KR20220026750A - 차조기 초임계 추출물을 포함하는 관절염 예방, 개선용 건강식품 조성물 - Google Patents
차조기 초임계 추출물을 포함하는 관절염 예방, 개선용 건강식품 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 차조기 초임계 추출물을 유효성분으로 함유하여 관절염의 예방, 개선용 건강식품 조성물에 관한 것으로 차조기 잎을 건조시킨 후에 파쇄하여 제분하고, 초임계 추출공정으로 추출한 후에 상등액을 분리하여 제조된 차조기 초임계 추출물을 포함하는 것을 특징으로 한다.
Description
본 발명은 차조기 초임계 추출물을 유효성분으로 함유하여 관절염의 예방, 개선용 건강식품 조성물에 관한 것이다.
일반적으로 관절이란 뼈와 뼈가 만나는 부위로써 뼈와 뼈 사이가 부드럽게 운동할 수 있도록, 연골, 관절낭, 활막, 인대, 힘줄, 근육 등으로 구성되어 있으며 움직임에 따라 발생하는 충격을 흡수하는 역할을 한다.
이러한 관절에 나타나는 염증성 질환은 류마티스, 감염성 관절염 등의 여러 원인으로 인하여 관절 연골이나 뼈에 변성이나 파괴가 일어나는 변형성 관절염, 가용성 대사산물이 관절 주변의 결합 조직 내에 결정으로 침착되는 결정성 관절염 등으로 크게 구분될 수 있다.
퇴행성 관절염, 즉 골관절염은 관절을 구성하는 연골세포(chondrocytes)에 노화 등의 퇴행이 발생하여, 연골세포에서 관절의 기질 물질들인 Calcitonin 등의 합성이 저해됨과 동시에 LTB4, PGE2, COX-2 등의 염증성 인자가 생성됨에 따라 관절조직이 파괴됨으로써 유발되는 질병이다.
또한, 관절염은 염증성 사이토카인에 의한 일산화질소의 생성과, 생성된 일산화질소에 의한 자가 증폭적인 사이토카인의 생성으로 인해 더욱 많은 MMP의 합성이 유발되어 관절기질의 분해가 촉진됨으로써 더욱 악화된다.
이에 본 발명에서는 차조기 추출물이 연골 세포 내 염증 억제, 연골 기질 성분 생성 촉진 및 세포독성이 없는 안전한 물질임을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명이 해결하고자 하는 과제는 차조기 초임계 추출물을 유효성분으로 함유하여 관절염의 예방, 개선용 건강식품 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명에 따른 차조기 초임계 추출물을 유효성분으로 포함하는 건강식품 조성물은 차조기 잎을 건조시킨 후에 파쇄하여 제분하고, 초임계 추출공정으로 추출한 후에 상등액을 분리하여 제조된 차조기 초임계 추출물을 포함하는 것을 특징으로 한다.
바람직하게, 초임계 추출공정은 10분간 등압, 10 분간 퍼징, 10 분간 가압, 180분간 400 bar 압력에서 추출 유지 후 20분간 감압으로 진행된 것을 특징으로 한다.
바람직하게, 차조기 초임계 추출물의 사용량은 성인 기준으로 1일 100 내지 2,000mg/kg 체중인 것을 특징으로 하는 차조기 초임계 추출물을 포함하는 것을 특징으로 한다.
바람직하게, 건강식품 조성물은 식품, 식품첨가제, 음료, 음료첨가제, 발효유, 건강기능식품 중의 어느 하나인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 차조기 초임계 추출물을 포함하는 건강식품 조성물은 관절염의 원인으로 발생되는 LTB4, PGE2, COX-2, MMP-3, COMP의 활성을 감소 또는 억제시키고, TIMP1, Calcitonin의 활성을 증가시켜 관절염의 예방에 유용하게 사용할 수 있는 장점이 있다.
도 1은 본 발명에 따른 차조기 초임계 추출물의 정량 분석 그래프.
도 2는 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 LTB4 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 PGE2 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 MMP-3 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 TIMP-1 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 COX-2 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 7은 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 COMP 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 8은 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 Calcitonin 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 9는 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 Micro-CT 사진이다.
도 10은 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 조직 병리 검사 사진이다.
도 2는 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 LTB4 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 PGE2 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 MMP-3 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 TIMP-1 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 COX-2 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 7은 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 COMP 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 8은 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 Calcitonin 생성량을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 9는 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 Micro-CT 사진이다.
도 10은 본 발명의 차조기 초임계 추출물로 유도한 관절염 유도 효능 평가 모델에서 실험용 쥐의 조직 병리 검사 사진이다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 실시예를 설명한다.
본 발명의 차조기 초임계 추출물은 차조기 잎을 건조기에서 건조시킨 후에 파쇄하여 제분하고, 180분간 400bar의 초임계 추출공정으로 추출한 후에 상등액을 분리하여 차조기 초임계 추출물을 제조하였다
또한, 본 발명의 차조기 초임계 추출물을 유효성분으로 함유하는 관절염의 예방 또는 개선용 식품 조성물은 식품, 식품첨가제, 음료, 음료첨가제, 발효유, 건강기능식품 등으로 사용될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물에 포함된 차조기 초임계 추출물은 성인 기준으로 1일 100 내지 2,000mg/kg 체중, 바람직하게는 200 내지 1,500mg/kg 체중의 범위로 사용한다.
또한, 본 발명의 식품 조성물에는 차조기 초임계 추출물의 제거 활성 및 생육 저해 활성에 방해가 되지 않는 성분을 포함시킬 수 있다. 예를 들면, 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
<실시예 1> 차조기 초임계 추출물의 생성
차조기 잎을 건조기에서 건조시킨 후에 파쇄하여 제분한 분말 500g을 표 1과 같은 초임계 추출공정으로 진행하여 추출하였다. 그 후, 유체 추출물에서 상등액을 분리하여 차조기 초임계 추출물을 제조하였다. 추출공정은 10분간 등압, 10 분간 퍼징, 10 분간 가압, 180분간 400 bar 압력에서 추출 유지 후 20분간 감압으로 진행하였다.
| 추출조(Extractor) | 보조용매유량 (ml/min) |
분리조 (Separator) |
CO2 유량 (ml/min) |
냉각기 (℃) |
유지시간 (Run-time) (min) |
||
| 압력(bar) | 온도 (℃) |
압력(bar) | 온도(℃) | ||||
| 400 | 50 | - | 40 | 40 | 550/12 | 1 | 180 |
<차조기 초임계 추출물의 성질>제조된 차조기 초임계 추출물을 육안으로 관찰하면 점성이 큰 초록색 액체였다. 또한, 차조기의 지표성분은 이소에고마케톤(isoegomaketone)으로 원료 1.0g에 대하여 19.0 ~ 28.5 mg (실측치의 80 ~ 120 % 해당량)이였다.
<차조기 초임계 추출물의 정량 분석>
차조기 초임계 추출물 1mg에 메탄올 1ml을 취해 0.45μm 필터로 여과한 것을 HPLC(Agilent technology)를 사용하여 표 2와 같은 운전 조건으로 분석하여 도 1의 그래프로 나타내었다.
| Column(컬럼) | YMC-Triart C18 250x4.6mm, S-5um, 12nm | |
| Detection(검출) | 254nm | |
| Flow rate(유속) | 1ml/min | |
| Column temp.(온도) | 25 ℃ | |
| Solvent A(용매 A) | Water | |
| Solvent B(용매 B) | Acetonitrile | |
| Gradient(구배) |
Time(min) | B(%) |
| 0 | 45 | |
| 30 | 55 | |
도 1에 나타난 바와 같이 차조기 초임계 추출물의 경우 이소에고마케톤(isoegomaketone)으로 원료 1.0g에 대하여 19.0 ~ 28.5 mg (실측치의 80 ~ 120 % 해당량)으로 매우 높은 수치를 갖는 것으로 확인되었다.
<시험예 1> 동물모델을 이용한 골관절염 치료 효능 분석
본 발명의 차조기 초임계 추출물의 골관절염에서 연골 보호 효과를 측정하기 위해 연골손상에 따른 퇴행성관절염 모델인 MIA로 유도된 골관절염 동물 모델을 사용하였다.
<실험동물의 사육>
시험동물은 수컷 SD-랫트(SLC, Japan) 6주령을 사용하였다. 본 시험에 사용하는 랫트는 골관절염 시험에 널리 사용되고 있고 시험 기초자료가 축적되어 있어 시험결과의 해석 및 평가에 자료를 이용할 수 있기에 선택하였다. 실험동물은 2주간의 안정기를 가지면서 순화를 시켰으며, 안정기 및 실험 기간에 모든 실시예에는 일반 사료(ENVIGO, U.S.A.)를 자유식이 하며 물을 충분히 공급하였다. 2주간의 안정기 이후 8주령부터 동물 실험을 진행하였다. 동물 사육실의 조건은 conventional system으로 22ㅁ2℃, 1일 중 12시간은 200-300 Lux로 조명하고, 12시간은 모든 빛을 차단하였다.
실험 그룹은 관절염 유발과 경구 투여를 진행하지 않는 정상군(Normal), 관절염 유발 후 증류수만을 경구투여하는 음성대조군(Negative Control; NC), indomethacin 2 ㎎/㎏/day의 농도로 투여하는 양성대조군(Positive Control; PC), 차조기 초임계 추출물을 25, 50, 100 ㎎/㎏/day 농도로 경구투여하는 실시예 등 총 6개의 그룹으로 나누고 그룹당 10마리의 동물을 배정하였다. 시료 투여는 MIA로 관절염을 유발하기 전 음성대조군과 실시예를 매일 1회 2 ㎖씩 oral zonde를 이용하여 2주간 각각의 시료를 경구 투여하였다. 2주간의 경구 투여가 종료된 이후 실험동물을 마취하고 SD-Rat의 우측 무릎을 제모하여 우측 무릎 관절낭에 0.9% 생리식염수에 용해시킨 monosodium iodoacetate (MIA)를 60 ㎎/㎖의 농도로 당뇨주사기에 넣어 50 ㎕ 주입함으로써 관절염을 유발하였다. 관절염 유발 후 양성대조군을 포함하여 추가로 4주간 경구 투여를 진행하였다.
<혈액 채취 및 혈청 보관>
실험종료 후 심장천자법으로 채혈한 후 혈액을 30분간 상온에서 굳혀 3,000 rpm에서 15분간 원심 분리하여 혈청을 분리한 후 혈청 바이오마커 측정에 필요한 용량만큼 1.5 ㎖ tube에 넣어 초저온 냉동고 (-80℃)에 보관하였다.
<실험결과> 본 발명의 차조기 초임계 추출물의 괄절염 억제 효과 측정
<Leukotriene B4 (LTB4) 생성량 측정>
96 well plate에 분리한 혈청과 standard를 각각 50 ㎕씩 넣고 antibody solution을 50 ㎕씩 추가하여 상온에서 60분간 반응시키고 conjugate를 50 ㎕씩 추가하여 상온에서 180분간 반응시켰다. Washing buffer를 이용하여 4회 세척하고 substrate solution을 200 ㎕씩 넣은 후, 빛을 차단하여 37℃에서 30분간 반응시켰다. 이후, stop solution을 100 ㎕씩 추가하여 450 ㎚에서 흡광도를 측정하였으며, standard curve를 기준으로 절대 값으로 표시하여 도 2의 그래프로 나타내었다.
도 2에 나타난 바와 같이, 혈액 내 LTB₄생성량을 측정한 결과 정상군은 1401.6ㅁ461.7 pg/㎖, 음성대조군(NC)은 4021.6ㅁ606.0 pg/㎖, 양성대조군(PC)은 2317.7ㅁ740.9 pg/㎖로 나타난 반면, 차조기 초임계 추출물을 25, 50, 100 (㎎/㎏/day)으로 투여한 실시예는 각각 3288.8ㅁ915.9 pg/㎖, 2802.7ㅁ671.8 pg/㎖, 2060.6ㅁ587.4 pg/㎖로 나타나, 음성대조군 대비 50, 100 ㎎/㎏/day 투여군에서 유의성 있는 (p<0.001) 감소가 나타난 것을 확인할 수 있었다.
<PGE2, MMP-3, TIMP-1 생성량 측정>
PGE2, MMP-3, TIMP-1 생성량을 확인하기 위하여 96 well plate에 분리한 혈청과 standard를 각각 100 ㎕씩 넣고 37℃에서 90분간 반응시키고 혈청과 standard를 제거하고 detection antibody를 각각 100 ㎕씩 추가하여 37℃에서 60분간 반응시킨다. Washing buffer를 이용하여 3회 세척하고 HRP-conjugate를 각각 100 ㎕씩 넣고 37℃에서 30분간 반응시키고 다시 3회 세척하였다. 세척 후, substrate reagent를 90 ㎕씩 넣은 후, 빛을 차단하여 37℃에서 15분간 반응시켰다. 이후, stop solution를 50 ㎕씩 추가하여 450 ㎚에서 흡광도를 측정하였으며, standard curve를 기준으로 절대 값으로 표시하여 도 3, 도 4 및 도 5의 그래프로 나타내었다.
도 3에 나타난 바와 같이, 혈액 내 PGE₂생성량을 측정한 결과 정상군은 186.4ㅁ16.9 pg/㎖, 음성대조군은 438.9ㅁ35.2 pg/㎖, 양성대조군은 242.1ㅁ52.7 pg/㎖로 나타난 반면, 차조기 초임계 추출물을 25, 50, 100 (㎎/㎏/day)으로 투여한 실시예는 각각 205.5ㅁ47.7 pg/㎖, 229.5ㅁ22.5 pg/㎖, 187.3ㅁ28.0 pg/㎖로 나타나, 음성대조군 대비 모든 실시예에서 유의성 있는 p<0.001) 감소가 나타난 것을 확인할 수 있었다.
도 4에 나타난 바와 같이, 혈액 내 MMP-3 생성량을 측정한 결과 정상군은 0.8ㅁ0.2 ng/㎖, 음성대조군은 1.6ㅁ0.3 ng/㎖, 양성대조군은 1.1ㅁ0.1 ng/㎖로 나타난 반면, 차조기 초임계 추출물을 25, 50, 100 (㎎/㎏/day)으로 투여한 실시예는 각각 1.2ㅁ0.2 ng/㎖, 1.1ㅁ0.3 ng/㎖, 1.2ㅁ0.3 ng/㎖로 나타나, 음성대조군 대비 모든 실시예에서 유의성 있는 (**p<0.01) 감소가 나타난 것을 확인할 수 있었다.
도 5에 나타난 바와 같이, 혈액 내 TIMP1 생성량을 측정한 결과 정상군은 1.1ㅁ0.2 ng/㎖, 음성대조군은 0.8ㅁ0.2 ng/㎖, 양성대조군은 1.0ㅁ0.1 ng/㎖로 나타난 반면, 차조기 초임계 추출물을 25, 50, 100 (㎎/㎏/day)으로 투여한 실시예는 각각 1.1ㅁ0.1 ng/㎖, 1.2ㅁ0.1 ng/㎖, 1.2ㅁ0.2 ng/㎖로 나타나, 음성대조군 대비 모든 실시예에서 유의성 있는 (p<0.01) 증가가 나타난 것을 확인할 수 있었다.
<COX-2, COMP 생성량 측정>
COX-2, COMP를 확인하기 위하여 96 well plate에 분리한 혈청과 standard를 각각 100 ㎕씩 넣고 37℃에서 90분간 반응시키고 washing buffer를 이용하여 2회 세척하였다. 세척 후, antibody를 각각 100 ㎕씩 넣고 37℃에서 60분간 반응시키고 다시 3회 세척하였다. 그 후, enzyme-conjugate를 각각 100 ㎕씩 넣고 37℃에서 30분간 반응시키고 다시 5회 세척하였다. Color reagent A와 B를 각각 50 ㎕씩 넣은 후, 빛을 차단하여 37℃에서 15분간 반응시켰다. 이후, color reagent C를 100 ㎕씩 추가하여 450 ㎚에서 흡광도를 측정하였으며, standard curve를 기준으로 절대 값으로 표시하여 도 6, 도 7의 그래프로 각각 나타내었다.
도 6에 나타난 바와 같이, 혈액 내 COX-2 생성량을 측정한 결과, 정상군은 0.3ㅁ0.1 ng/㎖, 음성대조군은 1.2ㅁ0.3 ng/㎖, 양성대조군은 0.3ㅁ0.2 ng/㎖로 나타난 반면, 차조기 초임계 추출물을 25, 50, 100 (㎎/㎏/day)으로 투여한 실시예는 각각 0.4ㅁ0.2 ng/㎖, 0.4ㅁ0.3 ng/㎖, 0.3ㅁ0.1 ng/㎖로 나타나, 음성대조군 대비 모든 실시예에서 유의성 있는 (p<0.001) 감소가 나타난 것을 확인할 수 있었다.
도 7에 나타난 바와 같이, 혈액 내 COMP 생성량을 측정한 결과, 정상군은 0.9ㅁ0.6 ng/㎖, 음성대조군은 5.3ㅁ1.0 ng/㎖, 양성대조군은 1.0ㅁ0.5 ng/㎖로 나타난 반면, 차조기 초임계 추출물을 25, 50, 100 (㎎/㎏/day)으로 투여한 실시예는 각각 0.6ㅁ0.3 ng/㎖, 0.5ㅁ0.4 ng/㎖, 0.7ㅁ0.8 ng/㎖로 나타나, 음성대조군 대비 모든 실시예에서 유의성 있는 (***p<0.001) 감소가 나타난 것을 확인할 수 있었다.
<Calcitonin 생성량 측정>
Calcitonin 생성량을 확인하기 위하여 96 well plate에 분리한 혈청과 standard를 각각 50 ㎕씩 넣고 HRP-conjugate를 100 ㎕씩 넣어 37℃에서 60분간 반응시켰다. washing buffer를 이용하여 3회 세척하고 chromogen solution A와 B를 각각 50 ㎕씩 넣은 후, 빛을 차단하여 37℃에서 15분간 반응시켰다. 이후, stop solution을 50 ㎕씩 추가하여 450 ㎚에서 흡광도를 측정하였으며, standard curve를 기준으로 절대 값으로 표시하여 도 8의 그래프로 나타내었다.
도 8에 나타난 바와 같이, 혈액 내 Calcitonin 생성량을 측정한 결과, 정상군은 9.2ㅁ1.3 pg/㎖, 음성대조군은 10.6ㅁ1.9 pg/㎖, 양성대조군은 10.9ㅁ2.2 pg/㎖로 나타난 반면, 차조기 초임계 추출물을 25, 50, 100 (㎎/㎏/day)으로 투여한 실시예는 각각 11.0ㅁ2.0 pg/㎖, 13.9ㅁ3.6 pg/㎖, 15.7ㅁ4.9 pg/㎖로 나타나, 음성대조군 대비 50, 100 ㎎/㎏/day 투여군에서 유의성 있는 (*p<0.05) 증가가 가 나타난 것을 확인할 수 있었다.
<Micro-CT 촬영 및 조직 병리 검사>
실험종료 후 우측 대퇴골과 경골 부위를 절단하고 피부 및 근육을 제거하여 10% 포르말린에 고정시킨 조직을 시험 검사 기관인 KPNT(Korea)에 Micro-CT와 조직 염색을 의뢰하였다. 이후, Micro-CT 촬영 결과를 3D로 변환하여 연골 부위를 판독하여 도 9에 나타내었다.
그리고, 촬영이 종료된 조직을 H&E 염색과 Safranin-O 염색하여 슬라이드 제작과 스캐닝 작업을 진행하고 Motic DSAssistant 프로그램을 통해 조직 관찰과 이미지 추출을 진행하여 도 10에 나타내었다.
도 9에 나타난 바와 같이, 무릎 관절을 micro CT를 이용하여 정면과 측면을 촬영한 결과, 정상군 대비 음성대조군((NC) 및 양성대조군(PC)과 실시예의 연골 양(cartilage volume)이 많이 감소한 것을 확인할 수 있었으나 상대적으로 실시예가 음성대조군보다 연골 양이 더 보존되었음을 확인할 수 있었다. 또한, 음성 및 양성대조군과 실시예는 정상군 대비 대퇴골의 하단 측의 골의 부식과 파괴가 심하게 일어났으나 실시예는 음성군보다 골의 부식이나 파괴가 적은 것을 확인할 수 있었다.
도 10에 나타난 바와 같이, 무릎 관절의 H&E 염색을 진행한 결과, 정상군 대비 음성대조군((NC) 및 양성대조군(PC)과 실시예는 대퇴골(femur)과 경골(tibia) 사이의 연골(cartilage)이 많이 감소한 것을 확인할 수 있었으나 상대적으로 실시예가 음성대조군보다 연골 양이 더 보존되었음을 확인할 수 있었다. 또한, 음성 및 양성대조군과 실시예는 정상군 대비 연골 주변으로 침윤 세포(infiltrating cells)가 많이 생성된 것을 확인할 수 있었으나 상대적으로 실시예가 음성대조군보다 침윤 세포의 범위나 밀집도가 적음이 관찰되었다(도 10A).
또한, Safranin-O 염색을 진행한 결과, 정상군 대비 음성대조군(NC) 및 양성대조군(PC)과 실시예는 연골(cartilage) 주변과 활막(synovial membrane) 내에 붉은색으로 염색된 proteoglycan이 고르게 형성되어 있지 않게 형성된 것을 확인할 수 있었으나 대조군은 proteoglycan이 소실된 개체를 보인 반면, 실시예는 연골 주변과 활막 내 proteoglycan의 분포가 많음이 관찰되었다(도 10B).
이상과 같이, 본 발명은 비록 한정된 실시예와 도면에 의해 설명되었으나, 본 발명은 이것에 의해 한정되지 않으며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 본 발명의 기술사상과 아래에 기재될 청구범위의 균등범위 내에서 다양한 수정 및 변형이 가능함은 물론이다.
Claims (4)
- 차조기 잎을 건조기에서 건조시킨 후에 파쇄하여 제분하고, 초임계 추출공정으로 추출한 후에 상등액을 분리하여 제조된 차조기 초임계 추출물을 유효성분으로 포함하는 건강식품 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 초임계 추출공정은 10분간 등압, 10 분간 퍼징, 10 분간 가압, 180분간 400 bar 압력에서 추출 유지 후 20분간 감압으로 진행된 것을 특징으로 하는 차조기 초임계 추출물을 포함하는 건강식품 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 차조기 초임계 추출물의 사용량은 성인 기준으로 1일 100 내지 2,000mg/kg 체중인 것을 특징으로 하는 차조기 초임계 추출물을 포함하는 건강식품 조성물.
- 청구항 1 내지 청구항 3 중의 어느 한 항에 있어서, 건강식품 조성물은 식품, 식품첨가제, 음료, 음료첨가제, 발효유, 건강기능식품 중의 어느 하나인 것을 특징으로 하는 차조기 초임계 추출물을 포함하는 건강식품 조성물.
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|---|---|---|---|---|
| KR102582313B1 (ko) * | 2022-11-28 | 2023-09-22 | 김태윤 | 반려견의 체지방감소를 통한 관절건강 개선용 조성물 |
-
2020
- 2020-08-26 KR KR1020200107649A patent/KR20220026750A/ko unknown
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102582313B1 (ko) * | 2022-11-28 | 2023-09-22 | 김태윤 | 반려견의 체지방감소를 통한 관절건강 개선용 조성물 |
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