KR20220035048A - 화합물 3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-(1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온의 입체이성질체 및 항종양제 및 포스포디에스테라제 효소 억제제로서의 이의 용도 - Google Patents

화합물 3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-(1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온의 입체이성질체 및 항종양제 및 포스포디에스테라제 효소 억제제로서의 이의 용도 Download PDF

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코스타 투자림 카를로스 에두아르도 다
파비아노 트라반카 톨레도
산토스 페라리니 레난 도스
데보라 로샤 헬프스타인
티아고 자미넬리
훌리오 알레한드로 로하스 모스코소
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바이오랩 세너스 팔마씨우티카 엘티디에이.
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Abstract

본 발명은 식 (I)의 화합물 3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-(1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-indol-3-일)-6,7-디하이드로-3H-oxazol[3,4-a]피라진-5,8-디온에 관한 것이고, 또한 이의 약학적으로 허용되는 입체이성질체, 염, 용매화물, 수화물, 전구약물 및 에스테르; 기재된 화합물 중 하나 이상을 포함하는 약학 조성물; 항종양제 또는 포스포디에스테라제 효소 억제제로서의 상기 입체이성질체의 용도, 및 양성 전립선 비대증 및 암, 보다 구체적으로 전립선암의 치료에서의 상기 입체이성질체의 용도에 관한 것이며; 상기 입체이성질체는 이들 각각의 개별 형태 및/또는 임의의 비율로 과량의 부분입체이성질체를 갖는 라세미 혼합물 또는 비-라세미 혼합물의 형태이다.

Description

화합물 3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-(1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온의 입체이성질체 및 항종양제 및 포스포디에스테라제 효소 억제제로서의 이의 용도
제1 측면에서 본 특허 출원은 포스포디에스테라제(PDE) 효소 억제제인 화합물에 관한 것이다.
제2 측면에서 본 출원은 항증식성 및 항종양 화합물에 관한 것이다.
상기 화합물은, 예를 들어, 폐 질환 및 심장 기능부전에서 항-염증제, 혈관확장제, 각성제 및 수축제로 사용될 수 있다. 특히, PDE 억제제는 남성의 발기부전 치료에 유용한 것으로 나타났다. 추가로, 상기 화합물은 항증식제 및 항종양제로 사용될 수 있다.
포스포디에스테라제 억제제 화합물은 발기부전, 조직 이완으로 치료할 수 있는 장애 및/또는 병태, 및 포스포디에스테라제 억제제로 치료할 수 있는 기타 질병의 치료 및/또는 예방을 위해 의료 클리닉에서 사용되는 주요 제제이다. 발기부전의 경우 PDE-5 억제제가 의료 클리닉에서 가장 많이 사용되는 것이다.
일반적으로 성기능 장애로 알려진 발기부전은 남성의 삶의 질에 가장 해로운 질병 중 하나이다. 오랫동안 발기부전은 효과적인 치료의 가능성이 크지 않은 남성들을 괴롭혔다.
70년대 이전에는, 거의 모든 발기부전 사례가 심리적 원인에 의한 것으로 간주되었고, 치료는 테스토스테론의 경험적 투여 또는 정신과 전문의에게 의뢰하는 방식으로 이루어졌다.
경구 치료는 cGMP-PDE 억제제, 보다 구체적으로 PDE-5 억제제의 사용에 대한 임상 연구에서 비롯되었다. 이들 화합물의 전구체는, 혈관 확장제 특성을 가지며 산화질소의 효과를 강화시키는, 5-[2-에톡시-5-(4-메틸피페라지닐-술포닐)페닐]-1-메틸-3-n-프로필-1,6-디하이드로-7H-피라졸[4,3-d]피리미딘-7-온, 또는 실데나필이다. 실데나필 분자는 북미 특허 US5250534에 최초로 개시되었다.
그 후, PDE-5 효소의 다른 억제제 화합물들이 개발되었으며 많은 기술 문헌 간행물과 특허 문헌들에 인용되었다. 공지된 화합물 중에서 우리는 다음을 강조한다: 특허 US3635178에 최초로 개시된, 바데나필 분자; 미국 특허 US5859006에 최초로 개시된 타다라필; 미국특허 US8338432, US9359378에 최초로 개시되었으며 본 특허출원과 동일한 연구팀에 의해 개발된, 아직 상용화되지 않은 BL-106, BL-230, BL-236 화합물.
또한, 연구자들은 조직 이완제 화합물이 결석과 관련된 치료, 시술 또는 수술에서 치료 목적으로 또는 보조제로 작용할 목적으로 여러 조직의 이완을 촉진하는 데 사용되었음을 확인하였다 (Korkes, F. et al, J Bras Nefrol. (2009) 31(1):55), 전립선 비대 (예를 들어, 전립선 비대증, 전립선염) (WO 9911279) 및 요도 수축(Van der werf et al, BJU International (2002) 90:588). 다른 조직 이완제 치료가능한 병태 및/또는 장애는 공지되어 있으며 당해 기술 분야에 기술되어 있다.
이러한 시나리오를 고려하고, 발기부전, 조직 이완제로 치료가능한 병태 및/또는 장애, 및 포스포디에스테라제 억제제로 치료가능한 기타 질환의 치료를 위한 포스포디에스테라제 억제제 화합물, 보다 구체적으로는 PDE-5 저해제로서의 상기 화합물에 대한 새로운 대안을 찾고자, 본 발명의 발명자들은 본원에 기술되고 청구항에 기재된 새로운 화합물들을 개발하였으며, 이는 3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-(1-히드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 및 PDE 억제제로서 항증식 및 항종양 활성을 함께 또는 별개로 탁월하게 나타내는 이의 입체이성질체를 포함한다.
이러한 방식으로, 한 측면에서, 본원에 청구된 화합물은 발기부전, 심부전, 폐고혈압과 같은 PDE 억제로부터 이익을 얻는 여러 질병 및 의학적 병태의 치료, 및 항증식 및 항종양 효과로부터 이익을 얻는 여러 질병 및 병태의 치료를 위한 대안으로 제시된다.
한 측면에서, 본 특허 출원은 식 (I)의 3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-(1-히드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 화합물 및 이의 입체이성질체, 및 이의 염, 용매화물, 수화물, 전구약물 및 약학적으로 허용되는 에스테르에 관한 것이다.
Figure pct00001
대안적인 측면에서, 식 (I)의 화합물의 상기 입체이성질체는 이들 각각의 개별적인 형태 및/또는 임의의 비율로 과량의 부분입체이성질체를 갖는 라세미 혼합물 또는 비-라세미 혼합물 형태이다.
특정 측면에서, 입체이성질체는 식 (II) 및 (III)의 화합물이다.
Figure pct00002
식 (II)의 화합물은 3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-236)로 명명되고 식 (III)의 화합물은 3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R) 1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-239)로 명명된다.
바람직한 측면에서, 본 특허 출원은 하기 식 (IV), (V), (VI) 및 (VII)로 공지된 단리된 입체이성질체를 언급한다:
Figure pct00003
Figure pct00004
전술한 입체이성질체의 이름은 다음과 같다:
식 (IV)의 화합물: (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-236A);
식 (V)의 화합물: (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-236B);
식 (VI)의 화합물: (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-239A); 및
식 (VII)의 화합물: (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-239B).
본 특허 출원의 또 다른 측면은 식 (I)의 3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-(1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 화합물의 입체이성질체 혼합물을 언급하며, 상기 혼합물은 라세미 혼합물 또는 비-라세미 혼합물일 수 있다.
바람직하게는, 본 특허 출원은 임의의 비율로 과량의 부분입체이성질체를 갖는 비-라세미 혼합물에 대한 보호를 추구한다.
보다 구체적으로, 부분입체이성질체 비율은 1:99 내지 99:1 범위에 있다. 또 다른 바람직한 측면에서, 상기 혼합물은 1:50 내지 50:1 범위, 대안적으로 1:25 내지 25:1 범위이다. 보다 바람직한 측면에서, 과량의 부분입체이성질체를 갖는 비-라세미 혼합물은 1:2 내지 2:1 범위, 대안적으로 1:1 비율이다.
또 다른 바람직한 측면에서, 본 특허 출원은 식 (VIII) 및 (IX)에 기재된 부분입체이성질체의 혼합물을 언급하며, 상기 혼합물은 부분입체이성질체의 임의의 비율을 함유할 수 있다.
식 (VIII)의 부분입체이성질체의 혼합물은 (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 및 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-380) 으로 명명되며 다음 구조를 갖는다:
Figure pct00005
상기 부분입체이성질체 비율은 1:99 내지 99:1 범위이다. 또 다른 바람직한 측면에서, 혼합물은 1:50 내지 50:1 범위, 보다 바람직하게는 1:25 내지 25:1 범위이다. 보다 바람직한 측면에서, 혼합물은 1:2 내지 2:1 범위, 더욱 바람직하게는 1:1 비율이다.
식 (IX)의 부분입체이성질체의 혼합물은 (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 및 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-indo1e-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-241) 으로 명명되며 다음 구조를 갖는다:
Figure pct00006
상기 부분입체이성질체 비율은 1:99 내지 99:1 범위이다. 또 다른 바람직한 측면에서, 혼합물은 1:50 내지 50:1 범위, 대안적으로 1:25 내지 25:1 범위이다. 보다 바람직한 측면에서, 혼합물은 1:2 내지 2:1 범위, 대안적으로 1:1 비율이다.
본 특허 출원의 목적인 부분입체이성질체 및 이들의 혼합물은, 예를 들어 하기 반응식에 따라 제조될 수 있다:
반응식 1: 식 (VIII)의 화합물 (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 및 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-380)에 대한 제조 과정.
Figure pct00007
반응식 2: 식 (IX)의 화합물- (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 및 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-241) 에 대한 제조 과정.
Figure pct00008
본 특허 출원은 또한 식 (I)의 화합물의 언급된 입체이성질체로서 이들 각각의 개별적인 형태 및/또는 임의의 비율로 과량의 부분입체이성질체를 갖는 라세미 혼합물 또는 비-라세미 혼합물 형태인 입체이성질체를 포함하는 약학적 조성물 및 상기 언급된 입체이성질체를 포함하는 약물을 포함한다. 상기 조성물은 희석제, 부형제 또는 약학적으로 허용되는 담체를 사용하여 제약 기술 분야에 공지된 방법에 따라 제조될 수 있다.
본 특허 출원의 또 다른 측면은 5형(PDE-5)의 포스포디에스테라제 효소 억제제 및 항종양제와 같은, 식 (I)의의 화합물 및 이의 입체이성질체의 용도; 및 양성 전립선 비대증 및 암, 보다 구체적으로 전립선암의 치료에서의, 언급된 입체이성질체의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 측면에서, 본 특허 출원은, 임의 비율의 부분입체이성체들인, 식 (VIII)에 의해 정의되고 (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 및 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-380)로 명명된 혼합물의, 항종양제로서 및 포유동물에서 PDE-5 억제제로 치료할 수 있는 장애의 치료를 위한 용도에 관한 것이다. 특히 전립선암 및 양성 전립선 비대증의 치료에 사용하기 위한 것이다.
본 특허 출원의 또 다른 바람직한 측면은, 식 (IV), (V), (VI) 및 (VII)로 정의되고 각각 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-236A); (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-236B); (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-239A); 및 (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-indo1e-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-239B)로 명명된 단리된 입체이성질체의, 항종양제로서 및 포유동물에서 PDE-5 억제제로 치료할 수 있는 장애의 치료를 위한 용도에 관한 것이다. 특히 전립선암 및 양성 전립선 비대증의 치료에 사용하기 위한 것이다.
본 특허 출원의 추가적인 목적은, 본원에 기재된 식 (I)의 화합물 및 이의 입체이성질체, 염, 에스테르, 전구약물의, 항증식성, 항종양 및 포스포디에스테라제 효소 억제제, 보다 구체적으로는 5형 포스포디에스테라제 효소(PDE-5) 억제제 약물의 제조를 위한 용도; 및 염증성 질환 및 장애, 심혈관, 폐, 남성의 발기부전, 양성 전립선 비대증 및 암, 보다 구체적으로 전립선암과 같은 질환 및 장애의 치료를 위한 약제의 제조에서의 언급된 입체이성질체의 용도에 관한 것이다.
본 특허 출원은 식 (I)의의 입체이성질체, 이의 염, 수화물, 전구약물 및 약학적으로 허용되는 에스테르를 사용하여 양성 전립선 비대증 및 암, 보다 구체적으로 전립선암과 같은 암을 치료하는 방법을 추가로 기재하고; 상기 입체이성질체는 이들 이들 각각의 개별 형태 또는 임의의 비율로 과량의 부분입체이성질체를 갖는 라세미 혼합물 또는 비-라세미 혼합물로 존재한다.
상기 기재된 용도 및 치료 방법은 치료학적 유효량의 화합물 및 이들의 각각의 염, 용매화물, 전구약물, 입체이성질체 및 이들의 라세미 혼합물의 공급을 포함한다.
본 특허 출원의 다른 목적은, 상기 반응식 및 하기 실시예에 기재된 바와 같은, 식 (I)의 화합물 3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-(1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온의 입체이성질체의 제조 방법이다.
실시예:
본 특허 명세서에 상세하게 기술된 실시예 및 구체예는 본 특허 출원을 예시하지만, 그 범위를 제한하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
실시예 1: 식 (VIII)의 화합물의 제조
기계적 교반기, 투입 깔때기 및 CaCl2를 함유하는 건조 튜브를 갖춘 500mL 벌룬(balloon)에, 중간체 화합물인 식 (A)의 (E)-메틸 2-((벤조[d][1,3]디옥솔-5-일 메틸렌) 아민)-3-(1H-인돌-3-일)-3-옥소프로파노에이트 (5,0 g, 13,7 mmol), 건조 THF (90mL) 및 건조 피리딘 (5,5mL)을 첨가하고 30분 동안 교반하였다. 이 현탁액에 건조 THF (23mL) 중의 클로로아세틸 클로라이드 (1.5mL, 19.2mmol)의 용액을 약 3시간 동안 천천히 첨가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 반응시켰다. 상기 기간 종료시, (R)-2-아미노프로판-1-올 (23.7g, 315.1mmol)을 매질에 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 상기 시간 종료시, 100mL 에탄올을 첨가하였다. 시스템을 진공 증류하고 생성물이 침전될 때까지 과량의 용매를 제거하였다. 벌룬을 실온으로 냉각한 후 0 내지 5℃로 냉각하고, 이 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 고체를 100mL 벌룬에 넣고 30mL의 에탄올을 첨가하였다; 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 이 기간이 끝나면, 고체를 여과하고 진공 건조하여, 41% 수율에 해당하는 화합물 (VI) 및 (VII)의 혼합물로 구성된 식 (VIII)의 화합물을 형성하였다.
이 방법으로 얻은 화합물은 IUPAC 명명법에 따라, 화학구조 (VIII)로 표시되는, (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 및 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-380)으로 나타내며:
Figure pct00009
다음과 같은 특성을 나타낸다: 황색 고체; 융점 256-262 ℃; NMR 1 H (500 MHz, DMSO-d6) : δ 11.84 (ls, 2H) , 8.97-8.95 (m, 2H) , 7.87-7.85 (m, 2H) , 7.47-7.46 (m, 2H) , 7.17-7.09 (m, 8H) , 7.08-7.04 (m, 2H),6.04 (s, 4H) , 4.84 (t, J= 5.8 Hz, 1H) , 4.80 (t, J= 5.8 Hz, 1H) , 4.67-4.60 (m, 2H) , 4.14-4.03 (m, 4H) , 3.57-3.42 (m, 4H) , 1.11 (d, J= 7.0 Hz, 3H) , 1.08 (d, J= 7.0 Hz, 3H);NMR 13C (125 MHz, DMSO-d6) : δ 159.0, 158.7, 157.0, 156.7, 148,3, 147.6, 147.57, 147,55, 135.77, 135.76, 131.1 131.0, 130.9, 130.8, 125.2, 122.1, 121.3, 120.50, 120.49, 120.44, 120.36, 112.1, 108.3, 108.2, 106.5, 106.4, 105.2, 105.1, 102.3, 101.4, 90.3, 90.1, 61.8, 61.4, 49.4, 49.3,46.3,46.1, 13.2, 13.1. C24H21N3O6에 대해 계산된 HRMS (EI) m/z: [447.1430] + 실측치: 448.1542 [M+H] +.
하기 화합물을 중간 반응으로 사용하였다: 화학구조 (A)로 표시되는, (E)-메틸 2-((벤조[d][1,3]디옥솔-5-일 메틸렌) 아민)-3-(1H-인돌-3-일)-3-옥소프로파노에이트; 하기 예시된 및 반응식 1에 예시된 바와 같은, 화합물 ((R)-2-아미노프로판-1-올 (3), 및 2-클로로아세틸 클로라이드 (1).
Figure pct00010
실시예 2: 식 (IX)의 화합물의 제조
기계적 교반기, 투입 깔때기 및 CaCl2를 함유하는 건조 튜브를 갖춘 500mL 벌룬(balloon)에, 중간체 화합물인 식 (A)의 (E)-메틸 2-((벤조[d][1,3]디옥솔-5-일 메틸렌) 아민)-3-(1H-인돌-3-일)-3-옥소프로파노에이트 (5.0g, 13.7mmol), 건조 THF (90mL) 및 건조 피리딘 (5.5mL)을 첨가하고 30분 동안 교반하였다. 이 현탁액에 건조 THF (23mL) 중의 클로로아세틸 클로라이드 (1.5mL, 19.2mmol)의 용액을 약 3시간 동안 천천히 첨가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 반응시켰다. 상기 기간 종료시, (R)-2-아미노프로판-1-올 (23.7g, 315.1mmol)을 매질에 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 상기 시간 종료시, 100mL 에탄올을 첨가하였다. 시스템을 진공 증류하고 생성물이 침전될 때까지 과량의 용매를 제거하였다. 벌룬을 실온으로 냉각한 후 0 내지 5℃로 냉각하고, 이 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 고체를 100mL 벌룬에 넣고 30mL의 에탄올을 첨가하였다; 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 이 기간이 끝나면, 고체를 여과하고 진공 건조하여, 40% 수율에 해당하는 화합물 (IV) 및 (V)의 혼합물로 구성된 식 (IX)의 화합물을 형성하였다.
이 방법에 의해 얻은 화합물은, IUPAC 명명법에 따라, 화학구조 (IX)로 표시되는, (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 및 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-241) 으로 나타내며:
Figure pct00011
다음과 같은 특성을 나타낸다: 황색 고체; 융점 256-261 ℃; NMR 1 H (500 MHz, DMSO-d6) : δ 11.84 (is, 2H) , 8.97-8.95 (m, 2H) , 7.88-7.85 (m, 2H) , 7.47-7.46 (m, 2H) , 7.17-7.05 (m, 10H) , 6.98-6.96 (m, 2H) , 6.04 (s, 4H) , 4.84 (t, J= 5.5 Hz, 1H) , 4.80 (t, J= 5.5 Hz, 1H) , 4.67-4.60 (m, 2H) , 4.14-4.03 (m, 4H) , 3.57-3.42 (m, 4H) , 1.11 (d, J= 7.0 Hz, 3H) , 1.08 (d, J= 7.0 Hz, 3H); NMR 13 C (125 MHz, DMSO-d6): δ 159.0, 158.7, 157.0, 156.8, 148,3, 147.6, 147.57, 147,55, 135.8, 135.78, 135.77, 131.1 131.0, 130.9, 130.8, 125.2, 122.1, 121.3, 120.5, 120.49, 120.44, 120.36, 112.1, 108.3, 108.2, 106.5, 106.4, 105.2, 105.1, 102.3, 101.4, 90.3, 90.1, 61.8, 61.4, 49.4, 49.3,46.3,46.1, 13.2, 13.1. C24H21N3O6 에 대해 계산된 HRMS (EI) m/z: [447.1430] + 실측치: 448.1541 [M+H] +.
하기 화합물을 중간 반응으로 사용하였다: 화학구조 (A)로 표시되는, (E)-메틸 2-((벤조[d][1,3]디옥솔-5-일 메틸렌) 아민)-3-(1H-인돌-3-일)-3-옥소프로파노에이트; 및 하기 예시된 및 반응식 2에 예시된 바와 같은, 화합물 (S)-2-아미노프로판-1-올 (4) 및 클로로아세틸 클로라이드 (1).
Figure pct00012
실시예 3: 식 (IV) 및 (V)의 부분입체이성질체의 정제 방법
1,0 L 벌룬에, 4.5 g의 식 (IX)의 화합물 (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 및 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-indo1e-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-241), 및 THF/H2O (8:2)의 혼합물 75mL을 첨가하였다. 현탁액을 가용화될 때까지 50℃에서 가열하였다. 가용화 후, 상기 배지에 메탄올 560mL를 첨가하고 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 형성된 고체를 진공 여과하고, 50mL의 메탄올로 세척하고, 100℃에서 4시간 동안 가마 건조시켰다. 이 단계는 하기 특성을 나타내는 화합물 BL-236A 또는 BL-236B 중 하나의 분리를 생성하였다: 황색 고체, 융점: 227-231℃; NMR 1 H (300 MHz , DMS0-d6) : δ 11.89 (ls, 1H) , 8.97 (d, J= 1.8 Hz, 1H) , 7.86 (d, J= 7.9 Hz, 1H) , 7.46 (d, J= 7.9 Hz, 1H) , 7.18-7.03 (m, 5H) , 6.98 (dd, J= 7.4 Hz, J= 1.0 Hz, 1H) , 6.04 (s, 2H) , 4.88 (t, J= 5.5 Hz, 1H) , 4.69-4.58 (m, 1H) , 4.07 (dd, J= 22.5 Hz, J= 17.5 Hz, 2H) , 3.58-3.41 (m, 2H) , 1.07 (d, J= 6.9 Hz, 3H); NMR 13 C (75 MHz, DMSO-d6) : δ 159.9, 157.1, 148.4, 147.7, 147.6, 135.8, 131.2, 130.9, 125.3, 122.2, 121.4, 120.6, 120.5, 112.3, 108.4, 106.6, 105.2, 102.5, 101.5, 90.2, 61.4, 49.4, 46.1, 13.2; C24H21N3O6 에 대해 계산된 HRMS (EI) m/ z: [447.1430]+, 실측치: 448.1321 [M+H]+. 화합물의 화학 구조는 핵자기 공명 분석, 고해상도 질량 및 X-선 결정학에 의해 분석하였다.
이전 여과의 모액을 반응 벌룬으로 되돌리고 200mL의 H2O를 천천히 첨가하여 반응 매질의 탁도를 유도하여 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 현탁액을 진공 여과하고 50mL 에탄올로 세척하였다. 얻어진 고체를 50mL의 에탄올에 재현탁하고 한 번 더 여과한 다음, 100℃에서 4시간 동안 가마 건조하여 다음과 같은 특성을 나타내는 BL-236의 다른 화합물을 분리하였다: 황색 고체, 융점: 221-225℃; NMR 1 H (300 MHz , DMSO-d6) : δ 11.90 (1s, 1H) , 8.96 (s, 1H) , 7.85 (d, J= 7.9 Hz, 1H) , 7.46 (d, J= 7.9 Hz, 1H) , 7.18-7.03 (m, 5H) , 6.97 (d, J= 7.9 Hz, 1H) , 6.04 (s, 2H) , 4.83 (t, J= 5.7 Hz, 1H) , 4.67-4.60 (m, 1H) , 4.09 (dd, J= 25.7 Hz, J= 17.6 Hz, 2H) , 3.56-3.41 (m, 2H) , 1.10 (d, J= 6.9 Hz, 3H); NMR 13 C (75 MHz, DMSO-d6) : δ 158.7, 156.8, 148.4, 147.6 (2C) , 135.8, 131.1, 130.9, 125.3, 122.2, 121.4, 120.6, 120.5, 112.2, 108.3, 106.6, 105.2, 102.4, 101.5, 90.4, 61.8, 49.4, 46.3, 13.3; C24H21N3O6 에 대해 계산된 HRMS (EI) m/ z: [447.1430]+, 실측치: 448.1530 [M+H]+. 화합물의 화학 구조는 핵자기 공명 분석, 고해상도 질량 및 X-선 결정학에 의해 분석하였다.
이 과정을 통해 우리는 각각 구조 (IV) 및 (V)로 표시되는, 화합물 (S) 3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-236A) 및 (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)―7― ((57)― 1― 하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-236B) 을 분리하였다.
Figure pct00013
실시예 4: 식 (VI) 및 VII의 부분입체이성질체의 정제 방법
1.0 L 벌룬에, 4.5 g의 식 (VIII)의 화합물 (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 및 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-380), 및 THF/H2O (8:2)의 혼합물 75mL을 첨가하였다. 현탁액을 가용화될 때까지 50℃에서 가열하였다. 가용화 후, 상기 배지에 메탄올 560mL를 첨가하고 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 형성된 고체를 진공 여과하고, 50mL의 메탄올로 세척하고, 100℃에서 4시간 동안 가마 건조시켰다. 이 단계는 하기 특성을 나타내는 화합물 BL-239A 또는 BL-239B 중 하나의 분리를 생성하였다: 황색 고체, 융점: 233- 236 ° C ; NMR 1 H (300 MHz , DMSO-d6) : δ 11.89 (ls, 1H) , 8.97 (d, J= 2.4 Hz, 1H) , 7.86 (d, J= 7.9 Hz, 1H) , 7.46 (d, J= 8.0 Hz, 1H) , 7.18-7.04 (m, 5H) , 6.98 (d, J= 8.3 Hz, 1H) , 6.04 (s, 2H) , 4.88 (t, J= 5.7 Hz, 1H) , 4.67-4.60 (m, 1H) , 4.07 (dd, J= 22.5 Hz, J= 17.5 Hz, 2H) , 3.58-3.41 (m, 2H) , 1.06 (d, J= 6.9 Hz, 3H); NMR 13 C (75 MHz, DMSO-d6) : δ 159.1, 157.1, 148.4, 147.7, 147.6, 135.8, 131.2, 130.9, 125.3, 122.2, 121.4, 120.6, 120.5, 112.3, 108.4, 106.6, 105.2, 102.4, 101.5, 90.2, 61.4, 49.4, 46.1, 13.2; C24H21N3O6 에 대해 계산된 HRMS (EI) m/ z: [447.1430]+, 실측치: 448.1540 [M+H]+. 화합물의 화학 구조는 핵자기 공명 분석, 고해상도 질량 및 X-선 결정학에 의해 분석하였다.
이전 여과의 모액을 반응 벌룬으로 되돌리고 200mL의 H2O를 천천히 첨가하여 반응 매질의 탁도를 유도하여 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 현탁액을 진공 여과하고 50mL 에탄올로 세척하였다. 얻어진 고체를 50mL의 에탄올에 재현탁하고 한 번 더 여과한 다음, 100℃에서 4시간 동안 가마 건조하여 관심 생성물(또 다른 BL-239 분자)을 생성하였다: 황색 고체, 융점: 223-225 ℃; NMR 1H (300 MHz , DMSO-d6) : δ 11.90 (ls, 1H) , 8.96 (s, 1H) , 7.85 (d, J= 8.2 Hz, 1H) , 7.47 (d, J= 8.2 Hz, 1H) , 7.18- 7.03 (m, 5H) , 6.98 (d, J= 8.0 Hz, 1H) , 6.04 (s, 2H) , 4.84 (t, J= 5.6 Hz, 1H) , 4.69-4.58 (m, 1H) , 4.09 (dd, J= 25.7 Hz, J= 17.6 Hz, 2H) , 3.55-3.41 (m, 2H) , 1.10 (d, J= 6.7 Hz, 3H); NMR 13 C (75 MHz, DMSO-d6) : δ 158.7, 156.8, 148.4, 147.6 (2C), 135.8, 131.1, 130.9, 125.3, 122.2, 121.4, 120.6, 120.5, 112.2, 108.3, 106.6, 105.2, 102.4, 101.5, 90.4, 61.8, 49.4, 46.3, 13.3; C24H21N3O6 에 대해 계산된 HRMS (EI) m/ z: [447.1430]+, 실측치: 448.1529, [M+H]+. 화합물의 화학 구조는 핵자기 공명 분석, 고해상도 질량 및 X-선 결정학에 의해 분석하였다.
이 과정을 통해 우리는 각각 구조 (VI) 및 (VII)로 표시되는, (S)-3-(벤조[d][l,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-l-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-239A) 및 (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-239B) 을 분리하였다.
Figure pct00014
실시예 5: 인간 포스포디에스테라제 효소 5의 활성 하에 화합물의 억제 잠재력의 시험관내 평가
화합물의 평가는 BPS Bioscience 효소 분석 키트(카탈로그 60350)를 사용하여 연구하였다. PDE5A1 분석 키트는 형광 편광을 사용하여 PDE5A1 억제제를 식별하도록 설계되었다. 이 분석은 PDE5A1 효소에 의해 생성된 형광 뉴클레오티드 모노포스페이트의 결합제에 대한 결합을 기반으로 한다.
이 방법론에서 PDE5A1 반응에는 마이크로타이터 플레이트에서 두 가지 간단한 단계만 필요하다. 먼저, 형광 표지된 cGMP를 PDE5A1과 함께 1시간 동안 인큐베이션한다. 둘째, 결합제를 반응 혼합물에 첨가하여, 형광 편광 측정을 위해 장착된 형광 판독기를 사용하여 측정할 수 있는 형광 편광의 변화를 생성한다.
분석을 위해 보관 시약 FAM-사이클릭-3',5'-GMP (20μM)를 PDE 분석 완충액으로 희석하여 200μM 농도의 용액을 얻었다; PDE5A1 효소를 해동하고 PDE 완충액으로 희석하여 10 pg/mL의 PDE5A1 용액을 얻었다.
분석 화합물을 1000 μM 농도의 DMSO 100%(v/v)로 희석한 다음, 염화나트륨 0.9% 용액에 희석하여 분석에 대한 관심 농도 곡선을 얻었다. 화합물은 10 nM, 30 nM, 50 nM, 100 nM, 300 nM, 500 nM, 1 μM, 3 μM, 5 μM (DMSO 10% v/v)의 농도로 희석하였다.
본 연구는 (i) 기질 대조군; (ii) 양성 대조군(KIT); (iii) 여러 농도의 샘플; (iv) 타다라필(비교 대조군) 그룹으로 구성되었다. 각 매개변수(그룹)에는 3중 레이블이 지정된다.
분석 절차:
· 4개 그룹의 경우 각 마이크로플레이트 웰에 25mL의 FAM-사이클릭-3' 시약, 5'-GMP(200μM)를 첨가하였다.
· 기질 대조군에는 각 웰에 5mL의 비히클 (DMSO 10% v/v) 및 20mL PDE 완충액을 첨가하였다.
· 양성 대조군에는 각 웰에 5mL의 비히클 (DMSO 10% v/v) 을 첨가하였다.
· 타다라필 그룹: 관심 농도의 용액 5mL를 첨가하였다.
· 시험군에 검액(테스트 화합물) 5mL를 첨가하였다.
관찰: 테스트된 매개변수들은 삼중(triplicate) 이었다.
반응을 시작하기 위해, PDE5A1 효소 (전술한대로 희석함) 20mL를 양성 대조군 및 샘플(테스트 및 타다라필)로 지정된 마이크로플레이트 웰에 첨가하고, 25℃의 온도에서 1시간 동안 마이크로플레이트를 배양하였다.
인큐베이션 기간 후, 모든 웰에 100mL의 결합제 용액을 첨가하여 반응을 중단하고, 마이크로플레이트를 실온에서 가벼운 교반 하에 30분 동안 인큐베이션하였다. 마이크로플레이트의 판독은 편광 형광(475-495 nm - 여기 및 518-538 nm - 방출 감지) 500 나노초 통합 시간으로 수행하였다.
화합물 BL-380의 경우 10 nM, 30 nM, 50 nM, 100 nM, 300 nM, 500 nM, 1 μM (1000 nM), 3 μM (3000 nM) 및 5 μM (5000 nM) 농도로 준비하였다. 얻어진 결과에 기초하여(표 1), 화합물 BL-380이 용량 의존적으로 PDE5를 억제할 수 있음을 관찰할 수 있었지만, 이러한 억제는 300nM 농도의 BL-380 에서만 관찰되었다.
화합물 BL-380에 의한 PDE5 효소의 억제율(%)
화합물 억제율(%)
(PDE5A1)
BL-380 10 nM 0
BL-380 30 nM 0
BL-380 50 nM 0
BL-380 100 nM 0
BL-380 300 nM 15 ± 3
BL-380 500 nM 25 ± 3
BL-380 1000 nM 55 ± 4
BL-380 3000 nM 65 ± 2
BL-380 5000 nM 78 ± 1
타다라필 5000 nM 96 ± 2
화합물 BL-241의 경우, 500nM, 1μM (1000nM) 및 3μM (3000nM) 농도로 준비하였다. 얻어진 결과(표 2)에 기초하여, 화합물 BL-241 또한 용량 의존적 방식으로 PDE5를 억제할 수 있음을 관찰할 수 있었다.
화합물 BL-241에 의한 PDE5 효소의 억제 억제율(%)
화합물 억제율(%)
(PDE5A1)
BL-241 500 nM 57%
BL-241 1000 nM 71%
BL-241 3000 nM 88%
실시예 6: 전립선암, 위암 및 방광암의 인간 세포 계통의 배양물에서 화합물의 항증식 효과 평가
분석을 수행하기 위해, 화합물을 1000μM 농도의 DMSO 100% (v/v)에 희석하고 이어서 염화나트륨 용액 0.9%로 희석하여 본 분석에 사용하기 위한 관심 저장 용액을 얻었다. 관심 최종 농도는 세포 배양 배지에서 직접 희석된다.
분석을 위해 다음 종양 세포 계통을 사용되었다: PC3-인간 전립선암 세포; LNCAP-인간 전립선암 세포; DU145-인간 전립선암 세포; MNK45-인간 위암 및 RT4-인간 방광암 세포.
종양 세포 계통은 리우데자네이루의 세포 은행(계통 기원 장소)에서 확립한 표준 절차에 따라 배양물에서 유지되었다. 절차:
· 분석을 위해, 종양 세포는 웰당 10.000개 세포의 농도로 시딩하고(200.mL 의 반응의 최종 부피), 플레이트는 세포가 웰의 벽에 부착되도록 8시간 동안 인큐베이션하였다. 이 기간이 지난 후, 플레이트는 다음 그룹으로 나누었다:
(a) 시험군: 20mL의 샘플을 관심 농도로 첨가하였다(테스트 화합물);
(b) 양성 대조군: 20mL의 배양 배지를 첨가하였다(100% 세포 증식);
(c) 음성 대조군: 200mL의 배양 배지와 20mL의 사용된 비히클을 첨가하여 화합물을 희석하였다(세포 없음 - 증식 없음).
(d) 대조군: 화합물을 희석하기 위해, 사용된 비히클 20mL를 첨가하였다. 이 그룹은 사용된 비히클이 세포 증식을 방해하는지 여부를 평가하는 데 중요하다.
관찰: 샘플(테스트 화합물) 및 대조군의 농도로 처리를 3회 수행하였다.
· 플레이트를 37℃의 CO2 가마에서 72시간 동안 배양하였다.
· 배양 기간 후, CYQuant 키트의 DNA 마커 함유 용액 100mL/웰을 첨가하고 플레이트를 37℃의 CO2 배양기에서 60분 동안 배양하였다. 형광 강도는 485 nm 여기 및 530 nm 방출 검출을 갖춘 형광 마이크로플레이트 판독기를 사용하여 결정하였다. 얻어진 결과는 양성 대조군(100% 증식)에 대하여 정규화하였다.
화합물의 경우 100nM, 1μM, 3μM, 5μM, 10μM 및 30Μm (DMSO 10% v/v) 농도의 보관 용액을 준비하였. 테스트의 최종 농도는 10nM, 100nM, 300nM, 500nM, 1000nM 및 3000nM 였다 (DMSO 1% v/v 에서).
얻어진 결과는 BL-380 화합물이 테스트된 3가지 전립선암 종양 계통(PC3, LNCAP 및 DU145) 및 방광암 종양 계통(RT4)에 대해 항증식 효과를 나타냈다는 것을 입증하며, 이는 표 3에서 확인할 수 있다. 그리고 BL-241 화합물은 테스트된 3가지 전립선암 종양 계통(PC3, LNCAP 및 DU145)과 방광암 종양 계통(RT4)에 대해 항증식 효과를 나타냈으며, 이는 표 4에서 확인할 수 있다.
세포 증식 억제율(%) - BL-380 화합물.
BL-380 화합물의 농도 세포 증식 억제율(%) (세포내 DNA)
PC-3 (평균 ± E.P.M.) LNCAP (평균 + E.P.M.) DU145 (평균 + E.P.M.) MNK45 (평균 ± E.P.M.) RT4 (평균 ± E.P.M.)
10 nM 39 ± 6 26 ± 10 - - -
100 nM 25 ± 5 12 ± 3 12 ± 4 7 ± 2 8 ± 6
300 nM 28 ± 2 29 ± 6 10 ± 5 0 5 ± 5
500 nM 48 ± 6 27 ± 2 12 ± 2 0 3 ± 5
1000 nM 40 ± 3 37 ± 2 10 ± 3 0 3 ± 1
3000 nM 54 ± 4 48 ± 6 31 ± 5 16 ± 5 58 ± 4
세포 증식 억제율(%) - 화합물 BL-241
BL-241 화합물의 농도 세포 증식 억제율(%) (세포내 DNA)
PC-3(평균 ± E.P.M.) LNCAP
(평균 ± E.P.M.) 		DU145(평균 ± E.P.M.) MNK45(평균 ± E.P.M.) RT4
(평균 ± E.P.M.)
10 nM 27 ± 11 25 ± 2 - - -
100 nM 36 ± 7 37 ± 3 33 ± 8 25 ± 1 28 ± 6
300 nM 42 ± 6 38 ± 4 17 ± 3 10 ± 2 5 ± 2
500 nM 46 ± 1 44 ± 2 18 ± 2 2 ± 1 4 ± 2
1000 nM 33 ± 3 34 ± 6 22 ± 2 4 ± 1 11 ± 8
3000 nM - - 43 ± 5 20 ± 3 57 ± 4

Claims (34)

  1. 식 (I)의 3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-(1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온인 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 이의 입체이성질체, 염, 용매화물, 수화물, 전구약물 및 약학적으로 허용되는 에스테르:
    Figure pct00015
  2. 제1항에 있어서,
    입체이성질체가 이들 각각의 개별 형태 및/또는 임의의 비율로 과량의 부분입체이성질체를 갖는 라세미 혼합물 또는 비-라세미 혼합물 형태로 존재하는 것을 특징으로 하는, 화합물.
  3. 제1항에 있어서,
    식 (II)로 표시되는 3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-236)인 것을 특징으로 하는, 화합물:
    Figure pct00016
  4. 제1항에 있어서,
    식 (III)으로 표시되는 3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-239) 인 것을 특징으로 하는, 화합물:
    Figure pct00017
  5. 제3항에 있어서,
    식 (IV)로 표시되는 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-236A) 인 것을 특징으로 하는, 화합물:
    Figure pct00018
  6. 제3항에 있어서,
    식 (V)로 표시되는 R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-236B) 인 것을 특징으로 하는, 화합물:
    Figure pct00019
  7. 제4항에 있어서,
    식 (VI)로 표시되는 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-239A) 인 것을 특징으로 하는, 화합물:
    Figure pct00020
  8. 제4항에 있어서,
    식 (VII)로 표시되는 (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-239B)인 것을 특징으로 하는, 화합물:
    Figure pct00021
  9. 제2항에 있어서,
    3-(벤조[d][l,3]디옥솔-5-일)-7-(1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온의 부분입체이성질체의 혼합물인 것을 특징으로 하는, 화합물.
  10. 제9항에 있어서,
    식 (VIII)로 표시되는 (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 및 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-indo 1-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-380) 인 것을 특징으로 하는, 화합물:
    Figure pct00022
  11. 제9항에 있어서,
    식 (IX)로 표시되는 (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 및 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-indo1e-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-241) 인 것을 특징으로 하는, 화합물:
    Figure pct00023
  12. 제2항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 입체이성질체의 혼합물로서,
    라세미 혼합물 또는 비-라세미 혼합물인 것을 특징으로 하는 혼합물.
  13. 제12항에 있어서,
    상기 혼합물이 임의의 비율로 과량의 부분입체이성질체를 갖는 비-라세미체임을 특징으로 하는, 입체이성질체의 혼합물.
  14. 제13항에 있어서,
    부분입체이성질체 비율이 1:99 내지 99:1 범위인 것을 특징으로 하는, 입체이성질체의 혼합물.
  15. 제13항에 있어서,
    부분입체이성질체 비율이 1:2 내지 2:1 범위인 것을 특징으로 하는, 입체이성질체의 혼합물.
  16. 제13항에 있어서,
    부분입체이성질체 비율이 바람직하게는 1:1인 것을 특징으로 하는, 입체이성질체의 혼합물.
  17. 제12항에 있어서,
    식 (VIII)로 표시되는 ((R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-indo1e-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 및 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-380)의 혼합물임을 특징으로 하는, 입체이성질체의 혼합물로서:
    Figure pct00024

    상기 부분상기 입체이성질체 비율은 1:99 내지 99:1 범위인, 입체이성질체의 혼합물.
  18. 제12항에 있어서,
    식 (IX)로 표시되는 (R)-3-(벤조 [d] [l,3]디옥솔- 5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3 , 4-a]피라진-5,8-디온 및 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-241) 의 혼합물임을 특징으로 하는, 입체이성질체의 혼합물로서:
    Figure pct00025

    상기 부분입체이성질체 비율은 1:99 내지 99:1 범위인, 입체이성질체의 혼합물.
  19. 치료 유효량의 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 기재된 하나 이상의 화합물 또는 제12항 내지 제18항에 정의된 것과 동일한 혼합물, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 것을 특징으로 하는, 약학 조성물.
  20. 제19항에 있어서,
    활성성분으로서 하기로 구성된 군에서 선택되는 하나 이상의 입체이성질체, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함함을 특징으로 하는, 약학 조성물:
    (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-236A);
    (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-236B);
    (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-239A);
    (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-239B); 및
    이들의 약학적으로 허용되는 염, 용매화물, 수화물, 전구약물 및 에스테르;
    상기 입체이성질체는 이들 각각의 개별 형태 및/또는 임의의 비율로 과량의 부분입체이성질체를 갖는 라세미 혼합물 또는 비-라세미 혼합물의 형태임.
  21. 제19항에 있어서,
    활성성분으로서 하기로 구성된 군에서 선택되는 하나 이상의 입체이성질체 혼합물, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함함을 특징으로 하는, 약학 조성물:
    (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진- 5,8-디온 및 (S)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((R)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-380); 및
    (R)-3-(벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 및 (S)-3-(벤조[d][1, 3]디옥솔-5-일)-7-((S)-1-하이드록시프로판-2-일)-1-(1H-인돌-3-일)-6,7-디하이드로-3H-옥사졸[3,4-a]피라진-5,8-디온 (BL-241);
    상기 부분입체이성질체는 임의의 비율일 수 있음.
  22. 제19항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서,
    경구, 국소, 주사, 비강 및 직장 투여용임을 특징으로 하는 약학 조성물.
  23. 포스포디에스테라제 효소의 억제제로서 및 항종양제로서 사용되는 것을 특징으로 하는, 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 화합물 또는 제12항 내지 제18항에 정의된 이들의 혼합물을 포함하는 약학 조성물.
  24. 제19항에 있어서,
    양성 전립선 비대증, 암, 조직 이완으로 치료할 수 있는 장애 및/또는 병태, 및 포스포디에스테라제 억제제로 치료할 수 있는 장애의 치료에 사용되는 것을 특징으로 하는, 약학 조성물.
  25. 제24항에 있어서,
    전립선암 치료용임을 특징으로 하는, 약학 조성물.
  26. 제24항에 있어서,
    양성 전립선 비대증 및 전립선암의 치료용임을 특징으로 하는, 약학 조성물.
  27. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 화합물 또는 제12항 내지 제18항에 정의된 혼합물의 용도로서,
    포스포디에스테라제 효소 억제용 약학 조성물의 제조를 위한 것임을 특징으로 하는, 용도.
  28. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 화합물, 또는 제12항 내지 제18항에서 정의된 혼합물의 용도로서,
    항종양 약학 조성물의 제조를 위한 것임을 특징으로 하는, 용도.
  29. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 화합물, 또는 제12항 내지 제18항에서 정의된 혼합물의 용도로서,
    양성 전립선 비대증, 암, 조직 이완으로 치료할 수 있는 장애 및/또는 병태, 및 포스포디에스테라제 억제제로 치료할 수 있는 장애의 치료용 약학 조성물의 제조를 위한 것임을 특징으로 하는, 용도.
  30. 제19항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서,
    양성 전립선 비대증 및 전립선암의 치료를 위한 것을 특징으로 하는 약학 조성물의 용도.
  31. 제28항에 있어서,
    전립선암 치료용임을 특징으로 하는, 용도.
  32. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 화합물 또는 제12항 내지 제18항에서 정의된 혼합물 중 하나 이상의 유효량을 투여하는 것을 특징으로 하는,
    포스포디에스테라제 활성 및 암과 관련된 기능장애의 치료 또는 예방 방법.
  33. 제31항에 있어서,
    양성 전립선 비대증 및/또는 전립선암의 치료 및/또는 예방을 위한 것임을 특징으로 하는, 방법.
  34. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 정의된 화합물 또는 제12항 내지 제18항에서 정의된 혼합물을 유효량으로 투여하는 것을 특징으로 하는,
    양성 전립선 비대증 및/또는 전립선암의 치료 또는 예방 방법.
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Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3635178A (en) 1970-04-17 1972-01-18 Home Curtain Corp Machine for making shirred curtains
US5250534A (en) 1990-06-20 1993-10-05 Pfizer Inc. Pyrazolopyrimidinone antianginal agents
GB9401090D0 (en) 1994-01-21 1994-03-16 Glaxo Lab Sa Chemical compounds
WO1999011279A1 (en) 1997-09-04 1999-03-11 Rexall Sundown, Inc. Composition and method for the treatment of benign prostatic hyperplasia and prostatitis
UY33535A (es) 2010-08-13 2011-12-01 Biolab Sanus Farmaceutuca Limitada Derivados de 6,7-dihidro-3h-oxazolo[3,4]pirazin-5,8-diona
US8673914B2 (en) * 2011-03-28 2014-03-18 St. John's University Use of phosphodiesterase inhibitors for treating multidrug resistance
AR099523A1 (es) * 2014-02-24 2016-07-27 Biolab Sanus Farmacêutica Ltda Compuestos derivados de 6,7-dihidro-3h-oxazolo[3,4-a]pirazina-5,8-diona
AU2018397436A1 (en) * 2017-12-26 2020-08-13 Ftf Pharma Private Limited Liquid oral formulations for PDE V inhibitors

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