KR20220103986A - 지정 접합 기술 - Google Patents

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amino acid
binding moiety
antibody
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KR1020227019529A
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루카 라스텔리
데이비드 아담 스피겔
매튜 어니스트 웰쉬
테티아나 버바소바
마이클 씨. 쿠칸
로렌스 제랄드 이벤
아다 마가렛 베일
안나 부닌
크리스티안 마르셀 비달
엔리케 알바레즈
Original Assignee
클레오 파마슈티컬스 인코포레이티드
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Abstract

특히, 본 개시내용은 표적 제제에 다양한 관심 모이어티의 부위-지정 접합을 위한 기술을 제공한다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 높은 접합 효율 및 선택성을 제공하기 위해 표적 결합 모이어티를 이용한다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술은 항체 접합체의 제조에 유용하다.

Description

지정 접합 기술
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2019년 11월 18일자로 출원된 미국 특허 가출원 제62/937,131호 및 2020년 8월 10일자로 출원된 제63/063,902호에 대한 우선권을 주장하며, 이들 각각의 전문은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
접합체, 예를 들어, 단백질 접합체, 예컨대, 항체-약물 접합체는 다양한 목적을 위해, 예를 들어, 진단 시약, 치료제(예를 들어, 항원 표적화된 치료제) 등으로서 유용하다.
특히, 본 개시내용은 현재의 접합 기술이 다양한 문제를 겪을 수 있다는 인식을 포함한다. 예를 들어, 표적 분자(예를 들어, 항체-약물 접합체에 대한 항체)에 관심 모이어티(예를 들어, 검출 모이어티, 약물 모이어티 등)를 접합시키는 반응은 낮은 효율을 가질 수 있고/있거나, 낮은 선택성(예를 들어, 표적 분자의 다양한 위치에서의 접합(예를 들어, 항체의 다양한 아미노산 잔기))을 갖고, 각각 독립적으로 관심 모이어티의 자체 복제 수, 접합 위치(예를 들어, 단백질의 상이한 아미노산 잔기) 등을 갖는 다수의 개개 접합체 유형을 비롯하여 생성물 접합체 조성물은 종종 상당히 이질적이다. 일부 실시형태에서, 접합체의 제조는 여러 단계를 수반하며, 다양한 반응, 예컨대, 환원, 산화, 가수분해 등을 포함하고, 이러한 반응은, 예를 들어, 표적 제제 모이어티의 하나 이상의 위치에서(예를 들어, 하나 이상의 잔기 및/또는 항체 모이어티의 하나 이상의 변형(예를 들어, 글리칸)에서), 원치않는 변형을 야기할 수 있다. 이러한 원치않는 변형은 추가로 생성물 접합체 조성물의 효율을 낮추고/낮추거나 이질성을 증가시키고, 특성규명, 평가 및/또는 정제 공정을 복잡하게 하며, 생산 비용을 증가시킬 수 있다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 표적(예를 들어, 단백질)에 다양한 관심 모이어티를 접합시키기 위한 접합 기술을 제공한다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술은 관심 모이어티가 표적(예를 들어, 항체와 같은 단백질)의 특정 위치에서 선택적으로 접합된다는 점에서 지정 접합(directed conjugation)을 제공한다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술은 보다 적은 단계를 이용한다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술은 약한 반응 조건을 이용한다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술은 환원, 산화 및/또는 가수분해와 같은 반응 조건을 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술은 표적 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 접합체 분자로부터의 절단을 실질적으로 포함하지 않는다(예를 들어, 표적 제제 모이어티, 관심 모이어티 및/또는 링커 모이어티로부터의 절단 없음). 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 검출 가능한 모이어티(예를 들어, FITC)이다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 약물 모이어티(예를 들어, 항체-약물 접합체에서 이용되는 다양한 약물 모이어티)이다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 단백질 모이어티(예를 들어, (표적 제제 모이어티로서) 다른 항체 제제에 접합된 항체 제제)이다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 반응기이거나, 반응기를 포함한다. 일부 실시형태에서, 반응기에서의 반응을 통해 다른 관심 모이어티가 추가로 혼입될 수 있도록 관심 모이어티는 반응기이거나 반응기를 포함한다.
본 개시내용의 기술은 다양한 이점을 제공할 수 있다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 개선된 효율 및/또는 선택성, 감소된 이질성 수준 및/또는 감소된 원치않는 형질전환(예를 들어, 보다 소수의 반응 단계(일부 실시형태에서, 단지 하나)를 통해), 특정 반응 조건(예를 들어, 환원, 산화, 가수분해 등)의 회피를 제공한다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 표적 제제 모이어티의 특정 위치에 접합된 관심 모이어티를 포함하는 제제를 제공한다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 기준 기술(예를 들어, 제공된 방법에 기재된 바와 같은 표적 결합 모이어티(예를 들어, LG)를 이용하지 않는 기술)로부터의 조성물에 비해 증가된 균질성의 조성물을 제공한다.
도 1. 제공된 기술이 다양한 이점(예를 들어, 추가 반응 단계 없이 개선된 효율, 개선된 선택성 등)을 제공할 수 있다는 것을 나타내는 웨스턴 블롯 데이터. 2시간 동안 37℃에서 pH 8.3의 중탄산염 완충제 중 10 M의 표시된 시약을 이용하여 다라투무맙으로 반응을 셋업하였다. 반응 상대: 1: I-1; 2: I-2; 3: I-3; 4: I-4; 5: I-9; 6: I-10; 7: I-11; 8: I-15; 9: I-14.
도 2. 제공된 기술이 다양한 이점(예를 들어, 추가 반응 단계 없이 개선된 효율, 개선된 선택성 등)을 제공할 수 있다는 것을 나타내는 웨스턴 블롯 데이터. 20시간 동안 37℃에서 pH 8.3의 붕산염 완충제 중 30 M eq의 표시된 시약을 이용하여 다라투무맙으로 반응을 셋업하였다. 1: 다라투무맙. 레인 2 내지 9에 대한 반응 상대: 2: I-10; 3: I-11; 4: I-46; 5: I-24; 6: I-25; 7: I-35; 8: I-36; 및 9: I-37.
도 3. 제공된 기술이 다양한 이점(예를 들어, 추가 반응 단계 없이 개선된 효율, 개선된 선택성 등)을 제공할 수 있다는 것을 나타내는 웨스턴 블롯 데이터. 20시간 동안 37℃에서 pH 8.3의 중탄산염 완충제 중 5 M eq의 표시된 시약을 이용하여 다라투무맙으로 반응을 셋업하였다. 1: 다라투무맙. 레인 2 내지 10에 대한 반응 상대: 2: I-6; 3: I-5; 4: I-13; 5: I-17; 6: I-7; 7: I-8; 8: I-12; 9: I-16; 및 10: I-35.
도 4. 제공된 기술이 다양한 이점(예를 들어, 추가 반응 단계 없이 개선된 효율, 개선된 선택성 등)을 제공할 수 있다는 것을 나타내는 웨스턴 블롯 데이터. 4시간 동안 25℃에서 pH 7.4의 인산염 완충제 식염수 중 2.5 M eq의 표시된 시약을 이용하여 다라투무맙으로 반응을 셋업하였다. 1 및 2: 다라투무맙. 레인 3 내지 14에 대한 반응 상대: 3: I-38; 4: I-39; 5: I-40; 6: I-47; 7: I-48; 8: I-49; 9: I-18; 10: I-50; 11: I-51; 12: I-52; 13: I-9; 및 14: I-45.
도 5. 제공된 기술이 다양한 이점(예를 들어, 추가 반응 단계 없이 개선된 효율, 개선된 선택성 등)을 제공할 수 있다는 것을 나타내는 웨스턴 블롯 데이터. 반응은 표 30-8에 기재된 바와 같았다. 1: 다라투무맙; 2: I-45, 2.5 Eq, 1㎎/㎖; 3: I-45, 3.0 Eq, 1㎎/㎖; 4: I-45, 3.5 Eq, 1㎎/㎖; 5: I-9, 2.5 Eq, 1㎎/㎖; 6: I-9, 3.0 Eq, 1㎎/㎖; 7: I-9, 3.5 Eq, 1㎎/㎖; 8: I-45, 2.5 Eq, 4㎎/㎖; 9: I-45, 3.0 Eq, 4㎎/㎖; 10: I-45, 3.5 Eq, 4㎎/㎖; 11: I-9, 2.5 Eq, 4㎎/㎖; 12: I-9, 3.0 Eq, 4㎎/㎖; 13: I-9, 3.5 Eq, 4㎎/㎖.
도 6. 제공된 기술이 다양한 이점(예를 들어, 추가 반응 단계 없이 개선된 효율, 개선된 선택성 등)을 제공할 수 있다는 것을 나타내는 웨스턴 블롯 데이터. 특정 반응은 표 30-10에 기재된 바와 같았다. 1: 다라투무맙; 2: I-10, PBS, pH 8.2, 25℃; 3: I-44, PBS, pH 8.2, 25℃; 4: I-10, PBS, pH 8.0, 25℃; 5: I-44, PBS, pH 8.0, 25℃; 6: I-10, PBS, pH 7.8, 25℃; 7: I-44, PBS, pH 7.8, 25℃; 8: I-10, PBS, pH 7.4, 30℃; 9: I-44, PBS, pH 7.4, 30℃; 10: I-10, PBS, pH 7.4, 37℃; 및 11: I-44, PBS, pH 7.4, 37℃.
도 7. 항체 접합체는 항체의 특성/활성을 유지한다. 20시간 동안 37℃에서 pH 8.3의 붕산염 완충제 중 30 M eq의 표시된 시약을 이용하여 다라투무맙으로 반응을 셋업하였다. 왼쪽에서 오른쪽으로: 다라투무맙; I-46; I-24; I-25, I-35, 8: I-36 및 I-37을 이용하는 접합체; 항체 없음.
도 8. 항체 접합체는 항체의 특성/활성을 유지한다. 20시간 동안 37℃에서 pH 8.3의 중탄산염 완충제 중 5 M의 표시된 시약을 이용하여 다라투무맙으로 반응을 셋업하였다. 왼쪽에서 오른쪽으로: 다라투무맙; I-6, I-5, I-13, I-17, I-7, I-8, I-12, I-16 및 I-35를 이용하는 접합체; 항체 없음.
도 9. 항체 접합체는 항체의 특성/활성을 유지한다. 4시간 동안 25℃에서 pH 7.4의 인산염 완충제 식염수 중 2.5 M eq의 표시된 시약을 이용하여 다라투무맙으로 반응을 셋업하였다. 왼쪽에서 오른쪽으로: 다라투무맙; I-38, I-39, I-40, I-47, I-49, I-48, I-18, I-50, I-51, I-52, I-9, I-45를 이용하는 접합체; 항체 없음.
도 10. 항체 접합체는 항체의 특성/활성을 유지한다. 반응은 표 30-10에 기재된 바와 같았다. 1: 다라투무맙; 2: I-10, PBS, pH 8.2, 25℃; 3: I-44, PBS, pH 8.2, 25℃; 4: I-10, PBS, pH 8.0, 25℃; 5: I-44, PBS, pH 8.0, 25℃; 6: I-10, PBS, pH 7.8, 25℃; 7: I-44, PBS, pH 7.8, 25℃; 8: I-10, PBS, pH 7.4, 30℃; 9: I-44, PBS, pH 7.4, 30℃; 10: I-10, PBS, pH 7.4, 37℃; 및 11: I-44, PBS, pH 7.4, 37℃.
도 11. 예로서 다라투무맙(DAR = 0)의 특정 원형 질량(intact mass) 데이터.
도 12. 예로서 I-45와 접합된 다라투무맙의 특정 원형 질량 데이터. (a) FITC DAR은 0.43이다. (b) FITC DAR은 1.09이다. (c) FITC DAR은 0.90이다.
도 13. 예로서 I-45와 접합된 다라투무맙의 특정 펩타이드 맵핑 데이터. (a) FITC DAR은 0.43이다. (b) FITC DAR은 1.09이다. (c) FITC DAR은 0.90이다.
도 14. 예로서 I-9와 접합된 다라투무맙의 특정 원형 질량 데이터.
도 15. 예로서 I-9(다라투무맙에 결합하는 항체 결합 모이어티를 포함하지 않음)와 접합된 다라투무맙의 특정 펩타이드 맵핑 데이터. FITC DAR은 0.44이다.
도 16. 예로서 I-44와 접합된 다라투무맙의 특정 원형 질량 데이터. (a) 인산염 완충 식염수, pH 8.2, 25℃, 20 h, 2.5 M eq I-44, FITC DAR 1.14. (b) 인산염 완충 식염수, pH 7.4, 30℃, 20 h, 2.5 M eq I-44. FITC DAR 1.15. (c) 인산염 완충 식염수, pH 7.4, 37 C, 20 h, 2.5 M eq I-44. FITC DAR 1.66. (d) 붕산염 완충제 pH 8.2 25 C, 20 h, 2.5 M eq I-44. FITC DAR 1.42. (e) 붕산염 완충제 pH 8.2 25 C, 20 h, 2.5 M eq I-44. FITC DAR 0.21.
도 17. 화학적으로 접합된 생성물 III-1(CD20×CD3) 환원 및 비환원의 SDS-PAGE.
도 18. 다중 항체 제제 모이어티를 포함하는 제공된 제제는 개개 항체 제제 모이어티의 특성 및/또는 활성을 유지한다. 예를 들어, III-1(CD20×CD3)은 고친화도로 CD20에 결합할 수 있다. 예로서 Octet 분석 데이터를 나타낸다. Kd = 1.06 nM. R2 =0.9983.
도 19. 다중 항체 제제 모이어티를 포함하는 제공된 제제는 개개 항체 제제 모이어티에 비해 추가적인 특성 및/또는 활성을 제공할 수 있다. 예를 들어, III-1(CD20×CD3)은 T-세포 수용체 복합체의 성분일 수 있는 CD3에 대한 결합을 얻을 수 있다. 특히, CD3의 혼입은 T-세포 보충(recruitment) 및 활성을 초래하는 항체 기능을 제공할 수 있다. ELISA 분석으로부터의 특정 데이터를 나타낸다.
도 20. 다중 항체 제제 모이어티를 포함하는 제공된 제제는 개개 항체 제제 모이어티의 특성 및/또는 활성을 유지한다. 예를 들어, III-1(CD20×CD3)은 CD16 Fc 수용체에 대한 이의 결합(CD16a-V158), 및 NK 세포 보충을 초래하는 이의 기능을 유지한다. ELISA 데이터를 나타낸다.
도 21. 다중 항체 제제 모이어티를 포함하는 제공된 제제는 개개 항체 제제 모이어티의 특성 및/또는 활성을 유지 또는 개선시킨다. 예를 들어, III-1(CD20×CD3)은 FcRn Fc 수용체에 대해 이의 결합을 유지 또는 심지어 개선시켰으며, 이는 항체 재순환 메커니즘이 유지된다는 것을 나타낸다.
도 22. 제공된 기술은 특정 부위에서 선택적 접합을 제공할 수 있다. 나타낸 바와 같이, I-44는 기준 화합물, 예를 들어, I-10 (B)에 비교되는 중쇄의 부위 246 또는 248에서의 접합 (A)을 선택적으로 제공할 수 있다.
도 23. 제공된 기술은 반응으로부터의 방출된 표적 결합 모이어티를 포함하는 제제를 효과적으로 제거할 수 있다. 산성 용액으로 처리에 의한 특정 표적 결합 모이어티의 제거가 본 명세서에서 입증된다.
도 24. 제공된 기술은 항체-항체 접합체를 제공할 수 있다. 트라스투주맙(TRA)-세툭시맙(CTX) 이중특이성 항체에 대한 특정 데이터를 도시한다.
도 25. 제공된 항체-항체 접합체는 각 항체의 표적에 결합한다. 예를 들어, ELISA 결합 분석으로부터의 특정 데이터는 트라스투주맙(TRA)-세툭시맙(CTX) 접합체가 HER2와 EGFR 둘 다에 결합한다는 것을 확인한다.
도 26. 제공된 항체-항체 접합체는 Fc 수용체에 결합한다. 예를 들어, ELISA 결합 분석으로부터의 특정 데이터는 트라스투주맙(TRA)-세툭시맙(CTX) 접합체가 IgG1 대조군과 유사한 수준으로 Fc 수용체 FcRn 및 FcRIII에 대한 결합을 유지한다는 것을 확인한다.
도 27. 제공된 기술은 다양한 유형의 항체 제제에 대해 고도로 효욜적이고/이거나 선택적인 접합을 제공할 수 있다. 본 명세서에서 입증되는 바와 같이, 제공된 기술(예를 들어, I-44)은 특히 IgG2 항체 데노수맙에 대한 특이적 접합을 제공할 수 있다.
도 28. 제공된 기술은 다양한 유형의 항체 제제에 대해 고도로 효율적이고/이거나 선택적인 접합을 제공할 수 있다. 본 명세서에서 입증되는 바와 같이, 제공된 기술(예를 들어, I-44)은 특히 IgG4 항체 니볼루맙에 대한 효율적이고 특이적인 접합을 제공할 수 있다.
도 29. 제공된 기술은 높은 활성을 갖는 scFv-항체 접합체를 제공할 수 있다. 예를 들어, CD3(scFv)-리툭시맙 접합체는 T-세포(A)를 활성화시킬 수 있고, IL6(B)을 최소로 증가시키며, B-세포 고갈(C)이 최대 10x 더 강할 수 있다.
도 30. 제공된 기술은 다양한 효과기 세포를 활성화시킬 수 있다. 일부 실시형태에서, 도 30에 나타낸 바와 같이, III-1은 PBMC 효과기 세포를 활성화시킬 수 있다. (A): 일부 실시형태에서, T 세포 수용체(TCR)/CD3 맞물림 및 T 세포 활성화를 측정하기 위해, 루시퍼라제 상류의 NFAT-RE를 안정하게 발현시키는 효과기 Jurkat 세포를 사용하였다. 활성화는 발광에 의해 측정되었다. 효과기 + 표적에 대해, EC50은 III-1에 대해 0.10 nM이고, Fc 침묵 III-1에 대해 0.56 nM이다. 효과기 단독에 대해, EC 50은 III-1과 Fc 침묵 III-1 둘 다에 대해 10 nM 초과이다. (B): 일부 실시형태에서, PBMC를 CD2, CD56, CD14 및 CD19에 특이적인 형광-표지된 항-인간 항체로 염색하고, 유세포 분석에 의해 CD69 활성화 마커에 대해 PBMC 하위집단을 분석하였다.
도 31. 제공된 기술은 표적 세포, 예컨대, 암 세포를 효과적으로 사멸시킬 수 있다. (A): KILR 레트로입자(Eurofins DiscoverX)를 이용하여 베타-gal 리포터 단편을 안정하게 발현시키기 위해 Daudi(CD20+) B 림프아구 세포를 조작하였다. 표적 세포를 III-1, 리툭시맙 및 적절한 대조군으로 다양한 농도에서 처리하였다. 비분획화 및 NK 세포 고갈 PBMC로부터의 효과기로부터의 효과기 세포를 새로 해동시키거나 또는 PHA + IL-2 사전 자극한 (5일) PBMC로부터 제조하였다. 세포를 15:1의 효과기:표적비로 배양시키고, 18시간 동안 인큐베이션시켰다. 표적 세포사를 반영하기 위해 루미노미터를 이용하여 발광 신호를 얻었다. (B): A-431 (EGFR+) 표피모양 암종 세포를 다양한 농도의 세툭시맙(CTX)-CD3 MATE, 대조군 mAb 또는 scFv로 처리하였다. CytoTox-Glo 시약(Promega)을 이용하여 표적 세포사를 측정하였다.
도 32. 특정 조성물은 시험관내 표적 세포-의존적 방식에서 활성화 및 염증 사이토카인을 유도할 수 있다. 새로-해동된 비분획화 PBMC를 Daudi 표적 세포와 함께(20:1 효과기-대-표적 비) 또는 이것 없이 배양시키고, 다양한 농도의 III-1, 리툭시맙, 또는 대조군 scFv(도시하지 않음)로 18시간 동안 처리하였다. 상청액을 수집하고, 다중복합 면역분석 인간 사이토카인 패널(Invitrogen, ProcartaPlex)로 평가하였다.
도 33. 제공된 기술은 생체내 전염증 사이토카인/케모카인 수준을 최소로 증가시키는 활성을 제공할 수 있다. (A): T 세포를 CD45+CD3+로서 확인하였고, 활성화를 CD69 및 CD44로 표시하였다. (B): B 세포를 CD45+CD3-CD14-NKG2A-HLADR+로서 확인하였다. 면역 세포 서브세트의 절대 수 및 빈도를 모니터링하였다. 비교로서, 인간 PBMC를 18시간 동안 시험관내에서 처리하고, CD19+로서 확인하고, PBMC의 백분율을 계산하였다. (C): 사이토카인/케모카인의 수준을 선택한다.
1. 정의
본 개시내용의 화합물은 본 명세서에서 일반적으로 기재되는 것을 포함하고, 본 명세서에 개시된 부류, 하위부류 및 종에 의해 추가로 예시된다. 본 명세서에 사용된 바와 같은, 달리 표시되지 않는 한 다음의 정의를 적용할 것이다. 본 개시내용의 목적을 위해, 화학 원소는 문헌[Periodic Table of the Elements, CAS version, Handbook of Chemistry and Physics, 75th Ed]에 따라 확인된다. 추가로, 유기 화학의 일반적 원칙은 문헌["Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, 및 "March's Advanced Organic Chemistry", 5th Ed., Ed.: Smith, M.B. and March, J., John Wiley & Sons, New York: 2001]에 기재되어 있다.
본 명세서에서 본 개시내용에 사용되는 바와 같이, 문맥에서 달리 분명하게 나타나지 않는 한, (i) 단수의 용어는 "적어도 하나"를 의미하는 것으로 이해될 수 있고; (ii) 용어 "또는"는 "및/또는"를 의미하는 것으로 이해될 수 있고; (iii) 용어 "포함하는(comprising)", "포함하다(comprise)", "포함하는(including)"("로 제한되지 않는"과 함께 사용되든 아니든), 및 "포함하다(include)"("로 제한되지 않는"과 함께 사용되든 아니든)는 단독으로 제시되든 또는 하나 이상의 추가적인 성분 또는 단계와 함께 제시되든 항목별로 구분된 성분 또는 단계를 포함하는 것으로 이해될 수 있으며; (iv) 용어 "다른"은 적어도 추가적인/제2의 하나 이상을 의미하는 것으로 이해될 수 있고; (v) 용어 "약" 및 "대략"은 당업자에 의해 이해되는 바와 같은 표준편차를 허용하는 것으로 이해될 수 있으며; 그리고 (vi) 범위가 제공되는 경우, 종점이 포함된다. 달리 구체화되지 않는 한, 본 명세서에 기재된 화합물은 염 형태, 특히 약제학적으로 허용 가능한 염 형태로 제공되고/되거나 이용될 수 있다.
제제: 일반적으로, 본 명세서에서 사용되는 바와 같은 "제제"는, 예를 들어, 폴리펩타이드, 핵산, 당류, 지질, 소분자, 금속, 또는 이들의 조합물 또는 복합체을 포함하는 임의의 화학적 부류의 화합물 또는 독립제를 지칭하기 위해 사용될 수 있다. 적절한 상황에서, 문맥으로부터 당업자에게 분명한 바와 같이, 상기 용어는 세포 또는 유기체, 또는 분획, 추출물 또는 이들의 조합물이거나, 이들을 포함하는 독립체를 지칭하기 위해 이용될 수 있다. 대안적으로 또는 추가적으로, 문맥에서 분명한 바와 같은 상기 용어는 천연에서 발견되고/되거나 얻어진 천연 생성물을 지칭하기 위해 사용될 수 있다. 일부 예에서, 또한 문맥으로부터 분명한 바와 같은 상기 용어는 사람 손의 작용을 통해 설계, 조작 및/또는 생성되고/되거나 천연에서 발견되지 않는다는 점에서 인공인 하나 이상의 독립체를 지칭하는 데 사용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 제제는 단리 또는 순수한 형태로 이용될 수 있고; 일부 실시형태에서, 제제는 조질의 형태로 이용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 잠재적 제제는, 예를 들어, 수집물 또는 라이브러리 내의 활성제를 확인 또는 특성규명하기 위해 선별될 수 있는 수 있는 수집물 또는 라이브러리로서 제공될 수 있다. 일부 경우에, 용어 "제제"는 중합체이거나 중합체를 포함하는 화합물 또는 독립체를 지칭하고; 일부 경우에, 상기 용어는 하나 이상의 중합체 모이어티를 포함하는 화합물 또는 독립체를 지칭할 수 있다. 일부 실시형태에서, 용어 "제제"는 중합체가 아니고/아니거나 임의의 중합체가 실질적으로 없고/없거나 하나 이상의 특정 중합체 모이어티가 실질적으로 없는 화합물 또는 독립체를 지칭할 수 있다. 일부 실시형태에서, 상기 용어는 임의의 중합체 모이어티가 없거나 또는 실질적으로 없는 화합물 또는 독립체를 지칭할 수 있다. 일부 실시형태에서, 제제는 화합물(예를 들어, 소분자, 단백질, 핵산 등)이다. 일부 실시형태에서, 제제는 (예를 들어, 화합물로부터 하나(1가 모이어티에 대해) 이상의(2가 또는 다가 모이어티에 대해) 수소 원자 및/또는 다른 1가 기를 제거함으로써) 화합물의 1가, 2가 또는 다가 모이어티이다.
지방족: 본 명세서에 사용된 바와 같은, "지방족"은 완전히 불포화되거나 하나 이상의 불포화 단위를 함유하는 직쇄(즉, 비분자) 또는 분지, 치환 또는 비치환 탄화수소쇄, 또는 완전히 포화되거나 또는 하나 이상의 불포화 단위(방향족이 아님)를 함유하는 치환 또는 비치환된 단환식, 이환식 또는 다환식 탄소원자 고리, 또는 이들의 조합을 의미한다. 일부 실시형태에서, 지방족기는 1 내지 50개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 일부 실시형태에서, 지방족기는 1 내지 20개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 다른 실시형태에서, 지방족기는 1 내지 10개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 다른 실시형태에서, 지방족기는 1 내지 9개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 다른 실시형태에서, 지방족기는 1 내지 8개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 다른 실시형태에서, 지방족기는 1 내지 7개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 다른 실시형태에서, 지방족기는 1 내지 6개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 또 다른 실시형태에서, 지방족기는 1 내지 5개의 지방족 탄소 원자를 함유하고, 또 다른 실시형태에서, 지방족기는 1, 2, 3 또는 4개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 적합한 지방족기는 선형 또는 분지형, 치환 또는 비치환된 알킬, 알켄일, 알킨일기 및 이의 혼성체, 예컨대, (사이클로알킬)알킬, (사이클로알켄일)알킬 또는 (사이클로알킬)알켄일을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
알켄일: 본 명세서에 사용된 바와 같은, 용어 "알켄일"은 하나 이상의 이중 결합을 갖는 본 명세서에 정의된 바와 같은 지방족기를 지칭한다.
알킬: 본 명세서에 사용된 바와 같은, 용어 "알킬"은 당업계에서 주어지는 이의 보통의 의미이며, 직쇄 알킬기, 분지쇄 알킬기, 사이클로알킬(지환식) 기, 알킬 치환된 사이클로알킬기 및 사이클로알킬 치환된 알킬기를 포함하는, 포화된 지방족기를 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, 알킬은 1 내지 100개의 탄소 원자를 가진다. 특정 실시형태에서, 직쇄 또는 분지쇄 알킬은 이의 골격에 약 1 내지 20개의 탄소 원자(예를 들어, 직쇄에 대해 C1-C20, 분지쇄에 대해 C2-C20), 대안적으로는, 약 1 내지 10개를 갖는다. 일부 실시형태에서, 사이클로알킬 고리는 이들의 고리 구조에 약 3 내지 10개의 탄소 원자(이러한 고리는 단환식, 이환식 또는 다환식임), 및 대안적으로는 고리 구조에 약 5, 6 또는 7개의 탄소를 갖는다. 일부 실시형태에서, 알킬기는 저급 알킬기일 수 있되, 저급 알킬기는 1 내지 4개의 탄소 원자(예를 들어, 직쇄 저급 알킬에 대해 C1-C4)를 포함한다.
알킨일: 본 명세서에 사용된 바와 같은, 용어 "알킨일"은 하나 이상의 삼중 결합을 갖는 본 명세서에 정의된 바와 같은 지방족기를 지칭한다.
아릴: 단독으로, 또는 "아랄킬", "아르알콕시" 또는 "아릴옥시알킬"에서와 같이 거대 모이어티의 부분으로서 사용되는 본 명세서에 사용되는 바와 같은 용어 "아릴"은 총 5 내지 30개의 고리 구성원을 갖는 단환식, 이환식 또는 다환식 고리계를 지칭하되, 시스템에서 적어도 하나의 고리는 방향족이다. 일부 실시형태에서, 아릴기는 총 5 내지 14개의 고리원을 갖는 단환식, 이환식 또는 다환식 고리계이되, 시스템에서 적어도 하나의 고리는 방향족이고, 시스템에서 각각의 고리는 3 내지 7개의 고리원을 포함한다. 일부 실시형태에서, 아릴기는 바이아릴기이다. 용어 "아릴"은 용어 "아릴 고리"와 상호 호환적으로 사용될 수 있다. 본 개시내용의 특정 실시형태에서, "아릴"은 하나 이상의 치환체를 보유할 수 있는 페닐, 바이페닐, 나프틸, 바이나프틸, 안트라실 등을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는, 방향족 고리계를 지칭한다. 또한 본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "아릴"의 범주에는 방향족 고리가 하나 이상의 비-방향족 고리, 예컨대, 하나 이상의 비-방향족 고리, 예컨대, 인단일, 프탈이미딜, 나프티미딜, 페난트리딘일, 또는 테트라하이드로나프틸 등에 축합된 기가 포함된다.
항체: 본 명세서에서 사용되는 용어 "항체"는 특정 표적 항원에 특이적 결합을 부여하는 데 충분한 표준 면역글로불린 서열 요소를 포함하는 폴리펩타이드를 지칭한다. 당업계에 공지된 바와 같이, 천연에서 생성된 바와 같은 무손상 항체는 "Y-형" 구조로서 통상적으로 지칭되는 것과 서로 회합되는 2개의 동일한 중쇄 폴리펩타이드(각각 약 50 kD) 및 2개의 동일한 경쇄 폴리펩타이드(각각 약 25 kD)로 이루어진 대략 150 kD의 사량체 제제이다. 각각의 중쇄는 적어도 4개의 도메인(각각 약 110개의 아미노산 길이)- 아미노-말단의 가변(VH) 도메인(Y 구조 끝에 위치됨) 다음에 3개의 불변 도메인: CH1, CH2 및 카복시-말단의 CH3(Y 줄기의 기저에 위치됨)으로 이루어진다. "스위치"로서 알려진 짧은 영역은 중쇄 가변 영역과 불변 영역을 연결한다. "힌지"는 항체의 나머지에 CH2 및 CH3 도메인을 연결한다. 이 힌지 영역에서 2개의 이황화결합은 2개의 중쇄 폴리펩타이드를 무손상 항체에서 서로 연결한다. 각 경쇄는 다른 "스위치"에 의해 서로 분리되는 2개의 도메인 - 아미노-말단의 가변(VL) 도메인 다음에 카복시-말단의 불변(CL) 도메인으로 이루어진다. 무손상 항체 사량체는 2개의 중쇄-경쇄 이량체로 이루어지며, 이때, 중쇄 및 경쇄는 단일 이황화 결합에 의해 서로 연결되고; 2개의 다른 이황화 결합은 중쇄 힌지 영역을 서로 연결하며, 따라서, 이량체는 서로 연결된고, 사량체가 형성된다. 천연-생성된 항체는 또한 전형적으로 CH2 도메인 상에서 글리코실화된다. 천연 항체에서 각 도메인은 압축된 역평행 베타 배럴에서 서로에 대해 패킹된 2개의 베타 시트(예를 들어, 3-, 4- 또는 5-가닥 시트)로부터 형성된 "면역글로불린 폴드"를 특징으로 하는 구조를 갖는다. 각 가변 도메인은 "보체 결정 영역"으로 알려진 3개의 초가변 루프(CDR1, CDR2 및 CDR3) 및 4개의 약간의 비변이체 "프레임워크" 영역(FR1, FR2, FR3 및 FR4)을 포함한다. 천연 항체가 폴딩될 때, FR 영역은 도메인에 대한 구조적 프레임워크를 제공하는 베타 시트를 형성하고, 중쇄와 경쇄 둘 다로부터의 CDR 루프 영역은 Y 구조의 끝에 위치된 단일 초가변 항원 결합 부위를 생성하도록 3차원 구조로 합쳐진다. 천연 유래 항체의 Fc 영역은 보체 시스템의 구성요소에 결합하고, 또한, 예를 들어, 세포독성을 매개하는 효과기 세포를 포함하는, 효과기 세포 상의 수용체에 결합한다. 당업계에 공지된 바와 같이, Fc 수용체에 대한 Fc 영역의 친화도 및/또는 다른 결합 속성은 글리코실화 또는 다른 변형을 통해 조절될 수 있다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용에 따라 생성 및/또는 이용되는 항체는 변형 또는 조작된 이러한 글리코실화를 갖는 Fc 도메인을 포함하는 글리코실화된 Fc 도메인을 포함한다. 본 개시내용의 목적을 위해, 특정 실시형태에서, 천연 항체에서 발견된 바와 같은 충분한 면역글로불린 도메인 서열을 포함하는 임의의 폴리펩타이드 또는 폴리펩타이드의 복합체는, 이러한 폴리펩타이드가 자연적으로 생성되든(예를 들어, 항원에 반응하는 유기체에 의해 생성됨), 또는 재조합 조작, 화학적 합성 또는 다른 인공 시스템 또는 형태에 의해 생성되든, "항체"로 지칭되고/되거나 사용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 항체는 다클론성이고; 일부 실시형태에서, 항체는 단클론성이다. 일부 실시형태에서, 항체는 마우스, 토끼, 영장류 또는 인간 항체의 특징인 불변 영역 서열을 갖는다. 일부 실시형태에서, 항체 서열 요소는 당업계에 공지된 바와 같이 인간화, 영장류화, 키메라 등이다. 또한, 본 명세서에서 사용되는 바와 같은 용어 "항체"는 (문맥에서 달리 언급되거나 또는 분명하지 않다면) 대안의 표현에서 항체 구조 및 기능적 특징을 이용하기 위한 당업계에 공지되거나 개발된 작제물 또는 형식 중 어느 것에 대한 적절한 실시형태를 지칭할 수 있다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 본 개시내용에 따라 이용되는 항체는 무손상 IgA, IgG, IgE 또는 IgM 항체; 이중- 또는 다중-특이성 항체(예를 들어, Zybodies®, 문헌[Ulrich Brinkmann & Roland E. Kontermann (2017) The making of bispecific antibodies, mAbs, 9:2, 182-212, doi: 10.1080/19420862.2016.1268307] 등에 기재된 추가적인 이중- 또는 다중 특이성 항체); 항체 단편, 예컨대, Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2 단편, Fd' 단편, Fd 단편 및 이들의 단리된 CDR 또는 세트; 단일쇄 Fv; 폴리펩타이드-Fc 융합; 단일 도메인 항체(예를 들어, 상어 단일 도메인 항체, 예컨대, IgNAR 또는 이의 단편); 낙타과 항체; 마스킹된 항체(예를 들어, Probodies®); 소형 모듈 면역약제(Small Modular ImmunoPharmaceuticals: "SMIPsTM"); 단일쇄 또는 탠덤 다이어바디(Tandem diabodies)(TandAb®); VHHs; Anticalins®; Nanobodies®; 미니바디; BiTE®; 안키린 반복부 단백질 또는 DARPINs®; Avimers®; DART; TCR-유사 항체; Adnectins®; Affilins®; Trans-bodies®; Affibodies®; TrimerX®; 마이크로단백질; Fynomers®, Centyrins®; KALBITOR®; CovX-Bodies; 및 CrossMab로부터 선택되지만, 이들로 제한되지 않는 형식이다. 일부 실시형태에서, 항체는 향상된 Fc 도메인을 가질 수 있다. 일부 실시형태에서, 항체는 하나 이상의 비천연 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, 항체는 자연적으로 생성되는 경우에 공유 변형(예를 들어, 글리칸 부착)을 결여할 수 있다. 일부 실시형태에서, 항체는 비푸코실화된(afucosylated) 항체이다. 일부 실시형태에서, 항체는 다른 항체와 접합된다. 일부 실시형태에서, 항체는 공유 변형(예를 들어, 글리칸, 페이로드[예를 들어, 검출 가능한 모이어티, 치료적 모이어티, 촉매적 모이어티 등의 부착] 또는 다른 현수기[예를 들어, 폴리-에틸렌 글리콜 등])을 포함할 수 있다.
비슷한: 본 명세서에서 사용되는 용어 "비슷한"은 서로 동일하지 않을 수도 있지만 이들 사이의 비교를 허용하는 데 충분히 유사할 수 있어서, 당업자가 관찰된 차이 또는 유사성에 기반하여 합리적으로 결론을 도출할 수 있다는 것을 인식하는, 둘 이상의 제제, 독립체, 상황, 조건의 세트 등을 지칭한다. 일부 실시형태에서, 조건, 상황, 개체 또는 집단의 비슷한 세트는 복수의 실질적으로 동일한 특징 및 하나 또는 소수의 변화된 특징을 특징으로 한다. 당업자는 문맥에서, 비슷하게 간주되어야 하는 둘 이상의 이러한 제제, 독립체, 상황, 조건의 세트 등에 대한 임의의 주어진 상황에 동일성 정도가 필요한 것을 이해할 것이다. 예를 들어, 당업자는 상황, 개체 또는 집단의 상이한 세트 하에 또는 이에 의해 얻어진 결과 또는 관찰된 현상의 차이가 변화된 해당 특징의 변형에 의해 야기되거나 이를 나타낸다는 합리적인 결론을 보장하기 위해 실질적으로 동일한 특징의 충분한 수 및 유형을 특징으로 할 때, 조건, 상황, 개체 또는 집단의 세트가 서로 비슷하다는 것을 인식할 것이다.
지환족: 용어 "지환족", "카보사이클", "카보사이클릴", "탄소환식 라디칼" 및 "탄소환식 고리"는 상호 호환적으로 사용되고, 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 달리 구체화되지 않는 한, 본 명세서에 기재된 바와 같은 3 내지 30개의 고리 구성원을 갖는 포화 또는 부분적으로 불포화이지만, 비-방향족 환식 지방족 단환식, 이환식, 또는 다환식 고리계를 지칭한다. 지환족기는 사이클로프로필, 사이클로뷰틸, 사이클로펜틸, 사이클로펜텐일, 사이클로헥실, 사이클로헥센일, 사이클로헵틸, 사이클로헵텐일, 사이클로옥틸, 사이클로옥텐일, 노르본일, 아다만틸 및 사이클로옥타다이엔일을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 일부 실시형태에서, 지환족기는 3 내지 6개의 탄소를 갖는다. 일부 실시형태에서, 지환족기는 포화되고, 사이클로알킬이다. 용어 "지환족"은 또한 하나 이상의 방향족 또는 비방향족 고리, 예컨대, 데카하이드로나프틸 또는 테트라하이드로나프틸에 융합된 지방족 고리를 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, 지환족기는 이환식이다. 일부 실시형태에서, 지환족기는 삼환식이다. 일부 실시형태에서, 지환족기는 다환식이다. 일부 실시형태에서, "지환족"은 C3-C6 단환식 탄화수소, 또는 C8-C10 이환식 또는 완전히 포화되거나 또는 하나 이상의 불포화 단위를 포함하지만, 방향족은 아니고, 분자의 나머지에 단일 부착 지점을 갖는 다환식 탄화수소, 또는 완전히 포화되거나 또는 하나 이상의 불포화 단위를 포함하지만, 방향족은 아니고, 분자의 나머지에 단일 부착 지점을 갖는 C9-C16 다환식 탄화수소를 지칭한다.
헤테로지방족: 본 명세서에 사용되는 바와 같은 용어 "헤테로지방족"은 당업계에서 주어지는 이의 보통의 의미이며, 하나 이상의 탄소 원자가 하나 이상의 헤테로원자(예를 들어, 산소, 질소, 황, 규소, 인 등)으로 독립적으로 대체된 본 명세서에 기재된 바와 같은 지방족기를 지칭한다. 일부 실시형태에서, C, CH, CH2 및 CH3으로부터 선택된 하나 이상의 단위는 하나 이상의 헤테로원자(이의 산화 및/또는 치환된 형태를 포함)에 의해 독립적으로 대체된다. 일부 실시형태에서, 헤테로지방족기는 헤테로알킬이다. 일부 실시형태에서, 헤테로지방족기는 헤테로알켄일이다.
헤테로알킬: 본 명세서에 사용되는 바와 같은 용어 "헤테로알킬"은 당업계에서 주어지는 이의 보통의 의미이며, 하나 이상의 탄소 원자가 하나 이상의 헤테로원자(예를 들어, 산소, 질소, 황, 규소, 인 등)으로 독립적으로 대체된 본 명세서에 기재된 바와 같은 알킬기를 지칭한다. 헤테로알킬기의 예는 알콕시, 폴리(에틸렌 글리콜)-, 알킬-치환된 아미노, 테트라하이드로퓨란일, 피페리딘일, 몰폴린일 등을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
헤테로아릴: 단독으로 또는 거대 모이어티, 예를 들어, "헤테로아랄킬" 또는 "헤테로아르알콕시"의 부분으로서 본 명세서에 사용되는 바와 같은 용어 "헤테로아릴" 및 "헤테로아르-"는 총 5 내지 30개의 고리원을 갖는 단환식, 이환식 또는 다환식 고리계를 지칭하되, 시스템에서 적어도 하나의 고리는 방향족이고, 적어도 하나의 방향족 고리 원자는 헤테로원자이다. 일부 실시형태에서, 헤테로아릴기는 5 내지 10개의 고리 원자(즉, 단환식, 이환식 또는 다환식), 일부 실시형태에서, 5, 6, 9 또는 10개의 고리 원자를 갖는 기이다. 일부 실시형태에서, 헤테로아릴기는 환식 배열에서 공유되는 6, 10 또는 14 π를 갖고; 탄소 원자에 추가로, 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는다. 헤테로아릴기는 티엔일, 퓨란일, 피롤릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 트라이아졸릴, 테트라졸릴, 옥사졸릴, 아이소옥사졸릴, 옥사다이아졸릴, 티아졸릴, 아이소티아졸릴, 티아다이아졸릴, 피리딜, 피리다진일, 피리미딘일, 피라진일, 인돌리진일, 퓨린일, 나프티리딘일 및 프테리딘일을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 일부 실시형태에서, 헤테로아릴은 헤테로바이아릴기, 예컨대, 바이피리딜 등이다. 본 명세서에 사용되는 바와 같은 용어 "헤테로아릴" 및 "헤테로아르-"는 또한 헤테로방향족 고리가 하나 이상의 아릴, 지환족 또는 헤테로사이클릴 고리에 축합되는 기를 포함하며, 라디칼 또는 부착 지점은 헤테로방향족 고리 상에 있다. 비제한적 예는 인돌릴, 아이소인돌릴, 벤조티엔일, 벤조퓨란일, 다이벤조퓨란일, 인다졸릴, 벤즈이미다졸릴, 벤즈티아졸릴, 퀴놀릴, 아이소퀴놀릴, 신놀린일, 프탈라진일, 퀴나졸린일, 퀴녹살린일, 4H-퀴놀리진일, 카바졸릴, 아크리딘일, 페나진일, 페노티아진일, 페녹사진일, 테트라하이드로퀴놀린일, 테트라하이드로아이소퀴놀린일 및 피리도[2,3-b]-1,4-옥사진-3(4H)-온을 포함한다. 헤테로아릴기는 단환식, 이환식 또는 다환식일 수 있다. 용어 "헤테로아릴"은 용어 "헤테로아릴 고리", "헤테로아릴기" 또는 "헤테로방향족"과 상호 호환적으로 사용될 수 있고, 이들 용어 중 어느 것은 선택적으로 치환되는 고리를 포함한다. 용어 "헤테로아랄킬"은 헤테로아릴기에 의해 치환되는 알킬기를 지칭하되, 알킬 및 헤테로아릴 부분은 독립적으로 선택적으로 치환된다.
헤테로원자: 본 명세서에 사용되는 바와 같은 용어 "헤테로원자"는 탄소 또는 수소가 아닌 원자를 의미한다. 일부 실시형태에서, 헤테로원자는 붕소, 산소, 황, 질소, 인 또는 규소(이러한 원자의 다양한 형태, 예컨대, 산화된 형태(예를 들어, 질소, 황, 인 또는 규소), 염기성 질소 또는 복소환식 고리의 치환 가능한 질소의 4차화된 형태(예를 들어, 3,4-다이하이드로-2H-피롤릴에서와 같은 N), NH(피롤리딘일에서와 같음) 또는 NR+(N-치환된 피롤리딘일에서와 같음) 등을 포함)이다. 일부 실시형태에서, 헤테로원자는 산소, 황 또는 질소이다.
헤테로사이클: 본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "헤테로사이클", "헤테로사이클릴", "복소환식 라디칼" 및 "복소환식 고리"는 상호 호환적으로 사용되고, 포화 또는 부분적으로 불포화되고 하나 이상의 헤테로원자 고리 원자를 갖는 단환식, 이환식 또는 다환식 고리 모이어티(예를 들어, 3 내지 30원)를 지칭한다. 일부 실시형태에서, 헤테로사이클릴기는 포화 또는 부분적으로 불포화되고, 탄소 원자에 추가로, 하나 이상의, 바람직하게는 1 내지 4개의 상기 정의된 바와 같은 헤테로원자를 갖는 안정한 5- 내지 7-원 단환식 또는 7- 내지 10-원 이환식 복소환식 모이어티이다. 헤테로사이클의 고리 원자와 관련하여 사용될 때, 용어 "질소"는 치환된 질소를 포함한다. 예로서, 산소, 황 및 질소로부터 선택된 0 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 포화 또는 부분적으로 불포화된 고리에서, 질소는 N(3,4-다이하이드로-2H-피롤릴에서와 같음), NH(피롤리딘일에서와 같음), 또는 +NR(N-치환된 피롤리딘일에서와 같음)일 수 있다. 복소환식 고리는 안정한 구조를 초래하는 임의의 헤테로원자 또는 탄소 원자에서 이의 현수기에 부착될 수 있고, 고리 원자 중 어느 것은 선택적으로 치환될 수 있다. 이러한 포화 또는 부분적으로 불포화된 복소환식 라디칼의 예는 테트라하이드로퓨란일, 테트라하이드로티엔일, 피롤리딘일, 피페리딘일, 피롤린일, 테트라하이드로퀴놀린일, 테트라하이드로아이소퀴놀린일, 데카하이드로퀴놀린일, 옥사졸리딘일, 피페라진일, 다이옥산일, 다이옥솔란일, 다이아제핀일, 옥사제핀일, 티아제핀일, 몰폴린일 및 퀴뉴클리딘일을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 용어 "헤테로사이클," "헤테로사이클릴," "헤테로사이클릴 고리", "복소환식기", "복소환식 모이어티" 및 "복소환식 라디칼"은 본 명세서에서 상호 호환적으로 사용되고, 또한 헤테로사이클릴 고리가 하나 이상의 아릴, 헤테로아릴 또는 지환족 고리, 예컨대, 인돌린일, 3H-인돌릴, 크로만일, 페난트리딘일 또는 테트라하이드로퀴놀린일에 축합된 기를 포함한다. 헤테로사이클릴기는 단환식, 이환식 또는 다환식일 수 있다. 용어 "헤테로사이클릴알킬"은 헤테로사이클릴알킬에 의해 치환되는 알킬기를 지칭하되, 알킬 및 헤테로사이클릴알킬 부분은 독립적으로 선택적으로 치환된다.
저급 알킬: 용어 "저급 알킬"은 C1-4 직선형 또는 분지형 알킬기를 지칭한다. 예시적인 저급 알킬기는 메틸, 에틸, 프로필, 아이소프로필, 뷰틸, 아이소뷰틸 및 tert-뷰틸이다.
저급 할로알킬: 용어 "저급 할로알킬"은 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 C1-4 직선형 또는 분지형 알킬기를 지칭한다.
선택적으로 치환된: 본 명세서에 기재된 바와 같은 본 개시내용의 화합물은 선택적으로 치환되고/되거나 치환된 모이어티를 함유할 수 있다. 일반적으로, 용어 "치환된"은 용어 "선택적으로"가 선행하든 아니든, 표기된 모이어티의 하나 이상의 수소가 적합한 치환체로 대체된다는 것을 의미한다. 달리 표시되지 않는 한, "선택적으로 치환된" 기는 기의 각각의 치환 가능한 위치에서 적합한 치환체를 가질 수 있고, 임의의 주어진 구조에서 하나 초과의 위치가 구체화된 기로부터 선택된 하나 초과의 치환체로 치환될 수 있을 때, 치환체는 모든 위치에서 동일 또는 상이할 수 있다. 일부 실시형태에서, 선택적으로 치환된 기는 비치환된다. 본 개시내용에 의해 생각되는 치환체의 조합물은 바람직하게는 안정하거나 또는 화학적으로 실현 가능한 화합물의 형성을 초래하는 것이다. 본 명세서에 사용되는 바와 같은 용어 "안정한"은 화합물의 생성, 검출, 및 특정 실시형태에서, 이들의 회수, 정제 및 본 명세서에 개시된 목적 중 하나 이상을 위한 용도를 가증하게 하기 위한 조건으로 처리될 때 실질적으로 변경되지 않는 화합물을 지칭한다. 특정 치환체는 이하에 기재된다.
치환 가능한 원자, 예를 들어, 적합한 탄소 원자 상의 적합한 1가 치환체가 독립적으로 할로겐; -(CH2)0-4R°; -(CH2)0-4OR°; -O(CH2)0-4Ro, -O-(CH2)0-4C(O)OR°; -(CH2)0-4CH(OR°)2; R°로 치환될 수 있는 -(CH2)0-4Ph; R°로 치환될 수 있는 -(CH2)0-4O(CH2)0-1Ph; R°로 치환될 수 있는 -CH=CHPh; R°로 치환될 수 있는 -(CH2)0-4O(CH2)0-1-피리딜; -NO2; -CN; -N3; -(CH2)0-4N(R°)2; -(CH2)0-4N(R°)C(O)R°; -N(R°)C(S)R°; -(CH2)0-4N(R°)C(O)NR°2; -N(R°)C(S)NR°2; -(CH2)0-4N(R°)C(O)OR°; -N(R°)N(R°)C(O)R°; -N(R°)N(R°)C(O)NR°2; -N(R°)N(R°)C(O)OR°; -(CH2)0-4C(O)R°; -C(S)R°; -(CH2)0-4C(O)OR°; -(CH2)0-4C(O)SR°; -(CH2)0-4C(O)OSiR°3; -(CH2)0-4OC(O)R°; -OC(O)(CH2)0-4SR°, -SC(S)SR°; -(CH2)0-4SC(O)R°; -(CH2)0-4C(O)NR°2; -C(S)NR°2; -C(S)SR°; -(CH2)0-4OC(O)NR°2; -C(O)N(OR°)R°; -C(O)C(O)R°; -C(O)CH2C(O)R°; -C(NOR°)R°; -(CH2)0-4SSR°; -(CH2)0-4S(O)2R°; -(CH2)0-4S(O)2OR°; -(CH2)0-4OS(O)2R°; -S(O)2NR°2; -(CH2)0-4S(O)R°; -N(R°)S(O)2NR°2; -N(R°)S(O)2R°; -N(OR°)R°; -C(NH)NR°2; -Si(R°)3; -OSi(R°)3; -B(R°)2; -OB(R°)2; -OB(OR°)2; -P(R°)2; -P(OR°)2; -P(R°)(OR°); -OP(R°)2; -OP(OR°)2; -OP(R°)(OR°); -P(O)(R°)2; -P(O)(OR°)2; -OP(O)(R°)2; -OP(O)(OR°)2; -OP(O)(OR°)(SR°); -SP(O)(R°)2; -SP(O)(OR°)2; -N(R°)P(O)(R°)2; -N(R°)P(O)(OR°)2; -P(R°)2[B(R°)3]; -P(OR°)2[B(R°)3]; -OP(R°)2[B(R°)3]; -OP(OR°)2[B(R°)3]; -(C1-4 직선형 또는 분지형 알킬렌)O-N(R°)2; 또는 -(C1-4 직선형 또는 분지형 알킬렌)C(O)O-N(R°)2이되, 각각의 R°는 본 명세서에 정의된 바와 같이 치환될 수 있고, 독립적으로 수소, C1-20 지방족, 질소, 산소, 황, 규소 및 인으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-20 헤테로지방족, -CH2-(C6-14 아릴), -O(CH2)0-1(C6-14 아릴), -CH2-(5 내지 14원 헤테로아릴 고리), 질소, 산소, 황, 규소 및 인으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원 단환식, 이환식, 또는 다환식, 포화, 부분적 불포화 또는 아릴 고리이거나, 또는 상기 정의에도 불구하고, R°의 2개의 독립적 발생은 이들의 개재 원자(들)와 함께, 이하에 정의되는 바와 같이 치환될 수 있는 질소, 산소, 황, 규소 및 인으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원, 단환식, 이환식, 또는 다환식, 포화, 부분적 불포화 또는 아릴 고리를 형성한다.
R° 상의 적합한 1가 치환체(또는 R°의 2개의 독립적 경우를 이들의 개재 원자와 함께 취함으로써 형성된 고리)는 독립적으로 할로겐, -(CH2)0-2R
Figure pct00001
, -(할로R
Figure pct00002
), -(CH2)0-2OH, -(CH2)0-2OR
Figure pct00003
, -(CH2)0-2CH(OR
Figure pct00004
)2; -O(할로R
Figure pct00005
), -CN, -N3, -(CH2)0-2C(O)R
Figure pct00006
, -(CH2)0-2C(O)OH, -(CH2)0-2C(O)OR
Figure pct00007
, -(CH2)0-2SR
Figure pct00008
, -(CH2)0-2SH, -(CH2)0-2NH2, -(CH2)0-2NHR
Figure pct00009
, -(CH2)0-2NR
Figure pct00010
2, -NO2, -SiR
Figure pct00011
3, -OSiR
Figure pct00012
3, -C(O)SR
Figure pct00013
, -(C1-4 직선형 또는 분지형 알킬렌)C(O)OR
Figure pct00014
또는 -SSR
Figure pct00015
이되, 각각의 R
Figure pct00016
은 비치환되거나, 또는 "할로"가 선행되는 경우 하나 이상의 할로겐으로만 치환되고, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 C1-4　지방족, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph 및 5 내지 6원 포화, 부분적 불포화, 또는 아릴 고리로부터 독립적으로 선택된다. R°의 포화 탄소 원자 상에서 적합한 2가 치환체는 =O 및 =S를 포함한다.
예를 들어, 적합한 탄소 원자 상의 적합한 2가 치환체는 독립적으로 다음의: =O, =S, =NNR* 2, =NNHC(O)R*, =NNHC(O)OR*, =NNHS(O)2R*, =NR*, =NOR*, -O(C(R* 2))2-3O- 또는 -S(C(R* 2))2-3S-이되, R*의 각각의 독립적 경우는 수소, 이하에 정의되는 바와 같이 치환될 수 있는 C1-6 지방족 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 비치환된 5 내지 6원 포화, 부분적 불포화 또는 아릴 고리로부터 선택된다. "선택적으로 치환된" 기의 근처의 치환 가능한 탄소에 결합된 적합한 2가 치환체는 -O(CR* 2)2-3O-를 포함하되, R*의 각각의 독립적 경우는 수소, 이하에 정의되는 바와 같이 치환될 수 있는 C1-6　지방족 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 비치환된 5 내지 6원 포화, 부분적 불포화 및 아릴 고리로부터 선택된다.
R*의 지방족기 상의 적합한 치환체는 독립적으로 할로겐, -R
Figure pct00017
, -(할로R
Figure pct00018
), -OH, -OR
Figure pct00019
, -O(할로R
Figure pct00020
), -CN, -C(O)OH, -C(O)OR
Figure pct00021
, -NH2, -NHR
Figure pct00022
, -NR
Figure pct00023
2 또는 -NO2이되, 각각의 R
Figure pct00024
은 비치환되거나, "할로"가 선행하는 경우 하나 이상의 할로겐으로만 치환되고, 독립적으로 C1-4 지방족, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph, 또는 5 내지 6-원 포화, 부분적 불포화이거나 또는 질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 아릴 고리이다.
일부 실시형태에서, 치환 가능한 질소 상의 적합한 치환체는 독립적으로 -R
Figure pct00025
, -NR
Figure pct00026
2, -C(O)R
Figure pct00027
, -C(O)OR
Figure pct00028
, -C(O)C(O)R
Figure pct00029
, -C(O)CH2C(O)R
Figure pct00030
, -S(O)2R
Figure pct00031
, -S(O)2NR
Figure pct00032
2, -C(S)NR
Figure pct00033
2, -C(NH)NR
Figure pct00034
2 또는 -N(R
Figure pct00035
)S(O)2R
Figure pct00036
이되; 각각의 R
Figure pct00037
는 독립적으로 수소, 이하에 정의된 바와 같이 치환될 수 있는 C1-6 지방족, 비치환된 -OPh, 또는 비치환된 5 내지 6원 포화, 부분적 불포화, 또는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 아릴 고리이거나, 또는 상기 정의에도 불구하고, R
Figure pct00038
의 2개의 독립적 경우는 이들의 개재 원자(들)와 함께 비치환된 3 내지 12원 포화, 부분적 불포화 또는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 아릴 단환식 또는 이환식 고리를 형성한다.
R
Figure pct00039
의 지방족기 상의 적합한 치환체는 독립적으로 할로겐, -R
Figure pct00040
, -(할로R
Figure pct00041
), -OH, -OR
Figure pct00042
, -O(할로R
Figure pct00043
), -CN, -C(O)OH, -C(O)OR
Figure pct00044
, -NH2, -NHR
Figure pct00045
, -NR
Figure pct00046
2 또는 -NO2이되, 각각의 R
Figure pct00047
은 비치환되거나, "할로"가 선행하는 경우 하나 이상의 할로겐으로만 치환되고, 독립적으로 C1-4 지방족, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph, 또는 5 내지 6-원 포화, 부분적 불포화이거나 또는 질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 아릴 고리이다.
부분적으로 불포화된: 본 명세서에 사용된 바와 같은, 용어 "부분적으로 불포화된"는 적어도 하나의 이중 또는 삼중 결합을 포함하는 고리 모이어티를 지칭한다. 용어 "부분적으로 불포화된"은 다수의 불포화 부위를 갖는 고리를 포함하는 것으로 의도되지만, 본 명세서에 정의된 바와 같은 아릴 또는 헤테로아릴 모이어티를 포함하는 것으로는 의도되지 않는다.
약제학적 조성물: 본 명세서에 사용된 바와 같은, 용어 "약제학적 조성물"은 1종 이상의 약제학적으로 허용 가능한 담체와 함께 제형화되는 활성제를 지칭한다. 일부 실시형태에서, 활성제는 적절한 집단에 투여될 때 미리 결정된 치료 효과를 달성하는 것의 통계적으로 유의한 확률을 나타내는 치료 요법에서의 투여에 적절한 단위 투약량으로 제공된다. 일부 실시형태에서, 약제학적 조성물은 다음에 적합한 것을 포함하는, 고체 또는 액체 형태로 투여를 위해 특별하게 제형화될 수 있다: 경구 투여, 예를 들어, 드렌치(drench)(수성 또는 비수성 용액 또는 현탁액), 정제, 예를 들어, 협측, 설하 및 전신 흡수용으로 표적화된 것, 볼루스, 분말, 과립, 혀에 적용하기 위한 페이스트; 비경구 투여, 예를 들어, 피하, 근육내, 정맥내 또는 경막외 주사에 의해, 예를 들어, 멸균 용액 또는 현탁액, 또는 지속-방출 제형으로서; 국소 적용, 예를 들어, 크림, 연고 또는 제어-방출 패치 또는 피부, 폐 또는 구강에 적용되는 스프레이로서; 질내 또는 직장내, 예를 들어, 페서리, 크림 또는 폼으로서; 설하; 안구; 경피; 또는 비강, 폐 및 기타 점막면.
약제학적으로 허용 가능한: 본 명세서에 사용된 바와 같은, 어구 "약제학적으로 허용 가능한"은 타당한 의학적 판단의 범주 내에서, 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응, 또는 다른 문제 또는 합병증 없이, 합리적인 유해/유익비에 비례하여 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합한, 해당 화합물, 물질, 조성물 및/또는 투약 형태를 지칭한다.
약제학적으로 허용 가능한 담체: 본 명세서에 사용된 바와 같은, 용어 "약제학적으로 허용 가능한 담체"는 대상 화합물을 하나의 기관, 또는 신체의 일부로부터 다른 기관 또는 신체의 일부로 운반하거나 수송하는 데 수반되는 약제학적으로 허용 가능한 물질, 조성물 또는 비히클, 예컨대, 액체 또는 고체 충전제, 희석제, 부형제 또는 용매 캡슐화 물질을 의미한다. 각각의 담체는 제형의 다른 성분과 양립 가능한 의미에서 "허용 가능"하여야 하고, 환자에게 손상을 주지 않아야 한다. 약제학적으로-허용 가능한 담체로서 작용할 수 있는 물질의 일부 예는 당, 예컨대, 락토스, 글루코스 및 수크로스; 전분, 예컨대, 옥수수 전분 및 감자 전분; 셀룰로스, 및 이의 유도체, 예컨대, 카복시메틸 셀룰로스나트륨, 에틸 셀룰로스 및 셀룰로스 아세테이트; 분말 트래거캔스; 맥아; 젤라틴; 활석; 부형제, 예컨대, 코코아 버터 및 좌약 왁스; 오일, 예컨대, 땅콩유, 면실유, 홍화유, 참깨유, 올리브유, 옥수수유 및 대두유; 글리콜, 예컨대, 프로필렌 글리콜; 폴리올, 예컨대, 글리세린, 솔비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌 글리콜; 에스터, 예컨대, 에틸 올리에이트 및 에틸 라우레이트; 한천; 완충제, 예컨대, 수산화나트륨 및 수산화알루미늄; 알긴산; 무발열원수; 등장 식염수; 링거액; 에틸 알코올; pH 완충 용액; 폴리에스터, 폴리카보네이트 및/또는 폴리산 무수물; 및 약제학적 제형에서 사용되는 기타 비독성의 양립 가능한 물질을 포함한다.
약제학적으로 허용 가능한 염: 본 명세서에 사용되는 바와 같은 용어 "약제학적으로 허용 가능한 염"은 약제학적 문맥에서 사용하기에 적절한 이러한 화합물의 염, 즉, 타당한 의학적 판단의 범주 내에서, 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 등 없이 인간 및 하등 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합하고, 합리적인 유해/유익비에 비례하는 염을 지칭한다. 약제학적으로 허용 가능한 염은 당업계에 잘 공지되어 있다. 예를 들어, S. M. Berge 등은 약제학적으로 허용 가능한 염을 문헌[J. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19 (1977)]에서 상세하게 기재한다. 일부 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 염은 무기산, 예컨대, 염산, 브로민화수소산, 인산, 황산 및 과염소산에 의해 또는 유기산, 예컨대, 아세트산, 말레산, 타르타르산, 시트르산, 석신산 또는 말론산에 의해 또는 당업계에서 사용되는 기타 방법, 예컨대, 이온 교환을 이용함으로써 형성된 아미노기의 염인 비독성 산 부가염을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 일부 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 염은 아디프산염, 알긴산염, 아스코브산염, 아스파르트산염, 벤젠설폰산염, 벤조산염, 중황산염, 붕산염, 뷰티르산염, 캄포르산염, 캄포설폰산염, 시트르산염, 사이클로펜탄프로피온산염, 다이글루콘산염, 도데실황산염, 에탄설폰산염, 폼산염, 퓨마르산염, 글루코헵톤산염, 글리세로인산염, 글루콘산염, 헤미황산염, 헵탄산염, 헥산산염, 아이오딘화수소산, 2-하이드록시-에탄설폰산염, 락토바이오네이트, 락트산염, 라우르산염, 라우릴황산염, 말산염, 말레산염, 말론산염, 메탄설폰산염, 2-나프탈렌설폰산염, 니코틴산염, 질산염, 올레산염, 옥살산염, 팔미트산염, 파모산염, 펙틴산염, 과황산염, 3-페닐프로피온산염, 인산염, 피크르산염, 피발산염, 프로피온산염, 스테아르산염, 석신산염, 황산염, 타르타르산염, 티오시안산염, p-톨루엔설폰산염, 운데칸산염, 발레르산염 등을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 하나 이상의 산성기를 포함하고, 약제학적으로 허용 가능한 염은 알칼리, 알칼리 토금속 또는 암모늄(예를 들어, N(R)3의 암모늄 염, 여기서, 각각의 R은 독립적으로 정의되고, 본 개시내용에 기재되어 있음) 염이다. 대표적인 알칼리 또는 알칼리 토금속 염은 나트륨, 리튬, 칼륨, 칼슘, 마그네슘 등을 포함한다. 일부 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 염은 나트륨염이다. 일부 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 염은 칼륨염이다. 일부 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 염은 칼슘염이다. 일부 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 염은, 적절한 경우, 비독성 암모늄, 4차 암모늄 및 반대이온을 이용하여 형성된 아민 양이온, 예컨대, 할로겐화물, 수소화물, 카복실산염, 황산염, 인산염, 질산염, 1 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 알킬, 설폰산염 및 아릴 설폰산염을 포함한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 1개 초과의 산성기를 포함한다. 일부 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 염, 또는 일반적으로 이러한 화합물의 염은 동일 또는 상이할 수 있는 2가지 이상의 양이온을 포함한다. 일부 실시형태에서, 산성기에서 약제학적으로 허용 가능한 염(또는 일반적으로, 염)에서, 모든 이온화 가능한 수소(예를 들어, 약 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3 또는 2 이하; 일부 실시형태에서, 7 이하; 일부 실시형태에서, 약 6 이하; 일부 실시형태에서, 약 5 이하; 일부 실시형태에서, 약 4 이하; 일부 실시형태에서, 약 3 이하의 pKa를 갖는 수용액 중)는 양이온으로 대체된다.
보호기: 본 명세서에 사용되는 바와 같은 용어 "보호기"는 당업계에 잘 공지되어 있으며, 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용되는 문헌[Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999]에서 상세하게 기재되는 것을 포함한다. 또한 2012년 6월에 Serge L. Beaucage 등에 의해 편집된 문헌[Current Protocols in Nucleic Acid Chemistry]에 기재되어 있는 뉴클레오사이드 및 뉴클레오타이드 화학에 특히 적합한 해당 보호기가 포함되며, 이의 2장의 전문은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 적합한 아미노-보호기는 메틸 카바메이트, 에틸 카바메이트, 9-플루오렌일메틸 카바메이트(Fmoc), 9-(2-설포)플루오렌일메틸 카바메이트, 9-(2,7-다이브로모)플루오로엔일메틸 카바메이트, 2,7-다이-t-뷰틸-[9-(10,10-다이옥소-10,10,10,10-테트라하이드로티옥산틸)]메틸 카바메이트(DBD-Tmoc), 4-메톡시펜아실 카바메이트(Phenoc), 2,2,2-트라이클로로에틸 카바메이트(Troc), 2-트라이메틸실릴에틸 카바메이트(Teoc), 2-페닐에틸 카바메이트(hZ), 1-(1-아다만틸)-1-메틸에틸 카바메이트(Adpoc), 1,1-다이메틸-2-할로에틸 카바메이트, 1,1-다이메틸-2,2-다이브로모에틸 카바메이트(DB-t-BOC), 1,1-다이메틸-2,2,2-트라이클로로에틸 카바메이트(TCBOC), 1-메틸-1-(4-바이페닐일)에틸 카바메이트(Bpoc), 1-(3,5-다이-t-뷰틸페닐)-1-메틸에틸 카바메이트(t-Bumeoc), 2-(2'- 및 4'-피리딜)에틸 카바메이트(Pyoc), 2-(N,N-다이사이클로헥실카복스아미도)에틸 카바메이트, t-뷰틸 카바메이트(BOC), 1-아다만틸 카바메이트(Adoc), 비닐 카바메이트(Voc), 알릴 카바메이트(Alloc), 1-아이소프로필알릴 카바메이트(Ipaoc), 신남일 카바메이트(Coc), 4-나이트로신남일 카바메이트(Noc), 8-퀴놀릴 카바메이트, N-하이드록시피페리딘일 카바메이트, 알킬다이티오 카바메이트, 벤질 카바메이트(Cbz), p-메톡시벤질 카바메이트(Moz), p-나이트로벤질 카바메이트, p-브로모벤질 카바메이트, p-클로로벤질 카바메이트, 2,4-다이클로로벤질 카바메이트, 4-메틸설핀일벤질 카바메이트(Msz), 9-안트릴메틸 카바메이트, 다이페닐메틸 카바메이트, 2-메틸티오에틸 카바메이트, 2-메틸설폰일에틸 카바메이트, 2-(p-톨루엔설폰일)에틸 카바메이트, [2-(1,3-다이티안일)]메틸 카바메이트(Dmoc), 4-메틸티오페닐 카바메이트(Mtpc), 2,4-다이메틸티오페닐 카바메이트(Bmpc), 2-포스포니오에틸 카바메이트(Peoc), 2-트라이페닐포스포니오아이소프로필 카바메이트(Ppoc), 1,1-다이메틸-2-사이아노에틸 카바메이트, m-클로로-p-아실옥시벤질 카바메이트, p-(다이하이드록시보릴)벤질 카바메이트, 5-벤즈아이소옥사졸릴메틸 카바메이트, 2-(트라이플루오로메틸)-6-크로몬일메틸 카바메이트(Tcroc), m-나이트로페닐 카바메이트, 3,5-다이메톡시벤질 카바메이트, o-나이트로벤질 카바메이트, 3,4-다이메톡시-6-나이트로벤질 카바메이트, 페닐(o-나이트로페닐)메틸 카바메이트, 페노티아진일-(10)-카본일 유도체, N'-p-톨루엔설폰일아미노카본일 유도체, N'-페닐아미노티오카본일 유도체, t-아밀 카바메이트, S-벤질 티오카바메이트, p-사이아노벤질 카바메이트, 사이클로뷰틸 카바메이트, 사이클로헥실 카바메이트, 사이클로펜틸 카바메이트, 사이클로프로필메틸 카바메이트, p-데실옥시벤질 카바메이트, 2,2-다이메톡시카본일비닐 카바메이트, o-(N,N-다이메틸카복스아미도)벤질 카바메이트, 1,1-다이메틸-3-(N,N-다이메틸카복스아미도)프로필 카바메이트, 1,1-다이메틸프로핀일 카바메이트, 다이(2-피리딜)메틸 카바메이트, 2-퓨란일메틸 카바메이트, 2-아이오도에틸 카바메이트, 아이소보닐 카바메이트, 아이소뷰틸 카바메이트, 아이소니코틴일 카바메이트, p-(p'-메톡시페닐아조)벤질 카바메이트, 1-메틸사이클로뷰틸 카바메이트, 1-메틸사이클로헥실 카바메이트, 1-메틸-1-사이클로프로필메틸 카바메이트, 1-메틸-1-(3,5-다이메톡시페닐)에틸 카바메이트, 1-메틸-1-(p-페닐아조페닐)에틸 카바메이트, 1-메틸-1-페닐에틸 카바메이트, 1-메틸-1-(4-피리딜)에틸 카바메이트, 페닐 카바메이트, p-(페닐아조)벤질 카바메이트, 2,4,6-트라이-t-뷰틸페닐 카바메이트, 4-(트라이메틸암모늄)벤질 카바메이트, 2,4,6-트라이메틸벤질 카바메이트, 폼아마이드, 아세트아마이드, 클로로아세트아마이드, 트라이클로로아세트아마이드, 트라이플루오로아세트아마이드, 페닐아세트아마이드, 3-페닐프로판아마이드, 피콜린아마이드, 3-피리딜카복스아마이드, N-벤조일페닐알란일 유도체, 벤즈아마이드, p-페닐벤즈아마이드, o-나이트로페닐아세트아마이드, o-나이트로페녹시아세트아마이드, 아세토아세트아마이드, (N'-다이티오벤질옥시카본일아미노)아세트아마이드, 3-(p-하이드록시페닐)프로판아마이드, 3-(o-나이트로페닐)프로판아마이드, 2-메틸-2-(o-나이트로페녹시)프로판아마이드, 2-메틸-2-(o-페닐아조페녹시)프로판아마이드, 4-클로로부탄아마이드, 3-메틸-3-나이트로부탄아마이드, o-나이트로신남아마이드, N-아세틸메티오닌 유도체, o-나이트로벤즈아마이드, o-(벤조일옥시메틸)벤즈아마이드, 4,5-다이페닐-3-옥사졸린-2-온, N-프탈이미드, N-다이티아석신이미드(Dts), N-2,3-다이페닐말레이미드, N-2,5-다이메틸피롤, N-1,1,4,4-테트라메틸다이실릴아자사이클로펜탄 부가물(STABASE), 5-치환된 1,3-다이메틸-1,3,5-트라이아자사이클로헥산-2-온, 5-치환된 1,3-다이벤질-1,3,5-트라이아자사이클로헥산-2-온, 1-치환된 3,5-다이나이트로-4-피리돈, N-메틸아민, N-알릴아민, N-[2-(트라이메틸실릴)에톡시]메틸아민(SEM), N-3-아세톡시프로필아민, N-(1-아이소프로필-4-나이트로-2-옥소-3-피룰린-3-일)아민, 4차 암모늄 염, N-벤질아민, N-다이(4-메톡시페닐)메틸아민, N-5-다이벤조수베릴아민, N-트라이페닐메틸아민(Tr), N-[(4-메톡시페닐)다이페닐메틸]아민(MMTr), N-9-페닐플루오렌일아민(PhF), N-2,7-다이클로로-9-플루오렌일메틸렌아민, N-페로센일메틸아미노(Fcm), N-2-피콜릴아미노 N'-옥사이드, N-1,1-다이메틸티오메틸렌아민, N-벤질리덴아민, N-p-메톡시벤질리덴아민, N-다이페닐메틸렌아민, N-[(2-피리딜)메시틸]메틸렌아민, N-(N',N'-다이메틸아미노메틸렌)아민, N,N'-아이소프로필리덴다이아민, N-p-나이트로벤질리덴아민, N-살리실리덴아민, N-5-클로로살리실리덴아민, N-(5-클로로-2-하이드록시페닐)페닐메틸렌아민, N-사이클로헥실리덴아민, N-(5,5-다이메틸-3-옥소-1-사이클로헥센일)아민, N-보란 유도체, N-다이페닐보린산 유도체, N-[페닐(펜타카본일크로뮴- 또는 텅스텐)카본일]아민, N-구리킬레이트, N-아연 킬레이트, N-나이트로아민, N-나이트로소아민, 아민 N-옥사이드, 다이페닐포스핀아마이드(Dpp), 다이메틸티오포스핀아마이드(Mpt), 다이페닐티오포스핀아마이드(Ppt), 다이알킬 포스포르아미데이트, 다이벤질 포스포르아미데이트, 다이페닐 포스포르아미데이트, 벤젠설펜아마이드, o-나이트로벤젠설펜아마이드(Nps), 2,4-다이나이트로벤젠설펜아마이드, 펜타클로로벤젠설펜아마이드, 2-나이트로-4-메톡시벤젠설펜아마이드, 트라이페닐메틸설펜아마이드, 3-나이트로피리딘설펜아마이드(Npys), p-톨루엔설폰아마이드(Ts), 벤젠설폰아마이드, 2,3,6,-트라이메틸-4-메톡시벤젠설폰아마이드(Mtr), 2,4,6-트라이메톡시벤젠설폰아마이드(Mtb), 2,6-다이메틸-4-메톡시벤젠설폰아마이드(Pme), 2,3,5,6-테트라메틸-4-메톡시벤젠설폰아마이드(Mte), 4-메톡시벤젠설폰아마이드(Mbs), 2,4,6-트라이메틸벤젠설폰아마이드(Mts), 2,6-다이메톡시-4-메틸벤젠설폰아마이드(iMds), 2,2,5,7,8-펜타메틸크로만-6-설폰아마이드(Pmc), 메탄설폰아마이드(Ms), β-트라이메틸실릴에탄설폰아마이드(SES), 9-안트라센설폰아마이드, 4-(4',8'-다이메톡시나프틸메틸)벤젠설폰아마이드(DNMBS), 벤질설폰아마이드, 트라이플루오로메틸설폰아마이드 및 펜아실설폰아마이드를 포함한다.
적합하게 보고된 카복실산은 실릴-, 알킬-, 알켄일-, 아릴- 및 아릴알킬-보호된 카복실산을 추가로 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 적합한 실릴기의 예는 트라이메틸실릴, 트라이에틸실릴, t-뷰틸다이메틸실릴, t-뷰틸다이페닐실릴, 트라이아이소프로필실릴 등을 포함한다. 적합한 알킬기의 예는 메틸, 벤질, p-메톡시벤질, 3,4-다이메톡시벤질, 트라이틸, t-뷰틸, 테트라하이드로피란-2-일을 포함한다. 적합한 알켄일기의 예는 알릴을 포함한다. 적합한 아릴기의 예는 선택적으로 치환된 페닐, 바이페닐 또는 나프틸을 포함한다. 적합한 아릴알킬기의 예는 선택적으로 치환된 벤질(예를 들어, p-메톡시벤질(MPM), 3,4-다이메톡시벤질, O-나이트로벤질, p-나이트로벤질, p-할로벤질, 2,6-다이클로로벤질, p-사이아노벤질), 및 2- 및 4-피콜릴을 포함한다.
적합한 하이드록실 보호기는 메틸, 메톡실메틸(MOM), 메틸티오메틸(MTM), t-뷰틸티오메틸, (페닐다이메틸실릴)메톡시메틸(SMOM), 벤질옥시메틸(BOM), p-메톡시벤질옥시메틸(PMBM), (4-메톡시페녹시)메틸(p-AOM), 구아야콜메틸(GUM), t-뷰톡시메틸, 4-펜텐일옥시메틸(POM), 실옥시메틸, 2-메톡시에톡시메틸(MEM), 2,2,2-트라이클로로에톡시메틸, 비스(2-클로로에톡시)메틸, 2-(트라이메틸실릴)에톡시메틸(SEMOR), 테트라하이드로피란일(THP), 3-브로모테트라하이드로피란일, 테트라하이드로티오피란일, 1-메톡시사이클로헥실, 4-메톡시테트라하이드로피란일(MTHP), 4-메톡시테트라하이드로티오피란일, 4-메톡시테트라하이드로티오피란일 S,S-다이옥사이드, 1-[(2-클로로-4-메틸)페닐]-4-메톡시피페리딘-4-일(CTMP), 1,4-다이옥산-2-일, 테트라하이드로퓨란일, 테트라하이드로티오퓨란일, 2,3,3a,4,5,6,7,7a-옥타하이드로-7,8,8-트라이메틸-4,7-메타노벤조퓨란-2-일, 1-에톡시에틸, 1-(2-클로로에톡시)에틸, 1-메틸-1-메톡시에틸, 1-메틸-1-벤질옥시에틸, 1-메틸-1-벤질옥시-2-플루오로에틸, 2,2,2-트라이클로로에틸, 2-트라이메틸실릴에틸, 2-(페닐셀렌일)에틸, t-뷰틸, 알릴, p-클로로페닐, p-메톡시페닐, 2,4-다이나이트로페닐, 벤질, p-메톡시벤질, 3,4-다이메톡시벤질, o-나이트로벤질, p-나이트로벤질, p-할로벤질, 2,6-다이클로로벤질, p-사이아노벤질, p-페닐벤질, 2-피콜릴, 4-피콜릴, 3-메틸-2-피콜릴 N-옥시도, 다이페닐메틸, p,p'-다이나이트로벤즈하이드릴, 5-다이벤조수베릴, 트라이페닐메틸, α-나프틸다이페닐메틸, p-메톡시페닐다이페닐메틸, 다이(p-메톡시페닐)페닐메틸, 트라이(p-메톡시페닐)메틸, 4-(4'-브로모펜아실옥시페닐)다이페닐메틸, 4,4',4"-트리스(4,5-다이클로로프탈이미도페닐)메틸, 4,4',4"-트리스(레불리노일옥시페닐)메틸, 4,4',4"-트리스(벤조일옥시페닐)메틸, 3-(이미다졸-1-일)비스(4',4"-다이메톡시페닐)메틸, 1,1-비스(4-메톡시페닐)-1'-피렌일메틸, 9-안트릴, 9-(9-페닐)잔텐일, 9-(9-페닐-10-옥소)안트릴, 1,3-벤조다이티올란-2-일, 벤즈아이소티아졸릴 S,S-다이옥시도, 트라이메틸실릴(TMS), 트라이에틸실릴(TES), 트라이아이소프로필실릴(TIPS), 다이메틸아이소프로필실릴(IPDMS), 다이에틸아이소프로필실릴(DEIPS), 다이메틸테실실릴, t-뷰틸다이메틸실릴(TBDMS), t-뷰틸다이페닐실릴(TBDPS), 트라이벤질실릴, 트라이-p-자일릴실릴, 트라이페닐실릴, 다이페닐메틸실릴(DPMS), t-뷰틸메톡시페닐실릴(TBMPS), 폼산염, 벤조일폼산염, 아세테이트, 클로로아세테이트, 다이클로로아세테이트, 트라이클로로아세테이트, 트라이플루오로아세테이트, 메톡시아세테이트, 트라이페닐메톡시아세테이트, 페녹시아세테이트, p-클로로페녹시아세테이트, 3-페닐프로피오네이트, 4-옥소펜타노에이트(레불리네이트), 4,4-(에틸렌다이티오)펜타노에이트(레불리노일다이티오아세탈), 피발로에이트, 아다만토에이트, 크로토네이트, 4-메톡시크로토네이트, 벤조산염, p-페닐벤조산염, 2,4,6-트라이메틸벤조산염(메시토에이트), 알킬 메틸 카보네이트, 9-플루오렌일메틸 카보네이트(Fmoc), 알킬 에틸 카보네이트, 알킬 2,2,2-트라이클로로에틸 카보네이트(Troc), 2-(트라이메틸실릴)에틸 카보네이트(TMSEC), 2-(페닐설폰일) 에틸 카보네이트(Psec), 2-(트라이페닐포스포니오) 에틸 카보네이트(Peoc), 알킬 아이소뷰틸 카보네이트, 알킬 비닐 카보네이트 알킬 알릴 카보네이트, 알킬 p-나이트로페닐 카보네이트, 알킬 벤질 카보네이트, 알킬 p-메톡시벤질 카보네이트, 알킬 3,4-다이메톡시벤질 카보네이트, 알킬 o-나이트로벤질 카보네이트, 알킬 p-나이트로벤질 카보네이트, 알킬 S-벤질 티오카보네이트, 4-에톡시-1-나프틸 카보네이트, 메틸 다이티오카보네이트, 2-아이오도벤조산염, 4-아지도뷰티레이트, 4-나이트로-4-메틸펜타노에이트, o-(다이브로모메틸)벤조산염, 2-폼일벤젠설폰산염, 2-(메틸티오메톡시)에틸, 4-(메틸티오메톡시)뷰티레이트, 2-(메틸티오메톡시메틸)벤조산염, 2,6-다이클로로-4-메틸페녹시아세테이트, 2,6-다이클로로-4-(1,1,3,3-테트라메틸뷰틸)페녹시아세테이트, 2,4-비스(1,1-다이메틸프로필)페녹시아세테이트, 클로로다이페닐아세테이트, 아이소뷰티레이트, 모노석시노에이트, (E)-2-메틸-2-뷰테노에이트, o-(메톡시카본일)벤조산염, α-나프토에이트, 나이트레이트, 알킬 N,N,N',N'-테트라메틸포스포로다이아미데이트, 알킬 N-페닐카바메이트, 보레이트, 다이메틸포스피노티오일, 알킬 2,4-다이나이트로페닐설페네이트, 설페이트, 메탄설폰산염(메실레이트), 벤질설폰산염 및 토실레이트(Ts)를 포함한다. 1,2- 또는 1,3-다이올을 보호하기 위해, 보호기는 메틸렌 아세탈, 에틸리덴 아세탈, 1-t-뷰틸에틸리덴 케탈, 1-페닐에틸리덴 케탈, (4-메톡시페닐)에틸리덴 아세탈, 2,2,2-트라이클로로에틸리덴 아세탈, 아세토나이드, 사이클로펜틸리덴 케탈, 사이클로헥실리덴 케탈, 사이클로헵틸리덴 케탈, 벤질리덴 아세탈, p-메톡시벤질리덴 아세탈, 2,4-다이메톡시벤질리덴 케탈, 3,4-다이메톡시벤질리덴 아세탈, 2-나이트로벤질리덴 아세탈, 메톡시메틸렌 아세탈, 에톡시메틸렌 아세탈, 다이메톡시메틸렌 오쏘 에스터, 1-메톡시에틸리덴 오쏘 에스터, 1-에톡시에틸리딘 오쏘 에스터, 1,2-다이메톡시에틸리덴 오쏘 에스터, α-메톡시벤질리덴 오쏘 에스터, 1-(N,N-다이메틸아미노)에틸리덴 유도체, α-(N,N'-다이메틸아미노)벤질리덴 유도체, 2-옥사사이클로펜틸리덴 오쏘 에스터, 다이-t-뷰틸실릴렌기(DTBS), 1,3-(1,1,3,3-테트라아이소프로필다이실록산일리덴) 유도체(TIPDS), 테트라-t-뷰톡시다이실록산-1,3-다이일리덴 유도체(TBDS), 환식 카보네이트, 환식 보로네이트, 에틸 보로네이트 및페닐 보로네이트를 포함한다.
일부 실시형태에서, 하이드록실 보호기는 아세틸, t-뷰틸, t뷰톡시메틸, 메톡시메틸, 테트라하이드로피란일, 1 -에톡시에틸, 1 -(2-클로로에톡시)에틸, 2- 트라이메틸실릴에틸, p-클로로페닐, 2,4-다이나이트로페닐, 벤질, 벤조일, p-페닐벤조일, 2,6- 다이클로로벤질, 다이페닐메틸, p-나이트로벤질, 트라이페닐메틸(트라이틸), 4,4'-다이메톡시트라이틸, 트라이메틸실릴, 트라이에틸실릴, t-뷰틸다이메틸실릴, t-뷰틸다이페닐실릴, 트라이페닐실릴, 트라이아이소프로필실릴, 벤조일폼산염, 클로로아세틸, 트라이클로로아세틸, 트라이플루오로아세틸, 피발로일, 9- 플루오렌일메틸 카보네이트, 메실레이트, 토실레이트, 트라이플레이트, 트라이틸, 모노메톡시트라이틸(MMTr), 4,4'-다이메톡시트라이틸(DMTr) 및 4,4',4"-트라이메톡시트라이틸(TMTr), 2-사이아노에틸(CE 또는 Cne), 2-(트라이메틸실릴)에틸(TSE), 2-(2-나이트로페닐)에틸, 2-(4-사이아노페닐)에틸 2-(4-나이트로페닐)에틸(NPE), 2-(4-나이트로페닐설폰일)에틸, 3,5-다이클로로페닐, 2,4-다이메틸페닐, 2-나이트로페닐, 4-나이트로페닐, 2,4,6-트라이메틸페닐, 2-(2-나이트로페닐)에틸, 뷰틸티오카본일, 4,4',4"-트리스(벤조일옥시)트라이틸, 다이페닐카바모일, 레불린일, 2-(다이브로모메틸)벤조일(Dbmb), 2-(아이소프로필티오메톡시메틸)벤조일(Ptmt), 9-페닐잔텐-9-일(pixyl) 또는 9-(p-메톡시페닐)잔틴-9-일(MOX)이다. 일부 실시형태에서, 하이드록실 보호기 각각은 아세틸, 벤질, t- 뷰틸다이메틸실릴, t-뷰틸다이페닐실릴 및 4,4'-다이메톡시트라이틸로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시형태에서, 하이드록실 보호기는 트라이틸, 모노메톡시트라이틸 및 4,4'-다이메톡시트라이틸기로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 인 결합 보호기는 올리고뉴클레오타이드 합성 내내 인 결합(예를 들어, 뉴클레오타이드간 결합)에 부착된 기이다. 일부 실시형태에서, 보호기는 포스포로티오에이트기의 황 원자에 부착된다. 일부 실시형태에서, 보호기는 뉴클레오타이드간 포스포로티오에이트 결합의 산소 원자에 부착된다. 일부 실시형태에서, 보호기는 뉴클레오타이드간 포스페이트 결합의 산소 원자에 부착된다. 일부 실시형태에서, 보호기는 2-사이아노에틸(CE 또는 Cne), 2-트라이메틸실릴에틸, 2-나이트로에틸, 2-설폰일에틸, 메틸, 벤질, o-나이트로벤질, 2-(p-나이트로페닐)에틸(NPE 또는 Npe), 2-페닐에틸, 3-(N-tert-뷰틸카복스아미도)-1-프로필, 4-옥소펜틸, 4-메틸티오-l-뷰틸, 2-사이아노-1,1-다이메틸에틸, 4-N-메틸아미노뷰틸, 3-(2-피리딜)-1-프로필, 2-[N-메틸-N-(2-피리딜)]아미노에틸, 2-(N-폼일,N-메틸)아미노에틸 또는 4-[N-메틸-N-(2,2,2-트라이플루오로아세틸)아미노]뷰틸이다.
대상체: 본 명세서에 사용된 바와 같은, 용어 "대상체"는, 예를 들어, 실험, 진단, 예방 및/또는 치료적 목적을 위해 화합물 또는 조성물이 본 개시내용에 따라 투여되는 임의의 유기체를 지칭한다. 전형적인 대상체는 동물(예를 들어, 포유류, 예컨대, 마우스, 랫트, 토끼, 비인간 영장류 및 인간; 곤충; 벌레; 등) 및 식물을 포함한다. 일부 실시형태에서, 대상체는 인간이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 질환, 장애 및/또는 병태를 앓고 있고/있거나 이들에 걸리기 쉬울 수 있다.
실질적으로: 본 명세서에 사용된 바와 같은, 용어 "실질적으로"는 관심 특징 또는 특성의 전체 또는 거의 전체의 정도를 나타내는 정량적 상태를 지칭한다. 당업자는 생물학적 및 화학적 현상이, 있다고 하더라도, 완료되고/되거나 완료까지 진행되거나, 완전한 결과를 달성하거나 피하는 것이 드물다는 것을 이해할 것이다. 따라서, 용어 "실질적으로"는 다수의 생물학적 및/또는 화학적 현상에 고유한 완전성의 잠재적 결여를 포착하기 위해 본 명세서에서 사용된다.
치료제: 본 명세서에 사용된 바와 같은, 용어 "치료제"는 일반적으로 대상체에게 투여될 때 목적하는 효과(예를 들어, 목적하는 생물학적, 임상적 또는 약학적 효과)를 유발하는 임의의 제제를 지칭한다. 일부 실시형태에서, 제제는 적절한 집단에 걸쳐 통계적으로 유의한 효과를 입증하는 경우에 치료제인 것으로 간주된다. 일부 실시형태에서, 적절한 집단은 질환, 장애 또는 병태를 앓고 있고/있거나 걸리기 쉬운 대상체의 집단이다. 일부 실시형태에서, 적절한 집단은 모델 유기체의 집단이다. 일부 실시형태에서, 적절한 집단은 한 가지 이상의 기준, 예컨대, 연령, 그룹, 성별, 유전적 배경, 이미 존재하는 임상 병태, 요번에 대한 사전 노출에 의해 정해질 수 있다. 일부 실시형태에서, 치료제는 대상체에게 유효량으로 투여될 때 대상체에서 질환, 장애 및/또는 병태의 한 가지 이상의 증상 또는 특징의 발병을 완화, 개선, 경감, 저해, 방지, 지연하고/하거나 이의 중증도를 감소시키고/시키거나 발생률을 감소시키는 물질이다. 일부 실시형태에서, "치료제"는 인간 투여용으로 판매될 수 있기 전에 정부 규제기관에 의해 승인되었거나 승인이 필요한 제제이다. 일부 실시형태에서, "치료제"는 인간 투여를 위해 의학적 처방이 필요한 제제이다. 일부 실시형태에서, 치료제는 본 명세서에 기재된 화합물이다.
치료적 유효량: 본 명세서에 사용된 바와 같은, 용어 "치료적 유효량"은 치료 요법의 부분으로서 투여될 때 목적하는 생물학적 반응을 유발하는 물질(예를 들어, 치료제, 조성물 및/또는 제형)의 양을 의미한다. 일부 실시형태에서, 치료적 유효량의 물질은 대상체에게 투여될 때, 질환, 장애 및/또는 병태를 앓고 있거나 걸릴 수 있거나, 질환, 장애 및/또는 병태의 발병을 치료, 진단, 예방 및/또는 지연시키는 데 충분한 양이다. 당업자에 의해 인식될 바와 같이, 유효량의 물질은 목적하는 생물학적 종점, 전달될 물질, 표적 세포 또는 조직과 같은 인자에 따라 다를 수 있다. 예를 들어, 질환, 장애 및/또는 병태를 치료하기 위한 제형 중 화합물의 유효량은 질환, 장애 및/또는 병태의 한 가지 이상의 증상 또는 특징의 발병을 완화, 개선, 경감, 저해, 방지, 지연하고/하거나 이의 중증도를 감소시키고/시키거나 발생률을 감소시키는 양이다. 일부 실시형태에서, 치료적 유효량은 단일 용량으로 투여되고; 일부 실시형태에서, 치료적 유효량을 전달하는 데 다회 단위 용량이 필요로 된다.
치료하다: 본 명세서에 사용된 바와 같은, 용어 "치료하다", "치료" 또는 "치료하는"은 질환, 장애 및/또는 병태의 한 가지 이상의 증상 또는 특징의 발병을 부분적으로 또는 완전히 완화, 개선, 경감, 저해, 방지, 지연하고/하거나 이의 중증도를 감소시키고/시키거나 발생률을 감소시키기 위해 사용되는 임의의 방법을 지칭한다. 치료는 질환, 장애 및/또는 병태의 징후를 나타내지 않는 대상체에게 투여될 수 있다. 일부 실시형태에서, 치료는, 예를 들어, 질환, 장애 및/또는 병태와 관련된 병리가 발생할 위험을 감소시키기 위한 목적을 위해, 질환, 장애 및/또는 병태의 조기 징후만을 나타내는 대상체에게 투여될 수 있다.
불포화: 본 명세서에서 사용되는 바와 같은 용어 "불포화된"은 모이어티가 하나 이상의 불포화 단위를 갖는다는 것을 의미한다.
달리 언급되지 않는 한, 본 명세서에 도시된 구조는 또한 구조의 모든 이성질체(예를 들어, 거울상이성질체, 부분입체이성질체 및 기하이성질체(또는 입체구조))형태; 예를 들어, 각 비대칭 중심에 대한 R 및 S 입체배치, Z 및 E 이중결합 이성질체, 및 Z 및 E 입체구조 이성질체를 포함하는 것을 의미한다. 따라서, 본 화합물의 단일 입체화학적 이성질체뿐만 아니라 거울상이성질체, 부분입체이성질체 및 기하이성질체(또는 입체구조) 혼합물은 본 개시내용의 범주 이내이다. 달리 언급되지 않는 한, 화합물의 모든 호변이성질체 형태는 본 개시내용의 범주 이내이다. 추가적으로, 달리 언급되지 않는 한, 본 명세서에 도시된 구조는 또한 하나 이상의 동위원소가 풍부한 원자의 존재 하에서만 다른 화합물을 포함하는 것을 의미한다. 예를 들어, 수소의 중수소 또는 삼중수소로의 대체, 또는 탄소의 13C- 또는 14C-풍부 탄소로의 대체를 포함하는 본 구조를 갖는 화합물은 본 개시내용의 범주 이내이다. 이러한 화합물은, 예를 들어, 분석 도구로서, 생물학적 분석에서 프로브로서 또는 본 개시내용에 따른 치료제로서 유용하다.
2. 예시적인 실시형태의 설명:
본 명세서에 기재된 바와 같이, 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 고효율, 높은 선택성 및/또는 감소된 부차적인 전환(예를 들어, 화학 반응의 수 및/또는 화학 반응의 조건/유형으로 인함)으로 표적에 관심 모이어티를 접합시킬 수 있는 기술을 제공한다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 유용한 시약 및 접합 방법을 제공하며, 향상된 균질성(예를 들어, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 또는 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20배 이상, 표적 제제의 하나 이상의 목적하는 부위에서의 변형/접합의 증가, 및/또는 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 또는 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20배 이상, 표적 제제의 하나 이상의 목적하지 않는 부위에서 변형/접합의 감소), 순도 및/또는 감소된 목적하지 않는 변형(예를 들어, 부반응의 결과로서 특정 단백질 잔기에 대해)을 갖는 생성물 조성물을 제공할 수 있다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 본 명세서에 기재된 바와 같은 식 R-I의 화합물 또는 이의 염을 제공한다. 일부 실시형태에서, 식 R-I의 화합물 또는 이의 염은 반응의 한 단계에서 표적에 관심 모이어티를 도입하는 데 유용하다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염의 제제를 제공한다. 일부 실시형태에서, 생성물 조성물은 식 P-I 또는 P-II의 구조, 또는 이의 염을 갖는 복수의 제제를 포함하되, 생성물 조성물은 기준 생성물 조성물에 비해 상기 제제의 보다 높은 균질성 수준을 갖는다(예를 들어, 각각의 표적 결합 모이어티가 -H로 대체된다는 것을 제외하고 식 R-I의 화합물 또는 이의 염과 동일한 구조를 갖는 화합물로 대체되는 방법으로부터의 생성물 조성물).
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 하기 단계들을 포함하는 방법을 제공한다:
1) 표적 제제를 하기를 포함하는 반응 상대와 접촉시키는 단계:
표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 제1 기,
반응기;
관심 모이어티; 및
선택적으로 하나 이상의 링커 모이어티;
2) 하기를 포함하는 제제를 형성하는 단계:
표적 제제 모이어티;
관심 모이어티; 및
선택적으로 하나 이상의 링커 모이어티.
일부 실시형태에서, 반응기는 제1 기와 관심 모이어티 사이에 위치되고, 제1 기 및 관심 모이어티에 독립적으로, 그리고 선택적으로 링커 모이어티를 통해 연결된다. 일부 실시형태에서, 반응 상대는 식 R-I의 화합물 또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 제1 기는 본 명세서에 기재된 바와 같은 LG 기이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제1 기는 본 명세서에 기재된 바와 같은 LG 기이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 하기 단계들을 포함하는 방법을 제공한다:
1) 표적 제제를 하기 식 R-I의 구조식 또는 이의 염을 갖는 반응 상대와 접촉시키는 단계:
Figure pct00048
(식 중,
LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 도메인을 포함하는 기이고,
RG는 반응기이며;
LRM은 링커이고; 그리고
MOI는 관심 모이어티임); 및
2) 식 P-I의 구조식 또는 이의 염을 갖는 제제를 형성하는 단계:
Figure pct00049
(식 중,
P는 표적 제제 모이어티이고;
LPM은 링커이고; 그리고
MOI는 관심 모이어티임).
일부 실시형태에서, 표적 제제는 단백질 제제이다. 일부 실시형태에서, 표적 제제. 일부 실시형태에서, 표적 제제는 항체이다. 일부 실시형태에서, 표적 제제는 IgG 항체이다. 일부 실시형태에서, 표적은 단백질이고, 관심 모이어티는 하나 이상의 라이신 잔기에 접합된다. 일부 실시형태에서, 식 P-I 또는 이의 염의 제제는 식 P-II 또는 이의 염의 제제이다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 P-II의 구조식을 갖는 제제의 제조 방법을 제공한다:
Figure pct00050
(식 중,
P-N은 라이신 잔기를 포함하는 단백질 제제 모이어티이고;
LPM은 링커이고; 그리고
MOI는 관심 모이어티임);
상기 방법은 하기 단계들을 포함한다:
P-N을 하기 식 R-I의 구조식 또는 이의 염을 갖는 반응 상대와 접촉시키는 단계:
Figure pct00051
(식 중,
LG는 P-N에 결합하는 단백질-결합 도메인을 포함하는 기이고,
RG는 반응기이며;
LRM은 링커이고; 그리고
MOI는 관심 모이어티임).
일부 실시형태에서, 본 명세서에 예시되는 바와 같이, 접촉시키는 단계는 라이신 잔기 N이 RG의 원자와 반응하고 결합을 형성하며 LG를 방출하는 데 충분한 조건 및 시간 동안에 수행된다.
표적
본 개시내용을 읽은 후에 당업자는 본 명세서에서 제공된 기술이 다수 유형의 관심 모이어티에 다양한 표적 제제를 접합시키는 데 유용하다는 것을 인식할 것이다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술은 단백질 제제를 다양한 관심 모이어티와 접합시키는 데 특히 유용하다. 일부 실시형태에서, 표적 제제는 핵산이거나 핵산을 포함한다.
일부 실시형태에서, 표적 제제는 단백질 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 제제는 단백질 제제이다. 일부 실시형태에서, 표적 제제는 세포, 조직, 기관 또는 유기체에서의 천연 단백질이다. 일부 실시형태에서, 표적 제제는 내인성 단백질이다. 일부 실시형태에서, 표적 제제는 외인성 단백질이다. 일부 실시형태에서, 표적 제제는 제조된 단백질, 예를 들어, 다양한 생물기술을 이용하여 생성된 단백질이다. 일부 실시형태에서, 표적 제제는 항체 제제이다. 일부 실시형태에서, 표적 제제는 치료제로서 유용한 항체이다. 다양한 이러한 항체는 당업계에 공지되어 있으며, 표적 제제로서 이용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 항체는 단클론성 항체이다. 일부 실시형태에서, 항체는 다클론성 항체이다. 일부 실시형태에서, 항체는 IgG 항체이다. 일부 실시형태에서, 항체는 IVIG(일부 실시형태에서, 건강한 공여자로부터 풀링)이다. 일부 실시형태에서, 단백질은 Fc 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체는 Fc 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, Fc 영역은 단일 중쇄 또는 이의 단편을 포함한다. 일부 실시형태에서, Fc 영역은 2개의 중쇄 또는 이의 단편을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체는 인간 항체이다. 일부 실시형태에서, 항체는 키메라 항체이다. 일부 실시형태에서, 항체는 인간화된 항체이다. 일부 실시형태에서, 항체는 마우스 항체이다.
일부 실시형태에서, 다클론성 항체 제제 또는 IVIG 제제를 특성규명할 때, (예를 들어, MS에 의해) 특성규명을 위한 개선된 균질성을 갖는 조성물을 제공하기 위해 항체의 특정 영역(예를 들어, Fab)이 제거되도록, 접합 전에, 접합 동안에 또는 접합 후에, 분해, 예를 들어, IdeZ, IdeS 등을 이용하는 효소 분해가 수행된다.
일부 실시형태에서, 항체는 치료적 항체, 예를 들어, 치료적 용도를 위한 FDA-승인 항체이다. 일부 실시형태에서, 치료적 항체는 암을 치료하는 데 유용하다. 일부 실시형태에서, 항체는 아달리무맙, 알렘투주맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙, 이필리무맙, 세툭시맙, 다라투무맙, 디누톡시맙, 엘로투주맙, 이브리투모맙 티욱세탄, 임가투주맙, 인플릭시맙, 이필리무맙, 네시투무맙, 오비누투주맙, 오파투무맙, 퍼투주맙, 레슬리주맙, 리툭시맙, 트라스투주맙, 모가물리주맙, AMP-224, FS-102, GSK-2857916, ARGX-111, ARGX-110, AFM-13, APN-301, BI-836826, BI-836858, 에노브릴투주맙, 오틀레르주맙, 벨투주맙, KHK-4083, BIW-8962, ALT-803, 카로툭시맙, 에프라투주맙, 이네빌리주맙, 이사툭시맙, 마르게툭시맙, MOR-208, 오카라투주맙, 탈라코투주맙, 트레멜리무맙, 벤랄리주맙, 루밀릭시맙, MOR-208, 이피바투주맙, GSK2831781, SEA-CD40, KHK-2823 또는 BI836858이다. 일부 실시형태에서, 항체는 리툭시맙, 바실릭시맙, 인플릭시맙, 세툭시맙, 실툭시맙, 디누톡시맙, 알테르톡삭시맙, 다클리주맙, 파빌리주맙, 트라스투주맙, 알렘투주맙, 오말리주맙, 에팔리주맙, 베바시주맙, 나탈리주맙, 토실리주맙, 에쿨리주맙, 모가물리주맙, 퍼투주맙, 오비누투주맙, 베돌리주맙, 펨브롤리주맙, 메폴리주맙, 엘로투주맙, 다라투무맙, 익세키주맙, 레슬리주맙, 및 아테졸리주맙, 아달리무맙, 파니투무맙, 골리무맙, 우스테키누맙, 카나키누맙, 오파투무맙, 데소수맙, 이필리무맙, 벨리무맙, 락시바쿠맙, 라무시루맙, 니볼루맙, 세쿠키누맙, 에볼로쿠맙, 알리로쿠맙, 네시투무맙, 브로달루맙 또는 올라라투맙이다. 일부 실시형태에서, 항체는 다라투무맙이다. 일부 실시형태에서, 항체는 세툭시맙이다. 일부 실시형태에서, 항체 제제 모이어티를 포함하는 제공된 화합물 또는 제제는 항체 제제에 의해 치료될 수 있는 병태, 장애 또는 질환을 치료하는 데 유용하다.
항체는 본 개시내용에 따른 다수의 기술에서 제조될 수 있다. 일부 실시형태에서, 항체는 천연 면역글로불린에 비해 조작된 구조를 가질 수 있다. 일부 실시형태에서, 항체는 정제, 식별, 평가 등을 위한 특정 태그를 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, 항체는 단편(예를 들어, CDR 및/또는 Fc 등)을 포함하며, 전체 면역글로불린은 포함하지 않을 수도 있다. 당업자는 항체 부위가 본 개시내용에서 열거될 때(예를 들어, K246, K248, K288, K290, K317 등; 달리 표시되지 않는 한, EU 넘버링에 따른 인간 항체), 아미노산 잔기가 정확한 넘버링 부위에 있지 않을 수도 있지만, 예를 들어, EU 넘버링 및/또는 서열 상동성(예를 들어, 동일 또는 상이한 종의 상동체)에 따라 해당 넘버링 부위에 대응하는 부위에서일 수 있다는 것을 인식한다.
당업자가 인식할 바와 같이, 제공된 기술은 특히 천연 표적, 예를 들어, 천연 항체와의 지정 접합을 제공할 수 있다. 일부 실시형태에서, 표적 제제는 천연 항체 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 제제는 조작된 항체 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 제제, 예를 들어, 항체는 조작된 비천연 아미노산 잔기를 포함하지 않는다.
상대 화합물
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티, 반응기, 관심 모이어티, 및 선택적으로 이러한 기/모이어티를 연결하는 하나 이상의 링커 모이어티를 포함하는, 제1 기를 각각 독립적으로 포함하는 화합물을 제공한다. 일부 실시형태에서, 이러한 화합물은 표적에 관심 모이어티를 접합시키기 위한 반응 상대로서 유용하다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은, 예를 들어, 다양한 단백질에 다양한 관심 모이어티를 접합시키기 위한 화합물을 제공한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 각각 관심 모이어티, 반응기, 표적 결합 모이어티, 및 선택적으로 이러한 모이어티를 연결하는 하나 이상의 링커 모이어티(링커)를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 이러한 화합물을 표적과 접촉시키고, 화합물의 반응기를 표적의 반응기예를 들어, 표적 단백질의 Lys 잔기의 -NH2)와 반응시킬 때 방출되는 이탈기의 부분이다. 본 명세서에서 입증되는 바와 같이, 제공된 화합물은 특히 접합 생성물에 대해 개선된 접합 효율, 높은 선택성 및 보다 소수의 단계(일부 경우에, 단일 단계)를 제공할 수 있다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 식 R-I의 구조식 또는 이의 염을 갖는다:
Figure pct00052
식 중:
LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기이고,
RG는 반응기이며;
LRM은 링커이고; 그리고
MOI는 관심 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 제1 기는 LG이다.
일부 실시형태에서, LG는 표적 제제에 결합할 수 있는 표적 결합 모이어티, 및 선택적으로 링커 모이어티이거나, 이들을 포함한다.
본 개시내용에서 사용되는 바와 같은 모이어티는 일반적으로, 예를 들어, 에스터 RCOOR'에서 분자의 부분을 지칭하며, 알코올 모이어티는 RO-이다. 일부 실시형태에서, 화합물의 모이어티(예를 들어, 표적 제제, 단백질 제제, 항체 제제 등)는 화합물은 화합물의 하나 이상의 또는 모든 바람직한 구조적 특징, 특성, 기능 및/또는 활성을 보유한다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는, 선택적으로 대응하는 표적 결합 화합물로서 비슷한 방식으로 표적에 결합할 수 있고; 일부 실시형태에서, 표적 제제 모이어티는 이의 대응하는 표적 제제 화합물과 비슷한 하나 이상의 목적하는 구조적 특징, 특성, 기능 및/또는 특성을 유지하며; 일부 실시형태에서, 항체 제제 모이어티는 대응하는 항체 제제 화합물과 비슷한 하나 이상의 구조적 특징, 특성, 기능 및/또는 특성(예를 들어, 3-차원 구조, 항원 특이성, 항원-결합 능력 및/또는 면역학적 기능 등)을 유지한다. 일부 실시형태에서, 화합물의 모이어티, 예를 들어, 표적 제제 모이어티, 단백질 제제 모이어티, 항체 제제 모이어티 등은 화합물, 예를 들어, 표적 제제 화합물(표적 제제 모이어티에 대해), 단백질 제제 화합물(단백질 제제 모이어티에 대해), 항체 제제 화합물(항체 제제 모이어티) 등의 1가(1가 모이어티에 대해), 2가(2가 모이어티에 대해) 또는 다가(다가 모이어티에 대해) 라디칼이다. 일부 실시형태에서, 1가 라디칼은 1가 부분(예를 들어, 수소, 할로겐, 알킬과 같은 다른 1가 기, 아릴 등)을 제거함으로써 형성된다. 일부 실시형태에서, 2가 또는 다가 라디칼은 화합물로부터 하나 이상의 1가(예를 들어, 수소, 할로겐, 알킬과 같은 1가 기, 아릴 등), 2가 및/또는 다가 부분을 제거함으로써 형성된다. 일부 실시형태에서, 라디칼은 수소 원자를 제거함으로써 형성된다. 일부 실시형태에서, 모이어티는 1가이다. 일부 실시형태에서, 모이어티는 2가이다. 일부 실시형태에서, 모이어티는 다가이다.
일부 실시형태에서, LG는 RLG-LLG-이거나 이를 포함하되, RLG는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하고, LLG는 본 명세서에 기재된 바와 같은 LLG1이다. 일부 실시형태에서, LLG는 -LLG1-LLG2-이되, LLG1 및 LLG2 각각은 독립적으로 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, LLG는 -LLG1-LLG2-LLG3-이되, LLG1, LLG2 및 LLG3 각각은 독립적으로 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, LLG는 -LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-이되, LLG1, LLG2, LLG3 및 LLG4 각각은 독립적으로 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, LLG1은 RLG에 결합된다. 일부 실시형태에서, LLG1은 관심 모이어티에 결합된다. 일부 실시형태에서, LLG는 -LLG1-이고, 반응기는 LLG2, LLG3 및 LLG4를 포함한다. 일부 실시형태에서, LLG는 -LLG1-LLG2-이고, 반응기는 LLG3 및 LLG4를 포함한다. 일부 실시형태에서, LLG는 -LLG1-LLG2-LLG3-이고, 반응기는 LLG4를 포함한다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 제1 기 및/또는 LG는 반응 후에, 예를 들어, 상대 화합물이 표적 제제와 반응한 후에 방출된다. 일부 실시형태에서, 제1 기는 반응 후에 방출된다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 반응 후에 방출된다. 일부 실시형태에서, LG는 반응 후에 방출된다. 일부 실시형태에서, 제1 기는 LG-H의 구조식을 갖는 화합물 또는 이의 염의 일부로서 방출된다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 LG-H의 구조식을 갖는 화합물 또는 이의 염의 일부로서 방출된다. 일부 실시형태에서, LG는 LG-H의 구조식을 갖는 또는 이의 염 화합물의 일부로서 방출된다. 일부 실시형태에서, 제1 기는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조식을 갖는 화합물 또는 이의 염의 일부로서 방출된다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조식을 갖는 화합물 또는 이의 염의 일부로서 방출된다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조식을 갖는 화합물 또는 이의 염의 일부로서 방출되되, RLG는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, LG는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조식을 갖는 화합물 또는 이의 염의 일부로서 방출되되, LG는 RLG-LLG이고, LLG는 -LLG1-, -LLG1-LLG2-, -LLG1-LLG2-LLG3- 또는 -LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-이다. 일부 실시형태에서, LG는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조식을 갖는 화합물 또는 이의 염의 일부로서 방출되되, LG는 RLG-LLG1-이다. 일부 실시형태에서, LG는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조식을 갖는 화합물 또는 이의 염의 일부로서 방출되되, LG는 RLG-LLG1-LLG2이다. 일부 실시형태에서, LG는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조식을 갖는 화합물 또는 이의 염의 일부로서 방출되되, LG는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3이다. 일부 실시형태에서, LG는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조식을 갖는 화합물 또는 이의 염의 일부로서 방출되되, LG는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4이다.
일부 실시형태에서, L는 공유 결합이거나, 또는 하나 이상의 지방족 모이어티, 아릴 모이어티, 각각 독립적으로 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로지방족 모이어티, 각각 독립적으로 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로방향족 모이어티 또는 이러한 모이어티의 임의의 하나 이상의 임의의 조합을 포함하는 2가의 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-100 기이되, 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 C1-6 알킬렌, C1-6 알켄일렌, 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 2가 C1-6 헤테로지방족기, -C≡C-, -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 선택적 및 독립적으로 대체되고, n은 1 내지 20이다. 일부 실시형태에서, L은 공유 결합 또는 2가의 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-100 지방족 또는 헤테로지방족기 1 내지 20개의 헤테로원자이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C≡C-, -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')- 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 선택적 및 독립적으로 대체되되, n은 1 내지 20이다. 일부 실시형태에서, L은 공유 결합이거나, 또는 2가의 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 C1, C2, C3, C4, C5, C10, C15, C20, C25, C30, C40, C50, C60, C1-2, C1-5, C1-10, C1-15, C1-20, C1-30, C1-40, C1-50, C1-60, C1-70, C1-80, 또는 C1-90 지방족 또는 헤테로지방족기 1 내지 10 헤테로원자이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C≡C-, -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기, 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 선택적 및 독립적으로 대체되되, n은 1 내지 20이다. 일부 실시형태에서, L은 공유 결합이거나, 또는 2가의 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 C1, C2, C3, C4, C5, C10, C15, C20, C25, C30, C40, C50, C60, C1-2, C1-5, C1-10, C1-15, C1-20, C1-30, C1-40, C1-50, C1-60, C1-70, C1-80, 또는 C1-90 지방족 또는 헤테로지방족기 1 내지 10개의 헤테로원자이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C≡C-, -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, 아미노산 잔기, 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 선택적 및 독립적으로 대체되되, n은 1 내지 10이다. 일부 실시형태에서, L은 공유 결합이거나, 또는 2가의 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 C1, C2, C3, C4, C5, C10, C15, C20, C25, C30, C40, C50, C60, C1-2, C1-5, C1-10, C1-15, C1-20, C1-30, C1-40, C1-50, C1-60, C1-70, C1-80 또는 C1-90 지방족기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -O-, -N(R')-, -C(O)-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, 아미노산 잔기, 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 선택적 및 독립적으로 대체되되, n은 1 내지 10이다. 일부 실시형태에서, L은 공유 결합이거나, 또는 2가의 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 C1, C2, C3, C4, C5, C10, C15, C20, C25, C30, C40, C50, C60, C1-2, C1-5, C1-10, C1-15, C1-20, C1-30, C1-40, C1-50, C1-60, C1-70, C1-80 또는 C1-90 지방족기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -O-, -N(R')-, -C(O)-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')- 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 선택적 및 독립적으로 대체되되, n은 1 내지 10이다. 일부 실시형태에서, L은 공유 결합이거나, 또는 2가의 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-10 지방족기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -O-, -N(R')-, -C(O)-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -Cy- 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 선택적 및 독립적으로 대체되되, n은 1 내지 10이다. 일부 실시형태에서, L은 공유 결합이거나, 또는 2가의 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-10 지방족기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -O-, -N(R')-, -C(O)-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')- 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 선택적 및 독립적으로 대체되되, n은 1 내지 10이다. 일부 실시형태에서, L은 -C(O)O-를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, L은 -C(O)-N(R')-를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, L은 -S-를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, L은 -S-Cy-를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, L은 -S-S-를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, L은 -C(O)O-, -C(O)-N(R')-, -S-, 및 -S-S- 중 하나 이상 또는 어느 것도 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, L은 -C(O)O-, -C(O)-N(R')-, -S-Cy- 및 -S-S- 중 하나 이상 또는 어느 것도 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, L은 -C(O)O-, -S-, 및 -S-S- 중 하나 이상 또는 어느 것도 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, L은 -C(O)O-, -S-Cy- 및 -S-S- 중 하나 이상 또는 어느 것도 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, L은 -C(O)O-, -S- 및 -S-S- 중 어느 것도 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, L은 -C(O)O-, -S-Cy- 및 -S-S- 중 어느 것도 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, L은 -C(O)O- 및 -S-S- 중 어느 것도 포함하지 않는다.
일부 실시형태에서, 각각의 아미노산 잔기는 독립적으로 식 A-I의 구조식 또는 이의 염을 갖는 아미노산의 잔기이다. 일부 실시형태에서, 각각의 아미노산 잔기는 독립적으로 -N(Ra1)-La1-C(Ra2)(Ra3)-La2-CO-의 구조식 또는 이의 염 형태를 갖는다. 일부 실시형태에서, 각각의 아미노산 잔기는 독립적으로 -N(Ra1)-C(Ra2)(Ra3)-CO-의 구조식 또는 이의 염 형태를 갖는다.
일부 실시형태에서, L은 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, L은 공유 결합이 아니다.
일부 실시형태에서, LLG1은 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 공유 결합이 아니다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2CH2O)n-이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2)n-O-(CH2CH2O)n-(CH2)n-이거나 이를 포함하되, 각각의 n은 독립적으로 본 명세서에 기재된 바와 같고, 각각의 -CH2-는 독립적으로 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2)n-O-(CH2CH2O)n-(CH2)n-이되, 각각의 n은 독립적으로 본 명세서에 기재된 바와 같고, 각각의 -CH2-는 독립적으로 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2)2-O-(CH2CH2O)n-(CH2)2-이되, n은 본 명세서에 기재된 바와 같고, 각각의 -CH2-는 독립적으로 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2)2-O-(CH2CH2O)n-(CH2)2-이되, n은 본 명세서에 기재된 바와 같다.
일부 실시형태에서, LLG1은 -CH2-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2)2-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2)2-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2)2-C(O)-NH-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2)3-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2)3NH-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2)3NH-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -C(O)-(CH2)3NH-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -C(O)-(CH2)3-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-C(O)-(CH2)3-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NHC(O)-(CH2)3NH-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, -CH2-는 표적 결합 모이어티에 결합된다.
일부 실시형태에서, LLG1은 -CH2CH2-O-CH2CH2-O-CH2CH2-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -CH2CH2-O-CH2CH2-O-CH2CH2-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -CH2CH2-O-CH2CH2-O-CH2CH2-C(O)NH-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -CH2CH2-O-CH2CH2-O-CH2CH2-C(O)NH-CH2-이다. 일부 실시형태에서, -CH2CH2-는 표적 결합 모이어티에 결합된다.
일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2CH2O)n-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2CH2O)n-CH2-CH2-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2CH2O)n-CH2-CH2-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2CH2O)2-CH2-CH2-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2CH2O)4-CH2-CH2-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -(CH2CH2O)8-CH2-CH2-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, -C(O)-는 표적 결합 모이어티에 결합된다.
일부 실시형태에서, LLG1은 -N(R')-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]n-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]n-CH2CH2-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]n-CH2CH2-NH-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]n-CH2CH2-NH-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, n은 1이다. 일부 실시형태에서, n은 2이다. 일부 실시형태에서, n은 3이다. 일부 실시형태에서, n은 4이다. 일부 실시형태에서, n은 5이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-CH2CH2-O-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-CH2CH2-O- CH2CH2-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-CH2CH2-O- CH2CH2-NH-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-CH2CH2-O-CH2CH2-NH-C(O)-이다.
일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]2-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]2-CH2CH2-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]2-CH2CH2-NH-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]2-CH2CH2-NH-C(O)-이다.
일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]3-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]3-CH2CH2-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]3-CH2CH2-NH-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]3-CH2CH2-NH-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]4-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]4-CH2CH2-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]4-CH2CH2-NH-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]4-CH2CH2-NH-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]5-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]5-CH2CH2-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]5-CH2CH2-NH-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]5-CH2CH2-NH-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, -NH-은 표적 결합 모이어티에 결합된다.
일부 실시형태에서, LLG1은 -CH2-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -CH2CH2-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -CH2CH2NH-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -CH2CH2NH-(CO)-이다. 일부 실시형태에서, -CH2-는 표적 결합 모이어티에 결합된다.
일부 실시형태에서, LLG1은 -CH2-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -CH2C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -CH2C(O)NH-이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 -CH2(CO)NHCH2-이다. 일부 실시형태에서, -CH2-C(O)-는 -CH2-에서 표적 결합 모이어티에 결합된다.
일부 실시형태에서, LLG2는 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, LLG2는 공유 결합이 아니다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -N(R')C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -NHC(O)-이다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -(CH2)n-N(R')C(O)-이되, -(CH2)n-은 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -(CH2)n-OC(O)-이되, -(CH2)n-은 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -(CH2)n-OC(O)N(R')-이되, -(CH2)n-은 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -(CH2)n-OC(O)NH-이되, -(CH2)n-은 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, n은 1 내지 10이고, 예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이다. 일부 실시형태에서, n은 1이다. 일부 실시형태에서, n은 2이다. 일부 실시형태에서, n은 3이다. 일부 실시형태에서, -(CH2)n-은 치환된다. 일부 실시형태에서, -(CH2)n-은 비치환된다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -CH2N(CH2CH2CH2S(O)2OH)-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -C(O)-NHCH2-이다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -C(O)-NHCH2CH2-이다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -C(O)O-CH2-이다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -NH-C(O)O-CH2-이다. 일부 실시형태에서, -C(O)-는 LLG3에 결합된다. 일부 실시형태에서, -N(R')-, -NH- 또는 선택적으로 치환된 -CH2- 단위(선택적으로 치환된 -(CH2)n- 단위)가 LLG3에 결합된다.
일부 실시형태에서, LLG2는 -N(R')-이다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -N(R)-이다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -NH-이다.
일부 실시형태에서, LLG2는 선택적으로 치환된 2가 C1-6 지방족이다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -CH2-이다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -CH2NH-이다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -CH2NH-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LLG2는 -CH2NH-C(O)-CH2-이다.
일부 실시형태에서, LLG3은 선택적으로 치환된 아릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, LLG3은 선택적으로 치환된 페닐 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, LLG3은 하나 이상의 전자-회수기로 치환된 페닐 고리이다. 당업자에 의해 인식되는 바와 같이, 다양한 전자-회수기는 당업계에 공지되어 있고, 본 개시내용에 따라 이용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 전자-회수기는 할로겐이다. 일부 실시형태에서, 전자-회수기는 -F이다. 일부 실시형태에서, 이는 -Cl이다. 일부 실시형태에서, 이는 -Br이다. 일부 실시형태에서, 이는 -I이다. 일부 실시형태에서, 전자-회수기는 X=Y 이중 결합을 포함하되, X는 전자-회수기가 치환체인 기에 결합되고, X 및 Y 중 적어도 하나는 헤테로원자이다. 일부 실시형태에서, X는 헤테로원자이다. 일부 실시형태에서, Y는 헤테로원자이다. 일부 실시형태에서, X 및 Y 각각은 독립적으로 헤테로원자이다. 일부 실시형태에서, Y는 O이다. 일부 실시형태에서, Y는 S이다. 일부 실시형태에서, X는 C이다. 일부 실시형태에서, X는 N이다. 일부 실시형태에서, X는 P이다. 일부 실시형태에서, X는 S이다. 일부 실시형태에서, X=Y는 C=O이다. 일부 실시형태에서, X=Y는 N=O이다. 일부 실시형태에서, X=Y는 S=O이다. 일부 실시형태에서, X=Y는 P=O이다. 일부 실시형태에서, 전자-회수기는 -C(O)-L-R'이다. 일부 실시형태에서, 전자-회수기는 -C(O)-R'이다. 일부 실시형태에서, 이는 -NO2이다. 일부 실시형태에서, 이는 -S(O)-L-R'이다. 일부 실시형태에서, 이는 -S(O)-R'이다. 일부 실시형태에서, 이는 -S(O)2-L-R'이다. 일부 실시형태에서, 이는 -S(O)2-O-R'이다. 일부 실시형태에서, 이는 -S(O)2-N(R')2이다. 일부 실시형태에서, 이는 -P(O)(-L-R')2이다. 일부 실시형태에서, 이는 -P(O)(R')2이다. 일부 실시형태에서, 이는 -P(O)(OR')2이다. 일부 실시형태에서, 이는 -P(O)[N(R')2]2이다.
일부 실시형태에서, LLG3은 -LLG3a-LLG3b-이되, LLG3a는 공유 결합 또는 -C(O)O-CH2-이고, -CH2-는 선택적으로 치환되고, LLG3b는 선택적으로 치환된 아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, LLG3a는 LLG2에 결합되고, LLG3b는 LLG4에 결합된다.
일부 실시형태에서, LLG3a는 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, LLG3a는 -C(O)O-CH2-이되, -CH2-는 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, LLG3a는 -C(O)O-CH2-이되, -CH2-는 치환된다. 일부 실시형태에서, LLG3a는 -C(O)O-CH2-이되, -CH2-는 비치환된다.
일부 실시형태에서, 제1 기, 표적 결합 모이어티 및/또는 LG는 RLG-LLG1-LLG2-H의 구조식을 갖는 화합물 또는 이의 염의 일부로서 방출된다.
일부 실시형태에서, LLG3b는 선택적으로 치환된 페닐 고리이다. 일부 실시형태에서, 적어도 하나의 치환체는 본 명세서에 기재된 바와 같은 전자-회수기이다.
일부 실시형태에서, LLG3은
Figure pct00053
이되, s는 0 내지 4이고, 각각의 Rs는 독립적으로 할로겐, -NO2, -L-R', -C(O)-L-R', -S(O)-L-R', -S(O)2-L-R' 또는 -P(O)(-L-R')2이다. 일부 실시형태에서, C1은 LLG4에 결합된다. 일부 실시형태에서, LLG3은
Figure pct00054
이다. 일부 실시형태에서, LLG3은
Figure pct00055
이다. 일부 실시형태에서, LLG3은
Figure pct00056
이다. 일부 실시형태에서, LLG3은
Figure pct00057
이다. 일부 실시형태에서, LLG3은
Figure pct00058
이다. 일부 실시형태에서, LLG3은
Figure pct00059
이다.
일부 실시형태에서, LLG3b는
Figure pct00060
이되, s는 0 내지 4이고, 각각의 Rs는 독립적으로 할로겐, -NO2, -L-R', -C(O)-L-R', -S(O)-L-R', -S(O)2-L-R' 또는 -P(O)(-L-R')2이다. 일부 실시형태에서, C1은 LLG4에 결합된다. 일부 실시형태에서, LLG3b는
Figure pct00061
이다. 일부 실시형태에서, LLG3b는
Figure pct00062
이다. 일부 실시형태에서, LLG3b는
Figure pct00063
이다. 일부 실시형태에서, LLG3b는
Figure pct00064
이다. 일부 실시형태에서, LLG3b는
Figure pct00065
이다. 일부 실시형태에서, LLG3b는
Figure pct00066
이다.
일부 실시형태에서, s는 0이다. 일부 실시형태에서, s는 1 내지 4이다. 일부 실시형태에서, s는 1이다. 일부 실시형태에서, s는 2이다. 일부 실시형태에서, s는 3이다. 일부 실시형태에서, s는 4이다.
일부 실시형태에서, s는 1 내지 4이고, 적어도 하나의 Rs는 전자-회수기, 예를 들어, 상기 기재한 전자-회수기이다. 일부 실시형태에서, 적어도 하나의 Rs는 -NO2이다. 일부 실시형태에서, 적어도 하나의 Rs는 -F이다. 일부 실시형태에서, 각각의 Rs는 독립적으로 전자-회수기이다. 일부 실시형태에서, 각각의 Rs는 -NO2이다. 일부 실시형태에서, 각각의 Rs는 -F이다.
일부 실시형태에서, 전자-회수기 또는 Rs는 C2에 있다. 일부 실시형태에서, 전자-회수기 또는 Rs는 C3에 있다. 일부 실시형태에서, 전자-회수기 또는 Rs는 C4에 있다. 일부 실시형태에서, 전자-회수기 또는 Rs는 C2 및 C5에 있다.
일부 실시형태에서, LLG3은
Figure pct00067
이다. 일부 실시형태에서, LLG3은
Figure pct00068
이다. 일부 실시형태에서, LLG3은
Figure pct00069
이다. 일부 실시형태에서, LLG3은
Figure pct00070
이다. 일부 실시형태에서, LLG3은
Figure pct00071
이다. 일부 실시형태에서, LLG3은
Figure pct00072
이다. 일부 실시형태에서, LLG3은
Figure pct00073
이다. 일부 실시형태에서, LLG3은
Figure pct00074
이다.
일부 실시형태에서, LLG3b는
Figure pct00075
이다. 일부 실시형태에서, LLG3b는
Figure pct00076
이다. 일부 실시형태에서, LLG3b는
Figure pct00077
이다. 일부 실시형태에서, LLG3b는
Figure pct00078
이다. 일부 실시형태에서, LLG3b는
Figure pct00079
이다. 일부 실시형태에서, LLG3b는
Figure pct00080
이다. 일부 실시형태에서, LLG3b는
Figure pct00081
이다. 일부 실시형태에서, LLG3b는
Figure pct00082
이다.
일부 실시형태에서, LLG3b는 선택적으로 치환된
Figure pct00083
이다. 일부 실시형태에서, 질소 원자는 -O-인 LLG4에 결합된다. 일부 실시형태에서, 질소 원자는 -O-이고, -LRG1-LRG2-는 -C(O)-인 LLG4에 결합된다.
일부 실시형태에서, -LLG4-LRG1-LRG2-는 -O-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, -LLG4-LRG1-LRG2-는 -S-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, -LLG4-LRG1-LRG2-는 -S-C(O)-이다.
일부 실시형태에서, LLG4는 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, LLG4는 공유 결합이 아니다. 일부 실시형태에서, LLG4는 -O-이다. 일부 실시형태에서, LLG4는 -N(R')-이다. 일부 실시형태에서, LLG4는 -NH-이다. 일부 실시형태에서, LLG4는 -N(CH3)-이다. 일부 실시형태에서, LLG4는 -N(R')-이고, LLG3은 -O-이다. 일부 실시형태에서, R'는 선택적으로 치환된 C1-6 알킬이다. 일부 실시형태에서, LLG4는 -S-이다.
본 명세서에 기재된 바와 같이, 일부 실시형태에서, RLG는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, RLG는 단백질 결합 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, RLG는 항체 결합 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, RLG는 표적 결합 모이어티이다. 일부 실시형태에서, RLG는 단백질 결합 모이어티이다. 일부 실시형태에서, RLG는 항체 결합 모이어티이다.
일부 실시형태에서, RLG는 본 명세서에 기재된 바와 같은
Figure pct00084
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, RLG는 본 명세서에 기재된 바와 같은 Rc-(Xaa)z-이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, RLG는 소분자 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, RLG는 펩타이드 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, RLG는 핵산 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, RLG는 앱타머 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 본 명세서에 기재된 바와 같은
Figure pct00085
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 단백질 결합 모이어티는 본 명세서에 기재된 바와 같은
Figure pct00086
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티는 본 명세서에 기재된 바와 같은
Figure pct00087
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 본 명세서에 기재된 바와 같은 Rc-(Xaa)z-이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 단백질 결합 모이어티는 본 명세서에 기재된 바와 같은 Rc-(Xaa)z-이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티는 본 명세서에 기재된 바와 같은 Rc-(Xaa)z-이거나 이를 포함한다.
표적 결합 모이어티
당업자에 의해 인식될 바와 같이, 다양한 표적 결합 모이어티가 본 개시내용에 따라 이용될 수 있다. 표적 결합 모이어티를 개발 및 평가하기 위해 당업계에서 다양한 기술이 또한 이용될 수 있으며, 본 개시내용에 따라 이용될 수 있다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 소분자 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 중합체 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 핵산 또는 이의 단편이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 펩타이드 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 폴리펩타이드 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 제공된 기술은 1개 이하의 표적 결합 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술은 2개 이상의 표적 결합 모이어티를 포함한다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 표적 항체 제제에 결합할 수 있는 2개 이상의 표적 결합 모이어티를 포함할 수 있다.
a. 소분자
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 표적 제제에 선택적으로 결합할 수 있는 소분자 모이어티이거나 이를 포함한다. 다양한 단백질 제제를 포함하는 표적 제제에 대한 소분자 결합제는 당업계에 널리 공지되어 있으며, 본 개시내용에 따라 이용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 소분자 결합제는 치료제, 예를 들어, 약물, 항체-약물 접합체 등이거나, 이의 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 소분자 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 소분자 모이어티는 분자량이 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000, 2000, 1500, 1000, 900, 800, 700 또는 600 이하이다. 일부 실시형태에서, 소분자 모이어티는 분자량이 8000 이하이다. 일부 실시형태에서, 소분자 모이어티는 분자량이 7000 이하이다. 일부 실시형태에서, 소분자 모이어티는 분자량이 6000 이하이다. 일부 실시형태에서, 소분자 모이어티는 분자량이 5000 이하이다. 일부 실시형태에서, 소분자 모이어티는 분자량이 4000 이하이다. 일부 실시형태에서, 소분자 모이어티는 분자량이 3000 이하이다. 일부 실시형태에서, 소분자 모이어티는 분자량이 2000 이하이다. 일부 실시형태에서, 소분자 모이어티는 분자량이 1500 이하이다. 일부 실시형태에서, 소분자 모이어티는 분자량이 1000 이하이다. 일부 실시형태에서, 소분자 모이어티는 분자량이 900 이하이다.
b. 펩타이드 제제
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 펩타이드 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 펩타이드 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 모이어티는 선형 또는 환식 중 하나일 수 있다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 환식 펩타이드 모이어티이거나 이를 포함한다. 다양한 펩타이드 표적 결합 모이어티는 당업계에 공지되어 있고, 본 개시내용에 따라 이용될 수 있다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 펩타이드 앱타머 제제이거나 이를 포함한다.
c. 앱타머 제제
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 핵산 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 올리고뉴클레오타이드 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 앱타머 제제이거나 이를 포함한다. 다양한 앱타머 제제는 당업계에 공지되어 있거나, 통상적인 기술을 이용하여 용이하게 개발될 수 있고, 본 개시내용에 따라 제공된 기술에서 이용될 수 있다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다. 이러한 표적 결합 모이어티는 특히 항체 제제에 관심 모이어티를 접합시키기 위한 것이다.
항체 결합 모이어티
일부 실시형태에서, 표적은 항체 제제이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물 및/또는 제제는 항체 결합 모이어티를 포함한다. 다양한 항체 결합 모이어티는 본 개시내용에 따라 이용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티는 상이한 Fab 영역 및 상이한 특이성을 갖는 항체에 결합할 수 있는 보편적 항체 결합 모이어티이다. 특히, 이러한 항체 결합 모이어티를 포함하는 화합물은 상이한 특이성을 갖는 항체와의 접합을 위해 이용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용의 항체 결합 모이어티, 예를 들어, 보편적 항체 결합 모이어티는 Fc 영역에 결합한다. 일부 실시형태에서, Fc 영역에 대한 항체 결합 모이어티의 결합은 동일한 Fc 영역(예를 들어, 동일한 Fc 영역의 상이한 위치/아미노산 잔기일 수 있음)에 대한 Fc 수용체, 예를 들어, CD16a의 결합과 동시에 일어날 수 있다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티의 결합 시, 예를 들어, 제공된 제제, 화합물, 방법 등에서의 결합 시, Fc 영역은 여전히 Fc 수용체와 상호작용할 수 있고, 면역 세포(예를 들어, 효과기 세포, 예컨대, NK 세포)의 보충, 및/또는 표적 세포, 조직, 대상 및/또는 독립체에 대한 면역계 활성, 예를 들어, 항체-의존적 세포-매개 세포독성(ADCC) 및/또는 ADCP의 촉발, 생성, 조장 및/또는 향상을 포함하는, 면역 활성 중 하나 이상 또는 모두를 수행할 수 있다.
보편적 항체 결합 모이어티를 포함하는 다양한 항체 결합 모이어티는 본 개시내용에 따라 이용될 수 있다. 항체 결합 모이어티를 확인 및/또는 평가하기 위한 특정 항체 결합 모이어티 및 기술은 WO/2019/023501 및 WO/2019/136442에 기재되어 있고, 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 당업자는 당업계의 추가적인 기술이 본 개시내용에 따른 항체 결합 모이어티를 확인 및/또는 평가하는 데 적합할 수 있다는 것을 인식한다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티는 각각 독립적으로 천연 또는 비천연인 하나 이상의 아미노산 잔기를 포함한다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 단백질 결합 모이어티(예를 들어, 항체 결합 모이어티(예를 들어, 보편적 항체 결합 모이어티))는
Figure pct00088
의 구조식 또는 이의 염 형태를 갖는다, 식 중:
R1, R3 및 R5 각각은 독립적으로 수소 또는 C1-6 지방족, 3 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 탄소환식 고리, 페닐, 8 내지 10원 이환식 방향족 탄소환식 고리, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 단환식 헤테로방향족 고리 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8 내지 10원 이환식 헤테로원자 고리로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이거나; 또는:
R1 및 R1'는 선택적으로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 3 내지 8원 선택적으로 치환된 포화 또는 부분적 불포화 스피로환식 탄소환식 고리 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 스피로환식 복소환식 고리를 형성하거나;
R3 및 R3'는 선택적으로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 3 내지 8원 선택적으로 치환된 포화 또는 부분적 불포화 스피로환식 탄소환식 고리 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 스피로환식 복소환식 고리를 형성하거나;
동일한 탄소 원자에 부착된 R5 기 및 R5' 기는 선택적으로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 3 내지 8원 선택적으로 치환된 포화 또는 부분적 불포화 스피로환식 탄소환식 고리 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 스피로환식 복소환식 고리를 형성하거나;
2개의 R5 기는 선택적으로 이들의 개재 원자와 함께 C1-10 선택적으로 치환된 2가 직선형 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 쇄를 형성하되, 쇄의 1 내지 3개의 메틸렌 단위는 -S-, -SS-, -N(R)-, -O-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -C(O)N(R)-, -N(R)C(O)-, -S(O)-, -S(O)2- 또는 -Cy1-로 독립적 및 선택적으로 대체되며, 각각의 -Cy1-은 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 헤테로아릴렌일이고;
R1', R3' 및 R5' 각각은 독립적으로 수소 또는 선택적으로 치환된 C1-3 지방족이며;
R2, R4 및 R6 각각은 독립적으로 수소, 또는 선택적으로 치환된 C1-4 지방족이거나, 또는:
R2 및 R1은 선택적으로 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원, 선택적으로 치환된 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리를 형성하거나;
R4 및 R3은 선택적으로 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원, 선택적으로 치환된 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리를 형성하거나; 또는
R6 기 및 이의 인접한 R5 기는 선택적으로 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원, 선택적으로 치환된 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리를 형성하거나;
L1은 3가 링커 모이어티이고; 그리고
m 및 n 각각은 독립적으로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20이다.
일부 실시형태에서, L1은 C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택된 선택적으로 치환된 3가기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 선택적 및 독립적으로 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S- 또는 -C(O)O-로 대체된다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 단백질 결합 모이어티(예를 들어, 항체 결합 모이어티(예를 들어, 보편적 항체 결합 모이어티))는
Figure pct00089
의 구조식 또는 이의 염 형태를 갖는다, 식 중:
R7 각각은 독립적으로 수소 또는 C1-6 지방족, 3 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 탄소환식 고리, 페닐, 8 내지 10원 이환식 방향족 탄소환식 고리, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 단환식 헤테로방향족 고리 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8 내지 10원 이환식 헤테로원자 고리로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이거나; 또는:
동일한 탄소 원자에 부착된 R7 기 및 R7' 기는 선택적으로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 3 내지 8원 선택적으로 치환된 포화 또는 부분적 불포화 스피로환식 탄소환식 고리 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 3 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 스피로환식 복소환식 고리를 형성하거나;
R7' 각각은 독립적으로 수소 또는 선택적으로 치환된 C1-3 지방족이며;
R8 각각은 독립적으로 수소, 또는 선택적으로 치환된 C1-4 지방족이거나, 또는:
R8 기 및 이의 인접한 R7 기는 선택적으로 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원, 선택적으로 치환된 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리를 형성하고; 그리고
R9는 수소, 선택적으로 치환된 C1-3 지방족 또는 -C(O)-이다.
일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어, 보편적 항체 결합 모이어티는 펩타이드 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-의 구조식 또는 이의 염 형태를 갖는 모이어티이거나 이를 포함하되, Rc, z 및 Xaa의 각각은 독립적으로 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 하나 이상의 Xaa는 독립적으로 비천연 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 둘 이상의 아미노산 잔기의 측쇄는 함께 연결되어 브리지를 형성할 수 있다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 2개의 시스테인 잔기의 측쇄는 -S-S-를 포함하는 이황화 브리지를 형성할 수 있다(다수의 단백질에서와 같이, 2개의 -SH기에 의해 형성될 수 있음).
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 단백질 결합 모이어티(예를 들어, 항체 결합 모이어티(예를 들어, 보편적 항체 결합 모이어티))는 환식 펩타이드 모이어티, 예를 들어,
Figure pct00090
의 구조식 또는 이의 염 형태를 갖는 모이어티이거나 이를 포함한다:
각각의 Xaa는 독립적으로 아미노산 또는 아미노산 유사체의 잔기이고;
t는 0 내지 50이며;
z는 1 내지 50이고;
L은 링커 모이어티이며;
각각의 Rc는 독립적으로 -La-R'이며;
각각의 La는 독립적으로 공유 결합이거나, 또는 C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택된 선택적으로 치환된 2가 기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S- 또는 -C(O)O-로 선택적 및 독립적으로 대체되고;
각각의 -Cy-는 독립적으로 선택적으로 치환된 2가의 단환식, 이환식 또는 다환식 기이되, 각각의 단환식 고리는 C3-20 지환족 고리, C6-20 아릴 고리, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원 헤테로아릴 고리, 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 20원 헤테로사이클릴 고리로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 R'는 독립적으로 -R, -C(O)R, -CO2R 또는 -SO2R이며;
각각의 R은 독립적으로 -H, 또는 C1-30 지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-30 헤테로지방족, C6-30 아릴, C6-30 아릴지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C6-30 아릴헤테로지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 헤테로사이클릴로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이거나, 또는
2개의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께 공유 결합을 형성하거나, 또는:
동일한 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께, 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 30원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성하거나; 또는
2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 이들의 개재 원자와 함께 개재 원자에 추가로, 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 30원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, 헤테로원자는 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 Rc-(Xaa)z- 또는 이의 염 형태이거나 이를 포함하되, 각각의 변수는 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 단백질 결합 모이어티는 Rc-(Xaa)z- 또는 이의 염 형태이거나 이를 포함하되, 각각의 변수는 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어, 보편적 항체 결합 모이어티는 Rc-(Xaa)z- 또는 이의 염 형태이거나 이를 포함하되, 각 변수는 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00091
또는 이의 염 형태이거나 이를 포함하되, 각각의 변수는 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 단백질 결합 모이어티는
Figure pct00092
또는 이의 염 형태이거나 이를 포함하되, 각각의 변수는 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어, 보편적 항체 결합 모이어티는
Figure pct00093
또는 이의 염 형태이거나 이를 포함하되, 각 변수는 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어, 보편적 항체 결합 모이어티는 Rc-(Xaa)z- 또는,
Figure pct00094
또는 이의 염 형태이고, 펩타이드 단위이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -(Xaa)z-는 펩타이드 단위이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 아미노산 잔기는 브리지, 예를 들어, 선택적으로 링커 모이어티(예를 들어, L)를 통해 측쇄에 의해 형성되는 연결을 형성할 수 있고; 예를 들어, 다수의 폴리펩타이드에서와 같이, 시스테인 잔기는 이황화 브리지를 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 아미노산 잔기(예를 들어, 생리학적 pH 약 7.4에서, "양으로 하전된 아미노산 잔기", XaaP), 예를 들어, 양으로 하전된 측쇄를 갖는 식 A-I의 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 R을 포함한다. 일부 실시형태에서, 적어도 하나 Xaa는 R이다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 APAR이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 RAPA이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 방향족기("방향족 아미노산 잔기", XaaA)를 포함하는 측쇄를 갖는 아미노산 잔기, 예를 들어, 식 A-I의 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 양으로 하전된 아미노산 잔기 및 방향족 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 W를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 양으로 하전된 아미노산 잔기 및 방향족 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 XaaAXaaXaaPXaaP이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 XaaPXaaPXaaXaaA이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 XaaPXaaAXaaP이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 둘 이상의 XaaPXaaAXaaP이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 XaaPXaaAXaaPXaaXaaPXaaAXaaP이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 XaaPXaaPXaaAXaaAXaaP이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 XaaPXaaPXaaPXaaA이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 둘 이상의 XaaAXaaAXaaP이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 잔기는 하나 이상의 프롤린 잔기를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 HWRGWA이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 WGRR이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 RRGW이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 NKFRGKYK이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 NRFRGKYK이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 NARKFYK이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 NARKFYKG이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 HWRGWV이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 KHFRNKD이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 양으로 하전된 아미노산 잔기, 방향족 아미노산 잔기 및 아미노산 잔기, 예를 들어, 음으로 하전된 측쇄를 갖는 식 A-I의 아미노산 잔기(예를 들어, 생리학적 pH 약 7.4에서, "음으로 하전된 아미노산 잔기", XaaN)를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 RHRFNKD를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 RHRFNKD를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 TY를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 TY이다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 TYK를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 TYK이다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 RTY를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 RTY이다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 RTYK를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 RTYK이다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 PAM로부터 선택된 서열이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 WHL을 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 WHL이다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 WXL이거나 이를 포함하되, X는 본 명세서에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티와의 연결에 적합한 것(예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대, D, E 등)이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 WDL을 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 WDL이다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 ELVW를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 ELVW이다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 GELVW를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 GELVW이다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 AWHLGELVW로부터 선택된 서열이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 AWHLGELVW이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 AWDLGELVW로부터 선택된 서열이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 AWDLGELVW이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 AWXLGELVW이거나 이를 포함하되, X는 본 명세서에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티와의 연결에 적합한 것(예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대, D, E 등)이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DCAWHLGELVWCT로부터 선택된 서열이거나 이를 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화결합을 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DCAWHLGELVWCT이거나 이를 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화결합을 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DCAWXLGELVWCT로부터 선택된 서열이거나 이를 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 이황화 결합을 형성할 수 있고, X는 본 명세서에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티와의 연결에 적합한 것(예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대, D, E 등)이다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DCAWXLGELVWCT이거나 이를 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 이황화 결합을 형성할 수 있고, X는 본 명세서에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티와의 연결에 적합한 것(예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대, D, E 등)이다. 일부 실시형태에서, X는 측쇄에서 -COOH 또는 이의 염 또는 활성화된 형태를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DCAWDLGELVWCT로부터 선택된 서열이거나 이를 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화결합을 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DCAWDLGELVWCT이거나 이를 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화결합을 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 Fc-III으로부터 선택된 서열이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 Fc-III이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DpLpAWXLGELVW로부터 선택된 서열이거나 이를 포함하되, X는 본 명세서에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티와의 연결에 적합한 것(예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대, D, E 등)이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DpLpAWXLGELVW이거나 이를 포함하되, X는 본 명세서에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티와의 연결에 적합한 것(예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대, D, E 등)이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DpLpAWDLGELVW로부터 선택된 서열이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DpLpAWDLGELVW이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DpLpAWHLGELVW로부터 선택된 서열이거나 이를 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화결합을 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DpLpAWHLGELVW(예를 들어, FcBP-1)이거나 이를 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화결합을 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 FcBP-1로부터 선택된 서열이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DpLpDCAWXLGELVWCT로부터 선택된 서열이거나 이를 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 이황화 결합을 형성할 수 있고, X는 본 명세서에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티와의 연결에 적합한 것(예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대, D, E 등)이다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DpLpDCAWXLGELVWCT이거나 이를 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 이황화 결합을 형성할 수 있고, X는 본 명세서에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티와의 연결에 적합한 것(예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대, D, E 등)이다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DpLpDCAWHLGELVWCT로부터 선택된 서열이거나 이를 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화결합을 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DpLpDCAWHLGELVWCT(예를 들어, FcBP-2)이거나 이를 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화결합을 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DpLpDCAWDLGELVWCT로부터 선택된 서열이거나 이를 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화결합을 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 DpLpDCAWDLGELVWCT이거나 이를 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화결합을 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 FcBP-2로부터 선택된 서열이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 CDCAWXLGELVWCTC로부터 선택된 서열이거나 이를 포함하되, 첫번째 및 마지막 시스테인, 및 서열 중간의 2개의 시스테인은 각각 독립적으로 천연 단백질에서와 같이 이황화결합을 형성할 수 있고, X는 본 명세서에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티와의 연결에 적합한 것(예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대, D, E 등)이다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 CDCAWXLGELVWCTC이거나 이를 포함하되, 첫번째 및 마지막 시스테인, 및 서열 중간의 2개의 시스테인은 각각 독립적으로 천연 단백질에서와 같이 이황화결합을 형성할 수 있고, X는 본 명세서에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티와의 연결에 적합한 것(예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대, D, E 등)이다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 CDCAWHLGELVWCTC로부터 선택된 서열이거나 이를 포함하되, 첫 번째 시스테인 및 마지막 시스테인, 및 서열 중간의 2개의 시스테인은 천연 단백질에서와 같이 각각 독립적으로 이황화결합을 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 CDCAWHLGELVWCTC이거나 이를 포함하되, 첫 번째 시스테인 및 마지막 시스테인, 및 서열 중간의 2개의 시스테인은 천연 단백질에서와 같이 각각 독립적으로 이황화결합을 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 CDCAWDLGELVWCTC로부터 선택된 서열이거나 이를 포함하되, 첫 번째 시스테인 및 마지막 시스테인, 및 서열 중간의 2개의 시스테인은 천연 단백질에서와 같이 각각 독립적으로 이황화결합을 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 CDCAWDLGELVWCTC이거나 이를 포함하되, 첫 번째 시스테인 및 마지막 시스테인, 및 서열 중간의 2개의 시스테인은 천연 단백질에서와 같이 각각 독립적으로 이황화결합을 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 Fc-III-4c로부터 선택된 서열이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 FcRM으로부터 선택된 서열이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 환식 펩타이드 단위이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 환식 펩타이드 단위는 측쇄의 아미노기 및 C-말단 -COOH의 아미노기에 의해 형성된 아마이드기를 포함한다. 당업자는, 다양한 실시형태에서, 펩타이드 단위가 다른 모이어티에 연결될 때, 펩타이드 단위의 아미노산 잔기가 다양한 위치, 예를 들어, 이의 골격, 이의 측쇄 등을 통해 연결될 수 있다는 것을 인식한다. 일부 실시형태에서, 아미노산 잔기는 연결을 위해 변형된다. 일부 실시형태에서, 아미노산 잔기는 연결을 위해 다른 적합한 잔기로 대체되지만, 펩타이드 단위의 하나 이상의 특성 및/또는 활성(예를 들어, 본 명세서에 기재된 바와 같은 항체에 대한 결합)을 유지한다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 아미노산 잔기는 -COOH 또는 이의 염 또는 활성화된 형태를 포함하는 측쇄를 갖는 아미노산 잔기로 대체된다(예를 들어, 측쇄는 -CH2-COOH 또는 이의 염 또는 활성화된 형태임). 본 명세서에 예시된 바와 같이, 다양한 서열에서, H는 D로 대체될 수 있다(예를 들어, WHL를 포함하는 다양한 펩타이드 단위에서). 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 -COOH 또는 이의 염 또는 활성화된 형태를 통해, 예를 들어, 예를 들어, -CON(R')-의 형성을 통해 다른 모이어티에 연결된다. 일부 실시형태에서, R'는 -H이다. 일부 실시형태에서, -COOH는 아미노산 잔기의 측쇄에 있다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 서열(예를 들어, DCAWHLGELVWCT)에서, 1 내지 5(예를 들어, 1, 2, 3, 4 또는 5)개의 아미노산 잔기는 다른 아미노산 잔기로 독립적 및 선택적으로 대체될 수 있으며, 1 내지 5(예를 들어, 1, 2, 3, 4 또는 5)개의 아미노산 잔기는 독립적 및 선택적으로 결실될 수 있고/있거나 1 내지 5(예를 들어, 1, 2, 3, 4 또는 5)개의 아미노산 잔기는 독립적 및 선택적으로 삽입될 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 모이어티는 이의 N-말단을 통해 분자의 나머지에 연결된다. 일부 실시형태에서, 이는 C-말단을 통해 분자의 나머지에 연결된다. 일부 실시형태에서, 이는 아미노산 잔기(예를 들어, 본 개시내용에 기재된 바와 같은 다양한 X 잔기)의 측쇄를 통해 분자의 나머지에 연결된다. 일부 실시형태에서, 2개의 시스테인 잔기는 독립적 및 선택적으로 이황화결합을 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 대체, 결실 및 삽입의 총 수는 10개 이하(예를 들어, 0, 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개 이하)이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 0이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 1 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 2 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 3 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 4 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 5 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 6 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 7 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 8 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 9 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 10 이하이다. 일부 실시형태에서, 삽입이 없다. 일부 실시형태에서, 결실이 없다.
일부 실시형태에서, -(Xaa)z-는 [X1]p1[X2]p2-X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12-[X13]p13-[X14]p14[X15]p15[X16]p16이거나 이를 포함하되, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, X12 및 X13 각각은 독립적으로, 예를 들어, 식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기이고, p1, p2, p13, p14, p15 및 p16 각각은 독립적으로 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이다. 일부 실시형태에서, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, X12 및 X13 각각은 독립적으로 식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, X12 및 X13 각각은 독립적으로 천연 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, X12 및 X13 중 하나 이상은 독립적으로 본 개시내용에 기재된 바와 같은 비천연 아미노산 잔기이다.
일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 다른 아미노산 잔기의 작용기와 반응할 수 있는 아미노산 잔기의 작용기를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 다른 아미노산 잔기의 측쇄의 다른 작용기와 반응하여 결합을 형성할 수 있는 작용기를 포함하는 측쇄를 갖는 아미노산 잔기를 포함한다(예를 들어, 표 A-1, 표 1 등에 기재되어 있는 모이어티를 참조). 일부 실시형태에서, 하나의 아미노산 잔기의 하나의 작용기는 다른 아미노산 잔기의 작용기에 연결되어 결합(또는 브리지)를 형성한다. 결합은 펩타이드 단위의 골격 원자에 결합되고, 골격 원자를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 단위는 이웃하지 않는 아미노산 잔기의 2개의 측쇄에 의해 형성되는 결합을 포함한다. 일부 실시형태에서, 결합은 2개의 이웃하지 않는 아미노산 잔기의 2개의 골격 원자에 의해 결합된다. 일부 실시형태에서, 결합에 결합된 골격 원자는 둘 다 탄소 원자이다. 일부 실시형태에서, 결합은 Lb의 구조를 갖되, Lb는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 La이고, La는 공유 결합이 아니다. 일부 실시형태에서, La는 -Cy-를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는 -Cy-를 포함하되, -Cy-는 선택적으로 치환된 헤테로아릴이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는
Figure pct00095
이다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00096
이다. 일부 실시형태에서, 이러한 La는 하나의 아미노산 잔기 측쇄의 -N3기, 및 다른 아미노산 잔기 측쇄의
Figure pct00097
에 의해 형성될 수 있다. 일부 실시형태에서, 결합은, 예를 들어, 2개의 시스테인 잔기의 2개의 티올기의 연결을 통해 형성된다. 일부 실시형태에서, La는 -S-S-를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는 -CH2-S-S-CH2-이다. 일부 실시형태에서, 결합은 아미노기(예를 들어, 라이신 잔기 측쇄에서 -NH2) 및 카복실산기(예를 들어, 아스파르트산 또는 글루탐산 잔기 측쇄에서 -COOH)의 연결을 통해 형성된다. 일부 실시형태에서, La는 -C(O)-N(R')-를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는 -C(O)-NH-를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는 -CH2CONH-(CH2)3-를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는 -C(O)-N(R')-를 포함하되, R'는 R이고, 펩타이드 골격 상의 R기와 함께 (예를 들어, A-34에서) 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, La는 -(CH2)2-N(R')-CO--(CH2)2-이다. 일부 실시형태에서, -Cy는 선택적으로 치환된 페닐렌이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 선택적으로 치환된 1,2-페닐렌이다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00098
이다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00099
이다. 일부 실시형태에서, La는 선택적으로 치환된 2가 C2-20 2가 지방족이다. 일부 실시형태에서, La는 선택적으로 치환된 -(CH2)9-CH=CH-(CH2)9-이다. 일부 실시형태에서, La는 -(CH2)3-CH=CH-(CH2)3-이다.
일부 실시형태에서, 결합에 결합된 2개의 아미노산 잔기는 이들 사이에 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15개 또는 15개 초과의 아미노산 잔기(결합에 결합된 2개의 아미노산 잔기를 제외)에 의해 분리된다. 일부 실시형태에서, 숫자는 1이다. 일부 실시형태에서, 숫자는 2이다. 일부 실시형태에서, 숫자는 3이다. 일부 실시형태에서, 숫자는 4이다. 일부 실시형태에서, 숫자는 5이다. 일부 실시형태에서, 숫자는 6이다. 일부 실시형태에서, 숫자는 7이다. 일부 실시형태에서, 숫자는 8이다. 일부 실시형태에서, 숫자는 9이다. 일부 실시형태에서, 숫자는 10이다. 일부 실시형태에서, 숫자는 11이다. 일부 실시형태에서, 숫자는 12이다. 일부 실시형태에서, 숫자는 13이다. 일부 실시형태에서, 숫자는 14이다. 일부 실시형태에서, 숫자는 15이다.
일부 실시형태에서, p1, p2, p13, p14, p15 및 p16 각각은 0이다. 일부 실시형태에서, -(Xaa)z-는 -X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12-이거나 이를 포함하되, 여기서:
X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11 및 X12 각각은 독립적으로 아미노산 잔기이고;
X6은 XaaA 또는 XaaP이며;
X9는 XaaN이고; 그리고
X12는 XaaA 또는 XaaP이다.
일부 실시형태에서, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11 및 X12 각각은 독립적으로 본 개시내용에 기재된 바와 같은 식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, X5는 XaaA 또는 XaaP이다. 일부 실시형태에서, X5는 XaaA이다. 일부 실시형태에서, X5는 XaaP이다. 일부 실시형태에서, X5는 아미노산 잔기이며, 이의 측쇄는 선택적으로 치환된 포화, 부분적 포화 또는 방향족 고리를 포함한다. 일부 실시형태에서, X5는
Figure pct00100
이다. 일부 실시형태에서, X5는
Figure pct00101
이다. 일부 실시형태에서, X6은 XaaA이다. 일부 실시형태에서, X6은 XaaP이다. 일부 실시형태에서, X6은 His이다. 일부 실시형태에서, X12는 XaaA이다. 일부 실시형태에서, X12는 XaaP이다. 일부 실시형태에서, X9는 Asp이다. 일부 실시형태에서, X9는 Glu이다. 일부 실시형태에서, X12는
Figure pct00102
이다. 일부 실시형태에서, X12는
Figure pct00103
이다. 일부 실시형태에서, X7, X10 및 X11 각각은 독립적으로 소수성 측쇄를 갖는 아미노산 잔기("소수성 아미노산 잔기", XaaH)이다. 일부 실시형태에서, X7은 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X7은
Figure pct00104
이다. 일부 실시형태에서, X7은 Val이다. 일부 실시형태에서, X10은 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X10은 Met이다. 일부 실시형태에서, X10은
Figure pct00105
이다. 일부 실시형태에서, X11은 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X11은
Figure pct00106
이다. 일부 실시형태에서, X8은 Gly이다. 일부 실시형태에서, X4는 Pro이다. 일부 실시형태에서, X3은 Lys이다. 일부 실시형태에서, X12의 -COOH는 Lys의 측쇄 아미노기(X3)와 아마이드 결합을 형성하고, Lys의 다른 아미노기(X3)는 링커 모이어티에 연결된 다음, 표적 결합 모이어티에 연결된다.
일부 실시형태에서, -(Xaa)z-는 -X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12-이거나 이를 포함하되, 여기서:
X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11 및 X12 각각은 독립적으로 아미노산 잔기이고;
적어도 2개의 아미노산 잔기는 하나 이상의 결합 Lb를 통해 연결되며;
Lb는 C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택된 선택적으로 치환된 2가 기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S- 또는 -C(O)O-로 선택적 및 독립적으로 대체되되, Lb는 하나의 아미노산 잔기의 골격 원자 및 다른 아미노산 잔기의 골격 원자에 결합되고, 골격 원자를 포함하지 않으며;
X6은 XaaA 또는 XaaP이며;
X9는 XaaN이고; 그리고
X12는 XaaA 또는 XaaP이다.
일부 실시형태에서, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11 및 X12 각각은 독립적으로 본 개시내용에 기재된 바와 같은 식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 2개의 이웃하지 않는 아미노산 잔기는 Lb에 의해 연결된다. 일부 실시형태에서, X5와 X10은 Lb에 의해 연결된다. 일부 실시형태에서, 1개의 결합 Lb가 있다. 일부 실시형태에서, X6은 XaaA이다. 일부 실시형태에서, X6은 XaaP이다. 일부 실시형태에서, X6은 His이다. 일부 실시형태에서, X9는 Asp이다. 일부 실시형태에서, X9는 Glu이다. 일부 실시형태에서, X12는 XaaA이다. 일부 실시형태에서, X12는
Figure pct00107
이다. 일부 실시형태에서, X12는
Figure pct00108
이다. 일부 실시형태에서, X12는
Figure pct00109
이다. 일부 실시형태에서, X4, X7 및 X11 각각은 독립적으로 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X4는 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X4는 Ala이다. 일부 실시형태에서, X7은 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X7은
Figure pct00110
이다. 일부 실시형태에서, X11은 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X11은
Figure pct00111
이다. 일부 실시형태에서, X8은 Gly이다. 일부 실시형태에서, X3은 Lys이다. 일부 실시형태에서, X12의 -COOH는 Lys의 측쇄 아미노기(X3)와 아마이드 결합을 형성하고, Lys의 다른 아미노기(X3)는 링커 모이어티에 연결된 다음, 표적 결합 모이어티에 연결된다. 일부 실시형태에서, Lb는
Figure pct00112
이다. 일부 실시형태에서, Lb는
Figure pct00113
이다. 일부 실시형태에서, Lb는 2개의 상이한 아미노산 잔기의 2개의 알파-탄소 원자를 연결한다. 일부 실시형태에서, X5와 X10는 둘 다 Cys이고, 이들의 측쇄의 2개의 -SH 기는 -S-S-를 형성한다(Lb는 -CH2-S-S-CH2-이다).
일부 실시형태에서, -(Xaa)z-는 -X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12-이거나 이를 포함하되, 여기서:
X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11 및 X12 각각은 독립적으로 아미노산 잔기이고;
적어도 2개의 아미노산 잔기는 하나 이상의 결합 Lb를 통해 연결되며;
Lb는 C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택된 선택적으로 치환된 2가 기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S- 또는 -C(O)O-로 선택적 및 독립적으로 대체되되, Lb는 하나의 아미노산 잔기의 골격 원자 및 다른 아미노산 잔기의 골격 원자에 결합되고, 골격 원자를 포함하지 않으며;
X4는 XaaA이고;
X5는 XaaA 또는 XaaP이며;
X8은 XaaN이고; 그리고
X11은 XaaA이다.
일부 실시형태에서, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11 및 X12 각각은 독립적으로 본 개시내용에 기재된 바와 같은 식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 2개의 이웃하지 않는 아미노산 잔기는 Lb에 의해 연결된다. 일부 실시형태에서, 1개의 결합 Lb가 있다. 일부 실시형태에서, X2와 X12는 Lb에 의해 연결된다. 일부 실시형태에서, Lb는 -CH2-S-S-CH2-이다. 일부 실시형태에서, Lb는 -CH2-CH2-S-CH2-이다. 일부 실시형태에서, Lb는
Figure pct00114
이다. 일부 실시형태에서, Lb는
Figure pct00115
이다. 일부 실시형태에서, Lb는 -CH2CH2CO-N(R')-CH2CH2-이다. 일부 실시형태에서, R'는 골격 원자 상의 R기와 함께 취해져서, -N(R')-CH2CH2-가 결합되어, 예를 들어, A-34에서와 같은 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 3-, 4-, 5-, 6-, 7- 또는 8-원이다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 단환식이다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 포화된다. 일부 실시형태에서, Lb는
Figure pct00116
이다. 일부 실시형태에서, Lb는 2개의 상이한 아미노산 잔기의 2개의 알파-탄소 원자를 연결한다. 일부 실시형태에서, X4는 XaaA이다. 일부 실시형태에서, X4는 Tyr이다. 일부 실시형태에서, X5는 XaaA이다. 일부 실시형태에서, X5는 XaaP이다. 일부 실시형태에서, X5는 His이다. 일부 실시형태에서, X8은 Asp이다. 일부 실시형태에서, X8은 Glu이다. X11은 Tyr이다. 일부 실시형태에서, X2와 X12는 둘 다 Cys이고, 이들의 측쇄의 2개의 -SH 기는 -S-S-를 형성한다(Lb는 -CH2-S-S-CH2-이다). 일부 실시형태에서, X3, X6, X9 및 X10 각각은 독립적으로 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X3은 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X3은 Ala이다. 일부 실시형태에서, X6은 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X6은 Leu이다. 일부 실시형태에서, X9는 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X9는 Leu이다. 일부 실시형태에서, X9는
Figure pct00117
이다. 일부 실시형태에서, X10은 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X10은 Val이다. 일부 실시형태에서, X10은
Figure pct00118
이다. 일부 실시형태에서, X7은 Gly이다. 일부 실시형태에서, p1은 1이다. 일부 실시형태에서, X1은 Asp이다. 일부 실시형태에서, p13은 1이다. 일부 실시형태에서, p14, p15 및 p16은 0이다. 일부 실시형태에서, X13은 극성 비하전 측쇄를 포함하는 아미노산 잔기(예를 들어, 생리학적 pH에서, "극성 비하전 아미노산 잔기", XaaL)이다. 일부 실시형태에서, X13은 Thr이다. 일부 실시형태에서, X13은 Val이다. 일부 실시형태에서, p13은 0이다. 일부 실시형태에서, Rc는 -NHCH2CH(OH)CH3이다. 일부 실시형태에서, Rc는 (R)-NHCH2CH(OH)CH3이다. 일부 실시형태에서, Rc는 (S)-NHCH2CH(OH)CH3이다.
일부 실시형태에서, -(Xaa)z-는 -X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12-이거나 이를 포함하되, 여기서:
X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11 및 X12 각각은 독립적으로 아미노산 잔기이고;
적어도 2개의 아미노산 잔기는 하나 이상의 결합 Lb를 통해 연결되며;
Lb는 C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택된 선택적으로 치환된 2가 기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S- 또는 -C(O)O-로 선택적 및 독립적으로 대체되되, Lb는 하나의 아미노산 잔기의 골격 원자 및 다른 아미노산 잔기의 골격 원자에 결합되고, 골격 원자를 포함하지 않으며;
X5는 XaaA 또는 XaaP이며;
X8은 XaaN이고; 그리고
X11은 XaaA이다.
일부 실시형태에서, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11 및 X12 각각은 독립적으로 본 개시내용에 기재된 바와 같은 식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 2개의 이웃하지 않는 아미노산 잔기는 Lb에 의해 연결된다. 일부 실시형태에서, 1개의 결합 Lb가 있다. 일부 실시형태에서, 2개 이상의 결합 Lb가 있다. 일부 실시형태에서, 2개의 결합 Lb가 있다. 일부 실시형태에서, X2와 X12는 Lb에 의해 연결된다. 일부 실시형태에서, X4와 X9는 Lb에 의해 연결된다. 일부 실시형태에서, X4와 X10은 Lb에 의해 연결된다. 일부 실시형태에서, Lb는 -CH2-S-S-CH2-이다. 일부 실시형태에서, Lb는
Figure pct00119
이다. 일부 실시형태에서, Lb는
Figure pct00120
이다. 일부 실시형태에서, X2와 X12는 둘 다 Cys이고, 이들의 측쇄의 2개의 -SH 기는 -S-S-를 형성한다(Lb는 -CH2-S-S-CH2-이다). 일부 실시형태에서, X4와 X10은 둘 다 Cys이고, 이들의 측쇄의 2개의 -SH 기는 -S-S-를 형성한다(Lb는 -CH2-S-S-CH2-이다). 일부 실시형태에서, X4와 X9는 Lb에 의해 연결되되, Lb는
Figure pct00121
이다. 일부 실시형태에서, X4와 X9는 Lb에 의해 연결되되, Lb는
Figure pct00122
이다. 일부 실시형태에서, X5는 XaaA이다. 일부 실시형태에서, X5는 XaaP이다. 일부 실시형태에서, X5는 His이다. 일부 실시형태에서, X8은 Asp이다. 일부 실시형태에서, X8은 Glu이다. 일부 실시형태에서, X11은 Tyr이다. 일부 실시형태에서, X11은
Figure pct00123
이다. 일부 실시형태에서, X2 및 X12는 Lb에 의해 연결되되, Lb는 -CH2-S-CH2CH2-이다. 일부 실시형태에서, Lb는 2개의 상이한 아미노산 잔기의 2개의 알파-탄소 원자를 연결한다. 일부 실시형태에서, X3, X6 및 X9 각각은 독립적으로 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X3은 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X3은 Ala이다. 일부 실시형태에서, X6은 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X6은 Leu이다. 일부 실시형태에서, X6은
Figure pct00124
이다. 일부 실시형태에서, X9는 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X9는 Leu이다. 일부 실시형태에서, X9는
Figure pct00125
이다. 일부 실시형태에서, X10은 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X10은 Val이다. 일부 실시형태에서, X7은 Gly이다. 일부 실시형태에서, p1은 1이다. 일부 실시형태에서, X1은 XaaN이다. 일부 실시형태에서, X1은 Asp이다. 일부 실시형태에서, X1은 Glu이다. 일부 실시형태에서, p13은 1이다. 일부 실시형태에서, p14, p15 및 p16은 0이다. 일부 실시형태에서, X13은 XaaL이다. 일부 실시형태에서, X13은 Thr이다. 일부 실시형태에서, X13은 Val이다.
일부 실시형태에서, -(Xaa)z-는 -X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15X16-이거나 이를 포함하고, 여기서:
X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, X12, X13, X14, X15 및 X16 각각은 독립적으로 아미노산 잔기이고;
적어도 2개의 아미노산 잔기는 결합 Lb를 통해 연결되며;
Lb는 C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택된 선택적으로 치환된 2가 기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S- 또는 -C(O)O-로 선택적 및 독립적으로 대체되되, Lb는 하나의 아미노산 잔기의 골격 원자 및 다른 아미노산 잔기의 골격 원자에 결합되고, 골격 원자를 포함하지 않으며;
X3은 XaaN이고;
X6은 XaaA이며;
X7은 XaaA 또는 XaaP이고;
X9는 XaaN이고; 그리고
X13은 XaaA이다.
일부 실시형태에서, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11 및 X12 각각은 독립적으로 본 개시내용에 기재된 바와 같은 식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 2개의 이웃하지 않는 아미노산 잔기는 Lb에 의해 연결된다. 일부 실시형태에서, 1개의 결합 Lb가 있다. 일부 실시형태에서, 2개 이상의 결합 Lb가 있다. 일부 실시형태에서, 2개의 결합 Lb가 있다. 일부 실시형태에서, X2는 Lb에 의해 X16에 연결된다. 일부 실시형태에서, X4는 Lb에 의해 X14에 연결된다. 일부 실시형태에서, X2와 X16은 둘 다 Cys이고, 이들의 측쇄의 2개의 -SH 기는 -S-S-를 형성한다(Lb는 -CH2-S-S-CH2-이다). 일부 실시형태에서, X4와 X14는 둘 다 Cys이고, 이들의 측쇄의 2개의 -SH 기는 -S-S-를 형성한다(Lb는 -CH2-S-S-CH2-이다). 일부 실시형태에서, Lb는 2개의 상이한 아미노산 잔기의 2개의 알파-탄소 원자를 연결한다. 일부 실시형태에서, X3은 Asp이다. 일부 실시형태에서, X3은 Glu이다. 일부 실시형태에서, X5는 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X5는 Ala이다. 일부 실시형태에서, X6은 XaaA이다. 일부 실시형태에서, X6은 Tyr이다. 일부 실시형태에서, X7은 XaaA이다. 일부 실시형태에서, X7은 XaaP이다. 일부 실시형태에서, X7은 His이다. 일부 실시형태에서, X8은 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X8은 Ala이다. 일부 실시형태에서, X9는 Gly이다. 일부 실시형태에서, X10은 Asp이다. 일부 실시형태에서, X10은 Glu이다. 일부 실시형태에서, X11은 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X11은 Leu이다. 일부 실시형태에서, X12는 XaaH이다. 일부 실시형태에서, X12는 Val이다. 일부 실시형태에서, X13은 XaaA이다. 일부 실시형태에서, X13은 Tyr이다. 일부 실시형태에서, X15는 XaaL이다. 일부 실시형태에서, X15는 Thr이다. 일부 실시형태에서, X15는 Val이다. 일부 실시형태에서, p1은 1이다. 일부 실시형태에서, 일부 실시형태에서, X1은 XaaN이다. 일부 실시형태에서, X1은 Asp이다. 일부 실시형태에서, X1은 Glu이다.
당업자에 의해 인식될 바와 같이, 아미노산 잔기는 by 유사한 특성을 갖는 다른 아미노산 잔기에 의해 대체될 수 있고, 예를 들어, 하나의 XaaH(예를 들어, Val, Leu 등)는 다른 XaaH(예를 들어, Leu, Ile, Ala 등)으로 대체될 수 있으며, 하나의 XaaA는 다른 XaaA로 대체될 수 있고, 하나의 XaaP는 다른 XaaP로 대체될 수 있고, 하나의 XaaN은 다른 XaaN으로 대체될 수 있으며, 하나의 XaaL은 다른 XaaL로 대체될 수 있으며, 기타 등등이다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 표 A-1의 선택적으로 치환된 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 단백질 결합 모이어티는 표 A-1의 선택적으로 치환된 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어, 보편적 항체 결합 모이어티는 표 A-1의 선택적으로 치환된 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 표 A-1로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 단백질 결합 모이어티는 표 A-1로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어, 보편적 항체 결합 모이어티는 표 A-1로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, C-말단 및/또는 N-말단은 (예를 들어, C-말단에 대해, -COOH를 -C(O)NH2와 같은 -C(O)N(R')2로 전환시킴으로써; N-말단에 대해, CH3C(O)-와 같은 R'C(O)-를 아미노기에 첨가함으로써) 선택적으로 캡핑된다.
[표 A-1]
Figure pct00126
Figure pct00127
Figure pct00128
Figure pct00129
Figure pct00130
Figure pct00131
Figure pct00132
Figure pct00133
Figure pct00134
Figure pct00135
Figure pct00136
Figure pct00137
Figure pct00138
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 본 명세서에 기재된 항체 결합 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 단백질 결합 모이어티는 본 명세서에 기재된 항체 결합 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 아미노산 잔기의 -COOH 및/또는 아미노기, 예를 들어, C-말단 또는 N-말단에서의 이것들은 선택적으로 캡핑된다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, -COOH 기(예를 들어, C-말단 -COOH)은 아마이드화되고(예를 들어, -CON(R')2, 예를 들어, -C(O)NHR(예를 들어, -C(O)NH2)로 전환됨), 일부 실시형태에서, 아미노기, 예를 들어, -NH2(예를 들어, N-말단 -NH2)는 (예를 들어, 일부 실시형태에서, -NH2의 -NHR'(예를 들어, -NHC(O)R(예를 들어, -NHC(O)CH3))로의 전환에 의해) R'- 또는 R'C(O)-로 캡핑된다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-1이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-2이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-3이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-4이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-5이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-6이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-7이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-8이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-9이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-10이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-11이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-12이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-13이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-14이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-15이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-16이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-17이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-18이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-19이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-20이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-21이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-22이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-23이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-24이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-25이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-26이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-27이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-28이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-29이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-30이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-31이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-32이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-33이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-34이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-35이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-36이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-37이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-38이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-39이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-40이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-41이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-42이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-43이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-44이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-45이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-46이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-47이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-48이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된 A-49이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 보편적 항체 결합 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-1이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-2이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-3이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-4이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-5이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-6이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-7이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-8이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-9이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-10이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-11이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-12이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-13이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-14이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-15이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-16이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-17이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-18이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-19이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-20이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-21이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-22이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-23이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-24이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-25이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-26이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-27이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-28이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-29이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-30이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-31이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-32이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-33이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-34이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-35이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-36이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-37이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-38이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-39이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-40이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-41이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-42이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-43이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-44이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-45이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-46이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-47이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-48이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 A-49이다. 일부 실시형태에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 보편적 항체 결합 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 단백질 결합 모이어티(예를 들어, 항체 결합 모이어티(예를 들어, 보편적 항체 결합 모이어티))는 펩타이드 단위를 포함하고, 펩타이드 단위의 C-말단을 통해 링커 모이어티에 연결된다. 일부 실시형태에서, 이는 펩타이드 단위의 N-말단을 통해 링커 모이어티에 연결된다. 일부 실시형태에서, 이는 펩타이드 단위의 측쇄기를 통해 링커에 연결된다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어, 보편적 항체 결합 모이어티는 펩타이드 단위를 포함하고, 선택적으로 펩타이드 단위의 C-말단을 통하여 링커 모이어티를 통해 표적 결합 모이어티에 연결된다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 단백질 결합 모이어티(예를 들어, 항체 결합 모이어티(예를 들어, 보편적 항체 결합 모이어티))는 펩타이드 단위를 포함하고, 선택적으로 펩타이드 단위의 N-말단을 통해 링커 모이어티를 통해서 표적 결합 모이어티에 연결된다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 단백질 결합 모이어티(예를 들어, 항체 결합 모이어티(예를 들어, 보편적 항체 결합 모이어티))는 펩타이드 단위를 포함하고, 선택적으로 펩타이드 단위의 측쇄를 통해 링커 모이어티를 통해서 표적 결합 모이어티에 연결된다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 (DCAWHLGELVWCT)-이거나 이를 포함하되, 1 내지 5(예를 들어, 1, 2, 3, 4 또는 5)개의 아미노산 잔기는 다른 아미노산 잔기로 독립적 및 선택적으로 대체될 수 있으며, 1 내지 5(예를 들어, 1, 2, 3, 4 또는 5)개의 아미노산 잔기는 독립적 및 선택적으로 결실될 수 있고/있거나 1 내지 5(예를 들어, 1, 2, 3, 4 또는 5)개의 아미노산 잔기는 독립적 및 선택적으로 삽입될 수 있다. 일부 실시형태에서, 이는 N-말단을 통해 분자의 나머지에 연결된다. 일부 실시형태에서, 이는 C-말단을 통해 분자의 나머지에 연결된다. 일부 실시형태에서, 이는 아미노산 잔기(예를 들어, 본 개시내용에 기재된 바와 같은 다양한 X 잔기)의 측쇄를 통해 분자의 나머지에 연결된다. 일부 실시형태에서, 2개의 시스테인 잔기는 이황화결합을 형성한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는,
Figure pct00139
또는
Figure pct00140
이거나 이를 포함하되, X는 화합물 또는 제제의 나머지에 결합된 아미노산 잔기이고, 1 내지 5(예를 들어, 1, 2, 3, 4 또는 5)개의 아미노산 잔기는 독립적 및 선택적으로 다른 아미노산 잔기로 대체되고, 1 내지 5(예를 들어, 1, 2, 3, 4 또는 5)개의 아미노산 잔기는 독립적 및 선택적으로 결실되고/되거나 1 내지 5(예를 들어, 1, 2, 3, 4 또는 5)개의 아미노산 잔기는 독립적 및 선택적으로 삽입될 수 있다. 일부 실시형태에서, 대체, 결실 및 삽입의 총 수는 10개 이하(예를 들어, 0, 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개 이하)이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 0이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 1 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 2 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 3 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 4 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 5 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 6 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 7 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 8 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 9 이하이다. 일부 실시형태에서, 총 수는 10 이하이다. 일부 실시형태에서, 삽입이 없다. 일부 실시형태에서, 결실이 없다. 일부 실시형태에서, 대체는 없다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00141
또는
Figure pct00142
이거나, 이들을 포함하되, X는 화합물 또는 제제의 나머지에 결합된 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, X는 -N(R')-CH(-)-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, X는 -N(R')-CH(-LLG1-)-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, X는 -N(R')-CH(-LLG1-LLG2-)-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, X는 -N(R')-CH(-LLG1-LLG2-LLG3-)-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, X는 -N(R')-CH(-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-)-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00143
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00144
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00145
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00146
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, X는
Figure pct00147
의 잔기이다. 일부 실시형태에서, X는
Figure pct00148
의 잔기이다. 일부 실시형태에서, X는
Figure pct00149
의 잔기이다. 일부 실시형태에서, X는
Figure pct00150
의 잔기이다. 일부 실시형태에서, X는
Figure pct00151
의 잔기이다. 일부 실시형태에서, X는
Figure pct00152
의 잔기이다. 일부 실시형태에서, X는
Figure pct00153
의 잔기이다. 일부 실시형태에서, X는
Figure pct00154
의 잔기이다. 일부 실시형태에서, X는
Figure pct00155
의 잔기이다. 일부 실시형태에서, X는 K이다. 일부 실시형태에서, X는 D이다. 일부 실시형태에서, X는 Dab의 잔기이다. 일부 실시형태에서, X는 E이다. 일부 실시형태에서, X는
Figure pct00156
의 잔기이다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은
Figure pct00157
Figure pct00158
Figure pct00159
의 구조식, 또는 이의 염, 또는 이의 에스터, 또는 이의 활성화된 에스터, 또는 이의 입체이성질체, 또는 입체이성질체의 에스터 또는 활성화된 에스터를 갖는 아미노산을 제공한다. 일부 실시형태에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어, 보편적 항체 결합 모이어티는 분자량이, 예를 들어, 10000, 9000, 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000, 2000, 1500, 1000 미만 등인 소분자 독립체이거나 이를 포함한다. 적합한 이러한 항체 결합 모이어티는 소분자 Fc 결합 모이어티, 예를 들어, 미국 특허 제9,745,339호, 미국 특허 공개 제201/30131321호 등에 기재되어 있는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티는 이의 대응하는 화합물이 미국 특허 제9,745,339호 또는 미국 특허 제2013/0131321호에 기재되어 있는 화합물의 구조를 갖고, 이들 각각의 화합물은 독립적으로 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티 ABT는 H-ABT가 미국 특허 제9,745,339호 또는 미국 특허 제2013/0131321호에 기재되어 있는 화합물의 구조를 갖고, 이들 각각의 화합물은 독립적으로 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 일부 실시형태에서, 이러한 화합물은 항체에 결합할 수 있다. 일부 실시형태에서, 이러한 화합물은 항체의 Fc 영역에 결합할 수 있다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된
Figure pct00160
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00161
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된
Figure pct00162
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00163
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00164
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된
Figure pct00165
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00166
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된
Figure pct00167
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00168
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00169
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00170
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된
Figure pct00171
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된
Figure pct00172
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00173
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된
Figure pct00174
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00175
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00176
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된
Figure pct00177
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00178
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 선택적으로 치환된
Figure pct00179
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00180
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00181
이거나 이를 포함하되, 각 변수는 독립적으로 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, m은 4 내지 13이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는
Figure pct00182
이거나 이를 포함하되, b는 1 내지 20이고, 각각의 다른 변수는 독립적으로 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, b는 4 내지 13이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00183
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00184
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00185
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00186
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00187
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00188
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00189
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00190
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00191
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00192
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00193
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00194
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00195
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00196
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00197
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00198
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00199
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00200
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00201
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -NH-는 Rc 기에 결합된다. 일부 실시형태에서, Rc는 R-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, Rc는 CH3C(O)-이다. 일부 실시형태에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 또는 Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00202
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 또는 Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00203
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어,
Figure pct00204
또는 Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00205
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어,
Figure pct00206
또는 Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00207
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어,
Figure pct00208
또는 Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00209
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어,
Figure pct00210
또는 Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00211
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어,
Figure pct00212
또는 Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00213
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어,
Figure pct00214
또는 Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00215
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어,
Figure pct00216
또는 Rc-(Xaa)z-는
Figure pct00217
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는 Z33 펩타이드 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는 -FNMQQQRRFYEALHDPNLNEEQRNAKIKSIRDD-NH2 또는 이의 단편이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는 FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNAKIKSIRDDC 또는 이의 단편이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어,
Figure pct00218
또는 Rc-(Xaa)z-는, 펩타이드의 모이어티, 예컨대, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNAKIKSIRDDC, RGNCAYHRGQLVWCTYH, RGNCAYHKGQLVWCTYH, RGNCKYHRGQLVWCTYH, RGNCAWHRGKLVWCTYH, RGNCKWHRGELVWCTYH, RGNCKWHRGQLVWCTYH, RGNCKYHLGELVWCTYH, RGNCKYHLGQLVWCTYH, DCKWHLGELVWCT, DCKYHLGELVWCT, DCKWHRGELVWCT, DCKWHLGQLVWCT, DCKYHRGELVWCT, DCKYHLGQLVWCT, DCKWHRGQLVWCT, DCKYHRGQLVWCT, FNKQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIKDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNKEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, RGNCAWHLGQLVWCKYH, RGNCAWHLGELVWCKYH, RGNCAYHLGQLVWCTKH, RGNCAYHLGQLVWCTYK, RGNCAYHRGQLVWCTKH, KNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQKRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEAKHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRKARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNKEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIKDDC, FNKQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCKRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRKDC, Fc-III, FcBP-2, Fc-III-4C,
Figure pct00219
(X = K 또는 R) 등이거나 이들을 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 선택적으로 이황화결합을 형성할 수 있다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 펩타이드에서, 2개의 시스테인 잔기는 이황화결합을 형성한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드, 예컨대, Z33, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNAKIKSIRDDC, RGNCAYHRGQLVWCTYH, RGNCKYHRGQLVWCTYH, RGNCAYHKGQLVWCTYH, RGNCAWHRGKLVWCTYH, RGNCKWHRGQLVWCTYH, RGNCKWHRGELVWCTYH, RGNCKYHLGELVWCTYH, RGNCKYHLGQLVWCTYH, DCKWHLGELVWCT, DCKYHLGELVWCT, DCKWHRGELVWCT, DCKWHLGQLVWCT, DCKYHRGELVWCT, DCKYHLGQLVWCT, DCKWHRGQLVWCT, DCKYHRGQLVWCT, FNKQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIKDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNKEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, RGNCAWHLGQLVWCKYH, RGNCAWHLGELVWCKYH, RGNCAYHLGQLVWCTKH, RGNCAYHLGQLVWCTYK, RGNCAYHRGQLVWCTKH, KNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQKRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEAKHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRKARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNKEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIKDDC, FNKQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCKRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRKDC, Fc-III, FcBP-2, Fc-III-4C,
Figure pct00220
(X = K 또는 R) 등은 이의 (예를 들어, K의(예를 들어, RGNCAYHKGQLVWCTYH, RGNCKYHRGQLVWCTYH, RGNCAWHRGKLVWCTYH, RGNCKWHRGELVWCTYH, RGNCKWHRGQLVWCTYH, RGNCKYHLGELVWCTYH, RGNCKYHLGQLVWCTYH, DCKWHLGELVWCT, DCKYHLGELVWCT, DCKWHRGELVWCT, DCKWHLGQLVWCT, DCKYHRGELVWCT, DCKYHLGQLVWCT, DCKWHRGQLVWCT, DCKYHRGQLVWCT, RGNCAWHLGQLVWCKYH, FNKQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIKDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNKEQRNARIRSIRDDC, RGNCAWHLGELVWCKYH, RGNCAYHLGQLVWCTKH, RGNCAYHLGQLVWCTYK, RGNCAYHRGQLVWCTKH, KNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQKRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEAKHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRKARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNKEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIKDDC, FNKQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCKRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRKDC 등에서 밑줄친 K 잔기의)) N-말단, C-말단 또는 측쇄를 통해 연결된다. 일부 실시형태에서, 서열의 하나 이상의 아미노산 잔기는 본 명세서에 기재된 바와 같이 독립적 및 선택적으로 대체(예를 들어, 1 내지 5), 결실(예를 들어, 1 내지 5) 및/또는 삽입될 수 있다(예를 들어, 1 내지 5). 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어,
Figure pct00221
또는 Rc-(Xaa)z-는 -CXYHXXXLVWC-, -XCXYHXXXLVWC-, -CXYHXXXLVWCX-, -X0-3CXYHXXXLVWCX0-3-, -XCXYHXXXLVWCXXX--XXXCXYHXXXLVWCXXX-이거나, 이들을 포함하되, 각각의 X는 독립적으로 아미노산 잔기이고, 2개의 C 잔기는 선택적으로 이황화결합을 형성한다. 일부 실시형태에서, X8(H 다음의 X)은 Orn이다. 일부 실시형태에서, X8은 Dab이다. 일부 실시형태에서, X8은 Lys(Ac)이다. 일부 실시형태에서, X8은 Orn(Ac)이다. 일부 실시형태에서, X8은 Dab(Ac)이다. 일부 실시형태에서, X8은 Arg이다. 일부 실시형태에서, X8은 Nle이다. 일부 실시형태에서, X8은 Nva이다. 일부 실시형태에서, X8은 Val이다. 일부 실시형태에서, X8은 Tle이다. 일부 실시형태에서, X8은 Leu이다. 일부 실시형태에서, X8은 Ala(tBu)이다. 일부 실시형태에서, X8은 Cha이다. 일부 실시형태에서, X8은 Phe이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어,
Figure pct00222
또는 Rc-(Xaa)z-는 DCAWHLGELVWCT이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 단백질 제제/펩타이드 제제 모이어티의 C-말단 및/또는 N-말단은 독립적으로 캡핑된다(예를 들어, N-말단에 대해 RC(O)-, 예컨대, CH3C(O)-, C-말단에 대해 -N(R')2, 예컨대, -NH2 등). 일부 실시형태에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 바와 같은, 잔기는 다른 모이어티와의 연결을 위해 변형 또는 대체될 수 있고, 예를 들어, 일부 실시형태에서, H는 -COOH 또는 이의 염 또는 활성화된 형태(예를 들어, D)를 포함하는 측쇄를 포함하는 아미노산 잔기로 대체될 수 있다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어,
Figure pct00223
또는 Rc-(Xaa)z-는 (X1-3)-C-(X2)-H-(Xaa1)-G-(Xaa2)-L-V-W-C-(X1-3)이거나 이를 포함하되, X 및 Xaa의 각각은 독립적으로 아미노산 잔기이고, 선택적으로 시스테인 잔기가 아니다. 일부 실시형태에서, Xaa1은 R, L, L, D, E, 2-아미노 수베르산 잔기 또는 다이아미노프로피온산 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa2는 L, D, E, N 또는 Q이다. 일부 실시형태에서, Xaa1은 라이신 잔기, 시스테인 잔기, 아스파르트산 잔기, 글루탐산 잔기, 2-아미노 수베르산 잔기 또는 다이아미노프로피온산 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa2는 글루탐산 잔기 또는 아스파르트산 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa1은 아르기닌 잔기 또는 류신 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa2는 라이신 잔기, 글루타민 잔기 또는 아스파르트산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어,
Figure pct00224
또는 Rc-(Xaa)z-는 (X1-3)-C-(Xaa3)-(xaa4)-H-(Xaa1)-G-(Xaa2)-L-V-W-C-(Xaa5)-(Xaa6)-(Xaa7)이거나 이를 포함하되, X 및 Xaa의 각각은 독립적으로 아미노산 잔기이고, 선택적으로 시스테인 잔기가 아니다. 일부 실시형태에서, Xaa3은 알라닌 잔기 또는 라이신 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa4는 트립토판 잔기 또는 타이로신 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa1은 아르기닌 잔기, 류신 잔기, 라이신 잔기, 아스파르트산 잔기, 글루탐산 잔기, 2-아미노 수베르산 잔기, 또는 다이아미노프로피온산 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa2는 라이신 잔기, 글루타민 잔기, 글루탐산 잔기, 아스파라긴 잔기 또는 아스파르트산 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa5는 트레오닌 잔기 또는 라이신 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa6은 타이로신 잔기, 라이신 잔기이거나 또는 존재하지 않는다. 일부 실시형태에서, Xaa7은 히스티딘 잔기, 라이신 잔기이거나 또는 존재하지 않는다. 일부 실시형태에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어,
Figure pct00225
또는 Rc-(Xaa)z-는 D-C-(Xaa3)-(Xaa4)-H-(Xaa1)-G-(Xaa2)-L-V-W-C-(Xaa5)-(Xaa6)-(Xaa7)이거나 이를 포함하되, X 및 Xaa의 각각은 독립적으로 아미노산 잔기이고, 선택적으로 시스테인 잔기가 아니다. 일부 실시형태에서, Xaa3은 알라닌 잔기 또는 라이신 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa4는 트립토판 잔기 또는 타이로신 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa1은 아르기닌 잔기, 류신 잔기, 라이신 잔기, 아스파르트산 잔기, 글루탐산 잔기, 2-아미노 수베르산 잔기, 또는 다이아미노프로피온산 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa2는 라이신 잔기, 글루타민 잔기, 글루탐산 잔기, 아스파라긴 잔기 또는 아스파르트산 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa5는 트레오닌 잔기 또는 라이신 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa6은 타이로신 잔기, 라이신 잔기이거나 또는 존재하지 않는다. 일부 실시형태에서, Xaa7은 히스티딘 잔기, 라이신 잔기이거나 또는 존재하지 않는다. 일부 실시형태에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어,
Figure pct00226
또는 Rc-(Xaa)z-는 D-C-(Xaa3)-(Xaa4)-H-(Xaa1)-G-(Xaa2)-L-V-W-C-T이거나 이를 포함하되, X 및 Xaa의 각각은 독립적으로 아미노산 잔기이고, 선택적으로 시스테인 잔기가 아니다. 일부 실시형태에서, Xaa3은 알라닌 잔기 또는 라이신 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa4는 트립토판 잔기 또는 타이로신 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa1은 아르기닌 잔기, 류신 잔기, 라이신 잔기, 아스파르트산 잔기, 글루탐산 잔기, 2-아미노 수베르산 잔기, 또는 다이아미노프로피온산 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa2는 라이신 잔기, 글루타민 잔기, 글루탐산 잔기, 아스파라긴 잔기 또는 아스파르트산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어,
Figure pct00227
또는 Rc-(Xaa)z-는 R-G-N-C-(Xaa3)-(Xaa4)-H-(Xaa1)-G-(Xaa2)-L-V-W-C-(Xaa5)-(Xaa6)-(Xaa7)이거나 이를 포함하되, X 및 Xaa의 각각은 독립적으로 아미노산 잔기이고, 선택적으로 시스테인 잔기가 아니다. 일부 실시형태에서, Xaa3은 알라닌 잔기 또는 라이신 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa4는 트립토판 잔기 또는 타이로신 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa1은 아르기닌 잔기, 류신 잔기, 라이신 잔기, 아스파르트산 잔기, 글루탐산 잔기, 2-아미노 수베르산 잔기, 또는 다이아미노프로피온산 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa2는 라이신 잔기, 글루타민 잔기, 글루탐산 잔기, 아스파라긴 잔기 또는 아스파르트산 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa5는 트레오닌 잔기 또는 라이신 잔기이다. 일부 실시형태에서, Xaa6은 타이로신 잔기, 라이신 잔기이거나 또는 존재하지 않는다. 일부 실시형태에서, Xaa7은 히스티딘 잔기, 라이신 잔기이거나 또는 존재하지 않는다. 일부 실시형태에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 상기 기재한 다양한 표적 결합 모이어티는 단백질 결합 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다. 일부 실시형태에서, LG는 이러한 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, LG는 단백질 결합 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, LG는 항체 결합 모이어티이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티, 및 이러한 모이어티를 개발 및/또는 평가하기 위한 유용한 기술은, 예를 들어, 문헌[Alves, Langmuir 2012, 28, 9640-9648; Choe et al., Materials 2016, 9, 994; doi:10.3390/ma9120994; Gupta et al., Nature Biomedical Engineering, vol. 3, 2019, 917-929; Muguruma, et al., ACS Omega 2019, 4, 14390-14397, doi: 10.1021/acsomega.9b01104; Yamada, et al., Angew Chem Int Ed Engl. 2019 Apr 16;58(17):5592-5597, doi: 10.1002/anie.201814215; Kruljec, et al., Bioconjug Chem. 2017, 28(8): 2009-2030, doi: 10.1021/acs.bioconjchem.7b00335(예를 들어, Fabsorbent, 트라이아진 등); Kruljec, et al., Bioconjugate Chem. 2018, 29, 8, 2763-2775, doi: 10.1021/acs.bioconjchem.8b00395]; WO2012017021A2 등, 결합 모이어티(예를 들어, 항체 결합 모이어티)에 기재되어 있으며, 이들 각각은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 단백질 결합 모이어티(예를 들어, 항체 결합 모이어티)는 AU 2018259856 또는 WO 2018199337에 기재된 친화도 물질이고, 이들 각각의 친화도 물질은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는, 예를 들어, 문헌[Hui, et al., Bioconjugate Chem. 2015, 26, 1456-1460, doi: 10.1021/acs.bioconjchem.5b00275]에 기재된 바와 같은 어댑터 단백질 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용에 따라 이용될 때, 어댑터 단백질은 하나 이상의 또는 모든 이점을 달성하기 위해 반응성 잔기(예를 들어, BPA)를 필요로 하지 않는다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 트라이아진 모이어티, 예를 들어, US 2009/0286693에 기재된 것이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 이의 대응하는 화합물이 미국 특허 공개 제2009/0286693호에 기재되어 있는 화합물의 구조를 갖고, 이의 화합물은 독립적으로 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 ABT이다. 일부 실시형태에서, ABT는 H-ABT가 미국 특허 제2009/0286693호에 기재되어 있는 화합물의 구조를 갖고, 이의 화합물은 독립적으로 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 일부 실시형태에서, 이러한 화합물은 항체에 결합할 수 있다. 일부 실시형태에서, 이러한 화합물은 항체의 Fc 영역에 결합할 수 있다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 트라이아진 모이어티, 예를 들어, 문헌[Teng, et al., A strategy for the generation of biomimetic ligands for affinity chromatography. Combinatorial synthesis and biological evaluation of an IgG binding ligand, J. Mol. Recognit. 1999;12:67-75 ("Teng")]에 기재된 것이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 이의 대응하는 화합물이 Teng에 기재되어 있는 화합물의 구조를 갖고, 이의 화합물은 독립적으로 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티, ABT는 H-ABT가 Teng에 기재되어 있는 화합물의 구조를 갖고, 이의 화합물은 독립적으로 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 일부 실시형태에서, 이러한 화합물은 항체에 결합할 수 있다. 일부 실시형태에서, 이러한 화합물은 항체의 Fc 영역에 결합할 수 있다.
일부 실시형태에서, v 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 트라이아진 모이어티, 예를 들어, 문헌[Uttamchandani, et al., Microarrays of Tagged Combinatorial Triazine Libraries in the Discovery of Small-Molecule Ligands of Human IgG, J Comb Chem. 2004 Nov-Dec;6(6):862-8 ("Uttamchandani")]에 기재되어 있는 것이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 이의 대응하는 화합물이 Uttamchandani에 기재되어 있는 화합물의 구조를 갖고, 이의 화합물은 독립적으로 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티, ABT는 H-ABT가 Uttamchandani에 기재되어 있는 화합물의 구조를 갖고, 이의 화합물은 독립적으로 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 일부 실시형태에서, 이러한 화합물은 항체에 결합할 수 있다. 일부 실시형태에서, 이러한 화합물은 항체의 Fc 영역에 결합할 수 있다.
일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티는 단백질 A의 하나 이상의 결합 부위에 결합한다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티는 단백질 G의 하나 이상의 결합 부위에 결합한다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티는 단백질 L의 하나 이상의 결합 부위에 결합한다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티는 단백질 Z의 하나 이상의 결합 부위에 결합한다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티는 단백질 LG의 하나 이상의 결합 부위에 결합한다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티는 단백질 LA의 하나 이상의 결합 부위에 결합한다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티는 단백질 AG의 하나 이상의 결합 부위에 결합한다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티는 문헌[Choe, W., Durgannavar, T. A., & Chung, S. J. (2016). Fc-binding ligands of immunoglobulin G: An overview of high affinity proteins and peptides. Materials, 9(12). https://doi.org/10.3390/ma9120994]에 기재되어 있다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 뉴클레오타이드-결합 부위에 결합할 수 있다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 뉴클레오타이드-결합 부위에 결합할 수 있는 소분자 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 소분자는 트립타민이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티, ABT는 H-ABT가 트립타민인 구조를 갖는다. 특정 유용한 기술은 문헌[Mustafaoglu, et al., Antibody Purification via Affinity Membrane Chromatography Method Utilizing Nucleotide Binding Site Targeting With A Small Molecule, Analyst. 2016 November 28; 141(24): 6571-6582]에 기재되어 있었다.
다수의 기술이 단백질 결합 모이어티(예를 들어, 항체 결합 모이어티, 예컨대 보편적 항체 결합 모이어티)를 포함하는 표적 결합 모이어티, 및/또는 제공된 기술에서의 이들의 이용, 예를 들어, WO/2019/023501에 기재된 것을 확인 및/또는 평가 및/또는 특성규명하는 데 이용되며, 이들 기술은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티는 IgG에 선택적으로 결합할 수 있고, 제공된 기술에서 사용될 때, ADCC 및/또는 ADCP를 제공 및/또는 자극할 수 있는 모이어티(예를 들어, 소분자 모이어티, 펩타이드 모이어티, 핵산 모이어티 등)이다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 디스플레이 기술(예를 들어, 파지 디스플레이, 비세포 디스플레이 등)은 항체 결합 모이어티를 확인하는 데 이용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티는 IgG에 결합할 수 있고, 선택적으로 공지된 항체 결합제, 예를 들어, 단백질 A, 단백질 G, 단백질 L 등과 경쟁할 수 있는 모이어티(예를 들어, 소분자 모이어티, 펩타이드 모이어티, 핵산 모이어티 등)이다.
당업자에 의해 인식될 바와 같이, 다양한 특성 및 활성의 항체(예를 들어, 최적의 변형을 갖는 상이한 항원을 인식하는 항체 등)는 본 개시내용에 기재된 항체 결합 모이어티에 의해 표적화될 수 있다. 일부 실시형태에서, 이러한 항체는, 예를 들어, 치료적 목적을 위해 대상체에게 투여되는 항체를 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 항체 결합 모이어티는 상이한 항원으로 향하는 항체에 결합할 수 있고, 관심 모이어티를 다양한 항체와 접합시키는 데 유용하다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 메디톱(meditope) 제제 모이어티이고, 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 메디톱 제제는, 예를 들어, US 2019/0111149에 기재되어 있다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 인간 IgG에 결합할 수 있다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 토끼 IgG에 결합할 수 있다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 IgG1에 결합한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 IgG2에 결합한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 IgG3에 결합한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 IgG4에 결합한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 IgG1, IgG2 및/또는 IgG4에 결합한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 IgG1, IgG2 및 IgG4에 결합한다.
일부 실시형태에서,
Figure pct00228
는 기준 기술에서 비-표적 결합 모이어티로서 이용된다. 일부 실시형태에서, CH3-은 기준 기술에서 비-표적 결합 모이어티로서 이용된다. 일부 실시형태에서, CH3C(O)-은 기준 기술에서 비-표적 결합 모이어티로서 이용된다. 일부 실시형태에서, CH3C(O)NH-는 기준 기술에서 비-표적 결합 모이어티로서 이용된다. 일부 실시형태에서, CH3C(O)NHCH2-는 기준 기술에서 비-표적 결합 모이어티로서 이용된다. 일부 실시형태에서, CH3CH2-는 기준 기술에서 비-표적 결합 모이어티로서 이용된다. 일부 실시형태에서, CH3CH2NH-는 기준 기술에서 비-표적 결합 모이어티로서 이용된다. 일부 실시형태에서, CH3CH2NHC(O)-는 기준 기술에서 비-표적 결합 모이어티로서 이용된다.
일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티(예를 들어, 항체 결합 모이어티)는 약 1 mM-1 pM 이하인 Kd로 표적(예를 들어, 항체 결합 모이어티에 대해 항체 제제)에 결합한다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 1mM, 0.5mM, 0.2mM, 0.1mM, 0.05mM, 0.02mM, 0.01mM, 0.005mM, 0.002mM, 0.001mM, 500nM, 200nM, 100nM, 50nM, 20nM, 10nM, 5nM, 2nM, 1nM, 0.5nM, 0.2nM, 0.1nM 이하이다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 1mM 이하이다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 0.5mM 이하이다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 0.1mM 이하이다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 0.05mM 이하이다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 0.01mM 이하이다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 0.005mM 이하이다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 0.001mM 이하이다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 500nM 이하이다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 200nM 이하이다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 100nM 이하이다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 50nM 이하이다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 20nM 이하이다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 10nM 이하이다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 5nM 이하이다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 2nM 이하이다. 일부 실시형태에서, Kd는 약 1nM 이하이다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티는 본 명세서에 기재된 Kd로 IgG 항체 제제에 결합한다.
아미노산
일부 실시형태에서, 제공된 화합물 및 제제는, 예를 들어, 항체 결합 모이어티, 링커 모이어티 등에서 하나 이상의 아미노산 모이어티를 포함할 수 있다. 아미노산 모이어티는 천연 아미노산 또는 비천연 아미노산의 모이어티 중 하나일 수 있다. 일부 실시형태에서, 아미노산은 하기 식 A-I의 구조식 또는 이의 염을 갖는다:
Figure pct00229
식 중:
Ra1, Ra2 및 Ra3 각각은 독립적으로 -La-R' 또는 아미노산 측쇄이고;
La1 및 La2 각각은 독립적으로 La이며;
각각의 La는 독립적으로 공유 결합이거나, 또는 C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택된 선택적으로 치환된 2가 기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S- 또는 -C(O)O-로 선택적 및 독립적으로 대체되고;
각각의 -Cy-는 독립적으로 선택적으로 치환된 2가의 단환식, 이환식 또는 다환식 기이되, 각각의 단환식 고리는 C3-20 지환족 고리, C6-20 아릴 고리, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원 헤테로아릴 고리, 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 20원 헤테로사이클릴 고리로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 R'는 독립적으로 -R, -C(O)R, -CO2R 또는 -SO2R이며;
각각의 R은 독립적으로 -H, 또는 C1-30 지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-30 헤테로지방족, C6-30 아릴, C6-30 아릴지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C6-30 아릴헤테로지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 헤테로사이클릴로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이거나, 또는
2개의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께 공유 결합을 형성하거나, 또는:
동일한 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께, 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 30원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성하거나; 또는
2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 이들의 개재 원자와 함께, 개재 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 30원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, 예를 들어, 식 A-I의 구조를 갖는 아미노산의 아미노산 잔기는 -N(Ra1)-La1-C(Ra2)(Ra3)-La2-CO-의 구조식을 갖는다. 일부 실시형태에서, 펩타이드에서 각각의 아미노산 잔기는 독립적으로 -N(Ra1)-La1-C(Ra2)(Ra3)-La2-CO-의 구조식을 갖는다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 식 A-I 또는 이의 염의 아미노산의 유도체를 제공한다. 일부 실시형태에서, 유도체는 에스터이다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 식 NH(Ra1)-La1-C(Ra2)(Ra3)-La2-COORCT의 화합물 또는 이의 염을 제공하되, RCT는 R'이고, 각각의 다른 변수는 독립적으로 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, RCT는 R이다. 일부 실시형태에서, RCT는 선택적으로 치환된 지방족이다. 일부 실시형태에서, RCT는 t-뷰틸이다.
일부 실시형태에서, La1은 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, 식 A-I의 화합물은 구조식 NH(Ra1)-C(Ra2)(Ra3)-La2-COOH를 갖는다. 일부 실시형태에서, La2는 -CH2SCH2-이다.
일부 실시형태에서, La2는 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, 식 A-I의 화합물은 구조식 NH(Ra1)-La1-C(Ra2)(Ra3)-COOH를 갖는다. 일부 실시형태에서, 아미노산 잔기는 -N(Ra1)-La1-C(Ra2)(Ra3)-CO-의 구조식을 갖는다. 일부 실시형태에서, La1은 -CH2CH2S-이다. 일부 실시형태에서, La1은 -CH2CH2S-이되, CH2는 NH(Ra1)에 결합된다.
일부 실시형태에서, La1은 공유 결합이고, La2는 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, 식 A-I의 화합물은 구조식 NH(Ra1)-C(Ra2)(Ra3)-COOH를 갖는다. 일부 실시형태에서, 식 A-I의 화합물은 구조식 NH(Ra1)-CH(Ra2)-COOH를 갖는다. 일부 실시형태에서, 식 A-I의 화합물은 구조식 NH(Ra1)-CH(Ra3)-COOH를 갖는다. 일부 실시형태에서, 식 A-I의 화합물은 구조식 NH2-CH(Ra2)-COOH를 갖는다. 일부 실시형태에서, 식 A-I의 화합물은 구조식 NH2-CH(Ra3)-COOH를 갖는다. 일부 실시형태에서, 아미노산 잔기는 -N(Ra1)-C(Ra2)(Ra3)-CO-의 구조식을 갖는다. 일부 실시형태에서, 아미노산 잔기는 -N(Ra1)-CH(Ra2)-CO-의 구조식을 갖는다. 일부 실시형태에서, 아미노산 잔기는 -N(Ra1)-CH(Ra3)-CO-의 구조식을 갖는다. 일부 실시형태에서, 아미노산 잔기는 -NH-CH(Ra2)-CO-의 구조식을 갖는다. 일부 실시형태에서, 아미노산 잔기는 -NH-CH(Ra3)-CO-의 구조식을 갖는다.
일부 실시형태에서, La는 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, La는 선택적으로 치환된 C1-6 2가 지방족이다. 일부 실시형태에서, La는 선택적으로 치환된 C1-6 알킬렌이다. 일부 실시형태에서, La는 -CH2-이다. 일부 실시형태에서, La는 -CH2CH2-이다. 일부 실시형태에서, La는 -CH2CH2CH2-이다.
일부 실시형태에서, La는 2가의 선택적으로 치환된 C1-20 지방족이되, 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C(O)-, -N(R')-, -Cy- 및/또는 -O-로 독립적으로 대체된다. 일부 실시형태에서, La는 2가의 선택적으로 치환된 C1-20 지방족이되, 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C(O)N(R')-, -Cy- 및 -O-로 독립적으로 대체된다. 일부 실시형태에서, La는 2가의 선택적으로 치환된 C1-20 지방족이되, 2개 이상의 메틸렌 단위는 다른 선택적 대체에 추가로 -C(O)N(R')- 및 -Cy-로 독립적으로 대체된다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 본 명세서에 기재된 바와 같은 전자-회수기로 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 하나 이상의 -F로 치환된다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 선택적으로 치환된 1,3-페닐렌이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 선택적으로 치환된 1,4-페닐렌이다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00230
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00231
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00232
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00233
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00234
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00235
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00236
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00237
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00238
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00239
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00240
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00241
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00242
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00243
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00244
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00245
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00246
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00247
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, La는
Figure pct00248
이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, R'는 R이다. 일부 실시형태에서, Ra1은 R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, Ra1이 R이되, R은 메틸이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, Ra3은 R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, Ra1, Ra2 및 Ra3 각각은 독립적으로 R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다.
일부 실시형태에서, Ra1은 수소이다. 일부 실시형태에서, Ra1은 보호기이다. 일부 실시형태에서, Ra1은 -Fmoc이다. 일부 실시형태에서, Ra1은 -Dde이다.
일부 실시형태에서, Ra1, Ra2 및 Ra3 각각은 독립적으로 -La-R'이다.
일부 실시형태에서, Ra2는 수소이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 수소이다. 일부 실시형태에서, Ra1은 수소이고, Ra2 및 Ra3 중 적어도 하나는 수소이다. 일부 실시형태에서, Ra1은 수소이고, Ra2 및 Ra3 중 하나는 수소이며, 다른 하나는 수소가 아니다. 일부 실시형태에서, Ra2는 -La-R이고, Ra3은 -H이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 -La-R이고, Ra2는 -H이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 -CH2-R이고, Ra3은 -H이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 -CH2-R이고, Ra2는 -H이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 R이고, Ra3은 -H이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 R이고, Ra2는 -H이다.
일부 실시형태에서, Ra2는 -La-R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, Ra2는 -La-R이되, R은 C3-30 지환족, C5-30 아릴, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴, 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 헤테로사이클릴로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 -La-R이되, R은 C6-30 아릴 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 아미노산의 측쇄이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 표준 아미노산의 측쇄이다.
일부 실시형태에서, Ra3은 -La-R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, Ra3은 -La-R이되, R은 C3-30 지환족, C5-30 아릴, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴, 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 헤테로사이클릴로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 -La-R이되, R은 C6-30 아릴 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 아미노산의 측쇄이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 표준 아미노산의 측쇄이다.
일부 실시형태에서, Ra2 및 Ra3 중 하나는 -H이다. 일부 실시형태에서, Ra2 및 Ra3 중 하나는 -La-R이되, La는 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, La는 공유 결합이 아니다. 일부 실시형태에서, La의 하나 이상의 메틸렌 단위는 본 명세서에 기재된 바와 같이 독립적 및 선택적으로, 예를 들어, -C(O)-, -N(R')-, -O-, -C(O)-N(R')- 및/또는 -Cy- 등으로 대체된다. 일부 실시형태에서, La는 -C(O)-, -N(R')- 및 -Cy-이거나, 이들을 포함한다. 일부 실시형태에서, La는 -C(O)N(R')- 및 -Cy-이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 바와 같은 -Cy-는 치환되고, 하나 이상의 치환체는 독립적으로 전자-회수기이다.
일부 실시형태에서, 아미노산 측쇄는 Ra2 또는 Ra3이다. 일부 실시형태에서, 아미노산 측쇄는 -LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 아미노산 측쇄는 -LLG2-LLG3-LLG4-H이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 아미노산 측쇄는 -LLG3-LLG4-H이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 아미노산 측쇄는 -LLG4-H이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 측쇄는
Figure pct00249
이다. 일부 실시형태에서, 이러한 측쇄는
Figure pct00250
이다. 일부 실시형태에서, 이러한 측쇄는
Figure pct00251
이다. 일부 실시형태에서, 이러한 측쇄는
Figure pct00252
이다.
일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 C1-6 지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 C1-6 알킬이다. 일부 실시형태에서, R은 -CH3이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 펜틸이다. 일부 실시형태에서, R은 n-펜틸이다.
일부 실시형태에서, R은 환식기이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 C3-30 지환족기이다. 일부 실시형태에서, R은 사이클로프로필이다.
일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 방향족기이고, 식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기는 XaaA이다. 일부 실시형태에서, Ra2 또는 Ra3은 -CH2-R이되, R은 선택적으로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴기이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 페닐이다. 일부 실시형태에서, R은 페닐이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 페닐이다. 일부 실시형태에서, R은 4-트라이플루오로메틸페닐이다. 일부 실시형태에서, R은 4-페닐페닐이다. 일부 실시형태에서, R은 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5 내지 30원 헤테로아릴이다. 일부 실시형태에서, R은 산소, 질소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5 내지 14원 헤테로아릴이다. 일부 실시형태에서, R은
Figure pct00253
이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 피리딘일이다. 일부 실시형태에서, R은 1- 피리딘일이다. 일부 실시형태에서, R은 2-피리딘일이다. 일부 실시형태에서, R은 3- 피리딘일이다. 일부 실시형태에서, R은
Figure pct00254
이다.
일부 실시형태에서, R'는 -COOH이다. 일부 실시형태에서, 식 A-I의 아미노산의 화합물 및 아미노산 잔기는 XaaN이다.
일부 실시형태에서, R'는 -NH2이다. 일부 실시형태에서, 식 A-I의 아미노산의 화합물 및 아미노노산 잔기는 XaaP이다.
일부 실시형태에서, Ra2 또는 Ra3은 R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 C1-20 지방족이다. 일부 실시형태에서, 식 A-I의 아미노산의 화합물 및 아미노산 잔기는 XaaH이다. 일부 실시형태에서, R은 -CH3이다. 일부 실시형태에서, R은 에틸이다. 일부 실시형태에서, R은 프로필이다. 일부 실시형태에서, R은 n-프로필이다. 일부 실시형태에서, R은 뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R은 n-뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R은 펜틸이다. 일부 실시형태에서, R은 n-펜틸이다. 일부 실시형태에서, R은 사이클로프로필이다.
일부 실시형태에서, Ra1, Ra2 및 Ra3 중 둘 이상은 R이고, 함께 본 개시내용에 기재된 바와 같이 선택적으로 치환된 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, Ra1 및 Ra2 및 Ra3 중 하나는 R이고, 함께 Ra1이 결합되는 질소 원자 이외의 추가적인 고리 헤테로원자가 없는 선택적으로 치환된 3 내지 6원 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 프롤린에서와 같이 5-원 고리이다.
일부 실시형태에서, Ra1, Ra2 및 Ra3은 R이고, 함께 본 개시내용에 기재된 바와 같이 선택적으로 치환된 3 내지 6원 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, Ra2 및 Ra3은 R이고, 함께 하나 이상의 질소 고리 원자를 갖는 선택적으로 치환된 3 내지 6원 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, Ra2 및 Ra3은 R이고, 함께 질소 원자인 1개 이하의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 3 내지 6원 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, 고리는 포화된 고리이다.
일부 실시형태에서, 아미노산은 천연 아미노산이다. 일부 실시형태에서, 아미노산은 비천연 아미노산이다. 일부 실시형태에서, 아미노산은 알파-아미노산이다. 일부 실시형태에서, 아미노산은 베타-아미노산이다. 일부 실시형태에서, 식 A-I의 화합물은 천연 아미노산이다. 일부 실시형태에서, 식 A-I의 화합물은 비천연 아미노산이다.
일부 실시형태에서, 아미노산은 소수성 측쇄를 포함한다. 일부 실시형태에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 A, V, I, L, M, F, Y 또는 W이다. 일부 실시형태에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 A, V, I, L, M 또는 F이다. 일부 실시형태에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 A, V, I, L 또는 M이다. 일부 실시형태에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 A, V, I 또는 L이다. 일부 실시형태에서, 소수성 측쇄는 R이되, R은 C1-10 지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 C1-10 알킬이다. 일부 실시형태에서, R은 메틸이다. 일부 실시형태에서, R은 에틸이다. 일부 실시형태에서, R은 프로필이다. 일부 실시형태에서, R은 뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R은 펜틸이다. 일부 실시형태에서, R은 n-펜틸이다. 일부 실시형태에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 NH2CH(CH2CH2CH2CH2CH3)COOH이다. 일부 실시형태에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 (S)-NH2CH(CH2CH2CH2CH2CH3)COOH이다. 일부 실시형태에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 (R)-NH2CH(CH2CH2CH2CH2CH3)COOH이다. 일부 실시형태에서, 소수성 측쇄는 -CH2R이되, R은 선택적으로 치환된 페닐이다. 일부 실시형태에서, R은 페닐이다. 일부 실시형태에서, R은 하나 이상의 탄화수소기로 치환된 페닐이다. 일부 실시형태에서, R은 4-페닐페닐이다. 일부 실시형태에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 NH2CH(CH2-4-페닐페닐)COOH이다. 일부 실시형태에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 (S)-NH2CH(CH2-4-페닐페닐)COOH이다. 일부 실시형태에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 (R)-NH2CH(CH2-4-페닐페닐)COOH이다.
일부 실시형태에서, 아미노산은 본 명세서에 기재된 바와 같이 (예를 들어, 생리학적 pH에서) 양으로 하전된 측쇄를 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 아미노산은 이의 측쇄에서 염기성 질소를 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 아미노산은 Arg, His 또는 Lys이다. 일부 실시형태에서, 이러한 아미노산은 Arg이다. 일부 실시형태에서, 이러한 아미노산은 His이다. 일부 실시형태에서, 이러한 아미노산은 Lys이다.
일부 실시형태에서, 아미노산은 본 명세서에 기재된 바와 같이 (예를 들어, 생리학적 pH에서) 음으로 하전된 측쇄를 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 아미노산은 이의 측쇄에서 -COOH를 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 아미노산은 Asp이다. 일부 실시형태에서, 이러한 아미노산은 Glu이다.
일부 실시형태에서, 아미노산은 본 명세서에 기재된 바와 같은 방향족기를 포함하는 측쇄를 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 아미노산은 Phe, Tyr, Trp 또는 His이다. 일부 실시형태에서, 이러한 아미노산은 Phe이다. 일부 실시형태에서, 이러한 아미노산은 Tyr이다. 일부 실시형태에서, 이러한 아미노산은 Trp이다. 일부 실시형태에서, 이러한 아미노산은 His이다. 일부 실시형태에서, 이러한 아미노산은 NH2-CH(CH2-4-페닐페닐)-COOH이다. 일부 실시형태에서, 이러한 아미노산은 (S)-NH2-CH(CH2-4-페닐페닐)-COOH이다. 일부 실시형태에서, 이러한 아미노산은 (R)-NH2-CH(CH2-4-페닐페닐)-COOH이다.
일부 실시형태에서, 아미노산은
Figure pct00255
또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 아미노산은
Figure pct00256
또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 아미노산은
Figure pct00257
또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 아미노산은
Figure pct00258
또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 아미노산은
Figure pct00259
또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 아미노산은
Figure pct00260
또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 아미노산은
Figure pct00261
또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 아미노산은
Figure pct00262
또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은
Figure pct00263
이다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 본 개시내용에 기재된 하나 이상의 아미노산 잔기를 포함하는 폴리펩타이드 제제를 제공한다.
반응기
일부 실시형태에서, 제공된 화합물, 예를 들어, 반응 상대로서 유용한 것은 반응기(예를 들어, RG)를 포함한다. 본 명세서에 예시된 바와 같이, 다수의 실시형태에서, 제공된 화합물에서 반응기(예를 들어, RG)는 제1 기(예를 들어, LG)와 관심 모이어티(예를 들어, MOI) 사이에 위치되고, 링커를 통해 제1 기 및 관심 모이어티에 선택적 및 독립적으로 연결된다. 일부 실시형태에서, RG는 본 명세서에 기재된 바와 같은 반응기이다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에 입증된 바와 같이, 표적 결합 모이어티를 포함하지 않는 화합물에서 이용될 때 반응기는 서서히 반응하고, 표적 제제와 관심 모이어티의 접합을 저수준으로 제공하며, 일부 실시형태에서, 실질적으로 제공하지 않는다. 본 명세서에서 입증되는 바와 같이, 예를 들어, 식 R-I의 화합물 또는 이의 염에서와 같이, 동일한 화합물에서 반응기와 표적 결합 모이어티의 조합은, 특히, 반응기와 표적 제제 사이의 반응을 촉진시키고/시키거나, 반응 효율을 향상시키고/시키거나, 부반응을 감소시키고/시키거나 반응 선택성을 개선시킬 수 있다(예를 들어, 표적 부위에 대해, 관심 모이어티와 표적 제제의 접합이 일어난다).
제공된 화합물에서의 반응기는 표적 제제에서 다양한 유형의 기와 반응할 수 있다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물에서의 반응기는 표적 제제의 아미노기, 예를 들어, 단백질의 라이신 잔기의 측쇄 상의 -NH2 기와 선택적으로 반응한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물, 예를 들어, 식 R-I의 화합물 또는 이의 염에서 이용될 때 반응기는, 예를 들어, 본 명세서의 실시예에 나타낸 바와 같이 표적 제제의 특정 부위, IgG1의 K246, K248, K288, K290, K317 등, IgG2에 대해 K251, K 253 등, IgG4 등에 대해 K239, K241 중 하나 이상과 선택적으로 반응한다. 일부 실시형태에서, 부위는 항체 중쇄의 K246 또는 K248이다. 일부 실시형태에서, 부위는 항체 중쇄의 K246 및/또는 K248이다. 일부 실시형태에서, 부위는 항체 중쇄의 K246이다. 일부 실시형태에서, 부위는 항체 중쇄의 K248이다. 일부 실시형태에서, 부위는 항체 중쇄의 K288 또는 K290이다. 일부 실시형태에서, 부위는 항체 중쇄의 K288이다. 일부 실시형태에서, 부위는 항체 중쇄의 K290이다. 일부 실시형태에서, 부위는 K317이다. 일부 실시형태에서, 부위는 항체 중쇄의 K414이다. 일부 실시형태에서, 부위는 항체 경쇄의 K185이다. 일부 실시형태에서, 부위는 항체 경쇄의 K187이다. 일부 실시형태에서, 부위는 IgG2 중쇄의 K251 및/또는 K253이다. 일부 실시형태에서, 부위는 IgG2 중쇄의 K251이다. 일부 실시형태에서, 부위는 IgG2 중쇄의 K253이다. 일부 실시형태에서, 부위는 IgG4 중쇄의 K239 및/또는 K241이다. 일부 실시형태에서, 부위는 IgG4 중쇄의 K239이다. 일부 실시형태에서, 부위는 IgG4 중쇄의 K241이다. 일부 실시형태에서, 접합은 경쇄 부위에 걸쳐 하나 이상의 중쇄 부위에서 선택적으로 일어난다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티가 없는 기술에 대해, 접합은 중쇄 부위보다 경쇄 부위에서 더 많이 일어난다(예를 들어, 도 15 참조).
일부 실시형태에서, 반응기, 예를 들어, RG는 에스터 기이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 반응기, 예를 들어, RG는 친전자성기, 예를 들어, Michael 수용자(acceptor)이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 반응기, 예를 들어, RG는 -LRG1-LRG2-이거나 이를 포함하되, LRG1 및 LRG2 각각은 독립적으로 L 본 명세서에 기재된 바와 같은 L이다. 일부 실시형태에서, 반응기, 예를 들어, RG는 -LLG4-LRG1-LRG2-이거나 이를 포함하되, 각 변수는 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 반응기, 예를 들어, RG는 -LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-이거나 이를 포함하되, 각 변수는 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 반응기, 예를 들어, RG는 -LLG2-LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-이거나 이를 포함하되, 각 변수는 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 반응기, 예를 들어, RG는 -LLG4-LRG2-이거나 이를 포함하되, 각 변수는 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 반응기, 예를 들어, RG는 -LLG3-LLG4-LRG2-이거나 이를 포함하되, 각 변수는 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 반응기, 예를 들어, RG는 -LLG2-LLG3-LLG4-LRG2-이거나 이를 포함하되, 각 변수는 본 명세서에 기재된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 바와 같은 LLG4는 -O-이다. 일부 실시형태에서, LLG4는 -N(R)-이다. 일부 실시형태에서, LLG4는 -NH-이다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 바와 같은, LLG3은 선택적으로 치환된 아릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, LLG3은 페닐 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 아릴 또는 페닐 고리는 치환된다. 일부 실시형태에서, 치환체는 본 명세서에 기재된 바와 같은 전자-회수기, 예를 들어, -NO2, -F 등이다.
일부 실시형태에서, LRG1은 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, LRG1은 공유 결합이 아니다. 일부 실시형태에서, LRG1은 -S(O)2-이다.
일부 실시형태에서, LRG2는 -C(O)-이다. 일부 실시형태에서, 반응기는 -LLG4-C(O)-이거나 이를 포함하되, 각 변수는 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 반응기는 -LLG3-LLG4-C(O)-이거나 이를 포함하되, 각 변수는 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 반응기는 -LLG2-LLG3-LLG4-C(O)-이거나 이를 포함하되, 각 변수는 본 명세서에 기재된 바와 같다.
일부 실시형태에서, LRG2는 -LRG3-C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4-이되, RRG1, RRG2, RRG3 및 RRG4 각각은 독립적으로 -L-R'이고, LRG3은 -C(O)-, -C(O)O-, -C(O)N(R')-, -S(O)-, -S(O)2-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')- 또는 -P(O)(N(R')2)-이다. 일부 실시형태에서, RRG1, RRG2, RRG3 및 RRG4 각각은 독립적으로 R'이다. 일부 실시형태에서, RRG1, RRG2, RRG3 및 RRG4 중 하나 이상은 독립적으로 -H이다. 일부 실시형태에서, LRG3은 -C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LRG3은 -C(O)O-이다. 일부 실시형태에서, LRG3의 -O-, -N(R')- 등은 LPM에 결합된다.
일부 실시형태에서, RRG1은 -H이다. 일부 실시형태에서, RRG3은 -H이다.
일부 실시형태에서, LRG2는 선택적으로 치환된 -LRG3-C(=CHRRG2)-CHRRG4-이되, 각 변수는 본 명세서에 기재된 바와 같다.
일부 실시형태에서, RRG2 및 RRG4는 이들의 개재 원자와 함께 본 명세서에 기재된 바와 같은 선택적으로 치환된 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 0 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 3 내지 10원 단환식 또는 이환식 고리이다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 선택적으로 치환된 3 내지 10원 사이클로지방족 고리이다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 선택적으로 치환된 3 내지 8원 사이클로지방족 고리이다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 선택적으로 치환된 5 내지 8원 사이클로지방족 고리이다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 선택적으로 치환된 5-원 사이클로지방족 고리이다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 선택적으로 치환된 6-원 사이클로지방족 고리이다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 선택적으로 치환된 7-원 사이클로지방족 고리이다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 치환된다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 치환되지 않는다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 C(=CHRRG2) 또는 C(=CRRG1RRG2)에서 이중 결합에 추가로 추가적인 불포화를 함유하지 않는다.
일부 실시형태에서, -C(=CHRRG2)-CHRRG4 또는 -C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4는 선택적으로 치환된
Figure pct00264
이다. 일부 실시형태에서, -C(=CHRRG2)-CHRRG4 또는 -C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4는
Figure pct00265
이다. 일부 실시형태에서, -C(=CHRRG2)-CHRRG4-LRG3- 또는 -C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4-LRG3-은 선택적으로 치환된
Figure pct00266
이다. 일부 실시형태에서, -C(=CHRRG2)-CHRRG4-LRG3- 또는 -C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4-LRG3-은
Figure pct00267
이다. 일부 실시형태에서, -LRG1-C(=CHRRG2)-CHRRG4-LRG3- 또는 -LRG1-C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4-LRG3-은 선택적으로 치환된
Figure pct00268
이다. 일부 실시형태에서, -LRG1-C(=CHRRG2)-CHRRG4-LRG3- 또는 -LRG1-C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4-LRG3-은 선택적으로 치환된
Figure pct00269
이다.
일부 실시형태에서, 반응기는 이하의 표로부터 선택된 구조식이다. 일부 실시형태에서, -LLG2-LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-는 이하의 표로부터 선택된 구조식이다. 일부 실시형태에서, -LLG2-LLG3-LLG4-RG-는 이하의 표로부터 선택된 구조식이다.
Figure pct00270
Figure pct00271
일부 실시형태에서, -LLG4-LRG2-는 -O-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, -LLG4-LRG2-는 -S-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, -LLG4-LRG1-LRG2-는 -S-C(O)-이다.
일부 실시형태에서, -LLG4-LRG2-는-N(-)-C(O)-이되, N은 선택적으로 치환된 헤테로아릴 고리의 고리 원자이다. 일부 실시형태에서, -LLG4-LRG2-는 -N(-)-C(O)-이되, N은 선택적으로 치환된 헤테로아릴 고리이거나 이를 포함하는 LLG4의 고리 원자이다. 일부 실시형태에서, -LLG4-LRG2-는 -N(-)-C(O)-O-이되, N은 선택적으로 치환된 헤테로아릴 고리이거나 이를 포함하는 LLG4의 고리 원자이다.
일부 실시형태에서, LRG2는 선택적으로 치환된 -CH2-C(O)-이되, -CH2-는 표적 결합 모이어티를 포함하거나 이에 연결된 전자-회수기에 결합된다. 일부 실시형태에서, LRG2는 표적 결합 모이어티를 포함하거나 이에 연결된 전자-회수기에 결합된 선택적으로 치환된 -CH2-이다. 일부 실시형태에서, LRG1은 전자-회수기이다. 일부 실시형태에서, LRG1은 -C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LRG1은 -S(O)-이다. 일부 실시형태에서, LRG1은 -S(O)2-이다. 일부 실시형태에서, LRG1은 -P(O(OR)-이다. 일부 실시형태에서, LRG1은 -P(O(SR)-이다. 일부 실시형태에서, LRG1은 -P(O(N(R)2)-이다. 일부 실시형태에서, LRG1은 -OP(O(OR)-이다. 일부 실시형태에서, LRG1은 -OP(O(SR)-이다. 일부 실시형태에서, LRG1은 -OP(O(N(R)2)-이다.
일부 실시형태에서, LRG2는 선택적으로 치환된 -CH2-C(O)-이되, -CH2-는 표적 결합 모이어티를 포함하거나 이에 연결된 이탈기에 결합된다. 일부 실시형태에서, LRG2는 표적 결합 모이어티를 포함하거나 이에 연결된 이탈기에 결합된 선택적으로 치환된 -CH2-이다. 일부 실시형태에서, LRG1은 -O-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LRG1은 -OS(O)2-이다. 일부 실시형태에서, LRG1은 -OP(O(OR)-이다. 일부 실시형태에서, LRG1은 -OP(O(SR)-이다. 일부 실시형태에서, LRG1은 -OP(O(N(R)2)-이다.
일부 실시형태에서, 반응기는 표적 제제의 아미노기와 반응한다. 일부 실시형태에서, 아미노기는 라이신 잔기 측쇄의 -NH2이다.
일부 실시형태에서, 표적 제제는 단백질 제제이다. 일부 실시형태에서, 표적 제제는 항체 제제이다. 일부 실시형태에서, 반응기는 이러한 단백질 또는 항체 제제의 아미노산 잔기와 반응한다. 일부 실시형태에서, 아미노산 잔기는 라이신 잔기이다. 일부 실시형태에서, 반응기는 라이신 잔기 측쇄의 -NH2와 반응한다. 일부 실시형태에서, 반응기는 -C(O)-O-이거나 이를 포함하고, 이는 (예를 들어, 라이신 잔기 측쇄의) -NH2와 반응하고, -NH2를 갖는 아마이드기 -C(O)-O-를 형성한다.
링커 모이어티
일부 실시형태에서, 모이어티는 선택적으로 링커 모이어티를 통해 서로 연결된다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 반응기, 예를 들어, RG는 링커, 예를 들어, LRM을 통해, 관심 모이어티, 예를 들어, MOI에 연결된다. 일부 실시형태에서, 모이어티, 예를 들어, LG는 또한 다양한 부분을 연결하기 위해 하나 이상의 링커, 예를 들어, LLG1, LLG2, LLG3, LLG4 등을 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, LLG는 본 명세서에 기재된 링커 모이어티이다. 일부 실시형태에서, LLG1은 본 명세서에 기재된 링커 모이어티이다. 일부 실시형태에서, LLG2는 본 명세서에 기재된 링커 모이어티이다. 일부 실시형태에서, LLG3은 본 명세서에 기재된 링커 모이어티이다. 일부 실시형태에서, LLG4는 본 명세서에 기재된 링커 모이어티이다. 일부 실시형태에서, LRM은 본 명세서에 기재된 링커 모이어티이다. 일부 실시형태에서, LPM은 본 명세서에 기재된 바와 같은 L이다. 일부 실시형태에서, LPM은 본 명세서에 기재된 바와 같은 링커 모이어티이다. 일부 실시형태에서, LPM은 본 명세서에 기재된 바와 같은 L이다.
다양한 유형 및/또는 다양한 목적을 위한 링커 모이어티, 예를 들어, 항체-약물 접합체에서 이용되는 것 등은 본 개시내용에 따라 이용될 수 있다.
링커 모이어티는 이들이 사용된 방법에 따라 2가 또는 다가 중 하나일 수 있다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 2가이다. 일부 실시형태에서, 링커는 다가이며, 2개 초과의 모이어티를 연결한다.
일부 실시형태에서, 링커 모이어티, 예를 들어, Lz(식 중, z는 첨자; 예를 들어, LPM, LRM, LLG, LLG1 등을 나타냄)는 L이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, L은 공유 결합이거나, 하나 이상의 지방족, 아릴, 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로지방족, 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로방향족 또는 이들의 임의의 조합을 포함하는 2가 또는 다가 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-100 기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 C1-6 알킬렌, C1-6 알켄일렌, 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 2가 C1-6 헤테로지방족기, -C≡C-, -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 선택적 및 독립적으로 대체되고, n은 1 내지 20이다. 일부 실시형태에서, 각각의 아미노산 잔기는 독립적으로 식 A-I의 구조식 또는 이의 염을 갖는 아미노산의 잔기이다. 일부 실시형태에서, 각각의 아미노산 잔기는 독립적으로 -N(Ra1)-La1-C(Ra2)(Ra3)-La2-CO-의 구조식 또는 이의 염 형태를 갖는다.
일부 실시형태에서, L은 2가이다. 일부 실시형태에서, L은 공유 결합이다.
일부 실시형태에서, L은 C1-00 지방족 및 1 내지 50개의 헤테로원자를 갖는 C1-100 헤테로지방족으로부터 선택된 2가 또는 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 C1-6 알킬렌, C1-6 알켄일렌, 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 2가 C1-6 헤테로지방족기, -C≡C-, -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 선택적 및 독립적으로 대체된다.
일부 실시형태에서, L은 C1-20 지방족 및 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-20 헤테로지방족으로부터 선택된 2가 또는 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 C1-6 알킬렌, C1-6 알켄일렌, 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 2가 C1-6 헤테로지방족기, -C≡C-, -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 선택적 및 독립적으로 대체된다.
일부 실시형태에서, L은 C1-20 지방족으로부터 선택된 2가 또는 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C≡C-, -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-으로 선택적 및 독립적으로 대체된다.
일부 실시형태에서, L은 C1-20 지방족으로부터 선택된 2가 또는 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C≡C-, -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, 아미노산 잔기 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-으로 선택적 및 독립적으로 대체된다.
일부 실시형태에서, L은 C1-20 지방족으로부터 선택된 2가 또는 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C≡C-, -Cy-, -C(R')2-, -O-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, 아미노산 잔기 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-으로 선택적 및 독립적으로 대체된다.
일부 실시형태에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L, LPM, LRM 등은 산성기, 예를 들어, -S(O)2OH를 포함한다.
일부 실시형태에서, L은 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, L은 -[(-O-CH2-CH2-)n]-이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, L은 -[(-CH2-CH2-O)6]-CH2-CH2-이다. 일부 실시형태에서, L은 -[(-CH2-CH2-O)8]-CH2-CH2-이다. 일부 실시형태에서, -CH2-CH2-O-는 -CH2-에서 표적 결합 모이어티에 결합된다. 일부 실시형태에서, -CH2-CH2-O-는 -CH2-에서 관심 모이어티에 결합된다. 일부 실시형태에서, LPM은 본 명세서에 기재된 바와 같은 이러한 L이다. 일부 실시형태에서, LRM은 본 명세서에 기재된 바와 같은 이러한 L이다.
일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 3가 또는 다가이다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 본 명세서에 기재된 바와 같은 L이고, L은 3가 또는 다가이다. 일부 실시형태에서, L은 3가이다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, L은 -CH2-N(-CH2-)-C(O)-이다.
일부 실시형태에서, L은 생물직교성(bioorthogonal) 또는 효소 반응 생성물 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, L은 선택적으로 치환된 트라이아졸 모이어티(선택적으로 이환식 또는 다환식 고리계의 부분임)이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, L은 LPXTG이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, L은 LPETG이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, L은 LPXT(G)n이거나 이를 포함하되, n은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이다. 일부 실시형태에서, L은 LPET(G)n이거나 이를 포함하되, n은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이다.
일부 실시형태에서, 제공된 화합물/제제(예를 들어, 반응 상대, 제제(예를 들어, 제공된 방법 및/또는 이의 단계들의 생성물)은 표적 제제 및/또는 표적 제제 모이어티를 포함하는 제제(예를 들어, 표적 제제 모이어티를 포함하는 접합 생성물)를 실질적으로 손상 또는 전환시키지 않는 조건 하에 절단될 수 있는 절단 가능한 기를 포함하지 않는다(하나 이상의 반응기 및/또는 이의 모이어티를 제외함). 일부 실시형태에서, 제공된 화합물/제제(예를 들어, 반응 상대, 제제(예를 들어, 제공된 방법 및/또는 이의 단계들의 생성물)는 표적 제제 및/또는 한 가지 이상의 용도를 위한(예를 들어, 진단제, 치료제 등으로서 사용하기 위한) 표적 제제 모이어티(예를 들어, 표적 제제 모이어티를 포함하는 접합 생성물)를 포함하는 제제를 제공하지 않는 조건 하에 절단될 수 있는 절단 가능한 기(하나 이상의 반응기 및/또는 이의 모이어티를 제외함)를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물/제제(예를 들어, 반응 상대, 제제(예를 들어, 제공된 방법 및/또는 이의 단계들의 생성물)는 생물직교성 조건 하에 절단될 수 있는 절단 가능한 기를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물/제제(예를 들어, 반응 상대, 제제(예를 들어, 제공된 방법 및/또는 이의 단계들의 생성물)는 단백질을 실질적으로 손상 및/또는 전환시키는 일 없이 절단될 수 있는 절단 가능한 기를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 절단 가능한 기는 -S-, -S-S-, -S-Cy-, -C(O)-O-, -C(O)-S-, 아세탈 모이어티, -N=N-, 이민 모이어티, -CH=N-, -P(O)(OR)O- 모이어티, -P(O)(OR)-N(R)- 모이어티, --C(O)-CH2-C(COOH)=CHC(O)- 모이어티, -CHOH-CHOH- 모이어티, -Se- 모이어티, 2개의 산소 원자에 결합된 Si, -C(O)-CH2-이거나 이들을 포함하되, -CH2-는 벤질 탄소에 결합되고, 벤질기의 페닐 고리는 -NO2-, -C(O)-CH2-로 치환되며, -CH2-는 벤질 탄소에 결합되고, 벤질기의 페닐 고리는 o-위치에서 -NO2-, 또는 -C(O)-N(-)- 모이어티로 치환되며, N은 헤테로아릴 고리의 질소 원자이다. 일부 실시형태에서, 절단 가능한 기는 S-S-, -S-CH2-Cy-, -S-Cy-, -C(O)-O-, -C(O)-S-, 아세탈 모이어티, -N=N-, 이민 모이어티, -CH=N-, -P(O)(OR)O- 모이어티, -P(O)(OR)-N(R)- 모이어티, --C(O)-CH2-C(COOH)=CHC(O)- 모이어티, -CHOH-CHOH- 모이어티, -Se- 모이어티, 2개의 산소 원자에 결합된 Si, -C(O)-CH2-이거나 이들을 포함하되, -CH2-는 벤질 탄소에 결합되고, 벤질기의 페닐 고리는 -NO2-, -C(O)-CH2-로 치환되며, -CH2-는 벤질 탄소에 결합되고, 벤질기의 페닐 고리는 o-위치에서 -NO2-, 또는 -C(O)-N(-)- 모이어티로 치환되며, N은 헤테로아릴 고리의 질소 원자이다. 일부 실시형태에서, 절단 가능한 기는 WO 2018199337A1 또는 AU 2018259856에 기재된 절단 가능한 링커 또는 절단 가능한 부분, 절단 가능한 링커들 및 절단 가능한 부분들이며, 이들 각각은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 일부 실시형태에서, 절단 가능한 기는 하기와 같다:
Figure pct00272
여기서:
결합에 직교성인 물결선은 잠재적 절단 부위를 나타내고,
R2a, R2b 및 R2c는 동일 또는 상이하고, 각각 독립적으로:
(i) 수소 원자 또는 할로겐 원자;
(ii) 1가 탄화수소기;
(iii) 아랄킬;
(iv) 1가 복소환식기;
(v) Rc-O-, Rc-C(O)-, Rc-O-C(O)- 또는 Rc-C(O)-O-(여기서, Rc는 수소 또는 1가 탄화수소기임);
(vi) -NRdRe, -NRdRe-C(O)-, -NRdRe-C(O)O-, -NRd-C(O)-, -NRd-C(O)O- 또는 Rd-C(O)-NRe-(여기서, Rd 및 Re는 동일 또는 상이하고, 각각은 수소 원자 또는 1가 탄화수소기임); 또는
(vii) 나이트로기, 황산기, 설폰산기, 사이아노기 및 카복실기로 이루어진 군으로부터 선택됨;
J는 -CH2-, -O- 또는 -S-이고;
r은 1 내지 4의 임의의 정수이며;
백색 원 및 검정 원은 독립적으로 다른 모이어티에 대한 결합 연결이고;
일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 상기 절단 가능한 기를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 다음의 모이어티: -S-, S-S-, -S-CH2-Cy-, -S-Cy-, -C(O)-O-, -C(O)-S-, 아세탈 모이어티, -N=N-, 이민 모이어티, -CH=N-, -P(O)(OR)O- 모이어티, -P(O)(OR)-N(R)- 모이어티, --C(O)-CH2-C(COOH)=CHC(O)- 모이어티, -CHOH-CHOH- 모이어티, -Se- 모이어티, 2개의 산소 원자에 결합된 Si, -C(O)-CH2- 중 하나 이상 또는 어느 것을 포함하지 않되, -CH2-는 벤질 탄소에 결합되고, 벤질기의 페닐 고리는 -NO2-, -C(O)-CH2-로 치환되며, -CH2-는 벤질 탄소에 결합되고, 벤질기의 페닐 고리는 o-위치에서 -NO2-, 또는 -C(O)-N(-)- 모이어티로 치환되며, N은 헤테로아릴 고리의 질소 원자이다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 다음의 모이어티: S-S-, -S-CH2-Cy-, -S-Cy-, -C(O)-O-, -C(O)-S-, 아세탈 모이어티, -N=N-, 이민 모이어티, -CH=N-, -P(O)(OR)O- 모이어티, -P(O)(OR)-N(R)- 모이어티, -C(O)-CH2-C(COOH)=CHC(O)- 모이어티, -CHOH-CHOH- 모이어티, -Se- 모이어티, 2개의 산소 원자에 결합된 Si, -C(O)-CH2- 중 하나 이상 또는 어느 것을 포함하지 않되, -CH2-는 벤질 탄소에 결합되고, 벤질기의 페닐 고리는 -NO2-, -C(O)-CH2-로 치환되며, -CH2-는 벤질 탄소에 결합되고, 벤질기의 페닐 고리는 o-위치에서 -NO2-, 또는 -C(O)-N(-)- 모이어티로 치환되며, N은 헤테로아릴 고리의 질소 원자이다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 -S-를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 -S-S-를 포함하지 않는다(선택적으로 2개의 아미노산 잔기에 의해 형성되는 이황화물 모이어티를 제외함, 일부 실시형태에서, 선택적으로 2개의 시스테인 잔기에 의해 형성되는 이황화물 모이어티를 제외함). 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 -S-Cy-를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 -S-CH2-Cy-를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 -C(O)-O-를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 -C(O)-S-를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 아세탈 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 -N=N-를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 이민 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 -CH=N-을 포함하지 않는다(선택적으로 고리에서를 제외, 일부 실시형태에서, 선택적으로 헤테로아릴 고리에서를 제외). 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 -P(O)(OR)O- 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 -P(O)(OR)-N(R)- 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 --C(O)-CH2-C(COOH)=CHC(O)- 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 -CHOH-CHOH- 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 -Se- 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 2개의 산소 원자에 결합된 Si를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 -C(O)-CH2-를 포함하지 않되, -CH2-는 벤질 탄소에 결합되고, 벤질기의 페닐 고리는 NO2-로 치환된다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 -C(O)-CH2-를 포함하지 않되, -CH2-는 벤질 탄소에 결합되고, 벤질기의 페닐 고리는 o-위치에서 NO2-로 치환된다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 C(O)-N(-)- 모이어티를 포함하지 않되, N은 헤테로아릴 고리의 고리 원자이다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 이들 기 중 어느 것을 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, LRM은 이러한 링커 모이어티이다. 일부 실시형태에서, LPM은 이러한 링커 모이어티이다. 일부 실시형태에서, LLG는 이러한 링커 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용의 제제는 이러한 모이어티 중 하나 이상 또는 모두를 포함하지 않는다.
일부 실시형태에서, L은 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, L은 2가 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-100 지방족기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 선택적 및 독립적으로 대체된다. 일부 실시형태에서, L은 2가 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 C6-100 아릴지방족기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 선택적 및 독립적으로 대체된다. 일부 실시형태에서, L은 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 2가 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 C5-100 헤테로아릴지방족기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 선택적 및 독립적으로 대체된다. 일부 실시형태에서, L은 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 2가 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-100 헤테로지방족기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 선택적 및 독립적으로 대체된다.
일부 실시형태에서, 링커 모이어티(예를 들어, L)는 하나 이상의(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20개 이상의) 폴리에틸렌 글리콜 단위이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 -(CH2CH2O)n-이거나 이를 포함하되, n은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 -(CH2CH2O)n-으로 대체된다.
본 명세서에 기재된 바와 같이, 일부 실시형태에서, n은 1이다. 일부 실시형태에서, n은 2이다. 일부 실시형태에서, n은 3이다. 일부 실시형태에서, n은 4이다. 일부 실시형태에서, n은 5이다. 일부 실시형태에서, n은 6이다. 일부 실시형태에서, n은 7이다. 일부 실시형태에서, n은 8이다. 일부 실시형태에서, n은 9이다. 일부 실시형태에서, n은 10이다. 일부 실시형태에서, n은 11이다. 일부 실시형태에서, n은 12이다. 일부 실시형태에서, n은 13이다. 일부 실시형태에서, n은 14이다. 일부 실시형태에서, n은 15이다. 일부 실시형태에서, n은 16이다. 일부 실시형태에서, n은 17이다. 일부 실시형태에서, n은 18이다. 일부 실시형태에서, n은 19이다. 일부 실시형태에서, n은 20이다.
일부 실시형태에서, 링커 모이어티(예를 들어, L)는 하나 이상의(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20개 이상의) 아미노산 잔기이거나 이를 포함한다. 본 개시내용에 사용되는 바와 같은 "하나 이상"은 1 내지 100, 1 내지 50, 1 내지 40, 1 내지 30, 1 내지 20, 1 내지 10, 1 내지 5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20개 이상일 수 있다. 일부 실시형태에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 아미노산 잔기로 독립적으로 대체된다. 일부 실시형태에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 아미노산 잔기로 대체되되, 아미노산 잔기는 식 A-I 또는 이의 염의 아미노산을 갖는다. 일부 실시형태에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 아미노산 잔기로 독립적으로 대체되되, 각각의 아미노산 잔기는 독립적으로 -N(Ra1)-La1-C(Ra2)(Ra3)-La2-CO-를 구조식 또는 이의 염 형태를 갖는다.
일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 하나 이상의 모이어티, 예를 들어, 다른 모이어티와의 결합을 위해 이용될 수 있는 아미노, 카본일 등을 포함한다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 하나 이상의 -NR'-이되, R'는 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, -NR'-는 용해도를 개선시킨다. 일부 실시형태에서, -NR'-는 다른 모이어티에 대한 연결 지점으로서 작용한다. 일부 실시형태에서, R'는 -H이다. 일부 실시형태에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 -NR'-로 대체되되, R'는 본 개시내용에 기재된 바와 같다.
일부 실시형태에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 모이어티와의 연결을 위해 이용될 수 있는 -C(O)- 기를 포함한다. 일부 실시형태에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 -C(O)-로 대체된다.
일부 실시형태에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 모이어티와의 연결을 위해 이용될 수 있는 -NR'- 기를 포함한다. 일부 실시형태에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 -N(R')-로 대체된다.
일부 실시형태에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 모이어티와의 연결을 위해 이용될 수 있는 -C(O)NR'- 기를 포함한다. 일부 실시형태에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 -C(O)N(R')-로 대체된다.
일부 실시형태에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 -C(R')2- 기를 포함한다. 일부 실시형태에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 -C(R')2-로 대체된다. 일부 실시형태에서, -C(R')2-는 -CHR'-이다. 일부 실시형태에서, R'는 -(CH2)2C(O)NH(CH2)11COOH이다. 일부 실시형태에서, R'는 -(CH2)2COOH이다. 일부 실시형태에서, R'는 -COOH이다.
일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 하나 이상의 고리 모이어티이거나 이를 포함하고, 예를 들어, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -Cy-로 대체된다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 아릴 고리를 포함한다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 헤테로아릴 고리를 포함한다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 지방족 고리를 포함한다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 헤테로사이클릴 고리를 포함한다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 다환식 고리를 포함한다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L에서 고리는 3 내지 20원이다. 일부 실시형태에서, 고리는 5원이다. 일부 실시형태에서, 고리는 6원이다. 일부 실시형태에서, 링커에서 고리는 상이한 모이어티를 함께 연결하기 위해 이용되는 고리화 첨가 반응(예를 들어, 클릭 화학, 및 이의 변이체)의 생성물이다.
일부 실시형태에서, 링커 모이어티(예를 들어, L)는
Figure pct00273
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, L의 메틸렌 단위는
Figure pct00274
로 대체된다. 일부 실시형태에서, L의 메틸렌 단위는 -Cy-로 대체된다. 일부 실시형태에서, -Cy-는
Figure pct00275
이다.
일부 실시형태에서, 링커 모이어티(예를 들어, L)는 -Cy-이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, L의 메틸렌 단위는 -Cy-로 대체된다. 일부 실시형태에서, -Cy-는
Figure pct00276
이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는
Figure pct00277
이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는
Figure pct00278
이다.
일부 실시형태에서, 제공된 제제, 예를 들어, 표 1의 화합물에서 링커 모이어티, 예를 들어, L은
Figure pct00279
를 포함한다. 일부 실시형태에서,
Figure pct00280
는 구조식에서
Figure pct00281
또는
Figure pct00282
이다. 일부 실시형태에서,
Figure pct00283
는
Figure pct00284
이다. 일부 실시형태에서,
Figure pct00285
는
Figure pct00286
이다.
일부 실시형태에서, 링커 모이어티는 표 1에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, L은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 L1이다. 일부 실시형태에서, L은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 Lb이다.
일부 실시형태에서, LRM은 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, LRM은 공유 결합이 아니다. 일부 실시형태에서, LRM은 -(CH2CH2O)n-이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, LRM은 -(CH2)n-O-(CH2CH2O)n-(CH2)n-이거나 이를 포함하되, 각각의 n은 독립적으로 본 명세서에 기재된 바와 같고, 각각의 -CH2-는 독립적으로 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, LRM은 -(CH2)n-O-(CH2CH2O)n-(CH2)n-이되, 각각의 n은 독립적으로 본 명세서에 기재된 바와 같고, 각각의 -CH2-는 독립적으로 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, LRM은 -(CH2)2-O-(CH2CH2O)n-(CH2)2-이되, n은 본 명세서에 기재된 바와 같고, 각각의 -CH2-는 독립적으로 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, LRM은 -(CH2)2-O-(CH2CH2O)n-(CH2)2-이되, n은 본 명세서에 기재된 바와 같다.
일부 실시형태에서, LPM은 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, LPM은 공유 결합이 아니다. 일부 실시형태에서, LPM은 -(CH2CH2O)n-이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, LPM은 -(CH2)n-O-(CH2CH2O)n-(CH2)n-이거나 이를 포함하되, 각각의 n은 독립적으로 본 명세서에 기재된 바와 같고, 각각의 -CH2-는 독립적으로 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, LPM은 -(CH2)n-O-(CH2CH2O)n-(CH2)n-이되, 각각의 n은 독립적으로 본 명세서에 기재된 바와 같고, 각각의 -CH2-는 독립적으로 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, LPM은 -(CH2)2-O-(CH2CH2O)n-(CH2)2-이되, n은 본 명세서에 기재된 바와 같고, 각각의 -CH2-는 독립적으로 선택적으로 치환된다. 일부 실시형태에서, LPM은 -(CH2)2-O-(CH2CH2O)n-(CH2)2-이되, n은 본 명세서에 기재된 바와 같다.
일부 실시형태에서, LPM(예를 들어, 제1 제제 및 제2 제제의 생성물에서)은 제1 반응성 모이어티 및 제2 반응성 모이어티를 형성한 반응 생성물 모이어티이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 링커 모이어티(예를 들어, 제1 제제 및 제2 제제의 생성물에서 LPM)는
Figure pct00287
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L 또는 L일 수 있는 링커 모이어티(예를 들어, LRM, LPM 등)의 메틸렌 단위는 -Cy-로 대체된다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 선택적으로 치환된
Figure pct00288
이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는
Figure pct00289
이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는
Figure pct00290
이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는
Figure pct00291
이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는
Figure pct00292
이다.
관심 모이어티
본 개시내용의 당업자는 다양한 유형의 관심 모이어티가 본 개시내용에 따라 다양한 목적을 위해 이용될 수 있다는 것을 인식할 것이다.
예를 들어, 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 검출 가능한 모이어티이거나 이를 포함한다. 특히, 이러한 모이어티는 검출, 정량화, 진단, 치료 등에 유용할 수 있다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 방사성 표지이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 분광학을 통해 검출될 수 있는 표지이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 FITC 모이어티와 같은 형광단이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는
Figure pct00293
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는
Figure pct00294
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 효소, 예를 들어, 퍼옥시다제, 알칼리성 포스파타제, 루시퍼라제, b-갈락토시다제 등의 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 친화도 물질, 예를 들어, 스트렙타비딘, 바이오틴 등이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 치료제 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 약물 모이어티, 예를 들어, 항체-약물 접합체에서의 약물 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 독성 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 세포독성제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 항암제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 항암제는 화학치료제이다. 일부 실시형태에서, 항암제는 DNA 손상제, 대사길항물질, 효소 저해제, DNA 끼어들기 약물, DNA 절단제, 토포아이소머라제 저해제, DNA 결합 저해제, 튜불린 결합 저해제, 세포독성 뉴클레오사이드 및 백금 화합물로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 항암제는 박테리아독소(예를 들어, 디프테리아 독소) 및 식물독소(예를 들어, 리신)를 포함하는 독소로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 치료제는 세포분열억제제이다. 일부 실시형태에서, 치료제는 메이탄시노이드 제제이다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 DM1 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 DM4 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 치료제는 아우리스타틴 제제이다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 모노메틸 아우리스타틴-E 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 모노메틸 아우리스타틴-F 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 엑사테칸 또는 이의 유도체(예를 들어, DXd)이다. 일부 실시형태에서, 치료제는 DNA 상호작용 제제이다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 칼리케아마이신 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 CC-1065 제제 또는 이의 유사체이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 듀오카마이신 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 치료제는 전사 저해제이다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 아마톡신제이거나 이를 포함한다. 당업자에 의해 인식되는 바와 같이, 다양한 치료제, 예를 들어, FDA, EMA 등에 의한 다수의 승인 약물을 포함하는 항암제는 본 개시내용에 따라 이용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 치료제는 소분자이다. 일부 실시형태에서, 치료제는 펩타이드이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 치료제는 단백질이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 치료제는 핵산 제제(예를 들어, 올리고뉴클레오타이드, RNA 치료제 등)이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 소분자 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 폴리펩타이드 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 핵산 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 올리고뉴클레오타이드 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 탄수화물 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 지질 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 치료제 모이어티를 포함하는 제공된 화합물 또는 제제는 치료제에 의해 치료될 수 있는 병태, 장애 또는 질환을 치료하는 데 유용하다.
일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 다른 제제, 예컨대, 단백질, 핵산, 세포 등과 상호작용하고/하거나 보충할 수 있는 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 특정 세포 유형, 예를 들어, 면역 세포, 질환 세포 등에 의해 발현되는 단백질과 상호작용한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 면역 세포 결합제이다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 면역 세포를 보충한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는, 예를 들어, 목적하는 표적(예를 들어, 암세포, 항원 등)을 제거, 살해 및/또는 저해하기 위한, 한 가지 이상의 면역 활성을 촉발하고/하거나 촉진시키고/시키거나, 향상시킨다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 질환 세포와 상호작용하고/하거나 보충하고/하거나 결합하고, 질환 세포의 제거, 사멸 및/또는 저해를 촉발하고/하거나, 촉진시키고/시키거나 향상시킨다.
일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 소분자 제제이거나 이를 포함한다(예를 들어, 이의 단백질 표적, 세포 표적 등에 특이적으로 결합할 수 있음). 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 펩타이드 또는 단백질 제제(예를 들어, 특정 표적에 대한 scFv, 펩타이드 결합제 등)이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 핵산 제제(예를 들어, 올리고뉴클레오타이드, mRNA 등)이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 탄수화물 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 지질 제제이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 단백질 복합체(예를 들어, Fab)이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 형광단이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 세포독성 소분자 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 세포독성 펩타이드 제제이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 아쥬반트이다. 당업자는 다양한 아쥬반트가 본 개시내용에 따른 관심 모이어티로서 이용될 수 있다는 것을 인식할 것이다. 일부 실시형태에서, 아쥬반트는 US20190015516에 기재된 것이다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 면역계를 자극한다.
일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 입자이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 입자는 나노입자이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 나노입자이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 입자는 금-나노입자이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 입자는 초상자성 산화철(SPIO) 나노입자이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 하나 이상의 금- 및 초상자성 산화철 나노입자를 포함하는 치료제이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 핵산 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 올리고뉴클레오타이드이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 앱타머이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 DNA 및/또는 RNA 앱타머이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 앱타머는 이중가닥 또는 단일가닥 DNA 서열 또는 RNA 서열이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 서열은 부분적으로 또는 완전히 정해진다. 일부 실시형태에서, 앱타머는 페갑타닙이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 I-66, I-67, I-68 또는 I-69의 구조식, 또는 이의 염을 갖는 제제를 제공한다.
일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 항체 제제이다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 항체 단편이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 표적 결합 모이어티가 결합하는 영역을 포함하지 않는 항체 제제 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 Fc 영역을 포함하지 않는 항체 제제이다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 scFv이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, scFv는 항체 표적 제제와 상이한 항원에 대한 것이다.
일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 반응성 모이어티, 특히 생물직교성 반응에 대한 해당 반응 상대이거나 이를 포함한다. 생물직교성 반응을 위한 것을 포함하는 적합한 반응성 모이어티는 당업계에 널리 공지되어 있으며, 본 명세서에서 이용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 생물직교성 반응은 고리화 첨가 반응, 예를 들어, 클릭 화학이다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 -N3이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 알킨이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 무 금속 클릭 화학에 적합한 알킨이거나 이를 포함한다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 선택적으로 치환된
Figure pct00295
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는
Figure pct00296
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는
Figure pct00297
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 선택적으로 치환된
Figure pct00298
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는
Figure pct00299
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는
Figure pct00300
이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 알데하이드, 케톤, 알콕시아민 또는 하이드라자이드 모이어티이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 표적 제제의 한 가지 이상의 특성 및/또는 활성을 개선시킨다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 안정성 향상제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 표적 제제의 한 가지 이상의 약력학적 및/또는 약물동태학적 특성을 개선시킨다.
일부 실시형태에서, 관심 모이어티는, 예를 들어, 검출, 형질전환 등을 위한 펩타이드 태그이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 태그는 GGGGG이거나 이를 포함하고, 예를 들어, LPETG 태그 단백질과의 소르타제 A 매개 반응을 위한 기질로서 작용할 수 있다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 태그는 LPXTG이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 펩타이드 태그는 LPETG이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 (G)n이거나 이를 포함하되, n은 1 내지 10이다. 일부 실시형태에서, 제1 G는 N-말단의 잔기이다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 LPXTG이거나 이를 포함하되, X는 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 LPETG이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 LPXTG-(X)n이거나 이를 포함하되, 각 X는 독립적으로 아미노산 잔기이고, n은 1 내지 10이다. 일부 실시형태에서, 관심 모이어티는 LPETG-(X)n이거나 이를 포함하되, 각 X는 독립적으로 아미노산 잔기이고, n은 1 내지 10이다. 일부 실시형태에서, n은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이다. 일부 실시형태에서, n은 2이다. 일부 실시형태에서, n은 3이다. 일부 실시형태에서, n은 4이다. 일부 실시형태에서, n은 5이다. 일부 실시형태에서, n은 2 내지 10이다. 일부 실시형태에서, n은 2 내지 5이다. 일부 실시형태에서, n은 3 내지 10이다. 일부 실시형태에서, n은 3 내지 5이다.
당업자에 의해 인식될 바와 같이, 다양한 펩타이드 태그를 이용 가능하며, 본 개시내용에 따라 이용될 수 있다.
일부 실시형태에서, 제공된 방법은, 하기를 추가로 포함한다:
예를 들어, 제1 관심 모이어티에서 제1 반응성 모이어티를 포함하는 제1 제제를 제2 반응성 모이어티를 포함하는 제2 제제와 반응시키는 단계. 다양한 실시형태에서, 제1 반응성 모이어티는, 예를 들어, 본 명세서에 기재된 방법을 통해(예를 들어, 식 R-I의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 염과의 접촉을 통해) 혼입될 수 있는, 제1 관심 모이어티에 있다.
일부 실시형태에서, 제1 관심 모이어티는 표적 결합 모이어티를 포함하지 않는 화합물에 있다. 일부 실시형태에서, 제1 관심 모이어티는 식 P-I 또는 P-II의 화합물, 또는 이의 염에 있다. 일부 실시형태에서, 제1 관심 모이어티는 R-I의 화합물, 또는 이의 염에 있다. 일부 실시형태에서, 제1 제제는 식 P-I 또는 P-II의 구조식 또는 이의 염을 갖는다.
일부 실시형태에서, 제2 제제는 제2 반응성 모이어티에 선택적으로 링커를 통해 연결된 펩타이드 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 제제는 제2 반응성 모이어티에 선택적으로 링커를 통해 연결된 펩타이드 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 제제는 제2 반응성 모이어티에 선택적으로 링커를 통해 연결된 항체 제제 모이어티를 포함한다.
일부 실시형태에서, 제2 관심 모이어티는 표적 결합 모이어티를 포함하지 않는 화합물에 있다. 일부 실시형태에서, 제2 관심 모이어티는 식 P-I 또는 P-II의 화합물, 또는 이의 염에 있다. 일부 실시형태에서, 제2 관심 모이어티는 R-I의 화합물, 또는 이의 염에 있다. 일부 실시형태에서, 제2 제제는 식 P-I 또는 P-II의 구조식 또는 이의 염을 갖는다. 일부 실시형태에서, 제2 반응성 모이어티는 제2 제제의 관심 모이어티에 있다. 일부 실시형태에서, 제2 제제는 본 명세서에 기재된 바와 같은 표적 제제 모이어티를 포함한다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 제2 제제에서 표적 제제 모이어티는 펩타이드 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 제제에서 표적 제제 모이어티는 본 명세서에 기재된 바와 같은 항체 제제 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 이는 scFv 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 제제에서 표적 제제 모이어티는 제1 제제에 비해 상이한 특이성을 제공한다. 일부 실시형태에서, 이러한 제1 제제 및 제2 제제는 본 명세서에 기재된 바와 같은 상이한 특이성을 갖는 모이어티를 포함하는 다양한 생성물 제제를 제공하기 위해 서로 반응한다.
일부 실시형태에서, 제1 반응성 모이어티와 제2 반응성 모이어티 사이의 반응은 생물직교성 반응이다. 일부 실시형태에서, 반응은 고리화 첨가 반응이다. 일부 실시형태에서, 반응은 [3+2] 반응이다. 적합한 이러한 반응 및 대응하는 제1 반응성 모이어티 및 제2 반응성 모이어티는 당업계에 널리 공지되어 있으며, 본 개시내용에 따라 이용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 제1 반응성 모이어티는 -N3이거나 이를 포함하고, 제2 반응성 모이어티는 -≡-(예를 들어, 무 금속 클릭 화학에 적합한 것을 포함하는, 클릭 화학에 적합한 알킨 모이어티)이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 반응성 모이어티는 -N3이거나 이를 포함하고, 제1 반응성 모이어티는 -≡-(예를 들어, 무 금속 클릭 화학에 적합한 것을 포함하는, 클릭 화학에 적합한 알킨 모이어티)이거나 이를 포함한다.
본 명세서에 기재된 바와 같이, 일부 실시형태에서, 제1 반응성 모이어티와 제2 반응성 모이어티 사이의 반응은 효소 반응이다. 일부 실시형태에서, 반응은 소르타제-매개 반응이다. 일부 실시형태에서, 제1 반응성 모이어티 및 제2 반응성 모이어티 각각은 독립적으로 반응, 예를 들어, 효소 반응을 위한 적합한 모이어티이거나 이를 포함한다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 소르타제-매개 접합을 위해, 반응성 모이어티는 (G)n(예를 들어, n은 3, 4, 5 등임)이거나 이를 포함하고, 반응성 모이어티는 LPXTG(예를 들어, LPETG)이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 반응성 모이어티는 LPXTG-(X)n(예를 들어, LPETG-(X)n, LPETG-XX 등)이거나 이를 포함한다. 본 개시내용을 읽는 당업자는 다양한 반응성 모이어티가 본 개시내용에 따라 접합을 위해, 효소 및/또는 비효소 경로를 통해 이용될 수 있다는 것을 인식할 것이다. 일부 실시형태에서, 제1 반응성 모이어티를 포함하는 화합물은 I-53, I-54, I-55, I-56, I-57 또는 I-58, 또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 제2 반응성 모이어티를 포함하는 화합물은
Figure pct00301
또는 이의 단편, 또는 서열번호 1 또는 이의 단편, 또는 이의 염과 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%의 상동성을 공유하는 서열이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 반응성 모이어티를 포함하는 화합물은 화합물 II-I이다:
Figure pct00302
또는 이의 염.
일부 실시형태에서, 제2 제제는 본 명세서에 기재된 바와 같은 관심 모이어티인 제2 관심 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 반응성 모이어티 및 제2 관심 모이어티는 링커(예를 들어, 본 명세서에 기재된 바와 같은 링커(예를 들어, 본 명세서에 기재된 바와 같은 LPM, L 등)를 통해 연결된다. 일부 실시형태에서, 제2 관심 모이어티는 본 명세서에 기재된 바와 같다(예를 들어, 단백질, 핵산, 면역 세포, 질환 세포 등과 상호작용하고/하거나 인식하고/하거나 결합할 수 있는 검출 모이어티, 치료적 모이어티, 관심 모이어티). 일부 실시형태에서, 제2 관심 모이어티는 항체 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 관심 모이어티는 scFv 항체 제제이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 항체 제제는 초기 표적 항체 제제와 비교할 때 상이한 특이성을 갖는다. 따라서, 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 이중특이성 항체 제제, 이의 조성물 및 방법을 제공한다. 일부 실시형태에서, 표적 제제는 제1 항체 제제이거나 이를 포함하고, 이는 제1 반응성 모이어티를 포함하는 관심 모이어티와 접합된다. 일부 실시형태에서, 제1 항체 제제 및 제1 반응성 모이어티를 포함하는 제제는 제1 항체 제제 및 제2 항체 제제를 포함하는 제제를 제공하기 위해 제2 항체 제제이거나 이를 포함하는 제2 반응성 모이어티 및 제2 관심 모이어티를 포함하는 제2 제제와 반응된다. 일부 실시형태에서, 제1 항체 제제와 제2 항체 제제는 상이하다. 일부 실시형태에서, 이들은 동일하다.
일부 실시형태에서, 제제는 2개 이상의 항체 제제 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 단일 제제 분자에서 항체 제제 모이어티는 상이한 표적 특이성을 갖는다. 일부 실시형태에서, 단일 제제 분자에서 일부 또는 모든 항체 제제 모이어티는 동일한 표적 특이성을 갖는다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 바와 같은 제제는 상이한 표적 특이성을 갖는 모이어티(예를 들어, 상이한 표적 특이성을 갖는 항체 모이어티)이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제제는 이중특이성 항체 제제이다. 일부 실시형태에서, 제제는 제1 모이어티(예를 들어, 제1 항체 제제 모이어티) 및 제2 모이어티(예를 들어, 제2 항체 제제 모이어티)를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제1 모이어티(예를 들어, 제1 항체 제제 모이어티)는 IgG 또는 이의 단편이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제1 모이어티(예를 들어, 제1 항체 제제 모이어티)는 표적 결합 모이어티가 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티 또는 이의 단편(예를 들어, Fc 영역 또는 이의 단편)이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 모이어티(예를 들어, 제2 항체 제제 모이어티)는 IgG 또는 이의 단편이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 모이어티(예를 들어, 제2 항체 제제 모이어티)는 표적 결합 모이어티가 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티 또는 이의 단편(예를 들어, Fc 영역 또는 이의 단편)이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체 제제 모이어티, 예를 들어, 제2 항체 제제 모이어티는 표적 결합 모이어티가 결합할 수 있는 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 항체 제제 모이어티, 예를 들어, 제2 항체 제제 모이어티는 표적 결합 모이어티가 결합할 수 있는 Fc 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 항체 제제 모이어티, 예를 들어, 제2 항체 제제 모이어티는 scFv이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제1 모이어티는 제1 제제의 제제 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 모이어티는 제2 제제의 관심 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제1 제제, 예를 들어, 제1 항체 제제 모이어티를 포함하는 것은 표적 특이성을 갖는 둘 이상의 모이어티(예를 들어, 항체 제제 모이어티)를 포함하는 제제를 제공하기 위해 제2 제제, 예를 들어, 제2 항체 제제 모이어티를 포함하는 것과 접촉된다.
일부 실시형태에서, 모이어티, 예를 들어, 제1 모이어티는 병태, 장애 또는 질환(예를 들어, 암)과 연관된 표적(예를 들어, 단백질, 지질, 탄수화물, 대상 등)에 결합하는 항체 제제 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 모이어티, 예를 들어, 제1 모이어티는 병태, 장애 또는 질환, 예를 들어, 암을 예방 또는 치료하는 데 적합한 항체 제제의 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 모이어티, 예를 들어, 제1 모이어티는 암세포, 조직, 기관 등을 표적화하는 항체 제제의 모이어티이거나 이를 포함한다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 제1 모이어티는 항-CD20 항체 또는 이의 단편의 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제1 모이어티는 리툭시맙 또는 이의 단편이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 모이어티, 예를 들어, 제2 모이어티는 제2 관심 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 모이어티, 예를 들어, 제2 모이어티는 면역 활성을 보충 및/또는 활성화시킬 수 있는 항체 제제 모이어티, 예를 들어, 하나 이상의 면역 세포이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 모이어티, 예를 들어, 제2 모이어티는 T 세포를 보충 및/또는 활성화할 수 있는 항체 제제 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 모이어티, 예를 들어, 제2 모이어티는 항-CD3 항체 또는 이의 단편의 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-CD3 항체는 CD3-지정 scFv이다. 일부 실시형태에서, 모이어티, 예를 들어, 제1 모이어티는 표적 제제 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 제공된 제제는 항-CD20 모이어티 및 항-CD3 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제공된 제제는 항-CD20 모이어티 및 항-CD3 모이어티를 포함하되, 2개의 모이어티는 링커에 의해 연결된다. 일부 실시형태에서, 링커는 아미노산 잔기가 아닌 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 링커는 천연 단백질 생성 아미노산 잔기가 아닌 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 링커는 본 명세서에 기재된 바와 같은 링커 모이어티이다. 당업자는 둘 이상의 표적-특이적 모이어티(예를 들어, 항체 제제 모이어티)를 포함하는 제제가 본 개시내용에 따른 다양한 이점 및 특징, 예를 들어, 높은 자리 특이성, 높은 균질성, 낮은 손상 수준, 목적하는 특성 및/또는 활성(예를 들어, 표적 결합, 면역 활성의 보충 및/또는 활성화 등) 감소의 낮은 수준 또는 실질적으로 존재하지 않음 등에 의해 제조될 수 있다는 것을 인식할 것이다. 당업자는 또한, 예를 들어, 이중특이성 제제를 생성하기 위해 제공된 기술이 항체 제제, 예를 들어, 다른 모이어티에 의해 용이하게 이용 가능한 것(예를 들어, "규격품(off-the-shelf)" 치료적 항체), 예를 들어, 일부 실시형태에서, 다른 항체 제제와 용이하게 접합할 수 있다는 것을 인식할 것이다. 일부 실시형태에서, 제1 모이어티 및 제2 모이어티는 본 명세서에 기재된 바와 같은 링커에 의해 연결된다.
일부 실시형태에서, 제공된 생성물 제제는 표적 제제 모이어티와 제2 관심 모이어티(예를 들어, 2개의 항체 제제 모이어티)를 연결하는 링커 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 링커는 LRG2, LPM 또는 이의 단편, 및 제1 반응성 모이어티 및 제2 반응성 모이어티에 의해 형성되는 하나 이상의 모이어티(예를 들어, 클릭 화학에 대해, 트라이아졸 모이어티) 중 하나 이상이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 링커는 생성물 링커 모이어티, 예를 들어, 제1 반응성 모이어티와 제2 반응성 모이어티 사이의 반응에 의해 형성되는 것이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 생성물 링커 모이어티는 LPXTG이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 생성물 링커 모이어티는 LPXT(G)n이거나 이를 포함하되, n은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이다. 일부 실시형태에서, 생성물 링커 모이어티는 생물직교성 반응 생성물 모이어티, 예를 들어, 클릭 화학 반응 생성물 모이어티이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 제2 반응성 모이어티 및 제2 관심 모이어티를 포함하는 제제는 본 명세서에 제공된 기술을 이용하여 제조된다. 일부 실시형태에서, 제2 관심 모이어티는 단백질 제제 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 관심 모이어티는 항체 제제 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 관심 모이어티(예를 들어, 단백질 제제(예를 들어, 항체 제제))는 표적 제제 모이어티로서 작용할 수 있고, 제2 반응성 모이어티는 특정 제공된 방법(예를 들어, 제2 제제를 제공하기 위해 표적 제제(예를 들어, 단백질 제제(예를 들어, 항체 제제 등)를 표적 제제에 결합할 수 있는 관심 모이어티(예를 들어, 제2 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는 것)를 포함하는 반응 상대, 반응기 및 표적 결합 모이어티와 반응시키는 단계를 포함)의 이용을 위해, 관심 모이어티(예를 들어, 식 R-I의 화합물 또는 이의 염에서 MOI)로서 작용할 수 있다.
일부 실시형태에서, 제1 제제 및 제2 제제 각각은 독립적 및 선택적으로 식 P-I의 제제 또는 P-II, 또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 제1 제제 및 제2 제제 각각은 독립적으로 식 P-I의 제제 또는 P-II, 또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 제1 제제 및 제2 제제 중 적어도 하나는 본 개시내용의 방법을 이용하여 제조된다. 일부 실시형태에서, 제1 제제 및 제2 제제 각각은 본 개시내용의 방법을 이용하여 독립적으로 제조된다. 일부 실시형태에서, 제1 제제의 표적 제제 모이어티는 항체 제제이다. 일부 실시형태에서, 제1 제제는 관심 모이어티는 제1 반응성 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 제제의 표적 제제 모이어티는 항체 제제이다. 일부 실시형태에서, 제2 제제의 관심 모이어티는 제2 반응성 모이어티이거나 이를 포함한다. 본 명세서에 기재된 바와 같이, 다수의 실시형태에서, 제1 반응성 모이어티 및 제2 반응성 모이어티는 생성물 제제를 제공하기 위해 각각과 반응할 수 있다. 일부 실시형태에서, 제1 모이어티와 제2 반응성 모이어티 사이의 반응은 제1 제제 및 제2 제제에서 표적 제제와 양립 가능한, 예를 들어, 단백질 제제(예를 들어, 항체 제제)와 양립 가능한 반응이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 반응은 생물직교성 반응이다. 일부 실시형태에서, 이러한 반응은 고리화 첨가 반응이다. 일부 실시형태에서, 이러한 반응은 클릭 반응이다. 일부 실시형태에서, 이러한 반응은 무금속 클릭 반응이다. 일부 실시형태에서, 생성물 제제는 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염의 생성물 제제에서, 표적 제제 모이어티는 단백질 제제(예를 들어, 항체 제제), 일부 실시형태에서, 제1 제제의 표적 제제 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염의 생성물 제제에서, 관심 모이어티는 단백질 제제(예를 들어, 항체 제제), 일부 실시형태에서, 제2 제제의 표적 제제 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 생성물 제제는 2종 이상의 항체 제제를 포함한다. 일부 실시형태에서, 2종 이상의 항체 제제는 상이한 항원 특이성을 갖는다. 일부 실시형태에서, 2종 이상의 항체 제제는 상이한 항원으로 향한다. 일부 실시형태에서, 제공된 방법은 하기 단계를 포함한다:
식 P-I 또는 P-II의 구조식 또는 이의 염을 갖는 제1 제제를 식 P-I 또는 P-II의 구조식 또는 이의 염을 갖는 제2 제제와 반응시켜 생성물 제제를 생성하는 단계.
일부 실시형태에서, 제1 제제는 식 P-I 또는 P-II 또는 이의 염의 제제이고, 제1 제제 및 생성물 제제는 동일한 표적 제제(P 또는 P-N), 상이한 링커 LPM 및 상이한 MOI를 공유한다(예를 들어, 일부 실시형태에서, 제1 제제의 MOI는, 제1 제제 및 제2 제제의 생성물 제제의 MOI가 제2 제제의 표적 제제 모이어티(예를 들어, 항체 제제 모이어티)이거나 이를 포함하는 반응기이거나 이를 포함한다). 일부 실시형태에서, 생성물 제제의 LPM은 제1 반응성 모이어티 및 제2 반응성 모이어티의 생성물 모이어티이거나 이를 포함한다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 반응이 클릭 반응이거나 이를 포함할 때, 생성물 제제에서 LPM은 트라이아졸 모이어티(예를 들어,
Figure pct00303
등)이거나 이를 포함한다.
방법 및 생성물
일부 실시형태에서, 제공된 기술은 표적 제제(예를 들어, 관심 모이어티가 부착됨)를 반응 상대와 접촉시키는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, 접촉은 표적 제제가 생성물로서 제제를 형성하기 위해 반응 상대와 반응하는 조건 하에 그리고 시간 동안에 수행된다. 당업계의 다수의 반응 조건/반응 시간은 본 개시내용에 따른 요망되는 목적에 적합한 경우에 평가 및 이용될 수 있고; 특정 이러한 조건, 반응 시간, 평가 등은 실시예에서 기재된다.
일부 실시형태에서, 형성된 제제는 표적 제제 모이어티, 관심 모이어티 및 선택적으로 표적 제제 모이어티와 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 제제 모이어티는 표적 제제로부터(예를 들어, 표적 제제로부터 하나 이상의 -H를 제거함으로써) 유래된다. 일부 실시형태에서, 표적 제제 모이어티는 표적 제제의 하나 이상, 대부분 또는 실질적으로 모든 구조적 특징 및/또는 생물학적 기능을 유지한다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 표적 제제는 항체 제제이고, 형성된 제제에서 표적 제제 모이어티는 대응하는 항체 제제 모이어티이며, 항체 제제의 주요 기능, 예를 들어, 다양한 수용체(예를 들어, Fc 수용체, 예컨대, FcRn)와의 상호작용, 특이성을 갖는 항원의 인식, 항체 제제로서 질환 세포로 향하는 면역 활성을 촉발, 촉진 및/또는 향상시키는 것을 유지한다. 일부 실시형태에서, 형성된 제제는 표적 제제, 예를 들어, 전체로서 관심 모이어티 및/또는 형성된 제제로부터의 기능 이상의 하나 이상의 기능을 제공한다.
일부 실시형태에서, 형성된 제제는 식 P-I 또는 P-II의 구조식 또는 이의 염을 갖는다. 일부 실시형태에서, 형성된 제제(예를 들어, 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염의 MOI)에서 관심 모이어티는 형성된 제제를 제조하기 위해 이용되는 반응 상대(예를 들어, 식 R-I 또는 이의 염의 MOI)에서 관심 모이어티와 동일하다. 일부 실시형태에서, P는 단백질 모이어티이다. 일부 실시형태에서, P는 항체 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 관심 모이어티에 연결된 링커 모이어티(또는 이의 부분)는 또한 반응 상대(예를 들어, 식 R-I 또는 이의 염의 LRM)으로부터 전달될 수 있다. 일부 실시형태에서, 형성된 제제에서 링커 모이어티(예를 들어, LPM)는 반응 상대에서의 링커 모이어티(예를 들어, 반응기와 관심 모이어티 사이의 것, 예를 들어, LRM)이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, LPM은 LRM이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, LPM은 -LRM-LRG2-이다. 일부 실시형태에서, LRG2는 -C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LRG2는 -C(O)-이고, 표적 제제 모이어티의 -NH-, 예를 들어, 일부 실시형태에서 항체 모이어티인 단백질 모이어티의 라이신 잔기 측쇄에서의 -NH-에 결합된다.
반응 상대, 예를 들어, 식 R-I의 화합물 또는 이의 염은 전형적으로, 반응기가 표적 제제와 반응하는 조건 하에 반응기와 반응할 수 있는 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 반응기가 표적 제제와 반응하는 조건 하에 반응 상대에서의 일부 모이어티가 반응기와 반응할 수 있는 정도로, 이러한 모이어티와 반응기 사이의 반응은 반응기와 표적 제제 사이의 반응에 비해 유의미하게 더 느리고/느리거나 덜 효율적이다. 일부 실시형태에서, 이러한 모이어티와 반응기 사이의 반응은 반응기와 표적 제제 사이의 반응의 효율, 수율, 속도 및/또는 전환 등을 유의미하게 감소시키지(예를 들어, 약 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 이하의 등의 감소) 않는다. 일부 실시형태에서, 반응기(예를 들어, 에스터기, 활성화된 카복실산 유도체 등)은 표적 제제(예를 들어, 단백질 제제, 예컨대, 항체 제제)의 아미노기(예를 들어, -NH2 기)와 반응한다. 일부 실시형태에서, 반응 상대, 예를 들어, 식 R-I의 화합물 또는 이의 염은 아민기를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 식 R-I의 화합물 또는 이의 염(또는 이의 일부, 예컨대, RLG, LLG, LLG1, LLG2, LLG3, LLG4, LRG1, LRG2, LRM 및/또는 MOI)은 아민기를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 이들은 1차 아민기(-NH2)를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 이들은 -CH2NH2를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 이들은 -CH2CH2NH2를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 이들은 -CH2CH2CH2NH2를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 이들은 -CH2CH2CH2CH2NH2를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 아민기, 예를 들어, 1차 아민기는 바람직하지 않은 반응을 방지 또는 감소시키기 위해 (예를 들어, 아마이드기를 형성하기 위해 아실기(예를 들어, R-C(O)- (예를 들어, 아세틸))의 도입에 의해) 캡핑된다.
일부 실시형태에서, 반응은 완충제 시스템에서 수행된다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용의 완충제 시스템은 표적 제제, 관심 모이어티 등의 구조 및/또는 기능을 유지한다. 일부 실시형태에서, 완충제는 인산염 완충제이다. 일부 실시형태에서, 완충제는 PBS 완충제이다. 일부 실시형태에서, 완충제는 붕산염 완충제이다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용의 완충제는 특정 pH 값 또는 범위를 제공하고, 선택적으로 유지한다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 유용한 pH는 약 7 내지 9, 예를 들어, 7.0, 7.1, 7.2, 7.3, 7.4, 7.5, 7.6, 7.7, 7.8, 7.9, 8.0, 8.1, 8.2, 8.3, 8.4, 8.5, 8.6, 8.7, 8.8, 9.0 등이다. 일부 실시형태에서, pH는 7.4이다. 일부 실시형태에서, pH는 7.5이다. 일부 실시형태에서, pH는 7.8이다. 일부 실시형태에서, pH는 8.0이다. 일부 실시형태에서, pH는 8.2이다. 일부 실시형태에서, pH는 8.3이다.
제공된 기술은 다양한 이점을 제공할 수 있다. 특히, 일부 실시형태에서, 표적 제제에 대한 제공된 반응 상대(예를 들어, 제1 기와 관심 모이어티 사이에 위치된 반응기를 포함하는 화합물(예를 들어, 식 R-I의 화합물 또는 이의 염))에서의 관심 모이어티의 연결 및 제공된 반응 상대에서 표적 결합 모이어티의 방출은 하나의 반응에서 그리고/또는 원 포트(one pot)로 달성될 수 있다. 따라서, 다수의 실시형태에서, 표적 결합 모이어티를 제거하기 위해 별도의 반응/단계가 수행되지 않는다. 당업자에 의해 인식될 바와 같이, 단일 반응/작업에서 관심 모이어티의 연결 및 표적 결합 모이어티의 방출을 수행함으로써, 제공된 기술은 표적 결합 모이어티 제거를 위한 별도의 단계를 피할 수 있고, (예를 들어, 작업을 단순화하고, 전체 수율 등을 증가시킴으로써) 전체 효율을 개선시키고, 제조 비용을 감소시키고, (예를 들어, 전형적으로 (예를 들어, 에스터기의) 환원, 산화, 가수분해 등의 조건 중 하나 이상을 수반하는 표적 결합 모이어티 제거 조건에 대한 노출을 피함으로써) 생성물 순도를 개선시킬 수 있고, 표적 제제 모이어티(예를 들어, 단백질 제제 모이어티에 대해, 단백질 아미노산 잔기, 이의 전체 구조 및/또는 번역 후 변형(예를 들어, 항체의 글리칸)을 손상시킬 수 있다. 사실, 본 명세서에서 입증된 바와 같이, 제공된 기술은 특히 참조 기술에 비해 특히 개선된 효율(예를 들어, 반응 속도 및/또는 전환 백분율에 관해), 증가된 수율, 증가된 순도/균질성 및/또는 향상된 선택성을 제공할 수 있되, 표적 결합 모이어티 제거에 대한 도입 단계(들) 없이 표적 결합 모이어티를 포함하지 않는 반응 상대가 사용된다(예를 들어, 표적 결합 모이어티는 관심 모이어티 접합과 동일한 단계에서 제거된다).
일부 실시형태에서, 본 개시내용은, 특히, 표적 결합 모이어티 제거를 위해 수행되지만 실질적인 관심 모이어티 접합을 위해서는 수행되지 않는 단계들을 포함하는 공정에 비해 표적 제제 모이어티에 대한 낮은 손상 수준을 포함하는 제공된 공정의 생성물을 제공한다. 일부 실시형태에서, 제공된 생성물 조성물은 기준 생성물 조성물(예를 들어, 표적 결합 모이어티를 이용하거나, 또는 표적 결합 모이어티 제거를 위한 추가 단계(들)를 이용하지 않은(예를 들어, 표적 결합 모이어티와 관심 모이어티 사이에 위치된 반응기를 포함하는 본 명세서에 기재된 반응 상대를 이용하지 않고) 기술로부터의 생성물 조성물)에 비해 높은 균질성을 가진다.
일부 실시형태에서, 생성물 제제는 하기를 포함하는 제제이다:
표적 제제 모이어티;
관심 모이어티; 및
선택적으로 하나 이상의 링커 모이어티.
일부 실시형태에서, 표적 제제 모이어티는 단백질 제제 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 표적 제제 모이어티는 항체 제제 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 항체 제제 모이어티는 IgG Fc 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 제제 모이어티는 아미노기를 통해 선택적으로 링커를 통해 관심 모이어티에 연결된다. 일부 실시형태에서, 이는 라이신 잔기를 통하되, 측쇄의 아미노기는 관심 모이어티에 선택적으로 링커를 통해(예를 들어, 아마이드기, 카바메이트 기등의 일부로서 -NH-C(O)-를 형성) 연결된다.
일부 실시형태에서, 표적 제제의 선택된 위치는 접합을 위해 이용된다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 항체 제제의 K246 또는 K248(EU 넘버링, 또는 대응하는 잔기)은 접합 위치이다. 일부 실시형태에서, 접합 위치는 중쇄의 K246이다(달리 구체화되지 않는 한, 본 명세서의 위치는, 예를 들어, 변형된 서열(예를 들어, 더 긴, 더 짧은, 재배열 등의 서열)에서 대응하는 잔기를 포함함). 일부 실시형태에서, 위치는 중쇄의 K248이다. 일부 실시형태에서, 위치는 중쇄의 K288 또는 K290이다. 일부 실시형태에서, 위치는 중쇄의 K288이다. 일부 실시형태에서, 위치는 중쇄의 K290이다. 일부 실시형태에서, 위치는 K317이다.
일부 실시형태에서, 표적 제제가 항체 제제일 때, 중쇄는 경쇄에 대해 선택적으로 표지된다.
특히, 본 개시내용은 제어된 관심 모이어티/표적 제제비(예를 들어, 항체-약물 접합체에 대해, 약물/항체비(DAR))를 제공할 수 있다. 일부 실시형태에서, 비는 약 0.5 내지 6(예를 들어, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1.0, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2.0, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 3.0, 3.5, 4.0, 4.5, 5.0, 5.5 등)이다. 일부 실시형태에서, 비는 약 0.5 내지 2.5이다. 일부 실시형태에서, 비는 약 0.5 내지 2이다. 일부 실시형태에서, 비는 약 1 내지 2이다. 일부 실시형태에서, 비는 약 1.5 내지 2이다. 일부 실시형태에서, 비는 표적 제제 모이어티에 접합된 관심 모이어티 및 관심 모이어티에 접합된 표적 제제 모이어티의 비이다. 일부 실시형태에서, 비는 표적 제제 모이어티 및 조성물 중 모든 표적 제제 모이어티에 접합된 관심 모이어티의 비이다.
일부 실시형태에서, 제공된 제제(예를 들어, 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염의 제제)에서 표적 제제 모이어티의 실질적으로 모든 접합 부위는 동일한 변형을 갖는다(예를 들어, 선택적으로 동일한 링커 모이어티를 통해 연결된 동일한 관심 모이어티를 모두 공유함). 일부 실시형태에서, 접합 부위는 상이한 변형(예를 들어, 상이한 관심 모이어티 및/또는 관심 모이어티 없음 및/또는 상이한 링커 모이어티)을 보유하지 않는다.
일부 실시형태에서, 복수의 제공된 제제(예를 들어, 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염의 제제)를 포함하는 제공된 조성물에서 표적 제제 모이어티의 실질적으로 모든 접합 부위는 동일한 변형을 갖는다(예를 들어, 선택적으로 동일한 링커 모이어티를 통해 연결된 동일한 관심 모이어티를 모두 공유함). 일부 실시형태에서, 접합 부위는 상이한 변형(예를 들어, 상이한 관심 모이어티 및/또는 관심 모이어티 없음 및/또는 상이한 링커 모이어티)을 보유하지 않는다. 일부 실시형태에서, 이러한 조성물은 동일한(또는 실질적으로 동일한) 표적 제제 모이어티를 공유하는 제제를 포함하지 않지만, 상이한 변형(예를 들어, 상이한 관심 모이어티 및/또는 관심 모이어티 없음 및/또는 상이한 링커 모이어티)을 공유하는 제제는 포함한다. 일부 실시형태에서, 동일한(또는 실질적으로 동일한) 표적 제제 모이어티를 공유하지만 상이한 변형(예를 들어, 상이한 관심 모이어티 및/또는 관심 모이어티 없음 및/또는 상이한 링커 모이어티)을 공유하지 않는 제제는 최종 생성물 제제의 다단계 제제의 중간체이다(예를 들어, 관심 모이어티 접합을 위한 단계에 추가로 표적 결합 모이어티의 제거를 위한 단계를 포함).
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 복수의 제제를 포함하는 조성물을 제공하며, 이들 각각은 독립적으로 하기를 포함한다:
표적 제제 모이어티,
관심 모이어티, 및
선택적으로 표적 제제 모이어티와 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티;
복수의 제제는 동일한 또는 실질적으로 동일한 표적 제제 모이어티 및 적어도 하나의 공통 위치에서 독립적으로 공통 변형을 공유하고; 그리고
표적 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다.
일부 실시형태에서, 표적 제제 모이어티는 단백질 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 복수의 제제는 적어도 하나의 아미노산 잔기에서 독립적으로 공통 변형(예를 들어, 선택적으로 링커 모이어티를 통한 관심 모이어티의 접합)을 공유한다. 일부 실시형태에서, 복수의 제제는 각각 독립적으로 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염을 갖는다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 복수의 제제를 포함하는 조성물을 제공하며, 이들 각각은 독립적으로:
단백질 제제 모이어티,
관심 모이어티, 및
선택적으로 단백질 제제 모이어티와 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티를 포함하되,
복수의 제제의 단백질 제제 모이어티는 공통 아미노산 서열을 포함하고, 복수의 제제는 단백질 제제 모이어티의 적어도 하나의 공통 아미노산 잔기에서 독립적으로 공통 변형을 공유하며; 그리고
공통 아미노산 서열을 포함하는 단백질 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다.
일부 실시형태에서, 복수의 제제는 각각 독립적으로 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염을 갖는다. 일부 실시형태에서, 각각의 단백질 제제 모이어티는 독립적으로 항체 제제 모이어티이다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 복수의 제제를 포함하는 조성물을 제공하며, 이들 각각은 독립적으로:
항체 제제 모이어티,
관심 모이어티, 및
선택적으로 항체 제제 모이어티와 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티를 포함하되,
복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 아미노산 서열을 포함하거나 공통 항원에 결합할 수 있고, 복수의 제제는 단백질 제제 모이어티의 적어도 하나의 공통 아미노산 잔기에서 독립적으로 공통 변형을 공유하며; 그리고
공통 아미노산 서열을 포함하거나 공통 항원에 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다.
일부 실시형태에서, 복수의 제제는 각각 독립적으로 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염을 갖는다. 일부 실시형태에서, 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 Fc 영역에서 공통 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 Fc 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 항원에 특이적으로 결합할 수 있다. 일부 실시형태에서, 항체 제제 모이어티는 단클론성 항체 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 항체 제제 모이어티는 다클론성 항체 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 항체 제제 모이어티는 둘 이상의 상이한 항원에 결합한다. 일부 실시형태에서, 항체 제제 모이어티는 둘 이상의 상이한 단백질에 결합한다. 일부 실시형태에서, 항체 제제 모이어티는 IVIG 모이어티이다.
본 개시내용에서 사용되는 바와 같이, 일부 실시형태에서, "적어도 하나의" 또는 "하나 이상"은 1 내지 1000, 1 내지 500, 1 내지 200, 1 내지 100, 1 내지 90, 1 내지 80, 1 내지 70, 1 내지 60, 1 내지 50, 1 내지 40, 1 내지 30, 1 내지 20, 1 내지 10, 1 내지 5, 또는 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 이상이다. 일부 실시형태에서, 이는 1이다. 일부 실시형태에서, 이는 2 이상이다. 일부 실시형태에서, 이는 약 3이다. 일부 실시형태에서, 이는 약 4이다. 일부 실시형태에서, 이는 약 5이다. 일부 실시형태에서, 이는 약 6이다. 일부 실시형태에서, 이는 약 7이다. 일부 실시형태에서, 이는 약 8이다. 일부 실시형태에서, 이는 약 9이다. 일부 실시형태에서, 이는 약 10이다. 일부 실시형태에서, 이는 약 10 이상이다.
일부 실시형태에서, 공통 아미노산 서열은 1 내지 1000, 1 내지 500, 1 내지 400, 1 내지 300, 1 내지 200, 1 내지 100, 1 내지 50, 10 내지 1000, 10 내지 500, 10 내지 400, 10 내지 300, 10 내지 200, 10 내지 100, 10 내지 50, 20 내지 1000, 20 내지 500, 20 내지 400, 20 내지 300, 20 내지 200, 20 내지 100, 20 내지 50, 50 내지 1000, 50 내지 500, 50 내지 400, 50 내지 300, 50 내지 200, 50 내지 100, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 200, 250, 300, 400, 500, 600개 이상의 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 실시형태에서, 길이는 적어도 5개의 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 길이는 적어도 10개의 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 길이는 적어도 50개의 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 길이는 적어도 100개의 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 길이는 적어도 150개의 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 길이는 적어도 200개의 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 길이는 적어도 300개의 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 길이는 적어도 400개의 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 길이는 적어도 500개의 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 길이는 적어도 600개의 아미노산 잔기이다.
일부 실시형태에서, 공통 아미노산 서열은 표적 제제 모이어티, 단백질 제제 모이어티, 항체 제제 모이어티 등의 아미노산 서열의 적어도 10% 내지 100%, 50% 내지 100%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%이다. 일부 실시형태에서, 이는 100%이다.
일부 실시형태에서, 단백질 제제 모이어티는 아미노산 서열 상동성의 높은 백분율을 공유한다. 일부 실시형태에서, 이는 50% 내지 100%이다. 일부 실시형태에서, 이는 50%이다. 일부 실시형태에서, 이는 60%이다. 일부 실시형태에서, 이는 70%이다. 일부 실시형태에서, 이는 80%이다. 일부 실시형태에서, 이는 90%이다. 일부 실시형태에서, 이는 91%이다. 일부 실시형태에서, 이는 50%이다. 일부 실시형태에서, 이는 92%이다. 일부 실시형태에서, 이는 93%이다. 일부 실시형태에서, 이는 94%이다. 일부 실시형태에서, 이는 95%이다. 일부 실시형태에서, 이는 96%이다. 일부 실시형태에서, 이는 97%이다. 일부 실시형태에서, 이는 98%이다. 일부 실시형태에서, 이는 99%이다. 일부 실시형태에서, 이는 100%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 50%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 60%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 70%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 80%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 90%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 91%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 50%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 92%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 93%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 94%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 95%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 96%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 97%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 98%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 99%이다.
일부 실시형태에서, 단백질 제제 모이어티 또는 항체 제제 모이어티는 단백질 복합체이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 적어도 하나의 또는 각각의 개개 쇄는 공통 아미노산 서열을 공유하고/하거나 본 명세서에 기재된 바와 같은 상동성을 갖는다.
일부 실시형태에서, 복수의 제제는 공통 관심 모이어티를 공유한다. 일부 실시형태에서, 각각의 복수의 제제는 독립적으로 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염의 제제이다. 일부 실시형태에서, 각각의 복수의 제제는 독립적으로 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염의 제제이되, MOI는 복수의 각 제제에 대해 동일하다. 일부 실시형태에서, 복수의 제제는 본 명세서에 기재된 방법의 생성물이다. 일부 실시형태에서, 복수의 제제를 포함하는 조성물은 본 명세서에 기재된 방법의 생성물이다.
일부 실시형태에서, 변형은 관심 모이어티 및 선택적으로 링커이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 변형은 -LPM-MOI이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, 복수의 제제는 적어도 하나의 위치에서 독립적으로 공통 변형을 공유한다. 일부 실시형태에서, 변형은 관심 모이어티 및 선택적으로 관심 모이어티를 연결하는 링커이거나 이를 포함한다. 본 명세서에 기재된 바와 같이, 각각의 위치는 독립적으로 이의 공통 변형을 갖는다. 일부 실시형태에서, 2개 이상의 또는 모든 위치에서 공통 변형은 공통 관심 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 공통 변형은 동일하다. 일부 실시형태에서, 복수의 제제는 관심 모이어티 및 선택적으로 링커이거나 이를 포함하는 변형을 갖는 각 위치에서 공통 변형을 공유한다. 일부 실시형태에서, 복수의 제제는 -LPM-MOI이거나 이를 포함하는 변형을 갖는 각 위치에서 공통 변형을 공유한다.
일부 실시형태에서, 단백질 제제(예를 들어, 항체 제제)는 적어도 하나의 아미노산 잔기에서 공통 변형을 공유한다. 일부 실시형태에서, 복수의 제제는 관심 모이어티 및 선택적으로 링커이거나 이를 포함하는 변형을 갖는 각 위치에서 공통 변형을 공유한다. 일부 실시형태에서, 복수의 제제는 -LPM-MOI이거나 이를 포함하는 변형을 갖는 각 위치에서 공통 변형을 공유한다.
일부 실시형태에서, 위치는 항체 제제의 K246, K248, K288, K290, K317 및 이에 대응하는 위치로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 위치는 K246 및 K248 및 이에 대응하는 위치로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 위치는 K288 및 K290 및 이에 대응하는 위치로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 위치는 K246 또는 이에 대응하는 위치이다. 일부 실시형태에서, 위치는 K248 또는 이에 대응하는 위치이다. 일부 실시형태에서, 위치는 K288 또는 이에 대응하는 위치이다. 일부 실시형태에서, 위치는 K290 또는 이에 대응하는 위치이다. 일부 실시형태에서, 위치는 K317 또는 이에 대응하는 위치이다. 일부 실시형태에서, 위치는 경쇄의 K185 또는 이에 대응하는 위치이다. 일부 실시형태에서, 위치는 경쇄의 K187 또는 이에 대응하는 위치이다. 일부 실시형태에서, 위치는 중쇄의 K133 또는 이에 대응하는 위치이다. 일부 실시형태에서, 위치는 중쇄의 K246 또는 K248 또는 이에 대응하는 위치이다. 일부 실시형태에서, 위치는 중쇄의 K414 또는 이에 대응하는 위치이다.
일부 실시형태에서, 표적 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다. 일부 실시형태에서, 공통 아미노산 서열을 포함하는 단백질 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다. 일부 실시형태에서, 공통 아미노산 서열을 포함하거나 공통 항원에 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다. 일부 실시형태에서, 표적 제제 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다. 일부 실시형태에서, 공통 아미노산 서열을 포함하는 단백질 제제 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다. 일부 실시형태에서, 공통 아미노산 서열을 포함하는 항체 제제 모이어티를 포함하거나 공통 항원에 결합할 수 있는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다. 일부 실시형태에서, 이는 50% 내지 100%이다. 일부 실시형태에서, 이는 50%이다. 일부 실시형태에서, 이는 60%이다. 일부 실시형태에서, 이는 70%이다. 일부 실시형태에서, 이는 80%이다. 일부 실시형태에서, 이는 90%이다. 일부 실시형태에서, 이는 91%이다. 일부 실시형태에서, 이는 50%이다. 일부 실시형태에서, 이는 92%이다. 일부 실시형태에서, 이는 93%이다. 일부 실시형태에서, 이는 94%이다. 일부 실시형태에서, 이는 95%이다. 일부 실시형태에서, 이는 96%이다. 일부 실시형태에서, 이는 97%이다. 일부 실시형태에서, 이는 98%이다. 일부 실시형태에서, 이는 99%이다. 일부 실시형태에서, 이는 100%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 50%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 60%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 70%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 80%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 90%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 91%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 50%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 92%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 93%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 94%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 95%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 96%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 97%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 98%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 99%이다.
일부 실시형태에서, 제공된 제제, 화합물 등, 예를 들어, 식 R-I, P-I, P-II 등의 화합물 및 이들의 염은 높은 순도를 갖는다. 일부 실시형태에서, 이는 50% 내지 100%이다. 일부 실시형태에서, 이는 50%이다. 일부 실시형태에서, 이는 60%이다. 일부 실시형태에서, 이는 70%이다. 일부 실시형태에서, 이는 80%이다. 일부 실시형태에서, 이는 90%이다. 일부 실시형태에서, 이는 91%이다. 일부 실시형태에서, 이는 50%이다. 일부 실시형태에서, 이는 92%이다. 일부 실시형태에서, 이는 93%이다. 일부 실시형태에서, 이는 94%이다. 일부 실시형태에서, 이는 95%이다. 일부 실시형태에서, 이는 96%이다. 일부 실시형태에서, 이는 97%이다. 일부 실시형태에서, 이는 98%이다. 일부 실시형태에서, 이는 99%이다. 일부 실시형태에서, 이는 100%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 50%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 60%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 70%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 80%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 90%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 91%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 50%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 92%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 93%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 94%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 95%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 96%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 97%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 98%이다. 일부 실시형태에서, 이는 적어도 99%이다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 생성물 제제(예를 들어, 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염의 제제)를 포함하는 생성물 제제 조성물을 제공한다. 일부 실시형태에서, 생성물 제제 조성물(예를 들어, 특정 방법으로부터의 형성된 제제 조성물)은 표적 제제 모이어티 및 관심 모이어티 및 선택적으로 링커(예를 들어, 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염의 제제), 방출된 표적 결합 모이어티(예를 들어, RLG-(LLG1)0-1-(LLG2)0-1-(LLG3)0-1-(LLG4)0-1-)의 화합물 또는 방출된 표적 결합 모이어티를 포함하는 화합물(예를 들어, RLG-(LLG1)0-1-(LLG2)0-1-(LLG3)0-1-(LLG4)0-1-H의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 염) 및 반응 상대(예를 들어, 식 R-I의 화합물 또는 이의 염)를 포함하는 생성물 제제를 포함한다. 일부 실시형태에서, 방출된 표적 결합 모이어티는 표적 제제 및/또는 형성된 생성물 제제에서 표적 제제 모이어티에 결합할 수 있다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 조성물을 특정 pH에서 글리신을 포함하는 조성물과 접촉시키는 것을 포함하는, 본 개시내용에 따른 표적 제제 모이어티로부터 방출된 표적 결합 모이어티를 분리시키기 위한 다양한 기술을 이용 가능하다.
변수의 특정 실시형태
예로서, 변수의 예시적인 실시형태는 본 개시내용 전체적으로 기재되어 있다. 당업자에 의해 인식될 바와 같이, 상이한 변수에 대한 실시형태가 선택적으로 조합될 수 있다.
일부 실시형태에서, ABT는 본 명세서에 기재된 바와 같은 항체 결합 모이어티이다. 일부 실시형태에서, ABT는 표 1에 도시된 것으로부터 선택된 화합물의 ABT이다. 일부 실시형태에서, ABT는 표 A-1로부터 선택된 모이어티이다. 일부 실시형태에서, ABT는 표 1에 기재된 모이어티이다.
일부 실시형태에서, L은 표 1에 도시된 것으로부터 선택된 화합물의 링커 모이어티이다.
일부 실시형태에서, R1, R3 및 R5 각각은 독립적으로 수소 또는 C1-6 지방족, 3 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 탄소환식 고리, 페닐, 8 내지 10원 이환식 방향족 탄소환식 고리, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 단환식 헤테로방향족 고리 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8 내지 10원 이환식 헤테로원자 고리로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이거나; 또는: R1 및 R1'는 선택적으로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 3 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 스피로환식 탄소환식 고리 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 스피로환식 복소환식 고리를 형성하고; R3 및 R3'는 선택적으로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 3 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 스피로환식 탄소환식 고리 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 스피로환식 복소환식 고리를 형성하고; 동일한 탄소 원자에 부착된 R5 기 및 R5' 기는 선택적으로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 3 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 스피로환식 탄소환식 고리 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 스피로환식 복소환식 고리를 형성하거나; 또는 2개의 R5 기는 선택적으로 이들의 개재 원자와 함께 C1-10 선택적으로 치환된 2가 직선형 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 쇄를 형성하되, 쇄의 1 내지 3개의 메틸렌 단위는 -S-, -SS-, -N(R)-, -O-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -C(O)N(R)-, -N(R)C(O)-, -S(O)-, -S(O)2- 또는 -Cy1-로 독립적 및 선택적으로 대체되며, 각각의 -Cy1-은 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 헤테로아릴렌일이다.
일부 실시형태에서, R1은 수소이다. 일부 실시형태에서, R1은 C1-6 지방족, 3 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 탄소환식 고리, 페닐, 8 내지 10원 이환식 방향족 탄소환식 고리, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 단환식 헤테로방향족 고리 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8 내지 10원 이환식 헤테로원자 고리로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이다. 일부 실시형태에서, R1은 선택적으로 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시형태에서, R1은 선택적으로 치환된 3 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 단환식 탄소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R1은 선택적으로 치환된 페닐이다. 일부 실시형태에서, R1은 선택적으로 치환된 8 내지 10원 이환식 방향족 탄소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R1은 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R1은 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5 내지 6원 단환식 헤테로방향족 고리이다. 일부 실시형태에서, R1은 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 8 내지 10원 이환식 헤테로방향족 고리이다.
일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00304
이다. 일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00305
이다. 일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00306
이다. 일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00307
이다. 일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00308
이다. 일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00309
이다. 일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00310
이다. 일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00311
이다. 일부 실시형태에서, R1은
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이다. 일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00313
이다.
일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00314
이다. 일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00315
이다. 일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00316
이다. 일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00317
이다. 일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00318
이다. 일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00319
이다. 일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00320
이다. 일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00321
이다.
일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00322
이다. 일부 실시형태에서, R1은
Figure pct00323
이다.
일부 실시형태에서, R1 및 R1'는 선택적으로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 3 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 스피로환식 탄소환식 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, R1 및 R1'는 선택적으로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 스피로환식 복소환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, R1은 표 1에 기재된 것으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R1이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R1이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R1이다.
일부 실시형태에서, R3은 수소이다. 일부 실시형태에서, R3은 C1-6 지방족, 3 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 탄소환식 고리, 페닐, 8 내지 10원 이환식 방향족 탄소환식 고리, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 단환식 헤테로방향족 고리 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8 내지 10원 이환식 헤테로원자 고리로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이다. 일부 실시형태에서, R3은 선택적으로 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시형태에서, R3은 선택적으로 치환된 3 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 단환식 탄소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R3은 선택적으로 치환된 페닐이다. 일부 실시형태에서, R3은 선택적으로 치환된 8 내지 10원 이환식 방향족 탄소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R3은 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R3은 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5 내지 6원 단환식 헤테로방향족 고리이다. 일부 실시형태에서, R3은 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 8 내지 10원 이환식 헤테로방향족 고리이다.
일부 실시형태에서, R3은 메틸이다. 일부 실시형태에서, R3은
Figure pct00324
이다. 일부 실시형태에서, R3은
Figure pct00325
이다.
일부 실시형태에서, R3은
Figure pct00326
이다. 일부 실시형태에서, R3은
Figure pct00327
이다. 일부 실시형태에서, R3은
Figure pct00328
이되, 부착 부위는 (S) 입체화학을 갖는다. 일부 실시형태에서, R3은
Figure pct00329
이되, 부착 부위는 (R) 입체화학을 갖는다. 일부 실시형태에서, R3은
Figure pct00330
이되, 부착 부위는 (S) 입체화학을 갖는다. 일부 실시형태에서, R3은
Figure pct00331
이되, 부착 부위는 (R) 입체화학을 갖는다.
일부 실시형태에서, R3은
Figure pct00332
이되, 부착 부위는 (S) 입체화학을 갖는다. 일부 실시형태에서, R3은
Figure pct00333
이되, 부착 부위는 (R) 입체화학을 갖는다.
일부 실시형태에서, R3 및 R3'는 선택적으로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 3 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 스피로환식 탄소환식 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, R3 및 R3'는 선택적으로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 스피로환식 복소환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, R3은 표 1에 기재된 것으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R2이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R2이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R2이다.
일부 실시형태에서, R5는 수소이다. 일부 실시형태에서, R5는 C1-6 지방족, 3 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 탄소환식 고리, 페닐, 8 내지 10원 이환식 방향족 탄소환식 고리, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 단환식 헤테로방향족 고리 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8 내지 10원 이환식 헤테로원자 고리로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이다. 일부 실시형태에서, R5는 선택적으로 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시형태에서, R5는 선택적으로 치환된 3 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 단환식 탄소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R5는 선택적으로 치환된 페닐이다. 일부 실시형태에서, R5는 선택적으로 치환된 8 내지 10원 이환식 방향족 탄소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R5는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R5는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5 내지 6원 단환식 헤테로방향족 고리이다. 일부 실시형태에서, R5는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 8 내지 10원 이환식 헤테로방향족 고리이다.
일부 실시형태에서, R5는 메틸이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00334
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00335
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00336
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00337
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00338
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00339
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00340
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00341
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00342
이되, 부착 부위는 (S) 입체화학을 갖는다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00343
이되, 부착 부위는 (R) 입체화학을 갖는다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00344
이되, 부착 부위는 (S) 입체화학을 갖는다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00345
이되, 부착 부위는 (R) 입체화학을 갖는다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00346
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00347
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00348
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00349
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00350
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00351
이다.
일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00352
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00353
이다.
일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00354
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00355
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00356
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00357
이다.
일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00358
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00359
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00360
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00361
이다.
일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00362
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00363
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00364
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00365
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00366
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00367
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00368
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00369
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00370
이다. 일부 실시형태에서, R5는
Figure pct00371
이다. 일부 실시형태에서, R4는
Figure pct00372
이되, 부착 부위는 (S) 입체화학을 갖는다. 일부 실시형태에서, R4는
Figure pct00373
이되, 부착 부위는 (R) 입체화학을 갖는다.
일부 실시형태에서, 동일한 탄소 원자에 부착되는 R5 및 R5' 기는 선택적으로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 3 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 스피로환식 탄소환식 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, 동일한 탄소 원자에 부착되는 R5 및 R5' 기는 선택적으로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 스피로환식 복소환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, 2개의 R5 기는 이들의 개재 원자와 함께 C1-10 치환된 2가 직선형 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 쇄를 형성하되, 쇄의 1 내지 3개의 메틸렌 단위는 -S-, -SS-, -N(R)-, -O-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -C(O)N(R)-, -N(R)C(O)-, -S(O)-, -S(O)2- 또는 -Cy1-로 독립적 및 선택적으로 대체되며, 각각의 -Cy1-은 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 헤테로아릴렌일이다.
일부 실시형태에서, 2개의 R5 기는 이들의 개재 원자와 함께
Figure pct00374
를 형성한다. 일부 실시형태에서, 2개의 R5 기는 이들의 개재 원자와 함께
Figure pct00375
를 형성한다. 일부 실시형태에서, 2개의 R5 기는 이들의 개재 원자와 함께
Figure pct00376
를 형성한다. 일부 실시형태에서, 2개의 R5 기는 이들의 개재 원자와 함께
Figure pct00377
를 형성한다.
일부 실시형태에서, R5는 표 1에 기재된 것으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R5이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R5이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R5이다.
일부 실시형태에서, R1', R3' 및 R5' 각각은 독립적으로 수소 또는 C1-3 지방족이다.
일부 실시형태에서, R1'는 수소이다. 일부 실시형태에서, R1'는 C1-3 지방족이다.
일부 실시형태에서, R1'는 메틸이다. 일부 실시형태에서, R1'는 에틸이다. 일부 실시형태에서, R1'는 n-프로필이다. 일부 실시형태에서, R1'는 아이소프로필이다. 일부 실시형태에서, R1'는 사이클로프로필이다.
일부 실시형태에서, R1'는 표 1에 기재된 것으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, R3'는 수소이다. 일부 실시형태에서, R3'는 C1-3 지방족이다.
일부 실시형태에서, R3'는 메틸이다. 일부 실시형태에서, R3'는 에틸이다. 일부 실시형태에서, R3'는 n-프로필이다. 일부 실시형태에서, R3'는 아이소프로필이다. 일부 실시형태에서, R3'는 사이클로프로필이다.
일부 실시형태에서, R3'는 표 1에 기재된 것으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, R5'는 수소이다. 일부 실시형태에서, R5'는 C1-3 지방족이다.
일부 실시형태에서, R5'는 메틸이다. 일부 실시형태에서, R5'는 에틸이다. 일부 실시형태에서, R5'는 n-프로필이다. 일부 실시형태에서, R5'는 아이소프로필이다. 일부 실시형태에서, R5'는 사이클로프로필이다.
일부 실시형태에서, R5'는 표 1에 기재된 것으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, R2, R4 및 R6 각각은 독립적으로 수소 또는 C1-4 지방족이거나 또는 R2 및 R1은 선택적으로 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리를 형성하거나; R4 및 R3은 선택적으로 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리를 형성하거나; 또는 R6 기 및 이의 인접한 R5 기는 선택적으로 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, R2는 수소이다. 일부 실시형태에서, R2는 C1-4 지방족이다. 일부 실시형태에서, R2는 메틸이다. 일부 실시형태에서, R2는 에틸이다. 일부 실시형태에서, R2는 n-프로필이다. 일부 실시형태에서, R2는 아이소프로필이다. 일부 실시형태에서, R2는 n-뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R2는 아이소뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R2는 tert-뷰틸이다.
일부 실시형태에서, R2 및 R1은 함께 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, R2 및 R1은 이들의 개재 원자와 함께
Figure pct00378
를 형성한다. 일부 실시형태에서, R2 및 R1은 이들의 개재 원자와 함께
Figure pct00379
를 형성한다.
일부 실시형태에서, R2는 표 1에 기재된 것으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, R4는 수소이다. 일부 실시형태에서, R4는 C1-4 지방족이다. 일부 실시형태에서, R4는 메틸이다. 일부 실시형태에서, R4는 에틸이다. 일부 실시형태에서, R4는 n-프로필이다. 일부 실시형태에서, R4는 아이소프로필이다. 일부 실시형태에서, R4는 n-뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R4는 아이소뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R4는 tert-뷰틸이다.
일부 실시형태에서, R4 및 R3은 함께 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, R4 및 R3은 이들의 개재 원자와 함께
Figure pct00380
를 형성한다. 일부 실시형태에서, R4 및 R3은 이들의 개재 원자와 함께
Figure pct00381
를 형성한다.
일부 실시형태에서, R4는 표 1에 기재된 것으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, R6은 수소이다. 일부 실시형태에서, R6은 C1-4 지방족이다. 일부 실시형태에서, R6은 메틸이다. 일부 실시형태에서, R6은 에틸이다. 일부 실시형태에서, R6은 n-프로필이다. 일부 실시형태에서, R6은 아이소프로필이다. 일부 실시형태에서, R6은 n-뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R6은 아이소뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R6은 tert-뷰틸이다.
일부 실시형태에서, R6 기 및 이의 인접한 R5 기는 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원, 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, R6 기 및 이의 인접한 R5 기는 이들의 개재 원자와 함께
Figure pct00382
를 형성한다. 일부 실시형태에서, R6 기 및 이의 인접한 R5 기는 이들의 개재 원자와 함께
Figure pct00383
를 형성한다.
일부 실시형태에서, R6은 표 1에 기재된 것으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R1'이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R1'이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R1'이다. 일부 실시형태에서, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R3'이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R3'이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R3'이다. 일부 실시형태에서, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R2이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R2이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R2이다. 일부 실시형태에서, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R4이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R4이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R4이다. 일부 실시형태에서, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R6이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R6이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R6이다.
일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00384
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00385
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00386
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00387
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00388
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00389
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00390
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00391
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00392
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00393
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00394
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00395
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00396
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00397
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00398
이다.
일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00399
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00400
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00401
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00402
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00403
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00404
이다. 일부 실시형태에서, L1은
Figure pct00405
이다.
일부 실시형태에서, L은 공유 결합이거나, 또는 C1-10 2가 직선형 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 쇄이되, 쇄의 1 내지 3개의 메틸렌 단위는 -S-, -N(R)-, -O-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -C(O)N(R)-, -N(R)C(O)-, -S(O)-, -S(O)2-,
Figure pct00406
또는 -Cy1-로 독립적 및 선택적으로 대체되고, 각각의 -Cy1-은 독립적으로 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 헤테로아릴렌일이다.
일부 실시형태에서, L은 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, L은 C1-10 2가 직선형 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 쇄이되, 쇄의 1 내지 3개의 메틸렌 단위는 -S-, -N(R)-, -O-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -C(O)N(R)-, -N(R)C(O)-, -S(O)-, -S(O)2-,
Figure pct00407
또는 -Cy1-로 독립적 및 선택적으로 대체되고, 각각의 -Cy1-은 독립적으로 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 헤테로아릴렌일이다.
일부 실시형태에서, L은
Figure pct00408
이다. 일부 실시형태에서, L은
Figure pct00409
이다. 일부 실시형태에서, L은
Figure pct00410
이다. 일부 실시형태에서, L은
Figure pct00411
이다. 일부 실시형태에서, L은
Figure pct00412
이다. 일부 실시형태에서, L은
Figure pct00413
이다.
일부 실시형태에서, m 및 n 각각은 독립적으로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이다.
일부 실시형태에서, m은 1이다. 일부 실시형태에서, m은 2이다. 일부 실시형태에서, m은 3이다. 일부 실시형태에서, m은 4이다. 일부 실시형태에서, m은 5이다. 일부 실시형태에서, m은 6이다. 일부 실시형태에서, m은 7이다. 일부 실시형태에서, m은 8이다. 일부 실시형태에서, m은 9이다. 일부 실시형태에서, m은 10이다.
일부 실시형태에서, m은 표 1에 기재된 것으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, n은 1이다. 일부 실시형태에서, n은 2이다. 일부 실시형태에서, n은 3이다. 일부 실시형태에서, n은 4이다. 일부 실시형태에서, n은 5이다. 일부 실시형태에서, n은 6이다. 일부 실시형태에서, n은 7이다. 일부 실시형태에서, n은 8이다. 일부 실시형태에서, n은 9이다. 일부 실시형태에서, n은 10이다.
일부 실시형태에서, n은 표 1에 기재된 것으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, R7은 독립적으로 수소 또는 C1-6 지방족, 3 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 탄소환식 고리, 페닐, 8 내지 10원 이환식 방향족 탄소환식 고리, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 단환식 헤테로방향족 고리 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8 내지 10원 이환식 헤테로원자 고리로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이거나; 또는: 동일한 탄소 원자에 부착된 R7 기 및 R7' 기는 선택적으로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 3 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 스피로환식 탄소환식 고리 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 스피로환식 복소환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, R7은 수소이다. 일부 실시형태에서, R7은 C1-6 지방족, 3 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 탄소환식 고리, 페닐, 8 내지 10원 이환식 방향족 탄소환식 고리, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 단환식 헤테로방향족 고리 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8 내지 10원 이환식 헤테로원자 고리로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이다. 일부 실시형태에서, R7은 선택적으로 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시형태에서, R7은 선택적으로 치환된 3 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 단환식 탄소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R7은 선택적으로 치환된 페닐이다. 일부 실시형태에서, R7은 선택적으로 치환된 8 내지 10원 이환식 방향족 탄소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R7은 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 4 내지 8원 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R7은 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5 내지 6원 단환식 헤테로방향족 고리이다. 일부 실시형태에서, R7은 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 8 내지 10원 이환식 헤테로방향족 고리이다.
일부 실시형태에서, R7은 메틸이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00414
이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00415
이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00416
이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00417
이다.
일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00418
이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00419
이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00420
이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00421
이다.
일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00422
이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00423
이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00424
이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00425
이다.
일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00426
이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00427
이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00428
이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00429
이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00430
이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00431
이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00432
이다. 일부 실시형태에서, R7은
Figure pct00433
이다.
일부 실시형태에서, 동일한 탄소 원자에 부착된 R7 기 및 R7' 기는 이들의 개재 탄소 원자와 함께 3 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 스피로환식 탄소환식 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, 동일한 탄소 원자에 부착되는 R7 기 및 R7' 기는 이들의 개재 탄소 원자와 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 스피로환식 복소환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, R7은 표 1에 기재된 것으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, R7' 각각은 독립적으로 수소 또는 C1-3 지방족이다.
일부 실시형태에서, R7'는 수소이다. 일부 실시형태에서, R7'는 메틸이다. 일부 실시형태에서, R7'는 에틸이다. 일부 실시형태에서, R7'는 n-프로필이다. 일부 실시형태에서, R7'는 아이소프로필이다.
일부 실시형태에서, R7'는 표 1에 기재된 것으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, 상기 정의되고 본 명세서에 기재되는 바와 같이, R8 각각은 독립적으로 수소, 또는 C1-4 지방족이거나, 또는: R8 기 및 이의 인접한 R7 기는 선택적으로 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원, 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, R8은 수소이다. 일부 실시형태에서, R8은 C1-4 지방족이다. 일부 실시형태에서, R8은 메틸이다. 일부 실시형태에서, R8은 에틸이다. 일부 실시형태에서, R8은 n-프로필이다. 일부 실시형태에서, R8은 아이소프로필이다. 일부 실시형태에서, R8은 n-뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R8은 아이소뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R8은 tert-뷰틸이다.
일부 실시형태에서, R8 기 및 이의 인접한 R7 기는 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원, 포화 또는 부분적 불포화 단환식 복소환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, R8 기 및 이의 인접한 R7 기는 이들의 개재 원자와 함께
Figure pct00434
를 형성한다. 일부 실시형태에서, R8 기 및 이의 인접한 R7 기는 이들의 개재 원자와 함께
Figure pct00435
를 형성한다.
일부 실시형태에서, R8은 표 1에 기재된 것으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, R9는 수소, C1-3 지방족 또는 -C(O)C1-3 지방족이다.
일부 실시형태에서, R9는 수소이다. 일부 실시형태에서, R9는 C1-3 지방족이다. 일부 실시형태에서, R9는 -C(O)C1-3 지방족이다.
일부 실시형태에서, R9는 메틸이다. 일부 실시형태에서, R9는 에틸이다. 일부 실시형태에서, R9는 n-프로필이다. 일부 실시형태에서, R9는 아이소프로필이다. 일부 실시형태에서, R9는 사이클로프로필이다.
일부 실시형태에서, R9는 -C(O)Me이다. 일부 실시형태에서, R9는 -C(O)Et이다. 일부 실시형태에서, R9는 -C(O)CH2CH2CH3이다. 일부 실시형태에서, R9는 -C(O)CH(CH3)2이다. 일부 실시형태에서, R9는 -C(O)사이클로프로필이다.
일부 실시형태에서, R9는 표 1에 기재된 것으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R7이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R7이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R7이다. 일부 실시형태에서, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R7'이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R7'이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R7'이다. 일부 실시형태에서, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R8이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R8이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R8이다. 일부 실시형태에서, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R8'이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R8'이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R8'이다. 일부 실시형태에서, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R9이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R9이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R9이다.
일부 실시형태에서, o는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이다.
일부 실시형태에서, o는 1이다. 일부 실시형태에서, o는 2이다. 일부 실시형태에서, o는 3이다. 일부 실시형태에서, o는 4이다. 일부 실시형태에서, o는 5이다. 일부 실시형태에서, o는 6이다. 일부 실시형태에서, o는 7이다. 일부 실시형태에서, o는 8이다. 일부 실시형태에서, o는 9이다. 일부 실시형태에서, o는 10이다.
일부 실시형태에서, o는 표 1에 기재된 것으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, Ra1은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R이다. 일부 실시형태에서, Ra1은 선택적으로 치환된 C1-4 지방족이다. 일부 실시형태에서, Ra1은 선택적으로 치환된 C1-4 알킬이다. 일부 실시형태에서, Ra1은 메틸이다.
일부 실시형태에서, La1는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 La이다. 일부 실시형태에서, La1은 공유 결합이다.
일부 실시형태에서, La2는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 La이다. 일부 실시형태에서, La2는 공유 결합이다.
일부 실시형태에서, LT는 본 명세서에 기재된 바와 같은 La이다. 일부 실시형태에서, LT는 본 명세서에 기재된 바와 같은 L이다. 일부 실시형태에서, LT는 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, LT는 -CH2-C(O)-이다. 일부 실시형태에서, LT는 측쇄의 -S-를(예를 들어, -CH2를 통해) 아미노산 잔기의 아미노기와(예를 들어, -C(O)-를 통해) 연결한다.
일부 실시형태에서, La는 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, La는 C1-C10 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C10 헤테로지방족으로부터 선택된 선택적으로 치환된 2가기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 선택적 및 독립적으로 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S- 또는 -C(O)O-로 대체된다. 일부 실시형태에서, La는 C1-C5 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C5 헤테로지방족으로부터 선택된 선택적으로 치환된 2가기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S- 또는 -C(O)O-로 선택적 및 독립적으로 대체된다. 일부 실시형태에서, La는 선택적으로 치환된 2가 C1-C5 지방족이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S- 또는 -C(O)O-로 선택적 및 독립적으로 대체된다. 일부 실시형태에서, La는 선택적으로 치환된 2가 C1-C5 지방족이다. 일부 실시형태에서, La는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 2가 C1-C5 헤테로지방족이다.
일부 실시형태에서, Ra2는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R이다. 일부 실시형태에서, Ra2는 천연 아미노산의 측쇄이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R이다. 일부 실시형태에서, Ra3은 천연 아미노산의 측쇄이다. 일부 실시형태에서, Ra2 및 Ra3 중 하나는 수소이다. 일부 실시형태에서, Ra2 및/또는 Ra3은 R이되, R은 선택적으로 치환된 C1-8 지방족 또는 아릴이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 선형 C2-8 알킬이다. 일부 실시형태에서, R은 선형 C2-8 알킬이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 분지형 C2-8 알킬이다. 일부 실시형태에서, R은 분지형 C2-8 알킬이다. 일부 실시형태에서, R은 n-펜틸이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 페닐이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 -CH2-페닐이다. 일부 실시형태에서, R은 4-페닐페닐-CH2-이다.
일부 실시형태에서, 각각의 -Cy-는 독립적으로 선택적으로 치환된 2가의 단환식, 이환식 또는 다환식 기이되, 각각의 단환식 고리는 C3-20 사이클로지방족 고리, C6-20 아릴 고리, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원 헤테로아릴 고리, 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 20원 헤테로사이클릴 고리로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시형태에서, 각각의 -Cy-는 독립적으로 C3-20 지환족 고리, C6-20 아릴 고리, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원 헤테로아릴 고리 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 20원 헤테로사이클릴 고리로부터 선택된 선택적으로 치환된 2가기이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 2가라는 것을 제외하고, 예를 들어, R 및 CyL에 대해, 본 개시내용에 기재된 바와 같은 선택적으로 치환된 고리이다.
일부 실시형태에서, -Cy-는 단환식이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 이환식이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 다환식이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 포화된다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 부분적으로 불포화된다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 방향족이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 포화된 단환식 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 부분적으로 불포화된 단환식 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 방향족 단환식 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 포화, 부분적으로 불포화 및/또는 방향족 환식 모이어티의 조합을 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 3-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 4-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 5-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 6-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 7-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 8-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 9-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 10-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 11-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 12-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 13-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 14-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 15-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 16-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 17-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 18-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 19-원 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 20-원 고리이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, -Cy-는 선택적으로 치환된 2가 C3-20 지환족 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 선택적으로 치환된 2가, 포화된 C3-20 지환족 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 선택적으로 치환된 2가, 부분적으로 불포화된 C3-20 지환족 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-H는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 선택적으로 치환된 지환족, 예를 들어, R에 대한 지환족 실시형태이다.
일부 실시형태에서, -Cy-는 선택적으로 치환된 C6-20 아릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 선택적으로 치환된 페닐렌이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 선택적으로 치환된 1,2-페닐렌이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 선택적으로 치환된 1,3-페닐렌이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 선택적으로 치환된 1,4-페닐렌이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 선택적으로 치환된 2가 나프탈렌 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-H는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 선택적으로 치환된 아릴, 예를 들어, R에 대한 아릴 실시형태이다.
일부 실시형태에서, -Cy-는 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 2가 5 내지 20원 헤테로아릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 산소, 질소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 2가 5 내지 20원 헤테로아릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 산소, 질소, 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 2가 5 내지 6원 헤테로아릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 산소, 질소, 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 2가 5 내지 6원 헤테로아릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 산소, 질소, 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 2가 5 내지 6원 헤테로아릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 산소, 질소, 황으로부터 독립적으로 선택된 1개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 2가 5 내지 6원 헤테로아릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-H는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 예를 들어, R에 대한 헤테로아릴 실시형태이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는
Figure pct00436
이다.
일부 실시형태에서, -Cy-는 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 2가 3 내지 20원 헤테로사이클릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 산소, 질소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 2가 3 내지 20원 헤테로사이클릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 산소, 질소, 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 2가 3 내지 6원 헤테로사이클릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 산소, 질소, 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 2가 5 내지 6원 헤테로사이클릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 산소, 질소, 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 2가 5 내지 6원 헤테로사이클릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 산소, 질소, 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 2가 5 내지 6원 헤테로사이클릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 산소, 질소, 황으로부터 독립적으로 선택된 1개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 2가 5 내지 6원 헤테로사이클릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 선택적으로 치환된 포화된 2가 헤테로사이클릴기이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-는 선택적으로 치환된 부분적으로 불포화된 2가 헤테로사이클릴기이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, -Cy-H는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 예를 들어, R에 대한 헤테로사이클릴 실시형태이다.
일부 실시형태에서, -Cy-는
Figure pct00437
이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는
Figure pct00438
이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는
Figure pct00439
이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는
Figure pct00440
이다. 일부 실시형태에서, -Cy-는
Figure pct00441
이다.
일부 실시형태에서, 각각의 Xaa는 독립적으로 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 각각의 Xaa는 독립적으로 식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기이다.
일부 실시형태에서, t는 0이다. 일부 실시형태에서, t는 1 내지 50이다. 일부 실시형태에서, t는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 z이다.
일부 실시형태에서, y는 1이다. 일부 실시형태에서, y는 2이다. 일부 실시형태에서, y는 3이다. 일부 실시형태에서, y는 4이다. 일부 실시형태에서, y는 5이다. 일부 실시형태에서, y는 6이다. 일부 실시형태에서, y는 7이다. 일부 실시형태에서, y는 8이다. 일부 실시형태에서, y는 9이다. 일부 실시형태에서, y는 10이다. 일부 실시형태에서, y는 11이다. 일부 실시형태에서, y는 12이다. 일부 실시형태에서, y는 13이다. 일부 실시형태에서, y는 14이다. 일부 실시형태에서, y는 15이다. 일부 실시형태에서, y는 16이다. 일부 실시형태에서, y는 17이다. 일부 실시형태에서, y는 18이다. 일부 실시형태에서, y는 19이다. 일부 실시형태에서, y는 20이다. 일부 실시형태에서, y는 20 초과이다.
일부 실시형태에서, z는 1이다. 일부 실시형태에서, z는 2이다. 일부 실시형태에서, z는 3이다. 일부 실시형태에서, z는 4이다. 일부 실시형태에서, z는 5이다. 일부 실시형태에서, z는 6이다. 일부 실시형태에서, z는 7이다. 일부 실시형태에서, z는 8이다. 일부 실시형태에서, z는 9이다. 일부 실시형태에서, z는 10이다. 일부 실시형태에서, z는 11이다. 일부 실시형태에서, z는 12이다. 일부 실시형태에서, z는 13이다. 일부 실시형태에서, z는 14이다. 일부 실시형태에서, z는 15이다. 일부 실시형태에서, z는 16이다. 일부 실시형태에서, z는 17이다. 일부 실시형태에서, z는 18이다. 일부 실시형태에서, z는 19이다. 일부 실시형태에서, z는 20이다. 일부 실시형태에서, z는 20 초과이다.
일부 실시형태에서, Rc는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R'이다. 일부 실시형태에서, Rc는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 R이다. 일부 실시형태에서, Rc는 -N(R')2이되, 각각의 R'는 독립적으로 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, Rc는 -NH2이다. 일부 실시형태에서, Rc는 R-C(O)-이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, Rc는 -H이다.
일부 실시형태에서, Lb는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 La이다. 일부 실시형태에서, Lb는 -Cy-를 포함한다. 일부 실시형태에서, Lb는 이중결합을 포함한다. 일부 실시형태에서, Lb는 -S-를 포함한다. 일부 실시형태에서, Lb는 -S-S-를 포함한다. 일부 실시형태에서, Lb는 -C(O)-N(R')-를 포함한다.
일부 실시형태에서, R'는 -R, -C(O)R, -C(O)OR 또는 -S(O)2R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, R'는 R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, R'는 -C(O)R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, R'는 -C(O)OR이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, R'는 -S(O)2R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, R'는 수소이다. 일부 실시형태에서, R'는 수소가 아니다. 일부 실시형태에서, R'는 R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 선택적으로 치환된 C1-20 지방족이다. 일부 실시형태에서, R'는 R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 선택적으로 치환된 C1-20 헤테로지방족이다. 일부 실시형태에서, R'는 R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 선택적으로 치환된 C6-20 아릴이다. 일부 실시형태에서, R'는 R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 선택적으로 치환된 C6-20 아릴지방족이다. 일부 실시형태에서, R'는 R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 선택적으로 치환된 C6-20 아릴헤테로지방족이다. 일부 실시형태에서, R'는 R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 선택적으로 치환된 5 내지 20원 헤테로아릴이다. 일부 실시형태에서, R'는 R이되, R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 선택적으로 치환된 3 내지 20원 헤테로사이클릴이다. 일부 실시형태에서, 둘 이상의 R'는 R이고, 선택적 및 독립적으로 함께 본 개시내용에 기재된 바와 같이 선택적으로 치환된 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, 각각의 R은 독립적으로 -H, 또는 C1-30 지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-30 헤테로지방족, C6-30 아릴, C6-30 아릴지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C6-30 아릴헤테로지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 헤테로사이클릴로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이거나, 또는
2개의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께 공유 결합을 형성하거나, 또는:
동일한 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께, 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 30원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성하거나; 또는
2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 이들의 개재 원자와 함께, 개재 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 30원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, 각각의 R은 독립적으로 -H, 또는 C1-30 지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-30 헤테로지방족, C6-30 아릴, C6-30 아릴지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C6-30 아릴헤테로지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 헤테로사이클릴로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이거나, 또는
2개의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께 공유 결합을 형성하거나, 또는:
동일한 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께, 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 30원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다.
2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 이들의 개재 원자와 함께, 개재 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 30원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, 각각의 R은 독립적으로 -H, 또는 C1-20 지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-20 헤테로지방족, C6-20 아릴, C6-20 아릴지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C6-20 아릴헤테로지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원 헤테로아릴 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 20원 헤테로사이클릴로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이거나, 또는
2개의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께 공유 결합을 형성하거나, 또는:
동일한 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께, 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 20원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다.
2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 이들의 개재 원자와 함께, 개재 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 20원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, 각각의 R은 독립적으로 -H, 또는 C1-30 지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-30 헤테로지방족, C6-30 아릴, C6-30 아릴지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C6-30 아릴헤테로지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 헤테로사이클릴로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이다.
일부 실시형태에서, 각각의 R은 독립적으로 -H, 또는 C1-20 지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-20 헤테로지방족, C6-20 아릴, C6-20 아릴지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C6-20 아릴헤테로지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원 헤테로아릴 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 20원 헤테로사이클릴로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이다.
일부 실시형태에서, R은 수소이다. 일부 실시형태에서, R은 수소가 아니다. 일부 실시형태에서, R은 C1-30 지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-30 헤테로지방족, C6-30 아릴, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴 고리, 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 복소환식 고리로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이다.
일부 실시형태에서, R은 수소 또는 C1-20 지방족, 페닐, 3 내지 7원 포화 또는 부분적으로 불포화된 탄소환식 고리, 8 내지 10원 이환식 포화, 부분적 불포화 또는 아릴 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 단환식 헤테로아릴 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 7원 포화 또는 부분적으로 불포화된 복소환식 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 7 내지 10원 이환식 포화 또는 부분적으로 불포화된 복소환식 고리, 또는 질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8 내지 10원 이환식 헤테로아릴 고리로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이다.
일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 C1-30 지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 C1-20 지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 C1-15 지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 C1-10 지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 C1-6 지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 C1-6 알킬이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 헥실, 펜틸, 뷰틸, 프로필, 에틸 또는 메틸이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 헥실이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 펜틸이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 프로필이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 에틸이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 메틸이다. 일부 실시형태에서, R은 헥실이다. 일부 실시형태에서, R은 펜틸이다. 일부 실시형태에서, R은 뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R은 프로필이다. 일부 실시형태에서, R은 에틸이다. 일부 실시형태에서, R은 메틸이다. 일부 실시형태에서, R은 아이소프로필이다. 일부 실시형태에서, R은 n-프로필이다. 일부 실시형태에서, R은 tert-뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R은 sec-뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R은 n-뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R은 -(CH2)2CN이다.
일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 C3-30 지환족이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 C3-20 지환족이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 C3-10 지환족이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 사이클로헥실이다. 일부 실시형태에서, R은 사이클로헥실이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 사이클로펜틸이다. 일부 실시형태에서, R은 사이클로펜틸이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 사이클로뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R은 사이클로뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 사이클로프로필이다. 일부 실시형태에서, R은 사이클로프로필이다.
일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 3 내지 30원 포화 또는 부분적으로 불포화된 탄소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 3 내지 7원 포화 또는 부분적으로 불포화된 탄소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 3-원 포화 또는 부분적으로 불포화된 탄소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 4-원 포화 또는 부분적으로 불포화된 탄소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 5-원 포화 또는 부분적으로 불포화된 탄소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 6-원 포화 또는 부분적으로 불포화된 탄소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 7-원 포화 또는 부분적으로 불포화된 탄소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 사이클로헵틸이다. 일부 실시형태에서, R은 사이클로헵틸이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 사이클로헥실이다. 일부 실시형태에서, R은 사이클로헥실이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 사이클로펜틸이다. 일부 실시형태에서, R은 사이클로펜틸이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 사이클로뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R은 사이클로뷰틸이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 사이클로프로필이다. 일부 실시형태에서, R은 사이클로프로필이다.
일부 실시형태에서, R이 고리 구조, 예를 들어, 지환족, 사이클로헤테로지방족, 아릴, 헤테로아릴 등이거나 이를 포함할 때, 고리 구조는 단환식, 이환식 또는 다환식일 수 있다. 일부 실시형태에서, R은 단환식 구조이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, R은 이환식 구조이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, R은 다환식 구조이거나 이를 포함한다.
일부 실시형태에서, R은 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 C1-30 헤테로지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 C1-20 헤테로지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 질소, 황, 인 또는 셀레늄의 하나 이상의 산화 형태를 포함하는 산소, 질소, 황, 인 또는 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 C1-20 헤테로지방족이다. 일부 실시형태에서, R은
Figure pct00442
, -N=, ≡N, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -O-, =O,
Figure pct00443
및
Figure pct00444
로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 기를 포함하는 선택적으로 치환된 C1-30 헤테로지방족이다.
일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 C6-30 아릴이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 페닐이다. 일부 실시형태에서, R은 페닐이다. 일부 실시형태에서, R은 치환된 페닐이다.
일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 8 내지 10원 이환식 포화, 부분적 불포화 또는 아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 8 내지 10원 이환식 포화 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 8 내지 10원 이환식 부분적으로 불포화된 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 8 내지 10원 이환식 아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 나프틸이다.
일부 실시형태에서, R은 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5 내지 30원 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 산소, 질소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5 내지 30원 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5 내지 30원 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 산소, 질소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5 내지 30원 헤테로아릴 고리이다.
일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5 내지 6원 단환식 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 치환된 5 내지 6원 단환식 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 비치환된 5 내지 6원 단환식 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 황 및 산소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5 내지 6원 단환식 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 치환된 5 내지 6원 단환식 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 황 및 산소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 비치환된 5 내지 6원 단환식 헤테로아릴 고리이다.
일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5원 단환식 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 6원 단환식 헤테로아릴 고리이다.
일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 선택된 1개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5원 단환식 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 피롤릴, 퓨란일 또는 티엔일이다.
일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 2개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5원 헤테로아릴 고리이다. 특정 실시형태에서, R은 1개의 질소 원자, 및 황 또는 산소로부터 선택된 추가적인 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5-원 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5원 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 4개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5원 헤테로아릴 고리이다.
일부 실시형태에서, R은 1 내지 4개의 질소 원자를 갖는 선택적으로 치환된 6-원 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 1 내지 3개의 질소 원자를 갖는 선택적으로 치환된 6-원 헤테로아릴 고리이다. 다른 실시형태에서, R은 1 내지 2개의 질소 원자를 갖는 선택적으로 치환된 6-원 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 4개의 질소 원자를 갖는 선택적으로 치환된 6-원 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 3개의 질소 원자를 갖는 선택적으로 치환된 6-원 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 2개의 질소 원자를 갖는 선택적으로 치환된 6-원 헤테로아릴 고리이다. 특정 실시형태에서, R은 1개의 질소 원자를 갖는 선택적으로 치환된 6-원 헤테로아릴 고리이다.
특정 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 8 내지 10원 이환식 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5,6-축합 헤테로아릴 고리이다. 특정 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 6,6-축합 헤테로아릴 고리이다.
일부 실시형태에서, R은 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 산소, 질소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 산소, 질소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 복소환식 고리이다.
일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 3 내지 7원 포화 또는 부분적으로 불포화된 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 치환된 3 내지 7원 포화 또는 부분적으로 불포화된 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 비치환된 3 내지 7원 포화 또는 부분적으로 불포화된 복소환식 고리이다. 특정 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5 내지 7원 부분적으로 불포화된 단환식 고리이다. 특정 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5 내지 6원 부분적으로 불포화된 단환식 고리이다. 특정 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5원 부분적으로 불포화된 단환식 고리이다. 특정 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 6원 부분적으로 불포화된 단환식 고리이다. 특정 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 7원 부분적으로 불포화된 단환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 또는 황으로부터 선택된 1개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 3-원 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 4-원 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5-원 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 6-원 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 7-원 복소환식 고리이다.
일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 3-원 포화 또는 부분적으로 불포화된 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 4-원 포화 또는 부분적으로 불포화된 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5-원 포화 또는 부분적으로 불포화된 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 6-원 포화 또는 부분적으로 불포화된 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 7-원 포화 또는 부분적으로 불포화된 복소환식 고리이다.
특정 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5 내지 6원 부분적으로 불포화된 단환식 고리이다. 특정 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 테트라하이드로피리딘일, 다이하이드로티아졸릴, 다이하이드로옥사졸릴 또는 옥사졸린일기이다.
일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 7 내지 10원 이환식 포화 또는 부분적으로 불포화된 복소환식 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 인돌린일이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 아이소인돌린일이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 1, 2, 3, 4-테트라하이드로퀴놀린일이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 1, 2, 3, 4-테트라하이드로아이소퀴놀린일이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 아자바이사이클로[3.2.1]옥탄일이다.
일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 8 내지 10원 이환식 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 5,6-축합 헤테로아릴 고리이다.
일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 C6-30 아릴지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 C6-20 아릴지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 선택적으로 치환된 C6-10 아릴지방족이다. 일부 실시형태에서, 아릴지방족의 아릴 모이어티는 6, 10 또는 14개의 아릴 탄소 원자를 갖는다. 일부 실시형태에서, 아릴지방족의 아릴 모이어티는 6개의 아릴 탄소 원자를 갖는다. 일부 실시형태에서, 아릴지방족의 아릴 모이어티는 10개의 아릴 탄소 원자를 갖는다. 일부 실시형태에서, 아릴지방족의 아릴 모이어티는 14개의 아릴 탄소 원자를 갖는다. 일부 실시형태에서, 아릴 모이어티는 선택적으로 치환된 페닐이다.
일부 실시형태에서, R은 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 C6-30 아릴헤테로지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 산소, 질소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 C6-30 아릴헤테로지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 C6-20 아릴헤테로지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 산소, 질소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 C6-20 아릴헤테로지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 C6-10 아릴헤테로지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 산소, 질소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 C6-10 아릴헤테로지방족이다.
일부 실시형태에서, 2개의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께 공유 결합을 형성한다. 일부 실시형태에서, -C=O가 형성된다. 일부 실시형태에서, -C=C-가 형성된다. 일부 실시형태에서, -C≡C-가 형성된다.
일부 실시형태에서, 동일한 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께, 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 30원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, 동일한 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께, 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 20원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, 동일한 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께, 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 10원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, 동일한 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께, 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 6원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, 동일한 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께, 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 5원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, 2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 이들의 개재 원자와 함께, 개재 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 30원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, 2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 이들의 개재 원자와 함께, 개재 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 20원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, 2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 이들의 개재 원자와 함께, 개재 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 10원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, 2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 이들의 개재 원자와 함께, 개재 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 10원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, 2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 이들의 개재 원자와 함께, 개재 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 6원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다. 일부 실시형태에서, 2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 이들의 개재 원자와 함께, 개재 원자에 추가로, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 0 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 5원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, R기에서, 또는 함께 취해진 2개 이상의 R기에 의해 형성된 구조에서 헤테로원자는 산소, 질소 및 황으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20-원이다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 포화된다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 부분적으로 포화된다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 방향족이다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 포화, 부분적 포화 또는 방향족 고리 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20개의 방향족 고리 원자를 포함한다. 일부 실시형태에서, 형성된 고리는 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20개 이하의 방향족 고리 원자를 포함한다. 일부 실시형태에서, 방향족 고리 원자는 탄소, 질소, 산소 및 황으로부터 선택된다.
일부 실시형태에서, 함께 취해진 둘 이상의 R기(또는 R로부터 선택된 2개 이상의 기 또는 R일 수 있는 변수)에 의해 형성된 고리는 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C3-30 지환족, C6-30 아릴, 5 내지 30원 헤테로아릴, 또는 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택된 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 헤테로사이클릴, 2가 또는 다가인 것을 제외하고 R에 대해 기재한 것과 같은 고리이다.
예시적인 화합물을 표 1에 제시한다.
Figure pct00445
Figure pct00446
Figure pct00447
Figure pct00448
Figure pct00449
Figure pct00450
Figure pct00451
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Figure pct00455
Figure pct00456
Figure pct00457
Figure pct00458
Figure pct00459
Figure pct00460
Figure pct00461
Figure pct00462
Figure pct00463
Figure pct00464
Figure pct00465
Figure pct00466
Figure pct00467
Figure pct00468
Figure pct00469
Figure pct00470
Figure pct00471
Figure pct00472
Figure pct00473
Figure pct00474
일부 실시형태에서, 반응 상대는 표 1a 또는 표 1b의 화합물이다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 반응 상대, 예를 들어, 식 R-I의 화합물 또는 이의 염은 표 1a의 화합물이다. 일부 실시형태에서, 항체 결합 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 화합물은 표 1a의 화합물이다. 일부 실시형태에서, 표 1b의 화합물은 항체 결합 모이어티를 포함하지 않으며, 대응하는 반응 상대 화합물에 대한 기준으로서 이용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 반응기의 특성 및/또는 활성을 평가하기 위한 기술을 제공한다. 일부 실시형태에서, 표 1c의 화합물은 이에 대한 반응기, 예를 들어,
Figure pct00475
, -C(O)N(CH3)O(CH3),
Figure pct00476
등의 특성 및/또는 활성을 평가하는 데 유용하다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 상기 표 1에 제시한 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 제공한다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 상기 표 1에 제시된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함하거나 전달하는 조성물을 제공한다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 본 명세서에 기재된 바와 같은 항체-항체 접합체를 제공한다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 본 명세서에 기재된 바와 같은 링커(예를 들어, -S-S-의 링커 결여)를 포함하는 항체-항체 접합체를 제공한다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 제공된 항체-항체 접합체를 포함하거나 이를 전달하는 조성물을 제공한다. 일부 실시형태에서, 제공된 조성물은 약제학적 조성물이다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 본 명세서에 기재된 바와 같은 화합물, 제제, 조성물의 제조하는 데 유용한 기술(예를 들어, 화합물, 방법 등)을 제공한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 식 R-I의 화합물 또는 이의 염을 제조하는 데 유용하다. 일부 실시형태에서, 화합물은 LG-RLG-H의 구조식 또는 이의 염을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화합물은 LG-LLG1-H의 구조식 또는 이의 염을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화합물은 LG-LLG1-LLG2-H의 구조식 또는 이의 염을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화합물은 LG-LLG1-LLG2-LLG3-H의 구조식 또는 이의 염을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화합물은 LG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조식 또는 이의 염을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화합물은 LG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-RG-H의 구조식 또는 이의 염을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화합물은 LG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-LRG1-H의 구조식 또는 이의 염을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화합물은 LG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-H의 구조식 또는 이의 염을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화합물은 LG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-LRM-H의 구조식 또는 이의 염을 갖는다. 일부 실시형태에서, 화합물은 LG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-LPM-H의 구조식 또는 이의 염을 갖는다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 화합물은
Figure pct00477
또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 화합물은
Figure pct00478
또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 화합물은
Figure pct00479
또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 화합물은
Figure pct00480
또는 이의 염이다. 일부 실시형태에서, 화합물은 본 명세서에 기재된 바와 같은 실시예에 기재된 것이다.
일반 방법, 시약 및 조건
다양한 기술은 본 개시내용에 따른 본 명세서의 화합물 및 제제를 제공하는 데 이용될 수 있다.
일부 실시형태에서, 특정 보호기("PG"), 이탈기("LG") 또는 변환 조건이 도시되는 경우, 당업자는 다른 보호기, 이탈기 및 변환 조건이 적합하고, 고려된다는 것을 인식할 것이다. 이러한 기 및 변환은 문헌[March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, M. B. Smith and J. March, 5th Edition, John Wiley & Sons, 2001, Comprehensive Organic Transformations, R. C. Larock, 2nd Edition, John Wiley & Sons, 1999, 및 Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999]에 상세하게 기재되어 있으며, 이들 각각의 전문은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
일부 실시형태에서, 이탈기는 할로겐(예를 들어, 플루오린화물, 염화물, 브로민화물, 아이오딘화물), 설폰산염(예를 들어, 메실레이트, 토실레이트, 벤젠설폰산염, 브로실레이트, 노실레이트, 트라이플레이트), 다이아조늄 등을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
일부 실시형태에서, 산소 보호기는, 예를 들어, 카본일 보호기, 하이드록실 보호기 등을 포함한다. 하이드록실 보호기는 당업계에 잘 공지되어 있으며, 문헌[Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999]에 상세하게 기재된 것을 포함하며, 이의 전문은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 적합한 하이드록실 보호기의 예는 에스터, 알릴 에터, 에터, 실릴 에터, 알킬 에터, 아릴알킬 에터 및 알콕시알킬 에터를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 이러한 에스터의 예는 폼산염, 아세트산염, 탄산염 및 설폰산염을 포함한다. 구체적 예는 폼산염, 벤조일 폼산염, 클로로아세테이트, 트라이플루오로아세테이트, 메톡시아세테이트, 트라이페닐메톡시아세테이트, p-클로로페녹시아세테이트, 3-페닐프로피오네이트, 4-옥소펜타노에이트, 4,4-(에틸렌다이티오)펜타노에이트, 피발로에이트(트라이메틸아세틸), 크로토네이트, 4-메톡시-크로토네이트, 벤조산염, p-벤질벤조산염, 2,4,6-트라이메틸벤조산염, 탄산염, 예컨대, 메틸, 9-플루오렌일메틸, 에틸, 2,2,2-트라이클로로에틸, 2-(트라이메틸실릴)에틸, 2-(페닐설폰일)에틸, 비닐, 알릴 및 p-나이트로벤질을 포함한다. 이러한 실릴 에터의 예는 트라이메틸실릴, 트라이에틸실릴, t-뷰틸다이메틸실릴, t-뷰틸다이페닐실릴, 트라이아이소프로필실릴 및 기타 트라이알킬실릴 에터를 포함한다. 알킬 에터는 메틸, 벤질, p-메톡시벤질, 3,4-다이메톡시벤질, 트라이틸, t-뷰틸, 알릴 및 알릴옥시카본일 에터 또는 유도체를 포함한다. 알콕시알킬 에터는 아세탈, 예컨대, 메톡시메틸, 메틸티오메틸, (2-메톡시에톡시)메틸, 벤질옥시메틸, 베타-(트라이메틸실릴)에톡시메틸 및 테트라하이드로피란일 에터를 포함한다. 아릴알킬 에터의 예는 벤질, p-메톡시벤질(MPM), 3,4-다이메톡시벤질, O-나이트로벤질, p-나이트로벤질, p-할로벤질, 2,6-다이클로로벤질, p-사이아노벤질 및 2- 및 4-피콜릴을 포함한다.
아미노 보호기는 당업계에 잘 공지되어 있으며, 문헌[Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999]에 상세하게 기재된 것을 포함하며, 이의 전문은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다. 적합한 아미노 보호기는 아랄킬아민, 카바메이트, 환식 이민, 알릴 아민, 아마이드 등을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 이러한 기의 예는 t-뷰틸옥시카본일(BOC), 에틸옥시카본일, 메틸옥시카본일, 트라이클로로에틸옥시카본일, 알릴옥시카본일(Alloc), 벤질옥소카본일(CBZ), 알릴, 프탈이미드, 벤질(Bn), 플루오렌일메틸카본일(Fmoc), 폼일, 아세틸, 클로로아세틸, 다이클로로아세틸, 트라이클로로아세틸, 페닐아세틸, 트라이플루오로아세틸, 벤조일 등을 포함한다.
당업자는 화합물/제제가 하나 이상의 입체중심을 포함할 수 있고, 라세미체 또는 부분입체이성질체 혼합물로서 존재할 수 있다는 것을 인식할 것이다. 당업자는 또한 HPLC, 카이랄 HPLC, 부분입체이성질체 염의 분별 결정, 동력학 효소 분해능(예를 들어, 진균-, 박테리아-, 또는 동물-유래 리파제 또는 에스터라제에 의함), 및 거울상이성질체 풍부 시약을 이용하는 공유 부분입체이성질체 유도체의 형성을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는, 해당 화합물의 입체풍부 또는 입체순수 이성질체를 얻기 위해 이성질체를 분리하기 위한 다수의 공지된 방법이 있다는 것을 인식할 것이다.
당업자는 본 개시내용의 화합물에 존재하는 다양한 작용기, 예컨대, 지방족기, 알코올, 카복실산, 에스터, 아마이드, 알데하이드, 할로겐 및 나이트릴이 환원, 산화, 에스터화, 가수분해, 부분적 산화, 부분적 환원, 할로겐화, 탈수, 부분적 수화 및 수화를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 당업계에 잘 공지된 기법에 의해 상호 전환될 수 있다는 것을 인식할 것이다. 전문이 본 명세서에 참조에 의해 원용되는 문헌["March's Advanced Organic Chemistry", 5th Ed., Ed.: Smith, M.B. and March, J., John Wiley & Sons, New York: 2001]. 이러한 상호전환은 앞서 언급한 기법 중 하나 이상을 필요로 할 수 있고, 본 개시내용의 화합물을 합성하기 위한 특정 방법은 이하의 예시에 기재된다.
용도, 제형 및 투여
본 개시내용의 화합물, 제제, 조성물 등은 목적하는 용도에 따른 다양한 형태로서 제공될 수 있다. 일부 실시형태에서, 이들은 약제학적 조성물로서 제공된다. 당업자에 의해 인식되는 바와 같이, 다수의 예에서, 약제학적 조성물은 제어된 양을 포함하고, 인간 환자와 같은 대상체에 대한 투여용으로 제조된다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 본 명세서에 기재된 화합물, 제제 및/또는 조성물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 유도체 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 조성물을 제공한다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 화합물, 제제 또는 조성물 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 치료적 유효량의 본 개시내용의 화합물, 제제 또는 조성물, 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는, 약제학적 조성물을 제공한다. 일부 실시형태에서, 약제학적 조성물은 저장, 수송, 투여 등을 위해 패키징된다. 일부 실시형태에서, 약제학적 조성물은 상당량의 유기 용매(예를 들어, 약제학적 조성물의 중량 및/또는 용적의 50%, 40%, 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, 5%, 4%, 3%, 2% 또는 1% 이하의 총량의 유기 용매)를 함유하지 않는다.
일부 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 담체는 제형화되는 화합물의 약학적 활성을 파괴하지 않는 비독성 담체, 아쥬반트 또는 비히클이거나 이를 포함한다. 약제학적으로 허용 가능한 담체, 아쥬반트 또는 비히클은 이온 교환체, 알루미나, 스테아르산알루미늄, 레시틴, 혈청 단백질, 예컨대, 인간 혈청 알부민, 완충제 물질, 예컨대, 인산염, 글리신, 솔브산, 솔브산칼륨, 포화 식물성 지방산의 부분적 글리세라이드 혼합물, 물, 염 또는 전해질, 예컨대, 프로타민 설페이트, 인산수소이나트륨, 인산수소칼륨, 염화나트륨, 아연염, 콜로이드 실리카, 삼규산마그네슘, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로스계 물질, 폴리에틸렌 글리콜, 카복시메틸셀룰로스나트륨, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-블록 중합체, 폴리에틸렌 글리콜 및 양모지를 포함할 수 있지만 이들로 제한되지 않는다.
일부 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 유도체는, 수용자에테 투여 시, 화합물 또는 활성 대사물질 또는 이의 잔사를 직접적 또는 간접적으로 제공할 수 있는 화합물의 비독성염, 에스터, 에스터의 염 또는 다른 유도체이다.
조성물은 경구로, 비경구로, 흡입 스프레이에 의해, 국소, 직장, 비강, 협측, 질 또는 이식 저장소를 통해 투여될 수 있다. 일부 실시형태에서, 비경구 투여는 피하, 정맥내, 근육내, 관절내, 활액내, 흉골내, 척추강내, 간내, 병변내 및 두개내 주사 또는 주입 기법을 포함한다. 일부 실시형태에서, 조성물은 경구로, 복강내로 또는 정맥내로 투여된다. 조성물의 멸균 주사 가능 형태는 수성 또는 유성 현탁액일 수 있다. 이들 현탁액은 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제를 이용하여 당업계에 공지된 기법에 따라 제형화될 수 있다. 멸균 주사 가능 제제는 또한 비독성의 비경구로 허용 가능한 희석제 또는 용매에서, 예를 들어, 1,3-뷰탄다이올 중 용액으로서 멸균 주사 가능 용액 또는 현탁액일 수 있다. 사용될 수 있는 허용 가능한 비히클 및 용매 중에는 물, 링거액 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 또한, 멸균, 고정유는 통상적으로 용매 또는 현탁 매질로서 사용된다.
일부 실시형태에서, 합성 모노-글리세라이드 또는 다이-글리세라이드를 포함하는 배합 고정유가 사용될 수 있다. 지방산, 예컨대, 올레산 및 이의 글리세라이드 유도체는 특히 이들의 폴리옥시에틸화된 형태의 천연 약제학적으로-허용 가능한 오일, 예컨대, 올리브유 또는 피마자유와 같이 주사 가능한 제제에서 유용하다. 이들 오일 용액 또는 현탁액은 또한 장쇄 알코올 희석제 또는 분산물, 예컨대, 카복시메틸 셀룰로스 또는 에멀션 및 현탁액을 포함하는 약제학적으로 허용 가능한 투약 형태 제형에서 통상적으로 사용되는 유사한 분산제를 함유할 수 있다. 다른 통상적으로 사용되는 계면활성제, 예컨대, Tween, Span 및 약제학적으로 허용 가능한 고체, 액체 또는 기타 투약 형태의 제조에서 통상적으로 사용되는 기타 유화제 또는 생체이용률 향상제가 또한 제형 목적을 위해 사용될 수 있다.
약제학적으로 허용 가능한 조성물은 캡슐, 정제, 수성 현탁액 또는 용액을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 임의의 경구로 허용 가능한 투약 형태로 경구 투여될 수 있다. 경구 용도를 위한 정제의 경우에, 통상적으로 사용되는 담체는 락토스 및 옥수수 전분을 포함한다. 윤활제, 예컨대, 스테아르산마그네슘이 또한 전형적으로 첨가된다. 캡슐 형태의 경구 투여를 위해, 유용한 희석제는 락토스 및 건조된 옥수수전분을 포함한다. 수성 현탁액이 경구 용도에 필요할 때, 활성 성분은 유화제 및 현탁제와 조합된다. 필요한 경우, 특정 감미제, 향미제 또는 착색제가 또한 첨가될 수 있다.
일부 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 조성물이 직장 투여용 좌약의 형태로 투여될 수 있다. 일부 실시형태에서, 이들은 제제를 실온에서 고체이지만 직장 온도에서 액체이고 따라서 직장에서 용융되어 약물을 방출시키는 적합한 비-자극성 부형제와 혼합함으로써 제조될 수 있다. 이러한 물질은 코코아버터, 밀랍 및 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다.
일부 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 조성물은, 특히, 치료 표적이 눈, 피부 또는 하부 장관의 질환을 포함하는 국소 적용에 의해 용이하게 접근 가능한 면적 또는 기관을 포함할 때, 국소로 투여될 수 있다. 적합한 국소 제형은 이들 면적 또는 기관 각각에 대해 용이하게 제조된다.
하부 장관에 대한 국소 적용은 직장 좌약 제형에서(상기 참조) 또는 적합한 관장 제형에서 달성될 수 있다. 국소-경피 패치가 또한 사용될 수 있다.
국소 적용을 위해, 약제학적으로 허용 가능한 조성물은 하나 이상의 담체에서 현탁 또는 용해된 활성 성분을 함유하는 적합한 연고로 제형화될 수 있다. 본 개시내용의 화합물의 국소 투여용 담체는 광유, 액체 페트롤라툼, 백색 페트롤라툼, 프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌, 폴리옥시프로필렌 화합물, 유화 왁스 및 물을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 대안적으로, 제공된 약제학적으로 허용 가능한 조성물은 1종 이상의 약제학적으로 허용 가능한 담체 중에서 현탁되거나 용해된 활성 성분을 함유하는 적합한 로션 또는 크림에서 제형화될 수 있다. 적합한 담체는 광유, 솔비탄 모노스테아레이트, 폴리솔베이트 60, 세틸 에스터 왁스, 세트아릴 알코올, 2-옥틸도데칸올, 벤질 알코올 및 물을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
안구 용도를 위해, 약제학적으로 허용 가능한 조성물은 벤질염화알코늄과 같은 보존제와 함께 또는 보존제 없이 등장성, pH 조절 멸균 식염수 중 미분화된 현탁액으로서, 또는 바람직하게는 등장성, pH 조절 멸균 식염수 중 용액으로서 제형화될 수 있다. 대안적으로, 안구 용도를 위해, 약제학적으로 허용 가능한 조성물은 페트롤라툼과 같은 연고에서 제형화될 수 있다.
약제학적으로 허용 가능한 조성물은 또한 비강 에어로졸 또는 흡입에 의해 투여될 수 있다. 이러한 조성물은 약제학적 제형 분야에 잘 공지되어 있는 기법에 따라 제조되고, 벤질 알코올 또는 기타 적합한 보존제, 생체 이용 능력을 향상시키기 위한 흡수 촉진제, 플루오로탄소 및/또는 기타 통상적인 가용화제 또는 분산제를 이용하여, 식염수 중 용액으로서 제조될 수 있다.
일부 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 조성물은 경구 투여용으로 제형화된다. 이러한 제형은 식품과 함께 또는 식품 없이 투여될 수 있다. 일부 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 조성물은 식품 없이 투여된다. 다른 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 조성물은 식품과 함께 투여된다.
단일 투약 형태 중 조성물을 생성하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 화합물의 양은 치료되는 숙주, 특정 투여 방식에 따라 다를 것이다. 일부 실시형태에서, 0.01 내지 100㎎/㎏ 체중/일의 저해제의 투약량이 이들 조성물을 받고 있는 환자에게 투여될 수 있도록, 제공되는 조성물이 제형화된다.
또한 임의의 특정 환자에 대한 구체적인 투약량 및 치료 요법은 사용되는 구체적 화합물의 활성, 연령, 체중, 일반적 건강상태, 성별, 식이요법, 투여 시간, 배설속도, 약물 조합, 및 치료 중인 의사의 판단, 및 치료 중인 특정 질환의 중증도를 포함하는 다양한 인장에 따라 다를 것임이 이해되어야 한다. 조성물 중 본 개시내용의 화합물의 양은 또한 조성물 중 특정 화합물에 따라 다를 것이다.
본 개시내용의 기술(예를 들어, 화합물, 제제, 조성물)은 다양한 목적, 예를 들어, 검출, 진단, 요법 등을 위해 이용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술은 병태, 장애 또는 질환, 예를 들어, 다양한 암을 치료하는 데 유용하다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술은 암 세포의 항원에 결합할 수 있는 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 제제 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 표적 결합 모이어티는 항체 제제 모이어티이다. 일부 실시형태에서, 항체 제제는 치료제이다. 특히, 치료제로서 (예를 들어, FDA, EMA 등에 의해) 다수의 개발 및/또는 승인된 것을 포함하는 다양한 항체 제제는 다양한 질환을 위한 치료제를 제공하기 위해 본 개시내용에 따라 이용될 수 있다.
특히, 본 개시내용은 다음의 실시형태를 제공한다:
1. 하기 식 R-I의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 염:
Figure pct00481
식 중:
LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기이고,
RG는 반응기이며;
LRM은 링커이고; 그리고
MOI는 관심 모이어티이다.
2. 하기 식 R-I의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 염:
Figure pct00482
식 중:
LG는 RLG-LLG이고;
RLG는
Figure pct00483
, Rc-(Xaa)z-, 핵산 모이어티 또는 소분자 모이어티이며;
각각의 Xaa는 독립적으로 아미노산 또는 아미노산 유사체의 잔기이고;
t는 0 내지 50이며;
z는 1 내지 50이고;
각각의 Rc는 독립적으로 -La-R'이며;
a 및 b 각각은 독립적으로 1 내지 200이고;
각각의 La는 독립적으로 공유 결합이거나, 또는 C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택된 선택적으로 치환된 2가 기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S- 또는 -C(O)O-로 선택적 및 독립적으로 대체되고;
각각의 -Cy-는 독립적으로 선택적으로 치환된 2가의 단환식, 이환식 또는 다환식기이되, 각각의 단환식 고리는 C3-20 지환족 고리, C6-20 아릴 고리, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원 헤테로아릴 고리, 및 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 20원 헤테로사이클릴 고리로부터 독립적으로 선택되며;
LLG는 -LLG1-, -LLG1-LLG2-, -LLG1-LLG2-LLG3-, 또는 -LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-이고;
RG는 -LRG1-LRG2-, -LLG4-LRG1-LRG2-, -LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-, -LLG2-LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-이며;
LLG1, LLG2, LLG3, LLG4, LRG1, LRG2 및 LRM 각각은 독립적으로 L이고;
각각의 L은 독립적으로 공유 결합이거나, 또는 하나 이상의 지방족 모이어티, 아릴 모이어티, 각각 독립적으로 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로지방족 모이어티, 각각 독립적으로 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로방향족 모이어티 또는 이러한 모이어티의 임의의 하나 이상의 임의의 조합을 포함하는 2가의 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-100 기이되, 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 C1-6 알킬렌, C1-6 알켄일렌, 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 2가 C1-6 헤테로지방족기, -C≡C-, -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 선택적 및 독립적으로 대체되고, n은 1 내지 20이고;
각각의 R'는 독립적으로 -R, -C(O)R, -CO2R 또는 -SO2R이며;
각각의 R은 독립적으로 -H이거나, 또는 C1-30 지방족, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-30 헤테로지방족, C6-30 아릴, C6-30 아릴지방족, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C6-30 아릴헤테로지방족, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴 및 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 헤테로사이클릴로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이거나, 또는
2개의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께 공유 결합을 형성하거나, 또는:
동일한 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 원자와 함께, 상기 원자에 추가로, 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 30원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성하거나; 또는
2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 이들의 개재 원자와 함께 개재 원자에 추가로, 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 30원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성하며; 그리고
MOI는 관심 모이어티이다.
3. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하되, 표적 제제는 단백질 제제인, 화합물.
4. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하되, 표적 제제는 항체 제제인, 화합물.
5. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LG는 Fc 영역에 결합하는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하는, 화합물.
6. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 각각의 L은 독립적으로 공유 결합이거나, 또는 2가의 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 지방족기 또는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 헤테로지방족기이되, 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 선택적 및 독립적으로 -C≡C-, -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기, 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 대체되며, n은 1 내지 20인, 화합물.
7. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LG는 RLG-LLG-이되, RLG는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하고, LLG는 LLG1이며, LLG1은 L인, 화합물.
8. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, RG는 -LLG2-LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-이거나 이를 포함하되, LLG2, LLG3, LLG4, LRG1, LRG2 각각은 독립적으로 L인, 화합물.
9. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LG는 RLG-LLG-이되, RLG는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하고, LLG는 LLG1-LLG2-인, 화합물.
10. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, RG는 -LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-이거나 이를 포함하는, 화합물.
11. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LG는 RLG-LLG-이되, RLG는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하고, LLG는 LLG1-LLG2-LLG3-인, 화합물.
12. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, RG는 -LLG4-LRG1-LRG2-이거나 이를 포함하는, 화합물.
13. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LG는 RLG-LLG-이되, RLG는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하고, LLG는 LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-인, 화합물.
14. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, RG는 -LRG1-LRG2-이거나 이를 포함하는, 화합물.
15. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, RLG는
Figure pct00484
또는 Rc-(Xaa)z-인, 화합물.
16. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, RLG는 WXL이거나 이를 포함하되, X는 아미노산 잔기인, 화합물.
17. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, RLG는 AWXLGELVW이거나 이를 포함하되, X는 아미노산 잔기인, 화합물.
18. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, RLG는 DpLpAWXLGELVW이거나 이를 포함하되, X는 아미노산 잔기인, 화합물.
19. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, RLG는 DCAWXLGELVWCT이거나 이를 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 선택적으로 이황화결합을 형성하고, X는 아미노산 잔기인, 화합물.
20. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, RLG는 DpLpDCAWXLGELVWCT이거나 이를 포함하되, 2개의 시스테인 잔기는 선택적으로 이황화결합을 형성하고, X는 아미노산 잔기인, 화합물.
21. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, RLG는 CDCAWXLGELVWCTC이거나 이를 포함하되, 첫 번째 시스테인과 마지막 시스테인 및 서열 중간의 2개의 시스테인은 각각 독립적 및 선택적으로 이황화결합을 형성하고, X는 아미노산 잔기인, 화합물.
22. 실시형태 16 내지 21 중 어느 하나에 있어서, RLG는 WXL이거나 이를 포함하되, X는 아미노산 잔기인, 화합물.
23. 실시형태 15에 있어서, RLG는 표 A-1로부터 선택된, 화합물.
24. 실시형태 15에 있어서, RLG는
Figure pct00485
인, 화합물.
25. 실시형태 15에 있어서, RLG는
Figure pct00486
인, 화합물.
26. 실시형태 15에 있어서, RLG는
Figure pct00487
인, 화합물.
27. 실시형태 15에 있어서, RLG는
Figure pct00488
인, 화합물.
28. 실시형태 15에 있어서, RLG는
Figure pct00489
인, 화합물.
29. 실시형태 15에 있어서, RLG는
Figure pct00490
인, 화합물.
30. 실시형태 15에 있어서, RLG는
Figure pct00491
인, 화합물.
31. 실시형태 15에 있어서, RLG는
Figure pct00492
인, 화합물.
32. 실시형태 15에 있어서, RLG는
Figure pct00493
인, 화합물.
33. 실시형태 15에 있어서, RLG는
Figure pct00494
인, 화합물.
34. 실시형태 15에 있어서, RLG는
Figure pct00495
인, 화합물.
35. 실시형태 15에 있어서, RLG는
Figure pct00496
인, 화합물.
36. 실시형태 15에 있어서, RLG는
Figure pct00497
인, 화합물.
37. 실시형태 15에 있어서, RLG는
Figure pct00498
인, 화합물.
38. 실시형태 33 내지 37 중 어느 하나에 있어서, Rc는 R-C(O)-이되, R은 선택적으로 치환된 C1-6 지방족인, 화합물.
39. 실시형태 33 내지 37 중 어느 하나에 있어서, Rc는 CH3C(O)-인, 화합물.
40. 실시형태 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, RLG는 소분자 모이어티인, 화합물.
41. 실시형태 40에 있어서, RLG는 선택적으로 치환된
Figure pct00499
인, 화합물.
42. 실시형태 40에 있어서, RLG는
Figure pct00500
인, 화합물.
43. 실시형태 40에 있어서, RLG는 선택적으로 치환된
Figure pct00501
인, 화합물.
44. 실시형태 40에 있어서, RLG는
Figure pct00502
인, 화합물.
45. 실시형태 40에 있어서, RLG는
Figure pct00503
인, 화합물.
46. 실시형태 40에 있어서, RLG는 선택적으로 치환된
Figure pct00504
인, 화합물.
47. 실시형태 40에 있어서, RLG는
Figure pct00505
인, 화합물.
48. 실시형태 40에 있어서, RLG는 선택적으로 치환된
Figure pct00506
인, 화합물.
49. 실시형태 40에 있어서, RLG는
Figure pct00507
인, 화합물.
50. 실시형태 40에 있어서, RLG는
Figure pct00508
인, 화합물.
51. 실시형태 40에 있어서, RLG는 선택적으로 치환된
Figure pct00509
인, 화합물.
52. 실시형태 40에 있어서, RLG는
Figure pct00510
인, 화합물.
53. 실시형태 40에 있어서, RLG는 선택적으로 치환된
Figure pct00511
인, 화합물.
54. 실시형태 40에 있어서, RLG는
Figure pct00512
인, 화합물.
55. 실시형태 40에 있어서, RLG는
Figure pct00513
인, 화합물.
56. 실시형태 40에 있어서, RLG는 선택적으로 치환된
Figure pct00514
인, 화합물.
57. 실시형태 40에 있어서, RLG는
Figure pct00515
인, 화합물.
58. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LLG1은 공유 결합인, 화합물.
59. 실시형태 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, LLG1은 -(CH2CH2O)n-이거나 이를 포함하는, 화합물.
60. 실시형태 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, LLG1은 -(CH2)n-O-(CH2CH2O)n-(CH2)n-이거나 이를 포함하되, 각각의 n은 독립적으로 1 내지 10이고, 각각의 -CH2-는 독립적으로 선택적으로 치환된, 화합물.
61. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 -NR'-이거나 이를 포함하는, 화합물.
62. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 -C(O)-이거나 이를 포함하는, 화합물.
63. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 -NR'C(O)-이거나 이를 포함하는, 화합물.
64. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 -(CH2)n-OC(O)N(R')-이거나 이를 포함하되, -(CH2)n-은 선택적으로 치환된, 화합물.
65. 실시형태 1 내지 60 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 공유 결합인, 화합물.
66. 실시형태 1 내지 60 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 -CH2N(CH2CH2CH2S(O)2OH)-C(O)-인, 화합물.
67. 실시형태 1 내지 60 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 -C(O)-NHCH2-인, 화합물.
68. 실시형태 1 내지 60 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 -C(O)O-CH2-인, 화합물.
69. 실시형태 1 내지 60 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 -NH-C(O)O-CH2-인, 화합물.
70. 실시형태 62 내지 63 및 66 내지 69 중 어느 하나에 있어서, -C(O)-는 LLG3에 결합된, 화합물.
71. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LLG3은 선택적으로 치환된 아릴 고리이거나 이를 포함하는, 화합물.
72. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LLG3은 선택적으로 치환된 페닐 고리이거나 이를 포함하는, 화합물.
73. 실시형태 71 내지 72 중 어느 하나에 있어서, 고리는 치환되고, 하나 이상의 치환체는 독립적으로 전자-회수기인, 화합물.
74. 실시형태 73에 있어서, 치환체는 -F인, 화합물.
75. 실시형태 73에 있어서, 치환체는 -NO2인, 화합물.
76. 실시형태 1 내지 75 중 어느 하나에 있어서, LLG3은
Figure pct00516
이되, s는 0 내지 4이고, 각각의 Rs는 독립적으로 할로겐, -NO2, -L-R', -C(O)-L-R', -S(O)-L-R', -S(O)2-L-R' 또는 -P(O)(-L-R')2인, 화합물.
77. 실시형태 1 내지 75 중 어느 하나에 있어서, LLG3은
Figure pct00517
인, 화합물.
78. 실시형태 1 내지 75 중 어느 하나에 있어서, LLG3은
Figure pct00518
인, 화합물.
79. 실시형태 1 내지 71 중 어느 하나에 있어서, LLG3은
Figure pct00519
인, 화합물.
80. 실시형태 1 내지 71 중 어느 하나에 있어서, LLG3은
Figure pct00520
인, 화합물.
81. 실시형태 76 내지 80 중 어느 하나에 있어서, C1은 LLG4에 결합된, 화합물.
82. 실시형태 1 내지 70 중 어느 하나에 있어서, LLG3은 공유 결합인, 화합물.
83. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LLG4는 -O-이거나 이를 포함하는, 화합물.
84. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LLG4는 -NR'-이거나 이를 포함하는, 화합물.
85. 실시형태 1 내지 83 중 어느 하나에 있어서, LLG4는 -O-인, 화합물.
86. 실시형태 1 내지 83 중 어느 하나에 있어서, LLG4는 -NH-인, 화합물.
87. 실시형태 1 내지 83 중 어느 하나에 있어서, LLG4는 공유 결합인, 화합물.
88. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LRG1은 공유 결합인, 화합물.
89. 실시형태 1 내지 88 중 어느 하나에 있어서, LRG1은 -S(O)2-이거나 이를 포함하는, 화합물.
90. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LRG2는 -C(O)-이거나 이를 포함하는, 화합물.
91. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LRG2는 -LRG3-C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4-이거나 이를 포함하되, RRG1, RRG2, RRG3 및 RRG4 각각은 독립적으로 -L-R'이고, LRG3은 -C(O)-, -C(O)O-, -C(O)N(R')-, -S(O)-, -S(O)2-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')- 또는 -P(O)(N(R')2)-인, 화합물.
92. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LRG2는 선택적으로 치환된 -LRG3-C(=CHRRG2)-CHRRG4-이거나 이를 포함하는, 화합물.
93. 실시형태 91 또는 92에 있어서, RRG2 및 RRG4는 이들의 개재 원자와 함께 0 내지 5개 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된 3 내지 10원 단환식 또는 이환식 고리를 형성하는, 화합물.
94. 실시형태 91 또는 92에 있어서, -C(=CHRRG2)-CHRRG4 또는 -C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4는 선택적으로 치환된
Figure pct00521
인, 화합물.
95. 실시형태 1 내지 89 중 어느 하나에 있어서, LRG2는 -C(O)-인, 화합물.
96. 실시형태 1 내지 89 중 어느 하나에 있어서, LRG2는
Figure pct00522
인, 화합물.
97. 실시형태 1 내지 89 중 어느 하나에 있어서, -LLG1-LRG2-는 -C(O)-인, 화합물.
98. 실시형태 1 내지 89 중 어느 하나에 있어서, -LLG1-LRG2-는
Figure pct00523
인, 화합물.
99. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LPM은 -(CH2CH2O)n-이거나 이를 포함하는, 화합물.
100. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, LPM은 -(CH2)n-O-(CH2CH2O)n-(CH2)n-이거나 이를 포함하되, 각각의 n은 독립적으로 1 내지 10이고, 각각의 -CH2-는 독립적으로 선택적으로 치환된, 화합물.
101. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 검출 가능한 모이어티이거나 이를 포함하는, 화합물.
102. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 형광단이거나 이를 포함하는, 화합물.
103. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는
Figure pct00524
이거나 이를 포함하는, 화합물.
104. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 치료제이거나 이를 포함하는, 화합물.
105. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 세포독성제이거나 이를 포함하는, 화합물.
106. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 단백질, 핵산 또는 세포에 결합할 수 있는 모이어티이거나 이를 포함하는, 화합물.
107. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 면역 세포에 결합할 수 있는 모이어티이거나 이를 포함하는, 화합물.
108. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 소분자 모이어티이거나 이를 포함하는, 화합물.
109. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 펩타이드 모이어티이거나 이를 포함하는, 화합물.
110. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는, 화합물.
111. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 생물직교성 반응에 적합한 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는, 화합물.
112. 실시형태 110 내지 111 중 어느 하나에 있어서, 반응성 모이어티는 -N3이거나 이를 포함하는, 화합물.
113. 실시형태 110 내지 111 중 어느 하나에 있어서, 반응성 모이어티는 알킨 모이어티이거나 이를 포함하는, 화합물.
114. 실시형태 110 내지 111 중 어느 하나에 있어서, 반응성 모이어티는 선택적으로 치환된
Figure pct00525
이거나 이를 포함하는, 화합물.
115. 실시형태 110 내지 111 중 어느 하나에 있어서, 반응성 모이어티는 선택적으로 치환된
Figure pct00526
이거나 이를 포함하는, 화합물.
116. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 화합물은 선택적으로 RG에서의 하나 이상을 제외하고 절단이 LG를 방출할 수 있는 절단 가능한 기를 포함하지 않는, 화합물.
117. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 화합물은 RG 또는 MOI에서를 제외하고 -S-S-, 아세탈 또는 이민기를 포함하지 않는, 화합물.
118. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 화합물이 2개의 아미노산 잔기에 의해 형성되는 -S-S-를 가질 수 있다는 것을 제외하고 화합물은 -S-S-, 아세탈 또는 이민기를 포함하지 않는, 화합물.
119. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 화합물이 시스테인 잔기에 의해 형성되는 -S-S-를 가질 수 있다는 것을 제외하고 화합물은 -S-S-, 아세탈 또는 이민기를 포함하지 않는, 화합물.
120. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 화합물은 -S-S-, 아세탈 또는 이민기를 포함하지 않는, 화합물.
121. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 화합물은 하기로부터 선택된 하나 이상의 기를 포함하는, 화합물:
Figure pct00527
.
122. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, -LLG2-LLG3-LLG4-RG-는 하기로부터 선택된 구조식인, 화합물:
Figure pct00528
Figure pct00529
.
123. 표 1a로부터 선택된 화합물 또는 이의 염.
124. 화합물이 I-10 또는 이의 염인, 화합물.
125. 화합물이 I-12 또는 이의 염인, 화합물.
126. 화합물이 I-17 또는 이의 염인, 화합물.
127. 화합물이 I-24 또는 이의 염인, 화합물.
128. 화합물이 I-25 또는 이의 염인, 화합물.
129. 화합물이 I-35 또는 이의 염인, 화합물.
130. 화합물이 I-36 또는 이의 염인, 화합물.
131. 화합물이 I-37 또는 이의 염인, 화합물.
132. 화합물이 I-38 또는 이의 염인, 화합물.
133. 화합물이 I-39 또는 이의 염인, 화합물.
134. 화합물이 I-40 또는 이의 염인, 화합물.
135. 화합물이 I-40 또는 이의 염인, 화합물.
136. 화합물이 I-44 또는 이의 염인, 화합물.
137. 화합물이 I-49 또는 이의 염인, 화합물.
138. 표 1b로부터 선택된 화합물 또는 이의 염.
139. 표 1c로부터 선택된 화합물 또는 이의 염.
140. 화합물로서,
표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 제1 기,
반응기;
관심 모이어티; 및
선택적으로 하나 이상의 링커 모이어티
를 포함하되,
반응기는 제1 기와 관심 모이어티 사이에 위치되고, 제1 기 및 관심 모이어티에 독립적으로, 그리고 선택적으로 링커 모이어티를 통해 연결된, 화합물.
141. 실시형태 140에 있어서, 반응기는 제1 기와 관심 모이어티 사이에 위치되고, 제1 기 및 관심 모이어티에 독립적으로, 그리고 선택적으로 링커 모이어티를 통해 연결되는, 화합물.
142. 실시형태 140 내지 141 중 어느 하나에 있어서, 제1 기는 실시형태 1 내지 139 중 어느 하나에서 LG인, 화합물.
143. 실시형태 140 내지 142 중 어느 하나에 있어서, 반응기는 실시형태 1 내지 139 중 어느 하나에서 RG인, 화합물.
144. 실시형태 140 내지 143 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 실시형태 1 내지 139 중 어느 하나에서 관심 모이어티인, 화합물.
145. 실시형태 140 내지 144 중 어느 하나에 있어서, 화합물은 실시형태 1 내지 139 중 어느 하나의 화합물인, 화합물.
146. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 화합물은 2개 이상의 표적 결합 모이어티를 포함하는, 화합물.
147. 하기 단계들을 포함하는 방법으로서,
1) 표적 제제를,
표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 제1 기,
반응기;
관심 모이어티; 및
선택적으로 하나 이상의 링커 모이어티
를 포함하는 반응 상대와 접촉시키는 단계;
2) 표적 제제 모이어티;
관심 모이어티; 및
선택적으로 하나 이상의 링커 모이어티
를 포함하는 제제를 형성하는 단계
를 포함하는, 방법.
148. 실시형태 147에 있어서, 반응기는 제1 기와 관심 모이어티 사이에 위치되고, 제1 기 및 관심 모이어티에 독립적으로, 그리고 선택적으로 링커 모이어티를 통해 연결되는, 방법.
149. 하기 P-I의 구조식 또는 이의 염을 갖는 제제의 제조 방법으로서,
Figure pct00530
(식 중:
P는 표적 제제 모이어티이고;
LPM은 링커이고; 그리고
MOI는 관심 모이어티임)
1) 표적 제제를 하기 식 R-I의 구조식 또는 이의 염을 갖는 반응 상대와 접촉시키는 단계:
Figure pct00531
식 중:
LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기이고,
RG는 반응기이며;
LRM은 링커이고; 그리고
MOI는 관심 모이어티이며; 그리고
2) 식 P-I의 구조식을 갖는 제제를 형성하는 단계
를 포함하는, 방법.
150. 하기 P-II의 구조식을 갖는 제제의 제조 방법으로서,
Figure pct00532
(식 중,
P-N은 라이신 잔기를 포함하는 단백질 제제 모이어티이고;
LPM은 링커이고; 그리고
MOI는 관심 모이어티임);
상기 방법은
P-N을 하기 식 R-I의 구조식 또는 이의 염을 갖는 반응 상대와 접촉시키는 단계를 포함하는, 제제의 제조 방법:
Figure pct00533
(식 중:
LG는 P-N에 결합하는 단백질-결합 모이어티를 포함하는 기이고,
RG는 반응기이며;
LRM은 링커이고; 그리고
MOI는 관심 모이어티임).
151. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제는 단백질 제제이거나 이를 포함하는, 방법.
152. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제는 항체 제제이거나 이를 포함하는, 방법.
153. 실시형태 152에 있어서, 관심 모이어티는 K246 또는 K248 또는 대응하는 위치에서 항체 제제에 선택적으로 부착되는, 방법.
154. 실시형태 152에 있어서, 관심 모이어티는 K288 또는 K290 또는 대응하는 위치에서 항체 제제에 선택적으로 부착되는, 방법.
155. 실시형태 152에 있어서, 관심 모이어티는 IgG2 중쇄의 K251 또는 K253 또는 대응하는 위치에서 항체 제제에 선택적으로 부착되는, 방법.
156. 실시형태 152에 있어서, 관심 모이어티는 IgG4 중쇄의 K239 또는 K241 또는 대응하는 위치에서 항체 제제에 선택적으로 부착되는, 방법.
157. 실시형태 152에 있어서, 관심 모이어티는 K317 또는 대응하는 위치에서 항체 제제에 선택적으로 부착되는, 방법.
158. 실시형태 152에서, 관심 모이어티는 경쇄 잔기(들)보다 중쇄 잔기(들)에서 항체 제제에 선택적으로 부착되는, 방법.
159. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제는 IgG 항체 제제이거나 이를 포함하는, 방법.
160. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제는 Fc 영역이거나 이를 포함하는, 방법.
161. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 반응 상대는 실시형태 1 내지 146 중 어느 하나의 화합물인, 방법.
162. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 접촉시키는 단계 및 형성하는 단계는 원 포트(one pot)로 수행되는, 방법.
163. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 접촉시키는 단계 및 형성하는 단계는 하나의 화학 반응으로 수행되는, 방법.
164. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 표적 제제 모이어티를 포함하는 제제에서 작용기의 절단에 주로 관련된 반응을 포함하지 않는, 방법.
165. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 LRM 또는 LPM에서 작용기의 절단에 주로 관련된 반응을 포함하지 않는, 방법.
166. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 표적 제제 모이어티를 포함하는 제제에서 작용기의 환원에 주로 관련된 반응을 포함하지 않는, 방법.
167. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 LRM 또는 LPM에서 작용기의 환원에 주로 관련된 반응을 포함하지 않는, 방법.
168. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 표적 제제 모이어티를 포함하는 제제에서 작용기의 산화에 주로 관련된 반응을 포함하지 않는, 방법.
169. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 LRM 또는 LPM에서 작용기의 산화에 주로 관련된 반응을 포함하지 않는, 방법.
170. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 표적 제제 모이어티를 포함하는 제제에서 작용기의 가수분해에 주로 관련된 반응을 포함하지 않는, 방법.
171. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 LRM 또는 LPM에서 작용기의 가수분해에 주로 관련된 반응을 포함하지 않는, 방법.
172. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 상기 방법은 LRM 또는 LPM에서 에스터의 가수분해에 주로 관련된 반응을 포함하지 않는, 방법.
173. 실시형태 164 내지 172 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제 모이어티는 단백질 제제 모이어티인, 방법.
174. 실시형태 164 내지 172 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제 모이어티는 항체 제제 모이어티인, 방법.
175. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 상기 접촉시키는 단계는 표적 제제의 라이신 잔기가 반응 상대의 반응기와 반응하기에 충분한 조건 및 시간 동안 수행되는, 방법.
176. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 상기 접촉시키는 단계는 표적 제제의 라이신 잔기가 RG의 원자와 반응하고 결합을 형성하고 LG를 방출하는 데 충분한 조건 및 시간 동안 수행되는, 방법.
177. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 상기 제제 및 반응 상대는 동일한 관심 모이어티를 공유하는, 방법.
178. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 항체 제제이거나 이를 포함하는, 방법.
179. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는, 방법.
180. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 아자이드이거나 이를 포함하는, 방법.
181. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 알킨이거나 이를 포함하는, 방법.
182. 실시형태 147 내지 181 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 알킨이거나 이를 포함하는, 방법.
183. 실시형태 182에 있어서, 관심 모이어티는
Figure pct00534
또는
Figure pct00535
이거나 이를 포함하는, 방법.
184. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 제1 관심 모이어티에서 제1 반응성 모이어티를 포함하는 제1 제제를 제2 반응성 모이어티를 포함하는 제2 제제와 반응시키는 단계를 포함하는, 방법.
185. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 제2 제제는 제2 반응성 모이어티 및 펩타이드 모이어티를 포함하는, 방법.
186. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 제2 제제는 제2 반응성 모이어티 및 단백질 모이어티를 포함하는, 방법.
187. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 제2 제제는 제2 반응성 모이어티 및 항체 제제 모이어티를 포함하는, 방법.
188. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 제1 관심 모이어티에서 제1 반응성 모이어티를 포함하는 제1 제제를 제2 관심 모이어티에서 제2 반응성 모이어티를 포함하는 제2 제제와 반응시키는 단계를 포함하는, 방법.
189. 실시형태 184 내지 188 중 어느 하나에 있어서, 제1 제제는 실시형태 147 내지 183 중 어느 하나의 방법의 생성물인, 방법.
190. 실시형태 184 내지 188 중 어느 하나에 있어서, 제2 제제는 실시형태 147 내지 183 중 어느 하나의 방법의 생성물인, 방법.
191. 실시형태 184 내지 188 중 어느 하나에 있어서, 제1 제제 및 제2 제제 각각은 독립적으로 실시형태 147 내지 183 중 어느 하나의 방법의 생성물인, 방법.
192. 제1 관심 모이어티에서 제1 반응성 모이어티를 포함하는 제1 제제를 제2 관심 모이어티에서 제2 반응성 모이어티를 포함하는 제2 제제와 반응시키는 단계를 포함하되, 제1 제제는 실시형태 147 내지 183 중 어느 하나의 방법에 의해 제조되는, 방법.
193. 제1 관심 모이어티에서 제1 반응성 모이어티를 포함하는 제1 제제를 제2 관심 모이어티에서 제2 반응성 모이어티를 포함하는 제2 제제와 반응시키는 단계를 포함하되, 제2 제제는 실시형태 147 내지 183 중 어느 하나의 방법에 의해 제조되는, 방법.
194. 제1 관심 모이어티에서 제1 반응성 모이어티를 포함하는 제1 제제를 제2 관심 모이어티에서 제2 반응성 모이어티를 포함하는 제2 제제와 반응시키는 단계를 포함하되, 제1 제제 및 제2 제제 각각은 독립적으로 실시형태 147 내지 183 중 어느 하나의 방법에 의해 제조되는, 방법.
195. 실시형태 184 내지 194 중 어느 하나에 있어서, 제1 제제 및 제2 제제 각각은 독립적으로 식 P-I 또는 P-II의 구조식, 또는 이의 염을 갖는, 방법.
196. 실시형태 184 내지 195 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 제제의 상기 표적 제제 모이어티는 항체 제제 모이어티인, 방법.
197. 실시형태 184 내지 196 중 어느 하나에 있어서, 상기 제2 제제의 상기 표적 제제 모이어티는 항체 제제 모이어티인, 방법.
198. 실시형태 196 내지 197 중 어느 하나에 있어서, 제1 표적 모이어티 및 제2 표적 모이어티는 독립적으로 상이한 항원으로 향하는 항체 제제 모이어티인, 방법.
199. 실시형태 196 내지 197 중 어느 하나에 있어서, 제1 표적 모이어티 및 제2 표적 모이어티는 독립적으로 상이한 단백질로 향하는 항체 제제 모이어티인, 방법.
200. 실시형태 184 내지 199 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 제제는 항-CD20 제제 모이어티를 포함하는, 방법.
201. 실시형태 184 내지 199 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 제제는 리툭시맙을 포함하는, 방법.
202. 실시형태 184 내지 199 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 제제는 트라스투주맙을 포함하는, 방법.
203. 실시형태 184 내지 202 중 어느 하나에 있어서, 상기 제2 제제는 항-CD3 제제 모이어티를 포함하는, 방법.
204. 실시형태 184 내지 202 중 어느 하나에 있어서, 상기 제2 제제는 scFv를 포함하는, 방법.
205. 실시형태 184 내지 202 중 어느 하나에 있어서, 상기 제2 제제는 서열이 서열번호 1 또는 이의 단편인 펩타이드를 포함하는, 방법.
206. 실시형태 184 내지 202 중 어느 하나에 있어서, 상기 제2 제제는 세툭시맙을 포함하는, 방법.
207. 실시형태 184 내지 206 중 어느 하나에 있어서, 제1 반응성 모이어티 및 제2 모이어티 중 하나는 (G)n(n은 1 내지 10임)이거나 이를 포함하고, 다른 하나는 LPXTG이거나 이를 포함하고, X는 아미노산 잔기인, 방법.
208. 실시형태 184 내지 206 중 어느 하나에 있어서, 제1 반응성 모이어티는 (G)n(n은 1 내지 10임)이거나 이를 포함하고, 제2 반응성 모이어티는 LPXTG이거나 이를 포함하고, X는 아미노산 잔기인, 방법.
209. 실시형태 184 내지 206 중 어느 하나에 있어서, 제2 반응성 모이어티는 (G)n(n은 1 내지 10임)이거나 이를 포함하고, 제1 반응성 모이어티는 LPXTG이거나 이를 포함하고, X는 아미노산 잔기인, 방법.
210. 실시형태 207 내지 209 중 어느 하나에 있어서, n은 2인, 방법.
211. 실시형태 207 내지 209 중 어느 하나에 있어서, n은 3인, 방법.
212. 실시형태 207 내지 209 중 어느 하나에 있어서, n은 4인, 방법.
213. 실시형태 207 내지 209 중 어느 하나에 있어서, n은 5인, 방법.
214. 실시형태 207 내지 213 중 어느 하나에 있어서, LPXTG이거나 이를 포함하는 반응성 모이어티는 LPXTG-(X)n이거나 이를 포함하되, 각각의 X는 독립적으로 아미노산 잔기이고, n은 1 내지 10인, 방법.
215. 실시형태 214에 있어서, (X)n의 n은 1인, 방법.
216. 실시형태 214에 있어서, (X)n의 n은 2인, 방법.
217. 실시형태 214에 있어서, (X)n의 n은 3인, 방법.
218. 실시형태 214에 있어서, (X)n의 n은 4인, 방법.
219. 실시형태 214에 있어서, (X)n의 n은 5인, 방법.
220. 실시형태 207 내지 219 중 어느 하나에 있어서, LPXTG는 LPETG인, 방법.
221. 실시형태 184 내지 206 중 어느 하나에 있어서, 제1 반응성 및 제2 모이어티 중 하나는 -N3이거나 이를 포함하고, 다른 하나는 알킨이거나 이를 포함하는, 방법.
222. 실시형태 184 내지 206 중 어느 하나에 있어서, 제1 반응성 및 제2 모이어티 중 하나는 -N3이거나 이를 포함하고, 다른 하나는
Figure pct00536
또는
Figure pct00537
이거나 이를 포함하는, 방법.
223. 실시형태 184 내지 222 중 어느 하나에 있어서, 제1 제제 및 제2 제제의 반응에 의해 형성된 생성물은 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염의 제제이되, 표적 제제 모이어티는 제1 제제 또는 제2 제제의 표적 제제 모이어티이거나 이로부터 유래되는 한편, 관심 모이어티는 제1 제제 또는 제2 제제 중 다른 하나의 표적 제제 모이어티로부터 유래된, 방법.
224. 실시형태 147 내지 223 중 어느 하나의 방법에 의해 제조된 생성물.
225. 실시형태 224에 있어서, 생성물은 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염의 제제이거나 이를 포함하는, 생성물.
226. 실시형태 224에 있어서, 상기 생성물은 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염의 제제를 포함하는 조성물인, 생성물.
227. 실시형태 225 내지 226 중 어느 하나에 있어서, 상기 제제는 -S-Cy-를 포함하지 않되, -Cy-는 선택적으로 치환된 5-원 단환식 고리이고, 시스테인 잔기에 의해 형성되지 않는 -S-S-를 포함하지 않으며, 시스테인 잔기의 것이 아닌 -SH 또는 이의 염 형태를 포함하지 않는, 생성물.
228. 실시형태 224 내지 226 중 어느 하나에 있어서, 상기 생성물은 약제학적 조성물인, 생성물.
229. 복수의 제제를 제공하는 조성물로서,
표적 제제 모이어티,
관심 모이어티, 및
선택적으로 표적 제제 모이어티와 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티
를 각각 독립적으로 포함하되;
복수의 제제는 동일한 또는 실질적으로 동일한 표적 제제 모이어티 및 적어도 하나의 공통 위치에서 독립적으로 공통 변형을 공유하고; 그리고
표적 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제인, 조성물.
230. 복수의 제제를 제공하는 조성물로서,
단백질 제제 모이어티,
관심 모이어티, 및
선택적으로 단백질 제제 모이어티와 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티
를 각각 독립적으로 포함하되;
복수의 제제의 단백질 제제 모이어티는 공통 아미노산 서열을 포함하고, 복수의 제제는 단백질 제제 모이어티의 적어도 하나의 공통 아미노산 잔기에서 독립적으로 공통 변형을 공유하며; 그리고
공통 아미노산 서열을 포함하는 단백질 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제인, 조성물.
231. 복수의 제제를 제공하는 조성물로서,
항체 제제 모이어티,
관심 모이어티, 및
선택적으로 항체 제제 모이어티와 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티
를 각각 독립적으로 포함하되;
복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 아미노산 서열을 포함하거나 공통 항원에 결합할 수 있고, 복수의 제제는 단백질 제제 모이어티의 적어도 하나의 공통 아미노산 잔기에서 독립적으로 공통 변형을 공유하며; 그리고
공통 아미노산 서열을 포함하거나 공통 항원에 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제인, 조성물.
232. 실시형태 231에 있어서, 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 항원에 결합할 수 있는, 조성물.
233. 실시형태 231에 있어서, 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 2개 이상의 상이한 항원에 결합할 수 있는, 조성물.
234. 실시형태 231 내지 233 중 어느 하나에 있어서, 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 아미노산 서열을 포함하는, 조성물.
235. 실시형태 231 내지 233 중 어느 하나에 있어서, 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 Fc 영역에서 공통 아미노산 서열을 포함하는, 조성물.
236. 실시형태 231 내지 233 중 어느 하나에 있어서, 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 Fc 영역을 포함하는, 조성물.
237. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 표적, 단백질 또는 항체 제제 모이어티는 항-CD20 제제 모이어티이거나 이를 포함하는, 조성물.
238. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 표적, 단백질 또는 항체 제제 모이어티는 항-CD20 제제 모이어티이거나 이를 포함하는, 조성물.
239. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 표적, 단백질 또는 항체 제제 모이어티는 리툭시맙이거나 이를 포함하는, 조성물.
240. 실시형태 229 내지 234 중 어느 하나에 있어서, 표적, 단백질 또는 항체 제제 모이어티는 트라스투주맙이거나 이를 포함하는, 조성물.
241. 실시형태 233 내지 236 중 어느 하나에 있어서, 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 IVIG 모이어티인, 조성물.
242. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 복수의 제제는 공통 관심 모이어티를 포함하는, 조성물.
243. 실시형태 229 내지 242 중 어느 하나에 있어서, 각각의 복수의 제제는 독립적으로 식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염의 제제인, 조성물.
244. 실시형태 229 내지 243 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 검출 가능한 모이어티이거나 이를 포함하는, 조성물.
245. 실시형태 229 내지 243 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는, 조성물.
246. 실시형태 229 내지 243 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 표적 제제 모이어티, 단백질 제제 모이어티 또는 항체 모이어티 제제와 반응하지 않는 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는, 조성물.
247. 실시형태 229 내지 243 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 항체 모이어티 제제와 반응하지 않는 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는, 조성물.
248. 실시형태 245에 있어서, 반응성 모이어티는 -N3인, 조성물.
249. 실시형태 245에 있어서, 반응성 모이어티는 -≡-인, 조성물.
250. 실시형태 245에 있어서, 반응성 모이어티는
Figure pct00538
또는
Figure pct00539
인, 조성물.
251. 실시형태 229 내지 243 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 치료제 모이어티이거나 이를 포함하는, 조성물.
252. 실시형태 229 내지 243 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 약물 모이어티이거나 이를 포함하는, 조성물.
253. 실시형태 229 내지 243 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 세포독성 모이어티이거나 이를 포함하는, 조성물.
254. 실시형태 229 내지 243 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 펩타이드 모이어티이거나 이를 포함하는, 조성물.
255. 실시형태 229 내지 243 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 단백질 모이어티이거나 이를 포함하는, 조성물.
256. 실시형태 229 내지 243 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 항체 제제이거나 이를 포함하는, 조성물.
257. 실시형태 229 내지 243 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 scFv 제제이거나 이를 포함하는, 조성물.
258. 실시형태 229 내지 243 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 항-CD3 제제이거나 이를 포함하는, 조성물.
259. 실시형태 229 내지 243 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 서열이 서열번호 1 또는 이의 단편인 펩타이드이거나 이를 포함하는, 조성물.
260. 실시형태 229 내지 243 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 세툭시맙이거나 이를 포함하는, 조성물.
261. 실시형태 229 내지 260 중 어느 하나에 있어서, 상기 링커는 천연 아미노산 펩타이드 링커가 아닌, 조성물.
262. 실시형태 229 내지 261 중 어느 하나에 있어서, 상기 링커는 LPXT(G)n이거나 이를 포함하되, n은 1 내지 10인, 조성물.
263. 실시형태 229 내지 261 중 어느 하나에 있어서, 상기 링커는 LPET(G)n이거나 이를 포함하되, n은 1 내지 10인, 조성물.
264. 실시형태 262 또는 263에 있어서, n은 1인, 조성물.
265. 실시형태 262 또는 263에 있어서, n은 2인, 조성물.
266. 270실시형태 262 또는 263에 있어서, n은 3인, 조성물.
267. 실시형태 262 또는 263에 있어서, n은 4인, 조성물.
268. 실시형태 262 또는 263에 있어서, n은 5인, 조성물.
269. 실시형태 229 내지 268 중 어느 하나에 있어서, 링커는 하나 이상의 -CH2-CH2-O-를 포함하는, 조성물.
270. 실시형태 229 내지 269 중 어느 하나에 있어서, 링커는 트라이아졸 고리를 포함하는, 조성물.
271. 실시형태 230 내지 270 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 서열은 약 1 내지 500개 이상의 아미노산 잔기를 포함하는, 조성물.
272. 실시형태 230 내지 270 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 서열은 약 10개 이상의 아미노산 잔기를 포함하는, 조성물.
273. 실시형태 230 내지 270 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 서열은 약 20개 이상의 아미노산 잔기를 포함하는, 조성물.
274. 실시형태 230 내지 270 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 서열은 약 50개 이상의 아미노산 잔기를 포함하는, 조성물.
275. 실시형태 230 내지 274 중 어느 하나에 있어서, 상기 공통 아미노산 서열은 IgG1 중쇄의 K246 및 K248로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 잔기 및 이에 대응하는 아미노산 잔기, IgG2 중쇄의 K251 및 K253 및 이에 대응하는 아미노산 잔기, 및 IgG4 중쇄의 K239 및 K241 및 이에 대응하는 아미노산 잔기를 포함하는, 조성물.
276. 실시형태 230 내지 275 중 어느 하나에 있어서, 상기 공통 아미노산 서열은 단백질 또는 항체 제제 모이어티의 적어도 10% 내지 100%인, 조성물.
277. 실시형태 230 내지 275 중 어느 하나에 있어서, 상기 공통 아미노산 서열은 단백질 또는 항체 제제 모이어티의 적어도 50% 내지 100%인, 조성물.
278. 실시형태 230 내지 275 중 어느 하나에 있어서, 복수의 제제의 단백질 제제 모이어티 또는 항체 제제 모이어티는 적어도 50% 아미노산 서열 상동성을 갖는, 조성물.
279. 실시형태 230 내지 275 중 어느 하나에 있어서, 복수의 제제의 단백질 제제 모이어티 또는 항체 제제 모이어티는 적어도 80% 아미노산 서열 상동성을 갖는, 조성물.
280. 실시형태 230 내지 275 중 어느 하나에 있어서, 복수의 제제의 단백질 제제 모이어티 또는 항체 제제 모이어티는 적어도 90% 아미노산 서열 상동성을 갖는, 조성물.
281. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 공통 변형은 관심 모이어티 및 선택적으로 링커이거나 이를 포함하는, 조성물.
282. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 모든 공통 변형은 공통 관심 모이어티 및 선택적으로 공통 링커를 포함하는, 조성물.
283. 실시형태 230 내지 282 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 중쇄의 K246 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
284. 실시형태 230 내지 283 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 중쇄의 K248 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
285. 실시형태 230 내지 284 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 중쇄의 K288 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
286. 실시형태 230 내지 285 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 중쇄의 K290 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
287. 실시형태 230 내지 286 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 중쇄의 K317 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
288. 실시형태 230 내지 287 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 중쇄의 K133 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
289. 실시형태 230 내지 288 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 중쇄의 K144 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
290. 실시형태 230 내지 289 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 중쇄의 K133 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
291. 실시형태 230 내지 290 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 경쇄의 K185 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
292. 실시형태 230 내지 291 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 경쇄의 K187 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
293. 실시형태 230 내지 292 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 IgG2 항체 중쇄의 K251 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
294. 실시형태 230 내지 293 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 IgG2 항체 중쇄의 K253 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
295. 실시형태 230 내지 294 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 IgG4 항체 중쇄의 K239 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
296. 실시형태 230 내지 295 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 IgG4 항체 중쇄의 K241 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
297. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 적어도 약 2%는 복수의 제제이거나, 공통 아미노산 서열을 포함하는 단백질 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 적어도 약 2%는 복수의 제제이거나, 공통 아미노산 서열을 포함하거나 공통 항원에 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 적어도 약 2%는 복수의 제제인, 조성물.
298. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이거나, 또는 공통 아미노산 서열을 포함하는 단백질 제제 모이어티를 포함하는 모든 제제의 적어도 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이거나, 또는 공통 아미노산 서열을 포함하거나 공통 항원에 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제인, 조성물.
299. 실시형태 297 내지 298 중 어느 하나에 있어서, 백분율은 적어도 약 5%인, 조성물.
300. 실시형태 297 내지 298 중 어느 하나에 있어서, 백분율은 적어도 약 10%인, 조성물.
301. 실시형태 297 내지 298 중 어느 하나에 있어서, 백분율은 적어도 약 20%인, 조성물.
302. 실시형태 297 내지 298 중 어느 하나에 있어서, 백분율은 적어도 약 25%인, 조성물.
303. 실시형태 297 내지 298 중 어느 하나에 있어서, 백분율은 적어도 약 50%인, 조성물.
304. 실시형태 297 내지 298 중 어느 하나에 있어서, 백분율은 적어도 약 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% 또는 95%인, 조성물.
305. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 복수의 제제 각각은 -S-Cy-를 포함하지 않되, -Cy-는 선택적으로 치환된 5-원 단환식 고리이고, 시스테인 잔기에 의해 형성되지 않는 -S-S-를 포함하지 않으며, 시스테인 잔기의 것이 아닌 -SH 또는 이의 염 형태를 포함하지 않는, 조성물.
306. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 복수의 제제 각각은 -S-CH2-CH2-를 포함하지 않는, 조성물.
307. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 복수의 제제 각각은 항체 제제에 특이적으로 결합할 수 있는 모이어티를 포함하지 않는, 조성물.
308. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 복수의 제제 각각은 독립적으로 항체 제제 모이어티를 포함하고, 각각의 제제는 Fc 수용체에 독립적으로 결합할 수 있는, 조성물.
309. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 조성물은 선행하는 실시형태 중 어느 하나의 방법의 생성물인, 조성물.
310. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 조성물은 약제학적 조성물인, 조성물.
311. 제제는 실시형태 229 내지 309 중 어느 하나의 복수의 제제인, 제제.
312. 실시형태 311의 제제 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는, 약제학적 조성물.
313. 실시형태 310 또는 312에 있어서, 상기 조성물은 고체 형태인, 조성물.
314. 실시형태 310 또는 312에 있어서, 상기 조성물은 액체 형태이고, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45% 또는 50%(v/v) 이하의 유기 용매를 함유하는, 조성물.
315. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제 모이어티에 접합된 관심 모이어티와 표적 제제 모이어티의 비, 또는 단백질 제제 모이어티에 접합된 관심 모이어티와 단백질 제제 모이어티의 비, 또는 항체 제제 모이어티에 접합된 관심 모이어티와 항체 제제 모이어티의 비는 약 0.5 내지 6인, 방법, 생성물, 조성물 또는 제제.
316. 실시형태 315에 있어서, 상기 비는 약 0.5 내지 2.5인, 방법, 생성물, 조성물 또는 제제.
317. 실시형태 315에 있어서, 상기 비는 약 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1.0, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2.0, 2.5 또는 3인, 방법, 생성물, 조성물 또는 제제.
318. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 있어서, 각각의 헤테로원자는 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택되는, 화합물, 방법, 생성물, 조성물 또는 제제.
319. 화합물은
Figure pct00540
또는 이의 염인, 화합물.
320. 화합물은
Figure pct00541
또는 이의 염인, 화합물.
321. 화합물은
Figure pct00542
또는 이의 염인, 화합물.
322. 화합물은
Figure pct00543
또는 이의 염인, 화합물.
323. 화합물은
Figure pct00544
또는 이의 염인, 화합물.
324. 화합물은
Figure pct00545
또는 이의 염인, 화합물.
325. 화합물은
Figure pct00546
또는 이의 염인, 화합물.
326. 화합물은
Figure pct00547
또는 이의 염인, 화합물.
327. 화합물은
Figure pct00548
또는 이의 염인, 화합물.
328. 화합물은
Figure pct00549
또는 이의 염인, 화합물.
329. 화합물은
Figure pct00550
또는 이의 염인, 화합물.
330. 실시형태 319 내지 329 중 어느 하나의 화합물의 에스터.
331. 실시형태 319 내지 329 중 어느 하나의 화합물의 아미노산 잔기를 포함하는 제제.
332. 실시형태 331에 있어서, 상기 제제는 식 R-I의 구조식 또는 이의 염을 갖는, 제제.
333. 실시형태 319 내지 329 중 어느 하나의 화합물의 아미노산 잔기를 포함하는 폴리펩타이드 제제.
334. 실시형태 319 내지 329 중 어느 하나의 화합물을 제공하는 단계를 포함하는, 화합물의 제조 방법.
335. 실시형태 334에 있어서, 화합물은 실시형태 331 내지 333 중 어느 하나의 제제인, 방법.
실시예
이하의 실시예에 설명하는 바와 같이, 특정 예시적 실시형태에서, 화합물, 제제, 조성물 등을 예로서 다음의 절차에 따라 제조 및/또는 평가한다. 일반적 방법은 본 개시내용의 특정 화합물, 제제, 조성물의 합성을 설명하지만, 다음의 일반적 방법 및 당업자에게 공지된 기타 방법은 본 개시내용의 기술을 제공하기 위해 본 개시내용에 따라 적용될 수 있다는 것을 인식할 것이다.
실시예 1. 화합물 I-1의 예시적 합성.
Figure pct00551
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00552
BH3.THF(1M, 1.29㎖, 4 eq)를 무수 THF(5㎖) 중 화합물 1(50㎎, 322.37μ㏖, 1 eq) 용액에 조심해서 첨가하였다. 얻어진 용액을 교반하고, 환류로 10시간 동안 가열하였다(70℃). TLC(플레이트 1, 석유 에터:에틸 아세테이트=1:1, Rf= 0.01)는 화합물 1이 완전히 소모되었고, 하나의 새로운 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 냉각시킨 후에, 6N HCl(2㎖)을 조심해서 용액에 첨가하고, 30분 동안 환류에서 가열을 계속하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 2(40㎎, 조질, HCl)를 HNMR에 의해 확인한 백색 고체로서 얻었다. 1 H NMR (400 MHz, 메탄올-d4) δ ppm 7.17 - 6.97 (m, 2H), 4.12 - 3.96 (m, 2H), 3.73 (s, 1H), 3.63 - 3.51 (m, 1H), 1.93 - 1.78 (m, 1H), 1.59 (br t, J = 2.7 Hz, 1H), 1.40 (s, 1H).
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00553
DMF(3㎖) 중 화합물 3(500㎎, 968.15μ㏖, 1 eq, TFA)에 0℃에서 0.5시간 동안 HATU(368.12㎎, 968.15μ㏖, 1 eq) 및 DIEA(500.51㎎, 3.87m㏖, 674.54㎕, 4 eq)를 첨가하였다. 혼합물에 DMF(2㎖) 중 화합물 2(378.73㎎, 968.15μ㏖, 1 eq, HCl)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 3이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 직접 정제하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Phenomenex luna C18 250*50㎜*10㎛; 이동상: [물(0.1% TFA)-ACN]; B%: 20% 내지 50%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 4(460㎎, 846.30μ㏖, 87.41% 수율)를 HNMR에 의해 확인된 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.794분, MS 계산치: 543.14, [M+H] + = 544.2. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 10.14 - 10.08 (m, 1H), 8.37 - 8.32 (m, 1H), 8.25 - 8.20 (m, 1H), 8.02 - 7.98 (m, 1H), 7.90 - 7.84 (m, 1H), 7.46 - 7.41 (m, 1H), 7.13 - 7.06 (m, 1H), 6.93 - 6.88 (m, 1H), 4.19 - 4.15 (m, 2H), 3.88 - 3.85 (m, 3H), 3.32 - 3.20 (m, 2H), 2.26 - 2.19 (m, 2H), 1.82 - 1.73 (m, 2H).
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00554
용액 1: DCM(3㎖) 중 아지도-PEG6-산(300㎎, 790.71μ㏖, 1 eq)의 용액에 0℃에서 5분 동안 SOCl2(282.21㎎, 2.37m㏖, 172.08㎕, 3 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 농축 건조시켰다. 조질의 생성물을 DCM(1㎖)으로 용해시켰다. 용액 2: DCM(3㎖) 중 화합물 4(429.78㎎, 790.71μ㏖, 1 eq)의 용액에 0℃에서 DIEA(306.58㎎, 2.37m㏖, 413.18㎕, 3 eq)를 첨가하였다. 용액 1에 용액 2를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 직접 정제하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Phenomenex luna C18 250*50㎜*10㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 30% 내지 60%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 5(570㎎, 591.52μ㏖, 74.81% 수율, 93.91% 순도)는 LCMS 및 HNMR에 의해 확인된 핑크색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 2.367분, MS 계산치:904.32, [M/2+H] + = 453.3. LCMS: RT = 2.356분, MS 계산치:904.32, [M/2+H] + = 453.4. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 10.14 - 10.06 (m, 1H), 8.48 - 8.40 (m, 1H), 8.36 - 8.32 (m, 1H), 8.26 - 8.17 (m, 1H), 8.03 - 7.94 (m, 1H), 7.94 - 7.81 (m, 1H), 7.48 - 7.38 (m, 1H), 7.21 - 7.01 (m, 3H), 4.33 - 4.25 (m, 2H), 3.89 - 3.83 (m, 3H), 3.80 - 3.71 (m, 3H), 3.67 - 3.52 (m, 27H), 3.52 - 3.45 (m, 16H), 3.41 - 3.36 (m, 2H), 3.33 - 3.24 (m, 3H), 2.99 - 2.88 (m, 3H), 2.29 - 2.22 (m, 2H), 1.86 - 1.72 (m, 2H), 1.29 - 1.20 (m, 1H).
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00555
THF(10㎖) 중 화합물 5(500㎎, 552.53μ㏖, 1 eq)의 용액에 Pd/C(500㎎, 552.53μ㏖, 10% 순도, 1 eq) 및 HCl(1M, 2.00㎖, 3.62 eq)을 N 2 하에 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H 2 (15 psi) 하에 25℃에서 10분 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 여과시키고, 여과액에 NaHCO3을 pH 5 내지 6까지 첨가하였다. 여과액을 동결건조시켜 고체를 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Nano-micro Kromasil C18 100*40㎜ 10㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 15% 내지 50%, 7분)에 의해 정제하였다. 화합물 6(240㎎, 273.06μ㏖, 49.42% 수율)을 HNMR에 의해 확인된 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.865분, MS 계산치: 878.33, [1/2M+H] + = 440.3. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 10.13 - 10.08 (m, 1H), 8.48 - 8.42 (m, 1H), 8.36 - 8.30 (m, 1H), 8.25 - 8.17 (m, 2H), 8.02 - 7.96 (m, 1H), 7.90 - 7.84 (m, 1H), 7.75 - 7.65 (m, 2H), 7.45 - 7.41 (m, 1H), 7.20 - 7.02 (m, 3H), 4.32 - 4.26 (m, 2H), 3.89 - 3.83 (m, 3H), 3.79 - 3.73 (m, 2H), 3.63 - 3.55 (m, 10H), 3.54 - 3.49 (m, 31H), 3.35 - 3.25 (m, 3H), 3.02 - 2.90 (m, 4H), 2.30 - 2.22 (m, 2H), 1.85 - 1.69 (m, 2H).
화합물 I-1의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00556
DMF(1㎖) 중 화합물 6(90㎎, 102.40μ㏖, 1 eq)의 용액에 화합물 6A(39.87㎎, 102.40μ㏖, 1 eq)를 첨가하였다. 혼합물에 TEA(22.80㎎, 225.27μ㏖, 31.36㎕, 2.2 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 10분 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 직접 정제하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Phenomenex Luna C18 100*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 40%-60%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 I-1(15.21㎎, 11.75μ㏖, 11.48% 수율, 98% 순도)을 HNMR, HPLC 및 QC-LCMS에 의해 확인된 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.429분, MS 계산치: 1267.37, [1/2M+H] + = 635.1. QCLCMS: RT = 3.092분, MS 계산치: 1267.37, [1/2M+H] + = 634.8. HPLC: Rt = 3.009. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 10.14 - 10.10 (m, 1H), 10.08 - 10.02 (m, 1H), 8.49 - 8.40 (m, 1H), 8.36 - 8.33 (m, 1H), 8.31 - 8.26 (m, 1H), 8.25 - 8.17 (m, 2H), 8.14 - 8.05 (m, 1H), 8.02 - 7.97 (m, 1H), 7.90 - 7.82 (m, 1H), 7.79 - 7.69 (m, 1H), 7.45 - 7.41 (m, 1H), 7.21 - 7.07 (m, 4H), 6.70 - 6.65 (m, 2H), 6.63 - 6.54 (m, 4H), 4.33 - 4.24 (m, 2H), 3.89 - 3.83 (m, 3H), 3.77 - 3.72 (m, 2H), 3.72 - 3.65 (m, 2H), 3.65 - 3.59 (m, 2H), 3.58 - 3.55 (m, 4H), 3.55 - 3.47 (m, 16H), 3.33 - 3.22 (m, 2H), 2.98 - 2.88 (m, 2H), 2.31 - 2.21 (m, 2H), 1.89 - 1.70 (m, 2H).
실시예 2. 화합물 I-2의 예시적 합성.
Figure pct00557
Figure pct00558
화합물 3의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00559
DMF(3㎖) 중 화합물 1(500㎎, 893.03μ㏖, 1 eq, 3M HCl)의 용액에 0℃에서 0.5시간 동안 HATU(339.56㎎, 893.03μ㏖, 1 eq) 및 DIEA(577.08㎎, 4.47m㏖, 777.73㎕, 5 eq)를 첨가하였다. 혼합물에 화합물 2(349.34㎎, 893.03μ㏖, 1 eq, HCl)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 1이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 직접 정제하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Nano-micro Kromasil C18 100*40㎜*10㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 26%-56%, 7분)에 의해 정제하였다. 화합물 3(470㎎, 794.42μ㏖, 88.96% 수율)을 HNMR에 의해 확인된 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 2.174분, MS 계산치: 591.63, [M+H] + = 592.4. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 10.09 - 9.95 (m, 1H), 8.96 - 8.62 (m, 1H), 8.44 - 8.25 (m, 1H), 8.20 - 7.87 (m, 1H), 8.25 - 7.86 (m, 1H), 7.46 - 7.32 (m, 1H), 7.25 - 7.02 (m, 3H), 6.97 - 6.82 (m, 2H), 4.65 - 4.41 (m, 2H), 4.21 - 4.13 (m, 2H), 3.70 - 3.61 (m, 2H), 3.58 - 3.49 (m, 5H), 3.48 - 3.36 (m, 4H), 3.33 - 3.18 (m, 2H), 2.42 - 2.33 (m, 2H), 1.59 - 1.41 (m, 1H), 1.40 - 1.15 (m, 2H), 1.41 - 1.13 (m, 3H), 0.94 - 0.85 (m, 2H), 0.96 - 0.75 (m, 3H), 0.96 - 0.75 (m, 3H).
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00560
용액 1: DCM(3㎖) 중 아지도-PEG6-산(280㎎, 738.00μ㏖, 1 eq)의 용액에 SOCl2(263.40㎎, 2.21m㏖, 160.61㎕, 3 eq)를 0℃에서 5분 동안 첨가하였다. 혼합물을 농축 건조시켰다. 조질의 생성물을 DCM(1㎖)으로 용해시켰다. 용액 2: DCM(3㎖) 중 화합물 3(436.62㎎, 738.00μ㏖, 1 eq)의 용액에 0℃에서 DIEA(286.14㎎, 2.21m㏖, 385.64㎕, 3 eq)를 첨가하였다. 화합물 3에 용액 2를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 3이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 직접 정제하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Phenomenex luna C18 250*50㎜*10㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 30% 내지 60%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 4(550㎎, 551.72μ㏖, 74.76% 수율, 95.6% 순도)를 LCMS에 의해 확인된 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.398분, MS 계산치: 952.46, [(M-N2)/2+H] + = 463.3. LCMS: RT = 1.361분, MS 계산치: 952.46, [M+H] + = 935.5.
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00561
THF(10㎖) 중 화합물 4(500㎎, 524.65μ㏖, 1 eq)의 용액에 Pd/C(500㎎, 524.65μ㏖, 10% 순도, 1 eq) 및 HCl(1M, 2㎖, 3.81 eq)을 N 2 하에 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H2(15 psi) 하에 25℃에서 10분 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 여과시키고, 여과액에 NaHCO3을 pH 5 내지 6까지 첨가하였다. 여과액을 동결건조시켜 고체를 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Phenomenex luna C18 250*50㎜*10㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 20% 내지 50%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 5(240㎎, 258.90μ㏖, 49.35% 수율)를 HNMR에 의해 확인된 핑크색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 2.176분, MS 계산치: 926.47, [1/2M+H] + = 464.4. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 8.55 - 8.45 (m, 1H), 7.82 - 7.68 (m, 2H), 7.42 - 7.34 (m, 1H), 7.21 - 7.06 (m, 5H), 4.59 - 4.44 (m, 2H), 4.32 - 4.23 (m, 2H), 3.80 - 3.72 (m, 5H), 3.69 - 3.48 (m, 37H), 3.54 - 3.48 (m, 21H), 3.03 - 2.91 (m, 4H), 1.55 - 1.42 (m, 1H), 1.38 - 1.25 (m, 2H), 1.27 - 1.16 (m, 1H), 1.25 - 1.12 (m, 1H), 0.92 - 0.77 (m, 3H).
화합물 I-2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00562
DMF(1㎖) 중 화합물 5(90㎎, 85.44μ㏖, 1 eq) 및 화합물 5A (33.27㎎, 85.44μ㏖, 1 eq)의 용액에 TEA(19.02㎎, 187.96μ㏖, 26.16㎕, 2.2 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 20분 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 직접 정제하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Phenomenex Luna C18 100*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 20%-50%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 I-2(13.27㎎, 9.96μ㏖, 11.66% 수율, 98.83% 순도)를 HPLC, QC-LCMS 및 HNMR에 의해 확인된 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.676분, MS 계산치: 1315.51, [1/2M+H] + = 659.1. QCLCMS: RT = 3.297분, MS 계산치: 1315.51, [1/2M+H] + = 658.9. HPLC: Rt = 3.273. 1 H NMR (400 MHz, 메탄올-d 4 ) δ ppm 8.35 - 8.27 (m, 1H), 7.93 - 7.81 (m, 1H), 7.37 - 7.29 (m, 1H), 7.24 - 7.19 (m, 1H), 7.17 - 7.09 (m, 1H), 7.09 - 7.04 (m, 1H), 7.03 - 6.90 (m, 5H), 7.04 - 6.89 (m, 6H), 6.88 - 6.81 (m, 2H), 6.76 - 6.68 (m, 2H), 4.60 - 4.54 (m, 2H), 4.39 - 4.34 (m, 2H), 3.84 - 3.74 (m, 6H), 3.73 - 3.69 (m, 3H), 3.68 - 3.64 (m, 5H), 3.63 - 3.56 (m, 24H), 3.48 (br s, 3H), 2.89 - 2.83 (m, 2H), 2.56 - 2.49 (m, 2H), 1.61 - 1.51 (m, 1H), 1.50 - 1.44 (m, 1H), 1.41 - 1.33 (m, 1H), 1.33 - 1.26 (m, 1H), 1.33 - 1.25 (m, 1H), 0.98 - 0.91 (m, 2H), 0.90 - 0.85 (m, 1H), 0.91 - 0.85 (m, 1H), 1.00 - 0.77 (m, 4H).
실시예 3. 화합물 I-3의 예시적 합성.
Figure pct00563
화합물의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00564
DCM(10㎖) 중 화합물 1(400㎎, 746.97μ㏖, 1 eq, TFA)의 용액에 HATU(312.42㎎, 821.67μ㏖, 1.1 eq) 및 DIEA(386.16㎎, 2.99m㏖, 520.42㎕, 4 eq)를 0℃에서 0.5시간 동안 첨가하였다. 혼합물에 DMF(2㎖) 중 화합물 2(321.43㎎, 821.67μ㏖, 1.1 eq, HCl)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 반응 혼합물을 직접 정제하였다. 잔사를 분취-HPLC(칼럼: Phenomenex Luna C18 200*40㎜*10㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 5%-35%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 3(250㎎, 444.37μ㏖, 59.49% 수율)을 HNMR에 의해 확인된 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 0.954분, MS 계산치: 526.16, [1/2M+H] + = 282.1. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 13.08 - 12.95 (m, 1H), 8.68 - 8.61 (m, 1H), 8.57 - 8.50 (m, 1H), 8.41 - 8.31 (m, 1H), 8.31 - 8.20 (m, 1H), 8.09 - 8.01 (m, 2H), 7.99 - 7.90 (m, 2H), 7.46 - 7.31 (m, 1H), 6.98 - 6.81 (m, 2H), 4.50 - 4.37 (m, 3H), 4.14 (br d, J = 5.7 Hz, 4H), 2.88 - 2.78 (m, 3H), 2.70 - 2.63 (m, 1H), 2.36 - 2.28 (m, 3H), 2.10 - 2.00 (m, 3H).
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00565
용액 1: DCM(5㎖) 중 아지도-PEG6-산(340㎎, 896.14μ㏖, 1 eq)의 용액에 SOCl2(319.84㎎, 2.69m㏖, 195.03㎕, 3 eq)를 0℃에서 5분 동안 첨가하였다. 혼합물을 농축 건조시켰다. 조질의 생성물을 DCM(1㎖)으로 용해시켰다. 용액 2: DCM(5㎖) 중 화합물 3(504.16㎎, 896.14μ㏖, 1 eq)의 용액에 DIEA(347.45㎎, 2.69m㏖, 468.26㎕, 3 eq)를 0℃에서 첨가하였다. 용액 2를 용액 1에 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 혼합물을 다음 단계에서 직접 사용하였다. 잔사를 분취-HPLC(칼럼: Welch Xtimate C18 250*50㎜*10㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 15%-45%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 4(600㎎, 649.37μ㏖, 72.46% 수율)를 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.819분, MS 계산치: 923.34, [1/2M+H] + = 462.9.
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00566
THF(10㎖) 중 화합물 4(300㎎, 324.68μ㏖, 1 eq)의 용액에 N2 하에 Pd/C(400㎎, 324.68μ㏖, 10% 순도, 1 eq) 및 HCl(1M, 1.62㎖, 5 eq)을 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H2(15 psi) 하에 25℃에서 10분 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 여과시키고, 여과액에 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Nano-micro Kromasil C18 100*40㎜ 10㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 8%-38%, 9분)에 의해 정제하였다. 화합물 5(200㎎, 222.72μ㏖, 68.60% 수율)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 0.996분, MS 계산치: 897.35, [1/2M+H] + = 449.8.
화합물 I-3의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00567
DMF(1㎖) 중 화합물 5(60㎎, 66.82μ㏖, 1 eq) 및 화합물 5A(26.02㎎, 66.82μ㏖, 1 eq)의 용액에 TEA(6.76㎎, 66.82μ㏖, 9.30㎕, 1 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 10분 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 35%-65%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 I-3(11.48㎎, 8.90μ㏖, 13.33% 수율, 99.85% 순도)을 HPLC, HNMR 및 QC-LCMS에 의해 확인된 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.047분, MS 계산치: 1286.39, [1/2M+H] + = 644.6. QCLCMS: RT = 3.151분, MS 계산치: 1286.39, [1/2M+H] + = 644.3. HPLC: Rt = 2.444. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 13.02 - 12.95 (m, 1H), 10.16 - 10.07 (m, 1H), 10.07 - 9.99 (m, 1H), 8.66 - 8.62 (m, 1H), 8.55 - 8.51 (m, 1H), 8.49 - 8.43 (m, 1H), 8.31 - 8.23 (m, 2H), 8.09 - 8.02 (m, 2H), 7.98 - 7.91 (m, 2H), 7.77 - 7.70 (m, 1H), 7.41 - 7.35 (m, 1H), 7.20 - 7.16 (m, 1H), 7.15 - 7.10 (m, 2H), 6.69 - 6.66 (m, 2H), 6.62 - 6.61 (m, 1H), 6.60 - 6.59 (m, 1H), 6.58 - 6.56 (m, 2H), 6.56 - 6.54 (m, 1H), 4.48 - 4.40 (m, 3H), 4.28 - 4.24 (m, 3H), 3.76 - 3.70 (m, 4H), 3.62 - 3.59 (m, 2H), 3.58 - 3.55 (m, 4H), 3.54 - 3.46 (m, 18H), 2.97 - 2.88 (m, 2H), 2.86 - 2.77 (m, 3H), 2.41 - 2.31 (m, 5H), 2.12 - 2.01 (m, 3H).
실시예 4. 화합물 I-4의 예시적 합성.
Figure pct00568
Figure pct00569
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00570
DCM(15㎖) 중 화합물 1(2g, 4.27m㏖, 1 eq)의 용액에 CDI(692.14㎎, 4.27m㏖, 1 eq) 및 DIEA(1.66g, 12.81m㏖, 2.23㎖, 3 eq)를 첨가하였다. 이어서, 화합물 1A(1.12g, 4.27m㏖, 1 eq)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS는 반응물 1이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 잔사를 H2O 20㎖로 희석시키고, DCM(20㎖ * 3)으로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(20㎖ * 3)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 2(2.2g, 3.09m㏖, 72.30% 수율)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 3.185분, MS 계산치: 712.38, [M+H] + = 713.4.
화합물 3의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00571
THF(50㎖) 중 화합물 2(1.4g, 1.96m㏖, 1 eq)의 용액에 N2 분위기 하에 Pd/C(1g, 10% 순도) 및 HCl(0.3M, 32.73㎖, 5 eq)을 첨가하였다. 현탁액을 탈기시키고, H2로 3회 퍼지하였다. 혼합물을 H2(15 psi) 하에 20℃에서 10분 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 여과시키고, 여과액을 동결건조시켜 백색 고체를 제공하였다. 화합물 3(1.4g, 1.45m㏖, 73.92% 수율, 75% 순도, HCl)을 HNMR에 의해 확인되는 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.208분, MS 계산치: 686.39, [M+H] + = 687.4. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 8.04 - 7.94 (m, 2H), 7.93 - 7.85 (m, 2H), 7.77 - 7.66 (m, 2H), 7.48 - 7.38 (m, 3H), 7.36 - 7.25 (m, 2H), 6.81 - 6.73 (m, 1H), 4.31 - 4.18 (m, 3H), 3.97 - 3.87 (m, 1H), 3.61 - 3.57 (m, 1H), 3.57 - 3.51 (m, 1H), 3.57 - 3.44 (m, 1H), 3.41 - 3.38 (m, 1H), 3.41 - 3.37 (m, 1H), 3.25 - 3.14 (m, 2H), 2.98 - 2.83 (m, 3H), 1.65 - 1.46 (m, 2H), 1.41 - 1.33 (m, 9H), 1.27 - 1.14 (m, 1H).
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00572
DMF(1㎖) 중 화합물 3A(500㎎, 968.15μ㏖, 1 eq, TFA)의 용액에 0℃에서 0.5시간 동안 HATU(368.12㎎, 968.15μ㏖, 1 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 화합물 3(778.07㎎, 968.15μ㏖, 1 eq, HCl) 및 TEA(293.90㎎, 2.90m㏖, 404.27㎕, 3 eq)와 합하였다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 합한 반응 혼합물을 HCl(0.5 M)(20㎖)에 부었고, 에틸 아세테이트(20㎖* 2)로 추출하였다. 합한 유기상을 진공 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하였다(SiO2, 다이클로로메탄: 메탄올 = 100/1 내지 5/1, Rf = 0.59). 화합물 4(900㎎, 840.15μ㏖, 86.78% 수율)를 HNMR에 의해 확인된 핑크색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.852분, MS 계산치: 1070.48, [1/2M+H] + = 536.4. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 10.13 - 10.04 (m, 1H), 8.35 - 8.30 (m, 1H), 8.24 - 8.14 (m, 2H), 8.01 - 7.95 (m, 1H), 7.94 - 7.82 (m, 6H), 7.76 - 7.68 (m, 2H), 7.45 - 7.36 (m, 4H), 7.35 - 7.28 (m, 2H), 7.12 - 7.05 (m, 1H), 6.79 - 6.70 (m, 1H), 4.27 - 4.16 (m, 3H), 4.06 - 3.99 (m, 1H), 3.95 - 3.88 (m, 1H), 3.87 - 3.83 (m, 3H), 3.52 - 3.43 (m, 13H), 3.41 - 3.36 (m, 5H), 3.29 - 3.23 (m, 3H), 3.21 - 3.15 (m, 4H), 2.93 - 2.79 (m, 3H), 2.17 - 2.11 (m, 2H), 2.00 - 1.96 (m, 1H), 1.77 - 1.69 (m, 2H), 1.62 - 1.46 (m, 3H), 1.40 - 1.32 (m, 12H), 1.20 - 1.15 (m, 2H).
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00573
Figure pct00574
DCM(2㎖) 중 화합물 4(600㎎, 560.10μ㏖, 1 eq)의 용액에 Et2NH(2.13g, 29.12m㏖, 3.00㎖, 51.99 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 4시간 동안 교반하였다. TLC는 화합물 4가 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. LC-MS는 화합물 4가 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 5(475.52㎎, 560.09μ㏖, 100% 수율)를 HNMR에 의해 확인되는 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LCMS: RT = 1.830분, MS 계산치: 848.41, [M+H] + = 849.4. 1 H NMR (400 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 9.15 - 9.04 (m, 1H), 8.29 - 8.06 (m, 4H), 7.80 - 7.67 (m, 3H), 7.54 - 7.47 (m, 1H), 7.42 - 7.31 (m, 3H), 7.09 - 6.93 (m, 2H), 6.13 - 6.01 (m, 2H), 5.38 - 5.26 (m, 1H), 4.05 - 3.94 (m, 3H), 3.76 - 3.61 (m, 13H), 3.60 - 3.53 (m, 5H), 3.51 - 3.38 (m, 6H), 3.18 - 3.05 (m, 1H), 3.05 - 2.96 (m, 1H), 2.36 - 2.20 (m, 3H), 2.00 - 1.89 (m, 4H), 1.46 - 1.33 (m, 16H), 1.29 - 1.20 (m, 3H), 0.94 - 0.73 (m, 6H).
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00575
DCM(3㎖) 중 화합물 5A(310㎎, 663.09μ㏖, 1.2 eq)의 용액에 0℃에서 0.5시간 동안 HATU(210.10㎎, 552.57μ㏖, 1 eq) 및 TEA(139.79㎎, 1.38m㏖, 192.28㎕, 2.5 eq)를 첨가하였다. 혼합물에 화합물 5(469.14㎎, 552.57μ㏖, 1 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 잔사를 NH4Cl 10㎖(10㎖*2)로 세척하고, DCM 40㎖(40㎖ * 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(20㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 6(700㎎, 539.08μ㏖, 97.56% 수율)을 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다(황색 오일). LCMS: RT = 2.372분, MS 계산치: 1297.65, [M+H] + = 650.1.
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00576
THF(1㎖) 및 MeOH(0.5㎖) 중 화합물 6(100㎎, 77.01μ㏖, 1 eq)의 용액에 Pd/C(100㎎, 77.01μ㏖, 10% 순도, 1 eq) 및 HCl(0.5M, 462.07㎕, 3 eq)을 N2 하에 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H2(15 psi) 하에 25℃에서 10분 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 여과시키고, 여과액을 MTBE 10㎖로 추출하였다. 포화 NaHCO3을 점진적으로 첨가함으로써 pH를 대략 8 내지 9로 조절하였다. 수층을 DCM 20㎖(20㎖ * 2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(20㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 7(40㎎, 9.12μ㏖, 11.84% 수율, 29% 순도)을 LCMS에 의해 확인된 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.973분, MS 계산치: 1271.66, [1/2M+H] + = 637.2. LCMS: RT = 1.919분, MS 계산치: 1271.66, [1/2M+H] + = 637.1.
화합물 8의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00577
DMF(2㎖) 중 화합물 7(200㎎, 157.17μ㏖, 1 eq)의 용액에 TEA(31.81㎎, 314.34μ㏖, 43.75㎕, 2 eq) 및 화합물 7A(60㎎, 154.09μ㏖, 0.98 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 직접 정제하였다. 잔사를 분취-HPLC(칼럼: Nano-micro Kromasil C18 100*30㎜ 5㎛; 이동상: [물(0.1% TFA)-ACN]; B%: 30%-55%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 8(100㎎, 53.55μ㏖, 34.07% 수율, 89% 순도)을 HNMR 및 LCMS에 의해 확인된 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.805분, MS 계산치: 1660.69, [1/2M+H] + = 831.8. LCMS: RT = 1.265분, MS 계산치: 1660.69, [1/2M+H] + = 831.8. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 10.12 - 10.07 (m, 1H), 10.05 - 9.98 (m, 1H), 8.35 - 8.30 (m, 1H), 8.28 - 8.24 (m, 1H), 8.22 - 8.17 (m, 2H), 7.99 - 7.96 (m, 1H), 7.94 - 7.87 (m, 3H), 7.87 - 7.80 (m, 1H), 7.74 - 7.67 (m, 1H), 7.44 - 7.37 (m, 1H), 7.18 - 7.13 (m, 1H), 7.10 - 7.06 (m, 1H), 6.75 - 6.69 (m, 1H), 6.67 - 6.62 (m, 2H), 6.62 - 6.51 (m, 4H), 3.87 - 3.79 (m, 4H), 3.60 - 3.50 (m, 95H), 3.51 - 3.44 (m, 51H), 3.40 - 3.32 (m, 5H), 3.28 - 3.20 (m, 2H), 3.20 - 3.10 (m, 4H), 2.88 - 2.80 (m, 2H), 2.44 - 2.26 (m, 2H), 2.17 - 2.08 (m, 2H), 1.76 - 1.68 (m, 2H), 1.61 - 1.50 (m, 1H), 1.49 - 1.40 (m, 1H), 1.38 - 1.29 (m, 12H), 1.23 - 1.10 (m, 2H).
화합물 9의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00578
DCM(0.5㎖) 중 화합물 8(6㎎, 3.61μ㏖, 1 eq)의 용액에 TFA(61.60㎎, 540.24μ㏖, 0.04㎖, 149.64 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 질소 기체 하에 건조시켰다. 화합물 9(5.64㎎, 3.61μ㏖, 100% 수율)를 황색 고체로서 얻었다. LCMS: Rt = 1.153분, MS 계산치: 1560.64, [1/2M+H] + = 781.7.
화합물 I-4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00579
Figure pct00580
DMF(1㎖) 중 화합물 9(18.8㎎, 12.04μ㏖, 1 eq)의 용액에 TEA(10.96㎎, 108.34μ㏖, 15.08㎕, 9 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 1,5-다이플루오로-2,4-다이나이트로-벤젠(2.46㎎, 12.04μ㏖, 2.94e-1㎕, 1 eq)과 0℃에서 합하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 직접 정제하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Nano-micro Kromasil C18 80*25㎜*3㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 35%-55%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 I-4(1.02㎎, 5.38e-1μ㏖, 4.47% 수율, 92% 순도)를 HPLC, MS 및 HNMR에 의해 확인된 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.591분, MS 계산치: 1744.63, [1/2M+H] + = 873.8. MS: MS 계산치: 1744.63, [1/2M+H] + = 874.0. HPLC: RT = 3.003 min. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 10.17 - 10.07 (m, 2H), 10.06 - 9.99 (m, 1H), 8.91 - 8.79 (m, 2H), 8.34 - 8.30 (m, 1H), 8.30 - 8.25 (m, 1H), 8.30 - 8.24 (m, 1H), 8.23 - 8.15 (m, 2H), 8.12 - 8.04 (m, 1H), 8.01 - 7.93 (m, 2H), 7.92 - 7.83 (m, 2H), 7.77 - 7.69 (m, 1H), 7.44 - 7.40 (m, 1H), 7.24 - 7.14 (m, 1H), 7.12 - 7.05 (m, 1H), 6.98 - 6.92 (m, 1H), 6.70 - 6.64 (m, 2H), 6.62 - 6.52 (m, 3H), 4.29 - 4.20 (m, 1H), 3.90 - 3.83 (m, 3H), 3.64 - 3.36 (m, 206H), 3.33 - 3.24 (m, 11H), 3.22 - 3.13 (m, 7H), 2.40 - 2.26 (m, 6H), 2.17 - 2.08 (m, 3H), 1.80 - 1.70 (m, 2H), 1.66 - 1.44 (m, 4H), 1.37 - 1.26 (m, 2H), 1.26 - 1.19 (m, 2H).
실시예 5. 화합물 I-5의 예시적 합성.
Figure pct00581
Figure pct00582
화합물 3의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00583
DCM(40㎖) 중 화합물 1(1g, 1.31m㏖, 1 eq)의 용액에 TEA(397.79㎎, 3.93m㏖, 547.16㎕, 3 eq), EDCI(376.80㎎, 1.97m㏖, 1.5 eq), 화합물 2(266.31㎎, 1.31m㏖, 1 eq) 및 HOBt(265.59㎎, 1.97m㏖, 1.5 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 12시간 동안 교반하였다. LC-MS(Rt = 1.489분)는 화합물 1이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 DCM(40㎖)과 0.5M HCl(40㎖) 사이에 배분하였다. 유기상을 분리시키고, 염수 40㎖로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 다이클로로메탄: 메탄올=80:1 내지 20:1)에 의해 정제하였다. 화합물 3(900㎎, 940.31μ㏖, 71.76% 수율)을 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.489분, MS 계산치:871.5, [M+H] + = 872.5. 1 H NMR (400 MHz, 메탄올-d4) δ ppm 7.77 - 7.87 (m, 2 H) 7.63 - 7.72 (m, 2 H) 7.50 - 7.57 (m, 1 H) 7.37 - 7.44 (m, 2 H) 7.28 - 7.35 (m, 3 H) 6.94 - 7.12 (m, 3 H) 4.33 - 4.48 (m, 2 H) 4.18 - 4.29 (m, 1 H) 4.00 - 4.11 (m, 1 H) 3.42 - 3.65 (m, 19 H) 3.18 - 3.27 (m, 1 H) 2.99 - 3.09 (m, 2 H) 2.73 - 2.84 (m, 2 H) 2.22 - 2.33 (m, 2 H) 1.96 - 2.07 (m, 2 H) 1.68 - 1.82 (m, 1 H) 1.55 - 1.68 (m, 2 H) 1.39 - 1.54 (m, 14 H) 1.28 - 1.36 (m, 3 H).
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00584
DCM(9㎖) 중 화합물 3(900㎎, 1.03m㏖, 1 eq)의 용액에 Et2NH(3.19g, 43.69m㏖, 4.50㎖, 42.33 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LC-MS(Rt = 1.970분)는 화합물 3이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 용매를 제거하였다. 잔사를 다음 단계에 직접 사용하였다. 화합물 4(670.64㎎, 1.03m㏖, 100.00% 수율)를 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.970분, MS 계산치: 649.6, [M+H] + = 650.4. 1 H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ 8.43 - 8.53 (m, 1 H) 7.60 - 7.71 (m, 2 H) 7.50 - 7.56 (m, 1 H) 7.37 - 7.44 (m, 1 H) 7.21 - 7.35 (m, 4 H) 7.07 - 7.14 (m, 1 H) 7.00 - 7.05 (m, 1 H) 6.95 - 6.99 (m, 1 H) 5.98 - 6.05 (m, 1 H) 3.51 - 3.63 (m, 9 H) 3.43 - 3.50 (m, 3 H) 3.30 - 3.41 (m, 3 H) 3.16 - 3.22 (m, 1 H) 2.99 - 3.08 (m, 1 H) 2.84 - 2.98 (m, 3 H) 2.69 - 2.80 (m, 1 H) 2.09 - 2.23 (m, 2 H) 1.93 - 2.07 (m, 2 H) 1.66 - 1.81 (m, 2 H) 0.92 - 1.08 (m, 1 H) 0.68 - 0.87 (m, 1 H).
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00585
DCM(10㎖) 중 화합물 5(730㎎, 1.56m㏖, 1.5 eq)의 용액에 Et3N(263.34㎎, 2.60m㏖, 362.23㎕, 2.5 eq) 및 HATU(395.81㎎, 1.04m㏖, 1 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 화합물 4(676.44㎎, 1.04m㏖, 1 eq)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. LC-MS(Rt = 1.365분)는 화합물 4가 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 DCM(10㎖)과 H2O(10㎖) 사이에 배분하였다. 합한 유기층을 NH4Cl(10㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 다이클로로메탄: 메탄올=50:1 내지 1:1)에 의해 정제하였다. 화합물 6(1.1g, 1.00m㏖, 96.12% 수율)을 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.317분, MS 계산치:1098.6, [M/2+H] + = 550.6. 1 H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ 8.58 - 8.64 (m, 1 H) 7.93 - 7.98 (m, 8 H) 7.61 - 7.69 (m, 4 H) 7.49 - 7.53 (m, 2 H) 7.27 - 7.34 (m, 4 H) 7.22 - 7.27 (m, 3 H) 7.05 - 7.12 (m, 2 H) 6.95 - 7.04 (m, 3 H) 6.72 - 6.82 (m, 2 H) 6.26 - 6.32 (m, 1 H) 5.99 - 6.03 (m, 2 H) 4.64 - 4.76 (m, 1 H) 4.21 - 4.30 (m, 2 H) 3.67 - 3.67 (m, 1 H) 3.50 - 3.62 (m, 122 H) 3.24 - 3.39 (m, 18 H) 3.11 - 3.18 (m, 3 H) 2.81 (s, 44 H) 2.79 - 2.85 (m, 1 H) 2.71 - 2.75 (m, 11 H) 2.52 - 2.58 (m, 3 H) 2.36 - 2.44 (m, 3 H) 2.12 - 2.19 (m, 3 H) 1.95 - 2.03 (m, 3 H) 1.33 - 1.41 (m, 23 H) 1.28 - 1.33 (m, 5 H) 1.08 - 1.13 (m, 3 H) 1.01 - 1.06 (m, 3 H).
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00586
THF(5㎖) 중 화합물 6(500㎎, 454.83μ㏖, 1 eq)의 용액에 HCl(0.5M, 4.55㎖, 5 eq) 및 Pd/C(454.83μ㏖, 500㎎)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS(Rt = 2.109분)는 화합물 6이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물에 에틸 아세테이트 20㎖를 첨가하였다. 유기상을 분리시켰다. NaHCO3을 이용하여 수성상을 pH 8로 염기성화하였고, 후속적으로 DCM(30ml*6)으로 추출하였다. 합한 유기상을 염수(20㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 7(480㎎, 447.21μ㏖, 98.33% 수율)을 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 2.109분, MS 계산치:1072.7, [M/2+H] + = 537.6.
화합물 9의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00587
DMF(3㎖) 중 화합물 7(220㎎, 204.97μ㏖, 1 eq)의 용액에 Et3N(41.48㎎, 409.95μ㏖, 57.06㎕, 2 eq) 및 화합물 8(79.81㎎, 204.97μ㏖, 1 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS(Rt = 1.308분)는 화합물 7이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 용매를 제거하였다. 잔사를 분취-HPLC(염기성 조건: 칼럼: Waters Xbridge Prep OBD C18 150*40㎜*10㎛; 이동상: [물(0.04%NH3H2O+10mM NH4HCO3)-ACN]; B%: 10%-40%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 7(100㎎, 68.37μ㏖, 33.35% 수율)을 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.308분, MS 계산치: 1461.7, [M/2+H] + = 732.2.
화합물 10의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00588
DCM(1㎖) 중 화합물 9(60㎎, 41.02μ㏖, 1 eq) 및 TFA(154.00㎎, 1.35m㏖, 0.1㎖, 32.93 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 퍼지하고, 이어서, 20℃에서 1시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 농축시켰다. 화합물 10(55.89㎎, 조질)을 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.171분, MS 계산치: 1053.4, [M2+H] + = 682.2.
화합물 I-5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00589
DMF(1㎖) 중 화합물 10(55.89㎎, 37.85μ㏖, 1 eq, TFA)의 용액에 Et3N(38.30㎎, 378.50μ㏖, 52.68㎕, 10 eq) 및 화합물 11(7.72㎎, 37.85μ㏖, 1 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. HPLC(RT = 2.160분) 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 필터를 농축시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Waters Xbridge BEH C18 100*30㎜*10㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 250%-85%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 I-5(2.68㎎, 1.73μ㏖, 4.58% 수율)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.822분, MS 계산치: 1234.7, [M/2+H] + = 774.2. HPLC: RT = 3.160분. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 9.98 - 10.22 (m, 3 H) 8.84 - 8.92 (m, 2 H) 8.27 (s, 1 H) 8.09 (br s, 1 H) 7.94 - 8.01 (m, 2 H) 7.81 - 7.87 (m, 1 H) 7.74 (br d, J = 6.36 Hz, 1 H) 7.48 (d, J = 7.46 Hz, 1 H) 7.31 (d, J = 8.19 Hz, 1 H) 7.02 - 7.24 (m, 6 H) 6.92 - 6.99 (m, 2 H) 6.67 (d, J = 2.20 Hz, 2 H) 6.54 - 6.62 (m, 5 H) 4.20 - 4.31 (m, 2 H) 3.69 (br s, 5 H) 3.57 (br s, 13 H) 3.12 - 3.27 (m, 7 H) 2.55 - 2.73 (m, 9 H) 2.52 - 2.55 (m, 12 H) 2.32 - 2.45 (m, 9 H) 2.08 - 2.15 (m, 2 H) 1.80 - 1.88 (m, 2 H) 1.46 - 1.68 (m, 5 H) 1.16 - 1.40 (m, 4 H). MS: [M/2+H] + = 773.9.
실시예 6. 화합물 I-6의 예시적 합성.
단편 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00590
화합물 I-6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00591
Figure pct00592
화합물 14의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00593
DCM(70㎖) 중 화합물 13(16g, 43.19m㏖, 1 eq)의 용액에 Na(29.79㎎, 1.30m㏖, 30.71㎕, 0.03 eq) 및 tert-뷰틸 아크릴레이트(5.54g, 43.19m㏖, 6.27㎖, 1 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄:메탄올 = 10:1 Rf = 0.43)는 반응이 완료되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 DCM을 제거하였다. 잔사를 H2O 100㎖로 희석시키고, EtOAc(200㎖ * 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(300㎖ * 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 14(16g, 35.20m㏖, 81.49% 수율)를 황색 오일로서 얻었다.
화합물 15의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00594
DCM(130㎖) 중 화합물 14(17g, 34.10m㏖, 1 eq)의 용액에 MsCl(5.86g, 51.14m㏖, 3.96㎖, 1.5 eq) 및 TEA(10.35g, 102.29m㏖, 14.24㎖, 3 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄:메탄올 = 10:1 Rf = 0.6)는 반응이 완료되었다는 것을 나타내었다. 잔사를 H2O 300㎖로 희석시키고, DCM(200㎖ * 2)으로 추출하였다. 합한 유기층을 0.5M HCl(200㎖ *2)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 15(19g, 32.95m㏖, 96.63% 수율)를 황색 오일로서 얻었다.
화합물 16의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00595
DMF(190㎖) 중 화합물 15(19g, 32.95m㏖, 1 eq)의 용액에 NaN3(4.28g, 65.89m㏖, 2 eq) 및 NaI(9.88g, 65.89m㏖, 2 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 90℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄:메탄올 = 10:1 Rf = 0.6)는 반응이 완료되었다는 것을 나타내었다. 잔사를 H2O 500㎖로 희석시키고, EtOAc(500㎖ * 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(500㎖ * 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 16(17g, 32.47m㏖, 98.54% 수율)을 황색 오일로서 얻었다.
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00596
3가지 반응을 동시에 실행하였다. DCM(120㎖) 중 화합물 16(6g, 11.46m㏖, 1 eq)의 용액에 HCl/다이옥산(4M, 48.00㎖, 16.76 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄:메탄올 = 10:1 Rf = 0.1)는 반응이 완료되었다는 것을 나타내었다. 3가지 반응을 함께 워크업하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, DCM: MeOH=200/1 내지 1/1)에 의해 정제하였다. 화합물 7(10g, 21.39m㏖, 62.22% 수율)을 황색 오일로서 얻었다.
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00597
DMF(40㎖) 중 화합물 1(6g, 14.10m㏖, 1eq)의 용액에 HATU(5.36g, 14.10m㏖, 1 eq) 및 DIEA(5.47g, 42.31m㏖, 7.37㎖, 3 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 화합물 1A(4.07g, 15.51m㏖, 1.1 eq)를 이것에 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 1이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 0.5M HCl(200㎖)로 희석시키고, MTBE(200㎖ * 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(200㎖ * 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에터:에틸 아세테이트= 20:1 내지 0:1)에 의해 정제하였다. 화합물 2(6g, 8.85m㏖, 62.76% 수율, 98.8% 순도)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.526분, MS 계산치: 669.34, [M+H] + = 670.3.
화합물 3의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00598
THF(80㎖) 중 화합물 2(3g, 4.48m㏖, 1 eq)의 용액에 Pd/C (5g, 4.48m㏖, 10% 순도, 1 eq) 및 HCl(0.5M, 17.92㎖, 2 eq)을 N2 하에 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H2(15 psi) 하에 25℃에서 10분 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 2가 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 이를 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 3(2.8g, 4.12m㏖, 91.90% 수율, HCl)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.157분, MS 계산치: 643.35, [M+H] + = 644.4.
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00599
DMF(15㎖) 중 화합물 4(1.7g, 3.29m㏖, 1eq, TFA)의 용액에 HATU(1.25g, 3.29m㏖, 1 eq) 및 DIEA(1.28g, 9.88m㏖, 1.72㎖, 3 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 화합물 3(6.72g, 4.94m㏖, 1.5 eq, HCl)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 4가 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 50㎖ 1M HCl에 첨가하였고, EtOAc(50㎖ * 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(50㎖ * 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, DCM: MeOH =100:1 내지 0:1)에 의해 정제하였다. 화합물 5(2.8g, 4.12m㏖, 91.90% 수율, HCl)를 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.903분, MS 계산치: 1027.44, [M/2+H] + = 514.9.
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00600
DCM(6㎖) 중 화합물 5(1.5g, 1.46m㏖, 1 eq)의 용액에 Et2NH(1.07g, 14.59m㏖, 1.50㎖, 10 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 5가 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 이를 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 6(1g, 1.24m㏖, 85.05% 수율)을 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.081분, MS 계산치: 805.37, [M+H] + = 806.4.
화합물 8의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00601
DMF(2㎖) 중 화합물 7(1 g,2.14m㏖, 1 eq)의 용액에 HATU(813.31㎎, 2.14m㏖, 1 eq) 및 DIEA(829.35㎎, 6.42m㏖, 1.12㎖,3 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 화합물 6(1.72g, 2.14m㏖, 1 eq)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: 메탄올 = 10:1 Rf = 0.24)는 이것이 완료되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 H2O(10㎖)에 첨가하고, EtOAc(10㎖ * 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(10㎖ * 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, DCM: MeOH=200:1 내지 5:1)에 의해 정제하였다. 화합물 8(1g, 673.87μ㏖, 31.50% 수율, 84.6% 순도)을 황색 고체로서 얻었다.
화합물 9의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00602
DCM(5㎖) 중 화합물 8(0.3g, 238.96μ㏖, 1 eq)의 용액에 TFA(408.71㎎, 3.58m㏖, 265.39㎕, 15 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 5시간 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: 메탄올 = 10:1 Rf = 0.1)는 이것이 완료되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 9(250㎎, 208.45μ㏖, 87.23% 수율)를 황색 오일로서 얻었다.
화합물 10의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00603
DMF(2㎖) 중 화합물 9(0.19g, 158.42μ㏖, 1 eq)의 용액에 HATU(60.24㎎, 158.42μ㏖, 1 eq) 및 DIEA(61.43㎎, 475.27μ㏖, 82.78㎕, 3 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 화합물 9A(30.91㎎, 316.85μ㏖, 2 eq, HCl)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LC-MS는 반응물 1이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 잔사를 H2O(10㎖)로 희석시키고, EtOAc(20㎖ * 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(20㎖ * 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Nano-micro Kromasil C18 80*25㎜*3㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 20%-40%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 10(0.1g, 80.49μ㏖, 50.81% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.030분, MS 계산치: 1241.58, [M/2+H] + = 622.0.
화합물 11의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00604
THF(3㎖) 중 화합물 10(5㎎, 4.02μ㏖, 1 eq)의 용액에 PPh3(1.06㎎, 4.02μ㏖, 1 eq) 및 H2O(83.33 ug, 4.63μ㏖, 8.33e-2㎕, 1.15 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 10이 완전히 소모되었고 주요 피크는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 H2O(10㎖)로 희석시키고, DCM(10㎖ * 3)으로 추출하였다. 합한 유기층을 H2O(20㎖), 염수(20㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 나서, 여과 후, 여과액을 농축시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 화합물 11(4㎎, 3.29μ㏖, 81.71% 수율)을 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.025분, MS 계산치: 1215.59, [M/2+H] + = 609.1.
화합물 I-6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00605
DMF(2㎖) 중 화합물 11(6㎎, 4.93μ㏖, 1 eq)의 용액에 TEA(1.50㎎, 14.80μ㏖, 2.06㎕, 3 eq) 및 화합물 12(1.92㎎, 4.93μ㏖, 1 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 10분 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 11이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 H2O(5㎖)로 희석시키고, DCM(5㎖ * 3)으로 추출하였다. 합한 유기층을 H2O(10㎖), 염수(10㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 나서, 여과 후, 여과액을 농축시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건: 칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1% TFA) -ACN]; B%: 30%-60%,12분)에 의해 정제하였다. 화합물 I-6(1.41㎎, 8.87*10-1μ㏖, 17.98% 수율)을 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.217분, MS 계산치:1604.63, [M/2+H] + = 803.7. HPLC: RT = 2.930분. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.02 (br s, 1 H) 8.33 (s, 1 H) 8.27 (s, 1 H) 8.18 - 8.23 (m, 1 H) 8.08 (br s, 1 H) 7.96 - 8.03 (m, 1 H) 7.84 - 7.93 (m, 2 H) 7.73 (br d, J =8.44 Hz, 1 H) 7.42 (d, J =4.52 Hz, 1 H) 7.18 (d, J =8.56 Hz, 1 H) 7.09 (d, J =8.93 Hz, 1 H) 6.67 (d, J =2.08 Hz, 1 H) 6.53 - 6.62 (m, 3 H) 4.24 (br d, J =5.50 Hz, 1 H) 3.86 (s, 3 H) 3.45 - 3.72 (m, 57 H) 3.39 (br d, J =2.45 Hz, 5 H) 3.15 - 3.30 (m, 7 H) 3.06 (s, 2 H) 2.30 - 2.42 (m, 11 H) 2.10 - 2.27 (m, 12 H) 1.69 - 1.90 (m, 4 H).
실시예 7. 화합물 I-7의 예시적 합성.
Figure pct00606
Figure pct00607
화합물 3의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00608
DMF(23㎖) 중 화합물 2(433.23㎎, 2.13m㏖, 1 eq)의 용액에 HATU(891.57㎎,2.34m㏖, 1.1 eq) 및 DIEA(826.50㎎, 6.39m㏖, 1.11㎖, 3 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 화합물 1(2.9g, 2.13m㏖, 1 eq, HCl)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 2가 완전히 소모되었고 목적하는 m/z를 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 잔사를 0.5M HCl 25㎖로 희석시키고, EtOAc(70㎖ * 3)로 추출하였다. Na2SO4로 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, DCM:MeOH=100:1 내지 20:1)에 의해 정제하였다. 화합물 3(0.7g, 844.40μ㏖, 39.61% 수율)을 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 3.241분, MS 계산치: 828.43, [M+H] + = 829.4.
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00609
2가지 반응을 동시에 실행하였다. DCM(5㎖) 중 화합물 3(0.65g, 784.09μ㏖, 1 eq) 및 Et2NH(1.07 g,14.56m㏖, 1.5㎖, 18.57 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LC-MS는 화합물 3이 완전히 소모되었고 목적하는 m/z를 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 2가지 반응을 함께 워크업하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 4(900㎎, 1.48m㏖, 94.59% 수율)를 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.833분, MS 계산치: 606.36, [M+H] + = 607.4.
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00610
DMF(20㎖) 중 화합물 5(690.01㎎, 1.48m㏖, 1 eq)의 용액에 DIEA(572.26㎎, 4.43m㏖, 771.24㎕, 3 eq) 및 HATU(561.20㎎, 1.48m㏖, 1 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 화합물 4(600㎎, 988.88μ㏖, 0.67 eq)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 5가 완전히 소모되었고 목적하는 m/z를 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 잔사를 H2O(60㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(60㎖ * 3)로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 다이클로로메탄: 메탄올=100:1 내지 10:1)에 의해 정제하였다. 화합물 6(1.5g, 1.42m㏖, 96.22% 수율)을 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 2.368분, MS 계산치: 1055.6, [M/2+H] + = 529.1.
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00611
DCM(5㎖) 중 화합물 6(100㎎, 94.68μ㏖, 1 eq) 및 TFA(323.85㎎, 2.84m㏖, 210.30㎕, 30 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LC-MS는 화합물 6이 완전히 소모되었고 여러 개의 새로운 피크가 관찰되었다는 것을 나타내었다. 목적하는 화합물의 대략 42.52%가 검출되었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 정제하였다. 화합물 7(92㎎, 91.99μ㏖, 48.58% 수율)을 무색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 2.135분, MS 계산치: 999.54, [M/2+H] + = 501.0.
화합물 8의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00612
DMF(1㎖) 중 화합물 7(50㎎, 49.99μ㏖, 1 eq)의 용액에 DIEA(19.38㎎, 149.98μ㏖, 26.12㎕, 3 eq) 및 HATU(19.01㎎, 49.99μ㏖, 1 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 화합물 7A(9.75㎎, 99.99μ㏖, 2 eq, HCl)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 7이 완전히 소모되었고 목적하는 m/z 또는 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 분취-HPLC에 의해 정제하였다. 혼합물을 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 정제하였다. 화합물 8(20㎎, 19.17μ㏖, 38.35% 수율)을 무색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 2.236분, MS 계산치: 1043.2, [M/2+H] + = 522.5.
화합물 9의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00613
MeOH(2㎖) 중 화합물 8(40㎎, 38.34μ㏖, 1 eq)의 용액에 Zn(25.07㎎, 383.43μ㏖, 10 eq) 및 HCOONH4(24.18㎎, 383.43μ㏖, 10 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LC-MS는 반응물 1이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 9(38㎎, 37.36μ㏖, 97.43% 수율)를 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.748분, MS 계산치: 1016.59, [M/2+H] + = 509.5.
화합물 I-7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00614
DMF(0.5㎖) 중 화합물 9(10㎎, 9.83μ㏖, 1 eq)의 용액에 TEA(1.99㎎, 19.66μ㏖, 2.74㎕, 2 eq) 및 화합물 10(3.83㎎, 9.83μ㏖, 1 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 5분 동안 교반하였다. LC-MS는 반응물 1이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 여러 개의 새로운 피크가 LC-MS 상에서 나타났다. 목적하는 화합물의 대략 19.07%가 검출되었다. 반응 혼합물을 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 분취-HPLC(중성 조건: 칼럼: Waters Xbridge BEH C18 100*30㎜*10㎛; 이동상: [물(0.04% NH3H2O)-ACN]; B%: 1%-30%,10분)에 의해 잔사를 정제하였다. 화합물 I-7(1.68㎎, 1.19μ㏖, 12.15% 수율)을 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.403분, MS 계산치: 1405.63, [M/2+H] + = 704.2. HPLC: RT = 1.610분. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.73 (s, 1 H) 8.41 (s, 1 H) 8.24 - 8.31 (m, 1 H) 8.01 (br d, J =8.44 Hz, 1 H) 7.81 - 7.94 (m, 2 H) 7.73 (br d, J =9.41 Hz, 1 H) 7.48 (d, J =8.44 Hz, 1 H) 7.31 (d, J =8.07 Hz, 1 H) 7.17 (d, J =8.07 Hz, 1 H) 7.01 - 7.10 (m, 2 H) 6.91 - 6.98 (m, 1 H) 6.67 (d, J =1.96 Hz, 2 H) 6.52 - 6.62 (m, 5 H) 4.24 (br d, J =5.75 Hz, 1 H) 3.68 (br s, 2 H) 3.55 - 3.63 (m, 11 H) 3.45 - 3.52 (m, 38 H) 3.13 - 3.23 (m, 5 H) 3.06 (s, 3 H) 2.60 - 2.69 (m, 4 H) 2.30 - 2.40 (m, 5 H) 2.13 (t, J =7.40 Hz, 2 H) 1.66 - 1.90 (m, 4 H).
실시예 8. 화합물 I-8의 예시적인 합성.
Figure pct00615
Figure pct00616
화합물 3의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00617
DCM(2㎖) 중 화합물 1(80㎎, 79.99μ㏖, 1 eq) 및 화합물 2(17.93㎎, 159.98μ㏖, 2 eq)의 용액에 DCC(24.76㎎, 119.98μ㏖, 24.27㎕, 1.5 eq) 및 DMAP(1.95㎎, 16.00μ㏖, 0.2 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 1이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 질소 기체 하에 건조시켰다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Nano-micro Kromasil C18 80*25㎜*3㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 32%-62%, 7분)에 의해 정제하였다. 화합물 3(50㎎, 45.69μ㏖, 57.13% 수율)을 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 2.499분, MS 계산치: 1093.56, [M/2+H] + = 580.0.
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00618
THF(2㎖) 중 화합물 3(20㎎, 18.28μ㏖, 1 eq)의 용액에 Pd/C(10㎎, 18.28μ㏖, 10% 순도, 1 eq) 및 HCl(0.5M, 73.11㎕, 2 eq)을 N2 하에 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H2(15 psi) 하에 25℃에서 10분 동안 교반하였다. LC-MS는 반응물 1이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 4(19㎎, 17.79μ㏖, 97.31% 수율)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.013분, MS 계산치: 1067.57, [M/2+H] + = 535.0.
화합물 I-8의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00619
DMF(1㎖) 중 화합물 4(20㎎, 18.10μ㏖, 1 eq, HCl) 및 화합물 5(7.05㎎, 18.10μ㏖, 1 eq)의 용액에 TEA(1.83㎎, 18.10μ㏖, 2.52㎕, 1 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 5분 동안 교반하였다. LC-MS는 반응물 1이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 목적하는 화합물의 대략 23.73%가 검출되었다. 반응 혼합물을 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Phenomenex Luna C18 100*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 35%-55%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 I-8(2.08㎎, 1.43μ㏖, 7.88% 수율)을 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.845분, MS 계산치: 1456.6, [M/2+H] + = 729.7. HPLC: RT = 3.857 min. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.74 (br s, 1 H) 10.00 - 10.22 (m, 2 H) 8.27 (s, 1 H) 7.99 - 8.13 (m, 3 H) 7.70 - 7.88 (m, 2 H) 7.48 (d, J =7.82 Hz, 1 H) 6.90 - 7.34 (m, 8 H) 6.67 (d, J =1.96 Hz, 2 H) 6.53 - 6.62 (m, 3 H) 5.58 (br s, 2 H) 4.35 (br d, J =5.62 Hz, 1 H) 3.68 (br s, 2 H) 3.45 - 3.62 (m, 48 H) 3.14 - 3.24 (m, 2 H) 2.13 (br t, J =7.70 Hz, 3 H) 1.94 - 2.05 (m, 2 H) 1.80 - 1.88 (m, 2 H) 1.71 (br d, J =12.35 Hz, 6 H) 1.57 - 1.65 (m, 6 H) 1.50 (br d, J =12.72 Hz, 3 H) 1.18 - 1.28 (m, 6 H) 0.98 - 1.16 (m, 10 H).
실시예 9. 화합물 I-9의 예시적인 합성.
Figure pct00620
Figure pct00621
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00622
DCM(2㎖) 중 화합물 1(140㎎, 369.00μ㏖, 1 eq), SOCl2(131.70㎎, 1.11m㏖, 80.30㎕, 3 eq)의 혼합물을 0℃에서 탈기시키고, N2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 N2 분위기 하에 0 내지 20℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: 메탄올 = 10:1 Rf = 0.46)는 화합물 1이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 농축시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 화합물 2(146.81㎎, 조질)를 황색 오일로서 얻었다.
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00623
BH3-THF(1M, 25.79㎖, 4 eq)를 무수 THF(70㎖) 중 화합물 3(1g, 6.45m㏖, 1 eq)의 용액에 조심해서 첨가하였다. 얻어진 용액을 교반하고, 환류로 10시간 동안 가열하였다(70℃). TLC(석유 에터:에틸 아세테이트=1:1, Rf = 0.01)는 화합물 3이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 냉각시킨 후에, 6N HCl(2㎖)을 조심해서 용액에 첨가하고, 30분 동안 환류에서 가열을 계속하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 4(2.5g, 조질, HCl)를 백색 고체로서 얻었다.
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00624
NaHCO3(5㎖) 중 화합물 4(270㎎, 690.20μ㏖, 1 eq, HCl), 아세트산 무수물(84.55㎎, 828.25μ㏖, 77.57㎕, 1.2 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 20℃에서 24시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. TLC는 화합물 4가 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물은 1M HCl을 이용하여 pH 4 내지 5로 산성화시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc(30㎖*2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(30㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에터:에틸 아세테이트=10:1 내지 1:3)에 의해 정제하였다. 화합물 5(67㎎, 333.05μ㏖, 48.25% 수율)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 0.609분, MS 계산치: 201.0, [M+H] + = 202.2. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 9.99 (s, 1 H) 8.28 (br s, 1 H) 6.83 - 6.93 (m, 2 H) 4.12 (d, J = 5.95 Hz, 2 H) 1.84 (s, 3 H).
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00625
DCM(1㎖) 중 화합물 5(67㎎, 333.05μ㏖, 1 eq)의 용액에 TEA(101.10㎎, 999.16μ㏖, 139.07㎕, 3 eq)를 첨가하고, 이어서, DCM(1㎖) 중 화합물 2(145.76㎎, 366.36μ㏖, 1.1 eq)를 0℃에서 첨가하였다. 얻어진 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 농축시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 35%-65%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 6(100㎎, 177.76μ㏖, 53.37% 수율)을 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 2.129분, MS 계산치: 562.2, [M+H] + = 563.3. 1 H NMR (400 MHz, 클로로폼- d ) δ ppm 6.84 (d, J = 7.95 Hz, 2 H) 5.86 (br s, 1 H)4.33 (d, J = 6.11 Hz, 2 H) 3.81 (t, J = 6.42 Hz, 2 H) 3.53 - 3.64 (m, 23 H) 3.32 (br t, J = 5.01 Hz, 3 H) 2.85 (t, J = 6.36 Hz, 2 H) 1.99 (s, 3 H) 1.50 (s, 2 H).
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00626
THF(3㎖) 중 화합물 6(100㎎, 177.76μ㏖, 1 eq)의 용액에 HCl(0.5M, 711.04㎕, 2 eq) 및 Pd/C(100㎎, 177.76μ㏖, 10% 순도, 1.00 eq)를 N2 하에 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H2(15 psi) 하에서 20℃에서 0.2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 농축시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 15%-45%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 7(60㎎, 111.82μ㏖, 62.91% 수율)을 백색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.272분, MS 계산치: 536.2, [M+H] + = 537.3. 1 H NMR (400 MHz, 클로로폼- d ) δ ppm 7.79 (br s, 3 H) 6.98 (br d, J = 8.19 Hz, 2 H) 6.72 (br s, 1 H) 4.42 (d, J = 5.99 Hz, 2 H) 3.88 (t, J = 5.93 Hz, 2 H) 3.80 - 3.85 (m, 2 H) 3.72 - 3.76 (m, 2 H) 3.65 - 3.71 (m, 12 H) 3.13 (br s, 2 H) 2.92 (t, J = 5.87 Hz, 2 H) 2.68 (br s, 4 H) 2.08 (s, 3 H).
화합물 I-9의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00627
DMF(1.5㎖) 중 화합물 7(20㎎, 37.27μ㏖, 1 eq), 화합물 8(14.51㎎, 37.27μ㏖, 1 eq), Et3N(3.77㎎, 37.27μ㏖, 5.19㎕, 1 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. HPLC 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 농축시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 40% 내지 70%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 I-9(8㎎, 8.64μ㏖, 23.18% 수율)를 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.350분, MS 계산치: 925.2, [M/2+H] + = 463.8. HPLC: RT = 2.521분. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.03 (br s, 1 H) 8.42 (br t, J = 5.50 Hz, 1 H) 8.27 (s, 1 H) 8.09 (br s, 1 H) 7.74 (br d, J = 7.70 Hz, 1 H) 7.18 (d, J = 8.19 Hz, 1 H) 7.12 (d, J = 8.80 Hz, 2 H) 6.67 (d, J = 1.83 Hz, 2 H) 6.53 - 6.62 (m, 4 H) 4.25 (d, J = 5.99 Hz, 2 H) 3.55 - 3.63 (m, 8 H) 3.45 - 3.53 (m, 17 H) 2.93 (t, J = 5.93 Hz, 2 H) 1.89 (s, 3 H). MS: [M/2+H] + = 463.9.
실시예 10. 화합물 I-10의 예시적 합성.
Figure pct00628
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00629
DCM(1㎖) 중 화합물 1(100㎎, 263.57μ㏖, 1 eq)의 용액에 SOCl2(94.07㎎, 790.71μ㏖, 57.36㎕, 3 eq)를 0℃에서 첨가하였다. 얻어진 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. TLC는 반응이 완료되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 직접 농축시켰다. 조질의 생성물 화합물 2(104㎎, 261.40μ㏖, 99.18% 수율)를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00630
BH3-THF(1M, 29.17㎖, 4 eq)를 무수 THF(50㎖) 중 화합물 3(1g, 7.29m㏖, 1 eq)의 용액에 조심해서 첨가하였다. 얻어진 용액을 교반하고, 환류로 10시간 동안 가열하였다(70℃). TLC(석유 에터:에틸 아세테이트=1:1, Rf = 0.01)는 화합물 3이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 실온까지 냉각시킨 후에, 6N HCl(2㎖)을 조심해서 용액에 첨가하고, 이를 30분 동안 환류로 가열하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 4(2.3g, 6.48m㏖, 88.78% 수율, 50% 순도, HCl)를 백색 고체로서 얻었다.
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00631
NaHCO3 (10㎖) 중 화합물 4(1g, 2.82m㏖, 1 eq, HCl), 아세틸 아세테이트(316.15㎎, 3.10m㏖, 290.04㎕, 1.1 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 20℃에서 8시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. TLC는 화합물 4가 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물은 1M HCl을 이용하여 pH 4 내지 5로 산성화시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc(30㎖*2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(30㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에터:에틸 아세테이트= 20:1 내지 1:2)에 의해 정제하였다. 화합물 5(250㎎, 1.36m㏖, 48.48% 수율)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 0.413분, MS 계산치: 183.0, [M+H] + = 184.0. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 9.76 (s, 1 H) 8.32 (br s, 1 H) 7.03 - 7.09 (m, 1 H) 6.90 - 6.95 (m, 2 H) 4.19 (d, J = 5.87 Hz, 2 H) 1.91 (s, 3 H).
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00632
DCM(1㎖) 중 화합물 2(104㎎, 261.40μ㏖, 1 eq)의 용액에 TEA(79.35㎎, 784.20μ㏖, 109.15㎕, 3 eq)를 0℃에서 첨가하고, 이어서, DCM(1㎖) 중 화합물 5(47.88㎎, 261.40μ㏖, 1 eq)를 0℃에서 첨가하였다. 얻어진 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물의 형성을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 농축시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 25% 내지 55%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 6(82㎎, 150.58μ㏖, 57.60% 수율)을 백색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.789분, MS 계산치: 544.2, [M+H] + = 545.5. 1 H NMR (400 MHz, 클로로폼- d ) δ ppm 7.04 - 7.17 (m, 3 H) 5.92 (br s, 1 H) 4.44 (d, J = 5.87 Hz, 2 H) 3.89 (t, J = 6.36 Hz, 2 H) 3.60 - 3.73 (m, 24 H) 3.40 (br t, J = 5.07 Hz, 3 H) 2.90 (t, J = 6.36 Hz, 2 H) 2.44 (br s, 2 H) 2.07 (s, 3 H).
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00633
THF(5㎖) 중 화합물 6(82㎎, 150.58μ㏖, 1 eq)의 용액에 HCl(1M, 301.16㎕, 2 eq) 및 Pd/C(150.58μ㏖, 10% 순도, 1 eq)을 N2 하에 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H2(15 psi) 하에 20℃에서 10분 동안 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 질소 기체 하에 건조시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30 ㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 12%-42%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 7(4㎎, 7.71μ㏖, 5.12% 수율)을 백색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.356분, MS 계산치: 518.2, [M+H] + = 519.2. 1 H NMR (400 MHz, 클로로폼- d ) δ ppm 7.94 (br s, 1 H) 7.05 - 7.18 (m, 1 H) 6.31 (br s, 1 H) 4.43 (d, J = 5.75 Hz, 1 H) 3.78 - 3.91 (m, 2 H) 3.56 - 3.77 (m, 10 H) 3.11 (br s, 1 H) 2.88 (t, J = 5.93 Hz, 1 H) 2.06 (s, 1 H) 1.61 (br s, 3 H).
화합물 I-10의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00634
DMF(0.2㎖) 중 화합물 7(4㎎, 7.71μ㏖, 1 eq), 화합물 8(3.00㎎, 7.71μ㏖, 1 eq), TEA(1.56㎎, 15.43μ㏖, 2.15㎕, 2 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. HPLC 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액은 조질의 생성물이었다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 30% 내지 60%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 I-10(1.35㎎, 1.49μ㏖, 19.28% 수율)을 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.294분, MS 계산치: 907.3, [M/2+H] + = 454.8. HPLC: RT = 2.496분. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 9.89 - 10.27 (m, 2 H) 8.40 (br s, 1 H) 8.27 (br s, 1 H) 8.08 (br s, 1 H) 7.72 (br s, 1 H) 7.14 - 7.24 (m, 3 H) 7.10 (br d, J = 7.95 Hz, 1 H) 6.67 (br s, 2 H) 6.58 (q, J = 8.35 Hz, 4 H) 4.24 (br d, J = 4.77 Hz, 2 H) 3.64 - 3.77 (m, 5 H) 3.55 - 3.64 (m, 9 H) 3.50 - 3.55 (m, 13 H) 2.86 (br s, 2 H) 1.88 (s, 3 H). MS: [M/2+H] + = 455.0.
실시예 11. 화합물 I-11의 예시적 합성.
Figure pct00635
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00636
SOCl2(94.07㎎, 790.71μ㏖, 57.36㎕, 3 eq) 중 화합물 1(100㎎, 263.57μ㏖, 1 eq)의 용액에 DCM(1㎖)을 0℃에서 N2 하에 한 번에 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 30분 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: 메탄올 = 10:1, Rf = 0.5)는 화합물 1이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 주요 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 조질의 생성물 화합물 2(104.86㎎, 263.57μ㏖, 100.00% 수율)를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. 화합물 2(104.86㎎, 263.57μ㏖, 100.00% 수율)를 무색 오일로서 얻었다.
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00637
포화 NaHCO3(3㎖) 중 화합물 3(300㎎, 2.44m㏖, 1 eq)의 용액에 Ac2O (273.56㎎, 2.68mmol, 250.97㎕, 1.1 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 10시간 동안 교반하였다. TLC는 목적하는 생성물의 형성을 나타내었다(석유 에터:에틸 아세테이트 = 0:1, Rf = 0.05). 1M HCl을 이용하여 반응 혼합물을 pH 4로 산성화시키고, 이어서, 혼합물을 EtOAc(5㎖ * 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(5㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 여과액을 농축시켰다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에터/에틸 아세테이트 = 20/1 내지 1/1)(석유 에터:에틸 아세티이트 = 0:1, Rf = 0.64)에 의해 정제하였다. 화합물 4(200㎎, 1.21m㏖, 49.70% 수율)를 황색 고체로서 얻었다.
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00638
DCM(1㎖) 중 화합물 4(47.98㎎, 261.40μ㏖, 1 eq) 및 TEA(79.35㎎, 784.21μ㏖, 109.15㎕, 3 eq)의 용액에 DCM(1㎖) 중 화합물 2(104.00㎎, 261.40μ㏖, 1 eq)를 0℃에서 N2 하에 서서히 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: 메탄올 = 10:1, Rf = 0.3)는 화합물 4가 완전히 소모되었고 하나의 새로운 주요 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 분취-HPLC(칼럼: Nano-micro Kromasil C18 80* 5 ㎜*3㎛; 이동상: [물(0.1% TFA)-ACN]; B%: 20%-40%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 5(48㎎, 91.15μ㏖, 34.87% 수율)를 무색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.148분, MS 계산치: 526.2 [M+H] + = 527.2. 1 H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) δ ppm 2.03 (s, 3 H) 2.85 (t, J = 6.28 Hz, 2 H) 3.40 (d, J = 5.07 Hz, 1 H) 3.62 - 3.71 (m, 22 H) 3.87 (t, J = 6.28 Hz, 2 H) 4.43 (d, J = 5.73 Hz, 2 H) 5.78 (br s, 1 H) 7.07 (d, J = 8.38 Hz, 2 H) 7.30 (d, J = 8.38 Hz, 2 H).
화합물 I-11의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00639
DMF(0.5㎖) 중 화합물 6(30㎎, 48.81μ㏖, 1 eq, TFA) 및 화합물 7(19.01㎎, 48.81μ㏖, 1 eq)의 용액에 TEA(4.94㎎, 48.81μ㏖, 6.79㎕, 1 eq)를 0℃에서 N2 하에 한번에 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 화합물 6이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 분취-HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30 ㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 30%-60%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 I-11(4.05㎎, 4.55μ㏖, 9.32% 수율)을 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.083분, MS 계산치: 889.3 [M+H] + = 890.3; [M/2+H]+ = 445.9. HPLC: RT = 2.767분. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 1.86 (s, 3 H) 2.80 (t, J = 6.17 Hz, 2 H) 3.41 - 3.65 (m, 22 H) 3.66 - 3.77 (m, 4 H) 4.23 (d, J = 5.95 Hz, 2 H) 6.51 - 6.63 (m, 4 H) 6.67 (d, J = 2.21 Hz, 2 H) 7.04 (d, J = 8.38 Hz, 2 H) 7.18 (d, J = 8.16 Hz, 1 H) 7.27 (d, J = 8.38 Hz, 2 H) 7.73 (br d, J = 8.16 Hz, 1 H) 8.08 (br s, 1 H) 8.27 (s, 1 H) 8.35 (br t, J = 5.95 Hz, 1 H) 9.97 - 10.21 (m, 3 H). MS: MS 계산치: 889.3 [M/2+H] + = 445.9; [M+H] + = 890.5.
실시예 12. 화합물 I-12의 예시적 합성.
Figure pct00640
화합물 13의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00641
DCM(2㎖) 중 화합물 13(80㎎, 210.86μ㏖, 1 eq)의 용액에 SOCl2(75.26㎎, 632.57μ㏖, 45.89㎕, 3 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: 메탄올=10:1, Rf = 0.57)는 화합물 13이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 14(83㎎, 208.62μ㏖, 98.94% 수율)를 황색 오일로서 얻었다.
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00642
DCM(150㎖) 중 화합물 1(20g, 100.43m㏖, 1 eq) 및 화합물 1A(19.65g, 100.43m㏖, 1 eq, HCl)의 용액에 DIPEA(28.56g, 220.95m㏖, 38.49㎖, 2.2 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. TLC(석유 에터:에틸 아세테이트 = 3:1, Rf = 0.24)는 화합물 1이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 반응물을 TLC에 따라 세정하였다. 반응 혼합물에 DCM(50㎖)을 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 0.2M HCl(100mL*2)로 세척하고, 합한 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 다음 단계에 직접 사용하였다. 화합물 2(33g, 97.53m㏖, 97.11% 수율)를 황색 고체로서 얻었다.
화합물 3의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00643
THF(80㎖) 중 화합물 2(30g, 88.66m㏖, 1 eq) 및 Pd/C(88.66m㏖, 10% 순도, 1 g)의 혼합물을 탈기시키고, H2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 H2 분위기 하에 교반하였다. TLC(에틸 아세테이트, Rf = 0.5)는 화합물 2가 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 반응물을 TLC에 따라 세정하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 3(27g, 87.56m㏖, 98.75% 수율)을 황색 고체로서 얻었다.
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00644
화합물 3(27g, 87.56m㏖, 1 eq)과 화합물 3A(45.45g, 280.18m㏖, 51.36㎖, 3.2 eq)의 혼합물을 AcOH(300㎖)에서 제조하였다. 혼합물을 60℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC(에틸 아세테이트, Rf = 0.42)는 화합물 3이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 반응물을 TLC에 따라 세정하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (150㎖)와 H2O(150㎖) 사이에 배분하였다. 유기상을 분리시키고, Na2SO4로 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 4(24g, 72.20m㏖, 82.47% 수율)를 황색 고체로서 얻었다.
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00645
3가지 반응을 동시에 실행하였다. 아세토나이트릴(900㎖) 및 H2O(300㎖) 중 화합물 4(10g, 30.08m㏖, 1 eq)의 용액에 Et3N (15.22g, 150.42m㏖, 20.94㎖, 5 eq) 및 LiBr(18.29g, 210.59m㏖, 5.29㎖, 7 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 95℃에서 36시간 동안 교반하였다. Et3N(40.00g, 395.30m㏖, 55.02㎖, 13.14 eq) 및 LiBr(44.00g, 506.65m㏖, 12.72㎖, 16.84 eq)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 95℃에서 36시간 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 4가 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 3가지 반응을 함께 워크업하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 용매를 제거하였다. 잔사를 물(200ml)에 의해 용해시키고, 수성상을 수성 HCl을 이용하여 pH 5까지 산성화시키고, 고체가 형성되었다. 여과시켜서 필터 케이크를 제공하였다. 필터 케이크를 MePh(3*200ml)로 회수하고, 얻어진 용액을 진공 하에 농축시켜 생성물을 제공하였다. 화합물 5(15g, 47.12m㏖, 52.20% 수율)를 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.108분, MS 계산치:318.2, [M+H] + = 319.1.
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00646
DMF(100㎖) 중 화합물 5(16g, 50.26m㏖, 1 eq)의 용액에 HATU(19.11g, 50.26m㏖, 1 eq) 및 DIEA(25.98g, 201.03m㏖, 35.02㎖, 4 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 화합물 5A(8.91g, 50.26m㏖, 1 eq)를 반응 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 90℃에서 7.5시간 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 5가 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 잔사를 H2O(500㎖)로 희석시키고, EtOAc(500㎖*2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(100㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, DCM: MeOH =200/1 내지 0:1)에 의해 정제하였다. 화합물 6(19g, 39.78m㏖, 79.16% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.639분, MS 계산치:477.2, [M+H] + = 478.0.
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00647
DCM(5㎖) 중 화합물 6(4g, 8.38m㏖, 1 eq)의 용액에 HCl/EtOAc(4M, 3㎖, 1.43 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄:메탄올 = 10:1 Rf = 0.24)는 반응이 완료되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 7(4.3g, 8.03m㏖, 95.87% 수율, TFA)을 백색 고체로서 얻었다.
화합물 9의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00648
DMF(5㎖) 중 화합물 7(250㎎, 466.86μ㏖, 1 eq, TFA)의 용액에 Et3N(188.97㎎, 1.87m㏖, 259.93㎕, 4 eq) 및 HATU(177.51㎎, 466.86μ㏖, 1 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 화합물 8(199.00㎎, 560.23μ㏖, 1.2 eq, HCl)에 적가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. LC-MS(Rt = 0.966분)는 화합물 7이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Nano-micro Kromasil C18 80*25㎜*3㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 5%-45%, 7분)에 의해 정제하였다. 화합물 9(280㎎, 425.13μ㏖, 91.06% 수율, TFA)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 0.966분, MS 계산치: 544.2, [M+H] + = 545.3.[M/2+H] + = 273.2. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.50 - 8.68 (m, 2 H) 8.20 - 8.36 (m, 2 H) 7.90 - 8.10 (m, 3 H) 7.35 - 7.43 (m, 1 H) 6.96 - 7.05 (m, 1 H) 6.82 - 6.92 (m, 2 H) 4.36 - 4.48 (m, 2 H) 4.10 - 4.17 (m, 3 H) 2.74 - 2.86 (m, 3 H) 2.26 - 2.37 (m, 2 H) 2.01 - 2.12 (m, 2 H).
화합물 10의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00649
DMF(2㎖) 중 화합물 13(82.19㎎, 206.57μ㏖, 1.5 eq)의 용액에 Et3N (55.74㎎, 550.86μ㏖, 76.67㎕, 4 eq) 및 화합물 9(75㎎, 137.72μ㏖, 1 eq, TFA)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS(Rt = 1.769분)는 화합물 9가 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Nano-micro Kromasil C18 80*25㎜*3㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 15%-60%, 7분)에 의해 정제하였다. 화합물 10(90㎎, 99.34μ㏖, 72.13% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.290분, MS 계산치:905.4, [M/2+H] + = 453.8.
화합물 11의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00650
THF(3㎖) 중 화합물 10(90㎎, 99.34μ㏖, 1 eq), HCl(1M, 397.36㎕, 4 eq) 및 Pd/C(90㎎, 10% 순도)의 혼합물을 탈기시키고, H2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 25℃에서 30분 동안 H2 분위기 하에 교반하였다. LC-MS(Rt = 1.473분)는 화합물 10이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 현탁액을 여과시키고, 필터 케이크를 THF(5㎖×3)로 세척하였다. 합한 여과액을 농축 건조시켜 생성물을 백색 고체로서 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Nano-micro Kromasil C18 80*25㎜*3㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 5%-45%, 7분)에 의해 정제하였다. 화합물 11(30㎎, 34.09μ㏖, 34.32% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.473분, MS 계산치: 879.4, [M/2+H] + = 440.9. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.90 - 12.98 (m, 1 H) 8.61 - 8.67 (m, 1 H) 8.50 - 8.53 (m, 1 H) 8.42 - 8.49 (m, 1 H) 8.17 - 8.23 (m, 1 H) 8.04 - 8.09 (m, 1 H) 7.90 - 7.97 (m, 3 H) 7.65 - 7.81 (m, 2 H) 7.35 - 7.42 (m, 1 H) 7.16 - 7.26 (m, 2 H) 7.07 - 7.14 (m, 1 H) 4.34 - 4.44 (m, 2 H) 4.23 - 4.29 (m, 2 H) 3.71 - 3.77 (m, 4 H) 3.55 - 3.60 (m, 24 H) 2.94 - 3.02 (m, 2 H) 2.83 - 2.90 (m, 2 H) 2.73 - 2.79 (m, 3 H) 2.00 - 2.11 (m, 2 H).
화합물 I-12의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00651
DMF(1㎖) 중 화합물 11(30㎎, 34.09μ㏖, 1 eq, TFA) 및 화합물 12(10.62㎎, 27.27μ㏖, 0.8 eq)의 용액에 Et3N(6.90㎎, 68.18μ㏖, 9.49㎕, 2 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS(Rt = 2.071분)은 화합물 11이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 25%-55%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 I-12(3.80㎎, 2.99μ㏖, 8.78% 수율)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.071분, MS 계산치:1268.4, [M/2+H] + = 635.6, [M/3+H] + = 424.1. MS: MS 계산치: 1268.4, [M/2+H] + = 635.3. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.97 - 13.06 (m, 1 H) 9.99 - 10.26 (m, 2 H) 8.62 - 8.67 (m, 1 H) 8.51 - 8.56 (m, 1 H) 8.41 - 8.49 (m, 1 H) 8.23 - 8.30 (m, 2 H) 8.09 - 8.15 (m, 1 H) 8.02 - 8.09 (m, 2 H) 7.91 - 7.98 (m, 2 H) 7.70 - 7.77 (m, 1 H) 7.36 - 7.42 (m, 1 H) 7.17 - 7.24 (m, 2 H) 7.06 - 7.13 (m, 1 H) 6.65 - 6.70 (m, 2 H) 6.54 - 6.63 (m, 3 H) 4.40 - 4.48 (m, 2 H) 4.22 - 4.27 (m, 2 H) 3.72 - 3.76 (m, 2 H) 3.46 - 3.64 (m, 21 H) 2.85 - 2.89 (m, 1 H) 2.78 - 2.84 (m, 3 H) 2.31 - 2.36 (m, 2 H) 2.02 - 2.13 (m, 2 H). HPLC: 생성물의 체류 시간은 2.521분이었다.
실시예 13. 화합물 I-13의 예시적 합성.
Figure pct00652
화합물의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00653
DCM(2㎖) 중 화합물 1(80㎎, 210.86μ㏖, 1 eq)의 용액에 SOCl2(75.26㎎, 632.57μ㏖, 45.89㎕, 3 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: 메탄올=10:1, Rf = 0.57)는 화합물 1이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 2(83㎎, 208.62μ㏖, 98.94% 수율)를 황색 오일로서 얻었다.
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00654
DMF(5㎖) 중 화합물 3(300㎎, 560.23μ㏖, 1 eq, TFA)의 용액에 Et3N(170.07㎎, 1.68m㏖, 233.93㎕, 3 eq) 및 HATU(213.02㎎, 560.23μ㏖, 1 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 화합물 4(89.69㎎, 728.30μ㏖, 1.3 eq)에 적가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. LC-MS(Rt = 0.979분)는 화합물 3이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 10%-40%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 5(280㎎, 437.07μ㏖, 78.02% 수율, TFA)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 0.979분, MS 계산치: 526.2, [M+H] + = 527.2. [M/2+H] + = 264.1. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.95 - 13.15 (m, 1 H) 8.62 - 8.74 (m, 1 H) 8.52 - 8.59 (m, 1 H) 8.18 - 8.40 (m, 2 H) 8.03 - 8.14 (m, 2 H) 7.88 - 8.02 (m, 2 H) 7.34 - 7.49 (m, 1 H) 6.98 - 7.15 (m, 2 H) 6.60 - 6.79 (m, 2 H) 4.35 - 4.54 (m, 2 H) 4.07 - 4.17 (m, 2 H) 2.75 - 2.92 (m, 3 H) 2.23 - 2.39 (m, 2 H) 1.96 - 2.15 (m, 2 H).
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00655
DMF(2㎖) 중 화합물 2(74.52㎎, 187.32μ㏖, 1.5 eq)의 용액에 Et3N(50.55㎎, 499.51μ㏖, 69.53㎕, 4 eq) 및 화합물 5(80㎎, 124.88μ㏖, 1 eq, TFA)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS(Rt = 1.769 분)는 남아있는 화합물 5의 대략 50% 및 목적하는 화합물의 대략 50%를 나타내었다. 반응 혼합물을 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Nano-micro Kromasil C18 80*25㎜*3㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 10%-54%, 7분)에 의해 정제하였다. 화합물 6(50㎎, 56.31μ㏖, 45.09% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.769분, MS 계산치: 887.4, [M/2+H] + = 444.9.
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00656
THF(3㎖) 중 화합물 6(160㎎, 180.18μ㏖, 1 eq), HCl(1M, 720.72uL, 4 eq) 및 Pd/C(160㎎, 10% 순도)의 혼합물을 탈기시키고, H2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 25℃에서 30분 동안 H2 분위기 하에 교반하였다. LC-MS(Rt = 0.968분)는 화합물 6이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건：칼럼: Nano-micro Kromasil C18 80*25㎜*3㎛; 이동상: [물(0.1% TFA)-ACN]; B%: 10%-40%, 7분)에 의해 정제하였다. 화합물 7(45㎎, 52.20μ㏖, 28.97% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.413분, MS 계산치: 861.4, [M/2+H] + = 431.9. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.87 - 12.99 (m, 1 H) 8.60 - 8.68 (m, 1 H) 8.49 - 8.55 (m, 1 H) 8.38 - 8.45 (m, 1 H) 8.17 - 8.24 (m, 1 H) 8.03 - 8.08 (m, 1 H) 7.88 - 7.98 (m, 2 H) 7.63 - 7.83 (m, 2 H) 7.35 - 7.42 (m, 1 H) 7.23 - 7.31 (m, 1 H) 7.02 - 7.09 (m, 1 H) 4.35 - 4.45 (m, 1 H) 4.22 - 4.27 (m, 1 H) 3.44 - 3.68 (m, 29 H) 2.96 - 3.03 (m, 2 H) 2.78 - 2.84 (m, 3 H) 2.72 - 2.78 (m, 3 H) 2.25 - 2.33 (m, 2 H) 2.00 - 2.11 (m, 1 H).
I-13의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00657
DMF(1㎖) 중 화합물 7(45㎎, 46.11μ㏖, 1 eq, TFA) 및 화합물 8(14.36㎎, 36.88μ㏖, 0.8 eq)의 용액에 Et3N(9.33㎎, 92.21μ㏖, 12.83㎕, 2 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS(Rt = 1.240분)는 화합물 7이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; Welch Ultimate AQ-C18 150*30㎜*5um, 물(0.1%TFA)-ACN)에 의해 정제하였다. 화합물 I-13(3.83㎎, 3.06μ㏖, 6.64% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.240분, MS 계산치: 1250.4, [M/2+H] + = 626.4, [M/3+H] + = 417.9. MS: MS 계산치:v1250.4, [M/2+H] + = 626.8. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ12.96 - 13.08 (m, 1 H) 10.14 (br s, 2 H) 8.63 - 8.66 (m, 1 H) 8.52 - 8.56 (m, 1 H) 8.35 - 8.44 (m, 1 H) 8.24 - 8.30 (m, 1 H) 8.10 - 8.14 (m, 1 H) 8.03 - 8.09 (m, 1 H) 7.91 - 7.98 (m, 1 H) 7.71 - 7.78 (m, 1 H) 7.36 - 7.43 (m, 1 H) 7.22 - 7.30 (m, 1 H) 7.16 - 7.21 (m, 1 H) 7.00 - 7.07 (m, 1 H) 6.66 - 6.70 (m, 1 H) 6.53 - 6.64 (m, 3 H) 4.40 - 4.48 (m, 2 H) 4.21 - 4.28 (m, 3 H) 3.68 - 3.75 (m, 4 H) 3.44 - 3.68 (m, 19 H) 2.75 - 2.91 (m, 4 H) 2.30 - 2.36 (m, 3 H) 2.04 - 2.14 (m, 3 H). HPLC: 생성물의 체류 시간은 HPLC에서 2.209분이었다.
실시예 14. 화합물 I-14의 예시적 합성.
Figure pct00658
Figure pct00659
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00660
DCM(0.5㎖) 중 화합물 1(250㎎, 658.93μ㏖, 1 eq)의 용액에 SOCl2(235.18㎎, 1.98m㏖, 143.40㎕, 3 eq)를 0℃에서 N2 하에 한 번에 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 30분 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: 메탄올 = 10:1, Rf = 0.6)는 화합물 1이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 농축시켜 화합물 2(260㎎, 653.51μ㏖, 99.18% 수율)를 무색 오일로서 제공하였다.
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00661
DMF(2㎖) 중 화합물 3(300㎎, 535.82μ㏖, 1 eq, 3HCl)의 용액에 HATU(203.74㎎, 535.82μ㏖, 1 eq) 및 Et3N(325.32㎎, 3.21m㏖, 447.48㎕, 6 eq)을 0℃에서 N2 하에 한 번에 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였고, 이어서, 혼합물을 DMF(1㎖) 중 화합물 4(228.39㎎, 642.98μ㏖, 1.2 eq, HCl)의 용액에 0℃에서 N2 하에 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 30분 동안 교반하였다. LCMS는 화합물 3이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 분취-HPLC(칼럼: Nano-micro Kromasil C18 80*25 ㎜*3㎛; 이동상: [물(0.1% TFA) - ACN]; B%: 20%-60%, 7분)에 의해 정제하여 화합물 5(300㎎, 327.62μ㏖, 61.14% 수율, 3TFA)를 핑크색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 2.141분, MS 계산치: 573.3, [M+H] + = 574.3. 1 H NMR (400 MHz, 클로로폼- d ) δ ppm 7.29 - 7.42 (m, 2 H) 6.95 - 7.16 (m, 5 H) 6.85 - 6.95 (m, 2 H) 4.50 - 4.65 (m, 2 H) 4.35 (br d, J = 5.26 Hz, 2 H) 3.76 (br s, 2 H) 3.50 - 3.68 (m, 5 H) 3.27 - 3.49 (m, 6 H) 2.53 (br t, J = 5.14 Hz, 2 H) 1.55 (br d, J = 7.46 Hz, 2 H) 1.28 - 1.43 (m, 2 H) 0.87 - 0.99 (m, 3 H).
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00662
DCM(4㎖) 중 화합물 5(300㎎, 327.62μ㏖, 1 eq, 3TFA)의 용액에 화합물 2(156.41㎎, 393.14μ㏖, 1.2 eq) 및 Et3N(165.76㎎, 1.64m㏖, 228.00㎕, 5 eq)를 0℃에서 N2 하에 한 번에 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 화합물 5가 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 TFA로 pH 6 내지 7까지 산성화시켰고, 농축시켰다. 잔사를 분취-HPLC(칼럼: Nano- micro Kromasil C18 80*25 ㎜*3㎛; 이동상: [물(0.1% TFA) - ACN]; B%: 20%-76%, 7분)에 의해 정제하여 화합물 6(300㎎, 234.91μ㏖, 71.70% 수율, 3TFA)을 무색 오일로서 제공하였다. LCMS: RT = 2.514분, MS 계산치: 934.5, [M+H] + = 935.5. 1 H NMR (400 MHz, 클로로폼- d ) δ ppm 7.31 (br s, 2 H) 6.92 - 7.20 (m, 6 H) 4.59 (br d, J = 5.75 Hz, 2 H) 4.42 (br d, J = 5.75 Hz, 1 H) 4.33 - 4.49 (m, 1 H) 3.75 - 3.92 (m, 3 H) 3.30 - 3.73 (m, 38 H) 2.81 - 2.91 (m, 2 H) 2.55 (br d, J = 5.01 Hz, 2 H) 1.55 (dt, J = 14.18, 7.09 Hz, 2 H) 1.22 - 1.44 (m, 2 H) 0.83 - 1.00 (m, 3 H).
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00663
THF(3㎖) 중 화합물 6(100㎎, 106.95μ㏖, 1 eq)의 용액에 Pd/C(100㎎, 106.95μ㏖, 10% 순도) 및 HCl(1M, 427.80㎕, 4 eq)을 N2 하에 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H2(215.60 ug, 106.95μ㏖)(15 psi) 하에 20℃에서 15분 동안 교반하였다. LCMS는 화합물 6이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 aq NaHCO3으로 pH 5 내지 6까지 염기성화시켰고, 여과 후, 농축시켰다. 잔사를 분취-HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ- C18 150*30 ㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1% TFA) - CAN]; B%: 25%-55%, 12분)에 의해 정제하여 화합물 7(60㎎, 66.00μ㏖, 61.72% 수율)을 무색 오일로서 제공하였다. LCMS: RT = 2.027분, MS 계산치: 908.5, [M+H] /2+ = 455.4. 1 H NMR (400 MHz, 클로로폼- d ) δ ppm 7.78 (br s, 3 H) 7.52 (br d, J = 8.56 Hz, 1 H) 6.94 - 7.16 (m, 6 H) 4.52 - 4.65 (m, 2 H) 4.41 (br d, J=5.50 Hz, 2 H) 3.77 - 3.89 (m, 6 H) 3.27 - 3.75 (m, 33 H) 2.87 (br d, J = 5.50 Hz, 3 H) 2.56 (br s, 3 H) 1.55 (br dd, J = 14.79, 7.09 Hz, 2 H) 1.28 - 1.43 (m, 2 H) 0.87 - 0.97 (m, 2 H) 0.84 - 0.97 (m, 1 H).
화합물 I-14의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00664
DMF(1㎖) 중 화합물 7(60㎎, 47.96μ㏖, 1 eq, 3TFA) 및 화합물 7A(18.67㎎, 47.96μ㏖, 1 eq)의 혼합물에 20℃에서 N2 하에 Et3N(4.85㎎, 47.96μ㏖, 6.68㎕, 1 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 15분 동안 교반하였고, 이어서, Et3N(4.85㎎, 47.96μ㏖, 6.68㎕, 1 eq)을 20℃에서 첨가하고, 15분 동안 교반하였다. LCMS는 화합물 7이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 TFA로 pH 6까지 산성화시켰다. 혼합물을 분취-HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ- C18 150*30 ㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1% TFA) - ACN]; B%: 48%- 58%, 12분)에 의해 정제하여 화합물 I-14(4.66㎎, 3.59μ㏖, 7.48% 수율)를 황색 고체로서 제공하였다. LCMS: RT = 1.368분, MS 계산치: 1297.5, [M+H]/2 + = 650.0. HPLC: RT = 3.123분. MS: MS 계산치: 1297.5, [M+H]/2 + = 650.3. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.06 (br s, 1 H) 9.97 - 10.27 (m, 1 H) 8.56 - 8.96 (m, 1 H) 8.45 (br d, J=5.95 Hz, 1 H) 8.27 (s, 1 H) 8.13 (br s, 1 H) 7.83 - 8.05 (m, 1 H) 7.74 (br d, J=8.16 Hz, 1 H) 7.34 - 7.43 (m, 1 H) 7.04 - 7.24 (m, 7 H) 6.67 (d, J=2.21 Hz, 2 H) 6.52 - 6.62 (m, 4 H) 4.51 (br d, J=14.77 Hz, 2 H) 4.27 (br d, J=5.29 Hz, 2 H) 3.16 - 3.75 (m, 38 H) 2.85 (t, J=6.06 Hz, 2 H) 2.35 - 2.42 (m, 2 H) 1.43 - 1.56 (m, 1 H) 1.15 - 1.42 (m, 3 H) 0.77 - 0.92 (m, 2 H) 0.76 - 0.93 (m, 1 H).
실시예 15. 화합물 I-15의 예시적 합성.
Figure pct00665
Figure pct00666
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00667
DCM(1㎖) 중 화합물 1(110㎎, 289.93μ㏖, 1 eq)의 용액에 SOCl2(103.48㎎, 869.78μ㏖, 63.10㎕, 3 eq)를 0℃에서 N2 하에 한 번에 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 30분 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: 메탄올 = 10:1, Rf = 0.64)는 출발 물질이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 용매를 제거하여 화합물 2(116㎎, 조질)를 무색 오일로서 제공하였고, 다음 단계를 위해 직접 사용하였다.
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00668
DMF(3㎖) 중 화합물 3(300㎎, 535.82μ㏖, 1 eq, 3HCl)의 용액에 HATU(224.11㎎, 589.40μ㏖, 1.1 eq) 및 DIEA(415.50㎎, 3.21m㏖, 559.97㎕, 6 eq)를 0℃에서 N2 하에 한 번에 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 20분 동안 교반하였고, 이어서, 혼합물을 0℃에서 DMF(0.5㎖) 중 화합물 4(79.18㎎, 642.98μ㏖, 1.2 eq)의 용액에 서서히 첨가하고 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응물을 여과시키고, 여과액에 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 정제하여 화합물 5(200㎎, 222.79μ㏖, 41.58% 수율, 3TFA)를 갈색 오일로서 제공하였다. LCMS: RT = 2.189분, MS 계산치: 555.3, [M+H] + =556.3. 1 H NMR: (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 9.28 (br s, 1 H) 7.81 - 8.92 (m, 4 H) 7.30 - 7.46 (m, 1 H) 6.96 - 7.25 (m, 5 H) 6.69 (d, J=8.31 Hz, 2 H) 4.51 (br d, J=11.37 Hz, 2 H) 4.14 (br d, J=5.50 Hz, 2 H) 3.10 - 3.71 (m, 12 H) 2.35 (br d, J=4.28 Hz, 2 H) 1.12 - 1.58 (m, 4 H) 0.74 - 0.97 (m, 3 H).
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00669
DCM(2㎖) 중 화합물 5(200㎎, 222.79μ㏖, 1 eq, 3TFA)의 용액에 TEA(135.26㎎, 1.34m㏖, 186.06㎕, 6 eq)를 0℃에서 N2 하에 한 번에 첨가하였다. 이어서, DCM(1㎖) 중 화합물 2(106.36㎎, 267.35μ㏖, 1.2 eq)의 용액을 반응 혼합물에 서서히 첨가하고, 혼합물을 20℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 화합물 5의 대략 20%가 남아있고, 목적하는 화합물의 대략 70%가 형성되었다는 것을 나타내었다. 용매를 제거하여 잔사를 제공하고, 잔시를 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 정제하여 화합물 6(200㎎, 193.98μ㏖, 87.07% 수율, TFA)을 밝은 황색 오일로서 제공하였다. LCMS: RT = 1.445분, MS 계산치: 916.5, [M+H] + = 917.7. 1 H NMR: (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 8.40 (br d, J=5.50 Hz, 1 H) 7.37 (br d, J=5.99 Hz, 1 H) 7.27 (d, J=8.31 Hz, 2 H) 6.99 - 7.20 (m, 5 H) 4.50 (br d, J=11.25 Hz, 2 H) 4.26 (br d, J=5.75 Hz, 2 H) 3.73 (t, J=6.17 Hz, 2 H) 3.57 - 3.66 (m, 5 H) 3.44 - 3.57 (m, 32 H) 3.26 (br s, 1 H) 2.80 (t, J=6.11 Hz, 2 H) 2.44 (br t, J=6.42 Hz, 1 H) 2.38 (br d, J=4.40 Hz, 2 H) 1.13 - 1.55 (m, 4 H) 0.72 - 0.94 (m, 3 H).
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00670
THF(5㎖) 중 화합물 6(170㎎, 164.88μ㏖, 1 eq, TFA) 및 HCl(1M, 659.52㎕, 4 eq)의 혼합물에 Pd/C(24㎎, 10% 순도)를 N2 하에 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H2(15 psi) 하에서 20℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 농축시켜 잔사를 제공하였고 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 정제하여 화합물 7(100㎎, 99.50μ㏖, 60.35% 수율, TFA)을 무색 오일로서 제공하였다. LCMS: RT = 2.018분, MS 계산치: 980.5, [M+H] + = 891.5. 1 H NMR: (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 8.41 (br d, J=6.11 Hz, 1 H) 7.76 (br s, 3 H) 7.32 - 7.43 (m, 1 H) 7.27 (d, J=8.44 Hz, 2 H) 6.99 - 7.20 (m, 5 H) 4.50 (br d, J=10.76 Hz, 2 H) 4.26 (br d, J=5.75 Hz, 2 H) 3.73 (t, J=6.17 Hz, 3 H) 3.53 - 3.66 (m, 21 H) 3.34 - 3.51 (m, 14 H) 2.92 - 3.04 (m, 2 H) 2.80 (t, J=6.17 Hz, 2 H) 2.38 (br d, J=3.42 Hz, 2 H) 1.15 - 1.55 (m, 4 H) 0.76 - 0.95 (m, 3 H).
화합물 I-15의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00671
DMF(1㎖) 중 화합물 7(100㎎, 112.23μ㏖, 1 eq) 및 3',6'- 다이하이드록시- 6-아이소티오사이아네이토-스피로[아이소벤조퓨란-3,9'-잔텐]-1-온(34.96㎎, 89.78μ㏖, 0.8 eq)의 혼합물에 20℃에서 N2 하에 TEA(11.36㎎, 112.23μ㏖, 15.62㎕, 1 eq)를 서서히 첨가하였다. 5분 동안 교반한 후에, TEA(13.63㎎, 134.67μ㏖, 18.75㎕, 1.2 eq)를 혼합물에 서서히 첨가하였고, 혼합물을 20℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 TFA로 pH 5 내지 6까지 산성화시키고, 이어서, 용매를 제거하고, 잔사를 제공하고, 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 정제하여 화합물 I-15(7.08㎎, 5.53μ㏖, 4.93% 수율)를 갈색 고체로서 제공하였다. LCMS: RT = 2.582분, MS 계산치:1279.5, [M/2+H] + =641.0. MS: MS 계산치: 1279.5, [M/2+H] + = 641.3, [M/3+H] + = 427.9. 1 H NMR: (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 9.99 - 10.27 (m, 2 H) 8.45 - 8.97 (m, 1 H) 8.40 (br d, J=5.62 Hz, 1 H) 8.21 - 8.32 (m, 1 H) 8.13 (br s, 1 H) 7.95 (br s, 1 H) 7.74 (br d, J=8.19 Hz, 1 H) 7.32 - 7.43 (m, 1 H) 7.26 (d, J=8.44 Hz, 2 H) 6.98 - 7.21 (m, 6 H) 6.67 (d, J=2.08 Hz, 2 H) 6.52 - 6.62 (m, 4 H) 4.46 - 4.56 (m, 2 H) 4.26 (br d, J=5.01 Hz, 2 H) 3.35 - 3.77 (m, 33 H) 3.27 (br s, 2 H) 2.79 (t, J=6.11 Hz, 2 H) 2.34 - 2.41 (m, 2 H) 1.11 - 1.58 (m, 3 H) 1.11 - 1.58 (m, 1 H) 0.70 - 0.95 (m, 3 H).
실시예 16. 화합물 I-16의 예시적 합성.
Figure pct00672
Figure pct00673
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00674
DCM(1㎖) 중 화합물 1(150㎎, 395.36μ㏖, 1 eq)의 용액에 0℃에서 N2 하에 한 번에SOCl2(282.22㎎, 2.37m㏖, 172.08㎕, 6 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 30분 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: 메탄올=10:1，Rf=0.5)는 화합물 1이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 주요 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 농축시켰다. 조질의 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. 화합물 2(157㎎, 394.62μ㏖, 99.81% 수율)를 무색 오일로서 얻었다.
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00675
MeOH(15㎖) 중 화합물 3(500㎎, 3.22m㏖, 1 eq)의 용액에 Pd/C(50㎎, 10% 순도) 및 HCl(12M, 2㎖, 7.44 eq)을 N2 하에 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H2(15 psi) 하에서 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. TLC는 반응이 완료되었다는 것을 나타내었다(석유 에터:에틸 아세테이트=1:1, Rf = 0.57). 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 농축시켜 화합물 4(0.35g, 2.20m㏖, 68.23% 수율)를 황색 고체로서 제공하였다.
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00676
DMF(2㎖) 중 화합물 4A(300㎎, 1.48m㏖, 1 eq)의 용액에 HATU(561.26㎎, 1.48m㏖, 1 eq) 및 Et3N(597.47㎎, 5.90m㏖, 821.83㎕, 4 eq)를 0℃에서 N2 하에 한 번에 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였고, 이어서, 혼합물을 0℃에서 DMF(1㎖) 중 화합물 4(320.80㎎, 1.48m㏖, 1 eq, HCl)에 첨가하였고, 20℃에서 30분 동안 교반하였다. LCMS는 화합물 4가 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 분취-HPLC(칼럼: Phenomenex Luna C18 100*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 25%-50%, 12분)에 의해 정제하여 화합물 5(250㎎, 726.00μ㏖, 49.18% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. LCMS: RT =1.891분, MS 계산치: 344.1, [M+H] + = 345.2.
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00677
DCM(2㎖) 중 화합물 5(130㎎, 377.52μ㏖, 1 eq) 및 화합물 2(150.20㎎, 377.52μ㏖, 1 eq)의 혼합물에 TEA(114.60㎎, 1.13m㏖, 157.64㎕, 3 eq)를 0℃에서 N2 하에 서서히 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 10시간 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: MeOH = 0:1, Rf = 0.6)는 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 농축시켰다. 잔사를 분취-HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1% TFA)-ACN]; B%: 42%-72%, 12분)에 의해 정제하여 화합물 6(140㎎, 198.37μ㏖, 52.55% 수율)을 백색 오일로서 제공하였다.
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00678
THF(3㎖) 중 화합물 6(130㎎, 184.20μ㏖, 1 eq)의 용액에 HCl(1M, 736.81㎕, 4 eq) 및 Pd/C(50㎎, 10% 순도)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 10분 동안 H2(15 psi) 하에 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물의 형성을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 분취-HPLC(칼럼: Nano-micro Kromasil C18 80*25㎜*3㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 18%-52%, 7분)에 의해 직접 정제하여 화합물 7(45㎎, 66.20μ㏖, 35.94% 수율)을 무색 오일로서 제공하였다. LCMS: RT = 2.071분, MS 계산치: 679.3, [M+H]/2 + = 680.4.
화합물 I-16의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00679
DMF(0.5㎖) 중 화합물 7(40㎎, 50.39μ㏖, 1 eq, TFA)의 용액에 화합물 8 (19.62㎎, 50.39μ㏖, 1 eq) 및 TEA(5.10㎎, 50.39μ㏖, 7.01㎕, 1 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물의 형성을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 분취-HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 45%-75%, 12분)에 의해 직접 정제하여 화합물 I-16(5.31㎎, 4.86μ㏖, 9.65% 수율, 97.9% 순도)을 황색 고체로서 제공하였다. LCMS: RT = 2.622분, MS 계산치: 1068.3, [M+H]/2 + = 535.5. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.76 (br s, 1 H) 9.95 - 10.23 (m, 2 H) 8.37 - 8.45 (m, 1 H) 8.27 (s, 1 H) 8.09 (br s, 1 H) 7.73 (br d, J=6.60 Hz, 1 H) 7.48 (br d, J=8.07 Hz, 1 H) 7.32 (d, J=8.07 Hz, 1 H) 7.08 - 7.22 (m, 3 H) 7.05 (br t, J=7.46 Hz, 1 H) 6.90 - 6.98 (m, 1 H) 6.67 (d, J=1.96 Hz, 2 H) 6.51 - 6.63 (m, 3 H) 4.27 (br d, J=5.38 Hz, 2 H) 3.40 - 3.64 (m, 27 H) 2.87 - 2.98 (m, 2 H) 2.62 - 2.72 (m, 2 H) 2.16 - 2.27 (m, 5 H) 1.83 - 1.99 (m, 2 H). HPLC: RT = 3.216분. MS: MS 계산치: 1068.3, [M+H]/2 + = 535.6.
실시예 17. 화합물 I-17의 예시적 합성.
Figure pct00680
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00681
DCM(1㎖) 중 화합물 1(500㎎, 1.32m㏖, 1 eq)의 용액에 0℃에서 N2하에 한 번에SOCl2(470.36㎎, 3.95m㏖, 286.80㎕, 3 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 30분 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: 메탄올 = 10:1, Rf = 0.64)는 출발 물질이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 용매를 제거하여 화합물 2(520㎎, 조질)를 무색 오일로서 제공하였고, 다음 단계를 위해 직접 사용하였다.
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00682
DMF(2㎖) 중 화합물 4(260㎎, 1.28m㏖, 1 eq)의 용액에 HATU(535.07㎎, 1.41m㏖, 1.1 eq) 및 DIEA(496.02㎎, 3.84m㏖, 668.49㎕, 3 eq)를 0℃에서 N2하에 한 번에 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였고, 이어서, 혼합물을 0℃에서 DMF(2㎖) 중 화합물 3(433.35㎎, 1.54m㏖, 1.2 eq)의 용액에 서서히 첨가하고 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 농축시켜 잔사를 제공하였고 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 정제하여 화합물 5(330㎎, 1.01m㏖, 79.04% 수율)를 백색 오일로서 제공하였다. LCMS: RT = 1.843분, MS 계산치: 326.1, [M+H] + = 327.2. 1 H NMR: (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.74 (br s, 1 H) 9.66 (br s, 1 H) 8.24 (s, 1 H) 7.47 (d, J=7.83 Hz, 1 H) 7.32 (d, J=8.19 Hz, 1 H) 6.84 - 7.10 (m, 5 H) 4.15 (d, J=5.75 Hz, 2 H) 2.66 (br t, J=7.27 Hz, 2 H) 2.18 (br t, J=7.58 Hz, 2 H) 1.82 - 1.94 (m, 1 H) 1.82 - 1.94 (m, 1 H).
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00683
DCM(2㎖) 중 화합물 5(330㎎, 1.01m㏖, 1 eq)의 용액에 0℃에서 N2 하에 한 번에 TEA(613.90㎎, 6.07m㏖, 844.43㎕, 6 eq)를 첨가하였다. 이어서, DCM(2㎖) 중 화합물 2(482.74㎎, 1.21m㏖, 1.2 eq)의 용액을 반응 혼합물에 서서히 첨가하고, 혼합물을 20℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 질량을 갖는 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 용매를 제거하여 잔사를 제공하였고, 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 정제하여 화합물 6(400㎎, 581.60μ㏖, 57.52% 수율)을 무색 오일로서 제공하였다. LCMS: RT = 2.476분, MS 계산치:687.3, [M+H] + =688.4. 1 H NMR: (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.76 (br s, 1 H) 8.39 (t, J=5.99 Hz, 1 H) 7.49 (d, J=7.83 Hz, 1 H) 7.33 (d, J=8.07 Hz, 1 H) 7.17 - 7.25 (m, 2 H) 7.09 - 7.13 (m, 2 H) 7.06 (t, J=7.15 Hz, 1 H) 6.93 - 6.99 (m, 1 H) 4.28 (d, J=5.50 Hz, 2 H) 3.75 (t, J=6.11 Hz, 2 H) 3.58 - 3.61 (m, 2 H) 3.49 - 3.57 (m, 22 H) 3.35 - 3.42 (m, 2 H) 2.87 (t, J=6.11 Hz, 2 H) 2.68 (t, J=7.46 Hz, 2 H) 2.23 (t, J=7.46 Hz, 2 H) 1.91 (quin, J=7.49 Hz, 2 H).
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00684
THF(5㎖) 중 화합물 6(120㎎, 174.48μ㏖, 1 eq) 및 HCl(1M, 523.44㎕, 3 eq)의 용액에 Pd/C(120㎎, 10% 순도)를 N2 하에 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H2(15 psi) 하에서 20℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 포화 NaHCO3 aq.로 pH 5 내지 6까지 염기성화시켜, 이어서, 혼합물을 농축시키고 나서, 잔사를 제공하였고, 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 정제하여 화합물 7(70㎎, 105.78μ㏖, 60.63% 수율)을 무색 오일로서 제공하였다. LCMS: RT = 2.005분, MS 계산치: 661.3, [M+H] + =662.4. 1 H NMR: (400 MHz, 클로로폼- d ) δ ppm 8.54 (br s, 1 H) 7.90 (br s, 2 H) 7.57 (d, J=7.82 Hz, 1 H) 7.35 (d, J=8.07 Hz, 1 H) 7.13 - 7.19 (m, 1 H) 7.01 - 7.11 (m, 4 H) 6.95 (d, J=1.71 Hz, 1 H) 6.36 (br t, J=5.81 Hz, 1 H) 4.35 (d, J=5.99 Hz, 2 H) 3.85 (t, J=5.93 Hz, 2 H) 3.69 - 3.75 (m, 2 H) 3.52 - 3.68 (m, 20 H) 3.07 (br s, 2 H) 2.73 - 2.91 (m, 4 H) 2.23 - 2.31 (m, 2 H) 2.07 (quin, J=7.34 Hz, 2 H).
화합물 I-17의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00685
DMF(1㎖) 중 화합물 7(70㎎, 105.78μ㏖, 1 eq) 및 3',6'-다이하이드록시-6- 아이소티오사이아네이토-스피로[아이소벤조퓨란-3,9'-잔텐]-1-온(32.95㎎, 84.62μ㏖, 0.8 eq)의 혼합물에 TEA(10.70㎎, 105.78μ㏖, 14.72㎕, 1 eq)를 20℃에서 N2 하에 서서히 첨가하였다. 5분 동안 교반한 후에, TEA(12.84㎎, 126.94μ㏖, 17.67㎕, 1.2 eq)를 혼합물에 서서히 첨가하였고, 혼합물을 20℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 TFA로 pH 5 내지 6까지 산성화시키고, 이어서, 용매를 제거하여 잔사를 제공하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 정제하여 화합물 I-17(8.42㎎, 8.01μ㏖, 7.57% 수율)을 갈색 고체로서 제공하였다. LCMS: RT = 2.781분, MS 계산치:1050.4, [M/2+H] + =526.4. MS: MS 계산치: 1050.4, [M/2+H] + = 526.6. 1 H NMR: (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.74 (br s, 1 H) 9.94 - 10.25 (m, 2 H) 8.37 (t, J=6.24 Hz, 1 H) 8.27 (s, 1 H) 8.08 (br s, 1 H) 7.73 (br d, J=7.70 Hz, 1 H) 7.48 (d, J=7.95 Hz, 1 H) 7.32 (d, J=8.07 Hz, 1 H) 7.15 - 7.23 (m, 3 H) 7.07 - 7.12 (m, 2 H) 7.04 (t, J=7.15 Hz, 1 H) 6.92 - 6.98 (m, 1 H) 6.67 (d, J=2.20 Hz, 2 H) 6.52 - 6.63 (m, 4 H) 4.27 (d, J=5.87 Hz, 2 H) 3.73 (t, J=6.11 Hz, 2 H) 3.68 (br s, 2 H) 3.58 - 3.63 (m, 2 H) 3.47 - 3.57 (m, 22 H) 2.81 - 2.89 (m, 2 H) 2.66 - 2.71 (m, 2 H) 2.22 (t, J=7.46 Hz, 2 H) 1.90 (quin, J=7.49 Hz, 2 H).
실시예 18. 화합물 I-18의 예시적 합성.
Figure pct00686
Figure pct00687
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00688
DCM(2㎖) 중 화합물 1(130㎎, 342.64μ㏖, 1 eq) 및 SOCl2(122.29㎎, 1.03m㏖, 74.57㎕, 3 eq)의 혼합물을 0℃에서 탈기시키고, N2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 20℃에서 0.5시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: 메탄올 = 10:1 Rf = 0.46)는 화합물 1이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 DCM과 함께 3회 공증발시켜 과량의 SOCl2를 제공하였다. 화합물 2(136㎎, 조질)를 황색 오일로서 얻었다.
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00689
SOCl2(3.28g, 27.57m㏖, 2㎖, 43.04 eq) 중 화합물 3(100㎎, 640.57μ㏖, 1 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 110℃에서 0.5시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: 메탄올 = 10:1 Rf = 0.38)는 화합물 3이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 DCM과 함께 3회 공증발시켜 과량의 SOCl2를 제공하였다. 화합물 4(112㎎, 조질)를 백색 오일로서 얻었다.
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00690
DCM(2㎖) 중 CH3CH2NH2·HCl(518.54㎎, 6.36m㏖, 10 eq)의 용액에 TEA(1.29g, 12.72m㏖, 1.77㎖, 20 eq)를 0℃에서 첨가하였다. 첨가 후에, 혼합물을 10분 동안 이 온도에서 교반하였고, 이어서, DCM(1㎖) 중 화합물 4(111㎎, 635.90μ㏖, 1 eq)의 용액을 0℃에서 적가하였다. 얻어진 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물에 DCM(10㎖) 및 H2O(5㎖)를 첨가하였다. 유기상을 분리시키고, 수성상을 1M HCl로 pH 3 내지 4까지 산성화시키고, 수성상을 DCM으로 각 회차마다 10㎖로 2회 추출하였다. 모든 유기상을 합하고, 포화 염수(10㎖)로 1회 세척하고 나서, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과 후 교반 건조시켰다. 화합물 5(60㎎, 327.55μ㏖, 51.51% 수율)를 황색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 0.799분, MS 계산치: 183.0, [M+H] + = 184.2. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.47 (br s, 1 H) 8.35 (br s, 1 H) 7.69 (dd, J = 12.41, 1.90 Hz, 1 H) 7.60 (br d, J = 8.44 Hz, 1 H) 7.00 - 7.09 (m, 1 H) 3.27 - 3.34 (m, 2 H) 1.16 (t, J = 7.15 Hz, 3 H).
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00691
DCM(1㎖) 중 화합물 5(60㎎, 327.55μ㏖, 1 eq)의 용액에 TEA(99.43㎎, 982.64μ㏖, 136.77㎕, 3 eq)를 0℃에서 첨가하였다. 첨가 후에, 혼합물을 이 온도에서 0.5시간 동안 교반하였고, 이어서, DCM(1㎖) 중 화합물 2(130.32㎎, 327.55μ㏖, 1 eq)의 용액을 0℃에서 첨가하였다. 얻어진 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 질소 기체 하에 건조시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1% TFA)-ACN]; B%: 27%-57%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 6(90㎎, 165.27μ㏖, 50.46% 수율)을 백색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 2.130분, MS 계산치: 544.2, [M+H] + = 545.3. 1 H NMR (400 MHz, 클로로폼- d ) δ ppm 7.64 (br d, J = 10.39 Hz, 1 H) 7.56 (br d, J = 9.54 Hz, 1 H) 6.12 (br s, 1 H) 3.90 (t, J = 6.36 Hz, 2 H) 3.63 - 3.75 (m, 24 H) 3.48 - 3.56 (m, 2 H) 3.40 (br t, J = 5.01 Hz, 2 H) 2.92 (t, J = 6.30 Hz, 2 H) 1.28 (t, J = 7.21 Hz, 3 H).
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00692
THF(3㎖) 중 화합물 6(60㎎, 110.18μ㏖, 1 eq)의 용액에 Pd/C(60㎎, 10% 순도) 및 HCl(0.5M, 220.36㎕, 1 eq)을 N2 하에 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H2(15psi) 하에 25℃에서 10분 동안 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 농축시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30 ㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 15%-40%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 7(50㎎, 96.42μ㏖, 87.51% 수율)을 백색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.426분, MS 계산치: 518.2, [M+H] + = 519.3. 1 H NMR (400 MHz, 클로로폼- d ) δ ppm 7.86 - 8.08 (m, 2 H) 7.73 (d, J = 10.64 Hz, 1 H) 7.65 (d, J = 7.82 Hz, 1 H) 3.90 (t, J = 5.93 Hz, 2 H) 3.78 - 3.86 (m, 2 H) 3.58 - 3.78 (m, 20 H) 3.47 - 3.57 (m, 2 H) 3.13 (br s, 1 H) 3.09 - 3.17 (m, 1 H) 2.91 (t, J = 5.93 Hz, 2 H) 1.29 (t, J = 7.27 Hz, 4 H).
화합물 I-18의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00693
Figure pct00694
DMF(0.8㎖) 중 화합물 7(40㎎, 77.14μ㏖, 1 eq), 화합물 8(30.03㎎, 77.14μ㏖, 1 eq) 및 TEA(15.61㎎, 154.27μ㏖, 21.47㎕, 2 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. HPLC 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 농축시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30 ㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 35%-65%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 I-18(5㎎, 4.89μ㏖, 6.34% 수율, TFA)을 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.427분, MS 계산치: 907.3, [M/2+H] + = 454.9. HPLC: RT =3.566분. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.00 - 10.22 (m, 2 H) 8.58 (br s, 1 H) 8.27 (s, 1 H) 8.10 (br s, 1 H) 7.80 (br d, J = 11.25 Hz, 1 H) 7.73 (br d, J = 7.70 Hz, 2 H) 7.38 (t, J = 8.01 Hz, 1 H) 7.19 (d, J = 8.31 Hz, 1 H) 6.68 (d, J = 1.96 Hz, 2 H) 6.53 - 6.65 (m, 4 H) 3.47 - 3.62 (m, 27 H) 3.23 - 3.36 (m, 2 H) 2.90 (t, J = 6.05 Hz, 2 H) 1.12 (t, J = 7.21 Hz, 3 H). MS: [M/2+H] + = 455.1.
실시예 19. 화합물 I-19의 예시적 합성.
Figure pct00695
Figure pct00696
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00697
DCM(2㎖) 중 화합물 1(160㎎, 421.71μ㏖, 1 eq) 및 SOCl2(150.51㎎, 1.27m㏖, 91.78㎕, 3 eq)의 혼합물을 0℃에서 탈기시키고, N2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 20℃에서 0.5시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: 메탄올 = 10:1 Rf = 0.46)는 화합물 1이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 농축시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 화합물 2(167㎎, 조질)를 황색 오일로서 얻었다.
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00698
SOCl2(3.28g, 27.57m㏖, 2㎖, 12.69 eq) 중 화합물 3(300㎎, 2.17m㏖, 1 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 110℃에서 0.5시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. TLC(석유 에터:에틸 아세테이트 = 10:1 Rf = 0.36)는 화합물 3이 완전히 소모되었다. 반응 혼합물을 DCM과 함께 3회 공증발시켜 과량의 SOCl2를 제공하였다. 화합물 4(340㎎, 조질)를 황색 오일로서 얻었다.
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00699
DCM(2㎖) 중 CH3CH2NH2·HCl(1.77g, 21.72m㏖, 10 eq)의 용액에 TEA(4.39g, 43.43m㏖, 6.05㎖, 20 eq)를 0℃에서 첨가하였다. 첨가 후에, 혼합물을 10분 동안 이 온도에서 교반하였고, 이어서, DCM(1㎖) 중 화합물 4(340㎎, 2.17m㏖, 1 eq)의 용액을 0℃에서 적가하였다. 얻어진 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 농축시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Nano-micro Kromasil C18 80*25㎜*3㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 1%-25%, 7분)에 의해 정제하였다. 화합물 5(70㎎, 423.76μ㏖, 19.51% 수율)를 백색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 0.561분, MS 계산치: 165.0, [M+H] + = 166.1.
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00700
DCM(3㎖) 중 화합물 5(66㎎, 399.54μ㏖, 1 eq)의 용액에 TEA(121.29㎎, 1.20m㏖, 166.84㎕, 3 eq)을 0℃에서 첨가하였다. 첨가 후에, 혼합물을 이 온도에서 0.5시간 동안 교반하였고, 이어서, DCM(1㎖) 중 화합물 2(158.96㎎, 399.54μ㏖, 1 eq)의 용액을 0℃에서 첨가하였다. 얻어진 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 질소 기체 하에 건조시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 25% 내지 55%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 6(100㎎, 189.91μ㏖, 47.53% 수율)을 백색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 2.038분, MS 계산치: 526.2, [M+H] + = 527.3. 1 H NMR (400 MHz, 클로로폼- d ) δ ppm 7.80 (d, J = 8.56 Hz, 2 H) 7.15 - 7.20 (m, 2 H) 6.14 (br s, 1 H) 3.88 (t, J = 6.30 Hz, 2 H) 3.59 - 3.72 (m, 23 H) 3.44 - 3.54 (m, 2 H) 3.35 - 3.42 (m, 2 H) 2.80 - 2.89 (m, 2 H) 1.26 (t, J = 7.21 Hz, 3 H).
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00701
THF(1㎖) 중 화합물 6(75㎎, 142.43μ㏖, 1 eq) 및 HCl(0.5M, 284.86㎕, 1 eq)의 혼합물에 Pd/C(10% 순도, 1 eq)를 N2 하에 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H2(15psi) 하에 25℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 농축시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30 ㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 13%-43%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 7(60㎎, 119.86μ㏖, 84.15% 수율)을 백색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.400분, MS 계산치: 500.2, [M+H] + = 501.3.
화합물 I-19의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00702
DMF(1㎖) 중 화합물 7(30㎎, 59.93μ㏖, 1 eq), 화합물 8(23.34㎎, 59.93μ㏖, 1 eq) 및 TEA(12.13㎎, 119.86μ㏖, 16.68㎕, 2 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LCMS(생성물: RT = 2.337분; M/2+1 = 445.9)는 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. HPLC는 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 농축시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Welch Ultimate AQ-C18 150*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 30% 내지 60%, 12분)에 의해 정제하였다. 화합물 I-19(5㎎, 4.98μ㏖, 8.31% 수율, TFA)를 황색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.337분, MS 계산치: 889.3, [M/2+H] + = 445.9. HPLC: RT =3.469분. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.03 (br s, 1 H) 8.47 (t, J = 5.44 Hz, 1 H) 8.28 (s, 1 H) 8.09 (br s, 1 H) 7.88 (d, J = 8.68 Hz, 2 H) 7.75 (br d, J = 8.93 Hz, 1 H) 7.16 - 7.22 (m, 3 H) 6.68 (d, J = 2.08 Hz, 2 H) 6.53 - 6.63 (m, 4 H) 3.75 (t, J = 6.11 Hz, 3 H) 3.69 (br s, 2 H) 3.60 - 3.65 (m, 2 H) 3.53 - 3.60 (m, 8 H) 3.46 - 3.53 (m, 13 H) 3.24 - 3.32 (m, 2 H) 2.84 (t, J = 6.11 Hz, 2 H) 1.12 (t, J = 7.15 Hz, 3 H). MS: [M/2+H] + = 446.0.
실시예 20. 화합물 I-20의 예시적 합성.
Figure pct00703
DMF(0.5㎖) 중 화합물 1(163.2㎎, 419.3μ㏖), FITC(0.10g, 381.2μ㏖), DIEA(98.5㎎, 762.4μ㏖, 132.8㎕)의 혼합물을 15℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 플래시 C18(ISCO®; 120 g SepaFlash® C18 플래시 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90% MeCN/H2O 에터 구배의 용리액)에 의해 정제하여 화합물 2(300㎎, 1.43m㏖, 90.0% 순도, 52.2% 수율)를 황색 고체로서 얻었다.
Figure pct00704
Figure pct00705
DMF(0.1㎖) 중 화합물 3(7.3㎎, 5.78μ㏖), 화합물 2(3.7㎎, 5.78μ㏖)의 용액을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 분취-HPLC(중성 조건, NH4OAc)에 의해 직접 정제하여 화합물 I-20(1.8㎎, 8.44e-1μ㏖, 90.1% 순도, 14.6% 수율, NH4OAc)을 황색 고체로서 얻었다. MS: m/z 959.6 [M+2H]2+. 예시적 정제 절차:
Figure pct00706
실시예 21. 화합물 I-21, I-22 및 I-23의 예시적 합성.
Figure pct00707
표준 Fmoc 화학을 이용하여 펩타이드를 합성하였다. 하나의 절차를 이하에 예로서 기재한다:
1) CTC 수지(0.20m㏖, 0.20g, 1.0m㏖/g) 및 Fmoc-Trp(Boc)-OH(0.085g, 0.16m㏖, 0.8 eq)를 함유하는 용기에 N2 버블링하면서 DCM을 첨가하였다.
2) DIEA(6.0 eq)를 적가하고, 2시간 동안 혼합한다.
3) MeOH(0.50㎖)를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
4) 액체를 따라내고, DMF로 5분 동안 세척한다.
5) 20% 피페리딘/DMF를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
6) 액체를 따라내고, 이어서, DMF로 30초 동안 5회 세척한다.
7) Fmoc-아미노산 용액을 첨가하고, 30초 동안 혼합하고, 이어서, 활성화 완충제를 N2 버블링하면서 1시간 동안 첨가하였다.
8) 20% 피페리딘/DMF를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
9) 다음 아미노산 결합을 위해 단계 4 내지 8을 반복한다.
하나의 합성된 규모는 0.2m㏖이었다.
Figure pct00708
Fmoc 탈보호를 위해 30분 동안 DMF 중 20% 피페리딘을 사용하였다. 제7 Fmoc에 대해 탈보호는 2분이었다. 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하고, 수지를 DMF로 5회 세척하였다. 마지막 결합 후에, 수지를 MeOH로 3회 세척하고, 이어서, 진공 건조시켰다.　FITC 결합 후에 펩타이드를 암실에서 처리하였다.
펩타이드 절단 및 정제. 하나의 절차를 이하에 예로서 기재한다:
1) 실온에서 측쇄 보호 펩타이드를 함유하는 플라스크에 절단 칵테일(97.5%TFA/2.5%H2O)을 첨가하고, 2시간 동안 교반한다.
2) 혼합물을 여과 후, 용액을 감압 하에 농축시켜 용매를 제거하였다.
3) 조질 펩타이드를 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 정제하여 I-21 (6.4㎎, 96.8% 순도, 3.47% 수율)을 제공하였다. MS: m/z 921.8 [M+2H]2+.
일부 실시형태에서, 펩타이드를 예로서 이하의 조건을 이용하여 정제하였다.
Figure pct00709
I-22 및 I-23을 유사한 과정을 이용하여 제조하였고, 주기 5에서 사용한 물질은 각각 Fmoc-PEG4-CH2CH2COOH 및 Fmoc-PEG2-CH2CH2COOH였다. 한 가지 제조에서, I-22에 대한 순도는 약 96%였다, MS: m/z 555.9 [M+3H]3+. 한 가지 제조에서, I-23에 대한 순도는 약 93%였다, MS: m/z 526.6 [M+3H]3+.
실시예 22. 화합물 I-24 및 I-25의 예시적 합성.
Figure pct00710
DCM(20㎖) 중 화합물 1(2.00g, 4.70m㏖), 화합물 1a(597.5㎎, 4.70m㏖), EDCI(1.80g, 9.40m㏖), HOBt(1.27g, 9.40m㏖)의 혼합물을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서, 용매를 DCM(100㎖)을 희석시키고, 1M HCl(50㎖), H2O(50㎖), 염수 (50㎖)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, DCM: MeOH = 50/1 내지 10/1)에 의해 정제하여 화합물 2(2.00g, 3.74m㏖, 79.59% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
Figure pct00711
DCM(20㎖) 및 TFA(20㎖) 중 화합물 2(2.00g, 3.74m㏖)의 혼합물을 15℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 플래시 C18(ISCO®;　120g SepaFlash® C18　Flash 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90%의 MeCN/H2O 에터 구배의 용리)에 의해 정제하여 화합물 3(1.00g, 2.09m㏖, 55.8% 수율)을 백색 오일로서 얻었다.
Figure pct00712
일부 실시형태에서, 이하의 절차를 이용하여 펩타이드를 제조하였다:
1) CTC 수지(0.10m㏖, 0.10g, 1.0m㏖/g) 및 Fmoc-Thr(tBu)-OH(39.7㎎, 0.10m㏖, 1.0 eq)를 함유하는 용기에 N2 버블링하면서 DCM을 첨가하였다.
2) DIEA(6.0 eq)를 적가하고, 2시간 동안 혼합한다.
3) MeOH(0.10㎖)를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
4) 액체를 따라내고, DMF로 5분 동안 세척한다.
5) 20% 피페리딘/DMF를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
6) 액체를 따라내고, 이어서, DMF로 30초 동안 5회 세척한다.
7) Fmoc-아미노산 용액을 첨가하고, 30초 동안 혼합하고, 이어서, 활성화 완충제를 N2 버블링하면서 1시간 동안 첨가하였다.
8) 20% 피페리딘/DMF를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
9) 다음 아미노산 결합을 위해 단계 4 내지 8을 반복한다.
합성 규모: 0.10m㏖.
Figure pct00713
Fmoc 탈보호를 위해 30분 동안 DMF 중 20% 피페리딘을 사용하였다. 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하고, 수지를 DMF로 5회 세척하였다. 마지막 아미노산 결합 후에, 수지를 MeOH로 3회 세척하고, 이어서, 진공 건조시켰다. FITC 결합 후에, 펩타이드를 암실에서 처리하였다. 일부 실시형태에서, 펩타이드를 절단하고, 다음의 절차를 이용하여 정제하였다:
1) 절단 칵테일(92.5%TFA/2.5%3-머캅토프로판산/2.5%H2O/2.5%TIS)을 실온에서 측쇄 보호된 펩타이드를 함유하는 플라스크에 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다.
2) 펩타이드를 차가운 아이소프로필 에터로 침전시키고, 원심분리(3000rpm에서 3분)에 의해 수집하였다.
3) 침전물을 2회의 추가적인 시간 동안 차가운 아이소프로필 에터로 세척한다.
4) 진공 하에 1시간 동안 조질의 펩타이드를 건조시킨다.
5) 화합물 4(100.0㎎, 조질)를 황색 고체로서 얻었다.
Figure pct00714
MeCN/H2O(1:1, 100㎖) 중 화합물 4(100.0㎎, 39.8μ㏖)의 혼합물을 암실에서 15℃에서 교반하여 16시간 동안 공기 산화에 의해 이황화물을 형성하였다. 용액을 1M HCl에 의해 pH = 3까지 산성화시키고, 동결건조로 건조시켰다. 잔사를 분취-HPLC(산 조건, TFA)에 의해 정제하여 I-24(2.5㎎, 9.96e-1μ㏖, 2.5% 수율, 95.4% 순도)를 황색 고체로서 얻었다. MS: m/z 837.7 [M+3H]3+. 정제 절차를 이하에 예로서 기재한다:
Figure pct00715
I-25를 대응하는 아미노산을 이용하여 유사한 절차를 이용해서 합성하였다(제조에서, 순도는 약 94%였다; MS: m/z 832.5 [M+3H]3+).
실시예 23. 화합물 I-26 및 I-27의 예시적 합성.
Figure pct00716
표준 Fmoc 화학을 이용하여 펩타이드를 합성하였다. 절차를 이하에 예로서 기재한다:
1) CTC 수지(0.20m㏖, 0.20g, 1.0m㏖/g) 및 Fmoc-Trp(Boc)-OH(0.085g, 0.16m㏖, 0.8 eq)를 함유하는 용기에 N2 버블링하면서 DCM을 첨가하였다.
2) DIEA(6.0 eq)를 적가하고, 2시간 동안 혼합한다.
3) MeOH(0.50㎖)를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
4) 액체를 따라내고, DMF로 5분 동안 세척한다.
5) 20% 피페리딘/DMF를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
6) 액체를 따라내고, 이어서, DMF로 30초 동안 5회 세척한다.
7) Fmoc-아미노산 용액을 첨가하고, 30초 동안 혼합하고, 이어서, 활성화 완충제를 N2 버블링하면서 1시간 동안 첨가하였다.
8) 20% 피페리딘/DMF를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
9) 다음 아미노산 결합을 위해 단계 4 내지 8을 반복한다.
합성 규모: 0.2m㏖.
Figure pct00717
D-Glu 측쇄 상의 ally 기를 제거하기 위해 Pd(PPh3)4 및 페닐실란을 사용하였다. Fmoc 탈보호를 위해 30분 동안 DMF 중 20% 피페리딘을 사용하였다. 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하고, 수지를 DMF로 5회 세척하였다. 마지막 아미노산 결합 후에, 수지를 MeOH로 3회 세척하고, 이어서, 진공 건조시켰다. 절단 및 정제를 위한 유용한 절차를 이하에 기재한다:
1) 실온에서 측쇄 보호 펩타이드를 함유하는 플라스크에 절단 칵테일(97.5%TFA/2.5%H2O)을 첨가하고, 2시간 동안 교반한다.
2) 절단 혼합물을 여과 후, 용액을 감압 하에 농축시켜 용매를 제거하였다.
3) 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 조질의 펩타이드를 정제하여 화합물 1(90㎎)을 제공하였다.
Figure pct00718
DMF(1㎖) 중 DIEA(27.02㎎, 209.07μ㏖, 36.42㎕)를 첨가한 화합물 1(90㎎, 69.69μ㏖), FITC(32.6㎎, 83.63μ㏖)의 용액을　25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 직접 정제하여 I-26(53.2㎎, 40.6% 수율, 95.2% 순도)을 황색 고체로서 얻었다. MS: m/z 560.2 [M+3H]3+. 정제 절차를 이하에 예로서 기재한다:
Figure pct00719
I-27을 유사한 과정을 이용하여 제조하고, 이때 Fmoc-PEG8-CH2CH2COOH를 주기 5에서 사용하였다(제조에서, 순도는 약 95%였다; MS: m/z 649[M+3H]3+.
실시예 24. 화합물 I-28 내지 I-41의 예시적 합성.
Figure pct00720
표준 Fmoc 화학을 이용하여 펩타이드를 합성하였다. 절차를 이하에 예로서 기재한다:
1) N2 버블링하면서 CTC 수지(0.50m㏖, 0.50g, 1.0m㏖/g) 및 Fmoc-Val-OH(0.136g, 0.40m㏖, 0.8 eq)를 함유하는 용기에 DCM(5.0㎖)을 첨가하였다.
2) DIEA(4.0 eq)를 적가하고, 2시간 동안 혼합한다.
3) MeOH(0.5㎖)를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
4) 액체를 따라내고, DMF로 5분 동안 세척한다.
5) 20% 피페리딘/DMF를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
6) 액체를 따라내고, 이어서, DMF로 30초 동안 5회 세척한다.
7) Fmoc-아미노산 용액을 첨가하고, 30초 동안 혼합하고, 이어서, 활성화 완충제를 N2 버블링하면서 1시간 동안 첨가하였다.
8) 20% 피페리딘/DMF를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
9) 다음 아미노산 결합을 위해 단계 4 내지 8을 반복한다.
합성 규모: 0.5m㏖.
Figure pct00721
Fmoc 탈보호를 위해 30분 동안 DMF 중 20% 피페리딘을 사용하였다. 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하고, 수지를 DMF로 5회 세척하였다. 마지막 아미노산 결합 후에, 수지를 MeOH로 3회 세척하고, 이어서, 진공 건조시켰다. 일부 실시형태에서, 펩타이드를 절단하고, 다음의 절차를 이용하여 정제하였다:
펩타이드 수지를 20% HFIP/DCM(20㎖)으로 0.5시간 동안 2회 처리하였다. 여과 후, 합한 여과액을 감압 하에 농축시켰다.
잔사를 처음에 MeCN(5㎖) 중에 용해시키고, 이어서, 완전히 보호된 펩타이드를 차가운 H2O(50㎖)로 침전시켰다. 여과시킨 후에, 고체 분획을 동결건조에 의해 건조시켜 화합물 2(707㎎, 95.0% 순도, 85.2% 수율)를 얻었다.
Figure pct00722
DMF(5㎖) 중 화합물 3(0.50g, 2.45m㏖), 화합물 3a(420㎎, 2.69m㏖), DIC(463㎎, 3.67m㏖, 568㎕), HOBt(496㎎, 3.67m㏖)의 혼합물을 15℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 플래시 C18(ISCO®; 120 g SepaFlash® C18 플래시 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90% MeCN/H2O 에터 구배의 용리액)에 의해 직접 정제하여 화합물 4(700㎎, 2.04m㏖, 83.5% 수율)를 무색 오일로서 얻었다.
Figure pct00723
HCl/다이옥산(4M, 10㎖) 중 화합물 4(700㎎, 2.04m㏖)의 혼합물을 15℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과 후, 고체를 동결건조에 의해 건조시켜 화합물 5(HCl 염, 400㎎, 1.65m㏖, 80.7% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
Figure pct00724
DMF(2㎖) 중 화합물 2(150㎎, 95.13μ㏖), 화합물 5(26.5㎎, 95.1μ㏖, HCl), DIC(18.0㎎, 142.7μ㏖, 22.1㎕), HOBt(19.3㎎, 142.7μ㏖), DIEA(18.4㎎, 142.7μ㏖, 24.8㎕)의 혼합물을 15℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 flash C18(ISCO®; 120 g SepaFlash® C18 플래시 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90% MeOH/H2O 에터 구배의 용리액)에 의해 직접 정제하여 화합물 6(150㎎, 83.2μ㏖, 87.4% 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
Figure pct00725
DMF(1㎖) 중 화합물 6(150㎎, 83.2μ㏖), 화합물 6a(75.4㎎, 166.4μ㏖), DIC(21.0㎎, 166.4μ㏖, 25.7㎕), HOBt(22.5㎎, 166μ㏖), DMAP(10.2㎎, 83.2μ㏖)의 용액을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 0.5M HCl(차가움, 30㎖)에 첨가하고, 많은 백색 고체가 나타났다. 혼합물을 원심분리시키고(3000rpm에서 3분), 액체 분획을 버렸다. 고체를 동결건조시켜 화합물 7(100㎎, 44.6μ㏖, 53.7% 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
Figure pct00726
TFA(4.81g, 42.2m㏖, 3.13㎖), 트라이아이소프로필실란(72.3㎎, 456.4μ㏖, 93.7㎕) 및 H2O(93.7㎎, 5.20m㏖, 93.7㎕) 중 화합물 7(100㎎, 44.7μ㏖)의 혼합물을 15℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 차가운 아이소프로필 에터(50㎖)로 침전시키고, 원심분리시키고(3000rpm에서 3분) 아이소프로필 에터로 2회 세척하고, 진공 하에 2시간 동안 건조시켰다. 잔사를 분취-HPLC(산성 조건, TFA)에 의해 정제하여 화합물 8(50.0㎎, 34.6μ㏖, 77.5% 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
Figure pct00727
DMF(0.5㎖) 중 화합물 8(40.0㎎, 27.7μ㏖), FITC(10.8㎎, 27.7μ㏖), DIEA(10.7㎎, 83.2μ㏖, 14.5㎕)의 혼합물을 15℃에서 1시간 동안 암실에서 교반하였다. 혼합물을 분취-HPLC(산성 조건, TFA)에 의해 직접 정제하여 I-28(13.0㎎, 6.55μ㏖, 23.6% 수율, 98.2% 순도, TFA)을 황색 고체로서 얻었다. MS: m/z 916 [M+2H]2+. 정제 절차를 이하에 예로서 기재한다:
Figure pct00728
대응하는 아미노산에 의한 유사한 절차를 이용하여 다양한 화합물을 제조하였다. 특정 제제로부터의 순도 및 MS 데이터를 이하에 제시한다.
Figure pct00729
실시예 25. 화합물 I-42의 예시적 합성.
Figure pct00730
Figure pct00731
표준 Fmoc 화학을 이용하여 펩타이드를 합성하였다. 절차를 이하에 예로서 기재한다:
1) CTC 수지(0.50m㏖, 0.50g, 1.0m㏖/g) 및 Fmoc-Thr(tBu)-OH(0.159g, 0.40m㏖, 0.80 eq)를 함유하는 용기에 N2 버블링하면서 DCM을 첨가하였다.
2) DIEA(6.0 eq)를 적가하고, 2시간 동안 혼합한다.
3) MeOH(0.50㎖)를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
4) 액체를 따라내고, DMF로 5분 동안 세척한다.
5) 20% 피페리딘/DMF를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
6) 액체를 따라내고, 이어서, DMF로 30초 동안 5회 세척한다.
7) Fmoc-아미노산 용액을 첨가하고, 30초 동안 혼합하고, 이어서, 활성화 완충제를 N2 버블링하면서 1시간 동안 첨가하였다.
8) 20% 피페리딘/DMF를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
9) 다음 아미노산 결합을 위해 단계 4 내지 8을 반복한다.
합성 규모: 0.50m㏖.
Figure pct00732
Fmoc 탈보호를 위해 30분 동안 DMF 중 20% 피페리딘을 사용하였다. 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하고, 수지를 DMF로 5회 세척하였다. 마지막 아미노산 결합 후에, 수지를 MeOH로 3회 세척하고, 이어서, 진공 건조시켰다. 일부 실시형태에서, 펩타이드를 절단하고, 다음의 절차를 이용하여 정제하였다:
1) 절단 칵테일(92.5%TFA/2.5%3-머캅토프로판산/2.5%H2O/2.5%TIS)을 실온에서 측쇄 보호된 펩타이드를 함유하는 플라스크에 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 교반하였다.
2) 펩타이드를 차가운 아이소프로필 에터로 침전시키고, 원심분리(3000rpm에서 3분)에 의해 수집하였다.
3) 침전물을 2회의 추가적인 시간 동안 차가운 아이소프로필 에터로 세척한다.
4) 진공 하에 2시간 동안 조질의 펩타이드를 건조시킨다.
5) ACN/H2O(1:1, 총 150㎖) 중에 조질의 펩타이드를 용해시킨다.
6) 아이오딘(MeOH 중 0.1M)을 황색이 지속될 때까지 펩타이드 용액을 격렬하게 교반하면서 적가하였다. 10분 후에, 황색이 사라질 때까지 티오황산나트륨(수 중 0.1 M)을 적가하고, 반응의 완료를 LCMS에 의해 나타냈다. 혼합물을 동결건조시켜 조질의 분말을 제공하였다.
7) 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 조질의 펩타이드를 정제하여 화합물 2(120㎎)를 제공하였다.
Figure pct00733
DMF(1.00㎖) 중 화합물 3(1.00g, 2.20m㏖), 화합물 3a(856.5㎎, 4.41m㏖), HOBt(893.8㎎, 6.61m㏖), DMAP(808.1㎎, 6.61m㏖), EDCI(1.27g, 6.61m㏖)의 혼합물을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 FLASH　C18(ISCO®;　120g SepaFlash® C18　Flash 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90%의 MeCN/H2O 에터 구배의 용리)에 의해 정제하여 화합물 4(1.20g, 90.0% 순도, 86.0% 수율)를 백색 고체로서 직접 얻었다.
Figure pct00734
TFA(36.96g, 324.1m㏖, 24.0㎖), H2O(1.20g, 66.6m㏖, 1.20㎖) 중 화합물 4(1.20g, 1.91m㏖)의 혼합물을 15℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 플래시 C18(ISCO®;　120g SepaFlash® C18　Flash 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90%의 MeCN/H2O 에터 구배의 용리)에 의해 정제하여 화합물 5(0.83g, 90.0% 순도, 74.1% 수율, TFA)를 무색 오일로서로서 얻었다.
Figure pct00735
DMF(5.0㎖) 중 화합물 5(0.57g, 970.15μ㏖, TFA), DIEA(376.1㎎, 2.91m㏖, 506.9㎕)의 혼합물에 Boc2O(317.6㎎, 1.46m㏖, 334.3㎕)를 0℃에서 첨가하였고, 이어서, 혼합물을 15℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 플래시 C18(ISCO®; 120 g SepaFlash® C18 플래시 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90% MeCN/H2O 에터 구배의 용리액)에 의해 직접 정제하여 화합물 6(230㎎, 400.9μ㏖, 41.3% 수율)을 무색 오일로서 얻었다.
Figure pct00736
DMF(1.0㎖) 중 화합물 6(230㎎, 400.9μ㏖), HOSu(69.2㎎, 601.4μ㏖), EDCI(153.7㎎, 801.9μ㏖)의 혼합물을 15℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 플래시 C18(ISCO®; 120 g SepaFlash® C18 플래시 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90% MeCN/H2O 에터 구배의 용리액)에 의해 직접 정제하여 화합물 7(150㎎, 223.6μ㏖, 55.7% 수율)을 무색 오일로서 얻었다.
Figure pct00737
DMF(0.2㎖) 중 화합물 2(24.6㎎, 14.9μ㏖, TFA), 화합물 7(10.0㎎, 14.9μ㏖), DIEA(9.6㎎, 74.5μ㏖, 12.9㎕)의 혼합물을 15℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 분취-HPLC(산성 조건, TFA)에 의해 직접 정제하여 화합물 8(3.3㎎, 1.58μ㏖, 10.5% 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
Figure pct00738
TFA(770.0㎎, 6.75m㏖, 0.50㎖) 및 DCM(0.5㎖) 중 화합물 8(3.3㎎, 1.58μ㏖)의 혼합물을 15℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하여 화합물 9(3.0㎎, 조질, TFA)를 무색 오일로서 얻었다.
Figure pct00739
Figure pct00740
DMF(0.1㎖) 중 화합물 9(3.0㎎, 1.51μ㏖), FITC(0.6㎎, 1.51μ㏖), DIEA(7.53μ㏖, 1.3㎕)의 혼합물을 15℃에서 1시간 동안 암실에서 교반하였다. 혼합물을 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 직접 정제하여 I-42(2.1㎎, 9.06e-1μ㏖, 98.3% 순도, 60.1% 수율)를 황색 고체로서 얻었다. MS: m/z 1191 [M+2H]2+. 일부 실시형태에서, 펩타이드를 절단하고, 다음의 절차를 이용하여 정제하였다:
Figure pct00741
실시예 26. 화합물 I-43의 예시적 합성.
Figure pct00742
Figure pct00743
표준 Fmoc 화학을 이용하여 펩타이드를 합성하였다. 절차를 이하에 예로서 기재한다:
1) CTC 수지(0.500m㏖, 0.500g, 1.00m㏖/g) 및 Fmoc-Thr(tBu)-OH(159㎎, 0.400m㏖, 0.80 eq)를 함유하는 용기에 N2 버블링하면서 DCM을 첨가하였다.
2) DIEA(4.00 eq)를 적가하고, 2시간 동안 혼합한다.
3) MeOH(0.500㎖)를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
4) 액체를 따라내고, DMF로 5분 동안 세척한다.
5) 20% 피페리딘/DMF를 첨가하고, 30분 동안 반응시킨다.
6) 액체를 따라내고, DMF로 5분 동안 세척한다.
7) Fmoc-아미노산 용액을 첨가하고, 처음에 30초 동안 혼합하고, 이어서, 활성화 용액을 첨가하고 나서, 지속적으로 N2 버블링하면서 1시간 동안 결합 반응을 지속한다.
8) 다음 아미노산 결합을 위해 단계 4 내지 7을 반복한다.
Figure pct00744
a) 합성 규모: 0.5m㏖
b) Fmoc 탈보호를 위해 30분 동안 DMF 중 20% 피페리딘을 사용하였다.
c) 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하였다.
d) 제14 주기 후에, 3% NH2NH2.H2O/DMF(10㎖)를 첨가하고, 20분 동안 버블링하였다.
e) 마지막 결합 후에, 수지를 MeOH로 3회 세척하고, 이어서, 진공 건조시켰다.
펩타이드 절단 및 정제:
1) 실온에서 측쇄 보호 펩타이드를 함유하는 플라스크에 절단 칵테일(92.5%TFA/2.5%3-머캅토프로판산/2.5%H2O/2.5%TIS)을 첨가하고, 2시간 동안 교반한다.
2) 펩타이드를 차가운 아이소프로필 에터로 침전시키고, 원심분리(3000rpm에서 3분)에 의해 수집하였다.
3) 침전물을 2회의 추가적인 시간 동안 차가운 아이소프로필 에터로 세척한다.
4) 진공 하에 2시간 동안 조질의 펩타이드를 건조시킨다.
5) ACN/H2O(1:1, 총 150㎖) 중에 조질의 펩타이드를 용해시킨다.
6) 아이오딘(MeOH 중 0.1 M)을 황색이 지속될 때까지 펩타이드 용액을 격렬하게 교반하면서 적가하였다. 10분 후에, 황색이 사라질 때까지 티오황산나트륨(수 중 0.1 M)을 적가하고, 반응의 완료를 LCMS에 의해 나타낸다. 혼합물을 동결건조시켜 조질의 분말을 제공하였다.
7) 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 조질의 펩타이드를 정제하여 화합물 2(22.4㎎)를 제공하였다.
Figure pct00745
화합물 2(22.4㎎, 1.00 eq)와 FITC(4.38㎎, 1.00 eq)의 혼합물을 DMF(1㎖) 중에 용해시키고, 이어서, DIEA(6.00 eq)를 서서히 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었다는 것을 나타내었다. 이어서, 혼합물을 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 직접 정제하고, I-43(16.7㎎, 96.0% 순도, 59.8% 수율)을 황색 고체로서 얻었다. MS: m/z 794.2 [M+3H]3+. 정제 절차를 이하에 예로서 기재한다:
Figure pct00746
실시예 27. 화합물 I-44의 예시적 합성.
Figure pct00747
표준 Fmoc 화학을 이용하여 펩타이드를 합성하였다. 절차를 이하에 예로서 기재한다:
1) CTC 수지(0.500m㏖, 0.500g, 1.00m㏖/g) 및 Fmoc-Thr(tBu)-OH(159㎎, 0.400m㏖, 0.80 eq)를 함유하는 용기에 N2 버블링하면서 DCM을 첨가하였다.
2) DIEA(4.00 eq)를 적가하고, 2시간 동안 혼합한다.
3) MeOH(0.500㎖)를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
4) 액체를 따라내고, DMF로 5분 동안 세척한다.
5) 20% 피페리딘/DMF를 첨가하고, 30분 동안 반응시킨다.
6) 액체를 따라내고, DMF로 5분 동안 세척한다.
7) Fmoc-아미노산 용액을 첨가하고, 처음에 30초 동안 혼합하고, 이어서, 활성화 용액을 첨가하고 나서, 지속적으로 N2 버블링하면서 1시간 동안 결합 반응을 지속한다.
8) 다음 아미노산 결합을 위해 단계 4 내지 7을 반복한다.
Figure pct00748
a) 합성 규모: 0.5m㏖
b) Fmoc 탈보호를 위해 30분 동안 DMF 중 20% 피페리딘을 사용하였다.
c) 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하였다.
d) 제14 주기 후에, 3% NH2NH2.H2O/DMF(10㎖)를 첨가하고, 버블링하면서 20분 동안 혼합하였다.
e) 마지막 결합 후에, 수지를 MeOH로 3회 세척하고, 이어서, 진공 건조시켰다.
일부 실시형태에서, 펩타이드를 절단하고, 다음의 절차를 이용하여 정제하였다:
4) 실온에서 측쇄 보호 펩타이드를 함유하는 플라스크에 절단 칵테일(92.5%TFA/2.5%3-머캅토프로판산/2.5%H2O/2.5%TIS)을 첨가하고, 2시간 동안 교반한다.
5) 펩타이드를 차가운 아이소프로필 에터로 침전시키고, 원심분리(3000rpm에서 3분)에 의해 수집하였다.
6) 침전물을 2회의 추가적인 시간 동안 차가운 아이소프로필 에터로 세척한다.
7) 진공 하에 2시간 동안 조질의 펩타이드를 건조시킨다.
8) ACN/H2O(1:1, 총 150㎖) 중에 조질의 펩타이드를 용해시킨다.
9) 아이오딘(MeOH 중 0.1 M)을 황색이 지속될 때까지 펩타이드 용액을 격렬하게 교반하면서 적가하였다. 10분 후에, 황색이 사라질 때까지 티오황산나트륨(수 중 0.1 M)을 적가하고, 반응의 완료를 LCMS에 의해 나타낸다. 혼합물을 동결건조시켜 조질의 분말을 제공하였다.
10) 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 조질의 펩타이드를 정제하여 화합물 2(48.0㎎)를 제공하였다.
Figure pct00749
화합물 2(48.0㎎, 1.00 eq)와 FITC(9.29㎎, 1.00 eq)의 혼합물을 DMF(1㎖) 중에 용해시키고, 이어서, DIEA(6.00 eq)를 서서히 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었다는 것을 나타내었다. 이어서, 혼합물을 분취-HPLC(TFA 조건)에 의해 직접 정제하고, I-44(32.1㎎, 97.0% 순도, 83.7% 수율)를 황색 고체로서 얻었다. MS: m/z 1200 [M+2H]2+. 정제 절차를 이하에 예로서 기재한다:
Figure pct00750
실시예 28. 화합물 I-45의 예시적 합성.
Figure pct00751
표준 Fmoc 화학을 이용하여 펩타이드를 합성하였다. 절차를 이하에 예로서 기재한다:
1) CTC 수지(1.00m㏖, 1.00g, 1.0m㏖/g) 및 Fmoc-NH-PEG4-COOH(0.39g, 0.80m㏖, 0.8 eq)를 함유하는 용기에 N2 버블링하면서 DCM을 첨가하였다.
2) DIEA(4.0 eq)를 적가하고, 2시간 동안 혼합한다.
3) MeOH(1㎖)를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
4) 액체를 따라내고, DMF로 5분 동안 세척한다.
5) 20% 피페리딘/DMF를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
6) 액체를 따라내고, 이어서, DMF로 30초 동안 5회 세척한다.
7) Fmoc-아미노산 용액을 첨가하고, 30초 동안 혼합하고, 이어서, 활성화 완충제를 N2 버블링하면서 1시간 동안 첨가하였다.
8) 20% 피페리딘/DMF를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
9) 다음 아미노산 결합을 위해 단계 4 내지 8을 반복한다.
합성 규모: 1.0m㏖.
Figure pct00752
Fmoc 탈보호를 위해 30분 동안 DMF 중 20% 피페리딘을 사용하였다. 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하고, 수지를 DMF로 5회 세척하였다. 마지막 아미노산 결합 후에, 수지를 MeOH로 3회 세척하고, 이어서, 진공 건조시켰다. 일부 실시형태에서, 펩타이드를 절단하고, 다음의 절차를 이용하여 정제하였다:
1) 펩타이드 수지를 20% HFIP/DCM(20㎖)으로 30분 동안 동안 2회 처리하였다. 여과 후, 합한 여과액을 감압 하에 농축시켜 잔사를 생성하였다.
2) 잔사를 MeCN(5㎖) 중에 용해시켰다. 용액을 차가운 H2O(50㎖)로 침전시키고, 여과시킨 후에, 고체를 동결건조로 건조시켰다.
3) 화합물 4(800㎎, 95.0% 순도, 58.4% 수율)를 얻었다.
Figure pct00753
HBr/H2O (29.8g, 176m㏖, 20㎖) 중 화합물 1(0.30g, 1.73m㏖)의 용액을 120℃에서 16시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 MeCN(10㎖) 중에서 분쇄하였다. 여과 후에, 고체를 동결건조에서 건조시켜 화합물 2(200㎎, 833.1μ㏖, 48.1% 수율, HBr)를 갈색 고체로서 얻었다. 1 H NMR: (400 MHz DMSO-d 6 ) δ ppm 10.43 (s, 1 H) 8.16 (s, 2 H) 7.13 - 7.26 (m, 2 H) 3.96 (s, 2 H).
Figure pct00754
Figure pct00755
DMF(5㎖) 중 화합물 4(400㎎, 230.4μ㏖), 화합물 2(82.9㎎, 345.6μ㏖, HBr), DIC(43.6㎎, 345.6μ㏖, 53.2㎕), HOBt(62.3㎎, 460.8μ㏖), DIEA(59.5㎎, 460.8μ㏖, 80.3㎕)의 혼합물을 15℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 첨가하고, 이어서, 화합물 4a(104.5㎎, 230.4μ㏖), DMAP(56.3㎎, 460.8μ㏖), DIC(87.2㎎, 691.2μ㏖, 107.0㎕)를 15℃에서 첨가하고, 얻어진 혼합물을 15℃에서 추가 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 1M HCl(차가움, 40㎖)로 침전시키고, 원심분리시키고(3000rpm에서 3분), 동결건조에서 건조시켜 화합물 5(532㎎, 조질)를 백색 고체로서 얻었다.
Figure pct00756
TFA(24.6g, 215.5m㏖, 15.9㎖), 트라이아이소프로필실란(307.6㎎, 1.94m㏖, 399㎕), H2O(399㎎, 22.1m㏖, 399㎕) 중 화합물 6(532㎎, 230.2μ㏖)의 혼합물을 15℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 아이소프로필 에터(차가움, 50㎖)로 침전시키고, 원심분리시키고(3000rpm에서 3분), 아이소프로필 에터로 추가 2회(50㎖) 동안 세척하고, 조질 펩타이드를 진공 하에 2시간 동안 건조시켰다. 잔사를 분취-HPLC(산성 조건, TFA)에 의해 정제하여 화합물 7(43.0㎎, 21.6μ㏖, 9.4% 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
Figure pct00757
DMF(0.5㎖) 중 화합물 7(43.0㎎, 21.9μ㏖), FITC(8.5㎎, 21.9μ㏖), DIEA(5.7㎎, 43.9μ㏖, 7.6㎕)의 혼합물을 15℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 분취-HPLC(산 조건, TFA)에 의해 정제하여 I-45(29.1㎎, 95.5% 순도, 60.5% 수율, TFA 염)을 황색 고체로서 얻었다. MS: m/z 1189.4 [M+2H]2+. 정제 절차를 이하에 예로서 기재한다:
Figure pct00758
실시예 29. 화합물 I-46의 예시적 합성.
Figure pct00759
EtOH(40㎖) 중 화합물 1(0.30g, 1.66m㏖), 화합물 1a(301.7㎎, 1.66m㏖), TEA(251.3㎎, 2.48m㏖, 345.6㎕)의 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 1M HCl (20㎖) 중에서 10분 동안 분쇄시키고, 여과 후, 고체를 동결건조에 의해 건조시켜 화합물 2(500.0㎎, 조질)를 백색 고체로서 얻었다.
Figure pct00760
표준 Fmoc 화학을 이용하여 펩타이드를 합성하였다. 절차를 이하에 예로서 기재한다:
1) CTC 수지(0.10m㏖, 0.10g, 1.0m㏖/g) 및 Fmoc-Thr(tBu)-OH(39.7㎎, 0.10m㏖, 1.0 eq)을 함유하는 용기에 N2 버블링하면서 DCM을 첨가하였다.
2) DIEA(6.0 eq)를 적가하고, 2시간 동안 혼합한다.
3) MeOH(0.10㎖)를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
4) 액체를 따라내고, DMF로 5분 동안 세척한다.
5) 20% 피페리딘/DMF를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
6) 액체를 따라내고, 이어서, DMF로 30초 동안 5회 세척한다.
7) Fmoc-아미노산 용액을 첨가하고, 30초 동안 혼합하고, 이어서, 활성화 완충제를 N2 버블링하면서 1시간 동안 첨가하였다.
8) 20% 피페리딘/DMF를 첨가하고, 30분 동안 혼합한다.
9) 다음 아미노산 결합을 위해 단계 4 내지 8을 반복한다.
합성 규모: 0.10m㏖.
Figure pct00761
Fmoc 탈보호를 위해 30분 동안 DMF 중 20% 피페리딘을 사용하였다. DMF 중 3% 하이드라진 수화물을 Dde 탈보호를 위해 30분 동안 사용하였다. 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하고, 수지를 DMF로 5회 세척하였다. 마지막 결합 후에, 수지를 MeOH로 3회 세척하고, 이어서, 진공 건조시켰다. FITC 결합 후에, 펩타이드를 암실에서 처리하였다. 일부 실시형태에서, 펩타이드를 절단하고, 다음의 절차를 이용하여 정제하였다:
11) 절단 칵테일(92.5%TFA/2.5%3-머캅토프로판산/2.5%H2O/2.5%TIS)을 실온에서 측쇄 보호된 펩타이드를 함유하는 플라스크에 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다.
12) 펩타이드를 차가운 아이소프로필 에터로 침전시키고, 원심분리(3000rpm에서 3분)에 의해 수집하였다.
13) 침전물을 2회의 추가적인 시간 동안 차가운 아이소프로필 에터로 세척한다.
14) 진공 하에 2시간 동안 조질의 펩타이드를 건조시킨다.
15) 화합물 3(100.0㎎, 조질)을 황색 고체로서 얻었다.
Figure pct00762
화합물 3(100.0㎎, 41.43μ㏖)을 MeCN(50㎖) 및 H2O(50㎖)의 혼합물 중에 용해시키고, 15℃에서 암실에서 굡간하여 16시간 동안 공기 산화에 의해 이황화물을 형성하였다. 용액을 1M HCl에 의해 pH = 3까지 산성화시키고, 동결건조 하에 건조시켰다. 잔사를 분취-HPLC(산성 조건, TFA)에 의해 정제하여 화합물 I-46(1.1㎎, 4.33e-1μ㏖, 1.0% 수율, 91.8% 순도)을 황색 고체로서 얻었다. MS: m/z 1207.0 [M+2H]2+. 정제 절차를 이하에 예로서 기재한다:
Figure pct00763
실시예 30. 제공된 기술은 상당히 개선된 효율을 제공한다.
특히, 제공된 기술은 증가된 효율(예를 들어, 보다 높은 비율 및/또는 수율) 및/또는 선택성을 제공할 수 있다. 특정 평가로부터의 데이터를 본 명세서에서 예로서 제공한다.
일부 실시형태에서, 표적 제제는 단백질 제제이다. 일부 실시형태에서, 표적 제제는 항체 제제이다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 항체, 예를 들어, 다라투무맙, 세툭시맙 등에 관심 모이어티를 접합시키기 위한 기술을 제공한다.
일부 실시형태에서, 반응 상대, 예를 들어, 식 R-I의 화합물 또는 이의 염을 DMSO 중에 5mM의 저장 용액으로 용해시켰다.
일부 실시형태에서, 반응은 300 마이크로그램의 항체로 셋업한다. 일부 실시형태에서, 다양한 완충제, 시약 동등물, 반응 시간, 반응 온도 및 반응 조건을 포함하는 다양한 조건이 이용될 수 있다.
예로서, 한 가지 반응은 PBS 중 1㎎/㎖의 항체와의 300 마이크로리터 반응이다. 펩타이드 I-45(DMSO 중 5mM 저장액의 1 마이크로리터, 다라투무맙에 대해 2.5 몰 당량)을 284 마이크로리터의 PBS 완충제(10mM 인산염, 150mM 염화나트륨, pH 7.4)에 희석시키고, 이어서, 15 마이크로리터의 다라투무맙(20㎎/㎖ 저장액)을 반응 혼합물에 첨가한 후에 암실 내 실온에서 인큐베이션시켰다. 4시간 후에 Amicon Ultra 원심분리 필터(30 KDa MWCO, 0.5㎖ 용적)을 이용하여 반응 완충제를 교환하였다. 처음에, 완충제 교환을 위해 글리신 완충제(100mM, pH 2.1)를 사용하여 반응 후 표적 결합 모이어티의 해리를 보장하였다. 이어서, 추가적인 완충제 교환 및 저장을 위해 인산염 완충제 식염수(pH 7.4)를 사용하였다.
다른 예에서, 반응은 붕산염 완충제 중 1㎎/㎖의 항체와의 300 마이크로리터 반응이다. 펩타이드 I-44(DMSO 중 5mM 저장액의 1.2 마이크로리터, 다라투무맙에 대해 3.0 몰 당량)를 284 마이크로리터의 붕산염 완충제(100mM 붕산염, pH 8.3) 중에 희석시키고, 15 마이크로리터의 다라투무맙(20㎎/㎖ 저장액)을 반응 혼합물에 첨가한 후에 암실 내 실온에서 인큐베이션시켰다. 20시간 후에 Amicon Ultra 원심분리 필터(30KDa MWCO, 0.5㎖ 용적)을 이용하여 반응 완충제를 교환하였다. 처음에, 완충제 교환을 위해 글리신 완충제(100mM, pH 2.1)를 사용하여 반응 후 표적 결합 모이어티의 해리를 보장하였다. 이어서, 추가적인 완충제 교환 및 저장을 위해 인산염 완충제 식염수(10mM 인산염, 150mM 염화나트륨, pH 7.4)를 사용하였다.
본 개시내용에 따른 반응 결과의 평가를 위해 다양한 기술을 이용할 수 있다.
본 명세서에서 입증되는 바와 같이, 제공된 기술은, 특히, 추가 반응 단계들을 필요로 하는 일 없이 증가된 접합 효율 및 선택성을 제공할 수 있다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술은 항체 제제의 선택 잔기(들)에서 목적하는 관심 모이어티에 선택적으로 접합할 수 있다. 특히, 본 개시내용의 기술은 고효율로 개선된 특성 및/또는 활성(예를 들어, 개선된 순도, 균질성 등)을 갖는 제제를 제공할 수 있다.
일부 실시형태에서, 유용한 기술은 흡광도 기반 DAR 분석이다. DAR(관심 모이어티 및 표적 제제 모이어티(예를 들어, 항체 제제 모이어티)의 비)를, 예를 들어, 다양한 시약 선별/평가 방법에서 다양한 항체 접합체에 대해 계산하였다. 표적 결합 모이어티를 포함하는 다양한 제제를 동일한 반응기를 갖지만 표적 결합 모이어티가 없는 시약에 비해 표적, 예를 들어, 단백질 제제, 예컨대, 항체 제제와의 반응 상대로서 접합 효율에 대해 평가하였다. 다양한 비에서, '약물'/관심 모이어티의 결정은 표적 제제, 예를 들어, 항체 제제에 접합된 플루오레세인 아이소티오사이아네이트(FITC) 염료이다. DAR 몰비는 약물/관심 모이어티의 몰 대 표적 제제/항체의 몰의 비로서 정의된다. 몰농도를 비어람버트 법칙(Beer-Lambert law)을 이용하여 접합 생성물의 FITC의 흡광도(A485) 및 항체의 흡광도(A280), 및 FITC 및 항체의 흡광 상수로부터 계산한다. 보정계수 0.35를 사용하여 280 nm에서 FITC의 흡광도를 보정하였다. 흡광도 측정을 위해 Biotek Synergy H1 마이크로플레이트 판독기 및 Take3 마이크로볼륨 플레이트를 사용하였다. 판독에서 최적의 신호-대-노이즈를 위한 항체 농도는 적어도 3㎎/㎖였다. (표적 결합 모이어티가 존재하지 않는) 동등한 대조군에 비해 더 높은 DAR를 제공할 수 있는 특정 표적 결합 모이어티를 추가 분석을 위한 히트(hit)로서 선택하였다. 특정 평가 데이터를 이하에 예시로서 제공하였다.
[표 30-1]
Figure pct00764
중탄산염 완충제 pH 8.3 중 20시간 동안 25℃에서 10 M eq의 표시된 시약을 이용하여 다라투무맙으로 반응을 셋업하였다. DAR은 약물 대 항체비이고, 이 경우에 "약물"은 FITC이고, DAR은 FITC 흡광도를 이용하여 측정한다.
[표 30-2]
Figure pct00765
중탄산염 완충제 pH 8.3 중 2시간 동안 37℃에서 10 M eq의 표시된 시약을 이용하여 다라투무맙으로 반응을 셋업하였다. DAR은 약물 대 항체비이고, 이 경우에 "약물"은 FITC이고, DAR은 FITC 흡광도를 이용하여 측정한다.
[표 30-3]
Figure pct00766
붕산염 완충제 pH 8.3 중 20시간 동안 37℃에서 30 M eq의 표시된 시약을 이용하여 다라투무맙으로 반응을 셋업하였다. DAR은 약물 대 항체비이고, 이 경우에 "약물"은 FITC이고, DAR은 FITC 흡광도를 이용하여 측정한다.
[표 30-4]
Figure pct00767
중탄산염 완충제 pH 8.3 중 20시간 동안 37℃에서 5 M eq의 표시된 시약을 이용하여 다라투무맙으로 반응을 셋업하였다. DAR은 약물 대 항체비이고, 이 경우에 "약물"은 FITC이고, DAR은 FITC 흡광도를 이용하여 측정한다.
[표 30-5]
Figure pct00768
DAR은 약물 대 항체비이고, 이 경우에 "약물"은 FITC이고, DAR은 FITC 흡광도를 이용하여 측정한다. 상기 표에 나타낸 바와 같이, 제공된 기술은 표적 항체에 대해 표적 결합 모이어티를 포함하지 않는 대조군 기술에 비해 접합을 상당히 향상시킬 수 있다.
[표 30-6]
Figure pct00769
인산염 완충제 식염수 pH 7.4 중 4시간 동안 25℃에서 5 M eq의 표시된 시약을 이용하여 다라투무맙으로 반응을 셋업하였다. DAR은 약물 대 항체비이고, 이 경우에 "약물"은 FITC이고, DAR은 FITC 흡광도를 이용하여 측정한다.
[표 30-7]
Figure pct00770
인산염 완충제 식염수 pH 7.4 중 4시간 동안 25℃에서 2.5 M eq의 표시된 시약을 이용하여 다라투무맙으로 반응을 셋업하였다. DAR은 약물 대 항체비이고, 이 경우에 "약물"은 FITC이고, DAR은 FITC 흡광도를 이용하여 측정한다. 본 명세서에서 입증되는 바와 같이, 표적 결합 모이어티를 포함하는 다양한 시약은 표적 결합 모이어티를 포함하지 않는 기준 시약에 비해 더 높은 수준의 접합(더 높은 비의 관심 모이어티/표적 제제 모이어티)을 제공할 수 있다.
[표 30-8]
Figure pct00771
다라투무맙으로 반응을 셋업하였다. DAR은 약물 대 항체비이고, 이 경우에 "약물"은 FITC이고, DAR은 FITC 흡광도를 이용하여 측정한다. 본 명세서에서 입증되는 바와 같이, 제공된 기술은 다양한 조건 하에 개선된 접합을 제공할 수 있다.
[표 30-9]
Figure pct00772
인산염 완충제 식염수 pH 7.4 중 4시간 동안 25℃에서 2.5 M eq의 표시된 시약을 이용하여 항체로 반응을 셋업하였다. DAR은 약물 대 항체비이고, 이 경우에 "약물"은 FITC이고, DAR은 FITC 흡광도를 이용하여 측정한다. 본 명세서에서 입증되는 바와 같이, 표적 결합 모이어티를 포함하는 제공된 기술은 상이한 항체 시약을 포함하는 다양한 표적 제제에 대해 상당히 개선된 접합을 제공할 수 있다.
[표 30-10]
Figure pct00773
다양한 조건 하에 다라투무맙으로 반응을 셋업하였다. DAR은 약물 대 항체비이고, 이 경우에 "약물"은 FITC이고, DAR은 FITC 흡광도를 이용하여 측정한다. 본 명세서에서 입증되는 바와 같이, 표적 제제(예를 들어, 다라투무맙)에 대해 표적 결합 모이어티(예를 들어, I-44)를 포함하는 제공된 기술은 다양한 조건 하에 표적 제제(예를 들어, I-10)에 대해 표적 결합 모이어티를 포함하지 않는 기준 기술에 비해 상당히 더 많은 접합을 제공할 수 있다. 특히, 본 개시내용은 목적하는 결과(예를 들어, DAR, 기준 기술에 대한 배수 증가 등)를 더 양호하게 달성하기 위해 다양한 조건을 평가하기 위한 기술을 제공한다.
실시예 31. 제공된 기술은 상당히 개선된 선택성을 제공한다.
특히, 제공된 기술은 표적 제제가 접합에 이용 가능한 다중 부위를 가질 때 접합 부위에 대해 상당히 개선된 선택성을 제공할 수 있다. 예를 들어, 본 명세서에 입증된 바와 같이, 다양한 조건 하에 다양한 제공된 기술은 항체 제제의 특정 쇄, 및/또는 항체 제제 상의 선택적 잔기에 선택적으로 접합한다. 특히, 본 개시내용은 효율 및/또는 선택성이 본 개시내용에 따라 최적화될 수 있다는 것을 나타내는 데이터를 제공한다.
일부 실시형태에서, 웨스턴 블롯을 이용하여 항체 접합 위치(예를 들어, 중쇄, 경쇄, etc.)를 평가하였다. 특정 데이터를 도면에 제시하였다. 나타낸 바와 같이, 본 개시내용의 기술은 다양한 선택성 수준을 제공할 수 있다. 일부 실시형태에서, 다양한 기술은 경쇄 이상으로 중쇄에 대한 선택성을 제공한다.
일부 실시형태에서, 웨스턴 블롯에 대해, 샘플을 NuPage 변성 겔(예를 들어, Invitrogen, NP0321) 상에서 처음 실행하였다. 샘플을 웰당 50ng의 양으로 장입하였다. 밴드 분리 후에, iBlot를 이용하여 겔을 나이트로셀룰로스 막(Invitrogen, IB23002) 상에 옮겼다. PBST 완충제(0.1% Tween 20와 함께 PBS pH 7.4)에서 5% 분유로 막을 차단하였다. 일부 실시형태에서, 플루오레세인 접합 경쇄 및 중쇄의 검출을 위해, 1차 항체는 1:2500 희석에서 마우스 항-플루오레세인 항체(EMD Millipore, MAB045)였고, 2차 항체는 1:20000 희석에서 HRP와 접합된 염소 항-마우스 IgG(Southern Biotech, 1038-05)였다. 나이트로셀룰로스 막 상의 항체에 대한 검출 시약을 SuperSignal West Femto 화학발광 기질(Thermo Fisher, 34096)을 이용하여 행하였다. 화학발광 신호에 대해 Azure Biosystems c500 상에서 막을 영상화하였다.
일부 실시형태에서, 제공된 기술을 평가하기 위한 기술은 선택적으로 크로마토그래피 기술(예를 들어, HPLC, UPLC 등)과 함께 질량 분석법이거나 이를 포함한다. 예를 들어, 다양한 생성물 제제를, 예를 들어, 일부 실시형태에서, Agilent ZORBAX RRHD(300SB-C8, 2.1x50㎜, 1.8㎛) 칼럼을 구비한 Sciex X500 QTOF 시스템을 이용하여, 질량 분석법에 의해 평가하였다. 일부 실시형태에서, 액체 크로마토그래피를 MS와 함께 이용하였다. 일례에서: 이동상 완충제는 A = 수 중 0.1% 폼산, B = 아세토나이트릴이었다. 프로토콜 조건은 0 - 1분, 2% B; 1 - 7분, 2 - 40 % B; 7 - 7.5분, 40 - 80% B; 7.5 - 9분, 80% B; 9 - 9.5분, 80 - 2% B; 9.5 - 10.5분, 2% B였고; 유속은 0.25㎖/분이었고; 접합체의 농도는 0.1㎎/분이었고; 주입 용적은 0.01㎖였다. 일부 실시형태에서, 원형(intact) 질량 분석을 위해 BioTool 키트를 사용하였다. 일부 실시형태에서, 질량 범위는 147,000 내지 155,000이고, m/z는 2200 내지 3400였다.
일부 실시형태에서, 제공된 기술의 평가를 위해 펩타이드 맵핑 분석을 이용하였다. 일부 실시형태에서, 트립신을 이용하여 접합 및 비접합 다라투무맙을 펩타이드로 분해하였고, 이온 질량에 의해 접합을 포함하는 펩타이드를 정량화하였다. 일부 실시형태에서, 트립신 분해를 이하와 같이 수행하였다:
1. 깨끗한 단백질 낮은-결합 에펜도르프 관에 25 내지 50 mcg의 총 단백질 샘플을 분취한다.
2. 7kDa MWCO 겔 여과 칼럼 및 Thermo Scientific에 의해 제공된 프로토콜을 이용하여 Smart 분해 완충제에 샘플 완충제 교환한다.
3. 100 mcL의 최종 용적을 달성하기 위해 완충제 교환 샘플에 임의의 필요한 Smart 분해 완충제를 첨가하였다.
4. 5 mcL의 Smart 트립신 용액을 완충제 교환 샘플에 첨가하였다.
5. 70℃에서 건조 욕에서 15분 동안 단백질을 분해시킨다(샘플에 적절한 열 전달을 보장하기 위해 웰에 물을 첨가한다).
6. 욕으로부터 샘플을 제거하고, 실온으로 냉각시킨다.
7. 1 mcL의 TCEP Bond Breaker 용액을 단백질 샘플에 첨가한다.
8. 실온에서 30분 동안(빛으로부터 떨어져서) 인큐베이션시킨다.
9. 10 mcL의 5% 수성 TFA를 샘플에 첨가하여 산성화시키고 교반한다.
10. 벤치 탑 원심분리기에서 12,000 rcf에서 샘플을 3분 동안 교반한다.
11. 샘플을 깨끗한 오토샘플러 관에 옮기고, 임의의 분해되지 않은 단백질 펠릿을 건드리지 않도록 조심한다.
일부 실시형태에서, 분석을 위한 기기 조건은 다음과 같다:
LC:
Waters Acquity I-Class UPLC
이동상:
A: 0.05% 수성 TFA
B: 아세토나이트릴 중 0.05% TFA
칼럼:
ACQUITY UPLC 펩타이드 BEH C18 칼럼, 300Å, 1.7㎛, 2.1㎜×100㎜
구배:
처음 1분 동안 2% B를 유지함
1 내지 60분에 걸쳐 2 내지 65% B
MS:
Thermo LTQ Orbitrap Velos Pro
MS1, 모 이온, 400Da에서 30000의 분해능; 범위: 300 내지 2000 Da, 5 ppm의 정확도를 보장하기 위해 락 매스(lock mass)를 사용함
모 이온의 단편화를 촉발하기 위해 20000개의 총 이온 계수 역치를 이용하는 데이터-의존적 방법. 35 eV의 충돌 에너지(펩타이드 맵핑을 위한 표준 충돌 에너지)
다양한 MS 데이터를 예로서 도면에 제시하였다. 일부 실시형태에서, 항체 중쇄의 K246/K248에서, 예를 들어, I-40 또는 I-45를 이용하였을 때, 접합 선택성이 생겼다(예를 들어, 도 13 참조). 일부 실시형태에서, 접합 부위는 중쇄의 K246을 포함한다. 일부 실시형태에서, 접합 부위는 중쇄의 K248을 포함한다. 일부 실시형태에서, 접합 부위는 중쇄의 K288/K290을 포함한다. 일부 실시형태에서, 접합 부위는 중쇄의 K288을 포함한다. 일부 실시형태에서, 접합 부위는 중쇄의 K290을 포함한다. 일부 실시형태에서, 접합 부위는 경쇄의 K185를 포함한다. 일부 실시형태에서, 접합 부위는 경쇄의 K187을 포함한다. 일부 실시형태에서, 접합 부위는 중쇄의 K414를 포함한다.
추가적인 데이터는 제공된 기술이 다양한 유형의 항체 제제(예를 들어, 단클론성 항체 제제, 다클론성 항체 제제, 풀링된 항체 제제, 예컨대, IVIG, IgG1, IgG2, IgG3 및/또는 IgG4 항체 제제 등)에 대해 효율적 및/또는 선택적인 접합을 제공할 수 있다는 것을 확인하였다. 예를 들어, 도 22에서 데이터는 I-44가 (예를 들어, I-10을 이용함으로써, 비-특이적 접합에 비해) 중쇄의 K246 및/또는 K248에서 접합을 효율적 및 선택적으로 제공할 수 있다는 것을 확인한다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술, 예를 들어, I-44를 데노수맙(IgG2)(예를 들어, 도 27 참조) 및 니볼루맙(IgG4)(예를 들어, 도 28 참조)과의 접합을 위해 이용하였다. 본 명세서에서 확인되는 바와 같이, 일부 실시형태에서, IgG2 중쇄의 잔기 251 및/또는 253은 선택적으로 접합되고; 일부 실시형태에서, IgG2 중쇄의 잔기 239 및/또는 241은 선택적으로 접합된다. 본 개시내용의 당업자는 다양한 유형의 항체가 또한 본 개시내용에 따라 (예를 들어, 이러한 항체에 대한 적합한 표적 결합 모이어티 및 본 명세서에 기재된 바와 같은 다양한 반응성 모이어티 및 선택적으로 링커 모이어티를 포함하는 화합물 및 방법을 이용하여) 고효율 및/또는 선택성으로 접합될 수 있다는 것을 인식할 것이다. 펩타이드 맵핑을 위한 유용한 프로토콜을 예로서 이하에 기재하며; 당업자는 이하에 기재한 프로토콜의 다양한 변형 및 변화를 포함하는 다른 프로토콜이 또한 본 개시내용에 따라 이용될 수 있다는 것을 인식한다.
1. 단백질을, 예를 들어, Pierce 660 시약으로 정량화한다.
2. 저-결합 에펜도르프 관에서 100㎕의 Tris 50mM pH 8.0에서 10 ug 샘플을 희석시킨다.
3. 블록 히터에서 15분 동안 60℃에서 10mM DTT (다이티오트레이톨)를 첨가함으로써 단백질을 환원시킨다.
4. 암실에서 30분 동안 실온에서 알킬화를 위해 15mM 아이오도아세트아마이드를 첨가한다.
5. 10mM DTT를 첨가함으로써 반응을 중단시킨다.
6. 써모쉐이커에서 37℃에서 밤새 0.33㎍의 α-키모트립신(Sigma)으로 단백질을 분해한다.
7. 2㎕의 100% 폼산으로 샘플을 산성화시킨다.
8. Strata-X 역상 SPE(Phenomenex) 상에서 펩타이드를 정제한다. 2% 폼산과 함께 60% 아세토나이트릴을 이용하여 펩타이드를 용리시켰다.
9. 질소 스트림 하에 용리된 펩타이드를 건조시킨다.
10. 25㎕의 이동상 A에서 펩타이드를 재구성한다.
11. LC-MS 상에서 주입 전에, 예를 들어, 이하의 파라미터에 따라 이동상 A에서 펩타이드를 1:10으로 희석시킨다.
예로서 분석을 위한 기기:
LC: Eksigent microLC200 (Sciex)
이동상:
A: 수 중 0.2% 폼산 및 3% DMSO
B: 에탄올 중 0.2% 폼산 및 3% DMSO
칼럼: Luna Omega PS 칼럼 0.3㎜ i.d., 3 μm 입자, 100mm (Phenomenex)
구배: 6㎕/분 유속에서 25분에 걸쳐 2 내지 48% B.
MS: ABSciex TripleTOF 6600+
MS1(범위 350 내지 1250 Da), 분해능 35000
500 cps 역치를 갖는 DDA 방법.
본 명세서에 기재된 바와 같이, 제공된 기술은 다양한 유형의 항체 제제(예를 들어, 단클론성 항체 제제, 다클론성 항체 제제 또는 풀링된 항체 제제, 예컨대, IVIG)에 대한 (예를 들어, 접합 부위에 대해) 고도로 효율적 및/또는 선택적인 접합을 제공할 수 있다. 특히, 본 개시내용은 본 개시내용의 기술이 IgG2 및 IgG4 항체의 고도로 효율적 및/또는 선택적인 접합을 제공할 수 있다는 것을 확인하는 데이터를 제공한다(예를 들어, 데노수맙(IgG2)에 대한 특정 접합 데이터에 대해 도 27, 및 니볼루맙(IgG4)에 대한 특정 접합 데이터에 대해 도 28 참조). 일부 실시형태에서, 20시간, 25℃에서 항체에 대해 붕산염 완충제 pH 8.2, 2.5 M eq의 시약에서 반응을 수행하였다. 본 개시내용의 당업자는 다른 유형의 항체가 또한 본 개시내용에 따라 (예를 들어, 이러한 항체에 대한 적합한 표적 결합 모이어티 및 본 명세서에 기재된 바와 같은 다양한 반응성 모이어티 및 선택적으로 링커 모이어티를 포함하는 화합물 및 방법을 이용하여) 고효율 및/또는 선택성으로 접합될 수 있다는 것을 인식할 것이다.
실시예 32. 제공된 생성물 제제는 표적 제제의 특성 및 기능을 유지한다.
특히, 제공된 기술은 순한 조건, 짧은 경로(예를 들어, 표적 결합 모이어티의 별도의 제거 없음) 등을 이용하고, 표적 제제(예를 들어, 항체 제제)의 하나 이상 또는 모든 목적하는 특성 및/또는 활성을 유지하는 지정 부위 및 생성물 제제에서 접합을 제공한다. 도면(예를 들어, 도 7, 도 8, 도 9, 도 10 등)에 입증된 바와 같이, 항체 제제 모이어티를 포함하는 제공된 제제는 Fc 수용체(예를 들어, FcRn)와의 상호작용을 유지할 수 있다.
표적 제제(예를 들어, 항체 제제)의 특성 및/또는 활성을 평가하는 데 다양한 기술이 유용하다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 제공된 제제와 FcRn 수용체 사이의 결합을 평가하는 데 ELISA 분석을 이용하였다. 일례에서, 고결합 96-웰 플레이트(예를 들어, Costar 3922)를 PBS 완충제(pH 7.4) 중 뉴트라비딘(Thermo Fisher, 31000)으로 코팅하고, PBST 완충제 pH 7.4(0.05% tween 20과 함께 PBS 완충제 pH 7.4) 중 5% 소 혈청 알부민으로 차단하고, PBST 완충제 pH 6.0 중에서 Avi-태그된 FcRn 단백질(Acro Biosystems, FCM-H82W4)을 고정하였다. PBST pH 6.0로 세척한 후에, 항체(예를 들어, 다라투무맙, 얼비툭스 등) 및 이의 접합체를 PBST pH 6.0에서 플레이트 상의 FcRn에 결합시켰다. 모든 결합된 항체 및 접합체를 HRP와 접합된 항-인간 F(ab)2 항체를 이용하여 PBST pH 6.0에서 검출하였다. 검출 시약은 SuperSignal ELISA Pico 화학발광 기질(Thermo fisher, 37069)이었고, 이어서, Biotek Synergy H1 마이크로플레이트 판독기 상에서 발광 판독하였다.
실시예 33. 화합물 I-53의 예시적 합성.
특히, 본 개시내용은 본 명세서에 기재된 화합물을 제조하기 위한 기술을 제공한다. I-53의 제조를 이하에 예로서 기재한다.
Figure pct00774
HBr/H2O(149.0g, 736.6m㏖, 100㎖, 40% 순도) 중 화합물 1(3.00g, 19.3m㏖)의 혼합물을 140℃에서 16시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 70℃에서 제거하고, 잔사를 MeCN(30㎖) 중에서 10분 동안 분쇄하였다. 여과 후에, 고체를 동결건조를 통해 건조시켜 화합물 2(4.00g, 18.0m㏖, 93.17% 수율, HBr)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR: ES9329-522-P1B (400 MHz DMSO-d 6 ): δ ppm 10.06 (s, 1 H) 8.11 (s, 3 H) 7.30 (dd, J = 12.17, 1.63 Hz, 1 H) 7.09 (d, J = 8.28 Hz, 1 H) 6.93 - 7.04 (m, 1 H) 3.93 (q, J = 5.27 Hz, 1 H) 3.87 - 4.00 (m, 1 H).
Figure pct00775
DMF(50㎖) 중 화합물 2(3.00g, 13.51m㏖, HBr, 1.00 eq), 화합물 2a(5.56g, 13.51m㏖, 1.00 eq), HBTU(5.12g, 13.51m㏖, 1.00 eq), DIEA(5.24g, 40.5m㏖, 7.06㎖, 3.00 eq)의 혼합물을 15℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 0.5M HCl(차가움, 500㎖)에 첨가하였고, 많은 백색 고체가 나타났다. 여과 후에, 고체를 동결건조를 통해 건조시켜 화합물 3(7.00g, 조질)을 백색 고체로서 얻었다.
Figure pct00776
TFA(61.60g, 540.2m㏖, 40㎖) 및 DCM(40㎖) 중 화합물 3(7.00g, 13.0m㏖)의 혼합물을 15℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 플래시 C18(ISCO®;　120g SepaFlash® C18　Flash 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90%의 MeCN/H2O 구배의 용리)에 의해 직접 정제하여 화합물 4(5.00g, 10.4m㏖, 79.8% 수율)을 백색 오일로서 얻었다. 1H NMR: ES9329-561-P1C (400 MHz DMSO-d 6 ): δ ppm 12.68 (s, 1 H) 9.67 (s, 1 H) 8.33 (t, J = 5.65 Hz, 1 H) 7.90 (d, J = 7.28 Hz, 2 H) 7.71 (d, J = 7.28 Hz, 2 H) 7.39 - 7.47 (m, 2 H) 7.29 - 7.37 (m, 2 H) 7.02 (d, J = 12.05 Hz, 1 H) 6.84 - 6.90 (m, 2 H) 4.36 - 4.47 (m, 1 H) 4.26 - 4.30 (m, 2 H) 4.20 - 4.25 (m, 1 H) 4.17 (s, 2 H) 1.88 - 2.06 (m, 1 H) 1.24 (s, 3 H).
Figure pct00777
일부 실시형태에서, Fmoc 화학을 이용하는 이하의 절차를 이용하여 펩타이드를 제조하였다.
1) 수지 제조: DCM(5㎖) 중 CTC 수지(1.0m㏖, 1.0g, 1.00m㏖/g) 및 Fmoc-PEG6-CH2CH2COOH(0.575g, 1.0m㏖, 1.00 eq)를 함유하는 용기에 DIEA(4.00 eq)를 적가하고, 2시간 동안 15℃에서 N2 버블링하면서 혼합하였다. 이어서, MeOH(1.0㎖)를 첨가하고, 다시 30분 동안 N2로 버블링하였다. 수지를 DMF(20㎖)*5로 세척하였다. 이어서, DMF(20㎖) 중 20% 피페리딘을 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 15℃에서 N2로 버블링하였다. 이어서, 혼합물을 여과시켜 수지를 얻었다. 수지를 DMF(20㎖)*5로 세척한 후에 다음 단계로 진행시켰다.
2) 결합: DMF(10㎖) 중 Fmoc-PEG12-CH2CH2COOH(1.26g, 1.50 eq), HATU(0.541g, 1.43 eq)의 용액을 N2 버블링하면서 수지에 첨가하였다. 이어서, DIEA(3.00 eq)를 혼합물에 적가하고, 30분 동안 15℃에서 N2로 버블링하였다. 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하였고, 무색을 나타낸다면, 결합이 완료되었다. 이어서, 수지를 DMF(20㎖)*5로 세척하였다.
3) 탈보호: DMF(20㎖) 중 20% 피페리딘을 수지에 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 15℃에서 N2로 버블링하였다. 이어서, 수지를 DMF(20㎖)*5로 세척하였다. 탈보호 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하였고, 청색 또는 다른 적갈색이 나타났다면, 결합이 완료되었다.
4) 모든 다른 아미노산에 대해 단계 2 및 3을 반복한다: (이하의 표에서 2 내지 4).
Figure pct00778
펩타이드 절단 및 정제: 실온에서 측쇄 보호 펩타이드를 함유하는 플라스크에 절단 완충제(20% HFIP/DCM, 30㎖)을 첨가하고, 30분 동안 교반한다. 여과시키고, 여과액을 수집한다. 혼합물을 감압 하에 농축시켜 용매를 제거하였다. 잔사를 동결건조시켜 조질 화합물 5(802㎎)를 제공하였다.
Figure pct00779
Figure pct00780
Figure pct00781
일부 실시형태에서, Fmoc 화학을 이용하는 이하의 절차를 이용하여 펩타이드를 제조하였다.
1) 수지 제조: DCM(5㎖) 중 CTC 수지(0.3m㏖, 0.3g, 1.00m㏖/g) 및 Fmoc-Thr(tBu)-OH(0.119g, 1.0m㏖, 1.00 eq)를 함유하는 용기에 DIEA(4.00 eq)를 적가하고, 2시간 동안 15℃에서 N2 버블링하면서 혼합하였다. 이어서, MeOH(0.5㎖)를 첨가하고, 다시 30분 동안 N2로 버블링하였다. 수지를 DMF(10㎖)*5로 세척하였다. 이어서, DMF(10㎖) 중 20% 피페리딘을 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 15℃에서 N2로 버블링하였다. 이어서, 혼합물을 여과시켜 수지를 얻었다. 수지를 DMF(10㎖)*5로 세척한 후에 다음 단계로 진행시켰다.
2) 결합: DMF(3㎖) 중 Fmoc-Cys(Trt)-OH(0.527g, 3.00 eq), HBTU(0.324g, 2.85 eq)의 용액을 수지에 N2 버블링하면서 첨가하였다. 이어서, DIEA(6.00 eq)를 혼합물에 적가하고, 30분 동안 15℃에서 N2로 버블링하였다. 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하였고, 무색을 나타낸다면, 결합이 완료되었다. 완료되지 않았다면, 닌하이드린 검사가 무색을 나타낼 때까지 결합을 한 번 더 반복하였다. 이어서, 수지를 DMF(10㎖)*5로 세척하였다.
3) 탈보호: DMF(10㎖) 중 20% 피페리딘을 수지에 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 15℃에서 N2로 버블링하였다. 이어서, 수지를 DMF(10㎖)*5로 세척하였다. 탈보호 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하였고, 청색 또는 다른 적갈색이 나타났다면, 결합이 완료되었다.
4) 모든 다른 아미노산에 대해 단계 2 및 3을 반복한다: (이하의 표에서 2 내지 13).
5) 아세틸화: Fmoc-Asp(OtBu)-OH를 서열에 결합한 후에, 수지를 DMF로 세척하고, Fmoc를 제거하였다. 이어서, 수지를 DMF로 5회, DCM으로 5회 세척하였고, 이어서, 혼합된 용액은 Ac2O/NMM/DMF(V/V/V, 총 10/5/85, 20㎖)를 함유하였고, 수지에 첨가하고, 반응을 20분 동안 지속하였다. 닌하이드린 검사는 유리 아민이 검출되지 않았다는 것을 나타내었다.
마지막 위치에 대한 결합: 화합물 5(802㎎, 0.6m㏖, 2.00 eq), DIC(2.00 eq), HOBt(2.00 eq) 및 DMAP(2.00 eq)의 용액을 수지에 첨가하고, 혼합물을 36분 동안 N2로 버블링하였다. 미니-절단 후에 결합 반응을 LCMS에 의해 모니터링하였고, 거의 50%는 목적하는 MS였다. 이어서, 수지를 DMF(10㎖)*5, MeOH(10㎖)*5로 세척하고, 이어서, 진공 하에 건조시켰다.
Figure pct00782
펩타이드 절단 및 정제: 실온에서 측쇄 보호 펩타이드를 함유하는 플라스크에 절단 완충제(95%TFA/2.5%Tis/2.5%H2O, 15㎖)를 첨가하고, 1시간 동안 교반한다. 여과시키고, 여과액을 수집한다. 펩타이드를 차가운 아이소프로필 에터(100㎖)로 침전시키고, 원심분리시켰다(3000rpm에서 3분). 아이소프로필 에터로 추가 2회 세척하고, 진공 하에 2시간 동안 조질의 펩타이드를 건조시킨다. 잔사를 분취-HPLC(산성 조건, TFA)에 의해 정제하여 화합물 420(17.3㎎, 1.99% 수율, 95.3% 순도)을 백색 고체로서 얻었다. 관찰된 LCMS +ESI(m/z, 주요 피크): 1447.8, 965.5, 724.4. 정제 프로토콜을 이하에 예로서 제시한다:
Figure pct00783
다양한 다른 화합물, 예를 들어 화합물s I-54, I-55, I-56, I-57, I-58 등을 또한 제조하였다.
실시예 34. 다중 항체 제제 모이어티를 포함하는 제제의 제조.
특히, 본 개시내용은 상이한 특이성을 갖는 모이어티, 예를 들어, 상이한 항원으로 향하는 항체 모이어티를 포함하는 제제의 제조를 위한 기술을 제공한다. 일부 실시형태에서, 이러한 제제는 제1 항체 제제 모이어티이거나 이를 포함하는 표적 제제 모이어티, 제1 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는 제1 관심 모이어티 및 선택적으로 링커 모이어티를 포함하는 제1 화합물을, 제2 반응성 모이어티 및 제2 항체 제제를 포함하는 제2 화합물과 반응시킴으로써 본 명세서에 기재된 바와 같이 제조될 수 있다. 일부 실시형태에서, 제1 제제 및 제2 제제의 각각은 독립적으로 식 P-I 또는 P-II의 화합물, 또는 이의 염이다. 특히, 제공된 기술은 다양한 이점을 제공하고, 예를 들어, 이들은 상이한 선택성을 선택적으로 갖는 다중 항체 제제 모이어티를 포함하는 제제를 제공하기 위해 현재의 항체 제제를 다른 항체 제제와 용이하게 접합시킬 수 있다. 일부 실시형태에서, 생성물 제제는 이중특이성 항체 제제이다. 본 명세서에서 제공된 기술의 다양한 효과 및/또는 이점을 확인하는 예가 기재된다.
제1 항체 제제 모이어티, 예를 들어, 항-CD20 제제 모이어티, 예컨대, 본 실시예에서 이용되는 리툭시맙을 포함하는 제1 제제는 이중특이성 제제, 본 실시예에서, CD20×CD3을 제공하기 위해 제2 항체 제제 모이어티, 예를 들어, CD3-지정 ScFv(SP34)를 포함하는 제2 제제와 접합시켰다. 치료적 및/또는 진단 적용을 위한 다양한 구조/형식 및/또는 이에 유용한 것을 포함하는 다양한 항체 제제를 접합시킬 수 있고, 예를 들어, 리툭시맙은, 예를 들어, B-세포 림프종 및 림프성 백혈병의 치료에 유용한 키메라 단클론성 항체이다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 "규격품" 치료적 항체 제제, 예를 들어, 다양한 mAb에 대한 효율적인 부위-지정 화학적 접합을 제공할 수 있고, 다양한 이중특이성 치료제의 개발을 가능하게 하는 기술, 예를 들어, mAb 요법 인핸서(MATETM) 기술을 제공한다. 특히, 본 개시내용의 기술, 예를 들어, MATE 기술은 새로운 DNA 벡터 또는 마스터 세포주의 유전자 조작을 생성할 필요 없이 항체 제제, 예를 들어, 다양한 현재의 항체의 화학적 조작을 제공한다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술의 이점은 1) 이용 가능한 아미노산 잔기에 무차별적으로 결합/접합함으로써 부위-지정 접합 특이성을 결여하고/하거나 2) 접합 태그를 생성하는 유전자 조작을 필요로 하는 특정 현재의 방법에 비해, 1) 부위-지정 접합 특이성, 및/또는 2) 유전자 조작의 필요 없음을 포함한다. 일부 실시형태에서, 유용한 기술을 이하에 기재하되, 반응성 모이어티를 포함하는 태그는 제1 항체 제제 모이어티를 포함하는 제제에 도입되고, 제2 항체 제제 모이어티를 포함하는 제제와의 접합에 이용된다. 일부 실시형태에서, 효소 접합은 소르타제에 의해 촉진된다.
Figure pct00784
일부 실시형태에서, 유용한 반응식을 이하에 도시한다:
Figure pct00785
Figure pct00786
일부 실시형태에서, 유용한 반응식을 이하에 도시한다:
Figure pct00787
Figure pct00788
일부 실시형태에서, 유용한 반응식을 이하에 도시한다:
Figure pct00789
Figure pct00790
Figure pct00791
일부 실시형태에서, 제1 제제는 (G)n이거나 이를 포함하는 반응성 모이어티를 포함하되, n은 1 내지 10이다. 일부 실시형태에서, n은 3, 4 또는 5이다. 일부 실시형태에서, (G)n 모이어티는 유리 N-말단 아미노기를 포함한다. 펜타글리신-태그된 리툭시맙의 제조를 위한 절차를 본 명세서에서 예로서 기재한다. 리툭시맙(임상 등급)을 50mM 붕산염 완충제 pH 8.2 중에서 1㎎/㎖로 희석시켰다. 2.5 몰 당량의 I-53을 첨가하고 철저하게 혼합하였다. 반응을 20시간 동안 25C에서 800 RPM으로 진행시켰다. 반응물을 15㎖ 10,000 MWCO Amicon 스핀 칼럼에 첨가하고, 멸균 인산염 완충제 식염수 pH 7.4를 상부에 첨가하였다. 스핀 칼럼을 스윙 버킷 로터(swinging bucket rotor)에서 30분 동안 2800×g에서 원심분리시켰다. 이어서, 스핀 칼럼을 멸균 100mM 글리신 완충제 pH 2.7로 채우고, 상기와 같이 교반하였다. 펜타글리신-태그 접합된 리툭시맙의 글리신 완충제 세척을 반복하였고, 이어서, 용액을 PBS에 대한 완충제 교환으로 다시 pH 7.4로 만들었다. 일부 실시형태에서, 예를 들어, (G)n이거나 이를 포함하는 반응성 모이어티를 항체 제제를 발현시킬 때 혼입할 수 있다.
일부 실시형태에서, 제2 제제는 LPXTG이거나 이를 포함하는 반응성 모이어티를 포함하되, X는 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 제2 제제는 LPETG이거나 이를 포함하는 반응성 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 제제는 LPXTG-(X)n이거나 이를 포함하는 반응성 모이어티를 포함하되, 각각의 X는 독립적으로 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, 제2 제제는 LPETG-(X)n이거나 이를 포함하는 반응성 모이어티를 포함하되, 각각의 X는 독립적으로 아미노산 잔기이다. 일부 실시형태에서, n은 1 내지 10이다. 일부 실시형태에서, n은 2 내지 10이다. 일부 실시형태에서, n은 3 내지 10이다. 일부 실시형태에서, n은 2이다. 일부 실시형태에서, n은 3이다. 일부 실시형태에서, n은 4이다. 일부 실시형태에서, n은 5이다. 일부 실시형태에서, n은 6이다. 일부 실시형태에서, n은 7이다. 일부 실시형태에서, n은 8이다. 일부 실시형태에서, n은 9이다. 일부 실시형태에서, n은 10이다. 일부 실시형태에서, LPXTG이거나 이를 포함하는 반응성 모이어티는 본 명세서에 기재된 바와 같은 반응을 이용하여(예를 들어, R-I의 구조식을 갖는 적합한 화합물 또는 이의 염과의 반응을 통해) 관심 모이어티로서 혼입될 수 있다. 일부 실시형태에서, 반응성 모이어티는 항체 제제를 발현시킬 때 혼입될 수 있다. 일부 실시형태에서, 제2 제제를 세포로부터 발현시켰다. 일부 실시형태에서, 제2 제제는
Figure pct00792
또는 이의 염이거나 이를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 제제는 II-I이되, II-I은 전체 서열이 서열번호 1, 또는 이의 염인 펩타이드이다. 일부 실시형태에서, 제제, 예를 들어, II-1을 낮은 내독소 조건 하에 코돈 최적화된 HEK293에서 발현 벡터로부터 발현시켰다. 일부 실시형태에서, 예를 들어, MATE에 대한 단량체 scFv를 얻기 위해, 친화도 정제 및 크기 배제 크로마토그래피를 이용하였다. Octet Data Analysis HT 소프트웨어를 이용하여 결합 분석을 행하였다. 진행된 데이터를 평형 해리 상수(Kd)의 결정을 위한 1:1 결합 모델에 전반적으로 적합화시켰다.
다양한 기술은, 예를 들어, 제1 반응성 모이어티 및 제2 반응성 모이어티를 통해, 제1 제제 및 제2 제제를 접합할 수 있다. 일부 실시형태에서, 반응은 효소 반응이다. 일부 실시형태에서, 반응은 소르타제에 의해 촉진된다. 일부 실시형태에서, 방법은 소르타제의 존재 하에 I-53 또는 이의 염을 I-I 또는 이의 염과 접촉시키는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, 생성물 제제는 CD20×CD3 제제이다. 일부 실시형태에서, 생성물은 LPXTG이거나 이를 포함하는 생성물 링커 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 생성물은 LPXT(G)n이거나 이를 포함하는 생성물 링커 모이어티이되, n은 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 생성물은 LPETG이거나 이를 포함하는 생성물 링커 모이어티를 포함한다. 일부 실시형태에서, 생성물은 LPET(G)n이거나 이를 포함하는 생성물 링커 모이어티이되, n은 본 명세서에 기재된 바와 같다. 일부 실시형태에서, 다르게 제조된 유사한 제제로 이루어진 생성물 제제는 다수의 이점, 예컨대, 항체 제제 모이어티의 특성/활성의 유지, 항체 제제 모이어티에 대한 낮은 손상 수준(예를 들어, 일부 실시형태에서 보다 소수의 단계 및/또는 보다 순한 반응 조건으로 인함), 균질성, 부위-특이성, 다양한 특성/활성의 링커(예를 들어, 천연 아미노산 펩타이드 링커에 의해 제공될 수 없는 것) 등을 제공한다. 일부 실시형태에서, 항체 제제 모이어티는 다양한 기능, 예를 들어, 표적에 대한 결합, FcR에 대한 (예를 들어, Fc 도메인을 통한) 결합 등을 유지한다. 일부 실시형태에서, 항체 제제 모이어티는 활성, 예를 들어, ADCC, ACDP 등과 같은 Fc 효과기 메커니즘을 유지한다. 일부 실시형태에서, 항체 제제 모이어티의 제2 유형의 혼입은 추가적인 특성 및/또는 활성, 예를 들어, T 세포-매개 면역 활성(예를 들어, T 세포-매개 세포독성, 표적-의존적 T 세포 활성화 및 보충 등)을 도입한다. 일부 실시형태에서, 다수 유형의 항체 제제 모이어티를 포함하는 제제는 하나 이상 또는 모든 유형의 항체 제제 모이어티에 대한 증가된 활성, 예를 들어, 일부 실시형태에서, 표적 세포, 예컨대 암세포의 증가된 사멸을 제공한다. 접합을 위한 절차를 이하에 예로서 기재한다.
리툭시맙에 대한 항-CD3 scFv의 접합. 소르타제 반응은 SP34 ScFv를 첨가하기 위해 활성 모티프 재조합 소르타제 A5 펜타돌연변이체(pentamutant) 효소를 사용하였다. 2.5 몰 당량의 scFv를 I-53와 접합된 리툭시맙에 첨가하였다(상기 참조). 5 몰 당량의 NiCl2를 혼합물에 첨가하여 2:1의 Ni2+ 대 scFv를 수득하였다. CaCl2를 1mM까지 첨가하였다. 6㎎의 표지된 리툭시맙(3㎎ scFv)마다 250 ug의 소르타제 A5를 첨가하였다. 1시간 동안 30℃에서 800 RPM으로 반응을 실행하였다. 50mM EDTA를 이용하여 반응을 중단시켰다. 크기-배제 크로마토그래피에 의해 샘플을 정제하여 리툭시맙×SP34 scFv의 조성물(III-1)을 제공하였다. 일부 실시형태에서, 생성물 제제 조성물은 특정 수준의 비반응 제1 제제 및/또는 제2 제제를 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 생성물 제제 조성물은 SP34 ScFv와 접합된 리툭시맙에 추가로 리툭시맙을 포함한다. 특정 결과를 도 17에 도시하였다. 샘플을 MOPS 실행 완충제에서 1.5시간 동안 150 V에서 4 내지 12% NuPAGE 겔 상에서 실행하였고, 이어서, 쿠마씨 블루로 염색하였다. 환원된 레인은 비접합 경쇄(대략 30kDa) 및 중쇄(대략 50kDa), 및 대략 80kDa에서 CD20×CD3(리툭시맙×SP34 scFv, III-1)을 나타낸다. 비환원 레인은 비접합 리툭시맙(하부 밴드) 및 CD20×CD3(상부 밴드)을 나타낸다. 일부 실시형태에서, 생성물 제제를 (예를 들어, 이하에 기재된 다양한 분석 결과에서) SP34 ScFv에 접합되지 않은 리툭시맙의 제거 없이 이용하였다.
1개 초과의 항체 제제 모이어티를 포함하는 제공된 제제, 예를 들어, CD20×CD3 제제(예를 들어, 상기 기재한 리툭시맙×SP34 scFv)를 생체내와 시험관내 둘 다에서 본 개시내용에 따른 다양한 적합한 기술을 이용하여 평가할 수 있다. 특정 분석을 이하에 기재한다.
일부 실시형태에서, 리툭시맙×SP34 scFv에 대한 CD20의 결합(III-1)을 평가하고, Octet을 이용하는 생물층 간섭계(Fortebio)에 의해 확인하였다. Protein A 바이오센서를 이용하여 결합 분석을 수행하였다. CD3εδ, CD16a 및 FcRn의 결합을 뉴트라비딘-코팅 플레이트를 이용하는 ELISA에 의해 결정하였다. 바이오틴일화된 인간 CD3 및 CD3 이형이량체 단백질(Avi 태그), CD16a(Avi 태그) 및 인간 CD16a를 사용하였다. 항-인간 F(ab) HRP를 이용하여 판독을 결정하였다.
일부 실시형태에서, 분석은 시험관내 T 세포-매개 세포독성 분석이다. 일부 실시형태에서, 비분획화 및 NK-세포 고갈된 PBMC를 새로 해동하고 PHA + IL-2 사전 자극한 PBMC로부터 제조하였다. KILR 레트로입자(Eurofins)를 이용하여 베타-gal 리포터 단편을 안정하게 발현시키기 위해 Daudi(CD38+) B 림프아구 세포를 조작하였다. 표적 세포를 III-1, 리툭시맙 및 대조군으로 처리하였다. PBMC를 15:1의 효과기:표적비로 도입하고, 18시간 동안 인큐베이션시켰다. 표적 세포사를 반영하기 위해 루미노미터를 이용하여 발광 신호를 얻었다.
일부 실시형태에서, 동물 모델에서 제공된 기술을 평가하였다. 일부 실시형태에서, 사이노몰거스 원숭이를 리툭시맙 또는 III-1(30㎍/㎏)을 정맥내로 주사하였다. 종점은 T 세포, 단핵구, 과립구, NK 세포 및 B 세포(CD45, CD3, CD16, CD14, NKG2A, HLA DR) 및 세포의 활성화(CD44 및 CD69)의 임상 관찰, 사이토카인 프로파일 및 유세포분석 면역표현법을 포함하였다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 다중 항체 제제 모이어티를 포함하는 제제, 예를 들어, 이중특이성 제제의 다양한 특성 및/또는 활성을 확인하는 데이터를 제공한다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 접합 후에 항체 제제 모이어티가 여전히 이들의 표적에 효과적으로 결합할 수 있다는 것을 확인하는 데이터를 제공한다. 일부 실시형태에서, III-1에 대한 CD20의 결합 친화도가 0.75nM이라는 것을 관찰하였다. 리툭시맙 및 III-1에 대한 CD20 결합은 유사하였고, 따라서, CD3-결합 ScFv의 접합은 CD20에 대한 친화도에 부정적으로 영향을 미치지 않았다. ELISA 결과는 III-1이 CD3εδ, FcRn 및 CD16a에 결합한다는 것을 나타내었는데, 이는 접합이 이들의 다양한 모이어티에 대한 결합을 방해하지 않는다는 것을 나타낸다.
일부 실시형태에서, 본 개시내용은 데이터, 예를 들어, 시험관내 T 세포-매개 세포독성 결과를 제공하는데, 이는 효과기 T 세포에 대한 리툭시맙 모이어티 대 CD3 결합에 의해 Fc/FcR 및 CD20 결합의 활성을 나타내었다. 일부 실시형태에서, PBMC를 기능적으로 사전자극하는 것에 의한 T 세포 풍부화는 표적 세포의 사멸을 2배만큼 증가시켰다. 일부 실시형태에서, NK 세포를 기계적으로 고갈시키는 것은 표적 세포사가 T 세포에 의해 유도되고, ADCC를 통해 NK 세포에 의해 유도되지 않거나 상대적으로 더 적은 정도일 수 있다는 것을 나타내었다. 일부 실시형태에서, III-1이 사전 자극한 또는 새로 해동시킨 PBMC 각각에 대해 0.03 내지 0.07nM 또는 0.09 내지 021nM의 EC50로 표적 세포사멸을 유발하였다는 것을 관찰하였다.
제공된 제제의 다양한 특성 및/또는 활성을 또한 동물 모델에서 확인하였다. 일부 실시형태에서, 사이노몰거스 원숭이에서의 연구는 III-1이 일부 경우에, 동등한 용량의 리툭시맙에 비해 투약 후 4시간에 피크를 갖는, 예를 들어, 증가된 CD69 및 CD44 발현(일부 실시형태에서, 각각 3- 및 2-배 관찰됨)에 의해 나타낸 바와 같은 면역 세포, 예를 들어, T 세포를 활성화시킬 수 있다는 것을 나타내었다. 일부 실시형태에서, III-1 처리 동물에서 B 세포의 확연한 고갈이 투여 후 30분 이내에 관찰되었고, 7 내지 14일까지는 부분적으로 회복된 반면, 동등한 용량의 리툭시맙은 일시적 B-세포 고갈을 유도한 후에 기준선 수준으로 더 빠르게 회복되었다.
특히, 실시예는 본 개시내용이, 예를 들어, 제공된 기술, 예를 들어, MATE™ 기술을 이용하여 "규격품" 리툭시맙에 대한 CD3-특이적 ScFv의 화학적 접합에 의해, 다중 유형의 항체 제제 모이어티를 포함하는 제제, 예를 들어, 이중특이성, 예컨대, III-1을 제공할 수 있다는 것을 확인한다. 본 명세서에서 확인되는 바와 같이, 제공된 기술은 개개 항체 제제 모이어티의 특성 및/또는 활성(예를 들어, 표적 결합, 면역 활성 등)을 유지 및/또는 개선시킬 수 있다. 예를 들어, III-1은 Fc 도메인을 통한 FcR에 대한 리툭시맙의 결합 및 표적 세포 상의 CD20에 대한 결합을 유지할 수 있고, ADCC 및 ADCP와 같은 Fc 효과기 메커니즘을 통해 B 림프모양 악성세포를 표적화하는 리툭시맙 고유 능력을 보유할 수 있다. 항체 제제 모이어티의 한 가지 초과의 유형의 접합에 의해 제공된 기술은 추가적인 특성 및/또는 활성, 예를 들어, 추가적인 면역 활성, 예컨대, T-세포 매개 세포독성을 제공할 수 있다. 예를 들어, III-1은 T 세포-매개 세포독성을 제공할 수 있다. 특히, 특정 시험관내 데이터는 리툭시맙에 비해 III-1에 의한 증가된 표적 세포 사멸을 나타내고, 생체내 연구는 III-1이 표적 의존적 T 세포 활성화 및 보충을 유도할 수 있다는 것을 확인하며, 이는 비접합 리툭시맙보다 우수하게 만든다. 다른 항체 제제에 의해 생성된 CD3 접합체는 유사한 증가된 T 세포-매개 세포독성을 나타내며, 이는 제공된 기술이 "규격품" 항체의 형태를 포함하는 개선된 제제를 생성하는 데 적용될 수 있다는 것을 확인한다.
당업자에 의해 인식되는 바와 같이, 제공된 조성물 및 방법을 평가하기 위해 다양한 기술을 이용 가능하다. 이러한 기술로부터의 특정 데이터를 예로서 도 18, 도 19, 도 20 및 도 21에 제공한다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술을 동물에서 평가한다. 특정 예를 이하에 기재하였다.
일부 실시형태에서, 동물은 투약 시 2 내지 3세인 나이브 목적으로 사육된 암컷 사이노몰거스 원숭이((마카카 파시쿨라리스(Macaca fascicularis))이다. 일부 실시형태에서, 그룹당 2마리의 동물은 리툭시맙 30㎍/㎏ 또는 III-1(30㎍/㎏) 중 하나의 정맥내(느린 볼루스) 주사를 받았다. 일부 실시형태에서, 이하에 나타내는 바와 같은 간격으로 혈액을 수집하였다.
Figure pct00793
하기를 포함하는 형광 표지된 항체로 염색함으로써 면역-표현법을 수행하였다:
Figure pct00794
일부 실시형태에서, 이하에 약술하는 게이팅 전략에 따라 T 세포 및 B 세포를 확인하였다. 일부 실시형태에서, T 세포를 CD45+CD3+으로서 확인하였다. 일부 실시형태에서, T 세포 활성화를 CD69 및 CD44에 의해 표시하였다. 일부 실시형태에서, B 세포를 CD45+CD3-CD14-NKG2A-HLADR+로서 확인하였다. 일부 실시형태에서, 면역 세포 서브세트의 절대 수 및 빈도를 모니터링하였다. 일부 실시형태에서, 비교로서, 인간 PBMC를 18시간 동안 시험관내에서 처리하고, CD19+로서 확인하고, PBMC의 백분율을 계산하였다. 일부 실시형태에서, 이하에 따른 간격으로 사이토카인 분석을 위해 혈액을 수집하고, 혈장을 얻었다:
Figure pct00795
일부 실시형태에서, 비-인간 영장류용 사이토카인 다중복합 패널(ThermoFisher)을 사용하여 염증 사이토카인 및 케모카인 수준을 결정하였다. 도 29 및 도 33에서 확인한 바와 같이, 제공된 기술은 사이토카인/케모카인(예를 들어, IL6)의 최소 증가 수준으로 면역 활성(예를 들어, T-세포)을 활성화시킬 수 있고, 표적(예를 들어, B-세포) 고갈(예를 들어, 리툭시맙(RTX)에 비교되는 Mate(III-1))에서 개선된 효능(예를 들어, 10배 이상)을 제공할 수 있다. 일부 실시형태에서, III-1이 동등한 용량의 RTX에 비해 투약 후 4시간에 최대로 CD69 및 CD44 발현(각각 3- 및 2-배)을 증가시켰다는 것을 관찰하였다. 일부 실시형태에서, B 세포의 확연한 고갈이 투약 후 0.5시간에 III-1-처리 동물에서 관찰되었고, 일부 실시형태에서, 제7일 내지 제14일까지 부분적 회복되었다는 것이 관찰되었다. 일부 실시형태에서, 인간 PBMC에 대해, III-1은 또한 시험관내 B 세포 고갈을 유도하였다. 일부 실시형태에서, 동등한 용량의 RTX는 일시적 B-세포 고갈을 유도한 후에 기준선 수준으로 더 빠르게 회복되었다. 일부 실시형태에서, III-1은 IL-6에서 최대 증가를 유도하였다. 일부 실시형태에서, III-1은 T 세포 활성화를 제공할 수 있고, 동물에 대한 염증 독성 없이 B 세포의 고갈을 증가시켰다. 일부 실시형태에서, III-1은 CCL4 및 CXCL11을 유도하였다. 일부 실시형태에서, III-1은 효과기 세포(즉, 단핵구, NK 세포)의 화학주성 활성을 촉진시키는 T 세포를 활성화시킬 수 있다.
일부 실시형태에서, III-1은 효과기 세포의 기능성 활성화를 유도한다. 일부 실시형태에서, T 세포 또는 PBMC를 다양한 농도의 III-1, mAb, scFv, 또는 대조군 MATE로 처리하였다. 효과기 세포를 CD20+ Daudi 표적 세포와 함께 또는 이것 없이 배양시켰다. 일부 실시형태에서, T 세포 수용체(TCR)/CD3 맞물림 및 T 세포 활성화를 측정하기 위해, 루시퍼라제 상류의 NFAT-RE를 안정하게 발현시키는 효과기 Jurkat 세포를 사용하였다. 활성화는 발광에 의해 측정되었다. 일부 실시형태에서, PBMC를 CD2, CD56, CD14 및 CD19에 특이적인 형광-표지된 항-인간 항체로 염색하고, 유세포 분석에 의해 CD69 활성화 마커에 대해 PBMC 하위집단을 분석하였다. 일부 실시형태에서, III-1은 T 세포의 표적 세포 의존적(100-배 더 높은) 활성화를 유도하였다. 일부 실시형태에서, III-1은 CD20+ 종양 세포를 사멸시키는 효과기 T 세포를 보충 및 활성화하는 이중특이성 분자로서 작용한다. 일부 실시형태에서, III-1은, 일부 실시형태에서, 용량-의존적 방식으로 부속 면역 세포에 의한 공자극에 의해, T 세포의 표적 세포-의존적 활성화를 유도하였다. 일부 실시형태에서, RTX 단독은 시험관내 PBMC 효과기 세포의 임의의 활성화를 유도하지 않았다. 특정 데이터를 도 30에 제공하였다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술을 평가하기 위한 유용한 프로토콜을 이하에 기재한다.
Daudi B 림프아구 세포를 1.0×104개의 세포/웰로 96-웰 둥근 바닥 백색벽 플레이트에서 플레이팅하고, 다양한 농도의 III-1, 대조군 MATE(Fc 침묵 리툭시맙에 접합된 항-CD3 scFv(예를 들어, Absolute Antibody로부터의 Ab00126-10.3 항-CD20 [10F381 (리툭시맙)], "Fc 침묵 III-1"), 항-CD3 단일쇄 가변 단편(scFv), 또는 분석 배지(RPMI, 10% 소태아 혈청, 100U/㎖ 페니실린-스트렙토마이신)에서 희석시킨 대조군 단클론성 항체로 처리하였다. 대안적으로, Daudi 세포를 함유하지 않는 배지("효과기 단독" 조건)를 분석하기 위해 시험 제제를 첨가하였다. 조건 둘 다 30분 동안 37℃에서 인큐베이션시켰다. NFAT-반응 요소(NFAT-RE)에 의해 유도되는 루시퍼라제 리포터를 발현시키는 유전자 조작된 Jurkat T 세포주(Promega # J1621)를 8:1의 효과기:표적비(또는 Daudi 없음 조건에 대해 동일한 수의 T 세포)로 도입하였고 18시간 동안 인큐베이션시켰다. Bio-Glo 시약을 제조업자의 권고(Promega)에 따라 각 웰에 첨가하였다. NFAT의 유도를 반영하기 위해 루미노미터에 의해 발광 신호를 관찰하였고, GraphPad Prism 소프트웨어를 이용하여 T 세포 활성화를 계산하였다.
Daudi 세포를96-웰 둥근 바닥 플레이트의 1.0×104개의 세포/웰에 플레이팅하고, 분석 배지(RPMI, 5% 낮은 IgG 소 혈청, 100U/㎖ 페니실린-스트렙토마이신)에서 희석시킨 다양한 농도의 III-1 또는 리툭시맙으로 처리하였다. 대안적으로, Daudi 세포를 함유하지 않는 배지를 분석하기 위해 시험 제제를 첨가하였다. 조건 둘 다 30분 동안 37℃에서 인큐베이션시켰다. 새로 해동한 PBMC 효과기 세포를 20:1의 효과기:표적비(또는 Daudi 없음 조건에 대해 동일한 수의 PBMC)로 도입하였고, 18시간 동안 인큐베이션시켰다. 세포를 채취하고 CD2, CD56, CD14 및 CD19에 특이적인 형광-표지된 항-인간 항체로 염색하고, 유세포 분석에 의해 CD69 활성화 마커에 대해 PBMC 하위집단을 분석하였다.
일부 실시형태에서, PBMC의 기능적 사전 자극에 의한 또는 NK 세포 고갈에 의한 T 세포 풍부화는 종양 세포의 T 세포-매개 사멸을 증가시킨다. 일부 실시형태에서, KILR 레트로입자(Eurofins DiscoverX)를 이용하여 베타-gal 리포터 단편을 안정하게 발현시키기 위해 Daudi(CD20+) B 림프아구 세포를 조작하였다. 표적 세포를 III-1, 리툭시맙 및 적절한 대조군으로 다양한 농도에서 처리하였다. 비분획화 및 NK 세포 고갈 PBMC로부터의 효과기로부터의 효과기 세포를 새로 해동시키거나 또는 PHA + IL-2 사전 자극한 (5일) PBMC로부터 제조하였다. 세포를 15:1의 효과기:표적비로 배양시키고, 18시간 동안 인큐베이션시켰다. 표적 세포사를 반영하기 위해 루미노미터를 이용하여 발광 신호를 얻었다. 일부 실시형태에서, A-431(EGFR+) 표피모양 암종 세포를 다양한 농도의 세툭시맙(CTX)-CD3 MATE(CTX-CD3 접합체), 대조군 mAb 또는 scFv로 처리하였다. CytoTox-Glo 시약(Promega)을 이용하여 표적 세포사를 측정하였다. 일부 실시형태에서, III-1은 Daudi 세포의 종양 세포 사멸을 유도하였다(일부 실시형태에서, ADCC 또는 ADCP 이상으로 T 세포-매개 세포독성을 통할 수 있음). 일부 실시형태에서, 제공된 기술은 천연 항체 제제, 예를 들어, RTX에 비해 종양 세포의 2 내지 3배 더 높은 최대 사멸을 제공한다. 일부 실시형태에서, RTX에 항-CD3 scFv를 접합시키는 유사한 부위-지정 화학을, 천연 Ab에 비해 우수한 사멸을 유발할 수 있는 세툭시맙-CD3 접합체를 제공하는 세툭시맙에 적용하였다. 특정 데이터를 도 31에 제공하였다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술을 평가하기 위한 유용한 프로토콜을 이하에 기재한다.
PBMC를 효과기 세포로서 작용하는 다양한 방법에 의해 제조하였다. 일부 실시형태에서, PBMC를 해동시키고, 피토헤마그글루티닌(PHA)(Sigma # L8754)으로 최종 농도 4㎍/㎖에서 그리고 인터류킨 2(IL-2)(R&D System # 202-IL)으로 최종 농도 5ng/㎖에서 3일 동안 처리하였다. 제3일에, IL-2를 추가 5㎍/㎖로 보충하고, PBMC를 추가 2일 동안 인큐베이션시켰다. 이들 "사전자극한" T 세포-풍부 PBMC를 채취하고, 제5일에 효과기 세포로서 사용하였다. 제2 방법에서, PBMC를 실험 셋업일에 단순히 해동시켰다. 방법 둘 다에서, PBMC를 있는 그대로 이용하고, "비분획화"로 지칭하거나 또는 CD56-양성 세포(StemCell Technologies # 17855)에 대한 면역자기 양성 선택 세포 단리 키트를 이용하여 NK 세포에 대해 고갈시켰다. KILR 레트로입자(DiscoverX #97-0002)를 이용하여 베타-gal 리포터 단편을 안정하게 발현시키기 위해 Daudi B 림프아구 세포를 조작하였다. Daudi 세포를 1.0×104개의 세포/웰로 96-웰 둥근 바닥 백색벽 플레이트에 플레이팅하고, 분석 배지(RPMI, 5% 낮은 IgG 소 혈청, 100U/㎖ 페니실린-스트렙토마이신)에서 희석시킨 다양한 농도의 MATE, 대조군 MATE, 항-CD3 단일쇄 가변 단편(scFv), 또는 대조군 단클론성 항체(mAb)로 처리하였다. 표적 Daudi 세포를 30분 동안 37℃에서 인큐베이션시켰다. 상기 기재한 바와 같이 제조한 PBMC 효과기 세포를 15:1의 효과기:표적비로 도입하였고, 18시간 동안 인큐베이션시켰다. KILR 검출 시약(DiscoverX #97-0001L)을 제조업자의 권고에 따라 각 웰에 첨가하였다. Daudi 세포사를 반영하기 위해 루미노미터에 의해 발광 신호를 관찰하였고, GraphPad Prism 소프트웨어를 이용하여 사멸 백분율을 계산하였다.
A-431 세포를 1.0×104개의 세포/웰로 96-웰 편평 바닥 백색벽 플레이트에서 플레이팅하고, 분석 배지(RPMI, 10% 소 혈청, 100U/㎖ 페니실린-스트렙토마이신)에서 희석시킨 다양한 농도의 MATE, 항-CD3 scFv 또는 대조군 mAb로 처리하였다. 표적 A-431 세포를 30분 동안 37℃에서 인큐베이션시켰다. PBMC를 실험 셋업일에 해동시키고, 있는 그대로 이용하거나("비분획화") 또는 CD56-양성 세포(StemCell Technologies # 17855)에 대한 면역자기 양성 선택 세포 단리 키트를 이용하여 NK 세포에 대해 고갈시켰다. PBMC 효과기 세포를 10:1의 효과기:표적비로 도입하였고, 18시간 동안 인큐베이션시켰다. CytoTox-Glo 시약(Promega #G9292)을 제조업자의 권고에 따라 각 웰에 첨가하였다. A-431 세포사를 반영하기 위해 루미노미터에 의해 발광 신호를 관찰하였고, GraphPad Prism 소프트웨어를 이용하여 사멸 백분율을 계산하였다.
일부 실시형태에서, III-1은 시험관내 효과기 세포 활성화와 일치되는 사이토??인의 생성을 유도한다. 일부 실시형태에서, 새로-해동된 비분획화 PBMC를 Daudi 표적 세포와 함께(20:1 효과기-대-표적 비) 또는 이것 없이 배양시키고, 다양한 농도의 III-1, 리툭시맙, 또는 대조군 scFv(도시하지 않음)로 18시간 동안 처리하였다. 상청액을 수집하고, 다중복합 면역분석 인간 사이토카인 패널(Invitrogen, ProcartaPlex)로 평가하였다. 일부 실시형태에서, III-1은 Daudi 표적 세포의 존재 하에 염증 증가 및 사이토카인 활성화를 우선적으로 유도한다. 일부 실시형태에서, 사이토카인 유도는 RTX 단독 또는 scFv 단독에 의해 분명하지 않다. 일부 실시형태에서, T 세포, NK 세포 및/또는 대식세포를 활성화시킨다. 일부 실시형태에서, III-1은 표적 세포-의존적 방식에서 활성화 및 염증 사이토카인을 유도할 수 있다. 다른 접합체, 예를 들어, 항-CD3 x 항-CD20 삼작용성 이중특이성 mAb "Lymphonum"(TRION Pharma, Bi20라고도 함, FBTA05)은 또한, 예를 들어, 시험관내 PBMCS + B 림프모양 세포주를 노출시킬 때 보다 높은 또는 유사한 IL-6 수준을 보고한다는 것을 주목한다. 추가로 이들 시험관내 데이터는 동물 데이터에 나타낸 바와 같은 생체내 결과를 반영하지 않을 수도 있으며(예를 들어, 도 33 참조), IL-6 증가는 최소인 것을 주목하며, 동물에서의 IL-6 수준은 인간 데이터를 제공할 수 있다는 것을 보고하였다(예를 들어, 문헌[Winkler, et. al. Blood, Vol 94, No 7 (October 1), 1999: pp 2217-2224]). 다양한 실시형태에서, 데이터는 제공된 항체-항체 접합체 제제가 다른 보고된 유사한 접합체 제제(예를 들어, Lymphonum)와 비교할 때 비슷한 또는 낮은 수준의 바람직하지 않은 사이토카인/케모카인(예를 들어, IL-6)을 나타내었다는 것을 확인하였다. 특정 데이터를 도 32에 제공하였다. 일부 실시형태에서, 제공된 기술을 평가하기 위한 유용한 프로토콜을 이하에 기재한다.
새로-해동된 비분획화 PBMC를 Daudi 표적 세포와 함께(20:1 효과기-대-표적 비) 또는 이것 없이 배양시키고, 다양한 농도의 III-1, 리툭시맙, 또는 대조군 scFv(도시하지 않음)로 18시간 동안 처리하였다. 상청액을 수집하고, 다중복합 면역분석 인간 사이토카인 패널(Invitrogen, ProcartaPlex)로 평가하였다.
Daudi 세포를96-웰 둥근 바닥 플레이트의 1.0×104개의 세포/웰에 플레이팅하고, 분석 배지(RPMI, 5% 낮은 IgG 소 혈청, 100U/㎖ 페니실린-스트렙토마이신)에서 희석시킨 다양한 농도의 항체-항체 접합체(III-1) 또는 리툭시맙으로 처리하였다. 대안적으로, Daudi 세포를 함유하지 않는 배지를 분석하기 위해 시험 제제를 첨가하였다. 조건 둘 다 30분 동안 37℃에서 인큐베이션시켰다. 새로 해동한 PBMC 효과기 세포를 20:1의 효과기:표적비(또는 Daudi 없음 조건에 대해 동일한 수의 PBMC)로 도입하였고, 18시간 동안 인큐베이션시켰다. 상청액을 채취하고, 추가 분석까지 -800C에서 저장하고, 다중복합 면역분석 인간 사이토카인 패널(Invitrogen, # EPX110-10810-901)로 평가하였다. Affymetrix ProcartaPlex Analyist 1.0 소프트웨어를 이용하여 사이토카인 데이터를 분석하였다.
예로서 III-1 및 다른 접합체를 이용하여, 제공된 기술이 다양한 유익 및 이점을 제공할 수 있다는 것을 확인한다.
일부 실시형태에서, 트르스투주맙-세툭시맙 접합체를 제공하였다. 일부 실시형태에서, 트라스투주맙을 I-56과 접합시키고, 세툭시맙을 실시예에 기재된 바와 유사한 화학을 이용하여 제조한 I-65와 접합시켰다. 접합 생성물을 세정하고, 클릭 반응을 위해 72시간 동안 인큐베이션시켜 트라스투주맙(TRA)-세툭시맙(CTX) 접합체를 제공하였다. 특정 결과를 항체 접합체의 형성을 확인하는 도 24에 도시하였다. 특히, 제공된 항체-항체 접합체는 각 항체의 표적에 대한 결합을 유지하고(예를 들어, 도 25 참조), Fc 수용체에 결합한다(예를 들어, 도 26 참조).
실시예 35. 화합물 I-59의 예시적 합성.
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00796
MeOH(50㎖) NH3.H2O(13㎖) 중 화합물 1(5g, 32.4m㏖, 1 eq)의 용액에 N2 하에 니켈(5 g)을 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H2(30 psi) 하에서 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. TLC(석유 에터:에틸 아세테이트 = 1:1 Rf = 0.01)는 화합물 1이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 필터를 농축시켰다. 화합물 2(10g, 63.23m㏖, 수율: 97.45%)를 갈색 고체로서 얻었다.
화합물 3의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00797
THF(50㎖) 중 화합물 2(5g, 31.62m㏖, 1 eq), Boc2O(5.52g, 25.2m㏖, 5.81㎖, 0.8 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 동안 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. TLC(석유 에터:에틸 아세테이트 = 1:1 Rf = 0.69)는 화합물 2가 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 잔사를 H2O(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖*2)로 추출하였다. 반응 혼합물을 분별 깔때기에 부었고, 분리시켰다. 합한 유기층을 염수(50㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에터:에틸 아세테이트 = 100:1 내지 0:1)에 의해 정제하였다. 화합물 3(5g, 19.36m㏖, 수율: 61.24%)을 백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 7.31 (br t, J = 5.96 Hz, 1 H) 6.76 (br d, J = 7.87 Hz, 2 H) 5.05 (s, 2 H) 3.97 (br d, J = 5.01 Hz, 2 H) 1.38 (s, 9 H).
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00798
DCM(80㎖) 중 화합물 4(5g, 15.32m㏖, 1 eq)의 용액에 Ag2O(5.33g, 22.98m㏖, 1.5 eq) 및 KI(508.61㎎, 3.06m㏖, 0.2 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 DCM(20㎖) 중 화합물 5(2.92g, 15.32m㏖, 1 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: 메탄올 = 10:1, Rf = 0.65)는 화합물 4가 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 반응물을 TLC에 따라 세정하였다. 현탁액을 여과시키고, 필터 케이크를 EtOAc(30㎖×3)로 세척하였다. 합한 여과액을 농축 건조시켜 생성물을 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 다이클로로메탄: 메탄올 = 100:1 내지 2:1)에 의해 정제하였다. 화합물 6(4.45g, 9.26m㏖, 수율: 60.45%)를 무색 오일로서 얻었다.
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00799
CH3CN(50㎖) 중 화합물 6(4.3g, 8.95m㏖, 1 eq)의 용액에 NaN3(988.88㎎, 15.21m㏖, 1.7 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC(다이클로로메탄: 메탄올 = 10:1, Rf = 0.40)는 화합물 6이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 H2O 100㎖로 희석시키고, EtOAc(50㎖ * 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(50㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 7(3g, 8.54m㏖, 수율 95.41%)을 황색 오일로서 얻었다.
화합물 9의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00800
에탄올(400㎖) 중 화합물 8(40g, 235m㏖, 37.7㎖, 1 eq)의 용액을 통해 -50℃에서 2시간 동안 H2S 기체를 버블링하였다. 이어서, HCl 기체를 반응 혼합물에 -20℃에서 2시간 동안 버블링한 후에, H2S 기체를 -20℃에서 2시간 동안 버블링하였다. 이어서, 혼합물을 25℃에서 14시간 동안 두었다. TLC(석유 에터:에틸 아세테이트=10:1 Rf = 0.52)는 화합물 8이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 빙수욕(300㎖)에 부었고, 석유 에터(500㎖) 및 물(500㎖*2)로 워크업하였다. 반응 혼합물을 분별 깔때기에 부었고, 분리시켰다. 합한 유기층을 염수(500㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 9(43g, 230m㏖, 수율 98.23%)를 적색 오일로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, 클로로폼-d): δ ppm 4.21 (q, J = 7.06 Hz, 2 H) 3.97 (s, 1 H) 2.43 - 2.53 (m, 2 H) 2.29 - 2.38 (m, 2 H) 1.59 - 1.71 (m, 4 H) 1.30 (t, J = 7.17 Hz, 3 H).
화합물 10의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00801
AcOH(360㎖) H2O(40㎖) 중 화합물 9(25g, 134.2m㏖, 1 eq)의 용액에 15℃에서 20분 동안 염소(10g)를 버블링하였다. 이어서, 반응 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 과량의 Cl2을 N2로 퍼지한 후에, TLC(석유 에터:에틸 아세테이트 = 10:1 Rf = 0.4)는 화합물 9가 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 잔사를 NH4Cl(500㎖ *5)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(500㎖)로 추출하였다. 반응 혼합물을 분별 깔때기에 부었고, 분리시켰다. 합한 유기층을 염수(500㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 화합물 10(28g, 110m㏖, 수율: 82.5%)을 황색 오일로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, 클로로폼-d): δ ppm 4.19 - 4.31 (m, 2 H) 2.52 - 2.61 (m, 2 H) 2.44 - 2.52 (m, 2 H) 1.72 - 1.82 (m, 2 H) 1.62 - 1.72 (m, 2 H) 1.21 - 1.33 (m, 3 H).
화합물 11의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00802
EtOAc(20㎖) 중 화합물 10(7.83g, 30.98m㏖, 2 eq)의 용액에 EtOAc (20㎖) 중 화합물 3(4g, 15.49m㏖, 42.63㎕, 1 eq) 및 TEA(3.13g, 30.98m㏖, 4.31㎖, 2 eq)을 0℃에서 적가하였다. 첨가 후에, 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC(석유 에터:에틸 아세테이트 = 3:1 Rf = 0.32)는 화합물 3이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 잔사를 H2O(100㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(200㎖*2)로 추출하였다. 반응 혼합물을 분별 깔때기에 부었고, 분리시켰다. 합한 유기층을 염수(100㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에터:에틸 아세테이트 = 10:1 내지 0:1)에 의해 정제하였다. 화합물 11(5.5g, 11.5m㏖, 수율: 74.84%)을 백색 고체로서 얻었다.
화합물 12의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00803
CH3CN(30㎖) H2O (20㎖) 중 화합물 11(3.5g, 7.38m㏖, 1 eq)의 용액에 수산화바륨 팔수화물(6.98g, 22.13m㏖, 3 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 40 내지 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(200㎖) 사이에 배분하였다. 유기상을 분리시켰다. 수성상을 H2O(100㎖)로 희석시키고, 0.5M HCl을 첨가하여 pH = 3 내지 4로 조절하였다. 혼합물의 유기상을 분리시키고, 수성상을 에틸 아세테이트로 각 회차마다 100㎖로 2회 추출하였다. 모든 유기상을 합하고, 50㎖의 포화 염수로 1회 세척하고 나서, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과 후 교반 건조시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Phenomenex luna c18 250㎜*100㎜*10㎛; 이동상: [물(0.05%HCl) -ACN]; B%: 15%-60%, 20분)에 의해 정제하였다. 화합물 12(1.7g, 3.81m㏖, 수율: 51.62%)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: Rt = 1.997분, MS(ESI): C19H24F2N 2O6S에 대한 m/z [M+H+] 계산치, 447.1; 실측치 464.2.
화합물 13의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00804
THF(2㎖) 중 화합물 12(200㎎, 447.96μ㏖, 1 eq)의 용액에 화합물 7(236㎎, 671.9μ㏖, 1.5 eq), PPh3(176.24㎎, 671.95μ㏖, 1.5 eq) 및 DEAD(140㎎, 806μ㏖, 146㎕, 1.8 eq)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. HPLC는 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 필터를 농축시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Phenomenex luna C18 250*50㎜*10㎛;이동상: [물(0.1%TFA)-ACN];B%: 50%-80%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 13(200㎎, 256.46μ㏖, 수율: 57.25%)을 백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.62 (s, 1 H) 7.51 (br t, J = 6.32 Hz, 1 H) 7.10 (br s, 1 H) 7.03 (br d, J = 8.58 Hz, 2 H) 4.37 (br d, J = 4.65 Hz, 1 H) 4.14 (br d, J = 5.72 Hz, 2 H) 4.01 - 4.11 (m, 2 H) 3.57 - 3.62 (m, 4 H) 3.43 - 3.57 (m, 26 H) 2.14 - 2.28 (m, 1 H) 2.10 (br s, 1 H) 1.80 (br d, J = 13.35 Hz, 1 H) 1.64 (br s, 2 H) 1.34 - 1.48 (m, 9 H) 1.31 (br s, 1 H). LCMS: Rt = 1.452분, MS(ESI): C33H51F2 N5O12S에 대한 m/z [M+H+] 계산치, 780.3; 실측치 797.3. HPLC: RT = 3.718분.
화합물 14의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00805
화합물 13(200㎎, 256.46μ㏖, 1 eq) Zn(167.70㎎, 2.56m㏖, 10 eq) 및 암모니아; MeOH(3㎖) 중 폼산(161.71㎎, 2.56m㏖, 10 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 동안 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 20℃에서 15분 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 농축시켰다. 조질의 생성물을 THF(20㎖) 중에 용해시키고, DCM(20㎖)을 첨가하고, 혼합물을 고체에 의해 침전시켰다. 혼합물을 여과시키고, 필터 케이크를 DCM(20㎖×2)으로 세척하였다. 합한 여과액을 농축 건조시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 화합물 14(195㎎, 조질)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: Rt = 0.678분, MS(ESI): C33H53F2 N3O12S에 대한 m/z [M+H+] 계산치, 754.3; 실측치 754.3.
화합물 16의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00806
DMF(1㎖) 중 화합물 14(193㎎, 256μ㏖, 1 eq), 화합물 15 (99.6㎎, 256μ㏖, 1 eq) 및 TEA(77.7㎎, 768μ㏖, 106㎕, 3 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 동안 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 20℃에서 0.5시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 필터를 농축시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Nano-micro Kromasil C18 100*40㎜ 10㎛; 이동상: [물(0.1%TFA) - ACN]; B%: 35%-65%, 8분)에 의해 정제하였다. 화합물 16(170㎎, 148.70μ㏖, 수율: 58.08%)을 황색 고체로서 얻었다. LCMS: Rt = 0.788분, MS(ESI): C54H64F2 N4O17S2에 대한 m/z [M/2+H+], 1142.3; 실측치 572.8.
화합물 17의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00807
DCM(2㎖) 중 화합물 16(100㎎, 87.4μ㏖, 1 eq), TFA(539㎎, 4.73m㏖, 350㎕, 54.0 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 동안 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. HPLC는 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 필터를 농축시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Nano-micro Kromasil C18 100*40㎜ 10㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 23%-58%, 8분)에 의해 정제하였다. 화합물 17(54.78㎎, 51.87μ㏖, 수율: 59.30%, 98.77% 순도)을 황색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.04 (br s, 3 H) 9.73 (br s, 1 H) 8.15 - 8.36 (m, 4 H) 8.10 (br s, 1 H) 7.75 (br s, 1 H) 7.33 (br d, J = 8.07 Hz, 2 H) 7.18 (br d, J = 8.44 Hz, 1 H) 7.12 (br s, 1 H) 6.67 (br s, 2 H) 6.49 - 6.64 (m, 4 H) 4.41 (br s, 1 H) 4.09 (br d, J = 4.16 Hz, 4 H) 3.35 - 3.64 (m, 31 H) 2.24 (br s, 2 H) 2.08 (br s, 1 H) 1.79 (br s, 1 H) 1.62 (br s, 1 H). LCMS: Rt = 0.655분, MS(ESI): C49H56F2N4 O15S2에 대한 m/z [M+H+], 1042.3; 실측치 522.6. HPLC: RT =3.146분. 화합물 17에 대한 QC 데이터: HPLC: Rt = 1.574분, 순도: 98.83%. QC LCMS: MS(ESI): C49H56F2N4O15S2에 대한 m/z [M/2+H+], 1042.3; 실측치 522.3.
화합물 4a의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00808
표준 Fmoc 화학을 이용하여 펩타이드를 합성하였다:
1) 수지 제조: DCM(20.0㎖) 중 CTC 수지(1.00m㏖, 0.97g, 1.05m㏖/g, 1.00 eq) 및 Fmoc-Thr(tBu)-OH(0.40g, 1.00m㏖, 1.00 eq)를 함유하는 용기에 DIEA(4.00 eq)를 적가하고, 15℃에서 N2 버블링하면서 2시간 동안 혼합하였다. 이어서, MeOH(1.0㎖)를 첨가하고, 다시 30분 동안 N2로 버블링하였다. 수지를 DMF(20.0㎖)*5로 세척하였다. 이어서, DMF(20.0㎖) 중 20% 피페리딘을 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 15℃에서 N2로 버블링하였다. 혼합물을 여과시켜 수지를 얻었고, 이를 DMF(20.0㎖)*5로 세척한 후에 다음 단계로 진행시켰다.
2) 결합: DMF(10.0㎖) 중 Fmoc-Cys(Trt)-OH(1.19g, 3.00m㏖, 3.00 eq), HBTU(1.08g, 2.85m㏖, 2.85 eq)의 용액을 N2 버블링하면서 수지에 첨가하였다. 이어서, DIEA(6.00 eq)를 혼합물에 적가하고, 30분 동안 15℃에서 N2로 버블링하였다. 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하였고, 무색을 나타낸다면, 결합이 완료되었다. 이어서, 수지를 DMF(20.0㎖)*5로 세척하였다.
3) 탈보호: DMF(20.0㎖) 중 20% 피페리딘을 수지에 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 15℃에서 N2로 버블링하였다. 이어서, 수지를 DMF(20.0㎖)*5로 세척하였다. 탈보호 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하였고, 청색 또는 다른 적갈색이 나타났다면, 결합이 완료되었다.
4) 모든 다른 아미노산에 대해 단계 2 및 3을 반복한다: (이하의 표에서 2 내지 13).
5) 아세틸화(화합물 1a): 10%Ac2O/5%NMM/85%DMF(20.0㎖)의 용액을 수지에 첨가하고, 혼합물을 20분 동안 N2로 버블링하였다. 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하였고, 무색을 나타낸다면, 결합이 완료되었다. 이어서, 수지를 DMF(20.0㎖)*5, DCM(10.0㎖)*5로 세척하였다.
6) De-OAll(화합물 2a): DCM(10.0㎖) 중 페닐실란(10.0 eq), Pd(PPh3)4 (0.10 eq)의 혼합물을 N2 버블링하면서 15분 동안 수지에 첨가하였다. 이어서, 수지를 DCM(20.0㎖)*3으로 세척하였다. 이 절차를 2회 반복하고, 절단 시험의 LCMS에 의해 탈보호 반응을 모니터링하였다.
7) TFP 결합(화합물 3a): DMF(15.0㎖) 중 TFP(20.00 eq), DMAP(1.00 eq)의 혼합물을 N2 버블링하면서 수지에 첨가하였다. 이어서, DIC(10.00 eq)를 수지에 적가하고, 혼합물을 N2로 3시간 동안 버블링하였다. 반응을 절단 시험의 LCMS에 의해 모니터링하였다. 마지막 위치가 완료된 후에, 수지를 DMF(20.0㎖)*5, 아이소프로필 에터(20.0㎖)*5로 세척하고, 진공 하에 건조시켰다.
Figure pct00809
펩타이드 절단 및 정제:
16) 절단 완충제(95%TFA/2.5%Tis/2.5%H2O)를 실온에서 측쇄 보호된 펩타이드를 함유하는 플라스크에 첨가하였고 1시간 동안 교반하였다.
17) 여과 후에 용액을 합하였다.
18) 펩타이드를 차가운 아이소프로필 에터(100㎖)로 침전시키고, 원심분리시켰다(3000rpm에서 3분).
19) 고체를 아이소프로필 에터로 2회 세척하고, 2시간 동안 진공 하에 건조시켰다.
20) 화합물 4a(1.50g, 조질)를 백색 고체로서 얻었다.
화합물 5a의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00810
혼합물의 색이 밝은 황색으로 바뀔때까지 MeCN/H2O(1/1, 1ℓ) 중 화합물 4a (1.51g, 조질)의 혼합물에 0.1 M I2/HOAc를 적가하였다. 혼합물을 15℃에서 5분 동안 교반하고, 혼합물의 색이 무색으로 바뀔 때까지 0.1M Na2S2O3을 적가하여 반응을 중단시켰다. 동결건조 하에 혼합물을 건조시켰다. 잔사를 분취-HPLC(산성 조건, TFA)에 의해 직접 정제하여 화합물 5a(22.01㎎, 90.0% 순도, 1.30% 수율)를 백색 고체로서 얻었다.
화합물 I-59의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00811
DMF(0.1㎖) 중 화합물 5a(22.01㎎, 12.90μ㏖, 1.00 eq) 및 화합물 17 (13.50㎎, 12.90μ㏖, 1.00 eq), DIEA(5.01㎎, 38.90μ㏖, 6.7㎕, 3.00 eq)의 혼합물을　15℃에서 1시간 동안 교반하였다.　혼합물을 1M HCl로 pH = 3까지 반응을 중단시켰다. 혼합물을 분취-HPLC(산성 조건, TFA)에 의해 직접 정제하여 화합물 I-59 (0.90㎎, 0.32μ㏖, 92.4% 순도, 2.45% 수율)를 백색 고체로서 얻었고, 화합물 I-59(1.4㎎, 0.50μ㏖, 91.2% 순도, 3.82% 수율)를 황색 고체로서 얻었다.
정제 조건:
Figure pct00812
실시예 36. 화합물 I-60의 예시적 합성.
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00813
THF(30㎖) 중 화합물 1(3g, 18.9m㏖, 1 eq), 아세틸 아세테이트(1.55g, 15.1m㏖, 1.42㎖, 0.8 eq), DIEA(1.96g, 15.1m㏖, 2.64㎖, 0.8 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 동안 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. TLC(석유 에터:에틸 아세테이트 = 1:1 Rf = 0.24)는 화합물 1이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 잔사를 H2O(20㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(50㎖*2)로 추출하였다. 반응 혼합물을 분별 깔때기에 부었고, 분리시켰다. 합한 유기층을 염수(50㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에터:에틸 아세 테이트 = 100: 1 내지 0: 1)에 의해 정제하였다. 화합물 2(3g, 14.99m㏖, 수율:79.00%)를 백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.25 (br s, 1 H) 6.71 - 6.85 (m, 2 H) 5.07 (s, 2 H) 4.09 (d, J = 5.96 Hz, 2 H) 1.84 (s, 3 H).
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00814
EtOAc(20㎖) 중 화합물 3(4.29g, 16.98m㏖, 2 eq)의 용액에 EtOAc (20㎖) 중 화합물 2(1.7g, 8.49m㏖, 42.63㎕, 1 eq) TEA(1.72g, 16.98m㏖, 2.36㎖, 2 eq)를 0℃에서 2분에 걸쳐 첨가하였다. 첨가 후에, 혼합물을 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC는 화합물 2가 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 잔사를 H2O(100㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(200㎖*2)로 추출하였다. 반응 혼합물을 분별 깔때기에 부었고, 분리시켰다. 합한 유기층을 염수(100㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에터:에틸 아세테이트 = 5:1 내지 0:1)에 의해 정제하였다. 화합물 4(4g, 조질)를 백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.64 (s, 1 H) 8.41 - 8.55 (m, 1 H) 7.18 - 7.31 (m, 1 H) 7.07 (br d, J = 8.46 Hz, 1 H) 4.31 - 4.40 (m, 1 H) 4.26 (d, J = 6.08 Hz, 1 H) 3.92 - 4.06 (m, 2 H) 2.30 - 2.44 (m, 2 H) 2.04 - 2.18 (m, 2 H) 2.00 (s, 1 H) 1.77 - 1.96 (m, 4 H) 1.64 (br s, 1 H) 1.15 - 1.21 (m, 1 H) 1.08 (t, J = 7.09 Hz, 1 H) 1.02 (td, J = 7.12, 1.85 Hz, 2 H).
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00815
CH3CN(20㎖) H2O(15㎖) 중 화합물 4(1.5g, 3.60m㏖, 1 eq)의 용액에 다이하이드록시바륨 팔수화물(3.41g, 10.81m㏖, 3 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 EtOAc(100㎖) 사이에 배분하였다. 유기상을 분리시켰다. 수성상을 H2O(100㎖)로 희석시키고, 이어서, 이것에 0.5M HCl를 첨가하여 pH = 3 내지 4로 조절하였다. 혼합물의 유기상을 분리시키고, 수성상을 에틸 아세테이트로 각 회차마다 200㎖로 2회 추출하였다. 모든 유기상을 합하고, 50㎖ 포화 염수로 1회 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고, 교반 건조시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Phenomenex luna C18 80*40㎜*3㎛; 이동상:[물(0.04%HCl)-ACN]; B%: 17%-35%, 7분)에 의해 정제하였다. 화합물 5(600㎎, 1.54m㏖, 수율:42.89%)를 백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.28 (br s, 1 H) 9.52 (s, 1 H) 8.42 (br t, J = 5.81 Hz, 1 H) 7.05 (br d, J = 8.68 Hz, 3 H) 4.37 (br d, J = 5.38 Hz, 1 H) 4.25 (d, J = 5.99 Hz, 2 H) 2.33 (br d, J=3.67 Hz, 1 H) 2.29 (br t, J=4.58 Hz, 1 H) 2.17 - 2.25 (m, 1 H) 2.03 - 2.17 (m, 1 H) 1.90 (s, 3 H) 1.67 - 1.81 (m, 1 H) 1.54 - 1.67 (m, 1 H). LCMS: Rt = 1.232분, MS(ESI): C16H18F2N2O5S에 대한 m/z [M*2+H+] 계산치, 388.0; 실측치 777.2.
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00816
THF(2㎖) 중 화합물 5(200㎎, 514μ㏖, 1 eq)의 용액에 PPh3(202㎎, 772μ㏖, 1.5 eq) 및 DEAD(161㎎, 926μ㏖, 168㎕, 1.8 eq) 및 화합물 5A(361㎎, 1.03m㏖, 2 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. HPLC는 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 필터를 농축시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Kromasil C18(250*50㎜*10㎛); 이동상:[물(10mM NH4HCO3)-ACN]; B%: 20%-45%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 6(170㎎, 235μ㏖, 수율:45.74%)를 백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.42 (br s, 1 H) 7.07 (br s, 2 H) 4.36 (br s, 1 H) 4.25 (br s, 2 H) 4.07 (br s, 2 H) 3.50 (br s, 16 H) 2.10 (br s, 5 H) 1.89 (br s, 3 H) 1.61 (br s, 3 H). LCMS: Rt = 1.239분, MS(ESI): C30H45F2N5O11S에 대한 m/z [M+H2O+] 계산치, 721.2; 실측치 739.3. HPLC: Rt = 1.983분.
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00817
Figure pct00818
화합물 6(50㎎, 69.2μ㏖, 1 eq), Zn(45.30㎎, 692.75μ㏖, 10 eq), 암모니아; MeOH(0.5㎖) 중 폼산(43.68㎎, 692.75μ㏖, 10 eq)의 혼합물을 탈기시키고 N2로 3회 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 20℃에서 15분 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 농축시켰다. 조질의 생성물을 THF(2㎖) 중에 용해시키고, DCM(2㎖)을 첨가하고, 혼합물을 고체에 의해 침전시켰다. 혼합물을 여과시키고, 필터 케이크를 DCM(3㎖×2)으로 세척하였다. 합한 여과액을 농축 건조시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 화합물 7(30㎎, 43.12μ㏖, 수율: 62.24%)을 백색 오일로서 얻었다. LCMS: Rt = 0.580분, MS(ESI): C30H47F2N3O11S에 대한 m/z [M+H+] 계산치, 695.5; 실측치 696.2.
화합물 I-60의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00819
DMF(1㎖) 중 화합물 7(30㎎, 43.1μ㏖, 1 eq), 화합물 7A (20.15㎎, 51.74μ㏖, 1.2 eq) 및 TEA(13.0㎎, 129μ㏖, 18.0㎕, 3 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 동안 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 20℃에서 0.5시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. HPLC는 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 농축시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Nano-micro Kromasil C18 100*40㎜ 10㎛; 이동상: [물(0.1% TFA)-ACN]; B%: 30%-58%, 8분)에 의해 정제하였다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Waters Xbridge BEH C18 100*30㎜*10㎛; 이동상: [물(10mM NH4HCO3) - ACN]; B%: 5%-40%, 8분)에 의해 정제하였다. 화합물 I-60 (5.27㎎, 5.01μ㏖, 수율:11.61%, 순도 96.00%)을 황색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10.05 (s, 1 H) 8.40 (br s, 1 H) 8.27 (s, 1 H) 8.14 (br s, 1 H) 7.73 (s, 1 H) 7.17 (d, J = 8.16 Hz, 1 H) 6.96 - 7.07 (m, 3 H) 6.67 (s, 2 H) 6.52 - 6.62 (m, 4 H) 4.31 (br s, 1 H) 4.23 (br d, J = 5.95 Hz, 2 H) 4.05 (br d, J = 4.41 Hz, 2 H) 3.68 (br s, 2 H) 3.60 (br s, 2 H) 3.56 (s, 4 H) 3.41 - 3.54 (m, 20 H) 2.25 - 2.31 (m, 1 H) 2.20 (s, 1 H) 2.15 (br s, 2 H) 1.89 (s, 3 H) 1.74 (s, 1 H) 1.59 (s, 1 H). LCMS: Rt = 0.716분, MS(ESI): C51H58F2N4O16S2에 대한 m/z [M/2+H+] 계산치, 1084.3; 실측치 543.9. HPLC: Rt = 1.481분. 화합물 I-60에 대한 QC 데이터: HPLC: Rt = 3.047분, 순도: 96.00%. MS: MS(ESI): C51H58F2N4O16S2에 대한 m/z [M+H+] 계산치, 1084.3; [M+H+] = 1085.1; [M/2+H+] = 543.1; 실측치 1085.1.
실시예 37. 화합물 I-61의 예시적 합성.
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00820
Figure pct00821
표준 Fmoc 화학을 이용하여 펩타이드를 합성하였다:
8) 수지 제조: DCM(5.0㎖) 중 CTC 수지(0.50m㏖, 0.50g, 1.00m㏖/g) 및 Fmoc-Thr(tBu)-OH(0.20g, 0.50m㏖, 1.00 eq)를 함유하는 용기에 DIEA(4.00 eq)를 적가하고, 2시간 동안 N2 버블링하면서 15℃에서 혼합하였다. 이어서, MeOH(0.5㎖)를 첨가하고, 다시 30분 동안 N2로 버블링하였다. 수지를 DMF(10.0㎖)*5로 세척한 후에, DMF(10.0㎖) 중 20% 피페리딘을 용기에 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 15℃에서 N2로 버블링하였다. 여과 후에, 수지를 DMF(10.0㎖)*5로 세척한 후에 다음 단계로 진행시켰다.
9) 결합: DMF(5.0㎖) 중 Fmoc-Cys(Trt)-OH(3.00 eq), HBTU(2.85 eq)의 용액을 수지에 N2 버블링하면서 첨가하였다. 이어서, DIEA(6.00 eq)를 혼합물에 적가하고, 30분 동안 15℃에서 N2로 버블링하였다. 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하였고, 무색을 나타낸다면, 결합이 완료되었다. 이어서, 수지를 DMF(10.0㎖)*5로 세척하였다.
10) 탈보호: DMF(10.0㎖) 중 20% 피페리딘을 수지에 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 15℃에서 N2로 버블링하였다. 이어서, 수지를 DMF(10.0㎖)*5로 세척하였다. 탈보호 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하였고, 청색 또는 다른 적갈색이 나타났다면, 결합이 완료되었다.
11) 모든 다른 아미노산에 대해 단계 2 및 3을 반복한다: (이하의 표에서 2 내지 13).
12) 아세틸화: 10%Ac2O/5%NMM/85%DMF(10.0㎖)의 용액을 수지에 첨가하고, 혼합물을 20분 동안 N2로 버블링하였다. 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하였고, 무색을 나타낸다면, 결합이 완료되었다. 이어서, 수지를 DMF(10.0㎖)*5, MeOH(10.0㎖)*5로 세척하고, 진공 하에 건조시켰다.
Figure pct00822
펩타이드 절단 및 정제:
21) 절단 완충제(95%TFA/2.5%Tis/2.5%H2O)를 실온에서 측쇄 보호된 펩타이드를 함유하는 플라스크에 첨가하였고 1시간 동안 교반하였다.
22) 여과 후에 용액을 합하였다.
23) 펩타이드를 차가운 아이소프로필 에터(100㎖)로 침전시키고, 원심분리시켰다(3000rpm에서 3분).
24) 고체를 아이소프로필 에터로 2회 세척하고, 2시간 동안 진공 하에 건조시켜 화합물 1(600.0㎎, 조질)을 백색 고체로서 얻었다.
밝은 황색이 지속될 때까지 MeCN/H2O(1/1, 500.0㎖) 중 화합물 1(600.0㎎, 조질)의 혼합물에 0.1 M I2/HOAc를 적가하고, 이어서, 밝은 황색이 사라질 때까지 혼합물에 0.1 M Na2S2O3을 적가하여 반응을 중단시켰다. 혼합물을 동결건조시킨 후에, 분취-HPLC(산성 조건, TFA) 정제로 화합물 2(245.0㎎)를 백색 고체로서 얻었다.
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00823
DMF(4㎖) 중 화합물 3a(323.1㎎, 2.65m㏖, 3.00 eq), 화합물 3(400.0㎎, 881.98μ㏖, 1.00 eq), DIC(333.9㎎, 2.65m㏖, 409.71㎕, 3.00 eq), HOBt(357.5㎎, 2.65m㏖, 3.00 eq) 및 DMAP(215.5㎎, 1.76m㏖, 2.00 eq)의 혼합물을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. 잔사를 플래시 C18(ISCO®; 120 g SepaFlash® C18 플래시 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90% MeCN/H2O 에터 구배의 용리액)에 의해 직접 정제하여 화합물 4(400.0㎎, 717.3μ㏖, 81.3% 수율)을 무색 오일로서 얻었다. 1HNMR (400 MHz CD3Cl): δ ppm 9.99 - 10.04 (m, 1 H) 7.88 - 7.97 (m, 2 H) 7.29 - 7.34 (m, 2 H) 5.12 (s, 1 H) 3.90 (t, J = 6.27 Hz, 2 H) 3.68 - 3.71 (m, 4 H) 3.66 - 3.68 (m, 12 H) 3.61 - 3.65 (m, 4 H) 3.52 - 3.58 (m, 2 H) 3.33 (d, J = 4.77 Hz, 2 H) 2.89 (t, J = 6.27 Hz, 2 H) 1.46 (s, 9 H).
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00824
MeOH(5㎖) 중 화합물 4(360.0㎎, 645.5μ㏖, 1.00 eq)의 혼합물에 0℃에서 MeOH(0.2㎖) 중 NaBH4(24.4㎎, 645.50μ㏖, 1.00 eq)의 용액을 첨가하고, 이어서, 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 잔사를 플래시 C18(ISCO®; 120g SepaFlash® C18 플래시 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90% MeCN/H2O 에터 구배의 용리액)에 의해 직접 정제하여 화합물 5(330.0㎎, 589.61μ㏖, 91.34% 수율)를 무색 오일로서 얻었다.
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00825
Figure pct00826
THF(5㎖) 중 화합물 5a (237.7㎎, 1.18m㏖, 2.00 eq), 화합물 5(330.0㎎, 589.61μ㏖, 1.00 eq), 및 DIEA(304.8㎎, 2.36m㏖, 410.8㎕, 4.00 eq)의 혼합물을 15℃에서 2시간 동안 교반하였다. 잔사를 플래시 C18(ISCO®; 120g SepaFlash® C18 플래시 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90% MeCN/H2O 에터 구배의 용리액)에 의해 직접 정제하여 화합물 6(200.0㎎, 275.91μ㏖, 46.8% 수율)을 밝은 황색 오일로서 얻었다.
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00827
DMF(2㎖) 중 화합물 2(92.6㎎, 55.19μ㏖, 1.00 eq, TFA), 화합물 6(40.0㎎, 55.19μ㏖, 1.00 eq), 및 DIEA(35.6㎎, 275.91μ㏖, 48.0㎕, 5.00 eq)의 혼합물을　15℃에서 1시간 동안 교반하였다. 잔사를 플래시 C18(ISCO®; 120g SepaFlash® C18 플래시 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90% MeCN/H2O 에터 구배의 용리액)에 의해 직접 정제하여 화합물 7(40.0㎎, 18.6μ㏖, 33.7% 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
화합물 8의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00828
25% TFA/DCM(1:4, 5.0㎖) 중 화합물 7(40.0㎎, 18.61μ㏖, 1.00 eq)의 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다.　용매를 감압 하에 0℃에서 제거하였다. 잔사를 플래시 C18(ISCO®; 120 g SepaFlash® C18 플래시 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90% MeCN/H2O 에터 구배의 용리액)에 의해 직접 정제하여 화합물 8(30.0㎎, 13.80μ㏖, 74.5% 수율, TFA)을 백색 고체로서 얻었다.
화합물 I-61의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00829
Figure pct00830
DMF(0.5㎖) 중 화합물 8 (30.0㎎, 13.80μ㏖, 1.00 eq, TFA), FITC(8.1㎎, 20.80μ㏖, 1.50 eq), DIEA(7.12㎎, 55.40μ㏖, 9.6㎕, 4.00 eq)의 혼합물을　15℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용액을 분취-HPLC(산성 조건, TFA)에 의해 직접 정제하여 화합물 I-61(14.3㎎, 5.05μ㏖, 36.4% 수율, 86.2% 순도)을 황색 고체로서 얻었다.
정제 조건:
Figure pct00831
실시예 38. 화합물 I-62의 예시적 합성.
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00832
DCM(3㎖) 중 화합물 1(500㎎, 1.32m㏖, 1 eq)의 용액에 SOCl2(470.36㎎, 3.95m㏖, 286.80㎕, 3 eq)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 30분 동안 교반하였다. TLC는 화합물 1이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 농축 건조시켰다. 조질의 생성물 화합물 2(524㎎, 조질)를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00833
DCM(3㎖) 중 화합물 3(160㎎, 1.31m㏖, 1 eq)의 용액에 TEA(397.73㎎, 3.93m㏖, 547.08㎕, 3 eq)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 DCM(1㎖) 중 화합물 2(521.25㎎, 1.31m㏖, 1 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. TLC는 화합물 3이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스팟이 형성되었다는 것을 나타내었다. 반응물을 TLC에 따라 세정하였다. 혼합물을 H2O(10㎖)로 희석시키고, DCM(20㎖ * 3)으로 추출하였다. 합한 유기층을 5㎖ H2O, 5㎖ 염수로 세척하였고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 여과액을 농축시켜, 조질의 생성물을 제공하였다. 화합물 4(550㎎, 1.14m㏖, 수율: 86.82%)를 황색 오일로서 얻었다. 1H NMR (클로로폼-d, 400 MHz): δ 10.00 (s, 1H), 7.93 (d, 2H, J = 8.7 Hz), 7.2-7.3 (m, 3H), 3.89 (t, 2H, J = 6.2 Hz), 3.6-3.7 (m, 24H), 3.39 (t, 2H, J = 5.1 Hz), 2.88 (t, 2H, J = 6.2 Hz).
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00834
THF(1㎖) 중 화합물 4(250㎎, 517.05μ㏖, 1 eq)의 용액에 NaBH4(19.56㎎, 517.05μ㏖, 1 eq)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 30분 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 4가 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 0℃에서 PH=4 내지 5까지 1㎖의 HCl(0.5M)의 첨가에 의해 반응을 중단시켰다. 혼합물을 직접 정제하였다. 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Phenomenex Synergi C18 150*25*10㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 15%-55%, 10분)에 의해 잔사를 정제하였다. 화합물 5(340㎎, 700.27μ㏖, 수율: 67.72%)를 무색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.748분, MS(ESI): C22H35N3O9에 대한 m/z [M+H+] 계산치, 485.24; 실측치 440.3. 1H NMR (클로로폼-d, 400 MHz): δ 7.38 (br s, 2H), 7.2-7.3 (m, 1H), 7.09 (br d, 2H, J=4.6 Hz), 4.70 (br s, 2H), 3.8-3.9 (m, 2H), 3.6-3.8 (m, 23H), 3.39 (br s, 2H), 2.8-2.9 (m, 2H), 1.8-2.2 (m, 3H).
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00835
THF(1㎖) 중 화합물 5(100㎎, 205.96μ㏖, 1 eq)의 용액에 CDI(40.08㎎, 247.15μ㏖, 1.2 eq)를 0.5시간 동안 첨가하였다. 혼합물을 MeI(29.23㎎, 205.96μ㏖, 12.82㎕, 1 eq)를 0.5시간 동안 첨가하였다. 혼합물을 메탄아민(0.5 M, 823.85㎕, 2 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. LC-MS는 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 질소 기체 하에 건조시켰다. 혼합물을 직접 정제하였다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Phenomenex luna C18 100*40㎜*3㎛;이동상: [물(0.1%TFA) -ACN]; B%: 35%-65%,10분)에 의해 정제하였다. 화합물 6 (50㎎, 92.15μ㏖, 수율: 44.74%)을 황색 오일로서 얻었다. LCMS: Rt = 1.277분, MS(ESI): C24H38N4O10에 대한 m/z [M+H+] 계산치, 543.26; 실측치 543.3. 1H NMR (클로로폼-d, 400 MHz): δ 7.38 (br d, 2H, J = 8.2 Hz), 7.09 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 5.09 (s, 2H), 3.87 (t, 2H, J = 6.4 Hz), 3.6-3.7 (m, 23H), 3.39 (t, 2H, J = 5.1 Hz), 2.8-2.9 (m, 5H).
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00836
THF(0.5㎖) 중 화합물 6(30㎎, 55.29μ㏖, 1 eq)의 용액에 Pd/C(15㎎, 10% 순도) 및 HCl(0.2M, 276.46㎕, 1 eq)을 N2 분위기 하에 첨가하였다. 현탁액을 탈기시키고, H2로 3회 동안 퍼지하였다. 혼합물을 H2(15 Psi) 하에 20℃에서 5분 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 6이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 현탁액을 여과시키고, 필터 케이크를 THF(2㎖×2)로 세척하였다. 합한 여과액을 질소 기체 하에 건조시켰다. 잔사를 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Nano-micro Kromasil C18 100*40㎜ 10㎛; 이동상: [물(0.1% TFA)-ACN]; B%: 1%-34%,8분)에 의해 정제하였다. 화합물 7(10㎎, 18.00μ㏖, 32.56% 수율, 93% 순도)을 무색 오일로서 얻었다. LCMS: Rt = 1.465분, MS(ESI): C24H40N2O10에 대한 m/z [M+H+] 계산치, 517.27; 실측치 517.3.
화합물 I-62의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00837
DMF(0.5㎖) 중 화합물 7(5㎎, 7.93μ㏖, 1 eq, TFA) 및 화합물 8(2.78㎎, 7.14μ㏖, 0.9 eq)의 용액에 TEA(1.60㎎, 15.86μ㏖, 2.21㎕, 2 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 30분 동안 교반하였다. LC-MS는 화합물 7이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었다는 것을 나타내었다. 혼합물을 직접 정제하였다. 분취-HPLC(TFA 조건; 칼럼: Phenomenex Synergi C18 150*25*10㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 25%-50%, 10분)에 의해 잔사를 정제하였다. 화합물 I-62 (5.34㎎, 5.77μ㏖, 수율: 36.39%, 97.91% 순도)을 황색 고체로서 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.27 (s, 1H), 7.9-8.2 (m, 1H), 7.74 (br d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.37 (br d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.18 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 7.09 (br d, 3H, J = 8.3 Hz), 6.67 (d, 2H, J = 2.0 Hz), 6.5-6.6 (m, 4H), 5.00 (s, 2H), 3.73 (br t, 3H, J = 6.2 Hz), 3.68 (br s, 2H), 3.6-3.6 (m, 3H), 3.5-3.6 (m, 22H), 2.8-2.8 (m, 2H), 2.57 (br d, 4H, J = 4.5 Hz). LCMS: Rt = 2.430분, MS(ESI): C45H51N3O15S에 대한 m/z [M+H+] 계산치, 906.30; 실측치 906.6. 화합물 I-62에 대한 QC 데이터: HPLC: Rt = 2.907분, 순도: 97.91%. LCMS: Rt = 2.330분. MS(ESI): m/z [M+H+] calcd for C45H51N3O15S, 906.30; 실측치 906.3.
실시예 39. 화합물 I-63의 예시적 합성.
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00838
표준 Fmoc 화학을 이용하여 펩타이드를 합성하였다.
1) 수지 제조: DCM(5.0㎖) 중 CTC 수지(0.50m㏖, 0.50g, 1.0m㏖/g) 및 Fmoc-Thr(tBu)-OH(0.20g, 0.50m㏖, 1.00 eq)를 함유하는 용기에 DIEA(4.00 eq)를 적가하고, 2시간 동안 N2 버블링하면서 15℃에서 혼합하였다. 이어서, MeOH(0.5㎖)를 첨가하고, 다시 30분 동안 N2로 버블링하였다. 수지를 DMF(10.0㎖)*5로 세척한 후에, DMF(10.0㎖) 중 20% 피페리딘을 용기에 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 15℃에서 N2로 버블링하였다. 여과 후에, 수지를 DMF(10.0㎖)*5로 세척한 후에 다음 단계로 진행시켰다.
2) 결합: DMF(5.0㎖) 중 Fmoc-Cys(Trt)-OH(3.00 eq), HBTU(2.85 eq)의 용액을 수지에 N2 버블링하면서 첨가하였다. 이어서, DIEA(6.00 eq)를 혼합물에 적가하고, 30분 동안 15℃에서 N2로 버블링하였다. 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하였고, 무색을 나타낸다면, 결합이 완료되었다. 이어서, 수지를 DMF(10.0㎖)*5로 세척하였다.
3) 탈보호: DMF(10.0㎖) 중 20% 피페리딘을 수지에 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 15℃에서 N2로 버블링하였다. 이어서, 수지를 DMF(10.0㎖)*5로 세척하였다. 탈보호 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하였고, 청색 또는 다른 적갈색이 나타났다면, 결합이 완료되었다.
4) 모든 다른 아미노산에 대해 단계 2 및 3을 반복한다: (이하의 표에서 2 내지 13).
5) 아세틸화: 10%Ac2O/5%NMM/85%DMF(10.0㎖)의 용액을 수지에 첨가하고, 혼합물을 20분 동안 N2로 버블링하였다. 결합 반응을 닌하이드린 검사에 의해 모니터링하였고, 무색을 나타낸다면, 결합이 완료되었다. 이어서, 수지를 DMF(10.0㎖)*5, MeOH(10.0㎖)*5로 세척하고, 진공 하에 건조시켰다.
Figure pct00839
펩타이드 절단 및 정제:
1) 절단 완충제(95%TFA/2.5%Tis/2.5%H2O)를 실온에서 측쇄 보호된 펩타이드를 함유하는 플라스크에 첨가하였고 1시간 동안 교반하였다.
2) 여과 후에 용액을 합하였다.
3) 펩타이드를 차가운 아이소프로필 에터(100㎖)로 침전시키고, 원심분리시켰다(3000rpm에서 3분).
4) 고체를 아이소프로필 에터로 2회 세척하고, 2시간 동안 진공 하에 건조시켜 화합물 1 (600.0㎎, 조질)을 백색 고체로서 얻었다.
5) 밝은 황색이 지속될 때까지 MeCN/H2O(1/1, 500.0㎖) 중 화합물 1(600.0㎎, 조질)의 혼합물에 0.1 M I2/HOAc를 적가하고, 이어서, 밝은 황색이 사라질 때까지 혼합물에 0.1 M Na2S2O3을 적가하여 반응을 중단시켰다. 혼합물을 동결건조시킨 후에, 분취-HPLC(산성 조건, TFA) 정제로 화합물 2(245.0㎎)를 백색 고체로서 얻었다.
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00840
DCM(1.0㎖) 중 화합물 3a(217.21㎎, 1.76m㏖, 2.00 eq) 및 화합물 3(400.01㎎, 881.90μ㏖, 1.00 eq)의 혼합물에 15℃에서 EEDQ(436.20㎎, 1.76m㏖, 2.00 eq)를 함유하는 MeOH(1.0㎖)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다.　용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 플래시 C18(ISCO®; 120 g SepaFlash® C18 플래시 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90% MeCN/H2O 에터 구배의 용리액)에 의해 직접 정제하여 화합물 4(270.01㎎, 483.30μ㏖, 54.8% 수율)을 갈색 오일로서 얻었다.
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00841
DMF(2㎖)　중 화합물 4a(294.0㎎, 966.60μ㏖, 2.00 eq), 화합물 4(270.0㎎, 483.30μ㏖, 1.00 eq)，및 DIEA(249.8㎎, 1.93m㏖, 336.7㎕, 4.00 eq)의 혼합물을 15℃에서 3시간 동안 교반하였다. 잔사를 플래시 C18(ISCO®; 120g SepaFlash® C18 플래시 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90% MeCN/H2O 에터 구배의 용리액)에 의해 직접 정제하여 화합물 5(172.0㎎, 237.6μ㏖, 49.1% 수율)를 황색 오일로서 얻었다.
화합물 6의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00842
DMF(0.5㎖) 중 화합물 2 (40.0㎎, 25.58μ㏖, 1.00 eq), 화합물 5(18.5㎎, 25.58μ㏖, 1.00 eq), 및 DIEA(16.5㎎, 127.80μ㏖, 22.28㎕, 5.00 eq)의 혼합물을 15℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 플래시 C18(ISCO®; 120 g SepaFlash® C18 플래시 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90% MeCN/H2O 에터 구배의 용리액)에 의해 직접 정제하여 화합물 6(28.0㎎, 12.38μ㏖, 48.3% 수율, TFA 염)을 백색 고체로서 얻었다.
화합물 7의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00843
Figure pct00844
25% TFA/DCM(2㎖) 중 화합물 6(28.0㎎, 13.00μ㏖, 1.00 eq)의 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다.　용매를 감압 하에 0℃에서 제거하였다. 잔사를 플래시 C18(ISCO®; 120g SepaFlash® C18 플래시 칼럼, 75㎖/분에서 0 내지 90% MeCN/H2O 에터 구배의 용리액)에 의해 직접 정제하여 화합물 7(25.0㎎, 11.50μ㏖, 88.7% 수율, TFA 염)을 백색 고체로서 얻었다.
화합물 I-63의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00845
Figure pct00846
DMF(0.20㎖) 중 화합물 7(25.0㎎, 12.20μ㏖, 1.00 eq), FITC(7.1㎎, 18.30μ㏖, 1.50 eq), 및 DIEA(7.8㎎, 61.0μ㏖, 10.6㎕, 5.00 eq)의 혼합물을　15℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 분취-HPLC(산 조건, TFA)에 의해 직접 정제하여 화합물 I-63 (6.5㎎, 2.59μ㏖, 97.0% 순도, 21.1% 수율)을 황색 고체로서 얻었다.
정제 조건:
Figure pct00847
실시예 40. 화합물 I-64의 예시적 합성.
화합물 2의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00848
THF(30㎖) 중 화합물(2g, 16.24m㏖, 1 eq), FMOC-OSU(6.03g, 17.86m㏖, 1.1 eq) 및 DIEA(2.31g, 17.86m㏖, 3.11㎖, 1.1 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 동안 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. TLC(석유 에터:에틸 아세테이트 = 1:1 Rf = 0.6)는 화합물 1이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 필터 케이크를 20㎖의 DCM으로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 생성물을 제공하거나 얻었다. 화합물 2(2.3g, 6.66m㏖, 수율: 41.00%)를 백색 고체로서 얻었다.
화합물 3의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00849
THF(2㎖) 중 화합물 2(200㎎, 579.05μ㏖, 1 eq)의 용액에 CDI(98.59㎎, 608.01μ㏖, 1.05 eq)를 25℃에서 첨가하였다. 첨가 후에, 혼합물을 이 온도에서 0.5시간 동안 교반하였고, 이어서, 메탄아민(2M, 1.16㎖, 4 eq)을 25℃에서 첨가하였다. 얻어진 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. TLC(석유 에터:에틸 아세테이트 = 1:1 Rf = 0.4)는 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 잔사를 H2O(2㎖)로 희석시키고, 에틸 아세테이트(5㎖*2)로 추출하였다. 반응 혼합물을 분별 깔때기에 부었고, 분리시켰다. 합한 유기층을 염수(5㎖)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과 후, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에터:에틸 아세테이트 = 100:1 내지 0:1)에 의해 정제하였다. 화합물 3(20㎎, 110.99μ㏖, 수율: 19.17%)을 백색 고체로서 얻었다.
화합물 4의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00850
DMF(0.5㎖) 중 화합물 3(42.11㎎, 110.99μ㏖, 1 eq)의 용액에 HATU(42.20㎎, 110.99μ㏖, 1 eq) 및 DIEA(43.03㎎, 332.96μ㏖, 58.00㎕, 3 eq)를 0℃에서 첨가하였다. 첨가 후에, 혼합물을 이 온도에서 0.5시간 동안 교반하였고, 화합물 3A(20㎎, 110.99μ㏖, 1 eq)를 0℃에서 첨가하였다. 얻어진 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 필터를 농축시켰다. 잔사를 분취-HPLC(칼럼: Waters Xbridge BEH C18 100*30㎜*10㎛; 이동상: [물(10mM NH4HCO3)-ACN]; B%: 20%-50%, 8분)에 의해 정제하였다. 화합물 4(12㎎, 22.16μ㏖, 수율: 19.96%)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: Rt = 1.854분, MS(ESI): C24H39N5O9에 대한 m/z [M+H+] 계산치, 542.2; 실측치 542.2.
화합물 5의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00851
Figure pct00852
MeOH(0.5㎖) 중 화합물 4(5㎎, 9.23μ㏖, 1 eq), Zn(6.04㎎, 92.32μ㏖, 10 eq), 암모니아; 폼산(5.82㎎, 92.32μ㏖, 10 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 동안 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 25℃에서 5분 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물을 농축시켰다. 조질의 생성물을 THF(1㎖) 중에 용해시키고, DCM(1㎖)을 첨가하고, 혼합물을 고체에 의해 침전시켰다. 혼합물을 여과시키고, 필터 케이크를 DCM(0.5㎖×2)으로 세척하였다. 합한 여과액을 농축 건조시켜 조질의 생성물을 제공하였다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Phenomenex Luna C18 150*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 25%-55%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 5(6㎎, 조질)를 무색 오일로서 얻었다. LCMS: Rt = 1.233분, MS(ESI): C24H41N3O9에 대한 m/z [M+H+] 계산치, 516.2; 실측치 516.2.
화합물 I-64의 제조를 위한 일반 절차:
Figure pct00853
DMF(1㎖) 중 화합물 5(3㎎, 5.82μ㏖, 1 eq), 화합물 5A(2.72㎎, 6.98μ㏖, 1.2 eq) 및 TEA(1.77㎎, 17.46μ㏖, 2.43㎕, 3 eq)의 혼합물을 탈기시키고, N2로 3회 동안 퍼지하고, 이어서, 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LCMS 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. HPLC는 출발 물질이 완전히 소모되었다는 것을 나타내었다. 반응 혼합물 여과시키고, 여과액을 농축시켰다. 조질의 생성물을 역상 HPLC(칼럼: Phenomenex Luna C18 150*30㎜*5㎛; 이동상: [물(0.1%TFA)-ACN]; B%: 30%-60%, 10분)에 의해 정제하였다. 화합물 I-64 (3.77㎎, 4.17μ㏖, 수율 71.60%)을 황색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6): δ = 10.10 (br s, 1H), 10.05 - 9.97 (m, 1H), 9.94 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.07 (br s, 1H), 7.72 (br d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.25 (br d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.03 (br s, 1H), 6.66 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 6.62 - 6.51 (m, 4H), 4.91 (s, 2H), 3.55 (br s, 5H), 3.47 (br d, J = 11.5 Hz, 22H), 2.55 (br d, J = 4.4 Hz, 5H). LCMS: Rt = 1.248분, MS(ESI): C45H52N4O14 S에 대한 m/z [M+H+] 계산치, 904.3; 실측치 453.3. HPLC: RT = 2.746분. 화합물 I-64에 대한 QC 데이터: HPLC: RT = 2.763분 순도: 95.42%. MS:, MS(ESI): C45H52N4O14 S에 대한 m/z [M+H+] 계산치, 904.3[M+H+] = 905.5 실측치, 905.5.
실시예 41. 제공된 기술은 표적 결합 모이어티의 효율적인 반응 및 제거를 제공한다.
다양한 화합물을 이용하는 데이터는 제공된 기술이 효율적인 접합을 제공할 수 있다는 것을 추가로 확인한다:
Figure pct00854
인산염 완충제 식염수 pH 7.4 중 4시간 동안 25℃에서 2.5 M eq의 표시된 시약을 이용하여 다라투무맙으로 반응을 셋업하였다. DAR은 약물 대 항체비이고, 이 경우에 "약물"은 FITC이고, DAR은 FITC 흡광도를 이용하여 측정한다.
특히, 본 개시내용은 반응 생성물(예를 들어, 항체 모이어티 또는 이의 단편을 포함하는 생성물)로부터의 표적 결합 모이어티를 포함하는 제제(예를 들어, 반응 후에 방출된 표적 결합 모이어티를 포함하는 반응 생성물)를 제거하기 위한 기술을 제공한다. 일부 실시형태에서, 방법은 표적 결합 모이어티 및 반응 생성물을 포함하는 제제를 포함하는 조성물을 산성 용액과 접촉시키는 단계를 포함하되, 표적 결합 모이어티는 반응 생성물과 상호작용한다. 일부 실시형태에서, 산성 용액과의 접촉 후에, 표적 결합 모이어티를 포함하는 제제를 반응 생성물로부터 분리시킨다. 일부 실시형태에서, 용액의 pH는 약 1, 2, 3 또는 4이다. 일부 실시형태에서, pH는 1이다. 일부 실시형태에서, pH는 2이다. 일부 실시형태에서, pH는 3이다. 일부 실시형태에서, pH는 4이다. 도 23에서 확인되는 바와 같이, I-44와 다라투무맙 사이의 반응으로부터의 방출된 표적 결합 모이어티를 포함하는 제제를, 예를 들어, pH 2에서 효과적으로 제거할 수 있다. 프로토콜을 이하에 예로서 기재한다.
일부 실시형태에서, 제공된 기술로부터의 항체 접합체의 평가를 위해 메탄올-침전 항체 접합체의 질량분석법을 이용하였다. 일부 실시형태에서, 상이한 pH의 완충제를 접합 후에 항체(예를 들어, 항체 접합 생성물)로부터의 결합 이탈기를 제거하는 데 이용하였다. 일부 실시형태에서, 메탄올 침전을 이하와 같이 수행하였다:
1. 1 용적의 정제된 항체 접합체를 3 용적의 메탄올과 합한다.
2. 4℃에서 1시간 동안 샘플을 인큐베이션시킨다.
3. 15,500×g에서 10분 동안 4℃에서 원심분리시킨다.
4. 상청액을 회수하고, 스피드 백(speed vac)에서 건조시켰다.
5. 0.1% 수성 폼산에서 30㎕까지 재현탁시킨다.
일부 실시형태에서, 분석을 위한 기기 조건은 다음과 같다:
LC: ExionLC
이동상:
A: 0.1% 수성 폼산
B: 95% 아세토나이트릴 중 0.1% 폼산
칼럼:
Phenomenex Luna C18(2) 칼럼(100 X 2, 3um, 100
Figure pct00855
)
구배:
처음 1분 동안 5% B를 유지함
1 내지 7분에 걸쳐 5 내지 50% B
MS:
Sciex X500B QTOF 시스템
CDS 시스템을 이용하여 양성 교정물질(calibrant)로 교정을 행하였다. 5.5 kV의 ESI 전압, 40 psi에서 이온 공급원 기체 1 및 2, 커튼 기체 30(임의의 단위), CAD 기체 7(임의의 단위). 공급원 온도 350℃, DP 100V, 축적 시간 0.25초, CE 0V. 프로파일 방식에서 m/z 300으로부터 m/z 5000까지의 TOF-MS 풀 스캔.
획득을 위해 사용한 Sciex OS 1.4.
본 발명자들은 다수의 실시형태를 기재하였지만, 본 개시내용의 기술(예를 들어, 화합물, 제제, 조성물, 방법 등)을 이용하는 다른 실시형태를 제공하기 위해 본 발명자들의 기본적 예시가 변경될 수 있다는 것은 분명하다.

Claims (35)

  1. 하기 식 R-I의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 염:
    Figure pct00856

    식 중:
    LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기이고,
    RG는 반응기이며;
    LRM은 링커이고; 그리고
    MOI는 관심 모이어티이다.
  2. 하기 식 R-I의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 염:
    Figure pct00857

    식 중:
    LG는 RLG-LLG이고;
    RLG는
    Figure pct00858
    , Rc-(Xaa)z-, 핵산 모이어티 또는 소분자 모이어티이며;
    각각의 Xaa는 독립적으로 아미노산 또는 아미노산 유사체의 잔기이고;
    t는 0 내지 50이며;
    z는 1 내지 50이고;
    각각의 Rc는 독립적으로 -La-R'이며;
    각각의 La는 독립적으로 공유 결합이거나, 또는 C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택된 선택적으로 치환된 2가 기이되, 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S- 또는 -C(O)O-로 선택적 및 독립적으로 대체되고;
    각각의 -Cy-는 독립적으로 선택적으로 치환된 2가의 단환식, 이환식 또는 다환식기이되, 각각의 단환식 고리는 C3-20 지환족 고리, C6-20 아릴 고리, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원 헤테로아릴 고리, 및 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 20원 헤테로사이클릴 고리로부터 독립적으로 선택되며;
    LLG는 -LLG1-, -LLG1-LLG2-, -LLG1-LLG2-LLG3-, 또는 -LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-이고;
    RG는 -LRG1-LRG2-, -LLG4-LRG1-LRG2-, -LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-, -LLG2-LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-이며;
    LLG1, LLG2, LLG3, LLG4, LRG1, LRG2 및 LRM 각각은 독립적으로 L이고;
    각각의 L은 독립적으로 공유 결합이거나, 또는 하나 이상의 지방족 모이어티, 아릴 모이어티, 각각 독립적으로 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로지방족 모이어티, 각각 독립적으로 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로방향족 모이어티 또는 이러한 모이어티의 임의의 하나 이상의 임의의 조합을 포함하는 2가의 선택적으로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-100 기이되, 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 C1-6 알킬렌, C1-6 알켄일렌, 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 2가 C1-6 헤테로지방족기, -C≡C-, -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 선택적 및 독립적으로 대체되고, n은 1 내지 20이고;
    각각의 R'는 독립적으로 -R, -C(O)R, -CO2R 또는 -SO2R이며;
    각각의 R은 독립적으로 -H이거나, 또는 C1-30 지방족, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-30 헤테로지방족, C6-30 아릴, C6-30 아릴지방족, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C6-30 아릴헤테로지방족, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴 및 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 헤테로사이클릴로부터 선택된 선택적으로 치환된 기이거나, 또는
    2개의 R기는 선택적 및 독립적으로 함께 공유 결합을 형성하거나, 또는:
    동일한 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 원자와 함께, 상기 원자에 추가로, 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 30원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성하거나; 또는
    2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R기는 선택적 및 독립적으로 이들의 개재 원자와 함께 상기 개재 원자에 추가로, 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 선택적으로 치환된, 3 내지 30원, 단환식, 이환식 또는 다환식 고리를 형성하며; 그리고
    MOI는 관심 모이어티이다.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하되, 표적 제제는 항체 제제인, 화합물.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, LG는 Fc 영역에 결합하는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하는, 화합물.
  5. 제2항에 있어서, RLG는 DCAWXLGELVWCT이거나 이를 포함하되, 상기 2개의 시스테인 잔기는 선택적으로 이황화결합을 형성하고, X는 아미노산 잔기인, 화합물.
  6. 제5항에 있어서, 관심 모이어티는 검출 가능한 모이어티이거나 이를 포함하는, 화합물.
  7. 제5항에 있어서, 관심 모이어티는 치료제이거나 이를 포함하는, 화합물.
  8. 제5항에 있어서, 관심 모이어티는 단백질, 핵산 또는 세포에 결합할 수 있는 모이어티이거나 이를 포함하는, 화합물.
  9. 제5항에 있어서, 관심 모이어티는 생물직교성(bioorthogonal) 반응에 적합한 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는, 화합물.
  10. 제5항에 있어서, 상기 화합물은 하기로부터 선택된 하나 이상의 기를 포함하는, 화합물:
    Figure pct00859
    .
  11. 하기 P-I의 구조식 또는 이의 염을 갖는 제제의 제조 방법으로서,
    Figure pct00860

    (식 중:
    P는 표적 제제 모이어티이고;
    LPM은 링커이고; 그리고
    MOI는 관심 모이어티임)
    1) 표적 제제를 하기 식 R-I의 구조식 또는 이의 염을 갖는 반응 상대와 접촉시키는 단계:
    Figure pct00861

    (식 중:
    LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기이고,
    RG는 반응기이며;
    LRM은 링커이고; 그리고
    MOI는 관심 모이어티임); 및
    2) 하기 식 P-I의 구조식을 갖는 제제를 형성하는 단계
    를 포함하는, 제제의 제조 방법, 또는,
    하기 P-II의 구조식을 갖는 제제의 제조 방법으로서,
    Figure pct00862

    (식 중,
    P-N은 라이신 잔기를 포함하는 단백질 제제 모이어티이고;
    LPM은 링커이고; 그리고
    MOI는 관심 모이어티임)
    P-N을 하기 식 R-I의 구조식 또는 이의 염을 갖는 반응 상대와 접촉시키는 단계:
    Figure pct00863

    (식 중:
    LG는 P-N에 결합하는 단백질-결합 모이어티를 포함하는 기이고,
    RG는 반응기이며;
    LRM은 링커이고; 그리고
    MOI는 관심 모이어티임)
    를 포함하는, 제제의 제조 방법.
  12. 제11항에 있어서, 표적 제제는 항체 제제이거나 이를 포함하는, 방법.
  13. 제12항에 있어서, 관심 모이어티는 IgG1 중쇄의 K246 또는 K248 또는 대응하는 위치에서 상기 항체 제제에 선택적으로 부착되는, 방법.
  14. 제12항에 있어서, 관심 모이어티는 IgG2 중쇄의 K251 또는 K253 또는 대응하는 위치에서 상기 항체 제제에 선택적으로 부착되는, 방법.
  15. 제12항에 있어서, 관심 모이어티는 IgG4 중쇄의 K239 또는 K241 또는 대응하는 위치에서 상기 항체 제제에 선택적으로 부착되는, 방법.
  16. 제12항에 있어서, 상기 접촉시키는 단계 및 형성하는 단계는 하나의 화학 반응으로 수행되는, 방법.
  17. 복수의 제제를 제공하는 조성물로서,
    표적 제제 모이어티,
    관심 모이어티, 및
    선택적으로 표적 제제 모이어티와 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티
    를 각각 독립적으로 포함하되;
    상기 복수의 제제는 동일한 또는 실질적으로 동일한 표적 제제 모이어티 및 적어도 하나의 공통 위치에서 독립적으로 공통 변형을 공유하고; 그리고
    표적 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제인, 조성물; 또는
    복수의 제제를 제공하는 조성물로서,
    단백질 제제 모이어티,
    관심 모이어티, 및
    선택적으로 단백질 제제 모이어티와 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티
    를 각각 독립적으로 포함하되;
    상기 복수의 제제의 단백질 제제 모이어티는 공통 아미노산 서열을 포함하고, 상기 복수의 제제는 단백질 제제 모이어티의 적어도 하나의 공통 아미노산 잔기에서 독립적으로 공통 변형을 공유하며; 그리고
    상기 공통 아미노산 서열을 포함하는 단백질 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제인, 조성물.
  18. 복수의 제제를 제공하는 조성물로서,
    항체 제제 모이어티,
    관심 모이어티, 및
    선택적으로 항체 제제 모이어티와 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티
    를 각각 독립적으로 포함하되;
    상기 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 아미노산 서열을 포함하거나 공통 항원에 결합할 수 있고, 상기 복수의 제제는 단백질 제제 모이어티의 적어도 하나의 공통 아미노산 잔기에서 독립적으로 공통 변형을 공유하며; 그리고
    상기 공통 아미노산 서열을 포함하거나 상기 공통 항원에 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제인, 조성물.
  19. 제18항에 있어서, 상기 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 항원에 결합할 수 있는, 조성물.
  20. 제18항에 있어서, 상기 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 2개 이상의 상이한 항원에 결합할 수 있는, 조성물.
  21. 제18항에 있어서, 관심 모이어티는 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는, 조성물.
  22. 제21항에 있어서, 상기 반응성 모이어티는 -N3인, 조성물.
  23. 제21항에 있어서, 상기 반응성 모이어티는 -≡-인, 조성물.
  24. 제21항에 있어서, 반응성 모이어티는
    Figure pct00864
    또는
    Figure pct00865
    인, 조성물.
  25. 제18항에 있어서, 관심 모이어티는 치료제 모이어티이거나 이를 포함하는, 조성물.
  26. 제18항에 있어서, 관심 모이어티는 항체 제제이거나 이를 포함하는, 조성물.
  27. 제18항에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 IgG1 항체 중쇄의 K246 또는 K248 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
  28. 제18항에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 IgG2 항체 중쇄의 K251 또는 K253 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
  29. 제18항에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 IgG4 항체 중쇄의 K239 또는 K241 또는 이에 대응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
  30. 제18항에 있어서, 상기 복수의 제제 각각은 -S-Cy-를 포함하지 않되, -Cy-는 선택적으로 치환된 5-원 단환식 고리이고, 시스테인 잔기에 의해 형성되지 않는 -S-S-를 포함하지 않으며, 시스테인 잔기의 것이 아닌 -SH 또는 이의 염 형태를 포함하지 않는, 조성물.
  31. 제18항에 있어서, 상기 복수의 제제 각각은 -S-CH2-CH2-를 포함하지 않는, 조성물.
  32. Figure pct00866

    Figure pct00867

    Figure pct00868

    Figure pct00869
    로부터 선택된 화합물, 또는 이들의 염.
  33. 제32항의 화합물의 아미노산 잔기를 포함하는 폴리펩타이드 제제.
  34. 제32항의 화합물을 제공하는 단계를 포함하는, 화합물의 제조 방법.
  35. 본 개시내용에 기재된 또는 실시형태 1 내지 335 중 어느 하나의 화합물, 제제, 생성물, 조성물 또는 방법.
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