KR20220131905A - 급성 심부전 치료 - Google Patents

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라스 에이치. 룬드
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Abstract

본 발명은 개체에서 급성 심부전(AHF)의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 그렐린 분자뿐만 아니라 상응하는 방법 및 용도를 제공한다. 본 발명은 개체에서 AHF의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 관련 조성물 및 부품의 키트를 추가로 제공한다.

Description

급성 심부전 치료
본 발명은 일반적으로 급성 심부전(Acute Heart Failure; AHF)의 치료에 관한 것이다.
AHF는 환자의 심장 기능의 급격한 손실을 수반하는 명백하게 식별 가능한 심장 질환으로서, 이는 종종 사망으로 이어질 수 있다. AHF는 가장 흔한 입원 원인이다(Ambrosy et al., 2014). 특히 문제가 되는 두 가지 유형의 AHF는 급성 비대상성 심부전(acute decompensated heart failure; ADHF) 및 급성 비대상성 만성 심부전(acute decompensated chronic heart failure; ADCHF)이다.
ADHF 및 ADCHF에서, 병원내 사망률은 5 내지 10%이며, 평균 입원 기간은 5 내지 8일이다. 환자의 50% 이상이 해결되지 않은 증상(symptom)을 갖고 퇴원하고, 다른 연구에서 30일 또는 60일 이내에 절반은 다시 증상이 악화되고, 1/4은 재입원하고, 10% 이상이 사망하였다(Baker et al., 2003; Curtis et al., 2008; Gheorghiade et al., 2006; Go et al., 2014; and Polanczyk et al., 2000). 인구 와이드 레지스트리에서 1년 간의 사망률은 25 내지 35%이다(Lund, 2017). 1990년대 후반에 결과의 개선 후, ADCHF의 예후는 2000년 이후 개선되지 않았다(Baker et al., 2003; Curtis et al., 2008; Polanczyk et al., 2000; and Thorvaldsen et al., 2016). 심부전에 대한 사회 비용은 2010년에서 2030년 사이에 3배 증가할 것으로 예상되며, 이 비용의 대부분은 ADCHF와 관련된다(Heididich et al., 2013).
현재 AHF, ADHF 또는 ADCHF 환자의 사망률 또는 재입원을 감소시키는데 이용 가능한 요법이 없다. 일부 상황에서는 이뇨제가 증상 완화에 사용된다.
치료에 대한 하나의 특별한 도전은 그 상태가 환자가 심장 부정맥(heart arrhythmias), 저혈압(hypotension) 및 허혈(ischemia)과 같은 생리학적 변화에 매우 민감하도록 유도하는 AHF이다. 그 민감한 상태는 다수의 약물(예: 이노트로프 약물)이 AHF에서 더 나쁜 결과에 기여하는 문제가 되는 생리적 변화를 유발한다는 것을 의미한다.
따라서, AHF, 특히 ADHF 및 ADCHF는 치료하기 어렵고 비용이 많이 들며, 이는 건강 서비스에 대한 경제적 부담을 초래한다. 따라서, AHF, 특히 ADHF 및 ADCHF에 대한 새롭고 효과적인 치료법을 개발하려는 요구가 크다.
이러한 배경에 대해, 본 발명자들은 그렐린을 사용하여 AHF, 특히 ADHF 및 ADCHF에 대한 새로운 치료법을 개발하였다.
따라서, 본 발명의 제1 측면은 개체(individual)에서 급성 심부전(AHF)의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 그렐린 분자(ghrelin molecule)를 제공한다.
본 발명의 제2 측면은 개체에서 급성 심부전(AHF)의 치료 및/또는 예방을 위한 약제의 제조에서 그렐린 분자의 용도를 제공한다.
본 발명의 제3 측면은 개체에서 급성 심부전(AHF)의 치료 및/또는 예방 방법을 제공하며, 상기 방법은 그렐린 분자를 상기 개체에 투여하는 단계를 포함한다.
AHF는 개체의 심장 기능(예: 혈액의 흐름을 유지하는 데 있어서 심장의 기능)이 짧은 기간에 걸쳐 급격히 악화되는 경우에 개체에서 발생한다. 개체는 개체가 호흡 곤란(a shortness of breath)(호흡 곤란(dyspnea)으로도 칭명됨), 피로(fatigue), 기침(coughing), 부어 오른 조직(부종(edema)으로도 칭명됨), 현기증(dizziness) 및/또는 어질어질함(light-headedness)을 포함하는 심부전과 관련된 증상의 급속한 발병을 나타내는 경우 AHF를 갖는 것으로 진단될 수 있다. AHF를 갖는 개체가 치료되지 않으면, 개체의 심장이 기능을 중단하여 개체의 사망으로 이어질 수 있다. 의학 분야의 숙련자는 개체가 AHF를 갖는지를 식별할 수 있을 것이다.
그렐린은 28 아미노산 펩티드 호르몬이다. 일반적으로, 그렐린은 개체의 위장관에서 세포로부터 혈류로 분비되는 것으로 공지되어 있으며, 에너지 사용의 분포 및 속도 뿐만 아니라 식욕을 조절하는 기능을 한다. 그렐린은 이노트로프 제제 로 작용하고, 심장 부정맥 증가, 저혈압 및 허혈을 포함하여 AHF 환자에게 매우 위험한 부작용을 나타내는 것으로 간주되었다(Abraham et al., 2005; Cuffe et al., 2002; Mebasaa et al., 2007; and Packer et al., 2013). 이러한 예상되는 위험한 부작용으로 인해, 그렐린은 AHF의 치료로서 적합한 것으로 간주되지 않았다.
그 배경에 대해, 발명자들은 이제 놀랍게도 그렐린이 이노트로프이지만 예상된 부작용을 나타내지 않으며 AHF를 치료하는데 적합하고 매우 효과적임을 식별하였다. 본 발명자들은 그렐린이 기능하는 메커니즘을 입증하였고, 이는 심장 근육 수축성을 증가시키지만, 심장 근육 세포에서 Ca2 + 농도를 증가시키는 대신 기존의 Ca2+에 대한 감도(sensitivity)를 증가시킴으로써 이노트로프 약물과 관련된 AHF 환자에 대해 이전에 예상된 위험 부작용(특히, 심장 부정맥, 저혈압 및 허혈)을 갖지 않을 것임을 보여주었다. 본 발명자들은 또한 AHF와 밀접하게 관련되지만 덜 심각한 진행성 심부전 환자에서 그렐린 치료에 대한 인간 연구를 수행하였고, 이는 그렐린이 증상 및 심장 출력(heart output)을 개선하는데 효과적이고 환자의 생존을 악화시키지 않았음을 보여주었다. 윤리적 이유로 이 연구에 대해 AHF 환자 대신 진행성 심부전 환자가 사용되었는데, 이는 심부전 상태가 덜 심각한 인간 환자에 대해 초기에 그렐린을 테스트하는 것이 더 안전했기 때문이다.
용어 "치료" 및 "예방"은 의학 분야의 숙련자에 의해 이해될 것이다.
"치료"란, 개체, 특히 인간에서 AHF의 임의의 치료를 포함하고, 임의로 다음과 같은 효과 중 하나 이상을 포함한다:
(i) AHF를 억제하는, 예를 들어, AHF의 발달을 늦추거나, 감소시키거나 정지시키는 것;
(ii) AHF를 완화시키는, 예를 들어, AHF를 갖는 개체에서 AHF의 회귀를 유발하는 것;
(iii) AFH를 치유하는, 예를 들어 AHF를 갖는 개체를 AHF가 더 이상 검출되지 않는 건강 상태로 회복시키는 것; 및/또는
(iv) AHF가 해결될 때, 만성 심부전(HF)의 진행 및/또는 발병을 감소 및/또는 억제하는 것.
"예방"이란, 개체, 특히 인간에서 AHF의 임의의 예방적 치료를 포함하고, 임의로 다음과 같은 효과 중 하나 이상을 포함한다:
(i) AHF가 개체(예: AHF에 걸리기 쉽거나 발병할 위험이 있지만, 아직 AHF를 갖는 것으로 진단되지 않은 개체)에서 발생하는 것을 방지하는, 예를 들어, 개체에서 AHF가 발달하는 것을 중지하는 것;
(ii) 개체에서 AHF의 발병을 지연시키는, 예를 들어, 개체가 개체의 삶 후반까지 AHF를 발달시키는 것을 지연시키는 것;
(iii) 개체에서 AHF의 발생을 제한하는, 예를 들어, 개체가 AHF에 의해 영향을 받는 정도를 줄이는 것;
(iv) 개체에서 AHF의 하나 이상의 증상을 예방하는, 예를 들어, 개체가 AHF의 하나 이상의 증상을 발달시키는 것을 중지시키는 것; 및/또는
(v) 개체의 죽음과 같은 AHF의 합병증을 예방하는 것 및/또는 초기 에피소드가 해결되고/되거나 치료된 후 AHF의 반복 에피소드를 갖는 것.
한 구현예에서, 개체는 AHF를 갖는 것으로 의심된다.
AHF의 급속한 발병으로 인해, 일부 상황에서는 AHF의 진단이 확인되기 전에 AHF가 단지 의심되는 경우, 그렐린과 같은 치료법을 투여할 필요가 있을 수 있다. 따라서, "AHF를 갖는 것으로 의심되는"이란 개체가 하나 이상의 AHF의 징후 및/또는 증상을 나타내지만, 그 개체는 아직 AHF의 진단을 받지 않았다는 것을 포함한다.
한 구현예에서, 개체는 치료학적 유효량의 그렐린 분자가 투여된다.
의학 분야의 숙련가는 그렐린의 "치료적 유효량"이 무엇인지 이해할 것이다. "치료적 유효량"이란, AHF의 치료 또는 예방과 관련된 임상 결과를 포함하여 유익하거나 목적하는 결과에 영향을 미치기에 충분한 그렐린의 양을 포함한다.
하나의 구현예에서, AHF는 심장 좌측의 AHF 또는 심장의 우측의 AHF이다. 바람직하게는, AHF는 심장의 좌측에 있다.
의학 분야의 숙련가에게 공지된 바와 같이, 심장은 해부학적으로 좌측과 우측으로 분리된다. 심장의 각 측면은 두 개의 챔버, 심실 및 심방으로 분리된다. 따라서, 심장의 우측은 우심실 및 우심방을 포함하고, 심장의 좌측은 좌심실 및 좌심방을 포함한다. 산소가 적은 혈액은 상대정맥 및 하대정맥으로부터 우심방으로 들어간 다음, 우심실로 통과한다. 이어서, 혈액은 산소를 수용하는 폐 순환을 통해 폐로 펌핑된다. 산소가 많은 혈액은 좌심방으로 들어가고 좌심실로 통과하며, 여기서 대동맥을 통해 전신 순환으로 펌핑된다. 따라서, "심장 우측의 AHF"란 우심방 및/또는 우심실이 AHF의 대상체임을 포함한다. "심장의 좌측의 AHF"란, 좌심방 및/또는 좌심실이 AHF의 대상체임을 포함한다.
한 구현예에서, AHF는 급성 비대상성 심부전(ADHF); 고혈압(hypertension)과 관련된 AHF: 빈맥(tachycardia)-매개 AHF; 폐 부종(pulmonary edema)과 관련된 AHF; 심장성 쇼크 AHF; 또는 심각한 심장성 쇼크 AHF를 포함하거나 이로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
급성 비대상성 심부전(ADHF)은 기존의 심부전을 갖는 개체, 심부전에 걸리기 쉬운 개체, 그 개체가 새로운 심부전 증상 및/또는 징후로 특성화될 수 있는 단기간에 걸쳐 심장 기능의 급격한 악화, 기존의 심부전 증상 및/또는 증후의 악화 및/또는 추가 심부전 증상 및/또는 증후의 수의 급격한 증가를 나타낼 때 발생한다. 특히 관련된 증상 및 징후는 호흡 곤란, 부어 오른 다리, 현기증, 어질어질함 및/또는 피로이다. 의학 분야의 숙련가는 개체가 ADHF를 갖는지를 식별할 수 있을 것이다.
고혈압과 관련된 AHF는 상기 기재된 바와 같은 AHF와 유사하지만, 이의 우세한 증상 또는 징후는 고혈압이다. 의학 분야의 숙련가는 개체가 고혈압과 관련된 AHF를 갖는지를 식별할 수 있을 것이다.
빈맥 매개 AHF는 상기 기재된 바와 같은 AHF와 유사하지만, 이의 우세한 증상 또는 징후는 빈맥이다. 의학 분야의 숙련가는 빈맥 매개 AHF를 갖는지를 식별할 수 있을 것이다.
폐 부종과 관련된 AHF는 상기 기재된 바와 같은 AHF와 유사하지만, 이의 우세한 증상 또는 징후는 폐 부종이다. 의학 분야의 숙련가는 개체가 폐부종과 관련된 AHF를 갖는지를 식별할 수 있을 것이다.
심장성 쇼크 AHF는 상기 기재된 바와 같은 AHF와 유사하지만, 이의 우세한 증상 또는 징후는 심장성 쇼크이다. 의학 분야의 숙련가는 개체가 심장성 쇼크 AHF를 갖는지를 식별할 수 있을 것이다.
심각한 심장성 쇼크 AHF는 상기 기재된 바와 같은 AHF와 유사하지만, 이의 우세한 증상 또는 징후는 심각한 심장성 쇼크이다. 의학 분야의 숙련가는 개체가 심각한 심장성 쇼크 AHF를 갖는지를 식별할 수 있을 것이다.
바람직한 구현예에서, 급성 비대상성 심부전(ADHF)은 급성 비대상성 만성 심부전(ADCHF)(급성 비대상성 울혈성 심부전(Acute Decompensated Congestive Heart Failure)으로도 공지됨) 또는 울혈성 ADHF, 보다 바람직하게는 급성 비대상성 만성 심부전(ADCHF)이다.
급성 비대상성 만성 심부전(ADCHF)은 기존 만성 심부전(CHF)을 갖는 개체에서 발생한다. CHF는 장기간(예: 적어도 수개월 및 종종 수년)에 걸쳐 점진적으로 악화되는 개체의 심장 기능을 특징으로 하며, 이는 심부전의 증상 및/또는 징후의 점진적인 악화 및/또는 출현에 의해 진단될 수 있다. ADCHF는 증상: 호흡 곤란, 부종 및/또는 피로를 특징으로 하는 CHF를 갖는 개체와 특히 관련이 있다. ADCHF는 CHF를 갖는 개체가 단기간(예: 몇 주 내지 며칠 동안)에 걸쳐 심장 기능의 급격한 악화를 나타낼 때 발생한다. ADCHF에 대한 예후는 환자가 일반적으로 CHF에 대한 치료를 받고 있지만, 그 치료에도 불구하고 악화되기 때문에, 특히 불량하다. 의학 분야의 숙련가는 개체가 ADCHF를 갖는지를 식별할 수 있을 것이다.
AHF (및, 특히 ADHF 및 ADCHF)는 CHF 환자가 호흡 곤란(호흡 곤란) 없이 휴식시 안정적이고, 장기 기능이 악화되지 않도록 적절한 심장 출력을 갖기 때문에 CHF와 다르다. 반대로, AHF (및, 특히 ADHF 및 ADCHF) 환자는 다른 증상들 중 휴식 상태에서도 호흡 곤란과 부적절한 심장 기능을 갖는다.
AHF (및, 특히 ADHF 및 ADCHF) 환자에 존재하지만 CHF 환자에는 존재하지 않는 다른 증상은 저산소혈증(hypoxemia), 부종 악화, 급심한 체중 증가, 상승된(예: 상승 수준의) 바이오마커(biomarker)(예: BNP 및 NT-proBNP), 신장 기능 악화(추정 사구체 여과율의 악화로 측정됨), 저혈압, 현기증 및/또는 어질어질함이다.
울혈성 ADHF는 AHF 및 ADHF와 유사하고, 울혈성 ADHF를 갖는 개체는 유사한 증상을 나타낼 것이다. 그러나, 울혈성 ADHF에서 개체는 특히 유체 보유에 취약하며, 이는 호흡 곤란, 피로 및 부종으로 이어진다.
다른 바람직한 구현예에서, 급성 비대상성 만성 심부전(ADCHF)은 심각한 ADCHF이다.
심각한 ADCHF는 심장의 기능이 매우 빠른 속도로(예: 며칠 내지 몇 시간 동안) 악화되는 CHF를 갖는 개체에서 발생한다. 심각한 ADCHF는 저혈압, 쇼크, 부정맥 및 광범위한 허혈을 나타내는 개체로서 특성화된다. 심각한 ADCHF를 갖는 개체의 사망률은 50% 이상으로 높다. ADCHF에 대한 예후는 환자가 일반적으로 CHF에 대한 치료를 받고 있지만, 그 치료에도 불구하고 빠르게 악화되기 때문에, 특히 불량하다. 심각한 ADCHF를 갖는 환자는 당업계에 공지된 치료법(예: 이뇨제, 산소, 현재 존재하는 이노트로프 및/또는 혈관 확장제)으로 치료된다면 생존할 가능성이 거의 없다. 의학 분야의 숙련가는 개체가 심각한 ADCHF를 갖는지를 식별할 수 있을 것이다.
한 구현예에서, 개체는 CHF를 가졌다. 의학 분야의 숙련가는, 예를 들어, 개체의 병력에 기초하여, 개체가 CHF를 가졌는지를 확인할 수 있을 것이다. 일부 상황에서, 개체는 이전에 CHF를 앓았거나 진단받았을 수 있고, 완전히 회복되었거나 완전히 회복되었었다고 간주되었다. "완전히 회복된"이란, 개체가 임의의 CHF 증상을 갖지 않음을 포함한다.　
한 구현예에서, 개체는 진행성 심부전을 가졌다. 진행성 심부전은 만성 심부전의 진행된 형태이므로, 때로는 진행성 만성 심부전으로 지칭된다. 진행성 심부전과 진행성 만성 심부전은 경계선 안정 형태의 질환이다. AHF 환자와 달리, 진행성 심부전 또는 진행성 만성 심부전 환자는 일반적으로 병원보다는 집에서 보살핌을 받는다. 의학 분야의 숙련가는, 예를 들어, 개체의 병력에 기초하여, 개체가 진행성 만성 심부전을 앓고 있는지 여부를 확인할 수 있다. 일부 상황에서, 개체는 이전에 진행성 만성 심부전을 앓았거나 진단받았고, 회복되었거나 회복되었던 것으로 간주되었다. "회복된"이란, 개체가 임의의 진행성 심부전 증상을 갖지 않는 완전히 회복된; 및 개체가 감소된 수의 진행성 심부전 증상 및/또는 진행성 심부전 증상의 심각도의 감소를 갖는 부분적으로 회복된을 포함한다. 다른 상황에서, 개체는 AHF의 발병 또는 진단 직전에 진행성 만성 심부전을 앓았거나 앓고 있는 것으로 진단될 수 있으며, 이에 의해 그 개체가 하나 이상의 AHF 증상의 제시 직전에 하나 이상의 진행성 심부전 증상을 가졌음을 포함한다. 다른 방법으로, 진행성 만성 심부전은 AHF로 악화된다. 본 발명의 구현예들은 또한 AHF를 추가로 갖는 개체 없이 현재 진행성 심부전을 갖는 개체의 치료에 적용할 수 있다는 것을 이해할 것이다.
한 구현예에서, AHF는 ADCHF 또는 심각한 ADCHF이고, 개체는 만성 신부전(CHF)을 약 1년 이상 동안; 예를 들어, 약 13개월 이상; 약 14개월 이상; 약 15개월 이상; 약 16개월 이상; 약 17개월 이상; 약 18개월 이상; 약 19개월 이상; 약 20개월 이상; 약 21개월 이상; 약 22개월 이상; 약 23개월 이상; 약 2년 이상; 약 25개월 이상; 약 26개월 이상; 약 27개월 이상; 약 28개월 이상; 약 29개월 이상; 약 30개월 이상; 약 31개월 이상; 약 32개월 이상; 약 33개월 이상; 약 34개월 이상; 약 35개월 이상; 약 3년 이상; 약 37개월 이상; 약 38개월 이상; 약 39개월 이상; 약 40개월 이상; 약 41개월 이상; 약 42개월 이상; 약 43개월 이상; 약 44개월 이상; 약 45개월 이상; 약 46개월 이상; 약 47개월 이상; 약 4년 이상; 약 49개월 이상; 약 50개월 이상; 약 51개월 이상; 약 52개월 이상; 약 53개월 이상; 약 54개월 이상; 약 55개월 이상; 약 56개월 이상; 약 57월 이상: 약 58개월 이상; 약 59개월 이상; 약 5년 이상; 약 66개월 이상; 약 6년 이상; 약 78개월 이상; 약 7년 이상; 약 90개월 이상; 약 8년 이상; 약 102개월 이상; 약 9년 이상; 약 114개월 이상; 또는 약 10년 이상, 바람직하게는 약 2년 이상 또는 약 3년 이상 동안 가졌다. 대안적인 구현예에서, AHF는 ADCHF 또는 심각한 ADCHF이고, 개체는 만성 심부전(CNF)을 약 1년 이하 동안; 예를 들어, 약 11개월 이하; 약 10개월 이하; 약 9개월 이하; 약 8개월 이하; 약 7개월 이하; 약 6개월 이하; 약 5개월 이하; 약 4개월 이하; 약 3개월 이하; 약 2개월 이하; 또는 약 1개월 이하 동안 가졌다.
의학 분야의 숙련가는, 예를 들어, 개체의 병력에 기초하여 ADCHF 또는 심각한 ADCHF의 발병 전에 개체가 CHF를 얼마나 오래 보유했었는지를 확인할 수 있을 것이다. 따라서, "AHF는 ADCHF 또는 심각한 ADCHF이고, 개체는 만성 심부전(CHF)을 가졌다"란, 다음을 포함한다:
개체가 ADCHF 또는 심각한 ADCHF 발병 전의 기간 동안 CHF, 또는 CHF의 하나 이상의 증상을 가졌다는 것; 및/또는
개체가 ADCHF 또는 심각한 ADCHF 발병 전의 기간 동안 CHF로 진단되었다는 것; 및/또는
개체가 ADCHF 또는 심각한 ADCHF의 진단 전의 기간 동안 CHF, 또는 CHF의 하나 이상의 증상을 가졌다는 것; 및/또는
개체가 ADCHF 또는 심각한 ADCHF의 진단 전의 기간 동안 CHF로 진단되었다는 것.
한 구현예에서, 개체는 이전에 AHF, 바람직하게는 ADCHF를 가졌다. 의학 분야의 숙련가는, 예를 들어, 개체의 병력에 기초하여, 개체가 이전에 AHF를 가졌는지를 확인할 수 있을 것이다. 일부 상황에서, 개체는 이전에 AHF를 갖졌었거나 진단을 받았을 수 있고, 회복되었거나 회복되었었다고 간주되었다. 그러나, AHF로부터 이전에 회복된 개체에 이어서, 개체는 이제 AHF 재발을 겪고 있다.
따라서, "개체가 이전에 AHF를 가졌다"란, 다음을 포함한다:
개체가 이전에 AHF로부터 완전히 회복되었지만(예를 들어, 개체가 임의의 AHF 증상을 갖지 않았고/않았거나, 더 이상 AHF를 갖는 것으로 진단되지 않았다), 이제 개체가 재발되었다(예를 들어, 개체가 이제 하나 이상의 AHF 증상을 갖고/갖거나 다시 AHF를 갖는 것으로 진단된다)는 것; 및/또는
개체가 이전에 AHF로부터 부분적으로 회복되었지만(예를 들어, 개체가 이전에 AHF 증상 수의 감소 및/또는 AHF 증상의 심각도의 감소를 가졌다), 이제 개체가 재발되었다(예를 들어, 개체가 이제 AHF 증상의 수의 증가 및/또는 AHF 증상의 심각도의 증가를 갖는다)는 것.
한 구현예에서, AHF는 심근 경색(myocardial infarction)과 관련되지 않는다.
심근 경색은 또한 심장 마비(heart attack)로서 공지되어 있다. 심근 경색은 심장의 일부로의 혈액의 흐름이 감소되거나 정지될 때 발생하며, 이는 심장을 손상시킨다. 의학 분야의 숙련가는 개체가 심근 경색을 앓았는지 및 AHF가 심근 경색과 관련되는지 여부를 식별할 수 있을 것이다. 따라서, "AHF는 심근 경색과 관련되지 않는다"란, AHF가 심근 경색에 의해 유발되지 않고/않거나; AHF의 발병 또는 진단은 심근 경색과 관련되지 않는다는 것을 포함한다.
바람직한 구현예에서, 개체는 심근 경색을 앓은 것으로 진단되지 않았고/않았거나 개체는 심근 경색을 가졌다고 의심되지 않는다.
한 구현예에서, 개체는 약 1개월 이하 동안; 예를 들어, 약 3주 이하; 약 2주 이하; 약 1주 이하; 약 6일 이하; 또는 약 5일 이하 동안 심근 경색을 갖지 않았다.
한 구현예에서, AHF는 데노보 AHF가 아니다. 대안적인 구현예에서, AHF는 데노보 AHF이다.
데노보 AHF는 이전 심부전 병력이 없는 개체에서 AHF이며, 개체가 급성 원인(예: 심근염(myocarditis))으로 인해 단기간에 걸쳐 심장 기능의 급격한 악화를 나타낼 때 발생한다. 의학 분야의 숙련가는 개체가 데노보 AHF를 갖는지를 식별할 수 있을 것이다.
한 구현예에서, 그렐린 분자의 투여 후, 개체는 증가된 심장 출력; 및/또는 증가된 심장 수축; 및/또는 증가된 심장 박출량(heart stroke volume); 및/또는 증가된 심실 기능; 및/또는 증가된 심실 박출 계수(ventricular ejection fraction); 및/또는 감소된 트로포닌 I 인산화; 및/또는 증가된 칼슘 감도; 및/또는 감소된 세포내 cAMP; 및/또는 개선된 신장 기능; 및/또는 개선된 추정 사구체 여과율(eGFR); 및/또는 개선된 호흡 곤란; 및/또는 개선된 부종; 및/또는 감소된 바이오마커; 및/또는 감소된 저혈압; 및/또는 심장성 쇼크의 해결; 및/또는 감소된 현기증; 및/또는 감소된 어질어질함; 및/또는 감소된 동맥 정맥 산소(arterio venous oxygen; AV02) 차이; 및/또는 폐 혈류(PBF)의 증가; 및/또는 감소된 추정 전신 혈관 저항(eSVR); 및/또는 감소된 폐 모세관 쐐기 압력; 및/또는 감소된 좌심실 말단 확장기 압력; 및/또는 감소된 좌심실 말단 확장기 용적; 및/또는 감소된 폐 동맥압; 및/또는 감소된 중앙정맥압을 포함하거나 이로 이루어진 그룹으로부터의 하나 이상의 파라미터를 나타낸다.
"개체가 나타낸다"란, 개체의 지정된 파라미터(예: 심장 출력)의 변화가 검출 가능하고/하거나 관찰 가능하다, 예를 들어, 그렐린 분자의 투여 후, 개체의 증가된 심장 출력이 검출 가능하고/하거나 관찰 가능하다는 것을 포함한다. 의학 분야의 숙련가는 개체가 임의로 상기 언급된 파라미터를 나타내는지를 식별할 수 있을 것이다.
개체가 그렐린 분자의 투여 후에 나타내는 파라미터의 임의의 변화는 일반적으로 그렐린 분자의 투여 이전의 동일한 파라미터의 측정과 비교된다. 예를 들어, 그렐린 분자의 투여 후 개체의 심장 출력은 그렐린 분자의 투여 전 개체의 심장 출력과 비교될 때 증가될 것이다.
바람직한 구현예에서, 그렐린 분자의 투여 후, 개체는 증가된 심장 출력; 및/또는 감소된 동맥 산소(AV02)의 차이; 및/또는 폐 혈류(PBF)의 증가; 및/또는 감소된 추정 전신 혈관 저항(eSVR)을 포함하거나 이로 이루어진 그룹으로부터의 하나 이상의 파라미터를 나타낸다. 이러한 특정 파라미터는 특히 AHF와 관련이 있으므로, 개체가 그렐린이 목적하는 효과를 갖는다는 것을 나타내는 것처럼 개체가 그들 중 어느 하나를 나타내면 특히 관련이 있다. 보다 바람직한 구현예에서, 그렐린 분자의 투여 후, 개체는 증가된 심장 출력을 나타낸다.
한 구현예에서, 상기 그렐린 분자는 개체에서 하나 이상의 파라미터의 변화를 일으키며, 여기서 상기 하나 이상의 파라미터는 증가된 심장 출력; 및/또는 증가된 심장 수축; 및/또는 증가된 심장 박출량; 및/또는 증가된 심실 기능; 및/또는 증가된 심실 박출 계수; 및/또는 감소된 트로포닌 I 인산화; 및/또는 증가된 칼슘 감도; 및/또는 감소된 세포내 cAMP; 및/또는 개선된 신장 기능; 및/또는 개선된 추정 사구체 여과율(eGFR); 및/또는 개선된 호흡 곤란; 및/또는 개선된 부종; 및/또는 감소된 바이오마커; 및/또는 감소된 저혈압; 및/또는 심장성 쇼크의 해결; 및/또는 감소된 현기증; 및/또는 감소된 어질어질함; 및/또는 감소된 동맥 정맥 산소(AV02) 차이; 및/또는 폐 혈류(PBF)의 증가; 및/또는 감소된 추정 전신 혈관 저항(eSVR); 및/또는 감소된 폐 모세관 쐐기 압력; 및/또는 감소된 좌심실 말단 확장기 압력; 및/또는 감소된 좌심실 말단 확장기 용적; 및/또는 감소된 폐 동맥압; 및/또는 감소된 중앙정맥압을 포함하거나 이로 이루어진 그룹으로부터 유래된다.
"그렐린 분자가 변화를 일으킨다"란, 지정된 파라미터가 그렐린 분자의 투여후 개체에서 변경 및/또는 변형된다는 것을 포함한다. 의학 분야의 숙련가는 그렐린 분자가 전술한 파라미터 중 어느 하나에서 변화를 일으키는지를 할 수 있을 것이다.
바람직한 구현예에서, 그렐린 분자는 개체에서 하나 이상의 파라미터의 변화를 일으키며, 여기서 상기 하나 이상의 파라미터는 증가된 심장 출력; 및/또는 감소된 동맥 정맥 산소(AV02) 차이; 및/또는 폐 혈류(PBF)의 증가; 및/또는 감소된 추정 전신 혈관 저항(eSVR)을 포함하거나 이로 이루어진 그룹으로부터 유래된다. 바람직한 구현예에서, 그렐린 분자는 개체에서 변화를 유발하며, 이는 증가된 심장 출력이다.
파라미터를 측정하기 위한 방법은 의학 분야의 숙련가에게 공지될 것이다.
한 구현예에서, 심장 출력은 다음과 같은 경우에 증가된다:
심장 출력량이 약 1.5리터/분 이상; 예를 들어, 약 1.6리터/분 이상; 약 1.7리터/분 이상; 약 1.8리터/분 이상; 약 1.9리터/분 이상; 약 2리터/분 이상; 약 2.1리터/분 이상; 약 2.2리터/분 이상; 약 2.3리터/분 이상; 약 2.4리터/분 이상; 약 2.5리터/분 이상; 약 2.6리터/분 이상; 약 2.7리터/분 이상; 약 2.8리터/분 이상; 약 2.9리터/분 이상; 약 3리터/분 이상; 약 3.1리터/분 이상; 약 3.2리터/분 이상; 약 3.3리터/분 이상; 약 3.4리터/분 이상; 약 3.5리터/분 이상; 약 3.6리터/분 이상; 약 3.7리터/분 이상; 약 3.8리터/분 이상; 약 3.9리터/분 이상; 약 4리터/분 이상; 약 4.1리터/분 이상; 약 4.2리터/분 이상; 약 4.3리터/분 이상; 약 4.4리터/분 이상; 약 4.5리터/분 이상; 약 4.6리터/분 이상; 약 4.7리터/분 이상; 약 4.8리터/분 이상; 약 4.9리터/분 이상; 약 5리터/분 이상; 약 5.1리터/분 이상; 약 5.2리터/분 이상; 약 5.3리터/분 이상; 약 5.4리터/분 이상; 약 5.5리터/분 이상; 약 5.6리터/분 이상; 약 5.7리터/분 이상; 약 5.8리터/분 이상; 약 5.9리터/분 이상; 약 6리터/분 이상; 약 6.5리터/분 이상; 약 7리터/분 이상; 약 7.5리터/분 이상; 약 8리터/분 이상; 약 8.5리터/분 이상; 약 9리터/분 이상; 약 9.5리터/분 이상; 또는 약 10리터/분 이상, 바람직하게는 약 5.2리터/분 이상인 경우; 및/또는
심장 출력량이 약 0.1리터/분 이상; 예를 들어, 약 0.15리터/분 이상; 약 0.2리터/분 이상; 약 0.25리터/분 이상; 약 0.3리터/분 이상; 약 0.35리터/분 이상; 약 0.4리터/분 이상; 약 0.45리터/분 이상; 약 0.5리터/분 이상; 약 0.55리터/분 이상; 약 0.6리터/분 이상; 약 0.65리터/분 이상; 약 0.7리터/분 이상; 약 0.75리터/분 이상; 약 0.8리터/분 이상; 약 0.85리터/분 이상; 약 0.9리터/분 이상; 약 0.95리터/분 이상; 약 1리터/분 이상; 약 1.05리터/분 이상; 약 1.1리터/분 이상; 약 1.15리터/분 이상; 약 1.2리터/분 이상; 약 1.25리터/분 이상; 약 1.3리터/분 이상; 약 1.35리터/분 이상; 약 1.4리터/분 이상; 약 1.45리터/분 이상; 약 1.5리터/분 이상; 약 1.55리터/분 이상; 약 1.6리터/분 이상; 약 1.65리터/분 이상; 약 1.7리터/분 이상; 약 1.75리터/분 이상; 약 1.8리터/분 이상; 약 1.85리터/분 이상; 약 1.9리터/분 이상; 약 1.95리터/분 이상; 약 2리터/분 이상; 약 2.5리터/분 이상; 약 3리터/분 이상; 약 4리터/분 이상; 또는 약 5리터/분 이상, 바람직하게는 약 0.5리터/분 이상; 보다 바람직하게는 약 1.15리터/분 이상 증가하는 경우; 및/또는
심장 출력량이 약 5% 이상; 예를 들어, 약 6% 이상; 약 7% 이상; 약 8% 이상; 약 9% 이상; 약 10% 이상; 약 11% 이상; 약 12% 이상; 약 13% 이상; 약 14% 이상; 약 15% 이상; 약 16% 이상; 약 17% 이상; 약 18% 이상; 약 19% 이상; 약 20% 이상; 약 25% 이상; 약 30% 이상; 약 35% 이상; 약 40% 이상; 약 45% 이상; 약 50% 이상; 약 55% 이상; 약 60% 이상; 약 65% 이상; 약 70% 이상; 약 75% 이상; 약 80% 이상; 약 85% 이상; 약 90% 이상; 약 95% 이상; 약 100% 이상; 약 105% 이상; 약 110% 이상; 약 115% 이상; 약 120% 이상; 약 125% 이상; 약 130% 이상; 약 135% 이상; 약 140% 이상; 약 145% 이상; 약 150% 이상; 약 155% 이상; 약 160% 이상; 약 165% 이상; 약 170% 이상; 약 175% 이상; 약 180% 이상; 약 185% 이상; 약 190% 이상; 약 195% 이상; 또는 약 200% 이상, 더욱 바람직하게는 약 15% 이상; 더욱 더 바람직하게는 약 25% 이상 증가하는 경우.
심장 출력을 측정하는 방법의 일례는 불활성 가스 재호흡 기술을 사용하는 것, 예를 들어, Innocor® 장치(Innovision, Odense, Denmark)를 사용하는 것이다. 대안적인 기술에는 심 초음파(echocardiogram) 검사, 픽 방법(Fick method), 열 희석, 및 지시제 희석에 의한 것이 포함되고, 이는 의료 분야의 숙련자에게 공지된 기술이다.
한 구현예에서, 심장 출력은 불활성 가스 재호흡 기술을 사용하여 측정된다.
대안적인 구현예에서, 심장 출력은 심 초음파 검사, 또는 픽 방법, 또는 열 희석에 의해 또는 지시제 희석에 의해 측정된다.
바람직한 구현예에서, 심장 출력은 심장 출력량이 약 5.2리터/분 이상인 경우 증가된다.
대안적인 바람직한 구현예에서, 심장 출력은 심장 출력량이 약 0.5리터/분 이상; 보다 바람직하게는 약 1.15리터/분 이상 증가하면 증가된다.
일부 구현예에서, 심장 출력은 대리 파라미터, 예를 들어, 혈압, 및/또는 소변 출력, 및/또는, 확고한 맥박, 및/또는 약한 맥박, 및/또는 따뜻한 사지(예: 팔 및 다리), 및/또는 차가운 사지(예: 팔 및 다리), 및/또는 혈청 크레아티닌의 수준, 및/또는 추정 사구체 여과율을 사용하여 측정될 수 있다. 의학 분야의 숙련가는 그 대리 파라미터의 측정이 개체의 심장 출력이 증가됨을 증명하기 위해 사용될 수 있는 방법을 이해할 것이다.
한 구현예에서, 심장 수축은 다음과 같은 경우에 증가된다:
약 2% 이상; 예를 들어, 약 3% 이상; 약 4% 이상; 약 5% 이상; 약 6% 이상; 약 7% 이상; 약 8% 이상; 약 9% 이상; 약 10% 이상; 약 11% 이상; 약 12% 이상; 약 13% 이상; 약 14% 이상; 약 15% 이상; 약 16% 이상; 약 17% 이상; 약 18% 이상; 약 19% 이상; 약 20% 이상; 약 25% 이상; 약 30% 이상; 약 35% 이상; 약 40% 이상; 약 45% 이상; 약 50% 이상; 약 55% 이상; 약 60% 이상; 약 65% 이상; 약 70% 이상; 약 75% 이상; 약 80% 이상; 약 85% 이상; 약 90% 이상; 또는 약 95% 이상, 바람직하게는 약 3% 이상의 절대적 퍼센트 분획 단축(absolute percent fractional shortening)의 증가가 존재하는 경우; 및/또는
약 20% 이상; 예를 들어, 약 25% 이상; 약 30% 이상; 약 35% 이상; 약 40% 이상; 약 45% 이상; 약 50% 이상; 약 55% 이상; 약 60% 이상; 약 65% 이상; 약 70% 이상; 약 75% 이상; 약 80% 이상; 약 85% 이상; 약 90% 이상; 또는 약 95% 이상, 바람직하게는 약 42% 이상의 상대적 퍼센트 분획 단축의 증가가 존재하는 경우.
용어 "절대적 퍼센트 분획 단축" 및 "상대적 퍼센트 분획 단축"은 의학 분야의 숙련가에게 공지될 것이다. 절대적 퍼센트 분획 단축의 증가는 후 및 전(예: 그렐린 분자의 투여 후 및 전) 퍼센트 분획 단축의 차이(예: 이전 분획 단축을 뺀 후 분획 단축)일 수 있다. 상대적 퍼센트 분획 단축의 증가는 이전의 값으로 나누어진 후 및 전(예: 그렐린 분자의 투여 후 및 전) 사이의 차이(예: 이전의 분획 단축으로 나누어진 (이전 분획 단축을 뺀 후 분획 단축))일 수 있다.
바람직한 구현예에서, 심장 수축은 약 3% 이상의 절대적 퍼센트 분획 단축의 증가가 있으면 증가된다.
대안적인 바람직한 구현예에서, 심장 수축은 약 42% 이상의 상대적 퍼센트 분획 단축의 증가가 있는 경우 증가된다.
한 구현예에서, 심장 박출량은 다음과 같은 경우에 증가된다:
심장 박출량이 약 30ml 이상; 예를 들어, 약 31ml 이상; 약 32ml 이상; 약 33ml 이상; 약 34ml 이상; 약 35ml 이상; 약 36ml 이상; 약 37ml 이상; 약 38ml 이상; 약 39ml 이상; 약 40ml 이상; 약 41ml 이상; 약 42ml 이상; 약 43ml 이상; 약 44ml 이상; 약 45ml 이상; 약 46ml 이상; 약 47ml 이상; 약 48ml 이상; 약 49ml 이상; 약 50ml 이상; 약 51ml 이상; 약 52ml 이상; 약 53ml 이상; 약 54ml 이상; 약 55ml 이상; 약 56ml 이상; 약 57ml 이상; 약 58ml 이상; 약 59ml 이상; 약 60ml 이상; 약 61ml 이상; 약 62ml 이상; 약 63ml 이상; 약 64ml 이상; 약 65ml 이상; 약 66ml 이상; 약 67ml 이상; 약 68ml 이상; 약 69ml 이상; 약 70ml 이상; 약 71ml 이상; 약 72ml 이상; 약 73ml 이상; 약 74ml 이상; 약 75ml 이상; 약 76ml 이상; 약 77ml 이상; 약 78ml 이상; 약 79ml 이상; 약 80ml 이상; 약 85ml 이상; 약 90ml 이상; 약 95ml 이상; 또는 약 100ml 이상, 바람직하게는 약 69ml 이상; 보다 바람직하게는 약 79ml 이상인 경우; 및/또는
심장 박출량이 약 3ml 이상; 예를 들어, 약 4ml 이상; 약 5ml 이상; 약 6ml 이상; 약 7ml 이상; 약 8ml 이상; 약 9ml 이상; 약 10ml 이상; 약 11ml 이상; 약 12ml 이상; 약 13ml 이상; 약 14ml 이상; 약 15ml 이상; 약 16ml 이상; 약 17ml 이상; 약 18ml 이상; 약 19ml 이상; 약 20ml 이상; 약 25ml 이상; 약 30ml 이상; 약 35ml 이상; 약 40ml 이상; 약 45ml 이상; 또는 약 50ml 이상 증가하는 경우; 및/또는
심장 박출량이 약 5% 이상; 예를 들어, 약 10% 이상; 약 15% 이상; 약 20% 이상; 약 25% 이상; 약 30% 이상; 약 35% 이상; 약 40% 이상; 약 45% 이상; 약 50% 이상; 약 55% 이상; 약 60% 이상; 약 65% 이상; 약 70% 이상; 약 75% 이상; 약 80% 이상; 약 85% 이상; 약 90% 이상; 또는 약 95% 이상, 더욱 바람직하게는 약 15% 이상, 훨씬 더 바람직하게는 약 25% 이상 증가하는 경우.
한 구현예에서, 심장 박출량은 약 30ml 내지 약 100ml; 예를 들어, 약 40ml 내지 약 100ml; 약 50ml 내지 약 100ml; 약 60ml 내지 약 100ml; 약 70ml 내지 약 100ml; 약 80ml 내지 약 100ml; 또는 약 90ml 내지 약 100ml인 경우에 증가된다.
바람직한 구현예에서, 심장 박출량은 심장 박출량이 약 69ml 이상; 보다 바람직하게는 약 79ml 이상인 경우 증가된다.
대안적인 바람직한 구현예에서, 심장 박출량은 심장 박출량이 약 15% 이상, 더욱 바람직하게는 약 25% 이상 증가하면 증가된다.
심장 박출량은 심 초음파 검사로 측정될 수 있다. 한 구현예에서, 심장 박출량은 심 초음파 검사에 의해 측정된다.
심장 박출량은 분당 심박수로 나누어진 분당 심장 출력으로 계산될 수 있다. 하나의 구현예에서, 심장 박출량은 분당 심박수로 나누어진 분당 심장 출력으로서 계산된다.
한 구현예에서, 트로포닌 I 인산화는 약 20% 이상; 예를 들어, 약 25% 이상; 약 30% 이상; 약 35% 이상; 약 40% 이상; 약 45% 이상; 약 50% 이상; 약 55% 이상; 약 60% 이상; 약 65% 이상; 약 70% 이상; 약 75% 이상; 약 80% 이상; 약 85% 이상; 약 90% 이상; 또는 약 95% 이상, 바람직하게는 50% 이상 감소된다.
한 구현예에서, 세포내 cAMP는 약 20% 이상; 예를 들어, 약 25% 이상; 약 30% 이상; 약 35% 이상; 약 40% 이상; 약 45% 이상; 약 50% 이상; 약 55% 이상; 약 60% 이상; 약 65% 이상; 약 70% 이상; 약 75% 이상; 약 80% 이상; 약 85% 이상; 약 90% 이상; 또는 약 95% 이상, 바람직하게는 75% 이상 감소된다.
본원에서 논의된 바와 같이, 본 발명자들은 그렐린이 기능하는 메카니즘이 세포내 cAMP를 감소시키는 것임을 식별하였다. 따라서, 세포내 cAMP가 감소되는 경우에 특히 유리하다.
한 구현예에서, 심실 박출 계수는 다음과 같은 경우에 증가된다:
약 2% 이상; 예를 들어, 약 5% 이상; 약 10% 이상; 약 15% 이상; 약 20% 이상; 약 25% 이상; 약 30% 이상; 약 35% 이상; 약 40% 이상; 약 45% 이상; 약 50% 이상; 약 55% 이상; 약 60% 이상; 약 65% 이상; 약 70% 이상; 약 75% 이상; 약 80% 이상; 약 85% 이상; 약 90% 이상; 또는 약 95% 이상, 바람직하게는 약 5% 이상 또는 약 10% 이상의 절대적 백분율의 증가가 있는 경우; 및/또는
약 15% 이상; 예를 들어, 약 16% 이상; 약 17% 이상; 약 18% 이상; 약 19% 이상; 약 20% 이상; 약 25% 이상; 약 30% 이상; 약 35% 이상; 약 40% 이상; 약 45% 이상; 약 50% 이상; 약 55% 이상; 약 60% 이상; 약 65% 이상; 약 70% 이상; 약 75% 이상; 약 80% 이상; 약 85% 이상; 약 90% 이상; 또는 약 95% 이상, 바람직하게는 약 17% 이상의 상대적 백분율의 증가가 있는 경우.
바람직한 구현예에서, 심실 박출 계수는 약 5% 이상 또는 약 10% 이상의 절대적 백분율의 증가가 존재하는 경우 증가된다.
바람직한 구현예에서, 심실 박출 계수는 약 25% 이상의 상대적 백분율의 증가가 존재하는 경우 증가된다.　
한 구현예에서, 심실 박출 계수는 약 20% 내지 약 25%의 상대적 백분율의 증가가 존재하는 경우 증가된다.
심실 박출 계수는 심 초음파 검사에 의해 측정될 수 있다. 한 구현예에서, 심실 박출 계수는 심 초음파에 의해 측정된다.
용어 "절대적 백분율" 및 "상대적 백분율"은 약학 분야의 숙련가에게 공지될 것이다. 절대적 백분율의 증가는 후 및 전(예: 그렐린 분자의 투여 후 및 전)의 백분율의 차이(예: 이전 백분율을 뺀 후 백분율)일 수 있다. 상대적 백분율의 증가는 이전 값에 의해 나누어진 후 및 전(예: 그렐린 분자의 투여 후 및 전) 사이의 차이(예: 이전 백분율로 나누어진 (이전 백분율을 뺀 후 백분율))일 수 있다.
한 구현예에서, 개선된 추정 사구체 여과율(eGFR)은 약 10% 이상; 예를 들어, 약 20% 이상; 약 30% 이상; 약 40% 이상; 약 50% 이상; 약 60% 이상; 약 70% 이상; 약 80% 이상; 또는 약 90% 이상의 증가이다. 바람직하게는, 개선된 추정 사구체 여과율(eGFR)은 약 30% 이상의 증가이다.
한 구현예에서, 동맥 정맥 산소(AV02) 차이는 약 2% 이상; 예를 들어, 약 3% 이상; 약 4% 이상; 약 5% 이상; 약 6% 이상; 약 7% 이상; 약 8% 이상; 약 9% 이상; 약 10% 이상; 약 15% 이상; 약 20% 이상; 약 25% 이상; 약 30% 이상; 약 35% 이상; 약 40% 이상; 약 45% 이상; 약 50% 이상; 약 55% 이상; 약 60% 이상; 약 65% 이상; 약 70% 이상; 약 75% 이상; 약 80% 이상; 약 85% 이상; 약 90% 이상; 또는 약 95% 이상, 바람직하게는 약 7% 이상 감소된다.
한 구현예에서, 폐 혈류(PBF) 수준은 약 0.1리터/분 이상; 예를 들어, 약 0.15리터/분 이상; 약 0.2리터/분 이상; 약 0.25리터/분 이상; 약 0.3리터/분 이상; 약 0.35리터/분 이상; 약 0.4리터/분 이상; 약 0.45리터/분 이상; 약 0.5리터/분 이상; 약 0.55리터/분 이상; 약 0.6리터/분 이상; 약 0.65리터/분 이상; 약 0.7리터/분 이상; 약 0.75리터/분 이상; 약 0.8리터/분 이상; 약 0.85리터/분 이상; 약 0.9리터/분 이상; 약 0.95리터/분 이상; 약 1리터/분 이상; 약 1.05리터/분 이상; 약 1.1리터/분 이상; 약 1.15리터/분 이상; 약 1.2리터/분 이상; 약 1.25리터/분 이상; 약 1.3리터/분 이상; 약 1.35리터/분 이상; 약 1.4리터/분 이상; 약 1.45리터/분 이상; 약 1.5리터/분 이상; 약 1.55리터/분 이상; 약 1.6리터/분 이상; 약 1.65리터/분 이상; 약 1.7리터/분 이상; 약 1.75리터/분 이상; 약 1.8리터/분 이상; 약 1.85리터/분 이상; 약 1.9리터/분 이상; 약 1.95리터/분 이상; 또는 약 2리터/분 이상, 바람직하게는 약 0.8리터/분 이상 또는 약 1리터/분 이상 증가된다.
한 구현예에서, 추정 전신 혈관 저항(eSVR)은 약 100dyn*s/cm-5　이상; 예를 들어, 약 120dyn*s/cm-5　이상; 약 140dyn*s/cm-5　이상; 약 160dyn*s/cm-5　이상; 약 180dyn*s/cm-5　이상; 약 200dyn*s/cm-5　이상; 약 220dyn*s/cm-5　이상; 약 240 dyn*s/cm-5　이상; 약 260dyn*s/cm-5　이상; 약 280dyn*s/cm-5　이상; 약 300dyn*s/cm-5　이상; 약 320 dyn*s/cm-5　이상; 약 340dyn*s/cm-5　이상; 약 360dyn*s/cm-5　이상; 약 380dyn*s/cm-5　이상; 약 400dyn*s/cm-5　이상; 약 420dyn*s/cm-5　이상; 약 440dyn*s/cm-5　이상; 약 460dyn*s/cm-5　이상; 약 480dyn*s/cm-5　이상; 또는 약 500dyn*s/cm-5　이상, 바람직하게는 약 300dyn*s/cm-5　이상 감소된다.
전신 혈관 저항(eSVR)은 약학 분야의 숙련가에게 공지될 측정치이다. 그것은 조직에 도달하기 위해 혈액이 극복해야 하는 저항의 측정치이다. 그것은 심장 출력에 의해 나누어진 (동맥 압력 - 정맥 압력)에 의해 계산될 수 있다.
한 구현예에서, AHF는 만성 심부전의 자발적 악화; 감염; 및/또는 알레르기 반응; 및/또는 혈액 응괴(blood clot); 및/또는 수술(surgery); 및/또는 심혈관 질환(cardiovascular disease); 및/또는 폐 질환(lung disease); 및/또는 심근병증(cardiomyopathy); 및/또는 수면 무호흡증(sleep apnea); 및/또는 알코올 소비; 및/또는 레크리에이션 약물 소비; 및/또는 빈혈(anaemia); 및/또는 이상지질혈증(dyslipidemia); 및/또는 과활성 갑상선(an overactive thyroid); 및/또는 파제트병(Paget's disease); 및/또는 고혈압(hypertension)(예: 폐 고혈압(pulmonary hypertension)); 및/또는 처방 약물 소비; 및/또는 흡연; 및/또는 고혈압(high blood pressure); 및/또는 신장 기능 장애(kidney dysfunction); 및/또는 당뇨병(diabetes); 및/또는 선천성 심장 결함(congenital heart defect); 및/또는 라이프 스타일 선택(lifestyle choice); 및/또는 불규칙한 심장 박동; 및/또는 빠른 심장 박동: 및/또는 느린 심장 박동: 및/또는 염증(inflammation); 및/또는 독소; 및/또는 자가 면역 질환(autoimmune disease); 및/또는 침윤성 질환(infiltrative disease); 및/또는 결합 조직 질환(connective tissue disease); 및/또는 대사 질환(metabolic disease); 및/또는 내분비 질환(endocrine disease); 및 노령; 및/또는 유전적 유전자 돌연변이(hereditary genetic mutations) 및/또는 임신을 포함하거나 이로 구성되는 그룹의 하나 이상의 인자와 관련된다.
의학 분야의 숙련가는 AHF가 상기 언급된 인자(예: 감염)와 관련되는지를 식별할 수 있을 것이다. 따라서, "AHF가 관련된다"란, AHF가 상기 언급된 인자들에 의해 유발되고/되거나; AHF의 발병, 또는 진단은 상기 언급된 인자에 연결된다는 것을 포함한다.
바람직한 구현예에서, AHF는 만성 심부전의 자발적 악화; 및/또는 감염; 및/또는 당뇨병; 및/또는 라이프 스타일 선택(예: 비만 및/또는 좌식 라이프 스타일)을 포함하거나 이로 구성되는 그룹의 하나 이상의 인자와 관련된다.
대안적인 바람직한 구현예에서, AHF는 고혈압과 관련된다.
한 구현예에서, 감염은 세균성 감염(예: 세균성 폐렴(bacterial pneumonia) 및/또는 세균성 패혈증(bacterial sepsis)), 및/또는 바이러스 감염 (바이러스성 폐렴(viral pneumonia) 및/또는 바이러스성 패혈증(bacterial sepsis)), 및/또는 진균 감염, 및/또는 원생동물 감염이다.
한 구현예에서, 수술은 심장 수술; 및/또는 심장 우회 수술(예: 관상 동맥 심장 우회 수술); 및/또는 혈관 성형술 수술; 및/또는 안디오플라스티 수술(andioplasty surgery); 및/또는 심장 판막 복구 수술; 및/또는 심장 이식 수술; 및/또는 장치를 설치하기 위한 수술(임의로, 상기 장치는 인공심박조율기 및/또는 심장 펌프, 및/또는 제세동기이다)을 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터 유래된다.
한 구현예에서, 심혈관 질환은 관상 동맥 심장 질환(coronary heart disease) 및/또는 판막 질환(valvular disease); 및/또는 관상 동맥 질환(coronary artery disease) 및/또는 죽상동맥경화증(atherosclerosis) 및/또는 뇌졸중(stroke); 및/또는 말초 혈관 질환(peripheral vascular disease)을 포함하거나 이로 구성되는 그룹 중 하나 이상이다.
한 구현예에서, 폐 질환은 천식(asthma) 및/또는 만성 폐쇄성 폐 질환(chronic obstructive pulmonary disease; CODE)이다.
한 구현예에서, 처방 약물은 당뇨병 약물; 및/또는 칼슘 채널 차단제; 및/또는 비스테로이드성 항염증제(NSAID)및/또는 티아졸리딘디온을 포함하거나 이로 구성되는 그룹 중 하나 이상이다.
한 구현예에서, 라이프 스타일 선택은 불량한 식이; 및/또는 운동 부족; 및/또는 과체중; 및/또는 비만(obese); 및/또는 좌식 라이프 스타일을 포함하거나 이로 구성되는 그룹 중 하나 이상이다.
한 구현예에서, 과활성 갑상선은 갑상선 중독증(thyrotoxicosis)과 관련된다.
한 구현예에서, AHF는 흉통(chest pain); 및/또는 기침; 및/또는 쇼크(예: 심장성 쇼크); 및/또는 고혈압; 및/또는 핍뇨증(oliguria); 및/또는 무뇨증(anuria); 및/또는 피로; 및/또는 호흡 곤란(호흡 곤란); 및/또는 저산소혈증; 및/또는 빠른 호흡(빈호흡(tachypnea)); 및/또는 빈맥; 및/또는 허혈; 및/또는 부종(예: 악화되는 부종); 및/또는 손상된 신장 기능(예: 악화되는 신장 기능); 및/또는 저혈압(low blood pressure); 및/또는 장기 부전(예: 간부전 및/또는 신부전); 및/또는 차거운 사지; 및/또는 마비 사지(numb extremities); 및/또는 근육 피로; 및/또는 메스꺼움(nausea); 및/또는 구토(vomiting); 및/또는 체중 감소(예: 거식증(anorexia)); 및/또는 폐 부종; 및 하체의 불편함; 및/또는 말초 팽윤; 및/또는 저관류(hypo-perfusion); 및/또는 하체의 팽윤; 및/또는 심장의 팽윤; 및/또는 체중 증가(예: 갑작스런 체중 증가); 및/또는 체중 감소; 및/또는 악액질(cachexia); 및/또는 상승된 목 혈관(예: 상승된 목 혈액 정맥 및/또는 경정맥 팽창); 및/또는 간비대증(hepatomegaly); 및/또는 현기증; 및/또는 기절(fainting)(또한 실신(syncope)으로 공지됨); 및/또는 변경된 정신 상태(예: 불안(anxiety) 및/또는 혼란(confusion) 및/또는 우울증(depression)); 및/또는 식욕 부진(loss of appetite); 저혈압(hypotension); 및/또는 부정맥(arrhythmia); 및/또는 수면 장애(difficulty sleeping); 및/또는 평평하게 누워있을 때 불편함; 및/또는 수면 무호흡증을 포함하거나 이로 구성되는 그룹의 증상 중 하나 이상을 포함한다.
바람직한 구현예에서, AHF는 호흡 곤란(호흡 곤란)(예: 휴지 중 호흡 곤란); 및/또는 저산소혈증; 및/또는 부종(예: 악화되는 부종); 및/또는 갑작스런 체중 증가; 및/또는 손상된 신장(예: 악화되는 신장 기능); 및/또는 저혈압; 및/또는 현기증; 및/또는 심장성 쇼크를 포함하거나 이로 구성되는 그룹의 증상 중 하나 이상을 포함한다.
대안적인 바람직한 구현예에서, 호흡 곤란(호흡 곤란); 및/또는 평평하게 누워있을 때 불편함; 및/또는 빠른 호흡; 및/또는 불안; 및/또는 저산소혈증; 및/또는 고혈압을 포함하거나 이로 구성되는 그룹의 증상 중 하나 이상을 포함한다.　
추가의 대안적인 바람직한 구현예에서, AHF는 부종(예: 악화되는 부종); 체중 증가; 및/또는 상승된 목 정맥; 및/또는 간비대증을 포함하거나 이로 구성되는 그룹의 증상 중 하나 이상을 포함한다.
한 구현예에서, 하체는 발; 및/또는 발목; 및/또는 다리(예: 하부 다리 및/또는 상부 다리); 및/또는 허리를 포함하거나 이로 구성되는 그룹 중 하나 이상을 포함한다.
한 구현예에서, 갑작스런 체중 증가는
하루에 약 1파운드 이상; 예를 들어, 약 2파운드 이상; 약 3파운드 이상; 약 4파운드 이상; 약 5파운드 이상; 약 6파운드 이상; 약 7파운드 이상; 약 8파운드 이상; 약 9파운드 이상; 또는 하루에 약 10파운드 이상, 바람직하게는 하루에 2파운드 이상 또는 하루에 3파운드 이상; 및/또는
1주일에 1파운드 이상; 예를 들어, 약 2파운드 이상; 약 3파운드 이상; 약 4파운드 이상; 약 5파운드 이상; 약 6파운드 이상; 약 7파운드 이상; 약 8파운드 이상; 약 9파운드 이상; 약 10파운드 이상; 약 11파운드 이상; 약 12파운드 이상; 약 13파운드 이상; 약 14파운드 이상; 약 15파운드 이상; 약 16파운드 이상; 약 17파운드 이상; 약 18파운드 이상; 약 19파운드 이상; 약 20파운드 이상; 약 21파운드 이상; 약 22파운드 이상; 약 23파운드 이상; 약 24파운드 이상; 약 25파운드 이상; 약 26파운드 이상; 약 27파운드 이상; 약 28파운드 이상; 약 29파운드 이상; 또는 1주일에 약 30파운드 이상, 바람직하게는 1주일에 5파운드 이상의 체중 증가를 포함한다.
바람직한 구현예에서, 갑작스런 체중 증가는 하루에 2파운드 이상의 체중 증가를 포함한다.
대안적인 바람직한 구현예에서, 갑작스런 체중 증가는 하루에 3파운드 이상의 체중 증가를 포함한다.
추가의 대안적인 바람직한 구현예에서, 갑작스런 체중 증가는 1주일에 5파운드 이상의 체중 증가를 포함한다.
한 구현예에서, 호흡 곤란(호흡 곤란)은 휴지 중 호흡 곤란(shortness of breath at rest); 및/또 보행 호흡 곤란(shortness of breath walking); 및/또는 누워 있을 때 호흡 곤란; 및/또는 운동 호흡 곤란(exertional dyspnea); 및/또는 기좌 호흡(orthopnea); 및/또는 발작성 호흡 곤란(paroxysmal dyspnea); 및/또는 야행성 호흡 곤란(nocturnal dyspnea)을 포함하거나 이로 구성되는 그룹 중 하나 이상이다.
한 구현예에서, 저혈압은 약 40mmHg 이하; 예를 들어, 약 45mmHg 이하; 약 50mmHg 이하; 약 55mmHg 이하; 약 60mmHg 이하; 약 65mmHg 이하; 약 70mmHg 이하; 약 75mmHg 이하; 약 80mmHg 이하; 약 85mmHg 이하; 약 90mmHg 이하; 약 95mmHg 이하; 약 100mmHg 이하; 약 105mmHg 이하; 약 110mmHg 이하; 약 115mmHg 이하; 또는 약 120mmHg 이하, 바람직하게는 약 90mmHg 이하의 수축기 혈압이다.
한 구현예에서, 저혈압은 약 40mmHg 내지 약 120mmHg의 수축기 혈압이다.
한 구현예에서, 심장성 쇼크은 다음을 포함하거나 이로 구성되는 하나 이상의 그룹과 관련된다:
약 45mmHg 이하, 예를 들어, 약 50mmHg 이하; 약 55mmHg 이하; 약 60mmHg 이하; 약 65mmHg 이하; 약 70mmHg 이하; 약 75mmHg 이하; 약 80mmHg 이하; 약 85mmHg 이하; 약 90mmHg 이하; 약 95mmHg 이하; 약 100mmHg 이하; 바람직하게는 약 90mmHg 이하의 혈압; 및/또는
약 3리터/분/미터2 이하, 예를 들어, 약 2.5리터/분/미터2 이하; 약 2리터/분/미터2 이하; 약 1.5리터/분/미터2 이하; 또는 약 1리터/분/미터2 　이하, 바람직하게는 약 2.5리터/분/미터2 이하의 심장 지수; 및/또는
약 5mmHg 이상; 예를 들어, 약 10mmHg 이상; 약 15mmHg 이상; 약 20mmHg 이상; 약 25mmHg 이상; 또는 약 30mmHg 이상, 바람직하게는 약 15mmHg 이상 또는 약 16mmHg 이상의 쐐기 압력(예: 폐 모세관 쐐기 압력); 및/또는
차가운 사지(예: 차가운 발가락 및/또는 차가운 손가락); 및/또는
핍뇨증; 및/또는
무뇨증을 포함하거나 이로 구성되는 그룹 중 하나 이상과 관련된다.
바람직한 구현예에서, 심장성 쇼크는 약 90mmHg 이하의 혈압, 및 약 2.5리터/분/미터2　이하의 심장 지수; 및/또는 약 15mmHg 이상의 쐐기 압력; 차가운 사지; 및/또는 핍뇨증; 및/또는 무뇨증을 포함하거나 이로 구성되는 그룹 중 하나 이상과 관련된다.　
한 구현예에서, 허혈은 하나 이상의 장기, 예를 들어, 심장; 및/또는 뇌; 및/또는 신장, 및/또는 위장관; 및/또는 간, 바람직하게는 심장을 포함하거나 이로 구성되는 그룹의 하나 이상의 장기에 존재한다.
허혈은 불충분한 혈류로 인해 발생할 수 있고, 때로는 부적절하게 펌핑되는 심장 또는 폐 시스템에서의 폐쇄로 인해 발생된다.
한 구현예에서, AHF는 울혈성 ADHF이고, 말초 팽윤 및/또는 호흡 곤란 증상을 포함한다.
한 구현예에서, AHF는 저혈압과 관련된 AHF이고, 호흡 곤란; 및/또는 변경된 정신 상태; 및/또는 핍뇨증; 및/또는 무뇨증; 및/또는 저혈압을 포함하거나 이로 구성되는 그룹의 하나 이상의 증상을 포함한다.
한 구현예에서, AHF는 폐 부종과 관련된 AHF이고, 호흡 곤란; 및/또는 빠른 호흡; 및/또는 빈맥; 및/또는 폐 부종을 포함하거나 이로 이루어진 그룹의 하나 이상의 증상을 포함한다.
한 구현예에서, AHF는 심장성 쇼크 AHF이고, 저혈압; 저관류; 및/또는 핍뇨증; 및/또는 심장성 쇼크; 및/또는 변경된 정신 상태; 및/또는 핍뇨증; 및/또는 무뇨증을 포함하거나 이로 이루어진 그룹의 하나 이상의 증상을 포함한다.
한 구현예에서, AHF는 심각한 심장성 쇼크 AHF이고, 저혈압, 저관류, 및/또는 무뇨증; 및/또는 핍뇨증; 및/또는 심각한 심장성 쇼크; 및/또는 변경된 정신 상태를 포함하거나 이로 이루어진 그룹의 하나 이상의 증상을 포함한다.
한 구현예에서, AHF는 심장의 우측의 AHF이고, 부종 및/또는 상승된 목 혈관 증상을 포함한다.
한 구현예에서, AHF는 심각한 ADCHF이고, 저혈압, 및/또는 쇼크; 및/또는 부정맥; 및/또는 광범위한 허혈을 포함하거나 이로 구성되는 그룹의 하나 이상의 증상을 포함한다.
한 구현예에서, 하나 이상의 증상은 약 1개월 이하; 예를 들어, 약 3주 이하; 약 2주 이하; 약 7일 이하; 약 6일 이하; 약 5일 이하; 약 4일 이하; 약 3일 이하; 약 2일 이하; 또는 약 1일 이하, 바람직하게는 약 7일 이하의 기간, 더욱 바람직하게는 약 7일 내지 약 1일의 기간에 걸쳐 발생한다.
"하나 이상의 증상이 기간에 걸쳐 발생한다"란 다수의 증상이 증가하고/하거나 증상의 심각도가 그 시간에 걸쳐 증가한다는 것을 포함한다.
한 구현예에서, 개체는 X-선; 및/또는 혈액 검사; 및/또는 심전도(ECG); 및/또는 개체의 병력에 기초; 및/또는 양전자 방출 단층 촬영(PET) 스캔; 및/또는 다중 게이트 획득(multigated acquisition; MUGA) 스캔; 및/또는 신티그래피(scintigraphy); 및/또는 심 초음파; 및/또는 혈관 조영술; 및/또는 혈역학적 측정(hemodynamic measurement); 및/또는 컴퓨터 단층 촬영(CT) 스캔; 및/또는 증상의 물리적 검사; 및/또는 바이오마커(예: 혈청 나트륨 이뇨성 펩티드(serum natriuretic peptide) 및/또는 혈장 나트륨 이뇨성 펩티드) 측정; 및/또는 자기 공명 영상(MRI) 스캔을 포함하거나 이로 구성되는 그룹의 절차 중 하나 이상을 사용하여 AHF를 갖는 것으로 진단된다.
의학 분야의 숙련가는 AHF를 갖는 개체를 진단하기 위해 상기 절차를 사용하는 방법을 이해할 것이다. 예를 들어, X선은 폐 또는 흉부 공간에서 확대된 심장 및/또는 유체를 검출하는데 사용될 수 있다. ECG를 사용하여 허혈, 빈맥, 서맥 및/또는 부정맥을 검출할 수 있다. PET 스캔, MUGA 스캔, 신티그래피, 심 초음파, 혈관 조영술, 혈역학적 평가, CT 스캔 및/또는 MRI 스캔을 사용하여 심장 출력, 폐 혈류, 박출량, 박출 계수, 심장 수축성, 및 심장 손상을 검출 (및/또는 측정 및/또는 정량화)할 수 있다.
바람직한 구현예에서, 개체는 개체의 병력에 기초; 및/또는 증상의 물리적 검사; 및/또는 심 초음파; 및/또는 혈청 나트륨 이뇨성 펩티드의 측정을 포함하거나 이로 이루어진 그룹의 절차 중 하나 이상을 사용하여 AHF를 갖는 것으로 진단된다.
한 구현예에서, 바이오마커는 혈청 나트륨 이뇨성 펩티드; 및/또는 sST2 심장 바이오마커; 및/또는 중간 지역 프로-아드레노메둘린(MR-proADM); 및/또는 락테이트, 바람직하게는 혈청 나트륨 이뇨성 펩티드를 포함하거나 이로 구성되는 그룹의 선택된 하나 이상이다. 바람직하게는, 개체는 혈청 및/또는 혈장 나트륨 이뇨성 펩티드의 하나 이상의 바이오마커; 및/또는 sST2 심장 바이오마커; 및/또는 중간 지역 프로-아드레노메둘린(MR-proADM); 및/또는 락테이트가 상승되는 경우, AHF를 갖는 것으로 진단된다.　
바이오마커가 "상승된다"란, 개체에서의 바이오마커가 AHF 없는 개체에서 예상되는 것보다 더 높다는 것을 의미한다. 의학 분야의 숙련가는 해당 바이오마커를 어떻게 검출할지, 그리고 그러한 바이오마커가 상승된 것으로 간주될 수 있는 수준을 이해할 것이다(예: 문헌(Ponikowski 2016, ESC HF guidelines, European Heart Journal)에 기초함).
한 구현예에서, 혈청 나트륨 이뇨성 펩티드는 B형 나트륨 이뇨성 펩티드(BNP) 및/또는 N-말단 프로-B형 나트륨 이뇨성 펩티드(NT-proBNP); 및/또는 중간 지역 프로-심방(pro-atrial) 나트륨 이뇨성 펩티드(MR-proANP)를 포함한다.
한 구현예에서, 개체는 다음과 같은 경우 AHF를 갖는 것으로 진단된다:
BNP가 약 50ng/리터 이상, 예를 들어, 약 60ng/리터 이상; 약 70ng/리터 이상; 약 80ng/리터 이상; 약 90ng/리터 이상; 약 100ng/리터 이상; 약 110ng/리터 이상; 약 120ng/리터 이상; 약 130ng/리터 이상; 약 140ng/리터 이상; 또는 약 150ng/리터 이상; 또는 약 160ng/리터 이상; 또는 약 170ng/리터 이상; 또는 약 180ng/리터 이상; 또는 약 190ng/리터 이상; 또는 약 200ng/리터 이상; 또는 약 250ng/리터 이상; 또는 약 300ng/리터 이상, 바람직하게는 약 100ng/리터 이상인 경우; 및/또는
NT-proBNP가 약 250ng/리터 이상, 예를 들어, 약 260ng/리터 이상; 약 270ng/리터 이상; 약 280ng/리터 이상; 약 290ng/리터 이상; 약 300ng/리터 이상; 약 310ng/리터 이상; 약 320ng/리터 이상; 약 330ng/리터 이상; 약 340ng/리터 이상; 또는 약 350ng/리터 이상; 또는 약 360ng/리터 이상; 또는 약 370ng/리터 이상; 또는 약 380ng/리터 이상; 또는 약 390ng/리터 이상; 또는 약 400ng/리터 이상; 또는 약 425ng/리터 이상; 또는 약 450ng/리터 이상; 또는 약 500ng/리터 이상, 바람직하게는 약 300ng/리터 이상인 경우.
바람직한 구현예에서, 개체는 BNP가 약 100ng/리터 이상이고/이거나 NT-proBNP가 약 300ng/리터 이상인 경우 AHF를 갖는 것으로 진단된다.
한 구현예에서, 개체는 MR-proANP가 약 80pmol/L 이상, 예를 들어, 약 90pmol/L 이상; 약 100pmol/L 이상; 약 110pmol/L 이상; 약 120pmol/L 이상; 약 130pmol/L 이상; 약 140pmol/L 이상; 또는 약 150pmol/L 이상, 바람직하게는 약 120pmol/L 이상인 경우 AHF를 갖는 것으로 진단된다.　
한 구현예에서, 혈역학적 측정은 수축기 혈압의 측정; 및/또는 심장 지수의 측정; 및/또는 폐 모세관 쐐기 압력의 측정을 포함하거나 이로 이루어지는 그룹 중 하나 이상이다.
폐 모세관 쐐기 압력은 폐 동맥 카테터에 의해 측정될 수 있다. 한 구현예에서, 폐 모세관 쐐기 압력은 폐 동맥 카테터에 의해 측정된다.
한 구현예에서, 혈역학적 측정은 수축기 혈압의 측정이고, 수축기 혈압은 약 180mmHg 이상이다.
한 구현예에서, 혈역학적 측정은 수축기 혈압의 측정이고, 수축기 혈압은 약 90mmHg 이하이다.
대안적인 구현예에서, 혈역학적 측정은 수축기 혈압의 측정이고, 수축기 혈압은 약 90mmHg 내지 약 180mmHg이다.
한 구현예에서, 혈역학적 측정은 심장 지수의 측정이고, 심장 지수는 약 5리터/분/미터2　이하; 예를 들어, 약 4.5리터/분/미터2 　이하; 약 4리터/분/미터2 　이하; 약 3.5리터/분/미터2 　이하; 약 3리터/분/미터2 　이하; 약 2.5리터/분/미터2　이하; 약 2리터/분/미터2 　이하; 약 1.5리터/분/미터2 　이하; 또는 약 1리터/분/미터2 　이하, 바람직하게는 약 2리터/분/미터2　이하 또는 약 1.8리터/분/미터2　이하이다.
한 구현예에서, 혈역학적 측정은 폐 모세관 쐐기 압력의 측정이고, 폐 모세관 쐐기 압력은 약 10mmHg 이상; 예를 들어, 약 11mmHg 이상; 약 12mmHg 이상; 약 13mmHg 이상; 약 14mmHg 이상; 약 15mmHg 이상; 약 16mmHg 이상; 약 17mmHg 이상; 약 18mmHg 이상; 약 19mmHg 이상; 약 20mmHg 이상; 약 25mmHg 이상; 약 30mmHg 이상; 약 35mmHg 이상; 또는 약 40mmHg 이상, 바람직하게는 약 15mmHg 이상이다
한 구현예에서, 그렐린 분자의 투여 후, 개체는 증가된 심박수; 및/또는 빈맥; 및/또는 감소된 혈압; 및/또는 저혈압; 및/또는 증가된 산소 요구량; 및/또는 허혈; 및/또는 증가된 혈장 트로포닌 T; 및/또는 심장 부정맥; 및/또는 영향을 받은 칼슘 과도 상태(affected calcium transient)를 포함하거나 이로 구성되는 그룹의 하나 이상의 파라미터를 나타내지 않는다. 의학 분야의 숙련가는 이러한 파라미터를 측정하는 방법을 이해할 것이다. 예를 들어, 심박수는 맥박 촉진, 심전도(ECG) 또는 원격 측정을 이용하여 측정될 수 있다. 혈압은 동맥 커프 또는 동맥 라인을 사용하여 측정될 수 있다. 여기서 논의된 바와 같이, 허혈은 다른 방법 중에서 ECG를 사용하여 측정될 수 있다. 허혈은 또한 임상 증상, 예를 들어, 흉통 및/또는 흉부 압력을 사용하여 식별될 수 있을 뿐만 아니라 심근 손상 바이오마커(예: 트로포닌 T 및/또는 트로포닌 I)를 증가시킬 수 있다.
"개체는 나타내지 않는다"란 개체의 지정된 파라미터(예: 심박수)의 변화가 검출 가능하지 않고/않거나 관찰 가능하지 않고/않거나 임상적으로 의미가 없고, 예를 들어, 그렐린 분자의 투여 후, 개체의 증가된 심박수가 검출 가능하지 않고/않거나 관찰 가능하지 않다. 의학 분야의 숙련가는 개체가 임의의 상기 언급된 파라미터를 나타내지 않는지를 식별할 수 있을 것이다.
개체가 그렐린 분자의 투여 후 나타내지 않는 파라미터의 임의의 변화는 일반적으로 그렐린 분자의 투여 전의 동일한 파라미터의 측정과 비교된다. 예를 들어, 그렐린 분자의 투여 후 개체의 심박수는 그렐린 분자의 투여 전 개체의 심박수와 비교될 때 증가되지 않는다.
바람직한 구현예에서, 그렐린 분자의 투여 후, 개체는 저혈압; 및/또는 허혈; 및/또는 심장 부정맥; 및/또는 빈맥을 포함하거나 이로 구성되는 그룹 중 하나 이상을 나타내지 않는다. 보다 바람직한 구현예에서, 그렐린 분자의 투여 후, 개체는 저혈압; 및/또는 허혈; 및/또는 심장 부정맥을 포함하거나 이로 구성되는 그룹 중 하나 이상을 나타내지 않는다. 이러한 특정 파라미터는 특히 이노트로프에 의해 유발될 것으로 예상되는 AHF 환자에 특히 문제가 되는 부작용이다. 따라서, 그들이 그렐린에 의해 유발되지 않는 경우에 특히 유리하다.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 개체에서 하나 이상의 파라미터의 변화를 일으키지 않으며, 여기서 상기 하나 이상의 파라미터는 증가된 심박수; 및/또는 빈맥; 및/또는 감소된 혈압; 및/또는 저혈압; 및/또는 증가된 산소 요구량; 및/또는 허혈; 및/또는 증가된 혈장 트로포닌 T; 및/또는 심장 부정맥; 및/또는 영향을 받은 칼슘 과도 상태를 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터 유래된다.　
"그렐린 분자가 변화를 일으키지 않는다"란, 지정된 파라미터가 그렐린 분자의 투여 후 개체에서 변경되지 않고/않거나 변형되지 않는다는 것을 포함한다. 의학 분야의 숙련가는 그렐린 분자가 임의의 상기 언급된 파라미터에서 변화를 일으키지 않는지를 식별할 수 있을 것이다.
바람직한 구현예에서, 그렐린 분자는 개체에서 하나 이상의 파라미터의 변화를 일으키지 않으며, 여기서 상기 하나 이상의 파라미터는 저혈압; 및/또는 허혈; 및/또는 심장 부정맥; 및/또는 빈맥을 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터 유래된다. 보다 바람직한 구현예에서, 그렐린 분자는 개체에서 하나 이상의 파라미터의 변화를 일으키지 않으며, 여기서 하나 이상의 파라미터는 저혈압; 및/또는 허혈; 및/또는 심장 부정맥을 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터 유래된다.
파라미터를 측정하기 위한 방법은 의학 분야의 숙련가에게 공지될 것이다.
한 구현예에서, 심박수는
약 5회 심장 박동/분 이상; 예를 들어, 약 10회 심장 박동/분 이상; 약 15회 심장 박동/분 이상; 약 20회 심장 박동/분 이상; 약 25회 심장 박동/분 이상; 약 30회 심장 박동/분 이상; 약 35회 심장 박동/분 이상; 또는 약 40회 심장 박동/분 이상으로 증가되고/되거나;
약 100회 심장 박동/분 이상; 예를 들어, 약 105회 심장 박동/분 이상; 약 110회 심장 박동/분 이상; 약 115회 심장 박동/분 이상; 약 120회 심장 박동/분 이상; 약 125회 심장 박동/분 이상; 약 130회 심장 박동/분 이상; 약 135회 심장 박동/분 이상; 또는 약 140회 심장 박동/분 이상이다.
한 구현예에서, 빈맥은
약 10회 심장 박동/분 이상; 예를 들어, 15회 심장 박동/분 이상; 약 20회 심장 박동/분 이상; 약 25회 심장 박동/분 이상; 약 30회 심장 박동/분 이상; 약 35회 심장 박동/분 이상; 또는 약 40회 심장 박동/분 이상, 바람직하게는 약 20회 심장 박동/분 이상의 심박수 증가; 및/또는
약 100회 심장 박동/분 이상; 예를 들어, 약 110회 심장 박동/분 이상; 115회 심장 박동/분 이상; 약 120회 심장 박동/분 이상; 약 125회 심장 박동/분 이상; 약 130회 심장 박동/분 이상; 약 135회 심장 박동/분 이상; 또는 약 140회 심장 박동/분 이상, 바람직하게는 약 100회 심장 박동/분 이상의 심박수이다.　
한 구현예에서, 빈맥은 지속된 심실 빈맥 및/또는 비지속성 심실 빈맥이다.
한 구현예에서, 혈압은 약 5mmHg 이상; 예를 들어, 약 10mmHg 이상; 약 15mmHg 이상; 약 20mmHg 이상; 약 25mmHg 이상; 약 30mmHg 이상; 약 35mmHg 이상; 약 40mmHg 이상; 약 45mmHg 이상; 약 50mmHg 이상; 약 55mmHg 이상; 약 60mmHg 이상; 약 65mmHg 이상; 약 70mmHg 이상; 약 75mmHg 이상; 약 80mmHg 이상; 약 85mmHg 이상; 약 90mmHg 이상; 약 95mmHg 이상; 약 100mmHg 이상, 바람직하게는 약 20mmHg 이상, 더욱 바람직하게는 20mmHg 내지 80mmHg 감소된다. 바람직한 구현예에서, 혈압의 감소는 개체의 출발 혈압에 무관하다.
한 구현예에서, 저혈압은 약 90mmHg 이하; 예를 들어, 약 85mmHg 이하; 약 80mmHg 이하; 약 75mmHg 이하; 약 70mmHg 이하; 약 65mmHg 이하; 약 60mmHg 이하; 약 55mmHg 이하; 약 50mmHg 이하, 바람직하게는 약 80mmHg 이하의 혈압이다.
한 구현예에서, 심장 부정맥은 심실 부정맥(ventricular arrhythmia); 심실상 부정맥(supra-ventricular arrhythmia); 이소성 심방 빈맥(ectopic atrial tachycardia); 심방 조동(atrial flutter); 동서맥(sinus bradycardia); 심방 심실 블록(atrial ventricular block(AV 블록); 및 심방 세동(atrial fibrillation)을 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터 선택된다.
한 구현예에서, 허혈은 심전도(ECG)의 변화 및/또는 증가된 혈장 트로포닌 T를 포함한다.
한 구현예에서, 심전도(ECG)의 변화는 ST 상승(elevation); 및/또는 ST 하강(depression); 및/또는 T파 변화를 포함하거나 이로 구성되는 그룹 중 하나 이상을 포함한다. 의학 분야의 숙련가는 ECG에서 그러한 변화를 해석하는 방법 및 그들이 개체의 진단 및/또는 예후에 대해 나타내는 것이 무엇인지를 이해할 것이다.
한 구현예에서, 혈장 트로포닌 T는 약 40% 이상; 예를 들어, 약 45% 이상; 약 50% 이상; 약 55% 이상; 약 60% 이상; 약 65% 이상; 약 70% 이상; 약 75% 이상; 약 80% 이상; 약 85% 이상; 약 90% 이상; 또는 약 95% 이상; 또는 약 100% 이상; 또는 약 110% 이상; 또는 약 120% 이상; 또는 약 130% 이상; 또는 약 150% 이상; 또는 200% 이상; 또는 약 250% 이상; 또는 약 300% 이상 또는 약 400% 이상, 또는 약 500% 이상, 바람직하게는 약 100% 이상 증가된다.
한 구현예에서, 칼슘 과도 상태는 칼슘 과도 상태 진폭의 변화를 포함하지 않는다.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 변형된 그렐린; 및/또는 그렐린 융합 분자; 및/또는 그렐린 단편; 및/또는 그렐린 변이체; 및/또는 그렐린 유도체; 및/또는 야생형 그렐린을 포함하거나 이로 구성되는 그룹 중 하나를 포함한다.
그렐린(또한 레노모렐린INN)으로 공지됨)은 분자량이 약 3,371g/mol인 28 아미노산 펩티드이고, 인간에서 그것은 GHRL 유전자에 의해 인코딩된다. 그것은 위장관에서 그렐린성 세포에 의해 생성되는 펩티드 호르몬이고, 중추 신경계에서 신경펩티드로서 기능한다. 그렐린은 그렐린/성장 호르몬 분비 촉진 수용체(GHS-R)에 결합한다. 혈장 중의 그렐린의 반감기는 대략 24 내지 30분이다. 정상 인간에서의 농도는 전체 그렐린에 대해 100 내지 300pmol/L(300 내지 900ng/L)에서 가변적으로 보고되었다. 아실 그렐린에 대한 제한적인 데이터가 있지만, 본 발명자들은 최근에 41명의 건강한 비-비만 성인에서 아실 그렐린을 측정하였다: 공복: 평균±SD: 118±14ng/L, 5-95번째 백분위수 27-328ng/L; 트로프 60분 포스트 260kcal 혼합 식사: 80±12ng/L, 5-95번째 백분위수 21-293ng/L. 그렐린은, 예를 들어, Bachem(Bubendorf, Switzerland)에서 시판되고 있다. Bachem으로부터 이용 가능한 특정 그렐린 제품은 Clinalfa라는 상표명을 갖는 합성 아실화된 인간 그렐린이다.
그렐린은 다음과 같은 아미노산 서열을 갖는다:
Gly-Ser-Ser(옥타노닐)-Phe-Leu-Ser-Pro-Glu-His-Gln-Arg-Val-Gln-Gln-Arg-Lys-Glu-Ser-Lys-Lys-Pro-Pro-Ala-Lys-Leu-GIn-Pro-Arg (서열번호 1).
한 구현예에서, 그렐린 분자는 그렐린 호르몬 분비 촉진 수용체(GHS-R)에 특이적으로 결합하고/하거나 GHS-R을 활성화시킨다.
"변형된 그렐린 분자"란, 화학적으로 변형된 그렐린 분자, 예를 들어, 유도체화된 그렐린 분자를 포함한다. 하나 이상의 아미노산의 화학적 유도체는 작용성 측쇄 그룹과의 반응에 의해 달성될 수 있다. 이러한 유도체화된 분자는, 예를 들어, 유리 아미노 그룹은 유도체화되어 아민 하이드로클로라이드, p-톨루엔 설포닐그룹, 카르복시벤족시 그룹, f-부틸옥시카르보닐 그룹, 클로로아세틸 그룹 또는 포르밀 그룹을 형성하는 분자를 포함한다.　 유리 카르복실 그룹은 유도체화되어 염, 메틸 및 에틸 에스테르 또는 다른 유형의 에스테르 및 하이드라지드를 형성할 수 있다. 유리 하이드록실 그룹은 유도체화되어 O-아실 또는 O-알킬 유도체를 형성할 수 있다. 화학적 유도체로서 20개의 표준 아미노산의 천연 아미노산 유도체를 함유하는 펩티드가 또한 포함된다. 예를 들어, 4-하이드록시프롤린은 프롤린으로 치환될 수 있고, 5-하이드록시리신은 리신으로 치환될 수 있고; 3-메틸히스티딘은 히스티딘으로 치환될 수 있고, 호모세린은 세린으로 치환될 수 있고, 오르니틴은 리신으로 치환될 수 있다. 유도체는 또한 필요한 활성이 유지되는 한 하나 이상의 추가 또는 결실을 함유하는 펩티드를 포함한다. 다른 포함된 변형은 아미드화, 아미노 말단 아실화(예: 아세틸화 또는 티오글리콜산 아미드화), 말단 카르복실아미드화(예: 암모니아 또는 메틸아민 사용) 및 유사 말단 변형이다.
예를 들어, 본원에 기재된 변형된 그렐린 분자는 아미노산 잔기가 펩티드(-CO-NH-) 결합에 의해 결합된 분자 뿐만 아니라 펩티드 결합이 역전되는 분자를 포함한다. 이러한 레트로-인버소 펩티도미메틱스는 당업계에 공지된 방법, 예를 들어, 개시내용이 본원에 참고로 인용된 문헌[참조: Meziere et al. (1997) J. Immunol. 159, 3230-3237]에 기재된 것들을 사용하여 제조될 수 있다. CO-NH 펩티드 결합 대신에 NH-CO 결합을 함유하는 이러한 레트로 역 펩티드는 단백질 분해에 훨씬 더 내성이 있다. 대안적으로, 본 발명의 폴리펩티드는 하나 이상의 아미노산 잔기가 종래의 아미드 결합을 대신하여 -γ(OH2NH)- 결합에 의해 연결된 펩티도미메틱 화합물일 수 있다.
폴리펩티드는, 예를 들어, 아미드화에 의해 외부 단백질 분해 소화에 대한 감수성을 감소시키는 것을 돕기 위해 그의 N- 또는 C-말단에서 편리하게 차단될 수 있는 것으로 인식될 것이다.
위에서 논의된 바와 같이, D-아미노산과 N-메틸 아미노산과 같은 다양한 비코딩된 또는 변형된 아미노산을 사용하여 본 발명의 그렐린 분자를 변형시킬 수 있다. 또한, 추정된 생체 활성 형태는 공유 변형, 예를 들어, 사이클릭화에 의해 또는 락탐 또는 다른 유형의 브릿지의 혼입에 의해 안정화될 수 있다. 이황화물, 황화물 및 알킬렌 브릿지를 포함한 사이클릭 동질성 펩티드 및 사이클릭 이질성 펩티드의 합성 방법은 미국 특허 제5,643,872호에 개시되어 있다. 사이클릭화 방법의 다른 예가 논의되고, 문서가 참고로 인용된 관련 개시내용인 US 6,008,058에 개시되어 있다. 사이클릭 안정화된 펩티도미메틱 화합물의 합성에 대한 추가적 접근법은 환-폐쇄 치환(RCM)이다.　
요약하면, 말단 변형은 프로테나제 소화에 의한 감수성을 감소시키고, 따라서 용액, 특히 프로테아제가 존재할 수 있는 생물학적 유체에서 펩티드의 반감기를 연장시키기 위해 익히 공지된 바와 같이 유용하다. 폴리펩티드 사이클릭화는 또한 유용한 변형이며, 사이클릭화에 의해 형성된 안정한 구조 및 사이클릭 펩티드에 대해 관찰된 생물학적 활성을 고려하여 바람직하다.
한 구현예에서, 변형된 그렐린은 아실화된 그렐린 분자이다. 아실화된 그렐린 분자는 때로는 활성화된 그렐린 분자 또는 옥타노일화된 그렐린 분자로 지칭된다.
"그렐린 단편"이란, GHS-R에 특이적으로 결합하고/하거나 GHS-R을 활성화시키고/시키거나 그렐린과 상호작용하는 다른 수용체에 특이적으로 결합하고/하거나 그렐린과 상호작용하는 다른 수용체를 활성화시키는 기능적 그렐린 단편, 예를 들어, 그렐린 단편을 포함한다. 한 구현예에서, 단편은 야생형 그렐린 분자의 약 5개 이상의 아미노산; 예를 들어, 야생형 그렐린 분자의 약 6개 이상의 아미노산; 약 7개 이상의 아미노산; 약 8개 이상의 아미노산; 약 9개 이상의 아미노산; 약 10개 이상의 아미노산; 약 11개 이상의 아미노산; 약 12개 이상의 아미노산; 약 13개 이상의 아미노산; 약 14개 이상의 아미노산; 약 15개 이상의 아미노산; 약 16개 이상의 아미노산; 약 17개 이상의 아미노산; 약 18개 이상의 아미노산; 약 19개 이상의 아미노산; 약 20개 이상의 아미노산; 약 21개 이상의 아미노산; 약 22개 이상의 아미노산; 약 23개 이상의 아미노산; 약 24개 이상의 아미노산; 약 25개 이상의 아미노산; 약 26개 이상의 아미노산; 또는 약 27개의 아미노산을 포함한다.
"야생형 그렐린"이란, 28 아미노산 인간 그렐린 분자와 같은 유기체에서 내인적으로 발견된 그렐린 분자의 아미노산 서열을 갖는 그렐린 분자를 포함한다. 한 구현예에서, 야생형 그렐린 분자는 또는 설치류(예: 마우스, 및/또는 래트, 및/또는 햄스터, 및/또는 기니 피그, 및/또는 저빌, 및/또는 토끼) 야생형 그렐린 분자; 및/또는 개과(예: 개) 야생형 그렐린 분자; 및/또는 고양이과(예: 고양이) 야생형 그렐린 분자; 영장류(예: 인간; 및/또는 원숭이; 및/또는 유인원) 야생형 그렐린 분자; 및/또는 말과(예: 말) 야생형 그렐린 분자; 및/또는 소과(예: 암소) 야생형 그렐린 분자; 및/또는 돼지과(예: 돼지) 야생형 그렐린 분자, 바람직하게는 인간 야생형 그렐린 분자, 보다 바람직하게는 28 아미노산 인간 야생형 그렐린 분자를 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터의 하나 이상이다.
"그렐린 융합 분자"란, 임의의 다른 폴리펩티드 및/또는 단백질 및/또는 펩티드에 융합된 그렐린 분자(변형된 그렐린, 및/또는 그렐린 단편, 및/또는 그렐린 변이체, 및/또는 그렐린 유도체, 및/또는 야생형 그렐린)을 포함한다. 예를 들어, 그렐린 분자는 내부적으로 및/또는 N- 및/또는 C-말단에 삽입된 하나 이상의 추가 아미노산을 포함할 수 있다.
"그렐린 변이체"란, 보존적 또는 비보존적인 삽입, 결실 및/또는 치환을 포함하는 야생형 그렐린 분자를 포함한다. 특히, 본 발명자들은 이러한 변화가 그렐린 분자의 활성을 실질적으로 변경시키지 않는 폴리펩티드의 변이체를 포함한다. 특히, 본 발명자들은 또한 이러한 변화가 GHS-R에 대한 결합 특이성 및/또는 GHS-R의 활성화를 실질적으로 변경하지 않는 그렐린 변이체를 추가로 포함한다. 한 구현예에서, 그렐린 변이체는 야생형 그렐린 분자에 대해 약 5% 이상의 동일성; 예를 들어, 야생형 그렐린 분자에 대해 약 10% 이상의 동일성; 약 15% 이상의 동일성; 약 20% 이상의 동일성; 약 25% 이상의 동일성; 약 30% 이상의 동일성; 약 35% 이상의 동일성; 약 40% 이상의 동일성; 약 45% 이상의 동일성; 약 50% 이상의 동일성; 약 55% 이상의 동일성; 약 60% 이상의 동일성; 약 65% 이상의 동일성; 약 70% 이상의 동일성; 약 75% 이상의 동일성; 약 80% 이상의 동일성; 약 85% 이상의 동일성; 약 86% 이상의 동일성; 약 87% 이상의 동일성; 약 88% 이상의 동일성; 약 89% 이상의 동일성; 약 90% 이상의 동일성; 약 91% 이상의 동일성; 약 92% 이상의 동일성; 약 93% 이상의 동일성; 약 94% 이상의 동일성; 약 95% 이상의 동일성; 약 96% 이상의 동일성; 약 97% 이상의 동일성; 약 98% 이상의 동일성; 또는 약 99%의 동일성을 포함하고/하거나; 야생형 그렐린 분자의 약 5개 이상의 연속 아미노산; 예를 들어, 약 6개 이상의 연속 아미노산; 약 7개 이상의 연속 아미노산; 약 8개 이상의 연속 아미노산; 약 9개 이상의 연속 아미노산; 약 10개 이상의 연속 아미노산; 약 11개 이상의 연속 아미노산; 약 12개 이상의 연속 아미노산; 약 13개 이상의 연속 아미노산; 약 14개 이상의 연속 아미노산; 약 15개 이상의 연속 아미노산; 약 16개 이상의 연속 아미노산; 약 17개 이상의 연속 아미노산; 약 18개 이상의 연속 아미노산; 약 19개 이상의 연속 아미노산; 약 20개 이상의 연속 아미노산; 약 21개 이상의 연속 아미노산; 약 22개 이상의 연속 아미노산; 약 23개 이상의 연속 아미노산; 약 24개 이상의 연속 아미노산; 약 25개 이상의 연속 아미노산; 약 26개 이상의 연속 아미노산; 또는 약 27개의 연속 아미노산을 포함한다.　
두 개의 폴리펩티드 사이의 퍼센트 서열 동일성은 적합한 컴퓨터 프로그램, 예를 들어, 위스콘신 대학 유전자 컴퓨팅 그룹의 GAP 프로그램을 사용하여 결정될 수 있고, 퍼센트 동일성은 서열이 최적으로 정렬된 폴리펩티드와 관련하여 계산된다는 것을 인식할 것이다.
정렬은 대안적으로 클러스탈 W 프로그램을 사용하여 수행될 수 있다(본원에 참조로 인용된 문헌(Thompson et aL, 1994, NucL Acid Res. 22:4673-4680)에 기재된 바와 같음).
그렐린 분자의 단편 및 변이체는 당업계에 익히 공지된 단백질 공학, 지시된 진화 및/또는 부위 지시된 돌연변이 유발의 임의의 방법을 사용하여 제조될 수 있다 (예를 들어, 문헌(Molecular Cloning: a Laboratory Manual, 3rd edition, Sambrook & Russell, 2001, Cold Spring Harbor Laboratory Press) 참조, 이 개시내용은 본원에 참고로 인용된다).
"유도체 그렐린"이란, 펩티도미메틱 화합물을 포함하며, 이는 GHS-R에 특이적으로 결합하고/하거나 GHS-R을 활성화시키는 펩티도미메틱 화합물과 같이 유용할 수 있다. 용어 "펩티도미메틱"은 치료제로서 특정 그렐린 분자의 형태 및 바람직한 특징을 모방하는 화합물을 지칭한다.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 합성 그렐린 분자; 및/또는 재조합 그렐린 분자; 및/또는 내인성 그렐린 분자를 포함하거나 이로 구성되는 그룹 중 하나 이상을 포함한다.
"합성 그렐린 분자"란, 액상 펩티드 합성 및 고상 펩티드 합성과 같은 숙주 세포 또는 숙주 유기체의 사용 없이 인위적으로 생성된 그렐린 분자를 포함한다.
한 구현예에서, 합성 그렐린 분자는 합성 변형된 그렐린; 및/또는 합성 그렐린 융합 분자; 및/또는 합성 그렐린 단편; 및/또는 합성 그렐린 변이체; 및/또는 합성 그렐린 유도체; 및/또는, 합성 야생형 그렐린을 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터의 하나 이상이다..
"재조합 그렐린 분자"란, 재조합 숙주 세포 유기체, 예를 들어, 재조합 이. 콜리(E. coli) 숙주에서 그렐린 분자를 인코딩하는 유전자를 재조합적으로 발현함으로써 생성되고, 바람직하게는 이로부터 그렐린 분자의 회수 및 정제가 뒤따르는 그렐린 분자를 포함한다. 일부 구현예에서, 재조합 그렐린 분자는 N-말단 메티오닌 아미노산을 갖지 않는다.
한 구현예에서, 재조합 그렐린 분자는 재조합 변형된 그렐린; 및/또는 재조합 그렐린 융합 분자; 및/또는 재조합 그렐린 단편; 및/또는 재조합 그렐린 변이체; 및/또는 재조합 그렐린 유도체; 및/또는, 재조합 야생형 그렐린을 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터의 하나 이상이다.
"내인성 그렐린 분자"란, 숙주 유기체에 의해 생성된 그렐린 분자를 포함하며, 여기서 상기 그렐린 분자는 해당 숙주 유기체에 대한 야생형 그렐린 분자인 그렐린 분자 또는 해당 숙주 유기체에 대한 야생형 그렐린 분자가 아닌 그렐린 분자일 수 있다.
한 구현예에서, 내인성 그렐린 분자는 내인성 변형된 그렐린; 및/또는 내인성 그렐린 융합 분자; 및/또는 내인성 그렐린 단편; 및/또는 내인성 그렐린 변이체; 및/또는 내인성 그렐린 유도체; 및/또는 내인성 야생형 그렐린을 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터의 하나 이상이다.
한 구현예에서, 숙주 유기체는 설치류(예: 마우스, 및/또는 래트, 및/또는 햄스터, 및/또는 기니 피그, 및/또는 저빌, 및/또는 토끼); 및/또는 개과(예: 개); 및/또는 고양이과(예: 고양이); 영장류(예: 인간, 및/또는 원숭이 및/또는 유인원); 및/또는 말과(예: 말); 및/또는 소과(예: 암소); 및/또는 돼지과(예: 돼지)를 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터의 하나 이상이다.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 매일 1회 이상; 예를 들어, 매일 2회 이상; 매일 3회 이상; 매일 4회 이상; 또는 매일 5회 이상, 바람직하게는 매일 2회 투여된다.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 하루 이상; 예를 들어, 2일 이상; 3일 이상; 4일 이상; 5일 이상; 6일 이상; 1주 이상; 8일 이상; 9일 이상; 10일 이상; 11일 이상; 12일 이상; 13일 이상; 2주 이상; 3주 이상; 4주 이상; 1개월 이상; 5주 이상; 6주 이상; 7주 이상; 8주 이상; 2개월 이상; 3개월 이상; 4개월 이상; 5개월 이상; 6개월 이상; 7개월 이상; 8개월 이상; 9개월 이상; 10개월 이상; 11개월 이상; 또는 1년 이상의 기간에 걸쳐 투여된다.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 매일, 2일 마다, 3일 마다, 4일 마다, 5일 마다, 6일 마다, 1주마다, 8일 마다, 9일 마다, 10일 마다, 11일 마다, 12일 마다, 13일 마다, 1주 마다, 2주 마다, 3주 마다, 4주 마다, 1개월 마다, 2개월 마다, 3개월 마다, 4개월 마다, 5개월 마다, 6개월 마다, 7개월 마다, 8개월 마다, 9개월 마다, 10개월 마다, 11개월 마다, 또는 1년 마다 투여된다.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 다음과 같은 목적하는 효과를 가질 때까지 투여된다:
(i) AHF를 억제하는 것, 예를 들어, AHF의 발생을 늦추거나, 감소하거나 정지시키는 것;
(ii) AHF를 완화시키는 것, 예를 들어, AHF를 갖는 개체에서 AHF의 회귀를 유발하는 것; 및/또는
(iii) AHF를 치료하는 것, 예를 들어, AHF를 갖는 개체를 AHF가 더 이상 검출가능하지 않는 건강 상태로 복귀시키는 것.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 비경구, 및/또는 정맥내, 및/또는 동맥내, 및/또는 복강내, 및/또는 척추강내, 및/또는 근육내, 및/또는 피하, 및/또는 주입에 의해 투여된다.
바람직한 구현예에서, 그렐린 분자는 주입, 예를 들어, 정맥내 주입에 의해 투여된다.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 약 10분 이상; 예를 들어, 약 20분 이상; 약 30분 이상; 약 40분 이상; 약 50분 이상; 약 1시간 이상; 약 2시간 이상; 약 3시간 이상; 약 4시간 이상; 약 5시간 이상; 약 6시간 이상; 약 7시간 이상; 약 8시간 이상; 약 9시간 이상; 약 10시간 이상; 약 11시간 이상; 약 12시간 이상; 약 13시간 이상; 약 14시간 이상; 약 15시간 이상; 약 16시간 이상; 약 17시간 이상; 약 18시간 이상; 약 19시간 이상; 약 20시간 이상; 약 21시간 이상; 약 22시간 이상; 약 23시간 이상; 또는 약 24시간 이상, 바람직하게는 약 6시간 이상 또는 약 24시간 이상, 더욱 바람직하게는 2시간 이상의 기간에 걸쳐 주입에 의해 투여된다.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 약 0.1ml/분 이상; 예를 들어, 약 0.2ml/분 이상; 약 0.3ml/분 이상; 약 0.4ml/분 이상; 약 0.5ml/분 이상; 약 0.6ml/분 이상; 약 0.7ml/분 이상; 약 0.8ml/분 이상; 약 0.9ml/분 이상; 약 1ml/분 이상; 약 1.1ml/분 이상; 약 1.2ml/분 이상; 약 1.3ml/분 이상; 약 1.4ml/분 이상; 약 1.5ml/분 이상; 약 1.6ml/분 이상; 약 1.7ml/분 이상; 약 1.8ml/분 이상; 약 1.9ml/분 이상; 약 2ml/분 이상; 약 3ml/분 이상; 약 4ml/분 이상; 약 5ml/분 이상; 약 6ml/분 이상; 약 7ml/분 이상; 약 8ml/분 이상; 약 9ml/분 이상; 또는 약 10ml/분 이상, 바람직하게는 약 0.5ml/분 이상의 속도로 주입에 의해 투여된다.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 약 1㎍/kg 체중 이상; 예를 들어, 약 2㎍/kg 체중 이상; 약 3㎍/kg 체중 이상; 약 4㎍/kg 체중 이상; 약 5㎍/kg 체중 이상; 약 6㎍/kg 체중 이상; 약 7㎍/kg 체중 이상; 약 8㎍/kg 체중 이상; 약 9㎍/kg 체중 이상; 약 10㎍/kg 체중 이상; 약 11㎍/kg 체중 이상; 약 12㎍/kg 체중 이상; 약 13㎍/kg 체중 이상; 약 14㎍/kg 체중 이상; 약 15㎍/kg 체중 이상; 약 16㎍/kg 체중 이상; 약 17㎍/kg 체중 이상; 약 18㎍/kg 체중 이상; 약 19㎍/kg 체중 이상; 약 20㎍/kg 체중 이상; 약 25㎍/kg 체중 이상; 약 30㎍/kg 체중 이상; 약 40㎍/kg 체중 이상; 약 50㎍/kg 체중 이상; 약 60㎍/kg 체중 이상; 약 70㎍/kg 체중 이상; 약 80㎍/kg 체중 이상; 약 90㎍/kg 체중 이상; 또는 약 100㎍/kg 체중 이상, 바람직하게는 약 12㎍/kg 체중 이상의 투여량으로 투여된다.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 약 0.001㎍/kg 체중/분 이상; 예를 들어, 약 0.002㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.003㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.004㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.005㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.006㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.007㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.008㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.009㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.01㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.02㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.03㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.04㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.05㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.06㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.07㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.08㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.09㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.1㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.2㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.3㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.4㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.5㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.6㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.7㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.8㎍/kg 체중/분 이상; 약 0.9㎍/kg 체중/분 이상; 약 1㎍/kg 체중/분 이상; 약 1.5㎍/kg 체중/분 이상; 약 2㎍/kg 체중/분 이상; 약 2.5㎍/kg 체중/분 이상; 약 3㎍/kg 체중/분 이상; 약 3.5㎍/kg 체중/분 이상; 약 4㎍/kg 체중/분 이상; 약 4.5㎍/kg 체중/분 이상; 약 5㎍/kg 체중/분 이상; 약 5.5㎍/kg 체중/분 이상; 약 6㎍/kg 체중/분 이상; 약 6.5㎍/kg 체중/분 이상; 약 7㎍/kg 체중/분 이상; 약 7.5㎍/kg 체중/분 이상; 약 8㎍/kg 체중/분 이상; 약 8.5㎍/kg 체중/분 이상; 약 9㎍/kg 체중/분 이상; 약 9.5㎍/kg 체중/분 이상; 또는 약 10㎍/kg 체중/분 이상, 바람직하게는 약 0.1㎍/kg 체중/분 이상의 투여량으로 투여된다.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 약 1피코몰(pmol) 이상, 예를 들어, 약 2pmol 이상; 약 3pmol 이상; 약 4pmol 이상; 약 5pmol 이상; 약 6pmol 이상; 약 7pmol 이상; 약 8pmol 이상; 약 9pmol 이상; 약 10pmol 이상; 약 15pmol 이상; 약 20pmol 이상; 약 25pmol 이상; 약 30pmol 이상; 약 35pmol 이상; 약 40pmol 이상; 약 45pmol 이상; 약 50pmol 이상; 약 55pmol 이상; 약 60pmol 이상; 약 65pmol 이상; 약 70pmol 이상; 약 75pmol 이상; 약 80pmol 이상; 약 85pmol 이상; 약 90pmol 이상; 약 95pmol 이상; 약 100pmol 이상; 약 110pmol 이상; 약 120pmol 이상; 약 130pmol 이상; 약 140pmol 이상; 약 150pmol 이상; 약 160pmol 이상; 약 170pmol 이상; 약 180pmol 이상; 약 190pmol 이상; 약 200pmol 이상; 약 250pmol 이상; 약 300pmol 이상; 약 350pmol 이상; 약 400pmol 이상; 약 450pmol 이상; 또는 약 500pmol 이상, 바람직하게는 약 30pmol 이상의 투여량으로 투여된다.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 약 1㎍/ml 이상, 예를 들어, 약 1.2㎍/ml 이상; 약 1.4㎍/ml 이상; 약 1.6㎍/ml 이상; 약 1.8㎍/ml 이상; 약 2㎍/ml 이상; 약 2.2㎍/ml 이상; 약 2.4㎍/ml 이상; 약 2.6㎍/ml 이상; 약 2.8㎍/ml 이상; 약 3㎍/ml 이상; 약 3.2㎍/ml 이상; 약 3.4㎍/ml 이상; 약 3.6㎍/ml 이상; 약 3.8㎍/ml 이상; 약 4㎍/ml 이상; 약 4.2㎍/ml 이상; 약 4.4㎍/ml 이상; 약 4.6㎍/ml 이상; 약 4.8㎍/ml 이상; 약 5㎍/ml 이상; 약 5.2㎍/ml 이상; 약 5.4㎍/ml 이상; 약 5.6㎍/ml 이상; 약 5.8㎍/ml 이상; 약 6㎍/ml 이상; 약 6.2㎍/ml 이상; 약 6.4㎍/ml 이상; 약 6.6㎍/ml 이상; 약 6.8㎍/ml 이상; 약 7㎍/ml 이상; 약 7.2㎍/ml 이상; 약 7.4㎍/ml 이상; 약 7.6㎍/ml 이상; 약 7.8㎍/ml 이상; 약 8㎍/ml 이상; 약 8.1 ㎍/ml 이상; 약 8.2㎍/ml 이상; 약 8.3㎍/ml 이상; 약 8.4㎍/ml 이상; 약 8.5㎍/ml 이상; 약 8.6㎍/ml 이상; 약 8.7㎍/ml 이상; 약 8.8㎍/ml 이상; 약 8.9㎍/ml 이상; 약 9㎍/ml 이상; 약 9.1㎍/ml 이상; 약 9.2㎍/ml 이상; 약 9.3㎍/ml 이상; 약 9.4㎍/ml 이상; 약 9.5㎍/ml 이상; 약 9.6㎍/ml 이상; 약 9.7㎍/ml 이상; 약 9.8㎍/ml 이상; 약 9.9㎍/ml 이상; 약 10㎍/ml 이상; 약 11㎍/ml 이상; 약 12㎍/ml 이상; 약 13㎍/ml 이상; 약 14㎍/ml 이상; 약 15㎍/ml 이상; 약 16㎍/ml 이상; 약 17㎍/ml 이상; 약 18㎍/ml 이상; 약 19㎍/ml 이상; 약 20㎍/ml 이상; 약 21㎍/ml 이상; 약 22㎍/ml 이상; 약 23㎍/ml 이상; 약 24㎍/ml 이상; 약 25㎍/ml 이상; 약 26㎍/ml 이상; 약 27㎍/ml 이상; 약 28㎍/ml 이상; 약 29㎍/ml 이상; 또는 약 30㎍/ml 이상의 농도로 투여된다.
바람직한 구현예에서, 그렐린 분자는 약 10㎍/ml 내지 약 30㎍/ml의 농도로 투여된다.
한 구현예에서, 투여되는 그렐린 분자의 양은 약 100㎍ 이상; 예를 들어, 약 120㎍ 이상; 약 140㎍ 이상; 약 160㎍ 이상; 약 180㎍ 이상; 약 200㎍ 이상; 약 220㎍ 이상; 약 240㎍ 이상; 약 260㎍ 이상; 약 280㎍ 이상; 약 300㎍ 이상; 약 320㎍ 이상; 약 340㎍ 이상; 약 360㎍ 이상; 약 380㎍ 이상; 약 400㎍ 이상; 약 420㎍ 이상; 약 440㎍ 이상; 약 460㎍ 이상; 약 480㎍ 이상; 약 500㎍ 이상; 약 520㎍ 이상; 약 540㎍ 이상; 약 560㎍ 이상; 약 580㎍ 이상; 약 600㎍ 이상; 약 620㎍ 이상; 약 640㎍ 이상; 약 660㎍ 이상; 약 680㎍ 이상; 약 700㎍ 이상; 약 720㎍ 이상; 약 740㎍ 이상; 약 760㎍ 이상; 약 780㎍ 이상; 또는 약 800㎍ 이상이다.　
바람직한 구현예에서, 그렐린 분자는 약 0.1㎍/kg 체중/분의 용량 및 약 10㎍/ml 내지 약 30㎍/ml의 농도 및 0.5ml/분의 주입 속도로 투여된다.
하기 표 2에 개요된 바와 같이, 투여되는 그렐린의 농도 및/또는 양은 그렐린이 투여될 개체의 체중에 의존할 수 있다.
요법에서, 본 발명의 그렐린 분자 및 조성물은 단독으로 투여될 수 있지만, 일반적으로 의도된 투여 경로 및 표준 제약 관행과 관련하여 선택된 적합한 약제학적 부형제, 희석제 또는 담체와의 혼합물로 투여될 것이다.
본 발명의 그렐린 분자 및 조성물은 다른 물질, 예를 들어, 용액을 혈액과 등장성으로 만들기에 충분한 염 또는 글루코스를 함유할 수 있는 멸균 수용액의 형태로 가장 잘 사용된다. 수용액은, 필요한 경우, 적합하게 완충되어야 한다(바람직하게는 pH 3 내지 9로).　 멸균 조건하에서 적합한 비경구 제형의 제조는 의학 분야의 숙련가에게 익히 공지된 표준 제약 기술에 의해 용이하게 달성된다.
비경구 투여에 적합한 그렐린 분자 및 조성물은 제형을 의도된 수용자의 혈액과 등장성으로 만드는 항산화제, 완충제, 세균 발육 저지제 및 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 주사 용액; 및 현탁제 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 현탁액을 포함한다.
그렐린 분자 및 조성물은 단위 용량 또는 다중 용량 용기, 예를 들어, 밀봉된 앰플 및 바이알로 제시될 수 있으며, 사용 직전에 멸균된 액체 담체, 예를 들어, 주사용수의 첨가만을 필요로 하는 동결 건조(동결건조) 상태로 저장될 수 있다. 즉각적인 주사 용액 및 현탁액은 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 제조될 수 있다.
의사는 임의의 개체에게 가장 적합한 그렐린 분자 및 조성물의 용량을 결정할 것이고, 특정 개체의 나이, 체중 및 반응에 따라 달라질 것이다.
한 구현예에서, 개체는 설치류(예: 마우스, 및/또는 래트, 및/또는 햄스터, 및/또는 기니 피그, 및/또는 저빌; 및/또는 토끼); 및/또는 개과(예: 개); 및/또는 고양이과(예: 고양이); 영장류(예: 인간; 및/또는 원숭이; 및/또는 유인원); 및/또는 말과(예: 말); 및/또는 소과(예: 암소); 및/또는 돼지과(예: 돼지), 바람직하게는 인간을 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터의 하나 이상이다.
한 구현예에서, 개체는 18세 이상; 예를 들어, 20세 이상; 30세 이상; 40세 이상; 50세 이상; 60세 이상; 65세 이상; 70세 이상; 75세 이상; 80세 이상; 85세 이상; 또는 90세 이상, 바람직하게는 65세 이상이다.
일반적으로, AHF는 고령자에게 더욱 보편적인 질환인 것으로 간주된다. 따라서, 본 발명의 그렐린 분자는 특히 고령자에게 효과적일 가능성이 있다.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 수술 전에, 및/또는 수술 중, 및/또는 수술 후에 투여된다.
일부 상황에서, AHF는 부분적으로 수술에 의해 야기될 수 있다. 따라서, 본 발명의 그렐린 분자의 투여는 수술 전, 후 또는 수술 중에 특히 효과적일 수 있다.
한 구현예에서, 수술은 심장 수술; 및/또는 심장 우회 수술(예: 관상 동맥 심장 우회 수술); 및/또는 혈관성형술 수술; 및/또는 안디오플라스티 수술; 및/또는 심장 판막 복구 수술; 및/또는 심장 이식 수술; 및/또는 위장 수술; 및/또는 정형 외과 수술; 및/또는 신경학적 수술; 및/또는 장치를 설치하기 위한 수술(임의로, 상기 장치는 인공심박조율기, 및/또는 심장 펌프, 및/또는 제세동기이다), 바람직하게 심장 우회 수술을 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터 선택된다.
한 구현예에서, 개체는 하나 이상의 추가 치료제가 투여된다.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 조성물, 바람직하게는 약제학적 조성물에 존재한다.　
한 구현예에서, 조성물은 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함한다.
한 구현예에서, 조성물은 무독성 유기산; 및/또는 무독성 무기산; 및/또는 무독성 유기 염기; 및/또는 무독성 무기 염기; 및 그로부터의 염을 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터의 하나 이상이다.
본질적으로 산성인 본 제제의 약제학적으로 허용되는 염기 염을 제조하기 위한 시약으로서 사용될 수 있는 화학적 염기는 이러한 화합물과 무독성 염기 염을 형성하는 것들이다. 이러한 무독성 염기 염은 이러한 약제학적으로 허용되는 양이온, 예를 들어, 알칼리 금속 양이온(예: 칼륨 및 나트륨) 및 알칼리 토금속 양이온(예: 칼슘 및 마그네슘), 암모늄 또는 수용성 아민 부가 염, 예를 들어, N-메틸글루카민-(메글루민), 및 저급 알칸올암모늄 및 특히 약제학적으로 허용되는 유기 아민의 기타 염기 염으로부터 유래된 것들을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
한 구현예에서, 조성물은 하나 이상의 추가 치료제를 포함한다.
한 구현예에서, 하나 이상의 추가 치료제는 AHF의 치료를 위한 하나 이상의 추가 치료제이다.
한 구현예에서, 하나 이상의 치료제는 안지오텐신 전환 효소(ACE) 억제제; 및/또는 안지오텐신 II 수용체 차단제; 및/또는 바소프레신 수용체 길항제; 및/또는 베타 차단제; 및/또는 심장수축성 혈관확장제(inodilator)(특히, 미리논 및/또는 에녹시몬 및/또는 도부타민 및/또는 레보시멘단); 및/또는 오메캄티브 메카빌; 및/또는 레닌 길항제; 및/또는 릴렉신; 및/또는 울라리티드(ularitide); 및/또는 디곡신(라녹신); 및/또는 혈관 확장제; 및/또는 안지오텐신 II 수용체 길항제(예: 발사르탄); 및/또는 아스피린; 및/또는 스타틴; 및/또는 항고혈압 약물(예: 사쿠비트릴); 및/또는 칼슘 감작제; 및/또는 이바브라딘; 및/또는 이뇨제; 및/또는 혈관 수축제(예: 노르아드레날린, 도파민, 바소프레신, 및/또는 안지오텐신 II); 및/또는 아데노신 길항제; 및/또는 알도스테론 길항제를 포함하거나 이로 구성되는 그룹으로부터 선택된다.
바람직한 구현예에서, 하나 이상의 치료제는 발사르탄 및/또는 사쿠비트릴을 포함한다.
대안적인 바람직한 구현예에서, 하나 이상의 치료제는 혈관 확장제를 포함한다.
한 구현예에서, 칼슘 감작제는 레보시멘단 및/또는 도부타민을 포함한다.
한 구현예에서, 혈관 확장제는 니트로혈관 확장제(예: 니트로글리세린, 및/또는 니트로프러시드, 및/또는 네시리티드)를 포함한다.
한 구현예에서, 이뇨제는 푸로세마이드; 및/또는 부메타니드; 및/또는 티아지드; 및/또는 메톨라존; 및/또는 메톨라존을 포함하거나 이로 구성되는 그룹 중 하나 이상을 포함한다.
한 구현예에서, 바소프레신 수용체 길항제는 톨밥탄 및/또는 코니밥탄을 포함한다.
한 구현예에서, 아데노신 길항제는 BG9719 및/또는 롤로필린을 포함한다.
한 구현예에서, 그렐린 분자는 의료 장치, 예를 들어, 심장 펌프와 함께 사용된다. "와 함께 사용된"이란, 의료 장치의 하나 이상의 표면이 그렐린 분자로 코팅된다는 것을 포함한다.
본 발명의 제4 측면은 그렐린 분자와 안지오텐신 전환 효소(ACE) 억제제; 및/또는 안지오텐신 II 수용체 차단제; 및/또는 바소프레신 수용체 길항제; 및/또는 베타 차단제; 및/또는 심장수축성 혈관확장제(특히, 미리논 및/또는 에녹시몬 및/또는 도부타민 및/또는 레보시멘단); 및/또는 오메캄티브 메카빌; 및/또는 레닌 길항제; 및/또는 릴렉신; 및/또는 울라리티드; 및/또는 디곡신(라녹신); 및/또는 혈관 확장제; 및/또는 안지오텐신 II 수용체 길항제(예: 발사르탄); 및/또는 아스피린; 및/또는 스타틴; 및/또는 항고혈압 약물(예: 사쿠비트릴); 및/또는 칼슘 감작제; 및/또는 이바브라딘; 및/또는 이뇨제; 및/또는 혈관 수축제(예: 노르아드레날린, 도파민, 바소프레신, 및/또는 안지오텐신 II); 및/또는 아데노신 길항제; 및/또는 알도스테론 길항제를 포함하는 목록으로부터 선택된 하나 이상의 치료제를 포함하는 조성물을 제공한다.
(특히 제4 측면의) 바람직한 구현예에서, 하나 이상의 치료제는 릴렉신; 및/또는 울라리티드; 및/또는 심장수축성 혈관확장제; 및/또는 혈관 수축제; 및/또는 혈관 확장제를 포함하는 목록으로부터 선택된다.
보다 바람직한 구현예에서, 하나 이상의 치료제는 혈관 확장제(특히, 노르아드레날린 및/또는 바소프레신 및/또는 안지오텐신 II)를 포함한다. 대안적인 보다 바람직한 구현예에서, 하나 이상의 치료제는 심장수축성 혈관확장제(특히, 미리논 및/또는 에녹시몬 및/또는 도부타민 및/또는 레보시멘단)를 포함한다.
(특히 제4 측면의) 한 구현예에서, 조성물은 의료 장치, 예를 들어, 심장 펌프와 함께 사용된다. "와 함께 사용된다"란, 의료 장치의 하나 이상의 표면이 조성물로 코팅된다는 것을 포함한다.
본 발명의 제4 측면의 구현예에서, 조성물은 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함한다.
본 발명자들은 본 발명의 제4 측면의 조성물이 본 발명의 제1, 제2 및/또는 제3 측면에 대해 논의된 특징들 중 어느 하나를 포함할 수 있고, 본 발명의 제1, 제2 및/또는 제3 측면에 대해 논의된 용도 또는 방법 중 어느 하나를 위해 사용될 수 있다는 것을 포함한다.
본 발명의 제5 측면은 본 발명의 제1, 제2, 제3 및/또는 제4 측면의 그렐린 분자 및/또는 조성물을 포함하는 부품의 키트(kit of parts)를 제공한다.
본 발명의 제5 측면의 구현예에서, 부품의 키트는 설명서를 포함한다. 상기 설명서는 본원에 기재된 용도, 및/또는 방법, 및/또는 그렐린 분자, 및/또는 조성물에 관한 설명적, 교육적, 마케팅 또는 다른 자료일 수 있다..
키트의 정보 자료는 그 형태에 제한되지 않는다. 본 발명의 제5 측면의 한 구현예에서, 정보 자료는 그렐린 분자 및/또는 조성물의 생산, 및/또는 그렐린 분자 및/또는 조성물의 분자량, 및/또는 그렐린 분자 및/또는 조성물의 농도, 및/또는 만료일, 및/또는 배치 및/또는 생산 현장 정보에 관한 정보를 포함할 수 있다. 정보는 다양한 포맷으로 제공될 수 있으며, 인쇄된 텍스트, 컴퓨터 판독 가능 자료, 비디오 녹음, 또는 오디오 녹음, 또는, 예를 들어, 인터넷상에서 실질적인 자료에 링크 또는 주소를 제공하는 정보를 포함한다.
본 발명의 제5 측면의 바람직한 구현예에서, 부품의 키트는 AHF의 치료에서 그렐린 분자 및/또는 조성물의 사용을 위한 설명서를 포함한다.
본 발명의 제5 측면의 구현예에서, 키트는 그렐린 분자 및/또는 조성물을 위한 하나 이상의 용기를 포함한다.　
본 발명의 제5 측면의 구현예에서, 부품의 키트는 용매; 및/또는 완충제; 및/또는 안정화제; 및/또는 방부제를 포함하거나 이로 구성되는 그룹의 하나 이상의다른 품목을 포함한다.
본 발명의 제5 측면의 구현예에서, 부품의 키트는 그렐린 분자 및/또는 조성물을 개체에 투여하기 위한 수단, 바람직하게는 그렐린 분자 및/또는 조성물을 개체에게 주입하기 위한 수단을 포함한다.
본 발명자들은 본 발명의 제5 측면의 부분의 키트가 본 발명의 제1, 제2, 제3 및/또는 제4 측면에 대해 논의된 특징 중 어느 하나를 포함할 수 있고, 본 발명의 제1, 제2, 제3 및/또는 제4 측면에 대해 논의된 용도 또는 방법 중 어느 하나를 위해 사용될 수 있음을 포함한다.
본 명세서에서 명백하게 이전에 공개된 문서의 목록 또는 논의는 상기 문서가 상기 기술 상태의 일부이거나 통상적인 일반적 지식이라는 것을 인정하는 것으로 반드시 받아들여져서는 안된다.
본 발명은 이제 하나 이상의 비제한적인 도면 및 실시예를 참조하여 기재될 것이다.
도 1. 스크리닝 및 등록 환자의 정렬 흐름도.
도 2. 조사 및 그렐린/위약 주입의 흐름도.
도 3. 아실화된 그렐린 농도 ng/L. 표기 "FU"는 2 내지 5일째 추적 조사를 나타낸다.
도 4. 그렐린/위약 주입 전, 동안 및 후의 심장 출력(CO). (A) 그렐린 그룹에서, CO는 주입에 따라 증가하고 주입 중단 후에 떨어지며, 모든 쌍별 비교는 유의하다. 위약 그룹에서는, CO의 유의한 변화는 없었다. (B 및 C) 개체 환자의 CO의 절대 및 % 변화는 그렐린 (증가) 대 위약 (변화 없음) 그룹에서 상이하였다.
도 5. 그렐린/위약 주입 전, 동안 및 후 박출량(SV). (A) 그렐린 그룹에서, SV는 주입에 따라 증가하고 주입 중단 후에 떨어지며, 모든 쌍별 비교는 유의하다. 위약 그룹에서는, SV의 유의한 변화가 없었다. (B 및 C) 개별 환자의 SV의 절대 및 % 변화는 그렐린 (증가) 대 위약 (변화 없음) 그룹에서 상이하였다.
도 6a. 그렐린/위약 주입 전, 동안 및 후 수동으로 측정된 심박수(HR). (A)그렐린 그룹에서, HR은 기준선과 120분 사이에서 약간 떨어졌다. 위약 그룹에서는, HR의 유의한 변화가 없었다. (B 및 C) HR의 절대 또는 % 변화에서 통계적으로 유의한 차이는 없었다.
도 6b. 넥스핀을 사용한 지속적인 모니터링에 의한 중앙값 심박수. 중앙값 심박수는 70인데, 이는 많은 환자가 심장 재동기화 요법(양심실 인공심박조율기)으로 분당 70회 박동으로 진행되었기 때문이다. 수단은 도 6c를 참조한다.
도 6c. 넥스핀을 사용하는 연속 모니터링을 의한 평균 심박수.
도 7. 그렐린/위약 주입 전, 동안 및 후 추정된 전신 혈관 저항(SVR). (A)그렐린 그룹에서, SVR은 기준선과 60분 사이에 떨어졌다. 위약 그룹에서는, SVR의 유의한 변화는 없었다. (B 및 C) SVR의 절대 및 % 변화는 그렐린(감소) 대 위약 (변화 없음) 그룹에서 상이하였다.
도 8-12. 넥스핀에 의해 측정된 혈압. 그렐린/위약 주입 동안 및 후 수축기(도 8), 확장기(도 9) 및 평균(도 10) 동맥압 및 넥스핀에 의해 연속적으로 측정된 중앙값(도 11) 및 평균(도 12). 그렐린 또는 위약 그룹 사이 또는 이내에 변화 또는 변화의 차이는 없었다.
도 13. 심 초음파 검사로부터의 좌심실 말단 확장기 직경(LVEDD). 그렐린 또는 위약 그룹 사이 또는 이내에 변화 또는 변화의 차이는 없었다.
도 14. 좌심실 말단 수축기 직경(LVESD). 그렐린 또는 위약 그룹 사이 또는 이내에 변화 또는 변화의 차이는 없었다.
도 15. 좌심실 박출 계수(LVEF). 그렐린으로 EF에서 더 큰 절대(p=0.12) 및 퍼센트 변화(p=0.14)를 향하는 경향이 있었지만, 그렐린 또는 위약 그룹 사이 또는 이내에 통계적 상이한 변화 또는 변화의 차이는 없었다.　
도 16. 삼첨판 환형 평면 수축기 변동(TACSE). 그렐린과 위약 사이의 변화에서 더 큰 차이를 향한 경향이 있었다.
도 17. E/e'(맥파 도플러 확장기 승모판 유입 속도[E]/조직 도플러 확장기 승모판 환형 속도[e'], LV 충전 압력에 대한 대리자). 그렐린과 위약 사이에 변화의 차이는 없었다.
도 18. 심 초음파 검사에 의해 측정된 박출량(SV). 그렐린(A)에 유리한 SV의 변화에는 유의한 차이가 있었고, 그렐린에 유리한 60분에 절대 및 퍼센트 변화의 차이, 및 120분에 절대 및 퍼센트 변화의 유의한 차이를 향한 경향이 있었다.
도 19. 심 초음파 검사에 의해 측정된 심장 출력(CO). 그렐린(A)에 유리한 CO의 변화의 차이를 향하는 경향, 그렐린에 유리한 60 및 120분에서의 절대 및 퍼센트 변화의 차이를 향한 경향이 있었다.
도 20. 심 초음파 검사에 의해 측정된 세그먼트 변형. 그렐린에 유리한 수치적 차이는 있었지만 통계적 유의성은 없었다.
도 21. 주입(INFUSION) 동안 및 기준선 대 2 내지 5일 추적 조사(BL 대 FU)에서 QTc.
도 22. HF 입원 없이 90일까지 생존.
도 23. HF 입원 또는 심장 이식 또는 좌심실 보조 장치 없이 90일까지 생존.
도 24. 심근세포 분획 단축. 그렐린, 위약, D-Lys(그렐린 길항제) 및 D-Lys + 그렐린에 노출된 SHAM 및 HF 마우스로부터 단리된 심근세포에서 퍼센트 분획 단축(FS)에 의해 측정된 수축성. 그렐린은 그렐린 수용체 특이적 방식으로 수축성을 증가시킨다. 이것은 생체외이기 때문에, 이들 효과는 로딩 조건(좌심실 프리로드 또는 후부하)과 무관하다. 이 MI 모델에서, HF 심근세포는 보상 반응으로 인해 더 큰 수축성을 갖는다. 분획 단축(FS).
도 25a. 전기적으로 자극된 성인 심근세포로부터 수득된 대표적인 Ca2+ 과도 상태. Ca2+ 과도 상태 진폭은 SHAM과 HF 마우스 모두에서 심근세포의 그렐린 치료 후 상이하지 않았다. 왼쪽: fluo-3으로 로딩된 심근세포에서의 대표적인 라인 스캔 기록. 우측: 대표적인 심근세포 Ca2+ 과도 상태.
도 25b. 성인 뮤린 심근세포로부터의 평균 Ca2+ 과도 상태. SHAM 또는 HF 마우스에서 그렐린 대 위약 사이의 차이는 없었다. 데이터는 평균±SEM으로 제시된다.
도 26. 심장 트로포닌 I 인산화. 트로포닌 I 상의 세린 23-24의 인산화에 대한 항체를 갖는 단백질 용해물의 면역블롯팅. 왼쪽, 예는 인산화된(ser23-24) 심장 트로포닌 I(cTnl phospho (23-24) 및 총 심장 트로포닌 I(ctnl)의 블롯을 면역블롯팅한다. 심근세포의 그렐린 치료는 총 트로포닌 I 발현의 변화 없이 적은 cTnl 인산화(저인산화)와 관련되었다. 그렐린 수용체 길항제 D-Lys와의 공동 배양은 그렐린 유도 저인산화 효과를 차단하였다. 오른쪽, 마우스 심근 경색 심장으로부터 단리된 심근세포에서 cTnl의 인산화 수준을 나타내는 면역블롯 밴드 세기의 정량화. 두 동물 및 동물당 하나의 실험. 각 실험에서, 표시된 바와 같이 단리되고 치료된 심근세포의 4개의 분취량. 2개의 실험의 평균±SEM.
도 27. 그렐린 배양 후 cAMP의 심근세포 농도. 그렐린은 심근세포에서 cAMP 농도를 감소시킨다. cAMP에 대한 그렐린의 효과는 그렐린 수용체 길항제 D-lys 3의 존재하에서 차단되었다.
실시예
하기 실시예는 본 발명의 특정 구현예를 입증하기 위해 포함된다. 다음 실시예에 개시된 기술은 본 발명의 실시에 있어서 잘 기능하기 위해 발명자가 발견한 기술을 나타내고, 따라서 그의 실시를 위해 바람직한 양식을 구성하는 것으로 간주될 수 있다는 것이 당업자에 의해 이해되어야 한다. 그러나, 당업자는 본 개시내용에 비추어, 많은 변경이 개시된 특정 구현예에서 이루어질 수 있고, 본 발명의 사상 및 범위를 벗어나지 않고 여전히 유사하거나 유사한 결과를 수득할 수 있음을 인식해야 한다.
실험 작업의 요약
도입
그렐린은 잠재적인 심혈관 작용을 갖는 내인성 식욕 자극 펩티드 호르몬이다. 그렐린은 잠재적인 이노트로프 제제인 것으로 오랫동안 간주되었고 세포내 Ca2+ 농도를 증가시킴으로써 작용한다고 가정되었다. 이러한 이해를 기준으로 하여, 그렐린은 증가된 심장 부정맥, 저혈압 및 허혈을 포함하는 급성 심부전(AHF) 환자에게 매우 위험할 수 있는 많은 부작용을 가질 것으로 널리 예상되었다(Abraham et al., 2005; Cuffe et al., 2002; Mebasaa et al, 2007; and Packer et al., 2013).
그 이해와는 반대로, 발명자들은 놀랍게도 그렐린이 세포내 Ca2 + 농도를 증가시키지 않고 기존의 Ca2 　에 대한 감도를 증가시킨다는 것을 식별하였다. 이는 본 발명자들이 종래의 이노트로프로서 작용하고 따라서 저혈압, 허혈 및 부정맥을 유발하는 그렐린의 이전 가정이 부정확하고, 그렐린의 기능에 대한 이전의 오해와 반대로, 그렐린이 새로운 유형의 이노트로프로서 작용하고 저혈압, 허혈 또는 부정맥을 유발하지 않고 AHF를 치료하는데 사용될 수 있다는 가설을 세우게 했다.
이 가설을 시험하기 위해, 본 발명자들은 심부전 환자에 대해 그렐린을 시험하였다. 그렐린이 시험된 환자에게 부주의하게 해를 끼치지 않기 위해, 본 발명자들은 진행성 심부전 환자에 대한 임상 연구를 수행하였다. 진행성 심부전은 AHF와 유사하지만, 이노트로프에 반응하여 AHF에서 관찰될 심각한 부작용이 동일한 정도로 발생하지 않을 것으로 예상되었다. 따라서, 진행성 심부전 환자에게 그렐린을 투여하는 것은 AHF 환자에게 투여되는 경우 그렐린의 안전성과 효과의 매우 유사한 표시를 제공하면서 상기 테스트는 보다 안전한 방식으로 수행될 수 있었다.
이하 설명된 바와 같이, 임상 연구에서 본 발명자들은 그렐린이 이노트로프로서 작용했지만 Ca2+ 농도를 증가시키지 않았음을 확인하였다. 가장 중요하게는, 본 발명자들은 그렐린이 증가된 심장 부정맥, 저혈압 및 허혈과 같은 AHF 환자에게 심각한 문제가 될 임의의 부작용을 일으키지 않았음을 증명하였다. 실험은 또한 그렐린에 의한 치료가 AHF에서 또한 발생할 수 있는 징후의 개선으로 이어짐을 나타내고 그렐린이 해당 질환의 치료에 효과적일 것이라는 것을 입증한다.
심부전 및 그의 형태 및 결과
심부전(HF)은 대사 요구량을 충족시키기에 부적절한 심장 출력 또는 단지 보상적 신경 호르몬 활성화에 이차적인 적절한 CO로서 정의된다. 만성 HF(CHF)는 인구의 2-3% 및 노인의 최대 20%에 영향을 미치며(Go et al., 2014), 입원의 가장 흔한 원인이다(급성 신부전; AHF)(Ambrosy et al., 2014 JACC 2014;63:1123-33).
AHF는 만성 보상이 부적합할 때 가장 빈번히 발생하고, 급성 비대상성 HF(ADHF)로 명명된다. 이의 대부분은 기존의 CHF 환자에 존재하며, 따라서 급성 비대상성 만성 HF, ADCHF라는 용어가 있다.
의료 및 장치 요법은 박출 계수(HFreF)가 감소된 CHF에서 향상된 결과를 갖고, 환자의 5 내지 10%는 감소된 심장 출력(CO), 점진적 말단 장기 부전, ADCHF에 대한 빈번한 반복 입원, 및 높은 사망 위험성을 특징으로 하는 진행성(또한 심각한 또는 말기 단계라고 칭명됨) CHF를 앓고 있다.
ADHF 및 ADCHF에서, 병원내 사망률은 5 내지 10% 범위이며, 평균 입원 기간은 5 내지 8일이다. 환자의 50% 이상은 해결되지 않은 증상을 갖고 퇴원하고, 다른 연구에서 30일 또는 60일 이내에, 절반은 다시 증상이 악화되고, 1/4은 재입원하고, 10% 이상이 사망하였다(Baker et al., 2003; Curtis et al., 2008; Gheorghiade et al., 2006; Go et al., 2014; Polanczyk et al., 2000). 인구 와이드 레지스트리에서 1년 간의 사망률은 25 내지 35%이다(Lund, 2017). 1990년대 후반에 결과가 개선된 후, CHF 및 ADCHD의 예후는 2000년 이후 개선되지 않았다(Baker et al., 2003; Curtis et al., 2008; Polanczyk et al., 2000; Thorvaldsen et al., 2016). HF에 대한 사회 비용은 2010년과 2030년 사이에 3배 증가할 것으로 예상되고, 이 비용의 대부분은 ADCHF와 관련된다(Heididich et al., 2013).
ADCHF에 대한 입원 중, 약 5%는 저혈압 및 쇼크, 부정맥 및 전체 허혈(폐쇄성 관상 동맥 병변의 부재하에서도)과 함께 심각한 혈역학적 손상을 가지며, 이 그룹에서 단기 사망률은 50%를 초과한다.
진행성 HF 및 ADCHF를 위한 이노트로프 요법
대부분의 이노트로프 약물은 세포내 Ca2 + 농도를 증가시킴으로써 작용하고(예: 밀리논, 도부타민); 일부는 기존의 Ca2 +에 대한 수축성 단백질의 민감도를 증가시킴으로써 작용하지만(레보시멘단); 전자는 산소 요구량을 증가시키고 모두 혈관 확장을 포함한 다중적이고 복잡한 메커니즘을 갖는다. 임상 시험과 임상적 관행에서, 기존의 이노트로프는 실제로 보편적으로 저혈압, 빈맥 부정맥 및 허혈을 일으키고, 사망률에 중립 효과를 갖거나 증가시킨다(Abraham et al., 2005; Cuffe et al., 2002; Mebazaa et al., 2007; Packer et al., 2013). 이노트로프의 세 가지 주요 부류가 사용되고 있다:　포스포디에스테라제(PD)-억제제(예: 밀리논); 아드레날린 작용제(예: 도부타민) 및 레보시멘단. 구체적으로, 무작위화 OPTPATH CHF에서, 밀리논 대 위약은 상당히 더 고혈압 및 심방 부정맥을 유발하고, 비유의하게 더 사망을 야기하였다(Cuffe et al., 2002). 관찰 ADHERE 레지스트리에서, 밀리논 및 도부타민은 모두 증가된 사망률과 독립적으로 관련되었다(Abraham et al., 2005). 경구 PD 억제제는 장기적 사용을 위해 개발되었지만 위약과 비교하여 부정맥, 현기증(저혈압으로 인한 가능성), 심장 사망, 및 돌연사를 더 유발하였다(Amsallem et al., 2005; Cohn et al., 1998; Packer et al., 1991; Uretsky et al., 1990). 간헐적 정맥내 도부타민 주입은 HF 입원을 감소시켰지만(Oliva et al., 1999), 조기에 중단되고 발표되지 않은 다음 연구에서는, 사망률을 증가시켰고(Dies et al., 1986), 또 다른 경우에는 대조군이 없었고, 13명의 환자 중 3명만이 26주간의 간헐적 치료 연구 기간 동안 생존하였다(Krell et al., 1986). 레보시멘단은 CO를 증가시키지만 또한 저혈압을 유발한다. 그것은 SURVIVE에서 도부타민(유해함)과 비교하여 중립이었고(Mebazaa et al., 2007), REVIVE I 및 II에서 위약에 대해 저혈압 및 부정맥을 증가시켰다(Packer et al., 2013). 따라서, 기존의 이노트로프는 결과를 악화시키지만, 장기 기능이 저하되는 경우 심한 ADCHF 및 진행성 CHF에서 때때로 사용되며, 환자는 심장 이식에 연결되고/되거나 죽음이 임박할 때 병원에서 동원 또는 퇴원할 수 없다.
그렐린
그렐린("ghre"= grow)은 원래 성장 호르몬(GH) 분비 촉진 수용체(GHSR)에 대한 내인성 리간드이고, GH 방출을 자극함으로써 부분적으로 작용하는 28 아미노산 펩티드 호르몬으로 식별되었다(Kojima et al., 1999). 그렐린은 주로 중앙에서 작용하는 식욕 자극제로서 주목을 받았다(Cummings et al., 2002). 그렐린은 공복 및 체중 감소에 반응하여 위로부터 방출되는 반면, 방출은 식품 섭취에 의해 억제된다(Kojima et al., 1999; Kojima and Kangawa, 2005; Shiiya et al., 2002). 그렐린은 아미노산 3에서 아실화되고("활성화되고"), 아실/아실화된 형태는 그렐린 작용의 대부분을 담당한다고 여겨진다(Hosoda et al., 2000; Soares and Leite-Moreira, 2008).
그렐린의 잠재적인 심혈관 작용
그렐린은 악액성(Nagaya et al., 2001c) 및 비-악액성 CHF(Lund et al., 2009)에서 상승하지만, 심장 이식 후 해소되는 식욕 자극 효과에 대한 저항성이 있는 것으로 보인다(Lund et al., 2009). 대사 효과 외에도, 그렐린은 특정 심혈관 작용을 갖는 것으로 보인다. 그렐린 수용체(성장 호르몬 분비 촉진 수용체; GHSR)는 심장 및 골격근 및 내피 내에 널리 분포된다(Papotti et al., 2000). 그렐린은 카테콜아민 및 나트륨 이뇨성 펩티드의 보상적 상승과 유사하게 불량한 심장 기능에 대한 보상 반응으로서 HF에서 상승되며, 실제로 그렐린의 아실화는 HF에서 증가되어 잠재적으로 적응적 보상 반응을 나타내며 심장 이식 후 감소할 수 있다(Zabarovskaja et al., 2014).
그렐린 치료에 대한 이전 데이터
래트 HF 모델에서, 그렐린은 CO 및 분획 단축을 증가시키고(Nagaya et al., 2001d); 래트 심근 경색 모델에서, 그렐린은 심장 교감 운동 및 좌심실(LV) 리모델링(Schwenke et al., 2008; Soeki et al., 2008) 및 아폽토시스(Yang et al., 2014)를 감소시켰다. 인간 HF에서 작은 연구는 그렐린이 심장 출력(Nagaya et al., 2001b) 및 좌심실 박출 계수(EF), 운동 용량 및 근육 소모(Nagaya et al., 2004)를 개선시키지만, 이들 연구는 사용된 그렐린 형태가 아실화되었는지의 여부를 특정하지 않는다. 그렐린의 심혈관 작용은 검토되었지만, 데이터는 불일치하ㅇ여 양성 및 음성 이노트로픽 효과 모두를 나타내고(Soares et al., 2005), 그렐린의 가변 형태 및 주로 비아실화된 불활성 형태를 지칭한다(Broglio et al., 2003b; Isgaard, 2013; Kishimoto et al., 2012; Leite-Moreira et al., 2008; Nagaya and Kangawa, 2003a, b, 2006; Nagaya et al., 2006). 게다가, HF에서 그렐린의 안전성, 임상적 효능 및 작용 메커니즘은 공지되지 않았다. 프랄모렐린 및 헥사렐린과 같은 GHSR 작용제는 아미노산이 적고 서열 유사성이 없다. 그렐린 또는 헥사렐린이 아니라 프랄모렐린은 급성 심근 경색을 갖는 개에서 CO를 개선시켰다(US 특허 US2004014671A1).
본 목적
급성 HF(AHF, ADHF, ADCHF)에서 충족되지 않은 임상적 필요성에 기초하여, 본 발명자들은 심부전 환자에서 정맥내 아실 그렐린의 무작위화된 이중 맹검 위약 제어 시험을 수행하였다. 임의의 임상 효과에 대한 기본 메커니즘을 결정하기 위해, 본 발명자들은 또한 건강한 대조군 및 HF 마우스로부터 단리된 심근세포에서 그렐린에 반응하여 수축성 및 세포성 Ca2+ 과도 상태를 평가했다.
방법 인간 시험
연구 설계 및 설정
2013년 2월 17일부터 2015년 5월 17일까지, 본 발명자들은 정맥내 아실 그렐린 또는 위약의 일회성 치료로 예비 이중 맹검, 위약 제어, 병렬 그룹, 단일 센터 무작위화 임상 시험을 수행했다.
환자
환자는 카롤린스카 대학교 병원 심부전 클리닉(도 1)에서 사전 스크리닝되었고, 진행성 CHF의 증상 및 징후(뉴욕 심장 연합회[NYHA] 부류 III-IV) 및 ≤40%의 EF를 가졌다. 상세한 포함 및 제외 기준은 표 1에 열거되어 있다.
포함 및 제외 기준
포함 기준
1. 조사자의 판단에서 신부전의 증상 및 징후로서 정의된 신부전
2. 스크리닝시 및 치료 당일 좌심실 박출 계수(EF) ≤ 40%
3. 뉴욕 심장 협회(NYHA) 부류 III 또는 IV
4. 서면 동의서
제외 기준
1. 18세 미만
2. 치료 당일 흡연을 자제할 수 없는 현재 흡연자
3. 치료 당일 카페인의 소비
4. 현재 알콜 또는 약물 남용
5. 지난 3개월 내 급성 관상 증후군
6. 심장 이식 또는 좌심실 보조 장치를 받은 적이 있음
7. 산소 의존 폐 질환
8. 연구 당일에 맥박 산소 측정법에 의한 말초 포화도 <95%
9. 연구 당일에 크레아티닌 클리어런스(Cockgroft-Gault) 또는 추정 사구체 여과율(eGFR, MDRD에 의해) < 30mL/분
10. 치매 또는 서면 동의서를 제공하지 못함
11. 임의의 고체 장기 이식
12. 현재 호르몬 치료
13. 코르티코스테로이드 이외의 현재 면역억제제 치료
14. 연구 전 2주 이내에 임의의 이노트로프
15. 맹장, 담낭, 탈장, 결장 이외의 임의의 위장 수술
16. 역류성 질환 또는 소화 불량 이외의 현재 위장 질환
17. 공지된 경화증
18. 연구 당일에 수축기 혈압 <90mmHg
19. 인슐린으로 <10으로 감소될 수 없는, 연구 당일 아침 식사후 혈당 >20mmol/L
그렐린의 제조
그렐린은 분자량이 3,371g/mol인 28 아미노산 펩티드이다. 혈장에서의 하프 타임은 24 내지 30분이다. 정상 인간에서의 농도는 전체 그렐린에 대해 100 내지 300pmol/L(300 내지 900ng/L)에서 가변적으로 보고되었다. 아실 그렐린에 대한 제한된 데이터가 존재하지만, 본 발명자들은 최근에 41명의 건강한 비-비만 성인에서 아실 그렐린을 측정하였다: 공복: 평균±SD: 118±14ng/L, 5-95번째 백분위수 27-328ng/L; 260kcal 혼합 식사 60분 후 트로프: 80±12ng/L, 5-95번째 백분위수 21-293ng/L. 합성 아실화된 (활성) 인간 그렐린(상표명 클리날파(Clinalfa) 그렐린 (인간) 아세테이트, 제품 번호 4071265; Bachem, Hauptstrase 144, 4416 Benbendorf, Switzerland - 이후, 그렐린으로서 지칭됨-은 Daichi Sankyo(Tokyo, Japan)의 허가하에 Bachem(Bubendorf, Switzerland)에서 구입하였다. 각각의 환자 및 치료를 위해, 분말 그렐린의 다수의 바이알(인산염 완충액과 함께 100ug 그렐린/바이알)로 구성되는 스톡 용액이 제조되었고, 각 바이알은 1mL 멸균 주입용수(B. Braun, Germany)에 용해되고, 각 바이알에 0.001g(0.02ml의 50g/L 스톡) 인간 알부민(농도 0.001g/mL =0.1%를 위해)을 첨가하기 전에, 투명하고 무색 용액인 것으로 육안으로 관찰되었고, 정상 식염수(NaCl 9mg/ml, B. Braun, Germany)와 추가로 혼합하였다. 스톡 용액 및 식염수의 비율은 환자 체중(표 2)에 따랐고, 총 용적 100ml(모든 환자를 위해 동일한 용적 주입을 보장하기 위해)를 초래했다. 최종 정맥내 주입 속도는 그렐린에 무작위화된 모든 환자에게 투여되는 아실 그렐린 0.1㎍(30pmol)/kg/분(총량 12.0㎍/kg)에 대등한 0.50mL/분 용적(총 용적 60mL)이었다. 주입은 120분 동안 주어졌고, 120분에 모든 측정이 완료될 때까지 계속되었다(따라서, 약간의 추가의 그렐린을 전달한다). 총 주입 지속 시간의 중앙값은 171분이었다. 측정은 주입 정지 후 30분에 반복하였다.
Figure pct00001
위약 제조
생리학적 정상 식염수의 용액(NaCI 9mg/mL, B. Braun, Germany)은 그렐린 주입과 동일한 용적 및 속도(0.50ml/분) 및 총 지속 시간으로 주입되었다.
절차 및 데이터 수집
사전 스크리닝 및 서면 동의서를 제공하는 동안 잠재적으로 자격을 갖춘 환자는 공복 상태에서 오전 8시에 실험실에 보고했다. 검사는 도 2에 개략적으로 나타나 있다. 수동 상완 동맥 혈압 및 02　포화도(말초 맥박 산소 측정)를 측정하고, 심 초음파 검사에 의해 EF ≤ 40%가 확인되었다(육안 추정 또는 심슨 방법). 두 개의 말초 정맥 카테터를 삽입하고, 혈액 샘플을 수집하고, 추정된 사구체 여과율(eGFR) 및 혈장 글루코스를 포함하여 분석되었다(포함/제외 기준의 일부로서). EF ≤40%를 포함하여 현재 자격 기준을 충족하지 않는 환자는 제외되었고, 스크리닝 실패로 간주되었다. 이후, 환자는 추가 검사를 받았고, 500kcal의 표준화된 아침 식사(공복이 내인성 그렐린 수준을 증가시키므로)를 커피 또는 차 없이 임의로 소비했다. 주입을 시작하기 전에, 혈액 샘플 및 검사가 반복되었다.
환자는 그렐린 또는 위약에 종이 봉투를 사용하여 4 그룹 단위로 블록 무작위화에 의해 병렬로 무작위화되었고, 주입은 120분 동안 전입방 정맥에 의해 제공되었다. 전용 연구 간호사가 주입을 위한 그렐린 및 위약을 제조하였고, 환자 및 다른 모든 조사자가 맹검화되었다. 120분 주입 직전, 동안 및 후 및 또한 주입 중지 후 30분에, 혈액 샘플을 인출하고, 증상, 징후, 심 초음파 검사, EGC 및 비침습적 혈역학을 평가하였다(도 2). 환자는 집으로 퇴원하였고 반복 측정을 위해 2 내지 5일 후에 복귀하였다. 환자는 이환률 및 사망률 결과에 대해 전향적으로 추적되었다.　
사전 지정된 시험 효능 결과
일차 효능 결과는 주입 시작(시간 0)으로부터 주입 종료(시간 120분)까지의 CO 변화에서 그렐린과 위약의 차이였다. 120분 주입, 주입 중지 후 30분 및 주입 중지 후 2 내지 5일째에 반응하여 혈역학, 심 초음파 검사 발견 및 혈장 바이오마커와 관련된 다수의 2차 결과가 또한 평가되었다(결과 참조).
사전 지정된 시험 안전성 결과
안전성 결과는 수축기 혈압의 감소, 저혈압, 및 증상적 저혈압, QTc의 연장, 허혈 및 주입 동안 또는 후의 부정맥 및 임상 결과를 포함했다.
데이터 수집 방법 및 정의
심장 출력 및 혈역학
내부 비침습적 휴지 CO는 Incocor® 장치(Innovision, Odense, Denmark)를 사용하여 각 측정에서 중복 평가되었다. 이노코어는 불활성 가스 재호흡 기술을 사용하여 폐 혈류를 측정하고 V02를 직접 측정하는 비침습적 장치이다. 휴지 중 및 운동 중 CO 및 V02에 대해 유효성이 검증되었다(Gabrielsen et al., 2002; Stahlberg et al., 2009). 분산 계수는 낮고(V02 　< 2%; CO 5-7%)(Stahlberg et al., 2009); 금 표준 픽 방법(Warburton et al., 1999)과 유사하고 다른 비침습적 방법보다 우월하다(Warburton et al., 1999). 유의한 폐내 션트의 부재하에, Incocor®에 의해 측정되는 불활성 가스 재호흡에 의해 계산된 폐 혈류는 CO의 신뢰 가능한 추정치를 제공하는 것으로 나타났다(Stahlberg et al., 2009).
Incocor®는 폐 혈류, V02　및 Sp02를 직접 측정한다. 이어서, 이들 변수로부터, 션트 분율, 심장 출력, SV02　및 A-V 02　차이를 표준 공식을 사용하여 계산하였다. 비트-바이-비트 ECG, 혈압 및 압력 신호(+ dP/dt)의 제1 유도체는 Nexpin® 장치(이하 기재됨)를 사용하여 측정하였다. 이노코르 측정 시점에서 15분의 연속 비트-바이-비트 넥스핀 데이터가 평균되었다. 추정 전신 혈관 저항(eSVR)을 후속적으로 평균 혈압/심장 출력 x 80으로 계산되었다. 박출량(ml)은 이노코르 유래 심장 출력/넥핀 유도 심박수 x 1000으로 계산되었다.
연속 혈역학 및 EKG 모니터링
혈량 측정 기반(손가락 커프) 접근법을 사용하여 혈압을 측정하였다(Nexfin®, BMEYE B.V., Amsterdam, The Netherlands). 넥스핀은 또한 심박수 모니터링에 사용되었다. 심박수 및 혈압 데이터는 연구 프로토콜 전반에 걸쳐 연속적으로 비트-바이트 비트를 측정하였다. 그런 다음, 데이터는 이노코르 측정에 따라 15분 동안 평균화되었다. 또한, EKG는 60분 및 120분에 주입 시작 전 및 주입 동안 및 임의의 점심 식사 후 평가되었다. QT 간격은 50mm/초 종이 속도 및 10mm/mV 진폭에서 12-유도 표면 ECG에서, 흉부 유도 V5에서 측정되었다. 심박수 보정된 QT 간격(QTc)은 측정된 QT 간격에 선행하는 RR 간격을 사용하여, 바제트(Bazett) 식, QTc = QT/RR1/2　으로 수동으로 계산되었다. 3개의 심장 박동으로부터 평균 QTc가 기록되었다.
심 초음파 검사
심 초음파 검사는 치료 할당에 맹검된 기술자에 의해 수행되었고, 모든 에코 이미지는 환자의 치료 할당 및 임상 병력에 맹검된 한 명의 독립적인 조사자에 의해 분석되고 해석되었다. 2차원 이미지는 3MHz 도플러 변환기가 장착된 Vivid 7/E9 초음파 시스템(GE, Horten, Norway)으로 기록하였다. 치수, 심장 수축기 및 확장기 기능, 판막 성능 및 수축기 폐 동맥압을 포함하는 상세한 심 초음파 검사가 기준선(표 5)에서 수행되었다. 좌심실 치수 및 기능, 박출량 및 심장 출력을 포함하는 더 짧은 프로토콜이 시간 경과에 따른 변화의 비교용으로 사용되었다. 좌심실 말단 수축기 및 말단 확장기 용적 및 좌심실 박출 계수(LVEF)는 변형된 복엽 심슨의 방법을 사용하여 측정하였다. LVEF는 또한 테이홀츠 방법을 사용하여 측정하였다. 낮은 이미지 품질로 인해 심슨의 방법에 의한 LVEF에 대한 데이터의 누락 때문에, 경시적인 LVEF의 변화는 테이홀츠 방법을 사용하여 계산하였다. 좌심방 용적은 정점 4개 및 2개 챔버 뷰로부터 복엽 면적 길이 방법을 사용하여 계산되고 체표면적으로 인덱싱되었다. E/e' 비율은 승모판 유입의 피크 E파 속도와 중격 및 측면 조직 도플러 기록의 평균을 사용하여 계산되었다. 삼첨판 환형 피크 수축기 변동(TACSE)은 M-모드 심 초음파 검사로 평가되었다. 좌심실 종방향 변형을 위해 반점 추적을 사용하였다. 중격과 하위 세그먼트로부터의 지역 변형의 평균을 사용하여 경시적 변형의 변화를 계산하였다. 박출량은 좌심실 유출관(LVOT) 면적 및LVOT 심실 시간 적분(VTI)(LVOT 면적 x LVOT VTI)으로부터 유도되었다. 심장 출력은 에코 유도된 박출량 x 심박수로 계산되었다.
Figure pct00002
약어: LVEDD, 좌심실 말단 확장기 직경; LVESD, 좌심실 말단 수축기 직경; LVESV, 좌심실 말단 수축기 용적; LVEDV, 좌심실 말단 확장기 용적; LEVF, 좌심실 박출 계수; SV, 박출량; CO, 심장 출력; LV 질량, 좌심실 질량; LAV, 좌심방 용적; LAVi, 좌심방 용적 지수; RA, 우측 심방; MR, 승모판 역류; TR, 삼첨판 역류; AR, 대동맥 역류; MS, 승모판 협착증; AS, 대동맥 협착증; TAPSE, 삼첨판 환형 평면 수축기 변형; SPAP, 수축기 폐 동맥압; E, E-파 승모판 유입; E/e', E-파/e' 비율; e', 승모판 이완 속도.　
Figure pct00003
Figure pct00004
증상 및 징후
다음 증상은 주입 전 및 30분, 60분, 120분 후 및 주입 후 30분 및 2 내지 5일 추적 조사에서 예 또는 아니오로 평가되었다: 두통, 현기증, 호흡 곤란, 중추 흉통, 홍조, 졸음, 위장 장애 및 기타 증상. 다음 징후는 주입 시작 전 및 점심 식사 후에 기록되었다: 수포음, 말초 부종, 경정맥 팽창, 간비대증 및 S3 갤럽.
혈액 샘플
혈액 샘플은 1) 아침 공복 상태 기준선, 2) 개입 직전 표준화된 아침 식사 후, 3) 30분 주입 후, 4) 60분 주입 후 및 5) 120분 주입 후, 6) 완전 주입 후 30분 및 7) 이후 추적 조사 2 내지 5일에 수집하였다. 혈액은 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA)및 혈청 튜브에 수집하고, 즉시 원심분리하고, 혈장 및 혈청을 분취하고, 분석할 때까지 -70℃에 저장하였다.　
그렐린 측정에 전용된 샘플에서, DMSO 중의 5.5㎕의 10mM KR-62436(DPP4 억제제) 및 2100㎕의 증류수(50x 스톡)에 용해된 SIGMAFAST® 프로테아제 억제제 정제(둘 다 Sigma-Aldrich Corp, St. Louis, MO, USA에 의해 생산됨)로 구성된 프로테아제 억제제 칵테일을 제조하였다. 혈액 샘플을 6mL EDTA 혈장 튜브를 사용하여 인출하고, 즉시 얼음 위에 놓고 160㎕의 50x 프로테아제 억제제 칵테일을 첨가하였다. 튜브는 10초 동안 와류시키고, 4℃, 10분, 2500 상대적 원심력(RCF, 또는 g)에서 원심분리되었다. 그 후, 생성되는 상청액(혈장)을 에펜도르프 튜브(각각 450㎕)로 피펫팅하고, 분석할 때까지 즉시 -70℃에서 동결시켰다.
혈청 및 혈장 바이오마커
크레아티닌 클리어런스는 콕크로프트-골트 방정식(Cockcroft-Gault equation)에 따라 계산되었다: ([140-나이]*체중(kg)* 1.23)/크레아티닌 * 0.85(여성인 경우). 신장 기능은 카롤린스카 대학교 병원 코어 실험실에서 크레아티닌 및 시스타틴-C에 의해 측정되었다. NT-proBNP를 proBNPII(Roche Diagnostics, Bromma, Swen)에 의해 분석하였다. 혈장 글루코스 측정은 EDTA 함유 전체 정맥 혈액 튜브로부터 이루어졌고, 광도계 관리 시점 기술, HemoCue® 글루코스 201 RT(Angelholm, Sweden)로 분석하였다. 트로포닌 T는 카롤린스카 대학교 병원 코어 실험실에서 분석되었다.
아실 그렐린 및 약동학
활성(아실화된) 그렐린의 혈장 농도는 전기화학발광 검출을 사용하여 맞춤형 ELISA에 의해 검정되었다. 혈장 샘플은 해동하고 와류시켰다. 이어서, 그들은 제조업체 지침에 따라 아실-그렐린에 대한 포획 항체로 코팅된 96-웰 멀티스팟 플레이트(Meso Scale Diagnostics, Rockville, MD, USA)에서 중복으로 분석하였다. 플레이트를 판독하기 위해 Meso Scale Diagnostics Sector Imager 2400을 사용하였다. 곡선 피팅 후 혈장 농도로부터 계산된 변동 계수(CV%)는 9.3/3.5였다(검정내/검정간 CV%). 검출의 하한치는 3.2ng/L이었고, 상한치는 10,000ng/L로 설정되었다.
안전성 결과
저혈압
저혈압은 두 가지 방법으로 평가되었다: 그룹 간의 혈압 변화의 차이를 정량화하였고, 어느 한 환자에서의 저혈압은 20mmHg 초과 또는 80mmHg 미만의 수축기 혈압 강하로 정의되었다.
부정맥
그룹 간의 심박수 변화의 차이를 정량화하였다. 서맥은 분당 >15 비트의 심박수 내, 분당 <40 비트 심박수로의 감소, >20ms로의 PQ 시간의 증가 또는 AV 블록 II-III로 정의되었다. 개별 환자에서, 빈맥은 분당 >10 비트 심박수 또는 분당 >110 비트 심박수의 증가로서 정의되었다. 심실 주기외수축이 정량화되고, 심실 빈맥은 연속으로 3회 이상 최대 30초 이하인 경우 지속되지 않고 30초 초과인 경우 지속되는 것으로 정의되었다. 심실상 부정맥은 이소성 심방 빈맥, 심방 조동 또는 심방 세동, 또는 >3초 지속 시간의 AV-결절성 빈맥으로 정의되었다. 그렐린은 hERG 채널을 활성화할 수 있고, 이로써 이론적으로 부정맥에 걸리기 쉬울 수 있는 EKG 상의 QTc 간격의 연장을 초래할 수 있다. 이를 위해, 본 발명자들은 QTc를 모니터링하였다.
허혈
허혈은 두 가지 방법으로 평가되었다: 그룹 간의 트로포닌 T의 변화의 차이를 정량화하였고, 어느 한 환자의 허혈은 허혈과 일치하는 ECG 변화의 증상, 또는 >50%의 트로포닌 T의 상승으로 정의되었다.
임상적 결과
환자는 2017년 4월 30일까지 의료 기록에 따랐다. 결과는 모든 원인으로 인한 사망; 모든 원인으로 인한 사망 또는 HF 입원; 모든 원인으로 인한 사망 또는 심장 이식 또는 좌심실 보조 장치, 및 이들 모두의 조합으로부터 자유로웠다.
통계
기준선 특성의 경우, 연속 변수는 연속 변수에 대한 윌콕슨 순위 합계 테스트 및 범주형 변수에 대한 피셔의 정확한 테스트에 의해 비교하였다.
경시적으로 연속 변수에 대한 그렐린 대 위약의 효과를 비교하기 위해, 2-원 반복 측정 ANOVA(2W-RM-ANOVA)를 사용하여 치료 그룹 내의 치료 효과를 평가하였다. 2W-RM-ANOVA는 두 가지 요소를 갖는다: 치료(2 레벨: 그렐린 또는 위약) 및 시간(3 레벨: 기준선, 60분 주입 후, 및 120분 주입 후). 본 통계 모델에서 고려될 주요 분석은 상호작용(치료 x 시간)이고, 여기서 본 발명자들은 치료 사이의 차이가 모든 시점에서 동일하다는 귀무 가설의 중요성을 테스트한다. 시간 요소는 시간 효과를 기대하기 때문에 이 분석에서 거의 의미가 없다. 치료 인자는 기준선에서 그렐린 대 위약 그룹 차이를 기대하지 않기 때문에 이 분석에서 거의 의미가 없다. 사후 시험, 각 치료 그룹 내의 반복 측정에 대한 터키(Tukey) 조정된 p 값 및 치료 그룹 사이의 Sidak은 유의한 변화에 대해 테스트하기 위해 수행하였다. 본 발명자들은 또한 윌콕슨 징후-순위 테스트에 의한 그룹 내에서 및 윌콕슨 순위 합계 테스트에 의해 그룹 사이에서 주입 개시 후 60분 및 120분 시점에 절대 및 % 델타 값의 쌍을 이루지 않은 t-테스트를 사용하여 60분 및 120분에 치료 그룹 사이의 차이를 평가했다.
시간과 결과를 비교하기 위해, 생존 및 이벤트 부재 생존을 카플란-마이어 곡선으로 차트화하고, 로그 순위 테스트로 비교했다.
샘플 크기
전력 계산은 CO 변화의 차이를 기반으로 하고, 표 3에서 기재된 바와 같이 수행되었다. 80%의 전력, 0.05의 2-측면 알파 및 가정된 10% 최소 치료 차이로, 동일한 크기는 각 그룹에서 10명의 환자를 필요로 했다. 잠재적인 누락 데이터 측정과 추가 마진을 고려하여, 샘플 크기는 각 그룹에서 15명의 환자로 설정되었다.
Figure pct00005
윤리학
그렐린은 이전에 건강한 인간 및 환자의 연구에 사용되었다. 시도는 헬싱키의 조화 및 양호한 임상 실습 지침 및 선언에 관한 국제 컨퍼런스에 따라 수행되었다. 상기 시도는 지역(스톡홀름) 윤리 위원회(번호 2008/1:12 및 2008/1695-31)에 의해 승인되었다. 이 생리학적 연구에서, 윤리 위원회는 위장 효과의 다른 연구에서 동일한 치료를 위한 이전 면제를 기초로 하여 의료 제품 기관(MPA) 승인의 필요성을 면제했다(MPA 면제 번호 159:2007/16373; 윤리 스톡홀름 번호 2007/119-31/1). 모든 환자는 서면 동의서를 제공했다.
설치류 연구 방법
심근 경색 유도 심부전 마우스 모델
산소와 이소플루란(2-3%)의 가스 혼합물로 12주령 C57BL6 마우스를 마취시켰다. 심근 경색(MI)은 이전에 기재된 바와 같이(Perrino et al., 2013) 좌측 관상 동맥의 영구적인 결찰에 의해 마우스에서 유도되었다. 간략하게, 마우스는 흉부 절제술 및 후속적인 좌측 관상 동맥 결찰을 겪었고; 추적 조사 기간 동안(4 내지 6주) 약 80% 생존하였다. SHAM 작동 동물은 관상 동맥 결찰(SHAM) 없이 동일한 절차를 거쳤다. 연구 종료시, 진정 후, 마우스를 자궁경부 탈구를 통해 안락사시켰다.
마우스 경흉부 심 초음파 검사
심장 기능은 종료 전 Philips HDI 5000 이미징 시스템을 사용하여 경흉부 심 초음파 검사에 의해 두 그룹에서 비침습적으로 모니터링되었다. 심초음파는 7-15 MHz CL 15-7 스캐닝 헤드로 수행하였다. 심장 수축성은 다음 식을 사용하여 좌심실 분획 단축 %로 측정되었다: LVd-LVs/LVd*100, 여기서 LVd 및 LVs는 각각 좌심실 확장기 및 수축기 치수를 나타낸다.
마우스 심근세포 격리
안락사 후, 단일 심근세포는 좌심실 및 우심실로부터 단리되었고(마우스 심장은 좌실에 의해 지배된다), 심방을 제외하였고, 이전에 기재된 바와 같이(Pironti et al., 2016), 세포 신호전달 동맹에 의해 개발된 프로토콜(AfCS Procedure Protocol ID PP00000 125)에 따랐다.
그렐린 및 위약에 반응하는 세포질 [ Ca2 +]I 및 세포 단축
마우스 심근세포를 형광 지시제 Fluo-3 AM의 세포 투과성 형태와 함께 배양한 후, 이전에 기술된 바와 같이(Andersson et al., 2011) >5분 동안 세척하였다. 심근세포를 라미닌 코팅된 유리 바닥 접시에 플레이팅하였다. 접시를 맞춤형 조립 관류/자극 챔버에 넣고, 다음 조성(mM 단위)의 02/C02　(95/5%) 버블링된 티로데(Tyrode) 용액으로 지속적으로 관류시켰다: NaCl 121, KCl 5.0, CaCl2 　1.8, MgCl2 　0.5, NaH2P04　0.4, NaHCO3 24, EDTA 0.1, 글루코스 5.5. 심근세포는 관류/자극 챔버에 부착된 두 백금 전극 사이의 전기장을 사용하여 수축하도록 자극되었다. 전기 자극시 수축되고 정상 형태(예: 가로무늬, "벽돌 모양")를 나타낸 심근세포에서만 측정이 수행된다. 자발적 수축을 나타낸 세포는 측정되지 않았다. 형광은 Nikon Diaphot 반전 현미경(40-60x 오일 침지 렌즈)에 부착된 공초점 현미경 Bio-Rad MRC 1024 유닛을 사용하여 측정하였다. 공초점 이미지는 ImageJ를 사용하여 오프라인에서 분석되었다(National Institutes of Health; http://rsb.info.nih.gov/ij에서 이용가능). 라인 스캔 공초점 이미지는 세포의 장축을 따라 진행하는 라인 스캔과 함께 진행된 심근세포로부터 수득되었다. 유리 세포질 Ca2 +의 변화를 나타내는 방출된 형광의 변화를 정량화하였다. Ca2 + 과도 상태의 진폭은 제어 조건하(FO)에서 주어진 자극 펄스 직전에 형광에 의해 분할된 fluo-3 형광 신호(F)의 변화로서 측정되었다. Ca2 + 과도 상태 감쇠 시간 상수(Tau)는 GraphPad Prism 소프트웨어(La Jolla, Ca, USA)에서 지수 감쇠 함수에 감쇠를 피팅함으로써 정량화되었다. 분획 세포 단축은 휴지 중 및 최대 수축 동안 세포 길이의 분획 변화로서 라인 스캔 이미지로부터 계산되었다.
근세포는 생리학적 완충제(티로데 용액) 또는 약리학적 실험을 위해 티로데 + 그렐린(100nM) 또는 D-Lys 3(D-Lys 3 GHS-R1a 길항제 3mM)으로 과융합시켰다. D-Lys 3(3μM)이 그렐린을 첨가하기 전 10분 관류 시스템으로 도입되는 일부 실험에서를 제외하고는 모든 세포는 측정 전 각각의 용액으로 15분 동안 관류시켰다. 모든 실험은 실온(약 24℃)에서 수행되었다.
심근세포의 그렐린 처리
근세포를 그렐린(Bachem, Bubendorf, Switzerland)(100nM)을 포함하거나 포함하지 않고 생리학적 완충제(티로데 용액)로 과융합시켰다. 모든 심근세포를 측정 전에 각각의 용액으로 15분 동안 과융합시켰다. 그렐린 수용체 GHS-r1a(D-Lys 3; 3μM)에 대한 길항제를 일부 실험에서 사용하였다. 그러한 실험에서, D-Lys 3을 그렐린을 첨가하기 전 10분 과융합 시스템에 도입하였다.
마우스 심근세포 단백질 면역블롯팅
단리된 심근세포를 다른 조건에서 15분 동안 처리하였다(위약, 그렐린, D-Lys 3 GHS-R1a, D-Lys 3 GHS-R1a + 그렐린). 그 후, 심근세포를 펠렛화하고 균질화시켰다. 단백질 용해물을 전기영동에 의해 분리하고, 막 상으로 옮겼다. 막을 1차 항체와 함께 배양하였다: 토끼 포스포-트로포닌 I(심장)(Ser 23/23) 항체(세포 신호 전달 #4004), 마우스 트로포닌 1(Millipore MAB1691A). 이후, 적외선 표지된 2차 항체(IRDye 680 및 IRCyre 800, 1:5000, Licor)를 사용하였다. 면역반응성 밴드를 Odyssey　적외선 영상 시스템을 사용하여 분석하였다. 밴드 밀도는 Image J로 정량화되고, GAPDH로 정규화되고, 최종 데이터는 위약 그룹과 비교하여 배수 증가로서 표현되었다.
cAMP 측정
cAMP 직접 면역검정 키트(Abeam ab65355)를 사용하여 세포내 cAMP 농도를 측정하였다. 간략하게, 상기 기재된 그룹(위약, 그렐린, D-Lys 3 GHS-R1a + 그렐린)의 동결된 심근세포 펠렛을 0.1M HCl의 용적을 사용하여 얼음 위에서 균질화시켜 1 mg/ml의 단백질 농도를 수득하였다. 샘플의 아세틸화된 상청액을 키트 제조자에 따른 ELISA 플레이트에서 항체와의 배양용으로 사용하였다. 마지막으로, 450nm에서의 광학 밀도 흡광도는 마이크로플레이트 판독기(Biotek, Synergy 2)를 사용하여 분석하였다. cAMP의 농도는 생성되는 판독치(pmol/ml)를 각 샘플에 대한 총 단백질 농도(mg/ml)로 나누어 정규화하였다. 실험은 동물의 치료에 대해 맹검된 조작자에 의해 수행되었다.
통계
두 그룹 간의 통계적 비교는 스튜던츠 t-테스트(쌍을 이루지 않음)를 사용하여 수행되었다. >2 그룹 간의 비교를 위해, ANOVA를 사용하였다. 통계적 유의성에 대한 정의로서 p < 0.05가 사용되었다. 평균 데이터는 평균±평균의 표준 오차(SEM)로서 제시되었다.
윤리적 승인
모든 동물 실험은 윤리적 승인인 N19/15, N273/15하에 수행되었다.
인간 시험의 결과
환자
34명의 환자가 카롤린스카 대학교 병원 심부전 클리닉으로부터 식별되고 실험에 동의하였다. 연구 당일 오전에, 한 명의 환자는 신경병증 및 다리 통증 때문에 여전히 누워 있을 수 없어서 제외되었고, 한 명의 환자는 크레아티닌 클리어런스 26mL/분 때문에(< 30ml/분이 제외 기준이었다) 제외되고, 한 명의 환자는 NYHA 부류 II(NYHA III-IV가 포함 기준이었다) 및 EF 43%(EF ≤ 40%가 포함 기준이었다) 로 인해 제외되었다. 따라서, 31명의 환자가 무작위화되었다. 한 명의 환자(위약)는 주입 개시 후 초기에 반복되는 요로 긴급성 및 현기증을 경험하였고, 주입이 중단되었고, 환자는 제외되었다. 분석을 위해 30명의 환자가 남아 있었다(15명 그렐린; 15명 위약).　
기준선 특성
기준선 특성은 표 4에 제시되어 있으며, 치료 및 위약 그룹 사이에서 유사했다. 중간 연령은 각각 71세 및 70세였고, 13%는 두 그룹에서 여성이었다. 기준선 심 초음파 검사 데이터는 표 5에 제시되어 있다. 중앙값 EF(심슨)는 각각 30% 및 28%였다.
Figure pct00006
Figure pct00007
Figure pct00008
약어: BMI, 체질량 지수; SBP, 수축기 혈압; DBP, 확장기 혈압; Sp02, 맥박 산소 측정에 의한 말초 포화도; HF, 심부전; NYHA 부류, 뉴욕 심장 협회 부류; INR, 국제 정규화 비율; NT-proBNP, N-말단 프로 뇌 나트륨 이뇨성 펩티드; hsCRP, 높은 민감성 C 반응성 단백질; MI, 심근 경색; AP, 협심증; CABG, 관상 동맥 우회 이식; PCI, 경피적 관상 동맥 개입; TIA, 일시적 허혈 공격, CRT, 심장 재동기화 요법; ICD, 이식 가능한 심장 박동 제세동기; MRA, 미네랄로코티코이드 수용체 길항제; ACEi, 안지오텐신 전환 효소 억제제; ARB, 안지오텐신 수용체 차단제.
*D Webb, 41명의 건강한 비-비만 성인의 파일에 대한 데이터
Figure pct00009
환자 결과
혈장 아실 그렐린 약동학
기준선 및 그렐린 주입 동안 및 후의 혈장 아실 그렐린 농도는 표 6 및 도 3에 제시되어 있다. 치료 그룹에서, 아실 그렐린의 중간값 농도는 검정의 최대 부근에 빠르게 도달하였다. 아실 그렐린은 주입 후 30분에 거의 정규화되었고, 2 내지 5일 추적 조사에서 정규화되었다.
Figure pct00010
1차 효능 결과: 심장 출력
표 7 및 표 8 및 도 4는 기준선에서 CO 및 그렐린 및 위약에 대한 반응을 나타낸다. 그렐린 그룹에서, CO는 주입과 함께 증가하고 주입 정지 후에 떨어지며, 모든 쌍별 방식 비교는 유의하다. 위약 그룹에서는, CO, p 상호작용 <0.0001에서 유의한 변화가 없었다. 그렐린 대 위약 그룹에서 CO의 절대 및 % 변화는 상이하였다. 2-5일 추적 조사에서, 위약 그룹과 비교하여 그렐린에서 CO의 유의한 증가가 있었다(표 8).　
Figure pct00011
Figure pct00012
2차 효능 및 안전성 결과: 혈역학
표 7 및 표 8과 도 5는 그렐린/위약 주입 전, 동안 및 후에 계산된 박출량(SV)을 나타낸다. 그렐린 그룹에서, SV는 주입에 따라 증가하고, 주입 정지 후에 떨어지며, 모든 쌍별 비교는 유의하다. 위약 그룹에서는, SV에 유의한 변화가 없었다. SV의 절대 및 퍼센트 변화는 그렐린 대 위약 그룹에서 상이하였다.
표 7 및 표 8과 도 6은 넥스핀에 의해 수동적으로 측정되고 연속적으로 기록된 선택 시점에서의 심박수(HR)를 나타낸다. 그렐린 그룹에서, HR은 기준선과 120분 사이에 약간 떨어졌다. 위약 그룹에서는, HR에 유의한 변화가 없었다. HR에서 절대 또는 % 변화에는 통계적으로 유의한 차이가 없었다.
표 7 및 표 8과 도 7은 추정된 전신 혈관 저항(SVR)을 나타내고, 도 8 내지 12는 수축기, 확장기 및 평균 동맥 혈압을 나타낸다. 그렐린에 의한 CO의 증가에 따른 계산된 SVR의 감소가 있었지만, 혈압의 변화 및 저혈압의 발생은 없었다.
표 7 및 표 8은 추가의 혈역학적 데이터를 나타낸다. 산소 소비량(V02　)의 변화는 없었고, 그렐린도 위약도 대사(산소 요구량)에 영향을 미치지 않았음을 시사한다. 그렐린 그룹에서, CO 증가와 일치하여 폐 혈류가 증가되었다.
2차 결과: 심 초음파 검사
표 9 및 표 10과 도 13 내지 20은 주입 전, 동안 및 후의 심 초음파 검사 파라미터를 나타낸다. 좌심실 말단 확장기 직경(LVEDD)(도 13) 또는 좌심실 말단 수축기 직경(LVESD)(도 14)의 변화 또는 변화의 차이는 없었다. 좌심실 기능을 나타내는 EF의 경우, 그렐린에 의한 EF의 개선을 시사하는 공칭 상호작용, 및 60분 및 120분에 EF의 변화의 차이를 향한 경향이 있었다(도 15). 우심실 기능을 나타내는 삼첨판 환형 평면 수축기 변형(TACSE)의 경우, TAPSE의 개선을 시사하는 상호작용을 향한 경향, 60분 및 120분에 변화의 차이, 및 120분에서 절대 변화의 유의한 차이를 향한 경향이 있었다(도 16). LV 충전 압력의 대리자인 E/e'와의 상호작용 또는 변화의 차이는 없었으며(도 17), 이는 증가된 CO가 충전 압력의 불리한 증가를 동반하지 않았음을 시사한다. 심 초음파 검진에 의해 측정된 박출량(SV)의 경우, 그렐린과의 개선을 시사하는 유의한 상호작용이 있었고, 측정된 SV보다 더 적은 크기가 비침습적 혈역학이었지만 일관적이었다. SV의 변화에도 차이가 있었지만, 이는 단지 120분에만 유의했고, 60분에는 그렇지 않았다(도 18). 심 초음파 검사에 의해 측정된 심장 출력(CO)의 경우, 그렐린과의 개선을 시사하는 공칭 상호작용이 있었지만, 변화의 유의한 차이는 없었다(도 19). 심장 수축성의 대리자인 수축기 변형에 대해서도 마찬가지였다(도 20).
바이오마커
표 11은 주입 전, 주입 동안 및 주입 후 30분의 바이오마커를 나타낸다. 임의의 바이오마커에 대한 치료와의 상호작용은 없었다. 트로포닌 T와의 상호작용 또는 변화는 없었다. NT-proBNP는 두 그룹 모두에서 증가되었는데, 이는 장기간 누운 상태와 주입 동안 이뇨제를 복용하지 않았기 때문일 수 있다. 시스타틴 C는 두 그룹 모두에서 증가되었다. 표 12는 주입 후 2-5일째 바이오마커를 나타낸다. NT-proBNP는 그렐린 그룹에서 상승된 상태로 유지되었다. 이것은 주입 후 또는 주입 이후의 상이한 시간에 증가된 활성으로 이어지는 그렐린의 자극 효과 때문일 수 있다. 다중 테스트로, 그것은 또한 우연에 의한 것일 수 있다.
주입 중 및 주입 직후 및 주입 후 2 내지 5일째 안전성 결과
심박수(도 6) 또는 심실 빈맥 또는 서맥 부정맥의 발병률(도시되지 않음)에 대한 그렐린 또는 위약의 효과는 없었다. 수축기(도 7), 확장기(도 8) 또는 평균 동맥(도 9) 혈압에 대한 그렐린 또는 위약의 효과는 없었다. 한 명의 환자(위약)가 위약 주입 개시 후 초기에 반복적인 요로 긴급성 및 현기증을 경험했고 주입이 중단되었고 환자가 제외되었다는 점을 제외하고, 어느 그룹에서도 저혈압 또는 증상적 저혈압의 이벤트는 없었다(도시되지 않음). 트로포닌 T(p 상호작용 주입, 0.67[표 11] 및 p 상호작용 2-5일 추적 조사, 0.36[표 12])에 대한 효과는 없었다. 허혈과 일치하는 증상 또는 EKG 변화는 없었다. 그렐린 그룹의 한 환자는 트로포닌 T의 >50% 증가를 가졌다(기준선; 31, 주입 중 34, 38, 42, 43 및 FU 164ng/L에서는, 흉통의 증상 또는 ECG 변화는 없었다).
증상(두통, 현기증, 호흡곤란, 중추 흉통, 홍조, 졸림, 위장 장애 및 다른 증상)은 예 또는 아니오로 평가되었으며, 60분에 홍조는 위약에 비해 중재 그룹에서 더 빈번했다(7 대 0; p=0.006). 공칭이지만, QTc에서 유의한 증가는 없었다(표 13 및 도 21).
Figure pct00013
Figure pct00014
90일 추적 조사 동안의 임상 안전성 결과
90일 추적 조사 동안 임상적 이벤트에는 차이가 없었다(도 22 및 23).
생체외 설치류 심근세포 연구 결과
마우스 건강 및 심부전 심근세포에 대한 그렐린의 이노트로픽 효과
15분 그렐린 노출 후, 심근세포 분획 단축(FS)은 위약과 비교하여 증가되었다. 그렐린 유발 수축의 증가는 샴 및 포스트-MI HF 마우스 둘 다로부터의 심근세포에서 나타났다(도 24). FS에 대한 그렐린 효과는 GHS-수용체 1a 길항제(D-Lys 3; Sigma)에 의한 전처리에 의해 차단되었다. 이는 심근세포에서 그렐린의 이노트로픽 효과가 GHS-R1a에 의해 매개됨을 시사한다.
그렐린의 이노트로프 효과는 Ca 2 + 감작을 통해서이다
심근세포 Ca2 + 과도 상태는 다른 치료법(위약, 그렐린, D-Lys3 또는 D-Lys 3 + 그렐린)과 상이하지 않았다(도 25a 및 b). 더욱이, 그렐린 치료는 ROI(Ca2 + 과도 상태의 증가율) 및 Tau(감쇠 시간 상수)가 그룹 사이에서 유사했기 때문에(도 25a) Ca2+ 과도 상태의 동력학에 영향을 미치지 않았다. 함께 취하면, 이들 데이터는 그렐린의 수축 강화 효과가 세포내 Ca2 +의 증가를 통해 매개되지 않지만, 근필라멘트 Ca2+ 감도의 증가를 통해 매개될 수 있음을 시사한다.
그렐린에 의한 Ca 2 + 감작은 트로포닌 I의 감소된 인산화와 관련된다
근원섬유성 단백질, 예를 들어, 트로포닌의 번역 후 변형은 근원섬유 Ca2 + 감도를 조절할 수 있다. 예를 들어, 트로포닌 I에 대한 세린 23-24의 인산화는 감소된 근원섬유성 Ca2 + 감도에 연결되었다(Hasenfuss and Teerlink, 2011; Layland et al., 2005). 본 발명자들은 그렐린이 단백질 인산화를 변화시켰는지를 테스트하기 위해 트로포닌 I 상의 인산화된 세린 23-24 잔기를 표적으로 하는 항체를 사용하였다. 위약, 그렐린, D-Lys 3 + 그렐린으로 처리된 건강한 심근세포로부터의 단백질 용해물을 사용하였다. 그렐린의 존재하에, 인산화 신호는 위약과 비교하여 더 낮았다(도 26). 그렐린 수용체 길항제 D-Lys 3에 의한 심근세포의 전처리는 트로포닌 세린 23-24 인산화의 감소를 방지하였다(도 26). 이것은 그렐린의 이노트로픽 효과가 트로포닌의 번역 후 변형을 수반할 수 있음을 나타낸다.　
그렐린은 심근세포 cAMP 농도를 감소시키고 트로포닌 I 인산화를 낮춘다
cAMP는 원형질막 수용체(예: β-아드레날린 수용체) 사이의 세포내 신호 전달 및 근세포 수축성의 조절을 위한 핵심 분자이다. cAMP는 트로포닌을 포함한 다운스트림 단백질을 또한 인산화할 수 있는 단백질 키나제 A(PKA)를 활성화한다. 본 발명자들은 그렐린의 존재하에 심근세포에서 cAMP 농도가 위약에 비해 낮았다(도 27 막대 1 및 2)는 것을 발견하였다. GHS-R1a 길항제(D-Lys 3)에 의한 심근세포의 전처리는 cAMP 농도의 감소를 방지하였으며, 이는 위약 치료와 유사하게 유지되었다(도 37 막대 3). 이러한 결과는 트로포닌 I 세린 23-24 인산화에서 그렐린 매개 감소와 일치하고, 포스포키나제 의존 cAMP가 세린 23-24 인산화의 원인이 될 수 있음을 시사한다.
논의
진행성 CHF 및 감소된 EF를 갖는 환자에서 정맥내 아실화된 그렐린 대 위약의 이 무작위화된 위약 제어 시험에서, CO 변화의 주요 결과가 충족되었다. 그렐린은 저혈압, 부정맥 또는 허혈에 대한 부작용 없이 CO를 증가시켰다. 이는 HR이 변하지 않았기 때문에 SV의 유의한 증가에 기인하였다. 증가된 CO는 계산된 변경되지 않은 휴지 V02, 감소된 AV02-차이, 증가된 Sv02 및 작지만 유의한 Sp02의 감소와 관련되었고, 이는 증가된 CO를 통한 대사 조직으로의 개선된 02　전달을 시사한다(SpO2로서 측정된 동맥 O2 함량의 작은 감소에도 불구하고). 생체외 데이터는 증가된 CO가 cAMP 생산의 억제, 감소된 트로포닌 I 인산화 및 칼슘 감작을 수반하는 신규 메커니즘에 이차적일 수 있음을 시사하였다. 이 메커니즘은 종래의 이노트로프(이는 유해한 부작용을 가짐)와 상이하며, 그렐린에 의한 부작용의 부재를 설명할 수 있다.
그렐린의 생리학 및 심혈관 작용
그렐린의 농도 및 효과는 정상 인간 대상체(Akamizu et al., 2004; Arvat et al., 2001; Broglio et al., 2001; Broglio et al., 2003a; Broglio et al., 2003c; Broglio F., 2001; Enomoto et al., 2003; Falken et al., 2010; Levin et al., 2006; Nagaya et al., 2001a; Okumura et al., 2002; Peino et al., 2000; Vestergaard et al., 2007a; Vestergaard et al., 2007b; Vestergaard et al., 2008; Vestergaard et al., 2007c) 및 암 악액질(cancer cachexia)(Garcia et al., 2013; Garcia et al., 2005), 만성 폐쇄성 폐 질환 악액질(chronic obstructive pulmonary disease cachexia)(Miki et al., 2012), 성장 호르몬 결핍(growth hormone deficiency)(Janssen et al., 2004a; Janssen et al., 2004b), 비만(obesity)(Tassone et al., 2003), 대사성 증후군(metabolic syndrome)(Tesauro et al., 2005), 및 쿠싱 증후군(Cushing's syndrome)(Leal-Cerro et al., 2002)을 갖는 환자에서 연구되었다. 효과는 가변적이었고 불일치하였다. 작은 인간 연구는 그렐린이 심장 출력(Nagaya et al., 2001b) 및 좌심실 EF(Nagaya et al., 2004)를 개선할 수 있지만, 이들은 사용된 그렐린 형태가 아실화되었는지 여부를 명시하지 않으며, AHF의 특정 조건에 관련이 없다는 것을 시사했다. 또한, 아실 및 데스-아실이 심근세포에서 상이한 결합 및 효과를 갖기 때문에(Lear et al., 2010), 그렐린의 어떤 형태가 이러한 연구에서 관찰된 작용을 담당하는지는 불분명하다.
잠재적 기본 메커니즘
만성 및 급성 심부전에서 사용 중이거나 개발 중인 많은 약물(예: 베타 차단제, 안지오텐신 수용체 네프릴리신 억제제, 레보시멘단, 세렐락신, 울라라티드, 오메캄티브 메카빌, 니트록실 공여자, 이스타록심 및 기타)과 마찬가지로, 작용 메커니즘 및 임상적 이익을 담당하는 메커니즘(들)은 공지되지 않았고, 아마도 다인자적이다.
성장 호르몬 분비 촉진 수용체(GHSR)는 다수의 다운스트림 신호 전달 경로를 갖는 7-막관통 G-단백질 결합 수용체이다. 그것은 다른 G-단백질 결합 수용체와 이종 이량체화되며, 이는 Gs, Gi 및 Gq 효과를 모두 초래할 수 있다. 심장 및 혈관구조에는 기능이 잘 이해되지 않는 4개 (및 가능하게는 5개)의 상이한 그렐린 수용체가 있다.
이전에 기재된 그렐린 신호전달 및 그렐린의 관찰된 이노트로픽(수축) 효과를 담당하는 잠재적 메커니즘은 다음을 포함한다:
1. GHSR-1a → Gaq11에 결합 → 포스포리파제 C(PLC) → 이노시톨 트리포스페이트(IP3) 및 디아실글리세롤(DAG) → 소포체 (및 잠재적으로 근소포체) 망상 상의 IP3 수용체 → 세포내 칼슘 방출(Albarran-Zeckler and Smith, 2013)
2. DAG → 단백질 키나제 C(PKC)를 활성화 → 전압 개폐 L형 Ca 채널을 활성화 → 증가된 세포내 칼슘(Sun et al., 2010b)
3. GHSR → PLC 및 단백질 키나제 S (또는 PKC)를 통함 → 칼륨 방출 억제 → 작용 전위 연장 → L-형 칼슘 채널 활성화(Sun et al., 2010a)
그러나, 이들 메커니즘은 모두 본 발명자들이 관찰하지 못한 증가된 세포내 칼슘 농도를 초래한다. 그것은 AHF 환자에서 심각한 부작용을 초래하는 세포내 칼슘 농도의 증가이다.　 대신에, 본 발명자들은 증가된 칼슘 감도에 이차적인 증가된 수축성 및 분획 단축을 관찰하였다.
본 데이터는 다음과 같은 새로운 메커니즘을 지지한다:
4. GHSR → Gi → cAMP 감소 → 감소된 PKA 활성 → 감소된 단백질(예: 트로포닌 I)의 인산화 → 변경된 Ca2+ 감도.
그렐린이 증가된 칼슘 농도를 통해 작용하면, 그것은 베타 아드레날린 수용체 작용제 및 포스포디에스테라제 억제제와 같은 부작용과 잠재적으로 관련될 수 있지만, 이는 또한 중심 교감 신경 차단 효과를 생성하는 그렐린에 의해 상쇄될 수 있다(Nagaya et al., 2001b). 그러나, 언급된 바와 같이, 본 데이터는 칼슘 감작을 통해 수축성이 증가된 모델을 지지한다. 따라서, 그렐린이 이노트로프로서 작용하면, 본 발명자들은 부작용 및 불리한 이벤트를 예상할 것이다. 본 발명자들은 아무 것도 관찰하지 않았다. 이것은 새롭고 예상치 못한 것이며, 본 생체외 실험에 의해 설명된다.
그렐린은 또한 많은 추가의 잠재적 심장 보호 효과, 예를 들어, 감소된 염증(Li et al., 2004) 및 아폽토시스(Baldanzi et al., 2002), 개선된 산화질소 생체 이용률을 통한 개선된 내피 기능(Tesauro et al., 2005), 및 증가된 제지방량(Nagaya et al., 2004)을 갖는다. 게다가, 그렐린은 또한 혈관 확장 효과를 갖는 것으로 관찰되었고, 이것은 종종 이노트로픽 약물의 한계로 저혈압으로 이어진다. 본 연구에서 관찰된 그렐린의 주요 잠재적인 이점은 혈압에 대한 영향의 부재 및 저혈압의 결여였다.
결론
진행성 HF 및 감소된 EF를 갖는 환자에서, 정맥내 그렐린의 120분은 위약과 비교하여 불리한 저혈압, 부정맥, 빈맥 또는 허혈을 유발하지 않으면서 심장 출력을 개선시켰다. 본 생체외 뮤린 심근세포 연구는 메커니즘이 칼슘 감작과 관련될 수 있음을 시사하였다. 이러한 실험은 그렐린이 AHF를 치료하는데 사용하기에 효과적이고 안전하다는 것을 입증한다.　
참고문헌
Figure pct00015
Figure pct00016
Figure pct00017
Figure pct00018
Figure pct00019
Figure pct00020
Figure pct00021
Figure pct00022

Claims (71)

  1. 개체(individual)에서 급성 심부전(Acute Heart Failure; AHF)의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 그렐린 분자(ghrelin molecule).
  2. 개체에서 급성 심부전(AHF)의 치료 및/또는 예방을 위한 약제의 제조에서의, 그렐린 분자의 용도.
  3. 개체에서 급성 심부전(AHF)의 치료 및/또는 예방 방법으로서, 상기 방법이 개체에게 그렐린 분자를 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  4. 제1항, 또는 제2항, 또는 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 AHF가 심장 좌측의 AHF, 또는 심장 우측의 AHF인, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  5. 제1항 또는 제4항, 또는 제2항 또는 제4항, 또는 제3항 또는 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 AHF가 급성 비대상성 심부전(acute decompensated heart failure; ADHF); 고혈압(hypertension)과 관련된 AHF;　빈맥(tachycardia) 매개 AHF;　폐 부종(pulmonary edema)과 관련된 AHF;　심장성 쇼크(cardiogenic shock) AHF;　또는 심각한 심장성 쇼크 AHF를 포함하는 그룹으로부터 선택되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  6. 제5항에 있어서, 상기 급성 비대상성 심부전(ADHF)이 급성 비대상성 만성 심부전(Acute Decompensated Chronic Heart Failure; ADCHF) 또는 울혈성 ADHF, 바람직하게는 급성 비대상성 만성 심부전(ADCHF)인, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  7. 제6항에 있어서, 상기 급성 비대상성 만성 심부전(ADCHF)이 심각한 ADCHF인, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  8. 제6항 또는 제7항에 있어서, 상기 AHF가 ADCHF 또는 심각한 ADCHF이고, 상기 개체가 약 1년 이상, 바람직하게는 약 2년 이상 또는 약 3년 이상 동안 만성 심부전(CHF)을 앓았던, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  9. 제6항 또는 제7항에 있어서, 상기 AHF가 ADCHF 또는 심각한 ADCHF이고, 상기 개체가 약 1년 이하 동안 만성 심부전(CHF)을 앓았던, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  10. 제1항 또는 제4항 내지 제9항 중 어느 한 항, 또는 제2항 또는 제4항 내지 제9항 중 어느 한 항, 또는 제3항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 AHF가 심근 경색(myocardial infarction)과 관련되지 않는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  11. 제1항 또는 제4항 내지 제10항 중 어느 한 항, 또는 제2항 또는 제4항 내지 제10항 중 어느 한 항, 또는 제3항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 AHF가 드 노보(de novo) AHF가 아닌, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  12. 제1항 또는 제4항 내지 제11항 중 어느 한 항, 또는 제2항 또는 제4항 내지 제11항 중 어느 한 항, 또는 제3항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 그렐린 분자의 투여 후, 상기 개체가 증가된 심장 출력(heart output); 및/또는 증가된 심장 수축; 및/또는 증가된 심장 박출량(heart stroke volume); 및/또는 증가된 심실 기능; 및/또는 증가된 심실 박출 계수(ventricular ejection fraction); 및/또는 감소된 트로포닌 I 인산화; 및/또는 증가된 칼슘 감도(sensitivity); 및/또는 감소된 세포내 cAMP; 및/또는 개선된 신장 기능; 및/또는 개선된 추정 사구체 여과율(eGFR); 및/또는 개선된 호흡 곤란; 및/또는 개선된 부종; 및/또는 감소된 바이오마커(biomarker); 및/또는 감소된 저혈압(hypotension); 및/또는 심장성 쇼크(cardiogenic shock)의 해결; 및/또는 감소된 현기증(dizziness); 및/또는 감소된 어질어질함(light-headedness); 및/또는 감소된 동맥 정맥 산소(AV02) 차이; 및/또는 폐 혈류(PBF)의 증가; 및/또는 감소된 추정 전신 혈관 저항(eSVR); 및/또는 감소된 폐 모세관 쐐기 압력; 및/또는 감소된 좌심실 말단 확장기 압력; 및/또는 감소된 좌심실 말단 확장기 용적; 및/또는 감소된 폐 동맥압; 및/또는 감소된 중앙정맥압을 포함하는 그룹으로부터의 하나 이상의 파라미터를 나타내는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  13. 제12항에 있어서, 상기 하나 이상의 파라미터가 증가된 심장 출력;　및/또는 감소된 동맥 정맥 산소(AV02) 차이;　및/또는 폐 혈류(PBF)의 증가;　및/또는 감소된 추정 전신 혈관 저항(eSVR)을 포함하는 그룹으로부터 유래되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  14. 제12항 또는 제13항에 있어서, 상기 심장 출력이, 상기 심장 출력량이 약 1.5리터/분 이상, 바람직하게는 약 5.2리터/분 이상인 경우;　및/또는 심장 출력량이 약 0.1리터/분 이상, 바람직하게는 약 0.5리터/분 이상; 보다 바람직하게는 약 1.15리터/분 이상 증가한 경우;　및/또는 심장 출력량이 약 5% 이상 증가하는 경우, 증가되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  15. 제12항 또는 제14항에 있어서, 상기 심장 수축이 약 2% 이상, 바람직하게는 약 3% 이상의 절대적 퍼센트 분획 단축(absolute percent fractional shortening)의 증가가 있는 경우;　및/또는 약 20% 이상, 바람직하게는 약 42% 이상의 상대적 퍼센트 분획 단축의 증가가 있는 경우, 증가되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  16. 제12항, 제14항 또는 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 심장 박출량이 약 30ml 이상, 바람직하게는 약 69ml 이상; 보다 바람직하게는 약 79ml 이상인 경우;　및/또는 상기 심장 박출량이 약 3ml 이상 증가하는 경우; 및/또는 심장 박출량이 약 5% 이상, 바람직하게는 약 15% 이상, 더 바람직하게는 약 25% 이상 증가하는 경우, 상기 심장 박출량이 증가되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  17. 제12항 또는 제14항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 트로포닌 I 인산화가 약 20% 이상 감소되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.　
  18. 제12항 또는 제14항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 세포내 cAMP가 약 20% 이상 감소되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  19. 제12항 또는 제14항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 심실 박출 계수가, 약 2% 이상의 절대적 백분율의 증가; 및/또는 약 5% 이상, 바람직하게는 약 10% 이상의 상대적 백분율의 증가가 존재하는 경우, 증가되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  20. 제12항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 동맥 정맥 산소(arterio venous oxygen; AV02) 차이가 약 2% 이상, 바람직하게는 약 7% 이상 감소되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  21. 제12항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폐 혈류(PBF) 수준이 약 0.1리터/분 이상, 바람직하게는 약 0.8리터/분 이상 또는 약 1리터/분 이상 증가되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  22. 제12항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 추정 전신 혈관 저항(eSVR)이 약 100dyn*s/cm-5　이상, 바람직하게는 약 300dyn*s/cm-5　이상 감소되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.　
  23. 제1항 또는 제4항 내지 제22항 중 어느 한 항, 또는 제2항 또는 제4항 내지 제22항 중 어느 한 항, 또는 제3항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 AHF가 만성 심부전의 자발적 악화; 감염; 및/또는 알레르기 반응; 및/또는 혈액 응괴(blood clot); 및/또는 수술(surgery); 및/또는 심혈관 질환(cardiovascular disease); 및/또는 폐 질환(lung disease); 및/또는 심근병증(cardiomyopathy); 및/또는 수면 무호흡증(sleep apnea); 및/또는 알코올 소비; 및/또는 레크리에이션 약물 소비; 및/또는 빈혈(anaemia); 및/또는 이상지질혈증(dyslipidemia); 및/또는 과활성 갑상선(an overactive thyroid); 및/또는 파제트병(Paget's disease); 및/또는 고혈압(hypertension)(예: 폐 고혈압(pulmonary hypertension)); 및/또는 처방 약물 소비; 및/또는 흡연; 및/또는 고혈압(high blood pressure); 및/또는 신장 기능 장애(kidney dysfunction); 및/또는 당뇨병(diabetes); 및/또는 선천성 심장 결함(congenital heart defect); 및/또는 라이프 스타일 선택; 및/또는 불규칙한 심장 박동; 및/또는 빠른 심장 박동: 및/또는 느린 심장 박동: 및/또는 염증(inflammation); 및/또는 독소; 및/또는 자가 면역 질환(autoimmune disease); 및/또는 침윤성 질환(infiltrative disease); 및/또는 결합 조직 질환(connective tissue disease); 및/또는 대사 질환(metabolic disease); 및/또는 내분비 질환(endocrine disease); 및 노령; 및/또는 유전적 유전자 돌연변이(hereditary genetic mutations) 및/또는 임신을 포함하는 그룹의 하나 이상의 인자와 관련되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  24. 제23항에 있어서, 상기 AHF가 만성 심부전의 자발적 악화;　감염;　당뇨병;　및/또는 라이프 스타일 선택(lifestyle choice)(예: 비만 및/또는 좌식 라이프 스타일)을 포함하는 그룹의 하나 이상의 인자와 관련되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  25. 제23항 또는 제24항에 있어서, 상기 AHF가 고혈압과 관련되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.　
  26. 제1항 또는 제4항 내지 제25항 중 어느 한 항, 또는 제2항 또는 제4항 내지 제25항 중 어느 한 항, 또는 제3항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 AHF가 흉통(chest pain); 및/또는 기침(cough); 및/또는 쇼크(예: 심장성 쇼크); 및/또는 고혈압; 및/또는 핍뇨증(oliguria); 및/또는 무뇨증(anuria); 및/또는 피로(fatigue); 및/또는 호흡 곤란(shortness of breath)(호흡 곤란(dyspnea)); 및/또는 저산소혈증(hypoxemia); 및/또는 빠른 호흡(빈호흡(tachypnea)); 및/또는 빈맥(tachycardia); 및/또는 허혈(ischemia); 및/또는 부종(edema)(예: 악화되는 부종); 및/또는 손상된 신장 기능(예: 악화되는 신장 기능); 및/또는 저혈압(low blood pressure); 및/또는 장기 부전(organ failure)(예: 간부전(liver failure) 및/또는 신부전(kidney failure)); 및/또는 차거운 사지; 및/또는 마비 사지(numb extremities); 및/또는 근육 피로; 및/또는 메스꺼움(nausea); 및/또는 구토(vomiting); 및/또는 체중 감소(예: 거식증(anorexia)); 및/또는 폐 부종; 및 하체의 불편함; 및/또는 말초 팽윤; 및/또는 저관류(hypo-perfusion); 및/또는 하체의 팽윤; 및/또는 심장의 팽윤; 및/또는 체중 증가(예: 갑작스런 체중 증가); 및/또는 체중 감소; 및/또는 악액질(cachexia); 및/또는 상승된 목 혈관(예: 상승된 목 혈액 정맥 및/또는 경정맥 팽창); 및/또는 간비대증(hepatomegaly); 및/또는 현기증; 및/또는 기절(fainting)(또한 실신(syncope)으로 공지됨); 및/또는 변경된 정신 상태(예: 불안(anxiety) 및/또는 혼란(confusion) 및/또는 우울증(depression)); 및/또는 식욕 부진(loss of appetite); 저혈압(hypotension); 및/또는 부정맥(arrhythmia); 및/또는 수면 장애(difficulty sleeping); 및/또는 평평하게 누워있을 때 불편함; 및/또는 수면 무호흡증을 포함하는 그룹의 증상(symptom) 중 하나 이상을 포함하는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  27. 제26항에 있어서, 상기 AHF가 호흡 곤란(예: 휴지 중 호흡 곤란);　및/또는 저산소혈증;　및/또는 부종(예: 악화되는 부종);　및/또는 급격한 체중 증가;　및/또는 손상된 신장 기능(예: 악화하는 신장 기능);　및/또는 저혈압;　및/또는 현기증;　및/또는 심장성 쇼크를 포함하는 그룹의 증상 중 하나 이상을 포함하는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  28. 제26항에 있어서, 상기 AHF가 호흡 곤란; 및/또는 평평하게 누워 있을 때의 불편함;　및/또는 빠른 호흡;　및/또는 불안;　및/또는 저산소혈증;　및/또는 고혈압을 포함하는 그룹의 증상 중 하나 이상을 포함하는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  29. 제26항에 있어서, 상기 AHF가 부종(예: 악화하는 부종);　체중 증가;　및/또는 상승된 목 정맥;　및/또는 간비대증을 포함하는 그룹의 증상 중 하나 이상을 포함하는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  30. 제1항 또는 제4항 내지 제29항 중 어느 한 항, 또는 제2항 또는 제4항 내지 제29항 중 어느 한 항, 또는　제3항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 하나 이상의 증상이 약 1개월 이하의 기간, 바람직하게는 약 7일 이하; 보다 바람직하게는 약 7일 내지 약 1일의 기간에 걸쳐 발생하는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.　
  31. 제1항 또는 제4항 내지 제30항 중 어느 한 항, 또는 제2항 또는 제4항 내지 제30항 중 어느 한 항, 또는　제3항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 개체가 X-선; 및/또는 혈액 검사; 및/또는 심전도(ECG); 및/또는 개체의 병력에 기초; 및/또는 양전자 방출 단층 촬영(PET) 스캔; 및/또는 다중 게이트 획득(multigated acquisition; MUGA) 스캔; 및/또는 신티그래피(scintigraphy); 및/또는 심 초음파(echocardiogram); 및/또는 혈관 조영술; 및/또는 혈역학적 측정(hemodynamic measurement); 및/또는 컴퓨터 단층 촬영(CT) 스캔; 및/또는 증상의 물리적 검사; 및/또는 바이오마커(예: 혈청 나트륨 이뇨성 펩티드(serum natriuretic peptide) 및/또는 혈장 나트륨 이뇨성 펩티드) 측정; 및/또는 자기 공명 영상(MRI) 스캔을 포함하는 그룹의 절차 중 하나 이상을 사용하여 AHF를 갖는 것으로 진단되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  32. 제31항에 있어서, 상기 개체가 개체의 병력에 기초;　및/또는 증상의 물리적 검사;　및/또는 심 초음파;　및/또는 혈청 나트륨 이뇨성 펩티드 측정을 포함하는 그룹의 절차 중 하나 이상을 사용하여 AHF를 갖는 것으로 진단되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  33. 제32항에 있어서, 상기 바이오마커가 혈청 나트륨 이뇨성 펩티드; 및/또는 sST2 심장 바이오마커; 및/또는 중간 지역 프로-아드레노메둘린(MR-proADM); 및/또는 락테이트를 포함하는 그룹의 선택된 하나 이상인, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  34. 제33항에 있어서, 상기 혈청 나트륨 이뇨성 펩티드가 B형 나트륨 이뇨성 펩티드(BNP) 및/또는 N-말단 프로-B형 나트륨 이뇨성 펩티드(NT-proBNP); 및/또는 중간 지역 프로-심방(pro-atrial) 나트륨 이뇨성 펩티드(MR-proANP)를 포함하는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  35. 제34항에 있어서, 상기 개체가, BNP가 50ng/리터 이상, 바람직하게는 약 100ng/리터 이상인 경우;　및/또는 NT-proBNP가 250ng/리터 이상, 바람직하게는 약 300ng/리터 이상인 경우, AHF를 갖는 것으로 진단되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  36. 제31항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 혈역학적 측정이 수축기 혈압의 측정;　및/또는 심장 지수의 측정;　및/또는 폐 모세관 쐐기 압력의 측정을 포함하는 그룹 중 하나 이상인, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  37. 제36항에 있어서, 상기 혈역학적 측정이 심장 지수의 측정이고, 상기 심장 지수가 약 5리터/분/미터2　이하, 바람직하게는 약 2리터/분/미터2　이하 또는 약 1.8리터/분/미터2　이하인, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  38. 제36항 또는 제37항에 있어서, 상기 혈역학적 측정이 폐 모세관 쐐기 압력의 측정이고, 상기 폐 모세관 쐐기 압력이 약 10mmHg 이상인, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  39. 제1항 또는 제4항 내지 제38항 중 어느 한 항, 또는 제2항 또는 제4항 내지 제38항 중 어느 한 항, 또는 제3항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 그렐린 분자의 투여 후, 상기 개체가 증가된 심박수;　및/또는 빈맥;　및/또는 감소된 혈압;　및/또는 저혈압;　및/또는 증가된 산소 요구량;　및/또는 허혈;　및/또는 증가된 혈장 트로포닌 T;　및/또는 심장 부정맥;　및/또는 영향을 받은 칼슘 과도 상태(affected calcium transient)를 포함하는 그룹의 하나 이상의 파라미터를 나타내지 않는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  40. 제39항에 있어서, 상기 그렐린 분자의 투여 후, 상기 개체가 저혈압;　및/또는 허혈;　및/또는 심장 부정맥;　및/또는 빈맥을 포함하는 그룹의 하나 이상의 파라미터를 나타내지 않는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  41. 제39항에 있어서, 상기 심박수가 약 5회 심장 박동/분 이상 및/또는 약 100회 심장 박동/분 이상 증가되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.　
  42. 제39항 또는 제41항에 있어서, 빈맥이 약 10회 심장 박동/분 이상의 심박수;　및/또는 약 110회 심장 박동/분 이상의 심박수의 증가인, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  43. 제39항, 제41항 또는 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 혈압이 약 5mmHg 이상, 바람직하게는 약 20mmHg 이상, 더욱 바람직하게는 20mmHg 내지 80mmHg 감소되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법..
  44. 제39항 또는 제41항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 저혈압이 약 90mmHg 이하, 바람직하게는 약 80mmHg 이하의 혈압인, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  45. 제39항 또는 제41항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 심장 부정맥이 심실 부정맥(ventricular arrhythmia); 심실상 부정맥(supra-ventricular arrhythmia); 이소성 심방 빈맥(ectopic atrial tachycardia); 심방 조동(atrial flutter); 동서맥(sinus bradycardia); 심방 심실 블록(atrial ventricular block(AV 블록); 및 심방 세동(atrial fibrillation)을 포함하는 그룹으로부터 선택되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  46. 제39항 또는 제41항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 허혈이 심전도(ECG)의 변화 및/또는 증가된 혈장 트로포닌 T를 포함하는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  47. 제46항에 있어서, 상기 심전도(ECG)의 변화가 ST 상승(elevation); 및/또는 ST 하강(depression);　및/또는 T파 변화를 포함하는 그룹 중 하나 이상을 포함하는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  48. 제39항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 혈장 트로포닌 T가 약 40% 이상, 바람직하게는 약 100% 이상 증가되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  49. 제33항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 칼슘 과도 상태가 칼슘 과도 상태 진폭의 변화를 포함하지 않는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  50. 제1항 또는 제4항 내지 제49항 중 어느 한 항, 또는 제2항 또는 제4항 내지 제49항 중 어느 한 항, 또는 제3항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 그렐린 분자가 변형된 그렐린;　및/또는 그렐린 융합 분자;　및/또는 그렐린　단편;　및/또는 그렐린 변이체;　및/또는 그렐린 유도체;　및/또는 야생형 그렐린을 포함하는 그룹 중 하나 이상을 포함하는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  51. 제50항에 있어서, 상기 변형된 그렐린이 아실화된 그렐린 분자를 포함하는 그룹 중 하나 이상을 포함하는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  52. 제1항 또는 제4항 내지 제51항 중 어느 한 항, 또는 제2항 또는 제4항 내지 제51항 중 어느 한 항, 또는 제3항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 그렐린 분자가 합성 그렐린 분자;　및/또는 재조합 그렐린 분자;　및/또는 내인성 그렐린 분자를 포함하는 그룹 중 하나 이상을 포함하는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  53. 제1항 또는 제4항 내지 제52항 중 어느 한 항, 또는 제2항 또는 제4항 내지 제52항 중 어느 한 항, 또는 제3항 내지 제52항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 그렐린 분자가 매일 1회 이상, 바람직하게는 매일 2회 투여되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  54. 제1항 또는 제4항 내지 제53항 중 어느 한 항, 또는 제2항 또는 제4항 내지 제53항 중 어느 한 항, 또는 제3항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 그렐린 분자가 주입에 의해 투여되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  55. 제54항에 있어서, 상기 주입이 약 10분 이상, 바람직하게는 약 120분의 기간에 걸쳐 이루어지는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  56. 제1항 또는 제4항 내지 제55항 중 어느 한 항, 또는 제2항 또는 제4항 내지 제55항 중 어느 한 항, 또는 제3항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 개체가 18세 이상, 바람직하게는 65세 이상인, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  57. 제1항 또는 제4항 내지 제56항 중 어느 한 항, 또는 제2항 또는 제4항 내지 제56항 중 어느 한 항, 또는 제3항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 그렐린 분자가 수술 전, 및/또는 수술 중, 및/또는 수술 후에 투여되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  58. 제1항 또는 제4항 내지 제57항 중 어느 한 항, 또는 제2항 또는 제4항 내지 제57항 중 어느 한 항, 또는 제3항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 개체가 하나 이상의 추가 치료제와 함께 투여되는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  59. 제1항 또는 제4항 내지 제58항 중 어느 한 항, 또는 제2항 또는 제4항 내지 제58항 중 어느 한 항, 또는 제3항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 그렐린 분자가 조성물, 바람직하게는 약제학적 조성물에 존재하는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  60. 제59항에 있어서, 상기 조성물이 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  61. 제59항 또는 제60항에 있어서, 상기 조성물이 하나 이상의 추가 치료제를 포함하는, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  62. 제58항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료제가 안지오텐신 전환 효소(ACE) 억제제; 및/또는 안지오텐신 II 수용체 차단제; 및/또는 바소프레신 수용체 길항제; 및/또는 베타 차단제; 및/또는 심장수축성 혈관확장제(특히, 미리논 및/또는 에녹시몬 및/또는 도부타민 및/또는 레보시멘단); 및/또는 오메캄티브 메카빌; 및/또는 레닌 길항제; 및/또는 릴렉신; 및/또는 울라리티드; 및/또는 디곡신(라녹신); 및/또는 혈관 확장제; 및/또는 안지오텐신 II 수용체 길항제(예: 발사르탄); 및/또는 아스피린; 및/또는 스타틴; 및/또는 항고혈압 약물(예: 사쿠비트릴); 및/또는 칼슘 감작제; 및/또는 이바브라딘; 및/또는 이뇨제; 및/또는 혈관 수축제(예: 노르아드레날린, 도파민, 바소프레신, 및/또는 안지오텐신 II); 및/또는 아데노신 길항제; 및/또는 알도스테론 길항제를 포함하는 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 치료제인, 그렐린 분자, 또는 용도, 또는 방법.
  63. 그렐린 분자, 및 안지오텐신 전환 효소(ACE) 억제제; 및/또는 안지오텐신 II 수용체 차단제; 및/또는 바소프레신 수용체 길항제; 및/또는 베타 차단제; 및/또는 심장수축성 혈관확장제(특히, 미리논 및/또는 에녹시몬 및/또는 도부타민 및/또는 레보시멘단); 및/또는 오메캄티브 메카빌; 및/또는 레닌 길항제; 및/또는 릴렉신; 및/또는 울라리티드; 및/또는 디곡신(라녹신); 및/또는 혈관 확장제; 및/또는 안지오텐신 II 수용체 길항제(예: 발사르탄); 및/또는 아스피린; 및/또는 스타틴; 및/또는 항고혈압 약물(예: 사쿠비트릴); 및/또는 칼슘 감작제; 및/또는 이바브라딘; 및/또는 이뇨제; 및/또는 혈관 수축제(예: 노르아드레날린, 도파민, 바소프레신, 및/또는 안지오텐신 II); 및/또는 아데노신 길항제; 및/또는 알도스테론 길항제를 포함하는 목록으로부터 선택된 하나 이상의 치료제를 포함하는 조성물.
  64. 제63항에 있어서, 릴렉신; 및/또는 울라리티드(ularitide); 및/또는 심장수축성 혈관확장제(inodilator); 및/또는 혈관 수축제; 및/또는 혈관 확장제를 포함하는 목록으로부터 선택된 하나 이상의 치료제를 포함하는, 조성물.
  65. 제63항 또는 제64항에 있어서, 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 조성물.
  66. 제63항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, 제1항 내지 제62항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같이 사용하기 위한, 조성물.　
  67. 제63항 내지 제65항 중 어느 한 항에 정의된 조성물의, 제1항 내지 제62항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 용도.
  68. 제63항 내지 제65항 중 어느 한 항에 정의된 조성물을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 제1항 내지 제62항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 방법.
  69. 제1항 내지 제62항 중 어느 한 항에 정의된 그렐린 분자 및/또는 제63항 내지 제65항 중 어느 한 항에 정의된 조성물을 포함하는 부품의 키트(kit of parts).
  70. 제69항에 있어서, 제1항 내지 제62항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 AHF의 치료에서 그렐린 분자 및/또는 조성물의 사용을 위한 설명서를 포함하는, 부품의 키트.
  71. 첨부된 청구범위, 설명, 실시예 및 도면을 참조하여 실질적으로 본원에서 청구된 바와 같은, 그렐린 분자, 용도를 위한 그렐린 분자, 용도, 방법, 조성물, 용도를 위한 조성물, 부품의 키트.




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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5643872A (en) 1989-10-23 1997-07-01 Smithkline Beecham Corporation Cyclic anti-aggregatory peptides
US6008058A (en) 1993-06-18 1999-12-28 University Of Louisville Cyclic peptide mixtures via side chain or backbone attachment and solid phase synthesis
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