KR20220074260A - 사포닌 함량이 증진된 흑도라지 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 흑도라지 - Google Patents

사포닌 함량이 증진된 흑도라지 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 흑도라지 Download PDF

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Abstract

본 발명은 사포닌 함량이 증진된 흑도라지 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 흑도라지에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명에 따른 방법으로 제조된 흑도라지는 도라지 내에 포함된 데사피오플라티코딘 D, 폴리갈라신 D, 3-O-β-D-글루코피라노실플라티코디게닌 및 플라티코디게닌의 함량이 유의적으로 증가하여 새로운 기능성 소재로서 유용하게 사용될 수 있다.

Description

사포닌 함량이 증진된 흑도라지 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 흑도라지{MANUFACTURING METHOD OF BLACK PLATYCODON GRANDIFLORUS INCREASED SAPONIN AND BLACK PLATYCODON GRANDIFLORUS MANUFACTURED THEREOF}
본 발명은 사포닌 함량이 증진된 흑도라지 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 흑도라지에 관한 것이다.
도라지(platycodon grandiflorus)는 한국, 중국 동북부, 일본에 자생하며 햇빛이 잘드는 산야의 초원에서 자라는 다년초이다. 도라지는 초롱꽃과에 속하는 다년생초로 뿌리는 굵고 줄기는 단생 또는 족생하여 높이 40 내지 100 ㎝까지 자란다. 도라지의 잎은 호생 또는 윤생하며 거의 잎자루 없이 긴 계란형 또는 타원형이고, 꽃은 6 내지 8월에 청자색의 종모양으로 줄기나 가지 끝에 하나씩 정생하여 핀다. 흰 꽃이 피는 계통을 백도라지라 하고, 뿌리는 각혈성 환자의 약제 또는 식용으로 쓰인다. 도라지의 뿌리는 식용 또는 약용으로 이용되어 왔으며, 뿌리를 물로 씻어 말리거나 껍질을 벗겨서 말리고 건조시킨 것을 길경근이라 하여 이를 약용하였다.
도라지의 뿌리에는 2%의 트리테르페노이드 사포닌(triterpenoid saponin) 및 0.03% 스테롤(sterol)이 함유되어 있고, 그외 당류로서 이눌린(inulin), 플라티코디닌(platycodinin)이 포함되어 있다. 한방에서 도라지는 기침, 가래, 폐질환, 배뇨곤란, 설사, 후중 등의 증상에 효과적인 것으로 알려져 있고, 도라지의 추출성분이 암세포 증식억제 등도 보고되어 있다.
한편, 도라지를 증숙 및 건조하는 과정을 수회 반복하거나, 10일 이상 장기간 동안 건열로 가열하면 백색의 도라지가 점차 황색, 홍색 및 흑색으로 변하면서 흑도라지를 제조할 수 있다. 이와 같이 제조된 흑도라지는 저장성 및 관능성이 증대되며 사포닌의 가수분해에 의한 기능성 성분의 증가가 나타난다. 또한, 최근 연구에 의하면 도라지보다 흑도라지에서 항산화 및 항당뇨 활성이 증가됨이 보고된 바 있고, 그에 따라 흑도라지를 이용한 다양한 기능성 식품의 제조도 활발하게 이루어지고 있다.
이와 관련하여, 대한민국 특허공개 제10-2015-0035030호는 흑도라지, 사과 및 대추 추출물을 혼합하여 다양한 폴리페놀, 식이섬유가 함유되었을 뿐만 아니라 당도가 높고 관능적인 특성이 우수한 흑도라지 사과주스를 개시하고 있다.
대한민국 특허공개 제10-2015-0035030호
본 발명의 목적은 사포닌 함량이 증진된 흑도라지 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 흑도라지를 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 도라지에 아밀라아제 및 글루카나아제로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효소를 처리하는 단계; 및 상기 효소가 처리된 도라지를 증숙하는 단계를 포함하는 효소처리된 흑도라지 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 제조방법으로 제조된 흑도라지를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 흑도라지를 유효성분으로 포함하는 조성물을 제공한다.
나아가, 본 발명은 도라지에 아밀라아제 및 글루카나아제로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효소를 처리하는 단계; 및 상기 효소가 처리된 도라지를 증숙하는 단계를 포함하는 흑도라지 내 사포닌 함량 증가방법을 제공한다.
본 발명에 따른 방법으로 제조된 흑도라지는 도라지 내에 포함된 데사피오플라티코딘 D, 폴리갈라신 D, 3-O-β-D-글루코피라노실플라티코디게닌 및 플라티코디게닌의 함량이 유의적으로 증가하여 새로운 기능성 소재로서 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에서 발효(A) 또는 효소처리(B) 방법으로 흑도라지를 제조하는 과정을 촬영한 사진이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 도라지에 아밀라아제 및 글루카나아제로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효소를 처리하는 단계; 및 상기 효소가 처리된 도라지를 증숙하는 단계를 포함하는 효소처리된 흑도라지 제조방법을 제공한다.
본 발명에 따른 효소처리된 흑도라지 제조방법은 도라지에 아밀라아제 및 글루카나아제로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효소를 처리하는 단계를 제공한다.
상기 용어, "아밀라아제(amylase)"는 녹말을 당으로 분해하는 효소로서, 녹말을 구성하는 아밀로오스(amylose) 및 아밀로펙틴(amylopectin)의 글리코시드 결합을 절단할 수 있다. 상기 아밀라아제는 통상의 기술분야에 알려진 모든 종류의 아밀라아제를 포함할 수 있고, 구체적으로, 상기 아밀라아제는 알파 아밀라아제일 수 있다.
또한, 상기 용어, "글루카나아제(glucanase)"는 글루코오스로 구성된 다당류인 글루칸(glucan)을 분해하는 효소를 의미한다. 상기 글루카나아제는 통상의 기술분야에 알려진 모든 종류의 글루카나아제를 포함할 수 있다. 구체적으로, 상기 글루카나아제는 베타 글루카나아제일 수 있고, 본 발명의 일 실시예에서, 상기 베타 글루카나아제는 자일라나제(xylanase), 셀룰라아제(cellulase) 및 헤미셀룰라아제(hemicellulase)로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다.
상기 효소는 통상의 기술자에 의해 적절한 양으로 처리될 수 있다. 구체적으로, 상기 효소는 전체 도라지 중량의 0.1 내지 10 중량비, 0.2 내지 10 중량비, 0.3 내지 10 중량비, 0.1 내지 5 중량비, 0.2 내지 5 중량비, 0.3 내지 5 중량비, 0.1 내지 3 중량비, 0.2 내지 3 중량비 또는 0.3 내지 3 중량비로 처리될 수 있다.
본 발명에 따른 제조방법은 도라지에 효소를 처리하기 전에 수침하는 단계를 더 포함할 수 있다. 상기 수침은 통상의 기술자에 의해 적절한 시간동안 수행될 수 있고, 구체적으로 10분 내지 10시간, 10분 내지 5시간, 10분 내지 3시간 또는 10분 내지 1시간 동안 수행될 수 있다. 또한, 상기 수침은 적절한 온도의 물을 사용하여 수행될 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 효소처리된 흑도라지 제조방법은 상기 효소가 처리된 도라지를 증숙하는 단계를 제공한다.
본 명세서에서 사용된 용어, "증숙"은 쪄서 익히는 것을 의미한다. 즉, 상기 단계에서 증숙은 도라지를 쪄서 익히는 것일 수 있다. 상기 증숙은 통상의 기술자에 의해 적절한 시간 및 온도에서 수행될 수 있고, 필요에 따라 적절히 변형될 수 있다.
일례로, 상기 증숙은 40 내지 90℃, 50 내지 90℃, 60 내지 90℃, 40 내지 85℃, 50 내지 85℃, 60 내지 85℃, 40 내지 70℃, 50 내지 70℃ 또는 60 내지 70℃의 온도에서 수행될 수 있다. 또한, 상기 증숙은 1 내지 20일, 3 내지 20일, 5 내지 20일, 1 내지 15일, 3 내지 15일, 5 내지 15일, 1 내지 10일, 3 내지 10일 또는 5 내지 10일 동안 수행될 수 있다.
본 발명에 따른 방법으로 제조된 흑도라지는 사포닌 함량이 증가될 수 있다. 구체적으로, 상기 사포닌은 플라티코딘 E(platycodin E), 데사피오플라티코딘 D(desapioplatycodin D), 플라티코딘 D(platycodin D), 폴리갈라신 D(polygalacin D), 디아피-플라티코딘 D3(deapi-platycodin D3), 디아피-플라티코사이드 E(deapi-platycoside E), 플라티코딘 D3(platycodin D3), 플라티코딘 D2(platycodin D2), 플라티코닉산(platyconic acid), 3-O-β-D-글루코피라노실플라티코디게닌(3-O-β-D-glucopyranosylplatycodigenin) 및 플라티코디게닌(platycodigenin)으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서, 상기 사포닌은 플라티코딘 E, 데사피오플라티코딘 D, 플라티코딘 D, 폴리갈라신 D, 3-O-β-D-글루코피라노실플라티코디게닌 및 플라티코디게닌일 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 제조방법으로 제조된 흑도라지를 제공한다.
본 발명에 따른 흑도라지 제조방법은 상기 서술한 바와 같은 특징을 가질 수 있다. 일례로, 상기 흑도라지는 도라지에 아밀라아제 및 글루카나아제로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효소를 처리하는 단계; 및 상기 효소가 처리된 도라지를 증숙하는 단계를 포함하는 방법으로 제조될 수 있다.
상기 흑도라지는 도라지 내 존재하는 사포닌의 함량이 증가된 것일 수 있다. 상기 사포닌 함량의 증가는 도라지 내 존재하는 사포닌의 함량이 증가하거나, 도라지 내 존재하지 않는 사포닌이 생성된 것을 모두 포함할 수 있다. 상기 사포닌은 통상의 기술분야에 도라지에 포함되었다고 알려진 모든 종류의 사포닌을 포함할 수 있다. 구체적으로, 상기 사포닌은 플라티코딘 E, 데사피오플라티코딘 D, 플라티코딘 D, 폴리갈라신 D, 디아피-플라티코딘 D3, 디아피-플라티코사이드 E, 플라티코딘 D3, 플라티코딘 D2, 플라티코닉산, 3-O-β-D-글루코피라노실플라티코디게닌 및 플라티코디게닌으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다.
본 발명에 따른 제조방법으로 제조된 흑도라지는 상기 서술한 바와 같은 사포닌의 함량을 증가시킴으로써, 도라지의 생리활성 효과로 알려진 항암, 항염증, 항비만, 항콜레스테롤 등의 활성이 증진된 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 흑도라지를 유효성분으로 포함하는 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 조성물은 상기 서술한 바와 같은 특징으로 제조되는 흑도라지를 유효성분으로 포함할 수 있다. 일례로, 상기 흑도라지는 도라지에 아밀라아제 및 글루카나아제로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효소를 처리하는 단계; 및 상기 효소가 처리된 도라지를 증숙하는 단계를 포함하는 방법으로 제조될 수 있다.
상기 흑도라지는 도라지 내 존재하는 사포닌의 함량이 증가된 것일 수 있다. 상기 사포닌 함량의 증가는 도라지 내 존재하는 사포닌의 함량이 증가하거나, 도라지 내 존재하지 않는 사포닌이 생성된 것을 모두 포함할 수 있다. 구체적으로, 상기 사포닌은 플라티코딘 E, 데사피오플라티코딘 D, 플라티코딘 D, 폴리갈라신 D, 디아피-플라티코딘 D3, 디아피-플라티코사이드 E, 플라티코딘 D3, 플라티코딘 D2, 플라티코닉산, 3-O-β-D-글루코피라노실플라티코디게닌 및 플라티코디게닌으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다.
상기 흑도라지는 상기 서술한 바와 같은 사포닌의 함량을 증가시킴으로써, 도라지의 생리활성 효과로 알려진 항암, 항염증, 항비만, 항콜레스테롤 등의 활성이 증진된 것일 수 있다.
따라서, 본 발명에 따른 흑도라지를 포함하는 조성물은 다양한 기능성 식품의 소재로서 유용하게 사용될 수 있다.
나아가, 본 발명은 도라지에 아밀라아제 및 글루카나아제로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효소를 처리하는 단계; 및 상기 효소가 처리된 도라지를 증숙하는 단계를 포함하는 흑도라지 내 사포닌 함량 증가방법을 제공한다.
본 발명에 따른 흑도라지 내 사포닌 함량 증가방법은 상기 서술한 바와 같은 특징을 가질 수 있다. 일례로, 상기 효소는 전체 도라지 중량의 0.1 내지 10 중량비, 0.2 내지 10 중량비, 0.3 내지 10 중량비, 0.1 내지 5 중량비, 0.2 내지 5 중량비, 0.3 내지 5 중량비, 0.1 내지 3 중량비, 0.2 내지 3 중량비 또는 0.3 내지 3 중량비로 처리될 수 있다.
본 발명에 따른 방법은 도라지 내 존재하는 사포닌의 함량을 증가시킬 수 있다. 상기 사포닌 함량의 증가는 도라지 내 존재하는 사포닌의 함량이 증가하거나, 도라지 내 존재하지 않는 사포닌이 생성된 것을 모두 포함할 수 있다. 상기 사포닌은 통상의 기술분야에 도라지에 포함되었다고 알려진 모든 종류의 사포닌을 포함할 수 있다.
구체적으로, 상기 사포닌은 플라티코딘 E, 데사피오플라티코딘 D, 플라티코딘 D, 폴리갈라신 D, 디아피-플라티코딘 D3, 디아피-플라티코사이드 E, 플라티코딘 D3, 플라티코딘 D2, 플라티코닉산, 3-O-β-D-글루코피라노실플라티코디게닌 및 플라티코디게닌으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서, 상기 사포닌은 플라티코딘 E, 데사피오플라티코딘 D, 플라티코딘 D, 폴리갈라신 D, 3-O-β-D-글루코피라노실플라티코디게닌 및 플라티코디게닌일 수 있다.
이하, 본 발명을 하기 실시예에 의해 상세히 설명한다, 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 이들에 의해 본 발명이 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 청구범위에 기재된 기술적 사상과 실질적으로 동일한 구성을 갖고 동일한 작용 효과를 이루는 것은 어떠한 것이라도 본 발명의 기술적 범위에 포함된다.
실시예 1. 흑도라지의 제조
세절된 건도라지를 30℃의 온도로 30분 동안 수침 후, 70℃의 온도로 8일 동안 증숙하여 흑도라지를 제조하였다. 제조된 흑도라지는 동결건조하여 다음 실험까지 보관하였다.
실시예 2. 효모로 발효된 흑도라지의 제조
세절된 건도라지를 30℃의 온도로 30분 동안 수침 후, 도라지 전체 중량의 0.5 중량비가 되도록 사카로마이세스 세레비지에 균주를 정제수와 혼합하여 접종하였다. 이를 30℃의 온도에서 12시간 동안 발효시키고, 밀봉용기를 교체하여 생성된 CO2를 제거한 뒤, 70℃의 온도로 8일 동안 증숙하여 발효된 흑도라지를 제조하였다. 제조된 흑도라지는 동결건조하여 다음 실험까지 보관하였다.
실시예 3. 효소처리된 흑도라지의 제조
세절된 건도라지를 30℃의 온도로 30분 동안 수침 후, 도라지 전체 중량 대비 0.5 중량비의 BAN 480L(중온용 알파 아밀라아제, novozyme) 및 0.5 중량비의 비스코자임 L(베타 글루카나아제 복합효소, novozyme)을 각각 정제수와 혼합하여 처리하였다. 효소가 처리된 도라지를 70℃의 온도로 8일 동안 증숙하여 효소처리된 흑도라지를 제조하였다. 제조된 흑도라지는 동결건조하여 다음 실험까지 보관하였다.
실시예 4. 발효 및 효소처리된 흑도라지의 제조
세절된 건도라지를 30℃의 온도로 30분 동안 수침 후, 도라지 전체 중량의 0.5 중량비가 되도록 사카로마이세스 세레비지에 균주를 정제수와 혼합하여 접종하였다. 이때, 도라지 전체 중량의 0.5 중량비가 되도록 BAN 480L(novozyme) 및 비스코자임 L을 각각 정제수와 혼합하여 함께 처리하였다. 이를 30℃의 온도에서 12시간 동안 발효시키고, 밀봉용기를 교체하여 생성된 CO2를 제거한 뒤, 70℃의 온도로 8일 동안 증숙하여 발효 및 효소처리된 흑도라지를 제조하였다. 제조된 흑도라지는 동결건조하여 다음 실험까지 보관하였다.
실험예 1. 제조된 흑도라지 내 사포닌 함량 확인
실시예 1 내지 4에서 제조된 흑도라지 내 사포닌 함량을 확인하기 위해, 먼저 흑도라지의 에탄올 추출물을 제조하고, 제조된 에탄올 추출물을 HPLC로 분석하였다.
1-1. 흑도라지 에탄올 추출물의 제조
20 g의 실시예 1 내지 4에서 제조된 흑도라지 각각에 200 ㎖의 70% 에탄올을 첨가하고 70℃에서 2시간씩 2회 열수추출하였다. 추출 후 수득된 추출물을 여과하고, 여과액을 50℃에서 회전감압농축하여 실시예 1 내지 4에서 제조된 흑도라지 에탄올 추출물을 각각 제조하였다.
1-2. 사포닌 함량 확인
실험예 1-1에서 제조된 흑도라지 에탄올을 이용하여 통상적인 방법으로 HPLC 분석을 수행하였다. 이때, 표준품으로서 순도 98% 이상의 플라티코딘 E(platycodin E), 데사피오플라티코딘 D(desapioplatycodin D), 플라티코딘 D(platycodin D), 폴리갈라신 D(polygalacin D), 3-O-β-D-글루코피라노실플라티코디게닌(3-O-β-D-glucopyranosylplatycodigenin) 및 플라티코디게닌(platycodigenin)을 시판되는 제품을 구입하여 사용하였다. HPLC는 하기 표 1에 기재된 장치 및 조건을 사용하였고, 이동상의 조건은 표 2에 기재된 바와 같이 수행하였다.
장치 Waters 1525 binary HPLC system
컬럼 Eurospher 100-5 C18(3×250 ㎜)
이동상 아세토니트릴, HPLC용 0.1% 인산
전개온도 실온
유속 0.8 ㎖/min
검출기 UV/Vis Waters 2487 dual λ absorbance detector (210 ㎚)
시간(분) 아세토니트릴(%) HPLC용 0.1% 인산(%)
0-44 15 85
45-54 21 79
55-79 23 77
80-99 25 75
100-139 35 65
140 15 85
그 결과, 실시예 1 내지 4에서 제조된 흑도라지에 포함된 사포닌 함량을 하기 표 3에 나타내었다.
사포닌 종류(%w/w) 실시예 1 실시예 2 실시예 3 실시예 4
플라티코딘 E 0.126±0.000 0.178±0.000 0.165±0.001 0.194±0.000
데사피오플라티코딘 D 0.115±0.000 0.132±0.000 0.168±0.001 0.151±0.001
플라티코딘 D 0.132±0.000 0.127±0.001 0.054±0.000 0.050±0.000
폴리갈라신 D 0.113±0.002 0.119±0.001 0.127±0.000 0.097±0.001
3-O-β-D-글루코피라노실플라티코디게닌 0.023±0.000 0.177±0.000 0.299±0.000 0.219±0.000
플라티코디게닌 - - 0.006±0.000 0.005±0.000
총 사포닌 0.508 0.733 0.819 0.715
표 3에 나타난 바와 같이, 실시예 3에서 제조된 흑도라지에 총 사포닌 함량이 가장 높았다. 특히, 실시예 3에서 제조된 흑도라지에서 데사피오플라티코딘 D, 폴리갈라신 D 및 3-O-β-D-글루코피라노실플라티코디게닌의 함량이 유의적으로 증가하였다. 한편, 실시예 3 및 4에서 제조된 흑도라지에서 항알츠하이머 활성이 알려진 플라디코디게닌이 생성되었다.
따라서, 상기로부터 본 발명에 따른 방법으로 제조된 흑도라지가 새로운 기능성 소재로서 유용하게 사용될 수 있음을 확인하였다.

Claims (13)

  1. 도라지에 아밀라아제 및 글루카나아제로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효소를 처리하는 단계; 및
    상기 효소가 처리된 도라지를 증숙하는 단계를 포함하는 효소처리된 흑도라지 제조방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 효소는 전체 도라지 중량의 0.1 내지 10 중량비로 첨가되는, 효소처리된 흑도라지 제조방법.
  3. 제1항에 있어서, 도라지에 효소를 처리하기 전에 수침하는 단계를 더 포함하는, 효소처리된 흑도라지 제조방법.
  4. 제1항에 있어서, 상기 아밀라아제는 알파 아밀라아제인, 효소처리된 흑도라지 제조방법.
  5. 제1항에 있어서, 상기 글루카나아제는 베타 글루카나아제인, 효소처리된 흑도라지 제조방법.
  6. 제5항에 있어서, 상기 베타 글루카나아제는 자일라나제(xylanase), 셀룰라아제(cellulase) 및 헤미셀룰라아제(hemicellulase)로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인, 효소처리된 흑도라지 제조방법.
  7. 제1항에 있어서, 상기 증숙은 40 내지 90℃의 온도에서 수행되는, 효소처리된 흑도라지 제조방법.
  8. 제1항에 있어서, 상기 증숙은 1 내지 20일 동안 수행되는, 효소처리된 흑도라지 제조방법.
  9. 제1항에 있어서, 상기 흑도라지는 사포닌 함량이 증가된, 효소처리된 흑도라지 제조방법.
  10. 제1항의 제조방법으로 제조된 흑도라지.
  11. 제10항의 흑도라지를 유효성분으로 포함하는 조성물.
  12. 도라지에 아밀라아제 및 글루카나아제로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효소를 처리하는 단계; 및
    상기 효소가 처리된 도라지를 증숙하는 단계를 포함하는 흑도라지 내 사포닌 함량 증가방법.
  13. 제12항에 있어서, 상기 사포닌은 플라티코딘 E, 데사피오플라티코딘 D, 플라티코딘 D, 폴리갈라신 D, 디아피-플라티코딘 D3, 디아피-플라티코사이드 E, 플라티코딘 D3, 플라티코딘 D2, 플라티코닉산, 3-O-β-D-글루코피라노실플라티코디게닌 및 플라티코디게닌으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인, 흑도라지 내 사포닌 함량 증가방법.
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