KR20150063474A - Ｐａｒｐ 억제제로서의 퀴나졸리논 유도체 - Google Patents

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Abstract

하기 식 I 의 화합물:

[식 중, R1, R2, R3, X1, X2 및 Y 는 청구항 1 에서 나타낸 의미를 가짐]
은 탄키라아제의 억제제이며, 그 중에서도, 암, 심혈관계 질환, 중추 신경계 손상 및 각종 형태의 염증과 같은 질환의 치료에 이용될 수 있다.

Description

ＰＡＲＰ 억제제로서의 퀴나졸리논 유도체 {QUINAZOLINONE DERIVATIVES AS PARP INHIBITORS}
본 발명은 유익한 특성을 갖는 신규 화합물, 특히 약제의 제조에 사용될 수 있는 화합물의 발견을 목적으로 한다.
본 발명은 탄키라아제 (Tankyrase) (TANK) 및 폴리(ADP-리보오스)폴리머라아제 PARP-1 의 활성을 억제하는 퀴나졸리논 유도체에 관한 것이다. 따라서, 본 발명의 화합물은 암, 다발성 경화증, 심혈관계 질환, 중추 신경계 손상 및 각종 형태의 염증과 같은 질환의 치료에 유용하다. 본 발명은 또한 상기 화합물의 제조 방법, 상기 화합물을 포함하는 약학적 조성물, 및 상기 화합물을 포함하는 약학적 조성물을 이용한 질환의 치료 방법을 제공한다.
핵 효소 (nuclear enzyme) 폴리(ADP-리보오스)폴리머라아제-1 (PARP-1) 은 PARP 효소 패밀리의 일원이다. 이러한 효소의 증가하고 있는 패밀리는 PARP, 예를 들어: PARP-1, PARP-2, PARP-3 및 Vault-PARP; 및 탄키라아제 (TANK), 예를 들어: TANK-1 및 TANK-2 로 이루어져 있다. PARP 는 또한 폴리(아데노신 5'-디포스포-리보오스)폴리머라아제 또는 PARS (폴리(ADP-리보오스)신타아제) 로서 언급된다.
TANK-1 은 유사분열 방추-관련 폴리(ADP-리보오스) 의 중합을 위해 요구되는 것으로 보인다. TANK-1 의 폴리(ADP-리보실)화 활성은 방추 양극성의 정확한 형성 및 유지에 중요할 수 있다. 나아가, TANK-1 의 PARP 활성은 후기 (anaphase) 전, 정상적인 텔로미어 분리를 위해 요구되는 것으로 나타난다. 탄키라아제 PARP 활성의 방해는 비정상 유사분열을 유도하고, 이는 아마도 방추 체크포인트 활성화에 의한 일시적인 세포 주기 정지를 야기하여, 세포 사멸에 이르게 한다. 따라서, 탄키라아제의 억제는 종양 세포 증식에 대해 세포독성 효과를 갖는 것으로 예상된다 (WO 2008/107478).
PARP 억제제는 [M. Rouleau et al. in Nature Reviews, Volume 10, 293-301 in clinical cancer studies (표 2, p. 298)] 에 기재되어 있다.
Horvath 및 Szabo (Drug News Perspect 20(3), April 2007, 171-181) 에 의한 보고서에 따르면, 대부분의 최근 연구는 PARP 억제제가 다양한 수준에서 DNA 복구를 방해하기 때문에, 기본적으로 암 세포 사멸을 증진시킨다는 것을 입증하였다. 보다 최근의 연구는 또한 PARP 억제제가 성장 인자 발현을 억제하거나, 또는 성장 인자-유도성 세포 증식 반응을 억제함으로써 혈관형성을 억제한다는 것을 입증하였다. 이러한 발견은 또한 생체내 PARP 억제제의 항암 효과의 방식에 영향을 미칠 수 있다.
또한, Tentori et al. (Eur. J. Cancer, 2007, 43 (14) 2124-2133) 에 의한 연구는, PARP 억제제가 VEGF 또는 태반의 성장 인자-유도성 이동을 없애고, 세포-기반 시스템에서 세관 (tubule) 유사 네트워크의 형성을 방지하고, 생체내 혈관형성을 손상시킨다는 것을 제시한다. 상기 연구는 또한 성장 인자-유도성 혈관형성이 PARP-1 녹-아웃 (knock-out) 마우스에서 결핍되어 있다는 것을 입증하였다. 상기 연구의 결과는 항-혈관형성을 위한 PARP 의 표적화에 대한 증거를 제공하며, 이는 암 치료에서 PARP 억제제의 사용에 대한 신규한 치료적 영향을 부가한다.
보존된 신호전달 경로에 있어서의 결함은 근본적으로 모든 암의 기원 및 거동에서 핵심적인 역할을 수행하는 것으로 널리 공지되어 있다 (E.A.Fearon, Cancer Cell, Vol. 16, Issue 5, 2009, 366-368). Wnt 경로는 항암 치료요법을 위한 표적이다. Wnt 경로의 핵심적인 특징은 β-카테닌 파괴 복합체에 의한 β-카테닌의 조절된 단백질분해 (분해 (degradation)) 이다. WTX, APC 또는 Axin 과 같은 단백질은 상기 분해 과정과 관련이 있다. β-카테닌의 적절한 분해는 다수의 암에서 관찰되었던 Wnt 경로의 부적절한 활성화를 방지하는데 중요하다. 탄키라아제는 Axin 의 활성을 억제하여, β-카테닌의 분해를 억제한다. 결과적으로, 탄키라아제 억제제는 β-카테닌의 분해를 증가시킨다. Nature 논문의 최근 보고서는 Wnt 신호전달을 조절하는 단백질에 대한 새로운 통찰을 제공할 뿐 아니라, 나아가 소분자를 통하여 β-카테닌 수준 및 국부화를 방지하는 것에 대한 접근법을 지지한다 (Huang et al., 2009; Nature, Vol 461, 614-620). 화합물 XAV939 는 DLD-1-암 세포의 성장을 억제한다. 상기 저자들은 XAV9393 가 AXIN1 및 AXIN2 단백질의 수준을 증가시킴으로써 β-카테닌의 Wnt-유도성 축적을 차단했다는 것을 발견하였다. 상기 저자에 의한 후속 연구에서는, XAV939 가 탄키라아제 1 및 2 (TNKS1 및 TNKS2) (둘 모두 폴리(ADP-리보오스)폴리머라아제 (PARP) 단백질 패밀리의 일원임) 의 억제를 통해 AXIN 수준을 조절한다는 것이 규명되었다 (S.J. Hsiao et al., Biochimie 90, 2008, 83-92).
본 발명에 따른 화합물 및 이의 염은 내성이 우수하면서, 매우 유용한 약리학적 특성을 갖는다는 것이 발견되었다.
본 발명은 특히 탄키라아제 1 및 2 를 억제하는 식 I 의 화합물, 상기 화합물을 포함하는 조성물, 및 TANK-유도성 질환 및 호소증상의 치료를 위한 이의 사용 방법에 관한 것이다.
식 I 의 화합물은 나아가 TANK 의 활성 또는 발현의 분리 및 조사를 위해 사용될 수 있다. 또한, 이는 비(非)조절된 또는 방해된 TANK 활성과 관련된 질환의 진단 방법에 사용하는데 특히 적합하다.
숙주 또는 환자는 임의의 포유류 종, 예를 들어 영장류 종, 특히 인간; 마우스, 랫트 및 햄스터를 포함하는 설치류; 토끼; 말, 암소, 개, 고양이 등일 수 있다. 동물 모델은 인간 질환의 치료를 위한 모델을 제공하는 실험적 연구를 위해 중요하다.
본 발명에 따른 화합물로의 치료에 대한 특정한 세포의 민감성은 시험관내 시험에 의해 측정될 수 있다. 통상적으로, 세포의 배양액은 항 IgM 과 같은 활성제가 표면 마커의 발현과 같은 세포 반응을 유도하기에 충분한 기간 동안, 통상적으로 약 1 시간 내지 1 주일 동안, 각종 농도로 본 발명에 따른 화합물과 조합된다. 시험관내 시험은 혈액 또는 생검 샘플로부터 배양된 세포를 사용하여 수행될 수 있다. 발현된 표면 마커의 양은 상기 마커를 인지하는 특이적 항체를 사용하여 유동 세포분석기에 의해 평가된다.
용량은 사용된 특정한 화합물, 특정한 질환, 환자의 상태 등에 따라 달라진다. 치료적 용량은 통상적으로 환자의 생존력을 유지시키면서, 표적 조직 내 바람직하지 않은 세포군을 상당히 감소시키는데 충분하다. 치료는 일반적으로 상당한 감소가 일어날 때까지, 예를 들어 세포 부담 (cell burden) 의 약 50% 이상이 감소될 때까지 지속되고, 본질적으로는 신체 내에서 더 이상 바람직하지 않은 세포가 검출되지 않을 때까지 지속될 수 있다.
선행 기술
E. Wahlberg et al., Nature Biotechnology (2012), 30(3), 283:
하기의 퀴나졸리논이 탄키라아제 억제제로서 기재되어 있다:
Figure pct00001
IC50(TNKS1) = 590 nM, IC50(TNKS2) = 600 nM; 세포 검정: 30 μM 에서 효과 없음.
WO 2010/106436 (Resverlogix Corp.):
하기의 화합물이 항-염증제로서 기재되어 있다:
Figure pct00002
(페이지 108 및 111).
(아자-)이소퀴놀리논 유도체는 EP 1020445 에서 중간체로서 기재되어 있다. 이소퀴놀리논 유도체는 WO 2010/133647 에서 PARP 억제제로서 기재되어 있다.
이소퀴놀리논 유도체는 하기에 의해 기재되어 있다:
Won-Jea Cho et al, Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters (1998), 8, 41-46;
Sung Hoon Cheon et al, Archives of Pharmacal Research (1997), 20, 138-143;
Sung Hoon Cheon et al, Archives of Pharmacal Research (2001), 24, 276-280.
발명의 개요
본 발명은 하기 식 I 의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체 및 입체이성질체, 및 이들의 모든 비율의 혼합물에 관한 것이다:
Figure pct00003
[식 중,
R1, R2 는 각각 서로 독립적으로 H, F 또는 Cl 을 나타내고,
R3 은 H, F, Cl, CH3 또는 OCH3 을 나타내고,
X1, X2 는 각각 서로 독립적으로 CH 또는 N 을 나타내고,
Y 는 A, Cyc 또는 옥시라닐, 옥세타닐, 테트라히드로푸라닐, 테트라히드로피라닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐, 티오모르폴리닐 또는 디아제파닐을 나타내고, 이는 비치환되거나 =O, Hal, OH 및/또는 A' 에 의해 단일- 또는 이중치환될 수 있고,
A' 는 1-4 개의 C-원자를 갖는 미분지형 또는 분지형 알킬을 나타내고, 이때 1 개의 CH2 기는 O-원자에 의해 대체될 수 있고/있거나 1 개의 H-원자는 OH 에 의해 대체될 수 있고,
A 는 2-10 개의 C-원자를 갖는 미분지형 또는 분지형 알킬을 나타내고, 이때 2 개의 인접한 탄소 원자는 이중 결합을 형성할 수 있고/있거나 1 또는 2 개의 비인접한 CH- 및/또는 CH2-기는 N-, O- 및/또는 S-원자에 의해 대체될 수 있고, 1-7 개의 H-원자는 F, Cl 및/또는 OH 에 의해 대체될 수 있고,
Cyc 는 3-7 개의 C-원자를 갖는 시클로알킬을 나타내고, 이는 비치환되거나 OH, Hal 또는 A' 에 의해 단일치환되고,
Hal 은 F, Cl, Br 또는 I 를 나타내고,
단, R1, R2, R3 중 하나 이상은 H 가 아니고,
단, Y 는 4-이소프로필-1-피페라지닐이 아님].
본 발명은 또한 이들 화합물의 광학 활성 형태 (입체이성질체), 거울상이성질체, 라세미체, 부분입체이성질체 및 수화물 및 용매화물에 관한 것이다.
본 발명은 하기 식 I 의 화합물 및 식 Ia 의 이의 호변이성질체에 관한 것이다:
Figure pct00004
.
또한, 본 발명은 식 I 의 화합물의 약학적으로 허용가능한 유도체에 관한 것이다.
용어 화합물의 용매화물은 화합물과 용매 분자의 상호 인력에 의해 형성된, 화합물 상의 불활성 용매 분자의 부가물을 의미하는 것으로 의도된다. 용매화물은, 예를 들어 단일- 또는 이중수화물 또는 알콕시드이다.
본 발명은 또한 염의 용매화물에 관한 것으로도 이해된다.
용어 약학적으로 허용가능한 유도체는, 예를 들어 본 발명에 따른 화합물의 염 및 또한 소위 전구약물 화합물을 의미하는 것으로 의도된다.
본원에 사용된 바 및 달리 언급되지 않는 한, 용어 "전구약물" 은 가수분해, 산화 또는 생물학적 조건 (시험관내 또는 생체내) 하에서 반응하여, 활성 화합물, 특히 식 I 의 화합물을 제공할 수 있는 식 I 의 화합물의 유도체를 의미한다. 전구약물의 예에는, 비제한적으로, 생가수분해가능한 (biohydrolyzable) 아미드, 생가수분해가능한 에스테르, 생가수분해가능한 카르바메이트, 생가수분해가능한 카르보네이트, 생가수분해가능한 우레이드, 및 생가수분해가능한 포스페이트 유사체와 같은 생가수분해가능한 부분을 포함하는, 식 I 의 화합물의 유도체 및 대사산물이 포함된다. 특정 구현예에서, 카르복실 관능기를 갖는 화합물의 전구약물은 카르복실산의 저급 알킬 에스테르이다. 카르복실레이트 에스테르는 분자 상에 존재하는 임의의 카르복실산 부분을 에스테르화하여 편리하게 형성된다. 전구약물은 통상적으로 [Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery 6th ed. (Donald J. Abraham ed., 2001, Wiley)] 및 [Design and Application of Prodrugs (H.Bundgaard ed., 1985, Harwood Academic Publishers Gmfh)] 에 기재된 바와 같은, 널리 공지된 방법을 사용하여 제조될 수 있다.
표현 "유효량" 은, 예를 들어 연구원 또는 의사에 의해 추구되거나 요구되는 생물학적 또는 의학적 반응을 조직, 계, 동물 또는 인간에서 야기하는, 약제 또는 약학적 활성 성분의 양을 나타낸다.
또한, 표현 "치료적 유효량" 은 이와 같은 양을 받지 않은 해당 개체와 비교하여, 하기 결과를 갖는 양을 나타낸다:
질환, 증후군, 병태, 호소증상, 장애 또는 부작용의 개선된 치료, 치유, 예방 또는 제거, 또는 또한 질환, 호소증상 또는 장애의 진전 감소.
표현 "치료적 유효량" 은 또한 통상의 생리학적 기능을 증가시키는데 유효한 양을 포함한다.
본 발명은 또한, 예를 들어 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:10, 1:100 또는 1:1000 비율로의, 예를 들어 2 가지 부분입체이성질체의 혼합물인, 식 I 의 화합물의 혼합물의 용도에 관한 것이다.
상기는 특히 바람직하게는 입체이성질체 화합물의 혼합물이다.
"호변이성질체" 는 서로 평형인 상태인 화합물의 이성질체 형태를 의미한다. 이성질체 형태의 농도는 화합물이 발견되는 환경에 따라 달라질 수 있고, 예를 들어 화합물이 고체인지 또는 유기 용액 또는 수용액 중에 존재하는지에 따라 달라질 수 있다.
본 발명은 식 I 의 화합물 및 이의 염, 및 하기를 특징으로 하는 식 I 의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 호변이성질체 및 입체이성질체의 제조 방법에 관한 것이다:
a) 식 II 의 화합물을:
Figure pct00005
[식 중, R1, R2 및 R3 은 청구항 1 에서 나타낸 의미를 가짐],
i) 식 III 의 화합물:
Figure pct00006
[식 중, X1, X2 및 Y 는 청구항 1 에서 나타낸 의미를 가짐],
또는
ii) 식 IV 의 화합물:
Figure pct00007
[식 중, X1, X2 및 Y 는 청구항 1 에서 나타낸 의미를 가짐]
과 반응시키거나,
b) 라디칼 Y 를 하기 i) ~ iv) 에 의해 또 다른 라디칼 Y 로 전환시키고/시키거나:
i) 알코올을 에테르기로 전환시킴,
ii) 에스테르기를 알코올기로 전환시킴,
iii) 니트로기를 아미노기로 전환시킴,
iv) 아미노기를 알킬화 아미노기로 전환시킴,
식 I 의 염기 또는 산을 이의 염 중 하나로 전환시킴.
상기 및 하기에서, 라디칼 R1, R2, R3, X1, X2 및 Y 는 달리 언급되지 않는 한, 식 I 에 나타낸 의미를 갖는다.
A 는 알킬을 나타내며, 이는 비분지형 (선형) 또는 분지형이고, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10 개의 C 원자를 갖는다. A 는 바람직하게는 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, sec-부틸 또는 tert-부틸, 나아가 또한 펜틸, 1-, 2- 또는 3-메틸부틸, 1,1-, 1,2- 또는 2,2-디메틸프로필, 1-에틸프로필, 헥실, 1-, 2-, 3- 또는 4-메틸펜틸, 1,1-, 1,2-, 1,3-, 2,2-, 2,3- 또는 3,3-디메틸부틸, 1- 또는 2-에틸부틸, 1-에틸-1-메틸프로필, 1-에틸-2-메틸프로필, 1,1,2- 또는 1,2,2-트리메틸프로필, 보다 바람직하게는, 예를 들어 트리플루오로메틸을 나타낸다.
A 는 매우 특히 바람직하게는 2, 3, 4, 5 또는 6 개 C 원자를 갖는 알킬, 바람직하게는 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 펜틸, 헥실, 트리플루오로메틸, 펜타플루오로에틸 또는 1,1,1-트리플루오로에틸을 나타낸다.
더욱이, A 는 바람직하게는 CH2OCH3, CH2CH2OH 또는 CH2CH2OCH3 을 나타낸다.
Cyc 는 바람직하게는 비치환되거나 OH, Hal 또는 A' 에 의해 단일치환되는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실 또는 시클로헵틸을 나타낸다.
A' 는 알킬을 나타내며, 이는 비분지형 (선형) 또는 분지형이고, 1, 2, 3 또는 4 개 C 원자를 가지며, 이때 1 개의 CH2 기는 O-원자에 의해 대체될 수 있고/있거나 1 개의 H-원자는 OH 에 의해 대체될 수 있다.
X1 은 바람직하게는 CH 를 나타낸다.
Y 는 바람직하게는 1-히드록시-1-메틸-에틸, (2-메톡시-에톡시)-1-메틸-에틸, (2-히드록시-에톡시)-1-메틸-에틸, tert.-부틸, 4-메틸-피페라지닐, 1-에틸, 1-히드록시-프로필, 2-메틸테트라히드로푸란-2-일, 1-히드록시-시클로펜틸, 3-히드록시-옥세탄-3-일, (2-아미노에톡시)-1-메틸-에틸, 피페라진-1-일, 4-메틸-피페라진-1-일, 피페리딘-4-일, 1-메틸-피페리딘-4-일, 1-(2-히드록시-에톡시)-1-메틸-에틸 , 1,1-디옥소-1l6-티오모르폴린-4-일, 4-히드록시메틸-피페리딘-1-일 또는 4-메틸-[1,4]디아제판-1-일을 나타낸다.
Y 는 특히 바람직하게는 1-히드록시-1-메틸-에틸 또는 tert.-부틸을 나타낸다.
Hal 은 바람직하게는 F, Cl 또는 Br 뿐 아니라 I, 특히 바람직하게는 F 또는 Cl 을 나타낸다.
본 발명의 전반에 걸쳐, 1 회 이상 나타나는 모든 라디칼은 동일하거나 상이할 수 있고, 즉 이들은 서로 독립적이다.
식 I 의 화합물은 하나 이상의 키랄 중심을 가질 수 있고, 따라서 각종 입체이성질체 형태로 존재할 수 있다. 식 I 은 이러한 모든 형태를 포함한다.
따라서 본 발명은, 특히 하나 이상의 상기 라디칼이 상기 기재된 바람직한 의미 중 하나를 갖는 식 I 의 화합물에 관한 것이다. 화합물의 일부 바람직한 군은 식 I 에 따르는 하기 하위식 Ia 내지 Id 및 이의 약학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체 및 입체이성질체, 및 이들의 모든 비율의 혼합물로 표현될 수 있고, 여기서 하기를 제외하고는, 보다 상세하게 명시되지 않은 라디칼은 식 I 에 나타낸 의미를 갖는다:
Ia 에서, X1 은 CH 를 나타내고;
Ib 에서, Y 는 1-히드록시-1-메틸-에틸, (2-메톡시-에톡시)-1-메틸-에틸, (2-히드록시-에톡시)-1-메틸-에틸, tert.-부틸, 4-메틸-피페라지닐, 1-에틸, 1-히드록시-프로필, 2-메틸테트라히드로푸란-2-일, 1-히드록시-시클로펜틸, 3-히드록시-옥세탄-3-일, (2-아미노에톡시)-1-메틸-에틸, 피페라진-1-일, 4-메틸-피페라진-1-일, 피페리딘-4-일 또는 1-메틸-피페리딘-4-일을 나타내고;
Id 에서, R1, R2 는 각각 서로 독립적으로 H, F 또는 Cl 을 나타내고,
R3 은 H, F, Cl, CH3 또는 OCH3 을 나타내고,
X1 은 CH 를 나타내고,
X2 는 CH 또는 N 을 나타내고,
Y 는 A, Cyc 또는 옥시라닐, 옥세타닐, 테트라히드로푸라닐, 테트라히드로피라닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐, 티오모르폴리닐 또는 디아제파닐을 나타내고, 이는 비치환되거나 =O, Hal, OH 및/또는 A' 에 의해 단일- 또는 이중치환될 수 있고,
A' 는 1-4 개의 C-원자를 갖는 미분지형 또는 분지형 알킬을 나타내고, 이때 1 개의 CH2 기는 O-원자에 의해 대체될 수 있고/있거나 1 개의 H-원자는 OH 에 의해 대체될 수 있고, A 는 2-10 개의 C-원자를 갖는 미분지형 또는 분지형 알킬을 나타내고, 이때 1 또는 2 개의 비인접한 CH- 및/또는 CH2-기는 N- 및/또는 O-원자에 의해 대체될 수 있고, 1-7 개의 H-원자는 F, Cl 및/또는 OH 에 의해 대체될 수 있고,
Cyc 는 3-7 개의 C-원자를 갖는 시클로알킬을 나타내고, 이는 비치환되거나 OH, Hal 또는 A' 에 의해 단일치환되고,
Hal 은 F, Cl, Br 또는 I 를 나타내고,
단, R1, R2, R3 중 하나 이상은 H 가 아니고,
단, Y 는 4-이소프로필-1-피페라지닐이 아님.
식 I 의 화합물 및 또한 이의 제조를 위한 출발 물질은, 또한 문헌 (예를 들어 표준 방법으로, 예컨대 Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie [Methods of Organic Chemistry], Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart) 에 기재된 바와 같이, 상기 반응을 위해 공지된 적합한 반응 조건 하에서 정확하게, 공지된 방법 그대로 제조된다. 그 자체가 공지되어 있지만, 본원에서 보다 상세하게 언급되지 않은 변형들 또한 사용될 수 있다.
식 II, III 및 IV 의 출발 화합물은 일반적으로 공지되어 있다. 하지만, 이들이 신규한 경우, 이는 공지된 방법 그대로 제조될 수 있다.
식 I 의 화합물은 식 II 의 화합물과 식 III 의 화합물 또는 식 IV 의 화합물을 나트륨 디술파이트와 같은 산화제의 존재 하에 반응시켜 바람직하게 수득될 수 있다.
사용되는 조건에 따라, 반응 시간은 수 분 내지 14 일이고, 반응 온도는 약 -10° 내지 160°, 통상적으로는 30° 내지 160°, 특히 약 100° 내지 약 160° 이다. 반응은 불활성 용매 중에서 수행된다.
적합한 불활성 용매의 예는, 탄화수소, 예컨대 헥산, 석유 에테르, 벤젠, 톨루엔 또는 자일렌; 염소화 탄화수소, 예컨대 트리클로로에틸렌, 1,2-디클로로에탄, 사염화탄소, 클로로포름 또는 디클로로메탄; 알코올, 예컨대 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, n-프로판올, n-부탄올 또는 tert-부탄올; 에테르, 예컨대 디에틸 에테르, 디이소프로필 에테르, 테트라히드로푸란 (THF) 또는 디옥산; 글리콜 에테르, 예컨대 에틸렌 글리콜 모노메틸 또는 모노에틸 에테르, 에틸렌 글리콜 디메틸 에테르 (디글림 (diglyme)); 케톤, 예컨대 아세톤 또는 부타논; 아미드, 예컨대 아세트아미드, 디메틸아세트아미드 (DMA), N-메틸피롤리돈 (NMP) 또는 디메틸포름아미드 (DMF); 니트릴, 예컨대 아세토니트릴; 술폭시드, 예컨대 디메틸 술폭시드 (DMSO); 이황화탄소; 카르복실산, 예컨대 포름산 또는 아세트산; 니트로 화합물, 예컨대 니트로메탄 또는 니트로벤젠; 에스테르, 예컨대 에틸 아세테이트, 또는 상기 용매들의 혼합물이다.
DMF, NMP 또는 DMA 가 특히 바람직하다.
식 I 의 화합물은 나아가 하기에 의해, 라디칼 Y 를 또 다른 라디칼 Y 로 전환시켜 수득될 수 있다:
i) 알코올을 에테르기로 전환시킴,
ii) 에스테르기를 알코올기로 전환시킴,
iii) 니트로기를 아미노기로 전환시킴,
iv) 아미노기를 알킬화 아미노기로 전환시킴.
단계 i):
알코올을 에테르기로 전환시키는 것은 표준 조건 하에 실행된다.
단계 ii):
에스테르기를 알코올기로 전환시키는 것은, 바람직하게는 염화세륨(III) 의 존재 하에서, 표준 조건 하 THF 중에서 알킬마그네슘클로라이드를 이용하거나 또는 THF 중에서 리튬알루미늄히드라이드를 이용하여 실행된다.
단계 iii) 및 iv):
니트로기를 아미노기로 전환시키는 것 또는 아미노기를 알킬화 아미노기로 전환시키는 것은 표준 조건 하에 실행된다.
에스테르는, 예를 들어 0 내지 100° 의 온도에서, 물, 물/THF 또는 물/디옥산 중에서, NaOH 또는 KOH 를 사용하거나 또는 아세트산을 사용하여 비누화될 수 있다.
약학적 염 및 기타 형태
본 발명에 따른 상기 화합물은 이의 최종 무(無) 염 형태로 사용될 수 있다. 한편, 본 발명은 또한 상기 화합물을 이의 약학적으로 허용가능한 염의 형태로 사용하는 것을 포함하는데, 이는 각종 유기 및 무기 산 및 염기로부터 당업계에 공지된 절차에 의해 유도될 수 있다. 식 I 의 화합물의 약학적으로 허용가능한 염 형태는 대부분 통상적인 방법에 의해 제조된다. 식 I 의 화합물이 카르복실기를 함유하는 경우, 이의 적합한 염 중 하나는 상기 화합물을 적합한 염기와 반응시켜 해당 염기-부가염을 수득함으로써 형성될 수 있다. 상기와 같은 염기는, 예를 들어 알칼리 금속 수산화물, 예컨대 수산화칼륨, 수산화나트륨 및 수산화리튬; 알칼리 토금속 수산화물, 예컨대 수산화바륨 및 수산화칼슘; 알칼리 금속 알콕시드, 예를 들어 칼륨 에톡시드 및 나트륨 프로폭시드; 및 각종 유기 염기, 예컨대 피페리딘, 디에탄올아민 및 N-메틸글루타민이다. 식 I 의 화합물의 알루미늄 염도 마찬가지로 포함된다. 특정한 식 I 의 화합물의 경우, 산-부가염은 이들 화합물을, 약학적으로 허용가능한 유기 및 무기 산, 예를 들어 할로겐화수소, 예컨대 염화수소, 브롬화수소 또는 요오드화수소, 기타 광물산 및 이의 해당 염, 예컨대 술페이트, 니트레이트 또는 포스페이트 등, 및 알킬- 및 모노아릴술포네이트, 예컨대 에탄술포네이트, 톨루엔술포네이트 및 벤젠술포네이트, 및 기타 유기산 및 이의 해당 염, 예컨대 아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 타르트레이트, 말레에이트, 숙시네이트, 시트레이트, 벤조에이트, 살리실레이트, 아스코르베이트 등으로 처리함으로써 형성될 수 있다. 따라서, 식 I 의 화합물의 약학적으로 허용가능한 산-부가염에는 하기가 포함되지만, 이에 제한되지는 않는다: 아세테이트, 아디페이트, 알기네이트, 아르기네이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 벤젠술포네이트 (베실레이트), 바이술페이트, 바이술파이트, 브로마이드, 부티레이트, 캄포레이트, 캄포술포네이트, 카프릴레이트, 클로라이드, 클로로벤조에이트, 시트레이트, 시클로펜탄프로피오네이트, 디글루코네이트, 디히드로겐포스페이트, 디니트로벤조에이트, 도데실술페이트, 에탄술포네이트, 푸마레이트, 포르메이트, 갈락터레이트 (점액산 유래), 갈락투로네이트, 글루코헵타노에이트, 글루코네이트, 글루타메이트, 글리세로포스페이트, 헤미숙시네이트, 헤미술페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 히푸레이트, 히드로클로라이드, 히드로브로마이드, 히드로요오다이드, 2-히드록시에탄술포네이트, 요오다이드, 이세티오네이트, 이소부티레이트, 락테이트, 락토비오네이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 만델레이트, 메타포스페이트, 메탄술포네이트, 메틸벤조에이트, 모노히드로겐포스페이트, 2-나프탈렌술포네이트, 니코티네이트, 니트레이트, 옥살레이트, 올레에이트, 팔모에이트, 펙티네이트, 퍼술페이트, 페닐아세테이트, 3-페닐프로피오네이트, 포스페이트, 포스포네이트, 프탈레이트.
나아가, 본 발명에 따른 화합물의 염기 염에는 하기가 포함되지만, 이에 제한되는 것으로 의도되지 않는다: 알루미늄, 암모늄, 칼슘, 구리, 철(III), 철(II), 리튬, 마그네슘, 망간(III), 망간(II), 칼륨, 나트륨 및 아연 염. 상기 언급된 염 중에서, 암모늄; 알칼리 금속 염인 나트륨 및 칼륨, 및 알칼리 토금속 염인 칼슘 및 마그네슘이 바람직하다. 약학적으로 허용가능한 유기 무독성 염기로부터 유도된 식 I 의 화합물의 염에는 하기 것들의 염이 포함되지만, 이에 제한되는 것으로 의도되지 않는다: 1차, 2차 및 3차 아민, 치환된 아민, 또한 자연 발생 치환된 아민, 시클릭 아민, 및 염기성 이온 교환 수지, 예를 들어 아르기닌, 베타인, 카페인, 클로로프로카인, 콜린, N,N'-디벤질에틸렌디아민 (벤자틴), 디시클로헥실아민, 디에탄올아민, 디에틸아민, 2-디에틸아미노에탄올, 2-디메틸아미노에탄올, 에탄올아민, 에틸렌디아민, N-에틸모르폴린, N-에틸피페리딘, 글루카민, 글루코사민, 히스티딘, 히드라바민, 이소프로필아민, 리도카인, 리신, 메글루민, N-메틸-D-글루카민, 모르폴린, 피페라진, 피페리딘, 폴리아민 수지, 프로카인, 퓨린, 테오브로민, 트리에탄올아민, 트리에틸아민, 트리메틸아민, 트리프로필아민 및 트리스(히드록시메틸)메틸아민 (트로메타민).
염기성 질소-함유기를 함유하는 본 발명의 화합물은 (C1-C4)-알킬 할라이드, 예를 들어 메틸, 에틸, 이소프로필 및 tert-부틸 클로라이드, 브로마이드 및 요오다이드; 디(C1-C4)알킬 술페이트, 예를 들어 디메틸, 디에틸 및 디아밀 술페이트; (C10-C18)알킬 할라이드, 예를 들어 데실, 도데실, 라우릴, 미리스틸 및 스테아릴 클로라이드, 브로마이드 및 요오다이드; 및 아릴(C1-C4)알킬 할라이드, 예를 들어 벤질 클로라이드 및 페네틸 브로마이드와 같은 제제를 사용해 4 차화될 수 있다. 본 발명에 따른 수용성 및 유용성 화합물 모두 상기와 같은 염을 사용하여 제조될 수 있다.
바람직한 상기 언급된 약학적 염에는 하기가 포함되지만, 이에 제한되는 것으로 의도되지 않는다: 아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 베실레이트, 시트레이트, 푸마레이트, 글루코네이트, 헤미숙시네이트, 히푸레이트, 히드로클로라이드, 히드로브로마이드, 이세티오네이트, 만델레이트, 메글루민, 니트레이트, 올레에이트, 포스포네이트, 피발레이트, 나트륨 포스페이트, 스테아레이트, 술페이트, 술포살리실레이트, 타르트레이트, 티오말레이트, 토실레이트 및 트로메타민.
히드로클로라이드, 디히드로클로라이드, 히드로브로마이드, 말레에이트, 메실레이트, 포스페이트, 술페이트 및 숙시네이트가 특히 바람직하다.
식 I 의 염기성 화합물의 산-부가 염은, 통상의 방식으로 유리 염기 형태를 충분량의 요구되는 산과 접촉시켜 염을 형성시킴으로써 제조된다. 유리 염기는 통상의 방식으로 상기 염 형태를 염기와 접촉시키고, 상기 유리 염기를 단리함으로써 재생될 수 있다. 유리 염기 형태는 극성 용매 중에서의 용해도와 같은 특정한 물리적 특성에 있어서 이의 해당 염 형태와 어느 정도 차이가 있지만; 본 발명의 목적을 위하여, 상기 염은 이의 각각의 유리 염기 형태에 해당한다.
언급된 바와 같이, 식 I 의 화합물의 약학적으로 허용가능한 염기-부가염은 금속 또는 아민, 예컨대 알칼리 금속 및 알칼리 토금속 또는 유기 아민을 이용하여 형성된다. 바람직한 금속은 나트륨, 칼륨, 마그네슘 및 칼슘이다. 바람직한 유기 아민은 N,N'-디벤질에틸렌디아민, 클로로프로카인, 콜린, 디에탄올아민, 에틸렌디아민, N-메틸-D-글루카민 및 프로카인이다.
본 발명에 따른 산성 화합물의 염기-부가염은, 통상의 방식으로 유리 산 형태를 충분량의 요구되는 염기와 접촉시켜 염을 형성시킴으로써 제조된다. 유리 산은 통상의 방식으로 상기 염 형태를 산과 접촉시키고, 상기 유리 산을 단리시킴으로써 재생될 수 있다. 유리 산 형태는 극성 용매 중에서의 용해도와 같은 특정한 물리적 특성에 있어서 이의 해당 염 형태와 어느 정도 차이가 있지만; 본 발명의 목적을 위하여, 상기 염은 이의 각각의 유리 산 형태에 해당한다.
본 발명에 따른 화합물이 상기 유형의 약학적으로 허용가능한 염을 형성할 수 있는 기를 하나 초과로 함유하는 경우, 본 발명은 또한 다중 염 (multiple salt) 을 포함한다. 전형적인 다중 염 형태에는, 예를 들어 하기가 포함되지만, 이에 제한되는 것으로 의도되지 않는다: 바이타르트레이트, 디아세테이트, 디푸마레이트, 디메글루민, 디포스페이트, 디나트륨 및 트리히드로클로라이드.
상기에서 언급된 바와 관련하여, 본 문맥에서 표현 "약학적으로 허용가능한 염" 은, 특히 상기 염 형태가 활성 성분의 유리 형태 또는 이전에 사용되었던 활성 성분의 임의의 기타 염 형태와 비교하여, 활성 성분에 개선된 약동학적 특성을 부여하는 경우, 식 I 의 화합물을 이의 염 중 하나의 형태로 포함하는 활성 화합물을 의미하는 것으로 의도되는 것을 볼 수 있다. 활성 성분의 약학적으로 허용가능한 염 형태는 또한 이전에는 갖지 않았던 목적하는 약동학적 특성을 처음으로 상기 활성 성분에 제공할 수 있고, 나아가 체내 이의 치료적 효능에 있어서 상기 활성 성분의 약력학에 긍정적인 영향을 미칠 수 있다.
동위원소
나아가, 식 I 의 화합물에는 이의 동위원소-라벨된 형태가 포함되는 것으로 의도된다. 식 I 의 화합물의 동위원소-라벨된 형태는, 화합물 중 하나 이상의 원자가 자연에서 통상적으로 발견되는 원자의 원자 질량 또는 질량수와 상이한 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자 또는 원자들로 대체된 것을 제외하고는, 상기 화합물과 동일하다. 용이하게 입수가능하고, 널리 공지된 방법에 의해 식 I 의 화합물에 혼입될 수 있는 동위원소의 예에는, 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 플루오린 및 염소의 동위원소, 각각 예를 들어 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F 및 36Cl 이 포함된다. 상기 언급된 동위원소 및/또는 기타 원자의 기타 동위원소 중 하나 이상을 함유하는, 식 I 의 화합물, 이의 전구약물 또는 약학적으로 허용가능한 염은 본 발명의 일부인 것으로 의도된다. 식 I 의 동위원소-라벨된 화합물은 다수의 유익한 방식으로 사용될 수 있다. 예를 들어, 3H 또는 14C 와 같은 방사성 동위원소가 혼입된 식 I 의 동위원소-라벨된 화합물은 약제 및/또는 기질 조직 분포 검정에 적합하다. 이러한 방사성 동위원소, 즉 트리튬 (3H) 및 탄소-14 (14C) 는, 간단한 제조 및 탁월한 검출능으로 인해 특히 바람직하다. 보다 무거운 동위원소, 예를 들어 듀테륨 (2H) 의 식 I 의 화합물로의 혼입은, 상기 동위원소-라벨된 화합물의 보다 우수한 대사 안정성에 의한 치료적 이점을 갖는다. 보다 우수한 대사 안정성은 증가된 생체내 반감기 또는 보다 적은 투여량으로 해석되며, 이는 대부분의 경우 본 발명의 바람직한 구현예에 해당한다. 식 I 의 동위원소-라벨된 화합물은 통상적으로 비(非)동위원소-라벨된 반응물을 용이하게 입수가능한 동위원소-라벨된 반응물로 대체하는, 본 발명의 실시예 부분 및 제조 부분에 있는 합성 모식도 및 관련 설명에 개시된 절차를 수행함으로써 제조될 수 있다.
듀테륨 (2H) 은 또한 1차 동력학적 동위원소 효과 (primary kinetic isotope effect) 에 의한 화합물의 산화적 대사를 조정하기 위한 목적으로, 식 I 의 화합물에 혼입될 수 있다. 1차 동력학적 동위원소 효과는 동위원소 핵의 교환에 의해 야기된 화학 반응 속도의 변화로, 이는 결국 상기 동위원소 교환 후 공유 결합 형성을 위해 요구되는 기저 상태 에너지의 변화에 의해 야기된다. 보다 무거운 동위원소의 교환은 통상적으로 화학 결합을 위한 기저 상태 에너지를 낮추기 때문에, 속도-제한 결합 파괴에서 속도를 감소시킨다. 결합 파괴가 다중-생성물 반응의 좌표에 따라 안장점 (saddle-point) 영역에서 또는 그 부근에서 일어나는 경우, 생성물 분포 비율은 실질적으로 변경될 수 있다. 설명으로서: 듀테륨이 비(非)교환가능한 위치에서 탄소 원자에 결합되는 경우, kM/kD = 2-7 의 속도 차이가 통상적이다. 이러한 속도 차이가 산화에 민감한 식 I 의 화합물에 성공적으로 적용되는 경우, 생체내 이러한 화합물의 프로파일은 극적으로 변경되어, 개선된 약동학적 특성을 야기할 수 있다.
치료제의 발견 및 개발의 경우, 당업자는 바람직한 시험관내 특성을 유지하면서 약동학적 변수를 최적화하고자 한다. 불량한 약동학적 프로파일을 갖는 다수의 화합물은 산화적 대사에 민감한 것으로 간주하는 것이 타당하다. 현재 이용가능한 시험관내 간 마이크로좀 검정은 상기 유형의 산화적 대사 과정에 대한 유용한 정보를 제공하며, 이는 결국 상기와 같은 산화적 대사에 대한 저항성을 통해 개선된 안정성을 갖는 중수소화된 식 I 의 화합물의 합리적인 설계를 가능하게 한다. 이에 따라, 식 I 의 화합물의 약동학적 프로파일에서의 유의한 개선이 수득되고, 이는 생체내 반감기 (t/2), 최대 치료 효과 농도 (Cmax), 용량 반응 곡선 하 면적 (AUC), 및 F 의 관점에서; 및 감소된 청소율 (clearance), 용량 및 재료비의 관점에서 정량적으로 표현될 수 있다.
하기는 상기를 예시하기 위한 것으로 의도된다: 산화적 대사를 위한 다중 잠재적 부위, 예를 들어 질소 원자에 결합된 수소 원자 및 벤질형 수소 원자들을 갖는 식 I 의 화합물은, 수소 원자의 각종 조합물이 듀테륨 원자로 대체된 일련의 유사체로서 제조되기 때문에, 상기 수소 원자 중 일부, 대부분 또는 전부가 듀테륨 원자로 대체된다. 반감기 측정은 산화적 대사에 대한 저항성의 개선이 개선되는 범위 정도의 유리하고 정확한 측정을 가능하게 한다. 이러한 방식으로, 모 (parent) 화합물의 반감기는 상기 유형의 듀테륨-수소 교환의 결과로서 100% 까지 연장될 수 있다고 확인되었다.
식 I 의 화합물에서 듀테륨-수소 교환은 바람직하지 않은 독성 대사산물을 감소 또는 제거하기 위하여 출발 화합물의 대사산물 스펙트럼의 유리한 변경을 달성하는데 또한 사용될 수 있다. 예를 들어, 독성 대사산물이 산화적 탄소-수소 (C-H) 결합 절단을 통해 발생하는 경우, 특정한 산화가 속도 결정 단계가 아닌 경우라도, 중수소화된 유사체는 원하지 않는 대사산물의 생성을 크게 감소 또는 제거할 수 있다고 합리적으로 추정될 수 있다. 듀테륨-수소 교환에 대한 당업계의 최신 추가 정보는, 예를 들어 하기에서 확인할 수 있다: [Hanzlik et al., J. Org. Chem. 55, 3992-3997, 1990, Reider et al., J. Org. Chem. 52, 3326-3334, 1987], [Foster, Adv. Drug Res. 14, 1-40, 1985, Gillette et al, Biochemistry 33(10) 2927-2937, 1994] 및 [Jarman et al. Carcinogenesis 16(4), 683-688, 1993].
본 발명은 나아가 하나 이상의 식 I 의 화합물 및/또는 이의 약학적으로 허용가능한 유도체, 용매화물 및 입체이성질체, 및 이들의 모든 비율의 혼합물, 및 임의로 부형제 및/또는 보조제를 포함하는 약제에 관한 것이다.
약학적 제형은, 투여량 단위 당 소정량의 활성 성분을 포함하는 투여량 단위 형태로 투여될 수 있다. 상기와 같은 단위는 치료되는 병태, 투여 방법 및 환자의 연령, 체중 및 상태에 따라, 예를 들어 본 발명에 따른 화합물을 0.5 mg 내지 1 g, 바람직하게는 1 mg 내지 700 mg, 특히 바람직하게는 5 mg 내지 100 mg 포함할 수 있거나, 또는 약학적 제형은 투여량 단위 당 소정량의 활성 성분을 포함하는 투여량 단위 형태로 투여될 수 있다. 바람직한 투여량 단위 제형은 상기 제시된 바와 같은 1 일 용량 또는 부분-용량, 또는 이의 해당 분율의 활성 성분을 포함하는 것들이다. 나아가, 이러한 유형의 약학적 제형은 약제학 업계에 일반적으로 공지되어 있는 방법을 사용하여 제조될 수 있다.
약학적 제형은 임의의 목적하는 적합한 방법, 예를 들어 경구 (구강 또는 설하 포함), 직장내, 비강내, 국소 (구강, 설하 또는 경피 포함), 질내 또는 비경구 (피하, 근육내, 정맥내 또는 피부내 포함) 방법을 통한 투여에 적합화될 수 있다. 상기와 같은 제형은, 예를 들어 활성 성분을 부형제(들) 또는 보조제(들) 와 조합함으로써 약학 업계에 공지된 모든 방법을 사용하여 제조될 수 있다.
경구 투여에 적합한 약학적 제형은, 예를 들어 캡슐 또는 정제; 분말 또는 과립; 수성 또는 비수성액 중의 용액 또는 현탁액; 식용 포말 (foam) 또는 포말 식품; 또는 수중유 (oil-in-water) 액체 에멀젼 또는 유중수 (water-in-oil) 액체 에멀젼과 같은 개별 단위로 투여될 수 있다.
따라서 예를 들어 정제 또는 캡슐 형태로의 경구 투여의 경우, 활성 성분은 예를 들어 에탄올, 글리세롤, 물 등과 같은 경구용, 무독성 및 약학적으로 허용가능한 불활성 부형제와 조합될 수 있다. 분말은 화합물을 적합한 미세 크기로 분쇄하고, 이를 유사한 방식을 이용하여 분쇄된 약학적 부형제, 예를 들어 전분 또는 만니톨과 같은 식용 탄수화물과 혼합함으로써 제조된다. 마찬가지로 향미제, 보존제, 분산제 및 염료가 존재할 수 있다.
캡슐은 상기 기재된 바와 같은 분말 혼합물을 제조하고, 이를 성형된 젤라틴 쉘에 충전함으로써 생성된다. 충전 작업 전에, 활택제 (glidant) 및 윤활제, 예를 들어 고체 형태의 고도로 분산된 규산, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 칼슘 스테아레이트 또는 폴리에틸렌 글리콜이 상기 분말 혼합물에 첨가될 수 있다. 캡슐 복용 후 약제의 이용가능성을 개선시키기 위하여, 마찬가지로 붕해제 또는 가용화제, 예를 들어 한천 (agar-agar), 탄산칼슘 또는 탄산나트륨이 첨가될 수 있다.
또한, 바람직하거나 또는 요구되는 경우, 적합한 결합제, 윤활제 및 붕해제 뿐 아니라, 염료도 마찬가지로 혼합물 내에 혼입될 수 있다. 적합한 결합제에는 전분, 젤라틴, 천연 당류, 예를 들어 글루코오스 또는 베타-락토오스, 옥수수로부터 제조된 감미제, 천연 및 합성 고무, 예를 들어 아카시아, 트래거캔스 또는 나트륨 알기네이트, 카르복시메틸셀룰로오스, 폴리에틸렌 글리콜, 왁스 등이 포함된다. 이러한 투여량 형태에 사용되는 윤활제에는, 나트륨 올레에이트, 나트륨 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 나트륨 벤조에이트, 나트륨 아세테이트, 염화나트륨 등이 포함된다. 붕해제에는 전분, 메틸셀룰로오스, 한천, 벤토나이트, 잔탄검 등이 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 정제는, 예를 들어 분말 혼합물을 제조하고, 상기 혼합물을 과립화 또는 건식 압착하고, 윤활제 및 붕해제를 첨가하고, 전체 혼합물을 압착하여 정제를 생성함으로써 제형화된다. 분말 혼합물은, 적합한 방식을 이용하여 분쇄된 화합물을, 상기 기재된 바와 같은 희석제 또는 염기, 및 임의로 카르복시메틸셀룰로오스, 알기네이트, 젤라틴 또는 폴리비닐피롤리돈과 같은 결합제, 파라핀과 같은 용해 지연제, 4차 염과 같은 흡수 촉진제 및/또는 벤토나이트, 카올린 또는 디칼슘 포스페이트와 같은 흡수제와 혼합함으로써 제조된다. 분말 혼합물은 이를 결합제, 예를 들어 시럽, 전분 페이스트, 아카디아 점액 또는 셀룰로오스 또는 중합체 물질의 용액으로 적시고, 체 (sieve) 를 통해 압착시킴으로써 과립화될 수 있다. 과립화에 대한 대안법으로서, 분말 혼합물을 타정기에 통과시킴으로써, 비균일한 모양의 덩어리를 수득하고, 이를 부수어 과립이 형성될 수 있다. 상기 과립에 스테아르산, 스테아레이트 염, 탈크 또는 광유를 첨가하여 윤활시켜, 정제 캐스팅 몰드에 달라붙는 것을 방지할 수 있다. 그 후, 윤활된 혼합물을 압착하여 정제를 수득한다. 또한, 본 발명에 따른 화합물을 자유-유동성 불활성 부형제와 조합한 후, 과립화 또는 건식 압착 단계를 수행하지 않고 직접 압착시켜 정제를 수득할 수 있다. 쉘락 (shellac) 밀봉층으로 이루어진 투명 또는 불투명 보호층, 당 또는 중합체 물질층 및 왁스의 광택층이 존재할 수 있다. 상이한 투여량 단위 사이를 구별 가능하도록 하기 위하여, 상기 코팅에 염료가 첨가될 수 있다.
경구용 액체, 예를 들어 용액, 시럽 및 엘릭시르 (elixir) 는, 제공된 양이 사전지정된 양의 화합물을 포함하도록 투여량 단위 형태로 제조될 수 있다. 시럽은 상기 화합물을 적합한 향미제와 함께 수용액 중에 용해시킴으로써 제조될 수 있는 한편, 엘릭시르는 무독성 알코올계 비히클을 사용하여 제조된다. 현탁액은, 상기 화합물을 무독성 비히클에 분산시킴으로써 제형화될 수 있다. 가용화제 및 유화제, 예를 들어 에톡실화 이소스테아릴 알코올 및 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에테르, 보존제, 향미 첨가제, 예를 들어 박하 오일 또는 천연 감미제 또는 사카린, 또는 기타 인공 감미제 등이 마찬가지로 첨가될 수 있다.
경구 투여용 투여량 단위 제형은, 필요한 경우, 마이크로캡슐 내에 캡슐화될 수 있다. 상기 제형은 또한 방출이 연장 또는 지연되는 방식으로, 예를 들어 미립자 물질을 중합체, 왁스 등으로 코팅하거나 또는 이에 포매함으로써 제조될 수 있다.
식 I 의 화합물 및 이의 약학적 염, 호변이성질체 및 입체이성질체는 또한 리포좀 전달 시스템 형태, 예를 들어 소형 단일라멜라 (unilamellar) 소포, 대형 단일라멜라 소포 및 다중라멜라 소포의 형태로 투여될 수 있다. 리포좀은 각종 인지질, 예를 들어 콜레스테롤, 스테아릴아민 또는 포스파티딜콜린으로부터 형성될 수 있다.
식 I 의 화합물 및 이의 염, 호변이성질체 및 입체이성질체는 또한 상기 화합물 분자에 커플링되는 각각의 담체로서 단일클론 항체를 사용하여 전달될 수 있다. 상기 화합물은 또한 표적화된 약제 담체로서 가용성 중합체에 커플링될 수 있다. 상기와 같은 중합체에는, 팔미토일 라디칼로 치환된, 폴리비닐피롤리돈, 피란 공중합체, 폴리히드록시프로필메타크릴아미도페놀, 폴리히드록시에틸아스파르트아미도페놀 또는 폴리에틸렌 옥시드 폴리리신이 포함될 수 있다. 상기 화합물은 나아가 약제의 제어된 방출을 달성하기에 적합한 생분해성 중합체 부류, 예를 들어 폴리락트산, 폴리-엡실론-카프로락톤, 폴리히드록시부티르산, 폴리오르토에스테르, 폴리아세탈, 폴리디히드록시피란, 폴리시아노아크릴레이트 및 히드로겔의 가교 또는 양친매성 블록 공중합체에 커플링될 수 있다.
경피 투여에 적합한 약학적 제형은 수용자의 표피와 연장된 밀접한 접촉을 위해 독립적인 플라스터 (plaster) 로서 투여될 수 있다. 따라서, 예를 들어 활성 성분은 문헌 [Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986)] 에서 일반적인 용어로 기재된 이온도입법 (iontophoresis) 에 의해 플라스터로부터 전달될 수 있다.
국소 투여에 적합한 약학적 화합물은 연고, 크림, 현탁액, 로션, 분말, 용액, 페이스트, 겔, 스프레이, 에어로졸 또는 오일로서 제형화될 수 있다.
눈 또는 기타 외부 조직, 예를 들어 구강 및 피부의 치료를 위해, 제형은 바람직하게는 국소 연고 또는 크림으로서 적용된다. 연고로 제조되는 제형의 경우, 활성 성분은 파라핀계 또는 수혼화성 크림 베이스 중 어느 하나와 함께 이용될 수 있다. 대안적으로, 활성 성분은 수중유 크림 베이스 또는 유중수 베이스를 갖는 크림을 수득하도록 제형화될 수 있다.
눈에 국소 적용하기에 적합한 약학적 제형에는, 활성 성분이 적합한 담체, 특히 수성 용매 중에 용해 또는 현탁된 점안액이 포함된다.
구강에 국소 적용하기에 적합한 약학적 제형에는, 로젠지 (lozenge), 향정 및 구강세정제가 포함된다.
직장 투여에 적합한 약학적 제형은 좌제 또는 관장제의 형태로 투여될 수 있다.
담체 물질이 고체인 비강내 투여에 적합한 약학적 제형은, 입자 크기가, 예를 들어 20 - 500 마이크론 범위인 조분말 (coarse powder) 을 포함하며, 이는 코담배 (snuff) 가 흡입되는 방식으로, 즉 코에 가까이 놓인 분말 함유 용기로부터 비강내 경로를 통한 신속한 흡입에 의해 투여된다. 담체 물질으로서 액체를 갖는 비강내 스프레이 또는 점비약으로서의 투여에 적합한 제형은, 물 또는 오일 중의 활성 성분 용액을 포함한다.
흡입 투여에 적합한 약학적 제형은 에어로졸, 분무기 또는 취입기를 갖는 각종 유형의 가압 디스펜서에 의해 생성될 수 있는 미립자 분진 또는 미스트를 포함한다.
질내 투여에 적합한 약학적 제형은 페서리 (pessary), 탐폰, 크림, 겔, 페이스트, 발포체 또는 스프레이 제형으로서 투여될 수 있다.
비경구 투여에 적합한 약학적 제형에는, 제형이 치료될 수용자의 혈액과 등장성이 되도록 하는 항산화제, 완충제, 정균제 (bacteriostatic) 및 용질을 포함하는 수성 및 비수성 멸균 주사 용액; 및 현탁 매질 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 현탁액이 포함된다. 상기 제형은 단일 용량 또는 다중 용량 용기, 예를 들어 밀폐된 앰플 및 바이알로 투여될 수 있으며, 냉동 건조 (동결건조) 상태로 보관될 수 있기 때문에, 사용 직전에 멸균 담체 액체, 예를 들어 주사용수를 첨가하기만 하면 된다. 레시피에 따라 제조되는 주사 용액 및 현탁액은 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 제조될 수 있다.
상기 구체적으로 언급된 구성성분에 더하여, 상기 제형은 또한 특정 유형의 제형에 대해 당업계에서 통상적인 기타 제제를 포함할 수 있음은 말할 것도 없고; 따라서, 예를 들어 경구 투여에 적합한 제형은 향미제를 포함할 수 있다.
식 I 의 화합물의 치료적 유효량은, 예를 들어 동물의 연령 및 체중, 치료가 요구되는 정확한 병태, 및 이의 중증도, 제형의 성질 및 투여 방법을 포함하는 다수의 인자에 따라 달라지며, 궁극적으로는 치료의 또는 치료 수의사에 의해 결정된다. 하지만, 본 발명에 따른 화합물의 유효량은 일반적으로 1 일 당 수용자 (포유동물) 체중의 0.1 내지 100 mg/kg, 특히 통상적으로는 1 일 당 체중의 1 내지 10 mg/kg 범위이다. 따라서, 체중이 70 kg 인 성체 포유동물에 대한 1 일 당 실제량은 통상적으로 70 내지 700 mg 이며, 이 양은 1 일 당 단일 투여량으로서 또는 통상적으로는 총 1 일 투여량이 동일해지도록 일련의 1 일 당 부분 투여량으로서 (예를 들어, 2, 3, 4, 5 또는 6 회) 투여될 수 있다. 이의 염 또는 용매화물 또는 생리학적 관능성 유도체의 유효량은, 본 발명에 따른 화합물 그 자체의 유효량의 분율로서 결정될 수 있다. 유사한 용량이 상기 언급된 기타 병태의 치료에 적합한 것으로 추정될 수 있다.
상기 유형의 조합된 치료는 각각의 치료 성분을 동시적, 연속적 또는 개별적으로 투여함으로써 달성될 수 있다. 상기 유형의 조합 생성물은 본 발명에 따른 화합물을 이용한다.
본 발명은 나아가 하나 이상의 식 I 의 화합물 및/또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체 및 입체이성질체, 및 이들의 모든 비율의 혼합물, 및 하나 이상의 추가 약제 활성 성분을 포함하는 약제에 관한 것이다.
본 발명은 또한 하기의 개별 팩으로 이루어진 세트 (키트) 에 관한 것이다:
(a) 유효량의 식 I 의 화합물 및/또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체 및 입체이성질체, 및 이들의 모든 비율의 혼합물, 및
(b) 유효량의 추가 약제 활성 성분.
상기 세트는 적합한 용기, 예컨대 박스, 개별 병, 백 (bag) 또는 앰플을 포함한다. 상기 세트는, 예를 들어 각각 유효량의 식 I 의 화합물 및/또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체 및 입체이성질체 및 이들의 모든 비율의 혼합물, 및 유효량의 용해된 또는 동결건조된 형태의 추가 약제 활성 성분을 함유하는 개별 앰플들을 포함할 수 있다.
본원에 사용된 바, 용어 "치료" 는, 장애 또는 질환과 관련된 증상을 부분적 또는 전제적으로 경감시키는 것, 또는 상기 증상의 추가 진전 또는 악화를 느리게 하거나 중단시키는 것, 또는 상기 질환 또는 장애의 발전 위험이 있는 개체에서 질환 또는 장애를 방지하거나 예방하는 것을 의미한다.
식 (I) 의 화합물과 관련된 용어 "유효량" 은, 장애 또는 질환과 관련된 증상을 부분적 또는 전제적으로 경감시키거나, 또는 상기 증상의 추가 진전 또는 악화를 느리게 하거나 중단시키거나, 또는 본원에 개시된 질환, 예컨대 염증성 병태, 면역학적 병태, 암 또는 대사적 병태를 갖거나 이의 발전 위험이 있는 개체에서 질환 또는 장애를 방지하거나 예방할 수 있는 양을 의미할 수 있다.
한 구현예에서, 식 (I) 의 화합물의 유효량은, 예를 들어 시험관내 또는 생체내에서, 세포 내 탄키라아제를 억제하는 양이다. 일부 구현예에서, 식 (I) 의 화합물의 유효량은 비(非)처리된 세포 내 탄키라아제의 활성과 비교하여, 세포 내 탄키라아제를 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 99% 억제한다. 예를 들어 약학적 조성물 내 식 (I) 의 화합물의 유효량은, 목적하는 효과를 발휘할 수준일 수 있다: 예를 들어, 경구 및 비경구 투여의 경우 모두 단위 투여량으로, 개체의 체중의 약 0.005 mg/kg 내지 개체의 체중의 약 10 mg/kg.
용도
본 발명의 화합물은 암, 다발성 경화증, 심혈관계 질환, 중추 신경계 손상 및 각종 형태의 염증의 치료에서, 포유동물, 특히 인간을 위한 약학적 활성 성분으로서 적합하다.
본 발명은 암, 다발성 경화증, 심혈관계 질환, 중추 신경계 손상 및 각종 형태의 염증의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조를 위한, 식 I 의 화합물 및/또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체 및 입체이성질체의 용도를 포함한다.
염증성 질환의 예에는, 류마티스성 관절염, 건선, 접촉성 피부염, 지연된 과민반응 등이 포함된다.
또한, 포유동물에서의 탄키라아제-유도성 질환 또는 탄키라아제-유도성 병태의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조를 위한, 식 I 의 화합물 및/또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체 및 입체이성질체의 용도가 포함되며, 이는 치료적 유효량의 본 발명에 따른 화합물을 상기와 같은 치료가 필요한 병든 포유동물에게 투여하는 방법에서의 용도이다. 치료적 양은 특정한 질환에 따라 달라지며, 이는 큰 어려움 없이 당업자에 의해 결정될 수 있다.
표현 "탄키라아제-유도성 질환 또는 병태" 는 하나 이상의 탄키라아제의 활성에 따른 병리학적 병태를 의미한다. 탄키라아제 활성과 관련된 질환에는, 암, 다발성 경화증, 심혈관계 질환, 중추 신경계 손상 및 각종 형태의 염증이 포함된다.
본 발명은 특히 탄키라아제의 억제, 조절 및/또는 조정 억제가 역할을 하는 질환의 치료에 사용되는 식 I 의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체 및 입체이성질체, 및 이들의 모든 비율의 혼합물에 관한 것이다.
본 발명은 특히 탄키라아제의 억제를 위하여 사용되는, 식 I 의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체 및 입체이성질체, 및 이들의 모든 비율의 혼합물에 관한 것이다.
본 발명은 특히 암, 다발성 경화증, 심혈관계 질환, 중추 신경계 손상 및 각종 형태의 염증의 치료에 사용되는, 식 I 의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체 및 입체이성질체, 및 이들의 모든 비율의 혼합물에 관한 것이다.
본 발명은 특히 유효량의 식 I 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체, 입체이성질체 또는 용매화물을, 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 것을 포함하는, 암, 다발성 경화증, 심혈관계 질환, 중추 신경계 손상 및 각종 형태의 염증의 치료 또는 예방 방법에 관한 것이다.
식 I 의 화합물이 치료 또는 예방에 유용한 대표적인 암에는, 비제한적으로, 머리, 목, 눈, 구강, 목구멍, 식도, 기관지, 후두, 인두, 흉부, 뼈, 폐, 결장, 직장, 위, 전립선, 방광, 자궁, 자궁경부, 유방, 난소, 고환 또는 기타 생식기, 피부, 갑상선, 혈액, 림프절, 신장, 간, 췌장, 뇌, 중추신경계 암, 고형 종양 및 혈인성 종양이 포함된다.
식 I 의 화합물이 치료 또는 예방에 유용한 대표적인 심혈관계 질환에는, 비제한적으로, 재협착증, 죽상동맥경화증 및 뇌졸중, 심근경색증, 심장, 폐, 내장, 신장, 간, 췌장, 비장 또는 뇌에 대한 허혈성 손상과 같은 이의 결과들이 포함된다.
본 발명은 치료적 유효량의 식 I 의 화합물을 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 것을 포함하는, 증식성, 자가면역성, 항염증성 또는 감염성 질환 장애의 치료 방법에 관한 것이다.
바람직하게는, 본 발명은 질환이 암인 방법에 관한 것이다.
특히 바람직하게는, 본 발명은 질환이 암이고, 투여가 하나 이상의 기타 활성 약제의 투여와 동시적, 순차적 또는 교대로 투여되는 것인 방법에 관한 것이다.
상기 개시된 식 I 의 화합물은 항암제를 비롯한 기타 공지된 치료제와 조합으로 투여될 수 있다. 본원에서 사용된 바, 용어 "항암제" 는 암의 치료를 위해, 암을 앓는 환자에게 투여되는 임의의 제제에 관한 것이다.
본원에 기재된 항암 치료는 단독 치료법으로서 적용되거나, 본 발명의 화합물에 더하여, 통상의 수술법 또는 방사선요법 또는 화학요법을 포함할 수 있다. 상기와 같은 화학요법에는, 하기 항종양제의 범주 중 하나 이상이 포함될 수 있다:
(i) 의학적 종양학에서 사용되는 바와 같은 항증식성/항종양성/DNA-손상제 및 이들의 조합물, 예컨대 알킬화제 (예를 들어 시스플라틴 (cis-platin), 카르보플라틴 (carboplatin), 시클로포스파미드 (cyclophosphamide), 질소 머스타드 (nitrogen mustard), 멜팔란 (melphalan), 클로람부실 (chloroambucil), 부설판 (busulphan) 및 니트로소우레아 (nitrosourea)); 항대사물질 (예를 들어 항엽산제, 예컨대 5-플루오로우라실 및 테가푸르 (tegafur) 와 같은 플루오로피리미딘, 랄티트렉세드 (raltitrexed), 메토트렉세이트 (methotrexate), 시토신 아라비노시드 (cytosine arabinoside), 히드록시우레아 및 젬시타빈 (gemcitabine)); 항종양 항생제 (예를 들어 안트라사이클린 (anthracycline), 예컨대 아드리아마이신 (adriamycin), 블레오마이신 (bleomycin), 독소루비신 (doxorubicin), 다우노마이신 (daunomycin), 에피루비신 (epirubicin), 이다루비신 (idarubicin), 미토마이신-C (mitomycin-C), 닥티노마이신 (dactinomycin) 및 미트라마이신 (mithramycin)); 항유사분열제 (예를 들어 빈크리스틴 (vincristine), 빈블라스틴 (vinblastine), 빈데신 (vindesine) 및 비노렐빈 (vinorelbine) 과 같은 빈카 알칼로이드 (vinca alkaloids), 및 탁솔 (taxol) 및 탁소테레 (taxotere) 와 같은 탁소이드 (taxoid)); 토포이소머라아제 (topoisomerase) 억제제 (예를 들어 에피포도필로톡신 (epipodophyllotoxin), 예컨대 에토포시드 (etoposide) 및 테니포시드 (teniposide), 암사크린 (amsacrine), 토포테칸 (topotecan), 이리노테칸 (irinotecan) 및 캄프토테신 (camptothecin)) 및 세포분화제 (예를 들어 모든 트랜스-레티노산, 13-시스-레티노산 및 펜레티니드 (fenretinide));
(ii) 세포분열 억제제 (cytostatic agent), 예컨대 항에스트로겐 (antioestrogen) (예를 들어 타목시펜 (tamoxifen), 토레미펜 (toremifene), 랄록시펜 (raloxifene), 드롤록시펜 (droloxifene) 및 요오독시펜 (iodoxyfene)), 에스트로겐 수용체 하향조절제 (downregulator) (예를 들어 풀베스트란트 (fulvestrant)), 항안드로겐 (antiandrogen) (예를 들어 비칼루타미드 (bicalutamide), 플루타미드 (flutamide), 닐루타미드 (nilutamide) 및 시프로테론 아세테이트 (cyproterone 아세테이트)), LHRH 길항제 또는 LHRH 작용제 (예를 들어 고세렐린 (goserelin), 류프로렐린 (leuprorelin) 및 부세렐린 (buserelin)), 프로게스테론 (예를 들어 메가스트롤 아세테이트 (megestrol 아세테이트)), 아로마타아제 (aromatase) 억제제 (예를 들어 아나스트로졸 (anastrozole), 레트로졸 (letrozole), 보라졸 (vorazole) 및 엑세메스탄 (exemestane)) 및 5α-리덕타아제 억제제, 예컨대 피나스테리드 (finasteride);
(iii) 암 세포 침입 억제제 (예를 들어 마리마스타트 (marimastat) 와 같은 메탈로-프로테이나아제 (metallo-proteinase) 억제제 및 우로키나아제 (urokinase) 플라스미노겐 활성제 수용체 기능의 억제제);
(iv) 성장 인자 기능의 억제제, 예를 들어 상기와 같은 억제제에는, 성장 인자 항체, 성장 인자 수용체 항체 (예를 들어 항-erbb2 항체 트라스투주마브 (trastuzumab) [HerceptinTM] 및 항-erbb1 항체 세툭시마브 (cetuximab) [C225]), 파르네실 트랜스퍼라아제 (farnesyl transferase) 억제제, 티로신 키나아제 억제제 및 세린/트레오닌 키나아제 억제제, 예를 들어 상피 성장 인자 패밀리의 억제제 (예를 들어 EGFR 패밀리 티로신 키나아제 억제제, 예컨대 N-(3-클로로-4-플루오로페닐)-7-메톡시-6-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린-4-아민 (제피티니브 (gefitinib), AZD1839), N-(3-에티닐페닐)-6,7-비스(2-메톡시에톡시)퀴나졸린-4-아민 (엘로티니브 (erlotinib), OSI-774) 및 6-아크릴아미도-N-(3-클로로-4-플루오로페닐)-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린-4-아민 (CI 1033)), 예를 들어 혈소판-유래 성장 인자 패밀리의 억제제 및 예를 들어 간세포 성장 인자 패밀리의 억제제가 포함됨;
(v) 항혈관형성제, 예컨대 혈관 내피 성장 인자의 작용을 억제하는 것들 (예를 들어 항혈관 내피 세포 성장 인자 항체 베바시주마브 (bevacizumab) [AvastinTM], 공개 국제 특허 출원 WO 97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 및 WO 98/13354 에 개시된 화합물) 및 기타 메카니즘에 의해 작용하는 화합물 (예를 들어 리모니드 (linomide), 인테그린 αvβ3 기능의 억제제 및 앤지오스타틴 (angiostatin));
(vi) 혈관-손상제, 예컨대 콤브레타스타틴 A4 (combretastatin A4) 및 국제 특허 출원 WO 99/02166, WO 00/40529, WO 00/41669, WO 01/92224, WO 02/04434 및 WO 02/08213 에 개시된 화합물;
(vii) 안티센스 (antisense) 치료법, 예를 들어 상기 열거된 표적에 대하여 작용하는 것들, 예컨대 ISIS 2503, 항-Ras 안티센스;
(viii) 유전자 치료 접근법, 예를 들어 비정상 유전자, 예컨대 비정상 p53 또는 비정상 BRCA1 또는 BRCA2 의 대체를 위한 접근법, GDEPT (유전자-유도성 효소 전구약물 치료법) 접근법, 예컨대 시토신 데아미나아제 (deaminase), 티미딘 키나아제 또는 박테리아 니트로리덕타아제 효소를 사용하는 것들 및 화학요법 또는 방사선요법에 대한 환자의 내성을 증가시키는 접근법, 예컨대 다중약물 저항성 유전자 치료법; 및
(ix) 면역치료 접근법, 예를 들어 환자 종양 세포의 면역원성을 증가시키는 세포외 및 생체내 접근법, 예컨대 인터루킨 (interleukin) 2, 인터루킨 4 또는 과립구 대식세포 집락 자극 인자와 같은 사이토카인을 이용한 트랜스펙션, T-세포 아네르기 (anergy) 를 감소시키는 접근법, 트랜스펙션된 면역 세포, 예컨대 사이토카인-트랜스펙션된 수지상 세포를 사용하는 접근법, 사이토카인-트랜스펙션된 종양 세포주를 사용하는 접근법, 및 항-유전자형 항체를 사용하는 접근법.
하기 표 1 의 약제들은 바람직하게는, 전적으로는 아니지만, 식 I 의 화합물과 조합된다.
표 1.
Figure pct00008
Figure pct00009
Figure pct00010
Figure pct00011
Figure pct00012
Figure pct00013
Figure pct00014
하기 약어는 각각 하기 정의를 의미한다:
aq (수성), h (시간), g (그램), L (리터), mg (밀리그램), MHz (메가헤르츠), min. (분), mm (밀리미터), mmol (밀리몰), mM (밀리몰농도), m.p. (용융점), eq (당량), mL (밀리리터), μL (마이크로리터), ACN (아세토니트릴), AcOH (아세트산), CDCl3 (중수소화 클로로포름), CD3OD (중수소화 메탄올), CH3CN (아세토니트릴), c-hex (시클로헥산), DCC (디시클로헥실 카르보디이미드), DCM (디클로로메탄), DIC (디이소프로필 카르보디이미드), DIEA (디이소프로필에틸아민), DMF (디메틸포름아미드), DMSO (디메틸술폭시드), DMSO-d6 (중수소화 디메틸술폭시드), EDC (1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드), ESI (전자 분무 이온화), EtOAc (에틸 아세테이트), Et2O (디에틸 에테르), EtOH (에탄올), HATU (디메틸아미노-([1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피리딘-3-일옥시)메틸렌]디메틸암모늄 헥사플루오로포스페이트), HPLC (고성능 액체 크로마토그래피), i-PrOH (2-프로판올), K2CO3 (탄산칼륨), LC (액체 크로마토그래피), MeOH (메탄올), MgSO4 (황산마그네슘), MS (질량 분석기), MTBE (메틸 tert-부틸 에테르), NaHCO3 (탄산수소나트륨), NaBH4 (수소화붕소나트륨), NMM (N-메틸 모르폴린), NMR (핵 자기 공명), PyBOP (벤조트리아졸-1-일-옥시-트리스-피롤리디노-포스포늄 헥사플루오로포스페이트), RT (실온), Rt (체류 시간), SPE (고체상 추출), TBTU (2-(1-H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 테트라플루오로 보레이트), TEA (트리에틸아민), TFA (트리플루오로아세트산), THF (테트라히드로푸란), TLC (박막 크로마토그래피), UV (자외선).
시험관내 검정의 설명
약어:
GST = 글루타티온-S-트랜스퍼라아제
FRET = 형광 공명 에너지 전이
HTRF® = (균일 시간 분해 형광 (homogenous time resolved fluorescence))
HEPES = 4-(2-히드록시에틸)-1-피페라진 에탄술폰산 완충액
DTT = 디티오트레이톨
BSA = 소 혈청 알부민
CHAPS = 세제;
CHAPS = 3-[(3-콜라미도프로필)디메틸암모니오]-1-프로판술포네이트
스트렙타비딘-XLent® 는, 커플링 조건이 일부 검정, 특히 고민감성이 요구되는 검정을 위해 증진된 성능을 갖는 컨쥬게이트가 수득되도록 최적화된, 고급 스트렙타비딘-XL665 컨쥬게이트이다.
탄키라아제 1 및 2 의 생화학적 활성 시험: 자가파르실화 (autoparsylation) 검정
자가파르실화 검정은 2 단계로 진행된다: GST-태그된 탄키라아제-1, resp 탄키라아제-2 가 비오틴화 (biotinylated) ADP-리보오스를 보조 기질로서의 비오틴화 NAD 로부터 그 자체로 이동시키는 효소 반응 및 효소의 GST 태그에 결합된 크립테이트 (cryptate) 라벨된 항-GST 와 비오틴-파르실화 잔기에 결합된 Xlent® 라벨된-스트렙타비딘 사이의 시간 분해 FRET 가 분석되는 검출 반응. 자가파르실화 활성은 HTRF 신호의 증가를 통해 직접적으로 검출가능하다.
자가파르실화 검정은 그라이너 (Greiner) 저용량 nb 384-웰 마이크로타이터 플레이트 내에서 384-웰 HTRF® (Cisbio, Codolet, France) 검정 포맷으로 수행하며, 이는 고속처리탐색 (high throughput screen) 을 위해 사용된다. 250 nM GST-태그된 탄키라아제-1 (1023-1327 aa), 각각 약 250 nM GST-태그된 탄키라아제-2 (873-1166 aa) 및 보조 기질로서 5 μM bio-NAD (Biolog, Life science Inst., Bremen, Germany) 를 총 부피 5 μl (50 mM HEPES, 4 mM Mg-클로라이드, 0.05% Pluronic F-68, 1.4 mM DTT, 0.5% DMSO, pH 7.7) 로 시험 화합물 (10 배 희석 농도) 의 부재 또는 존재 하에서, 30℃ 에서 90 분 동안 인큐베이션한다. 상기 반응을 1 μl 50 mM EDTA 용액의 첨가에 의해 중단시킨다. 2 μl 의 검출 용액 (50 mM HEPES, 800 mM KF, 0.1% BSA, 20 mM EDTA, 0.1% CHAPS, pH 7.0 중의, 1.6 μM SA-Xlent® (Cisbio, Codolet, France), 7.4 nM Anti-GST-K® (Eu-라벨된 항-GST, Cisbio, Codolet, France)) 을 첨가한다. 실온에서 1 시간 인큐베이션 후, HTRF 를 여기 파장 340 nm (레이저 모드) 및 방출 파장 615 nm 및 665 nm 에서, Envision 다중모드 판독기 (Perkin Elmer LAS Germany GmbH) 를 이용하여 측정한다. 방출 신호의 비가 측정된다. 사용된 전체 값 (full value) 은 무(無)억제제 반응이다. 사용된 약리학적 영점 값 (pharmacological zero value) 은 최종 농도 5 μM 로의 XAV-939 (Tocris) 이다. 억제 값 (IC50) 은 GeneData 사의 프로그램 Symyx Assay Explorer® 또는 Condosseo® 를 사용하여 측정한다.
탄키라아제의 세포 억제 측정
탄키라아제가 Axin2 의 세포 수준을 조절하는 것으로 기재되어 있기 때문에 (Huang et al., 2009; Nature), Axin2 수준의 증가는 Luminex 기반 검정에서 탄키라아제의 세포 억제 측정용 판독값으로 사용된다.
결장 암종 세포주 DLD1 의 세포를 웰 당 1.5x104 세포로 96 웰 내에 플레이팅한다. 다음날, 0.3% 의 최종 DMSO 농도로, 삼중으로, 7 단계로의 시험 화합물의 순차적 희석으로 세포를 처리한다. 24 시간 후, 세포를 용해 (lysis) 완충액 (20mM Tris/HCl pH 8.0, 150 mM NaCl, 1% NP40, 10% 글리세롤) 중에 용해시키고, 용해물을 96 웰 필터 플레이트 (0.65μm) 를 통해 원심분리하여 제거한다. Axin2 단백질을 형광 카르복시비드에 결합된 단일클론 항-Axin2 항체 (R&D Systems #MAB6078) 와 함께 인큐베이션하여 세포 용해물로부터 단리한다. 그 후, 결합된 Axin2 를 다중클론 항-Axin2 항체 (Cell Signaling #2151) 및 적절한 PE-형광 2차 항체를 이용하여 특이적으로 검출한다. 단리된 Axin2 단백질의 양을 웰 당 100 개의 건수 (event) 를 계수함으로써, 제조사의 지침에 따라 Luminex200 기계 (Luminex Corporation) 로 측정한다. 시험 화합물에 의한 탄키라아제의 억제는 보다 높은 수준의 Axin2 를 야기하며, 이는 검출가능한 형광의 증가와 직접적인 상관관계가 있다. 대조군으로서, 세포를 용매 단독 (중립 대조군) 및 탄키라아제 기준 억제제 IWR-2 (3E-06 M) (이는 Axin2 의 최대 증가에 대한 대조군으로서 언급됨) 로 처리한다. 분석을 위하여, 수득된 데이터를 비처리된 용매 대조군에 대하여 정규화하고, Assay Explorer 소프트웨어 (Accelrys) 를 사용하여 EC 50 값의 측정치에 대하여 피팅한다.
PARP1 검정의 설명
PARP-1 의 생화학적 활성 시험: 자가파르실화 검정
자가파르실화 검정은 2 단계로 진행된다: His-태그된 Parp-1 이 비오틴화 ADP-리보오스/ADP-리보오스를 보조 기질로서의 비오틴화 NAD/NAD 로부터 그 자체로 이동시키는 효소 반응 및 효소의 His 태그에 결합된 크립테이트 라벨된 항-His 항체와 비오틴-파르실화 잔기에 결합된 Xlent® 라벨된-스트렙타비딘 사이의 시간 분해 FRET 가 분석되는 검출 반응. 자가파르실화 활성은 HTRF 신호의 증가를 통해 직접적으로 검출가능하다.
자가파르실화 검정은 그라이너 저용량 nb 384-웰 마이크로타이터 플레이트 내에서 384-웰 HTRF® (Cisbio, Codolet, France) 검정 포맷으로 수행한다. 35 nM His-태그된 Parp-1 (인간, 재조합, Enzo Life Sciences GmbH, Lorrach, Germany) 과 125 nM bio-NAD (Biolog, Life science Inst., Bremen, Germany) 및 보조 기질로서 800 nM NAD 의 혼합물을 총 부피 6 μl (100 mM Tris/HCl, 4 mM Mg-클로라이드, 0.01% IGEPAL® CA630, 1mM DTT, 0.5% DMSO, pH 8, 13 ng/μl 활성화 DNA (BPS Bioscience, San Diego, US)) 로 시험 화합물 (10 배 희석 농도) 의 부재 또는 존재 하에서, 23℃ 에서 150 분 동안 인큐베이션한다. 상기 반응을 4 μl 의 중단/검출 용액 (50 mM HEPES, 400 mM KF, 0.1% BSA, 20 mM EDTA, pH 7.0 중의, 70 nM SA-Xlent® (Cisbio, Codolet, France), 2.5 nM Anti-His-K® (Eu-라벨된 항-His, Cisbio, Codolet, France)) 의 첨가에 의해 중단시킨다. 실온에서 1 시간 인큐베이션 후, HTRF 를 여기 파장 340 nm (레이저 모드) 및 방출 파장 615 nm 및 665 nm 에서, Envision 다중모드 판독기 (Perkin Elmer LAS Germany GmbH) 를 이용하여 측정한다. 방출 신호의 비가 측정된다. 사용된 전체 값은 무(無)억제제 반응이다. 사용된 약리학적 영점 값은 최종 농도 1 μM 로의 Olaparib (LClabs, Woburn, US) 이다. 억제 값은 (IC50) 은 GeneData 사의 프로그램 Symyx Assay Explorer® 또는 Condosseo® 를 사용하여 측정한다.
TNKS1 및 TNKS2 ELISA 검정의 설명
TNKS 1 및 2 의 생화학적 활성 시험: 활성 ELISA (자가파르실화 검정)
TNKS 1 및 2 의 자가파르실화 활성의 분석을 위하여, 하기와 같이 활성 ELISA 를 수행한다: 제 1 단계에서, GST 태그된 TNKS 를 글루타티온 코팅된 플레이트 상에서 포획한다. 그 후, 비오틴화 NAD 를 이용한 활성 검정을 상기 화합물의 존재/부재 하에서 수행한다. 효소 반응 중, GST 태그된 TNKS 는 비오틴화 ADP-리보오스를 보조 기질로서의 비오틴화 NAD 로부터 그 자체로 이동시킨다. 검출을 위하여, 비오틴화 TNKS 에 결합된 스트렙타비딘-HRP 컨쥬게이트를 첨가하고, 이를 플레이트에 포획한다. 비오틴화된 각각의 자가파르실화 TNKS 의 양을 HRP 에 대한 발광 기질을 이용하여 측정한다. 발광 신호의 수준은 자가파르실화 TNKS 의 양 및 따라서 TNKS 의 활성과 직접적인 상관관계가 있다.
활성 ELISA 는 384 웰 글루타티온 코팅된 마이크로타이터 플레이트 (Express capture Glutathione coated plate, Biocat, Heidelberg, Germany) 에서 수행한다. 상기 플레이트를 PBS 를 이용하여 사전평형화 (pre-equilibrated) 시킨다. 그 후, 상기 플레이트를 검정 완충액 (50 mM HEPES, 4 mM Mg-클로라이드, 0.05% Pluronic F-68, 2 mM DTT, pH 7.7) 중에서, 50 μl 20 ng/웰 GST-태그된 Tnks-1 (1023-1327 aa, 내부에서 제조됨), 각각 GST-태그된 Tnks-2 (873-1166 aa, 내부에서 제조됨) 를 이용하여, 4℃ 에서 밤새 인큐베이션한다. 상기 플레이트를 PBS-Tween-20 으로 3 회 세정한다. 상기 웰을 50 μl 블로킹 완충액 (PBS, 0.05% Tween-20, 0.5% BSA) 을 이용하여 실온에서 20 분 동안 인큐베이션하여 블로킹한다. 그 후, 상기 플레이트를 PBS-Tween-20 로 3 회 세정하였다. 상기 효소 반응을 50 μl 반응 용액 (50 mM HEPES, 4 mM Mg-클로라이드, 0.05% Pluronic F-68, 1.4 mM DTT, 0.5% DMSO, pH 7.7) 중에서, 보조 기질로서 10 μM bio-NAD (Biolog, Life science Inst., Bremen, Germany) 를 이용하여, 시험 화합물 (10 개의 희석 농도) 의 존재 또는 부재 하에서, 30℃ 에서 1 시간 동안 수행한다. 상기 반응을 PBS-Tween-20 으로 3 회 세정하여 중단시킨다. 검출을 위하여, PBS/0.05% Tween-20/0.01% BSA 중의 50 μl 의 20ng/μl 스트렙타비딘, HRP 컨쥬게이트 (MoBiTec, Gottingen, Germany) 를 첨가하고, 상기 플레이트를 실온에서 30 분 동안 인큐베이션한다. PBS-Tween-20 으로 3 회 세정한 후, 50 μl 의 SuperSignal ELISA Femto Maximum 민감도 기질 용액 (ThermoFisherScientific (Pierce), Bonn, Germany) 을 첨가한다. 실온에서 1 분 인큐베이션 후, 발광 신호를 Envision 다중모드 판독기 (Perkin Elmer LAS Germany GmbH) 를 이용하여 700 nm 에서 측정한다. 사용된 전체 값은 무억제제 반응이다. 사용된 약리학적 영점 값은 최종 농도 5 μM 로의 XAV-939 (Tocris) 이다. 억제 값 (IC50) 은 GeneData 사의 프로그램 Symyx Assay Explorer® 또는 Condosseo® 를 사용하여 측정한다.
상기 및 하기에서, 모든 온도는 ℃ 로 표시된다. 하기 실시예에서, "통상의 후처리" 는 하기를 의미한다: 필요한 경우 물을 첨가하고, 필요한 경우 최종 생성물의 조성에 따라 pH 를 2 내지 10 으로 조정하고, 혼합물을 에틸 아세테이트 또는 디클로로메탄으로 추출하고, 상을 분리하고, 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발시키고, 잔류물을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피로 및/또는 결정화로 정제한다. 실리카 겔 상의 Rf 값; 용리액: 에틸 아세테이트/메탄올 9:1.
HPLC/MS 조건 A
컬럼: Chromolith Performance ROD RP-18e, 100 x 3 mm2
구배: 1.8 분 내 A:B = 99:1 → 0:100
유량: 2.0 ml/분
용리액 A: 물 + 0.05% 포름산
용리액 B: 아세토니트릴 + 0.04% 포름산
파장: 220 nm
질량 분석법: 양성 (positive) 모드
HPLC/MS 조건 B
컬럼: Chromolith Performance ROD RP-18e, 100 x 3 mm2
구배: 3.5 분 내 A:B = 99:1 → 0:100
유량: 2.0 ml/분
용리액 A: 물 + 0.05% 포름산
용리액 B: 아세토니트릴 + 0.04% 포름산
파장: 220 nm
질량 분석법: 양성 모드
HPLC/MS 조건 C
컬럼: Chromolith PerformanceROD RP-18e, 50 x 4.6　mm2
구배: 2.8 분 내 A:B = 96:4 → 0:100
유량: 2.40　ml/분
용리액 A: 물 + 0.05% 포름산
용리액 B: 아세토니트릴 + 0.04% 포름산
파장: 220 nm
질량 분석법: 양성 모드
1H NMR 은 내부 기준으로서 중수소화 용매의 잔류 신호를 사용하여, Bruker DPX-300, DRX-400 또는 AVII-400 분광계 상에서 기록하였다. 화학적 이동 (δ) 은 잔류 용매 신호 (DMSO-d6 중에서 1H NMR 에 대하여 δ = 2.49 ppm) 에 비례하여 ppm 으로 기록된다. 1H NMR 데이터는 하기와 같이 기록된다: 화학적 이동 (다중도, 커플링 상수 및 수소의 수). 다중도는 하기와 같이 축약된다: s (단일항), d (이중항), t (삼중항), q (사중항), m (다중항), br (브로드 (broad)).
마이크로파 화학은 Personal Chemistry 사의 단일 모드 마이크로파 반응기 EmrysTM Optimiser 상에서 수행하였다.
실시예 1
6-플루오로-2-[4-(1-히드록시-1-메틸-에틸)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A1") 의 합성
Figure pct00015
N,N-디메틸아세트아미드 (13 ml) 중 2-아미노-5-플루오로벤즈아미드 (1.00 g, 6.49 mmol), 메틸 4-포르밀벤조에이트 (1.06 g, 6.49 mmol) 및 나트륨 디술파이트 (1.26 g, 6.62 mmol) 의 현탁액을 150℃ 로 가열하고 상기 온도에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온이 되도록 하고 빙수에 부었다. 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하고, 물로 세척하고 진공 하 건조시켜 4-(6-플루오로-4-옥소-3,4-디히드로-퀴나졸린-2-일)-벤조산 메틸 에스테르를 황색 고체로서 수득하였다; HPLC/MS 2.08 분 (C), [M+H] 299.
THF (20 ml) 중 4-(6-플루오로-4-옥소-3,4-디히드로-퀴나졸린-2-일)-벤조산 메틸 에스테르 (1.53 g, 5.13 mmol) 의 현탁액에 염화세륨(III) (1.33 g, 5.38 mmol) 을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 이후 메틸마그네슘 클로라이드 (THF 중 20% 용액, 7.54 ml, 20.5 mmol) 를 첨가하고 상기 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 더 교반하였다. 반응 혼합물을 THF 로 희석하고 포화 염화나트륨 용액을 조심스럽게 첨가하였다. 혼합물을 철저히 교반하고 흡입 여과하였다. 여과물의 유기상을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고 증발시켰다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄을 용리액으로서 사용하여 실어리카 겔 컬럼 상에서 크로마토그래피 처리하여, 6-플루오로-2-[4-(1-히드록시-1-메틸-에틸)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온을 백색 결정질 고체로서 수득하였다; HPLC/MS 2.22 분 (B), [M+H] 299.
Figure pct00016
하기 화합물을 유사하게 제조하였다:
2-[4-(1-히드록시-1-메틸-에틸)-페닐]-8-메톡시-3H-퀴나졸린-4-온 ("A2")
Figure pct00017
HPLC/MS 1.61 분 (C), [M+H] 311;
Figure pct00018
8-플루오로-2-[4-(1-히드록시-1-메틸-에틸)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A3")
Figure pct00019
HPLC/MS 2.11 분 (B), [M+H] 299;
Figure pct00020
5-플루오로-2-[4-(1-히드록시-1-메틸-에틸)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A4")
Figure pct00021
HPLC/MS 1.81 분 (C), [M+H] 299;
Figure pct00022
6-클로로-2-[4-(1-히드록시-1-메틸-에틸)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A5")
Figure pct00023
HPLC/MS 2.44 분 (B), [M+H] 315;
Figure pct00024
Figure pct00025
8-클로로-2-[4-(1-히드록시-1-메틸-에틸)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A6")
Figure pct00026
Figure pct00027
HPLC/MS 2.50 분 (B), [M+H] 315;
6-플루오로-2-[5-(1-히드록시-1-메틸-에틸)-2-피리딜]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A13")
Figure pct00028
HPLC/MS 2.30 분 (B), [M+H] 300;
Figure pct00029
2-[4-(1-에틸-1-히드록시-프로필)페닐]-6-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온 ("A14")
Figure pct00030
HPLC/MS 2.62 분 (B), [M+H] 327;
Figure pct00031
실시예 2
6-플루오로-2-{4-[1-(2-히드록시-에톡시)-1-메틸-에틸]-페닐}-3H-퀴나졸린-4-온 ("A7") 의 합성
Figure pct00032
에탄-1,2-디올 (2 ml) 중 6-플루오로-2-[4-(1-히드록시-1-메틸-에틸)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 (149 mg, 0.50 mmol) 의 현탁액에 톨루엔-4-술폰산 일수화물 (114 mg, 0.60 mmol) 을 첨가하였다. 반응 혼합물을 3 시간 동안 주위 온도에서 교반하였다. 현탁액을 이후 80℃ 로 가열하고 생성된 맑은 용액을 상기 온도에서 5 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물 실온으로 냉각시키고 물을 첨가하였다. 생성된 침전물을 여과 제거하고 물로 세척하였다. 잔류물을 시클로헥산/에틸 아세테이트를 용리액으로서 사용하여 실리카 겔 컬럼 상에서 크로마토그래피 처리하여, 6-플루오로-2-{4-[1-(2-히드록시-에톡시)-1-메틸-에틸]-페닐}-3H-퀴나졸린-4-온을 백색 결정으로서 수득하였다; HPLC/MS 2.28 분 (B), [M+H] 343;
Figure pct00033
하기 화합물을 유사하게 제조하였다:
6-플루오로-2-{4-[1-(2-메톡시-에톡시)-1-메틸-에틸]-페닐}-3H-퀴나졸린-4-온 ("A8")
Figure pct00034
HPLC/MS 2.61 분 (B), [M+H] 357;
Figure pct00035
6-플루오로-2-{4-[1-(2-히드록시-에톡시)-1-메틸-에틸]-페닐}-8-메틸-3H-퀴나졸린-4-온 ("A21")
Figure pct00036
HPLC/MS 1.90 분 (A), [M+H] 327;
Figure pct00037
실시예 3
2-(4-tert-부틸-페닐)-6-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온 ("A9") 의 합성
Figure pct00038
N,N-디메틸아세트아미드 (2 ml) 중 2-아미노-5-플루오로벤즈아미드 (154 mg, 1.0 mmol), 4-tert-부틸벤즈알데히드 (162 mg, 1.0 mmol) 및 나트륨 디술파이트 (194 mg, 1.02 mmol) 의 현탁액을 150℃ 로 가열하고 상기 온도에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온이 되도록 하고 빙수에 부었다. 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하고, 물로 세척하고 진공 하 건조시켜 2-(4-tert-부틸-페닐)-6-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온을 옅은 회색 고체로서 수득하였다;
HPLC/MS 3.10 분 (B), [M+H] 297;
Figure pct00039
하기 화합물을 유사하게 제조하였다:
6-플루오로-2-[4-(4-메틸-피페라진-1-일)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A10")
Figure pct00040
HPLC/MS 1.67 분 (B), [M+H] 339;
Figure pct00041
6-플루오로-2-(4-이소프로필-페닐)-3H-퀴나졸린-4-온 ("A22")
Figure pct00042
HPLC/MS 2.99 분 (B), [M+H] 283;
Figure pct00043
실시예 4
6-플루오로-2-[4-(2-메틸테트라히드로푸란-2-일)페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A15") 의 합성
Figure pct00044
2 번째 단계를 [M. McConville et al., Org. Biomol. Chem., 2010, 8, 5614 - 5619] 에 따라 실행하였다.
실시예 5
6-플루오로-2-[4-(1-히드록시시클로펜틸)페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A16") 의 합성
Figure pct00045
THF (5.0 ml) 중 2-(4-브로모페닐)-[1,3]디옥솔란 (1.15 g, 5.00 mmol) 의 용액을 55℃ 에서 THF (5 ml) 중 요오드 결정 및 마그네슘 터닝 (turning) (146 mg, 6.0 mmol) 에 적가하였다. 혼합물을 1 시간 동안 55℃ 에서 교반하였다. 이후 THF (5 ml) 중 시클로펜타논 (465 μl, 5.25 mmol) 의 용액을 적가하고 혼합물을 1 시간 더 55℃ 에서 교반하였다. 반응 혼합물을 THF 로 희석하고, 1 N HCl (4 ml) 로 산성화하고 염수로 3 회 세척하였다. 유기상을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 건조되도록 증발시켰다. 잔류물을 시클로헥산/에틸 아세테이트를 용리액으로서 사용하여 실리카 겔 컬럼 상에서 크로마토그래피 처리하여, 1-(4-[1,3]디옥솔란-2-일-페닐)-시클로펜탄올을 황색 오일로서 수득하였다; HPLC/MS 1.71 분 (A), [M+H] 235.
N,N-디메틸아세트아미드 (2 ml) 중 2-아미노-5-플루오로벤즈아미드 (135 mg, 0.88 mmol), 1-(4-[1,3]디옥솔란-2-일-페닐)-시클로펜탄올 (206 mg, 0.88 mmol) 및 나트륨 디술파이트 (170 mg, 0.89 mmol) 의 현탁액을 150℃ 로 가열하고 상기 온도에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온이 되도록 하고 빙수에 부었다. 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하고 물로 세척하였다. 이를 메탄올/디클로로메탄을 용리액으로서 사용하여 실리카 겔 컬럼 상에서 크로마토그래피 처리하여, 6-플루오로-2-[4-(1-히드록시-시클로펜틸)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온을 백색 고체로서 수득하였다; HPLC/MS 1.80 분 (A), [M+H] 325;
Figure pct00046
하기 화합물을 유사하게 제조하였다:
6-플루오로-2-[4-(3-히드록시옥세탄-3-일)페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A17")
Figure pct00047
실시예 6
2-[4-[1-(2-아미노에톡시)-1-메틸-에틸]페닐]-6-플루오로-3H-퀴나졸린-4-온 ("A18") 의 합성
Figure pct00048
실시예 7
6-플루오로-2-[4-(4-피페리딜)페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A19") 및 6-플루오로-2-[4-(1-메틸-4-피페리딜)페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A20") 의 합성
Figure pct00049
실시예 8
6,8-디플루오로-2-[4-(1-히드록시-1-메틸-에틸)페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A11") 의 합성
Figure pct00050
N-메틸-피롤리돈 (1 ml) 중 2-아미노-3,5-디플루오로-벤즈아미드 (86.2 mg, 0.50 mmol), 메틸 4-포르밀벤조에이트 (82.1 mg, 0.50 mmol) 및 나트륨 디술파이트 (97 mg, 0.51 mmol) 의 용액을 150℃ 로 가열하고 상기 온도에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온이 되도록 하고 빙수에 부었다. 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하고, 물로 세척하고 진공 하 건조시켜 4-(6,8-디플루오로-4-옥소-3,4-디히드로-퀴나졸린-2-일)-벤조산 메틸 에스테르를 갈색 고체로서 수득하였다; HPLC/MS 1.88 분 (A), [M+H] 316.
THF (20 ml) 중 4-(6,8-디플루오로-4-옥소-3,4-디히드로-퀴나졸린-2-일)-벤조산 메틸 에스테르 (152 mg, 0.48 mmol) 의 현탁액에 염화세륨(III) (130 mg, 0.53 mmol) 을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 이후 메틸마그네슘 클로라이드 (THF 중 20% 용액, 671 μl, 2.01 mmol) 를 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 20 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 THF 로 희석하고 포화 염화나트륨 용액을 조심스럽게 첨가하였다. 혼합물을 철저히 교반하고 흡입 여과하였다. 여과물의 유기상을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고 증발시켰다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄을 용리액으로서 사용하여 실리카 겔 컬럼 상에서 크로마토그래피 처리하여, 6,8-디플루오로-2-[4-(1-히드록시-1-메틸-에틸)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온을 백색 분말로서 수득하였다; HPLC/MS 2.37 분 (B), [M+H] 317;
Figure pct00051
하기 화합물을 유사하게 제조하였다:
5,6-디플루오로-2-[4-(1-히드록시-1-메틸-에틸)페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A12")
Figure pct00052
HPLC/MS 2.28 분 (B), [M+H] 317;
Figure pct00053
5-클로로-2-[4-(1-히드록시-1-메틸-에틸)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A23")
Figure pct00054
HPLC/MS 2.33 분 (B), [M+H] 315;
Figure pct00055
2-[4-(1-히드록시-1-메틸-에틸)-페닐]-8-메틸-3H-퀴나졸린-4-온 ("A24")
Figure pct00056
HPLC/MS 2.52 분 (B), [M+H] 295;
Figure pct00057
6-플루오로-2-[4-(1-히드록시-1-메틸-에틸)-페닐]-8-메틸-3H-퀴나졸린-4-온 ("A25")
Figure pct00058
HPLC/MS 1.89 분 (A), [M+H] 313;
Figure pct00059
5,6,8-트리플루오로-2-[4-(1-히드록시-1-메틸-에틸)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A26")
Figure pct00060
HPLC/MS 2.39 분 (B), [M+H] 335;
Figure pct00061
5,8-디플루오로-2-[4-(1-히드록시-1-메틸-에틸)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A27")
Figure pct00062
HPLC/MS 1.68 분 (A), [M+H] 317;
Figure pct00063
Figure pct00064
실시예 9
6-플루오로-8-메틸-2-[4-(4-메틸-피페라진-1-일)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A28") 의 합성
Figure pct00065
THF (60 ml) 중 2-아미노-5-플루오로-3-메틸-벤조산 (4.80 g, 28.4 mmol) 의 용액에 N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (10.9 g, 56.8 mmol), 1-히드록시벤조트리아졸 수화물 (4.34 g, 28.4 mmol) 및 디옥산 (283 ml, 142 mmol) 중 5 M 용액으로서의 암모니아를 첨가하였다. 생성된 슬러리를 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 THF 로 세척하였다. 여과물을 증발시키고 물과 에틸 아세테이트 사이에 분할시켰다. 유기상을 황산나트륨으로 건조시키고 증발시켰다. 잔류물을 2-프로판올로부터 결정화하여 2-아미노-5-플루오로-3-메틸-벤즈아미드를 베이지색 결정으로서 수득하였다; HPLC/MS 1.68 분 (B), [M+H] 169.
N-메틸-피롤리돈 (1 ml) 중 2-아미노-5-플루오로-3-메틸-벤즈아미드 (84.1 mg, 0.50 mmol), 4-(4-메틸-피페라진-1-일)-벤즈알데히드 (123 mg, 0.60 mmol) 및 나트륨 디술파이트 (97 mg, 0.51 mmol) 의 용액을 150℃ 로 가열하고 상기 온도에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온이 되도록 하고 빙수에 부었다. 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하고, 물로 세척하고 건조시켰다. 잔류물을 메탄올/디클로로메탄을 용리액으로서 사용하여 실리카 겔 컬럼 상에서 크로마토그래피 처리하여, 6-플루오로-8-메틸-2-[4-(4-메틸-피페라진-1-일)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온을 갈색 분말로서 수득하였다; HPLC/MS 1.47 분 (A), [M+H] 353;
Figure pct00066
하기 화합물을 유사하게 제조하였다:
6-플루오로-2-[4-(4-히드록시-피페리딘-1-일)-페닐]-8-메틸-3H-퀴나졸린-4-온 ("A29")
Figure pct00067
HPLC/MS 2.54 분 (B), [M+H] 354;
Figure pct00068
2-[4-(1,1-디옥소-1l6-티오모르폴린-4-일)-페닐]-6-플루오로-8-메틸-3H-퀴나졸린-4-온 ("A30")
Figure pct00069
HPLC/MS 1.88 분 (A), [M+H] 388;
Figure pct00070
6-플루오로-2-[4-(4-히드록시메틸-피페리딘-1-일)-페닐]-8-메틸-3H-퀴나졸린-4-온 ("A31")
Figure pct00071
HPLC/MS 2.57 분 (B), [M+H] 368;
Figure pct00072
6-플루오로-8-메틸-2-[4-(4-메틸-[1,4]디아제판-1-일)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A32")
Figure pct00073
HPLC/MS 2.00 분 (B), [M+H] 367;
Figure pct00074
Figure pct00075
실시예 10
6-플루오로-8-메틸-2-(4-피페리딘-4-일-페닐)-3H-퀴나졸린-4-온 히드로클로라이드 ("A33") 의 합성
Figure pct00076
DMF (5 ml) 중 4-(4-카르복시-페닐)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (828 mg, 2.71 mmol) 의 용액에 요오도메탄 (577 mg, 4.07 μl) 및 탄산칼륨 (375 mg, 2.71 mmol) 을 첨가하고, 반응 혼합물을 4 시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 증발시키고 잔류물을 디클로로메탄으로 처리하였다. 고체를 여과 제거하고 여과물을 건조되도록 증발시켜 4-(4-메톡시-카르보닐-페닐)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르를 황색 고체로서 수득하였다; HPLC/MS 2.21 분 (A), [M-tBu] 264.
디클로로메탄 (10 ml) 중 4-(4-메톡시카르보닐-페닐)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (776 mg, 2.43 mmol) 의 용액에 디에틸실란 (470 μl, 3.64 mmol) 및 클로로비스(시클로옥텐)이리듐(I) 이량체 (22 mg, 0.025 mmol) 를 첨가하고, 혼합물을 마이크로파 반응기 내에서 1.5 시간 동안 50℃ 에서 방사선 조사하였다. 반응 혼합물을 2 N 염산 (0.6 ml) 과 함께 30 분 동안 격렬히 교반하였다. 유기층을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고 증발시켰다. 잔류물을 시클로헥산/에틸 아세테이트를 용리액으로서 사용하여 실리카 겔 컬럼 상에서 크로마토그래피 처리하여, 4-(4-포르밀-페닐)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테스를 황색 수지로서 수득하였다; HPLC/MS 2.10 분 (A), [M-tBu] 234.
N-메틸-피롤리돈 (1 ml) 중 2-아미노-5-플루오로-3-메틸-벤즈아미드 (84.1 mg, 0.50 mmol), 4-(4-포르밀-페닐)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (145 mg, 0.50 mmol) 및 나트륨 디술파이트 (97 mg, 0.51 mmol) 의 용액을 160℃ 로 가열하고 상기 온도에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온이 되도록 하고 빙수에 부었다. 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하고 물로 세척하였다. 고체를 메탄올로 저작하고 다시 흡입 여과하였다. 잔류물을 디옥산 (1 ml) 중 4 N HCl 에서 슬러리화하고 메탄올 (0.25 ml) 을 첨가하였다. 혼합물을 16 시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 분취용 HPLC 로 크로마토그래피 처리하여, 6-플루오로-8-메틸-2-(4-피페리딘-4-일-페닐)-3H-퀴나졸린-4-온 히드로클로라이드를 옅은 베이지색 분말로서 수득하였다; HPLC/MS 1.53 분 (A), [M+H] 338;
Figure pct00077
하기 화합물을 유사하게 제조하였다:
6,8-디플루오로-2-(4-피페리딘-4-일-페닐)-3H-퀴나졸린-4-온 히드로클로라이드 ("A34")
Figure pct00078
HPLC/MS 1.44 분 (A), [M+H] 342;
Figure pct00079
실시예 11
6,8-디플루오로-2-[4-(1-메틸-피페리딘-4-일)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 트리플루오로아세테이트 ("A35") 의 합성
Figure pct00080
포름산 (2.0 ml) 중 6,8-디플루오로-2-(4-피페리딘-4-일-페닐)-3H-퀴나졸린-4-온 히드로클로라이드 (238 mg, 0.63 mmol) 의 용액에 포름알데히드 (37% 수용액, 160 μl, 1.27 mmol) 를 첨가하였다. 혼합물을 80℃ 로 가열하고 상기 온도에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 증발시키고 잔류물을 2 N NaOH 로 처리하였다. 고체를 여과 제거하고 분취용 HPLC 에 의해 정제하여 6,8-디플루오로-2-[4-(1-메틸-피페리딘-4-일)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 트리플루오로아세테이트를 백색 분말로서 수득하였다; HPLC/MS 1.43 분 (A), [M+H] 356.
Figure pct00081
Figure pct00082
6-플루오로-8-메틸-2-[4-(1-메틸-피페리딘-4-일)-페닐]-3H-퀴나졸린-4-온 ("A36") 을 유사하게 제조하였다; 백색 분말; HPLC/MS 1.54 분 (A), [M+H] 352.
약리학적 데이터
표 2. 식 I 의 일부 대표적 화합물의 탄키라아제의 억제
Figure pct00083
Figure pct00084
IC50: < 0.3 μM = A 0.3 - 3 μM = B 3 - 50 μM = C
표 2 에서 나타낸 화합물은 본 발명에 따른 특히 바람직한 화합물이다.
표 3. 식 I 의 일부 대표적 화합물의 탄키라아제의 억제
Figure pct00085
Figure pct00086
IC50: < 0.3 μM = A 0.3 - 3 μM = B 3 - 50 μM = C
표 3 에서 나타낸 화합물은 본 발명에 따른 특히 바람직한 화합물이다.
하기 실시예는 약제에 관한 것이다:
실시예 A: 주사 바이알
3 l 의 2차 증류수 중의 100 g 의 식 I 의 활성 성분 및 5 g 의 인산수소이나트륨의 용액을 2 N 염산을 사용하여 pH 6.5 로 조정하고, 멸균 여과하고, 주사 바이알에 옮기고, 멸균 조건 하에서 동결건조시키고, 멸균 조건 하에서 밀봉하였다. 각각의 주사 바이알은 5 mg 의 활성 성분을 함유하였다.
실시예 B: 좌제
20 g 의 식 I 의 활성 성분과 100 g 의 대두 레시틴 및 1400 g 의 코코아 버터의 혼합물을 용융시키고, 몰드에 붓고, 냉각시켰다. 각각의 좌제는 20 mg 의 활성 성분을 함유하였다.
실시예 C: 용액
940 ml 의 2차 증류수 중의 1 g 의 식 I 의 활성 성분, 9.38 g 의 NaH2PO4·2 H2O, 28.48 g 의 Na2HPO4·12 H2O 및 0.1 g 의 벤즈알코늄 클로라이드로부터 용액을 제조하였다. pH 를 6.8 로 조정하고, 상기 용액을 1 l 로 제조하고, 방사선조사에 의해 멸균시켰다. 상기 용액은 점안액의 형태로 사용할 수 있었다.
실시예 D: 연고
500 mg 의 식 I 의 활성 성분을 무균 조건 하에서, 99.5 g 의 바셀린과 혼합하였다.
실시예 E: 정제
1 kg 의 식 I 의 활성 성분, 4 kg 의 락토오스, 1.2 kg 의 감자 전분, 0.2 kg 의 탈크 및 0.1 kg 의 마그네슘 스테아레이트의 혼합물을 통상의 방식으로 압축하여, 각각의 정제가 10 mg 의 활성 성분을 함유하도록 정제를 수득하였다.
실시예 F: 당의정
정제를 실시예 E 와 유사하게 압축한 후, 수크로오스, 감자 전분, 탈크, 트래거캔스 및 염료의 코팅을 이용하여 통상의 방식으로 코팅하였다.
실시예 G: 캡슐
2 kg 의 식 I 의 활성 성분을 각각의 캡슐이 20 mg 의 활성 성분을 함유하도록 통상의 방식으로 경질 젤라틴 캡슐 내에 도입하였다.
실시예 H: 앰플
60 l 의 2차 증류수 중의 1 kg 의 식 I 의 활성 성분의 용액을 멸균 여과하고, 앰플 내에 옮기고, 멸균 조건 하에서 동결건조시키고, 멸균 조건 하에서 밀봉하였다. 각각의 앰플은 10 mg 의 활성 성분을 함유하였다.

Claims (9)

  1. 하기 식 I 의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체 및 입체이성질체, 및 이들의 모든 비율의 혼합물:
    Figure pct00087

    [식 중,
    R1, R2 는 각각 서로 독립적으로 H, F 또는 Cl 을 나타내고,
    R3 은 H, F, Cl, CH3 또는 OCH3 을 나타내고,
    X1, X2 는 각각 서로 독립적으로 CH 또는 N 을 나타내고,
    Y 는 A, Cyc 또는 옥시라닐, 옥세타닐, 테트라히드로푸라닐, 테트라히드로피라닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐, 티오모르폴리닐 또는 디아제파닐을 나타내고, 이는 비치환되거나 =O, Hal, OH 및/또는 A' 에 의해 단일- 또는 이중치환될 수 있고,
    A' 는 1-4 개의 C-원자를 갖는 미분지형 또는 분지형 알킬을 나타내고, 이때 1 개의 CH2 기는 O-원자에 의해 대체될 수 있고/있거나 1 개의 H-원자는 OH 에 의해 대체될 수 있고,
    A 는 2-10 개의 C-원자를 갖는 미분지형 또는 분지형 알킬을 나타내고, 이때 2 개의 인접한 탄소 원자는 이중 결합을 형성할 수 있고/있거나 1 또는 2 개의 비인접한 CH- 및/또는 CH2-기는 N-, O- 및/또는 S-원자에 의해 대체될 수 있고, 1-7 개의 H-원자는 F, Cl 및/또는 OH 에 의해 대체될 수 있고,
    Cyc 는 3-7 개의 C-원자를 갖는 시클로알킬을 나타내고, 이는 비치환되거나 OH, Hal 또는 A' 에 의해 단일치환되고,
    Hal 은 F, Cl, Br 또는 I 를 나타내고,
    단, R1, R2, R3 중 하나 이상은 H 가 아니고,
    단, Y 는 4-이소프로필-1-피페라지닐이 아님].
  2. 제 1 항에 있어서, 하기와 같은 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체 및 입체이성질체, 및 이들의 모든 비율의 혼합물:
    R1, R2 가 각각 서로 독립적으로 H, F 또는 Cl 을 나타내고,
    R3 이 각각 H, F, Cl, CH3 또는 OCH3 을 나타내고,
    X1 이 CH 를 나타내고,
    X2 가 CH 또는 N 을 나타내고,
    Y 가 A, Cyc 또는 옥시라닐, 옥세타닐, 테트라히드로푸라닐, 테트라히드로피라닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐, 티오모르폴리닐 또는 디아제파닐을 나타내고, 이는 비치환되거나 =O, Hal, OH 및/또는 A' 에 의해 단일- 또는 이중치환될 수 있고,
    A' 가 1-4 개의 C-원자를 갖는 미분지형 또는 분지형 알킬을 나타내고, 이때 1 개의 CH2 기가 O-원자에 의해 대체될 수 있고/있거나 1 개의 H-원자가 OH 에 의해 대체될 수 있고,
    A 가 2-10 개의 C-원자를 갖는 미분지형 또는 분지형 알킬을 나타내고, 이때 1 또는 2 개의 비인접한 CH- 및/또는 CH2-기가 N- 및/또는 O-원자에 의해 대체될 수 있고, 1-7 개의 H-원자가 F, Cl 및/또는 OH 에 의해 대체될 수 있고,
    Cyc 가 3-7 개의 C-원자를 갖는 시클로알킬을 나타내고, 이는 비치환되거나 OH, Hal 또는 A' 에 의해 단일치환되고,
    Hal 이 F, Cl, Br 또는 I 를 나타내고,
    단, R1, R2, R3 중 하나 이상은 H 가 아니고,
    단, Y 는 4-이소프로필-1-피페라지닐이 아님.
  3. 제 1 항에 있어서, 하기의 군에서 선택되는 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 용매화물, 염, 호변이성질체 및 입체이성질체, 및 이들의 모든 비율의 혼합물:
    Figure pct00088

    Figure pct00089

    Figure pct00090

    Figure pct00091
    .
  4. 하기를 특징으로 하는, 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 따른 식 I 의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 호변이성질체 및 입체이성질체의 제조 방법:
    a) 식 II 의 화합물을:
    Figure pct00092

    [식 중, R1, R2 및 R3 은 제 1 항에서 나타낸 의미를 가짐],
    i) 식 III 의 화합물:
    Figure pct00093

    [식 중, X1, X2 및 Y 는 제 1 항에서 나타낸 의미를 가짐],
    또는
    ii) 식 IV 의 화합물:
    Figure pct00094

    [식 중, X1, X2 및 Y 는 제 1 항에서 나타낸 의미를 가짐]
    과 반응시키거나,
    b) 라디칼 Y 를 하기 i) ~ iv) 에 의해 또 다른 라디칼 Y 로 전환시키고/시키거나:
    i) 알코올을 에테르기로 전환시킴,
    ii) 에스테르기를 알코올기로 전환시킴,
    iii) 니트로기를 아미노기로 전환시킴,
    iv) 아미노기를 알킬화 아미노기로 전환시킴,
    식 I 의 염기 또는 산을 이의 염 중 하나로 전환시킴.
  5. 하나 이상의 식 I 의 화합물 및/또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 호변이성질체 및 입체이성질체, 및 이들의 모든 비율의 혼합물, 및 임의로는 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 비히클을 포함하는 약제.
  6. 암, 다발성 경화증, 심혈관계 질환, 중추 신경계 손상 및 각종 형태의 염증의 치료 및/또는 예방에 사용되는 식 I 의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 호변이성질체 및 입체이성질체, 및 이들의 모든 비율의 혼합물.
  7. 제 6 항에 있어서, 머리, 목, 눈, 구강, 목구멍, 식도, 기관지, 후두, 인두, 흉부, 뼈, 폐, 결장, 직장, 위, 전립선, 방광, 자궁, 자궁경부, 유방, 난소, 고환 또는 기타 생식기, 피부, 갑상선, 혈액, 림프절, 신장, 간, 췌장, 뇌, 중추신경계 암, 고형 종양 및 혈인성 종양의 군에서 선택되는 질환의 치료 및/또는 예방에 사용되는 화합물.
  8. 하나 이상의 식 I 의 화합물 및/또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 및 입체이성질체, 및 이들의 모든 비율의 혼합물, 및 하나 이상의 추가적인 약제 활성 성분을 포함하는 약제.
  9. 하기의 개별 팩으로 이루어진 세트 (키트):
    (a) 유효량의 식 I 의 화합물 및/또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 염 및 입체이성질체, 및 이들의 모든 비율의 혼합물, 및
    (b) 유효량의 추가 약제 활성 성분.
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Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
UA117095C2 (uk) 2011-12-22 2018-06-25 Аліос Біофарма, Інк. Нуклеозидна сполука або її фармацевтично прийнятна сіль
US9193689B2 (en) 2012-03-07 2015-11-24 Institute Of Cancer Research: Royal Cancer Hospital (The) 3-aryl-5-substituted-isoquinolin-1-one compounds and their therapeutic use
USRE48171E1 (en) 2012-03-21 2020-08-25 Janssen Biopharma, Inc. Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof
US9441007B2 (en) 2012-03-21 2016-09-13 Alios Biopharma, Inc. Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof
WO2013174962A1 (en) 2012-05-25 2013-11-28 Janssen R&D Ireland Uracyl spirooxetane nucleosides
LT2935303T (lt) 2012-12-21 2021-03-25 Janssen Biopharma, Inc. 4'-fluor-nukleozidai, 4'-fluor-nukleotidai ir jų analogai, skirti hcv gydymui
ES2666729T3 (es) 2013-09-11 2018-05-07 Institute Of Cancer Research: Royal Cancer Hospital (The) Compuestos de isoquinolin-1-ona 3-aril-5-sustituida y su uso terapéutico
US10626094B2 (en) 2014-10-14 2020-04-21 Sanford Burnham Prebys Medical Discovery Institute Inhibitors of low molecular weight protein tyrosine phosphatase and uses thereof
WO2017156350A1 (en) 2016-03-09 2017-09-14 K-Gen, Inc. Methods of cancer treatment
CN107286169B (zh) * 2016-04-05 2020-11-24 北京四环制药有限公司 端锚聚合酶抑制剂
CN106432103A (zh) * 2016-09-14 2017-02-22 信阳师范学院 一种喹唑酮类化合物及其制备方法
WO2018204176A1 (en) * 2017-05-01 2018-11-08 Sanford Burnham Prebys Medical Discovery Institute Inhibitors of low molecular weight protein tyrosine phosphatase (lmptp) and uses thereof
WO2019131794A1 (ja) * 2017-12-27 2019-07-04 公益財団法人がん研究会 抗がん剤
WO2019131798A1 (ja) * 2017-12-27 2019-07-04 国立研究開発法人理化学研究所 新規ジヒドロキナゾリノン系化合物又はその薬理学的に許容される塩、及び細胞増殖阻害剤
WO2021037868A1 (en) * 2019-08-28 2021-03-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel quinazoline compounds for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus disease

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004014873A1 (ja) * 2002-08-09 2004-02-19 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. 4-置換キナゾリン-8-カルボン酸アミド誘導体とその薬理上許容される付加塩
WO2012028578A1 (de) * 2010-09-03 2012-03-08 Bayer Cropscience Ag Substituierte anellierte pyrimidinone und dihydropyrimidinone

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3046871A1 (de) * 1980-12-12 1982-07-22 Dr. Karl Thomae Gmbh, 7950 Biberach Neue chinazolinone, ihre herstellung und ihre verwendung als arzneimittel
DE3166627D1 (en) * 1980-12-12 1984-11-15 Thomae Gmbh Dr K Pyrimidones, their preparation and medicines containing them
GB9404485D0 (en) 1994-03-09 1994-04-20 Cancer Res Campaign Tech Benzamide analogues
GB9624482D0 (en) 1995-12-18 1997-01-15 Zeneca Phaema S A Chemical compounds
KR19990082463A (ko) 1996-02-13 1999-11-25 돈 리사 로얄 혈관 내피 성장 인자 억제제로서의 퀴나졸린유도체
DK0885198T3 (da) 1996-03-05 2002-03-25 Astrazeneca Ab 4-Anilinoquinazolinderivater
GB9718972D0 (en) 1996-09-25 1997-11-12 Zeneca Ltd Chemical compounds
GB9702701D0 (en) * 1997-02-01 1997-04-02 Univ Newcastle Ventures Ltd Quinazolinone compounds
GB9714249D0 (en) 1997-07-08 1997-09-10 Angiogene Pharm Ltd Vascular damaging agents
EP1020445B1 (en) 1997-10-02 2008-08-13 Eisai R&D Management Co., Ltd. Fused pyridine derivatives
GB9900334D0 (en) 1999-01-07 1999-02-24 Angiogene Pharm Ltd Tricylic vascular damaging agents
GB9900752D0 (en) 1999-01-15 1999-03-03 Angiogene Pharm Ltd Benzimidazole vascular damaging agents
CA2406979A1 (en) 2000-05-31 2001-12-06 Astrazeneca Ab Indole derivatives with vascular damaging activity
AU2001266233B2 (en) 2000-07-07 2006-06-29 Angiogene Pharmaceuticals Limited Colchinol derivatives as vascular damaging agents
RU2003103603A (ru) 2000-07-07 2004-08-20 Энджиоджен Фармасьютикалз Лимитед (Gb) Производные колхинола в качестве ингибиторов ангиогенеза
MX2007010965A (es) * 2005-03-09 2007-09-19 Merck & Co Inc Antagonistas de canales de calcio de tipo t de quinazolinona.
AU2008223793B2 (en) 2007-03-08 2012-08-23 Janssen Pharmaceutica Nv Quinolinone derivatives as PARP and TANK inhibitors
JP5795304B2 (ja) * 2009-03-18 2015-10-14 レスバーロジックス コーポレイション 新規抗炎症剤
TWI499418B (zh) 2009-05-21 2015-09-11 Nerviano Medical Sciences Srl 異喹啉－１（２ｈ）－酮衍生物

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004014873A1 (ja) * 2002-08-09 2004-02-19 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. 4-置換キナゾリン-8-カルボン酸アミド誘導体とその薬理上許容される付加塩
WO2012028578A1 (de) * 2010-09-03 2012-03-08 Bayer Cropscience Ag Substituierte anellierte pyrimidinone und dihydropyrimidinone

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Costantino 외, J. Med. Chem., Vol. 44, No. 23 pp 3786-3794, 2001* *

Also Published As

Publication number Publication date
CN104662006B (zh) 2017-10-24
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