KR20240012381A - 세포독성제를 전달하기 위한 mate 기술을 사용한 항체 약물 접합체 - Google Patents

세포독성제를 전달하기 위한 mate 기술을 사용한 항체 약물 접합체 Download PDF

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KR20240012381A
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진 엠. 두보치크
비슬라프 카즈미에르스키
리처드 프라시토
리즈 엠. 콜드웰
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바이오하벤 테라퓨틱스 리미티드
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Abstract

무엇보다도, 본 개시내용은 다양한 관심 모이어티의 표적 제제에 대한 부위 지향적 접합을 위한 기술을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 표적 결합 모이어티를 활용하여 높은 접합 효율과 선택성을 제공한다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 항체 접합체를 제조하는데 유용하다.

Description

세포독성제를 전달하기 위한 MATE 기술을 사용한 항체 약물 접합체
관련 출원의 교차 참조
본 출원은 2021년 5월 19일에 출원된 미국 출원 번호 제63/190,703호의 우선권을 주장하며, 본원에 이의 전문이 참조로 포함된다.
항체 약물 접합체는 다양한 목적, 예를 들어, 진단 시약, 치료제 (예를 들어, 항원 표적 치료제) 등으로서 유용하다. 기존의 약물 항체 접합 기술은 다양한 문제를 겪을 수 있다. 예를 들어, 표적 분자 (예를 들어, 항체 약물 접합체에 대한 항체)에 관심 모이어티 (예를 들어, 검출 모이어티, 약물 모이어티 등)를 접합하는 반응은 효율성이 낮고/낮거나 선택성 (예를 들어, 표적 분자의 다양한 위치 (예를 들어, 항체의 다양한 아미노산 잔기)에서의 접합)이 낮을 수 있고, 생성 접합체 조성물은 종종 매우 불균질하며, 각각 독립적으로 자체적인 관심 모이어티의 사본 수, 접합 위치 (예를 들어, 단백질의 다른 아미노산 잔기) 등을 갖는 다수의 개별 접합체 유형을 포함한다.
암 세포에 세포독성제를 전달하기 위한 승인된 항체 약물 접합체는 PADCEV (엔포르투맙 베도틴)과 ADCETRIS (브렌툭시맙 베도틴)을 포함하고, 둘 모두는 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)를 전달하는데 유용하다. 현재의 약물 항체 접합 기술은 리신 잔기를 통한 접합, 환원된 사슬간 이황화 결합을 통한 접합, 및 조작된(engineered) 시스테인 잔기를 통한 접합을 포함한다. 도 1의 이러한 기술들 각각은 단점을 갖는다. 리신을 통한 접합은 광범위한 약물 항체 비율 (DAR)을 생성하며, 표지된 각 리신은 통계적으로 확률이다. 그 결과 수백만 개의 가능한 약물 항체 접합체가 탄생한다. 높은 DAR 종은 응집과 같은 CMC 문제가 발생하기 쉽다. 일부 종은 접합된 약물을 쉽게 방출하여 독성을 유발할 수 있다. 환원된 사슬간 이황화 결합을 통한 접합은 또한 다양한 항체 접합체 종을 생성한다. 약물 연결은 시간이 지남에 따라 역전되어 유리 약물(free drug)을 방출할 수 있다. 조작된 시스테인을 통한 기존 접합 기술은 광범위한 항체 조작(manipulation) 또는 가공을 수반한다.
예측 가능한 DAR 및 접합된 약물 "누출(leak)"이 없는 접합 위치를 갖고 광범위한 항체 조작이 필요 없는 약물 항체 접합체에 대한 필요성이 존재한다. 본 개시내용은 그러한 필요성을 충족시키며 추가적인 이점을 제공한다.
본 개시내용은 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)를 포함하고 항체 약물 접합체를 형성할 수 있는 이중기능성 분자를 제공하며, 여기서 접합은 상기 항체 상의 유한하고 예측 가능한 부위에서 발생한다.
일부 구현예에서, 접합체의 제조는 여러 단계를 수반하고 다양한 반응, 예컨대 환원, 산화, 가수분해 등을 포함하며, 이러한 반응은 예를 들어, 표적 제제 모이어티의 하나 이상의 위치에서 (예를 들어, 항체 모이어티의 하나 이상의 잔기에서, 및/또는 하나 이상의 수정 (예를 들어, 글리칸)에서) 원하지 않는 변형을 유발할 수 있다. 이러한 원하지 않는 변형은 효율성을 더욱 낮추고/거나 생성 접합체 조성물의 이질성을 증가시키고, 특성화, 평가, 및/또는 정제 공정을 복잡하게 하고 제품 비용을 증가시킬 수 있다.
일부 구현예에서, 본 개시내용은 다양한 관심 모이어티를 표적 (예를 들어, 단백질)에 접합하기 위한 접합 기술을 제공한다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 관심 모이어티가 표적 (예를 들어, 단백질, 예컨대 항체)의 특정 위치에서 선택적으로 접합되도록 유도된 접합을 제공한다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 적은 단계를 활용한다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 온화한(mild) 반응 조건을 활용한다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 반응 조건, 예컨대 환원, 산화, 및/또는 가수분해를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 표적 제제 모이어티와 관심 모이어티를 포함하는 접합 분자로부터의 실질적인 절단을 포함하지 않는다 (예를 들어, 표적 제제 모이어티, 관심 모이어티 및/또는 링커 모이어티로부터의 기의 절단 없음). 일부 구현예에서, 관심 모이어티는 검출 가능한 모이어티이다 (예를 들어, FITC). 일부 구현예에서, 관심 모이어티는 약물 모이어티이다 (예를 들어, 항체 약물 접합체에 활용되는 다양한 약물 모이어티). 일부 구현예에서, 관심 모이어티는 단백질 모이어티이다 (예를 들어, (표적 제제 모이어티로서) 다른 항체 제제에 접합된 항체 제제). 일부 구현예에서, 관심 모이어티는 반응기이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 관심 모이어티는 반응기이거나 이를 포함하여 다른 관심 모이어티가 반응기에서의 반응을 통해 추가적으로 포함될 수 있다.
본 개시내용의 기술은 다양한 이점을 제공할 수 있다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 향상된 효율성 및/또는 선택성, 감소된 이질성 수준, 및/또는 감소된 원치 않는 변형을 제공한다 (예를 들어, 적은 단계의 반응을 통해 (일부 구현예에서, 오직 하나), 특정 반응 조건 (예를 들어, 환원, 산화, 가수분해 등) 회피).
일부 구현예에서, 본 개시내용은 관심 모이어티가 표적 제제 모이어티의 특정 위치에서 접합되는 것을 포함하는 제제를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 참조 기술 (예를 들어, 제공된 방법에 기재된 바와 같은 표적 결합 모이어티 (예를 들어, LG)를 사용하지 않는 기술)의 조성물에 비해 증가된 균질성을 갖는 조성물을 제공한다.
일부 구현예에서, 본 개시내용은 "기성품" 치료적 항체 제제, 예컨대, 다양한 mAb에 효율적인 부위-지향적 화학적 접합을 제공할 수 있고 다양한 이중특이적 치료적 제제의 개발을 가능하게 하는 기술, 예를 들어, mAb 치료 증진제(mAb therapy enhancer (MATETM)) 기술을 제공한다. 무엇보다도, 본 개시내용의 기술, 예를 들어, MATE 기술은, 새로운 DNA 벡터를 생성하거나 마스터 세포주의 유전적 가공을 사용할 필요 없이 항체 제제, 예를 들어, 다양한 기존의 항체의 화학적 가공을 제공한다. 일부 구현예에서, 1) 이용 가능한 아미노산 잔기에 무차별적으로 결합/접합함으로써 부위-지향적 접합 특이성이 결여되고/되거나, 2) 접합 태그를 생성하기 위해 유전적 가공이 요구되는 특정 기존 방법과 비교하여, 제공된 기술의 이점은 1) 부위-지향적 접합 특이성, 및/또는 2) 유전적 가공이 요구되지 않는 것을 포함한다. MATE 기술의 개략도는 도 2 및 도 3에 나타난다.
도 1은 기존의 약물 항체 기술의 도면이다. A. 리신 잔기를 통한 접합. B. 환원된 사슬간 이황화 결합을 통한 접합. C. 가공된 시스테인 잔기를 통한 접합.
도 2는 MATE 기술의 개략도이다. 반응성 표적 결합 모이어티, 링커를 통해 MOI에 연결된 반응기를 포함하는 반응 파트너는 표적 (항체)에 특이적으로 결합한다. 상기 반응기는 항체 리신 잔기에서 부착되고, 표적 결합 모이어티를 방출한다.
도 3은 반응기와 항체 중쇄 리신의 반응 후 항체에 특이적으로 결합하는 반응성 표적 모이어티의 화학적 도식이다. 반응성 표적 결합 모이어티는 시클릭 펩티드 표적 결합 모이어티, 플루오로페닐 반응성 모이어티, PEG 링커, 및 펩티드 MOI를 포함한다.
도 4는 화합물 1101에 대한 잔류 페이로드 분석 (도 4a), 화합물 1101에 대한 잔류 시약 분석 (도 4b), 및 잔류 uABT 분석 (도 4c)에 대한 표준 곡선이다.
도 5는 화합물 1101 페이로드 분석에 대한 HPLC 추적 및 피크 영역이다. 10 μM (가장 큰 피크), 5 μM, 2 μM, 및 1 μM의 페이로드에 대한 연속 추적이 표시된다.
도 6은 화합물 1101 잔류 시약 분석에 대한 HPLC 추적 및 피크 영역이다. 10 μM (가장 큰 피크), 5 μM, 2 μM, 및 1 μM의 페이로드에 대한 연속 추적이 표시된다.
도 7은 uABT 분석에 대한 HPLC 추적이다. 14 μM (가장 큰 피크), 7 μM, 3.5 μM, 1.75 μM, 및 0.7 μM의 페이로드에 대한 연속 추적이 표시된다.
1. 정의
본 개시내용의 화합물은 본원에 일반적으로 기술된 것들을 포함하고, 본원에 개시된 부류, 하위부류, 및 종에 의해 추가로 설명된다. 본원에 사용된 바와 같이, 달리 명시되지 않는 한 다음의 정의가 적용될 것이다. 본 개시내용의 목적을 위해, 화학 원소는 [Periodic Table of the Elements, CAS version, Handbook of Chemistry and Physics, 75th Ed]에 따라 식별된다. 또한, 유기화학의 일반적 원리는 ["Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999], 및 ["March's Advanced Organic Chemistry", 5th Ed., Ed.: Smith, M.B. and March, J., John Wiley & Sons, New York: 2001]에 기재된다.
본원에 사용된 바와 같이, 문맥상 달리 명확하지 않는 한, (i) 용어 "a" 또는 "an"은 "적어도 하나(at least one)"를 의미하는 것으로 이해될 수 있다; (ii) 용어 "또는"은 "및/또는"을 의미하는 것으로 이해될 수 있다; (iii) 용어 "포함하는(comprising)", "포함하다(comprise)", "포함하는(including)" ("로 제한되지 않는(not limited to)"와 함께 사용되든지 아니든지), 및 "포함하다(include)" ("로 제한되지 않는(not limited to)"와 함께 사용되든지 아니든지)는 그 자체로 제시되든지 하나 이상의 추가 구성요소 또는 단계와 함께 제시되든지 항목화된 구성요소 또는 단계를 포함하는 것으로 이해될 수 있다; (iv) 개방형 전환 문구 "포함하는(comprising)" ("포함하다(comprise)," "포함하는(including)," 및 "포함하다(include)"와 같은 기태 개방형 전환 문구)은 중간 및 폐쇄형 문구 "로 필수적으로 구성되는(consisting essentially of)" 및 "로 구성되는(consisting of)"을 망라하고 포함하며, 문맥에서 달리 명시하지 않는 한 개방형 문구가 있는 청구항은 중간 또는 폐쇄형 전환 문구를 갖도록 수정될 수 있다 (v) 용어 "또 다른(another)"은 적어도 추가적인/두번째 하나 이상을 의미하는 것으로 이해될 수 있다; (v) 용어 "약(about)" 및 "대략(approximately)"은 당업자가 이해하는 바와 같이 표준 변형을 허용하는 것으로 이해될 수 있다; 및 (vi) 범위가 제공되면 끝점이 포함된다. 달리 명시하지 않는 한, 본원에 개시된 화합물은 염 형태, 특히 약학적으로 허용 가능한 염 형태로 제공 및/또는 활용될 수 있다.
제제(Agent): 용어 "제제"는 예를 들어, 폴리펩티드, 핵산, 당류, 지질, 소분자, 금속, 또는 이들의 조합 또는 복합체를 포함하는 모든 화학적 분류의 화합물 또는 실체를 지칭하는데 사용될 수 있다. 적절한 상황에서, 당업자에게 문맥상 명확한 바와 같이, 상기 용어는 세포 또는 유기체, 또는 이의 분획, 추출물 또는 구성 성분이거나 이를 포함하는 실체를 지칭하기 위해 사용될 수 있다. 대안적으로, 또는 추가적으로, 문맥에서 명확해지는 바와 같이, 상기 용어는 자연에서 발견되고/거나 자연으로부터 얻어지는 천연 생성물을 지칭하는데 사용될 수 있다. 일부 경우에, 다시 문맥에서 명확해지는 바와 같이, 상기 용어는 사람의 손에 의한 활동을 통해 설계, 가공, 및/또는 생산되고/거나 자연에서 발견되지 않는다는 점에서 사람이 만든 하나 이상의 실체를 지칭하는데 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 제제는 분리된 형태나 순수한 형태로 활용될 수 있고, 일부 구현예에서, 제제는 미정질 형태로 활용될 수 있다. 일부 구현예에서, 잠재적인 제제는 컬렉션 또는 라이브러리로서 제공될 수 있으며, 예를 들어 그들 안에 있는 활성 제제를 식별하거나 특성화하기 위해 스크리닝될 수 있다. 일부 경우에, 상기 용어 "제제"는 중합체이거나 중합체를 포함하는 화합물 또는 실체를 지칭할 수 있고, 일부 경우에, 상기 용어는 하나 이상의 중합체 모이어티를 포함하는 화합물 또는 실체를 지칭할 수 있다. 일부 구현예에서, 상기 용어 "제제"는 중합체가 아닌 화합물 또는 실체를 지칭할 수 있고/있거나 임의의 중합체 및/또는 하나 이상의 특정 중합체 모이어티가 실질적으로 없는 화합물 또는 실체를 지칭할 수 있다. 일부 구현예에서, 상기 용어는 중합체 모이어티가 없거나 실질적으로 없는 화합물 또는 실체를 지칭할 수 있다. 일부 구현예에서, 제제는 화합물 (예를 들어, 소분자, 단백질, 핵산 등)이다. 일부 구현예에서, 제제는 화합물의 1가, 2가, 또는 다가 모이어티이다 (예를 들어, 화합물로부터 (1가 모이어티에 대해) 하나 또는 (2가 또는 다가 모이어티에 대해) 하나 이상의 수소 원자 및/또는 다른 1가 기를 제거함으로써).
지방족(Aliphatic): "지방족"은 완전히 포화되거나 하나 이상의 불포화 단위를 함유하는 직쇄 (즉, 비분지형) 또는 분지형, 치환 또는 비치환 탄화수소 사슬, 또는 완전히 포화되었거나 하나 이상의 불포화 단위 (방향족은 아님) 또는 이들의 조합을 함유하는 치환 또는 비치환 모노시클릭, 바이시클릭, 또는 폴리시클릭 탄화수소 고리를 의미한다. 일부 구현예에서, 지방족기는 1 내지 50개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 일부 구현예에서, 지방족기는 1 내지 20개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 다른 구현예에서, 지방족기는 1 내지 10개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 다른 구현예에서, 지방족기는 1 내지 9개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 다른 구현예에서, 지방족기는 1 내지 8개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 다른 구현예에서, 지방족기는 1 내지 7개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 다른 구현예에서, 지방족기는 1 내지 6개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 또 다른 구현예에서, 지방족기는 1 내지 5개의 지방족 탄소원자를 함유하고, 또 다른 구현예에서, 지방족기는 1, 2, 3, 또는 4개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 적합한 지방족기는 선형 또는 분지형, 치환 또는 비치환 알킬, 알케닐, 알키닐기 및 이들의 하이브리드, 예컨대 (시클로알킬)알킬, (시클로알케닐)알킬 또는 (시클로알킬)알케닐을 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다.
알케닐(Alkenyl): "알케닐"은 하나 이상의 이중 결합을 갖는 본원에 정의된 바와 같은 지방족기를 의미한다.
알킬(Alkyl): "알킬"은 당업계에서 일반적인 의미로 주어지며 직쇄 알킬기, 분지형 사슬 알킬기, 시클로알킬 (시클로지방족)기, 알킬 치환된 시클로알킬기, 및 시클로알킬 치환된 알킬기를 포함하는 포화 지방족기를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 알킬은 1 내지 100개의 탄소 원자를 갖는다. 특정 구현예에서, 직쇄 또는 분지형 사슬 알킬은 그의 백본에 약 1 내지 20개의 탄소 원자를 갖고 (예를 들어, 직쇄의 경우 C1-C20, 분지형 사슬의 경우 C2-C20), 대안적으로는 약 1 내지 10개의 탄소 원자를 갖는다. 일부 구현예에서, 시클로알킬 고리는 이들의 고리 구조에 약 3 내지 10개의 탄소 원자를 갖고 이러한 고리는 모노시클릭, 바이시클릭, 또는 폴리시클릭이며, 대안적으로 상기 고리 구조에는 약 5, 6, 또는 7개의 탄소가 있다. 일부 구현예에서, 알킬기는 저급 알킬기일 수 있으며, 여기서 저급 알킬기는 1 내지 4개의 탄소 원자를 포함한다 (예를 들어, 직쇄 저급 알킬의 경우 C1-C4).
알키닐(Alkynyl): "알키닐"은 하나 이상의 삼중 결합을 갖는 본원에 정의된 바와 같은 지방족기이다.
아릴(Aryl): 단독으로 사용되거나 "아랄킬," "아랄콕시," 또는 "아릴옥시알킬"에서와 같이 더 큰 모이어티의 일부로 사용되는 "아릴"은 총 5 내지 30개의 고리 구성원을 갖는 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭 고리 시스템을 지칭하며, 여기서 상기 시스템 내 적어도 하나의 고리는 방향족이다. 일부 구현예에서, 아릴기는 총 5 내지 14개의 고리 구성원을 갖는 모노시클릭, 바이시클릭, 또는 폴리시클릭 고리 시스템이고, 여기서 상기 시스템 내 적어도 하나의 고리는 방향족이고, 상기 시스템 내 각 고리는 3 내지 7개의 고리 구성원을 함유한다. 일부 구현예에서, 아릴기는 바이아릴기이다. 상기 용어 "아릴"은 용어 "아릴 고리"와 상호교환적으로 사용될 수 있다. 본 개시내용의 특정 구현예에서, "아릴"은 페닐, 바이페닐, 나프틸, 바이나프틸, 안트라실 등을 포함하지만 이들로 제한되지 않는 방향족 고리 시스템을 지칭하고, 이는 하나 이상의 치환기를 포함할 수 있다. 또한 본원에서 사용된 바와 같이 용어 "아릴"의 범위 내에는 방향족 고리가 하나 이상의 비방향족 고리에 융합된 기, 예컨대 인다닐, 프탈리미딜, 나프티미딜, 페난트리디닐, 또는 테트라히드로나프틸 등이 포함된다.
항체(Antibody): 용어 "항체"는 특정 표적 항원에 대한 특이적 결합을 부여하기에 충분한 표준 면역글로불린 서열 요소를 포함하는 폴리펩티드를 지칭한다. 당업계에 공지된 바와 같이, 자연에서 생성된 바와 같은 온전한 항체는 2개의 동일한 중쇄 폴리펩티드 (각각 약 50 kD) 및 2개의 동일한 경쇄 폴리펩티드 (각각 약 25 kD)로 구성된 대략 150 kD 사량체 제제이며, 서로 결합하여 일반적으로 "Y자형" 구조로서 지칭된다. 각 중쇄는 적어도 4개의 도메인 (각각 약 110개의 아미노산 길이) - 하나의 아미노-말단 가변 (VH) 도메인 (Y 구조의 끝에 위치), 뒤따르는 3개의 불변 도메인으로 구성된다: CH1, CH2, 및 카르복시-말단 CH3 (Y 줄기 기저부에 위치). "스위치(switch)"로 알려진 짧은 영역은 중쇄 가변 영역과 불변 영역을 연결한다. "힌지"는 CH2 및 CH3 도메인을 항체의 나머지 부분에 연결한다. 이 힌지 영역에 있는 2개의 이황화결합은 온전한 항체에서 2개의 중쇄 폴리펩티드를 서로 연결한다. 각 경쇄는 2개의 도메인 - 하나의 아미노-말단 가변 (VL) 도메인, 뒤따르는 하나의 카르복시-말단 불변 (CL) 도메인으로 구성되고, 또 다른 "스위치"에 의해 서로 분리된다. 온전한 항체 사량체는 중쇄와 경쇄가 단일 이황화 결합에 의해 서로 연결된 2개의 중쇄-경쇄 이량체로 구성된다; 2개의 다른 이황화 결합이 상기 중쇄 힌지 영역을 서로 연결하여 상기 이량체가 서로 연결되어 상기 사량체가 형성된다. 자연적으로 생성된 항체 또한 전형적으로 CH2 도메인 상에 글리코실화되어 있다. 천연 항체의 각 도메인은 압축된 역평행 베타 배럴에서 서로 패킹된 2개의 베타 시트 (예를 들어, 3-, 4-, 또는 5-가닥 시트)로 형성된 "면역글로불린 폴드"를 특징으로 하는 구조를 갖는다. 각 가변 도메인에는 "상보성 결정 영역" (CDR1, CDR2, 및 CDR3)으로 알려진 3개의 초가변 루프와 다소 불변인 4개의 "프레임워크" 영역 (FR1, FR2, FR3, 및 FR4)이 포함된다. 천연 항체가 폴딩되면 상기 FR 영역은 도메인에 대한 구조적 프레임워크를 제공하는 베타 시트를 형성하고, 중쇄와 경쇄 모두의 CDR 루프 영역은 3차원 공간에서 함께 모여 Y 구조의 끝에 위치한 단일 초가변 항원 결합 부위를 생성한다. 자연 발생 항체의 Fc 영역은 보체계(complement system)의 요소 및, 예를 들어 세포독성을 매개하는 효과기 세포를 포함하는 효과기 세포 상의 수용체에 결합한다. 당업계에 공지된 바와 같이, Fc 수용체에 대한 Fc 영역의 친화성 및/또는 기타 결합 속성은 글리코실화 또는 기타 변형을 통해 조절될 수 있다. 일부 구현예에서, 본 개시내용에 따라 생성 및/또는 활용되는 항체는 글리코실화 Fc 도메인, 예컨대 변형되거나 조작된 이러한 글리코실화를 갖는 Fc 도메인을 포함한다. 본 개시내용의 목적을 위해, 특정 구현예에서, 천연 항체에서 발견되는 충분한 면역글로불린 도메인 서열을 포함하는 임의의 폴리펩티드 또는 폴리펩티드 복합체는 이러한 폴리펩티드가 자연적으로 생성되던지 (예를 들어 항원에 반응하는 유기체에 의해 생성됨) 또는 재조합 조작, 화학적 합성 또는 기타 인공 시스템이나 방법론에 의해 생성되던지 "항체"로 지칭되고/되거나 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 항체는 다클론성(polyclonal)이고, 일부 구현예에서, 항체는 단클론성(monoclonal)이다. 일부 구현예에서, 항체는 마우스, 토끼, 영장류 또는 인간 항체의 특징인 불변 영역 서열을 갖는다. 일부 구현예에서, 항체 서열 요소는 당업계에 공지된 바와 같이 인간화, 영장류화, 키메라 등이다. 더욱이, 본원에서 사용된 용어 "항체"는 적절한 구현예에서 (달리 명시되지 않거나 문맥상 명확하지 않는 한) 대체 표현에서 항체 구조적 및 기능적 특징을 활용하기 위한 임의의 당업계에 공지되거나 개발된 구성 또는 형식을 지칭할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 본 개시내용에 따라 활용된 항체는 온전한 IgA, IgG, IgE 또는 IgM 항체; 이중- 또는 다중-특이적 항체 (예를 들어, Zybodies®, [Ulrich Brinkmann & Roland E. Kontermann (2017) The making of bispecific antibodies, mAbs, 9:2, 182-212, doi: 10.1080/19420862.2016.1268307]에 기재된 추가의 이중- 또는 다중-특이적 항체 등); 항체 단편 예컨대, Fab 단편, Fab'단편, F(ab')2 단편, Fd' 단편, Fd 단편, 및 단리된 CDR 또는 이들의 세트; 단일 사슬 Fv; 폴리펩티드-Fc 융합체; 단일 도메인 항체 (예를 들어, 상어 단일 도메인 항체, 예컨대 IgNAR 또는 이의 단편); 낙타 항체; 마스크 항체 (예를 들어, Probodies®); 소형 모듈 면역약제 ("SMIPsTM"); 단일 사슬 또는 탠덤(Tandem) 디아바디 (TandAb®); VHHs; Anticalins®; Nanobodies®; 미니바디; BiTE®; 안키린 반복 단백질 또는 DARPINs®; Avimers®; DART; TCR-유사 항체; Adnectins®; Affilins®; Trans-bodies®; Affibodies®; TrimerX®; 미세단백질; Fynomers®, Centyrins®; KALBITOR®; CovX-바디스(CovX-Bodies); 및 크로스맙(CrossMab)으로 제한되지는 않지만 이들로부터 선택되는 형식일 수 있다. 일부 구현예에서, 항체는 강화된 Fc 도메인을 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 항체는 하나 이상의 비천연 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 항체는 자연적으로 생산된다면 가질 수 있는 공유 결합 변형 (예를 들어, 글리칸의 부착)이 부족할 수 있다. 일부 구현예에서, 항체는 비푸코실화된 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 또 다른 실체와 접합된다. 일부 구현예에서, 항체는 공유 변형 (예를 들어, 글리칸, 페이로드 [예를 들어, 검출 가능한 모이어티, 치료용 모이어티, 촉매용 모이어티 등], 또는 기타 팬던트기 [예를 들어, 폴리-에틸렌글리콜 등]의 부착)을 포함할 수 있다.
비슷한(Comparable): 용어 "비슷한"은 서로 동일하지 않을 수 있지만 이들 사이의 비교를 허용할 만큼 충분히 유사하여 당업자가 관찰된 차이점 또는 유사점을 기반으로 하여 결론을 합리적으로 도출할 수 있음을 인식할 둘 이상의 제제, 실체, 상황, 조건 세트 등을 지칭한다. 일부 구현예에서, 조건, 상황, 실체, 또는 집단의 비슷한 세트는 복수의 실질적으로 동일한 특성 및 하나 또는 소수의 다양한 특성을 특징으로 한다. 당업자라면, 맥락에서, 둘 이상의 이와 같은 제제, 실체, 상황, 조건 세트 등이 비슷한 것으로 간주되도록 임의의 주어진 상황에서 어느 정도의 동일성이 요구되는지를 이해할 것이다. 예를 들어, 예를 들어, 당업자라면 상황, 개체, 또는 집단의 상이한 세트 하에서 또는 이러한 세트로 얻은 결과 또는 관찰된 현상의 차이가 변화하는 특성의 변화에 의해 유발되거나 이러한 변화를 나타내는 합리적인 결론을 보장하는 실질적으로 동일한 특성의 충분한 수 및 유형을 특징으로 할 때 상황, 개체, 또는 집단의 세트가 서로 비슷하다는 것을 인식할 것이다.
시클로지방족(Cycloaliphatic): 용어 "시클로지방족," "카보사이클," "카보시클릴," "카보시클릭 라디칼," 및 "카보시클릭 고리,"는 상호 교환적으로 사용되고, 달리 명시하지 않는 한, 3 내지 30개의 고리 구성원을 갖는, 본원에 기재된 바와 같은 포화 또는 부분 불포화이지만 비방향족, 고리형 지방족 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭 고리 시스템을 지칭한다. 시클로지방족기는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로펜테닐, 시클로헥실, 시클로헥세닐, 시클로헵틸, 시클로헵테닐, 시클로옥틸, 시클로옥테닐, 노르보르닐, 아다만틸 및 시클로옥타디에닐을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 일부 구현예에서, 시클로지방족기는 3 내지 6개의 탄소를 갖는다. 일부 구현예에서, 시클로지방족기는 포화되고 시클로알킬이다. 용어 "시클로지방족"은 또한 데카히드로나프틸 또는 테트라히드로나프틸과 같은 하나 이상의 방향족 또는 비방향족 고리에 융합된 지방족 고리를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 시클로지방족기는 바이시클릭이다. 일부 구현예에서, 시클로지방족기는 트리시클릭이다. 일부 구현예에서, 시클로지방족기는 폴리시클릭이다. 일부 구현예에서, "시클로지방족"은 완전히 포화되거나 하나 이상의 불포화 단위를 포함하지만 방향족은 아니며 분자의 나머지 부분에 단일 부착 지점을 갖는 C3-C6 모노시클릭 탄화수소, 또는 C8-C10 바이시클릭 또는 폴리시클릭 탄화수소, 또는 완전히 포화되거나 하나 이상의 불포화 단위를 포함하지만 방향족이 아니며 분자의 나머지 부분에 단일 부착 지점을 갖는 C9-C16 폴리시클릭 탄화수소를 지칭한다.
할로알킬(Haloalkyl) 및 할로알콕시(Haloalkoxy): 용어 "할로알킬"은 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 C1-4 직선형 또는 분지형 알킬기를 지칭하며, 예시로는 트리플루오로메틸, 디플루오로메틸, 및 디클로로메틸이 있다. 용오 "할로알콕시"는 -O- 연결을 통해 치환되는 기에 부착된 할로알킬기이다. 예시는 트리플루오로메톡시 및 디플루오로메톡시를 포함한다.
헤테로지방족(Heteroaliphatic): 용어 "헤테로지방족"은 당업계에서 일반적인 의미로 주어지며, 하나 이상의 탄소 원자가 하나 이상의 헤테로원자 (예를 들어, 산소, 질소, 황, 규소, 인 등)로 독립적으로 대체되는 본원에 기재된 바와 같은 지방족기를 지칭한다. 일부 구현예에서, C, CH, CH2, 및 CH3 로부터 선택되는 하나 이상의 단위는 하나 이상의 헤테로원자 (이들의 산화 및/또는 치환된 형태를 포함)에 의해 독립적으로 대체된다. 일부 구현예에서, 헤테로지방족기는 헤테로알킬이다. 일부 구현예에서, 헤테로지방족기는 헤테로알케닐이다.
헤테로알킬(Heteroalkyl): 용어 "헤테로알킬"은 당업계에서 일반적인 의미로 주어지며, 하나 이상의 탄소 원자가 하나 이상의 헤테로원자 (예를 들어, 산소, 질소, 황, 규소, 인 등)로 독립적으로 대체되는 본원에 기재된 바와 같은 알킬기를 지칭한다. 헤테로알킬기의 예는 알콕시, 폴리(에틸렌 글리콜)-, 알킬-치환된 아미노, 테트라히드로푸라닐, 피페리디닐, 모르폴리닐 등을 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다.
헤테로아릴(Heteroaryl): 단독으로 또는 더 큰 모이어티의 일부, 예를 들어, "헤테로아랄킬," 또는 "헤테로아랄콕시"로 사용되는 용어 "헤테로아릴"은 총 5개 내지 30개의 고리 구성원을 갖는 모노시클릭, 바이시클릭, 또는 폴리시클릭 고리 시스템을 지칭하고, 여기서 상기 시스템의 적어도 하나의 고리는 방향족이고 적어도 하나의 방향족 고리 원자는 헤테로원자이다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴기는 5 내지 10개의 고리 원자를 갖는 기이고 (즉, 모노시클릭, 바이시클릭, 또는 폴리시클릭), 일부 구현예에서 5, 6, 9, 또는 10개의 고리 원자를 갖는다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴기는 고리형 배열로 공유된 6, 10, 또는 14개의 π 전자를 가지며, 탄소 원자 외에 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는다. 헤테로아릴기는 티에닐, 푸라닐, 피롤릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 옥사디아졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 티아디아졸릴, 피리딜, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 인돌리지닐, 퓨리닐, 나프티리디닐, 및 프테리디닐을 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴은 헤테로바이아릴기, 예컨대 바이피리딜 등이다. 본원에서 사용된 바와 같이 용어 "헤테로아릴"은 또한 헤테로방향족 고리가 하나 이상의 아릴, 시클로지방족, 또는 헤테로시클릴 고리에 융합되어 있는 기를 포함하며, 여기서 라디칼 또는 부착 지점은 헤테로방향족 고리 상에 있다. 비제한적인 예는 인돌릴, 이소인돌릴, 벤조티에닐, 벤조푸라닐, 디벤조푸라닐, 인다졸릴, 벤즈이미다졸릴, 벤즈티아졸릴, 퀴놀릴, 이소퀴놀릴, 신놀리닐, 프탈라지닐, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 4H- 퀴놀리지닐, 카르바졸릴, 아크리디닐, 페나지닐, 페노티아지닐, 페녹사지닐, 테트라히드로퀴놀리닐, 테트라히드로이소퀴놀리닐 및 피리도[2,3-b]-1,4-옥사진-3(4H)-온을 포함한다. 헤테로아릴기는 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭일 수 있다. 용어 "헤테로아릴"은 용어 "헤테로아릴 고리", "헤테로아릴기", 또는 "헤테로방향족"과 상호 교환적으로 사용될 수 있으며, 이들 용어 중 임의의 용어는 임의로 치환된 고리를 포함한다. 용어 "헤테로아랄킬"은 헤테로아릴기로 치환된 알킬기를 지칭하고, 여기서 상기 알킬 및 헤테로아릴 부분은 독립적으로 임의로 치환된다.
헤테로원자(Heteroatom): 용어 "헤테로원자"는 탄소나 수소가 아닌 원자를 의미한다. 일부 구현예에서, 헤테로원자는 붕소, 산소, 황, 질소, 인 또는 규소 (이러한 원자의 다양한 형태, 예컨대 (예를 들어, 질소, 황, 인 또는 규소의) 산화된 형태, 헤테로시클릭 고리의 치환가능한 질소 또는 염기성 질소의 4차화된 형태 (예를 들어, 3,4-디히드로-2H-피롤릴에서와 같은 N), NH (피롤리디닐에서와 같음) 또는 NR+ (N-치환 피롤리디닐에서와 같음) 등 포함)이다. 일부 구현예에서, 헤테로원자는 산소, 황 또는 질소이다.
헤테로사이클(Heterocycle): 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로사이클," "헤테로시클릴," "헤테로시클릭 라디칼," 및 "헤테로시클릭 고리"는 상호 교환적으로 사용되며 포화 또는 부분 불포화이고 하나 이상의 헤테로원자 고리 원자를 갖는 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭 고리 모이어티 (예를 들어, 3 내지 30원)를 지칭한다. 일부 구현예에서, 헤테로시클릴기는 포화되거나 부분 불포화되고, 탄소 원자 외에 하나 이상, 바람직하게는 1 내지 4개의 상기 정의된 바와 같은 헤테로원자를 갖는 안정한 5원 내지 7원 모노시클릭 또는 7원 내지 10원 바이시클릭 헤테로시클릭 모이어티이다. 헤테로사이클의 고리 원자와 관련하여 사용되는 경우, 용어 "질소"는 치환된 질소를 포함한다. 예를 들어, 산소, 황 및 질소로부터 선택되는 0 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 포화 또는 부분 불포화 고리에서 질소는 N (3,4-디히드로-2H-피롤릴에서와 같이), NH (피롤리디닐에서와 같이), 또는 +NR (N-치환 피롤리디닐에서와 같이)일 수 있다. 헤테로시클릭 고리는 임의의 헤테로원자 또는 탄소 원자에서 펜던트기에 부착되어 안정적인 구조를 생성할 수 있으며 고리 원자 중 어느 것도 임의로 대체될 수 있다. 이러한 포화 또는 부분 불포화 헤테로시클릭 라디칼의 예는 테트라하이드로푸라닐, 테트라하이드로티에닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피롤리닐, 테트라하이드로퀴놀리닐, 테트라하이드로이소퀴놀리닐, 데카하이드로퀴놀리닐, 옥사졸리디닐, 피페라지닐, 디옥사닐, 디옥솔라닐, 디아제피닐, 옥사제피닐, 티아제피닐, 모르폴리닐 및 퀴누클리디닐을 포함되지만 이들로 제한되지는 않는다. 용어 "헤테로사이클," "헤테로시클릴," "헤테로시클릴 고리," "헤테로시클릭 기," "헤테로시클릭 모이어티," 및 "헤테로시클릭 라디칼"은 본원에서 상호 교환적으로 사용되며, 헤테로시클릴 고리가 하나 이상의 아릴, 헤테로아릴, 또는 시클로지방족 고리 (예컨대 인돌리닐, 3H-인돌릴, 크로마닐, 페난트리디닐, 또는 테트라히드로퀴놀리닐)에 융합된 기 또한 포함한다. 헤테로시클릴기는 모노시클릭, 바이시클릭, 또는 폴리시클릭일 수 있다. 용어 "헤테로시클릴알킬"은 헤테로시클릴로 치환된 알킬기를 지칭하고, 여기서 알킬 및 헤테로시클릴 부분은 독립적으로 임의로 치환된다.
임의로 치환된: 본원에 기재된 바와 같이 본 개시내용의 화합물은 임의로 치환되고/되거나 치환된 모이어티를 함유할 수 있다. 일반적으로, 용어 "임의로"가 앞에 오는지 여부에 관계없이 용어 "치환된"은 지정된 모이어티의 하나 이상의 수소가 적합한 치환기로 대체되는 것을 의미한다. 달리 명시하지 않는 한, "임의로 치환된" 기는 상기 기의 각 치환가능한 위치에 적합한 치환기를 가질 수 있으며, 주어진 구조에서 하나 이상의 위치가 지정된 기로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있는 경우, 상기 치환기는 모든 위치에서 동일할 수도 있고 다를 수도 있다. 일부 구현예에서, 임의로 치환된 기는 비치환된다. 본 개시내용에 의해 구상되는 치환기의 조합은 바람직하게는 안정하거나 화학적으로 실현 가능한 화합물의 형성을 초래하는 것들이다. 본원에서 사용된 바와 같은 용어 "안정한"은 화합물의 생성, 검출 및 특정 구현예에서는 회수, 정제 및 본원에 개시된 목적 중 하나 이상을 위한 사용을 가능하게 하는 조건에 처해졌을 때 실질적으로 변경되지 않는 화합물을 지칭한다. 특정 치환기는 하기에 설명된다.
치환 가능한 원자, 예를 들어, 적합한 탄소 원자 상의 적합한 1가 치환기는 독립적으로 할로겐; R°로 치환될 수 있는 -(CH2)0-4R°; -(CH2)0-4OR°; -O(CH2)0-4Ro, -O-(CH2)0-4C(O)OR°; -(CH2)0-4CH(OR°)2; -(CH2)0-4Ph; R°로 치환될 수 있는 -(CH2)0-4O(CH2)0-1Ph; R°로 치환될 수 있는 -CH=CHPh; R°로 치환될 수 있는 -(CH2)0-4O(CH2)0-1-피리딜; -NO2; -CN; -N3; -(CH2)0-4N(R°)2; -(CH2)0-4N(R°)C(O)R°; -N(R°)C(S)R°; -(CH2)0-4N(R°)C(O)NR°2; -N(R°)C(S)NR°2; -(CH2)0-4N(R°)C(O)OR°; -N(R°)N(R°)C(O)R°; -N(R°)N(R°)C(O)NR°2; -N(R°)N(R°)C(O)OR°; -(CH2)0-4C(O)R°; -C(S)R°; -(CH2)0-4C(O)OR°; -(CH2)0-4C(O)SR°; -(CH2)0-4C(O)OSiR°3; -(CH2)0-4OC(O)R°; -OC(O)(CH2)0-4SR°, -SC(S)SR°; -(CH2)0-4SC(O)R°; -(CH2)0-4C(O)NR°2; -C(S)NR°2; -C(S)SR°; -(CH2)0-4OC(O)NR°2; -C(O)N(OR°)R°; -C(O)C(O)R°; -C(O)CH2C(O)R°; -C(NOR°)R°; -(CH2)0-4SSR°; -(CH2)0-4S(O)2R°; -(CH2)0-4S(O)2OR°; -(CH2)0-4OS(O)2R°; -S(O)2NR°2; -(CH2)0-4S(O)R°; -N(R°)S(O)2NR°2; -N(R°)S(O)2R°; -N(OR°)R°; -C(NH)NR°2; -Si(R°)3; -OSi(R°)3; -B(R°)2; -OB(R°)2; -OB(OR°)2; -P(R°)2; -P(OR°)2; -P(R°)(OR°); -OP(R°)2; -OP(OR°)2; -OP(R°)(OR°); -P(O)(R°)2; -P(O)(OR°)2; -OP(O)(R°)2; -OP(O)(OR°)2; -OP(O)(OR°)(SR°); -SP(O)(R°)2; -SP(O)(OR°)2; -N(R°)P(O)(R°)2; -N(R°)P(O)(OR°)2; -P(R°)2[B(R°)3]; -P(OR°)2[B(R°)3]; -OP(R°)2[B(R°)3]; -OP(OR°)2[B(R°)3]; -(C1-4 직선형 또는 분지형 알킬렌)O-N(R°)2; 또는 -(C1-4 직선형 또는 분지형 알킬렌)C(O)O-N(R°)2이고, 여기서 각 R°는 본원에 정의된 바와 같이 치환될 수 있고 R°는 독립적으로 수소, C1-20 지방족, 질소, 산소, 황, 규소 및 인으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-20 헤테로지방족, -CH2-(C6-14 아릴), -O(CH2)0-1(C6-14 아릴), -CH2-(5 내지 14원 헤테로아릴 고리), 질소, 산소, 황, 규소 및 인으로부터 독립적으로 선택되는 0 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원, 모노시클릭, 바이시클릭, 또는 폴리시클릭, 포화, 부분 불포화 또는 아릴 고리이거나, 상기 정의에도 불구하고, 2개의 독립적인 R°의 발생은 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소, 황, 규소 및 인으로부터 독립적으로 선택되는 0 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원, 모노시클릭, 바이시클릭, 또는 폴리시클릭, 포화, 부분 불포화 또는 아릴 고리를 형성하고, 이는 하기에 정의된 바와 같이 치환될 수 있다.
R° (2개의 독립적인 R°의 발생과 이들 사이의 개재 원자가 함께하여 형성된 고리) 상의 적합한 1가 치환기는, 독립적으로 할로겐, -(CH2)0-2R●, -(할로R●), -(CH2)0-2OH, -(CH2)0-2OR●, -(CH2)0-2CH(OR●)2; -O(할로R●), -CN, -N3, -(CH2)0-2C(O)R●, -(CH2)0-2C(O)OH, -(CH2)0-2C(O)OR●, -(CH2)0-2SR●, -(CH2)0-2SH, -(CH2)0-2NH2, -(CH2)0-2NHR●, -(CH2)0-2NR● 2, -NO2, -SiR● 3, -OSiR● 3, -C(O)SR● , -(C1-4 직선형 또는 분지형 알킬렌)C(O)OR●, 또는 -SSR●이고, 여기서 각 R●은 비치환되거나 "할로"가 앞에 오는 경우 하나 이상의 할로겐으로만 치환되고, C1-4　지방족, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph, 및 질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택되는 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리로부터 독립적으로 선택된다. R°의 포화 탄소 원자 상의 적합한 2가 치환기는 =O 및 =S를 포함한다.
예를 들어, 적합한 탄소 원자 상의 적합한 2가 치환기는 독립적으로 다음과 같다: =O, =S, =NNR* 2, =NNHC(O)R*, =NNHC(O)OR*, =NNHS(O)2R*, =NR*, =NOR*, -O(C(R* 2))2-3O-, 또는 -S(C(R* 2))2-3S-, 여기서 R*의 각각의 독립적인 경우는 수소, 하기 정의된 바와 같이 치환될 수 있는 C1-6　지방족, 및 질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택되는 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 비치환 5 내지 6원 포화, 부분 불포화 또는 아릴 고리로부터 선택된다. "임의로 치환된" 기의 인접 치환가능 탄소에 결합된 적합한 2가 치환기는 -O(CR* 2)2-3O-를 포함하고, 여기서 R*의 각각의 독립적인 경우는 수소, 하기 정의된 바와 같이 치환될 수 있는 C1-6 지방족, 및 질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택되는 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 비치환 5 내지 6원 포화, 부분 불포화, 및 아릴 고리로부터 선택된다.
R*의 지방족기 상의 적합한 치환기는 독립적으로 할로겐, -R●, -(할로R●), -OH, -OR●, -O(할로R●), -CN, -C(O)OH, -C(O)OR●, -NH2, -NHR●, -NR● 2, 또는 -NO2이고, 여기서 각 R●은 비치환되거나 "할로"가 앞에 오는 경우 하나 이상의 할로겐으로만 치환되고, 독립적으로 C1-4 지방족, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph, 또는 질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택되는 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리이다.
일부 구현예에서, 치환 가능한 질소 상의 적합한 치환기는 독립적으로 -R†, -NR† 2, -C(O)R†, -C(O)OR†, -C(O)C(O)R†, -C(O)CH2C(O)R†, -S(O)2R†, -S(O)2NR† 2, -C(S)NR† 2, -C(NH)NR† 2, 또는 -N(R†)S(O)2R†이고, 여기서 각 R†는 독립적으로 수소, 하기 정의된 바와 같이 치환될 수 있는 C1-6 지방족, 비치환 -OPh 또는 질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택되는 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 비치환 5 내지 6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리이거나, 상기 정의에도 불구하고, 2개의 독립적인 R†는 이들의 개재 원자(들)과 함께 질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택되는 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 비치환된 3 내지 12원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 모노시클릭 또는 바이시클릭 고리를 형성한다.
R†의 지방족기 상의 적합한 치환기는 독립적으로 할로겐, -R●, -(할로R●), -OH, -OR●, -O(할로R●), -CN, -C(O)OH, -C(O)OR●, -NH2, -NHR●, -NR● 2, 또는 -NO2이고, 여기서 각 R●은 비치환되거나 "할로"가 앞에 오는 경우 하나 이상의 할로겐으로만 치환되고, 독립적으로 C1-4　지방족, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph, 또는 질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택되는 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리이다.
부분 불포화: 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "부분 불포화"는 적어도 하나의 이중결합 또는 삼중결합을 포함하는 고리 모이어티를 지칭한다. 용어 "부분 불포화"는 다중 불포화 부위를 갖는 고리를 포함하도록 의도되지만, 본원에 정의된 바와 같은 아릴 또는 헤테로아릴 모이어티를 포함하려는 의도는 아니다.
약학 조성물: 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "약학 조성물"은 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체와 함께 제형화된 활성제를 의미한다. 일부 구현예에서, 활성제는 관련 모집단에 투여될 때 미리 결정된 치료 효과를 달성할 통계적으로 유의미한 확률을 나타내는 치료 요법에서 투여하기에 적합한 단위 용량으로 존재한다. 일부 구현예에서, 약학 조성물은 하기에 적합한 것을 포함하여 고체 또는 액체 형태로 투여하기 위해 특별히 제형화될 수 있다: 경구 투여, 예를 들어, 드렌치(drench) (수용액 또는 비수용액 또는 현탁액), 정제, 예를 들어, 협측, 설하, 및 전신 흡수용으로 표적화된 것들, 볼루스(bolus), 분말, 과립, 혀에 도포하기 위한 페이스트; 비경구 투여, 예를 들어 멸균 용액 또는 현탁액 또는 서방형 제형으로서 예를 들어 피하, 근육 내, 정맥 내 또는 경막 외 주사에 의한 투여; 예를 들어 피부, 폐, 또는 구강에 도포되는 크림, 연고 또는 제어 방출형 패치 또는 스프레이로서의 국부 도포; 예를 들어, 좌약, 크림 또는 발포제로서의 질 내 또는 직장 내 투여; 설하; 안구; 경피; 또는 비강, 폐 및 기타 점막 표면에 대한 투여.
약학적으로 허용 가능한: 본원에서 사용되는 바와 같이, "약학적으로 허용 가능한"이란 문구는 건전한 의학적 판단 범위 내에서 합리적인 유익/유해 비율에 상응하는 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응, 또는 기타 문제점 또는 합병증 없이 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합한 이들 화합물, 재료, 조성물, 및/또는 복용 형태를 지칭한다.
약학적으로 허용 가능한 담체: 본원에서 사용되는 바와 같이, "약학적으로 허용 가능한 담체"란 용어는 액체 또는 고체 충전제, 희석제, 부형제, 또는 용매 캡슐화 재료와 같은 약학적으로 허용 가능한 재료, 조성물 또는 비히클을 의미하며, 여기서 이는 대상 화합물을 신체의 하나의 장기 또는 일부로부터 신체의 다른 장기 또는 일부로 수송 또는 전달하는 것과 관련이 있다. 각각의 담체는 제형의 기타 성분과 상용성이지만 환자에게 해롭지 않다는 측면에서 "허용 가능"해야 한다. 약학적으로 허용 가능한 담체로서 역할을 할 수 있는 재료의 일부 예는 다음을 포함한다: 락토오스, 글루코오스 및 수크로오스와 같은 당; 옥수수 전분 및 감자 전분과 같은 전분; 소듐 카르복시메틸 셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스 및 셀룰로오스 아세테이트와 같은 셀룰로오스 및 이의 유도체; 분말형 트라가칸트(tragacanth); 맥아; 젤라틴; 활석; 코코아 버터 및 좌제 왁스(suppository wax)와 같은 부형제; 땅콩 오일, 목화씨 오일, 해바라기 오일, 참기름, 올리브 오일, 옥수수 오일 및 대두 오일과 같은 오일; 프로필렌글리콜과 같은 글리콜; 글리세린, 소르비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌글리콜과 같은 폴리올; 에틸 올리에이트 및 에틸 라우레이트와 같은 에스테르; 한천; 수산화마그네슘 및 수산화알루미늄과 같은 완충제; 알긴산; 발열원(pyrogen) 무함유 물; 등장성 염수; 링거액; 에틸알코올; pH 완충 용액; 폴리에스테르, 폴리카르보네이트 및/또는 폴리안하이드라이드; 및 약학 제형에 사용되는 기타 무독성 상용성 물질
약학적으로 허용 가능한 염: 본원에서 사용되는 바와 같이, "약학적으로 허용 가능한 염"이라는 용어는 약학적 문맥에서 사용하기에 적합한 그러한 화합물의 염, 즉, 건전한 의학적 판단 범위 내에서 합리적인 유익/유해 비율에 상응하는 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 등 없이 인간 및 하위 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합한 염을 지칭한다. 약학적으로 허용 가능한 염은 당업계에 널리 공지된다. 예를 들어, 약학적으로 허용 가능한 염의 목록은 [G. Steffen Paulekuhn, 등, Journal of Medicinal Chemistry 2007, 50, 6665 and Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use,　P. Heinrich Stahl and　Camille G. Wermuth　Editors, Wiley-VCH, 2002]에서 찾을 수 있다.
일부 구현예에서, 약학적으로 허용 가능한 염은 염산, 브롬화수소산, 인산, 황산 및 과염소산과 같은 무기산 또는 아세트산, 말레산, 타르타르산, 시트르산, 숙신산 또는 말론산과 같은 유기산으로 형성되거나 이온 교환과 같은 당업계에서 사용되는 다른 방법을 사용하여 형성되는 아미노기의 염인 무독성 산 부가염을 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다. 일부 구현예에서, 약학적으로 허용 가능한 염은 아디프산염, 알긴산염, 아스코르브산염, 아스파르트산염, 벤젠설폰산염, 벤조산염, 중황산염, 붕산염, 부티르산염, 캄포르산염, 캄포르설폰산염, 시트르산염, 시클로펜탄프로피온산염, 다이글루콘산염, 도데실황산염, 에탄설폰산염, 포름산염, 푸마르산염, 글루코헵톤산염, 글리세로인산염, 글루콘산염, 헤미황산염, 헵탄산염, 헥산산염, 요오드화수소산염, 2-히드록시-에탄설폰산염, 락토바이온산염, 락트산염, 라우르산염, 라우릴 황산염, 말산염, 말레산염, 말론산염, 메탄설폰산염, 2-나프탈렌설폰산염, 니코틴산염, 질산염, 올레산염, 옥살산염, 팔미트산염, 파모산염, 펙틴산염, 과황산염, 3-페닐프로피온산염, 인산염, 피크르산염, 피발산염, 프로피온산염, 스테아르산염, 숙신산염, 황산염, 타르타르산염, 티오시안산염, p-톨루엔설폰산염, 운데칸산염, 발레르산염 등을 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다. 일부 구현예에서, 제공된 화합물은 하나 이상의 산성 기를 포함하고 약학적으로 허용 가능한 염은 알칼리, 알칼리 토금속, 또는 암모늄 (예를 들어, N(R)3의 암모늄 염, 여기서 각 R은 본 개시내용에 독립적으로 정의되고 설명됨) 염이다. 대표적인 알칼리 또는 알칼리 토금속 염은 나트륨, 리튬, 칼륨, 칼슘, 마그네슘 등을 포함한다. 일부 구현예에서, 약학적으로 허용 가능한 염은 나트륨 염이다. 일부 구현예에서, 약학적으로 허용 가능한 염은 칼륨 염이다. 일부 구현예에서, 약학적으로 허용 가능한 염은 칼슘 염이다. 일부 구현예에서, 약학적으로 허용 가능한 염은 적절한 경우에, 무독성 암모늄, 4차 암모늄, 및 할로겐화물, 수산화물, 카복실산염, 황산염, 인산염, 질산염, 1 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 알킬, 설폰산염 및 아릴 설폰산염과 같은 반대 이온을 사용하여 형성된 아민 양이온을 포함한다. 일부 구현예에서, 제공된 화합물은 하나 이상의 산성 기를 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 일반적으로 염은 2개 이상의 양이온을 포함하고 이들은 같거나 다를 수 있다. 일부 구현예에서, 약학적으로 허용 가능한 염 (또는 일반적으로 염)에서, 산성 기의 모든 이온화 가능한 수소 (예를 들어, pKa가 약 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 또는 2 이하인 수용액에서; 일부 구현예에서, 약 7 이하; 일부 구현예에서, 약 6 이하; 일부 구현예에서, 약 5 이하; 일부 구현예에서, 약 4 이하; 일부 구현예에서, 약 3 이하)는 양이온으로 대체된다.
보호기: 용어 "보호기"는 당업계에 널리 공지되고, [Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999]에 상세히 설명된 것을 포함하며, 이의 전문이 본원에 참조로서 포함된다. 또한 [Current Protocols in Nucleic Acid Chemistry, edited by Serge L. Beaucage 등 06/2012]에 설명된 뉴클레오시드 및 뉴클레오티드 화학에 특별히 적합한 보호기도 포함되고, 챕터 2의 전문이 본원에 참조로서 포함된다. 적합한 아미노 보호기는 메틸 카바메이트, 에틸 카바메이트, 9-플루오레닐메틸 카바메이트 (Fmoc), 9-(2-설포)플루오레닐메틸 카바메이트, 9-(2,7-디브로모)플루오레닐메틸 카바메이트, 2,7-디-t-부틸-[9-(10,10-디옥소-10,10,10,10-테트라히드로티옥산틸)]메틸 카바메이트 (DBD-Tmoc), 4-메톡시페나실 카바메이트 (Phenoc), 2,2,2-트리클로로에틸 카바메이트 (Troc), 2-트리메틸실릴에틸 카바메이트 (Teoc), 2-페닐에틸 카바메이트 (hZ), 1-(1-아다만틸)-1-메틸에틸 카바메이트 (Adpoc), 1,1-디메틸-2-할로에틸 카바메이트, 1,1-디메틸-2,2-디브로모에틸 카바메이트 (DB-t-BOC), 1,1-디메틸-2,2,2-트리클로로에틸 카바메이트 (TCBOC), 1-메틸-1-(4-비페닐릴)에틸 카바메이트 (Bpoc), 1-(3,5-디-t-부틸페닐)-1-메틸에틸 카바메이트 (t-Bumeoc), 2-(2'- 및 4'-피리딜)에틸 카바메이트 (Pyoc), 2-(N,N-디시클로헥실카르복사미도)에틸 카바메이트, t-부틸 카바메이트 (BOC), 1-아다만틸 카바메이트 (Adoc), 비닐 카바메이트 (Voc), 알릴 카바메이트 (Alloc), 1-이소프로필알릴 카바메이트 (Ipaoc), 신나밀 카바메이트 (Coc), 4-니트로신나밀 카바메이트 (Noc), 8-퀴놀릴 카바메이트, N-히드록시피페리디닐 카바메이트, 알킬디티오 카바메이트, 벤질 카바메이트 (Cbz), p-메톡시벤질 카바메이트 (Moz), p-니트로벤질 카바메이트, p-브로모벤질 카바메이트, p-클로로벤질 카바메이트, 2,4-디클로로벤질 카바메이트, 4-메틸설피닐벤질 카바메이트 (Msz), 9-안트릴메틸 카바메이트, 디페닐메틸 카바메이트, 2-메틸티오에틸 카바메이트, 2-메틸설포닐에틸 카바메이트, 2-(p-톨루엔설포닐)에틸 카바메이트, [2-(1,3-디티아닐)]메틸 카바메이트 (Dmoc), 4-메틸티오페닐 카바메이트 (Mtpc), 2,4-디메틸티오페닐 카바메이트 (Bmpc), 2-포스포니오에틸 카바메이트 (Peoc), 2-트리페닐포스포니오이소프로필 카바메이트 (Ppoc), 1,1-디메틸-2-시아노에틸 카바메이트, m-c클로로-p-아실옥시벤질 카바메이트, p-(디히드록시보릴)벤질 카바메이트, 5-벤지속사졸릴메틸 카바메이트, 2-(트리플루오로메틸)-6-크로모닐메틸 카바메이트 (Tcroc), m-니트로페닐 카바메이트, 3,5-디메톡시벤질 카바메이트, o-니트로벤질 카바메이트, 3,4-디메톡시-6-니트로벤질 카바메이트, 페닐(o-니트로페닐)메틸 카바메이트, 페노티아지닐-(10)-카르보닐 유도체, N'-p-톨루엔설포닐아미노카르보닐 유도체, N'-페닐아미노티오카르보닐 유도체, t-아밀 카바메이트, S-벤질 티오카바메이트, p-시아노벤질 카바메이트, 시클로부틸 카바메이트, 시클로헥실 카바메이트, 시클로펜틸 카바메이트, 시클로프로필메틸 카바메이트, p-데실옥시벤질 카바메이트, 2,2-디메톡시카르보닐비닐 카바메이트, o-(N,N-디메틸카르복사미도)벤질 카바메이트, 1,1-디메틸-3-(N,N-디메틸카르복사미도)프로필 카바메이트, 1,1-디메틸프로피닐 카바메이트, 디(2-피리딜)메틸 카바메이트, 2-푸라닐메틸 카바메이트, 2-요오도에틸 카바메이트, 이소보리닐 카바메이트, 이소부틸 카바메이트, 이소티코티닐 카바메이트, p-(p'-메톡시페닐아조)벤질 카바메이트, 1-메틸시클로부틸 카바메이트, 1-메틸시클로헥실 카바메이트, 1-메틸-1-시클로프로필메틸 카바메이트, 1-메틸-1-(3,5-디메톡시페닐)에틸 카바메이트, 1-메틸-1-(p-페닐아조페닐)에틸 카바메이트, 1-메틸-1-페닐에틸 카바메이트, 1-메틸-1-(4-피리딜)에틸 카바메이트, 페닐 카바메이트, p-(페닐아조)벤질 카바메이트, 2,4,6-트리-t-부틸페닐 카바메이트, 4-(트리메틸암모늄)벤질 카바메이트, 2,4,6-트리메틸벤질 카바메이트, 포름아미드, 아세트아미드, 클로로아세트아미드, 트리클로로아세트아미드, 트리플루오로아세트아미드, 페닐아세트아미드, 3-페닐프로판아미드, 피콜린아미드, 3-피리딜카르복사미드, N-벤조일페닐알라닐 유도체, 벤즈아미드, p-페닐벤즈아미드, o-니트로페닐아세트아미드, o-니트로페녹시아세트아미드, 아세토아세트아미드, (N'-디티오벤질옥시카르보닐아미노)아세트아미드, 3-(p-히드록시페닐)프로판아미드, 3-(o-니트로페닐)프로판아미드, 2-메틸-2-(o-니트로페녹시)프로판아미드, 2-메틸-2-(o-페닐아조페녹시)프로판아미드, 4-클로로부탄아미드, 3-메틸-3-니트로부탄아미드, o-니트로신나미드, N- 아세틸메티오닌 유도체, o-니트로벤즈아미드, o-(벤졸릴옥시메틸)벤즈아미드, 4,5-디페닐-3-옥사졸린-2-온, N-프탈리미드, N-디티아숙신이미드 (Dts), N-2,3-디페닐말레이미드, N-2,5-디메틸피롤, N-1,1,4,4-테트라메틸디실릴아자시클로펜탄 부가물 (STABASE), 5-치환된 1,3-디메틸-1,3,5-트리아자시클로헥산-2-온, 5-치환된 1,3-디벤질-1,3,5-트리아자시클로헥산-2-온, 1-치환된 3,5-디니트로-4-피리돈, N-메틸아민, N-알릴아민, N-[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸아민 (SEM), N-3-아세톡시프로필아민, N-(1-이소프로필-4-니트로-2-옥소-3-피로올린-3-일)아민, 4차 암모늄 염, N-벤질아민, N-디(4-메톡시페닐)메틸아민, N-5-디벤조수베릴아민, N-트리페닐메틸아민 (Tr), N-[(4-메톡시페닐)디페닐메틸]아민 (MMTr), N-9-페닐플루오레닐아민 (PhF), N-2,7-디클로로-9-플루오레닐메틸렌아민, N-페로세닐메틸아미노 (Fcm), N-2-피콜릴아미노 N'-옥시드, N-1,1-디메틸티오메틸렌아민, N-벤질리덴아민, N-p-메톡시벤질리덴아민, N-디페닐메틸렌아민, N-[(2-피리딜)메시틸]메틸렌아민, N-(N',N'-디메틸아미노메틸렌)아민, N,N'-이소프로필리덴디아민, N-p-니트로벤질리덴아민, N-살리실리덴아민, N-5-클로로살리실리덴아민, N-(5-클로로-2-히드록시페닐)페닐메틸렌아민, N-시클로헥실리덴아민, N-(5,5-디메틸-3-옥소-1-시클로헥세닐)아민, N-보란 유도체, N-디페닐붕산 유도체, N-[페닐(펜타카르보닐크롬- 또는 텅스텐)카르보닐]아민, N-구리 킬레이트, N-아연 킬레이트, N-니트로아민, N-니트로소아민, 아민 N-옥시드, 디페닐포스핀아미드 (Dpp), 디메틸티오포스핀아미드 (Mpt), 디페닐티오포스핀아미드 (Ppt), 디알킬 포스포르아미데이트, 디벤질 포스포르아미데이트, 디페닐 포스포르아미데이트, 벤젠술펜아미드, o-니트로벤젠술펜아미드 (Nps), 2,4-디니트로벤젠술펜아미드, 펜타클로로벤젠술펜아미드, 2-니트로-4-메톡시벤젠술펜아미드, 트리페닐메틸술펜아미드, 3-니트로피리딘술펜아미드 (Npys), p-톨루엔술폰아미드 (Ts), 벤젠술폰아미드, 2,3,6,-트리메틸-4-메톡시벤젠술폰아미드 (Mtr), 2,4,6-트리메톡시벤젠술폰아미드 (Mtb), 2,6-디메틸-4-메톡시벤젠술폰아미드 (Pme), 2,3,5,6-테트라메틸-4-메톡시벤젠술폰아미드 (Mte), 4-메톡시벤젠술폰아미드 (Mbs), 2,4,6-트리메틸벤젠술폰아미드 (Mts), 2,6-디메톡시-4-메틸벤젠술폰아미드 (iMds), 2,2,5,7,8-펜타메틸크로만-6-술폰아미드 (Pmc), 메탄술폰아미드 (Ms), β-트리메틸실릴에탄술폰아미드 (SES), 9-안트라센술폰아미드, 4-(4',8'-디메톡시나프틸메틸)벤젠술폰아미드 (DNMBS), 벤질술폰아미드, 트리플루오로메틸술폰아미드, 및 페나실술폰아미드를 포함한다.
적절하게 보호된 카르복실 산은 실릴-, 알킬-, 알케닐-, 아릴-, 및 아릴알킬-보호된 카르복실 산을 추가적으로 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다. 적합한 실릴기의 예는 트리메틸실릴, 트리에틸실릴, t-부틸디메틸실릴, t-부틸디페닐실릴, 트리이소프로필실릴 등을 포함한다. 적합한 알킬기의 예는 메틸, 벤질, p-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 트리틸, t-부틸, 테트라히드로피란-2-일을 포함한다. 적합한 알케닐기의 예는 알릴을 포함한다. 적합한 아릴기의 예는 임의로 치환된 페닐, 바이페닐, 또는 나프틸을 포함한다. 적합한 아릴알킬기의 예는 임의로 치환된 벤질 (예를 들어, p-메톡시벤질 (MPM), 3,4-디메톡시벤질, O-니트로벤질, p-니트로벤질, p-할로벤질, 2,6-디클로로벤질, p-시아노벤질), 및 2- 및 4-피콜릴을 포함한다.
적합한 히드록실 보호기는 메틸, 메톡실메틸 (MOM), 메틸티오메틸 (MTM), t-부틸티오메틸, (페닐디메틸실릴)메톡시메틸 (SMOM), 벤질옥시메틸 (BOM), p-메톡시벤질옥시메틸 (PMBM), (4-메톡시페녹시)메틸 (p-AOM), 과이아콜메틸 (GUM), t-부톡시메틸, 4-펜테닐옥시메틸 (POM), 실록시메틸, 2-메톡시에톡시메틸 (MEM), 2,2,2-트리클로로에톡시메틸, 비스(2-클로로에톡시)메틸, 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 (SEMOR), 테트라히드로피라닐 (THP), 3-브로모테트라히드로피라닐, 테트라히드로티오피라닐, 1-메톡시시클로헥실, 4-메톡시테트라히드로피라닐 (MTHP), 4-메톡시테트라히드로티오피라닐, 4-메톡시테트라히드로티오피라닐 S,S-디옥시드, 1-[(2-클로로-4-메틸)페닐]-4-메톡시피페리딘-4-일 (CTMP), 1,4-디옥산-2-일, 테트라히드로푸라닐, 테트라히드로티오푸라닐, 2,3,3a,4,5,6,7,7a-옥타히드로-7,8,8-트리메틸-4,7-메타노벤조푸란-2-일, 1-에톡시에틸, 1-(2-클로로에톡시)에틸, 1-메틸-1-메톡시에틸, 1-메틸-1-벤질옥시에틸, 1-메틸-1-벤질옥시-2-플루오로에틸, 2,2,2-트리클로로에틸, 2-트리메틸실릴에틸, 2-(페닐셀레닐)에틸, t-부틸, 알릴, p-클로로페닐, p-메톡시페닐, 2,4-디니트로페닐, 벤질, p-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, o-니트로벤질, p-니트로벤질, p-할로벤질, 2,6-디클로로벤질, p-시아노벤질, p-페닐벤질, 2-피콜릴, 4-피콜릴, 3-메틸-2-피콜릴 N-옥시도, 디페닐메틸, p,p'-디니트로벤즈히드릴, 5-디벤조수베릴, 트리페닐메틸, α-나프틸디페닐메틸, p-메톡시페닐디페닐메틸, 디(p-메톡시페닐)페닐메틸, 트리(p-메톡시페닐)메틸, 4-(4'-브로모페나실옥시페닐)디페닐메틸, 4,4',4''-트리스(4,5-디클로로프탈리미도페닐)메틸, 4,4',4''-트리스(레불리노일옥시페닐)메틸, 4,4',4''-트리스(벤조일옥시페닐)메틸, 3-(이미다졸-1-일)비스(4',4''-디메톡시페닐)메틸, 1,1-비스(4-메톡시페닐)-1'-피레닐메틸, 9-안트릴, 9-(9-페닐)잔테닐, 9-(9-페닐-10-옥소)안트릴, 1,3-벤조디티올란-2-일, 벤즈이소티아졸릴 S,S-디옥시도, 트리메틸실릴 (TMS), 트리에틸실릴 (TES), 트리이소프로필실릴 (TIPS), 디메틸이소프로필실릴 (IPDMS), 디에틸이소프로필실릴 (DEIPS), 디메틸텍실실릴, t-부틸디메틸실릴 (TBDMS), t-부틸디페닐실릴 (TBDPS), 트리벤질실릴, 트리-p-자일릴실릴, 트리페닐실릴, 디페닐메틸실릴 (DPMS), t-부틸메톡시페닐실릴 (TBMPS), 포르메이트, 벤조일포르메이트, 아세테이트, 클로로아세테이트, 디클로로아세테이트, 트리클로로아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 메톡시아세테이트, 트리페닐메톡시아세테이트, 페녹시아세테이트, p-클로로페녹시아세테이트, 3-페닐프로피오네이트, 4-옥소펜타노에이트 (레불리네이트), 4,4-(에틸렌디티오)펜타노에이트 (레불리노일디티오아세탈), 피발로에이트, 아다만토에이트, 크로토네이트, 4-메톡시트로토네이트, 벤조에이트, p-페닐벤조에이트, 2,4,6-트리메틸벤조에이트 (메시토에이트), 알킬 메틸 카보네이트, 9-플루오레닐메틸 카보네이트 (Fmoc), 알킬 에틸 카보네이트, 알킬 2,2,2-트리클로로에틸 카보네이트 (Troc), 2-(트리메틸실릴)에틸 카보네이트 (TMSEC), 2-(페닐설포닐) 에틸 카보네이트 (Psec), 2-(트리페닐포스포니오) 에틸 카보네이트 (Peoc), 알킬 이소부틸 카보네이트, 알킬 비닐 카보네이트 알킬 알릴 카보네이트, 알킬 p-니트로페닐 카보네이트, 알킬 벤질 카보네이트, 알킬 p-메톡시벤질 카보네이트, 알킬 3,4-디메톡시벤질 카보네이트, 알킬 o-니트로벤질 카보네이트, 알킬 p-니트로벤질 카보네이트, 알킬 S-벤질 티오카보네이트, 4-에톡시-1-나프틸 카보네이트, 메틸 디티오카보네이트, 2-요오도벤조에이트, 4-아지도부티레이트, 4-니트로-4-메틸펜타노에이트, o-(디브로모메틸)벤조에이트, 2-포르밀벤젠술포네이트, 2-(메틸티오메톡시)에틸, 4-(메틸티오메톡시)부티레이트, 2-(메틸티오메톡시메틸)벤조에이트, 2,6-디클로로-4-메틸페녹시아세테이트, 2,6-디클로로-4-(1,1,3,3-테트라메틸부틸)페녹시아세테이트, 2,4-비스 (1,1-디메틸프로필)페녹시아세테이트, 클로로디페닐아세테이트, 이소부티레이트, 모노숙시노에이트, (E)-2-메틸-2-부테노에이트, o-(메톡시카르보닐)벤조에이트, α-나프토에이트, 니트레이트, 알킬 N,N,N',N'-테트라메틸포스포로디아미데이트, 알킬 N-페닐카바메이트, 보레이트, 디메틸포스피노티오일, 알킬 2,4-디니트로페닐술페네이트, 설페이트, 메탄술포네이트 (메실레이트), 벤질술포네이트, 및 토실레이트 (Ts)를 포함한다. 1,2- 또는 1,3-디올을 보호하기 위해서, 보호기는 메틸렌 아세탈, 에틸리덴 아세탈, 1-t-부틸에틸리덴 케탈, 1-페닐에틸리덴 케탈, (4-메톡시페닐)에틸리덴 아세탈, 2,2,2-트리클로로에틸리덴 아세탈, 아세토니드, 시클로펜틸리덴 케탈, 시클로헥실리덴 케탈, 시클로헵틸리덴 케탈, 벤질리덴 아세탈, p-메톡시벤질리덴 아세탈, 2,4-디메톡시벤질리덴 케탈, 3,4-디메톡시벤질리덴 아세탈, 2-니트로벤질리덴 아세탈, 메톡시메틸렌 아세탈, 에톡시메틸렌 아세탈, 디메톡시메틸렌 오르토 에스테르, 1-메톡시에틸리덴 오르토 에스테르, 1-에톡시에틸리덴 오르토 에스테르, 1,2-디메톡시에틸리덴 오르토 에스테르, α-메톡시벤질리덴 오르토 에스테르, 1-(N,N-디메틸아미노)에틸리덴 유도체, α-(N,N'-디메틸아미노)벤질리덴 유도체, 2-옥사시클로펜틸리덴 오르토 에스테르, 디-t-부틸실릴렌 기 (DTBS), 1,3-(1,1,3,3-테트라이소프로필디실록사닐리덴) 유도체 (TIPDS), 테트라-t-부톡시디실록산-1,3-디일리덴 유도체 (TBDS), 시클릭 카보네이트, 시클릭 보로네이트, 에틸 보로네이트, 및 페닐 보로네이트를 포함한다.
일부 구현예에서, 히드록실 보호기는 아세틸, t-부틸, t-부톡시메틸, 메톡시메틸, 테트라히드로피라닐, 1 -에톡시에틸, 1 -(2-클로로에톡시)에틸, 2- 트리메틸실릴에틸, p-클로로페닐, 2,4-디니트로페닐, 벤질, 벤조일, p-페닐벤조일, 2,6- 디클로로벤질, 디페닐메틸, p-니트로벤질, 트리페닐메틸 (트리틸), 4,4'-디메톡시트리틸, 트리메틸실릴, 트리에틸실릴, t-부틸디메틸실릴, t-부틸디페닐실릴, 트리페닐실릴, 트리이소프로필실릴, 벤조일포르메이트, 클로로아세틸, 트리클로로아세틸, 트리플루오로아세틸, 피발로일, 9- 플루오레닐메틸 카보네이트, 메실레이트, 토실레이트, 트리플레이트, 트리틸, 모노메톡시트리틸 (MMTr), 4,4'-디메톡시트리틸 (DMTr) 및 4,4',4''-트리메톡시트리틸 (TMTr), 2-시아노에틸 (CE 또는 Cne), 2-(트리메틸실릴)에틸 (TSE), 2-(2-니트로페닐)에틸, 2-(4-시아노페닐)에틸 2-(4-니트로페닐)에틸 (NPE), 2-(4-니트로페닐설포닐)에틸, 3,5-디클로로페닐, 2,4-디메틸페닐, 2-니트로페닐, 4-니트로페닐, 2,4,6-트리메틸페닐, 2-(2-니트로페닐)에틸, 부틸티오카르보닐, 4,4',4''-트리스(벤조일옥시)트리틸, 디페닐카바모일, 레불리닐, 2-(디브로모메틸)벤조일 (페닐잔텐-9-일 (픽실) 또는 9-(p-메톡시페닐)잔틴-9-일 (MOX)이다. 일부 구현예에서, 각각의 히드록실 보호기는 아세틸, 벤질, t- 부틸디메틸실릴, t-부틸디페닐실릴 및 4,4'-디메톡시트리틸로부터 독립적으로 선택된다. 일부 구현예에서, 히드록실 보호기는 트리틸, 모노메톡시트리틸 및 4,4'-디메톡시트리틸 기로 이루어진 기로부터 선택된다. Dbmb), 2-(이소프로필티오메톡시메틸)벤조일 (Ptmt), 9- 일부 구현예에서, 인 연결 보호기는 올리고뉴클레오티드 합성 전반에 걸쳐 인 연결 (예를 들어, 뉴클레오티드 간 연결)에 부착된 기이다. 일부 구현예에서, 보호기는 포스포로티오에이트기의 황 원자에 부착되어 있다. 일부 구현예에서, 보호기는 뉴클레오티드 간 포스포로티오에이트 연결의 산소 원자에 부착된다. 일부 구현예에서, 보호기는 뉴클레오티드 간 인산 연결의 산소 원자에 부착된다. 일부 구현예에서 보호기는 2-시아노에틸 (CE 또는 Cne), 2-트리메틸실릴에틸, 2-니트로에틸, 2-설포닐에틸, 메틸, 벤질, o-니트로벤질, 2-(p-니트로페닐)에틸 (NPE 또는 Npe), 2-페닐에틸, 3-(N-tert-부틸카복사미도)-1-프로필, 4-옥소펜틸, 4-메틸티오-l-부틸, 2-시아노-1,1-디메틸에틸, 4-N-메틸아미노부틸, 3-(2-피리딜)-1-프로필, 2-[N-메틸-N-(2-피리딜)]아미노에틸, 2-(N-포르밀,N-메틸)아미노에틸, 또는 4-[N-메틸-N-(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]부틸이다.
대상체: 본원에서 사용되는 바와 같이, "대상체"라는 용어는 본 개시내용에 따라 예를 들어 실험, 진단, 예방 및/또는 치료 목적으로 화합물 또는 조성물이 투여되는 임의의 유기체를 지칭한다. 전형적인 대상체는 동물 (예를 들어, 마우스, 쥐, 토끼, 비인간 영장류, 및 인간과 같은 포유류, 곤충, 벌레 등) 및 식물을 포함한다. 일부 구현예에서, 대상체는 인간이다. 일부 구현예에서, 대상체는 질병, 질환 및/또는 병태를 앓고 있고/있거나 걸리기 쉬울 수 있다.
실질적으로: 본원에서 사용되는 바와 같이, "실질적으로"란 용어는 전체 또는 전체에 가까운 규모 또는 정도의 관심 있는 특징 또는 특성을 나타내는 정성적 조건을 지칭한다. 당업자라면 생물학적 및 화학적 현상이 완성되고/되거나 완전성을 향해 나아가거나 또는 절대 결과를 달성 또는 회피하더라도 특히 드물다는 것을 이해할 것이다. 따라서 "실질적으로"란 용어는 본원에서 많은 생물학적 및/또는 화학적 현상에 고유한 잠재적인 완전성의 부족을 포착하기 위해 사용된다.
치료제: 용어 "치료제"는 일반적으로 대상에게 투여될 때 원하는 효과 (예를 들어, 원하는 생물학적, 임상적, 또는 약리학적 효과)를 이끌어내는 임의의 제제를 지칭한다. 일부 구현예에서, 제제가 적절한 모집단 전체에 걸쳐 통계적으로 유의미한 효과를 나타내는 경우 치료제로 간주된다. 일부 구현예에서, 적절한 모집단은 질병, 질환, 또는 병태를 앓고 있고/있거나 걸리기 쉬운 대상체의 모집단이다. 일부 구현예에서, 적절한 모집단은 모델 유기체의 모집단이다. 일부 구현예에서, 적절한 모집단은 연령대, 성별, 유전적 배경, 기존의 임상적 조건, 이전 치료 노출과 같은 하나 이상의 기준에 의해 정의될 수 있다. 일부 구현예에서, 치료제는 대상에게 유효량으로 투여되었을 때, 질병, 질환, 및/또는 병태의 하나 이상의 증상 또는 특징을 완화, 개선, 경감, 억제, 예방하고/하거나, 이의 발병을 지연시키고/시키거나, 이의 중증도를 감소시키고/시키거나, 이의 발생률(incidence)을 감소시키는 물질이다. 일부 구현예에서, "치료제"는 인간에 대한 투여를 위해 판매될 수 있기 전에 정부 기관에 의해 승인되어 있거나 승인될 필요가 있는 제제이다. 일부 구현예에서, "치료제"는 인간에 대한 투여를 위해 처방전이 요구되는 제제이다. 일부 구현예에서, 치료제는 본원에 기재된 화합물이다.
치료학적 유효량: "치료학적 유효량"이라는 용어는 치료 용법의 일부로서 투여되는 경우에 목적하는 생물학적 반응을 유도하는 물질 (예를 들어, 치료제, 조성물, 및/또는 제형)의 양을 의미한다. 일부 구현예에서, 물질의 치료학적 유효량은 질병, 질환, 및/또는 병태를 앓고 있거나 이에 걸리기 쉬운 대상체에게 투여되는 경우에 질병, 질환, 및/또는 병태를 치료, 진단, 예방하고/하거나 이의 발병을 지연시키기에 충분한 양이다. 당업자에 의해 인지되는 바와 같이, 물질의 유효량은 목적하는 생물학적 종료점, 전달될 물질, 표적 세포 또는 조직 등과 같은 이러한 인자에 따라 달라질 수 있다. 예를 들어, 질병, 질환, 및/또는 병태를 치료하기 위한 제형 내의 화합물의 유효량은 질병, 질환, 및/또는 병태의 하나 이상의 증상 또는 특징을 완화, 개선, 경감, 억제, 예방하고/하거나, 이의 발병을 지연시키고/시키거나, 이의 중증도를 감소시키고/시키거나, 이의 발생률을 감소시키는 양이다. 일부 구현예에서, 치료학적 유효량은 단일 투여량으로 투여되고, 일부 구현예에서, 치료학적 유효량을 전달하기 위해 다중 단위 투여량이 요구된다.
치료하다(Treat): 용어 "치료하다(treat)," "치료(treatment)," 또는 "치료하는(treating)"은 질병, 질환, 및/또는 병태의 하나 이상의 증상 또는 특징을 부분적으로 또는 완전히 완화, 개선, 경감, 억제, 예방하고/하거나, 이의 발병을 지연시키고/시키거나, 이의 중증도를 감소시키고/시키거나, 이의 발생률을 감소시키기 위해 사용되는 임의의 방법을 지칭한다. 치료는 질병, 질환, 및/또는 병태의 징후를 나타내지 않는 대상체에게 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 치료는 예를 들어, 질병, 질환, 및/또는 병태와 관련된 병리가 발생할 위험을 감소시킬 목적으로, 질병, 질환, 및/또는 병태의 초기 징후만을 나타내는 대상체에게 투여될 수 있다.
불포화: 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "불포화"는 하나 이상의 불포화 단위를 갖는 모이어티를 의미한다.
달리 명시되지 않는 한, 본원에서 묘사되는 구조는 또한 상기 구조의 모든 이성질체 (예를 들어, 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 및 기하학적 (또는 형태적)) 형태, 예를 들어, 각 비대칭 중심에 대한 R 및 S 배열, Z 및 E 이중결합 이성질체, 및 Z 및 E 형태적 이성질체를 포함하는 것을 의미한다. 따라서 단일 입체화학적 이성질체뿐만 아니라 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 및 기하학적 (또는 구조적) 혼합물도 본 개시내용의 범위 내에 속한다. 달리 언급하지 않는 한 화합물의 모든 호변이성질체 형태는 본 개시내용의 범위 내에 속한다. 추가적으로, 달리 언급하지 않는 한, 본원에서 묘사되는 구조는 또한 하나 이상의 동위원소가 풍부한 원자가 존재할 때만 다른 화합물을 포함하는 것을 의미한다. 예를 들어, 중수소 또는 삼중수소에 의한 수소 대체 또는 13C- 또는 14C-풍부 탄소에 의한 탄소의 대체를 포함하는 본 구조를 갖는 화합물은 본 개시내용의 범위 내에 속한다. 이러한 화합물은 예를 들어, 본 개시내용에 따른 분석 도구, 생물학적 검정의 프로브 또는 치료제로서 유용하다.
2. 예시적 구현예의 설명:
본원에서 설명되는 바와 같이, 일부 구현예에서, 본 개시내용은 고효율, 고선택성, 및/또는 감소된 측부 변환 (예를 들어 화학 반응의 수 및/또는 화학 반응의 조건/유형에 의한 것)으로 표적에 관심 모이어티를 접합할 수 있는 기술을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 접합을 위한 유용한 시약 및 방법을 제공하고, 향상된 균질성 (예를 들어, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 또는 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20배 이상, 표적 제제의 하나 이상의 원하는 부위에서의 변형/접합의 증가, 및/또는 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 또는 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20배 이상, 표적 제제의 하나 이상의 원치 않는 부위에서의 변형/접합 감소), 순도 및/또는 감소된 원치 않는 변형 (예를 들어, 부작용의 결과로서 특정 단백질 잔기로의 변형)을 갖는 생성 조성물을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 본원에 기재된 바와 같은 화학식 R-I의 화합물 또는 그의 염을 제공한다. 일부 구현예에서, 화학식 R-I의 화합물 또는 그의 염은 반응의 한 단계에서 관심 모이어티를 표적으로 도입시키는데 유용한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 화학식 P-I 또는 P-II의 제제, 또는 이들의 염을 제공한다. 일부 구현예에서, 생성 조성물은 화학식 P-I 또는 P-II의 구조를 갖는 복수의 제제 또는 이들의 염을 포함하여, 여기서 생성 조성물은 기준 생성 조성물에 비해 상기 제제의 균질성이 더 높은 수준을 갖는다 (예를 들어, 화학식 R-I의 화합물 또는 이의 염이 각 표적 결합 모이어티가 -H로 대체되는 것을 제외하고는 화학식 R-I의 화합물 또는 이의 염과 동일한 구조를 갖는 화합물로 대체되는 방법으로부터의 생성 조성물).
일부 구현예에서, 본 개시내용은
1) 항체와 같은 표적 제제와 반응 파트너를 접촉시키는 단계로서, 상기 반응 파트너는
표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 제1기,
반응기,
MMAE이거나 이를 포함하는 관심 모이어티, 및
임의로 하나 이상의 링커 모이어티
를 포함하는 것인 단계,
2) 제제를 형성하는 단계로서, 상기 제제는
표적 제제 모이어티,
MMAE이거나 이를 포함하는 관심 모이어티, 및
임의로 하나 이상의 링커 모이어티
를 포함하는 것인, 단계
를 포함하는 방법을 제공한다.
모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE) (CAS Reg. No. 474645-27-7)은 하기의 화학식을 갖는 화합물이다
본 개시내용의 방법에서, 표적 결합 모이어티는 표적 제제에 특이적으로 결합하고 반응기는 표적 제제의 특정 부위, 예컨대 표적 제제 항체의 특정 리신 잔기와 반응하여, 상기 방법에 의해 형성된 제제가 임의로 링커를 통해 MMAE가 부착된 표적 제제를 포함하도록 한다.
일부 구현예에서, 반응기는 제1 기와 관심 모이어티 사이에 위치하고, 독립적으로 및 임의로 링커 모이어티를 통해 제1 기와 관심 모이어티에 연결된다. 일부 구현예에서, 반응 파트너는 화학식 R-I의 화합물 또는 이의 염이다. 일부 구현예에서, 제1 기는 본원에 기재된 바와 같은 LG기이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 기는 본원에 기재된 바와 같은 LG기이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서 본 개시내용은 화학식 R-I의 구조 또는 이의 염을 갖는 화합물을 제공하고
여기서,
LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기이고,
RG는 반응기이고,
LRM은 링커이며,
MOI는 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)를 포함하는 관심 모이어티이다.
일부 구현예에서 본 개시내용은 화학식 R-I의 구조 또는 이의 염을 갖는 화합물을 제공하고
여기서,
LG는 RLG-LLG이고,
RLG는 , Rc-(Xaa)z-, 핵산 모이어티, 또는 소분자 모이어티이고,
각 Xaa는 독립적으로 아미노산 또는 아미노산 유사체의 잔기이고,
t는 0 내지 50이고,
z는 1 내지 50이고,
각 Rc는 독립적으로 -La-R'이고,
각 La는 독립적으로 공유 결합이거나, 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족 또는 C1-C20 지방족으로부터 선택되는 임의로 치환된 2가 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, 또는 -C(O)O-로 대체되고;
각 -Cy-는 독립적으로 임의로 치환된 2가 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭 기이고, 여기서 각 모노시클릭 고리는 C3-20 시클로지방족 고리, C6-20 아릴 고리, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원 헤테로아릴 고리, 및 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 20원 헤테로시클릴 고리로부터 독립적으로 선택되고,
LLG는 -LLG1-, -LLG1-LLG2-, -LLG1-LLG2-LLG3-, 또는 -LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-이고,
RG는 -LRG1-LRG2-, -LLG4-LRG1-LRG2-, -LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-, -LLG2-LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-이고,
각각의 LLG1, LLG2, LLG3, LLG4, LRG1, LRG2, 및 LRM은 독립적으로 L이고,
각 L은 독립적으로 공유 결합이거나, 하나 이상의 지방족 모이어티, 아릴 모이어티, 각각 독립적으로 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로지방족 모이어티, 각각 독립적으로 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로방향족 모이어티, 또는 하나 이상의 이러한 모이어티의 임의의 조합을 포함하는 2가 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-100 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 C1-6 알킬렌, C1-6 알케닐렌, 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 2가 C1-6 헤테로지방족기, , -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기, 또는 n이 1 내지 20인 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 대체되고,
각 R'는 독립적으로 -R, -C(O)R, -CO2R, 또는 -SO2R이고,
각 R은 독립적으로 -H이거나, C1-30 지방족, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-30 헤테로지방족, C6-30 아릴, C6-30 아릴지방족, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C6-30 아릴헤테로지방족, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴, 및 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 헤테로시클릴로부터 선택되는 임의로 치환된 기이거나, 또는
2개의 R 기는 임의로 및 독립적으로 함께 공유 결합을 형성하거나, 또는
동일한 원자 상의 2개 이상의 R 기는 임의로 및 독립적으로 함께 상기 원자를 제외하고 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된, 3 내지 30원, 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하거나, 또는
2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R 기는 임의로 및 독립적으로 함께 개재 원자를 제외하고 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된, 3 내지 30원, 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하고
MOI는 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)를 포함하는 관심 모이어티이다.
일부 구현예에서, 본 개시내용은
1) 표적 제제를 화학식 R-I의 구조 또는 이의 염을 갖는 반응 파트너와 접촉시키는 단계, 및
2) 화학식 P-I의 구조 또는 이의 염을 갖는 제제를 형성하는 단계
를 포함하는 방법을 제공하고,
화학식 R-I에서
LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 도메인을 포함하는 기이고,
RG는 반응기이고,
LRM은 링커이고,
MOI는 MMAE이거나 이를 포함하는 관심 모이어티이며,
화학식 P-I에서
P는 표적 제제 모이어티이고,
LPM은 링커이고,
MOI는 MMAE이거나 이를 포함하는 관심 모이어티이다.
일부 구현예에서, 표적 제제는 항체이다. 일부 구현예에서, 표적 제제는 IgG 항체이다. 예를 들어, 항체는 브렌툭시맙과 같은 항-CD30 단클론 항체, 또는 엔포투맙과 같은 항 넥틴-4 항체일 수 있다. 일부 구현예에서, 표적은 단백질이고, 관심 모이어티는 하나 이상의 리신 잔기에서 접합된다. 일부 구현예에서, 화학식 P-I 또는 이의 염의 제제는 화학식 P-II 또는 이의 염의 제제이다.
일부 구현예에서, 본 개시내용은 화학식 P-II의 구조를 갖는 제제를 제조하는 방법을 제공하고
화학식 P-II에서,
P-N은 리신 잔기를 포함하는 단백질 제제 모이어티이고,
LPM은 링커이고,
MOI는 관심 모이어티이며,
상기 방법은 화학식 R-I의 구조 또는 이의 염을 갖는 반응 파트너와 P-N을 접촉시키는 단계를 포함하고
화학식 R-I에서,
LG는 P-N에 결합하는 단백질-결합 도메인을 포함하는 기이고,
RG는 반응기이고,
LRM은 링커이고,
MOI는 MMAE이거나 이를 포함하는 관심 모이어티이다.
일부 구현예에서, 본원에서 예시된 바와 같이, 접촉은 리신 잔기 N이 반응하여 RG의 원자와 결합을 형성하고 LG를 방출하기에 충분한 조건 하 및 시간 동안 수행된다.
표적
본 개시내용을 읽은 후 당업자는 본원에서 제공된 기술이 다양한 표적 제제를 많은 유형의 관심 모이어티에 접합시키는 데 유용하다는 것을 이해할 것이다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 단백질 제제를 다양한 관심 모이어티에 접합시키는 데 특히 유용하다. 일부 구현예에서, 표적 제제는 핵산이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 표적 제제는 단백질 제제이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 제제는 단백질 제제이다. 일부 구현예에서, 표적 제제는 세포, 조직, 기관 또는 유기체 내 천연 단백질이다. 일부 구현예에서, 표적 제제는 내인성 단백질이다. 일부 구현예에서, 표적 제제는 외인성 단백질이다. 일부 구현예에서, 표적 제제는 제조된 단백질, 예를 들어 다양한 생명공학을 사용하여 생성된 단백질이다. 일부 구현예에서, 표적 제제는 항체 제제이다. 일부 구현예에서, 표적 제제는 치료제로서 유용한 항체이다. 이러한 다양한 항체는 당업계에 공지되어 있으며 표적 제제로서 활용될 수 있다. 일부 구현예에서, 항체는 단클론 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 다클론 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 IgG 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 IVIG이다 (일부 구현예에서, 건강한 기증자로부터 모은 것). 일부 구현예에서, 단백질은 Fc 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 항체는 Fc 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, Fc 영역은 단일 중쇄 또는 이의 단편을 포함한다. 일부 구현예에서, Fc 영역은 2개의 중쇄 또는 이들의 단편을 포함한다. 일부 구현예에서, 항체는 인간 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 키메라 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 인간화된 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 마우스 항체이다.
일부 구현예에서, 다클론 항체 제제 또는 IVIG 제제를 특성화할 때, 접합 전, 도중 또는 후에 소화, 예를 들어, IdeZ, IdeS 등을 사용한 효소 소화가 수행되어, 항체의 특정 영역 (예를 들어, Fab)을 제거하여 특성화를 위해 향상된 균질성을 갖는 조성물을 제공하도록 한다 (예를 들어, MS에 의함).
일부 구현예에서, 항체는 치료적 항체, 예를 들어, 치료 용도를 위해 FDA 승인된 항체이다. 일부 구현예에서, 치료적 항체는 암을 치료하는데 유용하다. 일부 구현예에서, 항체는 아달리무맙, 알렘투주맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙, 바실릭시맙, 브렌툭시맙, 엔포르투맙, 이필리무맙, 세툭시맙, 다라투무맙, 디누툭시맙, 엘로투주맙, 이브리투모맙 티욱세탄, 임가투주맙, 인플릭시맙, 네시투무맙, 오비누투주맙, 오파투무맙, 페르투주맙, 레슬리주맙, 리툭시맙, 트라스투주맙, 모가물리주맙, AMP-224, FS-102, GSK-2857916, ARGX-111, ARGX-110, AFM-13, APN-301, BI-836826, BI-836858, 에노블리투주맙, 오틀레르투주맙, 벨투주맙, KHK-4083, BIW-8962, ALT-803, 카로툭시맙, 에프라투주맙, 이네빌리주맙, 이사툭시맙, 마게툭시맙, MOR-208, 오카라투주맙, 탈라코투주맙, 트레멜리무맙, 벤랄리주맙, 루미릭시맙, MOR-208, 이피바투주맙, GSK2831781, SEA-CD40, KHK-2823, 또는 BI836858이다. 일부 구현예에서, 항체는 실툭시맙, 다클리주맙, 팔리비주맙, 오말리주맙, 에팔리주맙, 베바시주맙, 나탈리주맙, 토실리주맙, 에쿨리주맙, 베돌리주맙, 펨브롤리주맙, 메폴리주맙, 익세키주맙, 파니투무맙, 골리무맙, 우스테키누맙, 카나키누맙, 데노수맙, 벨리무맙, 락시바쿠맙, 라무시루맙, 니볼루맙, 세쿠키누맙, 에볼로쿠맙, 알리로쿠맙, 브로달루맙 또는 올라라투맙이다. 일부 구현예에서, 항체는 브렌툭시맙 또는 엔포르투맙이다. 일부 구현예에서, 항체는 세툭시맙이다. 일부 구현예에서, 항체 제제 모이어티를 포함하는 제공된 제제 또는 화합물은 항체 제제에 의해 치료될 수 있는 병태, 질병, 또는 질환을 치료하는데 유용하다.
항체는 본 개시내용에 따라 수많은 기술로 제조될 수 있다. 일부 구현예에서, 항체는 천연 면역글로불린에 비해 조작된 구조를 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 항체는 정제, 식별, 평가 등을 위한 특정 태그를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 항체는 단편 (예를 들어, CDR 및/또는 Fc 등)을 함유할 수 있으며 전체 면역글로불린은 함유하지 않을 수 있다. 당업자는, 항체의 부위가 본 개시내용에 나열될 때 (예를 들어, K246, K248, K288, K290, K317, 등; 달리 명시하지 않는 한, EU 넘버링에 따른 인간 항체), 아미노산 잔기는 정확히 넘버링된 부위에 없을 수도 있지만 예를 들어, EU 넘버링 및/또는 서열 상동성 (예를 들어, 동일하거나 다른 종의 상동체)에 따라 넘버링된 부위에 해당하는 부위에 있을 수 있음을 이해할 것이다.
당업자가 이해하는 바와 같이, 제공된 기술은 다른 무엇보다도 천연 표적, 예를 들어, 천연(native) 항체와의 지향된(directed) 접합을 제공할 수 있다. 일부 구현예에서, 표적 제제는 천연 항체 제제이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 제제는 가공된 항체 제제이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 제제, 예를 들어, 항체는 가공된 비천연 아미노산 잔기를 포함하지 않는다.
파트너 화합물
일부 구현예에서, 본 개시내용은 각각 독립적으로 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 제1 기, 반응기, 관심 모이어티, 및 임의로 이러한 기/모이어티를 연결하는 하나 이상의 링커 모이어티를 포함하는 화합물을 제공한다. 일부 구현예에서, 이러한 화합물은 관심 모이어티를 표적에 접합하기 위한 반응 파트너로서 유용하다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 관심 모이어티를 표적, 예를 들어, 다양한 단백질에 접합하기 위한 화합물을 제공한다. 일부 구현예에서, 제공된 화합물 각각은 관심 모이어티, 반응기, 표적 결합 모이어티, 임의로 이러한 모이어티를 연결하는 하나 이상의 링커 모이어티 (링커)를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 이러한 화합물이 표적과 접촉하고 화합물의 반응기가 표적의 반응기 (예를 들어, 표적 단백질의 Lys 잔기의 -NH2)와 반응할 때 방출되는 이탈기의 일부이다. 본원에서 입증되는 바와 같이, 제공된 화합물은 다른 무엇보다도 접합 생성물에 대한 개선된 접합 효율, 높은 선택성, 및 더 적은 단계 (일부의 경우, 단일 단계)를 제공할 수 있다. 일부 구현예에서, 제공된 화합물은 화학식 R-I의 구조 또는 이의 염을 갖고
여기서,
LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기이고,
RG는 반응기이고,
LRM은 링커이고,
MOI는 MMAE이거나 이를 포함하는 관심 모이어티이다.
일부 구현예에서, 제1 기는 LG이다.
일부 구현예에서, 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티, 및 임의로 링커 모이어티이거나 이를 포함한다.
본 개시내용에서 사용되는 바와 같이, 모이어티는 일반적으로 분자의 일부를 지칭하고, 예를 들어, 에스테르 RCOOR'에서 알코올 모이어티는 RO-이다. 일부 구현예에서, 화합물의 모이어티 (예를 들어, 표적 제제, 단백질 제제, 항체 제제 등)는 화합물의 하나 이상 또는 모든 바람직한 구조적 특징, 속성, 기능, 및/또는 활성을 유지한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 이의 상응하는 표적 결합 화합물과 같이 임의로 비슷한 방식으로 표적에 결합할 수 있다; 일부 구현예에서, 표적 제제 모이어티는 이의 상응하는 표적 제제 화합물과 비슷한 하나 이상의 원하는 구조적 특징, 속성, 기능, 및/또는 속성을 유지한다; 일부 구현예에서, 항체 제제 모이어티는 이의 상응하는 항체 제제 화합물과 비슷한 하나 이상의 원하는 구조적 특징, 속성, 기능, 및/또는 속성 (예를 들어, 3차원 구조, 항원 특이성, 항원 결합능(binding capacity), 및/또는 면역학적 기능 등)을 유지한다. 일부 구현예에서, 화합물의 모이어티, 예를 들어, 표적 제제 모이어티, 단백질 제제 모이어티, 항체 제제 모이어티 등은 화합물, 예를 들어, 표적 제제 화합물 (표적 제제 모이어티의 경우), 단백질 제제 화합물 (단백질 제제 모이어티의 경우), 항체 제제 화합물 (항체 제제 모이어티의 경우) 등의 1가 (1가 모이어티의 경우), 2가 (2가 모이어티의 경우), 또는 다가 (다가 모이어티의 경우) 라디칼이다. 일부 구현예에서, 1가 라디칼은 화합물로부터 1가 부분 (예를 들어, 수소, 할로겐, 다른 1가 기, 예컨대 알킬, 아릴 등)을 제거함으로써 형성된다. 일부 구현예에서, 2가 또는 다가 라디칼은 화합물로부터 하나 이상의 1가 (예를 들어, 수소, 할로겐, 1가 기, 예컨대 알킬, 아릴 등), 2가 및/또는 다가 부분을 제거함으로써 형성된다. 일부 구현예에서, 라디칼은 수소 원자를 제거함으로써 형성된다. 일부 구현예에서, 모이어티는 1가이다. 일부 구현예에서, 모이어티는 2가이다. 일부 구현예에서, 모이어티는 다가이다.
일부 구현예에서, LG는 RLG-LLG-이거나 이를 포함하고, 여기서 RLG는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하고, LLG는 본원에 기재된 바와 같은 LLG1이다. 일부 구현예에서, LLG는 -LLG1-LLG2-이고, 여기서 각각의 LLG1 및 LLG2는 독립적으로 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, LLG는 -LLG1-LLG2-LLG3-이고, 여기서 각각의 LLG1, LLG2 및 LLG3은 독립적으로 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, LLG는 -LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-이고, 여기서 각각의 LLG1, LLG2, LLG3 및 LLG4는 독립적으로 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, LLG1은 RLG에 결합된다. 일부 구현예에서, LLG1은 관심 모이어티에 결합된다. 일부 구현예에서, LLG는 -LLG1-이고, 반응기는 LLG2, LLG3 및 LLG4를 포함한다. 일부 구현예에서, LLG는 -LLG1-LLG2-이고, 반응기는 LLG3 및 LLG4를 포함한다. 일부 구현예에서, LLG는 -LLG1-LLG2-LLG3-이고, 반응기는 LLG4를 포함한다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 제1 기, 및/또는 LG는 반응 후, 예를 들어, 파트너 화합물이 표적 제제와 반응한 후에 방출된다. 일부 구현예에서, 제1 기는 반응 후에 방출된다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 반응 후에 방출된다. 일부 구현예에서, LG는 반응 후에 방출된다. 일부 구현예에서, 제1 기는 LG-H의 구조 또는 이의 염을 갖는 화합물의 일부로서 방출된다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 LG-H의 구조 또는 이의 염을 갖는 화합물의 일부로서 방출된다. 일부 구현예에서, LG는 LG-H의 구조 또는 이의 염을 갖는 화합물의 일부로서 방출된다. 일부 구현예에서, 제1 기는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조 또는 이의 염을 갖는 화합물의 일부로서 방출된다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조 또는 이의 염을 갖는 화합물의 일부로서 방출된다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조 또는 이의 염을 갖는 화합물의 일부로서 방출되고, 여기서 RLG는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, LG는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조 또는 이의 염을 갖는 화합물의 일부로서 방출되고, 여기서 LG는 RLG-LLG이고, LLG는 -LLG1-, -LLG1-LLG2-, -LLG1-LLG2-LLG3-, 또는 -LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-이다. 일부 구현예에서, LG는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조 또는 이의 염을 갖는 화합물의 일부로서 방출되고, 여기서 LG는 RLG-LLG1-이다. 일부 구현예에서, LG는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조 또는 이의 염을 갖는 화합물의 일부로서 방출되고, 여기서 LG는 RLG-LLG1-LLG2이다. 일부 구현예에서, LG는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조 또는 이의 염을 갖는 화합물의 일부로서 방출되고, 여기서 LG는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3이다. 일부 구현예에서, LG는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H의 구조 또는 이의 염을 갖는 화합물의 일부로서 방출되고, 여기서 LG는 RLG-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4이다.
일부 구현예에서, L은 공유 결합이거나, 하나 이상의 지방족 모이어티, 아릴 모이어티, 각각 독립적으로 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로지방족 모이어티, 각각 독립적으로 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로방향족 모이어티, 또는 하나 이상의 이러한 모이어티의 임의의 조합을 포함하는 2가 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-100 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 C1-6 알킬렌, C1-6 알케닐렌, 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 2가 C1-6 헤테로지방족, , -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기, 또는 n이 1 내지 20인 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-으로 대체된다. 일부 구현예에서, L은 공유 결합이거나, 2가 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-100 지방족 또는 1내지 20개의 헤테로 원자를 갖는 헤테로지방족기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 , -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 또는 n이 1 내지 20인 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-으로 대체된다. 일부 구현예에서, L은 공유 결합이거나, 2가 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 C1, C2, C3, C4, C5, C10, C15, C20, C25, C30, C40, C50, C60, C1-2, C1-5, C1-10, C1-15, C1-20, C1-30, C1-40, C1-50, C1-60, C1-70, C1-80, 또는 C1-90 지방족 또는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 헤테로지방족기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 , -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기, 또는 n이 1 내지 20인 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-으로 대체된다. 일부 구현예에서, L은 공유 결합이거나, 2가 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 C1, C2, C3, C4, C5, C10, C15, C20, C25, C30, C40, C50, C60, C1-2, C1-5, C1-10, C1-15, C1-20, C1-30, C1-40, C1-50, C1-60, C1-70, C1-80, 또는 C1-90 지방족 또는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 헤테로지방족기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 -C≡C-, -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, 아미노산 잔기, 또는 n이 1 내지 10인 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-으로 대체된다. 일부 구현예에서, L은 공유 결합이거나, 2가 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 C1, C2, C3, C4, C5, C10, C15, C20, C25, C30, C40, C50, C60, C1-2, C1-5, C1-10, C1-15, C1-20, C1-30, C1-40, C1-50, C1-60, C1-70, C1-80, 또는 C1-90 지방족기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 -O-, -N(R')-, -C(O)-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, 아미노산 잔기, 또는 n이 1 내지 10인 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-으로 대체된다. 일부 구현예에서, L은 공유 결합이거나, 2가 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 C1, C2, C3, C4, C5, C10, C15, C20, C25, C30, C40, C50, C60, C1-2, C1-5, C1-10, C1-15, C1-20, C1-30, C1-40, C1-50, C1-60, C1-70, C1-80, 또는 C1-90 지방족기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 -O-, -N(R')-, -C(O)-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, 또는 n이 1 내지 10인 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-으로 대체된다. 일부 구현예에서, L은 공유 결합이거나, 2가 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-10 지방족기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 -O-, -N(R')-, -C(O)-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -Cy-, 또는 n이 1 내지 10인 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-으로 대체된다. 일부 구현예에서, L은 공유 결합이거나, 2가 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-10 지방족기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 -O-, -N(R')-, -C(O)-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, 또는 n이 1 내지 10인 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-으로 대체된다. 일부 구현예에서, L은 -C(O)O-를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, L은 -C(O)-N(R')-을 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, L은 -S-를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, L은 -S-Cy-를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, L은 -S-S-를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, L은 하나 이상 또는 임의의 -C(O)O-, -C(O)-N(R')-, -S-, 및 -S-S-를 함유하지 않는다. 일부 구현예에서, L은 하나 이상 또는 임의의 -C(O)O-, -C(O)-N(R')-, -S-Cy-, 및 -S-S-를 함유하지 않는다. 일부 구현예에서, L은 하나 이상 또는 임의의 -C(O)O-, -S-, 및 -S-S-를 함유하지 않는다. 일부 구현예에서, L은 하나 이상 또는 임의의 -C(O)O-, -S-Cy-, 및 -S-S-를 함유하지 않는다. 일부 구현예에서, L은 -C(O)O-, -S-, 및 -S-S- 중 무엇도 함유하지 않는다. 일부 구현예에서, L은 -C(O)O-, -S-Cy-, 및 -S-S- 중 무엇도 함유하지 않는다. 일부 구현예에서, L은 -C(O)O- 및 -S-S- 중 무엇도 함유하지 않는다.
일부 구현예에서, 각 아미노산 잔기는 독립적으로 화학식 A-I의 구조 또는 이의 염을 갖는 아미노산의 잔기이다. 일부 구현예에서, 각 아미노산 잔기는 독립적으로 -N(Ra1)-La1-C(Ra2)(Ra3)-La2-CO-의 구조 또는 이의 염을 갖는다. 일부 구현예에서, 각 아미노산 잔기는 독립적으로 -N(Ra1)-C(Ra2)(Ra3)-CO-의 구조 또는 이의 염을 갖는다.
일부 구현예에서, L은 공유 결합이다. 일부 구현예에서, L은 공유 결합이 아니다.
일부 구현예에서, LLG1은 공유 결합이다. 일부 구현예에서, LLG1은 공유 결합이 아니다. 일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2CH2O)n-이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2)n-O-(CH2CH2O)n-(CH2)n-이거나 이를 포함하고, 여기서 각 n은 독립적으로 본원에 기재된 바와 같고, 각 -CH2-는 독립적으로 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2)n-O-(CH2CH2O)n-(CH2)n-이고, 여기서 각 n은 독립적으로 본원에 기재된 바와 같고, 각 -CH2-는 독립적으로 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2)2-O-(CH2CH2O)n-(CH2)2-이고, 여기서 n은 본원에 기재된 바와 같고, 각 -CH2-는 독립적으로 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2)2-O-(CH2CH2O)n-(CH2)2-이고, 여기서 n은 본원에 기재된 바와 같다.
일부 구현예에서, LLG1은 -CH2-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2)2-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2)2-C(O)-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2)2-C(O)-NH-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2)3-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2)3NH-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2)3NH-C(O)-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -C(O)-(CH2)3NH-C(O)-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -C(O)-(CH2)3-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-C(O)-(CH2)3-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NHC(O)-(CH2)3NH-C(O)-이다. 일부 구현예에서, -CH2-는 표적 결합 모이어티에 결합된다.
일부 구현예에서, LLG1은 -CH2CH2-O-CH2CH2-O-CH2CH2-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -CH2CH2-O-CH2CH2-O-CH2CH2-C(O)-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -CH2CH2-O-CH2CH2-O-CH2CH2-C(O)NH-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -CH2CH2-O-CH2CH2-O-CH2CH2-C(O)NH-CH2-이다. 일부 구현예에서, -CH2CH2-는 표적 결합 모이어티에 결합된다.
일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2CH2O)n-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2CH2O)n-CH2-CH2-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2CH2O)n-CH2-CH2-C(O)-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2CH2O)2-CH2-CH2-C(O)-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2CH2O)4-CH2-CH2-C(O)-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -(CH2CH2O)8-CH2-CH2-C(O)-이다. 일부 구현예에서, -C(O)-는 표적 결합 모이어티에 결합된다.
일부 구현예에서, LLG1은 -N(R')-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]n-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]n-CH2CH2-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]n-CH2CH2-NH-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]n-CH2CH2-NH-C(O)-이다. 일부 구현예에서, n은 1이다. 일부 구현예에서, n은 2이다. 일부 구현예에서, n은 3이다. 일부 구현예에서, n은 4이다. 일부 구현예에서, n은 5이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-CH2CH2-O-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-CH2CH2-O- CH2CH2-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-CH2CH2-O- CH2CH2-NH-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-CH2CH2-O- CH2CH2-NH-C(O)-이다.
일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]2-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]2-CH2CH2-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]2-CH2CH2-NH-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]2-CH2CH2-NH-C(O)-이다.
일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]3-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]3-CH2CH2-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]3-CH2CH2-NH-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]3-CH2CH2-NH-C(O)-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]4-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]4-CH2CH2-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]4-CH2CH2-NH-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]4-CH2CH2-NH-C(O)-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]5-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]5-CH2CH2-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]5-CH2CH2-NH-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -NH-[(-CH2CH2-O-)]5-CH2CH2-NH-C(O)-이다. 일부 구현예에서, -NH-는 표적 결합 모이어티에 결합된다.
일부 구현예에서, LLG1은 -CH2-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -CH2CH2-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -CH2CH2NH-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -CH2CH2NH-(CO)-이다. 일부 구현예에서, -CH2-는 표적 결합 모이어티에 결합된다.
일부 구현예에서, LLG1은 -CH2-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -CH2C(O)-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -CH2C(O)NH-이다. 일부 구현예에서, LLG1은 -CH2(CO)NHCH2-이다. 일부 구현예에서, -CH2-C(O)-는 -CH2-에서 표적 결합 모이어티에 결합된다.
일부 구현예에서, LLG2는 공유 결합이다. 일부 구현예에서, LLG2는 공유 결합이 아니다. 일부 구현예에서, LLG2는 -N(R')C(O)-이다. 일부 구현예에서, LLG2는 -NHC(O)-이다. 일부 구현예에서, LLG2는 -(CH2)n-N(R')C(O)-이고, 여기서 -(CH2)n-는 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, LLG2는 -(CH2)n-OC(O)-, 여기서 -(CH2)n-는 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, LLG2는 -(CH2)n-OC(O)N(R')-, 여기서 -(CH2)n-는 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, LLG2는 -(CH2)n-OC(O)NH-, 여기서 -(CH2)n-는 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, n은 1 내지 10이고, 예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 일부 구현예에서, n은 1이다. 일부 구현예에서, n은 2이다. 일부 구현예에서, n은 3이다. 일부 구현예에서, -(CH2)n-는 치환된다. 일부 구현예에서, -(CH2)n-는 치환된다. 일부 구현예에서, LLG2는 -CH2N(CH2CH2CH2S(O)2OH)-C(O)-이다. 일부 구현예에서, LLG2는 -C(O)-NHCH2-이다. 일부 구현예에서, LLG2는 -C(O)-NHCH2CH2-이다. 일부 구현예에서, LLG2는 -C(O)O-CH2-이다. 일부 구현예에서, LLG2는 -NH-C(O)O-CH2-이다. 일부 구현예에서, -C(O)-는 LLG3에 결합된다. 일부 구현예에서, -N(R')-, -NH-, 또는 (임의로 치환된 -(CH2)n-의) 임의로 치환된 -CH2- 단위는 LLG3에 결합된다.
일부 구현예에서, LLG2는 -N(R')-이다. 일부 구현예에서, LLG2는 -N(R)-이다. 일부 구현예에서, LLG2는 -NH-이다.
일부 구현예에서, LLG2는 임의로 치환된 2가 C1-6 지방족이다. 일부 구현예에서, LLG2는 -CH2-이다. 일부 구현예에서, LLG2는 -CH2NH-이다. 일부 구현예에서, LLG2는 -CH2NH-C(O)-이다. 일부 구현예에서, LLG2는 -CH2NH-C(O)-CH2-이다.
일부 구현예에서, LLG3는 임의로 치환된 아릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, LLG3는임의로 치환된 페닐 고리이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, LLG3는 하나 이상의 전자 흡인기로 치환된 페닐 고리이다. 당업자에 의해 이해되는 바와 같이, 다양한 전자 흡인기는 당업계에 공지되고 본 개시내용에 따라 활용될 수 있다. 일부 구현예에서, 전자 흡인기는 할로겐이다. 일부 구현예에서, 전자 흡인기는 -F이다. 일부 구현예에서, 이는 -Cl이다. 일부 구현예에서, 이는 -Br이다. 일부 구현예에서, 이는 -I이다. 일부 구현예에서, 전자 흡인기는 X=Y 이중 결합을 포함하고, 여기서 X는 전자 흡인기가 치환기인 기에 결합되고, X 및 Y 중 적어도 하나는 헤테로원자이다. 일부 구현예에서, X는 헤테로원자이다. 일부 구현예에서, Y는 헤테로원자이다. 일부 구현예에서, 각각의 X 및 Y는 독립적으로 헤테로원자이다. 일부 구현예에서, Y는 O이다. 일부 구현예에서, Y는 S이다. 일부 구현예에서, X는 C이다. 일부 구현예에서, X는 N이다. 일부 구현예에서, X는 P이다. 일부 구현예에서, X는 S이다. 일부 구현예에서, X=Y는 C=O이다. 일부 구현예에서, X=Y는 N=O이다. 일부 구현예에서, X=Y는 S=O이다. 일부 구현예에서, X=Y는 P=O이다. 일부 구현예에서, 전자 흡인기는 -C(O)-L-R'이다. 일부 구현예에서, 전자 흡인기는 -C(O)-R'이다. 일부 구현예에서, 이는 -NO2이다. 일부 구현예에서, 이는 -S(O)-L-R'이다. 일부 구현예에서, 이는 -S(O)-R'이다. 일부 구현예에서, 이는 -S(O)2-L-R'이다. 일부 구현예에서, 이는 -S(O)2-O-R'이다. 일부 구현예에서, 이는 -S(O)2-N(R')2이다. 일부 구현예에서, 이는 -P(O)(-L-R')2이다. 일부 구현예에서, 이는 -P(O)(R')2이다. 일부 구현예에서, 이는 -P(O)(OR')2이다. 일부 구현예에서, 이는 -P(O)[N(R')2]2이다.
일부 구현예에서, LLG3는 -LLG3a-LLG3b-이고, 여기서 LLG3a는 공유 결합 또는 -C(O)O-CH2-이고, 여기서 -CH2-는 임의로 치환되고, LLG3b는 임의로 치환된 아릴 고리이다. 일부 구현예에서, LLG3a는 LLG2에 결합되고, LLG3b는 LLG4에 결합된다.
일부 구현예에서, LLG3a는 공유 결합이다. 일부 구현예에서, LLG3a는 -C(O)O-CH2-이고, 여기서 -CH2-는 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, LLG3a는 -C(O)O-CH2-이고, 여기서 -CH2-는 치환된다. 일부 구현예에서, LLG3a는 -C(O)O-CH2-이고, 여기서 -CH2-는 비치환된다.
일부 구현예에서, 제1 기, 표적 결합 모이어티, 및/또는 LG는 RLG-LLG1-LLG2-H의 구조 또는 이의 염을 갖는 화합물의 일부로서 방출된다.
일부 구현예에서, LLG3b는 임의로 치환된 페닐 고리이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 치환기는 본원에 기재된 바와 같은 전자 흡인기이다.
일부 구현예에서, LLG3는 이고, 여기서 s는 0 내지 4이고, 각각의 Rs는 독립적으로 할로겐, -NO2, -L-R', -C(O)-L-R', -S(O)-L-R', -S(O)2-L-R', 또는 -P(O)(-L-R')2이다. 일부 구현예에서, C1은 LLG4에 결합된다. 일부 구현예에서, LLG3는 이다. 일부 구현예에서, LLG3는 이다. 일부 구현예에서, LLG3는 이다. 일부 구현예에서, LLG3는 이다. 일부 구현예에서, LLG3는 이다. 일부 구현예에서, LLG3는 이다.
일부 구현예에서, LLG3b는 이고, 여기서 s는 0 내지 4이고, 각각의 Rs는 독립적으로 할로겐, -NO2, -L-R', -C(O)-L-R', -S(O)-L-R', -S(O)2-L-R', 또는 -P(O)(-L-R')2이다. 일부 구현예에서, C1은 LLG4에 결합된다. 일부 구현예에서, LLG3b는 이다. 일부 구현예에서, LLG3b는 이다. 일부 구현예에서, LLG3b는 이다. 일부 구현예에서, LLG3b는 이다. 일부 구현예에서, LLG3b는 이다. 일부 구현예에서, LLG3b는 이다.
일부 구현예에서, s는 0이다. 일부 구현예에서, s는 1 내지 4이다. 일부 구현예에서, s는 1이다. 일부 구현예에서, s는 2이다. 일부 구현예에서, s는 3이다. 일부 구현예에서, s는 4이다.
일부 구현예에서, s는 1 내지 4이고, 적어도 하나의 Rs는 전자 흡인기, 예를 들어, 상기 기재된 전자 흡인기이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 Rs는 -NO2이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 Rs는 -F이다. 일부 구현예에서, 각각의 Rs는 독립적으로 전자 흡인기이다. 일부 구현예에서, 각각의 Rs는 -NO2이다. 일부 구현예에서, 각각의 Rs는 -F이다.
일부 구현예에서, 전자 흡인기 또는 Rs는 C2에 있다. 일부 구현예에서, 전자 흡인기 또는 Rs는 C3에 있다. 일부 구현예에서, 전자 흡인기 또는 Rs는 C4에 있다. 일부 구현예에서, 전자 흡인기 또는 Rs는 C2 및 C5에 있다.
일부 구현예에서, LLG3는 이다. 일부 구현예에서, LLG3는 이다. 일부 구현예에서, LLG3는 이다. 일부 구현예에서, LLG3는 이다. 일부 구현예에서, LLG3는 이다. 일부 구현예에서, LLG3는 이다. 일부 구현예에서, LLG3는 이다. 일부 구현예에서, LLG3는 이다.
일부 구현예에서, LLG3b는 이다. 일부 구현예에서, LLG3b는 이다. 일부 구현예에서, LLG3b는 이다. 일부 구현예에서, LLG3b는 이다. 일부 구현예에서, LLG3b는 이다. 일부 구현예에서, LLG3b는 이다. 일부 구현예에서, LLG3b는 이다. 일부 구현예에서, LLG3b는 이다.
일부 구현예에서, LLG3b는 임의로 치환된 이다. 일부 구현예에서, 상기 질소 원자는 -O-인 LLG4에 결합된다. 일부 구현예에서, 상기 질소 원자는 -O-인 LLG4에 결합되고, -LRG1-LRG2-은 -C(O)-이다.
일부 구현예에서, -LLG4-LRG1-LRG2-는 -O-C(O)-이다. 일부 구현예에서, -LLG4-LRG1-LRG2-는 -S-C(O)-이다. 일부 구현예에서, -LLG4-LRG1-LRG2-는 -S-C(O)-이다.
일부 구현예에서, LLG4는 공유 결합이다. 일부 구현예에서, LLG4는 공유 결합이 아니다. 일부 구현예에서, LLG4는 -O-이다. 일부 구현예에서, LLG4는 -N(R')-이다. 일부 구현예에서, LLG4는 -NH-이다. 일부 구현예에서, LLG4는 -N(CH3)-이다. 일부 구현예에서, LLG4는 -N(R')-이고, LLG3는 -O-이다. 일부 구현예에서, R'는 임의로 치환된 C1-6 알킬이다. 일부 구현예에서, LLG4는 -S-이다.
표적 결합 모이어티
당업자에 의해 이해되는 바와 같이, 다양한 표적 결합 모이어티는 본 개시내용에 따라 활용될 수 있다. 다양한 기술이 또한 표적 결합 모이어티를 개발 및 평가하기 위해 당업계에서 이용 가능하며 본 개시내용에 따라 활용될 수 있다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 소분자 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 고분자 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 핵산 또는 이의 단편이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 펩티드 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 폴리펩티드 모이어티이다.
[0004] 일부 구현예에서, 제공된 기술은 하나 이하의 표적 결합 모이어티를 포함한다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 2개 이상의 표적 결합 모이어티를 포함한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 제공된 화합물은 표적 항체 제제에 결합하는 2개 이상의 표적 결합 모이어티를 포함할 수 있다.
a. 소분자
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 표적 제제에 선택적으로 결합할 수 있는 소분자 모이어티이거나 이를 포함한다. 다양한 단백질 제제를 포함하는 표적 제제에 대한 소분자 결합제는 당업계에 널리 공지되어 있으며 본 개시내용에 따라 활용될 수 있다. 일부 구현예에서, 소분자 결합제는 치료제, 예를 들어, 약물, 항체 약물 접합체 등의 모이어티이다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 소분자 모이어티이다. 일부 구현예에서, 소분자 모이어티는 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000, 2000, 1500, 1000, 900, 800, 700, 또는 600 이하의 분자량을 갖는다. 일부 구현예에서, 소분자 모이어티는 8000 이하의 분자량을 갖는다. 일부 구현예에서, 소분자 모이어티는 7000 이하의 분자량을 갖는다. 일부 구현예에서, 소분자 모이어티는 6000 이하의 분자량을 갖는다. 일부 구현예에서, 소분자 모이어티는 5000 이하의 분자량을 갖는다. 일부 구현예에서, 소분자 모이어티는 4000 이하의 분자량을 갖는다. 일부 구현예에서, 소분자 모이어티는 3000 이하의 분자량을 갖는다. 일부 구현예에서, 소분자 모이어티는 2000 이하의 분자량을 갖는다. 일부 구현예에서, 소분자 모이어티는 1500 이하의 분자량을 갖는다. 일부 구현예에서, 소분자 모이어티는 1000 이하의 분자량을 갖는다. 일부 구현예에서, 소분자 모이어티는 900 이하의 분자량을 갖는다.
b. 펩티드 제제
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 펩티드 제제이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 펩티드 모이어티이다. 일부 구현예에서, 펩티드 모이어티는 선형 또는 환형일 수 있다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 환형 펩티드 모이어티이거나 이를 포함한다. 다양한 펩티드 표적 결합 모이어티는 당업계에 공지되고 본 개시내용에 따라 활용될 수 있다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 압타머 제제이거나 이를 포함한다.
본원에 개시된 바와 같이, 일부 구현예에서, RLG는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, RLG는 단백질 결합 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, RLG는 항체 결합 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, RLG는 표적 결합 모이어티이다. 일부 구현예에서, RLG는 단백질 결합 모이어티이다. 일부 구현예에서, RLG는 항체 결합 모이어티이다.
c. 압타머 제제
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 핵산 제제이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 올리고뉴클레오티드 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 압타머 제제이거나 이를 포함한다. 다양한 압타머 제제가 당업계에 공지되어 있거나 일반적인 기술을 이용하여 용이하게 개발될 수 있으며, 본 개시내용에 따라 제공된 기술에서 활용될 수 있다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다. 이러한 표적 결합 모이어티는 다른 무엇보다도 항체 제제에 관심 모이어티를 접합하기 위한 것이다
항체 결합 모이어티
일부 구현예에서, 표적은 항체 제제이다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다. 일부 구현예에서, 제공된 화합물 및/또는 제제는 항체 결합 모이어티를 포함한다. 다양한 항체 결합 모이어티는 본 개시내용에 따라 활용될 수 있다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 서로 다른 Fab 영역과 서로 다른 특이성을 갖는 항체에 결합할 수 있는 보편적인 항체 결합 모이어티이다. 다른 무엇보다도, 이러한 항체 결합 모이어티를 포함하는 화합물은 서로 다른 특이성을 갖는 항체와의 접합을 위해 활용될 수 있다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 항체 결합 모이어티, 예를 들어, 보편적인 항체 결합 모이어티는 Fc 영역에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티의 Fc 영역에의 결합은 Fc 수용체, 예를 들어, CD16a가 동일한 Fc 영역에 결합하는 것과 동시에 일어날 수 있다 (예를 들어, 동일한 Fc 영역의 다른 위치/아미노산 잔기에서 일 수 있음). 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티의 결합시, 예를 들어, 제공된 제제, 화합물, 방법 등에서의 결합시, Fc 영역은 Fc 수용체와 여전히 상호작용할 수 있으며, 면역 세포 (예를 들어, NK 세포와 같은 이펙터 세포)의 모집, 및/또는 표적 세포, 조직, 개체 및/또는 실체에 대한 면역계 활동을 촉발, 생성, 장려, 및/또는 강화하는 것을 포함하여 면역 활동, 예를 들어, 항체 의존성 세포 매개 독성 (ADCC) 및/또는 ADCP 중 하나 이상 또는 모두를 수행할 수 있다.
보편적인 항체 결합 모이어티를 포함하는 다양한 항체 결합 모이어티가 본 개시내용에 따라 이용될 수 있다. 특적 항체 결합 모이어티 및 항체 결합 모이어티를 확인 및/또는 평가하기 위한 기술은 WO/2019/023501 및 WO/2019/136442에 기재되어 있으며, 이들 각각은 참조로 본원에 포함된다. 당업자는 당업계의 추가 기술이 본 개시내용에 따라 항체 결합 모이어티를 확인 및/또는 평가하는데 적합할 수 있음을 인식한다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 각각 독립적으로 천연 또는 비천연인 하나 이상의 아미노산 잔기를 포함한다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어 단백질 결합 모이어티 (예를 들어, 항체 결합 모이어티 (예를 들어, 보편적인 항체 결합 모이어티))는 의 구조 또는 이의 염을 갖고, 여기서
각각의 R1, R3 및 R5는 독립적으로 수소이거나 C1-6 지방족, 3 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노시클릭 카보시클릭 고리, 페닐, 8 내지 10원 바이시클릭 방향족 카보시클릭 고리, 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노시클릭 헤테로시클릭 고리, 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 모노시클릭 헤테로방향족 고리, 또는 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8 내지 10원 바이시클릭 헤테로방향족 고리로부터 선택되는 임의로 치환된 기이거나 또는,
R1 및 R1'는 임의로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 3 내지 8원 임의로 치환된 포화 또는 부분 불포화 스피로시클릭 카보시클릭 고리 또는 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 스피로시클릭 헤테로시클릭 고리를 형성하고,
R3 및 R3'는 임의로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 3 내지 8원 임의로 치환된 포화 또는 부분 불포화 스피로시클릭 카보시클릭 고리 또는 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 스피로시클릭 헤테로시클릭 고리를 형성하고,
동일한 탄소 원자에 부착된 R5 기 및 R5' 기는 임의로 이들의 개재 탄소 원자와 함께 3 내지 8원 임의로 치환된 포화 또는 부분 불포화 스피로시클릭 카보시클릭 고리 또는 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 8원 임의로 치환된 포화 또는 부분 불포화 스피로시클릭 헤테로시클릭 고리를 형성하거나 또는,
2개의 R5 기는 임의로 이들의 개재 원자와 함께 C1-10 임의로 치환된 2가 직쇄 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 사슬을 형성하고, 여기서 상기 사슬의 1 내지 3개의 메틸렌 단위는 독립적으로 및 임의로 -S-, -SS-, -N(R)-, -O-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -C(O)N(R)-, -N(R)C(O)-, -S(O)-, -S(O)2-, 또는 -Cy1-로 대체되고, 여기서 각각의 -Cy1-는 독립적으로 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 헤테로아릴레닐이고,
각각의 R1', R3' 및 R5'는 독립적으로 수소이거나 임의로 치환된 C1-3 지방족이고,
각각의 R2, R4 및 R6은 독립적으로 수소이거나 임의로 치환된 C1-4 지방족이거나 또는,
R2 및 R1은 임의로 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 임의로 치환된 포화 또는 부분 불포화 모노시클릭 헤테로시클릭 고리를 형성하고,
R4 및 R3는 임의로 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 임의로 치환된 포화 또는 부분 불포화 모노시클릭 헤테로시클릭 고리를 형성하거나 또는,
R6 기 및 이의 인접한 R5 기는 임의로 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 임의로 치환된 포화 또는 부분 불포화 모노시클릭 헤테로시클릭 고리를 형성하고,
L1은 3가 링커 모이어티이고,
각각의 m 및 n은 독립적으로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20이다.
일부 구현예에서, L1은 C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로 지방족으로부터 선택되는 임의로 치환된 3가 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, 또는 -C(O)O-로 대체된다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어 단백질 결합 모이어티 (예를 들어, 항체 결합 모이어티 (예를 들어 보편적인 항체 결합 모이어티))는 의 구조 또는 이의 염을 갖고, 여기서
각각의 R7은 독립적으로 수소이거나 C1-6 지방족, 3 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노시클릭 카보시클릭 고리, 페닐, 8 내지 10원 바이시클릭 방향족 카보시클릭 고리, 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노시클릭 헤테로시클릭 고리, 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 6원 모노시클릭 헤테로방향족 고리, 또는 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8 내지 10원 바이시클릭 헤테로방향족 고리로부터 선택되는 임의로 치환된 기이거나 또는,
동일한 탄소 원자에 부착된 R7 기 및 R7' 기는 임의로 이들의 탄소 개재 원자와 함께 3 내지 8원 임의로 치환된 포화 또는 부분 불포화 스피로시클릭 카보시클릭 고리 또는 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 8원 임의로 치환된 포화 또는 부분 불포화 스피로시클릭 헤테로시클릭 고리를 형성하고,
각각의 R7'는 독립적으로 수소이거나 임의로 치환된 C1-3 지방족이고,
각각의 R8은 독립적으로 수소이거나 임의로 치환된 C1-4 지방족이거나 또는,
R8기 및 이의 인접한 R7 기는 임의로 이들의 개재 원자와 함께 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 8원 임의로 치환된 포화 또는 부분 불포화 모노시클릭 헤테로시클릭 고리를 형성하고,
R9는 수소, 임의로 치환된 C1-3 지방족, 또는 -C(O)-이다.
일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어 보편적인 항체 결합 모이어티는 펩티드 모이어티, 예를 들어 Rc-(Xaa)z- 또는 이의 염의 구조를 갖는 모이어티이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 Rc, z 및 Xaa는 독립적으로 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 Xaa는 독립적으로 비천연 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, 2개 이상의 아미노산 잔기의 측쇄는 함께 연결되어 브릿지를 형성할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서 2개의 시스테인 잔기의 측쇄는 -S-S- (많은 단백질에서와 같이 2개의 -SH 기에 의해 형성될 수 있음)를 포함하는 이황화 브릿지를 형성할 수 있다.
일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어 단백질 결합 모이어티 (예를 들어 항체 결합 모이어티 (예를 들어 보편적인 항체 결합 모이어티))는 시클릭 펩티드 모이어티, 예를 들어, 의 구조 또는 이의 염을 갖는 모이어티이거나 이를 포함할 수 있고, 여기서
각각의 Xaa는 독립적으로 아미노산 또는 아미노산 유사체의 잔기이고,
t는 0 내지 50이고,
z는 1 내지 50이고,
L은 링커 모이어티이고,
각각의 Rc는 독립적으로 -La-R'이고,
각각의 La는 독립적으로 공유 결합이거나 C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택되는 임의로 치환된 2가 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, 또는 -C(O)O-로 대체되고,
각각의 -Cy-는 독립적으로 임의로 치환된 2가 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭 기이고, 여기서 각각의 모노시클릭 고리는 독립적으로 C3-20 시클로지방족 고리, C6-20 아릴 고리, 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원 헤테로아릴 고리, 및 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 20원 헤테로시클릴 고리로부터 선택되고,
각각의 R'는 독립적으로 -R, -C(O)R, -CO2R, 또는 -SO2R이고,
각각의 R은 독립적으로 -H이거나, C1-30 지방족, 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-30 헤테로지방족, C6-30 아릴, C6-30 아릴지방족, 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C6-30 아릴헤테로지방족, 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴, 및 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지30원 헤테로시클릴로부터 선택되는 임의로 치환된 기이거나 또는,
2개의 R 기는 임의로 및 독립적으로 함께 공유 결합을 형성하거나 또는,
동일한 원자 상의 2개 이상의 R 기는 임의로 및 독립적으로 상기 원자와 함께 상기 원자 외에 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 3 내지 30원 모노시클릭, 바이시클릭, 또는 폴리시클릭 고리를 형성하거나 또는,
2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R 기는 임의로 및 독립적의로 이들의 개재 원자와 함께 상기 개재 원자 외에 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 3 내지 30원 모노시클릭, 바이시클릭, 또는 폴리시클릭 고리를 형성한다.
일부 구현예에서, 헤테로원자는 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택된다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 Rc-(Xaa)z- 또는 이의 염이거나 또는 이를 포함하고, 여기서 각각의 변수는 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, 단백질 결합 모이어티는 Rc-(Xaa)z- 또는 이의 염이거나 또는 이를 포함하고, 여기서 각각의 변수는 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어 보편적인 항체 결합 모이어티는 Rc-(Xaa)z- 또는 이의 염이거나 또는 이를 포함하고, 여기서 각각의 변수는 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 또는 이의 염이거나 또는 이를 포함하고, 여기서 각각의 변수는 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, 단백질 결합 모이어티는 또는 이의 염이거나 또는 이를 포함하고, 여기서 각각의 변수는 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어 보편적인 항체 결합 모이어티는 또는 이의 염이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 변수는 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어 보편적인 항체 결합 모이어티는 Rc-(Xaa)z- 또는 , 또는 이의 염이고, 펩티드 단위이거나 펩티드 단위를 포함한다. 일부 구현예에서, -(Xaa)z-는 펩티드 단위이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 아미노산 잔기는 브릿지, 예를 들어 임의로 링커 모이어티 (예를 들어, L)을 통해 측쇄에 의해 형성되는 연결을 형성할 수 있고, 예를 들어 많은 폴리펩티드에서와 같이 시스테인 잔기가 이황화 브릿지를 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 아미노산 잔기 (예를 들어, 생리학적 pH 약 7.4에서 "양전하 아미노산 잔기", XaaP), 예를 들어 양전하 측쇄를 갖는 화학식 A-I의 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 R을 포함한다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 Xaa는 R이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 APAR이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 RAPA이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 아미노산 잔기, 예를 들어, 방향족 기를 포함하는 측쇄를 갖는 화학식 A-I의 아미노산의 잔기 ("방향족 아미노산 잔기", XaaA)를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 양전하 아미노산 잔기 및 방향족 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 W를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 양전하 아미노산 잔기 및 방향족 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 XaaAXaaXaaPXaaP이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 XaaPXaaPXaaXaaA이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 XaaPXaaAXaaP이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 2개 이상의 XaaPXaaAXaaP이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 XaaPXaaAXaaPXaaXaaPXaaAXaaP이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 XaaPXaaPXaaAXaaAXaaP이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 XaaPXaaPXaaPXaaA이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 2개 이상의 XaaAXaaAXaaP이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 잔기는 하나 이상의 프롤린 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 HWRGWA (서열 번호 1)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 WGRR (서열 번호 2)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 RRGW (서열 번호 3)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 NKFRGKYK (서열 번호 4)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 NRFRGKYK (서열 번호 5)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 NARKFYK (서열 번호 6)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 NARKFYKG (서열 번호 7)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 HWRGWV (서열 번호 8)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 KHFRNKD (서열 번호 9)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 양전하 아미노산 잔기, 방향족 아미노산 잔기, 및 아미노산 잔기, 예를 들어, 음전하 측쇄를 갖는 화학식 A-I의 아미노산의 잔기 (예를 들어 생리학적 pH 7.4, "음전하 아미노산 잔기", XaaN)를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 RHRFNKD (서열 번호 10)를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 RHRFNKD (서열 번호 10)이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 TY를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 TY이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 TYK를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 TYK이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 RTY를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 RTY이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 RTYK (서열 번호 11)를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 RTYK (서열 번호 11)이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 PAM으로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 WHL을 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 WHL이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 WXL이거나 이를 포함하고, 여기서 X는 본원에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티에 연결하기 적합한 것 (예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 이의 활성화된 형태, 예컨대 D, E, 등)이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 WDL을 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 WDL이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 ELVW (서열 번호 12)를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 ELVW (서열 번호 12)이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 GELVW (서열 번호 13)를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 GELVW (서열 번호 13)이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 AWHLGELVW (서열 번호 14)로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 AWHLGELVW (서열 번호 14)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 AWDLGELVW (서열 번호 15)로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 AWDLGELVW (서열 번호 15)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 AWXLGELVW (서열 번호 16)이거나 이를 포함하고, 여기서 X는 본원에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어 다른 모이어티에 연결하기에 적합한 것 (예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 이의 활성화된 형태, 예컨대 D, E, 등)이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DCAWHLGELVWCT (서열 번호 17)로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함하고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화 결합을 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DCAWHLGELVWCT (서열 번호 17)이거나 이를 포함하고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화 결합을 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DCAWXLGELVWCT (서열 번호 18)로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함할 수 있고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화 결합을 형성할 수 있고, X는 본원에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어 다른 모이어티에 연결하기에 적합한 것 (예를 들어 -COOH 또는 이의 염 또는 이의 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대 D, E, 등) 이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DCAWXLGELVWCT (서열 번호 18)이거나 이를 포함하고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화 결합을 형성할 수 있고, X는 본원에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티에 연결하기에 적합한 것 (예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 이의 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대 D, E, 등)이다. 일부 구현예에서, X는 -COOH 또는 이의 염 또는 이의 활성화된 형태를 이의 측쇄 내에 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DCAWDLGELVWCT (서열 번호 19)로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함하고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화 결합을 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DCAWDLGELVWCT (서열 번호 19)이거나 이를 포함할 수 있고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화 결합을 형성할 수 있다. 일부 구현에에서, 펩티드 단위는 Fc-III로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 Fc-III이거나 이를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DpLpAWXLGELVW (서열 번호 20)로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함할 수 있고, 여기서 X는 본원에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티와 연결하기에 적합한 것 (예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 이의 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대 D, E, 등)이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DpLpAWXLGELVW (서열 번호 20)이거나 이를 포함하고, 여기서 X는 본원에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티와 연결하기에 적합한 것 (예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 이의 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대 D, E, 등)이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DpLpAWDLGELVW (서열 번호 21)로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DpLpAWDLGELVW (서열 번호 21)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DpLpAWHLGELVW (서열 번호 22)로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함하고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화 결합을 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DpLpAWHLGELVW (서열 번호 22) (예를 들어, FcBP-1)이거나 이를 포함하고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화 결합을 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 FcBP-1로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DpLpDCAWXLGELVWCT (서열 번호 23)로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함하고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화 결합을 형성할 수 있고, X는 본원에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어 다른 모이어티에 연결하기에 적합한 것 (예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 이의 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대, D, E, 등)이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DpLpDCAWXLGELVWCT (서열 번호 23)이거나 이를 포함하고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화 결합을 형성할 수 있고, X는 본원에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티에 연결하기에 적합한 것 (예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 이의 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대, D, E, 등)이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DpLpDCAWHLGELVWCT (서열 번호 24)로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함하고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화 결합을 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DpLpDCAWHLGELVWCT (서열 번호 24) (예를 들어, FcBP-2)이거나 이를 포함하고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화 결합을 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DpLpDCAWDLGELVWCT (서열 번호 25)로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함하고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화 결합을 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 DpLpDCAWDLGELVWCT (서열 번호 25)이거나 이를 포함하고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 천연 단백질에서 발견되는 바와 같이 이황화 결합을 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 FcBP-2로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 CDCAWXLGELVWCTC (서열 번호 26)로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함하고, 여기서 첫번째 및 마지막 시스테인, 및 서열 중간에 있는 2개의 시스테인은 천연 단백질에서와 같이 각각 독립적으로 이황화 결합을 형성할 수 있고, X는 본원에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티와 연결하기에 적합한 것 (예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 이의 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대, D, E, 등)이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 CDCAWXLGELVWCTC (서열 번호 26)이거나 이를 포함하고, 여기서 첫번째 및 마지막 시스테인, 및 서열 중간에 있는 2개의 시스테인은 천연 단백질에서와 같이 각각 독립적으로 이황화 결합을 형성할 수 있고, X는 본원에 기재된 바와 같은 아미노산 잔기, 예를 들어, 다른 모이어티와 연결하기에 적합한 것 (예를 들어, -COOH 또는 이의 염 또는 이의 활성화된 형태를 포함하는 아미노산 잔기, 예컨대, D, E, 등)이다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 CDCAWHLGELVWCTC (서열 번호 27)로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함하고, 여기서 첫번째 및 마지막 시스테인, 및 서열 중간에 있는 2개의 시스테인은 천연 단백질에서와 같이 각각 독립적으로 이황화 결합을 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 CDCAWHLGELVWCTC (서열 번호 27)이거나 이를 포함하고, 여기서 첫번째 및 마지막 시스테인, 및 서열 중간에 있는 2개의 시스테인은 천연 단백질에서와 같이 각각 독립적으로 이황화 결합을 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 CDCAWDLGELVWCTC (서열 번호 28)로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함하고, 여기서 첫번째 및 마지막 시스테인, 및 서열 중간에 있는 2개의 시스테인은 천연 단백질에서와 같이 각각 독립적으로 이황화 결합을 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 CDCAWDLGELVWCTC (서열 번호 28)이거나 이를 포함하고, 여기서 첫번째 및 마지막 시스테인, 및 서열 중간에 있는 2개의 시스테인은 천연 단백질에서와 같이 각각 독립적으로 이황화 결합을 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 Fc-III-4c로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 FcRM로부터 선택되는 서열이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 시클릭 펩티드 단위이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 시클릭 펩티드 단위는 측쇄의 아미노 기와 C-말단 -COOH에 의해 형성된 아미드 기를 포함한다. 다양한 구현예에서, 펩티드 단위가 또 다른 모이어티에 연결될 때 펩티드 단위의 아미노산 잔기는 다양한 위치, 예를 들어 그의 백본, 그의 측쇄 등을 통해 연결될 수 있다는 것이 당업자에 의해 인식된다. 일부 구현예에서, 아미노산 잔기는 연결을 위해 변형된다. 일부 구현예에서, 아미노산 잔기는 펩티드 단위의 하나 이상의 특성 및/또는 활성 (예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 항체에 대한 결합)을 유지하면서 연결을 위한 또 다른 적합한 잔기로 대체된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 아미노산 잔기는 -COOH 또는 이의 염 또는 이의 활성화된 형태를 포함하는 측쇄 (예를 들어, -CH2-COOH 또는 이의 염 또는 이의 활성화된 형태인 측쇄)를 갖는 아미노산 잔기로 대체된다. 본원에 예시된 바와 같이, 다양한 서열에서 H는 D로 대체될 수 있다 (예를 들어, WHL을 포함하는 다양한 펩티드 단위에서). 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 -COOH 또는 이의 염 또는 이의 활성화된 형태, 예를 들어, 예컨대 -CON(R')-의 형태를 통해 또 다른 모이어티에 연결된다. 일부 구현예에서, R'는 -H이다. 일부 구현예에서, -COOH는 아미노산 잔기의 측쇄에 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 서열에서 (예를 들어, DCAWHLGELVWCT (서열 번호 17)), 1 내지 5개 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 또는 5개)의 아미노산 잔기는 독립적으로 및 임의로 또 다른 아미노산 잔기로 대체될 수 있고, 1 내지 5개 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 또는 5개)의 아미노산 잔기는 독립적으로 및 임의로 삭제될 수 있고/있거나, 1 내지 5개 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 또는 5개)의 아미노산 잔기는 독립적으로 및 임의로 삽입될 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 모이어티는 이의 N-말단을 통해 분자의 나머지 부분에 연결된다. 일부 구현예에서, 이는 이의 C-말단을 통해 분자의 나머지 부분에 연결된다. 일부 구현예에서, 이는 아미노산 잔기 (예를 들어, 본 기재내용에 기재된 바와 같은 다양한 X 잔기)의 측쇄를 통해 분자의 나머지 부분에 연결된다. 일부 구현예에서, 2개의 시스테인 잔기는 독립적으로 및 임의로 이황화 결합을 형성한다. 일부 구현예에서, 대체, 삭제, 및 삽입의 총 수는 10 이하 (예를 들어, 0, 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10 이하)이다. 일부 구현예에서, 총 수는 0이다. 일부 구현예에서, 총 수는 1 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 2 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 3 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 4 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 5 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 6 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 7 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 8 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 9 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 10 이하이다. 일부 구현예에서, 삽입은 없다. 일부 구현예에서, 삭제는 없다.
일부 구현예에서, -(Xaa)z-는 [X1]p1[X2]p2-X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12-[X13]p13-[X14]p14[X15]p15[X16]p16이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, X12, 및 X13는 독립적으로 아미노산 잔기, 예를 들어 화학식 A-I의 아미노산 잔기이고, 각각의 p1, p2, p13, p14, p15 및 p16은 독립적으로 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 일부 구현예에서, 각각의 X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, X12, 및 X13는 독립적으로 화학식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, 각각의 X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, X12, 및 X13은 독립적으로 천연 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, X12, 및 X13은 본 개시내용에 기재된 바와 같이 독립적으로 비천연 아미노산 잔기이다.
일부 구현예에서, 펩티드 단위는 다른 아미노산 잔기와 반응할 수 있는 아미노산 잔기 내 작용기를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 링키지를 형성하기 위해 또 다른 아미노산 잔기의 측쇄의 또 다른 작용기와 반응할 수 있는 작용기를 포함하는 측쇄를 갖는 아미노산 잔기를 포함한다 (예를 들, 표 A-1, 실시예 8 등에 기재된 모이어티 참고). 일부 구현예에서, 하나의 아미노산 잔기의 하나의 작용기는 또 다른 아미노산 잔기의 작용기에 연결되어 링키지 (또는 브릿지)를 형성한다. 링키지는 펩티드 단위의 백본 원자에 결합되며 백본 원자를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 펩티드 단위는 인접하지 않은 아미노산 잔기의 두 측쇄에 의해 형성되는 링키지를 포함한다. 일부 구현예에서, 링키지는 인접하지 않은 아미노산 잔기의 두 백본 원자에 결합된다. 일부 구현예에서, 링키지에 결합된 두 백본 원자 모두는 탄소 원자이다. 일부 구현예에서, 링키지는 Lb의 구조를 갖고, 여기서 Lb는 본 개시내용에 기재된 바와 같은 La이고, 여기서 La는 공유결합이 아니다. 일부 구현예에서, La는 -Cy-를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 -Cy-를 포함하고, 여기서 -Cy-는 임의로 치환된 헤테로아릴이다. 일부 구현예에서, -Cy-는 이다. 일부 구현예에서, La는 이다. 일부 구현예에서, 이러한 La는 한 아미노산 잔기의 측쇄의-N3 기 및 또 다른 아미노산 잔기의 측쇄의 -≡-에 의해 형성될 수 있다. 일부 구현예에서, 링키지는 2개의 티올 기, 예를 들어, 2개의 시스테인 잔기의 연결을 통해 형성된다. 일부 구현예에서, La는 -S-S-를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 -CH2-S-S-CH2-이다. 일부 구현예에서, 링키지는 아미노산 기 (예를 들어, 리신 잔기의 측쇄 내 -NH2) 및 카복실산 기 (예를 들어, 아스파트산 또는 글루탐산 잔기의 측쇄 내 -COOH)의 연결을 통해 형성된다. 일부 구현예에서, La는 -C(O)-N(R')-을 포함한다. 일부 구현예에서, La는 -C(O)-NH-를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 -CH2CONH-(CH2)3-이다. 일부 구현예에서, La는 -C(O)-N(R')-를 포함하고, 여기서 R'는 R이고, R'는 펩티드 백본 상의 R 기와 함께 고리를 형성한다 (예를 들어, A-34). 일부 구현예에서, La는 -(CH2)2-N(R')-CO--(CH2)2-이다. 일부 구현예에서, -Cy-는 임의로 치환된 페닐렌이다. 일부 구현예에서, -Cy-는 임의로 치환된 1,2-페닐렌이다. 일부 구현예에서, La는 이다. 일부 구현예에서, La는 이다. 일부 구현예에서, La는 임의로 치환된 2가 C2-20 2가 지방족이다. 일부 구현예에서, La는 임의로 치환된 -(CH2)9-CH=CH-(CH2)9-이다. 일부 구현예에서, La는 -(CH2)3-CH=CH-(CH2)3-이다.
일부 구현예에서, 링키지에 결합된 2개의 아미노산 잔기는 그들 사이의 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 또는 15개 이상의 아미노산 잔기에 의해 분리된다 (링키지에 결합된 2개의 아미노산 잔기 제외). 일부 구현예에서, 상기 수는 1이다. 일부 구현예에서, 상기 수는 2이다. 일부 구현예에서, 상기 수는 3이다. 일부 구현예에서, 상기 수는 4이다. 일부 구현예에서, 상기 수는 5이다. 일부 구현예에서, 상기 수는 6이다. 일부 구현예에서, 상기 수는 7이다. 일부 구현예에서, 상기 수는 8이다. 일부 구현예에서, 상기 수는 9이다. 일부 구현예에서, 상기 수는 10이다. 일부 구현예에서, 상기 수는 11이다. 일부 구현예에서, 상기 수는 12이다. 일부 구현예에서, 상기 수는 13이다. 일부 구현예에서, 상기 수는 14이다. 일부 구현예에서, 상기 수는 15이다.
일부 구현예에서, 각각의 p1, p2, p13, p14, p15 및 p16은 0이다. 일부 구현예에서, -(Xaa)z-는 -X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12-이거나 이를 포함하고, 여기서
각각의 X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, 및 X12는 독립적으로 아미노산 잔기이고,
X6은 XaaA 또는 XaaP이고,
X9는 XaaN이고,
X12는 XaaA 또는 XaaP이다.
일부 구현예에서, 각각의 X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, 및 X12는 독립적으로 본 개시내용에 기재된 바와 같은 화학식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, X5는 XaaA 또는 XaaP이다. 일부 구현예에서, X5는 XaaA이다. 일부 구현예에서, X5는 XaaP이다. 일부 구현예에서, X5는 그의 측쇄가 임의로 치환된 포화, 부분 포화 또는 방향족 고리를 포함하는 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, X5는 이다. 일부 구현예에서, X5는 이다. 일부 구현예에서, X6은 XaaA이다. 일부 구현예에서, X6은 XaaP이다. 일부 구현예에서, X6은 His이다. 일부 구현예에서, X12는 XaaA이다. 일부 구현예에서, X12는 XaaP이다. 일부 구현예에서, X9는 Asp이다. 일부 구현예에서, X9는 Glu이다. 일부 구현예에서, X12는 이다. 일부 구현예에서, X12는 이다. 일부 구현예에서, 각각의 X7, X10, 및 X11은 독립적으로 소수성 측쇄를 갖는 아미노산 잔기이다 ("소수성 아미노산 잔기", XaaH). 일부 구현예에서, X7은 XaaH이다. 일부 구현예에서, X7은 이다. 일부 구현예에서, X7은 Val이다. 일부 구현예에서, X10은 XaaH이다. 일부 구현예에서, X10은 Met이다. 일부 구현예에서, X10은 이다. 일부 구현예에서, X11은 XaaH이다. 일부 구현예에서, X11은 이다. 일부 구현예에서, X8는 Gly이다. 일부 구현예에서, X4는 Pro이다. 일부 구현예에서, X3는 Lys이다. 일부 구현예에서, X12의 -COOH는 Lys (X3)의 측쇄 아미노 기를 갖는 아미드 결합을 형성하고, Lys (X3)의 다른 아미노 기는 링커 모이어티 및 그 다음으로 표적 결합 모이어티에 연결된다.
일부 구현예에서, -(Xaa)z-는 -X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12-이거나 이를 포함하고, 여기서
각각의 X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, 및 X12는 독립적으로 아미노산 잔기이고,
적어도 2개의 아미노산 잔기는 하나 이상의 링키지 Lb를 통해 연결되고,
Lb는 C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택되는 임의로 치환된 2가 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, 또는 -C(O)O-로 대체되고, 여기서 Lb는 하나의 아미노산 잔기의 백본 원자 및 또 다른 아미노산 잔기의 백본 원자에 결합되고, 백본 원자를 갖지 않고,
X6는 XaaA 또는 XaaP이고,
X9는 XaaN이고,
X12는 XaaA 또는 XaaP이다.
일부 구현예에서, 각가의 X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, 및 X12는 독립적으로 본 개시내용에 기재된 바와 같은 화학식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, 2개의 인접한 아미노산 잔기는 Lb에 의해 연결된다. 일부 구현예에서, X5 및 X10은 Lb에 의해 연결된다. 일부 구현예에서, 하나의 링키지 Lb가 있다. 일부 구현예에서, X6는 XaaA이다. 일부 구현예에서, X6는 XaaP이다. 일부 구현예에서, X6은 His이다. 일부 구현예에서, X9는Asp이다. 일부 구현예에서, X9는 Glu이다. 일부 구현예에서, X12는 XaaA이다. 일부 구현예에서, X12는 이다. 일부 구현예에서, X12는 이다. 일부 구현예에서, X12는 이다. 일부 구현예에서, 각각의 X4, X7, 및 X11은 독립적으로 XaaH이다. 일부 구현예에서, X4는 XaaH이다. 일부 구현예에서, X4는 Ala이다. 일부 구현예에서, X7은 XaaH이다. 일부 구현예에서, X7은 이다. 일부 구현예에서, X11은 XaaH이다. 일부 구현예에서, X11은 이다. 일부 구현예에서, X8은 Gly이다. 일부 구현예에서, X3은 Lys이다. 일부 구현예에서, X12의 -COOH는 Lys (X3)의 측쇄 아미노 기를 갖는 아미드 결합을 형성하고, Lys (X3)의 다른 아미노 기는 링커 모이어티에 연결되고 그 다음 표적 결합 모이어티에 연결된다. 일부 구현예에서, Lb는 이다. 일부 구현예에서, Lb는 이다. 일부 구현예에서, Lb는 2개의 상이한 아미노산 잔기의 2개의 알파-탄소를 연결한다. 일부 구현예에서, X5 및 X10 둘 모두는 Cys이고, 이들의 측쇄의 2개의 -SH 기는 -S-S-를 형성한다 (Lb는 -CH2-S-S-CH2-이다).
일부 구현예에서, -(Xaa)z-는 -X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12-이거나 이를 포함하고, 여기서
각각의 X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, 및 X12는 독립적으로 아미노산 잔기이고,
적어도 2개의 아미노산 잔기는 하나 이상의 링키지 Lb를 통해 연결되고,
Lb는C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택되는 임의로 치환된 2가 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, 또는 -C(O)O-로 대체되고, 여기서 Lb는 하나의 아미노산 잔기의 백본 원자 및 또 다른 아미노산 잔기의 백본 원자에 결합되고, 백본 원자를 포함하지 않고,
X4는 XaaA이고
X5는 XaaA 또는 XaaP이고,
X8는 XaaN이고,
X11는 XaaA이다.
일부 구현예에서, 각각의 X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, 및 X12는 독립적으로 본 개시내용에 기재된 바와 같은 화학식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, 2개의 인접하지 않은 아미노산 잔기는 Lb에 의해 연결된다. 일부 구현예에서, 하나의 링키지 Lb가 있다. 일부 구현예에서, X2 및 X12는 Lb에 의해 연결된다. 일부 구현예에서, Lb는 -CH2-S-S-CH2-이다. 일부 구현예에서, Lb는 -CH2-CH2-S-CH2-이다. 일부 구현예에서, Lb는 이다. 일부 구현예에서, Lb는 이다. 일부 구현예에서, Lb는 -CH2CH2CO-N(R')-CH2CH2-이다. 일부 구현예에서, R'는 -N(R')-CH2CH2-이 결합된 백본 원자 상의 R기 와 함께 고리를 형성한다, 예를 들어, A-34에서와 같음. 일부 구현예에서, 형성된 고리는 3원, 4원, 5원, 6원, 7원 또는 8원이다. 일부 구현예에서, 형성된 고리는 모노시클릭이다. 일부 구현예에서, 형성된 고리는 포화이다. 일부 구현예에서, Lb는 이다. 일부 구현예에서, Lb는 2개의 상이한 아미노산 잔기의 2개의 알파-탄소 원자를 연결한다. 일부 구현예에서, X4는 XaaA이다. 일부 구현예에서, X4는 Tyr이다. 일부 구현예에서, X5는 XaaA이다. 일부 구현예에서, X5는 XaaP이다. 일부 구현예에서, X5는 His이다. 일부 구현예에서, X8은 Asp이다. 일부 구현예에서, X8은 Glu이다. X11은 Tyr이다. 일부 구현예에서, X2 및 X12 둘 모두는 Cys이고, 이들의 측쇄의 2개의 -SH 기는 -S-S-를 형성한다 (Lb는 -CH2-S-S-CH2-이다). 일부 구현예에서, 각각의 X3, X6, X9, 및 X10는 독립적으로 XaaH이다. 일부 구현예에서, X3은 XaaH이다. 일부 구현예에서, X3은 Ala이다. 일부 구현예에서, X6는 XaaH이다. 일부 구현예에서, X6는 Leu이다. 일부 구현예에서, X9는 XaaH이다. 일부 구현예에서, X9는 Leu이다. 일부 구현예에서, X9는 이다. 일부 구현예에서, X10은 XaaH이다. 일부 구현예에서, X10은 Val이다. 일부 구현예에서, X10은 이다. 일부 구현예에서, X7은 Gly이다. 일부 구현예에서, p1은 1이다. 일부 구현예에서, X1은 Asp이다. 일부 구현예에서, p13은 1이다. 일부 구현예에서, p14, p15 및 p16은 0이다. 일부 구현예에서, X13은 하전되지 않은 극성 측쇄를 포함하는 아미노산 잔기이다 (예를 들어, 생리학적 pH에서, "하전되지 않은 극성 아미노산 잔기", XaaL). 일부 구현예에서, X13는 Thr이다. 일부 구현예에서, X13은 Val이다. 일부 구현예에서, p13은 0이다. 일부 구현예에서, Rc는 -NHCH2CH(OH)CH3이다. 일부 구현예에서, Rc는 (R)-NHCH2CH(OH)CH3이다. 일부 구현예에서, Rc는 (S)-NHCH2CH(OH)CH3이다.
일부 구현예에서, -(Xaa)z-는 -X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12-이거나 이를 포함하고, 여기서
각각의 X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, 및 X12는 독립적으로 아미노산 잔기이고,
적어도 2개의 아미노산 잔기는 하나 이상의 링키지 Lb를 통해 연결되고,
Lb는 C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택되는 임의로 치환된 2가 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, 또는 -C(O)O-로 대체되고, 여기서 Lb는 하나의 아미노산 잔기의 백본 원자 및 또 다른 아미노산 잔기의 백본 원자에 결합되고, 백본 원자를 포함하지 않고,
X5는 XaaA 또는 XaaP이고,
X8은 XaaN이고,
X11은 XaaA이다.
일부 구현예에서, 각각의 X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, 및 X12는 독립적으로 본 개시내용에 기재된 바와 같은 화학식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, 2개의 인접하지 않은 아미노산 잔기는 Lb에 의해 연결된다. 일부 구현예에서, 하나의 링키지 Lb가 있다. 일부 구현예에서, 2개 이상의 링키지 Lb가 있다. 일부 구현예에서, 2개의 링키지 Lb가 있다. 일부 구현예에서, X2 및 X12는 Lb에 의해 연결된다. 일부 구현예에서, X4 및 X9는 Lb에 의해 연결된다. 일부 구현예에서, X4 및 X10은 Lb에 의해 연결된다. 일부 구현예에서, Lb는 -CH2-S-S-CH2-이다. 일부 구현예에서, Lb는 이다. 일부 구현예에서, Lb는 이다. 일부 구현예에서, X2 및 X12 둘 모두는 Cys이고, 이들의 측쇄의 2개의 -SH 기는 -S-S-를 형성한다 (Lb는 -CH2-S-S-CH2-이다). 일부 구현예에서, X4 및 X10 둘 모두는 Cys이고, 이들의 측쇄의 2개의 -SH 기는 -S-S-를 형성한다 (Lb는 -CH2-S-S-CH2-이다). 일부 구현예에서, X4 및 X9는 Lb에 의해 연결되고, 여기서 Lb는 이다. 일부 구현예에서, X4 및 X9는 Lb에 의해 연결되고, 여기서 Lb는 이다. 일부 구현예에서, X5는 XaaA이다. 일부 구현예에서, X5는 XaaP이다. 일부 구현예에서, X5는 His이다. 일부 구현예에서, X8는 Asp이다. 일부 구현예에서, X8은 Glu이다. 일부 구현예에서, X11은 Tyr이다. 일부 구현예에서, X11은 이다. 일부 구현예에서, X2 및 X12는 Lb에 의해 연결되고, 여기서 Lb는 -CH2-S-CH2CH2-이다. 일부 구현예에서, Lb는 2개의 상이한 아미노산 잔기의 2개의 알파-탄소 원자를 연결한다. 일부 구현예에서, 각각의 X3, X6, 및 X9는 독립적으로 XaaH이다. 일부 구현예에서, X3은 XaaH이다. 일부 구현예에서, X3은 Ala이다. 일부 구현예에서, X6은 XaaH이다. 일부 구현예에서, X6은 Leu이다. 일부 구현예에서, X6은 이다. 일부 구현예에서, X9는 XaaH이다. 일부 구현예에서, X9는 Leu이다. 일부 구현예에서, X9는 이다. 일부 구현예에서, X10 은 XaaH이다. 일부 구현예에서, X10은 Val이다. 일부 구현예에서, X7은 Gly이다. 일부 구현예에서, p1은 1이다. 일부 구현예에서, X1은 XaaN이다. 일부 구현예에서, X1은 Asp이다. 일부 구현예에서, X1은 Glu이다. 일부 구현예에서, p13은 1이다. 일부 구현예에서, p14, p15 및 p16은 0이다. 일부 구현예에서, X13은 XaaL이다. 일부 구현예에서, X13은 Thr이다. 일부 구현예에서, X13은 Val이다.
일부 구현예에서, -(Xaa)z-는 -X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15X16-이거나 이를 포함하고, 여기서
각각의 X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, X12, X13, X14, X15, 및 X16은 독립적으로 아미노산 잔기이고,
적어도 2개의 아미노산 잔기는 링키지 Lb를 통해 연결되고,
Lb는 C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택되는 임의로 치환된 2가 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, 또는 -C(O)O-로 대체되고, 여기서 Lb는 하나의 아미노산 잔기의 백본 원자 및 또 다른 아미노산 잔기의 백본 원자에 결합되고, 백본 원자를 포함하지 않고,
X3는 XaaN이고,
X6은 XaaA이고,
X7은 XaaA 또는 XaaP이고,
X9는 XaaN이고,
X13은 XaaA이다.
일부 구현예에서, 각각의 X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, 및 X12는 독립적으로 본 개시내용에 기재된 바와 같은 화학식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, 2개의 인접하지 않은 아미노산 잔기는 Lb에 의해 연결된다. 일부 구현예에서, 하나의 링키지 Lb가 있다. 당업자에게 이해되는 바와 같이, 아미노산 잔기는 유사한 특성을 갖는 또 다른 아미노산 잔기로 대체될 수 있으며, 예를 들어 하나의 XaaH (예를 들어, Val, Leu, 등)는 XaaH (예를 들어, Leu, Ile, Ala, 등)로 대체될 수 있고, 하나의 XaaA는 또 다른 XaaA 로 대체될 수 있고, 하나의 XaaP는 또 다른 XaaP 로 대체될 수 있고, 하나의 XaaN는 또 다른 XaaN 로 대체될 수 있고, 하나의 XaaL는 또 다른 XaaL 로 대체될 수 있다.
일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 표 A-1의 임의로 치환된 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 단백질 결합 모이어티는 표 A-1의 임의로 치환된 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어 보편적인 항체 결합 모이어티는 표 A-1의 임의로 치환된 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 표 A-1로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 단백질 결합 모이어티는 표 A-1로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어 보편적인 항체 결합 모이어티는 표 A-1로부터 선택된다. 일부 구현예에서, C-말단 및/또는 N-말단은 임의로 캡핑된다 (예를 들어, C-말단의 경우 -C(O)NH2와 같이-COOH를 -C(O)N(R')2 로 전환함으로써, N-말단의 경우 CH3C(O)-와 같은 R'C(O)-를 아미노 기에 추가함으로써).
표 A-1. 예시 항체 결합 모이어티.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 본원에 기재된 항체 결합 모이어티이다. 일부 구현예에서, 단백질 결합 모이어티는 본원에 기재된 항체 결합 모이어티이다. 일부 구현예에서, 아미노산 잔기의 -COOH 및/또는 아미노 기, 예를 들어, C-말단 또는 N-말단에서의 것들은 임의로 캡핑된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, -COOH 기 (예를 들어, C-말단 -COOH)는 아미드화되고 (예를 들어, -CON(R')2, 예컨대, -C(O)NHR (예컨대, -C(O)NH2)로 변환됨), 일부 구현예에서, 아미노 기, 예를 들어 -NH2 (예컨대, N-말단 -NH2)는 R'- 또는 R'C(O)-로 캡핑된다 (예를 들어, 일부 구현예에서, -NH2를-NHR' (예컨대, -NHC(O)R, (예컨대, -NHC(O)CH3))로 변환함으로써).
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 임의로 치환된 A-1, A-2, A-3, A-4, A-5, A-6, A-7, A-8, A-9, A-10, A-11, A-12, A-13, A-14, A-15, A-16, A-17, A-18, A-19, A-20, A-21, A-22, A-23, A-24, A-25, A-26, A-27, A-28, A-29, A-30, A-31, A-32, A-33, A-34, A-35, A-36, A-37, A-38, A-39, A-40, A-41, A-42, A-43, A-44, A-45, A-46, A-47, A-48, A-49, 또는 A-50이거나 이를 포함하고, 이들 각각은 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다. 일부 구현예에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 보편적인 항체 결합 모이어티이다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 단백질 결합 모이어티 (예를 들어, 항체 결합 모이어티 (예를 들어, 보편적인 항체 결합 모이어티))는 펩티드 단위를 포함하고, 상기 펩티드 단위의 C-말단을 통해 링커 모이어티에 연결된다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 상기 펩티드 단위의 N-말단을 통해 링커 모이어티에 연결된다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 펩티드 단위의 측쇄 기를 통해 링커에 연결된다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어, 보편적인 항체 결합 모이어티는 펩티드 단위를 포함하고, 임의로 상기 펩티드 단위의 C-말단을 통한 링커 모이어티를 통해 표적 결합 모이어티에 연결된다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 단백질 결합 모이어티 (예를 들어, 항체 결합 모이어티 (예를 들어, 보편적인 항체 결합 모이어티))는 펩티드 단위를 포함하고, 임의로 상기 펩티드 단위의 N-말단을 통한 링커 모이어티를 통해 표적 결합 모이어티에 연결된다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 단백질 결합 모이어티 (예를 들어, 항체 결합 모이어티 (예를 들어, 보편적인 항체 결합 모이어티))는 펩티드 단위를 포함하고, 임의로 상기 펩티드 단위의 측쇄를 통한 링커 모이어티를 통해 표적 결합 모이어티에 연결된다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 (DCAWHLGELVWCT, (서열 번호 17))-이거나 이를 포함하고, 여기서 1 내지 5개 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 또는 5)의 아미노산 잔기는 독립적으로 및 임의로 또 다른 아미노산 잔기로 대체될 수 있고, 1 내지 5개 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 또는 5)의 아미노산 잔기는 독립적으로 및 임의로 삭제될 수 있고/있거나 1 내지 5개 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 또는 5)의 아미노산 잔기는 독립적으로 및 임의로 삽입될 수 있다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 이의 N-말단을 통해 분자의 나머지 부분에 연결된다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 이의 C-말단을 통해 분자의 나머지 부분에 연결된다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 아미노산 잔기 (예를 들어, 본 개시내용에 기재된 바와 같은 다양한 X 잔기)의 측쇄를 통해 분자의 나머지 부분에 연결된다. 일부 구현예에서, 2개의 시스테인 잔기는 이황화 결합을 형성한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 (서열 번호 18), (서열 번호 17), (서열 번호 18), 또는 (서열 번호 17), 이거나 이를 포함하고, 여기서 X는 제제 또는 화합물의 나머지 부분에 결합되는 아미노산 잔기이고, 여기서 1 내지5개 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 또는 5)의 아미노산 잔기는 독립적으로 및 임의로 또 다른 아미노산 잔기로 대체될 수 있고, 1 내지 5개 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 또는 5)의 아미노산 잔기는 독립적으로 및 임의로 삭제될 수 있고/있거나, 1 내지 5개 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 또는 5)의 아미노산 잔기는 독립적으로 및 임의로 삽입될 수 있다. 일부 구현예에서, 대체, 삭제, 및 삽입의 총 수는 10 이하이다 (예를 들어, 0, 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10 이하). 일부 구현예에서, 총 수는 0이다. 일부 구현예에서, 총 수는 1 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 2 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 3 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 4 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 5 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 6 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 7 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 8 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 9 이하이다. 일부 구현예에서, 총 수는 10 이하이다. 일부 구현예에서, 삽입은 없다. 일부 구현예에서, 삭제는 없다. 일부 구현예에서, 대체는 없다. 일부 구현예에서, X는 제제 또는 화합물의 나머지 부분에 결합되는 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, X는 -N(R')-CH(-)-C(O)-이다. 일부 구현예에서, X는 -N(R')-CH(-LLG1-)-C(O)-이다. 일부 구현예에서, X는 -N(R')-CH(-LLG1-LLG2-)-C(O)-이다. 일부 구현예에서, X는 -N(R')-CH(-LLG1-LLG2-LLG3-)-C(O)-이다. 일부 구현예에서, X는 -N(R')-CH(-LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-)-C(O)-이다.
일부 구현예에서, X는 다음 중 임의의 것의 잔기이다:
및
일부 구현예에서, X는 K이다. 일부 구현예에서, X는 D이다. 일부 구현예에서, X는 Dab의 잔기이다. 일부 구현예에서, X는 E이다.
일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티, 예를 들어, 보편적인 항체 결합 모이어티는 분자량이 예를 들어, 10000, 9000, 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000, 2000, 1500, 1000, 등 미만인 소분자 실체이거나 이를 포함한다. 적합한 이러한 항체 결합 모이어티는 소분자 Fc 바인더 모이어티, 예를 들어, US 9,745,339, US 201/30131321 등에 기재된 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 이의 상응하는 화합물이 US 9,745,339 또는 US 2013/0131321에 기재된 화합물인 구조를 가지며, 이들 각각의 화합물은 독립적으로 본원에 참조로 포함된다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티 ABT는 H-ABT가 US 9,745,339 또는 US 2013/0131321에 기재된 화합물인 구조를 가지며, 이들 각각의 화합물은 독립적으로 본원에 참조로 포함된다. 일부 구현예에서, 이러한 화합물은 항체에 결합할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 화합물은 항체의 Fc 영역에 결합할 수 있다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 다음 중 임의의 것이거나 이를 포함하고, 이들 각각은 임의로 치환된다:
또는
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 또는 중 임의의 것이거나 이를 포함하고, 이들 각각은 임의로 치환되고,여기서 R은 예를 들어, 수소, C1-C4알킬, 또는 C3-C6시클로알킬일 수 있다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 다음 중 임의의 것이거나 이를 포함한다:
또는
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 변수는 독립적으로 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, m은 4 내지 13이다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 이거나 이를 포함하고, 여기서 b는 1 내지 20이고, 각각의 다른 변수는 독립적으로 본원에 기재된 바와 같다.
일부 구현예에서, b는 4 내지 13이다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
또는 중 임의의 것이거나 이를 포함하고, 여기서 R은, 예를 들어, H 또는 C1-C4 알킬이고 R'는 예를 들어, H 또는 C1-C4알킬이다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
, 예컨대 이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
, 예컨대 이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는 이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
, 예를 들어, , 또는 중 임의의 것이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
또는
이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는
또는
이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, -NH-는 Rc 기에 결합된다. 일부 구현예에서, Rc는 R-C(O)-이다. 일부 구현예에서, Rc는 CH3C(O)-이다. 일부 구현예에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 또는 Rc-(Xaa)z-는
또는 중 임의의 것이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는 Z33 펩티드 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는 -FNMQQQRRFYEALHDPNLNEEQRNAKIKSIRDD-NH2 (서열 번호 29) 또는 이의 단편이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, Rc-(Xaa)z-는 FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNAKIKSIRDDC (서열 번호 30) 또는 이의 단편이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 또는 Rc-(Xaa)z-는 예컨대 FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNAKIKSIRDDC (서열 번호 30), RGNCAYHRGQLVWCTYH (서열 번호 31), RGNCAYHKGQLVWCTYH, RGNCKYHRGQLVWCTYH (서열 번호 32), RGNCAWHRGKLVWCTYH (서열 번호 33), RGNCAWHRGKLVWCTYH (서열 번호 34), RGNCKWHRGELVWCTYH (서열 번호 35), RGNCKWHRGQLVWCTYH (서열 번호 36), RGNCKYHLGELVWCTYH (서열 번호 37), RGNCKYHLGQLVWCTYH (서열 번호 38), DCKWHLGELVWCT (서열 번호 39), DCKYHLGELVWCT (서열 번호 40), DCKWHRGELVWCT (서열 번호 41), DCKWHLGQLVWCT (서열 번호 42), DCKYHRGELVWCT (서열 번호 43), DCKYHLGQLVWCT (서열 번호 44), DCKWHRGQLVWCT (서열 번호 45), DCKYHRGQLVWCT (서열 번호 46), FNKQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 47), FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIKDDC (서열 번호 48), FNMQCQRRFYEALHDPNLNKEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 49), FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 50), RGNCAWHLGQLVWCKYH (서열 번호 51), RGNCAWHLGELVWCKYH (서열 번호 52), RGNCAYHLGQLVWCTKH (서열 번호 53), RGNCAYHLGQLVWCTYK (서열 번호 54), RGNCAYHRGQLVWCTKH (서열 번호 55), KNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 56), FNMQCQKRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 57), FNMQCQRRFYEAKHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 58), FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRKARIRSIRDDC (서열 번호 59), FNMQCQRRFYEALHDPNLNKEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 49), FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIKDDC (서열 번호 48), FNKQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 47), FNMQCKRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 60), FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRKDC (서열 번호 61), Fc-III, FcBP-2, Fc-III-4C, (X = K 또는 R, 서열 번호 62), 등과 같은 펩티드의 모이어티이거나 이를 포함하고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 임의로 이황화 결합을 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 펩티드에서, 2개의 시스테인 잔기는 이황화 결합을 형성한다. 일부 구현예에서, 펩티드, 예컨대 Z33, FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNAKIKSIRDDC (서열 번호 30), RGNCAYHRGQLVWCTYH (서열 번호 31), RGNCKYHRGQLVWCTYH (서열 번호 33), RGNCAYHKGQLVWCTYH (서열 번호 32), RGNCAWHRGKLVWCTYH (서열 번호 34), RGNCKWHRGQLVWCTYH (서열 번호 36), RGNCKWHRGELVWCTYH (서열 번호 34), RGNCKYHLGELVWCTYH (서열 번호 37), RGNCKYHLGQLVWCTYH (서열 번호 38), DCKWHLGELVWCT (서열 번호 39), DCKYHLGELVWCT (서열 번호 40), DCKWHRGELVWCT (서열 번호 41), DCKWHLGQLVWCT (서열 번호 42), DCKYHRGELVWCT (서열 번호 43), DCKYHLGQLVWCT (서열 번호 44), DCKWHRGQLVWCT (서열 번호 45), DCKYHRGQLVWCT (서열 번호 46), FNKQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 47), FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIKDDC (서열 번호 48), FNMQCQRRFYEALHDPNLNKEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 49), FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 50), RGNCAWHLGQLVWCKYH (서열 번호 51), RGNCAWHLGELVWCKYH (서열 번호 52), RGNCAYHLGQLVWCTKH (서열 번호 53), RGNCAYHLGQLVWCTYK (서열 번호 54), RGNCAYHRGQLVWCTKH (서열 번호 55), KNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 56), FNMQCQKRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 57), FNMQCQRRFYEAKHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 58), FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRKARIRSIRDDC (서열 번호 59), FNMQCQRRFYEALHDPNLNKEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 49), FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIKDDC (서열 번호 48), FNKQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 47), FNMQCKRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 60), FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRKDC (서열 번호 61), Fc-III, FcBP-2, Fc-III-4C, (X = K 또는 R, 서열 번호 62), 등은 이의 N-말단, C-말단, 또는 (예를 들어, K의 (예를 들어, RGNCAYHKGQLVWCTYH (서열 번호 32), RGNCKYHRGQLVWCTYH (서열 번호 33), RGNCAWHRGKLVWCTYH (서열 번호 34), RGNCKWHRGELVWCTYH (서열 번호 35), RGNCKWHRGQLVWCTYH (서열 번호 36), RGNCKYHLGELVWCTYH (서열 번호 37), RGNCKYHLGQLVWCTYH (서열 번호 38), DCKWHLGELVWCT (서열 번호 39), DCKYHLGELVWCT (서열 번호 40), DCKWHRGELVWCT (서열 번호 41), DCKWHLGQLVWCT (서열 번호 42), DCKYHRGELVWCT (서열 번호 43), DCKYHLGQLVWCT (서열 번호 44), DCKWHRGQLVWCT (서열 번호 45), DCKYHRGQLVWCT (서열 번호 46), RGNCAWHLGQLVWCKYH (서열 번호 51), FNKQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 47), FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIKDDC (서열 번호 48), FNMQCQRRFYEALHDPNLNKEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 49), RGNCAWHLGELVWCKYH (서열 번호 52), RGNCAYHLGQLVWCTKH (서열 번호 53), RGNCAYHLGQLVWCTYK (서열 번호 54), RGNCAYHRGQLVWCTKH (서열 번호 55), KNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 56), FNMQCQKRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 57), FNMQCQRRFYEAKHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 58), FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRKARIRSIRDDC (서열 번호 59), FNMQCQRRFYEALHDPNLNKEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 49), FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIKDDC (서열 번호 48), FNKQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 47), FNMQCKRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRDDC (서열 번호 60), FNMQCQRRFYEALHDPNLNEEQRNARIRSIRKDC (서열 번호 61)등에서 밑줄 친 K 잔기의)) 측쇄를 통해 연결된다. 일부 구현예에서, 서열의 하나 이상의 아미노산 잔기는 본원에 기재된 바와 같이 독립적으로 및 임의로 대체되고/되거나 (예를 들어, 1 내지 5), 삭제되고/되거나 (예를 들어, 1 내지 5) 삽입된다 (예를 들어, 1 내지 5). 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 또는 Rc-(Xaa)z-는 -CXYHXXXLVWC- (서열 번호 63), -XCXYHXXXLVWC- (서열 번호 64), -CXYHXXXLVWCX- (서열 번호 65), -X0-3CXYHXXXLVWCX0-3- (서열 번호 66), -XCXYHXXXLVWCXXX- (서열 번호 67), -XXXCXYHXXXLVWCXXX- (서열 번호 66)이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 X는 독립적으로 아미노산 잔기이고, 2개의 C 잔기는 임의로 이황화 결합을 형성한다. 일부 구현예에서, X8 (H 다음의 X)는 Orn이다. 일부 구현예에서, X8는 Dab이다. 일부 구현예에서, X8는 Lys(Ac)이다. 일부 구현예에서, X8는 Orn(Ac)이다. 일부 구현예에서, X8는 Dab(Ac)이다. 일부 구현예에서, X8는 Arg이다. 일부 구현예에서, X8는 Nle이다. 일부 구현예에서, X8는 Nva이다. 일부 구현예에서, X8는 Val이다. 일부 구현예에서, X8는 Tle이다. 일부 구현예에서, X8는 Leu이다. 일부 구현예에서, X8는 Ala이다 (tBu). 일부 구현예에서, X8는 Cha이다. 일부 구현예에서, X8는 Phe이다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 또는 Rc-(Xaa)z-는 DCAWHLGELVWCT (서열 번호 17)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 단백질 제제/펩티드 제제 모이어티의 C-말단 및/또는 N-말단은 독립적으로 캡핑된다 (예를 들어, N-말단에 대해 RC(O)-, 예컨대 CH3C(O)-, C-말단에 대해 -N(R')2, 예컨대 -NH2 등). 일부 구현예에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같이, 하나의 잔기는 또 다른 잔기와의 연결을 위해 변형되거나 대체될 수 있고, 예를 들어, 일부 구현예에서, H는 -COOH 또는 이의 염 또는 활성화된 형태 (예를 들어, D)를 함유하는 측쇄를 포함하는 아미노산 잔기로 대체될 수 있다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 또는 Rc-(Xaa)z-는 (X1-3)-C-(X2)-H-(Xaa1)-G-(Xaa2)-L-V-W-C-(X1-3) (서열 번호 68)이거나 이를 포함할 수 있고, 여기서 각각의 X 및 Xaa는 독립적으로 아미노산 잔기이고 임의로 시스테인 잔기는 아니다. 일부 구현예에서, Xaa1은 R, L, L, D, E, 2-아미노 수베르산 잔기, 또는 디아미노프로피온산 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa2는 L, D, E, N, 또는 Q이다. 일부 구현예에서, Xaa1은 리신 잔기, 시스테인 잔기, 아스파르트산 잔기, 글루탐산 잔기, 2-아미노 수베르산 잔기, 또는 디아미노프로피온산 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa2는 글루탐산 잔기 또는 아스파르트산 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa1는 아르기닌 잔기 또는 류신 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa2는 리신 잔기, 글루타민 잔기, 또는 아스파르트산 잔기이다. 일부 구현예에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 또는 Rc-(Xaa)z-는 (X1-3)-C-(Xaa3)-(xaa4)-H-(Xaa1)-G-(Xaa2)-L-V-W-C-(Xaa5)-(Xaa6)-(Xaa7) (서열 번호 68)이거나 이를 포함하고, 각각의 X 및 Xaa는 독립적으로 아미노산 잔기이고 임의로 시스테인 잔기는 아니다. 일부 구현예에서, Xaa3은 알라닌 잔기 또는 리신 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa4는 트립토판 잔기 또는 티로신 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa1은 아르기닌 잔기, 류신 잔기, 리신 잔기, 아스파르트산 잔기, 글루탐산 잔기, 2-아미노 수베르산 잔기, 또는 디아미노프로피온산 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa2는 리신 잔기, 글루타민 잔기, 글루탐산 잔기, 아스파라긴 잔기, 또는 아스파르트산 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa5는 트레오닌 잔기 또는 리신 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa6은 티로신 잔기, 리신 잔기이거나 또는 없다. 일부 구현예에서, Xaa7은 히스티딘 잔기, 리신 잔기이거나 또는 없다. 일부 구현예에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 또는 Rc-(Xaa)z-는 D-C-(Xaa3)-(Xaa4)-H-(Xaa1)-G-(Xaa2)-L-V-W-C-(Xaa5)-(Xaa6)-(Xaa7) (서열 번호 69)이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 X 및 Xaa는 독립적으로 아미노산 잔기이고 임의로 시스테인 잔기가 아니다. 일부 구현예에서, Xaa3은 알라닌 잔기 또는 리신 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa4는 트립토판 잔기 또는 티로신 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa1은 아르기닌 잔기, 류신 잔기, 리신 잔기, 아스파르트산 잔기, 글루탐산 잔기, 2-아미노 수베르산 잔기 또는 디아미노프로피온산 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa2는 리신 잔기, 글루타민 잔기, 글루탐산 잔기, 아스파라긴 잔기 또는 아스파르트산 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa5는 트레오닌 잔기 또는 리신 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa6은 티로신 잔기, 리신 잔기이거나 또는 없다. 일부 구현예에서, Xaa7은 히스티딘 잔기, 리신 잔기이거나 또는 없다. 일부 구현예에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 또는 Rc-(Xaa)z-는 D-C-(Xaa3)-(Xaa4)-H-(Xaa1)-G-(Xaa2)-L-V-W-C-T (서열 번호 70)이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 X 및 Xaa는 독립적으로 아미노산 잔기이고 임의로 시스테인 잔기가 아니다. 일부 구현예에서, Xaa3은 알라닌 잔기 또는 리신 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa4는 트립토판 잔기 또는 티로신 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa1은 아르기닌 잔기, 류신 잔기, 리신 잔기, 아스파르트산 잔기, 글루탐산 잔기, 2-아미노 수베르산 잔기 또는 디아미노프로피온산 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa2는 리신 잔기, 글루타민 잔기, 글루탐산 잔기, 아스파라긴 잔기 또는 아스파르트산 잔기이다. 일부 구현예에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 또는 Rc-(Xaa)z-는 R-G-N-C-(Xaa3)-(Xaa4)-H-(Xaa1)-G-(Xaa2)-L-V-W-C-(Xaa5)- (Xaa6)-(Xaa7) (서열 번호 71)이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 X 및 Xaa는 독립적으로 아미노산 잔기이고 임의로 시스테인 잔기가 아니다. 일부 구현예에서, Xaa3은 알라닌 잔기 또는 리신 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa4는 트립토판 잔기 또는 티로신 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa1은 아르기닌 잔기, 류신 잔기, 리신 잔기, 아스파르트산 잔기, 글루탐산 잔기, 2-아미노 수베르산 잔기 또는 디아미노프로피온산 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa2는 리신 잔기, 글루타민 잔기, 글루탐산 잔기, 아스파라긴 잔기 또는 아스파르트산 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa5는 트레오닌 잔기 또는 리신 잔기이다. 일부 구현예에서, Xaa6은 티로신 잔기, 리신 잔기이거나 또는 없다. 일부 구현예에서, Xaa7은 히스티딘 잔기, 리신 잔기이거나 또는 없다. 일부 구현예에서, 이러한 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 상기 기재된 다양한 표적 결합 모이어티는 단백질 결합 모이어티이다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 항체 결합 모이어티이다. 일부 구현예에서, LG는 이러한 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, LG는 단백질 결합 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, LG는 항체 결합 모이어티이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 예를 들어 [Hui, 등, Bioconjugate Chem. 2015, 26, 1456-1460, doi: 10.1021/acs.bioconjchem.5b00275]에 기재된 바와 같은 어댑터 단백질 제제이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용에 따라 이용될 때, 어댑터 단백질은 하나 이상의 또는 모든 이점을 달성하기 위해 반응성 잔기 (예를 들어, BPA)를 필요로 하지 않는다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 트리아진 모이어티, 예를 들어, US 2009/0286693에 기재된 것이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 그의 상응하는 화합물이 US 2009/0286693에 기재된 화합물인 구조를 갖고, 이들 화합물은 독립적으로 본원에 참조로 포함된다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 ABT이다. 일부 구현예에서, ABT는 H-ABT가 US 2009/0286693에 기재된 화합물인 구조를 가지며, 그의 화합물은 독립적으로 본원에 참조로 포함된다. 일부 구현예에서, 이러한 화합물은 항체에 결합할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 화합물은 항체의 Fc 영역에 결합할 수 있다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 트리아진 모이어티, 예를 들어, [Teng, 등, A strategy for the generation of biomimetic ligands for affinity chromatography. Combinatorial synthesis and biological evaluation of an IgG binding ligand, J. Mol. Recognit. 1999;12:67-75 ("Teng")]에 기재된 것 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 이의 상응하는 화합물이 Teng에 기재된 화합물인 구조이며, 이들 화합물은 독립적으로 본원에 참조로 포함된다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티, ABT는 H-ABT가 Teng에 기재된 화합물인 구조이며, 그 화합물은 독립적으로 본원에 참고로 포함된다. 일부 구현예에서, 이러한 화합물은 항체에 결합할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 화합물은 항체의 Fc 영역에 결합할 수 있다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 트리아진 모이어티, 예를 들어, [Uttamchandani, 등, Microarrays of Tagged Combinatorial Triazine Libraries in the Discovery of Small-Molecule Ligands of Human IgG, J Comb Chem. 2004 Nov-Dec;6(6):862-8 ("Uttamchandani")]에 기재된 것이다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 이의 상응하는 화합물이 Uttamchandani에 기재된 화합물인 구조이며, 그의 화합물은 독립적으로 본원에 참조로 포함된다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티, ABT는 H-ABT가 Uttamchandani에 기재된 화합물인 구조이며, 그의 화합물은 독립적으로 본원에 참조로 포함된다. 일부 구현예에서, 이러한 화합물은 항체에 결합할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 화합물은 항체의 Fc 영역에 결합할 수 있다.
일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 단백질 A의 하나 이상의 결합 부위에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 단백질 G의 하나 이상의 결합 부위에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 단백질 L의 하나 이상의 결합 부위에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 단백질 Z의 하나 이상의 결합 부위에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 단백질 LG의 하나 이상의 결합 부위에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 단백질 LA의 하나 이상의 결합 부위에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 단백질 AG의 하나 이상의 결합 부위에 결합한다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 뉴클레오티드-결합 부위에 결합할 수 있다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 뉴클레오티드-결합 부위에 결합할 수 있는 소분자 모이어티이다. 일부 구현예에서, 소분자는 트립타민이다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티, ABT는 H-ABT가 트립타민인 구조이다.
일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 IgG에 선택적으로 결합할 수 있는 모이어티 (예를 들어, 소분자 모이어티, 펩티드 모이어티, 핵산 모이어티 등)이고, 제공된 기술에서 사용될 때 ADCC 및/또는 ADCP를 제공 및/또는 자극할 수 있다. 일부 구현예에서, 펩티드 디스플레이 기술 (예를 들어, 위상 디스플레이, 비세포 디스플레이 등)은 항체 결합 모이어티를 확인하기 위해 이용될 수 있다. 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 IgG에 결합할 수 있고 공지된 항체 바인더, 예를 들어, 단백질 A, 단백질 G, 단백질 L 등과 임의로 경쟁할 수 있는 모이어티 (예를 들어, 소분자 모이어티, 펩티드 모이어티, 핵산 모이어티 등) 이다.
당업자에 의해 인식되는 바와 같이, 다양한 특성 및 활성의 항체 (예를 들어, 상이한 항원을 인식하고 임의의 변형을 갖는 항체 등)는 본 개시내용에 기재된 항체 결합 모이어티에 의해 표적화될 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 항체는 예를 들어, 치료 목적으로 대상체에게 투여되는 항체를 포함한다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 항체 결합 모이어티는 상이한 항원에 대한 항체에 결합할 수 있고 관심 모이어티를 다양한 항체와 접합시키는데 유용하다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 메디토프 제제 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 메디토프 제제는 예를 들어, US 2019/0111149에 기재된다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 인간 IgG에 결합할 수 있다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 토끼 IgG에 결합할 수 있다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 IgG1에 결합한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 IgG2에 결합한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 IgG3에 결합한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 IgG4에 결합한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 IgG1, IgG2 및/또는 IgG4에 결합한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 결합 모이어티는 IgG1, IgG2 및 IgG4에 결합한다.
일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티 (예를 들어, 항체 결합 모이어티)는 표적 (예를 들어, 항체 결합 모이어티용 항체 제제)에 약 1 mM 내지 1 pM 이하의 Kd로 결합한다. 일부 구현예에서, Kd는 약 1 mM, 0.5 mM, 0.2 mM, 0.1 mM, 0.05 mM, 0.02 mM, 0.01 mM, 0.005 mM, 0.002 mM, 0.001 mM, 500 nM, 200 nM, 100 nM, 50 nM, 20 nM, 10 nM, 5 nM, 2 nM, 1 nM, 0.5 nM, 0.2 nM, 0.1 nM 이하이다. 일부 구현예에서, Kd는 약 1 mM 이하이다. 일부 구현예에서, Kd는 약 0.5 mM 이하이다. 일부 구현예에서, Kd는 약 0.1 mM 이하이다. 일부 구현예에서, Kd는 약 0.05 mM 이하이다. 일부 구현예에서, Kd는 약 0.01 mM 이하이다. 일부 구현예에서, Kd는 약 0.005 mM 이하이다. 일부 구현예에서, Kd는 약 0.001 mM 이하이다. 일부 구현예에서, Kd는 약 500 nM 이하이다. 일부 구현예에서, Kd는 약 200 nM 이하이다. 일부 구현예에서, Kd는 약 100 nM 이하이다. 일부 구현예에서, Kd는 약 50 nM 이하이다. 일부 구현예에서, Kd는 약 20 nM 이하이다. 일부 구현예에서, Kd는 약 10 nM 이하이다. 일부 구현예에서, Kd는 약 5 nM 이하이다. 일부 구현예에서, Kd는 약 2 nM 이하이다. 일부 구현예에서, Kd는 약 1 nM 이하이다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 항체 결합 모이어티는 IgG 항체 제제에 본원에 기재된 Kd로 결합한다.
아미노산
일부 구현예에서, 제공된 화합물 및 제제는, 예를 들어 항체 결합 모이어티, 링커 모이어티 등에서 하나 이상의 아미노산 모이어티를 포함할 수 있다. 아미노산 모이어티는 천연 아미노산 또는 비천연 아미노산의 모이어티일 수 있다. 일부 구현예에서, 아미노산은 화학식 A-I의 구조 또는 이의 염을 갖고
화학식 A-I에서,
각각의 Ra1, Ra2 및 Ra3는 독립적으로 -La-R' 또는 아미노산 측쇄이고,
각각의 La1 및 La2는 독립적으로 La이고,
각각의 La 는 독립적으로 공유 결합이거나, C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택되는 임의로 치환된 2가 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, 또는 -C(O)O-로 대체되고;
각각의 -Cy-는 독립적으로 임의로 치환된 2가 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭 기이고, 여기서 각각의 모노시클릭 고리는 C3-20 시클로지방족 고리, C6-20 아릴 고리, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원 헤테로아릴 고리, 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 20원 헤테로시클릴 고리로부터 독립적으로 선택되고,
각각의 R'는 독립적으로 -R, -C(O)R, -CO2R, 또는 -SO2R이고,
각각의 R은 독립적으로 -H이거나, C1-30 지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-30 헤테로지방족, C6-30 아릴, C6-30 아릴지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C6-30 아릴헤테로지방족, 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴, 및 산소, 질소, 황, 인 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 헤테로시클릴로부터 선택되는 임의로 치환된 기이거나 또는,
2개의 R 기는 임의로 및 독립적으로 함께 공유 결합을 형성하거나 또는,
동일한 원자 상의 2개 이상의 R 기는 임의로 및 독립적으로 상기 원자와 함께, 상기 원자 외에 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 3 내지 30원, 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하거나 또는,
2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R 기는 임의로 및 독립적으로 이들의 개재 원자와 함께, 상기 개재 원자 외에 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 3 내지 30원, 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성한다.
일부 구현예에서, 예를 들어 화학식 A-I의 구조를 갖는 아미노산의 아미노산 잔기는 -N(Ra1)-La1-C(Ra2)(Ra3)-La2-CO-의 구조를 갖는다. 일부 구현예에서, 펩티드 내 각각의 아미노산 잔기는 독립적으로 -N(Ra1)-La1-C(Ra2)(Ra3)-La2-CO-의 구조를 갖는다.
일부 구현예에서, 본 개시내용은 화학식 A-I의 아미노산의 유도체 또는 이의 염을 제공한다. 일부 구현예에서, 유도체는 에스테르이다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 NH(Ra1)-La1-C(Ra2)(Ra3)-La2-COORCT의 화합물 또는 이의 염을 제공하고, 여기서 RCT는 R'이고 각각의 다른 변수는 독립적으로 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, RCT는 R이다. 일부 구현예에서, RCT는 임의로 치환된 지방족이다. 일부 구현예에서, RCT는 t-부틸이다.
일부 구현예에서, La1는 공유 결합이다. 일부 구현예에서, 화학식 A-I의 화합물은 NH(Ra1)-C(Ra2)(Ra3)-La2-COOH의 구조이다. 일부 구현예에서, La2는 -CH2SCH2-이다.
일부 구현예에서, La2는 공유 결합이다. 일부 구현예에서, 화학식 A-I의 화합물은 NH(Ra1)-La1-C(Ra2)(Ra3)-COO의 구조이다. 일부 구현예에서, 아미노산 잔기는 -N(Ra1)-La1-C(Ra2)(Ra3)-CO-의 구조를 갖는다. 일부 구현예에서, La1는 -CH2CH2S-이다. 일부 구현예에서, La1는 -CH2CH2S-이고, 여기서, 상기 CH2는 NH(Ra1)에 결합된다.
일부 구현예에서, La1는 공유 결합이고 La2는 공유 결합이다. 일부 구현예에서, 화학식 A-I의 화합물은 NH(Ra1)-C(Ra2)(Ra3)-COOH; NH(Ra1)-CH(Ra2)-COOH; NH(Ra1)-CH(Ra3)-COOH; NH2-CH(Ra2)-COOH; NH2-CH(Ra3)-COOH; -N(Ra1)-C(Ra2)(Ra3)-CO-; N(Ra1)-CH(Ra2)-CO-; -N(Ra1)-CH(Ra3)-CO-; -NH-CH(Ra2)-CO-; 또는 -NH-CH(Ra3)-CO-의 구조이다.
일부 구현예에서, La는 공유 결합이거나, La는 임의로 치환된 C1-6 2가 지방족이거나, La는 임의로 치환된 C1-6 알킬렌이거나, La는 -CH2-; La는 -CH2CH2-이거나, 또는 La는 -CH2CH2CH2-이다.
일부 구현예에서, La는 2가 임의로 치환된 C1-20 지방족이고, 여기서 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 -C(O)-, -N(R')-, -Cy-, 및/또는 -O-로 대체된다. 일부 구현예에서, La는 2가 임의로 치환된 C1-20 지방족이고, 여기서 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 -C(O)N(R')-, -Cy-, 및 -O-로 대체된다. 일부 구현예에서, La는 2가 임의로 치환된 C1-20 지방족이고, 여기서 2개 이상의 메틸렌 단위는 다른 임의의 대체 외에 독립적으로 -C(O)N(R')-, 및 -Cy-로 대체된다. 일부 구현예에서, -Cy-는 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, -Cy-는 본원에 기재된 바와 같이 전자 흡인기로 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, -Cy-는 하나 이상의 -F로 치환된다. 일부 구현예에서, -Cy-는 임의로 치환된 1,3-페닐렌이다. 일부 구현예에서, -Cy-는 임의로 치환된 1,4-페닐렌이다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, R'는 R이다. 일부 구현예에서, Ra1은 R이고, 여기서 R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, Ra1은 R이고, 여기서 R은 메틸이다. 일부 구현예에서, Ra2는 R이고, 여기서 R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, Ra3는 R이고, 여기서 R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, 각각의 Ra1, Ra2, 및 Ra3는 독립적으로 R이고, 여기서 R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다.
일부 구현예에서, Ra1은 수소이다. 일부 구현예에서, Ra1은 보호기이다. 일부 구현예에서, Ra1은 -Fmoc이다. 일부 구현예에서, Ra1은 -Dde이다.
일부 구현예에서, 각각의 Ra1, Ra2 및 Ra3는 독립적으로 -La-R'이다.
일부 구현예에서, Ra2는 수소이다. 일부 구현예에서, Ra3는 수소이다. 일부 구현예에서, Ra1은 수소이고, Ra2 및 Ra3 중 적어도 하나는 수소이다. 일부 구현예에서, Ra1은 수소이고, Ra2 및 Ra3 중 하나는 수소이고 다른 하나는 수소가 아니다. 일부 구현예에서, Ra2는 -La-R이고 Ra3는 -H이다. 일부 구현예에서, Ra3는 -La-R이고 Ra2는 -H이다. 일부 구현예에서, Ra2는 -CH2-R이고 Ra3는 -H이다. 일부 구현예에서, Ra3는 -CH2-R이고 Ra2는 -H이다. 일부 구현예에서, Ra2는 R이고 Ra3는 -H이다. 일부 구현예에서, Ra3는 R이고 Ra2는 -H이다.
일부 구현예에서, Ra2는 -La-R이고, 여기서 R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, Ra2는 -La-R이고, 여기서 R은 C3-30 시클로지방족, C5-30 아릴, 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴, 및 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 헤테로시클릴로부터 선택되는 임의로 치환된 기이다. 일부 구현예에서, Ra2는 -La-R이고, 여기서 R은 C6-30 아릴 및 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴로부터 선택되는 임의로 치환된 기이다. 일부 구현예에서, Ra2는 아미노산의 측쇄이다. 일부 구현예에서, Ra2는 표준 아미노산의 측쇄이다.
일부 구현예에서, Ra3는 -La-R이고, 여기서 R은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, Ra3는 -La-R이고, 여기서 R은 C3-30 시클로지방족, C5-30 아릴, 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴, 및 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 헤테로시클릴로부터 선택되는 임의로 치환된 기이다. 일부 구현예에서, Ra3는 -La-R이고, 여기서 R은 C6-30 아릴 및 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴로부터 선택되는 임의로 치환된 기이다. 일부 구현예에서, Ra3는 아미노산의 측쇄이다. 일부 구현예에서, Ra3는 표준 아미노산의 측쇄이다.
일부 구현예에서, 하나 이상의 Ra2 및 Ra3는 -H이다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 Ra2 및 Ra3는 -La-R이고, 여기서 La는 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, La는 공유 결합이 아니다. 일부 구현예에서, La의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 및 임의로 본원에 기재된 바와 같이, 예를 들어, -C(O)-, -N(R')-, -O-, -C(O)-N(R')- 및/또는 -Cy- 등으로 대체된다. 일부 구현예에서, La는 -C(O)-, -N(R')- 및 -Cy-이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, La는 -C(O)N(R')- 및 -Cy-이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같이, -Cy-는 치환되고 하나 이상의 치환기는 독립적으로 전자 흡인 기이다.
일부 구현예에서, 아미노산 측쇄는 Ra2 또는 Ra3이다. 일부 구현예에서, 아미노산 측쇄는 -LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-H이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 아미노산 측쇄는 -LLG2-LLG3-LLG4-H이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 아미노산 측쇄는 -LLG3-LLG4-H이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 아미노산 측쇄는 -LLG4-H이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 측쇄는 이다. 일부 구현예에서, 이러한 측쇄는 이다. 일부 구현예에서, 이러한 측쇄는 이다. 일부 구현예에서, 이러한 측쇄는 이다.
일부 구현예에서, R은 임의로 치환된 C1-6 지방족이다. 일부 구현예에서, R은 임의로 치환된 C1-6 알킬이다. 일부 구현예에서, R은 -CH3이다. 일부 구현예에서, R은 임의로 치환된 펜틸이다. 일부 구현예에서, R은 n-펜틸이다.
일부 구현예에서, R은 시클릭 기이다. 일부 구현예에서, R은 임의로 치환된 C3-30 시클로지방족기이다. 일부 구현예에서, R은 시클로프로필이다.
일부 구현예에서, R은 임의로 치환된 방향족기이고, 화학식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기는 XaaA이다. 일부 구현예에서, Ra2 또는 Ra3는 -CH2-R이고, 여기서 R은 임의로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴기이다. 일부 구현예에서, R은 임의로 치환된 페닐이다. 일부 구현예에서, R은 페닐이다. 일부 구현예에서, R은 임의로 치환된 페닐이다. 일부 구현예에서, R은 4-트리플루오로메틸페닐이다. 일부 구현예에서, R은 4-페닐페닐이다. 일부 구현예에서, R은 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 5 내지 30원 헤테로아릴이다. 일부 구현예에서, R은 산소, 질소, 및 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 5 내지 14원 헤테로아릴이다. 일부 구현예에서, R은 이다. 일부 구현예에서, R은 임의로 치환된 피리디닐이다. 일부 구현예에서, R은 1-피리디닐이다. 일부 구현예에서, R은 2-피리디닐이다. 일부 구현예에서, R은 3-피리디닐이다. 일부 구현예에서, R은 이다.
일부 구현예에서, R'는-COOH이다. 일부 구현예에서, 화학식 A-I의 아미노산의 화합물 및 아미노산 잔기는 XaaN이다.
일부 구현예에서, R'는-NH2이다. 일부 구현예에서, 화학식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기의 화합물은 XaaP이다.
일부 구현예에서, Ra2 또는 Ra3는 R이고, 여기서 R은 본 개시내용에 기재된 바와 같은 C1-20 지방족이다. 일부 구현예에서, 화학식 A-I의 아미노산의 아미노산 잔기의 화합물은 XaaH이다. 일부 구현예에서, R은 -CH3이다. 일부 구현예에서, R은 에틸이다. 일부 구현예에서, R은 프로필이다. 일부 구현예에서, R은 n-프로필이다. 일부 구현예에서, R은 부틸이다. 일부 구현예에서, R은 n-부틸이다. 일부 구현예에서, R은 펜틸이다. 일부 구현예에서, R은 n-펜틸이다. 일부 구현예에서, R은 시클로프로필이다.
일부 구현예에서, Ra1, Ra2, 및 Ra3 중 둘 이상은 R이고 함께 본 개시내용에 기재된 바와 같은 임의로 치환된 고리를 형성한다.
일부 구현예에서, Ra1 및, Ra2와 Ra3 중 하나는 R이고 함께 Ra1이 결합된 질소 원자 외에 추가의 고리 헤테로원자를 갖지 않는 임의로 치환된 3 내지 6원 고리를 형성한다. 일부 구현예에서, 형성된 고리는 프롤린에서와 같은 5-원 고리이다.
일부 구현예에서, Ra2 및 Ra3는 R이고 함께 본 개시내용에 기재된 바와 같은 임의로 치환된 3 내지 6원 고리를 형성한다. 일부 구현예에서, Ra2 및 Ra3는 R이고 함께 하나 이상의 질소 고리 원자를 갖는 임의로 치환된 3 내지 6원 고리를 형성한다. 일부 구현예에서, Ra2 및 Ra3는 R이고 함께 질소 원자인 1개 이하의 고리 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 3 내지 6원 고리를 형성한다. 일부 구현예에서, 고리는 포화 고리이다.
일부 구현예에서, 아미노산은 천연 아미노산이다. 일부 구현예에서, 아미노산은 비천연 아미노산이다. 일부 구현예에서, 아미노산은 알파-아미노산이다. 일부 구현예에서, 아미노산은 베타-아미노산이다. 일부 구현예에서, 화학식 A-I의 화합물은 천연 아미노산이다. 일부 구현예에서, 화학식 A-I의 화합물은 비천연 아미노산이다.
일부 구현예에서, 아미노산은 소수성 측쇄를 포함한다. 일부 구현예에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 A, V, I, L, M, F, Y 또는 W이다. 일부 구현예에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 A, V, I, L, M, 또는 F이다. 일부 구현예에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 A, V, I, L, 또는 M이다. 일부 구현예에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 A, V, I, 또는 L이다. 일부 구현예에서, 소수성 측쇄는 R이고, 여기서 R은 C1-10 지방족이다. 일부 구현예에서, R은 C1-10 알킬이다. 일부 구현예에서, R은 메틸이다. 일부 구현예에서, R은 에틸이다. 일부 구현예에서, R은 프로필이다. 일부 구현예에서, R은 부틸이다. 일부 구현예에서, R은 펜틸이다. 일부 구현예에서, R은n-펜틸이다. 일부 구현예에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 NH2CH(CH2CH2CH2CH2CH3)COOH이다. 일부 구현예에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 (S)-NH2CH(CH2CH2CH2CH2CH3)COOH이다. 일부 구현예에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 (R)-NH2CH(CH2CH2CH2CH2CH3)COOH이다. 일부 구현예에서, 소수성 측쇄는 -CH2R이고, 여기서 R은 임의로 치환된 페닐이다. 일부 구현예에서, R은 페닐이다. 일부 구현예에서, R은 하나 이상의 탄화수소 기로 치환된 페닐이다. 일부 구현예에서, R은 4-페닐페닐이다. 일부 구현예에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 NH2CH(CH2-4-페닐페닐)COOH이다. 일부 구현예에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 (S)-NH2CH(CH2-4-페닐페닐)COOH이다. 일부 구현예에서, 소수성 측쇄를 갖는 아미노산은 (R)-NH2CH(CH2-4-페닐페닐)COOH이다.
일부 구현예에서, 아미노산은 본원에 기재된 바와 같이 (예를 들어, 생리학적 pH에서) 양전하를 띤 측쇄를 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노산은 측쇄에 염기성 질소를 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노산은 Arg, His 또는 Lys이다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노산은 Arg이다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노산은 His이다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노산은 Lys이다.
일부 구현예에서, 아미노산은 본원에 기재된 바와 같이 (예를 들어, 생리학적 pH에서) 음전하를 띤 측쇄를 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노산은 그의 측쇄에 -COOH를 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노산은 Asp이다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노산은 Glu이다.
일부 구현예에서, 아미노산은 본원에 기재된 바와 같은 방향족기를 포함하는 측쇄를 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노산은 Phe, Tyr, Trp, 또는 His이다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노산은 Phe이다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노산은 Tyr이다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노산은 Trp이다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노산은 His이다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노산은 NH2-CH(CH2-4-페닐페닐)-COOH이다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노산은 (S)-NH2-CH(CH2-4-페닐페닐)-COOH이다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노산은 (R)-NH2-CH(CH2-4-페닐페닐)-COOH이다.
일부 구현예에서, 아미노산은 또는 이의 염이다. 일부 구현예에서, 아미노산은 또는 이의 염이다. 일부 구현예에서, 아미노산은 또는 이의 염이다. 일부 구현예에서, 아미노산은 또는 이의 염이다. 일부 구현예에서, 아미노산은 또는 이의 염이다. 일부 구현예에서, 아미노산은 또는 이의 염이다. 일부 구현예에서, 아미노산은 또는 이의 염이다. 일부 구현예에서, 아미노산은 또는 이의 염이다. 일부 구현예에서, 제공되는 화합물은 이다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 본 개시내용에 기재된 하나 이상의 아미노산 잔기를 포함하는 폴리펩티드 제제를 제공한다.
반응기
일부 구현예에서, 제공된 화합물, 예를 들어, 반응 파트너로서 유용한 것은 반응기 (예를 들어, RG)를 포함한다. 본원에 예시된 바와 같이, 많은 구현예에서, 제공된 화합물에서 반응기 (예를 들어, RG)는 제1 기 (예를 들어, LG) 및 관심 모이어티 (예를 들어, MOI) 사이에 위치하고, 링커를 통해 임의로 및 독립적으로 제1 기 및 관심 모이어티에 연결된다. 일부 구현예에서, RG는 본원에 기재된 바와 같은 반응기이다.
일부 구현예에서, 본원에 입증된 바와 같이, 표적 결합 모이어티를 포함하지 않는 화합물에서 활용될 때 반응기는 천천히 반응하고, 낮은 수준의 표적 제제와 관심 모이어티의 접합, 일부 구현예에서, 실질적으로 표적 제제와 관심 모이어티의 접합이 없음을 제공한다. 본원에 입증된 바와 같이, 동일한 화합물에서, 예를 들어 화학식 R-I의 화합물 또는 이의 염에서와 같이 반응기와 표적 결합 모이어티의 조합은 무엇보다도 반응기와 표적 제제 사이의 반응을 촉진하고/하거나, 반응 효율을 향상시키고/거나, 부반응을 감소시키고/거나, 반응 선택성을 향상시킬 수 있다 (예를 들어, 표적 제제와 관심 모이어티의 접합이 발생하는 표적 부위의 관점에서).
제공된 화합물 내 반응기는 표적 제제 내 다양한 유형의 기와 반응할 수 있다. 일부 구현예에서, 제공된 화합물 내 반응기는 표적 제제의 아미노기, 예를 들어 단백질의 리신 잔기의 측쇄 상의 -NH2 기와 선택적으로 반응한다. 일부 구현예에서, 제공된 화합물, 예를 들어 화학식 R-I의 것 또는 이의 염에서 활용될 때 반응기는 표적 제제의 특정 부위, 예를 들어 본원의 실시예에 나타낸 바와 같이 IgG1에 대해 K246, K248, K288, K290, K317 등, IgG2에 대해 K251, K 253 등, IgG4에 대해 K239, K241 등 중 하나 이상과 선택적으로 반응한다. 일부 구현예에서, 부위는 항체 중쇄의 K246 또는 K248이다. 일부 구현예에서, 부위는 항체 중쇄의 K246 및/또는 K248이다. 일부 구현예에서, 부위는 항체 중쇄의 K246이다. 일부 구현예에서, 부위는 항체 중쇄의 K248이다. 일부 구현예에서, 부위는 항체 중쇄의 K288 또는 K290이다. 일부 구현예에서, 부위는 항체 중쇄의 K288이다. 일부 구현예에서, 부위는 항체 중쇄의 K290이다. 일부 구현예에서, 부위는 K317이다. 일부 구현예에서, 부위는 항체 중쇄의 K414이다. 일부 구현예에서, 부위는 항체 경쇄의 K185이다. 일부 구현예에서, 부위는 항체 경쇄의 K187이다. 일부 구현예에서, 부위는 IgG2 중쇄의 K251 및/또는 K253이다. 일부 구현예에서, 부위는 IgG2 중쇄의 K251이다. 일부 구현예에서, 부위는 IgG2 중쇄의 K253이다. 일부 구현예에서, 부위는 IgG4 중쇄의 K239 및/또는 K241이다. 일부 구현예에서, 부위는 IgG4 중쇄의 K239이다. 일부 구현예에서, 부위는 IgG4 중쇄의 K241이다. 일부 구현예에서, 접합은 경쇄 부위보다 하나 이상의 중쇄 부위에서 선택적으로 발생한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티가 없는 기술의 경우, 접합은 중쇄 부위보다 경쇄 부위에서 더 많이 발생한다 (예를 들어, 도 15 참조).
일부 구현예에서, 반응기, 예를 들어, RG는 에스테르 기이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 반응기, 예를 들어, RG는 친전자성기, 예를 들어 마이클 수용체(Michael acceptor)이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 반응기, 예를 들어, RG는 -LRG1-LRG2-이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 LRG1 및 LRG2는 독립적으로 본원에 기재된 바와 같은 L이다. 일부 구현예에서, 반응기, 예를 들어, RG는 -LLG4-LRG1-LRG2-이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 변수는 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, 반응기, 예를 들어, RG는 -LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 변수는 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, 반응기, 예를 들어, RG는 -LLG2-LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 변수는 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, 반응기, 예를 들어, RG는 -LLG4-LRG2-이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 변수는 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, 반응기, 예를 들어, RG는 -LLG3-LLG4-LRG2-이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 변수는 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, 반응기, 예를 들어, RG는 -LLG2-LLG3-LLG4-LRG2-이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 변수는 본원에 기재된 바와 같다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같이, LLG4는 -O-이다. 일부 구현예에서, LLG4는 -N(R)-이다. 일부 구현예에서, LLG4는 -NH-이다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같이, LLG3는 임의로 치환된 아릴 고리이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, LLG3는 페닐 고리이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 아릴 또는 페닐 고리는 치환된다. 일부 구현예에서, 치환기는 본원에 기재된 바와 같은 전자 흡인기, 예를 들어, -NO2, -F 등이다.
일부 구현예에서, LRG1은 공유 결합이다. 일부 구현예에서, LRG1은 공유 결합이 아니다. 일부 구현예에서, LRG1은 -S(O)2-이다.
일부 구현예에서, LRG2는 -C(O)-이다. 일부 구현예에서, 반응기는 -LLG4-C(O)-이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 변수는 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, 반응기는 -LLG3-LLG4-C(O)-이거나 이를 포함하고 여기서 각각의 변수는 본원에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, 반응기는 -LLG2-LLG3-LLG4-C(O)-이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 변수는 본원에 기재된 바와 같다.
일부 구현예에서, LRG2는 -LRG3-C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4-이고, 여기서 각각의 RRG1, RRG2, RRG3 및 RRG4는 독립적으로 -L-R'이고, LRG3는 -C(O)-, -C(O)O-, -C(O)N(R')-, -S(O)-, -S(O)2-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, 또는 -P(O)(N(R')2)-이다. 일부 구현예에서, 각각의RRG1, RRG2, RRG3 및 RRG4는 독립적으로 R'이다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 RRG1, RRG2, RRG3 및 RRG4는 독립적으로 -H이다. 일부 구현예에서, LRG3는 -C(O)-이다. 일부 구현예에서, LRG3는 -C(O)O-이다. 일부 구현예에서, LRG3의 -O-, -N(R')- 등은 LPM에 결합된다.
일부 구현예에서, RRG1은 -H이다. 일부 구현예에서, RRG3는 -H이다.
일부 구현예에서, LRG2는 임의로 치환된 -LRG3-C(=CHRRG2)-CHRRG4-이고, 여기서 각각의 변수는 본원에 기재된 바와 같다.
일부 구현예에서, RRG2 및 RRG4는 이들의 개재 원자와 함께 본원에 기재된 바와 같이 임의로 치환된 고리를 형성한다. 일부 구현예에서, 형성된 고리는 0 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 3 내지 10원 모노시클릭 또는 바이시클릭 고리이다. 일부 구현예에서, 형성된 고리는 임의로 치환된 3 내지 10원 지환족 고리이다. 일부 구현예에서, 형성된 고리는 임의로 치환된 3 내지 8원 지환족 고리이다. 일부 구현예에서, 형성된 고리는 임의로 치환된 5 내지 8원 지환족 고리이다. 일부 구현예에서, 형성된 고리는 임의로 치환된 5원 지환족 고리이다. 일부 구현예에서, 형성된 고리는 임의로 치환된 6원 지환족 고리이다. 일부 구현예에서, 형성된 고리는 임의로 치환된 7원 지환족 고리이다. 일부 구현예에서, 형성된 고리는 치환된다. 일부 구현예에서, 형성된 고리는 치환되지 않는다. 일부 구현예에서, 형성된 고리는 C(=CHRRG2) 또는 C(=CRRG1RRG2) 내 이중 결합 외에 추가적인 불포화를 함유하지 않는다.
일부 구현예에서, -C(=CHRRG2)-CHRRG4 또는 -C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4는 임의로 치환된 이다. 일부 구현예에서, -C(=CHRRG2)-CHRRG4 또는 -C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4는 이다. 일부 구현예에서, -C(=CHRRG2)-CHRRG4-LRG3- 또는 -C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4-LRG3-는 임의로 치환된 이다. 일부 구현예에서, -C(=CHRRG2)-CHRRG4-LRG3- 또는 -C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4-LRG3-는 이다. 일부 구현예에서, -LRG1-C(=CHRRG2)-CHRRG4-LRG3- 또는 -LRG1-C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4-LRG3-는 임의로 치환된 이다. 일부 구현예에서, -LRG1-C(=CHRRG2)-CHRRG4-LRG3- 또는 -LRG1-C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4-LRG3-는 임의로 치환된 이다.
일부 구현예에서, 반응기는 하기 표로부터 선택되는 구조이다. 일부 구현예에서, -LLG2-LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-는 하기 표로부터 선택되는 구조이다. 일부 구현예에서, -LLG2-LLG3-LLG4-RG-눈 하기 표로부터 선택되는 구조이다.
표 RG-1. 예시로서의 특정 구조.
및
일부 구현예에서, -LLG4-LRG2-는 -O-C(O)-이다. 일부 구현예에서, -LLG4-LRG2-는 -S-C(O)-이다. 일부 구현예에서, -LLG4-LRG1-LRG2-는 -S-C(O)-이다.
일부 구현예에서, -LLG4-LRG2-는 -N(-)-C(O)-이고, 여기서 N은 임의로 치환된 헤테로아릴 고리의 고리 원자이다. 일부 구현예에서, -LLG4-LRG2-는 -N(-)-C(O)-이고, 여기서 N은 임의로 치환된 헤테로아릴 고리이거나 이를 포함하는 LLG4의 고리 원자이다. 일부 구현예에서, -LLG4-LRG2-는 -N(-)-C(O)-O-이고, 여기서 N은 임의로 치환된 헤테로아릴 고리이거나 이를 포함하는 LLG4의 고리 원자이다.
일부 구현예에서, LRG2는 임의로 치환된 -CH2-C(O)-이고, 여기서 -CH2-는 표적 결합 모이어티를 포함하거나 이에 연결된 전자 흡인기에 결합된다. 일부 구현예에서, LRG2는 표적 결합 모이어티를 포함하거나 이에 연결된 전자 흡인기에 결합되는 임의로 치환된 -CH2-이다. 일부 구현예에서, LRG1은 전자 흡인기이다. 일부 구현예에서, LRG1은 -C(O)-이다. 일부 구현예에서, LRG1은 -S(O)-이다. 일부 구현예에서, LRG1은 -S(O)2-이다. 일부 구현예에서, LRG1은 -P(O(OR)-이다. 일부 구현예에서, LRG1은 -P(O(SR)-이다. 일부 구현예에서, LRG1은 -P(O(N(R)2)-이다. 일부 구현예에서, LRG1은 -OP(O(OR)-이다. 일부 구현예에서, LRG1은 -OP(O(SR)-이다. 일부 구현예에서, LRG1은 -OP(O(N(R)2)-이다.
일부 구현예에서, LRG2는 임의로 치환된 -CH2-C(O)-이고, 여기서 -CH2-는 표적 결합 모이어티를 포함하거나 이에 연결된 이탈기에 결합된다. 일부 구현예에서, LRG2는 표적 결합 모이어티를 포함하거나 이에 연결된 이탈기에 결합된 임의로 치환된 -CH2-이다. 일부 구현예에서, LRG1은 -O-C(O)-이다. 일부 구현예에서, LRG1은 -OS(O)2-이다. 일부 구현예에서, LRG1은 -OP(O(OR)-이다. 일부 구현예에서, LRG1은 -OP(O(SR)-이다. 일부 구현예에서, LRG1은 -OP(O(N(R)2)-이다.
일부 구현예에서, 반응기는 표적 제제의 아미노 기와 반응한다. 일부 구현예에서, 아미노 기는 리신 잔기의 측쇄의 -NH2이다.
일부 구현예에서, 표적 제제는 단백질 제제이다. 일부 구현예에서, 표적 제제는 항체 제제이다. 일부 구현예에서, 반응기는 이러한 단백질 또는 항체 제제의 아미노산 잔기와 반응한다. 일부 구현예에서, 아미노산 잔기는 리신 잔기이다. 일부 구현예에서, 반응기는 리신 잔기의 측쇄의 -NH2와 반응한다. 일부 구현예에서, 반응기는 -C(O)-O-이거나 이를 포함하고, 이는 (예를 들어, 리신 잔기의 측쇄의) -NH2와 반응하고, 상기 -NH2를 갖는 아미드 기 -C(O)-O-를 형성한다.
링커 모이어티
일부 구현예에서, 모이어티는 임의로 링커 모이어티를 통해 서로 연결된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 반응기, 예를 들어, RG는 관심 모이어티, 예를 들어, MOI에 링커, 예를 들어, LRM을 통해 연결된다. 일부 구현예에서, 모이어티, 예를 들어, LG는 또한 다양한 부분을 연결하기 위해 하나 이상의 링커, 예를 들어, LLG1, LLG2, LLG3, LLG4 등을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, LLG는 본원에 기재된 링커 모이어티이다. 일부 구현예에서, LLG1은 본원에 기재된 링커 모이어티이다. 일부 구현예에서, LLG2는 본원에 기재된 링커 모이어티이다. 일부 구현예에서, LLG3는 본원에 기재된 링커 모이어티이다. 일부 구현예에서, LLG4는 본원에 기재된 링커 모이어티이다. 일부 구현예에서, LRM은 본원에 기재된 링커 모이어티이다. 일부 구현예에서, LPM은 본원에 기재된 바와 같은 L이다. 일부 구현예에서, LPM은 본원에 기재된 링커 모이어티이다. 일부 구현예에서, LPM은 본원에 기재된 바와 같은 L이다.
다양한 유형의 및/또는 다양한 목적을 위한 링커 모이어티, 예를 들어 항체 약물 접합체 등에 활용되는 것들이 본 개시내용에 따라 활용될 수 있다.
링커 모이어티는 이들이 어떻게 사용되는지에 따라 2가 또는 다가일 수 있다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 2가이다. 일부 구현예에서, 링커는 다가이고 2개 이상의 모이어티를 연결한다.
일부 구현예에서, 링커 모이어티, 예를 들어, Lz (여기서 z는 윗첨자 텍스트를 나타냄, 예를 들어, LPM, LRM, LLG, LLG1 등)는 L이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, L은 공유 결합, 또는 하나 이상의 지방족, 아릴, 1 내지 20개의 헤테로 원자를 갖는 헤테로지방족, 1내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로방향족, 또는 이들의 임의의 조합을 포함하는 2가 또는 다가 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C1-100 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 C1-6 알킬렌, C1-6 알케닐렌, 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 2가 C1-6 헤테로지방족 기, , -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기, 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-으로 대체되고, 여기서 n은 1내지 20이다. 일부 구현예에서, 각각의 아미노산 잔기는 독립적으로 화학식 A-I의 구조 또는 이의 염을 갖는 아미노산의 잔기이다. 일부 구현예에서, 각각의 아미노산 잔기는 독립적으로 -N(Ra1)-La1-C(Ra2)(Ra3)-La2-CO-의 구조 또는 이의 염을 갖는다.
일부 구현예에서, L은 2가이다. 일부 구현예에서, L은 공유 결합이다.
일부 구현예에서, L은 2가, 또는 C1-100 지방족 및 1 내지 50개의 헤테로원자를 갖는 C1-100 헤테로지방족으로부터 선택되는 임의로 치환된 선형 또는 분지형 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 C1-6 알킬렌, C1-6 알케닐렌, 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 2가 C1-6 헤테로지방족 기, , -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 대체된다.
일부 구현예에서, L은 2가이거나 또는 C1-20 지방족 및 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-20 헤테로지방족으로부터 선택되는 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 C1-6 알킬렌, C1-6 알케닐렌, 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 2가 C1-6 헤테로지방족기, , -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-으로 대체된다.
일부 구현예에서, L은 2가이거나 또는 C1-20 지방족으로부터 선택되는 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 , -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-으로 대체된다.
일부 구현예에서, L은 2가이거나 또는 C1-20 지방족으로부터 선택되는 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 , -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, 아미노산 잔기 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-으로 대체된다.
일부 구현예에서, L은 2가이거나 또는 C1-20 지방족으로부터 선택되는 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 , -Cy-, -C(R')2-, -O-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, 아미노산 잔기 또는 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-으로 대체된다.
일부 구현예에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L, LPM, LRM 등은 산성기, 예를 들어, -S(O)2OH를 포함한다.
일부 구현예에서, L은 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, L은 -[(-O-CH2-CH2-)n]-이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, L은 -[(-CH2-CH2-O)6]-CH2-CH2-이다. 일부 구현예에서, L은 -[(-CH2-CH2-O)8]-CH2-CH2-이다. 일부 구현예에서, -CH2-CH2-O-는 -CH2-에서 표적 결합 모이어티에 결합된다. 일부 구현예에서, -CH2-CH2-O-는 -CH2-에서 관심 모이어티에 결합된다. 일부 구현예에서, LPM은 본원에 기재된 바와 같은 그러한 L이다. 일부 구현예에서, LRM은 본원에 기재된 바와 같은 그러한 L이다.
일부 구현예에서, 링커 모이어티는 3가 또는 다가이다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 본원에 기재된 바와 같은 L이고, L은 3가 또는 다가이다. 일부 구현예에서, L은 3가이다. 예를 들어, 일부 구현예에서, L은 -CH2-N(-CH2-)-C(O)-이다.
일부 구현예에서, L은 생물학적 직교 또는 효소 반응 산물 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, L은 임의로 치환된 트리아졸 모이어티 (임의로 바이시클릭 또는 폴리시클릭 고리 시스템의 일부임)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, L은 LPXTG이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, L은 LPETG이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, L은 LPXT(G)n이거나 이를 포함하고, 여기서 n은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 일부 구현예에서, L은 LPET(G)n이거나 이를 포함하고, 여기서 n은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다.
일부 구현예에서, 제공된 화합물/제제 (예를 들어, 반응 파트너, 제제 (예를 들어, 제공된 방법 및/또는 그 안의 단계의 산물))는 표적 제제 및/또는 표적 제제 모이어티를 포함하는 제제 (예를 들어, 표적 제제 모이어티를 포함하는 접합 산물)를 실질적으로 손상시키거나 변형시키지 않는 조건 하에서 절단될 수 있는 절단 가능한 기 (그 안의 하나 이상의 반응기 및/또는 모이어티를 제외)를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 제공된 화합물/제제 (예를 들어, 반응 파트너, 제제 (예를 들어, 예를 들어, 제공된 방법 및/또는 그 안의 단계의 산물))는 하나 이상의 용도 (예를 들어, 진단제, 치료제 등으로서의 용도)를 위해 표적 제제 및/또는 표적 제제 모이어티를 포함하는 제제 (예를 들어, 표적 제제 모이어티를 포함하는 접합 산물)를 제공하지 않는 조건하에서 절단될 수 있는 절단 가능한 기(그 안의 하나 이상의 반응기 및/또는 모이어티를 제외)를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 제공된 화합물/제제 (예를 들어, 반응 파트너, 제제 (예를 들어, 예를 들어, 제공된 방법 및/또는 그 안의 단계의 산물))는 생물학적 직교 조건 하에서 절단될 수 있는 절단 가능한 기를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 제공된 화합물/제제 (예를 들어, 반응 파트너, 제제 (예를 들어, 제공된 방법 및/또는 그 안의 단계의 산물))는 단백질을 실질적으로 손상 및/또는 변형시키지 않고 절단될 수 있는 것을 제외한 절단 가능한 기를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 절단 가능한 기는 -S-, -S-S-, -S-Cy-, -C(O)-O-, -C(O)-S-, 아세틸 모이어티, -N=N-, 이민 모이어티, -CH=N-, -P(O)(OR)O- 모이어티, -P(O)(OR)-N(R)- 모이어티, --C(O)-CH2-C(COOH)=CHC(O)- 모이어티, -CHOH-CHOH- 모이어티, -Se- 모이어티, 2개의 산소 원자에 결합된 Si, -CH2-는 벤질 탄소에 결합되고 벤질 기의 페닐 고리가 -NO2-로 치환되는 것인 -C(O)-CH2-, o-위치에서 벤질 기의 페닐 고리가 -NO2-로 치환되는 것인 -CH2-가 벤질 탄소에 결합되는 것인 -C(O)-CH2-, 또는 N이 헤테로아릴 고리의 고리 원자인 -C(O)-N(-)- 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 절단 가능한 기는 -S-S-, -S-CH2-Cy-, -S-Cy-, -C(O)-O-, -C(O)-S-, 아세탈 모이어티, -N=N-, 이민 모이어티, -CH=N-, -P(O)(OR)O- 모이어티, -P(O)(OR)-N(R)- 모이어티, --C(O)-CH2-C(COOH)=CHC(O)- 모이어티, -CHOH-CHOH- 모이어티, -Se- 모이어티, 2개의 산소 원자에 결합된 Si, -CH2-는 벤질 기의 페닐 고리가 -NO2-로 치환되는 것인 벤질 탄소에 결합되는 것인 -C(O)-CH2-, o-위치에서 벤질 기의 페닐 고리가 -NO2-로 치환되는 것인 -CH2-가 벤질 탄소에 결합되는 것인 -C(O)-CH2-, 또는 N이 헤테로아릴 고리의 고리 원자인 -C(O)-N(-)- 모이어티이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 링커 모이어티는 상기 절단기를 함유하지 않는다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 다음의 모이어티 중 하나 이상 또는 어느 것도 함유하지 않는다: -S-, -S-S-, -S-CH2-Cy-, -S-Cy-, -C(O)-O-, -C(O)-S-, 아세탈 모이어티, -N=N-, 이민 모이어티, -CH=N-, -P(O)(OR)O- 모이어티, -P(O)(OR)-N(R)- 모이어티, --C(O)-CH2-C(COOH)=CHC(O)- 모이어티, -CHOH-CHOH- 모이어티, -Se- 모이어티, 2개의 산소 원자에 결합된 Si, -CH2-는 벤질 기의 페닐 고리가 -NO2-로 치환되는 것인 벤질 탄소에 결합되는 것인 -C(O)-CH2-, o-위치에서 벤질 기의 페닐 고리가 -NO2-로 치환되는 것인 -CH2-가 벤질 탄소에 결합되는 것인 -C(O)-CH2-, 또는 N이 헤테로아릴 고리의 고리 원자인 -C(O)-N(-)- 모이어티. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 다음의 모이어티 중 하나 이상 또는 어느 것도 함유하지 않는다: -S-S-, -S-CH2-Cy-, -S-Cy-, -C(O)-O-, -C(O)-S-, 아세탈 모이어티, -N=N-, 이민 모이어티, -CH=N-, -P(O)(OR)O- 모이어티, -P(O)(OR)-N(R)- 모이어티, -C(O)-CH2-C(COOH)=CHC(O)- 모이어티, -CHOH-CHOH- 모이어티, -Se- 모이어티, 2개의 산소 원자에 결합된 Si, 2개의 산소 원자에 결합된 Si, -CH2-는 벤질 기의 페닐 고리가 -NO2-로 치환되는 것인 벤질 탄소에 결합되는 것인 -C(O)-CH2-, o-위치에서 벤질 기의 페닐 고리가 -NO2-로 치환되는 것인 -CH2-가 벤질 탄소에 결합되는 것인 -C(O)-CH2-, 또는 N이 헤테로아릴 고리의 고리 원자인 -C(O)-N(-)- 모이어티. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 -S-를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 -S-S-를 포함하지 않는다 (2개의 아미노산 잔기에 의해 형성되는 이황화 모이어티 임의로 제외, 일부 구현예에서, 2개의 시스테인 잔기에 의해 형성되는 이황화 모이어티 임의로 제외). 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 -S-Cy-를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 -S-CH2-Cy-를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 -C(O)-O-를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 -C(O)-S-를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 아세탈 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 -N=N-을 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 이민 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티 -CH=N-을 포함하지 않는다 (고리에서 임의로 제외, 일부 구현예에서, 헤테로아릴 고리에서 임의로 제외). 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 -P(O)(OR)O- 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 -P(O)(OR)-N(R)- 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 --C(O)-CH2-C(COOH)=CHC(O)- 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 -CHOH-CHOH- 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 -Se- 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 2개의 산소 원자에 결합된 Si를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 -C(O)-CH2-를 포함하지 않고, 여기서 -CH2-는 벤질 기의 페닐 고리가 -NO2-로 치환되는 것인 벤질 탄소에 결합되는 것이다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 -C(O)-CH2-를 포함하지 않고, 여기서 -CH2-는 벤질 탄소에 결합되고, 여기서 벤질 기의 페닐 고리가 o-위치에서 -NO2-로 치환되는 것이다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 -C(O)-N(-)- 모이어티를 포함하지 않고, 여기서 N은 헤테로아릴 고리의 고리 원자이다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 이러한 기 중 어느 것도 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, LRM은 이러한 링커 모이어티이다. 일부 구현예에서, LPM은 이러한 링커 모이어티이다. 일부 구현예에서, LLG는 이러한 링커 모이어티이다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 제제는 하나 이상 또는 모든 이러한 모이어티를 함유하지 않는다.
일부 구현예에서, L은 공유 결합이다. 일부 구현예에서, L은 2가 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-100 지방족 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 대체된다. 일부 구현예에서, L은 2가 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 C6-100 아릴지방족 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 대체된다. 일부 구현예에서, L은 1 내지 20개의 헤테로 원자를 갖는 2가 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 C5-100 헤테로아릴지방족 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 대체된다. 일부 구현예에서, L은 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 2가 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-100 헤테로지방족 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 대체된다.
일부 구현예에서, 링커 모이어티 (예를 들어, L)는 하나 이상 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 이상)의 폴리에틸렌 글리콜 단위이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 -(CH2CH2O)n-이거나 이를 포함하고, 여기서 n은 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 -(CH2CH2O)n-으로 대체된다.
본원에 기재된 바와 같이, 일부 구현예에서, n은 1이다. 일부 구현예에서, n은 2이다. 일부 구현예에서, n은 3이다. 일부 구현예에서, n은 4이다. 일부 구현예에서, n은 5이다. 일부 구현예에서, n은 6이다. 일부 구현예에서, n은 7이다. 일부 구현예에서, n은 8이다. 일부 구현예에서, n은 9이다. 일부 구현예에서, n은 10이다. 일부 구현예에서, n은 11이다. 일부 구현예에서, n은 12이다. 일부 구현예에서, n은 13이다. 일부 구현예에서, n은 14이다. 일부 구현예에서, n은 15이다. 일부 구현예에서, n은 16이다. 일부 구현예에서, n은 17이다. 일부 구현예에서, n은 18이다. 일부 구현예에서, n은 19이다. 일부 구현예에서, n은 20이다.
일부 구현예에서, 링커 모이어티 (예를 들어, L)는 하나 이상 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 이상)의 아미노산 잔기이거나 이를 포함한다. 본 개시내용에서 사용된 바와 같이, "하나 이상"은 1-100, 1-50, 1-40, 1-30, 1-20, 1-10, 1-5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 이상일 수 있다. 일부 구현예에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 아미노산 잔기로 대체된다. 일부 구현예에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 아미노산 잔기로 대체되고, 여기서 아미노산 잔기는 화학식 A-I의 아미노산 또는 이의 염의 것이다. 일부 구현예에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 아미노산 잔기로 대체되고, 여기서 각각의 아미노산 잔기는 독립적으로 -N(Ra1)-La1-C(Ra2)(Ra3)-La2-CO-의 구조 또는 이의 염을 갖는다.
일부 구현예에서, 링커 모이어티는 다른 모이어티와의 연결을 위해 활용될 수 있는 하나 이상의 모이어티, 예를 들어, 아미노, 카르보닐 등을 포함한다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티는 하나 이상의 -NR'-을 포함하고, 여기서 R'는 본 개시내용에 기재된 바와 같다. 일부 구현예에서, -NR'-는 용해도를 향상시킨다. 일부 구현예에서, -NR'-는 또 다른 모이어티에 대한 연결점 역할을 한다. 일부 구현예에서, R'는 -H이다. 일부 구현예에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 -NR'-로 대체되고, 여기서 R'는 본 개시내용에 기재된 바와 같다.
일부 구현예에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 -C(O)- 기를 포함하고, 이는 모이어티와의 연결을 위해 활용될 수 있다. 일부 구현예에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 -C(O)-로 대체된다.
일부 구현예에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 -NR'- 기를 포함하고, 이는 모이어티와의 연결을 위해 활용될 수 있다. 일부 구현예에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 -N(R')-로 대체된다.
일부 구현예에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 -C(O)NR'- 기를 포함하고, 이는 모이어티와의 연결을 위해 활용될 수 있다. 일부 구현예에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 -C(O)N(R')-로 대체된다.
일부 구현예에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 -C(R')2- 기를 포함한다. 일부 구현예에서, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 독립적으로 -C(R')2-로 대체된다. 일부 구현예에서, -C(R')2-는 -CHR'-이다. 일부 구현예에서, R'는 -(CH2)2C(O)NH(CH2)11COOH이다. 일부 구현예에서, R'는 -(CH2)2COOH이다. 일부 구현예에서, R'는 -COOH이다.
일부 구현예에서, 링커 모이어티는 하나 이상의 고리 모이어티이거나 이를 포함하고, 예를 들어, L의 하나 이상의 메틸렌 단위는 -Cy-로 대체된다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 아릴 고리를 포함한다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 헤테로아릴 고리를 포함한다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 지방족 고리를 포함한다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 헤테로시클릴 고리를 포함한다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 폴리시클릭 고리를 포함한다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L의 고리는 3 내지 20원이다. 일부 구현예에서, 고리는 5원이다. 일부 구현예에서, 고리는 6원이다. 일부 구현예에서, 링커 내 고리는 다른 모이어티를 함께 연결하는데 활용되는 고리 첨가 반응 (예를 들어, 클릭 화학, 및 이의 변형)의 산물이다.
일부 구현예에서, 링커 모이어티 (예를 들어, L)는 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, L의 메틸렌 단위는 로 대체된다. 일부 구현예에서, L의 메틸렌 단위는 -Cy-로 대체된다. 일부 구현예에서, -Cy-는 이다.
일부 구현예에서, 링커 모이어티 (예를 들어, L)은 -Cy-이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, L의 메틸렌 단위는 -Cy-로 대체된다. 일부 구현예에서, -Cy-는 이다. 일부 구현예에서, -Cy-는 이다. 일부 구현예에서, -Cy-는 이다.
일부 구현예에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L은 를 포함한다.
일부 구현예에서, LRM은 공유 결합이다. 일부 구현예에서, LRM은 공유 결합이 아니다. 일부 구현예에서, LRM은 -(CH2CH2O)n-이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, LRM은 -(CH2)n-O-(CH2CH2O)n-(CH2)n-이거나 이를 포함하고, 여기서 각 n은 독립적으로 본원에 기재된 바와 같고, 각 -CH2-는 독립적으로 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, LRM은 -(CH2)n-O-(CH2CH2O)n-(CH2)n-이고, 여기서 각 n은 독립적으로 본원에 기재된 바와 같고, 각 -CH2-는 독립적으로 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, LRM은 -(CH2)2-O-(CH2CH2O)n-(CH2)2-이고, 여기서 각 n은 본원에 기재된 바와 같고, 각 -CH2-는 독립적으로 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, LRM은 -(CH2)2-O-(CH2CH2O)n-(CH2)2-이고, 여기서 n은 본원에 기재된 바와 같다.
일부 구현예에서, LPM은 공유 결합이다. 일부 구현예에서, LPM은 공유 결합이 아니다. 일부 구현예에서, LPM은 -(CH2CH2O)n-이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, LPM은 -(CH2)n-O-(CH2CH2O)n-(CH2)n-이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 n은 독립적으로 본원에 기재된 바와 같고, 각각의 -CH2-는 독립적으로 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, LPM은 -(CH2)n-O-(CH2CH2O)n-(CH2)n-이고, 여기서 각각의 n은 독립적으로 본원에 기재된 바와 같고, 각각의 -CH2-는 독립적으로 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, LPM은 -(CH2)2-O-(CH2CH2O)n-(CH2)2-이고, 여기서 n은 본원에 기재된 바와 같고, 각각의 -CH2-는 독립적으로 임의로 치환된다. 일부 구현예에서, LPM은 -(CH2)2-O-(CH2CH2O)n-(CH2)2-이고, 여기서 n은 본원에 기재된 바와 같다.
일부 구현예에서, (예를 들어, 제1 및 제2 제제의 산물 내) LPM은 제1 반응성 모이어티 및 제2 반응성 모이어티를 형성하는 반응 산물 모이어티이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 링커 모이어티 (예를 들어, 제1 및 제2 제제의 산물 내 LPM)은 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 링커 모이어티, 예를 들어, L 또는 L (예를 들어, LRM, LPM 등)일 수 있는 링커 모이어티의 메틸렌 단위는 -Cy-로 대체된다. 일부 구현예에서, -Cy-는 임의로 치환된 이다. 일부 구현예에서, -Cy-는 이다. 일부 구현예에서, -Cy-는 이다. 일부 구현예에서, -Cy-는 이다. 일부 구현예에서, -Cy-는 이다.
관심 모이어티
본 개시내용을 읽는 당업자는 본 개시내용에 따라 다양한 유형의 관심 모이어티가 다양한 목적을 위해 활용될 수 있음을 이해할 것이다. 본 개시내용에 대해 관심 모이어티는 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE), 또는 MMAE와 가까운 유사체이거나 이를 포함한다.
본 개시내용의 일부 구현예에서 관심 모이어티는 MMAE이거나 이를 포함한다. MMAE는 약물 항체 접합체, 예를 들어 MAB-MMAE 접합체에서 사용되는 항종양제이다. MMAE는 약물 항체 접합체가 종양 세포에 부착되면 절단될 수 있는 연결 구조를 통해 단클론 항체에 결합(join)된다. 연결 구조는 카텝신 절단 가능 서열 (발린-시트룰린)과 스페이서를 포함한다. 스페이서는 다양할 수 있다.
일부 구현예에서 관심 모이어티는 MMAD이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서 관심 모이어티는 MMAF, 즉 모노메틸 아우리스타틴 F 또는 데스메틸-아우리스타틴 F이거나 이를 포함하고, 이는 이의 연결 구조와 함께 아래 나타난다.
일부 구현예에서, 제공된 방법은
예를 들어, 제1 관심 모이어티 내에서 제1 반응성 모이어티를 포함하는 제1 제제를 제2 반응성 모이어티를 포함하는 제2 제제와 반응시키는 단계를 추가적으로 포함한다. 다양한 구현예에서, 제1 반응성 모이어티는, 예를 들어, 본원에 개시된 방법을 통해 (예를 들어, 화학식 R-I의 구조 또는 이의 염을 갖는 화합물과의 접촉을 통해) 포함될 수 있는 제1 관심 모이어티 내에 있다.
~일부 구현예에서, 제2 관심 모이어티는 표적 결합 모이어티를 포함하지 않는 화합물 내에 있다. 일부 구현예에서, 제2 관심 모이어티는 화학식 P-I 또는 P-II의 화합물 또는 이의 염 내에 있다. 일부 구현예에서, 제2 관심 모이어티는 화학식 R-I의 화합물 또는 이의 염 내에 있다. 일부 구현예에서, 제2 제제는 화학식 P-I 또는 P-II의 구조, 또는 이의 염을 갖는다. 일부 구현예에서, 제2 반응성 모이어티는 제2 제제의 관심 모이어티 내에 있다. 일부 구현예에서, 제2 제제는 본원에 개시된 바와 같은 표적 제제 모이어티를 포함한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 제2 제제 내 표적 제제 모이어티는 펩티드 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 제2 제제 내 표적 제제 모이어티는 본원에 개시된 바와 같은 항체 제제 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 이는 scFv 모이어티를 포함한다. 일부 구현예에서, 제2 제제 내 표적 제제 모이어티는 제1 제제의 것에 비해 상이한 특이성을 제공한다. 일부 구현예에서, 이러한 제1 제제 및 제2 제제는 서로 반응하여 본원에 개시된 바와 같은 상이한 특이성을 갖는 모이어티를 포함하는 다양한 산물 제제를 제공한다.
일부 구현예에서, 제1 반응성 모이어티와 제2 반응성 모이어티 사이의 반응은 생물학적 직교 반응이다. 일부 구현예에서, 반응은 고리화 첨가 반응이다. 일부 구현예에서, 반응은 [3+2] 반응이다. 적합한 이러한 반응 및 상응하는 제1 및 제2 반응성 모이어티는 당업계에 널리 공지되며 본 개시내용에 따라 활용될 수 있다. 일부 구현예에서, 제1 반응성 모이어티는 -N3이거나 이를 포함하고, 제2 반응성 모이어티는 -≡- (예를 들어, 무금속 클릭 화학에 적합한 것을 포함하여 클릭 화학에 적합한 알킨 모이어티)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 제2 반응성 모이어티는 -N3이거나 이를 포함하고, 제1 반응성 모이어티는 -≡- (예를 들어, 무금속 클릭 화학에 적합한 것을 포함하여 클릭 화학에 적합한 알킨 모이어티)이거나 이를 포함한다.
본원에 개시된 바와 같이, 일부 구현예에서, 제1 반응성 모이어티와 제2 반응성 모이어티 사이의 반응은 효소 반응이다. 일부 구현예에서, 반응은 소르타제 매개 반응이다. 일부 구현예에서, 각각의 제1 및 제2 반응성 모이어티는 반응, 예를 들어 효소 반응을 위한 기질(substrate) 모이어티이거나 이를 포함한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 소르타제 매개 접합의 경우, 반응성 모이어티는 (G)n이거나 이를 포함하고 (예를 들어, n은 3, 4, 5 등), 반응성 모이어티는 LPXTG (예를 들어, LPETG)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 반응성 모이어티는 LPXTG-(X)n (예를 들어, LPETG-(X)n, LPETG-XX 등)이거나 이를 포함한다. 본 개시내용을 읽는 당업자는 효소적 및/또는 비효소적 경로를 통해 접합을 위해 본 개시내용에 따라 다양한 반응성 모이어티가 활용될 수 있음을 이해할 것이다.
일부 구현예에서, 제2 제제는 본원에 기재된 바와 같은 관심 모이어티인 제2 관심 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 제2 반응성 모이어티 및 제2 관심 모이어티는 링커 (예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 링커 (예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 LPM, L 등))를 통해 연결된다. 일부 구현예에서, 제2 관심 모이어티는 본원에 기재된 바와 같다 (예를 들어, 검출용 모이어티, 치료용 모이어티, 단백질, 핵산, 면역 세포, 질병 세포를 상호작용, 인식 및/또는 결합할 수 있는 관심 모이어티 등). 일부 구현예에서, 제2 관심 모이어티는 항체 제제이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 제2 관심 모이어티는 scFv 항체 제제이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 항체 제제는 초기 표적 항체 제제와 비교하여 상이한 특이성을 갖는다. 따라서, 일부 구현예에서, 본 개시내용은 이중특이적 항체 제제, 조성물, 및 이의 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 표적 제제는 제1 항체 제제이거나 이를 포함하고, 이는 제1 반응성 모이어티를 포함하는 관심 모이어티와 접합된다. 일부 구현예에서, 제1 항체 제제와 제1 반응성 모이어티를 포함하는 제제를 제2 항체 제제이거나 이를 포함하는 제2 관심 모이어티 및 제2 반응성 모이어티를 포함하는 제2 제제와 반응시켜 제1 및 제2 항체 제제를 포함하는 제제를 제공한다. 일부 구현예에서, 제1 및 제2 항체 제제는 상이하다. 일부 구현예에서, 이들은 동일하다.
일부 구현예에서, 제제는 2개 이상의 항체 제제 모이어티를 포함한다. 일부 구현예에서, 단일 제제 분자 내 항체 제제 모이어티는 서로 다른 표적 특이성을 갖는다. 일부 구현예에서, 단일 제제 분자 내 일부 또는 모든 항체 제제 모이어티는 동일한 표적 특이성을 갖는다. 일부 구현예에서, 본원에 개시된 바와 같은 제제는 상이한 표적 특이성을 갖는 모이어티이거나 이를 포함한다 (예를 들어, 상이한 표적 특이성을 갖는 항체 모이어티). 일부 구현예에서, 제제는 이중특이적 항체 제제이다. 일부 구현예에서, 제제는 제1 모이어티 (예를 들어, 제1 항체 제제 모이어티) 및 제2 모이어티 (예를 들어, 제2 항체 제제 모이어티)를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 모이어티 (예를 들어, 제1 항체 제제 모이어티)는 IgG 또는 이의 단편이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 모이어티 (예를 들어, 제1 항체 제제 모이어티)는 표적 결합 모이어티에 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티 또는 이의 단편 (예를 들어, Fc 영역 또는 이의 단편)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 제2 모이어티 (예를 들어, 제2 항체 제제 모이어티)는 IgG 또는 이의 단편이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 제2 모이어티 (예를 들어, 제2 항체 제제 모이어티)는 표적 결합 모이어티에 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티 또는 이의 단편 (예를 들어, Fc 영역 또는 이의 단편)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 항체 제제 모이어티, 예를 들어, 제2 항체 제제 모이어티는 표적 결합 모이어티에 결합할 수 있는 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 항체 제제 모이어티, 예를 들어, 제2 항체 제제 모이어티는 표적 결합 모이어티에 결합할 수 있는 Fc 모이어티를 포함하지 않는다. 일부 구현예에서, 항체 제제 모이어티, 예를 들어, 제2 항체 제제 모이어티는 scFv이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 모이어티는 제1 제제의 제제 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 제2 모이어티는 제2 제제의 관심 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 제제, 예를 들어, 제1 항체 제제 모이어티를 포함하는 것은 제2 제제, 예를 들어 제2 항체 제제 모이어티를 포함하는 것과 접촉하여 표적 특이성을 갖는 2개 이상의 모이어티 (예를 들어, 항체 제제 모이어티)를 포함하는 제제를 제공한다.
일부 구현예에서, 모이어티, 예를 들어, 제1 모이어티는 병태, 질병 또는 질환 (예를 들어, 암)과 관련된 표적 (예를 들어, 단백질, 지질, 탄수화물, 개체 등)에 결합하는 항체 제제 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 모이어티, 예를 들어, 제1 모이어티는 병태, 질병 또는 질환, 예를 들어, 암을 예방하거나 치료하는데 적합한 항체 제제의 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 모이어티, 예를 들어, 제1 모이어티는 암 세포, 조직, 기관 등을 표적으로 하는 항체 제제의 모이어티이거나 이를 포함한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 제1 모이어티는 항-CD20 항체의 모이어티 또는 이의 단편이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 제1 모이어티는 리툭시맙 또는 이의 단편이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 모이어티, 예를 들어, 제2 모이어티는 제2 관심 모이어티이다. 일부 구현예에서, 모이어티, 예를 들어, 제2 모이어티는 면역 활동, 예를 들어, 하나 이상의 면역 세포를 모집하고/하거나 활성화할 수 있는 항체 제제 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 모이어티, 예를 들어, 제2 모이어티는 T 세포를 모집하고/하거나 활성화할 수 있는 항체 제제 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 모이어티, 예를 들어, 제2 모이어티는 항-CD3 항체의 모이어티 또는 이의 단편이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 항-CD3 항체는 CD3-지향 scFv이다. 일부 구현예에서, 모이어티, 예를 들어, 제1 모이어티는 표적 제제 모이어티이다. 일부 구현예에서, 제공된 제제는 항-CD20 모이어티 및 항-CD3 모이어티를 포함한다. 일부 구현예에서, 제공된 제제는 항-CD20 모이어티 및 항-CD3 모이어티를 포함하고, 여기서 상기 2개의 모이어티는 링커에 의해 연결된다. 일부 구현예에서, 링커는 아미노산 잔기가 아닌 모이어티를 포함한다. 일부 구현예에서, 링커는 천연 단백질 생성 아미노산 잔기가 아닌 모이어티를 포함한다. 일부 구현예에서, 링커는 본원에 개시된 바와 같은 링커 모이어티이다. 당업자는 2개 이상의 표적 특이적 모이어티 (예를 들어, 항체 제제 모이어티)를 포함하는 제제가 본 개시내용에 따른 다양한 이점 및 특성, 예를 들어, 높은 부위 특이성, 높은 균질성, 낮은 수준의 손상, 원하는 특성 및/또는 활성 (예를 들어, 표적 결합, 면역 활동의 모집 및/또는 활성)의 낮은 수준의 감소 또는 실질적 감소 없음 등을 가지고 제조될 수 있음을 이해할 것이다. 당업자는 또한 제공된 기술이 항체 제제, 예를 들어, 쉽게 이용가능한 것 (예를 들어, "기성품" 치료 항체)을 다른 모이어티, 예를 들어, 일부 구현예에서 다른 항체 제제와 용이하게 접합하여, 예를 들어, 이중특이적 제제를 생산할 수 있음을 인식할 것이다. 일부 구현예에서, 제1 및 제2 모이어티는 본원에 기재된 바와 같은 링커에 의해 연결된다.
일부 구현예에서, 제공된 산물 제제는 표적 제제 모이어티 및 제2 관심 모이어티 (예를 들어, 2개의 항체 제제 모이어티)를 연결하는 링커 모이어티를 포함한다. 일부 구현예에서, 링커는 하나 이상의 LRG2, LPM 또는 이의 단편, 및 제1 및 제2 반응성 모이어티에 의해 형성된 하나 이상의 모이어티 (예를 들어, 클릭 화학의 경우, 트리아졸 모이어티)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 링커는 산물 링커 모이어티, 예를 들어, 제1 및 제2 반응성 모이어티 사이의 반응에 의해 형성된 것이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 산물 링커 모이어티는 LPXTG이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 산물 링커 모이어티 LPXT(G)n이거나 이를 포함하고, 여기서 n은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10이다. 일부 구현예에서, 산물 링커 모이어티는 생물학적 직교 반응 산물 모이어티, 예를 들어, 클릭 화학 반응 산물 모이어티이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 제2 반응성 모이어티 및 제2 관심 모이어티를 포함하는 제제는 본원에 제공된 기술을 사용하여 제조된다. 일부 구현예에서, 제2 관심 모이어티는 단백질 제제 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 제2 관심 모이어티는 항체 제제 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 특정 제공된 방법 (예를 들어, 표적 제제 (예를 들어, 단백질 제제 (예를 들어, 항체 제제 등))를 관심 모이어티 (예를 들어, 제2 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는 것들), 반응기 및 표적 제제에 결합할 수 있는 표적 결합 모이어티를 포함하는 반응 파트너와 반응시켜 제2 제제를 제공하는 것을 포함)을 활용하기 위해 제2 관심 모이어티 (예를 들어, 단백질 제제 (예를 들어, 항체 제제))는 표적 제제 모이어티 역할을 할 수 있고, 제2 반응성 모이어티는 관심 모이어티 (예를 들어, 화학식 R-I 또는 이의 염의 화합물 내 MOI) 역할을 할 수 있다.
일부 구현예에서, 각각의 제1 제제 및 제2 제제는 독립적으로 및 임의로 화학식 P-I 또는 P-II의 제제 또는 이의 염이다. 일부 구현예에서, 각각의 제1 제제 및 제2 제제는 독립적으로 화학식 P-I 또는 P-II의 제제 또는 이의 염이다. 일부 구현예에서, 제1 제제 및 제2 제제 중 적어도 하나는 본 개시내용의 방법을 사용하여 제조된다. 일부 구현예에서, 각각의 제1 제제 및 제2 제제는 독립적으로 본 개시내용의 방법을 사용하여 제조된다. 일부 구현예에서, 제1 제제의 표적 제제 모이어티는 항체 제제이다. 일부 구현예에서, 제1 제제의 관심 모이어티는 제1 반응성 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 제2 제제의 표적 제제 모이어티는 항체 제제이다. 일부 구현예에서, 제2 제제의 관심 모이어티는 제2 반응성 모이어티이거나 이를 포함한다. 본원에 개시된 바와 같이, 많은 구현예에서, 제1 반응성 모이어티 및 제2 반응성 모이어티는 서로 반응하여 산물 제제를 제공할 수 있다. 일부 구현예에서, 제1 및 제2 반응성 모이어티 사이의 반응은 제1 및 제2 제제 내 표적 제제와 호환되는, 예를 들어, 단백질 제제 (예를 들어, 항체 제제)와 호환되는 반응이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 반응은 생물학적 직교 반응이다. 일부 구현예에서, 이러한 반응은 고리화 첨가 반응이다. 일부 구현예에서, 이러한 반응은 클릭 반응이다. 일부 구현예에서, 이러한 반응은 무금속 클릭 반응이다. 일부 구현예에서, 산물 제제는 화학식 P-I 또는 P-II의 것이거나 또는 이의 염이다. 일부 구현예에서, 화학식 P-I 또는 P-II 또는 이의 염의 산물 제제 내에서, 표적 제제 모이어티는 단백질 제제 (예를 들어, 항체 제제)이고, 일부 구현예에서, 제1 제제의 표적 제제 모이어티이다. 일부 구현예에서, 화학식 P-I 또는 P-II 또는 이의 염의 산물 제제 내에서, 관심 모이어티는 단백질 제제 (예를 들어, 항체 제제)이고, 일부 구현예에서, 제2 제제의 표적 제제 모이어티이다. 일부 구현예에서, 산물 제제는 2개 이상의 항체 제제를 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 2개 이상의 항체 제제는 상이한 항원 특이성을 갖는다. 일부 구현예에서, 상기 2개 이상의 항체 제제는 서로 다른 항원을 향한다. 일부 구현예에서, 제공된 방법은
화학식 P-I 또는 P-II의 구조를 갖는 제1 제제 또는 그의 염을, 화학식 P-I 또는 P-II의 구조를 갖는 제2 제제 또는 그의 염과 반응시켜 산물 제제를 제공하는 단계
를 포함한다.
방법 및 산물
일부 구현예에서, 제공된 기술은 표적 제제를 반응 파트너와 접촉시키는 것 (예를 들어, 이에 대해 관심 모이어티가 부착됨)을 포함한다. 일부 구현예에서, 접촉은 표적 제제가 반응 파트너와 반응하여 산물로서 제제를 형성하는 조건 하 및 시간 동안 수행된다. 당업계의 많은 반응 조건/반응 시간은 본 개시내용에 따라 원하는 목적에 적합한 경우 평가되고 활용될 수 있고, 특정 이러한 조건, 반응 시간, 평가 등은 실시예에 기재되어 있다.
일부 구현예에서, 형성된 제제는 표적 제제 모이어티, 관심 모이어티 및 임의로 표적 제제 모이어티와 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 제제 모이어티는 표적 제제로부터 유래된다 (예를 들어, 표적 제제로부터 하나 이상의 -H를 제거함으로써). 일부 구현예에서, 표적 제제 모이어티는 표적 제제의 하나 이상, 대부분, 또는 실질적으로 모든 구조적 특징 및/또는 생물학적 기능을 유지한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 표적 제제는 항체 제제이고, 형성된 제제 내 표적 제제 모이어티는 상응하는 항체 제제 모이어티이며 항체 제제의 주요 기능, 예를 들어, 다양한 수용체 (예를 들어, Fc 수용체, 예컨대 FcRn)와 상호작용, 항원을 특이적으로 인식, 질병 세포에 대한 면역 활성 촉발, 촉진, 및/또는 강화 등을 유지한다. 일부 구현예에서, 형성된 제제는 예를 들어, 관심 모이어티 및/또는 형성된 제제 전체에서 표적 제제의 기능을 넘어서 하나 이상의 기능을 제공한다.
일부 구현예에서, 형성된 제제는 화학식 P-I 또는 P-II의 구조, 또는 이의 염을 갖는다. 일부 구현예에서, 형성된 제제 내 관심 모이어티 (예를 들어, 화학식 P-I 또는 P-II, 또는 이의 염의 MOI)는 형성된 제제를 제조하기 위해 활용되는 반응 파트너 내 관심 모이어티 (예를 들어, 화확식 R-I 또는 이의 염의 MOI)와 동일하다. 일부 구현예에서, P는 단백질 모이어티이다. 일부 구현예에서, P는 항체 모이어티이다.
일부 구현예에서, 관심 모이어티에 연결된 링커 모이어티 (또는 이의 일부)는 또한 반응 파트너 (예를 들어, 화학식 R-I 또는 이의 염의 LRM)로부터 전달될 수도 있다. 일부 구현예에서, 형성된 제제 내 링커 모이어티 (예를 들어, LPM)는 반응 파트너 내 링커 모이어티 (예를 들어, 반응기와 관심 모이어티 사이의 것, 예를 들어, LRM)이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, LPM은 LRM이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, LPM은 -LRM-LRG2-이다. 일부 구현예에서, LRG2는 -C(O)-이다. 일부 구현예에서, LRG2는 -C(O)-이고, 표적 제제 모이어티의 -NH-, 예를 들어, 단백질 모이어티의 리신 잔기의 측쇄 내 -NH-에 결합되고, 일부 구현예에서, 상기 단백질 모이어티는 항체 모이어티이다.
반응 파트너, 예를 들어, 화학식 R-I의 화합물 또는 이의 염은 전형적으로 반응기가 표적 제제와 반응하는 조건 하에서 반응기와 반응할 수 있는 모이어티를 함유하지 않는다. 일부 구현예에서, 반응기가 표적 제제와 반응하는 조건 하에서 반응 파트너 내 일부 모이어티가 반응기와 반응할 수 있는 정도까지, 이러한 모이어티 및 반응기 사이의 반응은 반응기와 표적 제제 사이의 반응에 비해 상당히 느리고/거나 덜 효율적이다. 일부 구현예에서, 이러한 모이어티와 반응기 사이의 반응은 반응기와 표적 제제 사이의 반응의 효율, 수율, 속도, 및/또는 전환율을 유의하게 감소시키지는 않는다 (예를 들어, 약 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 이하 등의 감소). 일부 구현예에서, 반응기 (예를 들어, 에스테르 기, 활성 카르복실산 유도체 등)는 표적 제제 (예를 들어, 단백질 제제, 예컨대 항체 제제)의 아미노 기 (예를 들어, -NH2 기)와 반응한다. 일부 구현예에서, 반응 파트너, 예를 들어, 화학식 R-I의 화합물 또는 이의 염은 아민 기를 함유하지 않는다. 일부 구현예에서, 화학식 R-I의 화합물 또는 이의 염 (또는 이의 일부, 예컨대 RLG, LLG, LLG1, LLG2, LLG3, LLG4, LRG1, LRG2, LRM, 및/또는 MOI)는 아민 기를 함유하지 않는다. 일부 구현예에서, 이들은 1차 아민 기 (-NH2)를 함유하지 않는다. 일부 구현예에서, 이들은 -CH2NH2을 함유하지 않는다. 일부 구현예에서, 이들은 -CH2CH2NH2를 함유하지 않는다. 일부 구현예에서, 이들은 -CH2CH2CH2NH2를 함유하지 않는다. 일부 구현예에서, 이들은 -CH2CH2CH2CH2NH2를 함유하지 않는다. 일부 구현예에서, 아민 기, 예를 들어, 일차 아민 기는, (예를 들어, 아미드 기를 형성하기 위한 아실 기 (예를 들어, R-C(O)- (예를 들어, 아세틸)의 도입에 의해) 캡핑되어 원하지 않는 반응을 방지하거나 감소시킨다.
일부 구현예에서, 반응은 버퍼 시스템에서 수행된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 버퍼 시스템은 표적 제제, 관심 모이어티 등의 구조 및/또는 기능을 유지한다. 일부 구현예에서, 버퍼는 인산염 버퍼이다. 일부 구현예에서, 버퍼는 PBS 버퍼이다. 일부 구현예에서, 버퍼는 붕산염 버퍼이다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 버퍼는 특정 pH 값 또는 범위를 제공하거나 임의로 유지한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 유용한 pH는 약 7 내지 9, 예를 들어, 7.0, 7.1, 7.2, 7.3, 7.4, 7.5, 7.6, 7.7, 7.8, 7.9, 8.0, 8.1, 8.2, 8.3, 8.4, 8.5, 8.6, 8.7, 8.8, 9.0, 등이다. 일부 구현예에서, pH는 7.4이다. 일부 구현예에서, pH는 7.5이다. 일부 구현예에서, pH는 7.8이다. 일부 구현예에서, pH는 8.0이다. 일부 구현예에서, pH는 8.2이다. 일부 구현예에서, pH는 8.3이다.
제공된 기술은 다양한 이점을 제공할 수 있다. 무엇보다도, 일부 구현예에서, 제공된 반응 파트너 (예를 들어, 제1 기와 관심 모이어티 사이에 위치한 반응기를 포함하는 화합물 (예를 들어, 화학식 R-I의 화합물 또는 이의 염)) 내 관심 모이어티의 표적 제제에 대한 연결 및 제공된 반응 파트너 내 표적 결합 모이어티의 방출은 하나의 반응 및/또는 하나의 포트에서 달성될 수 있다. 따라서, 많은 구현예에서, 표적 결합 모이어티를 제거하기 위해 별도의 반응/단계를 수행하지 않는다. 당업자에게 이해되는 바와 같이, 단일 반응/작업 내에서 관심 모이어티의 연결 및 표적 결합 모이어티의 방출을 수행함으로써, 제공된 기술은 표적 결합 모이어티 제거를 위한 별도의 단계를 피할 수 있고, 전체 효율을 향상시킬 수 있고 (예를 들어, 작업을 단순화함으로써 전체 수율을 증가시킴 등), 제조 비용을 감소시키고, 제품 순도를 향상시키고, (예를 들어, (예를 들어, 에스테르기의) 제거, 산화, 수화 등 중 하나 이상을 전형적으로 수반하는, 표적결합 모이어티 제거 조건에의 노출을 피함으로써 (예를 들어, 단백질 제제 모이어티에 대한) 표적 제제 모이어티, 단백질 아미노산 잔기, 이의 전체 구조, 및/또는 번역 후 변형 (예를 들어, 항체의 글리칸)을 손상시킬 수 있다. 실제로, 본원에 입증된 바와 같이, 제공된 기술은 무엇보다도 향상된 효율 (예를 들어, 반응 속도 및 전환율 측면에서), 증가된 수율, 증가된 순도/균질성, 및/또는 향상된 선택성을 제공할 수 있고, 특히 표적 결합 모이어티를 함유하지 않는 반응 파트너가 사용되는 참조 기술과 비교하여, 표적 결합 모이어티 제거를 위한 단계 도입이 없다 (예를 들어, 표적 결합 모이어티는 관심 모이어티 접합과 동일한 단계에서 제거된다).
일부 구현예에서, 본 개시내용은, 표적 결합 모이어티 제거를 위해 수행되지만 실질적인 관심 모이어티 접합을 위해서는 수행되는 것이 아닌 단계를 포함하는 공정과 비교하여, 무엇보다도 항체 제제 모이어티에 대한 낮은 수준의 손상을 함유하는 제공된 공정의 산물을 제공한다. 일부 구현예에서, 제공된 산물 조성물은 참조 산물 조성물 (예를 들어, 표적 결합 모이어티를 사용하지 않거나 표적 결합 모이어티 제거를 위한 추가 단계를 활용하지 않는 기술로부터 나온 것 (예를 들어, 표적 결합 모이어티와 관심 모이어티 사이에 위치한 반응기를 포함하는 본원에 기재된 반응 파트너를 활용하지 않음))에 비해 높은 균질성을 갖는다.
일부 구현예에서, 산물 제제는
표적 제제 모이어티,
관심 모이어티, 예컨대 MMAD, 및
임의로 하나 이상의 링커 모이어티
를 포함하는 제제이다.
일부 구현예에서, 표적 제제 모이어티는 단백질 제제 모이어티이다. 일부 구현예에서, 표적 제제 모이어티는 항체 제제 모이어티이다. 일부 구현예에서, 항체 제제 모이어티는 IgG Fc 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 제제 모이어티는 아미노기를 통해, 임의로 링커를 통해 관심 모이어티에 연결된다. 일부 구현예에서, 이는 측쇄의 아미노기가 임의로 링커를 통해 관심 모이어티에 연결된 리신 잔기를 통한 것이다 (예를 들어, 아미드 기, 카바메이트 기 등의 일부로서 -NH-C(O)-를 형성).
일부 구현예에서, 항체 제제의 선택된 위치는 접합을 위해 활용된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 항체 제제의 K246 또는 K248 (EU 넘버링, 또는 상응하는 잔기)은 접합 위치이다. 일부 구현예에서, 접합 위치는 중쇄의 K246이다 (달리 명시되지 않는 한, 본원의 위치는, 예를 들어, 변형된 서열 (예를 들어, 길어지고, 짧아지고, 재정렬 등 된 서열) 내 상응하는 잔기를 포함한다). 일부 구현예에서, 위치는 중쇄의 K248이다. 일부 구현예에서, 위치는 중쇄의 K288 또는 K290이다. 일부 구현예에서, 위치는 중쇄의 K288이다. 일부 구현예에서, 위치는 중쇄의 K290이다. 일부 구현예에서, 위치는 K317이다.
일부 구현예에서, 표적 제제가 항체 제제일 때, 중쇄는 경쇄 상에 선택적으로 표지된다.
무엇보다도, 본 개시내용은 제어된 관심 모이어티/표적 제제 비율 (예를 들어, 항체 약물 접합체에 대해 약물/항체 비율 (DAR))을 제공할 수 있다. 일부 구현예에서, 비율은 약 0.5 내지 6 (예를 들어, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1.0, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2.0, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 3.0, 3.5, 4.0, 4.5, 5.0, 5.5, 등)이다. 일부 구현예에서, 비율은 약 0.5 내지 2.5이다. 일부 구현예에서, 비율은 약 0.5 내지 2이다. 일부 구현예에서, 비율은 약 1 내지 2이다. 일부 구현예에서, 비율은 약 1.5 내지 2이다. 일부 구현예에서, 비율은 표적 제제 모이어티에 접합된 관심 모이어티와 관심 모이어티에 접합된 표적 제제 모이어티의 비율이다. 일부 구현예에서, 비율은 표적 제제 모이어티에 접합된 관심 모이어티와 조성물 내 모든 표적 제제 모이어티의 비율이다.
일부 구현예에서, 제공된 제제 (예를 들어, 화학식 P-I 또는 P-II의 제제 또는 이의 염)에서 실질적으로 표적 제제 모이어티의 모든 접합 부위는 동일한 변형을 갖는다 (예를 들어, 모두 동일한 링커 모이어티를 통해 임의로 연결된 동일한 관심 모이어티를 공유함). 일부 구현예에서, 접합 부위는 다른 변형을 갖지 않는다 (예를 들어, 관심 모이어티 다름 및/또는 관심 모이어티 없음 및/또는 링커 모이어티 다름).
일부 구현예에서, 복수의 제공된 제제 (예를 들어, 화학식 P-I 또는 P-II의 제제, 또는 이의 염)를 포함하는 제공된 조성물에서 표적 제제 모이어티의 실질적으로 모든 접합 부위는 동일한 변형을 갖는다 (예를 들어, 모두 동일한 링커 모이어티를 통해 임의로 연결된 동일한 관심 모이어티를 공유함). 일부 구현예에서, 접합 부위는 다른 변형을 갖지 않는다 (예를 들어, 관심 모이어티 다름 및/또는 관심 모이어티 없음 및/또는 링커 모이어티 다름). 일부 구현예에서, 이러한 조성물은 동일한 (또는 실질적으로 동일한) 표적 제제 모이어티를 공유하지만 다른 변형 (예를 들어, 관심 모이어티 다름 및/또는 관심 모이어티 없음 및/또는 링커 모이어티 다름)을 공유하는 제제를 함유하지 않는다. 일부 구현예에서, 동일한 (또는 실질적으로 동일한) 표적 제제 모이어티를 공유하지만 다른 변형 (예를 들어, 관심 모이어티 다름 및/또는 관심 모이어티 없음 및/또는 링커 모이어티 다름)을 공유하는 제제는 최종 산물 제제의 다단계 제조 (예를 들어, 관심 모이어티 접합을 위한 단계 외에 표적 결합 모이어티의 제거를 위한 단계를 포함함)의 중간체이다.
일부 구현예에서, 본 개시내용은 복수의 제제를 포함하는 조성물을 제공하고, 복수의 제제 각각은 독립적으로
표적 제제 모이어티,
관심 모이어티, 및
임의로 표적 제제 모이어티와 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티
를 포함하고,
여기서 복수의 제제는 동일하거나 실질적으로 동일한 표적 제제 모이어티, 및 독립적으로 적어도 하나의 공통 위치에서의 공통 변형을 공유하고,
여기서 표적 제제 모이어티와 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다.
일부 구현예에서, 표적 제제 모이어티는 단백질 모이어티이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 복수의 제제는 독립적으로 적어도 하나의 아미노산 잔기에서 공통 변형을 공유한다 (예를 들어, 임의로 링커 모이어티를 통한 관심 모이어티의 접합). 일부 구현예에서, 복수의 제제는 각각 독립적으로 화학식 P-I 또는 P-II의 제제 또는 이의 염이다.
일부 구현예에서, 본 개시내용은 복수의 제제를 포함하는 조성물을 제공하고, 복수의 제제는 독립적으로
단백질 제제 모이어티,
관심 모이어티, 및
임의로 단백질 제제 모이어티와 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티
를 포함하고,
여기서 복수의 제제의 단백질 제제 모이어티는 공통 아미노산 서열을 포함하고, 복수의 제제는 독립적으로 단백질 제제 모이어티의 적어도 하나의 공통 아미노산 잔기에서 공통 변형을 공유하고,
여기서 관심 모이어티 및 공통 아미노산 서열을 포함하는 단백질 제제 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다.
일부 구현예에서, 복수의 제제는 각각 독립적으로 화학식 P-I 또는 P-II의 제제 또는 이의 염이다. 일부 구현예에서, 각 단백질 제제 모이어티는 독립적으로 항체 제제 모이어티이다.
일부 구현예에서, 본 개시내용은 복수의 제제를 포함하는 조성물을 제공하고, 복수의 제제 각각은 독립적으로
항체 제제 모이어티,
관심 모이어티
임의로 항체 제제 모이어티와 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티
를 포함하고,
여기서 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 아미노산 서열을 포함하고 공통 항원에 결합할 수 있고, 복수의 제제는 독립적으로 단백질 제제 모이어티의 적어도 하나의 공통 아미노산 잔기에서 공통 변형을 공유하고,
여기서 공통 아미노산 서열을 포함하고 공통 항원에 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다.
일부 구현예에서, 복수의 제제는 각각 독립적으로 화학식 P-I 또는 P-II의 제제, 또는 이의 염이다. 일부 구현예에서, 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 Fc 영역에서 공통 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 Fc 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 항원에 특이적으로 결합할 수 있다. 일부 구현예에서, 항체 제제 모이어티는 단클론 항체 모이어티이다. 일부 구현예에서, 항체 제제 모이어티는 다클론 항체 모이어티이다. 일부 구현예에서, 항체 제제 모이어티는 2개 이상의 상이한 항원에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체 제제 모이어티는 2개 이상의 상이한 단백질에 결합한다. 일부 구현예에서, 항체 제제 모이어티는 IVIG 모이어티이다.
본 개시내용에서 사용된 바와 같이, 일부 구현예에서, "적어도 하나(at least one)" 또는 "하나 이상(one or more)"은 1-1000, 1-500, 1-200, 1-100, 1-90, 1-80, 1-70, 1-60, 1-50, 1-40, 1-30, 1-20, 1-10, 1-5, 또는 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 이상이다. 일부 구현예에서, 이는 하나이다. 일부 구현예에서, 이는 둘 이상이다. 일부 구현예에서, 이는 약 3이다. 일부 구현예에서, 이는 약 4이다. 일부 구현예에서, 이는 약 5이다. 일부 구현예에서, 이는 약 6이다. 일부 구현예에서, 이는 약 7이다. 일부 구현예에서, 이는 약 8이다. 일부 구현예에서, 이는 약 9이다. 일부 구현예에서, 이는 약 10이다. 일부 구현예에서, 이는 약 10 이상이다.
일부 구현예에서, 공통 아미노산 서열은 1-1000, 1-500, 1-400, 1-300, 1-200, 1-100, 1-50, 10-1000, 10-500, 10-400, 10-300, 10-200, 10-100, 10-50, 20-1000, 20-500, 20-400, 20-300, 20-200, 20-100, 20-50, 50-1000, 50-500, 50-400, 50-300, 50-200, 50-100, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 200, 250, 300, 400, 500, 600 또는 이상의 아미노산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 길이는 적어도 5 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, 길이는 적어도 10 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, 길이는 적어도 50 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, 길이는 적어도 100 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, 길이는 적어도 150 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, 길이는 적어도 200 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, 길이는 적어도 300 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, 길이는 적어도 400 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, 길이는 적어도 500 아미노산 잔기이다. 일부 구현예에서, 길이는 적어도 600 아미노산 잔기이다.
일부 구현예에서, 공통 아미노산 서열은 표적 제제 모이어티, 단백질 제제 모이어티, 항체 제제 모이어티 등의 아미노산 서열의 적어도 10%-100%, 50%-100%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%이다. 일부 구현예에서, 이는 100%이다.
일부 구현예에서, 단백질 제제 모이어티는 높은 비율의 아미노산 서열 상동성을 공유한다. 일부 구현예에서, 이는 50% 내지 100%이다. 일부 구현예에서, 이는 50%이다. 일부 구현예에서, 이는 60%이다. 일부 구현예에서, 이는 70%이다. 일부 구현예에서, 이는 80%이다. 일부 구현예에서, 이는 90%이다. 일부 구현예에서, 이는 91%이다. 일부 구현예에서, 이는 50%이다. 일부 구현예에서, 이는 92%이다. 일부 구현예에서, 이는 93%이다. 일부 구현예에서, 이는 94%이다. 일부 구현예에서, 이는 95%이다. 일부 구현예에서, 이는 96%이다. 일부 구현예에서, 이는 97%이다. 일부 구현예에서, 이는 98%이다. 일부 구현예에서, 이는 99%이다. 일부 구현예에서, 이는 100%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 50%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 60%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 70%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 80%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 90%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 91%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 50%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 92%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 93%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 94%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 95%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 96%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 97%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 98%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 99%이다.
일부 구현예에서, 단백질 제제 모이어티 또는 항체 제제 모이어티는 단백질 복합체 이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 본원에 개시된 바와 같이 적어도 하나 또는 각각의 개별 사슬은 공통 아미노산 서열을 공유하고/하거나 상동성을 갖는다.
일부 구현예에서, 복수의 제제는 공통 관심 모이어티를 공유한다. 일부 구현예에서, 각 복수의 제제는 독립적으로 화학식 P-I 또는 P-II의 제제 또는 이의 염이다. 일부 구현예에서, 각 복수의 제제는 독립적으로 화학식 P-I 또는 P-II의 제제 또는 이의 염이고, 여기서 MOI는 각 복수의 제제에 대해 동일하다. 일부 구현예에서, 복수의 제제는 본원에 기재된 방법의 산물이다. 일부 구현예에서, 복수의 제제를 포함하는 조성물은 본원에 기재된 방법의 산물이다.
일부 구현예에서, 변형은 관심 모이어티 및 임의의 링커이거나 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 변형은 -LPM-MOI이거나 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 복수의 제제는 독립적으로 적어도 하나의 위치에서 공통 변형을 공유한다. 일부 구현예에서, 변형은 관심 모이어티 및 임의로 상기 관심 모이어티를 연결하는 링커이거나 이를 포함한다. 본원에 개시된 바와 같이, 각 위치는 독립적으로 이의 공통 변형을 갖는다. 일부 구현예에서, 2개 이상 또는 모든 위치에서의 공통 변형은 공통 관심 모이어티를 포함한다. 일부 구현예에서, 공통 변형은 동일하다. 일부 구현예에서, 복수의 제제는, 관심 모이어티 및 임의로 링커이거나 이를 포함하는 변형을 갖는 각 위치에서 공통 변형을 공유한다. 일부 구현예에서, 복수의 제제는, -LPM-MOI이거나 이를 포함하는 변형을 갖는 각 위치에서 공통 변형을 공유한다.
일부 구현예에서, 단백질 제제 (예를 들어, 항체 제제)는 적어도 하나의 아미노산 잔기에서 공통 변형을 공유한다. 일부 구현예에서, 복수의 제제는 관심 모이어티 및 임의로 링커이거나 이를 포함하는 변형을 갖는 각 위치에서 공통 변형을 공유한다. 일부 구현예에서, 복수의 제제는 -LPM-MOI이거나 이를 포함하는 변형을 갖는 각 위치에서 공통 변형을 공유한다.
일부 구현예에서, 위치는 항체 제제의 K246, K248, K288, K290, K317 및 이에 상응하는 위치로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 위치는 K246 및 K248, 및 이에 상응하는 위치로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 위치는 K288 및 K290, 및 이에 상응하는 위치로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 위치는 K246 또는 이에 상응하는 위치이다. 일부 구현예에서, 위치는 K248 또는 이에 상응하는 위치이다. 일부 구현예에서, 위치는 K288 또는 이에 상응하는 위치이다. 일부 구현예에서, 위치는 K290 또는 이에 상응하는 위치이다. 일부 구현예에서, 위치는 K317 또는 이에 상응하는 위치이다. 일부 구현예에서, 위치는 경쇄의 K185 또는 이에 상응하는 위치이다. 일부 구현예에서, 위치는 경쇄의 K187 또는 이에 상응하는 위치이다. 일부 구현예에서, 위치는 중쇄의 K133 또는 이에 상응하는 위치이다. 일부 구현예에서, 위치는 중쇄의 K246 또는 K248 또는 이에 상응하는 위치이다. 일부 구현예에서, 위치는 중쇄의 K414 또는 이에 상응하는 위치이다.
일부 구현예에서, 표적 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다. 일부 구현예에서, 공통 아미노산 서열 및 관심 모이어티를 포함하는 단백질 제제 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다. 일부 구현예에서, 공통 아미노산 서열을 포함하거나 공통 항원 및 관심 모이어티에 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다. 일부 구현예에서, 표적 제제 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다. 일부 구현예에서, 공통 아미노산 서열을 포함하는 단백질 제제 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다. 일부 구현예에서, 공통 아미노산 서열을 포함하거나 공통 항원에 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이다. 일부 구현예에서, 이는 50% 내지 100%이다. 일부 구현예에서, 이는 50%이다. 일부 구현예에서, 이는 60%이다. 일부 구현예에서, 이는 70%이다. 일부 구현예에서, 이는 80%이다. 일부 구현예에서, 이는 90%이다. 일부 구현예에서, 이는 91%이다. 일부 구현예에서, 이는 50%이다. 일부 구현예에서, 이는 92%이다. 일부 구현예에서, 이는 93%이다. 일부 구현예에서, 이는 94%이다. 일부 구현예에서, 이는 95%이다. 일부 구현예에서, 이는 96%이다. 일부 구현예에서, 이는 97%이다. 일부 구현예에서, 이는 98%이다. 일부 구현예에서, 이는 99%이다. 일부 구현예에서, 이는 100%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 50%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 60%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 70%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 80%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 90%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 91%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 50%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 92%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 93%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 94%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 95%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 96%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 97%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 98%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 99%이다.
일부 구현예에서, 제공된 제제, 화합물 등, 예를 들어, 화학식 R-I, P-I, P-II의 것 및 이들의 염은 고순도를 갖는다. 일부 구현예에서, 이는 50% 내지 100%이다. 일부 구현예에서, 이는 50%이다. 일부 구현예에서, 이는 60%이다. 일부 구현예에서, 이는 70%이다. 일부 구현예에서, 이는 80%이다. 일부 구현예에서, 이는 90%이다. 일부 구현예에서, 이는 91%이다. 일부 구현예에서, 이는 50%이다. 일부 구현예에서, 이는 92%이다. 일부 구현예에서, 이는 93%이다. 일부 구현예에서, 이는 94%이다. 일부 구현예에서, 이는 95%이다. 일부 구현예에서, 이는 96%이다. 일부 구현예에서, 이는 97%이다. 일부 구현예에서, 이는 98%이다. 일부 구현예에서, 이는 99%이다. 일부 구현예에서, 이는 100%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 50%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 60%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 70%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 80%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 90%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 91%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 50%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 92%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 93%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 94%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 95%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 96%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 97%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 98%이다. 일부 구현예에서, 이는 적어도 99%이다.
일부 구현예에서, 본 개시내용은 산물 제제 (예를 들어, 화학식 P-I 또는 P-II의 제제, 또는 이의 염)를 포함하는 산물 제제 조성물을 제공한다. 일부 구현예에서, 산물 제제 조성물 (예를 들어, 특정 방법으로부터 형성된 제제 조성물)은 표적 제제 모이어티 및 관심 모이어티 및 임의로 링커를 포함하는 산물 제제 (예를 들어, 화학식 P-I 또는 P-II의 제제, 또는 이의 염)를 포함하고, a released 표적 결합 모이어티 (예를 들어, RLG-(LLG1)0-1-(LLG2)0-1-(LLG3)0-1-(LLG4)0-1-)를 포함하는 화합물 또는 방출된 표적 결합 모이어티 (예를 들어, RLG-(LLG1)0-1-(LLG2)0-1-(LLG3)0-1-(LLG4)0-1-H의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 염)를 포함하는 화합물), 및 반응 파트너 (예를 들어, 화학식 R-I의 화합물 또는 이의 염)를 방출한다. 일부 구현예에서, 방출된 표적 결합 모이어티는 표적 제제 및/또는 형성된 산물 제제에서 표적 제제 모이어티에 결합할 수 있다. 본 개시내용에 따라 표적 제제 모이어티로부터 방출된 표적 결합 모이어티를 분리하기 위한 다양한 기술, 예를 들어, 일부 구현예에서, 조성물을 특정 pH에서 글리신을 포함하는 조성물과 접촉시키는 것이 이용 가능하다.
변수의 특정 구현예
실시예로서, 변수의 예시적인 구현예가 본 개시내용 전반에 걸쳐 설명된다. 당업자가 이해하는 바와 같이 서로 다른 변수에 대한 구현예가 임의로 조합될 수 있다.
일부 구현예에서, ABT는 본원에 개시된 바와 같은 항체 결합 모이어티이다. 일부 구현예에서, ABT는 MMAE-1, MMAE-2, MMAE-3, MMAE-4, MMAE-5, MMAE-6, 및 MMAE-7로부터 선택되는 화합물의 ABT이다. 일부 구현예에서, ABT는 표 A-1으로부터 선택되는 모이어티이다.
일부 구현예에서, L은 화합물 MMAE-1, MMAE-2, MMAE-3, MMAE-4, MMAE-5, MMAE-6, 및 MMAE-7에 묘사된 것으로부터 선택되는 화합물의 링커 모이어티이다.
일반적 방법, 시약, 및 조건
본 개시내용에 따라 본원의 화합물 및 제제를 제공하기 위해 다양한 기술이 활용될 수 있다.
일부 구현예에서, 특정 보호기 ("PG"), 이탈기 ("LG"), 또는 변형 조건이 묘사되는 경우, 당업자는 다른 보호기, 이탈기, 및 변형 조건 또한 적합하고 고려됨을 이해할 것이다. 이러한 기 및 변형은 [March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, M. B. Smith and J. March, 5th Edition, John Wiley & Sons, 2001, Comprehensive Organic Transformations, R. C. Larock, 2nd Edition, John Wiley & Sons, 1999], 및 [Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999]에 상세히 기재되고, 이들 각각의 전문이 본원에 참조로서 포함된다.
일부 구현예에서, 이탈기는 할로겐 (예를 들어, 불화물, 염화물, 브롬화물, 요오드화물), 설포네이트 (예를 들어, 메실레이트, 토실레이트, 벤젠설포네이트, 브로실레이트, 노실레이트, 트리플레이트), 디아조늄 등을 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다.
일부 구현예에서, 산소 보호기는 예를 들어, 카보닐 보호기, 히드록실 보호기 등을 포함한다. 히드록실 보호기는 당업계에 널리 공지되고 [Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999]에 상세히 기재된 것을 포함하며, 이의 전문이 본원에 참조로서 포함된다. 적합한 히드록실 보호기의 예시는 에스테르, 알릴 에테르, 에테르, 실릴 에테르, 알킬 에테르, 아릴알킬 에테르, 및 알콕시 알킬 에테르를 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다. 이러한 에스테르의 예시는 포름산염, 아세테이트, 카보네이트, 및 술폰산염을 포함한다. 특정 예시는 포름산염, 벤조일 포름산염, 클로로아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 메톡시아세테이트, 트리페닐메톡시아세테이트, p-클로로페녹시아세테이트, 3-페닐프로피오네이트, 4-옥소펜타노에이트, 4,4-(에틸렌디티오)펜타노에이트, 피발로에이트 (트리메틸아세틸), 크로톤산염, 4-메톡시-크로톤산염, 벤조에이트, p-벤질벤조에이트, 2,4,6-트리메틸벤조에이트, 카보네이트, 예컨대 메틸, 9-플루오레닐메틸, 에틸, 2,2,2-트리클로로에틸, 2-(트리메틸실릴)에틸, 2-(페닐설포닐)에틸, 비닐, 알릴, 및 p-니트로벤질을 포함한다. 이러한 실릴 에테르의 예시는 트리메틸실릴, 트리에틸실릴, t-부틸디메틸실릴, t-부틸디페닐실릴, 트리이소프로필실릴, 및 다른 트리알킬실릴 에테르를 포함한다. 알킬 에테르는 메틸, 벤질, p-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 트리틸, t-부틸, 알릴, 및 알릴옥시카보닐 에테르 또는 유도체를 포함한다. 알콕시 알킬 에테르는 아세탈, 예컨대 메톡시메틸, 메틸티오메틸, (2-메톡시에톡시)메틸, 벤질옥시메틸, 베타-(트리메틸실릴)에톡시메틸, 및 테트라히드로피라닐 에테르를 포함한다. 아릴알킬 에테르의 예시는 벤질, p-메톡시벤질 (MPM), 3,4-디메톡시벤질, O-니트로벤질, p-니트로벤질, p-할로벤질, 2,6-디클로로벤질, p-시아노벤질, 및 2- 및 4-피콜릴을 포함한다.
아미노 보호기는 당업계에 널리 공지되어 있고 [Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999]에 상세히 기재된 것을 포함하며, 이의 전체가 본원에 참조로서 포함된다. 적합한 아미노 보호기는 아랄킬아민, 카바메이트, 시클릭 이미드, 알릴 아민, 아미드 등을 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다. 이러한 기의 예시는 t-부틸옥시카보닐 (BOC), 에틸옥시카보닐, 메틸옥시카보닐, 트리클로로에틸옥시카보닐, 알릴옥시카보닐 (Alloc), 벤질옥소카보닐 (CBZ), 알릴, 프탈리미드, 벤질 (Bn), 플루오레닐메틸마보닐 (Fmoc), 포르밀, 아세틸, 클로로아세틸, 디클로로아세틸, 트리클로로아세틸, 페닐아세틸, 트리플루오로아세틸, 벤조일 등을 포함한다.
당업자는 화합물/제제가 하나 이상의 입체 중심을 함유할 수 있고 라세미체 또는 부분입체이성질체 혼합물로서 존재할 수 있음을 인식할 것이다. 당업자는 HPLC, 키랄 HPLC, 부분입체이성질체 염의 분별 결정화, 동적 효소 분해 (곰팡이 유래, 박테리아 유래, 또는 동물 유래 리파제 또는 에스테라제), 거울상 강화 시약을 가용한 공유 부분입체이성질체 유도체의 형성을 포함하지만 이들로 제한되지 않는, 이러한 화합물의 입체강화된(stereoenriched) 또는 입체순수(stereopure) 이성질체를 얻기 위해 이성질체를 분리하는 많은 방법이 당업계에 공지되어 있음을 또한 이해할 것이다.
당업자는 본 개시내용의 화합물에 존재하는 다양한 작용기, 예컨대 지방족기, 알코올, 카르복실산, 에스테르, 아미드, 알데하이드, 할로겐 및 니트릴이 환원, 산화, 에스테르화, 가수분해, 부분 산화, 부분 환원, 할로겐화, 탈수, 부분 수화, 및 수화를 포함하지만 이들로 제한되지 않는 당업계에 널리 알려진 기술에 의해 상호전환될 수 있음을 이해할 것이다. ["March's Advanced Organic Chemistry", 5th Ed., Ed.: Smith, M.B. and March, J., John Wiley & Sons, New York: 2001]는 이의 전문이 본원에 참조로서 포함된다. 이러한 상호전환은 앞서 언급한 기술 중 하나 이상을 요구할 수 있으며, 본 개시내용의 화합물을 합성하기 위한 특정 방법은 아래 예시에서 설명된다.
용도, 제형화, 및 투여
본 개시내용의 화합물, 제제, 조성물 등은 원하는 용도에 따라 다양한 형태로 제공될 수 있다. 일부 구현예에서, 이들은 약학 조성물로 제공된다. 당업자가 이해하는 바와 같이, 많은 경우에 약학 조성물은 제어된 양을 포함하고 인간 환자와 같은 대상체에게 투여하기 위해 제조된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용 본원에 개시된 화합물, 제제, 및/또는 조성물을 포함하는 조성물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 화합물, 제제, 또는 조성물을 포함하는 약학 조성물 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 화합물, 제제, 또는 조성물의 치료학적 유효량을 포함하는 약학 조성물 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 제공한다. 일부 구현예에서, 약학 조성물은 보관, 운송, 투여 등을 위해 포장된다. 일부 구현예에서, 약학 조성물은 상당한 양의 유기 용매를 함유하지 않는다 (예를 들어, 유기 용매의 총량은 약학 조성물의 중량 및/또는 부피의 50%, 40%, 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, 5%, 4%, 3%, 2%, 또는 1% 이하이다).
일부 구현예에서, 약학적으로 허용 가능한 담체는 제형화되는 화합물의 약리학적 활성을 파괴하지 않는 무독성 담체, 보조제, 또는 비히클이거나 이를 포함한다. 약학적으로 허용 가능한 담체, 보조제 또는 비히클은, 이온 교환제, 알루미나, 알루미늄 스테아레이트, 레시틴, 혈청 단백질, 예컨대 인간 혈청 알부민, 완충 물질, 예컨대 인산염, 글리신, 소르빈산, 소르빈산칼륨, 포화 식물성 지방산의 부분 글리세린 혼합물, 물, 염, 또는 전해질, 예컨대 프로타민 황산염, 인산 수소 이나트륨, 인산 수소 칼륨, 염화 나트륨, 아연 염, 콜로이드 실리카, 삼규산 마그네슘, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로오스계 물질, 폴리에틸렌 글리콜, 카복시 메틸 셀룰로오스 나트륨, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-블록 폴리머, 폴리에틸렌 글리콜 및 양모 지방을 포함할 수 있지만 이들로 제한되지는 않는다.
일부 구현예에서, 약학적으로 허용 가능한 유도체는 무독성 염, 에스테르, 에스테르의 염, 또는 수혜자에게 투여 시 직접 또는 간접적으로 화합물 또는 활성 대사산물 또는 이의 잔기를 제공할 수 있는 화합물의 다른 유도체이다.
조성물은 경구적으로, 비경구적으로, 흡입 스프레이에 의해, 국소적으로, 직장으로, 비강으로, 구강으로, 질로, 또는 이식된 저장소를 통해 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 비경구 투여는 피하, 정맥내, 근육내, 관절내, 윤확막내, 흉골내, 척수강내, 간내, 병변내 및 두개내 주사 또는 주입 기술을 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 경구적으로, 복강내로 또는 정맥내로 투여된다. 멸균 주사용 형태의 조성물은 수성 또는 유성 현탁액일 수 있다. 이러한 현탁액은 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제를 사용하여 당업계에 공지된 기술에 따라 제제화될 수 있다. 멸균 주사용 제형은 또한 무독성 비경구적으로 허용되는 희석제 또는 용매 내 멸균 주사용 용액 또는 현탁액, 예를 들어 1, 3-부탄디올 중 용액일 수 있다. 이용될 수 있는 허용 가능한 비히클 및 용매 중에는 물, 링거액 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 또한, 멸균 고정 오일(fixed oil)은 일반적으로 용매 또는 현탁 매질로서 이용된다.
일부 구현예에서, 합성 모노- 또는 디-글리세리드를 포함하는 완화성(bland) 고정 오일이 이용될 수 있다. 올레산 및 이의 글리세리드 유도체와 같은 지방산은 주사제 제조에 유용하며, 특히 폴리옥시에틸화 버전의 올리브유 또는 피마자유와 같은 천연 약학적으로 허용 가능한 오일도 유용하다. 이러한 오일 용액 또는 현탁액은 또한 카르복시메틸 셀룰로오스와 같은 장쇄 알코올 희석제 또는 분산제, 또는 에멀전 및 현탁액을 포함하는 약학적으로 허용 가능한 투여 형태의 제형에 일반적으로 사용되는 유사한 분산제를 함유할 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 고체, 액체, 또는 기타 투여 형태의 제조에 일반적으로 사용되는 트윈(Tween), 스팬(Span) 및 기타 유화제 또는 생체이용률 강화제와 같은 일반적으로 사용되는 계면활성제도 제형화 목적으로 사용될 수 있다.
약학적으로 허용 가능한 조성물은 캡슐, 정제, 수성 현탁액, 또는 용액을 포함하지만 이들로 제한되지 않는 임의의 경구적으로 허용 가능한 투여 형태로 경구 투여될 수 있다. 경구용 정제의 경우, 일반적으로 사용되는 담체는 락토오스와 옥수수 전분을 포함한다. 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제도 또한 일반적으로 첨가된다. 캡슐 형태로 경구 투여하는 경우, 유용한 희석제는 락토오스 및 건조 옥수수 전분을 포함한다. 경구 사용을 위해 수성 현탁액이 요구되는 경우, 활성 성분이 유화제 및 현탁제와 조합된다. 원하는 경우, 특정 감미료, 향료, 또는 착색제를 또한 첨가할 수도 있다.
일부 구현예에서, 약학적으로 허용 가능한 조성물은 직장 투여용 좌제 형태로 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 이는 실온에서는 고체이지만 직장 온도에서는 액체이므로 직장에서 녹아 약물을 방출하는 적합한 비자극성 부형제와 제제를 혼합하여 제조할 수 있다. 이러한 물질은 코코아 버터, 밀랍, 및 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다.
일부 구현예에서, 약학적으로 허용 가능한 조성물은 특히 치료 표적이 눈, 피부, 또는 하부 장관의 질병을 포함하여 국소 적용에 의해 쉽게 접근할 수 있는 부위 또는 기관을 포함하는 경우, 국소적으로 투여될 수 있다. 각각의 이들 부위 또는 기관에 적합한 국소 제형이 용이하게 제조된다.
하부 장관에 대한 국소 적용은 직장 좌약 제형 (상기 참조) 또는 적합한 관장 제형으로 수행될 수 있다. 국소적으로 경피 패치를 사용할 수도 있다.
국소 적용의 경우, 약학적으로 허용 가능한 조성물은 하나 이상의 담체에 현탁되거나 용해된 활성 성분을 함유하는 적합한 연고로 제형화될 수 있다. 본 개시내용의 화합물의 국소 투여를 위한 담체는 미네랄 오일, 액체 바셀린, 화이트 바셀린, 프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌, 폴리옥시프로필렌 화합물, 유화 왁스 및 물을 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다. 대안적으로, 제공된 약학적으로 허용 가능한 조성물은 하나 이상의 약학적으로 허용 가능한 담체에 현탁되거나 용해된 활성 성분을 함유하는 적합한 로션 또는 크림으로 제형화될 수 있다. 적합한 담체는 미네랄 오일, 소르비탄 모노스테아레이트, 폴리소르베이트 60, 세틸 에스테르 왁스, 세테아릴알코올, 2-옥틸도데칸올, 벤질 알코올 및 물을 포함하지만 이들로 제한되지는 않는다.
안과 용도의 경우, 약학적으로 허용 가능한 조성물은 벤질알코늄 염화물과 같은 보존제를 포함하거나 포함하지 않고, 등장성 pH 조정 멸균 식염수 중 미분화 현탁액으로 제형화될 수 있거나, 바람직하게는 등장성 pH 조정 멸균 식염수 중 용액으로 제형화될 수 있다. 대안적으로, 안과 용도의 경우, 상기 약학적으로 허용 가능한 조성물은 바셀린과 같은 연고로 제형화될 수 있다.
약학적으로 허용 가능한 조성물은 또한 비강 에어로졸 또는 흡입에 의해 투여될 수 있다. 이러한 조성물은 약학적 제형화 분야에 널리 공지된 기술에 따라 제조되며, 벤질 알코올 또는 기타 적합한 방부제, 생체이용률을 향상시키기 위한 흡수 촉진제, 플루오로카본, 및/또는 기타 통상적인 가용화제 또는 분산제를 사용하여, 식염수 중 용액으로 제조될 수 있다.
일부 구현예에서, 약학적으로 허용 가능한 조성물은 경구 투여용으로 제형화된다. 이러한 제형은 음식과 함께 또는 음식 없이 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 약학적으로 허용 가능한 조성물은 음식 없이 투여된다. 다른 구현예에서, 약학적으로 허용 가능한 조성물은 음식과 함께 투여된다.
단일 투여 형태의 조성물을 생성하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 화합물의 양은 치료 대상자, 특정 투여 방식에 따라 달라질 것이다. 일부 구현예에서, 제공된 조성물은 0.01 내지 100 mg/kg 체중/일의 억제제 투여량이 이들 조성물을 투여받는 환자에게 투여될 수 있도록 제형화된다.
일부 구현예에서, 본 발명은 특정 위치에서 표적 제제 모이어티에 접합된 관심 모이어티를 함유하는 치료 증강제를 포함하는 조성물에 관한 것이다.
일 구현예에서,
화학식 P-II의 구조를 갖는 제1 화합물, 및
LG-I의 구조를 갖는 제2 화합물
을 포함하는 조성물을 제공하고,
P-N-LPM-MOI (P-II)
화학식 P-II에서
P-N은 리신 잔기를 포함하는 단백질 제제 모이어티이고,
LPM은 링커이고,
MOI는 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)을 포함하는 관심 모이어티이며,
LG-OH (LG-I)
구조 LG-I에서, LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기이다.
다른 구현예에서, 조성물은
화학식 R-I를 갖는 제3 화합물,
화학식 R-III를 갖는 제4 화합물,
또는 이들의 조합을 추가적으로 포함하고,
LG-RG-LRM-MOI (R-I)
HO-RG-LRM-MOI (R-III)
LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기로서 화학식 LG-I의 LG와 동일하고,
RG는 반응기이고,
LRM은 링커로서 화학식 P-II에서와 동일하고,
MOI는 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)를 포함하는 관심 모이어티이다.
일부 구현예에서, 조성물은 제1 화합물과 제2 화합물을 등몰량으로 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 제2 화합물의 양은 조성물 중 제1 화합물과 제2 화합물의 총 몰수를 기준으로 50 몰퍼센트 (몰%) 이하일 수 있다. 일부 구현예에서, 제2 화합물의 양은 조성물 중 제1 화합물과 제2 화합물의 총 몰수를 기준으로 50 몰% 이하, 45 몰% 이하, 40 몰% 이하, 35 몰% 이하, 30 몰% 이하, 25 몰% 이하, 20 몰% 이하, 15 몰% 이하, 10 몰% 이하, 또는 5 몰% 이하일 수 있다. 일부 구현예에서, 제2 화합물의 양은 조성물 중 제1 화합물과 제2 화합물의 총 몰수를 기준으로 5% 이하, 4% 이하, 3% 이하, 2% 이하, 또는 1% 이하일 수 있다. 일부 구현예에서, 제2 화합물의 양은 조성물 중 제1 화합물과 제2 화합물의 총 몰수를 기준으로 1.0% 이하, 0.9% 이하, 0.8% 이하, 0.7% 이하, 0.6% 이하, 0.5% 이하, 0.4% 이하, 0.3% 이하, 0.2% 이하, 0.1% 이하일 수 있다. 일부 구현예에서, 제2 화합물의 양은 조성물 중 제1 화합물과 제2 화합물의 총 몰수를 기준으로 0.10% 이하, 0.09% 이하, 0.08% 이하, 0.07% 이하, 0.06% 이하, 0.05% 이하, 0.04% 이하, 0.03% 이하, 0.02% 이하, 0.01% 이하일 수 있다. 일부 구현예에서, 제2 화합물의 양은 조성물 중 제1 화합물과 제2 화합물의 총 몰수를 기준으로 0.010% 이하, 0.009% 이하, 0.008% 이하, 0.007% 이하, 0.006% 이하, 0.005% 이하, 0.004% 이하, 0.003% 이하, 0.002% 이하, 0.001% 이하일 수 있다. 일부 구현예에서, 제2 화합물의 양은 조성물 중 제1 화합물과 제2 화합물의 총 몰수를 기준으로 0.0010% 이하, 0.0009% 이하, 0.0008% 이하, 0.0007% 이하, 0.0006% 이하, 0.0005% 이하, 0.0004% 이하, 0.0003% 이하, 0.0002% 이하, 0.0001% 이하일 수 있다. 일부 구현예에서, 제2 화합물의 양은 조성물 중 제1 화합물과 제2 화합물의 총 몰수를 기준으로 0.00010% 이하, 0.00009% 이하, 0.00008% 이하, 0.00007% 이하, 0.00006% 이하, 0.00005% 이하, 0.00004% 이하, 0.00003% 이하, 0.00002% 이하, 0.00001% 이하일 수 있다. 일부 구현예에서, 제2 화합물의 양은 조성물 중 제1 화합물과 제2 화합물의 총 몰수를 기준으로 0.000010% 이하, 0.000009% 이하, 0.000008% 이하, 0.000007% 이하, 0.000006% 이하, 0.000005% 이하, 0.000004% 이하, 0.000003% 이하, 0.000002% 이하, 0.000001% 이하일 수 있다.
일부 구현예에서, 조성물은 제3 화합물, 제4 화합물, 또는 이들의 조합을 추가로 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 제3 화합물, 제4 화합물, 또는 이들의 조합의 양은 조성물 중 제1 화합물의 몰수를 기준으로 5% 이하, 4% 이하, 3% 이하, 2% 이하, 또는 1% 이하일 수 있다. 일부 구현예에서, 제3 화합물, 제4 화합물, 또는 이들의 조합의 양은 조성물 중 제1 화합물의 몰수를 기준으로 1.0% 이하, 0.9% 이하, 0.8% 이하, 0.7% 이하, 0.6% 이하, 0.5% 이하, 0.4% 이하, 0.3% 이하, 0.2% 이하, 0.1% 이하일 수 있다. 일부 구현예에서, 제3 화합물, 제4 화합물, 또는 이들의 조합의 양은 조성물 중 제1 화합물의 몰수를 기준으로 0.10% 이하, 0.09% 이하, 0.08% 이하, 0.07% 이하, 0.06% 이하, 0.05% 이하, 0.04% 이하, 0.03% 이하, 0.02% 이하, 0.01% 이하일 수 있다. 일부 구현예에서, 제3 화합물, 제4 화합물, 또는 이들의 조합의 양은 조성물 중 제1 화합물의 몰수를 기준으로 0.010% 이하, 0.009% 이하, 0.008% 이하, 0.007% 이하, 0.006% 이하, 0.005% 이하, 0.004% 이하, 0.003% 이하, 0.002% 이하, 0.001% 이하일 수 있다. 일부 구현예에서, 제3 화합물, 제4 화합물, 또는 이들의 조합의 양은 조성물 중 제1 화합물의 몰수를 기준으로 0.0010% 이하, 0.0009% 이하, 0.0008% 이하, 0.0007% 이하, 0.0006% 이하, 0.0005% 이하, 0.0004% 이하, 0.0003% 이하, 0.0002% 이하, 0.0001% 이하일 수 있다. 일부 구현예에서, 제3 화합물, 제4 화합물, 또는 이들의 조합의 양은 조성물 중 제1 화합물의 몰수를 기준으로 0.00010% 이하, 0.00009% 이하, 0.00008% 이하, 0.00007% 이하, 0.00006% 이하, 0.00005% 이하, 0.00004% 이하, 0.00003% 이하, 0.00002% 이하, 0.00001% 이하일 수 있다. 일부 구현예에서, 제3 화합물, 제4 화합물, 또는 이들의 조합의 양은 조성물 중 제1 화합물의 몰수를 기준으로 0.000010% 이하, 0.000009% 이하, 0.000008% 이하, 0.000007% 이하, 0.000006% 이하, 0.000005% 이하, 0.000004% 이하, 0.000003% 이하, 0.000002% 이하, 0.000001% 이하일 수 있다.
임의의 특정 환자에 대한 특정 투여량 및 치료 요법은 사용된 특정 화합물의 활성, 연령, 체중, 일반적 건강, 성별, 식이, 투여 시간, 배성 속도, 약물 조합, 치료 의사의 판단 및 치료할 특정 질병의 중증도를 포함하는 다양한 요인에 따라 달라질 것이라는 점 또한 이해해야 한다. 조성물 중 본 개시내용의 화합물의 양은 조성물 중 특정 화합물에 따라 또한 달라질 것이다.
본 개시내용의 기술 (예를 들어, 화합물, 제제, 조성물)은 예를 들어, 검출, 진단, 치료 등 다양한 목적으로 활용될 수 있다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 병태, 질환 또는 질병, 예를 들어 다양한 암을 치료하는데 유용하다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 암 세포의 항원에 결합할 수 있는 표적 결합 모이어티, 예를 들어, 항체 제제 모이어티를 포함한다. 일부 구현예에서, 표적 결합 모이어티는 항체 제제 모이어티이다. 일부 구현예에서, 항체 제제는 치료제이다. 무엇보다도, 치료제로 개발되고/되거나 승인된 (예를 들어, FDA, EMA 등에 의해) 많은 것을 포함한 다양한 항체 제제는 본 개시내용에 따라 다양한 질병에 대한 치료제를 제공하기 위해 활용될 수 있다.
무엇보다도, 본 개시내용은 다음의 구현예를 제공한다:
1. 화학식 R-I의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 염으로서,
LG-RG-LRM-MOI,
(R-I)
여기서,
LG는 RLG-LLG이고,
RLG는 , Rc-(Xaa)z-, 핵산 모이어티, 또는 소분자 모이어티이고,
각 Xaa는 독립적으로 아미노산 또는 아미노산 유사체의 잔기이고,
t는 0 내지 50이고,
z는 1 내지50이고,
각 Rc는 독립적으로 -La-R'이고,
각각의 a 및 b는 독립적으로 1 내지 200이고,
각 La는 독립적으로 공유 결합이거나, 또는 C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택되는 임의로 치환된 2가 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, 또는 -C(O)O-로 대체되고,
각 -Cy-는 독립적으로 임의로 치환된 2가 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭 기이고, 여기서 각 모노시클릭 고리는 독립적으로 C3-20 시클로지방족 고리, C6-20 아릴 고리, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원 헤테로아릴 고리, 및 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 20원 헤테로시클릴 고리로부터 선택되고,
LLG는 -LLG1-, -LLG1-LLG2-, -LLG1-LLG2-LLG3-, 또는 -LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-이고,
RG는 -LRG1-LRG2-, -LLG4-LRG1-LRG2-, -LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-, -LLG2-LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-이고,
각각의 LLG1, LLG2, LLG3, LLG4, LRG1, LRG2, 및 LRM은 독립적으로 L이고,
각 L은 독립적으로 공유 결합이거나 또는, 하나 이상의 지방족 모이어티, 아릴 모이어티, 각각 독립적으로 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로지방족 모이어티, 각각 독립적으로 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로방향족 모이어티, 또는 이러한 모이어티 중 임의의 하나 이상의 임의의 조합을 포함하는 2가 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 C1-100 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 C1-6 알킬렌, C1-6 알케닐렌, 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 2가 C1-6 헤테로지방족 기, , -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기, 또는 n이 1 내지 20인 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 대체되고,
각 R'는 독립적으로 -R, -C(O)R, -CO2R, 또는 -SO2R이고,
각 R은 독립적으로 -H이거나, 또는 C1-30 지방족, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-30 헤테로지방족, C6-30 아릴, C6-30 아릴지방족, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C6-30 아릴헤테로지방족, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴, 및 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 헤테로시클릴로부터 선택되는 임의로 치환된 기이거나, 또는
2개의 R기는 임의로 및 독립적으로 함께 공유 결합을 형성하거나, 또는
동일한 원자 상의 2개 이상의 R 기는 임의로 및 독립적으로 상기 원자와 함께, 상기 원자 외에 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 3 내지 30원, 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하거나, 또는
2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R 기는 임의로 및 독립적으로 이들의 개재 원자와 함께, 상기 개재 원자 외에 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 3 내지 30원, 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하고,
MOI는 베도틴 (MMAD, MMAE, 또는 MMAF), 베도틴, 오조가미신, 마포도틴, 데룩스테칸, 엠탄신, 고비테칸, 테시린, 듀오카마진, 소라브탄신, 라브탄신이거나 이를 포함하는 관심 모이어티인, 화합물 또는 이의 염.
2. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하고, 표적 제제는 단백질 제제인, 화합물.
3. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하고, 상기 표적 제제는 항체 제제인, 화합물.
4. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LG는 Fc 영역 또는 항체 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
5. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하고, 여기서 상기 표적 제제는 엔포투맙, 브렌툭시맙, 벨란타맙, 보세투주맙, 이노투주맙, 트라스투주맙, 젬투주맙, 폴라투주맙, 사시투주맙, 티소투맙, 론카스툭시맙, 다토포타맙, 데파툭시주맙, 미르베툭시맙, 투사미타맙, 아네투맙, 카미단루맙, 콜툭시맙, 디시타맙, 라베투주맙, 라디라투주맙, 리파스투주맙, 나라툭시맙, 시름투주맙, 파트리투맙, 피나투주맙, 폴라투주맙, 에나포타맙, 아네투맙 또는 옴부르타맙이거나 이를 포함하는 항체 제제인, 화합물 또는 염.
6. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 각 L은 독립적으로 공유 결합이거나, 또는 2가 임의로 치환된, 선형 또는 분지형 지방족 기 또는 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 헤테로지방족 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 , -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기, 또는 n이 1 내지 20인 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 대체되는 것인, 화합물.
7. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LG는 RLG-LLG-이고, RLG는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하고, LLG는 LLG1이고, LLG1은 L인, 화합물.
8. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, RG는 -LLG2-LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-이거나 이를 포함하고, 각각의 LLG2, LLG3, LLG4, LRG1, LRG2은 독립적으로 L인, 화합물.
9. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LG는 RLG-LLG-이고, RLG는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하고, LLG는 LLG1-LLG2-인, 화합물.
10. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, RG는 -LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
11. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LG는 RLG-LLG-이고, RLG는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하고, LLG는 LLG1-LLG2-LLG3-인, 화합물.
12. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, RG는 -LLG4-LRG1-LRG2-이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
13. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LG는 RLG-LLG-이고, RLG는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하고, LLG는 LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-인, 화합물.
14. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, RG는 -LRG1-LRG2-이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
15. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, RLG는 또는 Rc-(Xaa)z-인, 화합물.
16. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, RLG는 WXL이거나 이를 포함하고, 여기서 X는 아미노산 잔기인, 화합물.
17. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, RLG는 AWXLGELVW (서열 번호 16)이거나 이를 포함하고, 여기서X는 아미노산 잔기인, 화합물.
18. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, RLG는 DpLpAWXLGELVW (서열 번호 20)이거나 이를 포함하고, 여기서 X는 아미노산 잔기인, 화합물.
19. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, RLG는 DCAWXLGELVWCT (서열 번호 18)이거나 이를 포함하고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 임의로 이황화 결합을 형성하고, X는 아미노산 잔기인, 화합물.
20. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, RLG는 DpLpDCAWXLGELVWCT (서열 번호 23)이거나 이를 포함하고, 2개의 시스테인 잔기는 임의로 이황화 결합을 형성하고, X는 아미노산 잔기인, 화합물.
21. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, RLG는 CDCAWXLGELVWCTC (서열 번호 26)이거나 이를 포함하고, 여기서 상기 서열의 첫번째 및 마지막 시스테인, 및 중간의 2개의 시스테인은 각각 독립적으로 임의로 이황화 결합을 형성하고, X는 아미노산 잔기인, 화합물.
22. 구현예 16 내지 21 중 어느 하나에 있어서, RLG는 WXL이거나 이를 포함하고, X는 아미노산 잔기인, 화합물.
23. 구현예 15에 있어서, RLG는 표 A-1의 A-1 내지 A-50으로부터 선택되는 것인, 화합물.
24. 구현예 15에 있어서, RLG는 인, 화합물.
25. 구현예 15에 있어서, RLG는 인, 화합물.
26. 구현예 15에 있어서, RLG는 인, 화합물.
27. 구현예 15에 있어서, RLG는 인, 화합물.
28. 구현예 15에 있어서, RLG는 인, 화합물.
29. 구현예 15에 있어서, RLG는 인, 화합물.
30. 구현예 15에 있어서, RLG는 인, 화합물.
31. 구현예 15에 있어서, RLG는 인, 화합물.
32. 구현예 15에 있어서, RLG는 인, 화합물.
33. 구현예 15에 있어서, RLG는 인, 화합물.
34. 구현예 15에 있어서, RLG는 인, 화합물.
35. 구현예 15에 있어서, RLG는 인, 화합물.
36. 구현예 15에 있어서, RLG는 인, 화합물.
37. 구현예 15에 있어서, RLG는
인, 화합물.
38. 구현예 15에 있어서, RLG는 인, 화합물.
39. 구현예 33 내지 37 중 어느 하나에 있어서, Rc 는R-C(O)-이고, 여기서 R은 임의로 치환된 C1-6 지방족인, 화합물.
40. 구현예 33 내지 37 중 어느 하나에 있어서, Rc는 CH3C(O)-인, 화합물.
41. 구현예 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, RLG는 소분자 모이어티인, 화합물.
42. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LLG1는 공유 결합인, 화합물.
43. 구현예 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, LLG1는 -(CH2CH2O)n-이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
44. 구현예 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, LLG1은 -(CH2)n-O-(CH2CH2O)n-(CH2)n-이거나 이를 포함하고, 여기서 각 n은 독립적으로 1 내지 10이고, 각 - CH2-는 독립적으로 임의로 치환되는 것인, 화합물.
45. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 -NR'-이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
46. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 -C(O)-이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
47. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 -NR'C(O)-이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
48. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 -(CH2)n-OC(O)N(R')-이거나 이를 포함하고, 여기서 -(CH2)n-은 임의로 치환되는 것인, 화합물.
49. 구현예 1 내지 60 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 공유 결합인, 화합물.
50. 구현예 1 내지 60 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 -CH2N(CH2CH2CH2S(O)2OH)-C(O)-인, 화합물.
51. 구현예 1 내지 60 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 -C(O)-NHCH2-인, 화합물.
52. 구현예 1 내지 60 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 -C(O)O-CH2- 인, 화합물.
53. 구현예 1 내지 60 중 어느 하나에 있어서, LLG2는 -NH-C(O)O-CH2- 인, 화합물.
54. 구현예 62, 63, 및 66 내지 69 중 어느 하나에 있어서, -C(O)-는 LLG3에 결합되는 것인, 화합물.
55. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LLG3는 임의로 치환된 아릴 고리이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
56. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LLG3는 임의로 치환된 페닐 고리이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
57. 구현예 71 또는 72에 있어서, 상기 고리는 치환되고, 하나 이상의 치환기는 독립적으로 전자 흡인기인, 화합물.
58. 구현예 73에 있어서, 치환기는 -F인, 화합물.
59. 구현예 73에 있어서, 치환기는 -NO2인, 화합물.
60. 구현예 1 내지 75 중 어느 하나에 있어서, LLG3는 이고, 여기서 s는 0 내지 4이고, 각 Rs는 독립적으로 할로겐, -NO2, -L-R', -C(O)-L-R', -S(O)-L-R', -S(O)2-L-R', 또는 -P(O)(-L-R')2인, 화합물.
61. 구현예 1 내지 75 중 어느 하나에 있어서, LLG3는 인, 화합물.
62. 구현예 1 내지 75 중 어느 하나에 있어서, LLG3는 인, 화합물.
63. 구현예 1 내지 71 중 어느 하나에 있어서, LLG3는 인, 화합물.
64. 구현예 1 내지 71 중 어느 하나에 있어서, LLG3는 인, 화합물.
65. 구현예 76 내지 80 중 어느 하나에 있어서, C1은 LLG4에 결합되는 것인, 화합물.
66. 구현예 1 내지 70 중 어느 하나에 있어서, LLG3는 공유 결합인, 화합물.
67. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LLG4는 -O-이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
68. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LLG4는 -NR'- 이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
69. 구현예 1 내지 83 중 어느 하나에 있어서, LLG4는 -O-인, 화합물.
70. 구현예 1 내지 83 중 어느 하나에 있어서, LLG4는 -NH-인, 화합물.
71. 구현예 1 내지 83 중 어느 하나에 있어서, LLG4는 공유 결합인, 화합물.
72. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LRG1은 공유 결합인, 화합물.
73. 구현예 1 내지 88 중 어느 하나에 있어서, LRG1은 -S(O)2-이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
74. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LRG2는 -C(O)-이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
75. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LRG2는 -LRG3-C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4-이거나 이를 포함하고, 여기서 각각의 RRG1, RRG2, RRG3 및 RRG4는 독립적으로 -L-R'이고, LRG3은 -C(O)-, -C(O)O-, -C(O)N(R')-, -S(O)-, -S(O)2-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, 또는 -P(O)(N(R')2)-인, 화합물.
76. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LRG2는 임의로 치환된 -LRG3-C(=CHRRG2)-CHRRG4-이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
77. 구현예 91 또는 92에 있어서, RRG2 및 RRG4는 이들의 개재 원자와 함께 0 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 3 내지 10원 모노시클릭 또는 바이시클릭 고리를 형성하는 것인, 화합물.
78. 구현예 91 또는 92에 있어서, -C(=CHRRG2)-CHRRG4 또는 -C(=CRRG1RRG2)-CRRG3RRG4는 임의로 치환된 인, 화합물.
79. 구현예 1 내지 89 중 어느 하나에 있어서, LRG2는 -C(O)-인, 화합물.
80. 구현예 1 내지 89 중 어느 하나에 있어서, LRG2는 인, 화합물.
81. 구현예 1 내지 89 중 어느 하나에 있어서, -LLG1-LRG2-는 -C(O)-인, 화합물.
82. 구현예 1 내지 89 중 어느 하나에 있어서, -LLG1-LRG2-는 인, 화합물.
83. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LPM은 -(CH2CH2O)n-이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
84. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LPM은 -(CH2)n-O-(CH2CH2O)n-(CH2)n-이거나 이를 포함하고, 여기서 각 n은 독립적으로 1 내지 10이고, 각 - CH2-는 독립적으로 임의로 치환되는 것인, 화합물.
85. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 MMAD, MMAE, 및 MMAF와 같은 세포독성제이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
86. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는, MMAD, MMAE, 또는 MMAF이거나 이를 포함하는 펩티드 모이어티이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
87. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 MMAD, MMAE, 또는 MMAF에 추가적으로 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
88. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 생물학적 직교 반응에 적합한 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
89. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 임의로 RG에서 하나 이상을 제외하고 절단이 LG를 방출할 수 있는 절단 가능한 기를 포함하지 않는 화합물.
90. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, RG 또는 MOI에서를 제외하고 -S-S-, 아세탈 또는 이민기를 포함하지 않는 화합물.
91. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 화합물이 2개의 아미노산 잔기에 의해 형성된 -S-S-를 가질 수 있다는 점을 제외하고는 -S-S-, 아세탈 또는 이민기를 포함하지 않는 화합물.
92. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 화합물이 시스테인 잔기에 의해 형성된 -S-S-를 가질 수 있다는 점을 제외하고는 -S-S-, 아세탈 또는 이민기를 포함하지 않는 화합물.
93. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, -S-S-, 아세탈 또는 이민기를 포함하지 않는 화합물.
94. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서,
로부터 선택되는 하나 이상의 기를 포함하는 화합물.
95. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서,
로부터 선택되는 구조를 포함하는 화합물.
96. 구현예 1 내지 94 중 어느 하나에 있어서, 화합물이 반응기를 포함하고, 여기서 상기 반응기는 구현예 95에 나타낸 기이거나 이를 포함하는 것인, 화합물.
97. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 2개 이상의 표적 결합 모이어티를 포함하는 화합물.
98.
1) 표적 제제를 반응 파트너와 접촉시키는 단계
2) 제제를 형성하는 단계
를 포함하는 방법으로서,
상기 반응 파트너는
표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 제1 기,
반응기,
MMAD, MMAE, 또는 MMAF이거나 이를 포함하는 관심 모이어티, 및
임의로 하나 이상의 링커 모이어티를 포함하고,
상기 제제는
표적 제제 모이어티,
상기 관심 모이어티, 및
임의로 하나 이상의 링커 모이어티
를 포함하는 것인, 방법.
99. 구현예 98에 있어서, 반응기는 제1 기와 관심 모이어티 사이에 위치하고, 독립적으로 및 임의로 링커 모이어티를 통해 제1 기 및 관심 모이어티에 연결되는 것인, 방법.
100. P-I의 구조를 갖는 제제 또는 이의 염을 제조하는 방법으로서
여기서,
P는 표적 제제 모이어티이고,
LPM은 링커이고,
MOI는 MMAD, MMAE, 또는 MMAF이거나 이를 포함하는 관심 모이어티이고,
상기 방법은
1) 표적 제제를 화학식 R-I의 구조 또는 이의 염을 갖는 반응 파트너와 접촉시키는 단계
2) 화학식 P-I의 구조를 갖는 제제를 형성하는 단계를 포함하고
여기서,
LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기이고,
RG는 상기 반응기이고,
LRM은 링커이고,
MOI는 MMAD, MMAE, 또는 MMAF이거나 이를 포함하는 관심 모이어티인, 방법.
101. P-II의 구조를 갖는 제제를 제조하는 방법으로서
여기서,
P-N은 리신 잔기를 포함하는 단백질 제제 모이어티이고,
LPM은 링커이고,
MOI는 MMAD, MMAE, 또는 MMAF이거나 또는 이를 포함하는 관심 모이어티이고,
상기 방법은
P-N을 화학식 R-I의 구조 또는 이의 염을 갖는 반응 파트너와 접촉시키는 단계를 포함하고
여기서,
LG는 P-N에 결합하는 단백질 결합 모이어티를 포함하는 기이고,
RG는 반응기이고,
LRM은 링커이고,
MOI는 MMAD, MMAE, 또는 MMAF이거나 이를 포함하는 관심 모이어티인,
방법.
102. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제는 단백질 제제이거나 이를 포함하는 것인, 방법.
103. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제는 엔포르투맙, 브렌툭시맙, 벨란타맙, 보세투주맙, 이노투주맙, 트라스투주맙, 젬투주맙, 폴라투주맙, 사시투주맙, 티소투맙, 론카스툭시맙, 다토포타맙, 데파툭시주맙, 미르베툭시맙, 투사미타맙, 아네투맙, 카미단루맙, 콜툭시맙, 디시타맙, 레베투주맙, 라디라투주맙, 리파스투주맙, 나라툭시맙, 시름투주맙, 파트리투맙, 피나투주맙, 폴라투주맙, 에나포타맙, 아네투맙 또는 옴부르타맙과 같은 항체 제제이거나 이를 포함하는 것인, 방법
104. 구현예 103에 있어서, 관심 모이어티는 K246 또는 K248 또는 상응하는 위치에서 상기 항체 제제에 선택적으로 부착되는 것인, 방법.
105. 구현예 103에 있어서, 관심 모이어티는 K288 또는 K290 또는 상응하는 위치에서 상기 항체 제제에 선택적으로 부착되는 것인, 방법.
106. 구현예 103에 있어서, 관심 모이어티는 IgG2 중쇄의 K251 또는 K253 또는 상응하는 위치에서 상기 항체 제제에 선택적으로 부착되는 것인, 방법.
107. 구현예 103에 있어서, 관심 모이어티는 IgG4 중쇄의 K239 또는 K241 또는 상응하는 위치에서 상기 항체 제제에 선택적으로 부착되는 것인, 방법.
108. 구현예 103에 있어서, 관심 모이어티는 K317 또는 상응하는 위치에서 상기 항체 제제에 선택적으로 부착되는 것인, 방법.
109. 구현예 103에 있어서, 관심 모이어티는 경쇄 잔지 위에 중쇄 잔기에서 항체 제제에 선택적으로 부착되는 것인, 방법.
110. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제는 IgG 항체 제제이거나 이를 포함하는 것인, 방법.
111. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제는 Fc 영역이거나 이를 포함하는 것인, 방법.
112. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 반응 파트너는 구현예 1 내지 98 중 어느 하나의 화합물인 것인, 방법.
113. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 상기 접촉 및 형성 단계는 하나의 포트에서 수행되는 것인, 방법.
114. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 상기 접촉 및 형성 단계는 하나의 화학 반응에서 수행되는 것인, 방법.
115. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제 모이어티를 포함하는 제제에서의 작용기의 절단과 주로 관련된 반응을 포함하지 않는 방법.
116. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LRM 또는 LPM에서의 작용기의 절단과 주로 관련된 반응을 포함하지 않는 방법.
117. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제 모이어티를 포함하는 제제에서의 작용기의 제거와 주로 관련된 반응을 포함하지 않는 방법.
118. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LRM 또는 LPM에서의 작용기의 제거와 주로 관련된 반응을 포함하지 않는 방법.
119. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제 모이어티를 포함하는 제제에서의 작용기의 산화와 주로 관련된 반응을 포함하지 않는 방법.
120. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LRM 또는 LPM에서의 작용기의 산화와 주로 관련된 반응을 포함하지 않는 방법.
121. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제 모이어티를 포함하는 제제에서의 작용기의 가수분해와 주로 관련된 반응을 포함하지 않는 방법.
122. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LRM 또는 LPM에서의 작용기의 가수분해와 주로 관련된 반응을 포함하지 않는 방법.
123. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, LRM 또는 LPM에서의 에스테르기의 가수분해와 주로 관련된 반응을 포함하지 않는 방법.
124. 구현예 164 내지 172 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제 모이어티는 단백질 제제 모이어티인 방법.
125. 구현예 164 내지 172 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제 모이어티는 항체 제제 모이어티인 방법.
126. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 접촉은 표적 제제의 리신 잔기가 반응 파트너의 반응기와 반응하기에 충분한 조건 하 및 시간 동안 수행되는 것인, 방법.
127. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 접촉은 표적 제제의 리신 잔기가 반응하여 RG의 원자와 결합을 형성하여 LG를 방출하기에 충분한 조건 하 및 시간 동안 수행되는 것인, 방법.
128. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 상기 제제 및 상기 반응 파트너는 동일한 관심 모이어티를 공유하는 것인, 방법.
129. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 항체 제제이거나 이를 포함하는 것인, 방법.
130. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는 것인, 방법.
131. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 제1 관심 모이어티 내에 제1 반응성 모이어티를 포함하는 제1 제제를 제2 반응성 모이어티를 포함하는 제2 제제와 반응시키는 것을 포함하는 방법.
132. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 제2 제제는 제2 반응성 모이어티 및 펩티드 모이어티를 포함하는 것인, 방법
133. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 제2 제제는 제2 반응성 모이어티 및 단백질 모이어티를 포함하는 것인, 방법.
134. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 제2 제제는 제2 반응성 모이어티 및 항체 제제 모이어티를 포함하는 것인, 방법.
135. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 제1 관심 모이어티 내에 제1 반응성 모이어티를 포함하는 제1 제제를 제2 관심 모이어티 내에 제2 반응성 모이어티를 포함하는 제2 제제와 반응시키는 것을 포함하는 방법.
136. 구현예 132 내지 135 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 제제는 구현예 99 내지 131 중 어느 하나의 방법의 산물인, 방법.
137. 구현예 132 내지 135 중 어느 하나에 있어서, 상기 제2 제제는 구현예 99 내지 131 중 어느 하나의 방법의 산물인, 방법.
138. 구현예 132 내지 135 중 어느 하나에 있어서, 각각의 제1 및 제2 제제는 독립적으로 구현예 99 내지 131 중 어느 하나의 방법의 산물인, 방법.
139. 제1 관심 모이어티 내에 제1 반응성 모이어티를 포함하는 제1 제제를 제2 관심 모이어티 내에 제2 반응성 모이어티를 포함하는 제2 제제를 반응시키는 단계를 포함하는 방법으로서, 상기 제1 제제는 구현예 99 내지 131 중 어느 하나의 방법에 의해 제조되는 것인, 방법.
140. 제1 관심 모이어티 내에 제1 반응성 모이어티를 포함하는 제1 제제를 제2 관심 모이어티 내에 제2 반응성 모이어티를 포함하는 제2 제제를 반응시키는 단계를 포함하는 방법으로서, 상기 제2 제제는 구현예 99 내지 131 중 어느 하나의 방법에 의해 제조되는 것인, 방법.
141. 제1 관심 모이어티 내에 제1 반응성 모이어티를 포함하는 제1 제제를 제2 관심 모이어티 내에 제2 반응성 모이어티를 포함하는 제2 제제와 반응시키는 단계를 포함하는 방법으로서, 각각의 제1 및 제2 제제는 독립적으로 구현예 99 내지 131 중 어느 하나의 방법에 의해 제조되는 것인, 방법.
142. 구현예 132 내지 141 중 어느 하나에 있어서, 각각의 상기 제1 및 제2 제제는 독립적으로 P-I 또는 P-II의 구조, 또는 이의 염을 갖는 것인, 방법.
143. 구현예 132 내지 142 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 제제의 표적 제제 모이어티는 항체 제제 모이어티인, 방법.
144. 구현예 132 내지 143 중 어느 하나에 있어서, 상기 제2 제제의 표적 제제 모이어티는 항체 제제 모이어티인, 방법.
145. 구현예 143 또는 144에 있어서, 상기 제1 및 제2 표적 모이어티는 독립적으로 서로 다른 항원을 향한 항체 제제 모이어티인, 방법.
146. 구현예 143 또는 144에 있어서, 상기 제1 및 제2 표적 모이어티는 독립적으로 서로 다른 단백질을 향한 항체 제제 모이어티인, 방법.
147. 구현예 132 내지 146 중 어느 하나에 있어서, 상기 제1 제제는 브렌툭시맙과 같은 항 CD30 항체, 또는 엔포르투맙과 같은 항-넥틴-4-단클론 항체를 포함하는 것인, 방법.
148. 구현예 132 내지 147 중 어느 하나에 있어서, 상기 제2 제제는 항-CD3 제제 모이어티를 포함하는 것인, 방법.
149. 구현예 132 내지 147 중 어느 하나에 있어서, 상기 제2 제제는 scFv를 포함하는 것인 방법.
150. 구현예 184 내지 202 중 어느 하나에 있어서, 제2 제제는 세툭시맙을 포함하는 것인 방법.
151. 구현예 224에 있어서, 화학식 P-I 또는 P-II의 제제, 또는 이의 염이거나 이를 포함하는 산물.
152. 구현예 224에 있어서, 화학식 P-I 또는 P-II의 제제, 또는 이의 염을 포함하는 조성물인 산물.
153. 구현예 151 또는 152에 있어서, 상기 제제는 -S-Cy-를 함유하지 않고, -Cy-는 임의로 치환된 5원 모노시클릭 고리이고 시스테인 잔기에 의해 형성되는 -S-S-를 함유하지 않고 시스테인 잔기가 아닌 -SH 또는 이의 염 형태를 함유하지 않는 것인, 산물.
154. 구현예 151 내지 153 중 어느 하나에 있어서, 약학 조성물인 산물.
155. 복수의 제제를 제공하는 조성물로서, 각각의 제제는 독립적으로
표적 제제 모이어티,
MMAD, MMAE, 또는 MMAF이거나 이를 포함하는 관심 모이어티, 및
임의로 표적 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티
를 포함하고,
여기서 상기 복수의 제제는 동일하거나 실질적으로 동일한 표적 제제 모이어티를 공유하고, 독립적으로 적어도 하나의 공통 위치에서 공통 변형을 공유하고,
표적 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제인, 조성물.
156. 복수의 제제를 제공하는 조성물로서, 각각의 제제는 독립적으로:
단백질 제제 모이어티,
MMAD, MMAE, 또는 MMAF이거나 이를 포함하는 관심 모이어티, 및
임의로 단백질 제제 모이어티와 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티
를 포함하고,
상기 복수의 제제의 단백질 제제 모이어티는 공통 아미노산 서열을 포함하고, 상기 복수의 제제는 독립적으로 단백질 제제 모이어티의 적어도 하나의 공통 아미노산 잔기에서 공통 변형을 공유하고,
공통 아미노산 서열을 포함하는 단백질 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제인, 조성물.
157. 복수의 제제를 제공하는 조성물로서, 각각의 제제는 독립적으로
항체 제제 모이어티,
예를 들어, MMAD, MMAE, 또는 MMAF이거나 이를 포함하는 관심 모이어티, 및
임의로 항체 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티
를 포함하고,
상기 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 아미노산 서열을 포함하거나 공통 항원에 결합할 수 있고, 상기 복수의 제제는 단백질 제제 모이어티의 독립적으로 적어도 하나의 공통 아미노산 잔기에서 공통 변형을 공유하고,
상기 공통 아미노산 서열을 포함하거나 상기 공통 항원에 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제인, 조성물.
158. 구현예 157에 있어서, 상기 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 항원에 결합할 수 있는 것인, 조성물.
159. 구현예 157에 있어서, 상기 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 2개 이상의 상이한 항원에 결합할 수 있는 것인, 조성물.
160. 구현예 157 내지 159 중 어느 하나에 있어서, 상기 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 아미노산 서열을 포함하는 것인, 조성물.
161. 구현예 157 내지 159 중 어느 하나에 있어서, 상기 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 Fc 영역에서 공통 아미노산 서열을 포함하는 것인, 조성물.
162. 구현예 157 내지 159 중 어느 하나에 있어서, 상기 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 Fc 영역을 포함하는 것인, 조성물.
163. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 표적, 단백질 또는 항체 제제 모이어티는 항 CD30 또는 항-넥틴-4 제제 모이어티이거나 이를 포함하는 것인, 조성물.
164. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 표적, 단백질 또는 항체 제제 모이어티는 벤툭시맙 또는 엔포르투맙이거나 이를 포함하는 것인, 조성물.
165. 구현예 159 내지 162 중 어느 하나에 있어서, 상기 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 IVIG 모이어티인, 조성물.
166. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 상기 복수의 제제는 공통 관심 모이어티를 포함하는 것인, 조성물.
167. 구현예 155 내지 166 중 어느 하나에 있어서, 각 복수의 제제는 독립적으로 화학식 P-I 또는 P-II의 제제 또는 이의 염인, 조성물.
168. 구현예 155 내지 167 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 검출 가능한 모이어티이거나 이를 포함하는 것인, 조성물.
169. 구현예 155 내지 167 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는 것인, 조성물.
170. 구현예 155 내지 167 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 표적 제제 모이어티, 단백질 제제 모이어티 또는 항체 모이어티 제제와 반응하지 않는 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는 것인, 조성물.
171. 구현예 155 내지 167 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 항체 모이어티 제제와 반응하지 않는 반응성 모이어티이거나 이를 포함하는 것인, 조성물.
172. 구현예 155 내지 167 중 어느 하나에 있어서, 관심 모이어티는 치료제 모이어티, 예컨대 세포독성 모이어티, 예컨대 MMAD, MMAE, 또는 MMAF이거나 이를 포함하는 것인, 조성물.
173. 구현예 155 내지 172 중 어느 하나에 있어서, 상기 링커는 천연 아미노산 펩티드 링커가 아닌, 조성물.
174. 구현예 155 내지 173 중 어느 하나에 있어서, 링커는 하나 이상의 -CH2-CH2-O-를 포함하는 것인, 조성물.
175. 링커는, n이 각 경우에 독립적으로 정수 2, 3, 4, 5, 6, 7, 및 8로부터 선택되는 -(CH2CH2O)n-이거나 이를 포함하는 것인, 조성물 또는 구현예 174.
176. 링커는, m이 독립적으로 각 경우에 정수 1, 2, 3, 및 4로부터 선택되는 -(CH2CH2O)n-(CH2)n-NHC(O)-(CH-2)n-, -[(CH2CH2O)n-(CH2)n-NHC(O)]m-(CH2)n-, and -(CH2CH2O)n-(CH2)n-N((CH2CH2O)n-(CH2)n-)((CH2CH2O)n-(CH2)n-)이거나 이를 포함하는 것인, 조성물 또는 구현예 174.
177. 구현예 156 내지 176 중 어느 하나에 있어서, 상기 단백질 제제 모이어티의 상기 공통 아미노산 서열은, IgG1 중쇄의 K246 및 K248 및 이에 상응하는 아미노산 잔기, IgG2 중쇄의 K251 및 K253 및 이에 상응하는 아미노산 잔기, 및 IgG4 중쇄의 K239 및 K241 및 이에 상응하는 아미노산 잔기로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 잔기를 포함하는 것인, 조성물.
178. 구현예 156 내지 177 중 어느 하나에 있어서, 상기 공통 아미노산 서열은 상기 단백질 또는 항체 제제 모이어티의 것의 적어도 10% 내지 100%인, 조성물.
179. 구현예 156 내지 177 중 어느 하나에 있어서, 상기 공통 아미노산 서열은 상기 단백질 또는 항체 제제 모이어티의 것의 적어도 50% 내지 100%인, 조성물.
180. 구현예 156 내지 177 중 어느 하나에 있어서, 상기 복수의 제제의 상기 단백질 제제 모이어티 또는 항체 제제 모이어티는 적어도 50% 아미노산 서열 상동성을 갖는 것인, 조성물.
181. 구현예 156 내지 177 중 어느 하나에 있어서, 상기 복수의 제제의 상기 단백질 제제 모이어티 또는 상기 항체 제제 모이어티는 적어도 80% 아미노산 서열 상동성을 갖는 것인, 조성물.
182. 구현예 156 내지 177 중 어느 하나에 있어서, 상기 복수의 제제의 상기 단백질 제제 모이어티 또는 상기 항체 제제 모이어티는 적어도 90% 아미노산 서열 상동성을 갖는 것인, 조성물.
183. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 공통 변형은 관심 모이어티 및 임의로 링커이거나 이를 포함하는 것인, 조성물.
184. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 모든 공통 변형은 관심 모이어티 및 임의로 공통 링커이거나 이를 포함하는 것인, 조성물.
185. 구현예 156 내지 184 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 중쇄의 K246 또는 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
186. 구현예 156 내지 185 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 중쇄의 K248 또는 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
187. 구현예 156 내지 186 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 중쇄의 K288 또는 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
188. 구현예 156 내지 187 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 중쇄의 K290 또는 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
189. 구현예 156 내지 188 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 중쇄의 K317 또는 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
190. 구현예 156 내지 189 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 중쇄의 K133 또는 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
191. 구현예 156 내지 190 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 중쇄의 K144 또는 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
192. 구현예 156 내지 191 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 중쇄의 K133 또는 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
193. 구현예 156 내지 192 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 경쇄의 K185 또는 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
194. 구현예 156 내지 193 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 항체 경쇄의 K187 또는 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
195. 구현예 156 내지 194 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 IgG2 항체 중쇄의 K251 또는 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
196. 구현예 156 내지 195 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 IgG2 항체 중쇄의 K253 또는 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
197. 구현예 156 내지 196 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 IgG4 항체 중쇄의 K239 또는 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
198. 구현예 156 내지 197 중 어느 하나에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 IgG4 항체 중쇄의 K241 또는 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
199. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 적어도 약 2%는 복수의 제제이거나, 또는 공통 아미노산 서열을 포함하는 단백질 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 적어도 약 2%는 복수의 제제이거나, 또는 공통 아미노산 서열을 포함하거나 공통 항원에 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 포함하는 모든 제제의 적어도 약 2%는 복수의 제제인, 조성물.
200. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이거나, 또는 공통 아미노산 서열을 포함하는 단백질 제제 모이어티를 포함하는 모든 제제의 적어도 약 1% 내지 100%는 복수의 제제이거나, 또는 공통 아미노산 서열을 포함하거나 공통 항원에 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제인, 조성물.
201. 구현예 199 또는 200에 있어서, 상기 백분율은 적어도 약 5%인, 조성물.
202. 구현예 199 또는 200에 있어서, 상기 백분율은 적어도 약 10%인, 조성물.
203. 구현예 199 또는 200에 있어서, 상기 백분율은 적어도 약 20%인, 조성물.
204. 구현예 199 또는 200에 있어서, 상기 백분율은 적어도 약 25%인, 조성물.
205. 구현예 199 또는 200에 있어서, 상기 백분율은 적어도 약 50%인, 조성물
206. 구현예 199 또는 200에 있어서, 상기 백분율은 적어도 약 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% 또는 95%인, 조성물.
207. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 각 복수의 제제는 -S-Cy-를 함유하지 않고, 여기서 -Cy-는 임의로 치환된 5원 모노시클릭 고리이고, 시스테인 잔기에 의해 형성되지 않은 -S-S-를 함유하지 않고, 시스테인 잔기의 것이 아닌 -SH 또는 이의 염을 함유하지 않는 것인, 조성물.
208. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 각 복수의 제제는 -S-CH2-CH2-를 함유하지 않는 것인, 조성물.
209. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 각 복수의 제제는 항체 제제에 특이적으로 결합할 수 있는 모이어티를 함유하지 않는 것인, 조성물.
210. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 각 복수의 제제는 독립적으로 항체 제제 모이어티를 포함하고, 각 제제는 독립적으로 Fc 수용체에 결합할 수 있는 것인, 조성물.
211. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 이전 구현예 중 어느 하나의 방법의 산물인 조성물.
212. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 약학 조성물인 조성물.
213. 구현예 155 내지 211 중 어느 하나의 복수의 제제인, 제제.
214. 구현예 213의 제제 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약학 조성물.
215. 구현예 212 또는 214에 있어서, 고체 형태인 조성물.
216. 구현예 212 또는 214에 있어서, 액체 형태이고, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45% 또는 50% (v/v) 이하의 유기 용매를 함유하는 조성물.
217. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 표적 제제 모이어티에 접합된 관심 모이어티와 표적 제제 모이어티의 비율, 또는 단백질 제제 모이어티에 접합된 관심 모이어티와 단백질 제제 모이어티의 비율, 또는 항체 제제 모이어티에 접합된 관심 모이어티와 항체 제제 모이어티의 비율은 약 0.5 내지 6인, 방법, 산물, 조성물 또는 제제.
218. 구현예 217에 있어서, 상기 비율이 약 0.5 내지 2.5인, 방법, 산물, 조성물, 또는 제제.
219. 구현예 217에 있어서, 상기 비율이 약 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1.0, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2.0, 2.5 또는 3인, 방법, 산물, 조성물, 또는 제제.
220. 이전 구현예 중 어느 하나에 있어서, 각 헤테로원자는 산소, 질소, 황, 인, 및 규소로부터 독립적으로 선택되는 것인, 화합물, 방법, 산물, 조성물, 또는 제제.
221. 임의의 다음의 화합물의 아미노산 잔기, 또는 임의의 다음의 화합물의 에스테르의 아미노산 잔기를 포함하는 제제:
또는
222. 구현예 221에 있어서, 화학식 R-I의 구조 또는 이의 염을 갖는 것인 제제.
223. 구현예 221 중 어느 하나의 화합물의 아미노산 잔기를 포함하는 폴리펩티드 제제.
224. 구현예 221 중 어느 하나의 화합물을 제공하는 것을 포함하는 화합물의 제조 방법.
225. 화학식 R-I의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 염으로서
여기서,
LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기이고,
RG는 반응기이고,
LRM은 링커이고,
MOI는 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)를 포함하는 관심 모이어티인, 화합물 또는 염.
226. 화학식 P-II의 구조를 갖는 제1 화합물, 및 LG-I의 구조를 갖는 제2 화합물을 포함하는 조성물로서
화학식 P-II에서,
P-N은 리신 잔기를 포함하는 단백질 제제 모이어티이고,
LPM은 링커이고,
MOI는 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)을 포함하는 관심 모이어티이고,
LG-I에서, LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기인, 조성물.
227. 구현예 226에 있어서, 화학식 R-I를 갖는 제3 화합물, 화학식 R-III를 갖는 제4 화합물, 또는 이들의 조합을 추가로 포함하는 조성물로서,
LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기이고, 이는 화학식 LG-I 중 LG와 동일하고,
RG는 반응기이고,
LRM은 링커이고, 이는 화학식 P-II 중의 것과 동일하고,
MOI는 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)을 포함하는 관심 모이어티인, 조성물.
실시예
하기 실시예에 기술된 바와 같이, 특정한 예시적 구현예에서, 화합물, 제제, 조성물 등은 실시예로서 하기 절차에 따라 제조 및/또는 평가된다. 일반적인 방법은 본 개시내용의 특정 화합물, 제제, 조성물의 합성을 기술하지만, 다음의 일반적인 방법 및 당업자에게 공지된 다른 방법이 본 개시내용의 기술을 제공하기 위해 본 개시내용에 따라 적용될 수 있음이 이해될 것이다.
약어
다음 실시예에서는 다음 약어가 사용된다.
DCM 디클로로메탄
DIC N,N'-디이소프로필카르보디이미드
DIEA N,N-디이소프로필에틸아민
DMAP 4-디메틸아미노피리딘
DMF 디메틸푸란
EDCI 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드
Fmoc 플루오레닐메틸옥시카보닐 염화물
HATU 헥사플루로포스페이트 아자벤조트리아졸 테트라메틸 우로늄
HBTU (1H-벤조트리아졸-1-일옥시)(디메틸아미노)-N,N-디메틸메탄이미늄 헥사플루오로포스페이트
HOBt 히드록시벤조트리아졸
NMM N-메틸모르폴린
SPPS 고체상 펩티드 합성체
TEA 트리에틸아민
THF 테트라히드로푸란
TFA 트리플루오로 아세트산
실시예 1. 반응기를 함유하는 3-플루오로-4-히드록시벤질아민의 합성 (화합물 4)
HBr/H2O (40% HBr, 총 300 mL) 중의 중간체 1 (10 g, 64.45 mmol)의 혼합물을 140 °C에서 16시간 동안 교반하였다.　 70 oC에서 감압 하에 용매를 제거하고, 잔기를, MeCN (50 mL)에서 10분간 분쇄하였다. 여과 후, 고체를 동결건조 하에 건조시켜 중간체 2 (13.0 g, 58.5 mmol, 90.8% 수율, HBr 염)를 갈색 고체로서 얻었다. 1H NMR: (400 MHz DMSO-d 6 ) δ ppm 10.04 (s, 1 H) 8.18 (s, 3 H) 7.32 (dd, J = 12.17, 1.88 Hz, 1 H) 7.11 (dd, J = 8.28, 1.51 Hz, 1 H) 6.96 - 7.03 (m, 1 H) 3.93 (q, J = 5.52 Hz, 2 H).
DMF (200 mL) 중 중간체 2 (13.0 g, 58.5 mmol, 1 당량, HBr), 중간체 2a (24.1 g, 58.5 mmol, 1 당량), DIEA (3.78 g, 29.2 mmol, 5.10 mL, 0.5 당량) 및 HOBt (11.87 g, 87.8 mmol, 1.5 당량)의 혼합물을 15 oC에서 EDCI (12.35 g, 64.4 mmol, 1.1 당량)에 첨가하였고, 혼합물을 15 °C에서 3시간 동안 교반하였다.　혼합물을 0.5 M HCl (냉간, 1 L)에 적가하였고 백색 고체가 침전되었다. 여과 후, 고체를 동결건조 하에 건조시켜 중간체 3 (31 g, 조물질)을 백색 고체로서 얻었다.
대안적으로, 반응은 60.0 g의 화합물 2 출발 물질을 사용하여 20 oC에서 수행될 수 있다. HCl로 침전시키고 여과한 후 고체를 DCM (2 L) 중에 용해시키고, 0.5 M HCl (800 mL), H2O (800 mL), 염수 (800 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축하였다. 잔기를 실리카겔 컬럼 (DCM/MeOH = 1/0 내지 20/1)으로 정제하여 중간체 화합물 3 (120.0 g, 90% 순도, 소량의 DMF 함유, 83.3% 수율)을 흰색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 9.70 (s, 1 H) 8.34 (t, J = 5.77 Hz, 1 H) 7.90 (d, J = 7.53 Hz, 2 H) 7.71 (d, J = 7.53 Hz, 2 H) 7.61 (d, J = 8.28 Hz, 1 H) 7.39 - 7.47 (m, 2 H) 7.29 - 7.36 (m, 2 H) 7.02 (d, J = 12.30 Hz, 1 H) 6.85 - 6.92 (m, 2 H) 4.20 - 4.39 (m, 4 H) 4.11 - 4.19 (m, 2 H) 1.36 (s, 9 H).
TFA (300 mL)　및 DCM (300 mL) 중 화합물 3 (30 g, 56.12 mmol, 1.0 당량)의 혼합물을 15 °C에서 0.5 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔기를 플래시　C18 (ISCO®;　120 g SepaFlash® C18　플래시 컬럼, 0~90% MeCN/H2O의 용리액 구배 @　75 mL/분)로 직접 정제하여 화합물 4 (18 g, 37.6 mmol, 67.0% 수율)를 백색 고체로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 9.69 (s, 1 H) 8.34 (t, J = 5.90 Hz, 1 H) 7.90 (d, J = 7.28 Hz, 2 H) 7.71 (d, J = 7.53 Hz, 2 H) 7.54 (d, J = 6.53 Hz, 1 H) 7.42 (t, J = 7.40 Hz, 2 H) 7.27 - 7.37 (m, 1 H) 7.27 - 7.37 (m, 1 H) 7.02 (d, J = 12.05 Hz, 1 H) 6.82 - 6.93 (m, 2 H) 4.35 - 4.43 (m, 1 H) 4.20 - 4.31 (m, 3 H) 4.13 - 4.19 (m, 2 H).
실시예 2. 반응기에 커플링된 항체 결합 모이어티의 제조 절차 (중간체 화합물 5a)
표준 Fmoc 화학을 사용하여 펩티드를 합성하였다.
1) 수지 제조: DCM (30 mL) 중 CTC 수지 (3.0 mmol, 3.0 g, 1.00 mmol/g) 및 Fmoc-Thr(tBu)-OH (1.19 g, 3.0 mmol, 1.00 당량)를 함유한 용기에 DIEA (4.00 당량)를 적가하고 15 oC에서 N2 버블링과 함께 2시간 동안 혼합하였다. 그 다음 MeOH (3.0 mL)를 첨가하고 추가 30분 동안 N2로 버블링했다. 수지를 DMF (60 mL)로 세척하고, 이어서 DMF (60 mL)에 20% 피페리딘을 첨가하고 Fmoc 탈보호를 위해 15 °C에서 30분 동안 N2로 버블링했다. 다음 단계로 진행하기 전에 혼합물을 여과하고 수지를 DMF (60 mL)로 세척했다. 대안적으로 이 반응은 20 oC에서 수행될 수 있다.
2) 커플링: DMF (30 mL) 중 Fmoc-Cys(Trt)-OH (5.25 g, 3.00 당량), HBTU (3.24 g, 2.85 당량)의 용액을 N2 버블링과 함께 수지에 첨가하였다. 그 다음 DIEA (6.00 당량)를 혼합물에 적가하고 N2로30분 동안 15 oC (또는 20 oC)에서 버블링하였다. 커플링 반응을 닌히드린 테스트로 모니터링하고, 무색으로 나타나면 커플링이 완료되었다. 이어서 수지를 DMF (60 mL)로 세척하였다
3) 탈보호: DMF (60 mL) 중 20% 피페리딘을 수지에 첨가하고 혼합물을 15 °C에서 30분 동안 N2로 버블링하였다. 탈보호 반응을 닌히드린 테스트로 모니터링하고, 파란색 또는 기타 갈색을 띤 빨간색이 나타나면 반응을 완료하였다. 이어서 수지를 DMF (60 mL)로 세척하였다.
4) 아미노산 (하기 표 중 3 내지 13)에 대해 단계 2 및 3을 반복하였다.
5) 화합물에 대한 커플링: DMF (30 mL) 중 화합물 4 (2.87 g, 2.00 당량), DIC (0.76 g, 2.00 당량) 및 HOBt (0.82 g, 2.00 당량)의 용액을 15 oC에서 60분 동안 N2 버블링과 함께 수지에 첨가하였다. 커플링 반응을 닌히드린 테스트로 모니터링하고, 무색이 나타나면 커플링을 완료하였다. 이어서 수지를 DMF (60 mL)로 세척하였다.
6) Fmoc 탈보호를 위해 단계 3을 반복하였다.
7) 아미노산 (하기 표 중 10 내지 13)에 대해 단계 5 및 6을 반복하였다.
8) 아세틸화: 10%Ac2O/5%NMM/85%DMF (60 mL) 용액을 수지에 첨가하고 N2로 20분 동안 버블링하였다. 아세틸화 반응을 닌히드린 테스트로 모니터링하고, 무색이 나타나면 커플링을 완료하였다. 이어서 수지를 DMF (60 mL)로 세척하여 중간체 5a를 얻었다.
9) DMF (60 mL) 중 3% 히드라진을 N2 버블링과 함께 15분 동안 수지에 첨가하여 화합물 4의 히드록실기를 유리시킨 후, 수지를 DMF (60 mL)로 세척하였다.
펩티드 절단 및 정제:
1) 상온에서 측쇄 보호된 펩티드 수지가 담긴 플라스크에 절단 완충액 (95%TFA/2.5%TIS/2.5%H2O, 60.0 mL)을 첨가하고 1시간 동안 교반하였다.
2) 여과액을 수집하였다.
3) 차가운 이소프로필 에테르 (300 mL)로 펩티드를 침전시킨 후 원심분리하였다 (3000 rpm에서 3분).
4) 이소프로필 에테르를 2회 더 세척하고 조물질 펩티드를 진공 하에서 2시간 동안 건조시켰다.
5) 화합물 5a (4.2 g, 조물질)을 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 3. 링커를 함유하는 에톡시에 대한 화합물 5a의 커플링
상기 단계 9 이후, 펩티드가 고체상 지지체에 여전히 커플링되어 있는 동안 또는 펩티드 절단 및 정체 후에, 3-(2-(프로프-2-인-1-일옥시)에톡시)에틸 링커가 5에 커플링될 수 있다. 3-(2-(프로프-2-인-1-일옥시)에톡시)프로판 산 (1.54 g, 9.0 mmol, 3.00 당량), DIC (1.13 g, 3.00 당량), HOBt (1.23 g, 3.00 당량) 및 DMAP (1.10 g, 3.00 당량)의 용액을 수지에 첨가하고 혼합물을 N2로 36시간 동안 버블링하였다. 커플링 반응은 미니 절단 후 LCMS로 모니터링되었으며, 거의 50%가 원하는 MS였다. 그 다음 수지를 DMF (60 mL), MeOH (60 mL)로 세척한 후 진공 하에 건조하였다.
실시예 4. MMAE1/화합물 1100의 제조를 위한 절차
화합물 1100 제조를 위한 완전한 반응 도식은 도 4에 도시된다.
A. 중간체 5의 제조
수지 제조 (1), 커플링 (2), 및 탈보호 단계 (3)를 사용하여 중간체 화합물 5a가 실시예 1로부터 제조된다.
이어지는 아미노산 신장을 위해 단계 2 및 3을 반복하였다: 표 1의 3번 내지 13번.
4) 아세틸화: Ac2O/NMM/DMF (10/5/85, v/v/v, 2 L)의 용액을 수지에 첨가하고 혼합물을 N2로 20분 동안 버블링하였다. 커플링 반응을 닌히드린 테스트로 모니터링하였고 무색으로 나타나면 커플링이 완료됨을 나타낸다. 수지를 DMF (2 L)로 세척하여 중간체 5a를 얻었다.
5) DMF (2 L) 중 3% 히드라진을 N2 버블링과 함께 15분 동안 수지에 첨가하여 중간체 5a 상에 히드록실기를 유리시킨 후, 수지를 DMF (2 L)로 세척하였다.
6) 페놀과의 커플링: Boc-NH-PEG2-CH2CH2COOH (55.4 g, 200.0 mmol, 2.00 당량), DIC (25.2 g, 200.0 mmol, 2.00 당량), HOBt (27.0 g, 200.0 mmol, 2.00 당량) 및 DMAP (12.2 g, 200.0 mmol, 2.00 당량)의 용액을 수지에 첨가하고 혼합물을 N2로 36시간 동안 버블링하였다. 커플링 반응을 미니 절단 후 LCMS로 모니터링 하였고 거의 70%가 원하는 MS였다. 이어서 수지를 DMF (2 L), MeOH (2 L)로 세척하고, 감압 하에 건조하여 중간체 5b (CTC 수지, 100.0 mmol)를 얻었다.
펩티드 절단 및 고리화:
1) 절단: 실온에서 측쇄 보호 펩티드가 들어 있는 플라스크에 절단 용액 (TFA/Tis/H2O, 95/2.5/2.5, v/v/v, 2 L)을 첨가하고 1시간 동안 교반하였다. 여과 후, 이소프로필 에테르 (냉간, 10 L)로 여과액을 침전시켰다. 여과 후, 고체를 이소프로필 에테르 (냉간, 1 L)로 추가로 2회 세적하고, 감압 하에 2시간 동안 건조하여 중간체 5c (140.5 g, 조물질)를 백색 고체로서 얻었다.
2) 고리화: HOAc/MeCN/H2O (4/3/3, v/v/v, 80 L) 중 조물질 펩티드(중간체 5c)의 혼합물에 노란색이 지속될 때까지 0.1 M I2/AcOH를 적가하고, 이어서 혼합물을 20 °C에서 5분간 교반하였다. 노란색이 사라질 때까지 0.1 M aq. Na2S2O3를 적가하여 혼합물을 ??칭하였다. 여과 후, 여과액을 분취용 HPLC (A: 0.075% TFA/H2O, B: MeCN)로 정제하고, 이어서 동결건조하여 중간체 5 (22.0 g, 93.3% 순도, 12.0% 수율)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 0.907 분, MS 계산치: M av =1833.02, 관찰된 질량: [M + H]+ = 1833.81, [M + 2H]2+ = 917.00.
B. 중간체 7의 제조
DMF (10.0 mL) 중 중간체 6 (500.0 mg, 44.5 μmol, 1.00 당량), DIEA (11.5 mg, 89.0 μmol, 2.00 당량)의 혼합물을 DMF (10.0 mL) 중 화합물 6a (700.0 mg, 2.15 mmol, 4.80 당량)의 용액에 0 oC에서 적가하였다. 혼합물을 20 °C에서 10분 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소비되었음을 보여주었다. 혼합물을 분취용 HPLC (TFA 조건)로 직접 정제하여 화합물 7 (490.0 mg, 36.8 μmol, 82.6% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 0.942 분, 계산된 질량: M av = 1334.6, [M + 2H]2+ = 668.3.
C. 화합물 1100의 제조
DMSO (500 μL) 중 중간체 5 (14.42 mg, 7.87 umol, 1.05 당량), 중간체 7 (10 mg, 7.49 umol, 1.00 당량)의 용액에 DIEA (4.84 mg, 37.46 μmol, 6.53 uL, 5.00 당량)를 첨가하였다. 이어서 혼합물을 20 °C에서 1시간동안 교반하였다. LCMS는 중간체 7이 완전히 소비되었으며 주요 피크가 원하는 m/z임을 나타내었다. 반응물을 여과하고, 여과액을 분취용-HPLC (TFA 조건)로 직접 정제한 후, 동결건조하여 화합물 1100 (9.7 mg, 3.18 μmol, 42.4% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.16 분, 계산된 질량: M av = 3052.53, [M + 2H]2+ = 1526.5.
실시예 5. 화합물 1101의 제조 절차
화합물 1101의 제조를 위한 완전한 반응 도식은 도 5에 도시된다.
A. 중간체 9의 제조
DMF (5 mL) 중 중간체 8 (1.56 g, 5.64 mmol, 1.00 당량)의 용액에 2,3,4,6-테트라플루오로페놀 (2.81 g, 16.93 mmol, 3.00 당량), EDCI (1.62 g, 8.47 mmol, 1.50 당량)를 첨가하였다. 반응물을 20 °C에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 중간체 8이 완전히 소비되었으며 하나의 주요 피크가 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물을 분취용 플래시 (C18, TFA 조건)로 정제하여 중간체9 (2.00 g, 4.70 mmol, 95.9% 순도, 83.3% 수율)를 노란색 오일로 얻었다. LCMS: RT = 1.30 분, 계산된 질량: M av = 425.37, [M + Na] + = 447.99.
B. 중간체 10의 제조
DMSO (9 mL) 중 중간체 5 (300.0 mg, 163.66 μmol, 1.00 당량), 중간체 9 (90.5 mg, 212.76 μmol, 1.30 당량), DIEA (105.7 mg, 818.32 μmol, 142.54 μL, 5.00 당량.)를 15 °C에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 주요 피크가 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물을 플래시 C18 (ISCO®; 120 g SepaFlash® C18 플래시 컬럼, 0-90% MeCN/H2O 에테르 구배 @ 75 mL/분의 용리액)로 직접 정제하여 중간체 10 (200.0 mg, 95.59 μmol, 58.40% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.05 분, 계산된 질량: M av = 2092.32, [M + 2H]2+ = 1046.60.
C. 중간체 11의 제조
TFA/DCM (3/7, 4 mL) 중 중간체 10 (200.0 mg, 95.59 umol, 1.00 당량)의 혼합물을 0 °C에서 0.5 시간 동안 교반하였다. LCMS는 중간체 10이 완전히 소모되었으며 주요 피크가 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물을 분취용-HPLC (TFA 조건)로 직접 정제하고, 이어서 동결건조하여 중간체 11 (120.0 mg, 60.23 μmol, 63.0% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 0.95 분, 계산된 질량: M av = 1992.20, [M + 2H]2+ = 996.60.
D. 화합물 1101의 제조
화합물 1101의 구조는 두 부분으로 나누어진다. 점선은 1101 구조의 상부와 하부가 공유하는 공유 결합을 나타낸다.
DMSO (1.0 mL) 중 중간체 11 (29.85 mg, 14.99 μmol, 1.00 당량), DIEA (9.68 mg, 74.93 μmol, 13.05 μL, 5.00 당량)의 혼합물에 중간체 7 (20.0 mg, 14.99 μmol, 1.00 당량)을 20 oC에서 첨가하였다. 이어서 혼합물을 20 °C에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 중간체 7이 완전히 소비되었으며 하나의 주요 피크가 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물을 분취용 HPLC (TFA 조건)로 정제하여 화합물 1101 (22.8 mg, 98.6% 순도, 47.3% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.10 분, 계산된 질량: M av = 3211.71, [M + 2H]2+ = 1606.50.
실시예 6. 화합물 1102의 제조 절차
화합물 1102의 제조를 위한 완전한 반응 도식은 도 6에 나타난다.
중간체 13의 제조
DMF (3 mL) 중 중간체 12 (0.50 g, 1.37 mmol, 1.00 당량)에 2,3,4,6-테트라플루오로페놀 (568.09 mg, 3.42 mmol, 2.50 당량), EDCI (393.46 mg, 2.05 mmol, 1.50 당량)를 첨가하였다. 반응물을 20 °C에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 중간체 12 가 완전히 소모되었으며 하나의 주요 피크가 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물을 분취용 플래시 (C18, TFA 조건)로 정제하여 중간체 13 (0.625 g, 1.22 mmol, 88.96% 수율)을 노란색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.16 분, 계산된 질량: M av = 513.48, [M + Na]+ = 536.1, [M + H]+ = 514.1.
중간체 14의 제조:
DMSO (9 mL) 중 중간체 5 (300.0 mg, 163.66 μmol, 1.00 당량), 중간체 13 (9.25 mg, 212.76 μmol, 1.30 당량), DIEA (105.76 mg, 818.32 μmol, 142.54 μL, 5.00 당량)를 20 °C에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 주요 피크가 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물을 플래시 C18 (ISCO®; 120 g SepaFlash® C18 플래시 컬럼, 0-90% MeCN/H2O 에테르 구배 @ 75 mL/분의 용리액)로 직접 정제하여 중간체 14 (200.0 mg, 86.22 μmol, 52.6% 수율, 94.0% 순도)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.013 분, 계산된 질량: M av = 2180.42, [M- Boc + 2H]2+ = 1090.60, [M- Boc + 2H]2+ = 1040.50.
중간체 15의 제조:
TFA/DCM (3/7, 4 mL) 중 중간체 14 (200.0 mg, 95.59 μmol, 1.00 당량)의 혼합물을 0 °C에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 중간체 14가 완전히 소모되었으며 주요 피크가 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물을 분취용 HPLC (TFA 조건)로 직접 정제하고, 이어서 동결건조하여 중간체 15 (150.0 mg, 68.36 μmol, 74.5% 수율, TFA 염)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 0.95 분, 계산된 질량: M av = 2080.31, [M + 2H]2+ = 1040.59.
화합물 1102의 제조:
DMSO (1.0 mL) 중 중간체 15 (29.85 mg, 14.99 μmol, 1.00 당량), DIEA (9.68 mg, 74.93 μmol, 13.05 μL, 5.00 당량)의 혼합물에 중간체 7 (20.0 mg, 14.99 μmol, 1.00 당량)을 20 oC에서 첨가하였다. 이어서 혼합물을 20 °C에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 중간체 7이 완전히 소모되었으며 하나의 주요 피크가 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물을 분취용 HPLC (TFA 조건)으로 정제하여 화합물 1102 (30.5 mg, 98.6% 순도, 63.2% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.10 분, 계산된 질량: M av = 3299.82, [M + 2H]2+ = 1650.41, [M + 3H]3+ = 1100.50. 화합물 1102의 구조에서 점선은 상부 구조와 하부 구조 사이의 단일 공유 결합을 나타낸다.
실시예 7. 화합물 1103의 제조 절차
화합물 1103의 제조를 위한 완전한 반응 도식은 도 7에 나타난다.
중간체 17의 제조:
DMF (3 mL) 중 중간체 16 (1.00 g, 1.85 mmol, 1.00 당량)의 용액에 2,3,4,6-테트라플루오로페놀 (919.86 mg, 5.54 mmol, 3.00 당량), EDCI (530.91 mg, 2.77 mmol, 1.50 당량)을 첨가하였다. 반응물을 20 °C에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 중간체 16 이 완전히 소모되었으며 하나의 주요 피크가 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물을 분취용 플래시 (C18, TFA 조건)로 정제하여 중간체 17 (1.10 g, 1.59 mmol, 86.4% 수율)을 무색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 1.152 분, 계산된 질량: M av = 689.69, [M + H]+ = 690.1, [M + Na]+ = 707.2.
중간체 18의 제조:
DMSO (9 mL) 중 중간체 5 (300.0 mg, 163.66 μmol, 1.00 당량), 중간체 17 (112.8 mg, 163.66 μmol, 1.10 당량), DIEA (105.76 mg, 818.32 μmol, 142.54 μL, 5.00 당량)을 20 °C에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 주요 피크가 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물을 플래시 C18 (ISCO®; 120 g SepaFlash® C18 플래시 컬럼, 0-90% MeCN/H2O 에테르 구배 @ 75 mL/분의 용리액)로 직접 정제하여 중간체 18 (200.0 mg, 84.87 μmol, 51.8% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.05 분, 계산된 질량: Mav = 2356.63, [M + 2H]2+ = 1179.10, [M - Boc + 2H]2+ = 1129.20.
중간체 19의 제조:
TFA/DCM (3/7, 4 mL) 중 중간체 18 (200.0 mg, 84.87 μmol, 1.00 당량)의 혼합물을 0 °C에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 중간체 18이 완전히 소모되었으며 주요 피크가 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물을 분취용 HPLC (TFA 조건)로 직접 정제하고, 이어서 동결건조하여 중간체 19 (160.0 mg, 67.50 μmol, 79.5% 수율, TFA 염)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 0.95 분, 계산된 질량: M av = 2256.52, [M + 2H]2+ = 1128.79, [M + 3H]3+ = 752.89.
화합물 1103의 제조:
DMSO (1.0 mL) 중 중간체 19 (37.20 mg, 16.48 μmol, 1.10 당량), DIEA (9.68 mg, 74.93 μmol, 13.05 μL, 5.00 당량)의 혼합물에 중간체 7 (20.0 mg, 14.99 μmol, 1.00 당량)을 20 oC에서 첨가하였다. 그 후 혼합물을 20 °C에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 중간체 7 이 완전히 소모되었으며 하나의 주요 피크가 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물을 분취용 HPLC (TFA 조건)로 정제하여 화합물 1103 (31.4 mg, 9.03 μmol, 60.2% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.09 분, 계산된 질량: M av = 3476.03, [M + 2H]2+ = 1738.51, [M + 3H]3+ = 1159.23. 화합물 1103의 구조에서 점선은 상부 구조와 하부 구조 사이의 단일 공유 결합을 나타낸다.
실시예 8. 화합물 1104의 제조 절차
화합물 1104의 제조를 위한 완전한 반응 도식은 도 8에 나타난다.
중간체 21의 제조
DCM (150 mL) 중 DMSO (7.84 g, 100 mmol, 2.50 당량)의 용액에 DCM (50 mL) 중 옥살릴 염화물 (10.20 g, 80.2 mmol, 2.00 당량)의 용액을 첨가하고, 이어서 반응 혼합물을 -70 °C에서 10분 동안 교반한 후, DCM (50 mL) 중 중간체 20 (10.0 g, 40.1 mmol, 1.00 당량)의 용액을 적가하였다. -70 °C에서 50분 동안 교반한 후, TEA (32.5 g, 320 mmol, 8.00 당량)를 첨가하고 반응 혼합물을 20 °C로 가온하고 15시간 동안 교반하였다. TLC (디클로로메탄: 메탄올 = 10: 1, Rf = 0.48)는 반응물이 완전히 소모되고 하나의 새로운 반점이 형성됨을 보여주었다. 반응 혼합물을 H2O (50 mL)로 ??칭하고, 수성상을 DCM (300 mL)으로 추출했다. 조합된 유기 층을 염수 (300 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 후, 여과하고 감압 하에서 농축하여 잔기를 얻었다. 잔기를 실리카겔 컬럼 (DCM/EtOAc 95/5 내지 50/50)으로 정제하여 중간체 21 (5.10 g, 20.6 mmol, 51.4% 수율)을 노란색 오일로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 9.71 - 9.77 (m, 1 H) 3.39 - 3.90 (m, 8 H) 3.25 - 3.36 (m, 2 H) 1.40 - 1.52 (m, 9 H).
중간체 22의 제조:
MeOH (40 mL) 중 중간체 21 (5.02 g, 20.3 mmol, 1.00 당량), 중간체 21a (1.20 g, 6.77 mmol, 0.40 당량)의 용액에 NaBH3OAc (2.15 g, 10.2 mmol, 0.60 당량)를 천천히 20 oC에서 첨가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 20 °C에서 4시간 동안 교반하였다. LCMS는 원하는 MS를 찾았다. 반응 혼합물을 H2O (10 mL)로 적가하여 ??칭하였다. 여과 후, 여과액을 농축하였다. 잔기를 분취용 HPLC (컬럼: 웰치 울티밋 XB-C18 250 * 50mm, 10 μm, 120A + 웰치 울티밋 250 * 50mm, 10 μm, 120 A; 이동상: [물 (0.1%TFA)-ACN]; B%: 24%-54%, 24분)로 정제하여 중간체 22 (0.80 g, 1.25 μmol, 18.5% 수율)를 노란색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 0.833 분, 계산된 질량: M av = 639.78, [M + H]+ = 640.5. 1H NMR (400 MHz, 중수소 산화물) δ ppm 7.87 (s, 1 H) 7.37 (br d, J = 7.53 Hz, 1 H) 3.79 - 3.91 (m, 4 H) 3.70 - 3.79 (m, 4 H) 3.60 - 3.70 (m, 12 H) 3.45 - 3.58 (m, 8 H) 2.99 - 3.40 (m, 6 H) 2.59 (t, J = 5.52 Hz, 2 H) 1.36 (s, 18 H).
중간체 23 (측쇄 보호된 수지 결합 펩티드)의 제조:
중간체 23은 섹션 [0008] 내지 [0009], (페이지 5 내지 6)에서 언급한 절차에 따라, 중간체 22를 처리하여 합성되었다. 0.50 mmol CTC 수지로 중간체 23 (20.0 mg, 91.4% 순도, 2.0% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.61 분, 계산된 질량: M av = 2095.37, [M + H]+ = 2095.0, [M + 2H]2+ = 1048.47.
KP-0002645/화합물 1104의 제조:
DMSO (500 μL) 중 중간체 23 (17.0 mg, 8.11 μmol, 1.00 당량), DIEA (40.49 mg, 81.13 μmol, 14.3 μL, 10.00 당량)의 용액에 중간체 7 (21.66 mg, 16.23 μmol, 2.00 당량)을 20 oC에서 첨가하였다. 그 후 혼합물을 20 °C에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 완전히 소모되었으며 하나의 주요 피크가 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물을 분취용 HPLC (TFA 조건)로 정제하여 화합물 1104 (9.1 mg, 1.95 μmol, 97.2% 순도, 24.0% 수율)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.092 분, 계산된 질량: M av = 4534.39, [M + 3H]3+ = 1511.90, [M + 4H]4+ = 1134.10.
실시예 9. 화합물 1105의 제조 절차.
화합물 1105의 제조를 위한 완전한 반응 도식은 도 9에 나타난다.
중간체 25의 제조:
DCM (50 mL) 중 DMSO (4.92 g, 62.98 mmol, 4.92 mL, 2.50 당량)의 용액에 DCM (50 mL) 중 옥살릴 염화물 (6.40 g, 50.38 mmol, 4.41 mL, 2.00 당량)의 용액을 첨가하고, 이어서 반응 혼합물을 -70 °C에서 10분 동안 교반한 후, DCM (50 mL) 중 중간체 24 (8.50 g, 25.19 mmol, 1.00 당량)의 용액을 적가하였다. -70 °C에서 50분 동안 교반한 후, TEA (20.39 g, 201.54 mmol, 28.05 mL, 8.00 당량)를 첨가하고 반응 혼합물을 20 °C로 가온하고 15시간 동안 교반하였다. TLC (디클로로메탄: 메탄올 = 10: 1, Rf = 0.48)는 반응물이 완전히 소모되었으며 하나의 새로운 반점이 형성됨을 나타내었다. 반응 혼합물을 H2O (50 mL)로 ??칭하고, 수성상을 DCM (300 mL * 3)으로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수 (300 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 농축하여 잔기를 얻었다. 잔기를 실리카 겔 컬럼 (DCM/EtOAc 95/5 내지 50/50)으로 정제하여 중간체 25 (3.91 g, 11.66 mmol, 46.3% 수율)를 노란색 오일로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 9.71 - 9.77 (m, 1 H) 3.39 - 3.90 (m, 8 H) 3.25 - 3.36 (m, 2 H) 1.40 - 1.52 (m, 9 H).
중간체 26의 제조:
MeOH (40 mL) 중 중간체 25 (3.79 g, 11.29 mmol, 2.50 당량), 중간체 21a (0.8 g, 4.51 mmol, 1.00 당량)이 용액에 NaBH3OAc (1.44 g, 6.77 mmol, 1.50 당량)를 천천히 20 oC에서 첨가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 20 °C에서 4시간 동안 교반하였다. LCMS는 원하는 MS를 찾았다. 반응 혼합물을 H2O (10 mL)로 적가하여 ??칭하였다. 여과 후, 여과액을 농축하였다. 잔기를 분취용 HPLC (컬럼: 웰치 울티밋 XB-C18 250 * 50 mm, 10 μm, 120A + 웰치 울티밋 250 * 50 mm, 10 μm, 120 A; 이동상: [물 (0.1%TFA)-ACN]; B%: 24%-54%, 24 분)로 정제하여 중간체 26 (2.41 g, 2.95 mmol, 65.4% 수율)을 노란색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 0.833 분, 계산된 질량: M av = 815.99, [M + H]+ = 816.5. 1H NMR (400 MHz, 중수소 산화물) δ ppm 7.87 (s, 1 H) 7.37 (br d, J = 7.53 Hz, 1 H) 3.79 - 3.91 (m, 4 H) 3.70 - 3.79 (m, 4 H) 3.60 - 3.70 (m, 12 H) 3.45 - 3.58 (m, 8 H) 2.99 - 3.40 (m, 6 H) 2.59 (t, J = 5.52 Hz, 2 H) 1.36 (s, 18 H).
중간체 27의 제조:
중간체 27은 섹션 [0008] 내지 [0009], (페이지 5 내지 6)에서 언급한 절차에 따라, 중간체 26을 처리하여 합성되었다. 0.50 mmol CTC 수지로 중간체 27 (50.0 mg, 2.0% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.61 분, 계산된 질량: M av = 2271.58, [M + 2H]2+ = 1137.64, [M + 3H]3+ = 758.50.
화합물 1105의 제조:
DMSO (600 μL) 중 중간체 27 (17.3 mg, 7.62 μmol, 1.00 당량), DIEA (9.84 mg, 76.16 μmol, 13.27 μL, 10.00 당량)의 용액에 중간체 7 (20.84 mg, 15.61 μmol, 2.05 당량)을 20 oC에서 첨가하였다. 그 후 혼합물을 20 °C에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 완전히 소모되었으며 하나의 주요 피크는 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물은 분취용 HPLC (TFA 조건)로 정제되어 화합물 1105 (17.1 mg, 47.7% 수율, 97.2% 순도)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.092 분, 계산된 질량: M av = 4710.60, [M + 3H]3+ = 1570.71, [M + 4H]4+ = 1178.40, [M + 5H]5+ = 942.69.
실시예 7. 화합물 1106의 제조 절차.
중간체 28의 제조:
펩티드는 표준 Fmoc화학을 이용하여 합성되었다 (CTC 수지).
1) 수지 제조: DCM (20 mL) 중 CTC 수지 (2.00 mmol, 2.00 g, 1.00 mmol/g) 및 Fmoc-HN-PEG2-CH2CH2COOH (798.0 mg, 2.00 mmol, 1.00 당량)를 함유한 용기에 DIEA (4.00 당량)를 적가하고 20 °C에서 N2 버블링과 함께 2시간 동안 혼합하였다. 그 다음 MeOH (2 mL)를 첨가하고 추가 30분 동안 N2로 버블링했다. 수지를 DMF (40 mL)로 세척하였다. 그런 다음 DMF (40 mL) 중 20% 피페리딘을 첨가하고 혼합물을 20 °C에서 30분 동안 N2로 버블링하였다. 그 다음 혼합물을 여과하여 수지를 얻었다. 다음 단계로 진행하기 전에 수지를 DMF (40 mL)로 세척하였다.
2) 커플링: DMF (20 mL) 중 Fmoc-D-Lys(Fmoc)-OH (2.21 g, 6.00 mmol, 3.00 당량), HBTU (2.19 g, 2.85 당량)의 용액을 N2 버블링과 함께 수지에 첨가하였다. 그런 다음 DIEA (6.00 당량)를 혼합물에 적가하고 N2로 20 oC에서 30분 동안 버블링하였다. 커플링 반응을 닌히드린 테스트로 모니터링하였고, 무색이 나타나면 커플링을 완료하였다. 그 다음 수지를 DMF (40 mL)로 세척하였다.
3) 탈보호: DMF (40 mL) 중 20% 피페리딘을 수지에 첨가하고 혼합물을 N2로 20 °C에서 30분 동안 버블링하였다. 그런 다음 수지를 DMF (40 L)로 세척하였다. 탈보호 반응을 닌히드린 테스트로 모니터링하였고, 파란색 또는 갈색을 띤 빨간색이 나타나면 반응을 완료하였다.
4) 커플링: DMF (20 mL) 중 Fmoc-HN-PEG8-CH2CH2COOH (5.30 g, 8.00 mmol, 4.00 당량), HATU (2.93 g, 3.80 당량)의 용액을 N2 버블링과 함께 수지에 첨가하였다. 그런 다음 DIEA (8.00 당량)를 혼합물에 적가하고 N2로 20 °C에서 30분 동안 버블링하였다. 커플링 반응을 닌히드린 테스트로 모니터링하였고, 무색을 나타내면 커플링을 완료하였다. 그런 다음 수지를 DMF (20 mL)로 세척하였다.
5) 단계 3)을 한번 반복하였다.
6) Boc 보호: Boc2O (2.59 g, 12.00 mmol, 6.00 당량) 및 DIEA (12.00 당량)의 용액을 수지에 첨가하고 혼합물을 N2로 20분 동안 버블링하였다. 커플링 반응을 닌히드린 테스트로 모니터링하였고, 무색이 나타나면 커플링을 완료하였다. 그런 다음 수지를 DMF (40 mL), MeOH (40 mL)로 세척하고, 감압 하에 건조하였다.
펩티드 절단:
1) 절단: 절단 용액 (20% HFIP/H2O, v/v, 50 mL)을 측쇄 보호된 펩티드를 함유하는 플라스크에 상온에서 첨가하고 1시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여과액을 수집하였다.
2) 조합된 여과액을 감압 하에 농축하고, 이어서 동결건조하여 중간체 28 (1.7 g, 조물질)을 무색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 0.95 분, 계산된 질량: M av = 1352.60, [M + H]+ = 1352.86.
중간체 29 (측쇄 보호된 수지 결합 펩티드)의 제조:
중간체 29는 섹션 [0008] 내지 [0009], (페이지 5 내지 6)에 언급된 절차에 따라 중간체 28을 처리하여 합성되었다. 0.50 mmol CTC 수지로 중간체 29 (300.0 mg, 91.4% 순도, 9.7% 수율)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 0.872 분, 계산된 질량: M av = 2808.19, [M + 2H]2+ = 1404.79, [M + 3H]3+ = 936.52, [M + 4H]4+ = 702.73.
화합물 1106의 제조:
DMSO (400 μL) 중 중간체 29 (20.0 mg, 7.12 umol, 1.00 당량), DIEA (9.20 mg, 71.22 μmol, 12.41 μL, 10.00 당량)의 혼합물에 중간체 7 (19.9 mg, 14.96 μmol, 2.10 당량)을 20 oC에서 첨가하였다. 그런 다음 20 oC에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 완전히 소모되었으며 하나의 주요 피크가 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물을 분취용 HPLC (TFA 조건)로 정제하여 화합물 1106 (16.7 mg, 3.02 μmol, 95.0% 순도, 42.4% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.61 분, 계산된 질량: M av = 5247.21, [M + 3H]3+ = 1749.87, [M + 4H]4+ = 1312.53, [M + 5H]5+ = 1050.28, [M + 6H]6+ = 875.27.
실시예 10. 화합물 1199의 제조 절차.
중간체 32의 제조:
펩티드는 표준 Fmoc 화학을 사용하여 합성되었다 (CTC 수지).
1) 중간체 5a (0.50 mmol, 펩티드 수지)를 실시예 4에 언급된 절차에 의해 합성하였다.
2) 커플링: 무수 DMF (10 mL) 중 화합물 5a (CTC 수지, 0.50 mmol), DIEA (387.7 mg, 3.00 mmol, 522.53 uL, 6.00 당량), DMAP (183.26 mg, 1.50 mmol, 3.00 당량)의 혼합물에 디히드로-2H-피란-2,6(3H)-디온 (342.3 mg, 3.00 mmol, 6.00 당량)을 20 oC에서 N2 버블링과 함께 첨가하였다. 그런 다음 혼합물을 N2로 2시간 동안 버블링하였다. 미니 절단 테스트 후, LCMS는 반응이 완료되었음을. 펩티드 수지 (중간체 30)를 DMF (20 mL)로 세척하고, 다음 단계에서 바로 사용하였다. LCMS: RT = 1.21 분, 계산된 질량: M av = 1789.95, [M + 2H]2+ = 896.48.
3) TFP 에스테르 형성: 무수 DMF (5 mL) 중 TFP (830.37 mg, 5.00 mmol, 10.00 당량) 및 DIC (631.00 mg, 5.00 mmol, 774.23 μL, 10.00 당량)의 용액을 수지 결합 펩티드 (중간체 30)에 20 oC에서 N2 버블링과 함께 첨가하였다. 그런 다음 N2로 2시간 동안 버블링하였다. 미니 절단 테스트 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내었다. 수지를 DMF (20 mL), 2-이소프로폭시프로판 (20 mL)으로 세척하고, N2 버블링으로 건조시켜 중간체 31 (CTC 수지, 0.5 mmol)을 밝은 노란색 고체로서 얻었다.
4) 절단: 절단 용액 (TFA/Tis/H2O, 95/2.5/2.5, v/v/v, 20 mL)을 측쇄 보호된 펩티드를 함유하는 플라스크에 상온에서 첨가하고 1시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여과액을 이소프로필 에테르 (냉간, 100 L)로 침전시켰다. 여과 후, 고체를 이소프로필 에테르 (냉간, 50 mL)로 추가 2회 세척하고, 감압 하에 2시간 동안 건조시켰다.
5) 고리화: 조물질 펩티드를 HOAc/MeCN/H2O (4/3/3, v/v/v, 500 mL)에 용해시켰다. 그런 다음 노란색이 지속될 때까지 혼합물에 0.1 M I2/AcOH를 적가하고, 이어서 혼합물을 20 °C에서 5분 동안 교반하였다. 노란색이 사라질 때까지 0.1 M aq. Na2S2O3를 적가하여 혼합물을 ??칭하였다. 여과 후, 여과액을 분취용 HPLC (A: 0.075% TFA/H2O, B: MeCN)로 정제하고, 이어서 동결건조시켜 중간체 32 (73.0 mg, 89.2% 순도, 6.7% 수율)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.31 분, 계산된 질량: M av = 1935.99, [M + 2H]2+ = 968.03.
화합물 1199의 제조:
DMSO (400 μL) 중 중간체 6 (vcMMAE, 11.9 mg, 10.6 μmol, 1.00 당량)의 용액에 중간체 32 (20.0 mg, 10.6 μmol, 1.00 당량) 및 DIEA (6.82 mg, 53.0 μmol, 5.00 당량)를 20 oC에서 첨가하였다. 혼합물을 20 °C에서 2시간 동안 교반하였다. LC-MS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타내었다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔기를 분취용 HPLC (TFA 조건)로 정제하여 화합물 1199 (16.8 mg, 5.89 μmol, 55.8% 수율, 96.8% 순도)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: RT = 1.118 분, 계산된 질량: M av = 2893.35, [M + 2H]2+ = 1447.20, [M + 3H]3+ = 965.15.
실시예 11. 화합물 1434의 제조 절차
중간체 36의 제조:
펩티드는 표준 Fmoc 화학을 사용하여 합성되었다 (CTC 수지).
1) 수지 제조: DCM (10 mL) 중 CTC 수지 (1.00 mmol, 1.00 g, 1.00 mmol/g) 및 Fmoc-HN-PEG2-CH2CH2COOH (399.0 mg, 1.00 mmol, 1.00 당량)를 함유하는 용기에 DIEA (4.00 당량)를 적가하고 N2 버블링으로 20 °C에서 2시간 동안 혼합하였다. 이어서 MeOH (1 mL)를 추가하고 N2로 추가 30분 동안 버블링하였다. 수지를 DMF (20 mL)로 세척하였다. 이어서 DMF (20 mL) 중 20% 피페리딘을 첨가하고 혼합물을 20 °C에서 30분 동안 N2로 버블링하였다. 이어서 혼합물을 여과하여 수지를 얻었다. 다음 단계로 진행하기 전에 수지를 DMF (20 mL)로 세척하였다.
2) 탈보호: DMF (20 mL)중 20% 피페리딘을 수지에 첨가하고 혼합물을 20 °C에서 30분 동안 N2로 버블링하였다. 이어서 수지를 DMF (20 mL)로 세척하였다. 탈보호 반응을 닌히드린 테스트로 모니터링하였고, 파란색 또는 갈색을 띤 빨간색이 나타나면 반응을 완료하여 중간체 33을 얻었다.
3) 커플링: 디히드로-2H-피란-2,6(3H)-디온 (684.0 mg, 6.00 mmol, 6.00 당량) 및 DIEA (12.00 당량)의 용액을 수지에 첨가하고 혼합물을 N2로 20분 동안 버블링하였다. 커플링 반응을 닌히드린 테스트로 모니터링하였고, 무색이 나타나면 커플링을 완료하였다. 이어서 수지를 DMF (20 mL)로 세척하여 중간체 34를 얻었다.
4) TFP 에스테르 형성: 무수 DMF (10 mL) 중 2,3,5,6-테트라플루오로페놀 (1.65 g, 10.00 mmol, 10.00 당량) 및 DIC (1.26 g, 10.00 mmol, 774.23 μL, 10.00 당량)의 용액을 펩티드 수지 (중간체 34)에 20 oC에서 N2 버블링과 함께 첨가하였다. 이어서 혼합물을 N2로 2시간 동안 버블링하였다. 미니 절단 테스트 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내었다. 수지를DMF (20 mL), 2-이소프로폭시프로판 (20 mL), 이소프로필 에테르 (20 mL )로 세척하고, N2 버블링으로 건조시켜 중간체 35 (CTC 수지, 1.0 mmol)를 얻었다.
펩티드 절단 및 정제:
1) 절단: 1% TFA/DCM (v/v, 40 mL)의 용액을 수지 결합 펩티드 (중간체 35)에 첨가하고 20 °C에서 5분 동안 교반하였다. 여과 후, 여과액을 감압 하에서 농축시켰다.
2) 정제: 잔기를 분취용 HPLC (A: 0.075% TFA/H2O; B: MeCN)로 직접 정제하여 중간체 36 (250.0 mg, 41.8% 수율)을 무색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 0.947 분, MS 계산치: Mav = 439.36, 관찰된 질량: [M + H]+ = 440.23, [M + Na]+ = 462.11.
화합물 1434의 제조:
DMF (1 mL) 중 중간체 36 (39.1 mg, 89.02 μmol, 2.00 당량) 및 중간체 6 (vcMMAE, 50.0 mg, 44.51 μmol, 1.00 당량)의 혼합물에 DIEA (23.01 mg, 178.04 μmol, 31.01 μL, 4.00 당량)를 한 부분에 20 °C에서 첨가하였다. 혼합물을 20 °C에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 분취용 HPLC (A: 0.075% TFA/H2O; B: MeCN)로 직접 정제하고, 이어서 동결건조하여 화합물 1434 (36.9 mg, 26.34 μmol, 59.2% 수율, 99.7% 순도)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.955 분, MS 계산치: M av = 1396.71, 관찰된 질량: [M + H]+ = 1398.1, [M + 2H]2+ = 699.6. 점선은 화합물 1434의 상부와 하부 사이의 단일 공유 결합을 나타낸다.
화합물 1435, 화합물 1436, 화합물 1437은 화합물 1434의 절차를 따라 합성되었다. 점선은 각 화합물의 구조의 상부와 하부 사이의 단일 공유 결합을 나타낸다.
화합물 1435 (39.9 mg, 25.6 μmol, 99.9% 순도, 50.8% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: RT = 1.941 분, MS 계산치: M av = 1555.89, [M + H]+ = 1557.0, [M + 2H]2+ = 778.6.
화합물 1436 (41.8 mg, 25.4 μmol, 99.6% 순도, 57.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: RT = 1.934 분, MS 계산치: M av = 1644.00, [M + H]+ = 1645.3, [M + 2H]2+ = 822.8.
화합물 1437 (49.4 mg, 27.1 μmol, 99.8% 순도, 49.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: RT = 1.937 분, MS 계산치: M av = 1820.21, [M + H]+ = 1821.4, [M + 2H]2+ = 910.8, [M + 3H]3+ = 607.7.
실시예 12. 화합물 1438의 제조 절차
중간체 37의 제조:
TFA/DCM (3/7, v/v, 2 mL) 중 중간체 22 (0.10 g)의 혼합물을 20 oC에서 0.5시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔기를 동결건조하여 중간체 37 (0.10 g, 조물질, TFA 염)을 무색 오일로서 얻었다.
화합물 1438의 제조:
DMF (0.5 mL) 중 중간체 37 (3.00 mg, 6.83 μmol, 1.00 당량), DIEA (5.29 mg, 40.95 μmol, 7.13 μL, 6.00 당량)의 용액에 중간체 7 (27.33 mg, 20.48 μmol, 3.00 당량)을 20 °C에서 첨가하였다. 그런 다음 반응 혼합물을 20 °C에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 분취용 HPLC (A: 0.075% TFA/H2O; B: MeCN)로 직접 정제하고, 이어서 동결건조하여 화합물 1438 (6.3 mg, 2.19 μmol, 96.5% 순도, 32.0% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.709 분, MS 계산치: M av = 2878.57, [M + 2H]2+ = 1440.3, [M + 3H]3+ = 960.5.
중간체 37의 제조:
TFA/DCM (3/7, v/v, 2 mL) 중 중간체 22 (0.10 g)의 혼합물을 20 oC에서 0.5시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔기를 동결건조하여 중간체 37 (0.10 g, 조물질, TFA 염)을 무색 오일로서 얻었다.
화합물 1438의 제조:
DMF (0.5 mL) 중 중간체 37 (3.00 mg, 6.83 μmol, 1.00 당량), DIEA (5.29 mg, 40.95 μmol, 7.13 μL, 6.00 당량)의 용액에 중간체 7 (27.33 mg, 20.48 μmol, 3.00 당량)을 20 °C에서 첨가하였다. 그런 다음 반응 혼합물을 20 °C에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 분취용 HPLC (A: 0.075% TFA/H2O; B: MeCN)로 직접 정제하고, 이어서 동결건조하여 화합물 1438 (6.3 mg, 2.19 μmol, 96.5% 순도, 32.0% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.709 분, MS 계산치: M av = 2878.57, [M + 2H]2+ = 1440.3, [M + 3H]3+ = 960.5.
실시예 13. 화합물 1439의 제조 절차.
중간체 38의 제조:
TFA/DCM (3/7, v/v, 2 mL) 중 중간체 26 (0.10 g)의 혼합물을 20 oC에서 0.5시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔기를 동결건조하여 중간체 38 (0.10 g, 조물질, TFA 염)을 무색 오일로서 얻었다.
화합물 1439의 제조:
DMF (2 mL) 중 중간체 38 (20.0 mg, 32.48 μmol, 1.00 당량), DIEA (25.19 mg, 194.88 μmol, 33.95 μL, 6.00 당량)의 용액에 중간체 7 (130.0 mg, 97.44 μmol, 3.00 당량)을 20 °C에서 첨가하였다. 그런 다음 반응 혼합물을 20 °C에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 분취용 HPLC (A: 0.075% TFA/H2O; B: MeCN)로 직접 정제하고, 이어서 동결건조하여 화합물 1439 (10.8 mg, 3.54 μmol, 97.1% 순도, 10.8% 수율)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 2.221 분, MS 계산치: M av = 3054.78, [M + 2H]2+ = 1528.4, [M + 3H]3+ = 1019.1, [M + 4H]4+ = 764.7.
실시예 14. 화합물 1440의 제조 절차
중간체 39의 제조:
TFA/DCM (3/7, v/v, 6 mL) 중 중간체 28 (0.30 g)의 혼합물을 20 oC에서 0.5시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔기를 동결건조하여 중간체 39 (0.20 g, 조물질, TFA 염)를 무색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 0.637 분, MS 계산치: M av = 1152.37, [M + H]+ = 1152.7, [M + 2H]2+ = 576.99.
화합물 1440:
DMF (0.5 mL) 중 중간체 39 (17.27 mg, 14.99 μmol, 1.00 당량), DIEA (9.68 mg, 74.93 μmol, 13.05 μL, 6.00 당량)의 용액에 중간체 7 (50.0 mg, 37.46 μmol, 2.50 당량)을 20 °C에서 첨가하였다. 그런 다음 반응 혼합물을 20 °C에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 분취용 HPLC (A: 0.075% TFA/H2O; B: MeCN)로 직접 정제하고, 이어서 동결건조하여 화합물 1440 (31.7 mg, 8.68 μmol, 57.9% 수율, 98.3% 순도)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.689 분, MS 계산치: M av = 3591.39, [M + 2H]2+ = 1797.0, [M + 3H]3+ = 1197.9, [M + 4H]4+ = 898.8, [M + 5H]5+ = 719.8.
실시예 15. 화합물 1441의 제조 절차
DMF (0.4 mL) 중 디히드로-2H-피란-2,6(3H)-디온 (6.09 mg, 53.41 μmol, 1.50 당량), 중간체 6 (vcMMAE, 40.00 mg, 35.61 μmol, 1.00 당량), DIEA (13.81 mg, 106.82 μmol, 18.61 μL, 3.00 당량)의 혼합물을 20 °C에서 0.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 분취용 HPLC (A: 0.075% TFA/H2O; B: MeCN)로 직접 정제하고, 이어서 동결건조하여 화합물 1441 (34.5 mg, 27.26 μmol, 76.5% 수율, 97.8% 순도)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.983 분, MS 계산치: M av = 1237.83, [M + H]+ = 1238.8, [M + 2H]2+ = 619.6.
실시예 16. 화합물 1574의 제조 절차
중간체 40의 제조:
중간체 40은 화합물 1106의 합성을 위한 절차에 따라 합성하였다.
3.0 mmol 수지로 중간체 40 (2.46 g, 조물질)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 0.484 분, 계산된 질량: M av = 823.97, [M + H]+ = 825.49, [M -Boc + H]+ = 724.37.
중간체 41의 제조:
중간체 5의 합성에서 언급된 절차에 따라, 중간체 40을 처리하여 중간체 41을 합성하였다. 0.50 mmol CTC 수지로 중간체 41 (148.1 mg, 90.0% 순도, 12.9% 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
화합물 1574의 제조:
DMSO (600 μL) 중 중간체 41 (50.00 mg, 23.58 μmol, 1.00 당량), DIEA (18.29 mg, 141.48 μmol, 24.64 μL, 6.00 당량)의 혼합물에 중간체 7 (77.49 mg, 51.88 μmol, 2.20 당량)을 20 oC에서 첨가하였다. 그런 다음 혼합물을 20 oC에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 완전히 소모되었으며 하나의 주요 피크가 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물을 분취용 HPLC (TFA 조건)로 정제하여 화합물 1574 (85.0 mg, 17.49 μmol, 74.1% 수율, 97.1% 순도)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.856 분, 계산된 질량: M av = 4718.58, [M + 3H]3+ = 1573.8, [M + 4H]4+ = 1180.6, [M + 5H]5+ = 944.7.
실시예 17. 화합물 1575의 제조 절차
중간체 42의 제조:
TFA/DCM (3/7, v/v, 4 mL) 중 중간체 40 (0.20 g)의 혼합물을 20 oC에서 0.5시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔기를 동결건조하여 중간체 42 (0.20 g, 조물질, TFA 염)를 무색 오일로서 얻었다. LCMS: RT = 0.637 분, MS 계산치: M av = 623.74, [M + H]+ = 624.5.
화합물 1575의 제조:
DMSO (600 uL) 중 중간체 42 (10.00 mg, 16.03 μmol, 1.00 당량), DIEA (12.43 mg, 96.19 μmol, 16.76 μL, 6.00 당량)의 혼합물에 중간체 7 (47.07 mg, 35.27 μmol, 2.20 당량)을 20 oC에서 첨가하였다. 그런 다음 혼합물을 20 oC에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 완전히 소모되었으며 하나의 주요 피크가 원하는 MS임을 나타내었다. 혼합물을 분취용 HPLC (TFA 조건)로 정제하여 화합물 1575 (28.90 mg, 9.22 μmol, 57.5% 수율, 97.7% 순도)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 1.728 분, 계산된 질량: M av = 3062.76, [M + 2H]2+ = 1532.8, [M + 3H]3+ = 1021.8, [M + 4H]4+ = 766.7.
실시예 18. 링커의 합성
화합물 44의 제조를 위한 일반적 절차:
DCM (70 mL) 중 화합물 43 (16 g, 43.19 mmol, 1 당량)의 용액에 Na (29.79 mg, 1.30 mmol, 30.71 uL, 0.03 당량) 및 tert-부틸 아크릴레이트 (5.54 g, 43.19 mmol, 6.27 mL, 1 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 25 °C에서 12시간 동안 교반하였다. TLC (디클로로메탄: 메탄올 = 10: 1 Rf = 0.43)는 반응이 완료되었음을 나타내었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하여 DCM을 제거하였다. 잔기를 H2O 100 mL로 희석하고 EtOAc (200 mL* 3)로 추출하였다. 조합된 유기 층을 염수 (300 mL * 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조하여, 여과하고 감압 하에 농축하여 잔기를 얻었다. 화합물 44 (16 g, 35.20 mmol, 81.49% 수율)를 노란색 오일로서 수득하였다.
화합물 15의 제조를 위한 일반적 절차:
DCM (130 mL) 중 화합물 44 (17 g, 34.10 mmol, 1 당량)의 용액에 MsCl (5.86 g, 51.14 mmol, 3.96 mL, 1.5 당량) 및 TEA (10.35 g, 102.29 mmol, 14.24 mL, 3 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 0 °C에서 0.5시간 동안 교반하였다. TLC (디클로로메탄: 메탄올= 10: 1 Rf = 0.6)는 반응이 완료되었음을 나타내었다. 잔기를 H2O 300 mL로 희석하고 DCM (200 mL * 2)으로 추출하였다. 조합된 유기 층을 0.5 M HCl (200 mL *2)로 세척하고, Na2SO4로 건조하고, 여과하고 감압 하에 농축하여 잔기를 얻었다. 화합물 45 (19 g, 32.95 mmol, 96.63% 수율)를 노란색 오일로서 수득하였다.
화합물 46의 제조를 위한 일반적 절차:
DMF (190 mL) 중 화합물 45 (19 g, 32.95 mmol, 1 당량)의 용액에 NaN3 (4.28 g, 65.89 mmol, 2 당량) 및 NaI (9.88 g, 65.89 mmol, 2 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 90 °C에서 12시간 동안 교반하였다. TLC (디클로로메탄: 메탄올= 10: 1 Rf = 0.6)는 반응이 완료되었음을 나타내었다. 잔기를 H2O 500 mL로 희석하고 EtOAc (500 mL * 3)로 추출하였다. 조합된 유기 층을 염수 (500 mL * 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조하고, 여과하고 감압 하에 농축하여 잔기를 얻었다. 화합물 46 (17 g, 32.47 mmol, 98.54% 수율)을 노란색 오일로서 수득하였다.
화합물 47의 제조를 위한 일반적 절차:
세 가지 반응이 동시에 진행되었다. DCM (120 mL) 중 화합물 46 (6 g, 11.46 mmol, 1 당량)의 용액에 HCl/디옥산 (4 M, 48.00 mL, 16.76 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 25 °C에서 0.5시간 동안 교반하였다. TLC (디클로로메탄: 메탄올= 10: 1 Rf = 0.1)는 반응이 완료되었음을 나타내었다. 세 가지 반응이 함께 수행되었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하여 잔기를 얻었다. 잔기를 컬럼 크로마토그래피 (SiO2, DCM: MeOH=200/1 내지 1/1)로 정제하였다. 화합물 7 (10 g, 21.39 mmol, 62.22% 수율)을 노란색 오일로서 수득하였다.
실시예 19. 추가 링커의 합성
화합물 48의 제조:
DCM (2 mL) 중 화합물 47 (140 mg, 369.00 umol, 1 당량), SOCl2 (131.70 mg, 1.11 mmol, 80.30 uL, 3 당량)의 혼합물을 0 °C에서 탈기하고 N2로 3회 퍼징한 후, 혼합물을 0내지 20 °C에서 0.5시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. TLC (디클로로메탄: 메탄올= 10:1 Rf = 0.46)는 화합물 47이 완전히 소모되었음을 나타내었다. 반응 혼합물을 농축하여 조물질 산물을 얻었다. 화합물 48 (146.81 mg, 조물질)을 노란색 오일로서 수득하였다.
실시예 6. 링커를 갖는 디-플루오로 페닐 반응기의 제조
화합물 50의 제조:
BH3-THF (1 M, 25.79 mL, 4 당량)를 무수 THF (70 mL) 중 화합물 49 (1 g, 6.45 mmol, 1 당량)의 용액에 조심스럽게 첨가하였다. 생성된 용액을 교반하고 10시간 동안 환류 가열하였다 (70 °C). TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트=1:1, Rf = 0.01)는 화합물 49가 완전히 소모되었으며 하나의 새로운 반점이 형성되었음을 나타내었다. 혼합물을 냉각시킨 후, 6 N HCl (2 mL)을 용액에 조심스럽게 첨가하고, 환류 온도에서 30분 동안 계속 가열하였다. 혼합물을 감압 하에 농축하여 잔기를 얻었다. 화합물 50 (2.5 g, 조물질, HCl)을 백색 고체로서 수득하였다.
화합물 51의 제조 절차:
NaHCO3 (5 mL) 중 화합물 50 (270 mg, 690.20 umol, 1 당량, HCl), 아세트산 무수물 (84.55 mg, 828.25 umol, 77.57 uL, 1.2 당량)의 혼합물을 탈기하고 N2로 3회 퍼징하고, 이어서 N2 분위기 하에서 24시간 동안 20 °C에서 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 보여주었다. TLC는 화합물 50이 완전히 소모되었음을 나타내었다. 반응 혼합물을 1M HCl을 사용하여 pH 4-5로 산성화시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (30 mL*2)로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수 (30 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 후, 여과하고 감압 하에 농축하여 잔기를 얻었다. 잔기를 컬럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르: 에틸 아세테이트=10:1 내지 1:3)로 정제하였다. 화합물 51 (67 mg, 333.05 umol, 48.25% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: RT = 0.609 분, 계산된 질량: 201.0, [M+H] + = 202.2. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 9.99 (s, 1 H) 8.28 (br s, 1 H) 6.83 - 6.93 (m, 2 H) 4.12 (d, J = 5.95 Hz, 2 H) 1.84 (s, 3 H).
화합물 52의 제조:
DCM (1 mL) 중 화합물 51 (67 mg, 333.05 umol, 1 당량)의 용액에 TEA (101.10 mg, 999.16 umol, 139.07 uL, 3 당량)를 첨가한 후, DCM (1 mL) 중 화합물 48 (145.76 mg, 366.36 umol, 1.1 당량)을 0 °C에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20 °C에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 보여주었다. 반응 혼합물을 여과하고 여과액을 농축하였다. 조물질 산물을 역상 HPLC (컬럼: 웰치 울티밋 AQ-C18 150*30mm*5um; 이동상: [물 (0.1%TFA)-ACN]; B%: 35%-65%, 12 분)로 정제하였다. 화합물 52 (100 mg, 177.76 umol, 53.37% 수율)를 노란색 오일로서 수득하였다. LCMS: RT = 2.129 분, 계산된 질량: 562.2, [M+H] + = 563.3. 1 H NMR (400 MHz, 클로로포름- d ) δ ppm 6.84 (d, J = 7.95 Hz, 2 H) 5.86 (br s, 1 H)4.33 (d, J = 6.11 Hz, 2 H) 3.81 (t, J = 6.42 Hz, 2 H) 3.53 - 3.64 (m, 23 H) 3.32 (br t, J = 5.01 Hz, 3 H) 2.85 (t, J = 6.36 Hz, 2 H) 1.99 (s, 3 H) 1.50 (s, 2 H).
화합물 53의 제조:
THF (3 mL) 중 화합물 52 (100 mg, 177.76 umol, 1 당량)의 용액에 HCl (0.5 M, 711.04 uL, 2 당량) 및 Pd/C (100 mg, 177.76 umol, 10% 순도, 1.00 당량)를 N2 하에 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H2 (15 psi) 하에 20 °C에서 0.2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 보여주었다. 반응 혼합물을 여과하고 여과액을 농축하였다. 조물질 산물을 역상 HPLC (컬럼: 웰치 울티밋 AQ-C18 150*30mm*5um; 이동상: [물 (0.1%TFA)-ACN]; B%: 15%-45%, 12 분)로 정제하였다. 화합물 53 (60 mg, 111.82 umol, 62.91% 수율)을 백색 오일로서 수득하였다. LCMS: RT = 1.272 분, 계산된 질량: 536.2, [M+H] + = 537.3. 1 H NMR (400 MHz, 클로로포름- d ) δ ppm 7.79 (br s, 3 H) 6.98 (br d, J = 8.19 Hz, 2 H) 6.72 (br s, 1 H) 4.42 (d, J = 5.99 Hz, 2 H) 3.88 (t, J = 5.93 Hz, 2 H) 3.80 - 3.85 (m, 2 H) 3.72 - 3.76 (m, 2 H) 3.65 - 3.71 (m, 12 H) 3.13 (br s, 2 H) 2.92 (t, J = 5.87 Hz, 2 H) 2.68 (br s, 4 H) 2.08 (s, 3 H).
실시예 20. 링커를 갖는 플루오로-페닐 반응기의 제조
화합물 24의 제조:
NaHCO3 (10 mL) 중 화합물 2 (1 g, 2.82 mmol, 1 당량, HCl), 아세틸 아세테이트 (316.15 mg, 3.10 mmol, 290.04 uL, 1.1 당량)의 혼합물을 탈기시키고 N2로 3회 퍼징하고, 그런 다음 혼합물을 N2 분위기 하에서 8시간 동안 20 °C에서 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 보여주었다. TLC는 화합물 2 가 완전히 소모되었음을 나타내었다. 반응 혼합물을 1 M HCl을 사용하여 pH 4 내지 5로 산성화시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (30 mL * 2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수 (30 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 감압 하에서 농축하여 잔기를 얻었다. 잔기를 컬럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 20:1 내지 1:2)로 정제하였다. 화합물 54 (250 mg, 1.36 mmol, 48.48% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: RT = 0.413 분, 계산된 질량: 183.0, [M+H] + = 184.0. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 9.76 (s, 1 H) 8.32 (br s, 1 H) 7.03 - 7.09 (m, 1 H) 6.90 - 6.95 (m, 2 H) 4.19 (d, J = 5.87 Hz, 2 H) 1.91 (s, 3 H).
화합물 55의 제조:
DCM (1 mL) 중 화합물 (18 (산 염화물 PEG 링커), 104 mg, 261.40 umol, 1 당량)의 용액에 TEA (79.35 mg, 784.20 umol, 109.15 uL, 3 당량)를 0 °C에서 첨가하고 그런 다음 DCM (1 mL) 중 화합물 54 (47.88 mg, 261.40 umol, 1 당량)를 0 °C에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20 °C에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 원하는 산물의 형성을 보여주었다. 반응 혼합물을 여과하고 여과액을 농축하였다. 조물질 산물을 역상 HPLC (컬럼: 웰치 울티밋 AQ-C18 150*30mm*5um; 이동상: [물 (0.1%TFA)-ACN]; B%: 25%-55%, 12 분)로 정제하였다. 화합물 55 (82 mg, 150.58 umol, 57.60% 수율)를 백색 오일로서 수득하였다. LCMS: RT = 1.789 분, 계산된 질량: 544.2, [M+H] + = 545.5. 1 H NMR (400 MHz, 클로로포름- d ) δ ppm 7.04 - 7.17 (m, 3 H) 5.92 (br s, 1 H) 4.44 (d, J = 5.87 Hz, 2 H) 3.89 (t, J = 6.36 Hz, 2 H) 3.60 - 3.73 (m, 24 H) 3.40 (br t, J = 5.07 Hz, 3 H) 2.90 (t, J = 6.36 Hz, 2 H) 2.44 (br s, 2 H) 2.07 (s, 3 H).
화합물 56의 제조:
THF (5 mL) 중 화합물 55 (82 mg, 150.58 umol, 1 당량)의 용액에 N2 하에 HCl (1 M, 301.16 uL, 2 당량) 및 Pd/C (150.58 umol, 10% 순도, 1 당량)를 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기시키고 H2로 여러 번 퍼지하였다. 혼합물을 H2 (15 psi) 하에 20 °C에서 10분 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 보여주었다. 반응 혼합물을 질소 가스 하에 건조시켰다. 조물질 산물을 역상 HPLC (컬럼: 웰치 울티밋 AQ-C18 150*30 mm*5um; 이동상: [물 (0.1%TFA)-ACN]; B%: 12%-42%, 12 분)로 정제하였다. 화합물 26 (4 mg, 7.71 umol, 5.12% 수율)을 백색 오일로서 수득하였다. LCMS: RT = 1.356 분, 계산된 질량: 518.2, [M+H] + = 519.2. 1 H NMR (400 MHz, 클로로포름- d ) δ ppm 7.94 (br s, 1 H) 7.05 - 7.18 (m, 1 H) 6.31 (br s, 1 H) 4.43 (d, J = 5.75 Hz, 1 H) 3.78 - 3.91 (m, 2 H) 3.56 - 3.77 (m, 10 H) 3.11 (br s, 1 H) 2.88 (t, J = 5.93 Hz, 1 H) 2.06 (s, 1 H).
실시예 21. MMAE를 전달하기 위한 항체 약물 접합체
실시예 22. 약물 항체 비율을 평가하기 위한 방법
무엇보다도, 제공된 기술은 MMAE와 같은 모노메틸 아우리스타틴을 표적 제제에 접합하기 위한 증가된 효율성 (예를 들어, 더 높은 속도 및/또는 수율) 및/또는 선택성을 제공할 수 있다. 특정 평가에서 얻은 데이터는 본원에 예시로서 제공된다.
일부 구현예에서, 표적 제제는 단백질 제제이다. 일부 구현예에서, 표적 제제는 항체 제제이다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 관심 모이어티를 항체, 예를 들어, 브렌툭시맙, 엔포르투맙 등에 접합하기 위한 기술을 제공한다.
일부 구현예에서, 반응 파트너, 예를 들어, 화학식 R-I의 화합물 또는 이의 염, 또는 더욱 특히 실시예 8에서 보여준 바와 같은 MMAE-1-MMAE-7은 DMSO에 용해되어 5mM 스톡 용액이 된다.
일부 구현예에서, 반응은 300 마이크로그램의 항체로 설정된다. 일부 구현예에서, 다양한 완충액, 시약 등가물, 반응 시간, 반응 온도 및 반응 농도를 포함하는 다양한 조건을 활용할 수 있다.
예를 들어, 한 반응은 PBS 중 1 mg/mL의 항체를 사용한 300 마이크로리터 반응이다. 본 개시내용의 반응 파트너, 예컨대 MMAE-1 (DMSO 중 1 마이크로리터의 5 mM 스톡, 다라투무맙에 2.5 몰 당량)를 284마이크로리터의 PBS 완충액 (10mM 인산염, 150mM 염화나트륨, pH 7.4)에 희석하고, 그런 다음 15 마이크로리터의 항-CD30 항체, 예컨대 브렌툭시맙 (20mg/mL 스톡)을 반응 혼합물에 첨가하고 이어서 암실에서 실온에서 배양한다. 4시간 후 반응 완충액을 아미콘 울트라(Amicon Ultra) 원심분리 필터 (30 KDa MWCO, 0.5 mL 부피)를 사용하여 교환하였다. 먼저, 반응 후 표적 결합 모이어티의 해리를 보장하기 위해 글리신 완충액 (100 mM, pH 2.1)을 사용한다. 그런 다음, 인산염 완충 염수 (pH 7.4)를 추가 완충 교환 및 보관에 사용한다.
또 다른 예에서, 반응은 붕산염 완충액 중 1mg/mL의 항체를 사용한 300 마이크로리터 반응이다. 반응 파트너 (DMSO 중 5 mM 스톡 1.2 마이크로리터, MAB에 대해 3.0 몰 당량)를 284 마이크로리터의 붕산염 완충액 (100 mM 붕산염, pH 8.3)으로 희석하고, 그런 다음 15 마이크로리터의 다라투무맙 (20mg/mL 스톡)을 반응 혼합물에 첨가하고 이어서 실온에서 암실에서 배양하였다. 20시간 후 반응 완충액을 아미콘 울트라 원심분리 필터 (30 KDa MWCO, 0.5 mL 부피)를 사용하여 교환한다. 먼저, 반응 후 표적 결합 모이어티의 해리를 보장하기 위한 완충액 교환을 위해 글리신 완충액 (100 mM, pH 2.1)을 사용한다. 그런 다음 인산염 완충 염수 (10 mM 인산염, 150 mM 염화 나트륨, pH 7.4)를 추가 완충 교환 및 보관을 위해 사용한다.
본 개시내용에 따라 반응 결과를 평가하기 위해 다양한 기술이 활용될 수 있다.
무엇보다도 제공된 기술은 추가 반응 단계를 요구하지 않고 증가된 접합 효율 및 선택성을 제공할 수 있다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 항체 제제의 선택적 잔기에서 원하는 관심 모이어티에 선택적으로 접합할 수 있다. 무엇보다도, 본 개시내용의 기술은 개선된 특성 및/또는 황성 (예를 들어, 개선된 순도, 균질성 등)을 갖는 제제를 고효율로 제공할 수 있다.
일부 구현예에서, 유용한 기술은 흡광도 기반 DAR 분석이다. DAR (drug antibody ration, 관심 모이어티와 표적 제제 모이어티 (예를 들어, 항체 제제 모이어티)의 비율) 다양한 항체 접합체에 대해서, 예를 들어, 다양한 시약 스크리닝/평가 방법에서 계산될 수 있다. 표적 결합 모이어티를 포함하는 다양한 제제는, 동일한 반응기를 갖지만 표적 결합 모이어티가 없는 시약과 비교하여, 반응 파트너로서 표적, 예를 들어, 단백질 제제, 예컨대 항체 제제와의 접합 효율성을 평가한다. 다양한 비율 결정에서 '약물'/관심 모이어티는 표적 제제, 예를 들어 항체 제제에 접합된 플루오레세인 이소티오시아네이트 (FITC) 염료이다. DAR 몰비는 표적 제제/항체의 몰수에 대한 약물/관심 모이어티의 몰수 비율로 정의된다. 몰농도는 접합 산물의 FITC (A485) 및 항체 (A280)의 흡광도와 비어-램버트(Beer-Lambert) 법칙을 사용한 FITC 및 항체의 흡광 계수로부터 계산된다. 보정 계수0.35는 280 nm에서 FITC의 흡광도를 보정하는데 사용된다. 비오텍 시너지(Biotek Synergy) H1 마이크로플레이트 리더 및 테이크3(Take3) 마이크로볼륨 플레이트는 흡광도 측정에 사용된다. 판독값에서 최적의 신호 대 잡음비를 위해서는 항체의 농도가 적어도 3 mg/mL이어야 한다.
실시예 23. 항체 접합 부위를 결정하는 기술
E. 제공된 기술은 유의하게 향상된 선택성을 제공한다.
무엇보다도, 제공된 기술은 표적 제제가 접합에 이용 가능한 다중 부위를 가질 때 접합 부위에 대해 상당히 향상된 선택성을 제공할 수 있다. 예를 들어, 본원에서 입증된 바와 같이, 다양한 조건 하에서 다양한 제공된 기술은 특정 항체 제제의 사슬, 및/또는 항체 제제의 선택적 잔기에서 선택적으로 접합한다.
일부 구현예에서, 웨스턴 블롯(western blot)은 항체 접합 위치 (예를 들어, 중쇄, 경쇄 등)을 평가하는데 활용된다. 특정 데이터는 도면에 표시된다. 도시된 바와 같이, 본 개시내용의 기술은 다양한 수준의 선택성을 제공할 수 있다. 일부 구현예에서, 다양한 기술은 경쇄에 비해 중쇄에 대한 선택성을 제공한다.
일부 구현예에서, 웨스턴 블롯의 경우, 샘플을 먼저 누페이지(NuPage) 변성 젤 (예를 들어, 인비트로젠(Invitrogen), NP0321)에서 실행시킨다. 샘플은 웰당 50 ng의 양으로 로딩되었다. 밴드 분리 후 iBlot을 사용하여 겔을 니트로셀룰로오스 막 (인비트로젠, IB23002) 상으로 이동시켰다. 막은 PBST 완충액 (0.1% 트윈 20이 포함된PBS pH 7.4) 중 5% 분유로 차단된다. 일부 구현예에서, 플루오레세인 접합 광 및 중쇄 검출을 위한 1차 항체는 1:2500 희석의 마우스 항-플루오레세인 항체 (EMD 밀리포어(Millipore), MAB045)이고, 2차 항체는 1:20000 희석의 HRP (써전 바이오테크(Southern Biotech), 1038-05)와 접합된 염소 항-마우스 IgG이다. 니트로셀룰로오스 막 상의 항체 검출 시약은 수퍼시그널 웨스트 펨토 화학발광 기재(SuperSignal West Femto Chemiluminescent Substrate) (써모 피셔(Thermo Fisher), 34096)를 사용하여 수행된다. 막은 화학발광 신호를 위해 애저 바이오시스템스(Azure Biosystems) c500 상에서 이미지화된다.
일부 구현예에서, 제공된 기술을 평가하기 위한 기술은 임의로 크로마토그래피 기술 (예를 들어, HPLC, UPLC 등)을 갖춘 질량 분석법이거나 이를 포함한다. 예를 들어, 다양한 산물 제제는 질량 분석기, 예를 들어, 일부 구현예에서, 애질런트(Agilent) ZORBAX RRHD (300SB-C8, 2.1x50 mm, 1.8 um) 컬럼이 장착된 Sciex X500 QTOF 시스템을 사용하여 평가되었다. 일부 구현예에서, 액체 크로마토그래피는 MS와 함께 활용된다. 한 예에서, 이동상 완충액은 A = 물 내 0.1% 포름산, B = 아세토니트릴이었다. 프로토콜 조건은 0 - 1분, 2 % B; 1 - 7분, 2 - 40 % B; 7 - 7.5분, 40 - 80 % B; 7.5 - 9분, 80 % B; 9 - 9.5분, 80 - 2 % B; 9.5 - 10.5분, 2 % B; 유속 0.25 mL/분이고; 접합체의 농도는 0.1mg/분이고; 주입량은 0.01 mL이었다. 일부 구현예에서, 원형 질량 분석에 바이오툴 킷(BioTool kit)이 사용된다. 일부 구현예에서, 질량 범위는 147,000 - 155,000 및 m/z 2200 - 3400이다.
일부 구현예에서, 펩티드 맵핑 분석은 제공된 기술의 평가에 활용된다. 일부 구현예에서, 접합된 및 비접합된 항체는 트립신을 사용하여 펩티드로 소화되고, 접합을 포함하는 펩티드는 이온 질량으로 정량화되었다. 일부 구현예에서, 트립신 소화는 다음과 같이 수행된다:
1. 총 단백질 샘플의 25-50 mcg의 분취량을 깨끗한 단백질 저결합 에펜도르프(Eppendorf) 튜브에 분주한다.
2. 써모 사이언티픽에서 제공하는 7kDa MWCO 겔 여과 컬럼 및 프로토콜을 사용하여 샘플 완충액을 스마트 다이제스트(Smart digest) 완충액으로 교환한다.
3. 필요한 스마트 다이제스트 완충액을 완충액 교환된 샘플에 추가하여 최종 부피 100 mcl을 달성한다.
4. 완충액 교환된 샘플에 스마트 트립신(Smart Trypsin) 용액 5 mcL을 첨가한다.
5. 건 수조에서 70°C에서 15분간 단백질을 소화한다 (샘플에 적절한 열 전달을 보장하기 위해 웰에 물을 첨가한다).
6. 수조에서 샘플을 꺼내 실온으로 냉각시킨다.
7. 단백질 샘플에 1 mcL의 TCEP 본드 브레이커(Bond Breaker) 용액을 첨가한다.
8. 실온 (빛이 없는 곳)에서 30분 동안 배양한다.
9. 10 mcL의 5% 수성 TFA를 샘플에 첨가하고 산성화하고 와류시킨다(vortex).
10. 벤치 탑 원심분리기에서 12,000 rcf로 3분간 샘플을 스핀 다운한다.
11. 소화되지 않은 단백질 펠릿이 손상되지 않도록 주의하면서, 샘플을 깨끗한 자동샘플러 튜브로 이동시킨다.
일부 구현예에서, 분석을 위한 기기 조건은 다음과 같다:
LC: 워터스 어큐티(Waters Acquity) I-Class UPLC
이동상: A: 0.05% 수성 TFA; B: 아세토니트릴 중 0.05% TFA
컬럼: ACQUITY UPLC 펩티드 BEH C18 컬럼, 300Å, 1.7 μm, 2.1 mm X 100 mm
구배: 첫번째 1분 동안 2% B를 유지; 1-60분에 걸쳐 2-65% B를 유지
MS: Thermo LTQ Orbitrap Velos Pro MS1, 모 이온, 400 Da에서 30000의 분해능; 범위: 300-2000 Da, 5 ppm 이내의 정확도를 보장하기 위해 잠금 질량을 사용함
모 이온의 단편화를 유발하기 위한 총 이온 수 임계값이 20000인 데이터 의존적 방법이다. 35 eV의 충돌 에너지 (펩티드 맵핑을 위한 표준 충돌 에너지)
일부 구현예에서, 접합은 항체 중쇄의 K246/K248에서 선택적으로 발생한다. 일부 구현예에서, 접합 부위는 중쇄의 K246을 포함한다. 일부 구현예에서, 접합 부위는 중쇄의 K248을 포함한다. 일부 구현예에서, 접합 부위는 중쇄의 K288/K290을 포함한다. 일부 구현예에서, 접합 부위는 중쇄의 K288을 포함한다. 일부 구현예에서, 접합 부위는 중쇄의 K290을 포함한다. 일부 구현예에서, 접합 부위는 경쇄의 K185를 포함한다. 일부 구현예에서, 접합 부위는 경쇄의 K187을 포함한다. 일부 구현예에서, 접합 부위는 중쇄의 K414를 포함한다.
추가 데이터는 제공된 기술이 다양한 유형의 항체 제제 (예를 들어, 단클론 항체 제제, 다클론 항체 제제, 풀링된 항체 제제, 예컨대 IVIG, IgG1, IgG2, IgG3, 및/또는 IgG4 항체 제제 등)에 효율적이고/이거나 선택적인 접합을 제공할 수 있음을 확인해준다. 본 개시내용을 읽는 당업자는 또한 본 개시내용에 따라 고효율 및/또는 선택성으로 접합될 수 있음을 이해할 것이다 (예를 들어, 이러한 항체, 및 본원에 기재된 바와 같은 다양한 반응성 모이어티 및 임의로 링커 모이어티에 적합한 표적 결합 모이어티를 포함하는 화합물 및 방법을 사용). 펩타이드 맵핑을 위한 유용한 프로토콜은 하기에 예시로 설명되어 있다; 당업자는 아래에 설명된 프로토콜의 다양한 수정 및 변형을 포함하는 다른 프로토콜도 본 개시내용에 따라 활용될 수 있다는 것을 알고 있다:
1. 단백질 수량화, 예를 들어, Pierce 660 시약 사용.
2. 저결합 에펜도르프 튜브에서 10 ug의 샘플을 100 uL의 Tris 50mM pH8.0에 희석한다.
3. 블록 히터에 10 mM DTT (디티오트레이톨)를 15분 동안 60 °C에서 첨가하여 단백질을 줄인다.
4. 어둠 속에서 30분간 실온에서 알킬화를 위해 15 mM 요오도아세트아미드를 첨가한다.
5. 10 mM DTT를 첨가하여 반응을 ??칭한다.
6. 0.33 μg의 α-키모트립신 (Sigma)과 함께 밤새 37 °C의 열교반기에서 단백질을 소화한다.
7. 2 uL의100% 포름산으로 샘플을 산성화한다.
8. Strata-X 역상 SPE (페노메넥스(Phenomenex)) 상에서 펩타이드를 정제한다. 펩타이드는 2% 포름산과 60% 아세토니트릴로 용리되었다.
9. 용출된 펩타이드를 질소 기류 하에서 건조시킨다.
10. 25 uL의 이동상 A에서 펩타이드를 재구성한다.
11. LC-MS에 주입하기 전에, 예를 들어, 하기의 매개 변수에 따라 이동상 A에서 펩타이드를 1:10으로 희석한다.
예시로서 분석용 기기:
LC: Eksigent microLC200 (Sciex)
이동상: A: 물 중 0.2% 포름산 및 3% DMSO; B: 에탄올 중 0.2% 포름산 및 3% DMSO
컬럼: Luna Omega PS 컬럼 0.3 mm i.d., 3 μm 입자, 100mm (페노메넥스)
구배: 6ul/분 유속에서 25분에 걸쳐 2-48%B.
MS: ABSciex TripleTOF 6600+
MS1 (범위 350-1250 Da), 분해도(resolution) 35000
500 cps 임계값을 갖는 DDA 방법.
본원에 기재된 바와 같이, 제공된 기술은 다양한 유형의 항체 제제 (예를 들어, 단클론 항체 제제, 다클론 항체 제제, 또는 풀링된 항체 제제, 예컨대 IVIG)에 대한 효율적 및/또는 선택적 (예를 들어, 접합 부위와 관련하여) 접합을 제공할 수 있다. 무엇보다도, 본 개시내용은 본 개시내용의 기술이 IgG2 및 IgG4 항체의 고효율 및/또는 선택적 접합을 제공할 수 있음을 확인하는 데이터를 제공한다. 일부 구현예에서, 반응은 붕산염 완충액 pH 8.2, 2.5 M 당량의 시약에서 항체에 대해, 20 시간, 25 °C에서 수행되었다. 본 개시내용을 읽는 당업자는 다른 유형의 항체 또한 본 개시내용에 따라 고효율 및/또는 선택성으로 접합될 수 있다는 것을 이해할 것이다 (예를 들어, 이러한 항체, 및 본원에 개시된 바와 같은 다양한 반응성 모이어티 및 임의로 링커 모이어티에 적합한 표적 결합 모이어티를 포함하는 화합물 및 방법을 사용).
실시예 24. 제공되는 산물 제제는 표적 제제의 속성과 기능을 유지한다.
무엇보다도, 제공된 기술은 온화한 조건, 짧은 경로 (예를 들어, 표적 결합 모이어티의 별도 제거 없음) 등을 활용하고, 표적 제제 (예를 들어, 항체 제제)의 하나 이상 또는 모든 원하는 속성 및/또는 활성을 유지하는 지정된 부위 및 산물 제제에서 접합을 제공한다. 항체 제제 모이어티를 포함하는 제공된 제제는 Fc 수용체 (예를 들어, FcRn)와의 상호작용을 유지할 수 있다.
다양한 기술은 표적 제제 (예를 들어, 항체 제제)의 속성 및/또는 활성을 평가하는데 유용하다. 예를 들어, 일부 구현예에서, ELISA 분석은 제공된 제제와 FcRn 수용체 사이의 결합을 평가하는데 활용될 수 있다. 예를 들어, 고결합 96-웰 플레이트 (예를 들어, Costar 3922)를 PBS 완충액 (pH 7.4)에서 뉴트라비딘 (써모 피셔, 31000)으로 코팅하고, PBST 완충액 pH 7.4 (0.05% 트윈 20을 갖는 PBS 완충액 pH 7.4)에서 5% 소 혈청 알부민으로 차단하고, 이어서 PBST 완충액 pH 6.0에서 Avi-태그된 FcRn 단백질 (아크로 바이오시스템스(Acro Biosystems), FCM-H82W4)을 고정화했다. PBST pH 6.0으로 세척한 후, 항체 (예를 들어, 브렌툭시맙 등) 및 이의 접합체를 PBST pH 6.0에서 플레이트 상의 FcRn에 결합한다. 모든 결합된 항체 및 접합체는 PBST pH 6.0에서 HRP와 접합된 항 인간 F(ab)2 항체를 사용하여 검출되었다. 검출 시약은 수퍼시그널 ELISA 피코 화학발광 기재(SuperSignal ELISA Pico Chemiluminescent Substrate (써모 피셔, 37069))였으며 이어서 바이오텍 시너지(Biotek Synergy) H1 마이크로플레이트 리더에서 발광 판독을 수행하였다.
실시예 25. 제공된 기술은 효율적인 반응과 표적 결합 모이어티의 제거를 제공한다.
무엇보다도, 본 개시내용 표적 결합 모이어티를 포함하는 제제 (예를 들어, 반응 후에 방출되는 표적 결합 모이어티를 포함하는 반응 산물)를 반응 산물 (예를 들어, 항체 모이어티 또는 이의 단편을 포함하는 산물)로부터 제거하기 위한 기술을 제공한다. 일부 구현예에서, 방법은 표적 결합 모이어티를 포함하는 제제 및 표적 결합 모이어티가 반응 산물과 상호작용하는 반응 산물을 포함하는 조성물을 산성 용액과 접촉시키는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 산성 용액과의 접촉 후, 표적 결합 모이어티를 포함하는 제제가 반응 산물로부터 분리된다. 일부 구현예에서, 용액의 pH는 약 1, 2, 3, 또는 4이다. 일부 구현예에서, pH는 1이다. 일부 구현예에서, pH는 2이다. 일부 구현예에서, pH는 3이다. 일부 구현예에서, pH는 4이다. 도 23에서 확인된 바와 같이, I-44와 다라투무맙 사이의 반응으로부터 방출된 표적 결합 모이어티를 포함하는 제제는, 예를 들어, pH 2에서 효과적으로 제거될 수 있다. 프로토콜은 예로서 아래에 설명되어 있다.
일부 구현예에서, 메탄올 침전된 항체 접합체의 질량분석법 분석은 제공된 기술의 항체 접합체 평가를 위해 활용되었다. 일부 구현예에서, 접합 후 항체 (예를 들어, 항체 접합체 산물)에서 결합 이탈기를 제거하기 위해 다양한 pH의 완충액을 활용했니다. 일부 구현예에서, 메탄올 침전은 하기와 같이 수행된다:
1. 정제된 항체 접합체 1부피와 메탄올 3부피를 조합한다.
2. 샘플을 4 °C에서 1시간 동안 배양한다.
3. 15,500 x g에서 10분 동안 4 °C에서 원심분리한다.
4. 상층액을 회수하고 speed vac에서 건조시킨다.
5. 0.1% 수성 포름산에서 30 uL로 재현탁시킨다.
일부 구현예에서, 분석을 위한 기기 조건은 다음과 같다:
LC: ExionLC
이동상: A: 0.1% 수성 포름산; B: 95% 아세토니트릴 중 0.1% 포름산
컬럼: 페노메넥스 루나(Phenomenex Luna) C18(2) 컬럼(100 X 2, 3um, 100Å)
구배: 5% B를 첫번째 1분 동안 유지; 5-50% B를 1-7분에 걸쳐 유지
MS: Sciex X500B QTOF 시스템
CDS 시스템을 사용하여 양성 교정제로 교정을 수행했다. 5.5 kV의 ESI 전압, 40 psi의 이온 소스 가스 1 및 2, 커튼 가스 30 (임의 단위), CAD 가스 7 (임의 단위). 소스 온도 350 °C, DP 100V, 축적 시간 0.25초, CE 0V. 프로필 모드에서 m/z 300 부터 m/z 5000까지 TOF-MS 전체 스캔.
획득을 위해 사용된 Sciex OS 1.4.
실시예 26. 접합 방법
원하는 항체 (A = 브렌툭시맙 및 B = 엔포르투맙)를 50 mM HEPES 완충액 (pH 7.5)으로 8배 이상의 희석 부피 (DV)로 완충액 교환하였다. 완충액 교환 후 표적 항체 농도는 >14 mg/mL였다. 이어서 각 접합 시약에 대해 DMSO 중 10 mM 스톡 용액을 제조하였다. 1-7일 동안 25 oC에서 20%(v/v) DMSO를 갖는50 mM HEPES 완충액 (pH 7.5)에서 10 mg/mL의 표적 항체 농도에서 4 등가물 시약을 사용하여 항체 (A 또는 B)에 대한 적절한 시약 접합을 수행하였다. 접합 반응은 24시간 마다 LS-MS를 통해 약물 대 항체 비율 (DAR)에 대해 분석되었다. DAR이 >1.9 (선형 시약의 경우) 또는 >3.8 (분지형 시약의 경우)에 도달하면, 30 DV에 걸쳐 UFDF에 의해 PBS, pH7.4로 완충액 교환을 수행하여 최종 농도 범위가 대략 5-9 mg/mL가 되도록 하였다. 그런 다음 다양한 조건 하에서 ADC의 품질을 분석하였다. 결과는 표 5에 나열된다.
실시예 27. 잔류 페이로드 분석을 위한 대표적 실시예
지시기(directing group) 손실 후 미접합 MATE 시약의 양 ("uABT")이지만, 접합 반응 후 항체와 접합되지 않은 잔류 페이로드는 다음과 같이 정량화할 수 있다. 용매 완충액 I는 미리 혼합된 유기 용매 (6 mL MeOH 및 10 mL CAN)에 2 g NaCl을 첨가하여 제조된다. 완충액을 혼합하여 적어도 1시간 동안 교반하고, 완충액을 적어도 1시간 동안 방치한 후 사용한다. 상청액은 포화 염화 나트륨 용액이었다. 표준 완충액 II는 250 μL의 DMSO, 700 μL의 PBS, 1000μL의 6mg/mL PBS 중 헤르셉틴(Herceptin)을 혼합하여 제조하였다. PBS를 추가하고 DMSO를 샘플에 3mg/mL (예를 들어, 화합물1199 또는 1101) 또는 5mg/mL로 추가하였다. 15%(v/v) DMSO로. 그런 다음 100 uL 샘플 용액을 150 μL 용매 I (샘플: 침전제 1:1.5 v/v)과 혼합하였다. 실온에서 10분 동안 용액을 와류시켰다. 실온에서 16,000 rcf로 10분간 용액을 원심분리하였다. 분석을 위해 상청액을 즉시 유리 바이알에 옮겨 담았다. 페이로드 표준 스톡 용액 (10 mM)은 사용할 때까지 -80 oC에서 보관되었다. DMSO를 사용하여 참조 표준을 1000 μM으로 희석하였다. 10 μL의 1000 μM uABT를 390 μL의 완충액 II에 첨가하여 최종 농도를 25 μM로 만든다. 표준 샘플은 표 6에 나타낸 바와 같이 제조하였다.
200μL의 각 표준 샘플을 취하고 300ul 용매 완충액 I를 첨가하여, 최종 표준 곡선에 대한 표준을 생성한다 (10 μM, 5 μM, 2 μM 1 μM, 0.5 μM, 0.2 μM, 0.1 μM). 용액을 실온에서 10분 동안 와류시킨다. 실온에서 16,000 rcf로 10분간 용액을 원심분리한다. 분석을 위해 상청액을 즉시 유리 바이알에 옮겨 담는다.
페이로드 분석을 위한 표준 곡선이 도 4a에 도시된다. 페이로드 분석에 유용한 HPLC추적 및 화합물 1101에 대한 피크 면적이 도 5에 도시된다. 데이터는 Luna Omega 1.6 μm Polar C18 100A 컬럼을 이용하여 수집되었고, 여기서 이동상 A는 H2O 중0.1% TFA이고 이동상 B는 ACN 중 0.1% TFA이다.
표준 곡선 및 잔류 페이로드 분석을 위한 HPLC 조건이 표 7에 나타난다.
잔류 페이로드는 아래 공식을 통해 정량화된다.
여기서 STD= 시험 샘플 영역에 가장 가까운 표준 샘플, C잔류 = 유리 페이로드의 농도(μmol/L), 및 C단백질 = 단백질의 농도 (μmol/L).
실시예 28. 잔류 시약 분석
잔류 시약 분석은 잔류 페이로드 분석과 유사하게 수행된다. 용매 완충액 I는 미리 혼합된 유기 용매인 6 mL MeOH 및 10 mL CAN에 2 g NaCl을 첨가하여 제조된다. 완충액 I을 혼합하여 적어도 1시간 이상 교반하고, 용액을 사용하기 전에 적어도 1시간 동안 정치하고, 상청액은 포화 염화 나트륨 용액이었다. 용매 완충액 II는 250 μL의 DMSO, 700 μL의 PBS, 및 1000μL의 6 mg/mL 헤르셉틴을 혼합하여 제조한다. PBS 및 DMSO를 샘플에 첨가하여 15%(v/v) DMSO로 3mg/mL로 샘플을 제조한다. 그런 다음 100 uL의 3mg/mL 용액을 150 μL 용매 I (샘플: 침전제 1:1.5 v/v)와 혼합한다. 용액을 실온에서 10분 동안 와류시킨다. 용액을 실온에서 16,000rcf로 10분 동안 원심분리한다. 분석을 위해 상청액을 즉시 유리 바이알에 옮겨 담는다. 시약 참조 표준품은 시약 표준 스톡 용액(10mM)으로 구성된다. 표준품은 사용할 때까지 -80 oC에 보관된다. 참조 표준품은 DMSO를 사용하여 1000 μM로 희석된다. 10 μL의 1000 μM uABT를 390 μL의 완충액 II에 첨가하여 최종 농도가 25 μM가 되도록 한다. 시약 표준 곡선을 위한 샘플은 표 8에 따라 준비된다.
최종 표준 곡선을 만들기 위해 각 표준 샘플 200μL을 취하고 최종 표준 곡선 지점 (10 μM, 5 μM, 2 μM 1 μM, 0.5 μM, 0.2 μM, 0.1 μM)에 대해 300ul 용매 완충액 I를 첨가한다. 실온에서 10분 동안 용액을 와류시킨다. 실온에서 16,000rcf로 10분간 용액을 원심분리한다. 분석을 위해 즉시 상청액을 유리 바이알에 옮겨 담는다. 잔류 시약 분석을 위한 HPLC 매개변수는 구배를 제외하고 이전 예시의 잔류 페이로드 분석과 동일하다. 잔류 시약 분석에 대한 HPLC 구배는 표 9에 제공된다. 잔류 시약 분석에 대한 표준 곡선은 도 4b에 표시된다. 잔류 시약 분석을 위한 HPLC 추적 및 화합물 1101에 대한 피크 면적이 도 6에 도시된다.
잔류 시약은 다음 공식을 사용하여 계산된다.
잔류 시약 공식에서, STD = 테스트 샘플 영역에 가장 가까운 표준 샘플, C잔류 = 유리 시약의 농도 (μmol/L), 및 C단백질 = 단백질 시약의 농도 (μmol/L).
실시예 29. 모든 항체 약물 접합체 (ADS)에 대한 잔류 uABT 분석
용매 완충액 I 및 II는 잔류 시약 분석을 위한 완충액 I 및 II와 동일하다. PBS 및 DMSO를 첨가하여 15%(v/v) DMSO로 3mg/mL의 샘플을 만들어 샘플을 제조한다. 그런 다음 3mg/mL 용액 100uL를 150μL 용매 I과 혼합하고 실온에서 10분 동안 와류시킨다. 용액을 실온에서 16,000rcf로 10분 동안 원심분리한다. 분석을 위해 상청액을 즉시 유리 바이알에 옮겨 담는다. uABT 표준 스톡 용액 (10 mM)을 준비하고 사용할 때까지 -80 oC에서 보관한다. 참조 표준 스톡 용액을 DMSO를 사용하여 1400 μM로 희석한다. 참조 표준의 경우 35 μM의 최종 농도에 대한 390 μL의 완충액 II에 대해 10 μL의 1400 μM uABT이다. 표 10은 uABT 분석 표준 샘플의 구성을 보여준다. uABT 샘플은 각 표준 샘플 200μL와 용매 완충액 I 300ul를 결합하여 최종 표준 곡선 (14 μM, 7 μM, 3.5 μM 1.75 μM, 0.7 μM, 0.35 μM, 0.21 μM)을 제공하여 제조된다. 샘플 용액을 실온에서 10분 동안 와류시키고 16,000 rcf에서 10분 동안 원심분리한다. 상청액을 즉시 분석한다. 잔류 uABT 분석을 위한 HPLC 매개변수는 실시예 7에 제공된 잔류 페이로드 분석과 동일하다.
잔류 uABT는 다음 공식을 사용하여 계산된다.
상기 uABT 공식에서, STD는 테스트 샘플 영역에 가장 가까운 표준 샘플이고, C잔류는 유리 uABT의 농도 (μmol/L)이며 C단백질은 단백질의 농도 (μmol/L)이다. 잔류 uABT 분석에 대한 표준 곡선이 도 4c에 도시된다. 잔류 uABT 분석에 대한 HPLC 추적 및 피크 면적이 도 7에 도시된다.
실시예 30. DAR 분석 방법
DAR 분석을 위한 HPLC 및 MS 매개변수는 각각 표 11 및 12에 나와 있다.
DAR 분석을 위해 다음 공식이 사용된다.
다수의 구현예가 설명되었지만, 본 개시내용의 기술 (예를 들어, 화합물, 제제, 조성물, 방법 등)을 활용하는 다른 구현예를 제공하기 위해 우리의 기본 예가 변경될 수 있다는 점이 명백하다.
SEQUENCE LISTING <110> BIOHAVEN THERAPEUTICS LTD <120> ANTIBODY DRUG CONJUGATES USING MATES TECHNOLOGY FOR DELIVERING CYTOTOXIC AGENTS <130> BHL0029US <150> 63/190703 <151> 2021-05-19 <160> 71 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 1 His Trp Arg Gly Trp Ala 1 5 <210> 2 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 2 Trp Gly Arg Arg 1 <210> 3 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 3 Arg Arg Gly Trp 1 <210> 4 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 4 Asn Lys Phe Arg Gly Lys Tyr Lys 1 5 <210> 5 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 5 Asn Arg Phe Arg Gly Lys Tyr Lys 1 5 <210> 6 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 6 Asn Ala Arg Lys Phe Tyr Lys 1 5 <210> 7 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <400> 7 Asn Ala Arg Lys Phe Tyr Lys Gly 1 5 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(3)..(3) <223> X is any amino acid <400> 16 Ala Trp Xaa Leu Gly Glu Leu Val Trp 1 5 <210> 17 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic <220> <221> disulfid <222> (2)..(12) <400> 17 Asp Cys Ala Trp His Leu Gly Glu Leu Val Trp Cys Thr 1 5 10 <210> 18 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic <220> <221> disulfid <222> (2)..(12) <220> <221> SITE <222> (5)..(5) <223> X is any amino acid <400> 18 Asp Cys Ala Trp Xaa Leu Gly Glu Leu Val Trp Cys Thr 1 5 10 <210> 19 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial SEquence <220> <223> Synthetic <220> <221> disulfid <222> (2)..(12) <400> 19 Asp Cys Ala Trp Asp Leu Gly Glu Leu Val Trp Cys Thr 1 5 10 <210> 20 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic <220> <221> SITE <222> (2)..(2) <223> D proline <220> <221> SITE <222> (4)..(4) <223> D proline <220> <221> SITE <222> (7)..(7) <223> X is any amino acid <400> 20 Asp Pro Leu Pro Ala Trp Xaa Leu Gly Glu Leu Val Trp 1 5 10 <210> 21 <211> 13 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disulfid <222> (6)..(16) <400> 24 Asp Pro Leu Pro Asp Cys Ala Trp His Leu Gly Glu Leu Val Trp Cys 1 5 10 15 Thr <210> 25 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic <220> <221> SITE <222> (2)..(2) <223> D proline <220> <221> SITE <222> (4)..(4) <223> D proline <220> <221> Disulfid <222> (6)..(16) <223> D proline <400> 25 Asp Pro Leu Pro Asp Cys Ala Trp Asp Leu Gly Glu Leu Val Trp Cys 1 5 10 15 Thr <210> 26 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Seqeunce <220> <223> Synthetic <220> <221> disulfid <222> (1)..(15) <220> <221> disulfid <222> (3)..(13) <220> <221> SITE <222> (6)..(6) <223> X is an amino acid <400> 26 Cys Asp Cys Ala Trp Xaa Leu Gly Glu Leu Val Trp Cys Thr Cys 1 5 10 15 <210> 27 <211> 15 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic <220> <221> disulfid <222> (1)..(15) <220> <221> disulfid <222> (3)..(13) <400> 27 Cys Asp Cys Ala Trp His Leu Gly Glu Leu Val Trp Cys Thr Cys 1 5 10 15 <210> 28 <211> 15 <212> PRT <213> artificial sequence <220> 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32 Arg Gly Asn Cys Ala Tyr His Lys Gly Gln Leu Val Trp Cys Thr Tyr 1 5 10 15 His <210> 33 <211> 17 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic <220> <221> disulfid <222> (4)..(14) <400> 33 Arg Gly Asn Cys Lys Tyr His Arg Gly Gln Leu Val Trp Cys Thr Tyr 1 5 10 15 His <210> 34 <211> 17 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic <220> <221> disulfid <222> (4)..(14) <400> 34 Arg Gly Asn Cys Ala Trp His Arg Gly Lys Leu Val Trp Cys Thr Tyr 1 5 10 15 His <210> 35 <211> 17 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic <220> <221> disulfid <222> (4)..(14) <400> 35 Arg Gly Asn Cys Lys Trp His Arg Gly Glu Leu Val Trp Cys Thr Tyr 1 5 10 15 His <210> 36 <211> 17 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic <220> <221> disulfid <222> (4)..(14) <400> 36 Arg Gly Asn Cys Lys Trp His Arg Gly Gln Leu Val Trp Cys Thr Tyr 1 5 10 15 His <210> 37 <211> 17 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic <220> <221> disulfid <222> (4)..(14) <400> 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SITE <222> (5)..(7) <223> X is any amino acid <400> 63 Cys Xaa Tyr His Xaa Xaa Xaa Leu Val Trp Cys 1 5 10 <210> 64 <211> 12 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic <220> <221> SITE <222> (1)..(1) <223> X is any amino acid <220> <221> disulfid <222> (2)..(12) <220> <221> SITE <222> (3)..(3) <223> X is any amino acid <220> <221> SITE <222> (6)..(8) <223> X is any amino acid <400> 64 Xaa Cys Xaa Tyr His Xaa Xaa Xaa Leu Val Trp Cys 1 5 10 <210> 65 <211> 12 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic <220> <221> disulfid <222> (1)..(11) <220> <221> SITE <222> (2)..(2) <223> X is any amino acid <220> <221> SITE <222> (5)..(7) <223> X is any amino acid <220> <221> SITE <222> (12)..(12) <223> X is any amino acid <400> 65 Cys Xaa Tyr His Xaa Xaa Xaa Leu Val Trp Cys Xaa 1 5 10 <210> 66 <211> 17 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic <220> <221> site <222> (1)..(3) <223> X is any amino acid and up to three may be absent <220> <221> disulfid <222> (4)..(14) <220> <221> site <222> (5)..(5) <223> X is any amino acid <220> <221> site <222> (8)..(10) <223> X is any amino acid <220> <221> site <222> (15)..(17) <223> X is any amino acid and up to three may be absent <400> 66 Xaa Xaa Xaa Cys Xaa Tyr His Xaa Xaa Xaa Leu Val Trp Cys Xaa Xaa 1 5 10 15 Xaa <210> 67 <211> 15 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> Synthetic <220> <221> site <222> (1)..(1) <223> X is any amino acid <220> <221> disulfid <222> (2)..(12) <220> <221> site <222> (3)..(3) <223> X is any amino acid <220> <221> site <222> (6)..(8) <223> X is any amino acid <220> <221> site <222> (13)..(15) <223> X is any amino acid <400> 67 Xaa Cys Xaa Tyr His Xaa Xaa Xaa Leu Val Trp Cys Xaa Xaa Xaa 1 5 10 15 <210> 68 <211> 17 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic <220> <221> site <222> (1)..(3) <223> X is any amino acid and up to two of them may be absent <220> <221> disulfid <222> (4)..(14) <220> <221> site <222> (5)..(6) <223> X is any amino acid <220> 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amino acid <400> 70 Asp Cys Xaa Xaa His Xaa Gly Xaa Leu Val Trp Cys Thr 1 5 10 <210> 71 <211> 17 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic <220> <221> disulfid <222> (4)..(14) <220> <221> site <222> (5)..(6) <223> X is any amino acid <220> <221> site <222> (8)..(8) <223> X is any amino acid <220> <221> site <222> (10)..(10) <223> X is any amino acid <220> <221> site <222> (15)..(17) <223> X is any amino acid <400> 71 Arg Gly Asn Cys Xaa Xaa His Xaa Gly Xaa Leu Val Trp Cys Xaa Xaa 1 5 10 15 Xaa

Claims (30)

  1. 화학식 R-I의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 염으로서

    여기서,
    LG는 RLG-LLG이고,
    RLG는 , Rc-(Xaa)z-, 핵산 모이어티, 또는 소분자 모이어티이고,
    각 Xaa는 독립적으로 아미노산 또는 아미노산 유사체의 잔기이고,
    t는 0 내지 50이고,
    z는 1 내지 50이고,
    각 Rc는 독립적으로 -La-R'이고,
    각 La는 독립적으로 공유 결합이거나, 또는 C1-C20 지방족 또는 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 C1-C20 헤테로지방족으로부터 선택되는 임의로 치환된 2가 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 -C(R')2-, -Cy-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, 또는 -C(O)O-로 대체되고,
    각 -Cy-는 독립적으로 임의로 치환된 2가 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭 기이고, 여기서 각 모노시클릭 고리는 C3-20 시클로지방족 고리, C6-20 아릴 고리, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 20원 헤테로아릴 고리, 및 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 20원 헤테로시클릴 고리로부터 독립적으로 선택되고,
    LLG는 -LLG1-, -LLG1-LLG2-, -LLG1-LLG2-LLG3-, 또는 -LLG1-LLG2-LLG3-LLG4-이고,
    RG는 -LRG1-LRG2-, -LLG4-LRG1-LRG2-, -LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-, -LLG2-LLG3-LLG4-LRG1-LRG2-이고,
    각각의 LLG1, LLG2, LLG3, LLG4, LRG1, LRG2, 및 LRM은 독립적으로 L이고,
    각 L은 독립적으로 공유 결합이거나, 또는 하나 이상의 지방족 모이어티, 아릴 모이어티, 각각 독립적으로 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로지방족 모이어티, 각각 독립적으로 1 내지 20개의 헤테로원자를 갖는 헤테로방향족 모이어티, 또는 임의의 하나 이상의 이러한 모이어티의 임의의 조합을 포함하는 2가 임의로 치환된 선형 또는 분지형 C1-100 기이고, 여기서 상기 기의 하나 이상의 메틸렌 단위는 임의로 및 독립적으로 C1-6 알킬렌, C1-6 알케닐렌, 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 2가 C1-6 헤테로지방족 기, , -Cy-, -C(R')2-, -O-, -S-, -S-S-, -N(R')-, -C(O)-, -C(S)-, -C(NR')-, -C(O)N(R')-, -C(O)C(R')2N(R')-, -N(R')C(O)N(R')-, -N(R')C(O)O-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2N(R')-, -C(O)S-, -C(O)O-, -P(O)(OR')-, -P(O)(SR')-, -P(O)(R')-, -P(O)(NR')-, -P(S)(OR')-, -P(S)(SR')-, -P(S)(R')-, -P(S)(NR')-, -P(R')-, -P(OR')-, -P(SR')-, -P(NR')-, 아미노산 잔기, 또는 n이 1 내지 20인 -[(-O-C(R')2-C(R')2-)n]-로 대체되고,
    각 R'는 독립적으로 -R, -C(O)R, -CO2R, 또는 -SO2R이고,
    각 R은 독립적으로 -H이거나, 또는 C1-30 지방족, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C1-30 헤테로지방족, C6-30 아릴, C6-30 아릴지방족, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 C6-30 아릴헤테로지방족, 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 5 내지 30원 헤테로아릴, 및 1 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 3 내지 30원 헤테로시클릴로부터 선택되는 임의로 치환된기이거나, 또는
    2개의 R기는 임의로 및 독립적으로 함께 공유 결합을 형성하거나, 또는
    동일한 원자 상의 2개 이상의 R 기는 임의로 및 독립적으로 함께 상기 원자를 제외하고 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된, 3 내지 30원, 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하거나, 또는
    2개 이상의 원자 상의 2개 이상의 R 기는 임의로 및 독립적으로 함께 개재 원자를 제외하고 0 내지 10개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된, 3 내지 30원, 모노시클릭, 바이시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하고
    MOI는 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)를 포함하는 관심 모이어티인,
    화합물 또는 이의 염.
  2. 제1항에 있어서, LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하고, 여기서 상기 표적 제제는 항체 제제인, 화합물 또는 염.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, LG는 항체 제제의 Fc 영역에 결합하는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하는 것인, 화합물 또는 염.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티이거나 이를 포함하고, 여기서 상기 표적 제제는 엔포르투맙, 브렌툭시맙, 또는 트라스트주맙이거나 이를 포함하는 항체 제제인, 화합물 또는 염.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, LG는 표 A-1의 A-1 내지 A-50 중 임의의 것으로부터 선택되는 기이거나 이를 포함하는 것인, 화합물 또는 염.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, RLG는 DCAWXLGELVWCT (서열 번호 18)이거나 이를 포함하고, 여기서 2개의 시스테인 잔기는 임의로 이황화 결합을 형성하고, X는 아미노산 잔기인, 화합물 또는 염.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화합물이

    로부터 선택되는 하나 이상의 기를 포함하는 것인, 화합물 또는 염.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, LRM은 -(CH2CH2O)n-이거나 이를 포함하고, 여기서 n은 독립적으로 각 경우에 정수 2, 3, 4, 5, 6, 7, 및 8로부터 선택되는 것인, 화합물 또는 염.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, LRM은 -(CH2CH2O)n-(CH2)n-NHC(O)-(CH2)n-, -[(CH2CH2O)n-(CH2)n-NHC(O)]m-(CH2)n-, 및 -(CH2CH2O)n-(CH2)n-N((CH2CH2O)n-(CH2)n-)((CH2CH2O)n-(CH2)n-)이거나 이를 포함하고, m은 독립적으로 각 경우에 정수 1, 2, 3, 및 4로부터 선택되는 것인, 화합물 또는 염.
  10. P-I의 구조를 갖는 제제 또는 이의 염을 제조하는 방법으로서

    여기서,
    P는 표적 제제 모이어티이고,
    LPM은 링커이고,
    MOI는 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)이거나 이를 포함하는 관심 모이어티이고,
    상기 방법은
    1) 표적 제제를 화학식 R-I의 구조를 갖는 반응 파트너 또는 이의 염과 접촉시키는 단계
    2) 화학식 P-I의 구조를 갖는 제제를 형성하는 단계를 포함하고

    여기서,
    LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기이고,
    RG는 반응기이고,
    LRM은 링커이고,
    MOI는 MMAE 이거나 이를 포함하는 관심 모이어티이거나, 또는
    P-II의 구조를 갖는 제제를 제조하는 방법으로서

    여기서
    P-N은 리신 잔기를 포함하는 단백질 제제 모이어티이고,
    LPM은 링커이고,
    MOI는 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)이거나 이를 포함하는 관심 모이어티이고,
    상기 방법은
    P-N을 화학식 R-I의 구조를 갖는 반응 파트너 또는 이의 염과 접촉시키는 단계를 포함하고

    여기서
    LG는 P-N에 결합하는 단백질 결합 모이어티를 포함하는 기이고,
    RG는 반응기이고,
    LRM은 링커이고,
    MOI은 MMAE이거나 이를 포함하는 관심 모이어티인, 방법.
  11. 제10항에 있어서, 상기 항체 제제는 항체 제제이거나 이를 포함하는 것인, 방법.
  12. 제10항에 있어서, 상기 항체 제제는 항-CD30 단클론 항체, 예컨대, 브렌툭시맙 또는 항-넥틴-4-단클론 항체, 예컨대, 엔포르투맙이거나 이를 포함하는 것인, 방법.
  13. 제11항 또는 제12항에 있어서, 관심 모이어티는 IgG1 중쇄의 K246 또는 K248 또는 상응하는 위치에서 항체 제제에 선택적으로 부착되는 것인, 방법.
  14. 제11항 또는 제12항에 있어서, 관심 모이어티는 IgG2 중쇄의 K251 또는 K253 또는 상응하는 위치에서 항체 제제에 선택적으로 부착되는 것인, 방법
  15. 제11항 또는 제12항에 있어서, 관심 모이어티는 IgG4 중쇄의 K239 또는 K241 또는 상응하는 위치에서 항체 제제에 선택적으로 부착되는 것인, 방법
  16. 제10항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 접촉 및 형성 단계는 하나의 화학 반응에서 수행되는 것인, 방법.
  17. 복수의 제제를 제공하는 조성물로서, 각각의 제제는 독립적으로
    항체 제제 모이어티,
    모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)이거나 이를 포함하는 관심 모이어티, 및
    임의로 항체 제제 모이어티 및 관심 모이어티를 연결하는 링커 모이어티
    를 포함하고,
    여기서 상기 복수의 제제 중 항체 제제 모이어티는 공통 아미노산 서열을 포함하거나 공통 항원에 결합할 수 있고, 상기 복수의 제제는 독립적으로 항체 제제 모이어티의 적어도 하나의 공통 아미노산 잔기에서 공통 변형을 공유하고,
    공통 아미노산 서열을 포함하거나 공통 항원 및 관심 모이어티에 결합할 수 있는 항체 제제 모이어티를 포함하는 모든 제제의 약 1% 내지 100%는 복수의 제제인, 조성물.
  18. 제17항에 있어서, 상기 복수의 제제의 항체 제제 모이어티는 공통 항원에 결합할 수 있는 것인, 조성물.
  19. 제18항에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 IgG1 항체 중쇄의 K246 또는 K248이거나 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물.
  20. 제18항에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 IgG2 항체 중쇄의 K251 또는 K253이거나 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물
  21. 제18항에 있어서, 공통 아미노산 잔기는 IgG4 항체 중쇄의 K239 또는 K241이거나 이에 상응하는 아미노산 잔기인, 조성물
  22. 제18항에 있어서, 각 복수의 제제는 -S-Cy-를 함유하지 않고, 여기서 -Cy-는 임의로 치환된 5원 모노시클릭 고리이고, 시스테인 잔기에 의해 형성되지 않은 -S-S-를 함유하지 않고 시스테인 잔기의 것이 아닌 -SH 또는 이의 염 형태를 함유하지 않는 것인, 조성물.
  23. 제18항에 있어서, 각 복수의 제제는 -S-CH2-CH2-를 함유하지 않는 것인, 조성물.
  24. 제18항에 있어서,


    로부터 선택되는 하나 이상의 기를 포함하는, 조성물.
  25. 제1항에 있어서, RLG는


    , 또는 이들의 염 중 적어도 하나의 아미노산 잔기를 포함하는 폴리펩티드 또는 Rc-(Xaa)z-인, 화합물 또는 염.
  26. 제1항에 있어서, 화합물이







    로부터 선택되는 것인, 화합물 또는 염.
  27. 화학식 R-I의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 염으로서

    여기서,
    LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기이고,
    RG는 반응기이고,
    LRM은 링커이고,
    MOI는 MMAE를 포함하는 관심 모이어티이고,
    여기서 상기 표적 제제는 K246 또는 K248을 포함하는 IgG 중쇄를 포함하는 항체이고,
    여기서 상기 표적 결합 모이어티는, LRM-MOI를 포함하는 모이어티를 K246 또는 K248에 부착시키고 화합물로부터 표적 결합 모이어티를 함유하는 기를 추방시키는 K246 또는 K248과 반응기 사이의 반응을 가능하게 하기 위해 반응기가 IgG 중쇄의 K246 또는 K248에 근접하게 하도록 항체에 결합하도록 구성되는 것인, 화합물 또는 이의 염.
  28. 화학식 R-I의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 염으로서

    여기서,
    LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기이고,
    RG는 반응기이고,
    LRM은 링커이고,
    MOI는 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)을 포함하는 관심 모이어티인, 화합물 또는 염.
  29. 화학식 (P-II)의 구조를 갖는 제1 화합물, 및 (LG-I)의 구조를 갖는 제2 화합물을 포함하는 조성물로서


    (P-II)에서,
    P-N은 리신 잔기를 포함하는 단백질 제제 모이어티이고,
    LPM은 링커이고,
    MOI는 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)를 포함하는 관심 모이어티이고,
    (LG-I)에서, LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기인, 조성물.
  30. 제1항에 있어서,
    화학식 (R-I)를 갖는 제3 화합물

    화학식 (R-III)을 갖는 제4 화합물
    , 또는
    이들의 조합을 추가로 포함하고,
    (R-I)에서,
    LG는 표적 제제에 결합하는 표적 결합 모이어티를 포함하는 기이고, 이는 화학식 (LG-I)의 LG와 동일하고,
    RG는 반응기이고,
    LRM은 링커이고, 이는 화학식 (P-II)에서의 것과 동일하고,
    MOI는 모노메틸 아우리스타틴 E (MMAE)를 포함하는 관심 모이어티인,
    조성물.
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