 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다.

H1H17203P DP, H1H17139P DP, 및 H1H17161P DP에 대한 리서치 안정성 결론

DP 보관, 가속, 및 응력 안정성 연구들의 결과는 H1H17203P DP, H1H17139P DP, 및 H1H17161P DP 제형이 물리적 또는 화학적 안정성을 손상시키지 않으면서 실온에 대한 제한된 노출을 견딜 수 있음을 나타낸다. 또한, H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 제형 연구의 결과는 H1H17203P DP, H1H17139P DP, 및 H1H17161P DP가 5℃에서 적어도 3개월 동안 보관 시 안정함을 나타낸다. H1H17203P DP, H1H17139P DP, 및 H1H17161P DP는 2℃ 내지 8℃에서 보관되어야 하고 8℃를 초과하는 온도에 대한 노출은 제한되어야 한다.

결론

H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 항체는 IV 투여용 액체 DP로서 제조된다. H1H17203P DP는 10 mM 히스티딘(pH 6.0), 0.1%(w/v) 폴리소르베이트 80, 및 10%(w/v) 수크로오스를 함유하는 용액으로 제형화된 50 mg/mL H1H17203P 항체를 함유한다. H1H17139P DP는 10 mM 히스티딘(pH 6.0), 0.1%(w/v) 폴리소르베이트 80, 및 10%(w/v) 수크로오스를 함유하는 용액으로 제형화된 50 mg/mL H1H17139P 항체를 함유한다. H1H17161P DP는 10 mM 히스티딘(pH 6.0), 0.1%(w/v) 폴리소르베이트 80, 및 10%(w/v) 수크로오스를 함유하는 용액으로 제형화된 50 mg/mL H1H17161P 항체를 함유한다.

본 실시예의 연구 결과에 기초하여, 50 mg/mL H1H17203P DP, 50 mg/mL H1H17139P DP, 및 50 mg/mL H1H17161P DP는 2~8℃에서 적어도 12개월 동안 보관 시 안정하다. 또한, 가속 조건 하에서 식별된 주요 분해 경로는 HMW 및 LMW 종 및 산성 전하 변이체의 형성이었다.

실시예 5: 50 mg/mL 항-EBOV 항체 조합을 함유하는 수성 제형에 대한 안정성 연구

3개의 항-EBOV 단클론 항체, 즉 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P를 50 mg/mL 총 단백질(16.7 mg/mL H1H17203P, 16.7 mg/mL H1H17139P, 및 16.7 mg/mL H1H17161P), 10 mM 히스티딘(pH 6.0), 0.1%(w/v) 폴리소르베이트 80, 및 10%(w/v) 수크로오스를 사용해 제형화하였다. 3개의 항-EBOV 단클론 항체를 제형화하고 단일 유리 바이알 내로 조합하였다. 안정성을 평가하는 데 사용된 방법을 개발하여, 가능한 경우, 각 성분 항체에 대한 정보를 제공하였다. 그러나, 분석 방법들 중 다수는 각각의 개별 항체에 대한 정보를 제공할 수 없다. 각각의 항체에 대한 결과를 개별적으로 제공할 수 없을 때, 분석적 방법은 총 완제 의약품에 대한 안정성 데이터를 제공한다.

제형의 물리적 안정성은 색상, 성상, pH, 탁도, 및 단백질 농도와 같은 특성을 지칭한다. 용액 중의 가시적인 미립자의 존재는 육안 검사로 검출될 수 있다. 용액이 투명 내지 약간 유백색이고, 본질적으로 가시적인 미립자가 없고, 무색 내지 옅은 황색인 경우 육안 검사를 통과한다. 405 nm에서 OD의 증가에 의해 측정되는 탁도는 용액 중 미립자를 검출하는 데 사용될 수도 있다. 405 nm에서 OD의 증가는 미립자의 존재, 유백광의 증가, 또는 시험 물품의 색상 변화를 나타낼 수 있다. MFI는 크기가 ≥2 μm인 육안으로 보이지 않는 미립자를 측정하는 데 사용된다. 총 단백질 농도를 RP-UPLC 검정에 의해 측정하고, 출발 물질에 대한 단백질 회수 백분율로서 보고한다.

RP-UPLC 검정에서, HH1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 피크는 역상 컬럼에서 용리된 후 서로 분리될 수 없다(도 1). 총 단백질 농도(H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P)는 H1H17203P 표준을 사용하여 생성된 검량 곡선과 피크 면적을 비교하여 결정한다. H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P의 소광 계수가 각각 1.50, 1.57 및 1.36이기 때문에, 공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P(1:1:1)의 소광 계수는 대략 1.48이 될 것이다(3개의 소광 계수의 평균). 따라서, H1H17203P 표준(흡광 계수, 1.50)을 선택하여 공동 제형화된 제형 중 총 단백질 농도를 결정하기 위한 표준 곡선을 생성하였다. 회수 백분율은 출발 농도 대비 측정된 총 단백질 농도를 기준으로 계산된다.

화학적 안정성은 단백질의 공유 변형된 형태(예를 들어 공유 응집체, 절단 산물, 또는 전하 변이체 형태) 및 비공유 변형된 형태(예를 들어 비공유 응집체)의 형성을 지칭한다. 더 높은 분자량 분해 산물 및 더 낮은 분자량 분해 산물은 SE-UPLC 및 MCE-SDS 방법을 사용하여 고유 분자량 산물로부터 분리할 수 있다. 3원 항체 제형을 SE-UPLC에 의한 총 순도(H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P)에 대해 특성화하였는데(즉, H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P의 분자량 순도는 개별적으로 결정되지 않음), 이는 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 고유 종이 서로 분리될 수 없기 때문이다(도 2). 유사하게, 3원 항체 제형은 총 고분자량(HMW) 종(H1H17203P HMW, H1H17139P HMW, 및 H1H17161P HMW) 및 총 저분자량(LMW) 종(H1H17203P LMW, H1H17139P LMW, 및 H1H17161P LMW)에 대해 특성화되게 되는데, 이는 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P의 HMW 또는 LMW 종이 서로 분리될 수 없기 때문이다(도 2). SE-UPLC 방법을 사용하여 결정된, 3원 제형 중 총 HMW 종 또는 총 LMW 종의 백분율은 모든 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 피크의 총 면적에 대한 총 HMW 종 또는 총 LMW 종의 면적의 비율로부터 각각 계산된다. 비환원 MCE-SDS에 의해 결정된 총 순도는 모든 밴드의 총 강도에 대한 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 주요 밴드 강도의 비율로부터 계산된다. 환원 MCE-SDS에 의해 결정된 총 순도는 모든 밴드의 총 강도에 대한 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 중쇄 및 경쇄 밴드 강도의 합의 비율로부터 계산된다.

iCIEF 방법은 3개의 항체 모두의 모든 전하 변이체 형태를 분리하기에 충분한 해상도를 갖지 않았다. 따라서, 이러한 분석 방법은 3원 제형 샘플에 대한 전하 변이체 프로파일의 변화를 평가하는 데 사용하지 않았다. 공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P의 전하 변이체 형태는 CEX-UPLC 방법을 사용하여 분리할 수 있었다. H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P의 경우, 유지 시간이 주요 피크의 유지 시간보다 더 이른 피크는 “산성” 피크로서 표지하고; 유지 시간이 주요 피크의 유지 시간보다 늦은 피크는 “염기성” 피크로서 표지한다. 산성 피크, 주요 피크, 및 염기성 피크의 백분율은 개별 피크 면적을 각 항체의 총 피크 면적과 비교하여 계산한다.

보관, 가속, 및 응력 안정성 연구에 사용된 완제 의약품(DP)은 0.4 mL의 FDS를 2 mL의 1형 유리 바이알에 충진함으로써 생성하였다. DP를 보관 온도 조건에 비해 상승된 여러 가지 온도 조건 하에서 인큐베이션하였다. 공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP에 대한 분해 경로를 설명하기 위해 이러한 가속 조건을 선택하여 제조 및 취급 중에 DP가 겪을 수 있는 조건들을 시뮬레이션하였다. 공동 제형화된 DP에 대한 보관, 가속, 및 응력 안정성 조건의 개요는 표 12에 제시되어 있고, 분석 계획은 표 13에 제시되어 있다.

공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP(1:1:1, 50 mg/mL 총 단백질)에 대한 리서치 보관 안정성

공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP에 대한 3개월의 리서치 보관 안정성 데이터가 나타나 있다. 공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP는 5℃에서 3개월 동안 보관했을 때 물리적으로 안정하였다. 공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139PP, 및 H1H17161P DP(1:1:1, 50 mg/mL 총 단백질)를 5℃에서 3개월 동안 보관했을 때, 총 HMW 종에서 0.2%의 증가가 SE-UPLC에 의해 관찰되었으며, 5℃에서 18개월 동안 보관한 후, 총 HMW에서 0.6의 증가가 SE-UPLC에 의해 관찰되었다. 공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP(1:1:1, 50 mg/mL 총 단백질)의 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 다른 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다. H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P는 생물검정 분석에 의해 결정했을 때 3개월 평가 간격에 걸쳐 효능을 유지하였다. 표 14 참조.

공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP(1:1:1, 50 mg/mL 총 단백질)에 대한 리서치 가속 안정성

가속 조건 하에 인큐베이션한 후 공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP의 분석 결과는 4에 제공되어 있다. 45℃에서 28일 동안 인큐베이션한 후, 총 HMW 종의 상대량에서 1.3%의 증가(SE-UPLC)가 관찰되었다. 45℃에서 28일 동안 인큐베이션한 후, HH1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 산성 전하 변이체 종에서 각각 14.7%, 14.4%, 및 22.9%의 증가(CEX-UPLC)가 관찰되었다. 25℃에서 3개월 동안 인큐베이션한 후, HH1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 산성 전하 변이체 종에서 각각 2.6%, 2.5%, 및 5.6%의 증가(CEX-UPLC)가 관찰되었다. 가속 조건 하에 인큐베이션한 후 생물검정에 의해 결정했을 때 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P는 효능을 유지하였다. 가속 안정성 시험의 결과는, 총 HMW 종 및 총 LMW 종의 상대량 증가, 및 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P에 대한 산성 전하 변이체의 형성이 공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP (1:1:1, 50 mg/mL 총 단백질)에 대한 주된 분해 분해 경로였음을 입증하였다. 표 15 참조.

공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP(1:1:1, 50 mg/mL 총 단백질)에 대한 리서치 응력 안정성

공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP 응력 안정성 연구의 결과는 표 16에 제공되어 있다. 공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP를 120분 동안 교반했을 때(주변 온도에서 와동했을 때) 또는 8회의 동결/해동 사이클(-30℃에서 동결시키고 실온에서 해동함)을 거쳤을 때, 이들은 물리적으로 및 화학적으로 안정하였다. 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다. H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P는 DP를 120분 동안 교반했을 때 또는 8회의 동결/해동 사이클을 거쳤을 때 효능을 유지하였다. 표 16 참조.

공동 제형화된 H1H17203-3471-3479 완제 의약품에 대한 리서치 안정성 결론

보관 안전성 연구, 가속 안전성 연구, 및 응력 안정성 연구의 결과는, 공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP가 제조(충진/완료 및 라벨링 작업)하는 동안 안정할 것임을 나타낸다. H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 조합 DP 제형은 물리적 또는 화학적 안정성을 손상시키지 않으면서 실온에 대한 짧은 노출을 견딜 수 있다. H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P 조합 DP는 2℃ 내지 8℃에서 보관될 것이며 8℃를 초과하는 온도에 대한 노출은 제한될 것이다.

공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP를 2~8℃에서 장기 보관하는 것에 대해 36개월에 걸쳐 결정하였다(표 14). 5℃에서 에서 36개월 동안 보관한 후, 총 HMW 종 및 총 LMW 종에서 각각 0.7%의 증가가 관찰되었다. 산성 종에서 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P에 대해 1.1%, 1.2%, 및 7.3%의 변화가 각각 관찰되었다. 36개월의 연구 기간에 걸쳐 효능의 유의한 변화가 관찰되지 않았는데, 이는 항-EBOV 제형이 냉장 조건 하에서 허용 가능한 장기 보관 안정성을 제공하였음을 나타낸다.

가속 연구들의 결과가 아래 표 15에 제공되어 있다. 25℃에서 3개월 동안 인큐베이션한 후, 총 HMW 종 및 총 LMW 종의 상대량에서 0.6%의 증가가 관찰되었다. HH1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P에 대해 각각 2.6%, 2.5%, 및 5.6%의 산성 전하 변이체의 증가가 관찰되었다. 공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP는 가속 조건 하에 인큐베이션한 후 효능을 유지하였다. 45℃에서 28일 동안 인큐베이션한 후, 총 HMW 종의 상대량에서 1.3%의 증가가 관찰된 반면, 총 LMW 종에서의 증가는 1.9%였다.

공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP의 응력 안정성 연구 및 가속 안정성 연구의 결과는, 개별 제형으로부터와 유사하게, 공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP에 대한 총 HMW 종 및 총 LMW 종의 상대량, 및 산성 전하 변이체의 제한된 증가를 보여주었다.

응력 안정성 연구의 결과는, 공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP를 120분 동안 교반했을 때(주변 온도에서 와동했을 때) 또는 8회의 동결/해동 사이클을 거쳤을 때, 이들이 물리적으로 및 화학적으로 안정함을 보여주었다. 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다. 공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP를 교반했을 때 또는 이들이 동결/해동 사이클을 거쳤을 때 효능은 유지되었다.

결론

공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP는 IV 투여용 액체 DP로서 제조된다. H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP는 10 mM 히스티딘(pH 6.0), 0.1%(w/v) 폴리소르베이트 80, 및 10%(w/v) 수크로오스를 함유하는 용액으로 제형화된 16.7 mg/mL H1H17203P, 16.7 mg/mL H1H17139P, 및 16.7 mg/mL H1H17161P 항체를 함유할 수 있다. 본원의 연구 결과에 기초하여:

공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P DP는 2~8℃에서 적어도 3개월 동안 보관할 때 안정하다.

가속 조건 하에서 식별된 주요 분해 경로는 HMW 및 LMW 종 및 산성 전하 변이체의 형성이었다.

실시예 6: 상이한 완충액 및 pH가 미치는 영향

다양한 pH 범위의 일련의 완충액 시스템에서 100 mg/mL의 총 항체를 28일 동안 45℃에서 인큐베이션함으로써, 3개의 항-EBOV 항체의 열적 안정성에 완충액 및 pH가 미치는 영향을 액체 제형에서 조사하였다. 다음의 pH 및 완충액 시스템을 연구하였다: 구연산염(pH 5.2, 6.0, 6.8) 및 히스티딘(pH 5.2, 6.0, 6.8). SE-UPLC 분석 결과에 기초하여, 항체를 히스티딘 완충액에서 pH 6.0으로 제형화했을 때 최대 단백질 안정성이 관찰되었다(표 17~20 및 22~25). 미세 유체 영상화(MFI)을 사용하여 3원 항체 제형에서 육안으로 보이지 않는 미립자의 존재를 결정하였다(표 21).

CEX-UPLC 분석 결과에 기초하여, 항체를 히스티딘 완충액에서 pH 5.2 내지 6.8로 제형화하거나 구연산염 완충액에서 pH 5.2 내지 6.8로 제형화했을 때 최대 단백질 안정성이 관찰되었다. 이들 분석은 또한, 응집(즉, HMW 종의 형성), 단편화(즉, LMW 종의 형성), 및 전하 변이체의 형성이 주요 분해 경로였음을 보여주었다. 히스티딘 완충액을 제형화 완충액으로서 선택했는데, 이는 히스티딘 완충액이 HMW 및 LMW 종의 형성 및 전하 변이체의 형성과 관련하여 전체적으로 단백질 안정화의 최고 수준을 제공했기 때문이다. 제형에 대해 6.0의 pH를 선택하였는데, 이는 주요 분해 경로인 HMW 종 및 전하 변이체의 형성이 이 pH에서 최소화되었기 때문이다. 이러한 결과에 기초하여, 항-EBOV 개별 제형 및 조합 제형에 대해 pH 6.0의 10 mM 히스티딘 완충액을 선택하였다. 표 22~25 참조.

실시예 7: 응력 조건 하에서 안정화제의 선택

실시예 6에서, pH 6.0 및 10 mM L-히스티딘을 개별적으로 제형화된 항체 및 100 mg/mL 3원 공동 제형에 대한 최적의 완충액 시스템으로서 식별하였다. 열 안정화제, 계면활성제, 및 항산화제와 같은 추가 부형제를 이들이 강제 분해 및 안정성에 미치는 영향에 대해 본 실시예에서 평가하였다. 수크로오스, 계면활성제, 프롤린, 또는 메티오닌과 같은 안정화제는 종종 항체 제형에 첨가되어 액체 제형에서 단백질의 열 안정성을 증가시킨다. 액체 제형으로 별도로 또는 함께 제형화된 항-EBOV 항체는, 5% w/v 수크로오스 및 0.1% w/v 폴리소르베이트 80 또는 0.1% 폴리소르베이트 20과 함께 제형화될 때 가속 조건 하에서 개선된 안정성을 나타냈고, 와동 응력 하에서 유사한 안정성 결과를 나타냈다. (표 27~32). 표 26은 표 16~21에 대한 부형제 변수 및 각각의 제형을 제공한다. 염기성 제형은 33.3 mg/mL 항-EBOV 항체, 5% w/v 수크로오스, 및 10 mM 히스티딘을 함유한다.

실시예 8: 교반 응력에 대한 유기 공용매의 선택

계면활성제 및 유기 공용매와 같은 안정화제는 교반-유도 응집으로부터 단백질을 보호하기 위해 항체 제형에 자주 첨가된다. 33.3 mg/mL의 개별 항-EBOV 항체, 및 100 mg/mL의 3개의 항체 공동 제형화된 칵테일(1:1:1의 비율)의 교반 응력 안정성 및 열 안정성에 유기 공용매 및 계면활성제가 미치는 영향을 액체 제형에서 조사하였다. 앞의 실시예에서 폴리소르베이트 80이 중요한 부형제 성분으로 식별되었다. 본 실시예는 48시간 동안 250 rpm에서 궤도 진탕에 의해 유도된 교반 응력 하에 상이한 폴리소르베이트 80을 % w/v로 평가한다. 표 33~40 참조. 보여진 바와 같이, 염기성 제형은 33.3. mg/mL 단일 항체(또는 공동 제형 중 100 mg/mL 총 항체), 10 mM 히스티딘(pH 6.0), 5% w/v 수크로오스를 0.04% 내지 0.2% 폴리소르베이트 80과 함께 함유한다. 계면활성제를 함유하지 않는 제형은 ≥ 0.04% w/v PS80을 포함하는 제형과 비교하여 교반 응력 하에서 덜 안정적이다. 또한, ≥ 0.04% w/v 폴리소르베이트 80을 함유하는 제형들 간에는 MFI 및 SE-UPLC 결과에는 유의한 차이가 없다.

항-EBOV 항체는, 유기 공용매 또는 계면활성제가 없을 때 250 rpm에서 궤도 진탕에 의해 교반할 때 불안정하였다. 공용매 또는 계면활성제가 없는 상태에서 250 rpm으로 궤도 진탕에 의해 교반한 후, 용액은 혼탁해졌고, 탁도의 상당한 증가를 나타냈으며, SE-UPLC에 의해 결정했을 때 응집체가 증가하였을 뿐만 아니라, RP-UPLC에 의한 단백질 회수도 감소하였다. 대조적으로, 0.1% 폴리소르베이트 80은 교반-유도 불안정성으로부터 항체를 보호하였다.

실시예 9: 안정화제 농도의 선택

본 실시예의 목적은 완제 의약품 제형을 개발하는 데 사용될 수 있는 안정화 성분의 수준을 식별하여, 33.3 mg/mL의 개별 항-EBOV 항체 및 3개의 항체로 공동 제형화된 100 mg/mL의 칵테일(1:1:1의 비율)를 뒷받침하는 것이었다. 10% 수크로오스를 초기 제형에서 선택하고, 다양한 양으로 시험하여 항체 안정성의 임의의 변화를 평가하였다: 5%, 10%, 15%, 및 20%. 염기성 제형은 100 mg/mL 항체, pH 6.0의 10 mM 히스티딘, 및 0.1% 폴리소르베이트 80을 함유하였다.

저농도 제형을 개발하는 동안 항-EBOV 항체에 대한 열 안정화제로서 수크로오스를 선택하였다. 고농도 제형의 개발을 위해, 상이한 농도의 수크로오스를 100 mg/mL 농도의 항체의 안정성에 대해 25℃에서 0~6개월 동안 및 40℃에서 0~3개월 동안 평가하였다. 제형을 40℃에서 28일 동안 인큐베이션했을 때, 수크로오스 농도가 증가함에 따라 HMW 종의 형성이 감소하였다.

본 연구는, 10% w/v 수크로오스를 함유하는 제형의 단백질 안정성이 15% 또는 20% 수크로오스를 함유하는 제형과 비교했을 때 유사하고, 따라서 10% w/v를 초과하는 추가의 수크로오스가 필요하지 않음을 입증하였다. 표 41~48 참조.

실시예 10: 개별적으로 제형화된 H1H17203P C2P1 FDS, H1H17139P C2P1 FDS, 및 H1H17161P C2P1 FDS에 대한 제형화된 원료 의약품(FDS) 리서치 안정성 연구 (12개월)

리서치 및 임상 FDS는 유사한 공정을 사용하여 제조되며, 리서치 물질의 안정성을 평가하는 데 사용되는 방법은 임상 연구용으로 의도된 물질의 안정성을 평가하는 데 사용되는 방법과 유사하다. 결과적으로, 리서치 안정성 연구로부터 얻은 결과를 임상 연구용으로 의도된 물질의 안정성을 평가하는 데 사용할 수 있다.

본 장기 보관 안정성 연구는 -80℃ 및 -30℃에서 12개월에 걸쳐 H1H17203P C2P1 FDS, H1H17139P C2P1 FDS, 및 H1H17161P C2P1 FDS 안정성을 평가하였다. H1H17203P C2P1 FDS, H1H17139P C2P1 FDS, 및 H1H17161P C2P1 FDS는 -80°C 및 -30℃에서 보관될 때 적어도 12개월 동안 안정하다.

표 49에 제시된 바와 같이, 진행 중인 장기 안정성 연구는 안정성 프로토콜의 지속 기간 동안 계속된다. 샘플을 표 50에 개략된 분석 계획에 따라 분석하였다. 분석 계획, 예비 허용 기준, 및 샘플링 계획은 표 50에 제공되어 있다.

제형화된 원료 의약품 안정성 연구 결과

H1H17203P FDS의 장기 보관 리서치 안정성 연구 결과

리서치 안정성 연구에서, C2P1 FDS는 -80℃ 및 -30℃에서 보관될 때 물리적으로 및 화학적으로 안정한 것으로 밝혀졌다(각각 표 51 및 표 52). 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다. 장기 보관 조건에서 C2P1 FDS를 조사하는 리서치 안정성 연구는 84개월 동안 계속될 것이다.

H1H17203P FDS의 가속 안정성 연구 결과

리서치 안정성 연구는, C2P1 FDS가 -20℃에서 3개월 동안 및 5℃에서 56일 동안 보관했을 때 물리적으로 및 화학적으로 안정함을 나타냈다(표 53 및 표 54). 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다. 28일 동안 25℃/60% RH에서 보관한 후(표 54), HMW 종에서 0.3%의 경미한 증가가 H1H17203P에 대한 SE-UPLC에 의해 관찰되었다. 28일 동안 25℃/60% RH에서 인큐베이션한 후, 모니터링된 다른 속성에서 의미 있는 변화는 관찰되지 않았다. -20℃, 5℃, 및 25℃/60% RH의 가속 보관 조건 하에 C2P1 FDS를 조사하는 리서치 연구가 완료되었다.

H1H17203P FDS의 응력 안정성 연구 결과

40℃/75% RH의 응력 조건 하에 C2P1 FDS를 분석한 리서치 안정성 연구 결과가 표 55에 제공되어 있다. HMW 종에서 1.2%의 증가 및 LMW 종에서 0.4%의 증가가 SE-UPLC에 의해 관찰되었으며; 영역 1에서 11.1%의 증가가 CEX-UPLC에 의해 관찰되었다. 모니터링된 다른 속성에서 의미 있는 변화는 관찰되지 않았다. C2P1 FDS는 40℃/75% RH에서 28일 동안 인큐베이션한 후 효능을 유지하였다. 40℃/75% RH의 응력 보관 조건 하에 C2P1 FDS를 조사하는 리서치 연구가 완료되었다.

교반 및 동결/해동 조건 후 C2P1 FDS를 분석한 리서치 안정성 결과가 표 56에 제공되어 있다. C2P1 FDS는 120분 동안 교반했을 때 (주변 온도에서 와동했을 때) 또는 8회의 동결/해동 사이클(-30℃에서 동결시키고 실온에서 해동함)을 거쳤을 때 물리적으로 및 화학적으로 안정하였다. H1H17203P의 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 관찰되지 않았다. 교반 및 동결/해동 조건 하에서 C2P1 FDS를 조사하는 리서치 연구가 완료되었다.

H1H17139P FDS의 장기 보관 리서치 안정성 연구 결과

리서치 안정성 연구에서, C2P1 FDS는 -80℃ 및 -30℃에서 보관될 때 물리적으로 및 화학적으로 안정한 것으로 밝혀졌다(표 57 및 표 58). 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다. 장기 보관 조건에서 C2P1 FDS를 조사하는 리서치 안정성 연구는 84개월 동안 계속될 것이다.

H1H17139P FDS의 가속 안정성 연구 결과

리서치 안정성 연구는, C2P1 FDS가 -20℃에서 3개월 동안 및 5℃에서 56일 동안 보관했을 때 물리적으로 및 화학적으로 안정함을 나타냈다(표 59 및 표 60). 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다. 28일 동안 25℃/60% RH에서 보관한 후(표 60), HMW 종에서 0.3%의 경미한 증가가 SE-UPLC에 의해 관찰되었다. 28일 동안 25℃/60% RH에서 인큐베이션한 후, 모니터링된 다른 속성에서 의미 있는 변화는 관찰되지 않았다. -20℃, 5℃, 및 25℃/60% RH의 가속 보관 조건 하에 C2P1 FDS를 조사하는 리서치 연구가 완료되었다.

H1H17139P FDS의 응력 안정성 연구 결과

40℃/75% RH의 응력 조건 하에 C2P1 FDS를 분석한 리서치 안정성 연구 결과가 표 61에 제공되어 있다. HMW 종에서 0.9%의 증가 및 LMW 종에서 0.4%의 증가가 SE-UPLC에 의해 관찰되었으며; 영역 1에서 11.1%의 증가 및 영역 2에서 12.9%의 감소가 CEX-UPLC에 의해 관찰되었다. 모니터링된 다른 속성에서 의미 있는 변화는 관찰되지 않았다. C2P1 FDS는 40℃/75% RH에서 28일 동안 인큐베이션한 후 효능을 유지하였다. 40℃/75% RH의 응력 보관 조건 하에 C2P1 FDS를 조사하는 리서치 연구가 완료되었다.

교반 및 동결/해동 조건 후 C2P1 FDS를 분석한 리서치 안정성 결과가 표 62에 제공되어 있다. C2P1 FDS는 120분 동안 교반했을 때 (주변 온도에서 와동했을 때) 또는 8회의 동결/해동 사이클(-30℃에서 동결시키고 실온에서 해동함)을 거쳤을 때 물리적으로 및 화학적으로 안정하였다. H1H17139P의 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 관찰되지 않았다. 교반 및 동결/해동 조건 하에서 C2P1 FDS를 조사하는 리서치 연구가 완료되었다.

H1H17161P FDS의 장기 보관 리서치 안정성 연구 결과

리서치 안정성 연구에서, C2P1 FDS는 -80℃ 및 -30℃에서 보관될 때 물리적으로 및 화학적으로 안정한 것으로 밝혀졌다(표 63 및 표 64). 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다. 장기 보관 조건에서 C2P1 FDS를 조사하는 리서치 안정성 연구는 84개월 동안 계속될 것이다.

H1H17161P FDS의 가속 안정성 연구 결과

리서치 안정성 연구는, C2P1 FDS가 -20℃에서 3개월 동안 및 5℃에서 56일 동안 보관했을 때 물리적으로 및 화학적으로 안정함을 나타냈다(표 65 및 표 66). 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 검출되지 않았다. 28일 동안 25℃/60% RH에서 보관한 후(표 66), HMW 종에서 0.4%의 경미한 증가가 SE-UPLC에 의해 관찰되었다. 28일 동안 25℃/60% RH에서 인큐베이션한 후, 모니터링된 다른 속성에서 의미 있는 변화는 관찰되지 않았다. -20℃, 5℃, 및 25℃/60% RH의 가속 보관 조건 하에 C2P1 FDS를 조사하는 리서치 연구가 완료되었다.

H1H17161P FDS의 응력 안정성 연구 결과

40℃/75% RH의 응력 조건 하에 C2P1 FDS를 분석한 리서치 안정성 연구 결과가 표 67에 제공되어 있다. HMW 종에서 1.0%의 증가 및 LMW 종에서 0.4%의 증가가 SE-UPLC에 의해 관찰되었으며; 영역 1에서 14.4%의 증가가 CEX-UPLC에 의해 관찰되었다. 모니터링된 다른 속성에서 의미 있는 변화는 관찰되지 않았다. C2P1 FDS는 40℃/75% RH에서 28일 동안 인큐베이션한 후 효능을 유지하였다. 40℃/75% RH의 응력 보관 조건 하에 C2P1 FDS를 조사하는 리서치 연구가 완료되었다.

교반 및 동결/해동 조건 후 C2P1 FDS를 분석한 리서치 안정성 결과가 표 67에 제공되어 있다. C2P1 FDS는 120분 동안 교반했을 때 (주변 온도에서 와동했을 때) 또는 8회의 동결/해동 사이클(-30℃에서 동결시키고 실온에서 해동함)을 거쳤을 때 물리적으로 및 화학적으로 안정하였다. H1H17161P의 물리적 또는 화학적 안정성에 있어서 주목할 만한 변화는 모니터링된 속성 중 어느 하나에서도 관찰되지 않았다. 교반 및 동결/해동 조건 하에서 C2P1 FDS를 조사하는 리서치 연구가 완료되었다.

안정성 결론

H1H17203P C2P1 FDS, H1H17139P C2P1 FDS, 및 H1H17161P C2P1 FDS는 냉장, 실온, 및 교반 응력에 대한 짧은 노출을 각각 견딜 수 있고, 단백질의 물리적 또는 화학적 안정성을 손상시키지 않으면서 동결되고 및 해동될 수 있다. 이들 결과는, H1H17203P C2P1 FDS, H1H17139P C2P1 FDS, 및 H1H17161P C2P1 FDS가 3원 조합 완제 의약품(DP)을 제조하는 동안 안정함을 나타낸다. 실온보다 높은 온도에 H1H17203P C2P1 FDS, H1H17139P C2P1 FDS, 및 H1H17161P C2P1 FDS를 노출시키는 것은 피해야 한다.

권장 보관 조건

H1H17203P C2P1 FDS, H1H17139P C2P1 FDS, 및 H1H17161P C2P1 FDS에 대한 권장 장기 보관 온도는 -30℃이다.

실시예 11: 공동 제형화된 H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P C2P1 DP에 대한 제형화된 원료 의약품 리서치 안정성 연구

리서치 및 개발 용도로 제조된 조합 C2P1 DP에 대한 장기 보관, 가속, 및 응력 조건을 평가하기 위해 리서치 안정성 연구를 수행하였다. 6개월의 리서치 안정성 데이터를 5℃의 장기 보관 조건 및 6개월 25℃/60% RH의 가속 조건에 이용할 수 있다. 3개월 동안 40℃/75% RH, 교반, 및 동결과 해동의 응력 조건을 시험하는 연구가 완료되었다.

표 69는 조합 C2P1 DP를 조사하는 모든 안정성 연구를 기술한다. 안정성 샘플에 대한 분석 계획, 예비 허용 기준, 및 샘플링 계획은 표 70에 제공되어 있다.

표 69에 제시된 바와 같이, 안정성 연구는 안정성 프로토콜의 전체 기간 동안 계속될 것이다. 샘플을 표 70에 개략된 분석 계획에 따라 분석하였다.

장기 안정성 연구 결과

리서치 장기 안정성 연구에서, 조합 DP는 전체 평가 기간 동안 5℃에서 보관했을 때 물리적으로 및 화학적으로 안정하였다(표 71). 5℃에서 6개월 후, 모니터링된 속성 중 어느 것에서도 물리적 또는 화학적 안정성의 주목할 만한 변화는 검출되지 않았다. 장기 보관 조건 하에서 DP를 조사하는 리서치 안정성 연구는 84개월 동안 계속될 것이다.

가속 안정성 연구 결과

25℃/60% RH의 가속 조건 하에 DP를 분석한 리서치 안정성 연구 결과가 표 72에 제공되어 있다. 6개월의 평가 기간에 걸쳐, HMW 종에서 0.9%의 증가 및 LMW에서 0.3%의 증가가 SE-UPLC에 의해 관찰되었다. H1H17203P, H1H17139P, 및 H1H17161P에 상응하는 주요 피크에서 각각 2.0%, 3.1%, 및 5.1%의 감소가 CEX-UPLC에 의해 관찰되었다. DP는 25℃/60% RH에서 6개월 동안 인큐베이션한 후 효능을 유지하였다. HIAC에 의해 결정했을 때, 육안으로 보이지 않는 미립자 수준은 허용 기준 이내였다. 모니터링된 다른 속성에서 의미 있는 변화는 관찰되지 않았다. 25℃/60% RH의 가속 보관 조건 하에 DP를 조사하는 리서치 연구가 완료되었다.

응력 안정성 연구 결과

40℃/75% RH의 응력 조건 하에 DP를 분석한 리서치 안정성 연구 결과가 표 72에 제공되어 있다. 3개월의 평가 기간에 걸쳐, HMW에서 3.0%의 증가 및 LMW에서 1.3%의 증가가 SE-UPLC에 의해 관찰되었고; 순도에 있어서 3.8% 또는 7.8%의 감소 및 LMW 종에 있어서 1.8% 또는 6.4%의 증가가 환원 또는 비환원 MCE에 의해 각각 관찰되었으며; H1H17203P, H1H17139P, H1H17161P에 상응하는 주요 피크의 각각 9.3%, 11.5%, 및 11.4%의 감소가 CEX-UPLC에 의해 관찰되었다. DP는 슈도바이러스 중화 검정에 의해 결정했을 때, 효능을 유지하였다. DP는 40℃/75% RH에서 28일 동안 인큐베이션한 후 효능을 유지하였지만, ADCC 검정에 의해 결정했을 때, 3개월 동안 인큐베이션한 후 효능 감소를 나타냈다. HIAC에 의해 결정했을 때, 육안으로 보이지 않는 미립자 수준은 허용 기준 이내였다. 모니터링된 다른 속성에서 의미 있는 변화는 관찰되지 않았다. 40℃/75% RH의 응력 보관 조건 하에 DP를 조사하는 리서치 연구가 완료되었다.

교반 및 동결/해동 조건 후 DP를 분석한 리서치 안정성 결과가 표 73에 제공되어 있다. DP는 120분 동안 교반했을 때 (주변 온도에서 와동했을 때) 또는 4회의 동결/해동 사이클(-30℃에서 동결시키고 실온에서 해동함)을 거쳤을 때 물리적으로 및 화학적으로 안정하였다. DP의 물리적 또는 화학적 안정성에서 의미 있는 변화는 모니터링된 속성 중 어느 것에서도 관찰되지 않았다. 교반 및 동결/해동 조건 하에서 DP를 조사하는 리서치 연구가 완료되었다.

안정성 결론

조합 DP의 권장 보관 온도는 2℃~8℃이다. DP 안정성 연구의 데이터는 2℃ 내지 8℃에서 보관했을 때 완제 의약품이 안정하게 유지될 것임을 보여준다.

항체 서열

표 74는 본원에 선택된 항-에볼라 바이러스 항체의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 및 CDR의 아미노산 서열 식별자를 제시한다. 표 75는 전장 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열에 대한 서열 식별자를 제공한다.

본 개시는 본원에 기술된 특정 구현예에 의해 그 범위가 제한되지 않는다. 실제로, 본원에 기술된 것들 외에, 본 발명의 다양한 변형은 전술된 설명 및 첨부된 도면으로부터 당업자에게 명백해질 것이다. 이러한 변형은 첨부된 청구범위의 범위 이내에 포함되는 것으로 의도된다.

SEQUENCE LISTING <110> Regeneron Pharmaceuticals, Inc. CAO, Yuan LIU, Dingjiang XU, Long <120> STABLE ANTIBODY FORMULATION <130> 10668WO01 <140> TBD <141> 2021-01-22 <150> 62965786 <151> 2020-01-24 <160> 54 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 348 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 1 caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cgtctggctt caccttcaat aactatggca tgcactgggt ccgccaggct 120 ccaggcatgg ggctggagtg ggtggcagtt atatggcacg atggaagtga taaatactat 180 gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggctgtgt attactgtgc gagaaattgg 300 aacctctttg actactgggg ccagggaacc ctggtcactg tctcctca 348 <210> 2 <211> 116 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 2 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Asn Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Met Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Trp His Asp Gly 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Val 35 40 45 Ala Val Ile Trp His Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asn Trp Asn Leu Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 115 120 125 Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 130 135 140 Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 145 150 155 160 Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 165 170 175 Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 180 185 190 Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 195 200 205 Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 18 <211> 215 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 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Gly Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Thr Trp Phe Gly Glu Leu Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 21 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 21 ggattcacct tcagtagcta cgac 24 <210> 22 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 22 Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Asp 1 5 <210> 23 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 23 attggtactg ctggtgacac a 21 <210> 24 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 24 Ile Gly Thr Ala Gly Asp Thr 1 5 <210> 25 <211> 36 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 25 gcaagaacat ggttcgggga gctttacttt gactac 36 <210> 26 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 26 Ala Arg Thr Trp Phe Gly Glu Leu Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 27 <211> 339 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 27 gacatcgtga tgacccagtc tccagactcc 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Thr Ala Gly Asp Thr Tyr Tyr Pro Gly Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Glu Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Gly Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Thr Trp Phe Gly Glu Leu Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro 115 120 125 Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly 130 135 140 Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn 145 150 155 160 Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln 165 170 175 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser 180 185 190 Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser 195 200 205 Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr 210 215 220 His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 355 360 365 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 36 <211> 220 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 36 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser 20 25 30 Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Thr Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln 85 90 95 Tyr Tyr Ser Ser Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 115 120 125 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 130 135 140 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 145 150 155 160 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 165 170 175 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 180 185 190 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 195 200 205 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 220 <210> 37 <211> 354 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 37 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctctagc agctatgcca tgaactgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaaca attagtggta tgggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaagggga 300 tatccccatt cttttgatat ctggggccaa gggacaatgg tcaccgtctc ttca 354 <210> 38 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 38 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Ser Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Thr Ile Ser Gly Met Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Arg Gly Tyr Pro His Ser Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Met Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 39 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 39 ggattcacct ctagcagcta tgcc 24 <210> 40 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 40 Gly Phe Thr Ser Ser Ser Tyr Ala 1 5 <210> 41 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 41 attagtggta tgggtggtag caca 24 <210> 42 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 42 Ile Ser Gly Met Gly Gly Ser Thr 1 5 <210> 43 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 43 gcgaaaaggg gatatcccca ttcttttgat atc 33 <210> 44 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 44 Ala Lys Arg Gly Tyr Pro His Ser Phe Asp Ile 1 5 10 <210> 45 <211> 318 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 45 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctttttaa attggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaaactcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagattttg caacttacta ctgtcaacag agttacagta ccctcacctt cggccaaggg 300 acacgactgg agattaaa 318 <210> 46 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 46 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Phe 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 47 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 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Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Arg Gly Tyr Pro His Ser Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro 115 120 125 Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly 130 135 140 Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn 145 150 155 160 Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln 165 170 175 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser 180 185 190 Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser 195 200 205 Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr 210 215 220 His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 355 360 365 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 54 <211> 213 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 54 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Phe 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro 100 105 110 Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr 115 120 125 Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys 130 135 140 Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu 145 150 155 160 Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser 165 170 175 Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala 180 185 190 Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe 195 200 205 Asn Arg Gly Glu Cys 210

Claims

안정한 액체 약학적 제형으로서,
(a) 안정화제;
(b) 히스티딘을 포함하는 완충액;
(c) 폴리소르베이트를 포함하는 유기 공용매; 및
(d) 에볼라 바이러스(EBOV)에 특이적으로 결합하고, (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46으로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 가변 영역/경쇄 가변 영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 상보성 결정 영역(CDR)(HCDR1, HCDR2 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2 및 LCDR3)을 포함하는 적어도 하나의 항체를 포함하되;
제형은 (i), (ii), (iii), (i)+(ii), (i)+(iii), (ii)+(iii), 또는 (i)+(ii)+(ii)+(iii)을 포함하며;
제형은 6.0 ± 0.3의 pH를 갖는, 약학적 제형.
제1항에 있어서, 총 항체 농도는 5 mg/mL ± 0.75 mg/mL 내지 250 mg/mL ± 37.5 mg/mL인, 약학적 제형.
제1항에 있어서, 총 항체 농도는 25 mg/mL ± 3.75 mg/mL인, 약학적 제형.
제1항에 있어서, 총 항체 농도는 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL인, 약학적 제형.
제1항에 있어서, 총 항체 농도는 100 mg/mL ± 15.0 mg/mL인, 약학적 제형.
제1항에 있어서, 총 항체 농도는 150 mg/mL ± 22.5 mg/mL인, 약학적 제형.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 히스티딘 완충액 농도는 5 mM ± 1 mM 내지 20 mM ± 4 mM인, 약학적 제형.
제7항에 있어서, 히스티딘 완충액 농도는 10 mM ± 2 mM인, 약학적 제형.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 폴리소르베이트 농도는 0.01% ± 0.005% 내지 0.5% ± 0.25% w/v인, 약학적 제형.
제9항에 있어서, 폴리소르베이트 농도는 0.1% ± 0.05% w/v인, 약학적 제형.
제9항에 있어서, 폴리소르베이트 농도는 0.2% ± 0.1% w/v인, 약학적 제형.
제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 폴리소르베이트는 폴리소르베이트 80인, 약학적 제형.
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 안정화제는 수크로오스이고 수크로오스 농도는 0% 내지 20% ± 4% w/v인, 약학적 제형.
제13항에 있어서, 수크로오스 농도는 5% ± 1% 내지 15% ± 3% w/v인, 약학적 제형.
제14항에 있어서, 수크로오스 농도는 10% ± 2% w/v인, 약학적 제형.
제1항에 있어서, (i) + (ii)를 포함하는 약학적 제형.
제1항에 있어서, (i) + (iii)을 포함하는 약학적 제형.
제1항에 있어서, (ii) + (iii)을 포함하는 약학적 제형.
제1항에 있어서, (i) + (ii) + (iii)을 포함하는 약학적 제형.
제16항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) 5% ± 1% 내지 15% ± 3% w/v 수크로오스,
(b) 5 mM ± 1 mM 내지 20 mM ± 4 mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.01% ± 0.005% 내지 0.5% ± 0.25% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3인, 약학적 제형.
제16항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) 10% ± 2% w/v 수크로오스,
(b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3인, 약학적 제형.
제1항에 있어서,
(a) 10% ± 2% w/v 수크로오스,
(b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3이며;
항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는, 약학적 제형.
제1항에 있어서,
(a) 10% ± 2% w/v 수크로오스,
(b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3이며;
항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는, 약학적 제형.
제1항에 있어서,
(a) 10% ± 2% w/v 수크로오스,
(b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3이며;
항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는, 약학적 제형.
제1항에 있어서,
(a) 10% ± 2% w/v 수크로오스,
(b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3이며;
제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제2 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는, 약학적 제형.
제1항에 있어서,
(a) 10% ± 2% w/v 수크로오스,
(b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3이며;
제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제2 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는, 약학적 제형.
제1항에 있어서,
(a) 10% ± 2% w/v 수크로오스,
(b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3이며;
제1 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제2 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는, 약학적 제형.
제1항에 있어서,
(a) 10% ± 2% w/v 수크로오스,
(b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3이며;
제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제2 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제3 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는, 약학적 제형.
제16항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) 5% ± 1% 내지 15% ± 3% w/v 수크로오스,
(b) 5 mM ± 1 mM 내지 20 mM ± 4 mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.01% ± 0.005% 내지 0.5% ± 0.25% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3인, 약학적 제형.
제16항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
(a) 10% ± 2% w/v 수크로오스,
(b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3인, 약학적 제형.
제1항에 있어서,
(a) 10% ± 2% w/v 수크로오스,
(b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3이며;
항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는, 약학적 제형.
제1항에 있어서,
(a) 10% ± 2% w/v 수크로오스,
(b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3이며;
항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는, 약학적 제형.
제1항에 있어서,
(a) 10% ± 2% w/v 수크로오스,
(b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3이며;
항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는, 약학적 제형.
제1항에 있어서,
(a) 10% ± 2% w/v 수크로오스,
(b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3이며;
제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제2 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는, 약학적 제형.
제1항에 있어서,
(a) 10% ± 2% w/v 수크로오스,
(b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3이며;
제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제2 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는, 약학적 제형.
제1항에 있어서,
(a) 10% ± 2% w/v 수크로오스,
(b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3이며;
제1 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제2 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는, 약학적 제형.
제1항에 있어서,
(a) 10% ± 2% w/v 수크로오스,
(b) 10mM ± 2mM 히스티딘 완충액,
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트, 및
(d) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항체를 포함하고,
pH는 6.0 ± 0.3이며;
제1 항체는 (i) 서열번호 2/10의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제2 항체는 (ii) 서열번호 20/28의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하고, 제3 항체는 (iii) 서열번호 38/46의 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍에 함유된 3개의 중쇄 CDR(HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3) 및 3개의 경쇄 CDR(LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3)을 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 제형은 10 cP 미만의 점도를 갖는, 약학적 제형.
제29항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 제형은 5 cP 미만의 점도를 갖는, 약학적 제형.
제20항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 제형은 약 2.5 미만의 점도를 갖는, 약학적 제형.
제1항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 45℃에서 28일 후에 항체의 적어도 90%는 고유 종인, 약학적 제형.
제1항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 45℃에서 28일 후에 항체의 적어도 18%는 항체의 주요 전하 변이체인, 약학적 제형.
제1항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 25℃에서 3개월 후에 항체의 적어도 96%는 고유 종인, 약학적 제형.
제1항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 25℃에서 3개월 후에 항체의 적어도 30%는 항체의 주요 전하 변이체인, 약학적 제형.
제1항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 5℃에서 12개월 후에 항체의 적어도 96%는 고유 종인, 약학적 제형.
제1항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, 5℃에서 12개월 후에 항체의 적어도 34%는 항체의 주요 전하 변이체인, 약학적 제형.
제1항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 120분 교반 후에 항체의 적어도 97%는 고유 종인, 약학적 제형.
제1항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, 120분 교반 후에 항체의 적어도 35%는 항체의 주요 전하 변이체인, 약학적 제형.
제1항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 8회의 동결 해동 사이클 후에 항체의 적어도 97%는 고유 종인, 약학적 제형.
제1항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 8회의 동결 해동 사이클 후에 항체의 적어도 35%는 항체의 주요 전하 변이체인, 약학적 제형.
제1항, 제5항, 및 제29항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 제형은 5℃에서 6개월 동안 보관한 후의 ADCC 생물 검정에서, 5℃에서 6개월 동안 보관하기 전의 동일한 제형에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 ADCC 효능을 유지하는, 약학적 제형.
제1항, 제5항, 제29항 내지 제37항, 및 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 제형은 5℃에서 6개월 동안 보관한 후, 5℃에서 6개월 동안 보관하기 전의 동일한 제형에 비해 적어도 약 95%의 슈도바이러스 중화 활성을 유지하는, 약학적 제형.
제1항, 제5항, 제29항 내지 제37항, 및 제52항 중 어느 한 항에 있어서, 제형은 25℃/60% RH에서 6개월 동안 보관한 후의 ADCC 생물 검정에서, 25℃/60% RH에서 6개월 동안 보관하기 전의 동일한 제형에 비해 적어도 약 80% 또는 적어도 약 85%의 ADCC 효능을 유지하는, 약학적 제형.
제1항, 제5항, 제29항 내지 제37항, 및 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 제형은 25℃/60% RH에서 6개월 동안 보관한 후, 25℃/60% RH에서 6개월 동안 보관하기 전의 동일한 제형에 비해 적어도 약 95%의 슈도바이러스 중화 활성을 유지하는, 약학적 제형.
제1항, 제5항, 제29항 내지 제37항, 및 제54항 중 어느 한 항에 있어서, 제형은 40℃/75% RH에서 6개월 동안 보관한 후, 40℃/75% RH에서 6개월 동안 보관하기 전의 동일한 제형에 비해 적어도 약 95%의 슈도바이러스 중화 활성을 유지하는, 약학적 제형.
제1항, 제5항, 제29항 내지 제37항, 및 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 제형은 120분 동안 교반한 후의 ADCC 생물 검정에서, 120분 동안 교반하기 전의 동일한 제형에 비해 적어도 약 95%의 ADCC 효능을 유지하는, 약학적 조성물.
제1항, 제5항, 제29항 내지 제37항, 및 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 제형은 8회의 동결/해동 사이클 후의 ADCC 생물 검정에서, 8회의 동결/해동 사이클 전의 동일한 제형에 비해 적어도 약 85%의 ADCC 효능을 유지하는, 약학적 조성물.
제1항, 제5항, 제29항 내지 제37항, 및 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 제형은 120분 동안 교반한 후에, 120분 동안 교반하기 전의 동일한 제형에 비해 적어도 약 95%의 슈도바이러스 중화 활성을 유지하는, 약학적 제형.
제1항, 제5항, 제29항 내지 제37항, 및 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 제형은 8회의 동결/해동 사이클 후에, 8회의 동결/해동 사이클 전의 동일한 제형에 비해 적어도 약 95%의 슈도바이러스 중화 활성을 유지하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제59항 중 어느 한 항에 있어서, 제형 내의 항체는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 속성을 갖는, 약학적 제형:
(i) 항체는 -80℃에서 12개월 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 ADCC 활성에 비해 적어도 약 90%의 활성을 유지함;
(ii) 항체는 -30℃에서 12개월 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 ADCC 활성에 비해 적어도 약 80% 또는 적어도 약 90%의 활성을 유지함;
(iii) 항체는 -20℃에서 3개월 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 ADCC 활성에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함;
(iv) 항체는 5℃에서 56일 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 ADCC 활성에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함;
(v) 항체는 25℃/60% 상대 습도(RH)에서 28일 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 ADCC 활성에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함;
(vi) 항체는 40℃/75% RH에서 28일 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 ADCC 활성에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함;
(vii) 항체는 120분 동안 교반 후 또는 8회의 동결/해동 사이클 후, 교반 또는 동결/해동 전의 동일한 항체의 ADCC 활성에 비해 각각 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함.
제1항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 제형 내의 항체는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 속성을 갖는, 약학적 제형:
(i) 항체는 -80℃에서 12개월 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 슈도바이러스 중화 활성에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함;
(ii) 항체는 -30℃에서 12개월 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 슈도바이러스 중화 활성에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함;
(iii) 항체는 -20℃에서 3개월 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 슈도바이러스 중화 활성에 비해 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함;
(iv) 항체는 5℃에서 56일 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 슈도바이러스 중화 활성에 비해 적어도 약 80% 또는 적어도 약 85% 또는 적어도 약 90%의 활성을 유지함;
(v) 항체는 25℃/60% 상대 습도(RH)에서 28일 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 슈도바이러스 중화 활성에 비해 적어도 약 80% 또는 적어도 약 85% 또는 적어도 약 90%의 활성을 유지함;
(vi) 항체는 40℃/75% RH에서 28일 동안 보관한 후, 보관 이전의 동일한 항체의 슈도바이러스 중화 활성에 비해 적어도 약 80% 또는 적어도 약 85% 또는 적어도 약 90%의 활성을 유지함; 및
(vii) 항체는 120분 동안 교반 후 또는 8회의 동결/해동 사이클 후, 교반 또는 동결/해동 전의 동일한 항체의 슈도바이러스 중화 활성에 비해 각각 적어도 약 90% 또는 적어도 약 95%의 활성을 유지함.
안정한 액체 약학적 제형으로서,
(a) EBOV에 특이적으로 결합하는 적어도 하나의 항체로서, (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46으로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 가변 영역/경쇄 가변 영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 포함하고, 총 항체는 50 mg/mL ± 7.5 mL를 포함하는, 적어도 하나의 항체,
(b) 10 mM ± 2 mM 히스티딘 완충액 (pH 6.0 ± 0.3),
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트 80, 및
(d) 10% ± 2% w/v 수크로오스를 포함하되;
(i) 5℃에서 12개월 후, 항체의 적어도 96%는 고유 종이고;
(ii) 120분 교반 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종이거나;
(iii) 8회의 동결 해동 사이클 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종인, 약학적 제형.
제62항에 있어서, (a) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항체, (b) 10 mM ± 2 mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트 80, 및 (d) 물 중 10% ± 2% w/v 수크로오스로 이루어지고, pH는 6.0 ± 0.3인, 약학적 제형.
안정한 액체 약학적 제형으로서,
(a) EBOV에 특이적으로 결합하는 적어도 2개의 항체로서, (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46으로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 가변 영역/경쇄 가변 영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 포함하고, 총 항체는 50 mg/mL ± 7.5 mL를 포함하는, 적어도 2개의 항체,
(b) 10 mM ± 2 mM 히스티딘 완충액 (pH 6.0 ± 0.3),
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트 80, 및
(d) 10% ± 2% w/v 수크로오스를 포함하되;
(i) 5℃에서 12개월 후, 항체의 적어도 96%는 고유 종이고;
(ii) 120분 교반 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종이고;
(iii) 8회의 동결 해동 사이클 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종인, 약학적 제형.
제64항에 있어서, (a) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항체, (b) 10 mM ± 2 mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트 80, 및 (d) 물 중 10% ± 2% w/v 수크로오스로 이루어지고, pH는 6.0 ± 0.3인, 약학적 제형.
안정한 액체 약학적 제형으로서,
(a) EBOV에 특이적으로 결합하는 3개의 항체의 조합으로서, 3개의 항체는 (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46의 중쇄 가변 영역/경쇄 가변 영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 각각 포함하고, 총 항체는 50 mg/mL ± 7.5 mL를 포함하는, 항체의 조합,
(b) 10 mM ± 2 mM 히스티딘 완충액 (pH 6.0 ± 0.3),
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트 80, 및
(d) 10% ± 2% w/v 수크로오스를 포함하되;
(i) 5℃에서 12개월 후, 항체의 적어도 96%는 고유 종이고;
(ii) 120분 교반 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종이고;
(iii) 8회의 동결 해동 사이클 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종인, 약학적 제형.
제66항에 있어서, (a) 50 mg/mL ± 7.5 mg/mL 총 항체, (b) 10 mM ± 2 mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트 80, 및 (d) 물 중 10% ± 2% w/v 수크로오스로 이루어지고, pH는 6.0 ± 0.3인, 약학적 제형.
안정한 액체 약학적 제형으로서,
(a) EBOV에 특이적으로 결합하는 적어도 하나의 항체로서, (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46으로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 가변 영역/경쇄 가변 영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 포함하고, 총 항체는 100 mg/mL ± 15 mL를 포함하는, 적어도 하나의 항체,
(b) 10 mM ± 2 mM 히스티딘 완충액 (pH 6.0 ± 0.3),
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트 80, 및
(d) 10% ± 2% w/v 수크로오스를 포함하되;
(i) 5℃에서 12개월 후, 항체의 적어도 96%는 고유 종이고;
(ii) 120분 교반 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종이고;
(iii) 8회의 동결 해동 사이클 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종인, 약학적 제형.
제68항에 있어서, (a) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항체, (b) 10 mM ± 2 mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트 80, 및 (d) 물 중 10% ± 2% w/v 수크로오스로 이루어지고, pH는 6.0 ± 0.3인, 약학적 제형.
안정한 액체 약학적 제형으로서,
(a) EBOV에 특이적으로 결합하는 적어도 2개의 항체로서, (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46으로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 가변 영역/경쇄 가변 영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 포함하고, 총 항체는 100 mg/mL ± 15 mL를 포함하는, 적어도 2개의 항체,
(b) 10 mM ± 2 mM 히스티딘 완충액 (pH 6.0 ± 0.3),
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트 80, 및
(d) 10% ± 2% w/v 수크로오스를 포함하되;
(i) 5℃에서 12개월 후, 항체의 적어도 96%는 고유 종이고;
(ii) 120분 교반 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종이고;
(iii) 8회의 동결 해동 사이클 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종인, 약학적 제형.
제70항에 있어서, (a) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항체, (b) 10 mM ± 2 mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트 80, 및 (d) 물 중 10% ± 2% w/v 수크로오스로 이루어지고, pH는 6.0 ± 0.3인, 약학적 제형.
안정한 액체 약학적 제형으로서,
(a) EBOV에 특이적으로 결합하는 3개의 항체의 조합으로서, 3개의 항체는 (i) 서열번호 2/10, (ii) 서열번호 20/28, 및 (iii) 서열번호 38/46의 중쇄 가변 영역/경쇄 가변 영역(HCVR/LCVR) 아미노산 서열 쌍을 각각 포함하고, 총 항체는 100 mg/mL ± 15 mL를 포함하는, 항체의 조합,
(b) 10 mM ± 2 mM 히스티딘 완충액 (pH 6.0 ± 0.3),
(c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트 80, 및
(d) 10% ± 2% w/v 수크로오스를 포함하되;
(i) 5℃에서 12개월 후, 항체의 적어도 96%는 고유 종이고;
(ii) 120분 교반 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종이고;
(iii) 8회의 동결 해동 사이클 후, 항체의 적어도 97%는 고유 종인, 약학적 제형.
제72항에 있어서, (a) 100 mg/mL ± 15 mg/mL 총 항체, (b) 10 mM ± 2 mM 히스티딘 완충액, (c) 0.1% ± 0.05% w/v 폴리소르베이트 80, 및 (d) 물 중 10% ± 2% w/v 수크로오스로 이루어지고, pH는 6.0 ± 0.3인, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 4의 HCDR1, 서열번호 6의 HCDR2, 서열번호 8의 HCDR3, 서열번호 12의 LCDR1, 서열번호 14의 LCDR2, 및 서열번호 16의 LCDR3을 포함하는, 약학적 제형.
제74항에 있어서, 항체는 서열번호 2의 HCVR 및 서열번호 10의 LCVR를 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 2와 90% 서열 동일성을 갖는 HCVR을 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 10과 90% 서열 동일성을 갖는 LCVR을 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 2와 90% 서열 동일성을 갖는 HCVR 및 서열번호 10과 90% 서열 동일성을 갖는 LCVR을 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 중쇄 및 경쇄를 포함하고, 중쇄는 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 중쇄 및 경쇄를 포함하고, 경쇄는 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 17/18의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄/경쇄를 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 22의 HCDR1, 서열번호 24의 HCDR2, 서열번호 26의 HCDR3, 서열번호 30의 LCDR1, 서열번호 32의 LCDR2, 및 서열번호 34의 LCDR3을 포함하는, 약학적 제형.
8제82항에 있어서, 항체는 서열번호 20의 HCVR 및 서열번호 28의 LCVR를 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 20과 90% 서열 동일성을 갖는 HCVR을 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 28과 90% 서열 동일성을 갖는 LCVR을 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 20과 90% 서열 동일성을 갖는 HCVR 및 서열번호 28과 90% 서열 동일성을 갖는 LCVR을 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 중쇄 및 경쇄를 포함하고, 중쇄는 서열번호 35의 아미노산 서열을 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 중쇄 및 경쇄를 포함하고, 경쇄는 서열번호 36의 아미노산 서열을 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 35/36의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄/경쇄를 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 40의 HCDR1, 서열번호 42의 HCDR2, 서열번호 44의 HCDR3, 서열번호 48의 LCDR1, 서열번호 50의 LCDR2, 및 서열번호 52의 LCDR3을 포함하는, 약학적 제형.
제90항에 있어서, 항체는 서열번호 38의 HCVR 및 서열번호 46의 LCVR를 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 38과 90% 서열 동일성을 갖는 HCVR을 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 46과 90% 서열 동일성을 갖는 LCVR을 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 38과 90% 서열 동일성을 갖는 HCVR 및 서열번호 46과 90% 서열 동일성을 갖는 LCVR을 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 중쇄 및 경쇄를 포함하고, 중쇄는 서열번호 53의 아미노산 서열을 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 중쇄 및 경쇄를 포함하고, 경쇄는 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 53/54의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄/경쇄를 포함하는, 약학적 제형.
제1항 내지 제86항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제형은 용기에 담기는, 약학적 제형.
제98항에 있어서, 용기는 바이알인, 약학적 제형.
제99항에 있어서, 바이알은 10 mL 1형 투명 유리 바이알인, 약학적 제형.
제98항에 있어서, 용기는 주사기인, 약학적 제형.
제101항에 있어서, 주사기는 저-텅스텐 유리인, 약학적 제형.
제98항에 있어서, 용기는 미리 충진된 주사기인, 약학적 제형.
제103항에 있어서, 자가주사기에 담기는 약학적 제형.
제1항 내지 제97항 중 어느 한 항의 약학적 제형, 용기, 및 지침을 포함하는 키트.
제105항에 있어서, 상기 용기는 유리 바이알인, 키트.
제105항에 있어서, 용기는 미리 충진된 주사기인, 키트.
제105항에 있어서, 용기는 자가주사기인, 키트.
제19항에 있어서, 1:1:1의 비율인 약학적 제형.
제1항 내지 제97항 중 어느 한 항에 있어서, 정맥 내 투여, 근육 내 투여, 피하 투여, 복강 내 투여, 경피 투여, 점막 투여, 비강 투여, 폐 투여, 또는 경구 투여용으로 제형화되는 약학적 제형.